JP3533737B2

JP3533737B2 - 生体老化防止剤及び皮膚用組成物

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Publication number: JP3533737B2
Application number: JP33551894A
Authority: JP
Inventors: 宏安達; 真也江幡; 達男林
Original assignee: Lion Corp
Current assignee: Lion Corp
Priority date: 1994-12-21
Filing date: 1994-12-21
Publication date: 2004-05-31
Anticipated expiration: 2019-05-31
Also published as: JPH08176005A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、皮膚組織などの生体細
胞、組織に対する賦活化作用が高く、抗老化効果に優れ
た生体老化防止剤及び皮膚用組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】老化のメカニズムは、盛んに研究され、
いろいろな説が提示されている。しかし、未だ基礎研究
段階にあり、寿命を延ばしたり、老化に特徴的な諸症状
を遅延させるといったような、老化防止の有効な手だて
が確立されたとはいい難い。その様な中、数は少ないも
のの、個体レベル、組織レベルで幾つかの試みがなされ
ている。

【０００３】組織レベルの研究では、皮膚や関節の老化
に対する試みがあげられる。皮膚や関節では、老化によ
って細胞機能が低下してくると、生体成分の過酸化のみ
ならず、組織内のヒアルロン酸量が低下し、皮膚の乾
燥、ハリ・弾力性の低下、シミ・シワの増加、関節の潤
滑性の低下をきたす。これに対し、代表的な対処方法は
２つ知られている。１つは、皮膚にはヒアルロン酸、保
湿成分などを配合した化粧料を塗布したり、関節には直
接ヒアルロン酸を注入したりする方法である。もう１つ
はレチノイン酸の塗布による方法で、これによれば生体
のヒアルロン酸合成が促進され、シワ改善につながると
いうものである。しかし、前者は根本的改善にはつなが
らず、後者のレチノイン酸は強い皮膚刺激性や皮膚の肥
厚などの副作用が強い。

【０００４】一方、個体レベルの研究では、特定の栄養
素を欠いた飼料で飼育した動物実験の結果から、ビタミ
ンＥ、ビタミンＣなどに老化現象を遅延する効果が発見
された。たとえば、最も強い効果を示すものとしてビタ
ミンＥがあげられる。そこで、ビタミンＥにマウスやラ
ットに対する寿命延長効果の期待がもたれ、種々の研究
がなされたきた。しかし、今のところ、ビタミンＥに明
確な寿命延長効果は見られていない。

【０００５】ところが、その後の研究で、明確な寿命延
長効果の見られないビタミンＥやビタミンＣレベルの作
用でも、その局所投与により皮膚のシミ・シワや老化に
よる脂質過酸化の抑制が明らかにされ、医薬品のみなら
ず、化粧料、食品にも老化防止剤として広く応用されて
いる。現在のところ、これら物質は抗酸化剤として働
き、酸素代謝から生じる活性酸素などに起因する酸化障
害を抑制する結果、抗老化作用を示すものと考えられて
いる。

【０００６】このように、抗老化作用を与える有効成分
については種々の検討、提案がなされているが、更に抗
老化効果に優れ、かつ安全性の高い有効成分が望まれて
いる。

【０００７】

【課題を解決するための手段及び作用】本発明者らは、
上記要望に応えるため鋭意検討を行った結果、コレウス
・フォルスコリィ（Ｃｏｌｅｕｓｆｏｒｓｋｏｈｌｉ
ｉ）の根の抽出物あるいはフォルスコリンが線虫Ｃ．エ
レガンスの寿命を延ばす効果が高く、またラットの表皮
細胞に対するヒアルロン酸合成促進効果が高いこと、そ
してこれらの効果はトコトリエノールと併用される場
合、より顕著に増強されること、従ってコレウス・フォ
ルスコリィの根の抽出物又はフォルスコリンとトコトリ
エノールとの組合せが、皮膚組織などの生体細胞組織に
対して優れた賦活化作用を有し、抗老化効果が高いこと
を見い出した。

【０００８】すなわち、Ｃ．エレガンスは老化研究に適
したモデル動物として広く知られている。その老化プロ
セスは遺伝子レベルで研究が進められ、ヒトを始めとす
る哺乳類の老化研究には欠かせないモデル系である（Ｊ
ｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＧｅｒ
ｉａｔｒｉｃｓＳｏｃｉｅｔｙ４０（９），１９９
２，９３６−９４５）。その平均寿命は遺伝的に制御さ
れ、一定（２０℃でおよそ２０日）な上、加齢と共に細
胞内及び組織の代謝活性が低下し、過酸化物が蓄積する
など高等動物と同様のプロセスを経て死に至る。従っ
て、Ｃ．エレガンスの寿命は細胞及び組織の老化の格好
の指標といえる。それ故、線虫Ｃ．エレガンスを飼育す
る培地にある成分を添加してＣ．エレガンスの寿命を延
ばすことができた場合、この成分は皮膚を含む生体細
胞、組織に対する賦活化効果を有し、抗老化効果を与え
るものと評価することができる。

