JP3937367B2 - Nitric oxide synthase inhibitor - Google Patents

Description

【００１３】
〔式中、Ａで示される環はベンゼン環、ナフタレン環、ピリジン環又はフラン環であり、Ｒ¹ 、Ｒ² 及び Ｒ³ はＡがベンゼン環以外の場合には全て水素原子を示し、Ａがベンゼン環の場合には同一又は異なって水素原子、低級アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基、低級アルキル基、ハロゲン置換低級アルキル基、フェニル基、フェノキシ基、低級アルカノイルオキシ基、ヒドロキシ基、低級アルキルチオ基、低級アルキルスルフィニル基又は低級アルキルスルホニル基を示す。Ｒ⁴ は(1) 置換基として低級アルキル基を有するチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル基、(2) 置換基として低級アルキル基、フェニル基、フェニル低級アルキル基、フェニルチオフェニル基及びハロゲン原子から選ばれる基の１〜２個を有することのあるピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル基、(3) ６位に低級アルキル基を有し更に窒素原子の一つがフェニル低級アルキル基で置換されることのあるピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル基及び(4) ２位に低級アルキル基を有し更に窒素原子の一つが低級アルキル基又はフェニル低級アルキル基で置換されることのあるプリン−６−イル基から選ばれる複素環基を示し、Ｒ⁵ は水素原子又は基
【００１４】
【化４】

【００１５】
（式中、Ａ、Ｒ¹ 、Ｒ² 及びＲ³ は上記に同じ）を示す。〕
上記一般式（１）で表わされる誘導体は、ＮＯＳ阻害作用、殊にｉＮＯＳを選択的に阻害する作用を有しており、従って、血圧上昇、臓器血流減少、中枢神経系への悪影響等の副作用を殆ど示さない点において特徴づけられる。
【００１６】
本発明ＮＯＳ阻害剤の有効成分を表わす上記一般式（１）中の各基としては、例えば次の各基を例示できる。尚、各基における「低級」なる語は、炭素数１〜６を示すものとする。
【００１７】
低級アルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ペンチル、ヘキシル基等の直鎖又は分枝鎖状低級アルキル基を例示できる。
【００１８】
低級アルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ基等を例示できる。
【００１９】
フェニル低級アルキル基としては、ベンジル、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、５−フェニルペンチル、６−フェニルヘキシル基等等を例示できる。
【００２０】
ハロゲン原子には、弗素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子が包含される。
【００２１】
ハロゲン置換低級アルキル基としては、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ノナフルオロブチル、ウンデカフルオロペンチル、トリデカフルオロヘキシル基等を例示できる。
【００２２】
低級アルカノイルオキシ基としては、アセトキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、バレリルオキシ、ヘキサノイルオキシ、ヘプタノイルオキシ基等を例示できる。
【００２３】
低級アルキルチオ基としては、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオ基等を例示できる。
【００２４】
低級アルキルスルフィニル基としては、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、プロピルスルフィニル、ブチルスルフィニル、ペンチルスルフィニル、ヘキシルスルフィニル基等を例示できる。
【００２５】
低級アルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、ブチルスルホニル、ペンチルスルホニル、ヘキシルスルホニル基等を例示できる。
【００２６】
Ｒ⁴ で示される複素環基中、(1) に示す置換基として低級アルキル基を有するチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル基としては、２−メチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−エチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ｎ−プロピルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ｎ−ペンチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ｎ−ヘキシルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル基等を例示できる。
【００２７】
Ｒ⁴ で示される複素環基中、(2) に示す置換基として低級アルキル基、フェニル、フェニル低級アルキル基、フェニルチオフェニル基及びハロゲン原子から選ばれる基の１〜２個を有することのあるピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル基としては、無置換のそれに加えて、以下の各置換ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル基を例示できる。
【００２８】
２−メチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−エチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ペンチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ヘキシルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ベンジルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−（２−フェニルエチル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−（３−フェニルプロピル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−（４−フェニルブチル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−（５−フェニルペンチル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−（６−フェニルヘキシル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−メチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−エチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−フェニル−２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ペンチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ヘキシル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−メチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−エチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、７−フェニル−２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ペンチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ヘキシル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−メチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−エチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−（４−フェニルチオフェニル）−２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ペンチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ヘキシル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−メチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−エチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−ｎ−ペンチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、８−ブロモ−２−ｎ−ヘキシルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−８−フルオロピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−８−クロロピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル、２−ｎ−ブチル−８−ヨードピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル基等。
【００２９】
Ｒ⁴ で示される複素環基中、(3) に示す６位に低級アルキル基を有し、更に窒素原子の一つがフェニル低級アルキル基で置換されることのあるピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル基としては、次の各基を例示できる。
【００３０】
６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−エチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−プロピル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ペンチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ヘキシル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−メチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−エチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−プロピル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ペンチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ヘキシル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−メチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−エチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−ｎ−プロピル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−ｎ−ペンチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、２−ベンジル−６−ｎ−ヘキシル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（１−フェニルエチル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（２−フェニルエチル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（３−フェニルプロピル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（４−フェニルブチル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（５−フェニルペンチル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−２−（６−フェニルヘキシル）−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−エチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−ｎ−プロピル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−ｎ−ペンチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、１−ベンジル−６−ｎ−ヘキシル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（１−フェニルエチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（２−フェニルエチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（３−フェニルプロピル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（４−フェニルブチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（５−フェニルペンチル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−１−（６−フェニルヘキシル）−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、６−ｎ−ブチル−５Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル、５−ベンジル−６−ｎ−ブチル−５Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル基等。
【００３１】
また、Ｒ⁴ で示される複素環基中、(4) に示す２位に低級アルキル基を有し、更に窒素原子の一つが低級アルキル基又はフェニル低級アルキル基で置換されることのあるプリン−６−イル基としては、次の各基を例示できる。
【００３２】
２−メチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−エチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−プロピル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ペンチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ヘキシル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−メチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−エチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−プロピル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ペンチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ヘキシル−７Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−メチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−エチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−ｎ−プロピル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−ｎ−ペンチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−ベンジル−２−ｎ−ヘキシル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（１−フェニルエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（２−フェニルエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（３−フェニルプロピル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（４−フェニルブチル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（５−フェニルペンチル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−（６−フェニルヘキシル）−９Ｈ−プリン−６−イル、２，９−ジメチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−エチル−９−メチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−メチル−２−ｎ−プロピル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−９−メチル−９Ｈ−プリン−６−イル、９−メチル−２−ｎ−ペンチル−９Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ヘキシル−９−メチル−９Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−メチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−エチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−ｎ−プロピル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−ｎ−ペンチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−ベンジル−２−ｎ−ヘキシル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（１−フェニルエチル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（２−フェニルエチル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（３−フェニルプロピル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（４−フェニルブチル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（５−フェニルペンチル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−（６−フェニルヘキシル）−７Ｈ−プリン−６−イル、２，７−ジメチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−エチル−７−メチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−メチル−２−ｎ−プロピル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−７−メチル−７Ｈ−プリン−６−イル、７−メチル−２−ｎ−ペンチル−７Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ヘキシル−７−メチル−７Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−ｎ−プロピル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−ｎ−ブチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−ｎ−ペンチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−ベンジル−２−ｎ−ヘキシル−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（１−フェニルエチル）−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（２−フェニルエチル）−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（３−フェニルプロピル）−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（４−フェニルブチル）−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（５−フェニルペンチル）−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−（６−フェニルヘキシル）−１Ｈ−プリン−６−イル、１，２−ジメチル−１Ｈ−プリン−６−イル、２−エチル−１−メチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−メチル−２−ｎ−プロピル−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ブチル−１−メチル−１Ｈ−プリン−６−イル、１−メチル−２−ｎ−ペンチル−１Ｈ−プリン−６−イル、２−ｎ−ヘキシル−１−メチル−１Ｈ−プリン−６−イル等。
【００３３】
上記一般式（１）で表わされるアミド誘導体は、ＮＯ合成酵素阻害剤、特にｉＮＯＳを選択的に阻害する薬剤として、例えば敗血症、エンドトキシンショック、慢性関節リウマチ等の治療及び予防剤として、より好ましくは、敗血症予防及び治療剤及びエンドトキシンショック改善剤として有用である。特に、本発明ＮＯ合成酵素阻害剤は、従来のそれに見られる如き副作用が非常に少ない利点を有している。
【００３４】
一般式（１）に包含され且つＮＯ合成酵素阻害剤有効成分として好ましいアミド誘導体としては、上記一般式（１）中、Ａがベンゼン環でＲ⁵ が水素原子である化合物を例示できる。
【００３５】
なかでも、Ｒ⁴ で示される複素環基が、置換基として２位に低級アルキル基を有するチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル基、置換基として２位に低級アルキル基を有するピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル基又は２位に低級アルキル基を有する９Ｈ−プリン−６−イル基であるものは好適であり、その内でもＲ¹、Ｒ²及びＲ³が同一又は異なって水素原子、低級アルコキシ基又はハロゲン原子であるものは、より好ましい。
【００３６】
本発明ＮＯＳ阻害剤有効成分として特に好ましい化合物の具体例としては、例えばＮ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２，３，４−トリメトキシベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２，４−ジクロロベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−クロロベンズアミド、Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２，４−ジクロロベンズアミド及びＮ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３−メトキシベンズアミドを例示できる。この内でもＮ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドは、最も好ましい。
【００３７】
一般式（１）で表わされる本発明有効成分化合物は、各種の方法により製造できる。その例としては、例えば前記ＷＯ公報に記載の方法を挙げることができる。より具体的には、対応する複素環アミン誘導体と酸ハロゲン化物とを反応させる方法を例示することができる。その具体例は後述する実施例の項に詳述する通りである。
【００３８】
かくして得られる本発明ＮＯＳ阻害剤の有効成分化合物の具体例としては、後記実施例の項に示される各化合物（実施例１〜１２０として示す）を例示できる。
【００３９】
一般式（１）で表わされる本発明有効成分化合物は、医薬的に許容される酸付加塩とすることができ、之等の塩も本発明有効成分化合物に包含される。上記酸付加塩を形成させ得る酸としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸等の無機酸、シュウ酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸等の有機酸を例示でき、この酸付加塩の形成反応は常法に従うことができる。
【００４０】
また、本発明有効成分化合物の内、Ｒ⁵ が水素原子であるものは、これを常法に従い例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、その他銅塩等とすることができ、之等の塩もまた本発明有効成分に包含される。
【００４１】
尚、本発明有効成分化合物の内、下記化合物（１ａ）及び化合物（１ｂ）は、下記に示す共鳴構造（１ｃ）〜（１ｅ）及び（１ｆ）〜（１ｈ）のそれぞれをとると考えられ、之等のいずれの構造式でも表し得る。
【００４２】
【化５】

