JP6737838B2 - Ｍｅｋ阻害剤の調製およびｍｅｋ阻害剤を含む製剤 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年１０月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／７１６，１６９号の優先権を主張するものであり、参照により、その内容の全体が本明細書に組み込まれる。

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセス、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセス、およびそれに有用な中間体が、本明細書に提供される。また、この結晶化した化合物を含む薬学的組成物も、本明細書に提供される。

成長因子によって媒介される増殖シグナルは、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ経路を含むいくつかの経路を通って細胞外環境から核へと伝達される。ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫキナーゼシグナル伝達経路は、チロシン受容体キナーゼ（ＲＴＫ）のそれぞれの同族リガンドによる初期細胞外結合および刺激によって活性化される。ＲＴＫの細胞質ドメイン中で特定のチロシン残基が自己リン酸化されると、Ｇｒｂ２−Ｓｏｓ複合体が原形質膜に移動し、不活性ＲＡＳ・ＧＤＰを活性ＲＡＳ・ＧＴＰに変換する。Ｇｒｂ２ドッキングタンパク質と活性化キナーゼまたはリン酸化受容体関連タンパク質との相互作用は、特定のホスホチロシン配列を認識するシグナル伝達タンパク質のＳｒｃ相同（ＳＨ２）領域によって媒介される。グアノシン５’−三リン酸（ＧＴＰ）が結合すると、ＲＡＳは、立体構造変化を起こし、ＲＡＦ−１の細胞膜への動員を引き起こし、そこでいくつかのキナーゼによってリン酸化され、また同時にプロテインホスファターゼ２Ｂによって重要な残基において脱リン酸化される。活性化されたＲＡＦは、活性化ループの２つのセリン残基上でマイトジェン活性化プロテインキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）をリン酸化し、結果的にこのタンパク質キナーゼの活性化をもたらす。次いで、ＭＥＫは、細胞外シグナル制御キナーゼ（ＥＲＫ）をリン酸化および活性化することでＥＲＫの核への移動が可能となり、そこで転写因子をリン酸化して様々な遺伝子の発現を可能にする。

ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫシグナル伝達経路は、ヒトの癌の約１／３において、大抵はタンパク質の異所性活性化をもたらす突然変異によって制御不全となる。この制御不全は、同様に、増殖の促進およびアポトーシスの回避を含むがそれらに限定されない癌の表現型の病因および維持に不可欠な多様な細胞変化を引き起こす（Ｄｈｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ， ２００７， ２６： ３２７９−３２９０）。そのため、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫシグナル伝達経路の重要なメンバーの低分子阻害剤の開発が、製薬産業および腫瘍学コミュニティー内で熱心な努力の対象となっている。

ＭＥＫは、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ経路の主要なタンパク質であり、細胞増殖および生存に向けてシグナルを送信し、ＲＡＳもしくはＲＡＦ癌遺伝子、または成長受容体チロシンキナーゼに突然変異を有する腫瘍において頻繁に活性化される。ＭＥＫは、ＲＡＳおよびＲＡＦの下流にあるため、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ経路において重要な役割を果たす。癌において変異するのは稀であるにもかかわらず（Ｍｕｒｕｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ， ２００９， ８： ２１２２−２１２４； Ｓａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｔｈｏｒａｃ．Ｏｎｃｏｌ．， ２０１０，５： ５９７−６００）、
ＭＥＫ１およびＭＥＫ２タンパク質の阻害剤も、それらがＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫシグナル伝達経路のシグナル伝達カスケード内で中央に位置することに起因して、低分子阻害の標的となっている（Ｆｒｅｍｉｎ ａｎｄ Ｍｅｌｏｃｈｅ， Ｊ． Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．， ２０１０， ３：８）。最近、進行型非小細胞性肺癌に苦しむ患者の臨床試験において、強力なＭＥＫ阻害剤が有効性を示すことができなかった（Ｈａｕｒａ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２０１０， １６： ２４５０−２４５７）。この試験が失敗した理由は明らかではない。

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（これ以降「化合物Ａ」と称される）は、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２タンパク質の既知の強力かつ選択的な阻害剤であり、哺乳動物における過剰増殖性疾患、特に癌の治療に有用な、ベンズイミダゾール化合物である。例えば、最近公開された、切除不能な局所進行性または転移性胆道癌に苦しむ、１回以下の全身療法を受けたことのある２８人の患者の第Ｉ相試験において、経口化合物Ａによる治療（６０ｍｇ、１日２回）が、少なくとも６週間の治療後に、完全退縮１件、部分的退縮１件、および安定１１件の診断をもたらした（Ｆｉｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０， ２０１２ （Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ４， ２０１２ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｃａｎｃｅｒｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｏ． ２２０）。また化合物Ａは、ＢＲＡＦＶ６００またはＮＲＡＳ変異黒色腫のいずれかに苦しむ患者の治療に有効であることも示されている（Ａｓｃｉｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０， ２０１２ （Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， ２０１２ ＡＳＣＯ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｏ． ８５１１）。

この化合物、およびその調製のためのプロセスについては、ＰＣＴ公開番号第ＷＯ０３／０７７９１４号に開示されている。化合物Ａを調製するための製造プロセスは、同書の実施例１８に記載される。そこに記載される製造プロセスは、適切ではあるが、商業生産には不利であると見なされる。

特にＭＥＫ阻害剤として、このベンズイミダゾール化合物の高い力価のために、そのような化合物の改善された製造方法の必要性が存在する。具体的には、以下の基準のうちの１つ以上を満たすプロセスを提供する必要性がある：既知のプロセスと比較して、大規模で実現可能、より安全である、より単純である、より収率が高い、およびより経済的である。

また、癌の治療のための新しい固体形態の必要性も、依然として存在する。
本発明は、小規模または大規模な製造に適した化合物Ａ製造のための改善されたプロセス、およびその有用な中間体を対象とする。本発明はさらに、結晶化した化合物Ａの製造のためのプロセス、およびこの結晶化した化合物の投与に適した新しい薬学的組成物を対象とする。本発明のプロセスに従って調製した結晶化した化合物Ａが、医薬品の創薬および製造に有利な改善された純度プロファイルおよび改善された物理的形態を有するということが、意外にも発見された。

Ｄｈｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ， ２００７， ２６： ３２７９−３２９０ Ｍｕｒｕｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ， ２００９， ８： ２１２２−２１２４ Ｓａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｔｈｏｒａｃ．Ｏｎｃｏｌ．， ２０１０，５： ５９７−６００ Ｆｒｅｍｉｎ ａｎｄ Ｍｅｌｏｃｈｅ， Ｊ． Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．， ２０１０， ３：８ Ｈａｕｒａ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２０１０， １６： ２４５０−２４５７ Ｆｉｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０， ２０１２ （Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ４， ２０１２ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｃａｎｃｅｒｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｏ． ２２０） Ａｓｃｉｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０， ２０１２ （Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， ２０１２ ＡＳＣＯ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｏ． ８５１１）

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセス、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセス、およびそれに有用な中間体が、本明細書に提供される。また、この結晶化した化合物を含む薬学的組成物も、本明細書に提供される。

一態様において、化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（本明細書において「化合物Ａ」と称される）を調製するためのプロセスが本明細書に提供され、

当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 当該中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて

式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を提供するステップであって、
式中、Ｐ^１は、保護基である、ステップと、
ｃ） 当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を、好適な溶媒または溶媒系に溶解するステップと、
ｄ） 好適な脱保護試薬を用いて、当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を脱保護するステップであって、
式中、各出現におけるＰ^１は、同じかまたは異なってもよく、化合物Ａを提供するための好適な保護基である、ステップとを含む。

別の態様において、式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を調製するためのプロセスが本明細書に提供され、当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を、

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 式ＩＩＩの化合物またはその水和物が形成されるように、中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップであって、

式中、Ｐ^１は保護基である、ステップとを含む。

両方のプロセスのある特定の実施形態において、ステップａ）およびｂ）は「ワンポット」合成として実行され、ステップａ）の中間体を、最初にステップａ）の反応混合物から単離することなく、式（ＩＩ）の化合物と反応させる。特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体１（下に示す構造）を形成することを含み、ステップｂ）は、中間体１を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、中間体１は、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から単離されない。別の実施形態において、中間体１は、ＤＭＦおよびＴＨＦからなる群から選択される溶媒を含む溶液の一部である。

対照的に、他の実施形態において、ステップａ）で形成される中間体は、式（ＩＩ）の化合物と反応させる前に反応混合物から単離される。一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて式（Ｖ）の中間体（下に示す構造）を形成することと、反応混合物から中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。そのため、この実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、「ワンポット」手順としては実行されず、別個の生成ステップとして実行され、ステップａ）の中間体は、ステップｂ）における式（ＩＩ）の化合物との反応の前に単離される。特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させてから酸と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。プロセスの一実施形態において、ステップａ）は、反応混合物から中間体を結晶化させて回収することを含む。一実施形態において、中間体は、濾過によって結晶化および回収される。このさらなる単離ステップは、式（ＩＩ）の化合物とのカップリング反応前に出発物質および工程不純物を除去するので有利であり得る。プロセスのある特定の実施形態において、ステップａ）の中間体を単離することは、合成収率を向上させる。

別の態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、

当該プロセスは、
ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

別の態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、

当該プロセスは、
ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 当該溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｃ） 懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

別の態様において、本明細書に記載されるプロセスに従って調製される、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドが提供される。

別の態様において、式（Ｉ）の化合物が提供される。

当該式（Ｉ）の化合物は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。

別の態様において、式（Ｖ）の化合物が提供される。

当該式（Ｖ）の化合物は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。

別の態様において、式（ＩＶ）の化合物、

またはその水和物が提供される。好ましい実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、その一水和物の形態である。一水和物を含む当該式（ＩＶ）の化合物は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。

別の態様において、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む薬学的組成物が提供される。

別の態様において、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む薬学的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、対象における増殖性疾患、特に癌を治療する方法が提供される。 本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセスであって、

ａ） 式（Ｉ）の化合物を、

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 前記中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて

式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を提供するステップであって、式中、Ｐ^１は、保護基である、ステップと、
ｃ） 前記式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を、好適な溶媒または溶媒系に溶解するステップと、
ｄ） 好適な脱保護試薬を用いて、前記式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を脱保護するステップであって、式中、各出現におけるＰ^１は、同じかまたは異なってもよく、化合物Ａを提供するための好適な保護基である、ステップと、を含む、プロセス。
（項目２）
前記好適な保護基は、アルキル基、アルケニル基、第三級アリール−アルキル、アセタールを生じる基、およびシリル基から選択される、項目１に記載のプロセス。
（項目３）
前記好適な保護基は、ｔ−ブチル基である、項目１に記載のプロセス。
（項目４）
前記中間体を単離することをさらに含む、項目１に記載のプロセス。
（項目５）
前記単離するステップは、前記中間体を結晶化することを含む、項目４に記載のプロセス。
（項目６）
前記中間体は、