【０００９】一方、ヒアルロン酸合成能は皮膚の老化現
象をとらえている。皮膚は加齢と共にハリ、ツヤが低下
し、シワが増加する。これは、皮膚、特に表皮の弾力性
・保水性低下に起因することは周知の事実である。ヒア
ルロン酸は皮膚中で多量の水分を保持し、皮膚の弾力性
・保水性といった恒常性維持に大きく寄与している。老
化と共に、このヒアルロン酸が低下することは知られて
おり、これが皮膚のハリ、ツヤの低下、シワの増加につ
ながっている。即ち、表皮のヒアルロン酸を増加させる
ことは、皮膚の老化を抑制することにほかならず、ある
成分がヒアルロン酸合成促進効果を与えるということ
は、この成分が皮膚細胞、組織に対しその老化を抑制す
る賦活化効果を有するものと評価し得る。

【００１０】本発明者らは、このような点から、線虫
Ｃ．エレガンスの寿命を延ばす効果とラットの表皮細胞
に対するヒアルロン酸合成促進効果をスクリーニング指
標に選定し、スクリーニングを重ねた結果、コレウス・
フォルスコリィの根の抽出物又はフォルスコリンとトコ
トリエノールとの組み合せに目的の効果が得られること
を見いだし、本発明を完成するに至った。

【００１１】なお、従来、コレウス・フォルスコリィの
根の抽出物あるいはフォルスコリンが皮膚外用剤や毛髪
用組成物の有効成分として用いられることは公知である
（特開昭６３−３０４９７８号、同６４−７９１０７
号、特開平１−２１６９１２号、同３−１８８０２４
号、特表平５−５０１１０８号公報）が、コレウス・フ
ォルスコリィの根の抽出物あるいはフォルスコリンとト
コトリエノールとの併用により、高い抗老化効果を与え
ることは本発明者らによる新知見である。

【００１２】従って、本発明は、コレウス・フォルスコ
リィの根の抽出物又はフォルスコリンとトコトリエノー
ルとを有効成分とする生体老化防止剤及びこの生体老化
防止剤を含有する皮膚用組成物を提供する。

【００１３】以下、本発明につき更に詳しく説明する。

【００１４】本発明に用いられるコレウス・フォルスコ
リィ（Ｃｏｌｅｕｓｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ）とは、シ
ソ科に属し、インド、アラブ、アフリカ、ブラジル等の
地域で古くから民間薬として用いられており、心臓、呼
吸器系、神経系の疾患あるいは腹痛などにも効くとされ
ている。また、インドではこれをつけ物として食してい
る。本発明で用いるコレウス・フォルスコリィとして
は、これらの地域で栽培・自生するものを用いることが
できるが、これらに限られない。たとえば、日本で栽培
されたコレウス・フォルスコリィは、成分的にも有効性
の面でも上記地域から入手したものと何等変わりはな
く、従ってこれらのものも有効に用いることができる。
また、マイクロチューバー、不定芽、不定根、毛状根、
カルスなど組織培養手法によって得られる器官も用いる
ことが可能である。

【００１５】本発明に適用されるコレウス・フォルスコ
リィの根抽出物を得る方法に制限はなく、通常の抽出法
が採用され、水等の親水性有機溶剤、含水親水性有機溶
剤、その他の有機溶剤等を使用して抽出され、本発明に
おいては公知のコレウス・フォルスコリィの根抽出物を
用いることができる。

【００１６】フォルスコリンはコレウス・フォルスコリ
ィの根中から見いだされる既知の化合物である。この物
質を含む根抽出エキスを得る方法としては、次の方法が
好適である。すなわち、コレウス・フォルスコリィの根
を乾燥させたものをメタノールかエタノールを用いて冷
浸して抽出液を得、これを濃縮して抽出エキスを得る方
法である。なお、この方法は、本発明のフォルスコリン
を含むコレウス・フォルスコリィの根抽出エキスを得る
ための方法としての一態様を示すものであり、本発明に
係わる製造過程において、抽出に用いる溶剤ならびにそ
の使用順序は限定されることなく、任意に選択し得るも
のである。

【００１７】本発明において、上記コレウス・フォルス
コリィの根抽出物としては、その抽出溶媒が水、エタノ
ール、水−エタノール等の非毒性のものである場合は抽
出液をそのまま用いてもよく、あるいは希釈液として用
いることができる。また、濃縮エキスとしてもよく、凍
結乾燥などにより乾燥粉末物としたり、ペースト状に調
整してもよい。必要に応じては、エキス中のフォルスコ
リン含量を高めるために精製工程を加えてもよく、最終
抽出物がフォルスコリンでもよい。

