JP2024521709A - ミトコンドリア関連障害の治療方法 - Google Patents

Abstract

本明細書において開示されるのは、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする対象に投与することを含む治療方法である。５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールは、肥満、糖尿病、高血圧症、心血管疾患及び肝疾患を含む、ミトコンドリア関連障害または症状の治療に有用である。【選択図】図１

Description

本開示は、有害事象または過量投与の臨床的に重大な危険を引き起こすことなく、心血管疾患及びミトコンドリア関連障害または症状を治療するための方法に関する。

心血管疾患とは、冠動脈疾患、心臓発作、脳卒中、心不全、高血圧性心疾患及びリウマチ性心疾患など、心臓及び血管に関わる疾患の一種である。米国では６５０万人以上が心不全を患っている（Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ，Ａｐｒｉｌ ６，２０１７）。拡張期心不全としても知られる駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）は、米国における６５０万の心不全事例のほぼ２分の１を引き起こしている。ＨＦｐＥＦは、能動的心室弛緩及び受動的心室コンプライアンスの異常から生じ、一回拍出量及び心拍出量の低下をもたらす（Ａｍ Ｆａｍ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ．２０１７ Ｎｏｖ １；９６（９）：５８２－５８８）。収縮期心不全としても知られる駆出率が低下した心不全（ＨＦｒＥＦ）では、心筋が十分に収縮できず、体内に排出される酸素を多く含む血液が少なくなる。死亡率はＨＦｐＥＦ患者とＨＦｒＥＦ患者で同程度であった（Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ，Ａｐｒｉｌ ６，２０１７）。駆出率が軽度低下した心不全（ＨＦｍｒＥＦ）は、ＨＦｐＥＦとＨＦｒＥＦの中間に位置する新しいカテゴリーの心不全である。ＨＦｍｒＥＦの有病率は心不全患者の１０～２０％である（Ｍａｅｄｉｃａ（Ｂｕｃｕｒ），２０１６，１１（４）：３２０－３２４）。したがって、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、及びＨＦｍｒＥＦを含む心不全の効果的な治療が非常に必要とされている。

ミトコンドリアは、糖と脂肪を燃焼させることによって、個々の細胞の代謝を制御している。ミトコンドリア脱共役は、身体が熱を発生させるために利用する堅牢かつ自然なプロセスである。熱は、呼吸（複合体Ｉ～ＩＶ）とＡＴＰリン酸化（複合体Ｖ）の脱共役を介して、ミトコンドリアで生成される。実際、消費カロリーの２０～４０％が体熱の発生に使われている。ミトコンドリア関連障害または症状は、ミトコンドリアが身体を適切に機能させるのに十分なエネルギーを産生できなくなることで発生し、脳、脂肪組織、神経、筋肉、心臓、肺、肝臓、腎臓、膵臓、眼、及び耳などの細胞を含む身体のほとんどすべての部分に影響を及ぼす。

脂肪沈着を減少させる手段として、ミトコンドリアのための化学的脱共役剤を投与することは、長年にわたる科学的目標であった。ミトコンドリア酸化的リン酸化を脱共役させる低分子はいくつかあるが、最もよく知られているのは２，４－ジニトロフェノール（ＤＮＰ）である。ＤＮＰは強力な効果で脱共役させることが知られているが、残念ながら、許容できないほど高い確率で重大な副作用を伴う（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２０１１ Ｓｅｐ；７（３）：２０５－２１２）。これらの副作用には、高体温、頻脈、発汗及び頻呼吸があり、最終的には死に至る。小さく、高浸透性で、親油性の酸であるＤＮＰは、胃で急速に吸収される。高濃度が急速に分布して直ちに脱共役し、短時間で高レベルの熱を生成する。したがって、ＤＮＰは小さな治療指数を有し、過剰摂取すると非常に危険である。ＤＮＰは、１９３８年の米国Ｆｅｄｅｒａｌ Ｆｏｏｄ，Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ａｃｔによって「極めて危険であり、人間の消費には適さない」とされた。それに応じて、ミトコンドリア関連障害または症状を安全に治療できる脱共役剤が必要とされている。

５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールは新規な低分子脱共役剤（化合物１）である。これは制御された代謝促進剤（ＣＭＡ）として働く。ＣＭＡは、代謝性疾患の根本原因である体内の脂肪及び糖の蓄積に効果的に対処するように設計されている。ＣＭＡは、細胞の代謝を改善し、エネルギー消費及びカロリー消費を増加させ、脂肪の蓄積を抑える働きをする。新しい制御された的を絞った方法により、化合物１はミトコンドリアのプロトンリークを増加させることができる。ミトコンドリアのプロトンリークは、エネルギーを散逸させる体内で進行中のプロセスであり、１日のカロリーの２０％～４０％を占める。化合物１は、ミトコンドリア脱共役機構を利用して、基質の利用を増加させる。
化合物１は非臨床モデルで研究されてきた。関連性のあるげっ歯類の疾患モデルにおいて強力な治療活性が示されたことは、薬物動態学及び安全性プロファイルと共に、化合物１が幅広いミトコンドリア関連疾患の治療に有益かつ安全に使用し得ることを裏付けている。また、化合物１が心血管疾患の治療に有効である可能性も見出された。

Ａｍ Ｆａｍ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ．２０１７ Ｎｏｖ １；９６（９）：５８２－５８８ Ｍａｅｄｉｃａ（Ｂｕｃｕｒ），２０１６，１１（４）：３２０－３２４ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２０１１ Ｓｅｐ；７（３）：２０５－２１２

いくつかの実施形態において、本開示は、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む、対象における心血管疾患を治療する方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む、心不全を治療する方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、心血管疾患による症状に罹患している対象における心血管リスクまたは死亡率を低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全、心臓発作、冠動脈疾患及び冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）から構成される群から選択される。

本明細書で使用される心不全には、駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）、または駆出率が低下した心不全（ＨＦｒＥＦ）、もしくは駆出率が軽度低下した心不全（ＨＦｍｒＥＦ）が含まれる。

いくつかの実施形態では、心血管疾患はＨＦｐＥＦである。

いくつかの実施形態では、心血管疾患はＨＦｒＥＦである。

いくつかの実施形態では、心血管疾患はＨＦｍｒＥＦである。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が低下した心不全（ＨＦｒＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が軽度低下した心不全（ＨＦｍｒＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、息切れ、労作時の息切れ、心臓のエネルギー障害、めまい、疲労、呼吸困難、動悸（心房細動）、胸部不快感、浮腫、失神及び日常生活活動の制限のうち、少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、日常生活活動の制限は、身の回りの世話、移動及び食事に関する困難である。

いくつかの実施形態において、対象は、運動耐性の低下、疲労、倦怠感、運動後の回復時間の増加、及び足首の腫れから選択される症状を患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、冠動脈疾患、高血圧症及び心雑音のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における血圧を低下させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、心血管疾患、高血圧症、抵抗性高血圧症、及び重度の高血圧症のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全（ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、またはＨＦｍｒＥＦであり得る）、心臓発作、冠動脈疾患、または冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）である。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｐＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｒＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｍｒＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下を経験する。

いくつかの実施形態において、本方法は、心血管疾患を発症するリスクを低減し、及び／またはＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、もしくはＨＦｍｒＥＦのリスクを低減する。

いくつかの実施形態において、本方法は、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、またはＨＦｍｒＥＦの進行を遅らせる。

いくつかの実施形態において、本方法は、
ｉ）ＤＮＰの半減期（ｔ_１／２）を延長すること；
ｉｉ）ＤＮＰの血漿中濃度が最大に達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）を遅らせること；
ｉｉｉ）ＤＮＰの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）を低下させること；及び、
ｉｖ）曲線下面積（ＡＵＣ）を増加させること
のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に、有意な全身毒性、副作用、有意な体温の上昇、または有意な心拍数の上昇を経験しない。

いくつかの実施形態において、本開示は、
ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、ＤＮＰ最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、ＤＮＰの平均半減期（ｔ_１／２）；
ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、ＤＮＰが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、ＤＮＰの無限大に外挿された曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）の中央値；及び、
ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
を、約３０ｍｇ～約１４００ｍｇの化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することにより達成することによって、心血管疾患を治療する方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を治療する際の毒性もしくは副作用を低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を治療する際の過剰投与を予防する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく、対象における代謝率または安静時エネルギー消費量を増加させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における代謝異常症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における重度の高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における肝脂肪を少なくとも５０％減少させる方法、または脂質を少なくとも１０％減少させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ運動失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、または肝細胞癌を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、
ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）の中央値；及び、
ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
のうち少なくとも１つを達成する方法を提供する。

イヌに化合物１及び２，４－ジニトロフェノールを投与した後の、２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度を示す。

Ａ及びＢは、化合物１投与後の２，４－ジニトロフェノールのＡＵＣを示す。

Ａ及びＢは、５００ｍｇの化合物１を経口投与した後の、食事状態別の化合物１の血漿中濃度を示す（線形及び半対数スケール）。

Ａ及びＢは、５００ｍｇの化合物１を経口投与した後の、食事状態別の２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度を示す（線形及び半対数スケール）。

全コホートの２，４－ジニトロフェノール曲線を示す。

ＭＡＤのＱＤ投与期間中の、ＭＡＤコホートの体温を示す。

ＭＡＤのＱＤ投与期間中の、ＭＡＤコホートの安静時エネルギー消費量（ＲＥＥ）を示す。

化合物１投与後の体重減少を示す。

化合物１投与後の平均グルコースレベルの減少を示す。

化合物１投与後の収縮期血圧の変化を示す。

化合物１投与後の拡張期血圧の変化を示す。

化合物１投与後に観察された心拍数を示す。

化合物１投与後に観察された体温変化を示す。

化合物１投与後に観察されたＰＫの結果を示す。

化合物１投与後のＭＲＩ－プロトン密度脂肪画分（ＰＤＦＦ）の、ベースライン値からのプラセボ補正パーセント変化を示す。

ＦＡＳ集団における、６１日目のＭＲＩ－プロトン密度脂肪画分（ＰＤＦＦ）の、共分散のベースラインからの平均変化の分析を示す。

ＩｎＢｏｄｙ体重の反復測定分析における、ベースラインＦＡＳ集団からの平均の変化量を示す。

化合物１投与後の観察体重の変化を示す。

治療群ＦＡＳ集団別の腹部ＭＲＩ肝容積及び脂肪画分の、ベースライン値からのプラセボ補正パーセント変化を示す。

治療群ＦＡＳ集団別の腹部ＭＲＩ肝容積及び脂肪画分の、ベースライン値からのプラセボ補正パーセント変化を示す。

ＭＲＩで確認された脂肪減少（総脂肪組織）を示す。

観察された肝臓体積の変化を示す。

６１日目に観察された収縮期血圧のベースラインからの平均変化を示す。

６１日目に観察された拡張期血圧のベースラインからの平均変化を示す。

６１日目に観察された高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）のベースラインからの平均変化を示す。

定義
本発明のさまざまな実施形態及び態様を本明細書において示し、かつ説明するが、そのような実施形態及び態様が例としてのみ提供されることは当業者には明らかであろう。多数の変形、変更及び置換は、本発明から逸脱することなく当業者には想起されるであろう。本明細書に記載の本発明の実施形態に対する各種の代替が、本発明の実施において利用され得ることが理解されるべきである。

本明細書で使用される項目の見出しは、整理の目的のみのためのものであり、記載される主題を限定するものとして解釈されるものではない。特許、特許出願、論文、書籍、マニュアル及び論説を含むがこれらに限定されない、本出願において引用されるすべての文書または文書の一部は、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に明示的に組み込まれる。

５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールは新規な低分子脱共役剤であり、以下の構造を有する。

５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールは、ＷＯ２０１８／１２９２５８に記載される手順によって調製され得る。

本開示において、化合物１とＣＭ１は互いに置き換えできる。これらは両方とも、５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールを指す。

別段の定めがない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ ＯＦ ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ ＡＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＢＩＯＬＯＧＹ，２ｎｄ ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ １９９４）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ，Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ １９８９）を参照のこと。本明細書に記載されたものと類似または同等のいかなる方法、装置及び材料も、本発明の実施に使用することができる。以下の定義は、本明細書において頻繁に使用される特定の用語の理解を容易にするために提供されるものであり、本開示の範囲を限定するものではない。

用語「ａ」または「ａｎ」は、本明細書で使用される場合、１つまたは複数を意味する。

用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「有する」及びそれらの派生語は、包括的で制限のない用語として、本明細書では互換的に使用される。例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」または「有する」が使用されていることは、構成されている、持たれている、または含まれているどんな要素であれ、それは該動詞を含む節の主語に包含される唯一の要素ではないことを意味する。

本明細書で使用される場合、「約」という用語は、特定の値を含む値の範囲であって、当業者であれば特定の値と合理的に類似していると考える範囲を意味する。いくつかの実施形態において、「約」という用語は、当該技術分野において一般的に許容される測定結果を用いた標準偏差の範囲内を意味する。いくつかの実施形態において、「約」とは、特定の値の±１０％、±５％、または±２％に及ぶ範囲を意味する。いくつかの実施形態では、「約」は特定の値を意味する。

本明細書で使用される場合、「治療」、「治療する」、「和らげる」、「改善する」または「軽減する」は、互換的に使用される。これらの用語は、治療上の利益を含むがこれに限定されない、有益なまたは所望の結果を得るための方法を指す。治療上の利益とは、治療対象となる根本的な疾患の根絶または改善を意味する。また、治療上の利益は、対象が依然として基礎疾患に罹患している可能性があるにもかかわらず、対象において改善が観察されるような、基礎疾患に関連する１つ以上の生理学的症状の根絶または改善によって達成される。治療には、組成物の投与により疾患の臨床症状の発現を遅らせること；疾患の抑制、すなわち疾患の臨床症状の軽減を引き起こすこと；疾患の阻害、すなわち症状の最初の出現後に組成物の投与により臨床症状の発現を阻止すること；及び／または疾患の緩和、すなわち臨床症状の最初の出現後に組成物の投与によりそれらの後退を引き起こすこと、が含まれる。

「患者」、「対象」、または「それを必要とする対象」とは、本明細書に提供される方法を用いて治療することができる疾患または症状に罹患しているか、または罹患しやすい生体を指す。この用語は、対象が特定の疾患と診断されていることを必ずしも示すものではないが、典型的には、医学的管理下にある個体を指す。非限定的な例としては、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、ネコ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ、シカ、及び他の非哺乳動物が挙げられる。いくつかの実施形態において、患者、対象、またはそれを必要とする対象はヒトである。

本明細書で使用される場合、開示される化合物の「投与」は、本明細書に記載されるような化合物、またはそのプロドラッグもしくは他の薬学的に許容される誘導体を、例えば本明細書に記載されるような任意の適切な製剤または投与経路を用いて、対象に送達することを包含する。

「薬学的に許容される」とは、動物用またはヒト用の医薬用途に適した医薬組成物を調製するのに有用な化合物、塩、組成物、剤形及びその他の材料を指す。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」とは、無機酸、無機塩基、有機酸、無機塩基、それらの溶媒和物、水和物及び包接体を含む、薬学的に許容される無毒性の酸及び塩基から調製される投与化合物の塩を指す。適切な薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸または有機酸から調製され得る。無機酸の例としては、硫酸塩、硫酸水素塩、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸及びリン酸（リン酸水素及びリン酸二水素を含む）が挙げられる。適切な有機酸は、脂肪族、脂環式、芳香族、芳香族脂肪族、複素環式、カルボン酸及びスルホン酸類の有機酸から選択することができ、その例としては、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、４－ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、スルファニル酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、ステアリン酸、アルギン酸、β－ヒドロキシ酪酸、サリチル酸、ガラクタル酸及びガラクツロン酸が挙げられる。本発明の化合物の適切な薬学的に許容される塩基付加塩としては、例えば、アンモニウム塩及び、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩及び亜鉛塩などのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩及び遷移金属塩を含む金属塩が挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩にはまた、例えばＮ，Ｎ’－ジベンジルエチレン－ジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ－メチルグルカミン）、及びプロカインのような塩基性アミンから調製される有機塩も含まれる。これらの塩はすべて、例えば適切な酸または塩基を化合物と反応させることにより、対応する化合物から調製され得る。

「有効量」とは、記載された目的（例えば、投与目的の効果を達成する、疾患を治療する、酵素活性を低下させる、疾患または症状の１つ以上の症状を軽減する、細胞内のウイルス複製を低下させる）を達成するのに十分な量である。「有効量」の例としては、疾患の治療または症状（複数可）の軽減に寄与するのに十分な量が挙げられ、これは「治療有効量」とも呼ばれ得る。症状（複数可）の「軽減」（及びこの語句の文法的等価物）とは、症状（複数可）の重篤度または頻度の減少、または症状（複数可）の排除を意味する。有効性はまた、増加「倍率」または減少「倍率」として表現することもできる。例えば、治療上有効な量は、対照に対して少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、５倍、またはそれ以上の効果を有し得る。

