JP4010814B2

JP4010814B2 - Mevalonic acid derivative

Info

Publication number: JP4010814B2
Application number: JP2002004123A
Authority: JP
Inventors: 澄秋山
Original assignee: 有限会社尾源研究所
Priority date: 2002-01-11
Filing date: 2002-01-11
Publication date: 2007-11-21
Anticipated expiration: 2022-01-11
Also published as: CN1781927A; JP2003206297A; CN100362010C

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規なメバロン酸誘導体及びその抗腫瘍剤としての利用に関する。
【０００２】
【背景技術】
１，５−ジエン構造を持つゲラニル基を含む化合物は生体内に多く存在し、種々の生理活性を示すポリエン構造を持つ物質の生体内における前駆体として知られている。この１，５−ジエン構造を持つ物質及びこれより誘導されるポリエン類は全てメバロン酸より出発し生合成が行われている。
【０００３】
本発明者は、種々の生理活性を持つポリエン類の前駆体であるメバロン酸に着目し、メバロイル基を糖類に導入すれば、そのメバロイル基を有する糖質誘導体は、癌化している細胞の糖代謝系に効果的にとりこまれて優れた癌抑制作用を発揮するであろうと考え、メバロン酸の各種糖誘導体を合成し、その抗腫瘍作用および毒性を検討した結果、本発明を完成するに至った。
【０００４】
【発明の開示】
本発明は式
【０００５】
【化２】

【０００６】
式中、Ｒは−ＣＨ₂ＯＨ又は−ＣＨ₃を表わす、
で示されるメバロン酸誘導体を提供するものである。
【０００７】
上記式（Ｉ）のメバロン酸誘導体としては、例えば、下記の化合物が包含される。
【０００８】
Ｎ−グルコシルメバロン酸アミド
【０００９】
【化３】

【００１０】
Ｎ−ガラクトシルメバロン酸アミド
【００１１】
【化４】

【００１２】
Ｎ−フーコースメバロン酸アミド
【００１３】
【化５】

【００１４】
上記式（Ｉ）のメバロン酸誘導体は、例えば、式
【００１５】
【化６】

【００１６】
式中、Ｒは上記と同義である、
で示される糖アミンまたはその塩をメバロラクトン又はメバロン酸ハライドと反応させることにより製造することができる。
【００１７】
式（ＩＩ）の糖アミン又はその塩（例えば、塩酸塩）とメバロラクトン又はメバロン酸ハライド（例えば、メバロン酸クロライド）との反応は、水又は適当な不活性有機溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルムなど）中で、室温ないし溶媒の還流温度間、好ましくは約４０〜約７０℃の温度で行うことができる。
【００１８】
式（ＩＩ）の糖アミンに対するメバロラクトン又はメバロン酸ハライドの使用割合は、厳密に制限されるものではないが、通常、式（ＩＩ）の糖アミン１モルあたり、メバロラクトン又はメバロン酸ハライドを１〜２モルの範囲内で用いることが好ましい。
【００１９】
出発原料として式（ＩＩ）の糖アミンの塩又はメバロン酸ハライドを用いる場合には、一般に、上記反応は塩基、例えばＮ−メチルピペリジンのような第三級アミン；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウムのような無機塩基などを添加して行うことが望ましい。
【００２０】
上記反応により生成する式（Ｉ）メバロン酸誘導体は、通常の手段、例えば、抽出、結晶化、クロマトグラフィー等により反応混合物から単離、精製することができる。
【００２１】
得られる式（Ｉ）の化合物は、下記の抗腫瘍効果の測定結果から明らかなとおり、優れた抗腫瘍活性を有している。
抗腫瘍効果の測定
５週令の雌性ヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃ，Ｎｉｎｏｘ）の背部皮下に移植、継代移植されているＨｕＨ−７細胞（ヒト肝癌の樹立細胞株）の癌腫を無菌的に取り出し、リン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）中で５×５ｍｍ²の大きさに破砕した後、その一塊をヌードマウス背部皮下に移植した。
【００２２】
被験物質をコーンオイルに溶解し、その溶液を移植後１週間から３週間マウスの腹腔内に１日１回２５０μｇ／マウスづつ連日投与した。投与終了後癌腫を取り出し、その重量を測定し、下記式に従い抗腫瘍効果及び体重減少を算出する。なお、実験には各群６匹のマウスを用い、溶媒（コーンオイル）のみを投与した群をコントロール群とした。
【００２３】
【数１】