【００４３】
本発明ＮＯＳ阻害剤は、上記一般式（１）で表わされる化合物及びその塩から選ばれる少なくとも一種を有効成分として、これを、適当な製剤担体と共に用いて、一般的な医薬製剤組成物の形態とされ実用される。
【００４４】
上記製剤担体としては、製剤の使用形態に応じて、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤あるいは賦形剤を例示できる。之等は得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。
【００４５】
上記医薬製剤の投与単位形態としては、各種の形態が治療目的に応じて選択でき、その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、軟膏剤等が挙げられる。
【００４６】
錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウム等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロツプ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム等の崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド等の界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる。
【００４７】
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フイルムコーテイング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００４８】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナラン、カンテン等の崩壊剤等を使用できる。
【００４９】
坐剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を使用できる。
【００５０】
カプセル剤は、常法に従い通常有効成分化合物を上記で例示した各種の製剤担体と混合して、硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。
【００５１】
液剤、乳剤、懸濁剤等の注射剤として調製される場合、之等は殺菌され且つ血液と等張であるのが好ましく、之等の形態に成形するに際しては、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用できる。尚、この場合等張性の溶液を調整するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有させてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。
【００５２】
更に、本発明医薬製剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を含有させることもできる。
【００５３】
ペースト、クリーム、ゲル等の軟膏剤の形態に調製するに際しては、希釈剤として例えば白色ワセリン、パラフイン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト等を使用できる。
【００５４】
本発明医薬製剤中に含有されるべき有効成分化合物の量は、特に限定されず広範囲より適宜選択されるが、通常医薬製剤中に約１〜７０重量％程度含有されるものとするのがよい。
【００５５】
本発明医薬製剤の投与方法は特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、疾患の程度等に応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤は経口投与され、注射剤は単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じ単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与され、坐剤は直腸内投与される。
【００５６】
上記医薬製剤の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択されるが、通常有効成分化合物の量が１日当り体重１ｋｇ当り約０．５〜２０ｍｇ程度とするのがよく、該製剤は１日に１〜４回に分けて投与することができる。
【００５７】
【実施例】
以下、本発明を更に詳しく説明するため、本発明ＮＯＳ阻害剤において有効成分とする化合物の製造のための原料化合物の製造例を参考例として挙げ、次いで該有効成分化合物の製造例を実施例として挙げ、更に本発明ＮＯＳ阻害剤の調製例を製剤例として挙げ、最後に薬理試験例を挙げる。
【００５８】
【参考例１】４−アミノ−２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジンの製造
３−アミノチオフェン−２−カルボン酸メチル５．０ｇの無水ピリジン５０ｍｌ溶液に、ｎ−ペンタン酸クロリド３．８ｍｌを０℃で加え、０℃で１時間撹拌後、室温で２時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄した。酢酸エチルを減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５：１で溶出）で精製して、３−ペンタノイルアミノチオフェン−２−カルボン酸メチルの無色油状物７．０ｇを得た。
【００５９】
上記で得られた化合物４．０ｇのジメトキシエタン５ｍｌ溶液に、２５％アンモニア水溶液２０ｍｌを加え、封管中１００℃で２４時間加熱した。反応溶液を減圧濃縮し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を集めて減圧濃縮し、ジクロロメタン−ｎ−ヘキサンより再結晶して、５−ｎ−ブチル−７−ヒドロキシチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジンの無色結晶１．３５ｇを得た。
【００６０】
得られた結晶１．３５ｇのトルエン１４ｍｌ溶液に、オキシ塩化リン２．４ｍｌ及びトリエチルアミン１．３ｍｌを加え、１１５℃で１２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、氷水中に注ぎ込み、酢酸ナトリウムで中和後、セライトで濾過した。濾液を酢酸エチルで抽出し、有機層を集めて水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１で溶出）で精製して、５−ｎ−ブチル−７−クロロチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジンの無色油状物１．４ｇを得た。
【００６１】
得られた油状物１．４ｇのジメトキシエタン３ｍｌ溶液に、２５％アンモニア水溶液１５ｍｌを加え、封管中８０℃で２０時間加熱した。反応終了後、水冷し、析出した結晶を濾取し、水洗後、乾燥して、目的化合物の無色結晶１．２ｇを得た。
【００６２】
また、上記と同様にして、４−アミノ−２−ｎ−プロピルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジンを製造した。
【００６３】
【参考例２】４−アミノ−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジンの製造
３−アミノ−４−シアノピラゾール５ｇの無水ＤＭＦ５０ｍｌ溶液に、オルトｎ−ペンタン酸トリメチル１２ｍｌを加え、９０℃で２０分間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄した後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１で溶出）で精製して、４−シアノ−３−〔Ｎ−（１−メトキシペンチリデン）アミノ〕ピラゾールの無色油状物６．５ｇを得た。
【００６４】
上記で得られた化合物６．５ｇに、アンモニアのメタノール溶液（約７％）５０ｍｌを加え、室温で３６時間撹拌した。反応終了後、減圧濃縮し、残渣をエタノール−ｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶４．１ｇを得た。
【００６５】
【参考例３】４−アミノ−２−ベンジルオキシカルボニル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジンの製造
参考例２で得られた化合物７５０ｍｇの無水ＤＭＦ７．５ｍｌ溶液に、トリエチルアミン１．１ｍｌ及びベンジルオキシカルボニルクロリド（約３０％のトルエン溶液）３．４ｍｌをそれぞれ０℃で加え、０℃で１時間撹拌した。反応液を氷水中に移し、析出した結晶を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１→１０：１で溶出）で精製した後、更にエタノール−ｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶３９０ｍｇを得た。
【００６６】
【参考例４及び５】４−アミノ−２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン及び４−アミノ−１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジンの製造
参考例２で得られた化合物、ベンジルブロマイド及び塩基として水素化ナトリウムを用い、参考例３と同様に処理し、得られた粗生成物をジクロロメタン−ジエチルエーテルより再結晶して、４−アミノ−２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジンの無色結晶を得た。
【００６７】
一方、再結晶母液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：３で溶出）で精製した後、更にジエチルエーテル−ｎ−ヘキサンより再結晶して、４−アミノ−１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジンの無色結晶を得た。
【００６８】
【参考例６】６−アミノ−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリンの製造
４−アミノ−５−シアノイミダゾール１０ｇの無水ＤＭＦ２４ｍｌ溶液に、オルト−ｎ−ペンタン酸トリメチル２４ｍｌを加え、９０℃で２０分間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチルで溶出）で精製し、更に酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再結晶して、５−シアノ−４−〔Ｎ−（１−メトキシペンチリデン）アミノ〕イミダゾールの無色結晶１７．７ｇを得た。
【００６９】
上記で得られた化合物１５ｇに、アンモニアのメタノール溶液（２Ｎ）１００ｍｌを加え、室温で６日間撹拌した。反応終了後、析出した結晶を濾取し、メタノールで洗浄後、乾燥して、目的化合物の無色結晶９．５ｇを得た。尚、濾液を濃縮し、残渣をエタノール−ｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶３．０ｇを更に得た。
【００７０】
【参考例７】６−アミノ−９−ベンジルオキシカルボニル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリンの製造
参考例６で得られた化合物１０ｇの無水ＤＭＦ１００ｍｌ溶液に、トリエチルアミン２２ｍｌ及びベンジルオキシカルボニルクロリド（約３０％のトルエン溶液）４５ｍｌをそれぞれ０℃で加え、０℃で５時間撹拌した。反応液を氷水中に移し、クロロホルムで抽出し、クロロホルム層を飽和食塩水で洗浄し、減圧濃縮した。残渣をクロロホルム−ジエチルエーテルより再結晶して、目的化合物の無色結晶８．５ｇを得た。尚、母液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１で溶出）で精製後、クロロホルム−ジエチルエーテルより再結晶して、目的化合物の無色結晶２．４ｇを更に得た。
【００７１】
【参考例８】６−アミノ−１−ベンジル−２−ｎ−ブチル−１Ｈ−プリンの製造
参考例６で製造した５−シアノ−４−〔Ｎ−（１−メトキシペンチリデン）アミノ〕イミダゾール５ｇをメタノール５０ｍｌに溶解し、ベンジルアミン３．２ｍｌを加え、５０℃で２時間撹拌した。放冷後、析出した結晶を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄して、目的化合物の無色結晶６．２ｇを得た。
【００７２】
【参考例９】６−アミノ−２−ｎ−ブチル−１−メチル−１Ｈ−プリンの製造
参考例８と同様にして、目的化合物の無色結晶を得た。
【００７３】
【参考例１０】６−アミノ−７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリンの製造
１−ベンジル−４−アミノ−５−シアノイミダゾールを用い、参考例６と同様にして、目的化合物の無色結晶を得た。
【００７４】
【参考例１１】６−アミノ−９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリンの製造
３−ベンジル−４−アミノ−５−シアノイミダゾールを用い、参考例６と同様にして、目的化合物の無色結晶を得た。
【００７５】
【参考例１２】４−アミノ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジンの製造
３−アミノピラゾール５０ｇの無水ＤＭＦ２５０ｍｌ溶液に、オルト−ｎ−ペンタン酸トリメチル１２０ｍｌを加え、７０℃で２２時間撹拌した。反応終了後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１→２０：１で溶出）で精製して、３−〔Ｎ−（１−メトキシペンチリデン）アミノ〕ピラゾールの無色油状物６０ｇを得た。
【００７６】
上記で得られた化合物６０ｇをメタノール３００ｍｌに溶解し、シアナミド１５．３ｇを加え、６０℃で１７時間撹拌した。反応終了後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１で溶出）で精製し、更にジイソプロピルエーテルより再結晶して、目的化合物の無色結晶３６．４ｇを得た。尚、再結晶母液を同様に精製して、目的化合物の無色結晶７ｇを得た。
【００７７】
【参考例１３】４−アミノ−２−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジンの製造
参考例１２と同様にして、目的化合物の無色結晶を得た。
【００７８】
【参考例１４〜２０】
更に、参考例１２と同様にして、下記各化合物の結晶を得た。
【００７９】
参考例１４＝４−アミノ−２−メチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例１５＝４−アミノ−２−エチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例１６＝４−アミノ−２−ｎ−プロピルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例１７＝４−アミノ−２−ｎ−ペンチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例１８＝４−アミノ−２−ベンジルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例１９＝４−アミノ−２−ｎ−ブチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
参考例２０＝４−アミノ−２−ｎ−ブチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン
【００８０】
【実施例１】
Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの製造
参考例１で得られた化合物２００ｍｇの無水ピリジン４ｍｌ溶液に、３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド２７０ｍｇを０℃で加え、０℃で１時間、次いで室温で３日間撹拌した。反応液をクロロホルムで希釈し、１０％塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：２で溶出）で精製し、更にｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶１６０ｍｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第１表に示す。
【００８１】
【実施例２〜８】
実施例１と同様にして、第１表に記載の各化合物を製造した。得られた化合物の構造及び融点を第１表に示す。尚、油状物については、 ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータ（δ：ｐｐｍ値；溶媒＝重クロロホルム；内部基準＝テトラメチルシラン）を示す。
【００８２】
【実施例９】
Ｎ−（２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの製造
参考例７で得られた化合物５ｇの無水ピリジン５０ｍｌ溶液に、３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド５．３ｇを０℃で加え、０℃で２時間、次いで室温で５日間撹拌した。反応液をクロロホルムで希釈し、１０％塩酸で洗浄後、５％水酸化ナトリウム水溶液で抽出した。水層を集め、１０％塩酸で中和し、クロロホルムで抽出した。クロロホルム層を集め、水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１→２０：１で溶出）で精製し、更にジクロロメタン−ジエチルエーテルより再結晶して、目的化合物の無色結晶２．７ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第１表に示す。
【００８３】
【実施例１０】
Ｎ−（６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの製造
参考例３で得られた化合物１００ｍｇの無水ピリジン２ｍｌ溶液に、３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド１０６ｍｇを０℃で加え、０℃で１時間、次いで室温で１時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、１０％塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル＝１：１で溶出）で精製し、更にジクロロメタン−ｎ−ヘキサンより再結晶して、無色結晶１５０ｍｇを得た。
【００８４】
得られた結晶をエタノール１０ｍｌに溶解し、１０％パラジウム−炭素２０ｍｇを加え、水素ガス中室温で１晩撹拌した。パラジウム−炭素をセライトで濾去し、濾液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１で溶出）で精製し、更に酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶６０ｍｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第１表に示す。
【００８５】
【実施例１１及び１２】
Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミド及びＮ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの製造
参考例１１で得られた化合物１．５ｇの無水ピリジン３０ｍｌ溶液に、３，４，５−トリメトキシベンゾイルクロリド１．８５ｇを室温で加え、室温で６日間撹拌した。反応液をジクロロメタンで希釈し、１０％塩酸、飽和重曹水、水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１００：１→５０：１で溶出）で精製し、前の画分をｎ−ヘキサンより再結晶して、Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの無色結晶０．７５ｇを得た。更に、後の画分をｎ−ヘキサンより再結晶して、Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの無色結晶０．７２ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第１表に示す。
【００８６】
【表１】

