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JP2023540701A - グリコシル化ｉｌ－２タンパク質及びその使用 - Google Patents

グリコシル化ｉｌ－２タンパク質及びその使用 Download PDF

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JP2023540701A
JP2023540701A JP2023513563A JP2023513563A JP2023540701A JP 2023540701 A JP2023540701 A JP 2023540701A JP 2023513563 A JP2023513563 A JP 2023513563A JP 2023513563 A JP2023513563 A JP 2023513563A JP 2023540701 A JP2023540701 A JP 2023540701A
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オッケルズ，シーグル
ビー ローゼン，デイヴィッド
ロイファー，ブルクハルト
クナッペ，トーマス
Original Assignee
アセンディス ファーマ オンコロジー ディヴィジョン エー／エス
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Abstract

本発明は、式(Tag1)y-(Ala)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z(I)(式中、配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、かつ少なくとも1個のグリコシル化モチーフを含み、配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、Tag1及びTag2は、独立してタグ部分であり、Alaは、アラニン残基であり、xは0又は1、yは0又は1、zは0又は1である)のIL-2タンパク質配列、そのコンジュゲート、及び細胞増殖障害の治療におけるそれらの使用に関する。【選択図】 なし

Description

本発明は、式(Tag1)y-(Ala)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z(I)(式中、配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、かつ少なくとも1個のグリコシル化モチーフを含み、配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、Tag1及びTag2は、独立してタグ部分であり、Alaは、アラニン残基であり、xは0又は1、yは0又は1、zは0又は1である)のIL-2タンパク質配列、そのコンジュゲート、及び細胞増殖障害の治療におけるそれらの使用に関する。
健康なヒトでは、免疫系はしばしば、健康な細胞とがん細胞とを識別することができる。所与の細胞をがん性であると同定すると、免疫系は典型的には、それを除去する。しかし、免疫系が、例えば急性若しくは慢性的な欠陥によって不全である場合、又は圧倒されている場合、不全となった免疫系ががん細胞を区別して除去することができないために、がんが発生し得る。がんに罹っている患者では、患者への免疫調節タンパク質の投与は、免疫系のがん細胞を除去する能力が増強されるようにその患者の免疫系を活性化するために役立ち得る。ウイルス感染症に罹っている患者では、患者への免疫調節タンパク質の投与は、免疫系のウイルス感染症を除去する能力が増強されるようにその患者の免疫系を活性化するために役立ち得る。同様に、健康患者においてでさえ、ワクチンに対する免疫応答を、そのような免疫調節タンパク質の追加によって増強することができる。
ある特定のがんに罹っている患者の治療に使用される1つのそのような免疫調節タンパク質は、インターロイキン-2(IL-2)である。ヒトIL-2は153アミノ酸の前駆体ポリペプチド(全長)として合成され、次いで成熟IL-2へとプロセシングされる。成熟ヒトIL-2は、133アミノ酸からなる15.5kDaの4個のα-ヘリックスバンドル糖タンパク質である。IL-2は、免疫エフェクター細胞の生成、分化、生存、及び恒常性において中心的な役割を果たす。IL-2は、活性化CD4+ヘルパーT細胞によって合成され、異なる受容体相互作用を通して、IL-2は免疫応答を免疫又は寛容に向けて調節することができる。
IL-2は、IL-2受容体(IL-2R)に結合することによって作用する。α-(CD25)、β-(CD122)、及び共通のγ-(γc、CD132)サブユニットの会合によって、三量体の高親和性IL-2Rαβγがもたらされる。二量体の中親和性のIL-2Rβγは、β-及びγ-サブユニットからなり、50分の1の親和性でIL-2に結合する。IL-2Rαは、IL-2シグナル伝達にとって必要ではないが、三量体受容体の高親和性結合を付与する一方、β-及びγ-サブユニットは、シグナル伝達を媒介する。IL-2Rβγは、NK細胞、単球、マクロファージ、γδT細胞、特にVγ9Vδ2 T細胞、並びに休止CD4+及びCD8+ T細胞上で発現されるが、IL-2Rαβγは、活性化T及びNK細胞上で一過性に誘導され、制御性T細胞、並びに2型自然リンパ球細胞(ILC2)、好酸球及び内皮細胞上で構成的に発現される。IL-2が自然及び適応エフェクター細胞を増殖及び活性化させる能力は、その抗腫瘍活性の基盤である。
患者において、IL-2は、高用量(すなわち、ヒトにおいて600000～720000IU/kg体重を1日3回、最大14用量/サイクル)を投与した場合に、エフェクターT及びNK細胞を含む細胞傷害性リンパ球の増加によって特徴付けられる抗腫瘍有効性を刺激することができる。おそらくこの治療の間、高用量の投与後に全てのT細胞がIL-2によって刺激される。しかしながら、治療サイクルが終了し、並びに任意の個々の用量の投与の後の時点でIL-2レベルが低下する。その結果、IL-2は限定的となり、IL-2Rαβγを発現する制御性T(Treg)細胞が、残存している野生型IL-2に関してIL-2Rβγを発現しているエフェクターT細胞を打ち負かすことになる。
しかし、IL-2の抗腫瘍免疫は、重度の心血管、肺、肝臓、消化管、神経学的、及び血液学的副作用によって用量が制限されており、そのためこれは、専門の施設の患者に限って投与されている。これらの有害事象の多くは、毛細血管漏出症候群としても知られる血管漏出症候群(VLS)によって特徴付けられる。VLSを引き起こす機構はいくつか提唱されており、その多くは、野生型IL-2とIL-2Rαβγ発現細胞、例えば、ILC2、好酸球、及び内皮細胞との相互作用を伴う。
抗腫瘍免疫応答を有意に増強するエフェクターCD4+ T細胞、CD8+ T細胞、γδT細胞、特にVγ9Vδ2 T細胞、及びNK細胞は、IL-2RのIL-2Rβγ型を優先的に発現する。このため、IL-2Rβγに結合し、そのアゴニストである化合物の投与は、腫瘍に対する免疫応答を増強すると予想することができる(例えば、CD4+ T細胞、CD8+ T細胞、γδT細胞、特にVγ9Vδ2 T細胞、及びNK細胞の増殖及び作用活性を増加させることによって)。
このため、IL-2Rβγ選択的アゴニスト(IL-2Rαに対する結合が低減された若しくはそれに結合しない、又はIL-2Rβγに対する結合が増強された)の投与は、それにより肺浮腫、低血圧及び好酸球増加症などの全身性の血管漏出副作用を低減し、治療ウィンドウの改善を提供すると予想されることから、ある特定のがんに罹っている患者にとって有益となるであろう。
そのようなバイアスIL-2、すなわち、IL-2Rβγに優先的に結合するIL-2タンパク質を合成する1つの方法は、IL-2のIL-2Rαサブユニットに対する結合が遮断されるように、立体障害を導入することである。これは、例えば、国際公開第2019/185705号A1に示されているように、ある特定の部分をIL-2配列中の内因性又は変異アミノ酸にコンジュゲートさせて、非IL-2Rα結合バイアスを媒介することによって、達成することができる。しかし、そのような変異又はバイアスIL-2タンパク質を十分な収量及び品質で製造することは困難な可能性があり、前記部分をIL-2にコンジュゲートさせることは追加の合成ステップを必要とし、このことはコストを増加させるほか、品質及び全体的収量に負の影響を及ぼし得る。
したがって、本発明の目的は、上記の欠点を少なくとも部分的に克服することである。
この目的は、式(I)
(Tag1)y-(Ala)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z(I)
［式中、
配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、
配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、少なくとも1つのグリコシル化モチーフを含み、
配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、
Tag1及びTag2は、独立して、タグ部分であり、
Alaは、アラニン残基であり、
xは、0又は1であり、
yは、0又は1であり、
zは、0又は1である］
のIL-2タンパク質配列によって達成される。
驚くべきことに、理論に拘束されることはないが、IL-2Rα結合を媒介するIL-2バリアントのアミノ酸配列の特定の位置へのグリコシル化モチーフの導入は、いかなる追加のコンジュゲーションステップも回避しながら、効率的な部位特異的グリコシル化をもたらし、Treg活性化の低下及び持続的なCD8+ T細胞活性によって実証される効率的なIL-2Rβγ結合バイアスを提供することが見出された。
驚くべきことに、IL-2Rα結合領域へのグリコシル化モチーフの挿入は、ある特定の実施形態では、意図した部位で特に高いグリコシル化率をもたらし、グリコシル化IL-2バリアントの発現は、驚くべきことに、非グリコシル化IL-2バリアントの発現よりも効率的であった。その上、理論には拘束されないが、このグリコシル化により、いかなる追加の部分のコンジュゲーションも必要とせずに、IL-2Rα+細胞の活性化が効果的に遮断され、それ故にバイアスIL-2の製造がより効率的になった。
本発明において、用語は、以下の意味で使用される。
一般に、用語「インターロイキン-2」又は「IL-2」は、リンパ球の生成、生存、及び恒常性において中心的な役割を果たすことによって特徴付けられる、好ましくは哺乳動物種に由来する、より好ましくは霊長類種に由来する、最も好ましくはヒトに由来する全てのIL-2タンパク質、並びにそのバリアント、アナログ、オルソログ、ホモログ、誘導体、断片、及び融合タンパク質を指し、また、IL-2の天然に存在するバリアント、例えばスプライシングバリアント又は対立遺伝子バリアントも包含する。本発明の文脈において、用語「インターロイキン-2」及び「IL-2」は、特に式(I)の配列を有するタンパク質を指す。
ヒト全長IL-2は、以下の配列を有する：
MYRMQLLSCIALSLALVTNSAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT(配列番号5)
ヒトIL-2の成熟形態は、以下の配列を有する：
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT(配列番号6)
本明細書で使用される場合、用語「バイアスIL-2」は、前記バイアスIL-2のIL-2Rβに対するKDに対する、前記バイアスIL-2のIL-2Rαに対するKDの比が、配列番号213のIL-2のIL-2Rβに対するKDに対する、配列番号213のIL-2のIL-2Rαに対するKDの比より大きい改変IL-2を指す。これは以下の式によって記載される:
Figure 2023540701000001
 ［式中、
Figure 2023540701000002
Figure 2023540701000003
であり、
「IL-2Rαに対するバイアスIL-2のKD」は、バイアスIL-2のIL-2Rαに対するKDであり、
「IL-2Rβに対するバイアスIL-2のKD」は、バイアスIL-2のIL-2Rβに対するKDであり、
「IL-2Rαに対する配列番号213のIL-2のKD」は、配列番号213のIL-2のIL-2Rαに対するKDであり、
「IL-2Rβに対する配列番号213のIL-2のKD」は、配列番号213のIL-2のIL-2Rβに対するKDである］。
配列番号213のIL-2は、以下の配列を有する。
MAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLT(配列番号213)
バイアスIL-2のIL-2Rαに対するKD、バイアスIL-2のIL-2Rβに対するKD、配列番号213のIL-2のIL-2Rαに対するKD、及び配列番号213のIL-2のIL-2Rβに対するKDを決定するために必要な結合親和性/速度論（kinetics）は、以下のようにBiacore機器(GE Healthcare)において測定した表面プラズモン共鳴(SPR)を使用して評価され得る:CM5(又は代替的にC1若しくはCM4)チップ上のヒトFc捕捉表面を、抗ヒトFc抗体による共有結合性コーティングによって調製するか、又は代替的にプロテインAチップを使用する。次に、IL-2Rβ-Fc、又はIL2-Rα-Fcをチップ上に固定する。親和性/速度論定数を測定するために、検体の連続希釈液を、IL-2化合物に関して、例えば1nMから2μMの間、又は30nM及び500μMから出発して、作製する。検体を各々、適切な時間、例えば1～30分間（例えば2分間であってもよく、又は3分間であってもよい）、受容体修飾チップに曝露した後、適切な時間、例えば2～60分間（例えば10分間であってもよい）洗い流す。希釈系列から得た結合曲線を、1:1速度論モデルにフィットさせて、観察された応答ユニット(R)を結合速度定数及び解離速度定数ka及びkdと関連付ける:
Figure 2023540701000004
 ［式中、
tは、時間であり、
Cは、検体の濃度であり、
Rmaxは、表面の最大結合能である］。
速度論1:1モデルを介して決定した場合、解離速度と結合速度との比は、平衡解離定数KDを提供する。
或いは、希釈系列から得た結合曲線を、検体濃度(C)に対する定常状態結合レベル(Req)のプロットから1:1相互作用に関するKDを計算する1:1定常状態相互作用モデル:
Figure 2023540701000005
 ［式中、
Reqは、定常状態結合レベルであり、
Cは、検体の濃度であり、
Rmaxは、表面の最大結合能である］
にフィットさせる。
必ずしもあらゆる計算方法があらゆるバイアスIL-2分子について可能であり得るわけではないことが理解される。例えば、反応が速すぎる場合、1:1速度論モデルを使用することが可能ではない場合があり、1:1定常状態相互作用モデルが使用され得る。例えば、平衡が得られない場合、1:1相互作用モデルを使用することは可能ではない場合があり、1:1速度論モデルが使用され得る。
本明細書で使用される場合、用語「タンパク質原性アミノ酸」は、アラニン(Ala、A)、アルギニン(Arg、R)、アスパラギン(Asn、N)、アスパラギン酸(Asp、D)、システイン(Cys、C)、グルタミン酸(Glu、E)、グルタミン(Gln、Q)、グリシン(Gly、G)、ヒスチジン(His、H)、イソロイシン(Ile、I)、ロイシン(Leu、L)、リジン(Lys、K)、メチオニン(Met、M)、フェニルアラニン(Phe、F)、プロリン(Pro、P)、セリン(Ser、S)、トレオニン(Thr、T)、トリプトファン(Trp、W)、チロシン(Tyr、Y)、及びバリン(Val、V)からなる群から選択されるアミノ酸に関する。各々の三文字記号及び一文字記号は、括弧内に示されている。
本明細書で使用される場合、用語「非タンパク質原性アミノ酸」は、タンパク質原性アミノ酸であるピロリジン(Pyl、O)、セレノシステイン(Sec、U)、2-アミノアジピン酸(ad)、3-アミノアジピン酸(bAad)、β-アラニン(bAla)、2-アミノ酪酸(Abu)、4-アミノ酪酸(4Abu)、6-アミノカプロン酸(Acp)、2-アミノヘプタン酸(Ahe)、2-アミノイソ酪酸(Aib)、3-アミノイソ酪酸(bAib)、2-アミノピメリン酸(Apm)、2,4-ジアミノ酪酸(Dbu)、デスモシン(Des)、2,2'-ジアミノピメリン酸(Dpm)、2,3-ジアミノプロピオン酸(Dpr)、N-エチルグリシン(EtGly)、N-エチルアスパラギン(EtAsn)、ヒドロキシリジン(Hyl)、アロ-ヒドロキシリジン(aHyl)、3-ヒドロキシプロリン(3Hyp)、4-ヒドロキシプロリン(4Hyp)、イソデスモシン(Ide)、アロ-イソロイシン(alle)、N-メチルグリシン(MeGly)、N-メチルイソロイシン(Melle)、6-N-メチルリジン(MeLys)、N-メチルバリン(MeVal)、ノルバリン(Nva)、ノルロイシン(Nle)、及びオルニチン(Orn)のそれぞれのD-立体異性体からなる群から選択されるアミノ酸に関する。各々の略号は、括弧内に示されている。
アミノ酸配列の文脈において、一文字は、化学原子ではなくアミノ酸の一文字記号を指すことが理解される。
配列、例えば、配列A、配列B、配列C又は配列Dにおける1つ以上のアミノ酸の欠失又は挿入は、そのような配列内での特定のアミノ酸の数、すなわち、位置を変化させ得ること、及びそのような場合には、対応する、すなわち、相同なアミノ酸位置が含まれることが理解される。これは、語句「又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に」によって示され得るが、この語句がない場合であっても、そのような対応する位置は含まれる。