【００２４】
抗腫瘍効果及び体重減少の評価は、コントロール群を１００％として次の基準で行った。

【００２５】
＋／−：弱い抗腫瘍効果が認められるが、宿主マウスに対する毒性も認められる。
【００２６】
＋：一定の抗腫瘍効果が認められるが、宿主マウスに対する毒性も強い。
【００２７】
＋＋：強い抗腫瘍効果が認められ、宿主マウスに対する毒性が弱い。
【００２８】
＋＋＋：強い抗腫瘍効果が認められ、宿主マウスに対する毒性がない。
【００２９】
結果を下記表１に示す。
【００３０】
【表１】

【００３１】
上記結果から明らかなとおり、本発明の前記式（Ｉ）のメバロン酸誘導体は、ＨｕＨ−７細胞に対する優れた抗腫瘍効果を有しており、しかも毒性が殆んどなく、肝臓癌をはじめとする各種固形癌の処置、治療のための抗腫瘍剤として使用することが期待される。
【００３２】
本発明の化合物を抗腫瘍剤などの薬剤として使用する場合、該化合物は経口的又は非経口的（例えば、静注、筋注、皮下注など）に投与することができ、その有効投与量は投与すべき患者の症状、病気の軽重、体重、年令、医師の判断等に依存して広い範囲にわたって変えることができるが、例えば注射の場合には、通常、約１〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日とすることができ、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
【００３３】
本発明の化合物を薬剤として使用する場合には、該化合物の有効量を、製薬学的に許容しうる担体又は希釈剤（例えば、賦形剤、溶剤、その他の補助剤など）と共に投与に適した投与単位形態、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、腸溶剤、トローチ、シロップ剤、エリキシル剤、液剤、懸濁剤、エマルジョン剤等の剤形に製剤化することができる。
【００３４】
上記製剤化に使用しうる担体ないし希釈剤としては、例えば、デンプン、乳糖、砂糖、マンニット、カルボキシメチルセルロースなどの賦形剤；ステアリン酸マグネシウム、ラウリン硫酸ナトリウム、タルクなどの滑沢剤；デキストリン、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、アラビアゴム、トウモロコシデンプン、ゼラチンなどの結合剤；ばれいしょデンプン、カルボキシメチルセルロースなどの崩壊剤；注射用蒸留水、生理食塩水、デキストロース水溶液、注射用植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの希釈溶剤、等が挙げられ、さらに必要に応じて、矯味矯臭剤、着色剤、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を配合することができる。
【００３５】
また、本発明の薬剤には、必要に応じて、他の薬理学的に活性な物質を配合することもできる。
【００３６】
【実施例】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。
合成例１：Ｎ−グルコシルメバロン酸アミドの合成
グルコサミン塩酸塩（２．１６ｇ、１０ｍｍｏｌ）を２０ｍｌの水に溶解させ、その水溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム１０ｍｌとメバロラクトン（１．３０ｇ、１０ｍｌ）を加え５５℃で５時間加熱撹拌を行った。反応終了後、反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物にメタノール１００ｍｌを加え、析出した沈殿をろ過した。ろ液を再びエバポレーターで濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離を行い、エタノール留出液より生成物を得た。１．４５ｇ、収率４７％。この状態では、粘張な油状物であるため、少量のジクロロメタンを加え結晶化を行い、吸引ろ過して標題化合物を得た。１．１０ｇ。この結晶は吸湿性が強く融点の測定はできなかった。
【００３７】
¹H NMR(DMSO-d6) δ＝1.00(3H, s)、 1.44-1.59(2H, m)、 2.47(2H, s)、 2.96- 3.74(10H, m)、 4.04-5.08(3H, m)。
合成例２：Ｎ−ガラクトシルメバロン酸アミドの合成
グルコサミン塩酸塩の代りにガラクトサミン塩酸塩を用いる以外は合成例１と同様にして標題化合物を得た。
【００３８】
¹H NMR(DMSO-d6) δ＝1.08(3H, s)、 1.51-1.61(2H, m)、 2.44(2H, s)、 2.74- 5.16(13H, m)。
合成例３：Ｎ−フーコースメバロン酸アミドの合成
グルコサミン塩酸塩の代りにフーコーサミン塩酸塩を用いる以外は合成例１と同様にして標題化合物を得た。
【００３９】
¹H NMR(DMSO-d6) δ＝1.06(3H, s)、 1.20(3H, d, J=24.0Hz)、 1.54-1.62 (2H, m)、 2.44(2H, s)、 2.74-5.15(12H, m)。
製剤例１
Ｎ−グルコラルメバロン酸アミド２ｇを常温にて注射用蒸留水１ｌに溶解し、塩化ナトリウムで等張化した後、アンプルに封入した。本注射剤１ｍｌは有効成分２ｍｇを含有する。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel mevalonic acid derivative and its use as an antitumor agent.
[0002]
[Background]
Many compounds containing a geranyl group having a 1,5-diene structure exist in vivo, and are known as in vivo precursors of substances having a polyene structure exhibiting various physiological activities. The 1,5-diene-structured substance and polyenes derived therefrom are all biosynthesized starting from mevalonic acid.
[0003]
The present inventor has focused on mevalonic acid, which is a precursor of polyenes having various physiological activities. When a mevaloyl group is introduced into a saccharide, the carbohydrate derivative having the mevaloyl group is converted into a sugar of a cancerous cell. As a result of synthesizing various sugar derivatives of mevalonic acid and studying its antitumor activity and toxicity, it was thought that the present invention was completed. It was.
[0004]
DISCLOSURE OF THE INVENTION
The present invention is of the formula
[Chemical 2]