【００８７】
【表２】

【００８８】
【表３】

【００８９】
【表４】

【００９０】
尚、上記第１表に記載の実施例３の化合物の ¹Ｈ−ＮＭＲ分析値は、次の通りである。
【００９１】
０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２），１．３−１．５（２Ｈ，ｍ），１．８−１．９（２Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７），３．６２（６Ｈ，ｓ），３．８６（３Ｈ，ｓ），５．６−６．２（２Ｈ，ｂｒｓ），７．１８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９），７．２−７．４（５Ｈ，ｍ），８．１３（１Ｈ，ｓ），１２．３−１２．５（１Ｈ，ｂｒｓ）。
【００９２】
【実施例１３〜５３】
更に、実施例１と同様にして、第２表に記載の各化合物を製造した。得られた化合物の構造及び融点を第２表に示す。尚、油状物については、 ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータ（δ：ｐｐｍ値；溶媒＝ＤＭＳＯ−ｄ₆；内部基準＝テトラメチルシラン）を示す。
【００９３】
【実施例５４】
Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メチルスルフィニルベンズアミドの製造
実施例４７で得られた化合物１．２ｇの酢酸１８ｍｌ溶液に、３０％過酸化水素水０．４４ｍｌを加え、室温で４時間撹拌した。反応終了後、１０％水酸化ナトリウム水溶液を加えて中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を集めて水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣にジエチルエーテルを加え、析出した結晶を濾取し、ジクロロメタン−ジエチルエーテルより再結晶して、目的化合物の無色結晶０．４８ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９４】
【実施例５５】
Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メチルスルホニルベンズアミドの製造
実施例５４で得られた化合物１．０ｇのクロロホルム１０ｍｌ溶液に、メタクロロ過安息香酸１．４４ｇのクロロホルム１５ｍｌ溶液を、−７８℃で滴下し、その温度で４５分間攪拌した後、更に０℃で１時間攪拌した。反応液をジクロロメタンで希釈し、重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液；クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝４０：１）で精製し、更に酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再結晶して、目的化合物の無色結晶０．９５ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９５】
【実施例５６】
Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−ヒドロキシベンズアミドの製造
実施例４４で得られた化合物１．５ｇのエタノール１５ｍｌ懸濁液に、１０％水酸化ナトリウム水溶液２．０ｍｌを０℃で加え、その温度で１時間攪拌した。
反応液に１０％塩酸２．２ｍｌ及び水８０ｍｌを加え、析出した結晶を濾取し、水洗後、６０％の含水エタノールより再結晶して、目的化合物の無色結晶１．１２ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９６】
【実施例５７】
Ｎ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−４−ヒドロキシベンズアミドの製造
実施例５６と同様にして、実施例４６で得られた化合物より、目的化合物を製造した。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９７】
【実施例５８】
Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドの製造
実施例７で得られた化合物１．０ｇを１，２−ジメトキシエタン−水（３：１）２０ｍｌに溶かし、これにＮＢＳ０．５１ｇを０℃で加え、０℃で１時間撹拌した。反応混合液を水で希釈し、析出した結晶を濾取した。得られた粗結晶を水洗し、メタノール−水より再結晶して、目的化合物の無色結晶０．９４ｇを得た。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９８】
【実施例５９〜６２】
実施例７、１３、１４及び２５におけるシリカゲルクロマトグラフィーの前の画分より、第２表に実施例５９〜６２として示す各化合物を、それぞれ単離した。得られた化合物の構造及び融点を、第２表に示す。
【００９９】
【表５】

【０１００】
【表６】

【０１０１】
【表７】

【０１０２】
【表８】

【０１０３】
【表９】

【０１０４】
【表１０】

【０１０５】
【表１１】

【０１０６】
【表１２】

【０１０７】
【表１３】

【０１０８】
【表１４】

【０１０９】
【表１５】

【０１１０】
【表１６】

【０１１１】
【表１７】

【０１１２】
尚、上記第２表に記載の実施例４３の化合物の ¹Ｈ−ＮＭＲ分析値は、次の通りである。
【０１１３】
０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４），１．２−１．４（２Ｈ，ｍ），１．５−１．７（２Ｈ，ｍ），２．４７（３Ｈ，ｓ），２．６６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９），６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），７．２−７．４（２Ｈ，ｍ），７．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４），７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９），８．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），１１．６−１１．９（１Ｈ，ｂｒｓ）。
【０１１４】
【実施例６３〜７５】
更に、実施例１と同様にして、第３表に記載の各化合物を製造した。得られた化合物の構造及び融点を第３表に示す。
【０１１５】
【実施例７６〜８２】
実施例６３−６４及び実施例６８−７２におけるシリカゲルクロマトグラフィーの前の画分より、第３表に実施例７６〜８２として示す各化合物を、それぞれ単離した。得られた化合物の構造及び融点を、第３表に示す。
【０１１６】
【実施例８３】
実施例７５で得られた化合物より、実施例５６と同様にして、第３表に記載の化合物を製造した。得られた化合物の構造及び融点を第３表に示す。
【０１１７】
【表１８】