本明細書で使用される場合、2つ以上のポリヌクレオチド又はポリペプチド/タンパク質配列の文脈において、用語「同一の」及びパーセント「同一性」は、配列比較アルゴリズムの1つを使用して測定して、最大の対応関係となるように比較及びアラインメントを行った場合に、同じであるか、又は同じであるヌクレオチド若しくはアミノ酸残基を特定のパーセンテージで有する2つ以上の配列又は部分配列を指す。パーセント配列同一性を決定するために好適なそのようなアルゴリズムの一例は、BLASTアルゴリズムである(Altschul et al., J. Mol. Biol., 215: 403-410(1990); Henikoff & Henikoff, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 10915(1989); Karlin & Altschul, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 5873 5787(1993))。BLAST解析を行うためのソフトウェアは、米国国立バイオテクノロジー情報センター(National Center for Biotechnology Information)を通じて公開されている。
本明細書で使用される場合、用語「グリコシル化」は、炭水化物、特にグリカンがアミノ酸の官能基に結合している、タンパク質の翻訳後修飾を指す。グリコシル化は、アスパラギン若しくはアルギニン側鎖の窒素への(N-グリコシル化)、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、若しくはヒドロキシプロリン側鎖のヒドロキシル酸素への(O-グリコシル化)、ホスホセリンのリン酸への(ホスホグリコシル化)、又はトリプトファン側鎖上の炭素への(C-グリコシル化)、炭水化物の結合を含む。O-結合型グリカンは、例えば、N1(NeuAc(a2-3)Gal(b1-3)GalNAc-ol)又はN2(NeuAc(a2-3)Gal(b1-3)(NeuAc(a2-6))GalNAc-ol)であってもよく、ここで、NeuAcは、N-アセチルノイラミン酸(シアル酸)であり、Galは、ガラクトースであり、GalNAc-olは、アセチルガラクトサミニトールである。N-結合型グリカンは、最も内側の2つの糖残基がN-アセチルグルコサミン(GlcNAc)であり、トリマンノシルコア(Man3)によって更に伸長している、パウチマンノース型グリカン(Man3GlcNAc2)であってもよい。それは例えば、パウチマンノースが2つのGlcNAc残基に、トリマンノシルコアの2つの外側のマンノースのそれぞれで1つずつ結合して、二分岐構造を生じる二分岐型G0グリカン(GlcNAc2 Man3 GlcNAc2)であってもよい。そのような二分岐型グリコフォームは、最も内側のGlcNAc残基に結合したフコース(Fuc)残基を含む、ある範囲にわたる追加の糖、並びにGlcNAc、Gal、及びNeuAc残基を含む分枝によって、更に修飾されてもよい。例えば、N-結合型グリカンは、G0構造と比較して1つの追加のガラクトース及び1つの追加のシアル酸残基を保有するG1グリカン(NeuAcGalGlcNAc2Man3GlcNAc2)、又はG0構造と比較して2つの追加のガラクトース及び2つの追加のシアル酸残基を含むG2グリカン(NeuAc2Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2)であってもよい。その上、G0、G1及びG2グリカンは、最も内側のGlcNAc残基でフコシル化されて、G0F(GlcNAc2Man3GlcNAc2Fuc)、G1F(NeuAcGalGlcNAc2Man3GlcNAc2Fuc)、及びG2F(NeuAc2Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2Fuc)グリカンを生じてもよい。上記のグリカンは、トリマンノシルコアと結合した追加のGlcNAc残基によって修飾されて、G0B(GlcNAc3Man3GlcNAc2)、G1B(NeuAcGalGlcNAc3Man3GlcNAc2)、及びG2B(NeuAc2Gal2GlcNAc3Man3GlcNAc2)グリカンを生じてもよい。フコシル化及びトリマンノシルコアでの追加のGlcNAc結合を組み合わせて、G0BF(GlcNAc3Man3GlcNAc2Fuc)、G1BF(NeuAcGalGlcNAc3Man3GlcNAc2Fuc)、及びG2BF(NeuAc2Gal2GlcNAc3Man3GlcNAc2Fuc)グリカンを生じてもよい。N-結合型グリカンは、GlcNAcグリコシルトランスフェラーゼGNTIV及びGNTVの作用を通じた追加のGlcNAc残基の二分岐G0グリカンへの移動によって形成される四分岐グリカンであってもよい。また、N-結合型グリカンは、GlcNAc-Gal伸長(LacNAc)によって修飾された二分岐又は四分岐パウチマンノース型グリカンであってもよい。また、N-結合型グリカンは、GlcNAc-Gal伸長(LacNAc)によって修飾され、更にGal残基及び1つ以上のNeuAc残基に連結された二分岐又は四分岐パウチマンノース型グリカンであってもよい。N-結合型グリカンの更なる例は、「Antibody glycoengineering strategies in mammalian cells」、Wang et al., Biotechnology and Bioengineering、2018 Jun;115(6):1378-1393、及び「SnapShot: N-Glycosylation Processing Pathways across Kingdoms」、Chung et al., Cell, 2017 Sep 21;171(1):258-258.e1に見出すことができ、これらは参照により本明細書に組み込まれる。N-グリコシル化タンパク質はしばしば、1つの特定のN-グリカンによって均一にグリコシル化されるのではなく、N-グリカンの混合物を含む。これはしばしば、特定の部位でのグリカン構造多様性に関する場合はミクロ不均一性と称され、グリコシル化部位及び部位占有率の変動性に関する場合はマクロ不均一性と称される。N-グリコシル化の不均一性の度合いは、タンパク質及び発現宿主に応じて様々であり得る。例えば、IgG1抗体のFcドメインにおけるN-グリコシル化部位は、ヒト並びに哺乳動物発現系では主としてG0F、G1F、及びG2Fグリカンによって占有されるが、CHO細胞で産生される組換え治療用抗体は、典型的にはG0F、G1F、及びG2FグリカンをG0F>G1F>>G2Fの比で含み、マウス骨髄腫SP2/0細胞で産生される組換え抗体は、グリカンをG1F≧G0F>>G2Fの比で含み得る。N-結合型又はO-結合型グリカンの除去は、酵素的又は化学的処理によって達成することができる。ペプチド-N-グリコシダーゼF(PNgaseF)処理によるN-結合型グリカンの除去は、アルギニン(N)のアスパラギン酸(D)へのアミノ酸変化を引き起こし、例えば、配列FGNST(配列番号307)のグリコシル化モチーフは、それによってFGDST(配列番号368)に変換される。
本明細書で使用される場合、用語「部位占有率」は、特定のグリコシル化モチーフで見出されるグリコシル化のパーセンテージを指す。語句「少なくともX%の部位占有率」は、調製物又は医薬組成物に存在するような多数のIL-2分子又は部分について、その全てのIL-2分子又は部分のうちのX%がその特定の部位でグリコシル化されていることを指し、個々の分子又は部分を指すのではないことが理解される。糖タンパク質のN-グリカン構造及び部位占有率は、重要な特性、例えば、受容体結合親和性、安定性、溶解性、抗原性、クリアランス速度及び半減期に影響を及ぼし得る。したがって、組換え糖タンパク質の製造工程では、一般に、再現性よく且つ均一にグリコシル化された産物を得ることが重要である。このため、産物は、生産用宿主細胞によって完全N-グリコシル化形態(完全な部位占有率)で産生されることが有利である。「完全なグリコシル化」のために、全タンパク質のうちの少なくとも90%、例えば、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%が特定の部位でグリコシル化される。下流精製工程の間に、N-グリコシル化形態をN-グリコシル化を有しない形態と分離することが可能であるが、出発材料が不均一な場合には、より複雑な工程、及び精製化合物のより低い回収率が予想され、全体の工程コストにも大きな影響が及ぶ。加えて、出発材料がN-グリコシル化を有しないバリアントを多くの割合で含有する場合には、高純度のN-グリコシル化形態を得ることは困難であるか、又は不可能である可能性さえある。これは、非グリコシル化形態が望ましくない特性を有する場合に特に該当する。例えば、バイアスN-グリコシル化IL-2タンパク質について、N-グリカンを保有しない形態の存在は、これらのIL-2形態がN-グリコシル化形態よりもIL-2Rαを活性化する上でより高い残留効力を有すると考えられることから、非常に望ましくない。
本明細書で使用される場合、表現「-X位のアミノ酸」又は「+X位のアミノ酸」(ここで、Xは整数である)は、タンパク質又はペプチド配列中の特定のアミノ酸に対するアミノ酸の位置を指し、-X位のアミノ酸は、特定のアミノ酸に対してXの距離でN末端側に位置するアミノ酸であり、+X位のアミノ酸は、特定のアミノ酸に対してXの距離でC末端側に位置するアミノ酸である。例えば、ペプチド配列「ALMGR」(配列番号253)において、AはMの-2位のアミノ酸であり、LはMの-1位のアミノ酸であり、GはMの+1位のアミノ酸であり、RはMの+2位のアミノ酸である。
本明細書で使用される場合、用語「グリコシル化モチーフ」は、タンパク質の部位特異的グリコシル化を導くアミノ酸配列を指す。グリコシル化モチーフは、N-グリコシル化モチーフ、O-グリコシル化モチーフ、ホスホグリコシル化モチーフ、又はC-グリコシル化モチーフであってよい。N-グリコシル化モチーフは、2つ、3つ、4つ、5つ又は6つのアミノ酸を含み得る。O-グリコシル化モチーフは、1つ又は2つのアミノ酸を含み得る。
本明細書で使用される場合、用語「N-グリコシル化部位」は、N-グリコシル化モチーフのアスパラギン(N)が位置するアミノ酸配列中の位置を指す。
本明細書で使用される場合、用語「親和性」は、ある分子(例えば、受容体)の単一の結合部位とその結合パートナー(例えば、リガンド)との間の非共有結合性相互作用の合計の強度を指す。他に示していない限り、本明細書で使用される場合、「親和性」は、結合ペアのメンバーの間(例えば、受容体とリガンドの間)の1:1相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。ある分子XのそのパートナーYに対する親和性は一般的に、平衡状態で測定した解離速度定数と結合速度定数(それぞれ、kd及びka)との比である平衡解離定数(KD)によって表すことができる。したがって、同等の親和性は、速度定数の比が同じままである限り、異なる速度定数を含み得る。親和性は、本明細書に記載の方法を含む当技術分野で公知の十分に確立された方法によって測定することができる。
本明細書で使用される場合、用語「IL-2受容体のαサブユニット」及び「IL-2Rα」は、ヒトCD25を指す。
本明細書で使用される場合、用語「IL-2受容体のβサブユニット」及び「IL-2Rβ」は、ヒトCD122を指す。
本明細書で使用される場合、用語「IL-2受容体のγ-サブユニット」及び「IL-2Rγ」は、ヒトCD132を指す。
本明細書で使用される場合、用語「パターン認識受容体アゴニスト」(「PRRA」)は、病原体関連分子パターン(PAMP)又は損傷関連分子パターン(DAMP)を認識する1つ以上の免疫細胞関連受容体に結合してそれを活性化し、免疫細胞の活性化及び/又は病原体若しくは損傷誘発性の炎症反応につながる分子を指す。パターン認識受容体は、典型的には、自然免疫系の細胞、例えば、単球、マクロファージ、樹状細胞(DC)、好中球、及び上皮細胞、並びに適応免疫系の細胞によって発現される。
本明細書で使用される場合、用語「細胞毒性剤」及び「化学療法剤」は同義に使用され、細胞に対して毒性があり、細胞の複製又は増殖を妨げ、細胞の破壊/死を招く化合物を指す。細胞毒性剤の例としては、化学療法剤、及び毒素、例えば、細菌、真菌、植物又は動物起源の低分子毒素又は酵素活性毒素が、その合成類似体及び誘導体を含めて挙げられる。
本明細書で使用される場合、用語「免疫チェックポイント阻害剤」及び「免疫チェックポイントアンタゴニスト」は同義に使用され、受容体活性化に際して炎症性免疫細胞の機能を阻害する細胞膜発現受容体の機能を阻害するか、又はそれを介してシグナル伝達を誘導するリガンドの結合を阻害する化合物を意味する。そのような化合物は、例えば、生物製剤、例えば、抗体、抗体断片、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ(alphamab)、アルファボディ(alphabody)、アンチカリン、アビマー、DARPin、Fynomer(登録商標)、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、nanoCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖のみの抗体、VHH抗体又はNanobodies(登録商標)、単鎖可変断片(scFv)、これらの受容体の天然若しくは改変リガンド若しくは結合パートナー、又は低分子阻害剤であってよい。
本明細書で使用される場合、用語「免疫活性化アゴニスト」は、細胞膜で発現されたチェックポイント受容体を直接的又は間接的に活性化する化合物を指す。
本明細書で使用される場合、用語「免疫活性化受容体アゴニスト」は、活性化又は共刺激性受容体の活性化に際して免疫細胞機能を刺激する化合物を指す。そのような刺激性受容体の例としては、CD3サブユニットCD3γ、CD3δ、CD3ε及びCD3ζ(CD247)、T細胞受容体(TCR)サブユニットTCRα、TCRβ、TCRγ、及びTCRδ、B細胞受容体(BCR)鎖又はシグナル伝達ユニットCD79a又はCD79b、CD2、CD4、CD8、CD16、CD32a、CD64、CD27、CD28、CD134(OX40)、CD137(41BB)、CD244(2B4)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、CRACC(CS1)、LFA-1、NKG2D、NKG2C、NKp30、NKp46、NKp44、NKp80、NTB-A、活性化ショートフォーム(short form)KIR(KIR2DS1、KIR2DS2、KIR2DS3、KIR2DS4、KIR2DS5、KIR3DS1)、CD40、SIRP-β、デクチン-1、デクチン-2、TREM1、TREM2、ILT1、ILT6、ILT7、ILT8、LIR-6、MDL1、並びに免疫チロシン受容体ベースの活性化モチーフ(ITAM)を利用するか、又はPI3K、JAK/STAT、MyD88、IRF、NFKB若しくはJNK/AP1経路を通してシグナル伝達を誘導する他の免疫受容体が挙げられる。多くの多重特異的薬物は、免疫活性化受容体アゴニストの一種である。
本明細書で使用される場合、用語「多重特異的」及び「多重特異的薬物」は、2つ以上の異なる抗原に同時に結合して、拮抗的、作動的、又は特異的な抗原結合活性を標的依存的に媒介し得る化合物を指す。
本明細書で使用される場合、用語「抗体-薬物コンジュゲート」(ADC)は、典型的には、生物活性細胞毒性ペイロード、放射線療法、又は腫瘍環境に細胞毒性剤を送達するように設計された他の薬剤と結合された抗体からなる化合物を指す。ADCは、有意な全身毒性を伴わずに腫瘍量を減少させるのに特に有効であり、チェックポイント阻害抗体によって誘導される免疫応答の有効性を改善するように作用することがある。
本明細書で使用される場合、用語「抗体-アジュバントコンジュゲート」(AAC)は、直接的に又はリンカーを介して生物活性アジュバントに連結された抗体からなる化合物を指す。
本明細書で使用される場合、用語「アジュバント」は、抗原に対する身体の免疫応答を増強する物質を指す。
本明細書で使用される場合、用語「ボルトボディ(boltbody)」は、(a)(i)抗原結合ドメイン及び(ii)Fcドメインを含む抗体部分、(b)アジュバント部分、並びに(c)エチレングリコール基又はグリシン残基を含むリンカー、を含む抗体-アジュバントコンジュゲートを指し、ここで各アジュバント部分はリンカーを介して抗体部分に共有結合しており、リンカーは切断可能又は切断不能であり得る。
本明細書で使用される場合、用語「放射性核種」は、細胞破壊/死につながる電離放射線を放出する放射性同位元素を指す。腫瘍を標的とする担体にコンジュゲートされた放射性核種は、「標的化放射性核種治療薬」と称される。
本明細書で使用される場合、用語「DNA損傷修復阻害剤」は、DNA損傷修復エレメント、例えば、CHK1、CHK2、ATM、ATR、及びPARPを標的とする薬物を指す。ある特定のがんは、既存の変異又は経路変更のために、これらの経路を標的とすることに感受性が高く、例えば、BRCA1変異患者又は相同組換え経路欠損患者は、合成致死性の概念によりPARP阻害剤に感受性がある。
本明細書で使用される場合、用語「腫瘍代謝阻害剤」は、免疫細胞の機能を阻害する可能性のある代謝中間体を生成する腫瘍環境で発現される1つ以上の酵素の機能を妨げる化合物を指す。
本明細書で使用される場合、用語「プロテインキナーゼ阻害剤」は、1つ以上のプロテインキナーゼの活性を阻害する化合物を指す。プロテインキナーゼは、タンパク質をリン酸化する酵素であり、その結果、タンパク質の機能を調節することができる。プロテインキナーゼ阻害剤は、2つ以上のキナーゼを標的とすることができ、本明細書で使用されるプロテインキナーゼ阻害剤に関する任意の分類は、主な標的又は最も特徴付けられた標的を指すことが理解される。
本明細書で使用される場合、用語「ケモカイン受容体及び化学誘引物質受容体アゴニスト」は、多岐にわたる細胞上に発現されるGタンパク質共役受容体又はGタンパク質共役様受容体の1つのサブセットであり、主に細胞運動(化学走性又は化学運動性)の制御に関わるケモカイン又は化学誘引物質受容体を活性化する化合物を指す。これらの受容体は、細胞移動以外の過程、例えば、血管新生、細胞成熟、又は炎症にも関与する可能性がある。
本明細書で使用される場合、用語「サイトカイン受容体アゴニスト」は、免疫細胞の活性化及び増殖を制御する可溶性タンパク質を指す。サイトカインとしては、例えば、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、及び腫瘍壊死因子が挙げられる。