【００１８】一方、本発明では、トコトリエノールを使
用する。

【００１９】上記トコトリエノールのコレウス・フォル
スコリィの根抽出物又はフォルスコリンに対する併用割
合は適宜選定されるが、フォルスコリン１重量部に対し
０．０１〜５０重量部、特に０．１〜１０重量部とする
ことが好ましい。

【００２０】本発明の生体老化防止剤は、皮膚組織等に
対する細胞、組織賦活化効果に優れ、ヒアルロン酸合成
促進能も高いので、皮膚用化粧料、皮膚外用剤等の皮膚
用組成物に好適に配合されるほか、毛髪用化粧料等の毛
髪用組成物、飲食品、医薬品などに配合して使用するこ
とができる。この場合、剤型としては、リニメント、ス
プレー、ローション、水溶液、乳液、軟膏、パウダー、
溶解錠、石けん等の外用形態となすことができ、また、
錠剤、カプセル剤、散剤、内服液、細粒剤、顆粒剤等の
内服剤の形態とすることもでき、本発明の生体老化防止
剤が配合される組成物の形態は特に制限されるものでは
ない。

【００２１】上記生体老化防止剤を上記の如き皮膚用な
どの組成物に配合する場合、その配合量としては種々選
定し得るが、通常組成物全体の０．００１〜３０重量
％、特に０．０１〜１０重量％である。

【００２２】本発明の生体老化防止剤が配合される皮膚
用などの組成物を構成する成分としては、その組成物の
種類、使用目的や形態などに応じた公知の成分を使用し
得、その配合量も常用量とすることができる。

【００２３】

【発明の効果】以上説明したように、本発明にかかる生
体老化防止剤は、コレウス・フォルスコリィの根抽出物
又はフォルスコリンと、トコトリエノールとの相乗作用
によって、優れた細胞、組織の賦活化作用を与え、生体
老化防止効果が高く、かつ安全性が高いものであり、こ
の生体老化防止剤を含有する皮膚用組成物は、皮膚の老
化を抑制する効果が高いものである。

【００２４】

【実施例】以下、実施例と比較例を示し、本発明を具体
的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるも
のではない。

【００２５】〔製造例〕コレウス・フォルスコリィ根抽出物の製造コレウス・フォルスコリィの根２ｋｇを２０Ｌのエタノ
ールで３回にわたりそれぞれ３日間ずつ冷浸して抽出液
を得た。この抽出液よりエバポレーターを用いて溶媒を
留去して、１Ｌの濃縮エキスを得た。

【００２６】コレウス・フォルスコリィ精製エキスの製
造上で得られた濃縮エキスをカラムクロマトグラフィー
［担体；シリカゲル（ワコーゲルＣ−２００）、移動
相：ベンゼン／酢酸エチル＝９０／１０］にかけた。更
に、逆相系シリカゲルカラム［ＯＤＳ−ＡＱ（２５０×
３０ｍｍＤ．）；ＹＭＣ社製］カラムを用いて高速液体
クロマトグラフィーによる分取を行った。溶媒は６５％
アセトニトリル、流速は４０ｍｌ／分とし、紫外部２１
０ｎｍで検出した。保持時間１１分から１２分の部分を
分取し、濃縮乾固して薄茶褐色の粉末４．２ｇを得た。

【００２７】〔実験例１〕Ｃ．エレガンスの寿命延長
能評価ＮＧ培地上でＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｓｔ
ｒａｉｎＯＰ５０を培養し、ＮＧＭ培地（ｎｅｍａｔ
ｏｄｅｇｒｏｗｔｈｍｅｄｉｕｍ）とした。次に、
このＮＧＭ培地上で、線虫Ｃ．エレガンス（Ｃａｅｎｏ
ｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓｖａｒ．Ｂｒ
ｉｓｔｏｌ）を大量に飼育した。同一生育ステージの
Ｃ．エレガンスを得るため、大量飼育した個体群より採
卵した。すなわち、水酸化ナトリウムと次亜塩素酸ナト
リウムに大量の成虫を浸漬し、成虫の体表を溶かすこと
により卵だけを得ることができた。卵はＳ緩衝液中で十
分に洗浄し、２０℃で１８時間静置した。孵化してきた
幼虫を集め、ＮＧＭ培地上で成虫になるまで３日間飼育
した。次世代幼虫の孵化遊出を抑制する目的で５−フル
オロ−２’−デオキシウリジンを３日目より培地に添加
した。上記製造例で得られた検体、レチノイン酸、フラ
ビンアデニンジヌクレオチド、アスコルビン酸、α−ト
コフェロール、コエンザイムＱ、トコトリエノールを極
少量のエタノールとＴｗｅｅｎ８０に溶解した後、最終
濃度が２ｍｇ／ｍｌとなるように水で調整した。検体の
最終濃度が２５μｇ／ｍｌとなるようにこの溶液を４ｍ
ｌのＮＧＭ培地に添加した。成虫に育った４日目より、
Ｃ．エレガンスを検体添加培地の上で飼育し、その寿命
の変動を調査した。その結果を表１に示す。表１は各検
体を投与した個体群の寿命曲線から得られた平均寿命を
表す。