本明細書で使用される場合、対象における「体温の有意な上昇」という用語は、病気、身体的不快感または痛み、昏睡及び死に限定されない、対象に対する有害な影響と関連している体温上昇を指す。非限定的な一実施形態において、体温の有意な上昇は、約０．５℃、約１℃、約１．５℃、約２℃、約２．５℃、約３℃、約３．５℃、約４℃、約４．５℃、約５℃、約５．５℃、約６℃またはそれ以上の上昇である。別の非限定的実施形態において、体温の有意な上昇は、約５分間、約１５分間、約３０分間、約４５分間、約１時間、約１．５時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１２時間、約１４時間、約１６時間、約１８時間、約２０時間、約２２時間、約２４時間またはそれ以上持続する。

本明細書で使用される場合、対象における「有意な全身毒性」という用語は、病気、身体的不快感または痛み、昏睡及び死に限定されない、対象への有害な影響と関連している全身毒性を指す。非限定的な一実施形態において、有意な全身毒性は、組成物を投与しない場合の対象における対応するレベルと比較して、肝酵素、血中尿素窒素またはクレアチニンのレベルの増加によって示される。

治療方法
いくつかの実施形態において、本開示は、対象における心血管疾患を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。初期の研究は、化合物１が、
・ 制御され改善された２，４－ジニトロフェノールのＰＫ－低Ｃ_ｍａｘ、高ＡＵＣ、少ないばらつき、
・ １日１回の経口投与の可能性、
・ 肝臓特異的な脱共役及び全身への影響の低減、
・ 幅広い治療指数
を達成し得ることを示唆する。したがって、化合物１は幅広い疾患を安全に治療するのに有用である。

いくつかの実施形態において、本開示は、心血管疾患による症状を患っている対象における心不全を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、心血管疾患による症状を患っている対象における心血管リスクまたは死亡率を低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、心血管疾患による症状は、息切れ、めまい、胸痛、失神、疲労、または日常生活活動の制限である。

いくつかの実施形態において、日常生活活動の制限は、身の回りの世話、移動、または食事に関する困難である。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における心血管疾患を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は肥満と関連している。いくつかの実施形態において、心血管疾患は、下記の疾患、障害または症状を含む。

運動不足の人の心拍数の増加を特徴とする心血管系の血行動態の乱れ、心房細動のリスクの増加、血液量の増加、心拍出量の増加、高血圧症及びインスリン抵抗性を有する人の全身血管抵抗性の増大、動脈圧の増加、左室壁応力の増加、肺動脈圧の増加、睡眠時無呼吸症候群を患う人の心室内圧の変化。

主要なアテローム硬化性危険因子（糖尿病、高血圧症、脂質異常症など）の促進によって間接的に、または心外膜脂肪組織の脂肪症性内分泌疾患及び免疫異常症によって直接的に増加し得る、アテローム性動脈硬化症及び心筋梗塞。

心外膜脂肪の蓄積、病原性パラクリン及び血管内分泌シグナル伝達、炎症性マクロファージの増加、Ｔリンパ球及び肥満細胞の増加、脂肪症性アディポカインの増加、及び血管保護アディポカインの減少。

心不全（ＨＦ）、特に駆出率が保持されたＨＦ（ＨＦｐＥＦ）。

アテローム硬化性心血管疾患（ＡＳＣＶＤ）、不整脈、心臓の脂肪浸潤、冠動脈カルシウムの増加。

低酸素症につながる可能性のある睡眠時無呼吸症候群、エピネフリン（アドレナリン）の増加は高血圧につながる場合がある、胸部圧力の変動は左右心室圧を上昇させる。

血栓症及び血栓塞栓症事象、脂肪組織の増加が骨盤及び下肢静脈を圧迫し、静脈還流を障害し、深部静脈血栓症を促進する。

心筋脂肪症、アポトーシス及び線維症、ならびに左心室リモデリング及び肥大、左心房肥大、右心室肥大、ならびに心膜及び血管周囲の脂肪組織の増加を特徴とする心臓細胞及び構造の異常。

睡眠時無呼吸による低酸素症、アテローム性動脈硬化症、血栓症、左室機能障害（拡張期及び収縮期の両方）、及び右室不全を特徴とする心機能の低下。

炎症誘発性アディポサイトカイン、例えば腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）のようなインターロイキン、単球遊走因子－１（ＭＣＰ－１）またはＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の増加、もしくは抗炎症性アディポサイトカイン（例えばアディポネクチン）及びＩＬ－１０の減少を特徴とする免疫異常症。

重度の喘息のような好中球の活性化及び肉芽形成の亢進、ならびにグルココルチコイド抵抗性の重度の喘息を特徴とする免疫異常症。

血圧上昇につながるレニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の活性化、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体発現の変化を特徴とする内分泌疾患。

高インスリン血症、全身のインスリン抵抗性及び脂肪症、心筋のインスリン不感受性を特徴とする内分泌疾患。

心肥大及び心不全の一因となる可能性があるレプチンレベルの上昇を伴うレプチン不感受性を特徴とする内分泌疾患。

末梢皮下脂肪組織におけるエネルギー貯蔵の制限を特徴とする脂肪毒性。

肝臓、筋肉、膵臓、腎臓及び／または内臓脂肪組織、心膜脂肪組織、及び血管周囲脂肪組織への遊離脂肪酸の過剰供給。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全、心臓発作、冠動脈疾患及び冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）である。

いくつかの実施形態において、心不全は、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、またはＨＦｍｒＥＦを含む。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に深刻な心血管事象のリスクの減少を経験する。

いくつかの実施形態において、深刻な心血管事象とは、死または疾患の悪化による入院である。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が低下した心不全（ＨＦｒＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における駆出率が軽度低下した心不全（ＨＦｍｒＥＦ）を治療するための方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、肥満、過剰体脂肪、糖尿病、高血圧（高血圧症）、脂質異常症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、またはメタボリックシンドロームを患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、息切れ、労作時の息切れ、心臓のエネルギー障害、めまい、疲労、呼吸困難、動悸（心房細動）、胸部不快感、浮腫、失神、及び日常生活活動の制限から選択される少なくとも１つの症状を患っている。

いくつかの実施形態において、日常生活活動の制限とは、身の回りの世話、移動及び食事に関する困難である。

いくつかの実施形態において、対象は、運動耐容能の低下、疲労、倦怠感、運動後の回復時間の増加、及び足首の腫れのうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、冠動脈疾患、高血圧症、及び心雑音のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、対象は投与後に心臓生体エネルギー欠乏の改善を経験し、ここで言う改善は５％超の体重減少、血圧の低下、生活の質の向上、運動耐容能の増加、及び／または深刻な心血管事象のリスクの低下を含み、ここで言う深刻な心血管事象は、死、疾患の悪化のための入院、及び心筋梗塞から構成される群から選択される。

いくつかの実施形態において、本方法は、治療有効量の化合物１の投与前後の運動中の対象におけるピーク酸素消費量（ＶＯ_２）、及び／またはＶＥ／ＣＯ_２もしくはＶＥ／ＶＣＯ_２の傾斜を評価することをさらに含む。ここで、投与後の対象におけるＶＯ_２の増加は、対象におけるＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、またはそれらの心血管疾患の１つ以上の症候性成分もしくは症状の程度の減少を示す。

いくつかの実施形態において、本方法は、投与後に対象のＶＯ_２を増加させる。

いくつかの実施形態において、本方法は、対象の運動耐容能を増加させる。

いくつかの実施形態において、本方法は、治療有効量の化合物１の投与前後に６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を評価することによって測定される対象の運動耐容能を増加させる。ここで、投与後の対象の６ＭＷＤの増加は、対象におけるＨＦｐＥＦ、またはその症候性成分もしくは症状のうち少なくとも１つの程度の減少を示す。

いくつかの実施形態において、本方法は、投与後の６ＭＷＤを増加させる。

いくつかの実施形態において、対象におけるＨＦｐＥＦは、心エコー検査（Ｅ／ｅ’）またはバイオマーカー（ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ）に照らして診断される。

いくつかの実施形態において、本方法は、投与前後に対象のＮＹＨＡ分類スコアを評価することをさらに含む。

ＮＹＨＡ機能分類は心不全症状の重症度を４つの機能分類の１つとして分類したものである。ＮＹＨＡ機能分類は、治療に対する反応を評価し、管理の指針となる重症度の標準的な記述を提供することから、臨床診療及び研究において広く用いられている。症状及び身体活動の重症度に基づくＮＹＨＡ機能分類は以下の通りである：
・ クラスＩ：身体活動の制限なし。通常の身体活動で過度の息苦しさ、疲労または動悸を感じない。
・ クラスＩＩ：身体活動に若干の制限。安静時は快適だが、通常の身体活動では過度の息苦しさ、疲労または動悸が生じる。
・ クラスＩＩＩ：身体活動の著しい制限。安静時は快適だが、通常に満たない身体活動が過度の息苦しさ、疲労または動悸をもたらす。
・ クラスＩＶ：不快感なしにはいかなる身体活動も行うことができない。安静時に症状が出ることもある。何らかの身体活動を行うと不快感が増す。

いくつかの実施形態において、本方法は、治療有効量の化合物１の投与前後に対象のＮＹＨＡ分類スコアを評価するステップをさらに含む。ここで、投与後のＮＹＨＡスコアの低下は、対象における疾患の程度の減少を示す。

いくつかの実施形態において、本方法は、投与後の対象のＮＹＨＡ分類スコアをクラスＩＩＩからクラスＩＩへ、またはクラスＩＩからクラスＩへ低下させる。

いくつかの実施形態において、本方法は対象の生活の質を高める。

いくつかの実施形態において、本方法は、例えばＫＣＣＱ（Ｋａｎｓａｓ Ｃｉｔｙ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ）、ＫＣＣＱ－１２、ＫＣＣＱ－Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ（ＫＣＣＱ－ＰＬＳ）、ＫＣＣＱ－Ｔｏｔａｌｌｙ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ（ＫＣＣＱ－ＴＳＳ）ＫＣＣＱ－Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｕｍｍａｒｙ Ｓｃｏｒｅ（ＫＣＣＱ－ＣＳＳ）、ＫＣＣＱ－Ｏｖｅｒａｌｌ Ｓｕｍｍａｒｙ Ｓｃｏｒｅ（ＫＣＣＱ－ＯＳＳ）または他の派生物のような、標準化されたアンケート調査によって評価される対象の生活の質を向上させる。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において血圧を低下させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、心血管疾患、高血圧症、抵抗性高血圧症、及び重篤な高血圧症のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患、及び冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）から構成される群から選択される。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｐＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｒＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＦｍｒＥＦと関連している高血圧症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、頭痛、息切れ、胸痛、鼻血、めまい、疲労、視力障害、不整脈、血尿、発汗、睡眠障害、及び眼の血斑から選択される症状のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、症状はＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦまたはＨＦｍｒＥＦと関連している。

いくつかの実施形態において、血圧を低下させることは、拡張期血圧を低下させること及び／または収縮期血圧を低下させることを含む。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下を経験する。

いくつかの実施形態において、本方法は、心血管疾患を発症するリスクを低減するか、ＨＦｐＥＦのリスクを低減するか、またはＨＦｐＥＦの進行を遅らせる。

いくつかの実施形態において、本方法は、心血管疾患を発症するリスクを低減するか、ＨＦｒＥＦのリスクを低減するか、またはＨＦｒＥＦの進行を遅らせる。

いくつかの実施形態において、本方法は、心血管疾患を発症するリスクを低減するか、ＨＦｍｒＥＦのリスクを低減するか、またはＨＦｍｒＥＦの進行を遅らせる。

いくつかの実施形態において、対象は投与前に絶食状態にある。

いくつかの実施形態において、対象は投与前に摂食状態にある。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後、体重、血圧、及び血糖のうち少なくとも１つの減少を経験する。

いくつかの実施形態において、対象は以下のうち少なくとも１つを経験する：
ｉ）少なくとも５％または少なくとも１０％の体重減少；
ｉｉ）少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下；
ｉｉｉ）少なくとも０．５％、または少なくとも１．５％のＨｂＡ_１ｃの減少；
ｉｖ）少なくとも１０％の脂質の減少；及び、
ｖ）少なくとも５０％の肝脂肪の減少。

いくつかの実施形態において、本方法は、
２，４－ジニトロフェノールの半減期（ｔ_１／２）を延長すること；
２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度が最大に達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）を遅らせること；
２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）を低下させること；及び、
曲線下面積（ＡＵＣ）を増加させること
のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期は、約２０～５０時間、２５～４０時間、または３０～４０時間に延長される。

いくつかの実施形態において、２，４－ジニトロフェノールのＴ_ｍａｘの中央値は、少なくとも６時間または少なくとも８時間に延長される。

いくつかの実施形態において、２，４－ジニトロフェノールのＴ_ｍａｘの中央値は、約６～８時間または約６～１０時間に延長される。

いくつかの実施形態において、２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘを低下させることは、投与後の対象において、約８０ｎｇ／ｍＬ～約８３００ｎｇ／ｍＬの２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘの定常状態を提供することを含む。

いくつかの実施形態において、本方法は、対象において約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に、有意な全身毒性、副作用、有意な体温の上昇、または有意な心拍数の上昇を経験しない。

いくつかの実施形態において、副作用は、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高熱症、頻脈、多汗症、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、本開示は、心血管疾患を治療する方法であって、約３０ｍｇ～約１４００ｍｇの化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、
ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）の中央値；及び、
ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
のうち少なくとも１つを達成する方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において、ミトコンドリア関連障害または症状を有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を治療する際の毒性または副作用を低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を治療する際の、２，４－ジニトロフェノールの毒性または副作用を低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状を治療する際の過剰投与を予防する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象におけるミトコンドリア関連障害または症状の治療における２，４－ジニトロフェノールの過剰投与を予防する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリア関連疾患は、肥満、過剰体脂肪、糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧、脂質異常症、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症、または肝疾患を含む。

いくつかの実施形態において、障害は、分岐鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）代謝障害、リソソーム貯蔵障害、グリコーゲン貯蔵障害である。

いくつかの実施形態において、糖尿病は２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む。

いくつかの実施形態において、肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、または肝細胞癌を含む。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリア関連障害は、心血管疾患、高血圧症、２型糖尿病、脂質異常症、肥満、または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を含む。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリアに関連する症状は、ＮＡＳＨにおける脂肪症、炎症、線維症、肝硬変、及び肝細胞傷害のうち少なくとも１つである。

いくつかの実施形態において、毒性、有害事象、副作用及び過剰投与は、ミトコンドリア脱共役剤と関連している。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリア脱共役剤は２，４－ジニトロフェノールである。

いくつかの実施形態において、本方法は、
ｉ）２，４－ジニトロフェノールの半減期（ｔ_１／２）を延長すること；
ｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度が最大に達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）を遅らせること；
ｉｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）を低下させること；及び、
ｉｖ）曲線下面積（ＡＵＣ）を増加させること
のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく代謝率を増加させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象の安静時エネルギー消費量を増加させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における代謝異常症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧症、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ運動失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、本方法は、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく安静時代謝率を増加させることを含む。

いくつかの実施形態において、安静時代謝率は少なくとも１０％増加する。

いくつかの実施形態において、安静時代謝率は少なくとも２０％増加する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に少なくとも１０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に少なくとも２０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に約３０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する。

いくつかの実施形態において、本方法は、アテローム性動脈硬化症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つの進行を遅らせる。

いくつかの実施形態において、本方法は、人体の自然なプロセスを促進し、心臓代謝プロセスを改善する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している中等度の高トリグリセリド血症；または心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している重度の高トリグリセリド血症を有する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象における重度の高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、対象は、５００ｍｇ／ｄＬを超えるトリグリセリド血中濃度を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している重度の高トリグリセリド血症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、治療抵抗性高トリグリセリド血症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、治療抵抗性の重度の高トリグリセリド血症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している治療抵抗性の重度の高トリグリセリド血症を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、腹痛、中腹部、胸部、または背部領域の痛み、胃腸痛、呼吸困難、食欲不振、吐き気、嘔吐、膵臓の炎症、記憶喪失、認知症、黄色板腫、角膜輪、及び黄色腫のうち少なくとも１つを患っている。

いくつかの実施形態において、対象は成人男性である。

いくつかの実施形態において、対象はヒスパニック系の子孫である。

いくつかの実施形態において、本方法は、低密度リポタンパク質コレステロールレベルを低下させること、及び／または非高密度リポタンパク質コレステロールレベルを低下させることを含む。

いくつかの実施形態において、本方法は、
ｉ）トリグリセリドレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること；
ｉｉ）低密度リポタンパク質コレステロールレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること；及び、
ｉｉｉ）非高密度リポタンパク質コレステロールレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること
のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において、肝脂肪を少なくとも５０％減少させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において、脂質を少なくとも１０％減少させる方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本開示は、対象において、がんを治療またはそのリスクを低減する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態において、がんは、胆道癌、膀胱癌、脳腫瘍（すなわち、髄膜腫）、乳癌（閉経後）、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜／子宮体癌、食道癌、胆嚢癌、頭頸部癌、腎臓（ｋｉｄｎｅｙ）／腎臓（ｒｅｎａｌ）癌、白血病、肝臓癌、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣癌、膵臓癌、胃癌及び甲状腺癌、ならびに前立腺癌を含む。