式（Ｖ）の化合物である、項目４に記載のプロセス。
（項目７）
前記中間体を、カップリング剤およびプロトン源の存在下で式（ＩＩ）の化合物と反応させる、項目１に記載のプロセス。
（項目８）
前記好適な溶媒または溶媒系は、極性非プロトン溶媒である、項目１に記載のプロセス。
（項目９）
前記好適な溶媒または溶媒系は、アセトニトリルである、項目８に記載のプロセス。
（項目１０）
前記好適な脱保護試薬は、リン酸である、項目１に記載のプロセス。
（項目１１）
前記式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を好適な塩基とさらに反応させて化合物Ａを提供する、項目１に記載のプロセス。
（項目１２）
ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、前記化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 前記溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｃ） 前記懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 前記冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 前記処理した混合物を冷却して結晶化した化合物Ａを提供するステップと、をさらに含む、項目１に記載のプロセス。
（項目１３）
前記溶液は、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む、項目１２のプロセス。
（項目１４）
前記溶液は、メタノール、テトラヒドロフラン、および水からなる、項目１３に記載のプロセス。
（項目１５）
式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を調製するためのプロセスであって、
ａ）式（Ｉ）の化合物を、

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ）式ＩＩＩの化合物またはその水和物が形成されるように、前記中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップであって、

式中、Ｐ^１は保護基である、ステップと、を含むプロセス。
（項目１６）
前記保護基は、アルキル基、アルケニル基、第三級アリール−アルキル、アセタールを生じる基、およびシリル基から選択される、項目１５に記載のプロセス。
（項目１７）
前記好適な保護基は、ｔ−ブチル基である、項目１６に記載のプロセス。
（項目１８）
前記好適な塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化リチウム、カリウムトリメチルシラノラート、リチウムトリメチルシラノラート、およびナトリウムトリメチルシラノラートから選択される、項目１５に記載のプロセス。
（項目１９）
前記好適な塩基は、カリウムトリメチルシラノラートである、項目１８に記載のプロセス。
（項目２０）
前記好適な塩基は、水酸化ナトリウムである、項目１８に記載のプロセス。
（項目２１）
前記中間体は、式（Ｖ）

の化合物である、項目１８に記載のプロセス。
（項目２２）
前記中間体を単離することをさらに含む、項目１８に記載のプロセス。
（項目２３）
前記中間体を単離するステップは、前記中間体を結晶化することを含む、項目２２に記載のプロセス。
（項目２４）
結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（化合物Ａ）を調製するためのプロセスであって、

ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 前記溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｃ） 懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 前記処理した混合物を冷却して結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップと、を含む、プロセス。
（項目２５）
前記溶液は、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む、項目２４のプロセス。
（項目２６）
化合物Ａは、メタノール、テトラヒドロフラン、および水からなる溶液中に溶解される、項目２５に記載のプロセス。
（項目２７）
前記種結晶懸濁液の添加前に、化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ）水と、を含む溶液との混合物を５２℃〜５６℃の内部温度まで加熱するステップをさらに含む、項目２５に記載のプロセス。
（項目２８）
前記種結晶が加えられる前に、ステップ１）の前記溶液を約４７℃〜約４８℃の温度まで冷却するステップをさらに含む、項目２５に記載のプロセス。
（項目２９）
ステップｄ）の前記水は、１０〜２５時間の期間にわたって加えられる、項目２５に記載のプロセス。
（項目３０）
ステップｅ）の前記処理した混合物は、約３℃〜約５℃の内部温度まで冷却される、項目２５に記載のプロセス。
（項目３１）
前記化合物Ａを加える前に、ステップａ）の前記溶液が、約５３℃〜約５５℃の温度まで加熱される、項目２５に記載のプロセス。
（項目３２）
前記処理した混合物は、約２０／２０／６０ｗ／ｗのアルコール／エーテル／水の比率を有する、項目３０のプロセス。
（項目３３）
前記結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを乾燥させるステップをさらに含む、項目２４に記載のプロセス。
（項目３４）
前記結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを粉砕するステップをさらに含む、項目２４に記載のプロセス。
（項目３５）
前記種結晶は、化合物Ａの結晶である、項目１２または２４に記載の方法。
（項目３６）
項目２４または３４に従って調製される、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド。
（項目３７）

である、化合物。
（項目３８）

である、化合物。
（項目３９）

またはその水和物である、化合物。
（項目４０）
前記化合物は、その一水和物の形態である、項目３９に記載の化合物。
（項目４１）
結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む、薬学的組成物。
（項目４２）
前記少なくとも１つの糖は、ラクトース一水和物である、項目４１に記載の薬学的組成物。
（項目４３）
前記少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤は、微結晶性セルロース、微細セルロース、粉末セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースである、項目４１に記載の薬学的組成物。
（項目４４）
少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤は、微結晶性セルロースである、項目４１に記載の薬学的組成物。
（項目４５）
クロスカルメロースナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、および二酸化ケイ素のうちの１つ以上をさらに含む、項目４１〜４４のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目４６）
５〜３５重量パーセントの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、項目４１〜４５のいずれかに記載の薬学的組成物。（項目４７）
約１５ｍｇの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、項目４１〜４５のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目４８）
約４５ｍｇの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、項目４１〜４５のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目４９）
組成物の約５〜１１重量％の結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、約５５〜５６重量％のラクトース一水和物、および約３０〜３６重量％の微結晶性セルロースを含む、薬学的組成物。
（項目５０）
組成物の約１．５〜２．５重量％のクロスカルメロースナトリウム、約０．５〜０．９重量％のステアリン酸マグネシウム、および約０．１〜１重量％パーセントのコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカをさらに含む、項目４９に記載の薬学的組成物。
（項目５１）
前記薬学的組成物は、錠剤形態である、項目４１〜５０のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目５２）
前記錠剤は、コーティングされた錠剤である、項目５１に記載の薬学的組成物。
（項目５３）
前記結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドは、項目２４または３４に記載の方法によって生成される結晶性形態である、項目４１〜５２のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目５４）
対象における増殖性疾患を治療する方法であって、それを必要とする対象に、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法。
（項目５５）
前記増殖性疾患は、癌である、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記癌は、固形腫瘍またはリンパ腫である、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記癌は、黒色腫、膵癌、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、胆道癌、結腸癌、または直腸癌である、項目５５に記載の方法。

従来のプロセスによって生成された、凝集した原薬である化合物Ａの２つの顕微鏡画像を示す。 （ａ）粉砕を用いずに、（ｂ）ジェットミルを用いて、および（ｃ）ピンミルを用いて、本発明の新しい結晶化プロセスによって生成された結晶性化合物Ａの顕微鏡画像を示す。

強力かつ選択的なＭＥＫ１／２阻害剤６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（「化合物Ａ」）の調製および合成に有用なプロセス、およびその有用な中間体が本明細書に提供される。本発明はさらに、結晶化した化合物Ａの合成のためのプロセス、およびこの結晶化した化合物の投与に適した薬学的組成物を対象とする。

これらのプロセスは、以前に知られていたプロセス（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０７７９１４号）よりもいくつかの点において有利である。例えば、化合物Ａの形成のための本発明のプロセスは、低レベルのパラジウム（１ｐｐｍ未満）を含む改善された純度プロファイルを有する。

本明細書で使用される一般名称は、別途明示的に記載のない限り、以下の意味を有するものと定義される。

本発明の目的のための「対象」は、ヒトおよび他の動物、特に哺乳動物、ならびに他の生物を含む。したがって、本方法は、ヒトの治療および獣医学的用途の両方に適用可能である。好ましい実施形態において、患者は哺乳動物であり、最も好ましい実施形態において、患者はヒトである。

「有効量」、「薬学的有効量」、または「治療有効量」という用語は、所望の生物学的、治療的、および／または予防的結果を提供するのに十分な量の薬剤を指す。その結果は、疾患の徴候、症状、もしくは原因のうちの１つ以上の軽減、改善、寛解、減少、遅延、および／もしくは緩和、または生物系の任意の他の所望の変化であり得る。癌に関連して、有効量は、腫瘍を退縮させるおよび／もしくは腫瘍の増殖速度を低下させる（腫瘍増殖を抑制する等）、または他の望ましくない細胞増殖を予防もしくは遅延するのに十分な量を含む。いくつかの実施形態において、有効量は、発生を遅延するのに十分な量である。いくつかの実施形態において、有効量は、再発を予防または遅延するのに十分な量である。有効量は、１回以上の投与において投与することができる。薬物または組成物の有効量は、（ｉ）癌細胞の数を減少させる、（ｉｉ）腫瘍のサイズを減少させる、（ｉｉｉ）末梢器官への癌細胞の浸潤を阻害する、遅らせる、ある程度緩徐にする、および好ましくは停止する、（ｉｖ）腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度緩徐にする、好ましくは停止する）、（ｖ）腫瘍増殖を阻害する、（ｖｉ）腫瘍の発生および／もしくは再発を予防するもしくは遅延する、かつ／または（ｖｉｉ）癌と関連する症状のうちの１つ以上をある程度緩和することができる。

別途指示のない限り、疾患、障害、または症候群を「治療すること」またはその「治療」は、本明細書において使用される場合、疾患、障害、または症候群を阻止すること、すなわち、その発症を停止すること、および疾患、障害、または症候群を緩和すること、すなわち、疾患、障害、または症候群の退行を引き起こすことを意味する。当該技術分野において既知であるように、治療に関連して、全身送達対局所送達、年齢、体重、総体的な健康、性別、食事、投与期間、薬物相互作用、および状態の重症度に合わせた調節が必要な場合があり、それは当業者による日常的な実験によって確認可能である。

「予防」は、ヒトにおける疾患、障害、または症候群の発生を防止すること、すなわち、疾患、障害、または症候群に曝露された可能性があるかまたはそれらにかかりやすい素因を有し得るが、まだ疾患、障害、または症候群の症状を経験していないかまたは示してない動物において、疾患、障害、または症候群の臨床症状を発生させないようにすることを意味する。

「薬学的組成物」は、哺乳動物に発症する特定の疾患または状態を予防するかまたは治療するために、対象、例えば、哺乳動物またはヒトに投与されるべき少なくとも１つの治療剤を含有する混合物または溶液を意味する。

「薬学的に許容される」とは、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、および他の問題となる合併症を起こさない、対象、例えば、哺乳動物またはヒトの組織との接触に適した、妥当な利益／危険比に見合った化合物、材料、組成物、および／または投薬形態を意味する。

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語は、別途記載のない限り、それらの制約のない非限定的な意味で本明細書において使用される。

本発明を説明する文脈中（特に、以下の特許請求の範囲の文脈中）の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」という用語、および同様の言及は、本明細書において別途指示のない限り、または文脈上明らかに矛盾しない限り、単数および複数の両方を包含すると解釈されるべきである。化合物、塩等に複数形が使用される場合、これは、単一の化合物、塩等も意味するものと解釈される。

