JP3586903B2

JP3586903B2 - Cleaning preservative for contact lenses

Info

Publication number: JP3586903B2
Application number: JP29089394A
Authority: JP
Inventors: 剛宮▲崎▼; 徹安河内; 康美鯉沼
Original assignee: NOF Corp
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 1994-11-25
Filing date: 1994-11-25
Publication date: 2004-11-10
Anticipated expiration: 2019-11-10
Also published as: JPH08146363A

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、コンタクトレンズに付着したタンパク質、脂質、ムチン、多糖類等の汚染物の除去に有効なコンタクトレンズ用洗浄保存液に関する。
【０００２】
【従来の技術】
コンタクトレンズを長期間使用する場合、タンパク質、脂質、多糖類、無機性物質等が強固に沈着することにより、コンタクトレンズに曇りが発生したり、装用感が低下する等の問題が生じる。そこでこれらの汚染物を洗浄するために、界面活性剤、酵素、研磨剤等を使用したタンパク除去剤が一般に使用されている。また目への安全性を考慮すると、このようなコンタクトレンズのケアは毎日確実に行う必要があり、そこで最近では、該コンタクトレンズのケアを行い易いように、携帯性及び安全性に優れ、また簡便且つ効率良く洗浄ができ、更にコンタクトレンズの保存も同時にできる洗浄保存液が求められている。このようなコンタクトレンズの洗浄剤として酵素を使用することは、安全性が高く、また洗浄操作も簡単なので通常良く用いられている。例えば特開平６−１０２４７４号公報には、タンパク分解酵素、脂肪分解酵素、多糖分解酵素等をタブレット上に賦形した洗浄剤が記載されている。また、特開平６−０９５０４３号公報には、グリセロール中に、セリンプロテアーゼ、陰イオン性界面活性剤等を配合した洗浄剤が記載されている。更に、特公平５−３３７６８号公報には、タンパク分解酵素をポリエチレングリコールに分散させてなる洗浄剤を用いてレンズをこすり洗いすることを特徴とする洗浄方法が記載されている。
【０００３】
しかしながら、これらの洗浄剤ではほとんどの剤形がタブレットのため、これを溶解させるための容器が別途必要となり簡便ではなく、またタブレットがかさばり、割れやすいことから可搬性、携帯性等に劣るという問題点がある。一方、剤形がタブレットではなく水溶液である洗浄剤では、酵素の長期安定性が悪く洗浄効果が経時的に低下してくるという問題点がある。
【０００４】
また特開平１−１５３０８８号公報には、無水マレイン酸とポリエチレングリコールモノアリルエーテルとの共重合体で修飾された酵素が高活性を保持しながら安定性をも有することが提案されている。この酵素の用途としては、バイオリアクター等として使用できることが記載されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、長期にわたり洗浄効果を維持し、可搬性、携帯性等に優れ、また取り扱いの簡便なコンタクトレンズ用洗浄保存液を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、下記一般式化２で表わされるタンパク修飾剤（以下タンパク修飾剤Ａと称す）で修飾された酵素を含有することを特徴とするコンタクトレンズ用洗浄保存液が提供される。
【０００７】
【化２】

【０００８】
以下本発明を更に詳細に説明する。
本発明のコンタクトレンズ用洗浄保存液は、前記一般式化２で表わされるタンパク修飾剤Ａで修飾された酵素を含有する。
【０００９】
前記タンパク修飾剤Ａにおいて、ｎは１〜１０００、好ましくは１０〜３００、更に好ましくは２０〜１２０の正数であり、ｎが１０００を超える場合には製造が困難である。前記タンパク修飾剤Ａの重合度は式中ｍで示されるとおり１〜１０００、好ましくは２〜５００である。前記重合度が１０００を超えると製造が困難である。また前記タンパク修飾剤Ａの分子量は、好ましくは５００〜１００００００、好ましくは１０００〜１０００００、更に好ましくは５０００〜５００００である。
【００１０】
前記タンパク修飾剤Ａにおいて、ＯＡは炭素数２〜４のオキシアルキレン基であり、具体的には、例えばオキシエチレン基、オキシプロピレン基、オキシトリメチレン基、オキシ−１−エチルエチレン基、オキシ−１，２−ジメチルエチレン基、オキシテトラメチレン基等を挙げることができる。この際（ＯＡ）ｎのｎが２以上の場合、各ＯＡは同一若しくは異なる基のどちらであっても良い。ｎが２以上でＯＡとして異なる基を有する場合、（ＯＡ）ｎの結合はランダム又はブロックのどちらであっても良い。前記タンパク修飾剤Ａに親水性を付与する場合の（ＯＡ）ｎとしては、オキシエチレン基単位単独で構成されるものが好ましく、特にｎが５以上のものが好ましい。また種類の異なるＯＡにより（ＯＡ）ｎが構成される場合に親水性を付与するには、オキシエチレン基を（ＯＡ）ｎ中に、好ましくは２０モル％以上、更に好ましくは５０モル％以上存在させるのが望ましい。一方タンパク修飾剤Ａに親油性を付与する場合、（ＯＡ）ｎ中にオキシエチレン基以外のオキシアルキレン基のモル数を多くすれば良い。
【００１１】
前記タンパク修飾剤Ａにおいて、−ＣＨ_２−ＣＲ^１（ＣＨ_２（ＯＡ）ｎＯＲ^２）−を構成する具体的な化合物としては、例えば下記構造式で表わされる化合物等を挙げることができる。ＣＨ_２＝ＣＨＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎＯＨ、ＣＨ_２＝ＣＨＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎＯＣＨ_３