[0006]
In which R represents —CH ₂ OH or —CH ₃ ;
The mevalonic acid derivative shown by these is provided.
[0007]
Examples of the mevalonic acid derivative of the above formula (I) include the following compounds.
[0008]
N-Glucosyl mevalonamide [0009]
[Chemical 3]

[0010]
N-galactosyl mevalonamide
[Formula 4]

[0012]
N-Fucose Mevalonamide [0013]
[Chemical formula 5]

[0014]
Examples of the mevalonic acid derivative of the above formula (I) include those represented by the formula:
[Chemical 6]

[0016]
Wherein R is as defined above.
It can be produced by reacting the sugar amine represented by the formula (1) or a salt thereof with mevalolactone or mevalonic acid halide.
[0017]
The reaction of a sugar amine of formula (II) or a salt thereof (eg hydrochloride) with mevalolactone or mevalonic acid halide (eg mevalonic acid chloride) can be carried out with water or a suitable inert organic solvent (eg N, N-dimethyl). (Formamide, tetrahydrofuran, chloroform, etc.) between room temperature and the reflux temperature of the solvent, preferably at a temperature of about 40 to about 70 ° C.
[0018]
The ratio of mevalolactone or mevalonic acid halide to the sugar amine of formula (II) is not strictly limited, but usually 1 to 2 mevalolactone or mevalonic acid halide per mole of sugar amine of formula (II). It is preferable to use within the molar range.
[0019]
When using a sugar amine salt of formula (II) or mevalonic acid halide as a starting material, generally the reaction is a base, for example a tertiary amine such as N-methylpiperidine; sodium hydroxide, potassium hydroxide, It is desirable to carry out by adding an inorganic base such as potassium carbonate.
[0020]
The formula (I) mevalonic acid derivative produced by the above reaction can be isolated and purified from the reaction mixture by conventional means such as extraction, crystallization, chromatography and the like.
[0021]
The resulting compound of formula (I) has excellent antitumor activity, as is apparent from the following measurement results of antitumor effects.
Measurement of antitumor effect Aseptic removal of HuH-7 cells (established cell line of human liver cancer) transplanted subcutaneously in the back of subcultured 5-week-old female nude mice (BALB / c, Ninox) After crushing in phosphate buffer solution (PBS) to a size of 5 × 5 mm ² , the lump was transplanted subcutaneously on the back of nude mice.
[0022]
The test substance was dissolved in corn oil, and the solution was administered into the abdominal cavity of the mouse for 1 to 3 weeks after transplantation once a day, 250 μg / mouse every day. After completion of administration, the tumor is taken out, its weight is measured, and antitumor effect and weight loss are calculated according to the following formula. In the experiment, 6 mice were used for each group, and a group to which only the solvent (corn oil) was administered was used as a control group.
[0023]
[Expression 1]

[0024]
Evaluation of the antitumor effect and weight loss was performed according to the following criteria with the control group as 100%.