本明細書において使用される場合、「およそ」または「約」という用語は、一般的に、ある値の１０％、５％、または１％を超えない可能性のある変動を意味する。

本明細書において使用される場合、「単離される」という用語は、化合物が、それが形成されたまたは検出された反応混合物から分離されることを意味する。単離された化合物は、有機溶媒または水の１５重量％未満、１０重量％未満、６重量％未満、または３重量％未満を構成する。分離方法の非限定的な例として、濾過、遠心分離、真空乾燥、沈殿、結晶化、およびカラムクロマトグラフィーが挙げられる。

一態様において、化合物６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（本明細書において「化合物Ａ」と称される）を調製するためのプロセスが本明細書に提供され、

当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 当該中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて

式 （ＩＩＩ）の化合物

またはその水和物を提供するステップであって、
式中、Ｐ^１は、保護基である、ステップと、
ｃ） 当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を、好適な溶媒または溶媒系に溶解するステップと、
ｄ） 好適な脱保護試薬を用いて、当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を脱保護するステップであって、
式中、各出現におけるＰ^１は、同じかまたは異なってもよく、化合物Ａを提供するための好適な保護基である、ステップとを含む。

ステップａ）のプロセスにおいて、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体を生成する。上記反応に適した塩基の例として、限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化リチウム、カリウムトリメチルシラノラート、リチウムトリメチルシラノラート、およびナトリウムトリメチルシラノラートが挙げられる
。好ましい実施形態において、好適な塩基は、カリウムトリメチルシラノラートである。別の好ましい実施形態において、好適な塩基は、水酸化ナトリウムである。

式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させるステップａ）のプロセスは、いずれの好適な溶媒または溶媒系において行われてもよい。好適な溶媒は、極性非プロトン溶媒、例えば、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、２−メチル−テトラヒドロフラン、および１，４−ジオキサンを含む。好適な溶媒系は、好適な溶媒の任意の組み合わせを含む。好ましい実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドとＴＨＦとの混合物中で行われる。好適な溶媒系はまた、水と組み合わせて１つ以上の好適な溶媒も含むことができる。特定の一実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと水との混合物中で行われる。

上述のプロセスの一実施形態において、ステップａ）およびｂ）は「ワンポット」合成として実行され、ステップａ）の中間体を、最初にステップａ）の反応混合物から単離することなく、式（ＩＩ）の化合物と反応させる（例えば、実施例２Ａを参照）。一実施形態において、ステップａ）の中間体は中間体１である。

「ワンポット」合成を含むプロセスの特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体１を形成することを含み、ステップｂ）は、中間体１を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、中間体１は、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から単離されない。別の実施形態において、中間体１は、ＤＭＦおよびＴＨＦからなる群から選択される溶媒を含む溶液の一部である。

プロセスの別の実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、式（ＩＩ）の化合物と反応させる前に、反応混合物からのステップａ）の中間体の単離とともに実行される。一実施形態において、ステップａ）の中間体は、式（Ｖ）の化合物である。

ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体がステップａ）の反応混合物から単離されるプロセスの別の実施形態において、プロセスは、ステップｂ）の前にステップａ）
の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を単離することを含む。一実施形態において、単離プロセスは、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を結晶化および回収することを含む。ある実施形態において、中間体は、濾過によって結晶化および回収される。

別の実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体がステップａ）の反応混合物から単離されるプロセスの特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させてから酸と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から式（Ｖ）の中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、酸は塩酸である。別の実施形態において、プロセスのステップａ）は、ステップａ）の反応混合物から式（Ｖ）の中間体を結晶化および回収することを含む。一実施形態において、中間体は、濾過によって結晶化および回収される。

本明細書において使用される場合、「保護基」という用語は、反応基（カルボキシ基、アミノ基、ヒドロキシ基、およびメルカプト基等）が望ましくない反応を起こすことを防止するために使用される基を指すことが意図される。具体的には、本出願を通して使用されるＰ^１に適した保護基は、酸に不安定な保護基を含む。本出願を通して使用されるＰ^１に適したな酸に不安定な保護基の例示的な例として、限定されないが、アルキル基、例えば第三級アルキル（例えば、第三級Ｃ_４−Ｃ_７アルキル、例えば、ｔ−ブチルまたは第三級アミル等）；アルケニル基；第三級アリール−アルキル基、例えば、１−メチル−１−フェニルエチル（クミル）またはトリフェニルメチル（トリチル）等；アセタールを生じる基、例えば、メトキシメチル、１−エトキシエチル、２−テトラヒドロピラニルまたは２−テトラヒドロフラニル等；およびシリル基、例えば、トリメチルシリル、トリエチルシリル、またはｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルジリル等が挙げられる。好ましい実施形態において、Ｐ^１はｔ−ブチルである。

ステップａ）からの中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップｂ）のプロセスは、いずれのカップリング剤およびプロトン源の存在下で行われてもよい。好適なプロトン源は、限定されないが、イミダゾール塩酸塩、ピリジン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、Ｎ−メチルモルホリン塩酸塩、およびスルホン酸、例えば、メタンスルホン酸等を含み、好ましくはイミダゾール塩酸塩を含む。好適なカップリング剤は、限定されないが、１，１’−カルボニルジイミダゾール、クロロぎ酸イソブチル、塩化ピバロイル、塩化オキサリル、塩化チオニル、１−プロパンホスホン酸環状無水物、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）を含み、好ましくは１，１’−カルボニルジイミダゾールを含む。本発明の好ましい実施形態において、ステップｂ）のプロセスは、カップリング剤１，１’−カルボニルジイミダゾールおよびプロトン源イミダゾール塩酸塩の存在下で行われる。１，１’−カルボニルジイミダゾール以外のカップリング剤およびイミダゾール塩酸塩以外のプロトン源のために本発明のプロセスを最適化することは、当業者の知識の範囲内である。

式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物が好適な溶媒または溶媒系に溶解され、脱保護されるステップｃ）のプロセスは、いずれの好適な溶媒または溶媒系において行われてもよい。好適な溶媒の例として、（ａ）極性プロトン溶媒、例えば、メタノール、エタノール、およびイソプロパノール等、ならびに（ｂ）極性非プロトン溶媒、例えば、アセトン，アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル
、およびテトラヒドロフランが挙げられる。好適な溶媒系は、好適な溶媒の任意の組み合わせを含む。

一実施形態において、反応は、極性非プロトン溶媒中で行われる。好ましい実施形態において、反応は、アセトニトリル中で行われる。

Ｐ^１の保護基は、いずれの好適な脱保護剤を使用して除去されてもよい。ヒドロキシ保護基の脱保護条件は、保護基の選択に伴って必然的に変化する。アルキル基またはアルケニル基は、例えば、リン酸等の水性酸を用いて除去されてもよい。第三級アリール−アルキル基は、例えば、水性酸によって除去されてもよい。シリル基は、例えば、フッ化物によってまたは水性酸によって除去されてもよい。当業者は、水性酸を用いて、酸に不安定な保護基を除去できることを理解するであろう。上に例示したこれらの保護基に適した脱保護剤は、限定されないが、水性酸、例えば、リン酸、塩酸、または硫酸等；非水性酸、例えば、イソプロピルアルコールまたは１，４−ジオキサンもしくはテトラヒドロフラン等の他の好適な有機溶媒中の塩化水素酸、トリメチルシリルクロリド、トリフルオロ酢酸、あるいはｐ−トルエンスルホン酸を含んでもよい。

一実施形態において、保護基Ｐ^１がｔ−ブチルである場合、好適な脱保護剤は、水性酸、例えば、リン酸、塩酸、硫酸等；イソプロピルアルコール中の５Ｍ塩酸、トリメチルシリルクロリド、またはｐ−トルエンスルホン酸（水和物）から選択されてもよい。好ましくは、保護基Ｐ^１がｔ−ブチルである場合、好適な脱保護剤は、水性リン酸である。

一実施形態において、保護基Ｐ^１がｔ−ブチルである場合、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系は、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、およびエタノールから選択され、脱保護剤はリン酸である。

さらなる実施形態において、保護基Ｐ^１がｔ−ブチルである場合、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系は、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、およびエタノールから選択され、脱保護剤は塩酸である。

本発明のこの態様のさらなる実施形態において、ステップｄ）に次いで、ステップｄ）で提供される化合物Ａがさらにいずれかのその薬学的に許容される塩へ変換され得る。「薬学的に許容される塩」は、本明細書において使用される場合、別途指示のない限り、本発明の化合物中に存在し得る酸性基または塩基性基の塩を含む。本質的に塩基性である本発明の化合物は、種々の無機酸および有機酸と様々な塩を形成することができる。本発明のそのような塩基性化合物の薬学的に許容される酸付加塩を調製するために使用され得る酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち、アセテート、ベンゾエート、ブロミド、クロリド、シトレート、フマレート、ヒドロブロミド、ヒドロクロリド、ヨウ化物、ラクテート、マレエート、マンデレート、硝酸塩、シュウ酸塩、サリチレート、スクシネート、および酒石酸塩等の薬学的に許容されるアニオンを含有する塩を形成する酸である。本発明の単一化合物は、１つより多くの酸性部分または塩基性部分を含むことができるため、本発明の化合物は、単一化合物中に一、二または三塩を含み得る。

本発明の化合物中の酸性部分の場合、塩は、本発明の化合物を塩基性化合物、特に無機塩基で処理することによって形成されてもよい。好ましい無機塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、バリウム、およびカルシウム等のアルカリ金属およびアルカリ土類金属を用いて形成される無機塩である。好ましい有機塩基塩は、例えば、アンモニウム、ジベンジルアンモニウム、ベンジルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ビス（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、フェニルエチルベンジルアミン、ジベンジル−エチレンジアミン等の塩を含む。他の酸性部分の塩は、例えば、プロカイン、キニーネ、お
よびＮ−メチルグルソアミンを用いて形成される塩、ならびにグリシン、オルニチン、ヒスチジン、フェニルグリシン、リジン、およびアルギニン等の塩基性アミノ酸を用いて形成される塩を含んでもよい。特に好ましい塩は、本発明の化合物のナトリウム塩またはカリウム塩である。

塩基性部分に関して、塩は、本発明の化合物を酸性化合物、特に無機酸で処理することによって形成されてもよい。この種類の好ましい無機塩は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸等を含んでもよい。この種類の好ましい有機塩は、例えば、酢酸、コハク酸
、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、Ｄ−グルタミン酸、グリコール酸、安息香酸、桂皮酸等の有機酸を用いて形成される塩を含むことができる。この種類の特に好ましい塩は、化合物Ａの塩酸塩または硫酸塩である。

本発明に従って、５〜９の範囲のｐＨに達するように、脱保護ステップｄ）で形成された酸性反応混合物に塩基が加えられてもよいことを理解されたい。好ましくは、脱保護ステップｄ）で形成される酸性反応混合物を約８〜８．５のｐＨに中和するために塩基が加えられる。好適な塩基の例として、限定されないが、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、および水酸化アンモニウムが挙げられる。好ましくは、さらなる塩基は水酸化カリウムである。