いくつかの実施形態において、がんは、肥満、過剰な体脂肪、糖尿病、高血圧、脂質異常症、代謝性疾患、肝臓疾患、及び／または心血管疾患と関連している。

いくつかの実施形態において、本開示は、肥満、がん、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ運動失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、または肝細胞癌を治療する方法であって、治療有効量の化合物１またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、
ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの半減期（ｔ_１／２）の中央値；
ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）の中央値；及び、
ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
のうち少なくとも１つを達成する方法を提供する。

いくつかの実施形態において、本方法は、投与前及び投与後の対象のＦｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制振過渡弾性撮像法（ＶＣＴＥ）、Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制御減衰パラメータ（ＣＡＰ）スコア、磁気共鳴画像法プロトン密度脂肪画分（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）、及び強化された肝線維症（ＥＬＦ）スコアを決定するステップをさらに含む。

いくつかの実施形態において、対象は、投与前に３００ｄＢ／ｍを超えるＣＡＰスコアを有する。

いくつかの実施形態において、対象は、投与前に、少なくとも８％のＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪を有する。

いくつかの実施形態において、対象は、高まった体格指数（ＢＭＩ）を有する。

いくつかの実施形態において、対象は約２８．０ｋｇ／ｍ^２から約４５．０ｋｇ／ｍ^２のＢＭＩを有する。

いくつかの実施形態において、糖尿病は２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である。

いくつかの実施形態において、心血管疾患は、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む。

いくつかの実施形態において、肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変または肝細胞癌を含む。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリアと関連している症状は、ＮＡＳＨにおける脂肪症、炎症、線維症、肝硬変、及び肝細胞傷害のうち少なくとも１つである

いくつかの実施形態において、対象は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、及び／または肝脂肪症を患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、２型糖尿病、肥満、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＮＡＦＬＤ、及び／またはＮＡＳＨを患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、肝臓の炎症、線維症、肝硬変を患っている。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後に、有意な全身毒性、重篤な副作用、有害事象の臨床的に有意なリスク、及び／または過剰投与を経験しない。

いくつかの実施形態において、毒性、有害事象及び副作用は、ミトコンドリア脱共役剤と関連している。

いくつかの実施形態において、ミトコンドリア脱共役剤は２，４－ジニトロフェノールである。

いくつかの実施形態において、対象は、２，４－ジニトロフェノールと関連している有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意な危険性を経験しない。これにより、治療を必要とする対象は、重篤な副作用及び過剰投与の危険性なしに安全に治療され得る。

いくつかの実施形態において、有害事象または副作用は、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高熱症、頻脈、多汗症、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、有害事象または副作用は、発熱、高熱症、頻脈、多汗症、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む。

いくつかの実施形態において、有害事象または副作用は、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水、及び異常な呼吸速度のうち少なくとも１つを特徴とする。

いくつかの実施形態において、有害事象または副作用は、心血管虚脱、心停止、及び／または死と関連している。

いくつかの実施形態において、有害事象または副作用は心停止と関連している。

いくつかの実施形態において、対象は体温の有意な上昇または心拍数の有意な上昇を経験しない。

いくつかの実施形態において、対象は、過剰投与が防止されるような化合物１の可飽和吸収を経験する。いくつかの実施形態では、高い単回用量において吸収の飽和がある。いくつかの実施形態では、化合物１の５００ｍｇ超、６００ｍｇ超、７００ｍｇ超、８００ｍｇ超、９００ｍｇ超、１０００ｍｇ超、１０５０ｍｇ超、１１００ｍｇ超、１２００ｍｇ超、１３００ｍｇ超、または１４００ｍｇ超の単回経口用量において、吸収の飽和がある。

いくつかの実施形態において、対象は、用量と毒性、有害事象、副作用、または過剰投与との間の相関を経験しない。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、
ｉ）２，４－ジニトロフェノールの半減期（ｔ_１／２）を延長すること；
ｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度が最大に達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）を遅らせること；
ｉｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）を低下させること；及び、
ｉｖ）曲線下面積（ＡＵＣ）を増加させること
のうち少なくとも１つによって防止される。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、化合物１の投与により、約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態を提供することにより防止される。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、化合物１の投与により、約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）を提供することにより防止される。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、化合物１の投与により、約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値を提供することにより防止される。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、化合物１の投与により、約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）を提供することにより防止される。

いくつかの実施形態において、有害事象、副作用、毒性、及び／または過剰投与の臨床的に有意なリスクは、化合物１の投与により、約１８のＡＵＣ／Ｃ _ｍａｘ比を提供することにより防止される。

いくつかの実施形態において、上記のさまざまな方法は、
ｉ）約１～６時間、約１～３時間、または約１～２時間の、化合物１が最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
ｉｉ）約１～３時間または約１～２時間の、化合物１の半減期（ｔ_１／２）の中央値；及び、
ｉｉｉ）約１８ｈ＊ｎｇ／ｍＬ～約３８０ｈ＊ｎｇ／ｍＬの、化合物１の無限大まで外挿した曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）の中央値
のうち少なくとも１つを提供することを含む。

いくつかの実施形態において、対象は、投与後、体重、血圧及び血糖のうち少なくとも１つの減少を経験する。

いくつかの実施形態において、対象は、
ｉ）少なくとも５％または１０％の体重減少；
ｉｉ）少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下；
ｉｉｉ）少なくとも０．５％、または少なくとも１．５％のＨｂＡ_１ｃの減少；
ｉｖ）少なくとも１０％の脂質の減少；
ｖ）少なくとも５０％の肝脂肪の減少；
ｖｉ）血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）の減少；及び、
ｖｉｉ）アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）の減少
のうち少なくとも１つを経験する。

化合物１
化合物１は、５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールを指す。

いくつかの実施形態において、化合物１は、１日当たり約３０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、５００ｍｇ、または１０５０ｍｇ投与される。

特定の実施形態において、治療有効量は、１日当たり約３０ｍｇ～約１４００ｍｇ、１日当たり約５０ｍｇ～約１００ｍｇ、１日当たり約１５０ｍｇ～約６００ｍｇ、または１日当たり２００ｍｇ～５５０ｍｇである。

特定の実施形態において、治療有効量は、１日当たり約１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇまたは６００ｍｇである。

特定の実施形態において、治療有効量は、１日当たり、約３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇまたは９５ｍｇである。

特定の実施形態において、治療有効量は、１日当たり約１５０ｍｇ、３００ｍｇまたは４５０ｍｇである。

いくつかの実施形態において、治療有効量は、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ及びＡＵＣを調整するように選択される。

医薬塩類
式Ｉで示される化合物は、そのままの形または塩として使用され得る。安定な非毒性の酸塩または塩基塩の形成が望まれる場合には、薬学的に許容される塩としての化合物の投与が適切である場合がある。

適切な薬学的に許容される塩としては、硫酸塩、硫酸水素塩、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、４－ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、スルファニル酸、ステアリン酸、アルギン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、サリチル酸、ガラクタル酸、β－ヒドロキシ酪酸及びガラクツロン酸を含む無機酸及び有機酸から調製される塩；または、アンモニウム塩及びカルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩ならびに亜鉛塩を含む金属塩から調製される塩を含む。

組成物／製剤
本開示の医薬品組成物は、当該技術分野で周知のプロセス、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠化、湿式粉砕、乳化、カプセル化、封入、凍結乾燥プロセスまたは噴霧乾燥によって製造され得る。

本開示に従って使用するための医薬品組成物は、活性化合物を薬学的に使用可能な製剤に加工することを容易にする賦形剤及び補助剤を含む、１つ以上の薬学的に許容される担体を用いて、従来の方法で製剤化され得る。適切な製剤化は、選択された投与経路に依存する。薬学的に許容される賦形剤及び担体は、当業者に一般に知られており、したがって、本開示に含まれる。このような賦形剤及び担体は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ” Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ（１９９１）に記載されている。

いくつかの実施形態において、医薬品組成物は、化合物１またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される賦形剤を含む。

いくつかの実施形態において、本開示の方法は、化合物１またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬品組成物を対象に投与することを含む。

医薬品の剤形
本開示には、化合物１またはその薬学的に許容される塩の新規な医薬剤形が含まれる。本明細書に記載の剤形は、対象への経口投与に適している。剤形は、経口投与に適したものであればどのような形態でもよく、カプセルまたは錠剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施形態において、本開示は、約３０ｍｇ～約１４００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約１５０ｍｇ～約６００ｍｇ、または２００ｍｇ～５５０ｍｇの化合物１またはその薬学的に許容される塩を含有する、単回単位用量カプセル剤形または錠剤剤形を提供する。いくつかの実施形態において、化合物１は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセルで投与される。

いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約３０ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、１７０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３４０ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５１０ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇ、１１５０ｍｇ、１２００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ、１３５０ｍｇまたは１４００ｍｇである。いくつかの実施形態において、単回単位剤形はカプセルである。いくつかの実施形態において、単回単位剤形は錠剤である。

いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、１７０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３４０ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５１０ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇ、１１５０ｍｇ、１２００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ、１３５０ｍｇまたは１４００ｍｇである。いくつかの実施形態において、単回単位剤形はカプセルである。いくつかの実施形態において、単回単位剤形は錠剤である。

いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約３０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、１０５０ｍｇまたは１４００ｍｇである。いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約２００ｍｇ、４００ｍｇまたは５５０ｍｇである。いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約１７０ｍｇ、３４０ｍｇ、５１０ｍｇである。いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、約１５０ｍｇ、３００ｍｇ、４５０ｍｇである。

いくつかの実施形態において、単位用量中の化合物１の量は、１日当たり、約３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇまたは９５ｍｇである。

投与経路
哺乳動物における体重増加を制御または予防するための治療的使用において、本開示の化合物またはその医薬品組成物は、経口的または非経口的に投与される場合がある。

特定の実施形態において、本開示の化合物またはその医薬品組成物は、１日１回経口投与される場合がある。

実施例１：前臨床研究

化合物１の治療活性は、ＮＡＳＨのマウスモデル（ＤＩＡＭＯＮＤ（商標）マウス）及びメタボリックシンドロームのラットモデル（Ｚｕｃｋｅｒ糖尿病性脂肪ラット）を用いた経口投与により評価された。化合物１は、これらのモデルにおいて、マウスでは５ｍｇ／ｋｇ／日、ラットでは０．５ｍｇ／ｋｇ／日以上の用量レベルで有効性を示した。

化合物１のＰＫをマウス、ラット及びイヌで評価した。化合物１はすべての動物種で２，４－ジニトロフェノールに変換され速やかに吸収され、結果は、２，４－ジニトロフェノールそのものを直接経口投与した場合と比較して、化合物１を経口投与した場合、２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度がピークに達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）が大幅に遅延することを示した。図１に、化合物１及び２，４－ジニトロフェノール投与後の、２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度を示す。

化合物１の投与はまた、２，４－ジニトロフェノールを直接投与した場合と比較して、有意に高い２，４－ジニトロフェノールのＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比に至った。化合物１の経口投与による２，４－ジニトロフェノールのこの最適化された薬物動態プロファイルは、動物における忍容性及び安全性評価の大幅な改善につながった。さらに、化合物１の生体外血漿タンパク質結合が多くの動物種で試験され、ラットへの経口投与後の組織分布及び排泄が調査された。化合物１の代謝は、非臨床種とヒト両方の肝ミクロソーム及び肝細胞を用いて、ならびにヒト組換え代謝酵素を用いて生体外で評価された。これらの結果は、肝心の安全性試験用のげっ歯類及び非げっ歯類としてラット及びイヌを選択することにつながった。化合物１の薬物－薬物相互作用の可能性に関する予備調査では、薬物－薬物相互作用の可能性は明らかにされていない。

化合物１は、医薬品規制調和国際会議（ＩＣＨ）のガイダンスＭ３（Ｒ２）に基づき、急性毒性／忍容性研究、反復投与毒性研究、及び遺伝毒性研究を含む非臨床毒性研究プログラムで評価された。安全性評価の裏付けとなる重要な研究はすべて、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の優良研究所基準（ＧＬＰ）に準拠して実施された。全体として、マウス、ラット及びイヌを用いた単回投与の忍容性及び反復投与の毒性研究の結果は、化合物１の投与は、マウスでは１００ｍｇ／ｋｇ／日まで（７日間）、ラットでは１２０ｍｇ／ｋｇ／日まで（６３日まで）、イヌでは１００ｍｇ／ｋｇ／日まで（６１日まで）の用量で良好な忍容性を示している。

化合物１に関連する死亡例、または体重、体重増加、食物摂取量、体温、眼科検査、心電図、血液学、臨床化学もしくは尿検査（ＵＡ）への影響はなかった。

実施例２：単回漸増用量（ＳＡＤ）研究

健常ボランティアを対象に、化合物１の単回漸増用量の安全性及び薬物動態に関する二重盲検プラセボ対照第Ｉ相試験が実施された。８つのコホートにわたる合計６７人の対象（活性５０人／プラセボ１７人）において、化合物１を１日１回（ＱＤ）３０ｍｇから１４００ｍｇＱＤまでの用量範囲でボランティアに経口投与した。本研究の目的は以下の通りである：
・ 化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの単回用量後の、健常ボランティアにおける血漿中薬物動態プロファイルを確立する。
・ 化合物１の単回用量について、健常ボランティアにおける幅広い曝露範囲での用量／曝露関係を確立する。
・ 化合物１と併用した５０％脂肪食の薬物動態学的影響を推定する。
・ 化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの薬物動態を特徴付ける。

スクリーニングプロセスは２８日前～３日前まで行われた。コホート４（摂食／絶食）を除くすべてのコホートにおいて、対象は最長４日間臨床研究ユニットに入院した。食事前に１０時間の絶食が行われたクロスオーバー食物効果コホートを除き、絶食状態（８時間絶食）で治験薬の単回用量の投与が１日目に行われた。すべての安全性評価とＰＫ解析のための採血が終了した後、対象は３日目に退院した。摂食／絶食コホートは引き続き入院し、７日目に退院した。

二重盲検投与はコホート１から８で行われた。これらのコホートでは、６人の対象に化合物１が投与され、２人にそろいのプラセボが投与された。用量は３０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、５００ｍｇ、１４００ｍｇ、１０５０ｍｇ及び６００ｍｇの順序で漸増された。
・ コホート４は、薬物動態検査後、摂食状態（５０％脂肪食）投与に移行し、初回用量後、７２時間の入院ウォッシュアウトが最終用量で行われた。

用量漸増を下表１に示す。

対象は１日目に臨床研究ユニットに入院した。投与は１日目の朝、８時間の絶食後に行われた。ただし、摂食コホートでは食事の前に１０時間の絶食があった。ＰＫパラメータ評価のための採血は、評価スケジュールに従って行われた。ＩＣは評価スケジュールに従って採取された。対象はすべての採血と安全性評価の終了後、３日目に退院した。摂食／絶食コホートは引き続き入院し、７日目に退院した。

研究デザインの概略図

薬剤投与

化合物１またはそろいのプラセボを、単回用量として経口投与した。摂食コホートを除くすべての対象は、８時間絶食後の朝に投与され、１時間、半リクライニング姿勢を保ち、投与後４時間絶食した。カプセルは２４０ｍＬ（８液量オンス）の室温の水と共に飲み込んだ。

コホート４はクロスオーバー食物効果分析であった。コホート４に登録された対象には、食物の影響を評価するために、標準化された（５０％の脂肪を含む）食事の開始（１０時間の絶食後）３０分後に投与された。治験薬剤は室温の２４０ｍＬ（８液量オンス）の水と共に投与された。

この研究では、２，４－ジニトロフェノール曲線がすべてのコホートで延長していることが示されている。化合物１は、２，４－ジニトロフェノールの有効性を維持しながら、Ｃ_ｍａｘ曲線を平坦化することで毒性を抑制し、２４時間３６５日に近い送達のための「滴のような少しずつの」効果を提供する。

図２Ａ及び２Ｂは、化合物１投与後の２，４－ジニトロフェノールのＡＵＣを示している。化合物１投与後、２，４－ジニトロフェノールが可飽和吸収されることを示しており、２，４－ジニトロフェノールの過剰摂取を防ぐことができる。

化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの薬物動態

化合物１は、絶食状態で３０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、５００ｍｇ及び１０５０ｍｇ投与された。