【０１１８】
【表１９】

【０１１９】
【表２０】

【０１２０】
【表２１】

【０１２１】
【表２２】

【０１２２】
【表２３】

【０１２３】
【実施例８４〜１２０】
適当な出発物質を用い、上記参考例及び実施例と同様の反応を行なって、以下の各化合物を製造することができる。
【０１２４】
実施例８４＝Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例８５＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例８６＝Ｎ−（１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例８７＝Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例８８＝Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）ニコチンアミド
実施例８９＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）ニコチンアミド
実施例９０＝Ｎ−（１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）ニコチンアミド
実施例９１＝Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）ニコチンアミド
実施例９２＝Ｎ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例９３＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例９４＝Ｎ−（１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例９５＝Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例９６＝Ｎ−（１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例９７＝Ｎ−（２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例９８＝Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例９９＝Ｎ−（７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例１００＝Ｎ−（１−ベンジル−６−ｎ−ブチル−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０１＝Ｎ−（２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０２＝Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０３＝Ｎ−（７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０４＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例１０５＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−７−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０６＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例１０７＝Ｎ−（２−ｎ−ブチル−８−フェニルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド
実施例１０８＝Ｎ−〔２−ｎ−ブチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル〕−３−クロロベンズアミド
実施例１０９＝Ｎ−〔２−ｎ−ブチル−８−（４−フェニルチオフェニル）ピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル〕−２−メトキシベンズアミド
実施例１１０＝Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン−６−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例１１１＝Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン＝６−イル）ニコチンアミド
実施例１１２＝Ｎ−（９−ベンジル−２−ｎ−ブチル−９Ｈ−プリン＝６−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例１１３＝Ｎ−（７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例１１４＝Ｎ−（７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル）ニコチンアミド
実施例１１５＝Ｎ−（７−ベンジル−２−ｎ−ブチル−７Ｈ−プリン−６−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例１１６＝Ｎ−（２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−１−ナフトイルアミド
実施例１１７＝Ｎ−（２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）ニコチンアミド
実施例１１８＝Ｎ−（２−ベンジル−６−ｎ−ブチル−２Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−２−フランカルボキサミド
実施例１１９＝Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−３−クロロベンズアミド
実施例１２０＝Ｎ−（８−ブロモ−２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２−メトキシベンズアミド
【０１２５】
【製剤例１】
カプセル剤の調製
有効成分としてＮ−（２−ｎ−ブチルチエノ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−４−イル）−３，４，５−トリメトキシベンズアミドを用いて、１カプセル当りその２５０ｍｇを含有する硬質ゼラチンカプセル（１０００個）を、次の処方により調製した。
【０１２６】
有効成分化合物 ２５０ｇ
結晶セルロース（日本薬局方品） ３０ｇ
コーンスターチ（日本薬局方品） １７ｇ
タルク（日本薬局方品） ２ｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｇ
即ち、上記処方に従い各成分を細かく粉末にし、均一な混合物となるように混和した後、所望の寸法を有する経口投与用ゼラチンカプセルに充填して、目的のカプセルを得た。
【０１２７】
【製剤例２】
錠剤の調製
有効成分化合物としてＮ−（２−ｎ−ブチルピラゾロ〔１，５−ａ〕−１，３，５−トリアジン−４−イル）−２，４−ジクロロベンズアミドを用いて、１錠当りその３００ｍｇを含有する錠剤（２０００錠）を、次の処方により調製した。
【０１２８】
有効成分化合物 ６００ｇ
乳糖（日本薬局方品） ６７ｇ
コーンスターチ（日本薬局方品） ３３ｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム（日本薬局方品） ２５ｇ
メチルセルロース（日本薬局方品） １２ｇ
ステアリン酸マグネシウム ３ｇ
即ち、上記処方に従い、有効成分化合物、乳糖、コーンスターチ及びカルボキシメチルセルロースカルシウムを充分混合し、メチルセルロース水溶液を用いて顆粒化し、２４メッシュの篩に通し、ステアリン酸マグネシウムと混合後、打錠（プレス）して、目的の錠剤を調製した。
【０１２９】
【薬理試験例１】
スプラークダウリュー（Spraque Dawley）系雄性ラット（６〜９週齢、２００〜２５０ｇ）を頚椎脱臼により屠殺し、直ちに胸部大動脈を摘出し、周囲の結合組織を剥離した。次に、これを５〜７個に輪切りに分割し、それぞれ縦に切り開いた後、血管内皮細胞に存在するｃＮＯＳの影響をなくすため、血管内腔を洗浄綿棒にて擦過して内皮細胞を除去して、標本を調製した。
【０１３０】
３０μＭ濃度に調製した本発明有効成分化合物（供試化合物）のジメチルスルホキシド溶液を添加し、更に４００μＭ濃度となるようにＬ−アルギニンを添加したクレブス・ヘンゼライト液（ＮａＣｌ １１８．３ｍＭ、ＫＣｌ ４．７ｍＭ、ＣａＣｌ₂ ２．５ｍＭ、ＫＨ₂ＰＯ₄ １．２ｍＭ、ＭｇＳＯ₄ １．２ｍＭ、ＮａＨＣＯ₃ ２５．０ｍＭ及びグルコース１１．１ｍＭ）中に、上記標本を入れ、３７℃で３０分間インキュベートした。続いて、リポポリサッカライド（ＬＰＳ）を１０００ｎｇ／ｍｌの濃度で添加し、３７℃で２４時間インキュベートした（供試化合物を用いた実験群、本発明群）。
【０１３１】
次に、上清を９６穴プレートに取り、文献〔新生化学実験講座１０、血管、内皮と平滑筋、１３５頁、日本生化学会編、東京化学同人、１９９３年〕に記載のＮＯ₂測定法に従い、ＮＯ₂をグリース（Griess）液で発色させ、バイオカイネチックスリーダー（Biokinetics reader, BIO-TEK Instruments 社製、ＥＬ−３４０型）で測定して、蓄積されたＮＯ₂量を算出した。
【０１３２】
また、標本の血管片を、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液に溶解させ、バイオラッドＤＣプロテインアッセイキット（Bio-Rad DC protein assay kit, Bio-Rad Laboratories社製）で発色させ、スペクトロフォトメーター（Spectrophotometer, HITACHI社製、Ｕ−３０００型）で測定して、蛋白量を算出した。そして、之等の値より、蛋白１ｍｇ当たりのＮＯ₂生成量を求めた。
【０１３３】
一方、供試化合物の代わりにジメチルスルホキシドを加えた対照群、及びＬＰＳも加えないコントロール群について、同一試験を繰り返した。
【０１３４】
以上のようにして求められた各群における蛋白１ｍｇ当たりのＮＯ₂生成量より、ｉＮＯＳ誘導阻害率を下式に従い求めた。
【０１３５】
阻害率（％）＝｛１−〔（本発明群値）−（コントロール群値）〕／〔（対照群値）−（コントロール群値）〕｝×１００
得られた結果を第４表に示す。
【０１３６】
【表２４】

【０１３７】
第４表より、本発明有効成分化合物は、ＬＰＳによるｉＮＯＳの誘導を阻害していることが明らかである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel nitric oxide synthase inhibitor, and more particularly to an agent that inhibits induction of inducible nitric oxide synthase.
[0002]
[Prior art]
In the first half of the 1980s, it was first discovered that nitric oxide (hereinafter referred to as “NO”) was produced in vivo in the course of research on nitrogen oxides in vivo. As a result of this discovery, NO attracted the attention of many researchers, and in 1987, it was reported that NO was the main body of vascular endothelium-derived relaxing factor. At present, the relationship between NO physiological functions and pathological conditions has been clarified in a wide range of fields such as circulation, immunity, and nervous system.
[0003]
One of them is the fact that NO, which is constantly produced in the body, plays an important role in maintaining circulatory dynamic homeostasis. In sepsis, a large amount of NO is produced by the action of cytokines activated by endotoxin, which is said to cause an endotoxin shock state such as endothelial cell damage and decreased myocardial contractility.
[0004]
NO is produced from L-arginine by NO synthase (hereinafter referred to as “NOS”). The enzymes can be broadly classified into inducible NOS (hereinafter referred to as “iNOS”) related to NO production during pathological conditions and constitutive NOS (hereinafter referred to as “cNOS”) that is constantly expressed.
[0005]
As described above, since NO is involved in various diseases such as sepsis, research on NOS inhibitors has been promoted for the purpose of elucidating the mechanism and, consequently, application to therapeutic agents for these diseases. Yes. Representative examples of the inhibitor include arginine analogs such as N-ω-nitro-L-arginine.
[0006]
However, most of the conventionally known NOS inhibitors including the above representative examples inhibit not only iNOS but also cNOS. Therefore, use of these as therapeutic agents suppresses even the constant adjustment of the circulatory dynamics, and side effects such as an increase in blood pressure and a decrease in organ blood flow cannot be avoided. Furthermore, there are concerns about adverse effects on the central nervous system and problems such as impotence when using them.
[0007]
As described above, conventionally known NOS inhibitors cannot be evaluated as pharmaceuticals, and instead of these, provision of new NOS inhibitors capable of selectively inhibiting iNOS is desired in the industry. .
[0008]
[Problems to be solved by the invention]
Accordingly, an object of the present invention is to provide a substance capable of selectively inhibiting only iNOS desired in the art and a NOS inhibitor using the same.
[0009]
The research groups of the present inventors have long studied the synthesis of various compounds and the study and elucidation of their pharmacological actions for the purpose of developing active pharmaceutical compounds for pharmaceutical preparations. In the process, the inventors succeeded in synthesizing a series of amide derivatives having a strong analgesic action and filed a patent application for an invention related to this compound [see WO97 / 46560].
[0010]
In subsequent studies, the present inventors have demonstrated that certain compounds, including the above series of compounds, have iNOS induction inhibitory activity independent of and independent of the analgesic activity previously found. I found a new fact. The present invention has been completed based on the discovery.
[0011]
[Means for Solving the Problems]
That is, according to the present invention, there is provided a NOS inhibitor containing an amide derivative represented by the following general formula (1) as an active ingredient together with a pharmaceutical carrier.
[0012]
[Chemical 3]

[0013]
[In the formula, the ring represented by A is a benzene ring, naphthalene ring, pyridine ring or furan ring; ¹ , R ² And R ^Three Are all hydrogen atoms when A is other than a benzene ring, and when A is a benzene ring, they are the same or different and are each a hydrogen atom, a lower alkoxy group, a halogen atom, a nitro group, a lower alkyl group, or a halogen-substituted lower alkyl group. , Phenyl group, phenoxy group, lower alkanoyloxy group, hydroxy group, lower alkylthio group, lower alkylsulfinyl group or lower alkylsulfonyl group. R ^Four (1) Thieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl group having a lower alkyl group as a substituent, (2) Lower alkyl group, phenyl group, phenyl lower alkyl group, phenylthiophenyl group and A pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl group which may have one or two groups selected from halogen atoms, and (3) a lower alkyl group at the 6-position Furthermore, one of the nitrogen atoms may be substituted with a phenyl lower alkyl group, and a pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl group and (4) a lower alkyl group at the 2-position, and one of the nitrogen atoms A heterocyclic group selected from a purin-6-yl group that may be substituted with a lower alkyl group or a phenyl lower alkyl group, and R ^Five Is a hydrogen atom or group
[0014]
[Formula 4]