好ましい実施形態において、ステップａ）の好適な塩基はカリウムトリメチルシラノラートであり、保護基Ｐ^１はｔ−ブチルであり、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系はアセトニトリルであり、ステップｄ）の好適な脱保護剤は水性リン酸である。

別の好ましい実施形態において、ステップａ）の好適な塩基は水酸化ナトリウムであり、保護基Ｐ^１はｔ−ブチルであり、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系はアセトニトリルであり、ステップｄ）の好適な脱保護剤は水性リン酸である。

別の好ましい実施形態において、ステップａ）の好適な塩基はカリウムトリメチルシラノラートであり、保護基Ｐ^１はｔ−ブチルであり、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系はアセトニトリルであり、ステップｄ）の脱保護剤はリン酸であり、さらなる塩基が加えられ、そのさらなる塩基は水酸化カリウムである。

さらに別の好ましい実施形態において、ステップａ）の好適な塩基は水酸化ナトリウムであり、保護基Ｐ^１はｔ−ブチルであり、ステップｃ）の好適な溶媒または溶媒系はアセトニトリルであり、ステップｄ）の好適な脱保護剤はリン酸であり、さらなる塩基が加えられ、そのさらなる塩基は水酸化カリウムである。

別の態様において、式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を調製するためのプロセスが本明細書に提供され、当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を、

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 式ＩＩＩの化合物またはその水和物が形成されるように、当該中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップであって、

式中、Ｐ^１は保護基である、ステップとを含む。

式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体を生成する、ステップａ）のプロセス。上記反応に適した塩基の例として、限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化リチウム、カリウムトリメチルシラノラート、リチウムトリメチルシラノラート、およびナトリウムトリメチルシラノラートが挙げられる。好ましい実施形態において、好適な塩基は、カリウムトリメチルシラノラートである。別の好ましい実施形態において、好適な塩基は、水酸化ナトリウムである。

式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させるステップａ）のプロセスは、いずれの好適な溶媒または溶媒系において行われてもよい。好適な溶媒は、極性非プロトン溶媒、例えば、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、２−メチル−テトラヒドロフラン、および１，４−ジオキサンを含む。好適な溶媒系は、好適な溶媒の任意の組み合わせを含む。好ましい実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドとＴＨＦとの混合物中で行われる。好適な溶媒系はまた、水と組み合わせて１つ以上の好適な溶媒も含むことができる。特定の一実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと水との混合物中で行われる。

プロセスの一実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、前述のように「ワンポット」合成として実行される。一実施形態において、ステップａ）の中間体は中間体１である。別の実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体１を形成することを含み、ステップｂ）は、中間体１を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、中間体１は、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から単離されない。別の実施形態において、中間体１は、ＤＭＦおよびＴＨＦからなる群から選択される溶媒を含む溶液の一部である。

プロセスの別の実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、前述のように、ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体の単離とともに実行される。一実施形態において、ステップａ）の中間体は、式（Ｖ）の化合物である。別の実施形態において、プロセスは、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を単離することを含む。一実施形態において、単離プロセスは、ステップｂ）の前
にステップａ）の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を結晶化および回収することを含む。一実施形態において、中間体は、濾過によって結晶化および回収される。

ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体がステップａ）の反応混合物から単離されるプロセスの別の実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させてから酸と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から式（Ｖ）の中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、酸は塩酸である。

好適な保護基Ｐ^１の例として、上述の保護基が挙げられ、その記述は、参照により全体が本明細書に組み込まれる。

ステップａ）からの中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップｂ）のプロセスは、いずれのカップリング剤およびプロトン源の存在下で行われてもよい。好適なプロトン源は、限定されないが、イミダゾール塩酸塩、ピリジン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、Ｎ−メチルモルホリン塩酸塩、およびスルホン酸、例えば、メタンスルホン酸等を含み、好ましくはイミダゾール塩酸塩を含む。好適なカップリング剤は、限定されないが、１，１’−カルボニルジイミダゾール、クロロぎ酸イソブチル、塩化ピバロイル、塩化オキサリル、塩化チオニル、１−プロパンホスホン酸環状無水物、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）を含み、好ましくは１−１’−カルボニルジイミダゾールを含む。本発明の好ましい実施形態において、ステップｂ）のプロセスは、カップリング剤１，１’−カルボニルジイミダゾールおよびプロトン源イミダゾール塩酸塩の存在下で行われる。１，１’−カルボニルジイミダゾール以外のカップリング剤およびイミダゾール塩酸塩以外のプロトン源のために本発明のプロセスを最適化することは、当業者の知識の範囲内である。

本発明の別の態様において、化合物Ａの新しい結晶化形態を調製するための新しいプロセスが発見された。化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩の従来の合成プロセス（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０７７９１４号に記載されるもの）は、医薬品の創薬に関する以下の重大な欠点を有することが示された：（ａ）合成された原薬は、典型的には粉末の大きな塊（凝集体）を形成した、（ｂ）不十分な純度プロファイルおよび収率、ならびに（ｃ）合成された原薬は、流動性の低い「粘着」形態を有していた。従来のプロセスは、塊を形成する（中には最大１５ｍｍの直径を有する塊もある）、非常に凝集性の高い化合物Ａの材料を生成していた。これらの問題は、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物の、信頼性がある、再現性があり、制御された大規模生成の妨げとなる重大な問題である。

化合物Ａの結晶化形態を調製するための新しいプロセスが発見された。著しく改善された純度プロファイルおよび改善された物理的形態（例えば、粘着性のある結晶／粒子の減少、流動性の改善）を有する化合物Ａの結晶性形態を意外にも生成する。化合物Ａは、ほとんどの標準的な溶媒において非常に低い溶解度（すなわち、室温で１％未満）を有することが分かった。この低い溶解度のために、標準的な冷却方法によって結晶化を行うことおよび結晶の成長を制御することが困難である。しかしながら、概して貧溶媒（広い温度範囲で溶解度＜０．０１％）である水もまた、エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む新規溶媒混合物中で使用されると、予想外に化合物Ａの溶媒として作用し、したがっ
て化合物Ａの溶解度を著しく増加させることが発見された。溶媒に少量の貧溶媒を加えることにより、典型的には溶解度を若干増加させることができるが、テトラヒドロフランおよびメタノールの溶媒混合物への水の添加は、水を含まないメタノールおよびテトラヒドロフランの溶媒混合物と比較して化合物Ａの溶解度を約５０％増加させた。この溶解度における改善は、最終原薬の純度プロファイルの改善に寄与する。

さらに、化合物Ａの結晶化形態を調製するための新しいプロセスは、粘着挙動が低減され、流動性が改善された化合物Ａの新しい結晶性形態を生成する。この改善は、後に考察するようなその後の粉砕ステップを用いてまたは用いずに実証される。（図２と比較して図１を参照のこと）。しかしながら、さらなる粉砕ステップは、化合物Ａの粘着挙動および流動性にさらなる有利な改善を提供する。

したがって、一態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、

当該プロセスは、
ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

別の態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、

当該プロセスは、
ａ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｂ） 溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｃ） 懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
ｄ） 冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｅ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（
２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

本発明のこの態様のステップａ）によれば、化合物Ａは、（ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に溶解される。ステップａ）は、（ａ）（ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを加えること、または（ｂ）溶液の各構成要素を化合物Ａに加えることのいずれかによって行われてもよいことを理解されたい。

好適なエーテルは、ＴＨＦを含む。

本発明によれば、ステップａ）の溶液は、アルコールの包含を必要としない。しかしながら、エーテルおよびアルコールの両方を含む溶液が好ましい。好適なアルコールは、限定されないが、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールを含む。好ましくは、アルコールはメタノールである。

一実施形態において、化合物Ａは、溶媒ＴＨＦおよび水からなる溶液中に溶解される。

一実施形態において、化合物Ａは、（ｉ．）エーテルおよびアルコールの両方を含む溶液と、（ｉｉ．）水とを含むかまたはそれらからなる溶液中に溶解される。好ましい溶液は、アルコールおよびＴＨＦを含む溶媒系と、水とを含む。

好ましい実施形態において、化合物Ａは、（ｉ．）メタノールおよびＴＨＦからなる溶媒系と、（ｉｉ．）水とからなる溶液中に溶解される。

ステップａ）の溶液中における化合物Ａの溶解は、種結晶懸濁液の添加前に、化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物を約５２〜５６℃の内部温度まで加熱することによって促進される。

一態様において、化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物は、約５３〜５５℃の内部温度まで加熱される。

ステップｂ）で種結晶懸濁液が溶液に加えられ、懸濁液混合物が提供される。化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物を約５２〜５６℃の内部温度まで加熱した後、かつ（ｉｉ．）種結晶懸濁液の添加前に、溶液は有利に冷却される。

一態様において、水が懸濁混合物に加えられ、処理した混合物が提供される。別の態様において、水が加えられる前に、懸濁混合物は、約３０〜５０℃の温度まで冷却される。好ましい実施形態において、水が加えられる前に、懸濁混合物は、約４７〜４８℃の温度まで冷却される。

上で考察したように、結晶化プロセスは、貧溶媒冷却系を利用する。ステップｄ）において、懸濁液または冷却された懸濁混合物に水が加えられ、処理した混合物が提供される。概して貧溶媒（広い温度範囲にわたって溶解度＜０．０１％）として作用する水も、水／メタノール／テトラヒドロフラン溶媒系の一部である場合、予想外に化合物Ａの溶媒として作用する。したがって、水を加えることは、意外にも化合物Ａの溶解度を著しく増加させる効果を有する。このプロセスを使用して、水（２４％）、メタノール （３８％）、およびテトラヒドロフラン（３８％）の混合物を用いると、６５℃で化合物Ａの最大溶解度に達することが分かり、さらに水を加えると化合物Ａの溶解度が低下した。

水が溶媒系の７０％ｗ／ｗ、好ましくは６５％（ｗ／ｗ）を超えないように、５〜３５時間の期間にわたって水を加えることができる。一実施形態において、１０〜２５時間、好ましくは２５時間の期間にわたって水が加えられる。別の実施形態において、１５時間以内に３３％が加えられ、１０時間以内に６６％が加えられるように、２５時間の期間にわたって水が加えられる。

別の態様において、懸濁液または冷却した懸濁混合物への水の添加が終了した溶媒系中の成分は、４０／４０／２０〜１５／１５／７０ｗ／ｗの範囲のアルコール／エーテル／水の最終比率を有する：ｗ／ｗは、溶媒系／貧溶媒系の他の構成要素に対する各成分の重量％を指す。好ましい実施形態において、アルコール／エーテル／水の最終比率は、約２０／２０／６０ｗ／ｗ（２０／２０／６０ｗ／ｗ）である。