ＣＨ_２＝ＣＨＣＨ_２［（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎ^１（ＯＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ｎ^２］ＯＣ_３Ｈ_７、
ＣＨ_２＝ＣＨＣＨ_２［（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎ^１（ＯＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ｎ^２］ＯＣ_３Ｈ_７
ＣＨ_２＝ＣＨＣＨ_２［（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎ^１（ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ｎ^２］ＯＣ_１２Ｈ_２５
ＣＨ_２＝Ｃ（ＣＨ_３）ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｎＯＨ（但し［］内はランダム又はブロック共重合体を表し、ｎ＝１〜１０００、ｎ^１＋ｎ^２＝１〜１０００である）。
【００１２】
前記タンパク修飾剤Ａを調製するには、例えば原料成分としてα−アリル−ω−メトキシ−ポリオキシアルキレンと無水マレイン酸とを、好ましくはモル比で１：１〜１．５仕込み、無溶媒あるいはトルエン、ベンゼン、クロロホルム、四塩化炭素等の有機溶媒の存在下、重合開始剤を用いて重合させることにより得ることができる。前記原料成分において（ＯＡ）ｎに相当するポリオキシアルキレンを形成する化合物としては、例えばエチレンオキシド、プロピレンオキシド、オキセタン、１−ブテンオキシド、２−ブテンオキシド、テトラヒドロフラン等を挙げることができる。また重合開始剤としては、例えば過酸化ベンゾイル、ジイソプロピルオキシジカーボネート、ターシャリブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ターシャリブチルペルオキシピバレート、ターシャリブチルペルオキシジイソブチレート、過酸化ラウロイル、ターシャリブチルペルオキシアセテート、ターシャリペルオキシオクトエイト、ターシャリブチルペルオキシベンゾエイト等の有機過酸化物若しくはアゾビスイソブチロニトリル等のアゾ系化合物等を挙げることができる。重合開始剤の添加量は、前記原料成分との合計量に対して好ましくは５重量％以下、更に好ましくは１重量％以下である。また重合は、好ましくは０〜１５０℃、更に好ましくは３０〜１００℃で、好ましくは１〜２００時間、更に好ましくは６〜２４時間重合させる方法等により行うことができる。重合後、得られた共重合体中の溶媒を留去し、そのままあるいは再沈殿、ゲル濾過、イオン交換樹脂処理等の精製処理等により目的のタンパク修飾剤Ａを得ることができる。
【００１３】
本発明においては、前記タンパク修飾剤Ａで修飾された酵素を必須成分として用いるが、酵素としては、例えばタンパク質分解酵素、脂肪分解酵素、糖分解酵素等を挙げることができる。この際これらの酵素は、植物由来、微生物由来、動物由来等のいかなる由来のものであっても良い。前記タンパク質分解酵素としては、例えば植物由来のパパインあるいはプロメライン；微生物由来の放線菌ストレプトミセス、商品名「アクチナーゼ」（科研製薬（株）製）、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）、商品名「プロテアーゼアマノ」（天野製薬（株）製）；動物由来の豚膵臓由来の商品名「膵臓性消化酵素ＴＡ」（天野製薬（株）製）等の他、複合酵素としてパンクレアチン等を挙げることができる。また前記脂肪分解酵素としては、例えばリパーゼ＜サイケン＞（長瀬産業（株）製、商品名）、ビオブラーゼ３ＬＡＰ（長瀬産業（株）製、商品名）、ビオブラーゼＡＳＰ（長瀬産業（株）製、商品名）等のリパーゼ類を挙げることができる。更に前記糖分解酵素としては、例えばビオテックスＬＳ、ビオテックスＰＮ−２、スピターゼＰＮ−４、ビオタミラーゼ、ビオタミラーゼＳ、ビオタミラーゼＡ−１０００、ビオタミラーゼクリーンＷ等のα−アミラーゼ、あるいはマルトチーム２０６、β−アミラーゼ＃１５００等のβ−アミラーゼ等が挙げられる。
【００１４】
前記タンパク修飾剤Ａで前記酵素を修飾するには、例えば前記タンパク修飾剤Ａと前記酵素とを溶媒中にて混合撹拌して反応させる方法等により容易に行うことができる。前記酵素と前記タンパク修飾剤Ａとの反応時の仕込み割合は特に限定されないが、重量比で好ましくは１：０．１〜１００、特に好ましくは１：０．５〜３０、更に好ましくは１：１〜５である。また前記溶媒としては、例えば生理食塩水；燐酸緩衝液、炭酸緩衝液、トリス緩衝液、酢酸緩衝液等の好ましくはｐＨ２〜１１、更に好ましくはｐＨ６〜１０の緩衝液；アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、エタノール、メタノール等の有機溶媒またはこれらの混合物等を挙げることができる。また反応温度は、好ましくは−１０〜１００℃、更に好ましくは０〜５０℃である。更に反応時間は、好ましくは１０分〜３０時間、更に好ましくは３０分〜２４時間である。また反応終了後得られるタンパク修飾剤Ａで修飾された酵素は、ゲル濾過、限外濾過、透析等の方法により精製することができる。
【００１５】
本発明のコンタクトレンズ用洗浄保存液は、前記タンパク修飾剤Ａで修飾された酵素を、また必要に応じて洗浄や保存作用等を有する他の成分と組み合わせて、例えば緩衝液等に溶解させることにより得ることができる。この際前記タンパク修飾剤Ａで修飾された酵素の含有割合は、好ましくは０．０１〜３０重量％の範囲である。前記含有割合が０．０１重量％未満の場合、洗浄保存効果が不十分であり、また３０重量％を超えると作業性が低下するので好ましくない。該タンパク修飾剤Ａは、含有量５０重量％以上、好ましくは１００重量％のワックス状として流通させることができ、コンタクトレンズ用洗浄保存液とする際に、前記０．０１〜３０重量％の含有量となるように希釈するのが好ましい。