本明細書で使用される場合、用語「細胞死受容体アゴニスト」は、細胞死受容体、例えば、DR4(TRAIL-R1)又はDR5(TRAIL-R2)のうちの1つ以上を介してアポトーシス誘発シグナルを誘導し得る分子を指す。細胞死受容体アゴニストは、抗体、細胞死リガンド、サイトカイン、細胞死受容体アゴニスト発現ベクター、ペプチド、低分子アゴニスト、細胞死受容体アゴニストを発現する細胞(例えば、幹細胞)、及び細胞死リガンドの発現を誘導する薬物からなる群から選択され得る。
本明細書で使用される場合、用語「抗原提示細胞」又は「APC」は、プロセシングされた抗原ペプチドを、MHCクラスII分子を介してCD4 T細胞上のT細胞受容体に提示する細胞、例えば、マクロファージ、B細胞、又は樹状細胞を指す。APCは、フローサイトメトリーなどの表現型検査手法を使用することにより、当業者によって同定され得る。APCを同定するために使用される表現型マーカーとしては、種及び組織によって異なるが、骨髄系若しくは樹状細胞表面マーカー(例えば、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD33、CD34、CD68、CD206、MHC-II、CD163、Ly6C、Ly6G、GR-1、F4/80、TREM1、TREM2)又はB細胞表面マーカー(例えば、CD19、CD20、B220)が挙げられる。
本明細書で使用される場合、用語「MHCII」は、抗原提示細胞、例えば、骨髄系細胞、樹状細胞、B細胞上でのみ通常は見出される主要組織適合性複合体(MHC)分子の1つのクラスを意味する。MHCIIは、プロセシングされた抗原ペプチドを、CD4 T細胞上のT細胞受容体に対して提示する。MHCIIの発現を、当業者は、フローサイトメトリーなどのタンパク質発現プロファイリング手法を使用して測定することができる。MHCII発現の変化は、目的の特定の細胞サブセットにおけるMHCIIの蛍光強度シグナルの中央値、又はMHCIIに関して陽性である細胞のパーセンテージの変化を分析することによって決定することができる。
本明細書で使用される場合、用語「T細胞」は、適応免疫応答において中心的な役割を果たす免疫細胞の一種を指す。T細胞は、その細胞表面上にαβ又はγδ T細胞受容体(TCR)が存在することによって、他の免疫細胞と区別される。T細胞は、TCRシグナル伝達に重要なタンパク質複合体であるCD3も発現する。αβ T細胞は、CD4、CD8、又はCD4/CD8二重陰性サブセットに分けられ得る。CD4及びCD8はCD4+ T細胞及びCD8+ T細胞に高い表面密度で存在するため、CD4及びCD8は単独でしばしば、それぞれCD4+ T細胞及びCD8+ T細胞の同定に使用されることがある。γδ T細胞はγ鎖及びδ鎖からなるTCRを備えており、αβ TCRと同様に抗原の認識及び細胞活性化に中心的な役割を担っている。このTCRは、γδ T細胞の異なるサブセットであるVδ1とVδ2を区別するためにも使用される。Vδ1 T細胞は少数であり(5%未満)、抗炎症機能及び炎症誘発機能の両方を有するγδ T細胞の不均一な集団である。Vδ2 T細胞は、Vγ9Vδ2(Vδ2)T細胞という単一の比較的均質なT細胞集団であり、循環中のγδ T細胞の約95%を占める。Vδ2 T細胞は、そのTCR及び更なる自然免疫受容体の固有の特性により、強力な抗腫瘍特性を有し、免疫療法に利用することができる。T細胞は、MHC分子によって提示されるコグネイト抗原のTCR認識を介して活性化された後、成熟して分裂し、エフェクターT細胞又はメモリーT細胞を生成することができる。メモリーT細胞は、過去にコグネイト抗原と遭遇して応答したことのあるT細胞のサブセットである。そのようなT細胞は、病原性抗原、例えば、細菌又はウイルスに由来する抗原、並びにがん関連抗原を認識することができる。T細胞は、表現型検査手法、例えばフローサイトメトリーを使用することにより、当業者によって同定され得る。T細胞の同定に使用される表現型マーカーは、哺乳動物において一般に保存されており、CD3、TCRα、TCRβ、TCRδ、CD4、及びCD8が挙げられる。メモリーT細胞を同定するために使用される表現型マーカーは、種及び組織によって異なり得るが、CD45RO、LY6C、CD44、及びCD95等の細胞表面マーカーが挙げられる。
本明細書で使用される場合、表現「細胞療法」は、疾患の治療のために患者に改変ふと細胞を注入又は移植することを指す。細胞の起源は患者由来(自家)又は健康なドナー由来(同種異系)であり得る。
本明細書で使用される場合、第1の部分の第2の部分への結合に関する用語「可逆的」、「可逆的に」、「分解性」又は「分解性に」は、前記第1及び第2の部分を連結する結合が、pH 7.4、37℃の水性緩衝液という生理的条件下で切断可能であり、半減期が1時間～3ヶ月間、例えば、1時間～2ヶ月間、3時間～1ヶ月間、6時間～28日間、12時間～21日間、24時間～14日間、又は48時間～7日間であることを意味する。切断は酵素的でも又は非酵素的でもあってよく、ある特定の実施形態では非酵素的である。したがって、第1の部分の第2の部分との結合に関する用語「安定な」又は「永続的」は、前記第1の部分と第2の部分とを連結する結合が、生理的条件下で3ヶ月より長い半減期で切断可能であることを意味する。
本明細書で使用される場合、用語「試薬」は、別の化学化合物又は薬物の官能基との反応のために少なくとも1つの官能基を含む化学化合物を意味する。官能基(例えば、一級若しくは二級アミン、又はヒドロキシル官能基)を含む薬物もまた、試薬であると理解される。
本明細書で使用される場合、用語「部分」は、対応する試薬と比較して1つ以上の原子が欠如している分子の一部を意味する。例えば、式「H-X-H」の試薬が、別の試薬と反応して反応生成物の一部となる場合、反応生成物の対応する部分は、構造「H-X-」又は「-X-」を有し、各々の「-」は、別の部分に対する結合を示す。したがって、薬物部分は、可逆的結合から薬物として放出される。
本明細書で使用される場合、用語「タグ部分」は、IL-2タンパク質に翻訳的に融合しているペプチド又はタンパク質配列を指す。これは様々な機能、例えばIL-2タンパク質の安定化若しくは半減期の延長(「安定化タグ」)、IL-2タンパク質の精製の支持(「精製タグ」)、又は特定の細胞型若しくは組織へのIL-2タンパク質の標的化(「標的化タグ」)の役割を果たし得る。
2つの部分に結合しているか又は部分に割り込んでいる原子群の配列又は化学構造が提供されている場合、前記配列又は化学構造は、他に明白に述べていない限り、いずれの方向でもこの2つの部分に結合させることができると理解される。例えば、部分「-C(O)N(R1)-」は、「-C(O)N(R1)-」若しくは「-N(R1)C(O)-」のいずれかとして2つの部分に結合することができ、又は部分に割り込むことができる。同様に、部分
Figure 2023540701000006
 は、
Figure 2023540701000007
 若しくは
Figure 2023540701000008
 のいずれかとして2つの部分に結合することができ、又は部分に割り込むことができる。
本明細書で使用される場合、用語「置換された」は、分子又は部分の1つ以上の-H原子が、「置換基」と呼ばれる異なる原子又は原子群に置き換えられていることを意味する。ある特定の実施形態では、部分又は分子の6個以下の-H原子が置換される。ある特定の実施形態では、部分又は分子の5個以下の-H原子が置換される。ある特定の実施形態では、部分又は分子の4個以下の-H原子が置換される。ある特定の実施形態では、部分又は分子の3個以下の-H原子が置換される。ある特定の実施形態では、部分又は分子の2個以下の-H原子が置換される。ある特定の実施形態では、部分又は分子の1個の-H原子が置換される。
本明細書で使用される場合、用語「置換基」は、ある特定の実施形態では、ハロゲン、-CN、-COORx1、-ORx1、-C(O)Rx1、-C(O)N(Rx1Rx1a)、-S(O)2N(Rx1Rx1a)、-S(O)N(Rx1Rx1a)、-S(O)2Rx1、-S(O)Rx1、-N(Rx1)S(O)2N(Rx1aRx1b)、-SRx1、-N(Rx1Rx1a)、-NO2、-OC(O)Rx1、-N(Rx1)C(O)Rx1a、-N(Rx1)S(O)2Rx1a、-N(Rx1)S(O)Rx1a、-N(Rx1)C(O)ORx1a、-N(Rx1)C(O)N(Rx1aRx1b)、-OC(O)N(Rx1Rx1a)、-T0、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択される部分を指し、ここで、-T0、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Rx2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-、及び-OC(O)N(Rx3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
-Rx1、-Rx1a、-Rx1bは、-H、-T0、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T0、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Rx2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-;-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-、及び-OC(O)N(Rx3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各々のT0は、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、及び8～11員ヘテロビシクリルからなる群から独立して選択され、各々のT0は、同じ又は異なる1つ以上の-Rx2によって独立して任意選択で置換され、
各々の-Rx2は、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COORx4、-ORx4、-C(O)Rx4、-C(O)N(Rx4Rx4a)、-S(O)2N(Rx4Rx4a)、-S(O)N(Rx4Rx4a)、-S(O)2Rx4、-S(O)Rx4、-N(Rx4)S(O)2N(Rx4aRx4b)、-SRx4、-N(Rx4Rx4a)、-NO2、-OC(O)Rx4、-N(Rx4)C(O)Rx4a、-N(Rx4)S(O)2Rx4a、-N(Rx4)S(O)Rx4a、-N(Rx4)C(O)ORx4a、-N(Rx4)C(O)N(Rx4aRx4b)、-OC(O)N(Rx4Rx4a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々の-Rx3、-Rx3a、-Rx4、-Rx4a、-Rx4bは、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される。
ある特定の実施形態では、場合により置換されている分子の最大6個の-H原子が置換基によって独立して置き換えられ、例えば、5個の-H原子が置換基によって独立して置き換えられ、4個の-H原子が置換基によって独立して置き換えられ、3個の-H原子が置換基によって独立して置き換えられ、2個の-H原子が置換基によって独立して置き換えられ、又は1個の-H原子が置換基によって置き換えられる。
本明細書で使用される場合、用語「脂肪酸」は、4～28個の炭素原子を含み得る、脂肪族テールを有する飽和又は不飽和モノカルボン酸を指す。脂肪酸は、飽和又は不飽和、直鎖又は分岐したものであり得る。用語「脂肪酸バリアント」は、置換されていてもよく、ある特定の炭素原子が他の原子又は原子群によって置き換えられてもよい、改変脂肪酸を指す。
本明細書で使用される場合、用語「ペプチド」は、ペプチド(アミド)結合によって連結された少なくとも2個及び50個以内のアミノ酸モノマー部分の鎖を指す。用語「ペプチド」はまた、ペプチド模倣体、例えばD-ペプチド、ペプトイド、又はベータ-ペプチドを含み、50個以内のモノマー部分を有するそのようなペプチド模倣鎖を範囲に含む。
本明細書で使用される場合、用語「タンパク質」は、ペプチド結合によって連結された、50個より多くのアミノ酸モノマー部分(「アミノ酸残基」とも呼ばれ得る)の鎖を指し、ある特定の実施形態では、12000個以下のアミノ酸モノマー、例えば、10000個以下のアミノ酸モノマー部分、8000個以下のアミノ酸モノマー部分、5000個以下のアミノ酸モノマー部分、又は2000個以下のアミノ酸モノマー部分が、ペプチド結合によって連結される。
本明細書で使用される場合、数値と組み合わせて使用される用語「約」は、前記数値プラス/マイナス前記数値の25%以下、ある特定の実施形態ではプラス/マイナス前記数値の20%以下、ある特定の実施形態ではプラス/マイナス前記数値の10%以下の範囲(両端を含む)を示すために使用される。例えば、語句「約200」は、200+/-25%の範囲(両端を含む)、すなわち、150～250の範囲(両端を含む)、ある特定の実施形態では200+/-20%の範囲(両端を含む)、すなわち、160～240の範囲(両端を含む)、ある特定の実施形態では200+/-10%の範囲(両端を含む)、すなわち、180～220の範囲(両端を含む)を意味するために使用される。「約50%」として示される百分率は、「50%+/-25%」、すなわち25～75%の範囲（両端を含む）であることを意味するのではなく、「約50%」は、37.5～62.5%、すなわち、50である数値のプラス/マイナス25%の範囲（両端を含む）であることを意味することが理解される。
本明細書で使用される場合、用語「ポリマー」は、化学結合によって直鎖状、環状、分岐型、架橋型若しくはデンドリマー状に又はこれらの組合せで連結されている反復構造単位、すなわちモノマーを含む分子であって、合成起源であっても、生体起源であっても、又は両方の組合せであってもよい分子を意味する。ポリマーは、例えば1つ以上の官能基などの、1つ以上の他の化学基及び/又は部分／部分（複数）も含み得ることが理解される。同様に、ペプチド又はタンパク質もまた、個々のアミノ酸残基の側鎖は異なり得るが、ポリマーであることが理解される。ある特定の実施形態では、可溶性ポリマーは、少なくとも0.5kDaの分子量、例えば、少なくとも1kDaの分子量、少なくとも2kDaの分子量、少なくとも3kDaの分子量、又は少なくとも5kDaの分子量を有する。ポリマーが可溶性である場合、ある特定の実施形態では、ポリマーは、最大で1000kDa、例えば最大で750kDa、例えば最大で500kDa、例えば最大で300kDa、例えば最大で200kDa、例えば最大で100kDaの分子量を有する。ハイドロゲルのような不溶性ポリマーについては、意味のある分子量範囲は提供することができないことが理解される。
本明細書で使用される場合、用語「ポリマー（の）」は、1つ以上のポリマー又はポリマー部分／部分（複数）を含む試薬又は部分を意味する。ポリマー試薬又は部分は、1つ以上の他の部分/部分(複数)も任意選択で含んでもよく、ある特定の実施形態では、それらは、以下からなる群から選択される:
・C1-50アルキル、C2-50アルケニル、C2-50アルキニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル及びテトラリニル、並びに
・以下を含む群から選択される結合:
Figure 2023540701000009
 ［式中、
破線は、部分又は試薬の残部に対する結合を示し、
-R及び-Raは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択される］。
当業者には、重合反応から得られる重合生成物は、全て同じ分子量を有するのではなく、むしろ分子量分布を示すことが理解される。それ故、本明細書において使用する分子量範囲、分子量、ポリマー中のモノマー数範囲、及びポリマー中のモノマー数は、数平均分子量及びモノマー数平均を指し、すなわち、ポリマー又はポリマー部分の分子量の算術平均、及びポリマー又はポリマー部分のモノマー数の算術平均を指す。
したがって、「x」個のモノマー単位を含むポリマー部分において、「x」に当てはめられるいずれの整数もモノマーの算術平均数に相当する。「x」に当てはめられる整数のいずれの範囲も、モノマーの算術平均数が存在する整数範囲を提供する。「約x」として示される「x」の整数は、モノマーの算術平均数が、x+/-25%、好ましくはx+/-20%、より好ましくはx+/-10%の整数範囲内にあることを意味する。
本明細書で使用される場合、用語「数平均分子量」は、個々のポリマーの分子量の通常の算術平均を意味する。
本明細書で使用される場合、部分又は試薬に関する用語「PEG系」は、前記部分又は試薬がPEGを含むことを意味する。ある特定の実施形態では、PEG系部分又は試薬は、少なくとも10%(w/w)PEG、例えば少なくとも20%(w/w)PEG、例えば少なくとも30%(w/w)PEG、例えば少なくとも40%(w/w)PEG、例えば少なくとも50%(w/w)PEG、例えば少なくとも60%(w/w)PEG、例えば少なくとも70%(w/w)PEG、例えば少なくとも80%(w/w)PEG、例えば少なくとも90%(w/w)PEG、例えば少なくとも95%(w/w)PEGを含む。PEG系部分又は試薬の残りの重量百分率は、他の部分であり、ある特定の実施形態では、以下の部分及び連結から選択される:
・C1-50アルキル、C2-50アルケニル、C2-50アルキニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、及びテトラリニル、並びに
・以下のものを含む群から選択される結合:
Figure 2023540701000010
 ［式中、
破線は、部分又は試薬の残部に対する結合を示し、
-R及び-Raは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択される］。
用語「ヒアルロン酸系」はそれに応じて使用される。
本明細書で使用される場合、部分又は試薬に関する用語「少なくともX% PEGを含むPEG系」は、前記部分又は試薬が少なくともX%(w/w)エチレングリコール単位(-CH2CH2O-)を含むことを意味し、前記エチレングリコール単位は、交互にブロック状に配置されていてもよく、又は前記部分若しくは試薬内にランダムに分布していてもよく、ある特定の実施形態では、前記部分又は試薬の全てのエチレングリコール単位が1つのブロック内に存在し、そのPEG系部分又は試薬の残りの重量百分率は、他の部分であり、ある特定の実施形態では、以下の部分及び連結から選択される:
・C1-50アルキル、C2-50アルケニル、C2-50アルキニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、及びテトラリニル、並びに
・以下のものを含む群から選択される結合:
Figure 2023540701000011
 ［式中、
破線は、部分又は試薬の残部に対する結合を示し、
-R及び-Raは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択される］。
用語「少なくともX%ヒアルロン酸を含むヒアルロン酸系」はそれに応じて使用される。
本明細書で使用される場合、用語「ハイドロゲル」は、ホモポリマー又はコポリマーから構成される親水性又は両親媒性ポリマーネットワークを意味し、それは、疎水性相互作用、水素結合、イオン性相互作用、及び／又は共有結合性化学架橋の存在のために不溶性である。ある特定の実施形態では、ハイドロゲルは、共有結合性化学架橋の存在のために不溶性である。一般に、架橋はネットワーク構造及び物理的完全性を提供する。
用語「中断される」は、ある部分が、2個の炭素原子間に挿入されているか、又は挿入がその部分の末端の一方にある場合、炭素又はヘテロ原子と水素原子との間に挿入されていることを意味する。
本明細書で使用される場合、用語「C1-4アルキル」は、単独で又は組合せで、1～4個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル部分を意味する。分子の末端に存在する場合、直鎖又は分岐C1-4アルキルの例は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル及びtert-ブチルである。分子の2つの部分がC1-4アルキルによって結合されている場合には、そのようなC1-4アルキル基の例は、-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-、-CH(C2H5)-、-C(CH3)2-である。C1-4アルキル炭素の各水素は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、C1-4アルキルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
本明細書で使用される場合、用語「C1-6アルキル」は、単独で又は組合せで、1～6個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル部分を意味する。分子の末端に存在する場合、直鎖及び分岐C1-6アルキル基の例は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル及び3,3-ジメチルプロピルである。分子の2つの部分がC1-6アルキル基によって結合されている場合には、そのようなC1-6アルキル基の例は、-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-、-CH(C2H5)-及び-C(CH3)2-である。C1-6炭素の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、C1-6アルキルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
したがって、「C1-10アルキル」、「C1-20アルキル」又は「C1-50アルキル」は、それぞれ、1～10、1～20、又は1～50個の炭素原子を有するアルキル鎖を意味し、C1-10、C1-20又はC1-50炭素の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、C1-10又はC1-50アルキルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
本明細書で使用される場合、用語「C2-6アルケニル」は、単独で又は組合せで、2～6個の炭素原子を有する、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含む、直鎖又は分岐炭化水素部分を意味する。分子の末端に存在する場合、例は、-CH=CH2、-CH=CH-CH3、-CH2-CH=CH2、-CH=CHCH2-CH3及び-CH=CH-CH=CH2である。分子の2つの部分がC2-6アルケニル基によって結合されている場合には、そのようなC2-6アルケニルの例は、-CH=CH-である。C2-6アルケニル部分の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、C2-6アルケニルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
したがって、用語「C2-10アルケニル」、「C2-20アルケニル」又は「C2-50アルケニル」は、単独で又は組合せで、2～10、2～20、又は2～50個の炭素原子を有する、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含む、直鎖又は分岐炭化水素部分を意味する。C2-10アルケニル、C2-20アルケニル又はC2-50アルケニル基の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、C2-10アルケニル、C2-20アルケニル又はC2-50アルケニルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
本明細書で使用される場合、用語「C2-6アルキニル」は、単独で又は組合せで、2～6個の炭素原子を有する、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合を含む、直鎖又は分岐炭化水素部分を意味する。分子の末端に存在する場合、例は、-C≡CH、-CH2-C≡CH、CH2-CH2-C≡CH及びCH2-C≡C-CH3である。分子の2つの部分がアルキニル基によって結合されている場合には、例は、-C≡C-である。C2-6アルキニル基の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、1つ以上の二重結合が存在してもよい。任意選択で、C2-6アルキニルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
したがって、本明細書で使用される場合、用語「C2-10アルキニル」、「C2-20アルキニル」及び「C2-50アルキニル」は、単独で又は組合せで、それぞれ2～10、2～20、又は2～50個の炭素原子を有する、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合を含む、直鎖又は分岐炭化水素部分を意味する。C2-10アルキニル、C2-20アルキニル又はC2-50アルキニル基の各水素原子は、上で定義したような置換基によって任意選択で置き換えられてもよい。任意選択で、1つ以上の二重結合が存在してもよい。任意選択で、C2-10アルキニル、C2-20アルキニル又はC2-50アルキニルは、下で定義するような1つ以上の部分によって中断されてもよい。
上で述べたように、C1-4アルキル、C1-6アルキル、C1-10アルキル、C1-20アルキル、C1-50アルキル、C2-6アルケニル、C2-10アルケニル、C2-20アルケニル、C2-50アルケニル、C2-6アルキニル、C2-10アルキニル、C2-20アルケニル又はC2-50アルキニルは、任意選択で、1つ以上の部分によって中断されてもよく、前記1つ以上の部分は、好ましくは、
Figure 2023540701000012
 ［式中、
破線は、前記部分又は試薬の残部に対する結合を示し、
-R及び-Raは、-H、並びにメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル及びヘキシルからなる群から互いに独立して選択される］
からなる群から選択される。
本明細書で使用される場合、用語「C3-10シクロアルキル」は、飽和されていてもよく、又は不飽和であってもよい、3～10個の炭素原子を有する環状アルキル鎖、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル又はシクロデシルを意味する。C3-10シクロアルキル炭素の各水素原子は、上で定義したような置換基によって置き換えられてもよい。用語「C3-10シクロアルキル」は、ノルボルナン又はノルボルネンのような架橋された二環も含む。
本明細書で使用される場合、用語「8～30員カルボポリシクリル」又は「8～30員炭素多環（carbopolycycle）」は、8～30個の環原子を有し、2つの隣接する環が少なくとも1個の環原子を共有している、2環以上の環状部分であって、最大数までの二重結合を含有し得る環状部分(完全に飽和されている、部分的に飽和されている、又は不飽和である、芳香族又は非芳香族環)を意味する。好ましくは、8～30員カルボポリシクリルは、2、3、4又は5環、より好ましくは2、3又は4環の環状部分を意味する。
本明細書で使用される場合、用語「3～10員ヘテロシクリル」又は「3～10員複素環」は、3、4、5、6、7、8、9又は10個の環原子を有し、最大数までの二重結合を含有し得る環(完全に飽和されている、部分的に飽和されている、又は不飽和である、芳香族又は非芳香族環)であって、少なくとも1個の環原子、最大で4個までの環原子が、硫黄(-S(O)-、-S(O)2-を含む)、酸素、及び窒素(=N(O)-を含む)からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられ、環が炭素又は窒素原子によって分子の残部に結合している、環を意味する。3～10員複素環の例としては、アジリジン、オキシラン、チイラン、アジリン、オキシレン、チイレン、アゼチジン、オキセタン、チエタン、フラン、チオフェン、ピロール、ピロリン、イミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、チアゾール、チアゾリン、イソチアゾール、イソチアゾリン、チアジアゾール、チアジアゾリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、チアジアゾリジン、スルホラン、ピラン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、イミダゾリジン、ピリジン、ピリダジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、テトラゾール、トリアゾール、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ジアゼパン、アゼピン及びホモピペラジンが挙げられるが、これらに限定されない。3～10員ヘテロシクリル又は3～10員複素環式基の各水素原子は、下で定義するような置換基によって置き換えられてもよい。
本明細書で使用される場合、用語「8～11員ヘテロビシクリル」又は「8～11員複素二環(heterobicycle)」は、8～11個の環原子を有し、最大数までの二重結合を含有し得る、2環の複素環式部分(完全に飽和されている、部分的に飽和されている、又は不飽和である、芳香族又は非芳香族環)であって、少なくとも1個の環原子が、両方の環によって共有されており、少なくとも1個の環原子、最大で6個までの環原子が、硫黄(-S(O)-、-S(O)2-を含む)、酸素、及び窒素(=N(O)-を含む)からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられており、前記環が、炭素又は窒素原子によって分子の残部に結合している、複素環式部分を意味する。8～11員複素二環の例は、インドール、インドリン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾイミダゾリン、キノリン、キナゾリン、ジヒドロキナゾリン、キノリン、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、デカヒドロキノリン、イソキノリン、デカヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロイソキノリン、ベンザゼピン、プリン及びプテリジンである。用語8～11員複素二環は、1,4-ジオキサ-8-アザスピロ[4.5]デカンのような2環のスピロ構造、又は8-アザ-ビシクロ[3.2.1]オクタンのような架橋複素環も含む。8～11員ヘテロビシクリル又は8～11員複素二環炭素の各水素原子は、下で定義するような置換基によって置き換えられてもよい。
同様に、用語「8～30員ヘテロポリシクリル」又は「8～30員複素多環（heteropolycycle）」は、8～30個の環原子を有し、最大数までの二重結合を含有し得る、2つより多くの環、好ましくは3、4又は5環の複素環式部分(完全に飽和されている、部分的に飽和されている、又は不飽和である、芳香族又は非芳香族環)であって、2つの隣接する環が、少なくとも1個の環原子を共有しており、少なくとも1個の環原子、最大で10個までの環原子が、硫黄(-S(O)-、-S(O)2-を含む)、酸素、及び窒素(=N(O)-を含む)の群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられており、前記環が、炭素又は窒素原子によって分子の残部に結合している、複素環式部分を意味する。
構造:
Figure 2023540701000013
 の部分に関して、「ペアRx/Ryは、それらが結合している原子と一緒になって、C3-10シクロアルキル又は3～10員ヘテロシクリルを形成する」という語句は、Rx及びRyが、下記構造を形成することを意味することが理解される:
Figure 2023540701000014
 ［式中、Rは、C3-10シクロアルキル又は3～10員ヘテロシクリルである］。
構造:
Figure 2023540701000015
 の部分に関して、「ペアRx/Ryは、それらが結合している原子と一緒になって、環Aを形成する」という語句は、Rx及びRyが、下記構造を形成することを意味することも理解される:
Figure 2023540701000016
本明細書で使用される場合、「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードを意味する。ハロゲンはフルオロ又はクロロであることが一般に好ましい。
本明細書で使用される場合、用語「官能基」は、他の原子群と反応することができる原子群を意味する。例示的な官能基は、例えばカルボン酸(-(C=O)OH)、一級又は二級アミン(-NH2、-NH-)、マレイミド、チオール(-SH)、スルホン酸(-(O=S=O)OH)、カーボネート、カルバメート(-O(C=O)N<)、ヒドロキシル(-OH)、アルデヒド(-(C=O)H)、ケトン(-(C=O)-)、ヒドラジン(>N-N<)、イソシアネート、イソチオシアネート、リン酸(-O(P=O)OHOH)、ホスホン酸(-O(P=O)OHH)、ハロアセチル、ハロゲン化アルキル、アクリロイル、フッ化アリール、ヒドロキシルアミン、ジスルフィド、スルホンアミド、硫酸、ビニルスルホン、ビニルケトン、ジアゾアルカン、オキシラン、及びアジリジンである。
本発明のIL-2タンパク質又はコンジュゲートが1つ以上の酸性又は塩基性基を含む場合、本発明はまた、その対応する薬学的又は毒性学的に許容される塩、特にその薬学的に利用可能な塩も含む。従って、酸性基を含む本発明のIL-2タンパク質又はコンジュゲートを、本発明に従って、例えばアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、又はアンモニウム塩として使用することができる。そのような塩のより正確な例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、又はアンモニア若しくは有機アミン、例えばエチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、若しくはアミノ酸との塩が挙げられる。1つ以上の塩基性基、すなわちプロトン化することができる基を含む本発明のIL-2タンパク質又はコンジュゲートは、本発明に従って無機酸又は有機酸とのその付加塩の形態で存在することができ、使用することができる。適切な酸の例としては、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、シュウ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、サリチル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、スルファミン酸、フェニルプロピオン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、イソニコチン酸、クエン酸、アジピン酸、及び当業者に公知の他の酸が挙げられる。当業者においては、正電荷を持つアンモニウム基及び塩の適切な対イオンをもたらすアミン基のアルキル化のような、塩基性基を陽イオンに変換する更なる方法が公知である。本発明のIL-2タンパク質又はコンジュゲートが、酸性基及び塩基性基を同時に含む場合、本発明はまた、言及した塩の形態に加えて、分子内塩又はベタイン(双性イオン)も含む。それぞれの塩は、当業者に公知である通例の方法によって、例えばこれらのプロドラッグを溶媒若しくは分散剤中で有機若しくは無機の酸若しくは塩基と接触させるステップ、又は他の塩との陰イオン交換若しくは陽イオン交換によって得ることができる。本発明はまた、低い生理的適合性により、医薬品に使用するためには直接適していないが、例えば化学反応の中間体として、又は薬学的に許容される塩を調製するために使用することができる本発明のIL-2タンパク質又はそのコンジュゲートの全ての塩も含む。