[0015]
(Where A, R ¹ , R ² And R ^Three Is the same as above. ]
The derivative represented by the above general formula (1) has an NOS inhibitory action, particularly an action of selectively inhibiting iNOS, and therefore, such as an increase in blood pressure, a decrease in organ blood flow, and an adverse effect on the central nervous system. It is characterized in that it shows few side effects.
[0016]
Examples of each group in the general formula (1) representing the active ingredient of the NOS inhibitor of the present invention include the following groups. In addition, the term “lower” in each group shall have 1 to 6 carbon atoms.
[0017]
Examples of the lower alkyl group include linear or branched lower alkyl groups such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyl, and hexyl groups.
[0018]
Examples of lower alkoxy groups include methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, pentyloxy, hexyloxy groups and the like.
[0019]
Examples of the phenyl lower alkyl group include benzyl, 1-phenylethyl, 2-phenylethyl, 3-phenylpropyl, 4-phenylbutyl, 5-phenylpentyl, and 6-phenylhexyl groups.
[0020]
Halogen atoms include fluorine, chlorine, bromine and iodine atoms.
[0021]
Examples of the halogen-substituted lower alkyl group include trifluoromethyl, pentafluoroethyl, heptafluoropropyl, nonafluorobutyl, undecafluoropentyl, and tridecafluorohexyl groups.
[0022]
Examples of lower alkanoyloxy groups include acetoxy, propionyloxy, butyryloxy, valeryloxy, hexanoyloxy, heptanoyloxy groups and the like.
[0023]
Examples of the lower alkylthio group include a methylthio group, an ethylthio group, a propylthio group, a butylthio group, a pentylthio group, and a hexylthio group.
[0024]
Examples of the lower alkylsulfinyl group include methylsulfinyl, ethylsulfinyl, propylsulfinyl, butylsulfinyl, pentylsulfinyl, hexylsulfinyl groups and the like.
[0025]
Examples of the lower alkylsulfonyl group include methylsulfonyl, ethylsulfonyl, propylsulfonyl, butylsulfonyl, pentylsulfonyl, hexylsulfonyl groups and the like.
[0026]
R ^Four In the heterocyclic group represented by (1), the thieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl group having a lower alkyl group as the substituent represented by (1) includes 2-methylthieno [3,2-d] pyrimidine- 4-yl, 2-ethylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl, 2-n-propylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl, 2-n-butylthieno [3,2-d Pyrimidin-4-yl, 2-n-pentylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl, 2-n-hexylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl and the like can be exemplified.
[0027]
R ^Four In the heterocyclic group represented by (2), the substituent represented by (2) may have 1 to 2 groups selected from a lower alkyl group, phenyl, a phenyl lower alkyl group, a phenylthiophenyl group and a halogen atom. As the 1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl group, in addition to the unsubstituted one, each of the following substituted pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine- A 4-yl group can be exemplified.
[0028]
2-methylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-ethylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n- Propylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2- n-pentylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-hexylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine-4- Yl, 2-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-benzylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine-4- 2- (2-phenylethyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2- (3- Nylpropyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2- (4-phenylbutyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine-4- Yl, 2- (5-phenylpentyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2- (6-phenylhexyl) pyrazolo [1,5-a] -1, 3,5-triazin-4-yl, 2-methyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-ethyl-8-phenylpyrazolo [1 , 5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8-phenyl-2-n-propylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, -N-butyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl 2-n-pentyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-hexyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a]- 1,3,5-triazin-4-yl, 2-methyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-ethyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 7-phenyl-2-n-propylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl 2-n-butyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-pentyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-hexyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5 -Triazin-4-yl, 2-methyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-ethyl-8- (4- Phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8- (4-phenylthiophenyl) -2-n-propylpyrazolo [1,5-a]- 1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-butyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2- n-pentyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-hexyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8-brom 2-methylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8-bromo-2-ethylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl 8-bromo-2-n-propylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1 , 3,5-triazin-4-yl, 8-bromo-2-n-pentylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 8-bromo-2-n- Hexylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2-n-butyl-8-fluoropyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine 4-yl, 2-n-butyl-8-chloropyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl, 2 n- Butyl-8 Yodopirazoro [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl group.
[0029]
R ^Four A pyrazolo [3,4-d] pyrimidine having a lower alkyl group at the 6-position shown in (3) and one of the nitrogen atoms may be substituted with a phenyl lower alkyl group. Examples of the 4-yl group include the following groups.
[0030]
6-methyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-ethyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-propyl-1H-pyrazolo [ 3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-pentyl-1H-pyrazolo [3,4-d] Pyrimidin-4-yl, 6-n-hexyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-methyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6- Ethyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-propyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2H-pyrazolo [ 3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-pent -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-hexyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-methyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-ethyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-n-propyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-n-pentyl-2H -Pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 2-benzyl-6-n-hexyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2- ( 1-phenylethyl) -2H-pyrazolo [3,4 d] Pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2- (2-phenylethyl) -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2- (3- Phenylpropyl) -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2- (4-phenylbutyl) -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl 6-n-butyl-2- (5-phenylpentyl) -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-2- (6-phenylhexyl) -2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 1-benzyl-6-methyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 1-benzyl-6-ethyl-1H-pyrazolo [3 , 4-d] pyrimidin-4-yl, 1-benzyl -6-n-propyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 1 -Benzyl-6-n-pentyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 1-benzyl-6-n-hexyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl 6-n-butyl-1- (1-phenylethyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-1- (2-phenylethyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-1- (3-phenylpropyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl- 1- (4-Phenylbutyl) -1H-pyrazolo [3,4- Pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-1- (5-phenylpentyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-1- (6-phenyl) Hexyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 6-n-butyl-5H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl, 5-benzyl-6-n-butyl -5H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl group and the like.
[0031]
R ^Four In the heterocyclic group represented by (4), a purin-6-yl group having a lower alkyl group at the 2-position shown in (4) and wherein one of the nitrogen atoms may be substituted with a lower alkyl group or a phenyl lower alkyl group As examples, the following groups can be exemplified.
[0032]
2-methyl-9H-purin-6-yl, 2-ethyl-9H-purin-6-yl, 2-n-propyl-9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9H-purin-6 Yl, 2-n-pentyl-9H-purin-6-yl, 2-n-hexyl-9H-purin-6-yl, 2-methyl-7H-purin-6-yl, 2-ethyl-7H-purine- 6-yl, 2-n-propyl-7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7H-purin-6-yl, 2-n-pentyl-7H-purin-6-yl, 2-n- Hexyl-7H-purin-6-yl, 9-benzyl-2-methyl-9H-purin-6-yl, 9-benzyl-2-ethyl-9H-purin-6-yl, 9-benzyl-2-n- Propyl-9H-purin-6-yl, 9-benzyl-2-n-butyl-9H Purin-6-yl, 9-benzyl-2-n-pentyl-9H-purin-6-yl, 9-benzyl-2-n-hexyl-9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (1-phenylethyl) -9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (2-phenylethyl) -9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (3-phenylpropiyl ) -9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (4-phenylbutyl) -9H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (5-phenylpentyl) -9H -Purin-6-yl, 2-n-butyl-9- (6-phenylhexyl) -9H-purin-6-yl, 2,9-dimethyl-9H-purin-6-yl, 2-ethyl-9- Methyl-9H-purin-6-yl, 9-methyl-2-n-propyl- H-purin-6-yl, 2-n-butyl-9-methyl-9H-purin-6-yl, 9-methyl-2-n-pentyl-9H-purin-6-yl, 2-n-hexyl- 9-methyl-9H-purin-6-yl, 7-benzyl-2-methyl-7H-purin-6-yl, 7-benzyl-2-ethyl-7H-purin-6-yl, 7-benzyl-2- n-propyl-7H-purin-6-yl, 7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl, 7-benzyl-2-n-pentyl-7H-purin-6-yl, 7- Benzyl-2-n-hexyl-7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (1-phenylethyl) -7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (2- Phenylethyl) -7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (3- Phenylpropyl) -7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (4-phenylbutyl) -7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (5-phenylpentyl)- 7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7- (6-phenylhexyl) -7H-purin-6-yl, 2,7-dimethyl-7H-purin-6-yl, 2-ethyl-7 -Methyl-7H-purin-6-yl, 7-methyl-2-n-propyl-7H-purin-6-yl, 2-n-butyl-7-methyl-7H-purin-6-yl, 7-methyl 2-n-pentyl-7H-purin-6-yl, 2-n-hexyl-7-methyl-7H-purin-6-yl, 1-benzyl-2-methyl-1H-purin-6-yl, 1 -Benzyl-2-ethyl-1H-purin-6-yl, 1-benzyl 2-n-propyl-1H-purin-6-yl, 1-benzyl-2-n-butyl-1H-purin-6-yl, 1-benzyl-2-n-pentyl-1H-purin-6-yl 1-benzyl-2-n-hexyl-1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (1-phenylethyl) -1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (2-phenylethyl) -1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (3-phenylpropyl) -1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (4-phenyl) Butyl) -1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (5-phenylpentyl) -1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1- (6-phenylhexyl) -1H -Purin-6-yl, 1,2-dimethyl-1H-purin-6-yl 2-ethyl-1-methyl-1H-purin-6-yl, 1-methyl-2-n-propyl-1H-purin-6-yl, 2-n-butyl-1-methyl-1H-purin-6 Yl, 1-methyl-2-n-pentyl-1H-purin-6-yl, 2-n-hexyl-1-methyl-1H-purin-6-yl and the like.
[0033]
The amide derivative represented by the above general formula (1) is more preferably used as a NO synthase inhibitor, particularly as a drug that selectively inhibits iNOS, for example, as a therapeutic and prophylactic agent for sepsis, endotoxin shock, rheumatoid arthritis, etc. It is useful as an agent for preventing and treating sepsis and an agent for improving endotoxin shock. In particular, the NO synthase inhibitor of the present invention has the advantage that it has very few side effects as seen in the prior art.
[0034]
As an amide derivative which is included in the general formula (1) and is preferable as an active ingredient of the NO synthase inhibitor, in the general formula (1), A is a benzene ring and R ^Five A compound in which is a hydrogen atom.
[0035]
Above all, R ^Four Are a thieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl group having a lower alkyl group at the 2-position as a substituent, and a pyrazolo [1,5 having a lower alkyl group at the 2-position as a substituent. -A] -1,3,5-triazin-4-yl group or a 9H-purin-6-yl group having a lower alkyl group at the 2-position is preferable, and among them, R ¹ , R ² And R ^Three Are preferably the same or different and each is a hydrogen atom, a lower alkoxy group or a halogen atom.
[0036]
Specific examples of particularly preferred compounds as the active ingredient of the present invention NOS inhibitor include N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2,3. , 4-trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methoxybenzamide, N- (2-n-butylpyrazolo [ 1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2,4-dichlorobenzamide, N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3,4,5 -Trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylthieno [3,2- d] pyrimidin-4-yl) -2-c Robenzamide, N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -2,4-dichlorobenzamide and N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidine-4 -Yl) -3-methoxybenzamide. Among these, N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide is most preferable.
[0037]
The active ingredient compound of the present invention represented by the general formula (1) can be produced by various methods. As an example thereof, for example, the method described in the WO publication can be cited. More specifically, a method of reacting a corresponding heterocyclic amine derivative with an acid halide can be exemplified. Specific examples thereof are as described in detail in Examples below.
[0038]
As specific examples of the active ingredient compound of the NOS inhibitor of the present invention obtained in this way, each compound (shown as Examples 1 to 120) shown in the Examples section below can be exemplified.
[0039]
The active ingredient compound of the present invention represented by the general formula (1) can be a pharmaceutically acceptable acid addition salt, and these salts are also included in the active ingredient compound of the present invention. Examples of the acid that can form the acid addition salt include inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, and sulfuric acid, and organic acids such as oxalic acid, fumaric acid, maleic acid, tartaric acid, and citric acid. The salt formation reaction can follow conventional methods.
[0040]
Among the active ingredient compounds of the present invention, R ^Five Can be converted into an alkali metal salt such as a sodium salt or potassium salt, an alkaline earth metal salt such as a calcium salt or a magnesium salt, or a copper salt according to a conventional method. Such salts are also included in the active ingredient of the present invention.
[0041]
Of the active ingredient compounds of the present invention, the following compounds (1a) and (1b) are considered to take the resonance structures (1c) to (1e) and (1f) to (1h) shown below, These structural formulas can be represented.
[0042]
[Chemical formula 5]