【００１６】
前記緩衝液としては、生理食塩水、燐酸緩衝液、炭酸緩衝液、トリス緩衝液、酢酸緩衝液等の好ましくはｐＨ２〜１１、更に好ましくはｐＨ４〜８の緩衝液等を挙げることができる。また前記他の成分としては、例えば増粘剤、界面活性剤、防腐剤等を好ましく挙げることができる。
【００１７】
前記増粘剤としては、例えばエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコール共重合体、ケン化率５０％以上のポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルセルロース、ヒアルロン酸、ポリ（メタ）アクリル酸アルカリ金属塩、ポリビニルスルホン酸ナトリウム塩及びこれらの混合物等を挙げることができる。その含有割合は、好ましくは１〜５０重量％の範囲である。
【００１８】
前記界面活性剤としては、例えば脂肪酸ソーダ石鹸、アルキルサルフェートナトリウム塩、ジアルキルスルホコハク酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム等の陰イオン性界面活性剤；オクタデシルアミン酢酸塩、オクタデシルアンモニウムクロライド、アルキルジメチルベンジルアンモニウムクロライド等の陽イオン性界面活性剤；ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンモノアルキレート、ソルビタンモノアルキレート、ポリエチレンモノアルキレート、（ポリ）オキシエチレンアルキルアミン、アルキルアルキロールアミド、グリセロールモノステアレート、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤；ジメチルアルキルベタイン、アルキルグリシン等の両イオン性界面活性剤及びこれらの混合物等を挙げることができる。その含有割合は、好ましくは０．０１〜１０重量％の範囲である。
【００１９】
前記防腐剤としては、例えばソルビン酸、ソルビン酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸メチル、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００２０】
またこれらの他に、ｐＨ調整剤（ｐＨ緩衝剤）、金属キレート剤、酸化安定剤、香料、保存安定剤等を適時添加することもできる。更には前記タンパク修飾剤Ａで修飾された酵素の前記酵素成分として、パパイン、プロメラインを使用する場合、これらの洗浄効果を高めるために、還元剤として、例えばシステイン、クルタチオンチオ尿素等を添加することもできる。
【００２１】
本発明のコンタクトレンズ用洗浄保存液の使用方法としては、該洗浄保存液をそのまま若しくは更に生理食塩水、精水等で適量に希釈した後、コンタクトレンズを浸漬させて洗浄、保存させる方法等により用いることができる。洗浄液として使用する場合の浸漬時間は、室温において好ましくは３０分間以上、特に好ましくは１〜１２時間で行うことができる。この際、室温で静置するほかに、好ましくは３０〜６０℃に加温したり、あるいは超音波照射等を使用しても良い。また保存液として使用する場合には、任意の時間室温中にて浸漬させた後、精水、生理食塩水、水道水、蒸留水等で洗浄すれば良い。
【００２２】
【発明の効果】
本発明のコンタクトレンズ用洗浄保存液は、前記タンパク修飾剤Ａで修飾された酵素を含有しているので、長期間高い酵素活性を保持し、汚染物の除去、携帯性、可搬性等に優れており、取り扱いが簡便である。
【００２３】
【実施例】
以下本発明を実施例及び比較例を用いて更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２４】
【合成例１】
トルエン１００ｍｌ中に、分子量１５００のα−アリル−ω−メトキシ−ポリオキシエチレン１５０ｇ（１００ｍｍｏｌ）、無水マレイン酸１０．３ｇ（１０５ｍｍｏｌ）及び過酸化ベンゾイル０．４８ｇ（２ｍｍｏｌ）を溶解し、８０℃、６時間重合した後、減圧下、１００℃にてトルエン及び残留した無水マレイン酸を留去し、白色ワックス状のタンパク修飾剤を得た。またゲルパーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ、展開溶媒；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、標準サンプル；ＰＥＧ（ポリエチレングリコール））で分子量を測定した結果、１５０００であった。
【００２５】
【合成例２】
分子量１５００のα−アリル−ω−メトキシ−ポリオキシエチレンの代わりに、分子量３０００のα−アリル−ω−メトキシ−ポリオキシエチレン３００ｇ（１００ｍｍｏｌ）を用いた以外は、合成例１と同様にしてタンパク修飾剤を得た。得られたタンパク修飾剤の分子量は約３１０００であった。
【００２６】
【合成例２】
分子量１５００のα−アリル−ω−メトキシ−ポリオキシエチレンの代わりに、分子量１５００のα−アリル−ω−ヒドロキシ−ポリオキシエチレン１５０ｇ（１００ｍｍｏｌ）を用いた以外は、合成例１と同様にしてタンパク修飾剤を得た。得られたタンパク修飾剤の分子量は約１５０００であった。
【００２７】
【実施例１】
タンパク質分解酵素として商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）５ｇをｐＨ＝８．６のほう酸緩衝液５０ｍｌに溶解し、５℃に保ちながら、合成例１で得られたタンパク修飾剤５ｇを３０分間かけて徐々に加えた後、更に５℃に保ちながら１時間撹拌した。反応終了後、０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを７に調整し、更に防腐剤としてパラヒドロキシ安息香酸メチル０．１ｇを加え、洗浄保存液を調製した。
【００２８】
【実施例２】
タンパク修飾剤の使用量を１０ｇとした以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００２９】