ステップｅ）において、結晶化した化合物Ａが、処理した混合物を冷却することによって最終的に得られる。処理した混合物は、５〜２５時間の期間にわたって有利に冷却される。一態様において、処理した混合物は、８〜１５時間、８〜１２時間、または９〜１１時間の期間にわたって冷却される。好ましい実施形態において、処理した混合物は、約１０時間の期間にわたって冷却される。処理した混合物は、約１〜１０℃、好ましくは約３〜５℃の内部温度まで有利に冷却される。好ましい実施形態において、処理した混合物は、約９〜１１時間の期間にわたって約３〜５℃の内部温度まで冷却される。

結晶化した化合物Ａを濾過した後、例えば、真空下で、または真空オーブン内でそれを乾燥することができる。

さらなる実施形態において、上記本発明のプロセスのステップｅ）で提供される結晶化した化合物Ａは、続いて粉砕されてもよい。好適な粉砕技術は、当業者に既知であり、限定されないが、ピンミルまたはジェットミルを含む。

より小さな一次粒子は、より高い凝集作用を引き起こすことが多い。しかしながら、粉砕後、結晶化した化合物Ａは、たとえ３ヶ月を超える保存期間の後であっても、予想外に粘着性の低下を示した。

さらなる一態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 当該中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて

式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を提供するステップであって、式中、Ｐ^１は、保護基である、ステップと、
ｃ） 当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を、好適な溶媒または溶媒系に溶解するステップと、
ｄ） 好適な脱保護試薬を用いて、当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を脱保護するステップであって、
式中、各出現におけるＰ^１は、同じかまたは異なってもよく、化合物Ａを提供するための好適な保護基である、ステップと、
ｅ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｆ） 溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、
ｇ） 懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｈ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２− ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

別の態様において、化合物Ａの結晶化形態を調製するためのプロセスが提供され、当該プロセスは、
ａ） 式（Ｉ）の化合物を、

好適な塩基と反応させて中間体を形成するステップと、
ｂ） 当該中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて

式（ＩＩＩ）の化合物、

またはその水和物を提供するステップであって、式中、Ｐ^１は、保護基である、ステップと、
ｃ） 当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を、好適な溶媒または溶媒系に溶解するステップと、
ｄ） 好適な脱保護試薬を用いて、当該式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を脱保護するステップであって、
式中、各出現におけるＰ^１は、同じかまたは異なってもよく、化合物Ａを提供するための好適な保護基である、ステップと、
ｅ） （ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に、化合物Ａを溶解して溶液を提供するステップと、
ｆ） 溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップと、懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
ｇ） 冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
ｈ） 処理した混合物を冷却して、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップとを含む。

式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体を生成する、ステップａ）のプロセス。上記反応に適した塩基の例として、限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化リチウム、カリウムトリメチルシラノラート、リチウムトリメチルシラノラート、およびナトリウムトリメチルシラノラートが挙げられる。好ましい実施形態において、好適な塩基は、カリウムトリメチルシラノラートである。別の好ましい実施形態において、好適な塩基は、水酸化ナトリウムである。

式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させるステップａ）のプロセスは、いずれの好適な溶媒または溶媒系において行われてもよい。好適な溶媒は、極性非プロトン溶媒、例えば、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、２−メチル−テトラヒドロフラン、および１，４−ジオキサンを含む。好適な溶媒系は、好適な溶媒の任意の組み合わせを含む。好ましい実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドとＴＨＦとの混合物中で行われる。好適な溶媒系はまた、水と組み合わせて１つ以上の好適な溶媒も含むことができる。特定の一実施形態において、反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと水との混合物中で行われる。

プロセスの一実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、前述のように「ワンポット」合成として実行される。一実施形態において、ステップａ）の中間体は中間体１である。別の実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて中間体１を形成することを含み、ステップｂ）は、中間体１を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、中間体１は、ＤＭＦおよびＴＨＦからなる群から選択される溶媒を含む溶液である。

プロセスの別の実施形態において、ステップａ）およびｂ）は、前述のように、ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体の単離とともに実行される。一実施形態において、ステップａ）の中間体は、式（Ｖ）の化合物である。別の実施形態において、プロセスは、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を単離することを含む。一実施形態において、プロセスは、ステップｂ）の前にステップａ）の反応混合物から中間体（例えば、式（Ｖ）の化合物）を結晶化および回収することを含む。一実施形態において、中間体は、濾過によって結晶化および回収される。

ステップｂ）の反応の前にステップａ）の中間体がステップａ）の反応混合物から単離されるプロセスの別の実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。特定の一実施形態において、ステップａ）は、式（Ｉ）の化合物を好適な塩基と反応させてから酸と反応させて式（Ｖ）の中間体を形成することと、反応混合物から式（Ｖ）の中間体を単離することとを含み、ステップｂ）は、式（Ｖ）の中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を形成することを含む。一実施形態において、酸は塩酸である。

ステップｂ）およびｄ）の好適な保護基および脱保護試薬は上に提供され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

ステップａ）からの中間体を式（ＩＩ）の化合物と反応させるステップｂ）のプロセスは、いずれのカップリング剤およびプロトン源の存在下で行われてもよい。好適なプロトン源は、限定されないが、イミダゾール塩酸塩、ピリジン塩酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、Ｎ−メチルモルホリン塩酸塩、およびスルホン酸、例えば、メタンスルホン酸等を含み、好ましくはイミダゾール塩酸塩を含む。好適なカップリング剤は、限定されないが、１，１’−カルボニルジイミダゾール、クロロぎ酸イソブチル、塩化ピバロイル、塩化オキサリル、塩化チオニル、１−プロパンホスホン酸環状無水物、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）を含み、好ましくは１，１’−カルボニルジイミダゾールを含む。本発明の好ましい実施形態において、ステップ ｂ）のプロセスは、カップリング剤１，１’−カルボニルジイミダゾールおよびプロトン源イミダゾール塩酸塩の存在下で行われる。１，１’−カルボニルジイミダゾール以外のカップリング剤およびイミダゾール塩酸塩以外のプロトン源のために本発明のプロセスを最適化することは、当業者の知識の範囲内である。

本発明に従って、５〜９の範囲のｐＨに達するように、脱保護ステップｄ）で形成された酸性反応混合物に塩基が加えられてもよいことを理解されたい。好ましくは、脱保護ステップｄ）で形成される酸性反応混合物を約８〜８．５のｐＨに中和するために塩基が加えられる。好適な塩基の例として、限定されないが、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、および水酸化アンモニウムが挙げられる。好ましくは、さらなる塩基は水酸化カリウムである。

本発明のこの態様のステップｅ）によれば、化合物Ａは、（ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む溶液中に溶解される。ステップｅ）は、（ａ）（ｉ．）エーテルおよび任意選択的にアルコールを含む溶媒系と、（ｉｉ．）水と、を含む予め混合した溶液中に化合物Ａを加えること、または（ｂ）溶液の各構成要素を化合物Ａに加えることのいずれかによって行われてもよいことを理解されたい。

好適なエーテルは、ＴＨＦを含む。

本発明によれば、ステップｅ）の溶液は、アルコールの包含を必要としない。しかしながら、エーテルおよびアルコールの両方を含む溶液が好ましい。好適なアルコールは、限定されないが、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールを含む。好ましくは、アルコールはメタノールである。

好ましい実施形態において、化合物Ａは、（ｉ．）メタノールおよびＴＨＦからなる溶媒系と、（ｉｉ．）水とからなる溶液中に溶解される。

ステップｅ）の溶液中における化合物Ａの溶解は、種結晶懸濁液の添加前に、化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物を約５２〜５６℃の内部温度まで加熱することによって促進される。一態様において、化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物は、約５３〜５５℃の内部温度まで加熱される。

ステップｆ）で種結晶懸濁液が溶液に加えられ、懸濁液混合物が提供される。化合物Ａと、（ｉ．）エーテルおよびアルコールを含む溶媒系と（ｉｉ．）水とを含む溶液との混合物を約５２〜５６℃の内部温度まで加熱した後、かつ（ｉｉ．）種結晶懸濁液の添加前に、溶液は有利に冷却される。

一態様において、水が懸濁混合物に加えられ、処理した混合物が提供される。別の態様において、水が加えられる前に、懸濁混合物は、約３０〜５０℃の温度まで冷却される。好ましい実施形態において、水が加えられる前に、懸濁混合物は、約４７〜４８℃の温度まで冷却される。

ステップｇ）において、水が溶媒系の７０％ｗ／ｗ、好ましくは６５％（ｗ／ｗ）を超えないように、５〜３５時間の期間にわたって水を加えることができる。一実施形態において、１０〜２５時間、好ましくは２５時間の期間にわたって水が加えられる。別の実施形態において、１５時間以内に３３％が加えられ、１０時間以内に６６％が加えられるように、２５時間の期間にわたって水が加えられる。

別の態様において、懸濁液または冷却した懸濁混合物への水の添加が終了した溶媒系中の成分は、４０／４０／２０〜１５／１５／７０ｗ／ｗの範囲のアルコール／エーテル／水の最終比率を有し、ｗ／ｗは、溶媒系／貧溶媒系の他の成分に対する各構成要素の重量％を指す。好ましい実施形態において、アルコール／エーテル／水の最終比率は、約２０／２０／６０ｗ／ｗ（２０／２０／６０ｗ／ｗ）である。

ステップｈ）において、結晶化した化合物Ａが、処理した混合物を冷却することによって最終的に得られる。処理した混合物は、５〜２５時間の期間にわたって有利に冷却される。一態様において、処理した混合物は、８〜１５時間、８〜１２時間、または９〜１１時間の期間にわたって冷却される。好ましい実施形態において、処理した混合物は、約１０時間の期間にわたって冷却される。処理した混合物は、約１〜１０℃、好ましくは約３〜５℃の内部温度まで有利に冷却される。好ましい実施形態において、処理した混合物は、約９〜１１時間の期間にわたって約３〜５℃の内部温度まで冷却される。結晶化した化合物Ａを濾過した後、例えば、真空下で、または真空オーブン内でそれを乾燥することができる。

本発明のプロセスによって生成される結晶化した化合物Ａは、さらに粉砕することができる（例えば、ジェットミルまたはピンミル）。

さらなる態様において、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる本明細書において前述されるプロセスに従って調製される、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドが提供される。結晶化した化合物Ａは、さらなる粉砕を用いてまたは用いずに調製される原薬を含むことを理解されたい。

別の態様において、式（Ｉ）の化合物が提供される。

当該式（Ｉ）の化合物は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。

別の態様において、式（Ｖ）の化合物が提供される。

当該式（Ｖ）の化合物は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。
別の態様において、式（ＩＶ）の化合物、

またはその水和物が提供される。好ましい実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、その一水和物の形態である。当該式（ＩＶ）の化合物（その一水和物を含む）は、本発明による化合物Ａの合成のための中間体化合物として有用である。