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」は、患者に投与した場合に害を引き起こさない物質を意味し、好ましくは動物での使用、例えばヒトでの使用に関して規制当局、例えばEMA(ヨーロッパ)及び/又はFDA(US)及び/又は他の任意の国の規制当局によって承認されていることを意味する。
本明細書で使用される場合、用語「賦形剤」は、それと共に治療剤、例えば薬物若しくはプロドラッグが投与される希釈剤、アジュバント、又は媒体を指す。そのような薬学的賦形剤は、滅菌液、例えば水及び油、例えば石油、動物、植物又は合成起源のもの、例えば、限定されないが、落花生油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油等であり得る。水は、医薬組成物を経口投与する場合の好ましい賦形剤である。食塩水及び水性デキストロースは、医薬組成物を静脈内投与する場合の好ましい賦形剤である。食塩水溶液及び水性デキストロース及びグリセロール溶液は好ましくは、注射用溶液のための液体賦形剤として使用される。適切な薬学的賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、マンニトール、トレハロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール等が挙げられる。所望の場合、医薬組成物はまた、微量の湿潤剤若しくは乳化剤、pH緩衝剤等、例えば酢酸塩、コハク酸塩、トリス、炭酸塩、リン酸塩、HEPES(4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジンエタンスルホン酸)、MES(2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸)も含有し得るか、又は界面活性剤、例えばTween、ポロキサマー、ポロキサミン、CHAPS、Igepal、若しくはアミノ酸、例えばグリシン、リジン、若しくはヒスチジンを含有し得る。これらの医薬組成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、徐放性製剤等の形態を取り得る。医薬組成物は、通常の結合剤及び賦形剤、例えばトリグリセリドと共に坐剤として製剤化することができる。経口製剤は、標準的な賦形剤、例えば薬学等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等を含み得る。そのような組成物は、患者に適切に投与するための形態を提供するための適切な量の賦形剤と共に、治療有効量の薬物又は生物活性部分を含有する。製剤は、投与様式に適合すべきである。
一般的に、用語「含む(comprise)」又は「含む(comprising)」はまた、「からなる(consist of)」又は「からなる(consisting of)」も包含する。
式(I)の配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有する。配列番号1は、以下の配列を有する:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINN
式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有する。配列番号2は、以下の配列を有する:
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK
式(I)の配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有する。配列番号4は、以下の配列を有する:
NFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT
他に明記しない限り、本明細書において与えられる全てのアミノ酸位置は、それぞれ配列番号1、配列番号2又は配列番号4に基づく。
ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、配列番号1に対して少なくとも93%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、配列番号1に対して少なくとも96%の配列同一性を有する。
ある特定の実施形態では、配列Aは、配列番号1と比較して3個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Aは、配列番号1と比較して2個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Aは、配列番号1と比較して1個のアミノ酸変化を含む。そのようなアミノ酸変化は、アミノ酸欠失、アミノ酸付加、又は1つのアミノ酸の別のアミノ酸への交換、すなわち変異であってよい。そのような変異はまた、タンパク質原性アミノ酸の非タンパク質原性アミノ酸への交換であってもよい。ある特定の実施形態では、配列Aは、配列番号1と比較してアミノ酸変化を含まず、すなわち、配列Aは配列番号1の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Aは、配列番号36の配列：PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNを有する。
ある特定の実施形態では、配列Aは、アミノ酸変異を含み、内因性O-グリコシル化モチーフは除外される。好ましくは、そのようなアミノ酸変異は、配列番号1の2位にあり、更により好ましくは、そのようなアミノ酸変異は、T2A、T2G、T2Q、T2E、T2N、T2D、T2R、T2K、及びT2Pからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、そのようなアミノ酸変異は、配列番号1に基づくT2A、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものである。
ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも78%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも80%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも82%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも84%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも87%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも89%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも91%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも93%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Bは、配列番号2に対して少なくとも95%の配列同一性を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して11個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して10個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して9個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して8個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して7個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して6個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して5個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して4個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して3個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2と比較して2個のアミノ酸変化を含む。
配列Bは、少なくとも1つのグリコシル化モチーフを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、1つのグリコシル化モチーフを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、2つのグリコシル化モチーフを含み、それは同じであるか又は異なる。ある特定の実施形態では、配列Bは、3つのグリコシル化モチーフを含み、それは同じであるか又は異なる。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのグリコシル化モチーフは、N-グリコシル化モチーフ、O-グリコシル化モチーフ、ホスホグリコシル化モチーフ、及びC-グリコシル化モチーフからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのグリコシル化モチーフは、N-グリコシル化モチーフである。
そのようなN-グリコシル化は、アスパラギンアミノ酸のアミン官能基で起こる。アミン官能基を有するアスパラギンは、配列番号2の配列中に天然に存在してもよく、又はあるアミノ酸をアスパラギン残基に置換することによって導入されてもよい。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、アミノ酸配列X1X2NX3X4(配列番号254)を含み、
式中、
X1は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
X2は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
Nは、アスパラギンであり、
X3は、プロリン以外の任意のタンパク質原性又は非タンパク質原性アミノ酸であり、
X4は、トレオニン、セリン、及びシステインからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、X1は、タンパク質原性アミノ酸、非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、X1は、タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X1は、非タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X1は、存在しない。ある特定の実施形態では、X1は、フェニルアラニン、グルタミン酸又はアスパラギン酸である。ある特定の実施形態では、X1は、フェニルアラニンである。ある特定の実施形態では、X1は、グルタミン酸である。ある特定の実施形態では、X1は、アスパラギン酸である。
ある特定の実施形態では、X2は、タンパク質原性アミノ酸、非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、X2は、タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X2は、非タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X2は、存在しない。ある特定の実施形態では、X2は、グリシン又はアラニンである。ある特定の実施形態では、X2は、グリシンである。ある特定の実施形態では、X2は、アラニンである。
ある特定の実施形態では、X3は、プロリン以外のタンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X3は、非タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、X3は、セリンである。
ある特定の実施形態では、X4は、トレオニン、セリン又はシステインである。ある特定の実施形態では、X4は、トレオニンである。ある特定の実施形態では、X4は、セリンである。ある特定の実施形態では、X4は、システインである。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、アミノ酸配列NX3X4を有し、式中、X3及びX4は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NX3T、NX3S、及びNX3Cからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NX3Tである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NX3Sである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NX3Cである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NSX4である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NST、NSS、及びNSCからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NSTである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NSSである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、NSCである。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NX3X4(配列番号255)であり、式中、X2、X3、及びX4は、本明細書の他の箇所で定義された通りである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NX3T(配列番号256)、X2NX3S(配列番号257)、及びX2NX3C(配列番号258)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NX3T(配列番号256)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NX3S(配列番号257)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NX3C(配列番号258)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NSX4(配列番号259)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NST(配列番号260)、X2NSS(配列番号261)、及びX2NSC(配列番号262)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NST(配列番号260)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NSS(配列番号261)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X2NSC(配列番号262)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNX3X4(配列番号263)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNX3T(配列番号264)、GNX3S(配列番号265)、及びGNX3C(配列番号266)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNX3T(配列番号264)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNX3S(配列番号265)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNX3C(配列番号266)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNSX4(配列番号267)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNST(配列番号268)、GNSS(配列番号269)、及びGNSC(配列番号270)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNST(配列番号268)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNSS(配列番号269)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、GNSC(配列番号270)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANX3X4(配列番号271)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANX3T(配列番号272)、ANX3S(配列番号273)、及びANX3C(配列番号274)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANX3T(配列番号272)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANX3S(配列番号273)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANX3C(配列番号274)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANSX4(配列番号275)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANST(配列番号276)、ANSS(配列番号277)、及びANSC(配列番号278)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANST(配列番号276)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANSS(配列番号277)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、ANSC(配列番号278)である。