【実施例３】
タンパク修飾剤の使用量を２．５ｇとした以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００３０】
【実施例４】
タンパク修飾剤として、合成例２で合成したタンパク修飾剤１０ｇを用いた以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００３１】
【実施例５】
タンパク修飾剤として、合成例３で合成したのタンパク修飾剤５ｇを用いた以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００３２】
【実施例６】
酵素として、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）の代わりに、商品名「アクチナーゼ」（科研製薬（株）社製）を用いた以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００３３】
【実施例７】
酵素として、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）の代わりに、商品名「プロテアーゼアマノ」（天野製薬（株）社製）を用いた以外は、実施例１と同様にして洗浄保存液を調製した。
【００３４】
【実施例８】
リゾチーム０．１２９ｇ、アルブミン０．３９４ｇ、γ−グロブリン０．２７５ｇ、第１リン酸ナトリウム０．０８ｇ、塩化カルシウム２水和物０．０２２ｇ、１Ｎ水酸化ナトリウム０．３ｍｌ及び蒸留水１００ｍｌを混合して人工涙液を調製した。
次いで酸素透過性コンタクトレンズ（メニコン（株）製、商品名「メニコンＥＸ」）を前記人工涙液中で１５分間煮沸した後、生理食塩水で洗浄した。この操作を３回繰返すことにより人工汚垢レンズを得た。該人工汚垢レンズは、暗視野実体顕微鏡を用いると、レンズ全体が白濁して観察された。
【００３５】
そこで、この人工汚垢レンズを実施例１〜７で得られた各洗浄保存液中にそれぞれ別々に室温で６時間浸漬させた後、蒸留水ですすぎ、暗視野実体顕微鏡にて観察した結果、すべて透明となり、優れた洗浄効果が確認できた。また実施例１〜７で調製した後、６か月が経過した洗浄保存液を用いて同様の評価を行ったところ、すべて透明なレンズが得られた。従って該洗浄保存液は、６か月洗浄効果を維持していることが判った。
【００３６】
【比較例１】
商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）５ｇを、ｐＨ＝７．４のほう酸緩衝液５０ｍｌに溶解させ、洗浄液を調製した。これを用いて、実施例８と同様のタンパク質洗浄試験を行った。その結果、洗浄液調製直後では、透明なレンズが得られ、実施例１〜７で調製した洗浄保存液と同等の洗浄効果が得られたが、６か月間室温で放置した後、同様の評価を行ったところ、レンズは白濁しており、洗浄効果がないことが判った。
【００３７】
【比較例２】
酵素として、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）の代わりに、商品名「アクチナーゼ」（科研製薬（株）社製）を用いた以外は、比較例１と同様にして洗浄保存液を調製して試験した。その結果、洗浄保存液調製直後では優れた洗浄効果が確認できたが、６か月後では洗浄効果はなかった。
【００３８】
【比較例３】
酵素として、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）の代わりに、商品名「プロテアーゼアマノ」（天野製薬（株）社製）を用いた以外は、比較例１と同様にして洗浄保存液を調製して試験した。その結果、洗浄保存液調製直後では優れた洗浄効果が確認できたが、６か月後では洗浄効果はなかった。
【００３９】
【実施例９】
実施例１〜３で得られた洗浄保存液の４０℃での経時安定性を、商品名「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業（株）製）の基質であるカゼインの水解活性測定により評価した。すなわち、まずカゼイン（Ｈａｍｍａｒｓｔｅｎ社製）１．２ｇに、５０ｍＭリン酸水素二ナトリウム水溶液１６０ｍｌを加え、加熱して完全に溶解させ、希塩酸でｐＨを７．５に調整した後、精製水を加えてカゼイン含有溶液２００ｍｌを調製した。このカゼイン含有溶液３０ｍｌを試験管にとり、３７℃に保温した状態で実施例１〜３で得られた各洗浄保存液０．６ｍｌを加えた。続いて３７℃で２０分間加温した後、タンパク質沈殿試薬（トリクロロ酢酸１８．０ｇ、酢酸ナトリウム１８．０ｇ、酢酸１９．０ｍｌを精製水に溶解して１リットルとしたもの）３．０ｍｌを加えて酵素反応を停止させ、これを濾過した。この濾液０．８ｍｌを試験管にとり、０．５５Ｍ炭酸ナトリウム水溶液２．０ｍｌと、Ｆｏｌｉｎ試薬０．４ｍｌを加えて３７℃で３０分間加温して発色させ、６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。調製直後の洗浄液の吸光度に対する所定時間経過後の洗浄液の吸光度の比率を酵素活性残存率として表１に示す。
【００４０】
【比較例４】
比較例１で得られた洗浄液について、実施例９と同様に経時安定性を評価した。結果を表１に示す。
【００４１】
表１から、比較例４では１週間後には酵素活性の完全な失活が見られるのに対し、本発明による洗浄保存液は、４週間後においてもコンタクトレンズの洗浄に有効な酵素活性残存率を有していることが判った。
【００４２】
【表１】

[0001]
[Industrial applications]
The present invention relates to a contact lens washing and preserving solution that is effective for removing contaminants such as proteins, lipids, mucins, and polysaccharides attached to contact lenses.