結晶化した化合物Ａを含む薬学的組成物
別の態様において、結晶化した化合物Ａと、少なくとも１つの薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む薬学的組成物が提供される。薬学的組成物は、結晶化した化合物Ａ、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む。組成物
は、それを必要とする対象、好ましくはヒトにおける癌の治療に特に有用である。

本発明の薬学的組成物において、結晶化した化合物Ａは、粉砕ステップを用いてまたは用いずに、上述の結晶化プロセスによって生成される結晶形態である。本明細書に提供される薬学的組成物の一実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５〜３５重量％の結晶化した化合物Ａを含む。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５〜１１重量％の結晶化した化合物Ａを含む。別の好ましい実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約６．２５重量％の結晶化した化合物Ａを含む。別の好ましい実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約１０重量％の結晶化した化合物Ａを含む。

別の実施形態において、薬学的組成物は、約１５ｍｇまたは４５ｍｇの結晶化した化合物Ａを含む。

薬学的組成物に使用するのに好適な糖は、限定されないが、ラクトース（例えば、噴霧乾燥したラクトース、ラクトース一水和物）、麦芽糖、フルクトース、ガラクトース、粉砂糖、圧縮糖、デキストレート、デキストリン、ブドウ糖、マンニトール、Ｎｕ−Ｔａｂ、Ｄｉ−Ｐａｃ、Ｅｍｄｅｘ、およびショ糖を含む。好ましい実施形態において、薬学的組成物に使用される等は、ラクトース、特にラクトース一水和物である。

本明細書に提供される薬学的組成物の一実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約３０〜７０重量％の少なくとも１つの糖を含む。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５０〜６０重量％のラクトースを含む。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５０〜６０重量％のラクトース一水和物を含む。好ましい実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５５〜５６重量％のラクトース一水和物を含む。

好適なセルロース誘導体賦形剤は、限定されないが、微結晶性セルロース、微細セルロース、粉末セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む。好ましい実施形態において、セルロースに基づく賦形剤は、微結晶性セルロースである。

本明細書に提供される薬学的組成物の一実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約２０〜４０重量％のセルロース誘導体賦形剤を含む。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約２０〜４０重量％の微結晶性セルロースを含む。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約３０〜４０重量％の微結晶性セルロースを含む。好ましい実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約３０〜３６重量％の微結晶性セルロースを含む。

薬学的組成物は、例えば、錠剤、カプセル、丸剤、散剤、徐放性製剤、滅菌溶液としての非経口注射剤用の懸濁剤、軟膏もしくはクリームとしての局所投与または坐剤としての直腸投与用の懸濁剤または乳剤等の、単位投薬形態での経口投与に好適な形態であり得る。薬学的組成物は、正確な投薬量の単体投与に適した単位投薬形態であってもよい。複数の投薬単位の投与によって必要とされる有効量に達し得るため、各投薬形態の個々の用量に含有される組み合せパートナーの単位内容量が、それ自体で有効量を構成する必要はないことを認識されたい。

特定の量の活性化合物Ａを含む種々の薬学的組成物を調製する方法は、当業者に既知であるかまたは明白であろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅｓｔ
ｅｒ， Ｐａ．， １５^ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７５）を参照されたい。別途指示のない限り、本発明の製剤は、それ自体が既知である様式において、例えば、当業者に容易に明らかな種々の従来の混合、粉砕、直接圧縮、造粒、糖衣、溶解、凍結乾燥プロセス、または製造技術によって調製される。同様の種類の固形組成物はまた、軟カプセル剤および硬カプセル剤においても用いられ得る。好ましい実施形態において、本発明の薬学的組成物は、直接圧縮によって調製される。

上述のように、薬学的組成物は、限定されないが、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、結合剤、安定剤、ならびに充填剤、希釈剤、着色剤、香味剤、および防腐剤を含む、さらなる賦形剤または担体を含むことができる。当業者は、日常的な実験によって、過度の負担なしに、投薬形態の特定の所望の特性に関連して前述した担体のうちの１つ以上を選択することができる。使用される各担体の量は、当該技術分野で常用されている範囲内で異なってもよい。参照により全てが本明細書に組み込まれる以下の参考文献は、経口投薬形態を製剤化するために使用される技術および賦形剤を開示する。Ｔｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ， ４^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２００３）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， ２０^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｇｅｎｎａｒｏ， Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ （２００３）を参照されたい。これらの任意選択的なさらなる従来の担体は、１つ以上の従来の担体を初期混合物に組み込むかまたは混合段階の間に加えることのいずれかによって、経口投薬形態に組み込まれてもよい。

薬学的に許容される崩壊剤の例として、限定されないが、デンプン；粘土；セルロース；アルギン酸塩；ゴム；架橋ポリマー、例えば、架橋ポリビニルピロリドンまたはクロスポビドン、例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｗａｙｎｅ，ＮＪ）のＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ ＸＬ；架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウム（例えば、ＦＭＣのＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ）；および架橋カルボキシメチルセルロースカルシウム；大豆多糖類；ならびにグアーガムが挙げられる。崩壊剤は、組成物の約０重量％〜１０重量％の量で存在してもよい。一実施形態において、崩壊剤は、組成物の約０．１〜５重量％、または約１〜３重量％、または約１．５〜２．５重量％の量で存在する。

一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、崩壊剤クロスカルメロースナトリウムを含む。さらなる実施形態において、本発明の薬学的組成物は、組成物の約２重量％のクロスカルメロースナトリウムを含む。

薬学的に許容される滑沢剤および薬学的に許容される流動促進剤の例として、限定されないが、コロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカ（例えば、Ａｅｒｏｓｉｌ ２００（登録商標））、３ケイ酸マグネシウム、デンプン、タルク、第三リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロース、および微結晶性セルロースが挙げられる。滑沢剤は、組成物の約０重量％〜１０重量％の量で存在してもよい。一実施形態において、滑沢剤は、組成物の約０．１〜１．５重量％、約０．１〜１重量％、または約０．５〜０．９重量％の量で存在してもよい。流動促進剤は、組成物の約０．１〜１０重量％、約０．１〜５重量％、または約０．１〜１重量％の量で存在してもよい。

一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、流動促進剤であるコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカを含む。さらなる実施形態において、本発明の薬学的組成物
は、（組成物の重量の）約０．２５重量％のコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカを含む。

別の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、滑沢剤ステアリン酸マグネシウムを含む。さらなる実施形態において、本発明の薬学的組成物は、組成物の約０．７５重量％のステアリン酸マグネシウムを含む。

別の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、コロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカおよびステアリン酸マグネシウムを含む。さらなる実施形態において、本発明の薬学的組成物は、組成物の約０．２５重量％のコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカと、組成物の約０．７５重量％のステアリン酸マグネシウムを含む。

薬学的に許容される結合剤の例として、限定されないが、デンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、微結晶性セルロース、例えば、ＦＭＣ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）のＡＶＩＣＥＬ ＰＨ、ヒドロキシプロピルセルロースヒドロキシエチルセルロースおよびＤｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｒｐのヒドロキシプロピルメチルセルロース
ＭＥＴＨＯＣＥＬ（Ｍｉｄｌａｎｄ，ＭＩ）；ショ糖；ブドウ糖；コーンシロップ；多糖類；およびゼラチンが挙げられる。結合剤は、組成物の約０〜５０重量％、または約２〜２０重量％の量で存在してもよい。

薬学的に許容される希釈剤の例として、限定されないが、粉砂糖、圧縮糖、デキストレート、デキストリン、ブドウ糖、ラクトース、マンニトール、微結晶性セルロース、粉末セルロース、ソルビトール、ショ糖、およびタルクが挙げられる。希釈剤は、例えば、組成物の約０〜８０重量％、または約０〜５０重量％、または約１〜４０重量％、または約１〜１０重量％の量で存在してもよい。

特定の実施形態において、薬学的組成物は、クロスカルメロースナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、および二酸化ケイ素のうちの１つ以上をさらに含む。

水性懸濁液またはエリキシル剤が、経口投与用に所望される場合、その中の活性化合物は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、またはそれらの組み合わせ等の希釈剤とともに、種々の甘味もしくは香味剤、着色料もしくは色素、および所望に応じて、乳化剤もしくは懸濁剤と併用され得る。

特定の実施形態において、薬学的組成物は、組成物の約５〜１１重量％の結晶化した化合物Ａ、組成物の約５５〜５６重量％のラクトース一水和物、および組成物の約３０〜３６重量％の微結晶性セルロースを含む。

別の実施形態において、組成物は、組成物の約５〜１１重量％の結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、約５５〜５６重量％のラクトース一水和物、約３０〜３６重量％の微結晶性セルロース、組成物の約１．５〜２．５重量％のクロスカルメロースナトリウム、約０．５〜０．９重量％のステアリン酸マグネシウム、および約０．１〜１重量％パーセントのコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカを含む。

別の実施形態において、組成物は、組成物の約５〜１１重量％の結晶化した化合物Ａ、組成物の約５５〜５６重量％のラクトース一水和物、組成物の約３０〜３６重量％の微結晶性セルロース、組成物の約２重量％のクロスカルメロースナトリウム、組成物の約０．７５重量パーセントのステアリン酸マグネシウム、および組成物の約０．２５重量パーセ
ントのコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカを含む。

薬学的組成物の別の実施形態において、薬学的組成物は、錠剤形態である。さらに別の実施形態において、錠剤は、コーティングされた錠剤である。

一態様において、本発明の薬学的組成物は、少なくとも１つのさらなる治療剤をさらに含む。さらなる治療剤の例として、限定されないが、化学療法剤または抗腫瘍剤、例えば、分裂抑制因子、アルキル化剤、代謝拮抗剤、挿入型抗生物質、成長因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生体応答調節剤、抗ホルモン剤、血管形成阻害剤、および抗アンドロゲン剤が挙げられる。

一実施形態において、さらなる治療剤は、パクリタキセルまたはエベロリムスからなる群から選択される。

結晶化した化合物Ａおよびさらなる薬剤は、同じかまたは異なる単位投薬形態において投与されてもよいことを理解されたい。さらに、そのような組み合わせパートナーは、同時に、別々に、または連続的に投与されてもよい。

結晶化した化合物Ａを用いて増殖性疾患を治療する方法
一態様において、本発明は、有効量の結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（「化合物Ａ」）を対象に投与することを含む、対象における増殖性疾患、特に癌を治療する方法を提供する。結晶化した化合物Ａは、上述の結晶化プロセスによって生成される結晶形態にあることを理解されたい。

さらなる態様において、本発明は、結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（「化合物Ａ」）、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む有効量の薬学的組成物を対象に投与することを含む、対象における増殖性疾患、特に癌を治療する方法を提供する。結晶化した化合物Ａは、上述の結晶化プロセスによって生成される結晶形態にあることを理解されたい。