[0043]
The NOS inhibitor of the present invention contains at least one compound selected from the compound represented by the above general formula (1) and a salt thereof as an active ingredient, and is used together with an appropriate pharmaceutical carrier to form a general pharmaceutical preparation composition. It is practically used.
[0044]
As the above-mentioned preparation carrier, a diluent or excipient such as a filler, a bulking agent, a binder, a moistening agent, a disintegrating agent, a surfactant, or a lubricant, which are usually used, is used depending on the use form of the preparation. It can be illustrated. These are appropriately selected and used according to the dosage unit form of the obtained preparation.
[0045]
As the dosage unit form of the pharmaceutical preparation, various forms can be selected according to the purpose of treatment, and representative examples thereof include tablets, pills, powders, solutions, suspensions, emulsions, granules, capsules, Examples include suppositories, injections (solutions, suspensions, etc.), ointments and the like.
[0046]
In the case of forming into a tablet form, as the above-mentioned preparation carrier, excipients such as lactose, sucrose, sodium chloride, glucose, urea, starch, calcium carbonate, kaolin, crystalline cellulose, silicic acid, potassium phosphate, etc .; water, ethanol , Propanol, simple syrup, glucose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, polyvinylpyrrolidone and other binders; sodium carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, low-substituted hydroxypropylcellulose, dried starch, alginic acid Disintegrating agents such as sodium, agar powder, laminaran powder, sodium bicarbonate, calcium carbonate; polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, sodium lauryl sulfate, Surfactants such as monoglycerides of thee; disintegration inhibitors such as sucrose, stearin, cocoa butter, hydrogenated oil; absorption promoters such as quaternary ammonium base and sodium lauryl sulfate; humectants such as glycerin and starch; Adsorbents such as lactose, kaolin, bentonite and colloidal silicic acid; lubricants such as purified talc, stearate, boric acid powder and polyethylene glycol can be used.
[0047]
Furthermore, the tablets can be made into tablets with ordinary coatings as necessary, for example, sugar-coated tablets, gelatin-encapsulated tablets, enteric-coated tablets, film-coated tablets, double tablets, and multilayer tablets.
[0048]
When forming into a pill form, excipients such as glucose, lactose, starch, cocoa butter, hydrogenated vegetable oil, kaolin, talc and the like as a formulation carrier; binders such as gum arabic powder, tragacanth powder, gelatin, ethanol; Disintegrants such as laminaran and agar can be used.
[0049]
In molding into a suppository, for example, polyethylene glycol, cacao butter, higher alcohol, higher alcohol esters, gelatin, semi-synthetic glyceride and the like can be used as a pharmaceutical carrier.
[0050]
Capsules are usually prepared by mixing the active ingredient compound with the various preparation carriers exemplified above and filling them into hard gelatin capsules, soft capsules and the like according to conventional methods.
[0051]
When prepared as injections such as solutions, emulsions, suspensions, etc., they are preferably sterilized and isotonic with blood. In forming such forms, as diluents, for example, water, ethyl Alcohol, macrogol, propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters and the like can be used. In this case, a sufficient amount of sodium chloride, glucose or glycerin may be contained in the pharmaceutical preparation to prepare an isotonic solution, and a normal solubilizing agent, buffer, soothing agent, etc. may be added. May be.
[0052]
Furthermore, in the pharmaceutical preparation of the present invention, a coloring agent, a preservative, a fragrance, a flavoring agent, a sweetening agent, and other medicines can be contained as necessary.
[0053]
When preparing in the form of an ointment such as a paste, cream, or gel, white petrolatum, paraffin, glycerin, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicon, bentonite, and the like can be used as a diluent.
[0054]
The amount of the active ingredient compound to be contained in the pharmaceutical preparation of the present invention is not particularly limited and is appropriately selected from a wide range, but it is usually preferable to contain about 1 to 70% by weight in the pharmaceutical preparation. .
[0055]
The administration method of the pharmaceutical preparation of the present invention is not particularly limited, and is determined according to various preparation forms, patient age, sex, other conditions, the degree of disease, and the like. For example, tablets, pills, solutions, suspensions, emulsions, granules and capsules are administered orally, and injections are administered intravenously alone or mixed with normal fluids such as glucose and amino acids. Accordingly, it is administered alone intramuscularly, intradermally, subcutaneously or intraperitoneally, and suppositories are administered rectal.
[0056]
The dosage of the above pharmaceutical preparation is appropriately selected depending on its usage, patient age, gender and other conditions, disease severity, etc. The amount of the active ingredient compound is usually about 0.5 to 20 mg per kg body weight per day. The formulation can be administered in 1 to 4 divided doses per day.
[0057]
【Example】
Hereinafter, in order to explain the present invention in more detail, a production example of a raw material compound for producing a compound as an active ingredient in the NOS inhibitor of the present invention is given as a reference example, and then a production example of the active ingredient compound is taken as an example. Furthermore, preparation examples of the NOS inhibitor of the present invention are given as formulation examples, and finally pharmacological test examples are given.
[0058]
[Reference Example 1] Production of 4-amino-2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidine
To 50 ml of anhydrous pyridine in 5.0 g of methyl 3-aminothiophene-2-carboxylate, 3.8 ml of n-pentanoic acid chloride was added at 0 ° C., stirred at 0 ° C. for 1 hour, and then stirred at room temperature for 2 hours. The reaction solution was concentrated, diluted with ethyl acetate, and washed successively with 1N hydrochloric acid, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, and saturated brine. Ethyl acetate was distilled off under reduced pressure, and the residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with n-hexane: ethyl acetate = 5: 1) to give methyl 3-pentanoylaminothiophene-2-carboxylate as a colorless oil 7 0.0 g was obtained.
[0059]
To a solution of 4.0 g of the compound obtained above in 5 ml of dimethoxyethane, 20 ml of 25% aqueous ammonia solution was added and heated in a sealed tube at 100 ° C. for 24 hours. The reaction solution was concentrated under reduced pressure and extracted with dichloromethane. The organic layer was collected, concentrated under reduced pressure, and recrystallized from dichloromethane-n-hexane to obtain 1.35 g of colorless crystals of 5-n-butyl-7-hydroxythieno [3,2-d] pyrimidine.
[0060]
To a 14 ml toluene solution of 1.35 g of the obtained crystals, 2.4 ml phosphorus oxychloride and 1.3 ml triethylamine were added and stirred at 115 ° C. for 12 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, poured into ice water, neutralized with sodium acetate, and filtered through celite. The filtrate was extracted with ethyl acetate, and the organic layer was collected, washed successively with water and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with n-hexane: ethyl acetate = 4: 1) to obtain 1.4 g of a colorless oily product of 5-n-butyl-7-chlorothieno [3,2-d] pyrimidine. Obtained.
[0061]
To a solution of 1.4 g of the obtained oily substance in 3 ml of dimethoxyethane, 15 ml of 25% aqueous ammonia solution was added and heated in a sealed tube at 80 ° C. for 20 hours. After completion of the reaction, the mixture was cooled with water, and the precipitated crystals were collected by filtration, washed with water, and dried to obtain 1.2 g of the target compound as colorless crystals.
[0062]
Further, 4-amino-2-n-propylthieno [3,2-d] pyrimidine was produced in the same manner as described above.
[0063]
Reference Example 2 Production of 4-amino-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine
12 ml of trimethyl ortho-n-pentanoate was added to 50 ml of anhydrous DMF in 5 g of 3-amino-4-cyanopyrazole and stirred at 90 ° C. for 20 minutes. The reaction solution is diluted with ethyl acetate, washed successively with water and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue is purified by silica gel column chromatography (eluting with n-hexane: ethyl acetate = 2: 1) to give 4 A colorless oily product of 6.5-cyano-3- [N- (1-methoxypentylidene) amino] pyrazole was obtained.
[0064]
To 6.5 g of the compound obtained above, 50 ml of a methanol solution of ammonia (about 7%) was added and stirred at room temperature for 36 hours. After completion of the reaction, the reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was recrystallized from ethanol-n-hexane to obtain 4.1 g of the objective compound as colorless crystals.
[0065]
Reference Example 3 Production of 4-amino-2-benzyloxycarbonyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine
To a solution of 750 mg of the compound obtained in Reference Example 2 in 7.5 ml of anhydrous DMF, 1.1 ml of triethylamine and 3.4 ml of benzyloxycarbonyl chloride (approximately 30% toluene solution) were added at 0 ° C., and the mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour. did. The reaction solution was transferred into ice water, and the precipitated crystals were collected by filtration, washed with diethyl ether, purified by silica gel column chromatography (eluted with chloroform: methanol = 40: 1 → 10: 1), and further ethanol-n. Recrystallization from -hexane gave 390 mg of the target compound as colorless crystals.
[0066]
[Reference Examples 4 and 5] 4-amino-2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine and 4-amino-1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo Production of [3,4-d] pyrimidine
Using the compound obtained in Reference Example 2, benzyl bromide and sodium hydride as a base, the same treatment as in Reference Example 3 was carried out, and the resulting crude product was recrystallized from dichloromethane-diethyl ether to give 4-amino- Colorless crystals of 2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine were obtained.
[0067]
On the other hand, the recrystallized mother liquor was concentrated and the residue was purified by column chromatography (eluted with n-hexane: ethyl acetate = 2: 3) and then recrystallized from diethyl ether-n-hexane to give 4-amino- Colorless crystals of 1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine were obtained.
[0068]
Reference Example 6 Production of 6-amino-2-n-butyl-9H-purine
To a solution of 10 g of 4-amino-5-cyanoimidazole in 24 ml of anhydrous DMF, 24 ml of trimethyl ortho-n-pentanoate was added and stirred at 90 ° C. for 20 minutes. The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with ethyl acetate) and recrystallized from ethyl acetate-n-hexane to give 5-cyano-4- [N- (1-methoxypentyl). 17.7 g of colorless crystals of (redene) amino] imidazole were obtained.
[0069]
To 15 g of the compound obtained above, 100 ml of a methanol solution of ammonia (2N) was added and stirred at room temperature for 6 days. After completion of the reaction, the precipitated crystals were collected by filtration, washed with methanol, and dried to obtain 9.5 g of the target compound as colorless crystals. The filtrate was concentrated, and the residue was recrystallized from ethanol-n-hexane to further obtain 3.0 g of the objective compound as colorless crystals.
[0070]
Reference Example 7 Production of 6-amino-9-benzyloxycarbonyl-2-n-butyl-9H-purine
To 100 ml of an anhydrous DMF solution of 10 g of the compound obtained in Reference Example 6, 22 ml of triethylamine and 45 ml of benzyloxycarbonyl chloride (about 30% toluene solution) were added at 0 ° C. and stirred at 0 ° C. for 5 hours. The reaction solution was transferred into ice water and extracted with chloroform, and the chloroform layer was washed with saturated brine and concentrated under reduced pressure. The residue was recrystallized from chloroform-diethyl ether to obtain 8.5 g of the target compound as colorless crystals. The mother liquor was concentrated and the residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with chloroform: methanol = 20: 1) and then recrystallized from chloroform-diethyl ether to further obtain 2.4 g of the objective compound as colorless crystals. .
[0071]
Reference Example 8 Production of 6-amino-1-benzyl-2-n-butyl-1H-purine
5 g of 5-cyano-4- [N- (1-methoxypentylidene) amino] imidazole produced in Reference Example 6 was dissolved in 50 ml of methanol, 3.2 ml of benzylamine was added, and the mixture was stirred at 50 ° C. for 2 hours. After allowing to cool, the precipitated crystals were collected by filtration and washed with diethyl ether to obtain 6.2 g of the objective compound as colorless crystals.
[0072]
Reference Example 9 Production of 6-amino-2-n-butyl-1-methyl-1H-purine
In the same manner as in Reference Example 8, colorless crystals of the target compound were obtained.
[0073]
Reference Example 10 Production of 6-amino-7-benzyl-2-n-butyl-7H-purine
Using 1-benzyl-4-amino-5-cyanoimidazole, colorless crystals of the target compound were obtained in the same manner as in Reference Example 6.
[0074]
Reference Example 11 Production of 6-amino-9-benzyl-2-n-butyl-9H-purine
Colorless crystals of the target compound were obtained in the same manner as in Reference Example 6 using 3-benzyl-4-amino-5-cyanoimidazole.
[0075]
Reference Example 12 Production of 4-amino-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
120 ml of trimethyl ortho-n-pentanoate was added to 250 ml of anhydrous DMF in 50 g of 3-aminopyrazole and stirred at 70 ° C. for 22 hours. After completion of the reaction, the reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with dichloromethane: methanol = 50: 1 → 20: 1) to give 3- [N- (1-methoxypentylidene) amino] pyrazole. 60 g of a colorless oil was obtained.
[0076]
60 g of the compound obtained above was dissolved in 300 ml of methanol, 15.3 g of cyanamide was added, and the mixture was stirred at 60 ° C. for 17 hours. After completion of the reaction, the reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with dichloromethane: methanol = 50: 1) and further recrystallized from diisopropyl ether to obtain 36.4 g of the target compound as colorless crystals. The recrystallized mother liquor was purified in the same manner to obtain 7 g of the target compound as colorless crystals.
[0077]
Reference Example 13 Production of 4-amino-2-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
In the same manner as in Reference Example 12, colorless crystals of the target compound were obtained.
[0078]
[Reference Examples 14 to 20]
Further, in the same manner as in Reference Example 12, crystals of the following compounds were obtained.
[0079]
Reference Example 14 = 4-amino-2-methylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 15 = 4-amino-2-ethylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 16 = 4-amino-2-n-propylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 17 = 4-amino-2-n-pentylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 18 = 4-amino-2-benzylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 19 = 4-amino-2-n-butyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
Reference Example 20 = 4-amino-2-n-butyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazine
[0080]
[Example 1]
Production of N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide
To a solution of 200 mg of the compound obtained in Reference Example 1 in 4 ml of anhydrous pyridine, 270 mg of 3,4,5-trimethoxybenzoyl chloride was added at 0 ° C., and the mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour and then at room temperature for 3 days. The reaction mixture was diluted with chloroform, washed successively with 10% hydrochloric acid, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with n-hexane: ethyl acetate = 3: 2) and further recrystallized from n-hexane to obtain 160 mg of the objective compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 1.
[0081]
[Examples 2 to 8]
In the same manner as in Example 1, each compound shown in Table 1 was produced. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 1. For oily substances, ¹ 1 shows H-NMR spectrum data (δ: ppm value; solvent = deuterated chloroform; internal standard = tetramethylsilane).
[0082]
[Example 9]
Production of N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide
To a solution of 5 g of the compound obtained in Reference Example 7 in 50 ml of anhydrous pyridine was added 5.3 g of 3,4,5-trimethoxybenzoyl chloride at 0 ° C., and the mixture was stirred at 0 ° C. for 2 hours and then at room temperature for 5 days. The reaction solution was diluted with chloroform, washed with 10% hydrochloric acid, and extracted with 5% aqueous sodium hydroxide. The aqueous layer was collected, neutralized with 10% hydrochloric acid, and extracted with chloroform. The chloroform layer was collected, washed successively with water and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with chloroform: methanol = 50: 1 → 20: 1) and recrystallized from dichloromethane-diethyl ether to obtain 2.7 g of the objective compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 1.
[0083]
[Example 10]
Production of N- (6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide
To a solution of 100 mg of the compound obtained in Reference Example 3 in 2 ml of anhydrous pyridine, 106 mg of 3,4,5-trimethoxybenzoyl chloride was added at 0 ° C., and the mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour and then at room temperature for 1 hour. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate, washed successively with 10% hydrochloric acid, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with chloroform: ethyl acetate = 1: 1) and further recrystallized from dichloromethane-n-hexane to obtain 150 mg of colorless crystals.
[0084]
The obtained crystals were dissolved in 10 ml of ethanol, 20 mg of 10% palladium-carbon was added, and the mixture was stirred overnight at room temperature in hydrogen gas. Palladium-carbon was filtered off through celite, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with chloroform: methanol = 50: 1) and recrystallized from ethyl acetate-n-hexane to obtain 60 mg of the objective compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 1.
[0085]
Examples 11 and 12
N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide and N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purine-6 -Ill) -N- (3,4,5-trimethoxybenzoyl) -3,4,5-trimethoxybenzamide
To a solution of 1.5 g of the compound obtained in Reference Example 11 in 30 ml of anhydrous pyridine, 1.85 g of 3,4,5-trimethoxybenzoyl chloride was added at room temperature and stirred at room temperature for 6 days. The reaction mixture was diluted with dichloromethane, washed successively with 10% hydrochloric acid, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluted with dichloromethane: methanol = 100: 1 → 50: 1), and the previous fraction was recrystallized from n-hexane to give N- (9-benzyl-2-n- 0.75 g of colorless crystals of butyl-9H-purin-6-yl) -N- (3,4,5-trimethoxybenzoyl) -3,4,5-trimethoxybenzamide was obtained. Further, the subsequent fraction was recrystallized from n-hexane to give colorless crystals of N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide. 0.72 g was obtained. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 1.
[0086]
[Table 1]