[0002]
[Prior art]
When a contact lens is used for a long period of time, problems such as fogging of the contact lens and a reduced feeling of wearing occur due to strong deposition of proteins, lipids, polysaccharides, inorganic substances, and the like. Therefore, in order to clean these contaminants, a protein removing agent using a surfactant, an enzyme, an abrasive or the like is generally used. Also, in consideration of eye safety, it is necessary to carry out such contact lens care every day, and recently, in order to facilitate the care of the contact lens, it has excellent portability and safety. There is a need for a washing and preserving solution that can be easily and efficiently washed, and that can simultaneously preserve contact lenses. The use of an enzyme as a cleaning agent for such a contact lens is generally well used because it is highly safe and the cleaning operation is simple. For example, JP-A-6-102474 discloses a detergent in which a proteolytic enzyme, a lipolytic enzyme, a polysaccharide degrading enzyme, and the like are formed on a tablet. JP-A-6-095043 discloses a detergent comprising glycerol and serine protease, an anionic surfactant and the like. Further, Japanese Patent Publication No. 5-33768 discloses a cleaning method characterized by rubbing a lens with a cleaning agent obtained by dispersing a proteolytic enzyme in polyethylene glycol.
[0003]
However, since most of these cleaning agents are tablets, a separate container for dissolving them is required, which is not convenient, and the tablets are bulky and easily broken, resulting in poor portability and portability. There are points. On the other hand, a detergent in which the dosage form is not a tablet but an aqueous solution has a problem that the long-term stability of the enzyme is poor and the washing effect is reduced with time.
[0004]
Japanese Patent Application Laid-Open No. 1-153088 proposes that an enzyme modified with a copolymer of maleic anhydride and polyethylene glycol monoallyl ether has high activity and stability. It is described that this enzyme can be used as a bioreactor or the like.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a cleaning and preserving solution for contact lenses that maintains a cleaning effect for a long time, is excellent in portability, portability, and the like, and is easy to handle.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
According to the present invention, there is provided a cleaning and preserving solution for contact lenses, comprising an enzyme modified with a protein modifying agent represented by the following general formula (hereinafter referred to as protein modifying agent A).
[0007]
Embedded image

[0008]
Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
The cleaning stock solution for contact lenses of the present invention contains an enzyme modified with the protein modifier A represented by the general formula (2).
[0009]
In the protein modifier A, n is a positive number of 1 to 1000, preferably 10 to 300, and more preferably 20 to 120. When n exceeds 1,000, production is difficult. The polymerization degree of the protein modifier A is 1 to 1000, preferably 2 to 500 as shown by m in the formula. If the degree of polymerization exceeds 1,000, production is difficult. The molecular weight of the protein modifier A is preferably 500 to 1,000,000, preferably 1,000 to 100,000, more preferably 5,000 to 50,000.
[0010]
In the protein modifier A, OA is an oxyalkylene group having 2 to 4 carbon atoms, and specifically, for example, oxyethylene group, oxypropylene group, oxytrimethylene group, oxy-1-ethylethylene group, oxy- Examples thereof include a 1,2-dimethylethylene group and an oxytetramethylene group. In this case, when n of (OA) n is 2 or more, each OA may be the same or different. When n is 2 or more and has a different group as OA, the bond of (OA) n may be either random or block. (OA) n when imparting hydrophilicity to the protein modifier A is preferably composed of an oxyethylene group unit alone, and particularly preferably n is 5 or more. In order to impart hydrophilicity when (OA) n is composed of different types of OA, an oxyethylene group is preferably present in (OA) n in an amount of at least 20 mol%, more preferably at least 50 mol%. It is desirable to make it. On the other hand, when imparting lipophilicity to the protein modifier A, the number of moles of oxyalkylene groups other than oxyethylene groups in (OA) n may be increased.
[0011]
Wherein the protein modification agent _{^{_{A, -CH 2 -CR 1 (CH}}} 2 (OA) nOR 2) - Specific compounds constituting the may include, for example compounds represented by the following structural formula. _{_{_{CH 2 = CHCH 2 (OCH 2}}} CH 2) nOH, CH 2 = CHCH 2 (OCH 2 CH 2) nOCH 3
CH ₂ ＣＨCHCH ₂ [(OCH ₂ CH ₂ ) n ¹ (OCH (CH ₃ ) CH ₂ n ² ] OC ₃ H ₇ ,
_{_{_{CH 2 = CHCH 2 [(OCH}}} 2 CH 2) n 1 (OCH (CH 3) CH 2 n 2] OC 3 H 7
_{_{_{CH 2 = CHCH 2 [(OCH}}} 2 CH 2) n 1 (OCH 2 CH 2 CH 2 CH 2 n 2] OC 12 H 25
CH ₂ ＣC (CH ₃ ) CH ₂ (OCH ₂ CH ₂ ) nOH (where [] represents a random or block copolymer, and n = 1 to 1000, and n ¹ + n ² = 1 to 1000).