本発明は、参照により本明細書に組み込まれる前述の各実施形態に提供されるような結晶化した化合物を含む有効量の薬学的組成物を対象に投与することによって、対象における増殖性疾患、特に癌を治療する方法を含むことをさらに理解されたい。

本発明の治療方法によれば、結晶化した化合物Ａは、それを必要とする対象に治療有効量で投与される。

結晶化した化合物Ａは、１日体重１ｋｇ当たり約０．００１〜約１００ｍｇの範囲の有効投薬量を単回または分割用量で、好ましくは約１〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日の単回または分割用量で、適切な対象に投与されてもよい。７０ｋｇのヒトの場合、これは全部で０．０５〜７ｇ／日、好ましくは約０．０５〜約２．５ｇ／日になる。

結晶化した化合物Ａおよび／または本発明の薬学的組成物は、癌性または非癌性の増殖性疾患の治療に使用されてもよい。癌の治療が明示的に好ましい。

本明細書に提供される薬学的組成物を用いて治療することができる「癌」は、限定されないが、固形腫瘍または液体腫瘍を含む細胞増殖性疾患の状態を指す。本発明による治療に好適な癌の例として、限定されないが、肺癌、骨癌、ＣＭＭＬ、膵癌、皮膚癌、頭頸部
癌、黒色腫、子宮内癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門癌、胃癌、乳癌、精巣癌、婦人科腫瘍（例えば、子宮肉腫、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、または外陰癌）、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系癌（例えば、甲状腺、副甲状腺、または副腎癌）、軟組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、慢性または急性白血病、小児固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎癌または尿管癌（例えば、腎細胞癌）、腎盂癌、胆道癌、脳癌、膀胱癌、扁平上皮、腹膜癌、中枢神経系の新生物（例えば、原発性ＣＮＳリンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、または下垂体腺腫）が挙げられる。一実施形態において、癌は固形腫瘍である。特定の実施形態において、固形腫瘍は、転移性または切除不能である。

一実施形態において、癌は、脳癌、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、腎癌、腎臓癌、卵巣癌、前立腺癌、結腸癌、直腸癌、食道癌、精巣癌、婦人科腫瘍、または甲状腺癌等の癌である。

一実施形態において、癌は、肺癌、扁平上皮癌、膵癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、結腸癌、直腸癌、または黒色腫である。

特定の実施形態において、本明細書に提供される結晶化した化合物Ａまたは薬学的組成物を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における黒色腫、膵癌、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、胆道癌、結腸癌、または直腸癌を治療する方法が提供される。

別の実施形態において、増殖性疾患は、皮膚の良性過形成（例えば、乾癬）、再狭窄、前立腺（例えば、良性前立腺肥大（ＢＰＨ））、またはヌーナン症候群などの非癌性増殖性疾患である。さらなる治療剤の例として、限定されないが、化学療法剤または抗腫瘍剤、例えば、分裂抑制因子、アルキル化剤、代謝拮抗剤、挿入型抗生物質、成長因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生体応答調節剤、抗ホルモン剤、血管形成阻害剤、および抗アンドロゲン剤が挙げられる。

一実施形態において、さらなる治療剤は、パクリタキセルまたはエベロリムスからなる群から選択される。

結晶化した化合物Ａおよびさらなる薬剤は、同じかまたは異なる単位投薬形態において投与されてもよいことを理解されたい。さらに、そのような組み合わせパートナーは、同時に、別々に、または連続的に投与されてもよい。

一態様において、本発明は、増殖性疾患、特に癌の治療に適した薬物の調製のための結晶化した化合物Ａの使用を提供する。結晶化した化合物Ａは、上述の結晶化プロセスによって生成される結晶形態にあることを理解されたい。一実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。さらなる実施形態において、増殖性疾患は、前述のような癌である。

別の態様において、本発明は、増殖性疾患、特に癌の治療に適した薬物の調製のための本発明の薬学的組成物の使用を提供する。一実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。さらなる実施形態において、増殖性疾患は、前述のような癌である。

各態様の特定の実施形態において、増殖性疾患は、黒色腫、膵癌、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、胆道癌、結腸癌、または直腸癌から選択される。

一態様において、本発明は、増殖性疾患、特に癌の治療において使用するための結晶化した化合物Ａを提供する。結晶化した化合物Ａは、上述の結晶化プロセスによって生成される結晶形態にあることを理解されたい。一実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。さらなる実施形態において、増殖性疾患は、前述のような癌である。

別の態様において、本発明は、前述のような増殖性疾患、特に癌の治療に使用するために参照により本明細書に組み込まれる、本発明の薬学的組成物を提供する。一実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。さらなる実施形態において、増殖性疾患は、前述したような癌である。

各態様の特定の実施形態において、増殖性疾患は、黒色腫、膵癌、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、胆道癌、結腸癌、または直腸癌から選択される。

本発明は、以下の実施例によってさらに例示されるが、これらは、本発明を、範囲および主旨において、それらに記載される特定の手順に限定するものと解釈されるべきではない。

出発材料および種々の中間体は、市販の供給源から得られてもよいか、市販の有機化合物から調製されてもよいか、または周知の合成方法を用いて調製されてもよい。

本発明の方法および製剤の代表的な例を、以下に記載する。しかしながら、これらの実施例は、本発明の範囲を限定することは全く意図しない。

略語
以下の略語が、文章中に使用される。

実施例１．６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸メチルエステルの調製

内部温度２０℃の、湿度および空気を排除した、不活性化された（Ｎ_２）反応容器内で、内部温度９９℃のトルエンおよび１，４−ジオキサンの混合物中、炭酸セシウム（２．４当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０３５当量）、およびキサントホス（０．０７当量）の存在下で化合物１（１．０当量）および化合物２（１．２当量）を反応させる。８時間後、混合物を６０℃の内部温度まで冷却する。

続いて、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、濾過助剤（ＣＥＦＯＫ）、および活性炭（
ＥＫＮＳ）を加え、混合物を撹拌し、３５℃の内部温度まで冷却する。固体を濾過し、ジメチルホルムアミドおよびトルエンの混合物で洗浄する。生成物化合物３を含有する濾液に、２５℃の内部温度で塩化水素ガス（ＣＬＣ）を導入すると、化合物３のＨＣｌ塩が結晶化する。主としてパラジウム残渣が溶液中に残る。６０℃まで加温してから０℃に冷却した後、遠心分離を用いて固体を濾過し、トルエンおよびジメチルホルムアミドの混合物で洗浄する。

湿った化合物３のＨＣｌ塩を、ジメチルホルムアミドとともに反応器（ｐＨプローブを装備）に負荷し、６０℃まで加熱する。４ｗｔ％のリン酸三カリウム水溶液を加えることにより、ｐＨを（ｐＨ７．２を標的として）６．８〜７．６のｐＨ範囲に調整し、その間に化合物３が遊離塩基として結晶化する。２２℃まで冷却して撹拌した後、遠心分離を用いて固体を濾過し、飲料水を用いて洗浄する。湿った固体を真空下５０℃で乾燥させ、乾燥した粗化合物３を得る。

残留するパラジウムを除去するために、乾燥した粗化合物３を６０℃の内部温度でジメチルホルムアミドに溶解し、Ｓｍｏｐｅｘ−２３４（Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙから市販される）および活性炭と一緒に９０分撹拌する。６０℃の内部温度で固体を濾過し、ジメチルホルムアミドで洗浄する。濾液に、飲料水および化合物３の種結晶を加える。化合物３が結晶化する間にさらに多くの飲料水を加える。２０℃の内部温度まで冷却した後、遠心分離を用いて固体を濾過し、脱イオン水とジメチルホルムアミドの混合物、および脱イオン水を用いて洗浄する。湿った固体を真空下５０℃で乾燥させ、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸メチルエステル（化合物３）を提供する。

実施例２．６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミドの調製
Ａ．「ワンポット」合成

窒素下にある内部温度２０〜２５℃の不活性化された反応容器内で、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸メチルエステル（化合物３、１．０当量）をＤＭＦおよびＴＨＦの混合物に加える。このスラリーに、ＴＨＦ中のカリウムトリメチルシラノラート（１．０５当量）の溶液を約４０分の期間にわたって２５℃の内部温度で混合物に加え、得られた混合物を約１時間撹拌し、中間体１のカリウム塩溶液を提供する。次いで、ＴＨＦ／メタノール混合物を、約２時間の間に８５〜１２０℃で混合物から連続的に蒸留する。

次いで、ＴＨＦ中のＣＤＩ（１．２５当量）およびイミダゾール塩酸塩（１．４０当量）の懸濁液に、約１時間の期間にわたって２５℃の内部温度でカリウム塩溶液を加える。次いで、得られた混合物を約１時間５０℃で撹拌すると、以下のイミダゾリド中間体が形成される：

イミダゾリド中間体は、さらに単離されない。

続いて、１．２当量のＯ−（２−ブトキシエチル）ヒドロキシルアミン（化合物４、ＣＡＳ番号１０２３７４２−１３−３、Ｈｕｈｕ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｉｎｃ．（登録商標）等の供給業者から入手可能）を約３０分の期間にわたって５０℃で加え、１．５時間攪拌する。次いで、脱塩水を５０℃で加え、沈殿物を生成する。２０℃まで冷却して約３〜１６時間撹拌した後、スラリーを濾過し、２回に分けたＴＨＦ／脱塩水（１：２）および３回に分けた脱塩水で洗浄し、５０℃／＜７０ｍｂａｒで約１７時間時間乾燥させ
、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミド（化合物５）を一水和物として提供する。

Ｂ．ステップｂ）の反応前にステップａ）の反応混合物からのステップａ）の中間体の単離を伴う合成方法
代替として、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミド（化合物５）は、以下に示す合成方法によって作製されてもよい。メチルエステルである化合物３を、最初にカルボン酸に変換し、次いで結晶化により単離して化合物６を形成する。次いで、化合物６を化合物４とカップリングさせ、化合物５を一水和物として形成する。この方法の結晶化ステップは、化合物１、工程不純物、およびｄｂａリガンド等の出発材料を、化合物４とのカップリング反応の前に従来の触媒から除去し、それと同時に合成の全体的な収率を維持する。

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸
６０℃の内部温度の不活性化された（Ｎ_２）反応容器内で、化合物３（１．０当量）をＤＭＦに溶解し、ＳＭＯＰＥＸ ２３４の商標名で販売されるファイバーおよび活性炭とともに撹拌し、１００ｐｐｍ以下までパラジウムを除去する。ファイバーおよび活性炭を６０℃で濾過することにより除去し、ＤＭＦで洗浄する。

濾液（化合物３を含有する）を第２の不活性化された（Ｎ_２）反応容器に移し、３０℃の内部温度まで冷却する。この時点で、薄い懸濁液が形成し得る。３０％水酸化ナトリウム（１．１当量）および水（すすぎ用）を加え、得られた反応混合物を３０℃の内部温度で３時間激しく撹拌する。メチルエステルがけん化される。ＩＰＣ（ＨＰＬＣ）により変換を確認する。ＩＰＣ基準が満たされ次第すぐに、ＨＹＦＬＯの商標名で販売される濾過助剤を加える。混合物を１５分撹拌し、次いで、プレートフィルターおよびポリッシュフィルターを介して、３０℃で第３の反応不活性化（Ｎ_２）容器に濾過する。