[0087]
[Table 2]

[0088]
[Table 3]

[0089]
[Table 4]

[0090]
In addition, the compound of Example 3 described in Table 1 above. ¹ The H-NMR analysis values are as follows.
[0091]
0.90 (3H, t, J = 7.2), 1.3-1.5 (2H, m), 1.8-1.9 (2H, m), 2.87 (2H, t, J = 7.7), 3.62 (6H, s), 3.86 (3H, s), 5.6-6.2 (2H, brs), 7.18 (2H, d, J = 6.9) ), 7.2-7.4 (5H, m), 8.13 (1H, s), 12.3-12.5 (1H, brs).
[0092]
Examples 13 to 53
Further, in the same manner as in Example 1, each compound described in Table 2 was produced. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2. For oily substances, ¹ H-NMR spectrum data (δ: ppm value; solvent = DMSO-d ₆ ; Internal standard = tetramethylsilane).
[0093]
Example 54
Production of N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methylsulfinylbenzamide
To a solution of 1.2 g of the compound obtained in Example 47 in 18 ml of acetic acid, 0.44 ml of 30% aqueous hydrogen peroxide was added and stirred at room temperature for 4 hours. After completion of the reaction, the mixture was neutralized with 10% aqueous sodium hydroxide solution and extracted with dichloromethane. The organic layer was collected, washed successively with water and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. Diethyl ether was added to the residue, and the precipitated crystals were collected by filtration and recrystallized from dichloromethane-diethyl ether to obtain 0.48 g of the objective compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0094]
Example 55
Production of N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methylsulfonylbenzamide
To a solution of 1.0 g of the compound obtained in Example 54 in 10 ml of chloroform, a solution of 1.44 g of metachloroperbenzoic acid in 15 ml of chloroform was added dropwise at −78 ° C., stirred at that temperature for 45 minutes, and further at 0 ° C. Stir for 1 hour. The reaction mixture was diluted with dichloromethane, washed successively with aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (eluent; chloroform → chloroform: methanol = 40: 1) and further recrystallized from ethyl acetate-n-hexane to obtain 0.95 g of the target compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0095]
Example 56
Production of N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-hydroxybenzamide
To a suspension of 1.5 g of the compound obtained in Example 44 in 15 ml of ethanol, 2.0 ml of 10% aqueous sodium hydroxide solution was added at 0 ° C. and stirred at that temperature for 1 hour.
To the reaction solution, 2.2 ml of 10% hydrochloric acid and 80 ml of water were added, and the precipitated crystals were collected by filtration, washed with water, and recrystallized from 60% aqueous ethanol to obtain 1.12 g of colorless crystals of the target compound. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0096]
Example 57
Production of N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -4-hydroxybenzamide
In the same manner as in Example 56, the target compound was produced from the compound obtained in Example 46. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0097]
Example 58
Production of N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide
1.0 g of the compound obtained in Example 7 was dissolved in 20 ml of 1,2-dimethoxyethane-water (3: 1), 0.51 g of NBS was added thereto at 0 ° C., and the mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour. The reaction mixture was diluted with water, and the precipitated crystals were collected by filtration. The obtained crude crystals were washed with water and recrystallized from methanol-water to obtain 0.94 g of the objective compound as colorless crystals. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0098]
Examples 59-62
From the fractions before silica gel chromatography in Examples 7, 13, 14 and 25, the respective compounds shown as Examples 59 to 62 in Table 2 were isolated. The structure and melting point of the obtained compound are shown in Table 2.
[0099]
[Table 5]

[0100]
[Table 6]

[0101]
[Table 7]

[0102]
[Table 8]

[0103]
[Table 9]

[0104]
[Table 10]

[0105]
[Table 11]

[0106]
[Table 12]

[0107]
[Table 13]

[0108]
[Table 14]

[0109]
[Table 15]

[0110]
[Table 16]

[0111]
[Table 17]

[0112]
In addition, the compound of Example 43 described in Table 2 above. ¹ The H-NMR analysis values are as follows.
[0113]
0.88 (3H, t, J = 7.4), 1.2-1.4 (2H, m), 1.5-1.7 (2H, m), 2.47 (3H, s), 2.66 (2H, t, J = 6.9), 6.55 (1H, d, J = 2.0), 7.2-7.4 (2H, m), 7.43 (1H, t , J = 7.4), 7.62 (1H, d, J = 6.9), 8.21 (1H, d, J = 2.0), 11.6-19-11.9 (1H, brs) .
[0114]
Examples 63-75
Further, in the same manner as in Example 1, each compound shown in Table 3 was produced. Table 3 shows the structure and melting point of the compound obtained.
[0115]
Examples 76-82
From the fractions before silica gel chromatography in Examples 63-64 and Examples 68-72, the compounds shown as Examples 76 to 82 in Table 3 were isolated. Table 3 shows the structure and melting point of the compound obtained.
[0116]
Example 83
The compounds listed in Table 3 were produced from the compound obtained in Example 75 in the same manner as in Example 56. Table 3 shows the structure and melting point of the compound obtained.
[0117]
[Table 18]