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NX3X4(配列番号254)であり、式中、X1、X2、X3、及びX4は、本明細書の他の箇所で定義された通りである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NX3T(配列番号279)、X1X2NX3S(配列番号280)、及びX1X2NX3C(配列番号281)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NX3T(配列番号279)のものである。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NX3S(配列番号280)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NX3C(配列番号281)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NSX4(配列番号282)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NST(配列番号283)、X1X2NSS(配列番号284)、及びX1X2NSC(配列番号285)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NST(配列番号283)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NSS(配列番号284)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1X2NSC(配列番号285)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNX3X4(配列番号286)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNX3T(配列番号287)、X1GNX3S(配列番号288)、及びX1GNX3C(配列番号289)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNX3T(配列番号287)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNX3S(配列番号288)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNX3C(配列番号289)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNSX4(配列番号290)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNST(配列番号291)、X1GNSS(配列番号292)、及びX1GNSC(配列番号293)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNST(配列番号291)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNSS(配列番号292)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1GNSC(配列番号293)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3X4(配列番号294)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3T(配列番号295)、FX2NX3S(配列番号296)、及びFX2NX3C(配列番号297)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3T(配列番号295)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3S(配列番号296)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3C(配列番号297)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSX4(配列番号298)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NST(配列番号299)、FX2NSS(配列番号300)、及びFX2NSC(配列番号301)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NST(配列番号299)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSS(配列番号300)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSC(配列番号301)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNX3X4(配列番号302)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNX3T(配列番号303)、FGNX3S(配列番号304)、及びFGNX3C(配列番号305)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNX3T(配列番号303)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNX3S(配列番号304)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNX3C(配列番号305)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNSX4(配列番号306)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNST(配列番号307)、FGNSS(配列番号308)、及びFGNSC(配列番号309)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNST(配列番号307)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNSS(配列番号308)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNSC(配列番号309)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANX3X4(配列番号310)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANX3T(配列番号311)、X1ANX3S(配列番号312)、及びX1ANX3C(配列番号313)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANX3T(配列番号311)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANX3S(配列番号312)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANX3C(配列番号313)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANSX4(配列番号314)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANST(配列番号315)、X1ANSS(配列番号316)、及びX1ANSC(配列番号317)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANST(配列番号315)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANSS(配列番号316)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、X1ANSC(配列番号317)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3X4(配列番号318)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3T(配列番号319)、FX2NX3S(配列番号320)、及びFX2NX3C(配列番号321)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3T(配列番号319)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3S(配列番号320)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NX3C(配列番号321)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSX4(配列番号322)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NST(配列番号323)、FX2NSS(配列番号324)、及びFX2NSC(配列番号325)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NST(配列番号323)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSS(配列番号324)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FX2NSC(配列番号325)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANX3X4(配列番号326)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANX3T(配列番号327)、FANX3S(配列番号328)、及びFANX3C(配列番号329)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANX3T(配列番号327)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANX3S(配列番号328)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANX3C(配列番号329)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANSX4(配列番号330)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANST(配列番号331)、FANSS(配列番号332)、及びFANSC(配列番号333)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANST(配列番号331)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANSS(配列番号332)である。ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FANSC(配列番号333)である。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、FGNST(配列番号307)又はFANST(配列番号331)である。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのグリコシル化モチーフは、O-グリコシル化モチーフである。
そのようなO-グリコシル化は、ヒドロキシル官能基を有するアミノ酸で起こる。ヒドロキシル官能基を有するアミノ酸は、配列番号2の配列中に天然に存在してもよく、又はある内因性アミノ酸をヒドロキシル官能基を含むアミノ酸に置換することによって導入されてもよい。O-グリコシル化のために使用されるアミノ酸は、ヒドロキシル官能基を有する、タンパク質原性又は非タンパク質原性のアミノ酸のいずれであってもよい。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるアミノ酸は、タンパク質原性アミノ酸である。ある特定の実施形態では、ヒドロキシル官能基を有するタンパク質原性アミノ酸は、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、及びヒドロキシプロリンからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-6～-1位又は+1～+4位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-6位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-5位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-4位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-3位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-2位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して-1位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して+1位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して+2位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して+3位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。ある特定の実施形態では、O-グリコシル化のために使用されるヒドロキシル官能基を有するアミノ酸に対して+4位のアミノ酸が、プロリンによって置換される。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つのグリコシル化モチーフは、配列番号2のある特定の連続するアミノ酸を変異させることによって得られる。ある特定の実施形態では、1つのそのようなグリコシル化モチーフは、配列番号2のある特定のアミノ酸を変異させることによって、配列番号2に導入される。ある特定の実施形態では、2つのそのようなグリコシル化モチーフが、配列番号2のある特定のアミノ酸を変異させることによって、配列番号2に導入され、この2つのグリコシル化モチーフは同じでもよく、又は異なってもよい。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、29、30、31、32、33、34、40、41、42、43及び44からなる群から選択されるアミノ酸位置、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置3、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置4、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置5、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置6、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置7、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置8、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置9、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置10、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置11、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置12、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置13、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置14、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置15、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置16、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置17、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置29、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置30、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置31、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置32、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置33、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置34、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置40、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置41、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置42、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置43、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づく位置44、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置にN-グリコシル化部位を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、