【００２８】

【表１】

【００２９】次に、フラビンアデニンジヌクレオチド、
アスコルビン酸、α−トコフェロール、コエンザイム
Ｑ、トコトリエノールと、コレウス・フォルスコリィ精
製エキス（以下、単に精製エキスと呼ぶ）を組み合わせ
て投与し、上記と同様な方法で寿命の変動を調査した。
精製エキスは１２μｇ／ｍｌ、他の検体は２５μｇ／ｍ
ｌとした。その結果を表２に示す。

【００３０】

【表２】

【００３１】表１，２の結果から明らかなように、精製
エキスと抗酸化物質とを組み合わせることにより、寿命
延長効果は単独よりも強いものとなった。その中でも特
にトコトリエノールとの組み合わせによる相乗効果は著
しく、他を遙かに凌いでいる。コレウス・フォルスコリ
ィ根抽出エキスを用いた場合でも全く同様な結果が得ら
れている。

【００３２】〔実験例２〕表皮培養細胞を用いたヒア
ルロン酸の合成促進能評価新生児（３日令）ラットの皮膚から０．２５％トリプシ
ン処理によりケラチノサイトを分離し、増殖用培地
（０．１ｍＭ−Ｃａ）でシャーレにいっぱいになるまで
培養した後、分化用培地（１．８ｍＭ−Ｃａ）で２日間
培養した。スクリーニングにはこの細胞を用いた。この
細胞にコレウス・フォルスコリィ根抽出エキス等のサン
プルを２０μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌの濃度で４８
時間作用させた後、³Ｈ−グルコサミン（５μＣｉ／ｄ
ｉｓｈ）を添加してさらに２４時間培養した。さらに培
地をプロナーゼ処理してタンパクを消化した後、塩化セ
チルピリジニウム沈澱法により、培地中に放出されてき
たヒアルロン酸を含む総³Ｈ−ＧＡＧを分離してその放
射活性を測定し、コントロールを１としたときのＧＡＧ
合成促進能（コントロール比：倍率）を算出した。その
結果を表３に示す。

【００３３】ＧＡＧ合成促進能（倍率）＝Ａ／ＢＡ：サンプルを添加したときの³Ｈ−ＧＡＧの放射活性
（ｄｐｍ）Ｂ：無添加の場合の³Ｈ−ＧＡＧの放射活性（ｄｐｍ）

【００３４】

【表３】

【００３５】表３の結果より、精製エキスとトコトリエ
ノール（抗酸化剤）との組合せが優れたＧＡＧ合成促進
活性を与えることが認められる。また、コレウス・フォ
ルスコリィ根抽出エキスを用いた場合でも全く同様な結
果が得られている。なお、ビタミンＥには、特に高いＧ
ＡＧ合成促進活性は認められなかった。

【００３６】次に、本発明の生体老化防止剤を含む組成
物の配合例を示す。

【００３７】

【００３８】

【００３９】

【００４０】〔配合例４〕化粧用クリームＡ油相部流動パラフィン（＃７０）５．０％スクワラン１５．０セトステアリルアルコール５．０蜜ロウ２．０モノステアリン酸グリセリン２．０ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウレート２．０プロピルパラペン０．１フォリスコリン０．０５パーム油トコトリエノール０．５Ｂ水相部ヒアルロン酸０．２メチルパラベン０．２精製水バランスＣ香料適量 ─────────────────────────────────── 計１００．０％上記処方物Ａ，Ｂを７０℃でそれぞれ混合溶解し、Ｂに
Ａを加えて均一に乳化した。さらにＣを加えて冷却し、
乳液を調製した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 45/08 Ａ６１Ｋ 45/08 Ａ６１Ｐ 17/00 Ａ６１Ｐ 17/00 43/00 １０７ 43/00 １０７ (56)参考文献特開昭63−304978（ＪＰ，Ａ) 特開平３−188024（ＪＰ，Ａ) 国際公開94／027583（ＷＯ，Ａ１) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 35/78 A61K 7/00 A61K 31/355

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】コレウス・フォルスコリィの根の抽出物
とトコトリエノールとを有効成分とする生体老化防止
剤。
【請求項２】フォルスコリンとトコトリエノールとを
有効成分とする生体老化防止剤。
【請求項３】請求項１又は２記載の生体老化防止剤を
含有する皮膚用組成物。