[0118]
[Table 19]

[0119]
[Table 20]

[0120]
[Table 21]

[0121]
[Table 22]

[0122]
[Table 23]

[0123]
Examples 84-120
The following compounds can be produced by carrying out the same reactions as in the above Reference Examples and Examples using appropriate starting materials.
[0124]
Example 84 = N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -1-naphthoylamide
Example 85 = N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -1-naphthoylamide
Example 86 = N- (1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -1-naphthoylamide
Example 87 = N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -1-naphthoylamide
Example 88 = N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) nicotinamide
Example 89 = N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) nicotinamide
Example 90 = N- (1-Benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) nicotinamide
Example 91 = N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) nicotinamide
Example 92 = N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -2-furancarboxamide
Example 93 = N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -2-furancarboxamide
Example 94 = N- (1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -2-furancarboxamide
Example 95 = N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-furancarboxamide
Example 96 = N- (1-benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -3-chlorobenzamide
Example 97 = N- (2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -3-chlorobenzamide
Example 98 = N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3-chlorobenzamide
Example 99 = N- (7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl) -3-chlorobenzamide
Example 100 = N- (1-Benzyl-6-n-butyl-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -2-methoxybenzamide
Example 101 = N- (2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -2-methoxybenzamide
Example 102 = N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -2-methoxybenzamide
Example 103 = N- (7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl) -2-methoxybenzamide
Example 104 = N- (2-n-butyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -3-chlorobenzamide
Example 105 = N- (2-n-butyl-7-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methoxybenzamide
Example 106 = N- (2-n-butyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -3-chlorobenzamide
Example 107 = N- (2-n-butyl-8-phenylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methoxybenzamide
Example 108 = N- [2-n-butyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl] -3-chlorobenzamide
Example 109 = N- [2-n-butyl-8- (4-phenylthiophenyl) pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl] -2-methoxybenzamide
Example 110 = N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -1-naphthoylamide
Example 111 = N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin = 6-yl) nicotinamide
Example 112 = N- (9-benzyl-2-n-butyl-9H-purin = 6-yl) -2-furancarboxamide
Example 113 = N- (7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl) -1-naphthoylamide
Example 114 = N- (7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl) nicotinamide
Example 115 = N- (7-benzyl-2-n-butyl-7H-purin-6-yl) -2-furancarboxamide
Example 116 = N- (2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -1-naphthoylamide
Example 117 = N- (2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) nicotinamide
Example 118 = N- (2-benzyl-6-n-butyl-2H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl) -2-furancarboxamide
Example 119 = N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -3-chlorobenzamide
Example 120 = N- (8-bromo-2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methoxybenzamide
[0125]
[Formulation Example 1]
Preparation of capsules
Hard gelatin capsules containing 250 mg per capsule using N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide as an active ingredient 1000) were prepared according to the following recipe.
[0126]
Active ingredient compound 250g
Crystalline cellulose (Japanese Pharmacopoeia) 30g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 17g
Talc (Japanese Pharmacopoeia) 2g
Magnesium stearate 1g
That is, according to the above formulation, each component was finely powdered and mixed to form a uniform mixture, and then filled into a gelatin capsule for oral administration having a desired size to obtain a target capsule.
[0127]
[Formulation Example 2]
Tablet preparation
Using N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2,4-dichlorobenzamide as an active ingredient compound, containing 300 mg per tablet Tablets (2000 tablets) were prepared according to the following formulation.
[0128]
Active ingredient compound 600g
Lactose (Japanese Pharmacopoeia) 67g
Corn starch (Japanese Pharmacopoeia) 33g
Carboxymethylcellulose calcium (Japanese Pharmacopoeia) 25g
Methylcellulose (Japanese Pharmacopoeia) 12g
Magnesium stearate 3g
That is, in accordance with the above formulation, the active ingredient compound, lactose, corn starch and carboxymethylcellulose calcium are mixed well, granulated using an aqueous solution of methylcellulose, passed through a 24-mesh sieve, mixed with magnesium stearate, and compressed (pressed). The target tablet was prepared.
[0129]
[Pharmacological Test Example 1]
Spraque Dawley male rats (6-9 weeks old, 200-250 g) were sacrificed by cervical dislocation, the thoracic aorta was immediately removed, and the surrounding connective tissue was exfoliated. Next, this is divided into 5 to 7 pieces, each is cut open vertically, and then the endothelial cells are removed by rubbing the blood vessel lumen with a washing swab to eliminate the influence of cNOS present in the vascular endothelial cells. A sample was prepared.
[0130]
A Krebs-Henseleit solution (NaCl 118.3 mM, KCl 4.7 mM) to which a dimethyl sulfoxide solution of the active ingredient compound of the present invention (test compound) prepared to a concentration of 30 μM was added and L-arginine was further added to a concentration of 400 μM was added. , CaCl ₂ 2.5 mM, KH ₂ PO _Four 1.2 mM MgSO _Four 1.2 mM, NaHCO _Three The sample was placed in 25.0 mM and glucose 11.1 mM) and incubated at 37 ° C. for 30 minutes. Subsequently, lipopolysaccharide (LPS) was added at a concentration of 1000 ng / ml and incubated at 37 ° C. for 24 hours (experimental group using test compound, present invention group).
[0131]
Next, the supernatant was taken up in a 96-well plate, and the NO described in the literature [Neochemistry experiment course 10, blood vessels, endothelium and smooth muscle, page 135, edited by The Japanese Biochemical Society, Tokyo Chemical Dojin, 1993] ₂ According to the measurement method, NO ₂ NO was accumulated with a grease (Griess) solution and measured with a biokinetic reader (Biokinetics reader, manufactured by BIO-TEK Instruments, model EL-340). ₂ The amount was calculated.
[0132]
In addition, the blood vessel fragment of the specimen was dissolved in 1N sodium hydroxide aqueous solution, and the color was developed with a Bio-Rad DC protein assay kit (Bio-Rad Laboratories), and a spectrophotometer (Spectrophotometer, HITACHI). The amount of protein was calculated by measurement using a U-3000 model. And from these values, NO per mg of protein ₂ The amount produced was determined.
[0133]
On the other hand, the same test was repeated for the control group to which dimethyl sulfoxide was added instead of the test compound and the control group to which LPS was not added.
[0134]
NO per 1 mg protein in each group determined as above ₂ From the amount produced, the iNOS induction inhibition rate was determined according to the following equation.
[0135]
Inhibition rate (%) = {1-[(Invention group value) − (Control group value)] / [(Control group value) − (Control group value)]} × 100
The results obtained are shown in Table 4.
[0136]
[Table 24]

[0137]
From Table 4, it is clear that the active ingredient compound of the present invention inhibits iNOS induction by LPS.

Claims (9)

General formula

[Wherein, the ring represented by A is a benzene ring, a naphthalene ring, a pyridine ring or a furan ring, and R ¹ , R ² and R ³ all represent a hydrogen atom when A is other than a benzene ring; In the case of a benzene ring, the same or different, a hydrogen atom, lower alkoxy group, halogen atom, nitro group, lower alkyl group, halogen-substituted lower alkyl group, phenyl group, phenoxy group, lower alkanoyloxy group, hydroxy group, lower alkylthio group Represents a lower alkylsulfinyl group or a lower alkylsulfonyl group. R ⁴ is (1) a thieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl group having a lower alkyl group as a substituent, and (2) a lower alkyl group, a phenyl group, a phenyl lower alkyl group, a phenylthiophenyl as a substituent. A pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl group which may have one or two groups selected from a group and a halogen atom, (3) a lower alkyl group at the 6-position And a pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-yl group in which one of the nitrogen atoms may be substituted with a phenyl lower alkyl group and (4) a lower alkyl group at the 2-position, One represents a heterocyclic group selected from a purin-6-yl group which may be substituted with a lower alkyl group or a phenyl lower alkyl group, and R ⁵ represents a hydrogen atom or a group

(Wherein A, R ¹ , R ² and R ³ are the same as above). ]
A nitric oxide synthase inhibitor comprising an amide derivative represented by the formula (I) as an active ingredient and an effective amount thereof together with a pharmaceutical carrier. The nitric oxide synthase inhibitor according to claim 1, wherein the active ingredient is a compound in which A is a benzene ring and R ⁵ is a hydrogen atom in the general formula of claim 1. The thieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl group having a lower alkyl group at the 2-position as the substituent in the heterocyclic group represented by R ⁴ in the general formula according to claim 1, the 2-position as the substituent A compound which is a pyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl group having a lower alkyl group or a 9H-purin-6-yl group having a lower alkyl group at the 2-position as an active ingredient The nitric oxide synthase inhibitor according to claim 2. 4. The nitric oxide synthesis according to claim 3, wherein a compound in which R ¹ , R ² and R ³ are the same or different and are a hydrogen atom, a lower alkoxy group or a halogen atom in the general formula according to claim 1 is an active ingredient. Enzyme inhibitor. N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2,3,4-trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylpyrazolo [1, 5-a] -1,3,5-triazin-4-yl) -2-methoxybenzamide, N- (2-n-butylpyrazolo [1,5-a] -1,3,5-triazin-4-yl ) -2,4-dichlorobenzamide, N- (2-n-butyl-9H-purin-6-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylthieno [3,2- d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide, N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -2-chlorobenzamide, N- (2 -N-Butylthieno [3,2-d] pyrimidine-4- A compound comprising at least one compound selected from (i) -2,4-dichlorobenzamide and N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3-methoxybenzamide. Item 5. A nitric oxide synthase inhibitor according to Item 4. The nitric oxide synthase inhibitor according to claim 5, wherein the active ingredient is N- (2-n-butylthieno [3,2-d] pyrimidin-4-yl) -3,4,5-trimethoxybenzamide. The nitric oxide synthase inhibitor according to any one of claims 1 to 6, which selectively inhibits inducible nitric oxide synthase. An agent for preventing and treating sepsis, comprising an effective amount of the amide derivative according to claim 1 together with a pharmaceutical carrier. An endotoxin shock ameliorating agent comprising an effective amount of the amide derivative according to claim 1 together with a pharmaceutical carrier.