[0025]
+/-: A weak antitumor effect is observed, but toxicity to the host mouse is also observed.
[0026]
+: Although a certain antitumor effect is observed, the toxicity to host mice is also strong.
[0027]
++: Strong antitumor effect is observed, and toxicity to host mice is weak.
[0028]
+++: Strong antitumor effect is observed, and there is no toxicity to the host mouse.
[0029]
The results are shown in Table 1 below.
[0030]
[Table 1]

[0031]
As is clear from the above results, the mevalonic acid derivative of the above formula (I) of the present invention has an excellent antitumor effect on HuH-7 cells and has little toxicity, including liver cancer. It is expected to be used as an antitumor agent for the treatment and treatment of various solid cancers.
[0032]
When the compound of the present invention is used as a drug such as an antitumor agent, the compound can be administered orally or parenterally (for example, intravenous injection, intramuscular injection, subcutaneous injection, etc.), and its effective dose is It can vary over a wide range depending on the symptoms of the patient to be administered, the severity of the disease, weight, age, doctor's judgment, etc. For example, in the case of injection, it is usually about 1 to about 50 mg / kg / It can be a day, and can be administered once or several times a day.
[0033]
When a compound of the present invention is used as a medicament, an effective amount of the compound is suitable for administration with a pharmaceutically acceptable carrier or diluent (eg, excipients, solvents, other adjuvants, etc.). It can be formulated into dosage unit forms such as tablets, powders, granules, capsules, enteric solvents, troches, syrups, elixirs, solutions, suspensions, emulsions and the like.
[0034]
Examples of carriers or diluents that can be used for the above formulation include excipients such as starch, lactose, sugar, mannitol, carboxymethylcellulose; lubricants such as magnesium stearate, sodium laurate sulfate, talc; dextrin, Binders such as microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, gum arabic, corn starch and gelatin; disintegrants such as potato starch and carboxymethylcellulose; distilled water for injection, physiological saline, dextrose aqueous solution, vegetable oil for injection, propylene glycol, polyethylene Examples include diluent solvents such as glycols, and, if necessary, flavoring agents, coloring agents, tonicity agents, stabilizers, preservatives, soothing agents, and the like.
[0035]
Moreover, the pharmacologically active substance can also be mix | blended with the chemical | medical agent of this invention as needed.
[0036]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples.
Synthesis Example 1 Synthesis of N-glucosyl mevalonamide Glucosamine hydrochloride (2.16 g, 10 mmol) was dissolved in 20 ml of water, and 10 ml of 1N sodium hydroxide and mevalolactone (1.30 g, 10 ml) were added to the aqueous solution. The mixture was stirred at 5 ° C. for 5 hours. After completion of the reaction, the reaction mixture was concentrated under reduced pressure, 100 ml of methanol was added to the residue, and the deposited precipitate was filtered. The filtrate was again concentrated by an evaporator, and the residue was separated by silica gel column chromatography to obtain a product from the ethanol distillate. 1.45 g, 47% yield. Since this was a viscous oily substance, a small amount of dichloromethane was added for crystallization, and suction filtration was performed to obtain the title compound. 1.10 g. This crystal was highly hygroscopic and the melting point could not be measured.
[0037]
¹ H NMR (DMSO-d6) δ = 1.00 (3H, s), 1.44-1.59 (2H, m), 2.47 (2H, s), 2.96-3.74 (10H, m), 4.04-5.08 (3H, m) .
Synthesis Example 2 : Synthesis of N-galactosyl mevalonamide The title compound was obtained in the same manner as in Synthesis Example 1 except that galactosamine hydrochloride was used instead of glucosamine hydrochloride.
[0038]
¹ H NMR (DMSO-d6) δ = 1.08 (3H, s), 1.51-1.61 (2H, m), 2.44 (2H, s), 2.74-5.16 (13H, m).
Synthesis Example 3 Synthesis of N-fucose mevalonamide The title compound was obtained in the same manner as in Synthesis Example 1 except that fucosamine hydrochloride was used instead of glucosamine hydrochloride.
[0039]
¹ H NMR (DMSO-d6) δ = 1.06 (3H, s), 1.20 (3H, d, J = 24.0Hz), 1.54-1.62 (2H, m), 2.44 (2H, s), 2.74-5.15 (12H , m).
Formulation Example 1
2 g of N-glucoral mevalonic acid amide was dissolved in 1 l of distilled water for injection at room temperature, made isotonic with sodium chloride, and then enclosed in an ampoule. 1 ml of this injection contains 2 mg of active ingredient.

Claims

formula

In which R represents —CH ₂ OH or —CH ₃ ;
Mevalonic acid derivative represented by

An antitumor agent comprising the mevalonic acid derivative of formula (I) according to claim 1 as an active ingredient.