[0012]
In order to prepare the protein modifier A, for example, α-allyl-ω-methoxy-polyoxyalkylene and maleic anhydride are preferably charged as raw material components, preferably in a molar ratio of 1: 1 to 1.5, without solvent or It can be obtained by polymerizing using a polymerization initiator in the presence of an organic solvent such as toluene, benzene, chloroform, carbon tetrachloride and the like. Examples of the compound forming a polyoxyalkylene corresponding to (OA) n in the raw material component include ethylene oxide, propylene oxide, oxetane, 1-butene oxide, 2-butene oxide, and tetrahydrofuran. Examples of the polymerization initiator include benzoyl peroxide, diisopropyloxydicarbonate, tert-butyl peroxy-2-ethylhexanoate, tert-butyl peroxypivalate, tert-butyl peroxydiisobutyrate, lauroyl peroxide, and tertiary Organic peroxides such as butyl peroxyacetate, tertiary peroxy octoate, and tertiary butyl peroxy benzoate, and azo compounds such as azobisisobutyronitrile can be used. The amount of the polymerization initiator to be added is preferably 5% by weight or less, more preferably 1% by weight or less, based on the total amount of the raw material components. The polymerization can be carried out preferably at 0 to 150 ° C, more preferably at 30 to 100 ° C, preferably for 1 to 200 hours, more preferably for 6 to 24 hours. After the polymerization, the solvent in the obtained copolymer is distilled off, and the target protein modifier A can be obtained as it is or by reprecipitation, gel filtration, purification treatment such as ion exchange resin treatment, or the like.
[0013]
In the present invention, an enzyme modified with the protein modifying agent A is used as an essential component. Examples of the enzyme include a protease, a lipolytic enzyme, and a glycolytic enzyme. In this case, these enzymes may be of any origin such as plant origin, microorganism origin, animal origin, and the like. Examples of the proteolytic enzymes include papain or promelain derived from plants; actinomycetes Streptomyces derived from microorganisms, trade name "Actinase" (manufactured by Kaken Pharmaceutical Co., Ltd.), trade name "Bioprase" (Nagase Biochemical Co., Ltd.) )), Product name "Protease Amano" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.); product name derived from animal-derived pig pancreas "pancreatic digestive enzyme TA" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) Pancreatin and the like can be mentioned. Examples of the lipolytic enzyme include, for example, lipase <Saiken> (trade name, manufactured by Nagase Sangyo Co., Ltd.), biobrase 3LAP (trade name, manufactured by Nagase Sangyo Co., Ltd.), biobrase ASP (trade name, manufactured by Nagase Sangyo Co., Ltd. ). Further, as the glycolytic enzyme, for example, α-amylase such as Biotex LS, Biotex PN-2, spinase PN-4, biotamylase, biotamylase S, biotamylase A-1000, biotamylase clean W, or maltozyme 206; β-amylase such as β-amylase # 1500.
[0014]
The modification of the enzyme with the protein modifier A can be easily carried out, for example, by a method in which the protein modifier A and the enzyme are mixed and stirred in a solvent and reacted. The charge ratio during the reaction between the enzyme and the protein modifier A is not particularly limited, but is preferably 1: 0.1 to 100, particularly preferably 1: 0.5 to 30, and more preferably 1: 1 by weight. 1 to 5. Examples of the solvent include physiological saline; buffers having a pH of preferably 2 to 11, more preferably 6 to 10 such as a phosphate buffer, a carbonate buffer, a Tris buffer, and an acetate buffer; acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane, and the like. Examples thereof include organic solvents such as dimethylformamide, dimethylacetamide, dimethylsulfoxide, ethanol, and methanol, and mixtures thereof. The reaction temperature is preferably from -10 to 100C, more preferably from 0 to 50C. Further, the reaction time is preferably 10 minutes to 30 hours, more preferably 30 minutes to 24 hours. The enzyme modified with the protein modifier A obtained after the reaction can be purified by a method such as gel filtration, ultrafiltration, or dialysis.
[0015]
The cleaning preservation solution for contact lenses of the present invention is obtained by dissolving the enzyme modified with the protein modifying agent A, if necessary, in combination with other components having a cleaning or preserving action, for example, in a buffer or the like. Can be obtained by At this time, the content of the enzyme modified with the protein modifier A is preferably in the range of 0.01 to 30% by weight. When the content is less than 0.01% by weight, the effect of washing and preserving is insufficient, and when the content is more than 30% by weight, the workability is undesirably reduced. The protein modifier A can be distributed in the form of a wax having a content of 50% by weight or more, preferably 100% by weight. It is preferable to dilute to an amount.
[0016]
Examples of the buffer include a buffer having a pH of preferably 2 to 11, more preferably a pH of 4 to 8, such as a physiological saline, a phosphate buffer, a carbonate buffer, a Tris buffer, and an acetate buffer. Further, as the other component, for example, a thickener, a surfactant, a preservative and the like can be preferably mentioned.