化合物１は速やかに吸収され、Ｔ_ｍａｘの中央値は１．７５～３．００時間、Ｔ_ｌａｇの中央値は全用量レベルで０．５０時間未満であった。平均ｔ_１／２は短く、５００ｍｇと１０５０ｍｇの絶食コホートでは１．０１時間から２．３２時間の範囲であった。見かけのクリアランスの平均及び分布容積は、用量の増加と共に増加するようである。用量で正規化したＣ_ｍａｘ及びＡＵＣに基づく化合物１の曝露量は、３０ｍｇから２００ｍｇの用量群間で用量比例的に増加し、２００ｍｇを超える用量（５００ｍｇ及び１０５０ｍｇ）では用量比例的でないようである。

２，４－ジニトロフェノールは化合物１投与後速やかに発現し、Ｔ_ｌａｇの中央値は０．５０時間未満、Ｔ_ｍａｘの中央値は６．０１時間から１０時間の範囲であった。平均ｔ_１／２は比較的長く、用量レベルにわたって３０．０時間から３８．４時間の範囲であった。見かけのクリアランスの平均及び分布容積は、３０ｍｇ、１００ｍｇまたは２００ｍｇ用量群に比べ、５００ｍｇ及び１０５０ｍｇ用量群で高かった。Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣに基づく２，４－ジニトロフェノールの曝露量は、３０ｍｇ、１００ｍｇまたは２００ｍｇの用量レベルと５００ｍｇまたは１０５０ｍｇの用量レベルとの間で、用量比例よりも少ない程度で増加するようであり、３５倍の用量増加に伴う曝露量の増加は１８倍未満であった。

実施例３：食物効果の評価

絶食状態で単回用量５００ｍｇの化合物１のカプセルを、続いて標準化された（高脂肪５０％を含む）食事（１０時間の絶食後）と共に単回用量５００ｍｇの化合物１のカプセルを摂取した。化合物１のＣ_ｍａｘの幾何平均は１４．８ｎｇ／ｍＬ及び２５．３ｎｇ／ｍＬで、幾何平均ＣＶ％はそれぞれ５２．１％及び４９．３％と、中程度のばらつきがあった。絶食条件下でのＴ_ｍａｘの中央値は３．０時間、摂食条件下では６．０時間であった。幾何平均ＡＵＣ_{０－２４ｈ}は５３．５ｈ＊ｎｇ／ｍＬ及び２７３ｈ＊ｎｇ／ｍＬであり、幾何平均ＣＶ％はそれぞれ８６．５％及び７．９２％と高～低変動性であった。幾何平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは４４．３ｈ＊ｎｇ／ｍＬ及び１８３ｈ＊ｎｇ／ｍＬであり、絶食群及び摂食群の幾何平均ＣＶ％はそれぞれ６６．２％及び４４．３％と中程度のばらつきがあった。

化合物１の摂食（試験）対絶食（参照）の幾何平均比（９０％ ＣＩ）は、Ｃ_ｍａｘでは１．８２（１．３０－２．５６）、ＡＵＣ_{０－２４ｈ}では５．１１（１．７５－１４．９）、そしてＡＵＣ_ｌａｓｔでは４．１９（２．７５－６．３９）であった。

２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘの幾何平均は６９４ｎｇ／ｍＬ及び１６８０ｎｇ／ｍＬで、幾何平均ＣＶ％はそれぞれ３１．６％及び２３．３％と中程度のばらつきがあった。絶食条件下でのＴ_ｍａｘの中央値は８．０時間、摂食条件下では１８．０時間であった。幾何平均ＡＵＣ_{０－２４ｈ}は１２４００ｈ＊ｎｇ／ｍＬ及び２５３００ｈ＊ｎｇ／ｍＬであり、幾何平均ＣＶ％はそれぞれ３１．３％及び１８．０％と中程度から低い変動性であった。幾何平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは３４２００ｈ＊ｎｇ／ｍＬ及び９４０００ｈ＊ｎｇ／ｍＬであり、絶食群及び摂食群の幾何平均ＣＶ％はそれぞれ４６．２％及び２５．９％と、中等度から低度の変動性を示した。

２，４－ジニトロフェノールの摂食（試験）対絶食（参照）の幾何平均比（９０％ ＣＩ）は、Ｃ_ｍａｘでは２．３５（１．８５－２．９９）、ＡＵＣ_{０－２４ｈ}では２．０３（１．５３－２．７０）、そしてＡＵＣ_ｌａｓｔでは２．５８（１．８８－３．５６）であった。

図３ａ及び３ｂは、５００ｍｇの化合物１を経口投与した後の血漿中の化合物１濃度を、食事状態別に比較したものである（線形及び半対数スケール）。以下の図４ａ及び図４ｂは、５００ｍｇの化合物１を経口投与した後の血漿中２，４－ジニトロフェノール濃度を、食事状態別に比較したものである（線形及び半対数スケール）。

化合物１投与後の血漿中薬物動態パラメータのまとめを下表２に示す。化合物１投与後の２，４－ジニトロフェノールの血漿中薬物動態パラメータのまとめを下表３に示す。

完了したＳＡＤ研究では、化合物１は速やかに吸収され、平均半減期１～３時間を有する可飽和レベルの２，４－ジニトロフェノールに変換された。２，４－ジニトロフェノールレベルは有意に高く、平均半減期は４０時間未満であった。食事の化合物１の吸収に対する正の影響は明らかであり、粒径の異なる２種類の化合物１の製剤が評価されたことから、吸収に対する化合物１の粒径の正の影響も、同様に明らかであった。高い単回用量では、吸収が飽和する証拠が得られた。ＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比は用量に関係なく約１８であった。

化合物１の３０～１４００ｍｇの単回経口用量は、ＳＡＤ研究のすべての対象で安全かつ良好な忍容性が確認された。重篤な有害事象（ＳＡＥ）は報告されなかった。用量と有害事象の発生率との間に実証的な相関関係は認められなかった。有害事象（ＡＥ）の最も代表的な臓器分類（ＳＯＣ）は消化器系で、主に下腹部不快感及び緩い便／下痢であり、プラセボ群よりも化合物１投与群で高い発現率が観察された。すべてのＡＥの強度は軽度または中等度であり、大多数が軽度と判定された。ＥＣＧ、バイタルサイン及び臨床検査値の評価では、異常所見の傾向または用量との関連性は示されなかった。高用量で一部の対象に認められた緑色の変色尿は、無害な現象と思われる。

ＳＡＤ研究は以下を示している：
・ 化合物１の薬物動態は、迅速な吸収及び迅速な排泄によって特徴付けられる。
・ ２，４－ジニトロフェノールは速やかに現れ、比較的ゆっくりと排泄される。
・ この代謝物は速やかに生成され、排泄は比較的遅く、２，４－ジニトロフェノールに比べて循環レベルは低い（１％未満）。
・ 標準的な高脂肪（５０％）食の投与は、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの総曝露量（Ｃｍａｘ及びＡＵＣ）を増加させつつ、化合物１の吸収及び２，４－ジニトロフェノールの出現を遅延させる。絶食条件と比較して、摂食条件下では、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールのＣｍａｘは１．８倍超増加し、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールのＡＵＣはそれぞれ４．０倍超及び２．０倍超増加した。

実施例４：複数回漸増用量（ＭＡＤ）研究

高ＭＢＩのボランティアを対象に、化合物１の複数回漸増用量の安全性、薬物動態及び薬力学に関する二重盲検治験依頼者非盲検プラセボ対照第Ｉ相試験が実施された。健常な高体格指数（ＢＭＩ）対象１０名を含む最初のコホートは２００ｍｇの化合物１の用量を完了した。さらに２つのコホートが４００ｍｇ及び５５０ｍｇＱＤの用量で計画されている。

対象は、２００ｍｇＱＤの用量で、経口化合物１に良好な忍容性を示した。ＳＡＥはなく、データの予備的評価では、身体診察、バイタルサイン、ＥＣＧまたは臨床検査データに、有意な変化は認められなかった。図６はまた、２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度が定常状態に達し、２，４－ジニトロフェノールの曲線がすべてのコホートで平坦であることを示している。

図６は、化合物１を投与しても体温の有意な上昇がないことを示している。

下図７は、化合物１がプラセボと比較して安静時エネルギー消費量（ＲＥＥ）を約２９％増加させることを示している。

図８及び図９は、化合物１は、投与後に体重及びグルコースレベルを減少させることを示している。

図１０及び図１１は、化合物１は、投与後に収縮期血圧及び拡張期血圧を低下させ、それがＨＦｐＦＦ、ＨＦｒＥＦ及びＨＦｍｒＥＦなどの心血管疾患を有する患者において、有意なリスク低減につながることを示している。結果は、血圧の低下が統計学的に非常に有意であり、３つの用量レベルすべてで変化が認められたことを示す。拡張期血圧と収縮期血圧の両方に対して、ほとんど即効的で迅速な効果が観察された。血圧の低下は、血糖値及び脂肪画分の低下と併せて、化合物１がＨＦｐＥＦに有効であることを強く示している。図１２はまた、血圧及び血糖の低下ならびに脂肪画分の低下が心拍数の増加を伴わないことを示している。

実施例５：肝脂肪上昇及び高ＢＭＩ患者を対象とした化合物１の第２ａ相試験

肝脂肪が高く、体格指数の大きい（２８～４５ｋｇ／ｍ^２）対象において、化合物１の３用量の安全性及び有効性を評価する、６１日間の無作為化二重盲検プラセボ対照試験が進行中である。

研究の論拠

肝脂肪の上昇が認められる高ＢＭＩの対象は、ＮＡＳＨを伴う最終的な患者集団の代謝特性をよりよく再現している（Ｇｏｌａｂｉ ｅｔ ａｌ．，２０２０）。ＮＡＳＨの病因における代謝異常の重要性を考慮すると、肝脂肪が上昇した高ＢＭＩのボランティアにおいて、化合物１が主に肝脂肪に、二次的に体重に及ぼす安全性と治療効果を理解することは、第２ｂ相臨床研究のために有効かもしれない用量を選択する際により大きな自信をもたらす。６１日間の試験で肝脂肪の有意な減少（相対的肝脂肪の５０％以上の減少）をもたらす用量とそれに関連する薬物動態学的曝露を確立することにより、生検で検証されたＮＡＳＨ患者を対象とした長期（９ヶ月）の第２ｂ相試験のための安全性、標的関与及び有効性のデータが得られると期待される。さらに、ミトコンドリア脱共役の臨床効果は、同様の肥満代謝特性を反映する集団で研究され（Ｔａｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９３４；Ｈａｒｐｅｒ ｅｔ ａｌ，２００１）、本研究中の患者集団の安全性に関するさらなる歴史的先例を提供した。

概して、ＮＡＳＨ患者集団の代謝的特徴（高ＢＭＩ及び高肝脂肪）を有する対象集団における化合物１の肝脂肪及び体重に対する安全性及び有効性を理解することは、その後の第２ｂ相における長期臨床研究において、用量選択及び効果に対するより高い信頼性を提供することになる。

選択された用量の論拠

すべての化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの単回曝露は、ＳＡＤ研究において、許容可能なＡＥプロファイルを示した。化合物１の半減期が短いのに対し、２，４－ジニトロフェノールの半減期は約４０時間である。１日１回投与の場合、定常状態で２，４－ジニトロフェノールの有意な蓄積が予想される。ＭＡＤ研究のコホート１では、２００ｍｇＱＤを１４日間投与した結果、用量蓄積係数は約３．５倍となり、７日間の連日投与で定常状態に達した。

ＳＡＤ研究における化合物１の単回用量の薬力学的効果が、安静時代謝率（ＲＭＲ）の変化を確認するために間接熱量測定（ＩＣ）を用いて監視された。ＳＡＤ試験における１４００ｍｇという高い用量での化合物１の単回用量曝露では、投与後の最初の３３時間のＩＣ評価を通じて、最大約２０％のＲＭＲの増加が認められた。

単回用量曝露の安全性とそれと関連しているＲＭＲに対する薬理学的効果を考慮すると、１日２００ｍｇの開始反復経口用量は、ＲＭＲを約１０％増加すると予想された。このＲＭＲの増加はＭＡＤ研究のコホート１において確認され、そこでは１日２００ｍｇの経口投与７日目までに約１０％のＲＭＲの増加が認められ、それが反復投与１５日目まで持続した。２００ｍｇＱＤ用量の定常状態における曝露量は、用量蓄積を考慮すると予想通りであった。２００ｍｇＱＤ用量の２週間投与後の安全性プロファイルが許容範囲であったことから、ＭＡＤ研究の次のコホートには化合物１を４００ｍｇＱＤで１４日間投与する。予想されるＲＭＲの増加は２０％であり、定常状態における用量曝露はＳＡＤ研究で達成された最高曝露の範囲内になると予想される。２週間の投与後、１日４００ｍｇＱＤの用量が許容できる安全性プロファイルを示した場合、後続のコホートには１日５５０ｍｇＱＤの化合物１を投与することが予測されるが、その決定はリアルタイムで審査される新たなデータ次第である。この用量／曝露で予想されるＲＭＲの増加は３０％であり、食事がＲＭＲに与える影響の範囲内であり、２，４－ジニトロフェノールの過去の臨床研究で許容できる安全性プロファイルとされた値を下回っている。２，４－ジニトロフェノールの半減期が約４０時間であることから、化合物１の５５０ｍｇＱＤの定常状態曝露量は、ＳＡＤ研究で測定された単回用量曝露量よりも高くなると考えられる。それでも、化合物１及び２，４－ジニトロフェノール濃度の母集団薬物動態学的（ＰＰＫ）モデリングは、１日当たり５５０ｍｇの化合物１の投与で達成される定常状態の２，４－ジニトロフェノール濃度は、体温に影響を与える臨床研究及び非臨床研究で観察されたレベルを下回るであろうことを示している。歴史的に２，４－ジニトロフェノールは、ヒトにおいて２８，０００ｎｇ／ｍＬを超える濃度で体温の有害な上昇と関連しており（Ｚｈａｏ ２０１５）、血漿中２，４－ジニトロフェノール濃度が１３，０００ｎｇ／ｍＬを超えるイヌにおける化合物１の研究では、体温の上昇、浅速呼吸、紅斑が認められた。さらに、ＲＭＲが約２００％上昇すると、体温が上昇することが予想された（Ｂａｃｈｙｎｓｋｙ ２０１５［ＵＳ２０１５００５６１６０Ａ１］）。したがって、化合物１を５５０ｍｇＱＤで投与した場合に予想されるＣ_ｍａｘ定常状態の２，４－ジニトロフェノール濃度及びその結果生じるＲＭＲの増加は、体温の上昇と関連している２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘ及びＲＭＲの増加をはるかに下回る。

６１日間という研究期間は、化合物１の完了した毒性研究の投与期間に基づいて、また、Ｍａｕｒｉｃｅ ＴａｉｎｔｅｒならびにＳａｍｕｅｌ Ｓｉｍｋｉｎｓが実施した研究（Ｔａｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９３４；Ｈａｒｐｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００１；Ｇｅｉｓｌｅｒ，２０１９）による２，４－ジニトロフェノールの臨床経験を反映するために選択された。これらの研究では、２，４－ジニトロフェノールは１日１回、２０～４０％のＲＭＲ増加を容易に引き起こす用量で１～３ヶ月間投与された。結果として得られた経験した体重減少は１．４～２．１ポンド／週であった。この薬物は、１～３ヶ月の間、これらの用量レベルで十分な忍容性を示した。投与６１日目に、化合物１は、体重の減少及び用量に関連したＲＭＲの１０～４０％増加に呼応して、有意な肝脂肪減少を誘導すると予想される。例えば、化合物１を１５０ｍｇ投与すると安静時エネルギー消費量が１０％増加し、化合物１を３００ｍｇ投与すると安静時エネルギー消費量が２０％増加し、化合物１を４５０ｍｇ投与すると安静時エネルギー消費量が３０％増加する。結果として得られる６１日目の安全性及び有効性のデータは、より長期の第２ｂ相試験における用量選択の重要な指針を提供するはずである。

一次的目的
有効性：
・ 化合物１を投与されたＢＭＩが高値の対象において、ベースラインから６１日目までの磁気共鳴画像法プロトン密度脂肪画分（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）で評価した肝脂肪量の減少を、プラセボと比較して評価する。
安全性：
・ ＢＭＩで定義される過体重及び肥満の対象において、化合物１を６１日間毎日反復投与することの安全性及び忍容性を評価する。

二次的目的
・ ６１日間の化合物１による治療後の体重減少の割合及び量を評価する。
・ ６１日間の化合物１による治療後の、全身脂肪画分のベースラインからの変化をＭＲＩにより評価する。
・ 高ＢＭＩの対象における、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの６１日間の投与におけるＰＫプロファイルの特徴を明らかにする。
・ 化合物１投与後の肝組成測定におけるベースラインからの変化と肝脂肪量の変化を評価し、相関させる。
・ 代謝及び心血管危険因子に対する化合物１の薬力学的（ＰＤ）効果を調査する。
・ メタボローム、プロテオーム及びリピドームプロファイルに対する化合物１のＰＤ効果を調査する。
・ データが許す限り、化合物１の有効性及びＰＤ効果の用量／曝露関係を明らかにする。