８のｐＨ値に達するまで、３０℃の内部温度の第３の容器内で透明な濾液に７．５％Ｈ
Ｃｌ水溶液を加える。次いで、溶液に化合物６を３０℃の内部温度で播種し、ｐＨ２．８のｐＨ値に達するまで、激しく撹拌しながら７．５％ＨＣｌ水溶液を加える。生成物が、徐々に結晶化する。６０分かけて２５℃の内部温度まで懸濁液を冷却し、水を加える。懸濁液を２５℃の内部温度で少なくとも４時間撹拌する。

得られた固体を、遠心分離または濾過によって回収する。濾過ケーキを最初にＤＭＦ／水１：１（ｗ／ｗ）、次いで水で洗浄し、排出して５０℃の真空で乾燥させる。ＩＰＣによって含水量を制御する。ＩＰＣ基準が満たされ次第すぐに、結晶性生成物である化合物６を排出する。

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミド
不活性化された（Ｎ_２）反応容器に、化合物６（１．０当量）、ＤＭＦ、およびＴＨＦを室温で負荷する。窒素流とともに撹拌しながら２５℃で懸濁液を加熱する。ＣＤＩ（１．１３当量）を加えた後、懸濁液は薄くなる場合があり、若干のガスの発生が観察される可能性がある。懸濁液が最終的に溶液になった後、次いでＩＰＣ（ＨＰＬＣ）によって監視する。

ＩＰＣ（ＨＰＬＣ）基準が満たされ次第すぐに、２０分かけて５０℃まで反応混合物を加熱し、イミダゾール塩酸塩（０．３当量）を加え、中間体２の溶液を形成する。

中間体２の溶液に、窒素流とともに３００ｒｐｍの速度で撹拌しながら、５０℃の内部温度で６０分間かけて化合物４（１．３当量）を加える。ＩＰＣ（ＨＰＬＣ）基準が満たされ次第すぐに、３０分かけて２０〜２５℃まで混合物を冷却する。次いで、混合物を撹拌せずに周囲温度で一晩窒素下に保存する。ＤＭＦを混合物に加えてから、３０分かけてそれを５０℃まで加熱する。中間体２から化合物５への完全変換をＩＰＣ（ＨＰＬＣ）により確認する。

５０℃の内部温度で２０分かけて混合物に水を加える。次いで、溶液に化合物５を播種する。５０℃で６０分間撹拌した後、９０分かけて５０℃の懸濁液にさらに多くの水を加える。激しく撹拌した後、２時間かけて２０℃まで懸濁液を冷却し、濾過する。濾過ケーキを２０℃のＴＨＦ／水（ｖ／ｖ：１：２）で２回、および２０℃の水で２回洗浄する。最後に、真空下５０℃で濾過ケーキを乾燥させ、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミド（化合物５）を一水和物として提供する。

実施例３． ６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（化合物Ａ）の調製

６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ
−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエトキシ）−アミド（化合物５）一水和物を、内部温度２０〜２５℃のアセトニトリルおよび過剰なリン酸の予め混合した溶液（８５％水溶液）に３回に分けて加える。約１５分撹拌した後、懸濁液を内部温度５０〜５３℃まで加熱する。この温度で懸濁液を６時間維持し、内部温度２０〜２５℃まで冷却する。次いで、混合物を内部温度３５〜３７℃まで加熱し、エタノール−水（３：１ｖ／ｖ）で希釈する。ＥＫＮＳおよびＣＥＦＯＫを加え、反応混合物を約１５分撹拌し、ＣＥＦＯＫでコーティングした漏斗上で濾過する。濾液を約３０℃まで冷却する。３Ｎの水酸化カリウム（ＫＯＨ）水溶液を、約８．１のｐＨ値に達するまで９０分の期間にわたって冷却した濾液に加える。懸濁液を内部温度６０〜６３℃まで加熱し、この温度で約２時間の期間撹拌し、約４５分の期間にわたって２０〜２３℃まで冷却し、漏斗上で濾過し、５０℃、圧力１００ｍｂａｒ未満で約１７時間の期間にわたって乾燥し、６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（化合物Ａ）を白色粉末として提供する。

実施例４． 結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（化合物Ａ）の調製
室温の乾燥した容器内で、メタノール／ＴＨＦ／水（３５／３５／３０ｗ／ｗ）の予め混合した溶媒溶液に化合物Ａを加える。懸濁液を内部温度５３〜５５℃まで撹拌し、得られた水溶液を（紙フィルターおよびＰＴＦＥ膜を介した）深層濾過および膜濾過により内部温度５３〜５６℃で熱濾過する。透明な溶液を撹拌し、４７〜４８℃まで冷却し、種結晶懸濁液（すなわち、水中の結晶化した化合物Ａの種結晶、１０％ｍ／ｍ）を加える（結晶化した化合物Ａの予想される収量の０．２〜０．５％）。約２０分後、水を２５時間以内に徐々に加え（１５時間以内に３３．３％、１０時間以内に６６．６％、水を加えた後は少なくとも１０分撹拌する）、最終比率のメタノール／ＴＨＦ／水（２０／２０／６０ｗ／ｗ）を得る。水を加えた後、１０時間以内に懸濁液を内部温度３〜５℃まで冷却し、０．５時間撹拌する。白色懸濁液を焼結ガラス製ヌッチェ（７５ｍｌ、直径＝６ｃｍ、細孔３）吸込フィルター上で濾過し、氷冷メタノール／ＴＨＦ／水（２〜４℃の１５／１５／７０ｗ／ｗ）で１回洗浄し、氷冷水（２〜４℃）で２回洗浄する。乾燥は、真空オーブン乾燥機内にて１０ｍｂａｒ未満の圧力で、２０℃で１０時間、次いで４０℃で１０時間、次いで６０℃で少なくとも１２時間行い、結晶化した化合物Ａを提供する。

実施例５． 薬学的組成物
結晶化した化合物Ａを表１に示すように製剤化する。

錠剤コア成分を混合すると、薬学的組成物は、直接圧縮により錠剤形態に変換される。形成された錠剤は、上で提供された錠剤コーティングでさらにコーティングしてもよい。

Claims (17)

1. ６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを調製するためのプロセスであって、
   

   

   ａ） 式（Ｉ）の化合物を、
   

   

   好適な塩基と反応させてから酸と反応させて式（Ｖ）
   

   

   の中間体を形成し、前記式（Ｖ）の中間体を結晶化するステップと、
   ｂ） 前記結晶化された式（Ｖ）の中間体を、カップリング剤およびプロトン源の存在下で式（ＩＩ）の化合物と反応させて
   

   

   式（ＩＩＩ）の化合物、
   

   

   またはその水和物を提供するステップであって、式中、Ｐ^１は、ｔ−ブチルである、ステップと、
   ｃ） 好適な脱保護試薬を用いて、前記式（ＩＩＩ）の化合物またはその水和物を好適な極性非プロトン溶媒中で脱保護してから前記脱保護された化合物を適切な塩基と反応させて化合物Ａを提供するステップと、
   ｄ） （ｉ．）テトラヒドロフランおよびメタノールの溶媒系と、（ｉｉ．）水とからなる溶液中に、前記化合物Ａを溶解し、５２℃〜５６℃の内部温度まで加熱して溶液を提供するステップと、
   ｅ） 約４７℃〜約４８℃の温度に前記溶液を冷却するステップと、
   ｆ） 前記溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップであって、前記種結晶は化合物Ａの結晶である、ステップと、
   ｇ） 前記懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
   ｈ） 前記冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
   ｉ） 前記処理した混合物を冷却して結晶化した化合物Ａを提供するステップと、をさらに含む、プロセス。
2. 結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド（化合物Ａ）を調製するためのプロセスであって、
   

   

   ａ） （ｉ．）テトラヒドロフランおよびメタノールの溶媒系と、（ｉｉ．）水とからなる溶液中に、化合物Ａを溶解し、５２℃〜５６℃の内部温度まで加熱して溶液を提供してから約４７℃〜約４８℃の温度に前記溶液を冷却するステップと、
   ｂ） 前記溶液に種結晶懸濁液を加えて懸濁混合物を提供するステップであって、前記種結晶は化合物Ａの結晶である、ステップと、
   ｃ） 前記懸濁混合物を冷却して冷却された懸濁混合物を提供するステップと、
   ｄ） 前記冷却された懸濁混合物に水を加えて処理した混合物を提供するステップと、
   ｅ） 前記処理した混合物を冷却して前記結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを提供するステップと、を含む、プロセス。
3. ステップ（ｄ）の前記処理した混合物は、約２０／２０／６０ｗ／ｗ／ｗのアルコール／エーテル／水の比率を有する、請求項２のプロセス。
4. ステップｄ）の前記水は、１０〜２５時間の期間にわたって加えられる、請求項２に記載のプロセス。
5. ステップｅ）の前記処理した混合物は、約３℃〜約５℃の内部温度まで冷却される、請求項２に記載のプロセス。
6. 前記結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを粉砕するステップをさらに含む、請求項２に記載のプロセス。
7. 結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、少なくとも１つの糖、および少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤を含む、薬学的組成物。
8. 前記少なくとも１つの糖は、ラクトース一水和物である、請求項７に記載の薬学的組成物。
9. 前記少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤は、微結晶性セルロース、微細セルロース、粉末セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項８に記載の薬学的組成物。
10. 少なくとも１つのセルロース誘導体賦形剤は、微結晶性セルロースである、請求項９に記載の薬学的組成物。
11. クロスカルメロースナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、および二酸化ケイ素のうちの１つ以上をさらに含む、請求項７〜１０のいずれかに記載の薬学的組成物。
12. ５〜３５重量パーセントの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、請求項７〜１１のいずれかに記載の薬学的組成物。
13. 約１５ｍｇの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、請求項７〜１１のいずれかに記載の薬学的組成物。
14. 約４５ｍｇの結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミドを含む、請求項７〜１１のいずれかに記載の薬学的組成物。
15. 組成物の約５〜１１重量％の結晶化した６−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシエチオキシ）−アミド、約５５〜５６重量％のラクトース一水和物、および約３０〜３６重量％の微結晶性セルロースを含む、薬学的組成物。
16. 組成物の約１．５〜２．５重量％のクロスカルメロースナトリウム、約０．５〜０．９重量％のステアリン酸マグネシウム、および約０．１〜１重量％パーセントのコロイド状二酸化ケイ素／コロイド状無水シリカをさらに含む、請求項１５に記載の薬学的組成物。
17. 前記薬学的組成物は、錠剤形態である、請求項７〜１６のいずれかに記載の薬学的組成物。

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