[0017]
Examples of the thickener include ethylene glycol, propylene glycol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene glycol-polypropylene glycol copolymer, polyvinyl alcohol having a saponification ratio of 50% or more, polyvinyl pyrrolidone, hydroxyethyl cellulose, hyaluronic acid, poly ( Examples thereof include alkali metal (meth) acrylate, sodium salt of polyvinyl sulfonic acid, and a mixture thereof. The content ratio is preferably in the range of 1 to 50% by weight.
[0018]
Examples of the surfactant include anionic surfactants such as fatty acid soda soap, sodium alkyl sulfate, sodium dialkyl sulfosuccinate and sodium dodecylbenzene sulfonate; octadecylamine acetate, octadecyl ammonium chloride, and alkyldimethylbenzyl ammonium chloride. Cationic surfactants such as polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene alkyl phenyl ether, polyoxyethylene monoalkylate, sorbitan monoalkylate, polyethylene monoalkylate, (poly) oxyethylene alkylamine, and alkylalkylol Nonionic surfactants such as amides, glycerol monostearate, and polyglycerol fatty acid esters; Zwitterionic surfactants such as Kirugurishin and can mixtures thereof and the like. The content ratio is preferably in the range of 0.01 to 10% by weight.
[0019]
Examples of the preservative include sorbic acid, sodium sorbate, potassium sorbate, benzoic acid, sodium benzoate, methyl paraoxybenzoate, salicylic acid, and sodium salicylate.
[0020]
In addition to these, a pH adjuster (pH buffer), a metal chelating agent, an oxidation stabilizer, a fragrance, a storage stabilizer, and the like can also be added as appropriate. Further, when papain or promelain is used as the enzyme component of the enzyme modified with the protein modifying agent A, for example, cysteine, curtathione thiourea or the like is added as a reducing agent in order to enhance the washing effect thereof. You can also.
[0021]
The method for using the contact lens cleaning preservation solution according to the present invention includes a method in which the contact preservation solution is washed or preserved by diluting the contact lens as it is or after further diluting it with physiological saline, purified water or the like to an appropriate amount. Can be used. When used as a cleaning solution, the immersion time can be at room temperature, preferably at least 30 minutes, particularly preferably 1 to 12 hours. At this time, besides allowing the mixture to stand still at room temperature, the mixture may be preferably heated to 30 to 60 ° C., or may be irradiated with ultrasonic waves. When used as a preservative solution, it may be immersed at room temperature for an arbitrary time and then washed with purified water, physiological saline, tap water, distilled water, or the like.
[0022]
【The invention's effect】
Since the cleaning preservation solution for contact lenses of the present invention contains the enzyme modified with the protein modifier A, it retains high enzyme activity for a long time and is excellent in removing contaminants, portability, portability, and the like. And it is easy to handle.
[0023]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Comparative Examples, but the present invention is not limited thereto.
[0024]
[Synthesis Example 1]
In 100 ml of toluene, 150 g (100 mmol) of α-allyl-ω-methoxy-polyoxyethylene having a molecular weight of 1500, 10.3 g (105 mmol) of maleic anhydride, and 0.48 g (2 mmol) of benzoyl peroxide were dissolved. After polymerization for 6 hours, toluene and residual maleic anhydride were distilled off at 100 ° C. under reduced pressure to obtain a white waxy protein modifier. The molecular weight was measured by gel permeation chromatography (GPC, developing solvent; THF (tetrahydrofuran), standard sample; PEG (polyethylene glycol)), and as a result, was 15,000.
[0025]
[Synthesis Example 2]
A protein was prepared in the same manner as in Synthesis Example 1 except that 300 g (100 mmol) of α-allyl-ω-methoxy-polyoxyethylene having a molecular weight of 3000 was used instead of α-allyl-ω-methoxy-polyoxyethylene having a molecular weight of 1500. The modifier was obtained. The molecular weight of the obtained protein modifier was about 31,000.
[0026]
[Synthesis Example 2]
A protein was prepared in the same manner as in Synthesis Example 1 except that 150 g (100 mmol) of α-allyl-ω-hydroxy-polyoxyethylene having a molecular weight of 1500 was used instead of α-allyl-ω-methoxy-polyoxyethylene having a molecular weight of 1500. The modifier was obtained. The molecular weight of the obtained protein modifier was about 15,000.
[0027]
Embodiment 1
As a proteolytic enzyme, 5 g of trade name "Bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Co., Ltd.) is dissolved in 50 ml of borate buffer at pH = 8.6, and the protein modification obtained in Synthesis Example 1 is maintained at 5 ° C. After slowly adding 5 g of the agent over 30 minutes, the mixture was stirred for 1 hour while maintaining the temperature at 5 ° C. After the completion of the reaction, the pH was adjusted to 7 with a 0.1 N aqueous sodium hydroxide solution, and 0.1 g of methyl parahydroxybenzoate was further added as a preservative to prepare a washing stock solution.
[0028]
Embodiment 2
A washing stock solution was prepared in the same manner as in Example 1 except that the amount of the protein modifier used was changed to 10 g.
[0029]
Embodiment 3
A washing stock solution was prepared in the same manner as in Example 1 except that the amount of the protein modifier used was changed to 2.5 g.
[0030]
Embodiment 4
A washing preservation solution was prepared in the same manner as in Example 1 except that 10 g of the protein modifier synthesized in Synthesis Example 2 was used as the protein modifier.