エンドポイント

一次的エンドポイント
・ ６１日目のＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪量の、ベースラインからの相対的変化。

二次的エンドポイント
薬力学
・ ６１日目の体重のベースラインからの変化。
・ ６１日目の全身脂肪画分のベースラインからの変化。
・ ６１日目の肝臓の炎症及び線維症の代用指標におけるベースラインからの変化：Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制振過渡弾性撮像法（ＶＣＴＥ）、Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制御減衰パラメータ（ＣＡＰ）スコア、及び拡張肝線維症（ＥＬＦ）スコア。
・ ６１日目の脂質パラメータ及び心血管リスクバイオマーカーのベースラインからの変化：血清高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ－ＣＲＰ）、Ｌｐ（Ａ）、Ａｐｏ Ｂ、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、総コレステロール、トリグリセリド及び遊離脂肪酸（ＦＦＡ）。
・ ６１日目の代謝疾患パラメータのベースラインからの変化：インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ－ＩＲ）、空腹時血糖値、糖化アルブミン濃度、ＨｂＡ_１ｃ。
安全性及び忍容性
・ 研究期間中の身体検査所見の概要。
・ 研究期間中の有害事象（ＡＥ）評価。
・ 研究期間中のバイタルサインパラメータの評価。パラメータは安静時収縮期及び拡張期血圧、安静時心拍数、安静時呼吸数及び口腔体温を含む。
・ 研究期間中の体重の評価。
・ 研究期間中の安全１２誘導ＥＣＧ。
・ 投与６１日間にわたる臨床検査値（血液学的検査、完全生化学パネル（脂質パネル、ＣＰＫ、マグネシウム、肝機能検査を含む）及び尿検査（ＵＡ））の評価。
・ 投与前及び投与６１日後の細隙灯を含む眼科的検査の評価。
薬物動態
・ 化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの母集団ＰＫ解析。以下のＰＫパラメータが適宜推定される：Ｃ_ｍａｘ、Ｔ_ｍａｘ、ｔ_１／２、Ｔ_ｌａｇ、ＡＵＣ_０－ｔ、ＡＵＣ_０－∞、ＣＬ／Ｆ、Ｖｄ／Ｆ、λ_ｚ。その他のＰＫパラメータは、データが許容し、適切であれば計算される場合がある。
・ データが許す限り、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの非コンパートメント解析。以下のＰＫパラメータを計算する：Ｃ_ｍａｘ、ＡＵＣ、及び蓄積。
・ 化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの曝露応答関係、ならびに必要に応じて有効性／薬力学的エンドポイントのモデル化。

探索的エンドポイント
・ ６１日目のメタボローム及びリピドームプロファイルのベースラインからの変化（Ｏｎｅ Ｗａｙ Ｌｉｖｅｒ－［ＯＷＬ］メタボローム及びリピドームアッセイ）。
・ ６１日目のプロテオームプロファイル（ＳｏｍａＳｃａｎ（登録商標））のベースラインからの変化。
・ データが許す限り、６１日目の血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）及びアスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）濃度のベースラインからの変化。

研究デザイン

本研究は第２ａ相無作為化並行群間プラセボ対照二重盲検反復投与研究であり、以下のスキームに示すように、ＢＭＩが高く肝脂肪の上昇が認められる対象において、６１日間にわたり化合物１の３つの経口用量をプラセボと比較し、安全性及び有効性を評価するものである：

対象は４５日間にわたってスクリーニングを受け、特定の病歴、身体所見、臨床検査、及び画像評価に基づいて適格性が決定される。検査の日程の関係上、スクリーニングを完了するためには、おそらく複数回の訪問が必要となる。しかし、ＭＲＩを含むすべてのスクリーニング評価及び治療が初回投与から３０日以内に完了できる場合は、ただ１回のスクリーニングのための来院が許容される。

適格と判断された患者は、化合物１治療群またはそろいのプラセボ対照群のいずれかに無作為に割り付けられ、１日１回（絶食）、合計６１日間投与される。対象は６１日間の投与期間中、頻繁にクリニックを訪れて評価を受ける。投与終了後１０～１４日以内にフォローアップ来院を行う。

対象は、研究期間中、研究参加前と同じ食事及び活動・運動レベルを維持するよう指示を受ける。

投与は絶食状態で１日１回行われる。対象は以下の４つの治療群のいずれかに均等に無作為に割り付けられる（各群Ｎ＝２０）：
・ 第１群：そろいのプラセボを１日１回６１日間経口投与。
・ 第２群：化合物１を１５０ｍｇ、１日１回、６１日間経口投与。
・ 第３群：化合物１を３００ｍｇ、１日１回、６１日間経口投与。
・ 第４群：化合物１を４５０ｍｇ、１日１回、６１日間経口投与。

無作為化はＨｂＡ_１ｃによるブロック化及び層別化である（正常範囲対５．７％～９．０％（両端を含む））。

包含基準
対象が適格であるためには、以下のすべての包含基準を満たす必要がある：
１．インフォームド・コンセント時点で２８～６５歳（両端を含む）の成人男性または女性で、ＢＭＩが２８．０～４５．０ｋｇ／ｍ^２（両端を含む）。
ａ．妊娠可能な女性対象は、授乳中でなく、スクリーニング時の尿中妊娠検査で陰性であることが確認された妊娠していない者でなければならず、少なくとも４週間は有効な避妊法を継続するか、最初の治験薬投与の２週間前から治験薬最終投与後３０日までバリア法を継続することに同意しなければならない。
ｂ．妊娠可能な女性対象は、研究期間中及び治験薬の最終投与後少なくとも３０日間は卵子の提供をしてはならない。
ｃ．妊娠の可能性のない女性対象は、外科的不妊（例えば子宮摘出、両側卵管結紮、卵巣摘出）または閉経後（１年超月経がなく、スクリーニング時に卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）が４０Ｕ／Ｌ超）でなければならない。
ｄ．精管切除を受けていない男性対象、及び／または精管切除を受けたが術後２回の精子検査で陰性でなかった対象は、治験薬初回投与時から治験薬最終投与後３０日まで許容される避妊方法を使用し、研究中及び治験薬最終投与後少なくとも３０日間は精子を提供しないことに同意しなければならない。
２．一般的な医学的症状の治験責任医師の評価による、及び病歴、身体診察、バイタルサイン評価、１２誘導ＥＣＧ、臨床検査評価及び一般観察により文書化されたものによる包含。
ａ．対象は、スクリーニングのうち少なくとも２ヶ月前から、肥満と関連している基礎疾患の治療薬を安定した用量で服用していなければならない。
ｂ．糖尿病の患者はメトホルミン、ＤＰＰ－４阻害薬、またはスルホニル尿素薬による治療を受けていてもよいが、スクリーニングのうち少なくとも２ヶ月前から安定した用量を服用していなければならない。
ｃ．スクリーニングでは、資格のある対象の基礎疾患である肥満または関連する代謝機能障害（例えば、脂質異常症及び高血糖症）に見合った検査値であれば、これらの異常が試験における対象の安全性に影響を及ぼすことを示唆したり、または化合物１の評価を妨げたり、研究結果の解釈に影響を及ぼし得る基礎疾患を示唆したりしない場合に限り、ある臨床検査値は基準範囲外であってよい。
ｄ．治験責任医師が臨床的に重要であると判断したその他の評価（臨床検査、ＥＣＧ、バイタルサイン、身体検査）の正常範囲外の異常または逸脱は、治験責任医師（複数可）の判断により１回繰り返される場合がある。正常範囲外であり続ける結果は、治験責任医師により、臨床的に重要ではなく、試験参加に差し支えないと判断されなければならない。
ｅ．ジルベール症候群と推定されることによる非抱合ビリルビン上昇のある対象は許容される。
ｆ．対象は、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）及び遊離サイロキシン（Ｔ４）検査による甲状腺プロファイルでスクリーン時に評価されることにより、甲状腺機能が正常でなければならない。甲状腺疾患の安定した既往歴があり、甲状腺治療薬を最低４ヶ月間安定した用量で服用している対象は登録することができる。
３．Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）ＣＡＰスコア＞３００ｄＢ／ｍ。
４．ＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪≧８％。
５．研究の手順と要件を理解し、書面によるインフォームド・コンセントと保護されるべき健康情報の開示の承認を提供する。
６．治験実施計画書の要件を遵守する意思と能力がある。

除外基準
以下の基準のいずれかに該当する場合、対象は研究から除外される：
１．インスリンで制御されている糖尿病。
２．妊娠中、授乳中、または妊娠の予定がある。
３．磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）に耐えられない、またはＭＲＩスキャナーに収まらない、もしくは手術用クリップ／金属インプラント／榴散弾を含むがこれに限定されないＭＲＩ検査に禁忌の条件を有する者。対象は閉所恐怖症、閉所恐怖症の既往歴、または閉鎖空間もしくは狭い空間に対する不耐症であってはならない。
４．研究前３ヶ月間に５％超の体重増加または減少、もしくはスクリーニング前６ヶ月間に１０％超。
５．スクリーニングから５年以内にラップバンド、胃内バルーン、十二指腸－空腸スリーブ、または肥満手術の既往歴がある、研究参加終了前に肥満手術の予定がある、もしくは本研究中に特別な食事療法、運動プログラム、またはその両方によって体重を減らす予定がある。
６．悪性高熱症の既往歴。
７．原因不明の慢性の重篤な再発性皮疹の既往歴。
８．一過性脳虚血発作、脳卒中、不整脈、失神、不安定狭心症、スクリーニング前６ヶ月以内の心筋梗塞、うっ血性心不全、または管理されていない高血圧症を含むがこれらに限定されない既往のまたは進行中の臨床的に重大な心血管疾患。（制御されていない高血圧症とは、適切なサイズの血圧測定バンドを用いた座位での安静時血圧測定３回の平均値による収縮期血圧≧１６０ｍｍＨｇまたは拡張期血圧≧１００ｍｍＨｇと定義される）。
９．安静時心拍数＜４５ｂｐｍまたは＞１１０ｂｐｍ。
１０．スクリーニングＥＣＧまたは既往歴に以下がある：
ａ．ＱＴ／ＱＴｃＦ間隔の著明なベースラインにおける延長（例えば、男性で４５０ｍｓｅｃ超、女性で４７０ｍｓｅｃ超のＱＴｃＦ間隔を繰り返し示す）。
ｂ． トルサード・ド・ポワンツ（ＴｄＰ）の追加危険因子（例えば心不全、低カリウム血症、ＱＴ延長症候群の家族歴）の既往歴、または原因不明の心臓突然死の家族歴。
１１．腎臓病、腎移植、またはＣＫＤ－ＥＰＩクレアチニン方程式（ＮＫＦ ２００９；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｋｉｄｎｅｙ．ｏｒｇ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｃｋｄ－ｅｐｉ－ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ－ｅｑｕａｔｉｏｎ－２００９）に基づく推定糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）＜５０ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ^２。
１２．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、肺線維症または喘息を含む、毎日の常習的な投薬を必要とする重大な肺疾患。
１３．未治療の肥満低換気症候群（ＯＨＳ）または閉塞性睡眠時無呼吸症候群（ＯＳＡ）。
１４．自己免疫性肝疾患、ウイルス性肝炎、遺伝性血色素症、原発性胆汁性肝硬変、ウィルソン病、α－１－アンチトリプシン欠損症、アルコール性肝疾患、妊娠急性脂肪肝、または薬物性（アセトアミノフェンを含む）肝疾患などであるがこれらに限定されない非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）／非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）以外の肝疾患の既往歴または進行中（急性または慢性）肝疾患。
１５．臨床的に重大な胃不全麻痺、炎症性腸疾患、またはあらゆる上部消化管の手術歴またはその治療歴（胆嚢摘出術、メディカルモニターが承認した軽度の胃手術を除く）。
１６．肝硬変及び／または腹水、肝性脳症または静脈瘤出血を含む肝不全の既往歴。
１７．スクリーニング後１年以内の急性膵炎、または何らかの原因による慢性膵炎の既往歴。
１８．５００ｍｇ／ｄＬ超の血清トリグリセリド濃度。
１９．ＨｂＡ_１ｃ＞９．０％。
２０．過去の任意時点における家族（母親／父親／兄弟姉妹）の、及び／または自身の網膜剥離の既往歴。
２１．緑内障のいかなる既往歴または現在の診断。
２２．スクリーニング眼科検査における以下の証拠：
ａ．治療を必要とする網膜周辺部病変または網膜裂孔、もしくは治療を必要とする網膜格子。
ｂ．光干渉断層計（ＯＣＴ）及び検査で黄斑滲出液または黄斑浮腫を認める糖尿病網膜症。
ｃ．黄斑ひだ形成症（黄斑上膜）及び黄斑変性症を含む、視力に影響を及ぼす進行中の黄斑疾患。
ｄ．眼科医によって判断された視覚的に有意な白内障。
ｅ．黄斑変性症に対する抗ＶＥＧＦ薬のいかなる硝子体内注射歴。
ｆ．硝子体手術の既往歴。
２３．スクリーニングから５年以内の悪性新生物の既往歴。ただし、基底細胞性または扁平上皮性皮膚癌、頸部上皮内癌、または前立腺癌で、放射線療法、化学療法、及び／または外科的介入もしくはホルモン療法を現状で必要としないか、または必要されないと思われる場合は除く。
２４．臓器移植の既往歴。
２５．投与（来院２／第１日）前１週間以内にＣＯＶＩＤ－１９ワクチンを接種した、及び／または研究期間中にＣＯＶＩＤ－１９ワクチンを接種する予定がある。
２６．スクリーニング前１年以内に著しい薬物乱用の既往歴、またはスクリーニング来院前３ヶ月以内にソフトドラッグ（マリファナなど）の多用、もしくはスクリーニング前１年以内にハードドラッグ（コカイン、フェンサイクリジン［ＰＣＰ］、ヘロインを含むオピオイド誘導体及びアンフェタミン誘導体など）の多用。
２７．過去２年のアルコール依存症の既往歴、またはＡｌｃｏｈｏｌ Ｕｓｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｔｅｓｔ（ＡＵＤＩＴ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ２０１８）を用いたスクリーニング評価による過度のアルコール摂取の現状証拠、及び治験責任医師が判断したスクリーニングから６ヶ月以内の定期的なアルコール摂取量が男性で約１４杯／週、女性で約７杯／週［１杯＝ワイン４オンス（１２０ｍＬ）またはビール１２オンス（３６０ｍＬ）またはハードリカー１オンス（３０ｍＬ）］を超える摂取歴。
２８．尿中薬物スクリーニングで乱用薬物陽性、またはスクリーニング時の血液検査でホスファチジルエタノール（ＰＥｔｈ）が１００ｎｇ／ｍＬを超える陽性。ＰＥｔｈ値が除外値であった場合、治験責任医師とメディカルモニターが対象の既往歴がアルコール乱用と一致しないことに同意すれば、登録が考慮され得る。
２９．現在、定期的に電子タバコを使用している、または週に５本以上のタバコもしくはそれに相当するものを吸っている。禁煙のためのニコチンパッチの使用は認められる。
３０．Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、Ｃ型肝炎ウイルス抗体（ＨＣＶ Ａｂ）、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ１／２）抗体が陽性。
３１．好中球減少（絶対好中球数１０００／μＬ以下と定義）。
３２．スクリーニング時に血清ＡＳＴまたはＡＬＴが正常値の上限（ＵＬＮ）の５倍を超える。（治験責任医師の判断により、７日以内に１回の再検査を認める）。
３３．総ビリルビン値＞ＵＬＮ、ただしギルバート症候群によるもの、またはメディカルモニターが承認した臨床的に関連性のある他の肝障害がない場合に正常なばらつきとみなされる場合を除く。
３４．他に重大な肝障害の可能性を示す証拠がある場合、スクリーニング時の国際標準化比（ＩＮＲ）≧１．３。
３５．スクリーニング時に他の臨床試験への参加、またはスクリーニングから３０日以内、または半減期がわかっている場合は５半減期以内の外用薬を含むあらゆる治験薬への曝露。
３６．研究期間中、入れ墨やボディピアスをしないこと。治験責任医師または治験依頼者の見解により、対象が治験の要件を遵守できる見込みがない、または治験を完了することができないと判断されるあらゆる身体的もしくは精神的な基礎疾患。
３７．書面によるインフォームド・コンセントを提供する能力または研究の指示に従う能力を妨げる、もしくは研究結果の解釈を混乱させ得るか、または対象に過度のリスクを負わせ得ると治験責任医師が考えるあらゆる症状。
３８．化合物１またはその賦形剤に対する既知または潜在的な過敏症。
禁止薬物（使用中のもの）：
３９．減量を目的としたあらゆるハーブサプリメント、市販薬、通信販売薬または処方薬。
４０．デキストロアンフェタミン／Ｄｅｘｅｄｒｉｎｅ、デキストロアンフェタミン／アンフェタミン配合剤／Ａｄｄｅｒａｌｌ、またはメチルフェニデート（リタリン（登録商標）、コンサータ（登録商標））を含む処方薬または市販の覚せい剤。
４１．チアゾリジンジオン（ＴＺＤ）：ピオグリタゾン／アクトス、ロシグリタゾン／Ａｖａｎｄｉａ。
４２．グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）作動薬：エキセナチド／バイエッタ／ビデュリオン、リキシセナチド／Ａｄｌｙｘｉｎ、リラグルチド／ビクトーザ、デュラグルチド／トルリシティ、セマグルチド／オゼンピック。
４３．ナトリウム－グルコース共輸送体－２（ＳＧＬＴ２）阻害薬：カナグリフロジン／Ｉｎｖｏｋａｎａ、ダパグリフロジン／Ｆａｒｘｉｇａ、エンパグリフロジン／ジャディアンス、エルツグリフロジン／Ｓｔｅｇｌａｔｒｏ。
４４．ビタミンＥ：ウルソジオールまたは４００ＩＵ／日を超える高用量ビタミンＥを過去６ヶ月以内に１ヶ月以上使用、またはスクリーニング前３ヶ月以内に高用量ビタミンＥを開始。
４５．オベチコール酸／Ｏｃａｌｉｖａ、全身性コルチコステロイド、メトトレキサート、タモキシフェン、アミオダロンを最近（スクリーニングから３ヶ月以内）使用したか現在使用中、またはテトラサイクリン系剤の長期使用。
４６．ワルファリン、ヘパリン、ファクターＸａ阻害薬（ダビガトラン・ベトリキサバン・エドキサバン、アピキサバン及びリバーロキサバン）。
４７．ＱＴ／ＱＴｃ間隔を延長させ、ｈｔｔｐｓ：／／ｃｒｅｄｉｂｌｅｍｅｄｓ．ｏｒｇ／ウェブサイトのリストカテゴリー「Ｋｎｏｗｎ Ｒｉｓｋ（既知のリスク）」で特定されているように、トルサード・ド・ポワンツのリスク増加と関連することが知られている併用薬。
４８．カンナビジオール（ＣＢＤ）を含む製品。

治療計画及び方法
研究手順は、評価日程（表４）に指定された通りに行わなければならない。

薬物動態パラメータ
以下のＰＫパラメータは、濃度－時間データから決定される：
・ 化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの母集団ＰＫ（ＰＰＫ）解析。以下のＰＫパラメータを計算する：Ｃ_ｍａｘ、Ｔ_ｍａｘ、ｔ_１／２、Ｔ_ｌａｇ、ＡＵＣ_０－ｔ、ＡＵＣ_０－∞、ＣＬ／Ｆ、Ｖｄ／Ｆ、λｚ。データが許容し、適切であれば、他のＰＫパラメータを計算してもよい。
・ データが許す限り、化合物１及び２，４－ジニトロフェノールの非コンパートメント解析。以下のＰＫパラメータを計算する：Ｃ_ｍａｘ、ＡＵＣ、及び蓄積。

磁気共鳴画像法プロトン密度脂肪画分（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）

磁気共鳴画像法プロトン密度脂肪画分（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）は、肝脂肪量（脂肪症）を評価する非侵襲的で定量的なバイオマーカーである。ベースライン時及び治療終了時に、肝臓内の脂肪の割合またはプロトン密度脂肪画分（ＰＤＦＦ）を、ＭＲ：ＭＲＩ－ＰＤＦＦを用いて測定する。肝臓の体積は、肝臓全体をカバーするアキシャルＴ１強調画像またはデュアルエコー勾配エコー画像から評価される。この高度なＭＲＩ技術は、肝脂肪に起因する肝臓内の移動性プロトンの割合（ＰＤＦＦ）を測定するもので、肝脂肪含量の直接的な指標であり、組織の基本的な特性である。対象はＭＲＩ－ＰＤＦＦを実施する前に４時間の絶食が必要である。

腹部ＭＲＩ

総脂肪を評価するために腹部のＭＲＩ画像が撮影される。この検査の２つの主な測定は、体腔内に蓄積された脂肪の一種である総内臓脂肪組織（ＶＡＴ）と、皮膚のすぐ下に見える脂肪の一種である皮下脂肪組織（ＳＡＴ）の推定である。

Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）

Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）は非侵襲的な医療機器で、肝脂肪量（脂肪症）及び肝臓の硬度（線維症）を推定する。この検査はせん断波速度を測定することで機能する。超音波プローブの先端にある小さなトランスデューサーから５０ＭＨｚの波が肝臓に伝わる。プローブの先端には、この波が肝臓を通過するときのせん断波の速度（単位は毎秒メートル）を測定するトランスデューサーもついている。せん断波速度は肝臓の硬さに変換され、キロパスカルで表される（ＶＣＴＥスコア）。エコー波の超音波減衰を測定することで肝臓脂肪症を推定する２番目の測定も行われ、これは制御減衰パラメータ（ＣＡＰ）と呼ばれる。対象はＦｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）を実施する前に４時間の絶食をする必要がある。

Ｏｎｅ Ｗａｙ Ｌｉｖｅｒアッセイ（ＯＷＬ）

ＯＷＬ－メタボロミクス

このメタボロームアッセイでは、ボランティアの血漿及び血清から代謝物を抽出し、細胞機能のスナップショットを取得する。液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）メタボロミクスを用いて、正常肝及びＮＡＦＬＤ、ならびにＮＡＳＨ及びＮＡＦＬＤを区別する血清バイオマーカーを同定する。また、メタボロミクスプロファイルは、主要な分子経路に関する洞察を提供するさまざまな細胞代謝産物の検査を通じて、細胞機能及び炎症に関する洞察を提供する。

ＯＷＬ－リピドミクス

リピドミクスは、血漿及び血清中の脂質を分析・同定する非侵襲的な血液検査法である。これらの脂質は質量分析によって分離され、特徴付けられる。分析は脂肪酸、脂肪酸誘導体、グリセロ脂質、グリセロリン脂質、スフィンゴ脂質及びステロールを含む。

低速オフ速度変形アプタマー（ＳｏｍａＳｃａｎ）

ＳｏｍａＳｃａｎは非侵襲的血液アッセイである。血漿及び血清サンプルは、３次元的な立体構造が目的のタンパク質ターゲットに特異的に結合するオリゴヌクレオチドアプタマーを用いて検査される。７，０００以上のタンパク質が検査・定量され、身体のプロテオーム的スナップショットを可能にする。さまざまな数学的モデルが、心臓血管の健康、代謝率、除脂肪体重、肝臓の炎症、心肺フィットネス、及び耐糖能の予測値を持つアルゴリズムを確立するために、大規模な臨床データに適用されている。

強化肝線維症（ＥＬＦ）

ＥＬＦアッセイは非侵襲的な血液検査で、肝臓の炎症及び線維症の３つのマーカー、ヒアルロン酸、プロコラーゲンＩＩＩアミノ末端ペプチド（ＰＩＩＩＮＰ）及びマトリックスメタロプロテアーゼ１の組織阻害剤（ＴＩＭＰ－１）を測定する。これら３つのマーカーの値は、付随する臨床データと合わせて用いると、肝臓の炎症及び線維症の症状を非常に予測しやすいことが、より大規模な臨床試験で組織学的データと相関させることで証明された。

探索的バイオマーカー

血液サンプルを採取し、血漿と血清成分に分け、そこから４００μＬ分取してラベルを貼り、将来、化合物１の薬理作用を説明するのに役立つタンパク質、脂質または遺伝子発現を分析するために保存する。

眼科検診

対象のベースラインの状態を把握し、投与期間中のベースラインからの変化をモニターするために、スクリーニング時及び投与終了時（約６１日目）に、眼球後極の眼底写真、両眼の黄斑部のＯＣＴ、及び細隙灯検査を含む眼の精密検査を実施する。瞳孔拡張は、２．５％ネオシネフリンと０．５％トロピカミド（Ｍｙｄｒｉａｃｙｌ）を用いて（眼科医が禁忌と判断した場合を除く）、両眼に１滴ずつ、明るい色の眼では１回、暗い色の眼では５分間隔で２回まで行う。細隙灯は、眼科検診で使用される明るい光を持つ生体顕微鏡で、健康状態の判断や眼疾患の発見するために、眼の前面及び眼の中のさまざまな構造を評価する。ＯＣＴは、光波を使って網膜の断面写真を撮影する非侵襲的な画像技術である。眼底写真は眼球の後方を撮影する。これらの検査は、眼の健康状態の医学的評価に関わる標準的な検査であり、評価の一貫性を確保するために、限られた眼科医が協力して実施されなければならない。

バイタルサイン

バイタルサインには、体温、収縮期血圧、拡張期血圧、心拍数及び呼吸数が含まれる。すべての血圧測定は、対象の腕のサイズに合った血圧カフを用いて行わなければならない。血圧カフが小さすぎると、血圧の測定値が不正確に高くなる。血圧と心拍数の記録は、対象が仰臥位で５分以上経過した後に行う。各時点で３回血圧を測定し、各血圧は約２分間隔で測定する。最初の血圧は破棄される。２番目と３番目の血圧測定値がデータベースに入力され、平均されてその時点の値となる。

ＩｎＢｏｄｙ体重計を用いて体重、筋肉及び体脂肪を測定する。これは投与前、絶食状態で、ほぼ同じ時間帯に行わなければならない。

体温も、対象に提供されるＢｒａｕｎ Ｔｈｅｒｍｏｓｃａｎ ７内耳体温計を使用して、自宅で毎日モニターされる。この体温計は、体温を色分けして表示し、平熱、高温（９９．９°Ｆ超、黄色表示）または発熱（１０３°Ｆ超、赤色表示）も示す。適切な使用方法を保証し、体温が取得されたことをユーザーに警告する可聴フィードバックシステムを備えている。過去直近９回の測定値が体温計に記録される。検温は毎日、投与時に行われなければならない。対象に発熱を示唆する症状がある場合、彼らは体温を測定して確認しなければならない。黄色または赤色で表示され、体温上昇が１００°Ｆ以上の場合、対象は化合物１の服用を中止し、解熱剤（アセトアミノフェン、アスピリンまたは非ステロイド系抗炎症剤）を避け、治験実施医療機関に連絡しなければならない。

臨床検査

スクリーニング時のみ：
・ ウイルス血清学的検査では、Ｂ型肝炎抗原、抗Ｃ型肝炎抗体及び抗ＨＩＶ抗体の有無を検査する。
・ ＴＳＨ及び遊離Ｔ４。
・ ｅＧＦＲ＝ＣＫＤ－ＥＰＩクレアチニン方程式（ＮＫＦ ２００９；ｗｗｗ．ｋｉｄｎｅｙ．ｏｒｇ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｃｋｄ－ｅｐｉ－ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ－ｅｑｕａｔｉｏｎ－２００９）。

血液学検査には、平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）、平均赤血球体積（ＭＣＶ）、ヘマトクリット、ヘモグロビン、白血球数、及びリンパ球、単球、好中球、好塩基球、好酸球ならびに血小板の絶対数が含まれる。

血清化学分析には、グルコース、カルシウム、アルブミン、総タンパク、ナトリウム、カリウム、重炭酸塩、塩化物、マグネシウム、血中尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン、アルカリホスファターゼ、リン酸、尿酸、乳酸デヒドロゲナーゼ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、γ－グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）、ビリルビン（総ビリルビン及び直接型ビリルビン）、アミラーゼ及びＣＰＫが含まれる。
・ ベースラインＡＬＴ及びＡＳＴ＝各値は記録されるが、探索的解析におけるこれらのパラメータの統計的評価では、スクリーニング値と投与１日目の投与前値の平均値がベースライン値として使用される。

脂質パネルには、総コレステロール、ＨＤＬ、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、トリグリセリド及びＦＦＡが含まれる。

特定の時点における追加検査としては、糖化アルブミン、ｈｓ－ＣＲＰ、ＡｐｏＢ、Ｌｐ（ａ）及びＨＯＭＡ－ＩＲ（グルコース、インスリン、Ｃ－ペプチドを含む；Ｗａｌｌａｃｅ ２００４）、ならびにＰＥｔｈテストがある。
・ ＨＯＭＡ－ＩＲについては、３つの分析項目（血糖、血清インスリン及びＣ－ペプチド）について３回の採血を行い、各採血の間隔は最低５分とする。
・ ＰＥｔｈテストは、最近のアルコール摂取を評価できる血清バイオマーカーである。この値はアルコールの量と摂取からの時間の両方に依存する。この検査はスクリーニング時及び２８日目に評価される。既往歴、症状または臨床検査の評価（肝機能検査値の上昇など）に基づき、過度のアルコール摂取が懸念される場合は、治験責任医師の判断により、他の時期に実施してもよい。

尿検査はディップスティック検査で行われ、ディップスティック検査で血液またはタンパクが少量（１＋）、中程度（２＋）もしくは多量（３＋）の場合は、反射顕微鏡検査が行われる。２回の採尿で尿タンパクが痕跡量超であった場合は、尿タンパク及びアルブミンのスポット検査を行う。

女性対象には尿による妊娠検査を実施する。

臨床検査はスクリーニング時に一度だけ繰り返される場合がある。有害事象の評価において、医学的に正当な理由がある場合には、治験責任医師の判断により追加の臨床検査評価が行われる場合がある。

１２誘導心電図

１回の１２誘導ＥＣＧ測定が、対象が仰臥位で少なくとも１０分間安静にしてから行う。外部からの刺激は最小限に抑えなければならない。この間、ビデオゲーム、テレビ視聴及び会話は禁止される。試験にはデジタルＥＣＧ装置を使用する。ＥＣＧの時点がいずれかの血液サンプルと重なる場合、血液サンプルは予定通りの時点で採取し、ＥＣＧは同その時点でから±１０分の間隔を空けて実施される。また、可能な限り、対象はＥＣＧを実施する前２時間以内に食事をしてはならない。

ＥＣＧは、心拍数を自動的に計算し、ＰＲ、ＲＲ、ＱＲＳ、ＱＴ、及びＱＴｃＦ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａ補正式）を測定するＥＣＧ装置を用いて測定する。可能な限り、研究期間中同じ対象に同じＥＣＧ装置を使用するべきである。ＥＣＧ検査は、治験依頼者が承認する研究ユニットのＳＯＰに従って実施されなければならない。

実施例６：探索的第２Ａ相、駆出率が保持された肥満性心不全（ＨＦｐＥＦ）を有する対象の治療のための化合物１の研究

本研究は第２Ａ相無作為化並行群間プラセボ対照二重盲検対象内用量漸増試験であり、化合物１とプラセボを３用量水準で投与する。推定６２名の参加者が登録される。対象は化合物１またはプラセボのいずれかに無作為（１：１）に割り付けられる。２つの用量水準（１５０ｍｇ／日、次いで３００ｍｇ／日）を２０日間ずつ順次投与し、前２用量で安全性と忍容性が証明された場合、３番目の最高用量である４５０ｍｇ／日に到達する。４５０ｍｇの高用量投与は合計９４日間継続し、最終投与から１４日前以内に安全性フォローアップ来院を行う。

対象は、評価日程に従う特定の病歴、身体所見、臨床検査及び画像評価に基づき、適格性を判断するために４０日間にわたってスクリーニングを受ける。スクリーニングのための臨床施設来院は１回とされているが、スケジュールの問題により、スクリーニング手続きを完了するために追加来院が必要となる場合がある。これらの評価の多くは、薬剤投与前のベースラインとなる。ＭＲＩ、ＤＥＸＡ、臨床血液／血漿測定、経胸壁心エコー及びＣＰＥＴを含むすべての評価には中央検査室が使用される。

化合物１は、駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）を有する肥満対象の心血管系機能を改善する有効性が評価されている。