[0031]
Embodiment 5
A washing stock solution was prepared in the same manner as in Example 1 except that 5 g of the protein modifying agent synthesized in Synthesis Example 3 was used as the protein modifying agent.
[0032]
Embodiment 6
Washing was carried out in the same manner as in Example 1, except that "Actinase" (manufactured by Kaken Pharmaceutical Co., Ltd.) was used instead of "Bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Corporation) as an enzyme. A stock solution was prepared.
[0033]
Embodiment 7
The same procedure as in Example 1 was carried out except that "Protease Amano" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) was used instead of "Bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Corporation) as an enzyme. A wash stock solution was prepared.
[0034]
Embodiment 8
0.129 g of lysozyme, 0.394 g of albumin, 0.275 g of γ-globulin, 0.08 g of sodium monophosphate, 0.022 g of calcium chloride dihydrate, 0.3 ml of 1N sodium hydroxide and 100 ml of distilled water were mixed. To prepare artificial tears.
Next, an oxygen-permeable contact lens (trade name “Menicon EX” manufactured by Menicon Co., Ltd.) was boiled in the artificial tear for 15 minutes, and then washed with physiological saline. This operation was repeated three times to obtain an artificially soiled lens. When the artificial soiled lens was used with a dark-field stereomicroscope, the entire lens was observed to be cloudy.
[0035]
Therefore, the artificially soiled lenses were separately immersed in each of the cleaning storage solutions obtained in Examples 1 to 7 at room temperature for 6 hours, rinsed with distilled water, and observed with a dark-field stereomicroscope. All became transparent, and an excellent cleaning effect was confirmed. After the preparation in Examples 1 to 7, the same evaluation was performed using a cleaning preservation solution for which 6 months had elapsed. As a result, all transparent lenses were obtained. Therefore, it was found that the cleaning preservation solution maintained the cleaning effect for 6 months.
[0036]
[Comparative Example 1]
5 g of trade name "Bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Corporation) was dissolved in 50 ml of a borate buffer having a pH of 7.4 to prepare a washing solution. Using this, the same protein washing test as in Example 8 was performed. As a result, immediately after the preparation of the cleaning solution, a transparent lens was obtained, and a cleaning effect equivalent to that of the cleaning preservation solutions prepared in Examples 1 to 7 was obtained. However, after leaving at room temperature for 6 months, the same evaluation was performed. When the test was performed, it was found that the lens was cloudy and there was no cleaning effect.
[0037]
[Comparative Example 2]
Washing was carried out in the same manner as in Comparative Example 1, except that the trade name "actinase" (manufactured by Kaken Pharmaceutical Co., Ltd.) was used instead of the trade name "bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Corporation). Stock solutions were prepared and tested. As a result, an excellent cleaning effect was confirmed immediately after the preparation of the cleaning stock solution, but no cleaning effect was obtained after 6 months.
[0038]
[Comparative Example 3]
In the same manner as in Comparative Example 1 except that the trade name "Protease Amano" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) was used instead of the trade name "Bioprase" (manufactured by Nagase Seikagaku Corporation) as the enzyme. Wash stock solutions were prepared and tested. As a result, an excellent cleaning effect was confirmed immediately after the preparation of the cleaning stock solution, but no cleaning effect was obtained after 6 months.
[0039]
Embodiment 9
The stability over time of the washed stock solutions obtained in Examples 1 to 3 at 40 ° C. was evaluated by measuring the hydrolytic activity of casein, a substrate of “Bioprase” (trade name, manufactured by Nagase Seikagaku Corporation). That is, first, 160 ml of a 50 mM disodium hydrogen phosphate aqueous solution was added to 1.2 g of casein (manufactured by Hammarsten), completely dissolved by heating, and the pH was adjusted to 7.5 with dilute hydrochloric acid, and then purified water was added. 200 ml of a casein-containing solution was prepared. 30 ml of this casein-containing solution was placed in a test tube, and 0.6 ml of each of the washing stock solutions obtained in Examples 1 to 3 was added while keeping the temperature at 37 ° C. Subsequently, after heating at 37 ° C. for 20 minutes, 3.0 ml of a protein precipitation reagent (18.0 g of trichloroacetic acid, 18.0 g of sodium acetate, and 19.0 ml of acetic acid dissolved in purified water to make 1 liter) was added. To stop the enzymatic reaction, which was filtered. 0.8 ml of the filtrate was placed in a test tube, and 2.0 ml of a 0.55 M sodium carbonate aqueous solution and 0.4 ml of a Folin reagent were added. The mixture was heated at 37 ° C. for 30 minutes to develop a color, and the absorbance at 660 nm was measured. Table 1 shows the ratio of the absorbance of the washing solution after a lapse of a predetermined time to the absorbance of the washing solution immediately after preparation as the enzyme activity residual ratio.
[0040]
[Comparative Example 4]
The aging stability of the cleaning solution obtained in Comparative Example 1 was evaluated in the same manner as in Example 9. Table 1 shows the results.
[0041]
From Table 1, it can be seen that the enzyme activity was completely inactivated after one week in Comparative Example 4, whereas the cleaning preservation solution according to the present invention remained effective for cleaning contact lenses even after 4 weeks. It was found to have.
[0042]
[Table 1]

Claims

A cleaning preservative solution for contact lenses, comprising an enzyme modified with a protein modifier represented by the following general formula 1.