包含基準：
１．４０歳以上の成人男性または女性。
２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ（ＩＲＢ）またはＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＥＣ）が承認したインフォームド・コンセント書式（ＩＣＦ）に記載された情報を理解する能力があり、研究手順の開始前に同書式に署名しなければならない。
３．体格指数（ＢＭＩ）＞３０ｋｇ／ｍ２。
４．治験責任医師の判断により、ＨＦの徴候及び症状があり、以下の重症度基準を満たす：
ａ．ＫＣＣＱ ＯＳＳ＜８０；ｂ．ＮＹＨＡ分類クラスＩＩ～ＩＩＩ；ｃ．ベースラインでのピークＶＯ２が女性で１８ｍＬ／ｋｇ／分未満、男性で２０ｍＬ／ｋｇ／分未満；ｄ．ベースラインでの呼吸交換比（呼吸商）（ＲＥＲ［ＲＱ］）が１．０超；ｅ．左室駆出率（ＥＦ）＞５０％；ｆ．以下のＨＦの客観的基準のうち少なくとも１つ：ｉ．過去１年以内のＨＦを主因とする入院記録、または過去１年以上の場合は、心エコー検査における以下のような追加の構造的心疾患（左房容積の増大または左室肥大、Ｌａｎｇ， ２０１５による性特異的切点による）を伴う記録：
・ 左室肥大（ＬＶＨ）：
ａ．男性：中隔壁の厚さ（ｃｍ）１．１超、または後壁の厚さ１．１超；
ｂ．女性：中隔壁の厚さ（ｃｍ）１．０超、または後壁の厚さ１．０超；
・ 左房拡張（ＬＡＤ）：ＡＰ寸法（ｃｍ）：男性４．０超；女性３．８超；ｉｉ．最近１年間の安静時肺毛細血管楔入圧（ＰＣＷＰ）１５ｍｍＨｇ超（または左室拡張末期圧［ＬＶＥＤＰ］１８ｍｍＨｇ超）または運動時２５ｍｍＨｇ超（または２．０ｍｍＨｇ／Ｌ／ｍｉｎ）；ｉｉｉ．過去１年間のドップラー及び組織ドップラー画像における安静時の中隔環のＥ／ｅ’比１４超；またはｉｖ．心房細動／粗動のない対象では１２５ｐｇ／ｍｌ超、心房細動／粗動のある対象では３７５ｐｇ／ｍＬ超として定義される、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰが現在上昇している。
５．参加者は研究期間中、安定した身体活動水準を維持し、研究期間中は運動トレーニングプログラムに参加しないことに同意しなければならない。
６．参加者は安定した食生活を維持しなければならず、また研究開始前または研究期間中に減量プログラムに参加する予定がないこと。
７．スクリーニング時に甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）及び遊離サイロキシン（Ｔ４）検査による甲状腺プロファイルで評価される甲状腺機能が正常であること。甲状腺疾患の安定した病歴があり、甲状腺治療薬を最低４ヶ月間安定した用量で服用している対象は登録可能である。
８．歩行可能（車椅子やスクーターに依存しない）で、６ＭＷＴを含む直立運動負荷試験を実施できる。
９．スクリーニング前３０日間の安定した（新たな投薬または既存の投薬量の５０％以上の変更がないこととして定義）投薬量。利尿薬については以下の特別な基準を追加：
ａ．ループ利尿薬またはサイアザイド利尿薬による治療を受けている場合は、利尿薬の投与日程を柔軟に変更できる安定した投薬計画でなければならない。

除外基準：
１．治験責任医師の判断による心血管系以外の理由による余命１年未満。
２．５年以内の悪性腫瘍の既往歴（非高悪性度皮膚癌、上皮内癌、または低悪性度前立腺癌を除く）。
３．過去９０日以内の１０ポンド以上の体重変化（増減）（自己申告または記録による）。
４．スクリーニング前の肥満手術、または研究期間中の肥満手術の予定。
５．スクリーニングから１年以内にＧＬＰ－１受容体拮抗薬による治療開始。
６．スクリーニングから６ヶ月以内にＳＧＬＴ２阻害薬による治療開始。
７．ＭＲＩに対する不耐性、または以下のＭＲＩ検査に禁忌とされる状態（ただし、これらに限定されない）：
ａ．外科用クリップ／金属インプラント／榴散弾／体内電気インプラントを身につけている；または、
ｂ．対象の体格またはスキャナーの体重許容限界（一般に３５０ポンドまたは４００ポンド、メーカーによる）を超えるため、ＭＲＩスキャナーに収まらない；または、
ｃ．閉所恐怖症：ＭＲＩを実施できないような重度の閉所恐怖症の既往歴。
８．進行中の利尿薬の静注を必要とする急性代償性ＨＦ、または最近（スクリーニング前１ヶ月未満）のＨＦによる入院。
９．原発性心筋症（例：収縮性、拘束性、浸潤性、中毒性、肥大型［先天性］、先天性、または治験責任医師の判断によるその他の原発性心筋症）。
１０．進行中の心筋炎（ＣＯＶＩＤ誘発性またはそれ以外）。
１１．進行中の膠原病血管疾患。
１２．治験責任医師の意見において、進行中の中等度以上の左側または右側の弁膜症。
１３．試験参加期間中に心臓手術またはカテーテル治療の予定。
１４．過去３年以内にＥＦが４０％未満であった記録。
１５．スクリーニング時に頻脈（１１０拍／分超）。
１６．心拍数反応が制御できない、またはスクリーニング時の心電図で安静時心拍数が１１０ｂｐｍを超える、心房細動または心房粗動。対象は、心房細動を管理するための適切な薬物調整後に再スクリーニングを受けてよい。本研究には、この条件の対象は最大１６名まで登録可能である。
１７．未治療の、生命を脅かす不整脈。
第２ａ相試験結果
化合物１の第２ａ相代謝試験は、６１日間の無作為化二重盲検プラセボ対照試験であり、肝脂肪が高値（８％以上）の肥満の対象（体格指数２８～４５ｋｇ／ｍ^２）における、化合物１の３つの用量水準（１５０ｍｇ、３００ｍｇ、及び４５０ｍｇ）の安全性及び有効性を評価するようにデザインされた。２８歳から６５歳までの年齢範囲の８０名の参加者が無作為に、３つのうちの一つの化合物１治療群またはそろいのプラセボ群に割り付けられ、ＨｂＡ１Ｃ値が５．７％以上で層別化及びブロック化され、１日１回（絶食）投与された。参加者は食事や運動に関する行動を変えないように指示された。第２ａ相試験では、一次的評価項目（ＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪減少）及び二次的評価項目（腹部ＭＲＩによる体重及び脂肪の減少）が達成された。主な結果と考察は以下の通りである：
・ ３つの用量水準すべてにおいて、肝脂肪が統計的に有意に減少した（ＡＮＣＯＶＡによるｐ＜０．０００１）。
○ 肝脂肪の相対的減少は３３％、４３％及び４０％であり、それは低用量、中用量、高用量でそれぞれ４０％、７１％及び７２％の応答者率（相対的減少率３０％超）であった。プラセボの肝脂肪相対減少率は２％、応答者率は５％であった。
・ すべての投与水準で観察された主な心血管系及び代謝系の健康指標は以下の通りである：
○ グルコース制御とインスリン機能の指標である糖化アルブミンが用量依存的に減少した（ｐ＜０．０００１、高用量）。
○ 心血管系リスクの重要なパラメータである炎症マーカー高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）が用量依存的に減少した（ｐ＜０．００５、高用量）。
・ 化合物１の忍容性はすべての用量水準で良好であり、コンプライアンスも良好であった。重篤な有害事象または死亡例は報告されなかった。下痢及びアルコール摂取と関連している一過性の潮紅が、化合物１の対象のそれぞれ２５％及び３１．６％に認められ、それらは最も多く報告された緊急有害事象であった。これらの有害事象の大部分は軽度であり、低用量群では下痢のために化合物１を中止した参加者が１名いた一方で、高用量群ではいかなる理由でも中止した参加者はいなかった。
第２ａ相の具体的な有効性と安全性の結果を以下の図と表に示す：
（１）表５に示すように、化合物１は８週間にわたって良好な忍容性を示した。
（２）体温は図１３と表６に示すように変化する。
（３）図１４に示すようなＰＫ結果（平均±ＳＥＭ）。
（４）図１５及び表７に示すように、すべての用量で治療効果が認められた。
プラセボ補正によるＭＲＩ－プロトン密度脂肪画分（ＰＤＦＦ）のベースライン値からの変化率。
（５）図１６及び表８に示すように、すべての用量で治療効果が認められた。
ＭＲＩ－プロトン密度脂肪画分（ＰＤＦＦ）の共分散分析。ＦＡＳ集団の６１日目におけるベースラインからの平均変化（ＬＳ平均±９５％）
（６）表９に示すように、すべての投与群で治療効果（ＭＲＩ－ＰＤＦＦによる３０％超の肝脂肪減少）が認められた。
（７）図１７及び表１０に示すような、化合物１の用量３００ｍｇ及び４５０ｍｇの１日１回投与における有意な体重減少。
ＩｎＢｏｄｙ体重の反復測定分析。ベースラインＦＡＳ集団からの平均変化（ＬＳ平均±９５％ＣＩ）。
（８）図１８及び表１１に示すように観察された体重。
（９）内臓脂肪組織－図１９及び表１２に示すようなＦＡＳ集団の観察データ。
治療群別ＦＡＳ集団における腹部ＭＲＩ肝容積及び脂肪画分のベースライン値からのプラセボ補正変化率（平均値±ＳＥＭ）。
（１０）図２０及び表１３に示すような、ＦＡＳ集団の皮下脂肪組織観察データ。
治療群別ＦＡＳ集団における腹部ＭＲＩ肝容積及び脂肪画分のベースライン値からのプラセボ補正変化率（平均値±ＳＥＭ）。
（１１）図２１に示すようなＭＲＩによる脂肪減少（総脂肪組織）の確認。
（１２）図２２及び表１４に示すようなＦＡＳ集団の肝容量観測データ。
（１３）図２３に示すように観察された収縮期血圧。
ＦＡＳ集団の６１日目におけるベースラインからの平均変化（平均±ＳＥＭ）
（１４）図２４に示すように観察された拡張期血圧。
ＦＡＳ集団の６１日目におけるベースラインからの平均変化（平均±ＳＥＭ）
（１５）図２５及び表１５に示すように観察された高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）。
ＦＡＳ集団の６１日目におけるベースラインからの平均変化（ＬＳ平均±９５ＣＩ）。

Claims (164)

1. 心血管疾患による症状を患っている対象における心血管リスクまたは死亡率を低下させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
2. 前記症状が、息切れ、労作時の息切れ、めまい、胸痛、失神、疲労、心臓のエネルギー障害、または日常生活活動の制限である、請求項１に記載の方法。
3. 前記日常生活活動の制限が、身の回りの世話、移動、または食事に関する困難である、請求項２に記載の方法。
4. 前記心血管疾患が、心不全、心臓発作、冠動脈疾患、または冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）を含む、請求項１に記載の方法。
5. 前記心不全が、駆出率が保持された心不全（ＨＦｐＥＦ）、駆出率が低下した心不全（ＨＦｒＥＦ）、または駆出率が軽度低下した心不全（ＨＦｍｒＥＦ）を含む、請求項４に記載の方法。
6. 前記対象が、投与後に深刻な心血管事象のリスクの減少を経験する、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
7. 前記深刻な心血管事象が死または疾患の悪化のための入院である、請求項６に記載の方法。
8. 対象におけるＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦまたはＨＦｍｒＥＦを治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
9. 前記対象が、息切れ、労作時の息切れ、心臓のエネルギー障害、めまい、疲労、呼吸困難、動悸（心房細動）、胸部不快感、浮腫、失神、及び日常生活活動の制限から選択される症状のうち少なくとも１つを患っている、請求項８に記載の方法。
10. 前記日常生活動作の制限が、身の回りの世話、移動及び食事に関する困難である、請求項９に記載の方法。
11. 前記対象が、運動耐容能の低下、疲労、倦怠感、運動後の回復時間の増加、及び足首の腫れから選択される少なくとも１つの症状を患っている、請求項８に記載の方法。
12. 前記対象が、冠動脈疾患、高血圧症及び心雑音から選択される少なくとも１つの症状を患っている、請求項８に記載の方法。
13. 前記対象が、投与後に心臓生体エネルギー不足の改善を経験し、前記改善が、ａ）５％超の体重減少、ｂ）血圧の低下、及び／またはｃ）深刻な心血管事象のリスクの低下を含み、前記深刻な心血管事象が、死、疾患の悪化のための入院、及び心筋梗塞から構成される群から選択される、請求項１または８に記載の方法。
14. 前記治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールの投与前及び投与後の運動中の前記対象における、ピーク酸素消費量（ＶＯ_２）及び／またはＶＥ／ＣＯ_２、もしくはＶＥ／ＶＣＯ_２勾配を評価することをさらに含み、投与後の前記対象におけるＶＯ_２の増加が、前記対象におけるＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦまたはそれらの心血管疾患の１つ以上の症候性成分もしくは症状の程度の減少を示す、請求項１または８に記載の方法。
15. 請求項１または８に記載の方法であって、投与後に前記対象のＶＯ_２を増加させる、前記方法。
16. 前記治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールの投与前及び投与後の運動中の前記対象における、６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を評価することをさらに含み、投与後の前記対象における６ＭＷＤの増加が、前記対象におけるＨＦｐＥＦまたはその症状成分あるいは症状のうち少なくとも１つの程度の軽減を示す、請求項１または８に記載の方法。
17. 請求項１または８に記載の方法であって、投与後に６ＭＷＤを増加させる、前記方法。
18. 前記治療が、投与前後に前記対象のＮＹＨＡ分類スコアを評価することをさらに含む、請求項１または８に記載の方法。
19. 投与後のＮＹＨＡスコアの低下が、前記対象における心疾患の程度の低下を示す、請求項１８に記載の方法。
20. 請求項１９に記載の方法であって、投与後の前記対象のＮＹＨＡ分類スコアをクラスＩＩＩからクラスＩＩへ、またはクラスＩＩからクラスＩへ低下させる、前記方法。
21. 対象における血圧を低下させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
22. 前記対象が心血管疾患、高血圧症、抵抗性高血圧症または重篤な高血圧症を患っている、請求項２１に記載の方法。
23. 前記心血管疾患が、心不全、心臓発作、冠動脈疾患または冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）を含む、請求項２２に記載の方法。
24. 前記心不全がＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦまたはＨＦｍｒＥＦを含む、請求項２３に記載の方法。
25. 前記対象が、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦまたはＨＦｍｒＥＦと関連している高血圧症を有する、請求項２１～２４のいずれか１項に記載の方法。
26. 前記対象が、頭痛、息切れ、胸痛、鼻血、めまい、疲労、視力障害、不整脈、血尿、発汗、睡眠障害、及び眼の血斑から選択される少なくとも１つの症状を患っている、請求項２１～２５のいずれか１項に記載の方法。
27. 前記血圧を低下させることが、拡張期血圧を低下させること及び／または収縮期血圧を低下させることを含む、請求項２１～２６のいずれか１項に記載の方法。
28. 投与後に前記対象が少なくとも５ｍｍＨｇの血圧の低下を経験する、請求項２１に記載の方法。
29. 請求項２１記載の方法であって、心血管疾患または心不全を発症するリスクの進行を軽減または遅らせる、前記方法。
30. 前記心不全がＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦまたはＨＦｍｒＥＦを含む、請求項２９に記載の方法。
31. 前記対象が、肥満、過剰体脂肪、糖尿病、高血圧（高血圧症）、脂質異常症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、またはメタボリックシンドロームを患っている、請求項１、８または２１のいずれか１項に記載の方法。
32. 心血管疾患を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、
    ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
    ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
    ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
    ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
    ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
    のうち少なくとも１つを達成する、前記方法。
33. 請求項１～３２のいずれか１項に記載の方法であって、投与後に有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こさない、前記方法。
34. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、頻脈、発汗、頻呼吸及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項３３に記載の方法。
35. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水症、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つによって特徴付けられる、請求項３４に記載の方法。
36. 対象において、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく、ミトコンドリア関連障害または症状を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
37. 前記障害が肥満、過剰体脂肪、糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧、脂質異常症、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症または肝臓疾患である、請求項３６に記載の方法。
38. 前記糖尿病が２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である、請求項３７に記載の方法。
39. 前記心血管疾患が、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む、請求項３７に記載の方法。
40. 前記肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬変性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変または肝細胞癌を含む、請求項３７に記載の方法。
41. 前記症状が、ＮＡＳＨにおける脂肪症、炎症、線維症、肝硬変及び肝細胞傷害のうち少なくとも１つである、請求項３６に記載の方法。
42. 請求項３６～４１のいずれか１項に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、
    ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
    ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
    ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
    ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
    ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
    のうち少なくとも１つを提供する、前記方法。
43. 前記有害事象がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項３６に記載の方法。
44. 前記ミトコンドリア脱共役剤が２，４－ジニトロフェノールである、請求項４３に記載の方法。
45. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高体温、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項３６～４４のいずれか１項に記載の方法。
46. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水症、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つによって特徴付けられる、請求項４５に記載の方法。
47. 前記有害事象が心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項４５に記載の方法。
48. 前記有害事象が心停止と関連している、請求項４７に記載の方法。
49. 対象におけるミトコンドリア関連障害または症状の治療における毒性または副作用を軽減する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
50. 前記障害が肥満、過剰体脂肪、糖尿病、インスリン抵抗性または不耐性、高血圧、脂質異常症、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症または肝臓疾患である、請求項４９に記載の方法。
51. 前記糖尿病が２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である、請求項５０に記載の方法。
52. 前記心血管疾患が、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む、請求項５０に記載の方法。
53. 前記肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非肝硬変性ＮＡＳＨ、肝臓脂肪症、肝線維症、肝硬変または肝細胞癌を含む、請求項５０に記載の方法。
54. 前記症状が、ＮＡＳＨにおける脂肪症、炎症、線維症、肝硬変、及び肝細胞傷害のうち少なくとも１つである、請求項４９に記載の方法。
55. 前記副作用がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項４９に記載の方法。
56. 前記ミトコンドリア脱共役剤が２，４－ジニトロフェノールである、請求項５５に記載の方法。
57. ｉ）２，４－ジニトロフェノールの半減期（ｔ_１／２）を延長すること；
    ｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの血漿中濃度が最大に達するまでの時間（Ｔ_ｍａｘ）を遅らせること；
    ｉｉｉ）２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）を低下させること；及び、
    ｉｖ）曲線下面積（ＡＵＣ）を増加させること
    のうち少なくとも１つを含む、請求項５６に記載の方法。
58. 前記平均半減期が約２０～５０時間、２５～４０時間、または３０～４０時間に延長される、請求項５７に記載の方法。
59. 前記中央値Ｔ_ｍａｘが少なくとも６時間または少なくとも８時間に延長される、請求項５７に記載の方法。
60. 前記中央値Ｔ_ｍａｘが約６～８時間または約６～１０時間に延長される、請求項５７に記載の方法。
61. 前記２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘを低下させることが、投与後に、前記対象において、約８０ｎｇ／ｍＬ～約８３００ｎｇ／ｍＬの２，４－ジニトロフェノールのＣ_ｍａｘの定常状態を提供することを含む、請求項５７に記載の方法。
62. 請求項５７に記載の方法であって、前記対象において、約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比を提供する、前記方法。
63. 前記副作用が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高体温、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項４９～６２のいずれか１項に記載の方法。
64. 前記副作用が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水症、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つを特徴とする、請求項６３に記載の方法。
65. 前記副作用が、心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項６３に記載の方法。
66. 前記副作用が心停止と関連している、請求項６５に記載の方法。
67. 対象におけるミトコンドリア関連の障害または症状を治療する際の過剰摂取を予防する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
68. 前記障害が、肥満、過剰体脂肪、糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症または肝疾患である、請求項６７に記載の方法。
69. 前記糖尿病が２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である、請求項６８に記載の方法。
70. 前記心血管疾患が、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む、請求項６８に記載の方法。
71. 前記肝臓疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬変性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変または肝細胞癌を含む、請求項６８に記載の方法。
72. 前記症状が、ＮＡＳＨにおける脂肪症、炎症、線維症、肝硬変、及び肝細胞傷害のうち少なくとも１つである、請求項６７に記載の方法。
73. 前記過剰投与がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項６７に記載の方法。
74. 前記ミトコンドリア脱共役剤が２，４－ジニトロフェノールである、請求項７３に記載の方法。
75. 請求項７４に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、
    ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
    ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
    ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
    ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
    ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
    のうち少なくとも１つを提供する、前記方法。
76. 請求項６７～７５のいずれか１項に記載の方法であって、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こさない、前記方法。
77. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項７６に記載の方法。
78. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つを特徴とする、請求項７６に記載の方法。
79. 前記有害事象が、心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項７６に記載の方法。
80. 前記有害事象が心停止と関連している、請求項７９に記載の方法。
81. 対象において、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく、代謝速度を増加させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
82. 前記対象が、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つを患っている、請求項８１に記載の方法。
83. 有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こすことなく安静時代謝率を増加させることを含む、請求項８１または８２に記載の方法。
84. 前記安静時代謝率が少なくとも１０％増加する、請求項８３に記載の方法。
85. 前記安静時代謝率が少なくとも２０％増加する、請求項８３に記載の方法。
86. 対象の安静時エネルギー消費量を増加させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
87. 前記対象が、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つを患っている、請求項８６に記載の方法。
88. 前記対象が、投与後、少なくとも１０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する、請求項８１～８７のいずれか１項に記載の方法。
89. 前記対象が、投与後、少なくとも２０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する、請求項８１～８７のいずれか１項に記載の方法。
90. 前記対象が、投与後、約３０％の安静時エネルギー消費の増加を経験する、請求項８１～８７のいずれか１項に記載の方法。
91. 対象における代謝異常を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
92. 前記対象が、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つを患っている、請求項９１に記載の方法。
93. 前記対象が、血圧上昇、高血糖、腰回りの過剰な体脂肪、及び異常なコレステロールまたはトリグリセリドレベルのうち少なくとも１つを患っている、請求項９１に記載の方法。
94. 請求項８６～９３のいずれか１項に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こさない、前記方法。
95. 前記有害事象がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項８１～９４のいずれか１項に記載の方法。
96. 前記ミトコンドリア脱共役剤が２，４－ジニトロフェノールである、請求項９５に記載の方法。
97. 請求項９６に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、
    ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
    ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
    ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
    ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
    ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
    のうち少なくとも１つを提供する、前記方法。
98. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高体温、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項９４～９７のいずれか１項に記載の方法。
99. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つによって特徴付けられる、請求項９８に記載の方法。
100. 前記有害事象が、心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項９８に記載の方法。
101. 請求項１００に記載の方法であって、ｘｘ日間の治療期間中にｘｘ％未満の患者に心血管有害事象が生じる、前記方法。
102. 前記対象のインスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ－ＩＲ）、空腹時血糖濃度、糖化アルブミン濃度、グリコシル化ヘモグロビン（ヘモグロビンＡ１ｃ、ＨｂＡ_１ｃ）のうち少なくとも１つを、前記治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール投与前及び投与後に決定する段階をさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
103. 投与後、前記対象が体重、血圧及び血糖のうち少なくとも１つの減少を経験する、請求項１０２に記載の方法。
104. 前記対象が、
     ｉ）少なくとも５％または少なくとも１０％の体重の減少；
     ｉｉ）少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下；
     ｉｉｉ）少なくとも０．５％または少なくとも１．５％のＨｂＡ_１ｃの減少；
     ｉｖ）少なくとも１０％の脂質の減少；及び、
     ｖ）少なくとも５０％の肝脂肪の減少
     のうち少なくとも１つを経験する、請求項１０３に記載の方法。
105. 請求項８１～１０４のいずれか１項に記載の方法であって、アテローム性動脈硬化症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つの進行を遅らせる、前記方法。
106. 請求項８１～１０５のいずれか１項に記載の方法であって、人体の自然なプロセスを促進して心代謝プロセスを改善する、前記方法。
107. 対象における心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
108. 前記心血管疾患が、心不全、ＨＦｐＥＦ、ＨＦｒＥＦ、ＨＦｍｒＥＦ、心臓発作、冠動脈疾患またはＣＨＤを含む、請求項１０７に記載の方法。
109. 前記肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬変性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変または肝細胞癌を含む、請求項１０７に記載の方法。
110. 前記対象が、腹痛、中腹部、胸部、または背部領域の痛み、胃腸痛、呼吸困難、食欲不振、吐き気、嘔吐、膵臓の炎症、記憶喪失、認知症、黄色板腫、角膜輪、及び黄色腫のうち少なくとも１つを患っている、請求項１０７に記載の方法。
111. 前記対象が、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している中等度の高トリグリセリド血症；または心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している重度の高トリグリセリド血症を有する、請求項１０７～１１０のいずれか１項に記載の方法。
112. 対象における重度の高トリグリセリド血症を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
113. 前記対象が、腹痛、中腹部、胸部、または背部領域の痛み、胃腸痛、呼吸困難、食欲不振、吐き気、嘔吐、膵臓の炎症、記憶喪失、認知症、黄色板腫、角膜輪、及び黄色腫のうち少なくとも１つを患っている、請求項１１２に記載の方法。
114. 前記対象が、５００ｍｇ／ｄＬを超えるトリグリセリド血中レベルを有する、請求項１１２または１１３に記載の方法。
115. 前記対象が、治療抵抗性の重度の高トリグリセリド血症である、請求項１１２～１１４のいずれか１項に記載の方法。
116. 前記対象が、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患と関連している重度の高トリグリセリド血症を有する、請求項１１２～１１５のいずれか１項に記載の方法。
117. 前記対象が成人男性である、請求項１１２～１１６のいずれか１項に記載の方法。
118. 前記対象がヒスパニック系の子孫である、請求項１１２～１１７のいずれか１項に記載の方法。
119. 請求項１０７～１１８のいずれか１項に記載の方法であって、低密度リポタンパク質コレステロールレベルを低下させること及び／または非高密度リポタンパク質コレステロールレベルを低下させることを含む、前記方法。
120. 請求項１１９に記載の方法であって、
     ｉ）トリグリセリドレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること；
     ｉｉ）低密度リポタンパク質コレステロールレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること；及び、
     ｉｉｉ）非高密度リポタンパク質コレステロールレベルを少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも２０％低下させること
     のうち少なくとも１つを含む、前記方法。
121. 請求項１０７～１２０のいずれか１項に記載の方法であって、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、肥満、高血圧症、糖尿病、インスリン抵抗性、及び／または肝疾患のうち少なくとも１つの進行を遅らせる、及び／または投与後に深刻な心血管事象のリスクを低減する、前記方法。
122. 前記深刻な心血管事象が、死または疾患の悪化のための入院である、請求項１２１に記載の方法。
123. 請求項１０７～１２２のいずれか１項に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こさない、前記方法。
124. 前記有害事象がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項１２３に記載の方法。
125. 前記ミトコンドリア脱共役剤２，４－ジニトロフェノールである、請求項１２４に記載の方法。
126. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高体温、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項１２３～１２５のいずれか１項に記載の方法。
127. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つによって特徴付けられる、請求項１２６に記載の方法。
128. 前記有害事象が、心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項１２６に記載の方法。
129. 前記有害事象が心停止である、請求項１２８に記載の方法。
130. 対象における肝脂肪を少なくとも５０％減少させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
131. 前記対象が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、及び／または肝臓脂肪症を患っている、請求項１３０に記載の方法。
132. 前記対象の、投与前及び投与後におけるＦｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制振過渡弾性撮像法（ＶＣＴＥ）、Ｆｉｂｒｏｓｃａｎ（登録商標）制御減衰パラメータ（ＣＡＰ）スコア、磁気共鳴画像法プロトン密度脂肪画分（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）、及び強化された肝線維症（ＥＬＦ）スコアを決定する段階をさらに含む、請求項１３０または１３１に記載の方法。
133. 前記対象の投与前のＣＡＰスコアが３００ｄＢ／ｍを超える、請求項１３２に記載の方法。
134. 前記対象が、投与前にＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪を少なくとも８％有する、請求項１３２に記載の方法。
135. 前記対象における脂質を少なくとも１０％減少させる方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
136. 前記対象が、肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝性疾患、フリードライヒ失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬化性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬化性ＮＡＳＨ、肝脂肪症、肝線維症、肝硬変、及び肝細胞癌のうち少なくとも１つを患っている、請求項１３５に記載の方法。
137. 前記対象の、投与前及び投与後の血清高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ－ＣＲＰ）、Ｌｐ（Ａ）、Ａｐｏ Ｂ、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、総コレステロール、トリグリセリド、及び遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を測定する段階をさらに含む、請求項１３５または１３６に記載の方法。
138. 請求項１２９～１３７のいずれか１項に記載の方法であって、
     ｉ）少なくとも１０％の体重減少；
     ｉｉ）少なくとも０．５％、または少なくとも１．５％のＨｂＡ_１ｃの減少；
     ｉｉｉ）少なくとも５ｍｍＨｇの血圧低下；
     ｉｖ）少なくとも１０％の脂質の減少；
     ｖ）少なくとも５０％の肝脂肪の減少；
     ｖｉ）血清アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）の減少；及び、
     ｖｉｉ）アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）の低下
     のうち少なくとも１つを提供する、前記方法。
139. 請求項１２９～１３８のいずれか１項に記載の方法であって、投与後に、前記対象において、有害事象の臨床的に有意なリスクを引き起こさない、前記方法。
140. 前記有害事象がミトコンドリア脱共役剤と関連している、請求項１３９に記載の方法。
141. 前記ミトコンドリア脱共役剤が２，４－ジニトロフェノールである、請求項１４０に記載の方法。
142. 前記有害事象が、悪心、嘔吐、発汗、めまい、頭痛、白内障、緑内障、発熱、高体温、頻脈、発汗、頻呼吸、及び死のうち少なくとも１つを含む、請求項１３８～１４０のいずれか１項に記載の方法。
143. 前記有害事象が、体温上昇、心拍数上昇、異常発汗、紅斑、発汗、脱水、及び異常に速い呼吸のうち少なくとも１つによって特徴付けられる、請求項１４２に記載の方法。
144. 前記有害事象が、心血管系の虚脱、心停止、及び／または死と関連している、請求項１４２に記載の方法。
145. 前記有害事象が心停止と関連している、請求項１４４に記載の方法。
146. 請求項１０７～１４５のいずれか１項に記載の方法であって、約３０ｍｇ～約１４００ｍｇの５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールの投与後に、前記対象において、
     ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
     ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
     ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
     ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
     ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
     のうち少なくとも１つを提供する、前記方法。
147. 対象におけるがんを治療またはそのリスクを低減する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、前記方法。
148. 前記がんが、胆道癌、膀胱癌、脳腫瘍（すなわち、髄膜腫）、乳癌（閉経後）、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜／子宮体癌、食道癌、胆嚢癌、頭頸部癌、腎臓（ｋｉｄｎｅｙ）／腎臓（ｒｅｎａｌ）癌、白血病、肝臓癌、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣癌、膵臓癌、胃癌及び甲状腺癌、ならびに前立腺癌を含む、請求項１４７に記載の方法。
149. 前記がんが、肥満、過剰体脂肪、糖尿病、高血圧、脂質異常症、代謝性疾患、肝臓疾患、及び／または心血管疾患と関連している、請求項１４７または１４８に記載の方法。
150. 肥満、過剰体脂肪、２型糖尿病、インスリン抵抗性または不耐症、高血圧、脂質異常症、動脈硬化症、高トリグリセリド血症、後天性リポジストロフィー、遺伝性リポジストロフィー、部分的リポジストロフィー、メタボリックシンドローム、レット症候群、加齢と関連しているメタボリックシンドローム、活性酸素種（ＲＯＳ）の増加と関連している代謝疾患を治療する方法、フリードライヒ失調症、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、非硬変性ＮＡＳＨ、肝線維症を伴う非硬変性ＮＡＳＨ、肝臓脂肪症、肝線維症、肝硬変、がん、または肝細胞癌を治療する方法であって、治療有効量の５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾール、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、
     ｉ）約８０ｎｇ／ｍＬから約８３００ｎｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の定常状態；
     ｉｉ）約２０～５０時間、約２５～４０時間、または約３０～４０時間の、２，４－ジニトロフェノールの平均半減期（ｔ_１／２）；
     ｉｉｉ）約６～８時間または約６～１０時間の、２，４－ジニトロフェノールが最高血漿中濃度（Ｔ_ｍａｘ）に達するまでの時間の中央値；
     ｉｖ）約３ｈ＊μｇ／ｍＬ～約４２０ｈ＊μｇ／ｍＬの、２，４－ジニトロフェノールの無限大に外挿された曲線下面積の中央値（ＡＵＣ_ｉｎｆ）；及び、
     ｖ）約１８のＡＵＣ／Ｃ_ｍａｘ比
     のうち少なくとも１つを達成する、前記方法。
151. 前記対象が、高まった体格指数（ＢＭＩ）を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
152. 前記対象が、約２８．０ｋｇ／ｍ^２～約４５．０ｋｇ／ｍ^２のＢＭＩを有する、請求項１５１に記載の方法。
153. 治療される前記対象が、実施例５または実施例６の包含基準及び除外基準を満たす、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
154. 前記対象が、投与前に絶食状態にある、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
155. 前記対象が、投与前に摂食状態にある、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
156. 前記治療有効量が、１日当たり約３０ｍｇ～約１４００ｍｇ、１日当たり約１００ｍｇ～約１０００ｍｇ、１日当たり約１５０ｍｇ～約６００ｍｇ、または１日当たり２００ｍｇ～５５０ｍｇである、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
157. 前記治療有効量が、１日当たり約３０ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、１７０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３４０ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５１０ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇ、１１５０ｍｇ、１２００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ、１３５０ｍｇまたは１４００ｍｇである、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
158. 前記治療有効量が、１日当たり約３０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、１０５０ｍｇまたは１４００ｍｇである、請求項１５７に記載の方法。
159. 前記治療有効量が、１日当たり約２００ｍｇ、４００ｍｇまたは５５０ｍｇである、請求項１５７に記載の方法。
160. 前記治療有効量が、１日当たり約１７０ｍｇ、３４０ｍｇ、５１０ｍｇである、請求項１５７に記載の方法。
161. 前記治療有効量が、１日当たり約１５０ｍｇ、３００ｍｇ、４５０ｍｇである、請求項１５７に記載の方法。
162. ５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールを１日１回経口投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
163. ５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールを１日１回、２週間、４週間、６週間、８週間、１０週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、６ヶ月間、８ヶ月間または１年間にわたり投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
164. ５－［（２，４－ジニトロフェノキシ）メチル］－１－メチル－２－ニトロ－１Ｈ－イミダゾールが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセル中で投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。