NX3X4PKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号85)、
YNX3X4KLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号86)、
YKNX3X4LTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号87)、
YKNNX3X4TRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号88)、
YKNPNX3X4RMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号89)、
YKNPKNX3X4MLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号90)、
YKNPKLNX3X4LTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号91)、
YKNPKLTNX3X4TFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号92)、
YKNPKLTRNX3X4FKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号93)、
YKNPKLTRMNX3X4KFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号94)、
YKNPKLTRMLNX3X4FYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号95)、
YKNPKLTRMLTNX3X4YMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号96)、
YKNPKLTRMLTFNX3X4MPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号97)、
YKNPKLTRMLTFKNX3X4PKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号98)、
YKNPKLTRMLTFKFNX3X4KKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号99)、
YKNPKLTRMLTFKFYNX3X4KATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号100)、
YKNPKLTRMLTFKFYMNX3X4ATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号101)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPNX3X4TELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号102)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKNX3X4ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号103)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKNX3X4LKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号104)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKANX3X4KHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号105)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATNX3X4HLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号106)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATENX3X4LQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号107)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELNX3X4QCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号108)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKNX3X4CLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号109)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHNX3X4LEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号110)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLNX3X4EEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号111)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQNX3X4EELKPLEEVLNLAQSK (配列番号113)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCNX3X4ELKPLEEVLNLAQSK (配列番号114)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLNX3X4LKPLEEVLNLAQSK (配列番号115)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLENX3X4KPLEEVLNLAQSK (配列番号116)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEENX3X4PLEEVLNLAQSK (配列番号117)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEENX3X4LEEVLNLAQSK (配列番号118)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELNX3X4EEVLNLAQSK (配列番号119)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKNX3X4EVLNLAQSK (配列番号120)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPNX3X4VLNLAQSK (配列番号121)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLNX3X4LNLAQSK (配列番号122)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLENX3X4NLAQSK (配列番号123)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEENX3X4LAQSK (配列番号124)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVNX3X4AQSK (配列番号125)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNX3X4QSK (配列番号126)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNNX3X4SK (配列番号127)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLNX3X4K (配列番号128)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLANX3X4 (配列番号129)
からなる群から選択される配列を有し、式中、X3及びX4は、他の箇所で定義された通りである。
ある特定の実施形態では、配列Bは、
X1X2NX3X4LTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号130)、
YX1X2NX3X4TRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号131)、
YKX1X2NX3X4RMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号132)、
YKNX1X2NX3X4MLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号133)、
YKNPX1X2NX3X4LTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号134)、
YKNPKX1X2NX3X4TFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号135)、
YKNPKLX1X2NX3X4FKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号136)、
YKNPKLTX1X2NX3X4KFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号137)、
YKNPKLTRX1X2NX3X4FYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号138)、
YKNPKLTRMX1X2NX3X4YMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号139)、
YKNPKLTRMLX1X2NX3X4MPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号140)、
YKNPKLTRMLTX1X2NX3X4PKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号141)、
YKNPKLTRMLTFX1X2NX3X4KKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号142)、
YKNPKLTRMLTFKX1X2NX3X4KATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号143)、
YKNPKLTRMLTFKFX1X2NX3X4ATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号144)、
YKNPKLTRMLTFKFYX1X2NX3X4TELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号145)、
YKNPKLTRMLTFKFYMX1X2NX3X4ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号146)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPX1X2NX3X4LKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号147)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKX1X2NX3X4KHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号148)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKX1X2NX3X4HLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号149)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKAX1X2NX3X4LQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号150)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATX1X2NX3X4QCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号151)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATEX1X2NX3X4CLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号152)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELX1X2NX3X4LEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号153)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKX1X2NX3X4EEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号154)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHX1X2NX3X4EELKPLEEVLNLAQSK (配列番号155)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLX1X2NX3X4ELKPLEEVLNLAQSK (配列番号156)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQX1X2NX3X4LKPLEEVLNLAQSK (配列番号157)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCX1X2NX3X4KPLEEVLNLAQSK (配列番号158)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLX1X2NX3X4PLEEVLNLAQSK (配列番号159)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEX1X2NX3X4LEEVLNLAQSK (配列番号160)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEX1X2NX3X4EEVLNLAQSK (配列番号161)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEEX1X2NX3X4EVLNLAQSK (配列番号162)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELX1X2NX3X4VLNLAQSK (配列番号163)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKX1X2NX3X4LNLAQSK (配列番号164)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPX1X2NX3X4NLAQSK (配列番号165)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLX1X2NX3X4LAQSK (配列番号166)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEX1X2NX3X4AQSK (配列番号167)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEX1X2NX3X4QSK (配列番号168)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVX1X2NX3X4SK (配列番号169)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLX1X2NX3X4K (配列番号170)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNX1X2NX3X4 (配列番号171)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号87、配列番号88、配列番号89、配列番号90、配列番号91、配列番号92、配列番号93、配列番号94、配列番号95、配列番号96、配列番号97、配列番号98、配列番号99、配列番号100、配列番号114、配列番号115、配列番号116、配列番号117、配列番号125、配列番号126、及び配列番号127からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号130、配列番号131、配列番号132、配列番号133、配列番号134、配列番号135、配列番号136、配列番号137、配列番号138、配列番号139、配列番号140、配列番号141、配列番号142、配列番号143、配列番号144、配列番号156、配列番号157、配列番号158、配列番号159、配列番号160、配列番号161、配列番号167、配列番号168、配列番号169、配列番号170、及び配列番号171からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号89、配列番号92、配列番号93、配列番号95、配列番号96、配列番号97、配列番号98、配列番号99、配列番号116、配列番号117、及び配列番号127からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号134、配列番号137、配列番号138、配列番号140、配列番号141、配列番号142、配列番号143、配列番号144、配列番号160、配列番号161、及び配列番号171からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、
YKNPNSTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号172)、
YKNPKLTNSTTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号173)、
YKNPKLTRNSTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号174)、
YKNPKLTRMLNSTFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号175)、
YKNPKLTRMLTNSTYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号176)、
YKNPKLTRMLTFNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号177)、
YKNPKLTRMLTFKNSTPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号178)、
YKNPKLTRMLTFKFNSTKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号179)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLENSTKPLEEVLNLAQSK (配列番号112)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEENSTPLEEVLNLAQSK (配列番号180)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNNSTSK (配列番号181)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、
YKNPFANSTLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号182)、
YKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号14)、
YKNPKLTRFANSTFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号183)、
YKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号20)、
YKNPKLTRMLTFANSTPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号184)、
YKNPKLTRMLTFFANSTKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号185)、
YKNPKLTRMLTFKFANSTKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号186)、
YKNPKLTRMLTFKFFANSTATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号187)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSK (配列番号26)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEFANSTEEVLNLAQSK (配列番号188)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNFANST (配列番号189)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、
YKNPFGNSTLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号190)、
YKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号11)、
YKNPKLTRFGNSTFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号191)、
YKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号17)、
YKNPKLTRMLTFGNSTPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号192)、
YKNPKLTRMLTFFGNSTKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号193)、
YKNPKLTRMLTFKFGNSTKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号194)、
YKNPKLTRMLTFKFFGNSTATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号195)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSK (配列番号23)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEFGNSTEEVLNLAQSK (配列番号196)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNFGNST (配列番号197)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、N-グリコシル化モチーフは、配列番号2の配列の3位又は41位の内因性アスパラギンがN-グリコシル化モチーフの一部となるような様式で導入され、この場合、アスパラギンは置換される必要はなく、その結果、配列番号87、配列番号130、配列番号127、配列番号168、
YKNSTLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号198)、
FANSTLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号199)、
FGNSTLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号200)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNSTQSK (配列番号201)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSK (配列番号32)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSK (配列番号35)
の配列の群から選択される配列のうちの1つである配列Bが生じる。
ある特定の実施形態では、O-グリコシル化モチーフは、配列Bの配列中のいずれかのアミノ酸を、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、及びヒドロキシプロリンからなる群から選択されるアミノ酸によって置換することによって導入される。
ある特定の実施形態では、O-グリコシル化モチーフ、すなわち、配列番号2のあるアミノ酸の、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、及びヒドロキシプロリンからなる群から選択されるアミノ酸への変異は、配列Bの配列の位置K5、R8、M9、T11、F12、K13、F14、Y15、E32、又はL42で起こる。
ある特定の実施形態では、O-グリコシル化モチーフは、K5S、K5T、K5Y、K5Hyl、K5Hyp、R8S、R8T、R8Y、R8Hyl、R8Hy、M9S、M9T、M9Y、M9Hyl、M9Hyp、T11S、T11Y、T11Hyl、T11Hyp、F12S、F12T、F12Y、F12Hyl、F12Hyp、K13S、K13T、K13Y、K13Hyl、K13Hyp、Y15S、Y15T、Y15Hyl、Y15Hyp、E32S、E32T、E32Y、E32Hyl、E32Hyp、L42S、L42T、L42Y、L42Hyl及びL42Hypからなる群から選択される配列Bの配列におけるアミノ酸置換によって導入される。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号11、配列番号14、配列番号17、配列番号20、配列番号23、配列番号26、配列番号32、配列番号35、配列番号214、及び配列番号215からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号11の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号14の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号17の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号20の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号23の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号26の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号32の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号35の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号214の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号215の配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも50%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも55%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも60%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも65%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも70%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも75%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも80%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも85%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも90%の部位占有率をもたらす。ある特定の実施形態では、配列Bへのグリコシル化モチーフの挿入は、少なくとも95%の部位占有率をもたらす。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくK5、R8、M9、T11、F12、K13、F14、Y15、E31、E32、及びL42からなる群から選択されるアミノ酸位置、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に生じる少なくとも1つのアミノ酸変異を更に含む。さらにより好ましくは、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくF12、Y15、E31、E32、及びL42からなる群から選択されるアミノ酸位置、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置K5、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置R8、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置M9、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置T11、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置F12、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置K13、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置F14、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置Y15、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置E31、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置E32、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置L42、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。
ある特定の実施形態では、そのような変異は、タンパク質原性の天然に存在するアミノ酸の、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、リジン、セリン、トレオニン、トリプトファン、及びチロシンからなる群から選択されるアミノ酸残基による置換である。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、アラニンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、アルギニンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、アスパラギンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、アスパラギン酸によって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、システインによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、グルタミンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、グルタミン酸によって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、グリシンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、ヒスチジンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、リジンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、セリンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、トレオニンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、トリプトファンによって置換される。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、チロシンによって置換される。ある特定の実施形態では、そのような変異は、天然に存在するアミノ酸の、アルギニン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、ヒスチジン、リジン、セリン、トレオニン、トリプトファン、及びチロシンからなる群から選択されるアミノ酸残基による置き換えである。ある特定の実施形態では、そのような変異は、天然に存在するアミノ酸の、システイン、グルタミン酸、リジン、セリン、トレオニン、及びチロシンからなる群から選択されるアミノ酸残基による置き換えである。ある特定の実施形態では、天然に存在するアミノ酸は、非タンパク質原性アミノ酸によって置換される。そのような非タンパク質原性アミノ酸に関する実施形態は、上記の通りである。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくK5A、K5C、K5G、K5S、K5T、K5Q、K5E、K5N、K5D、K5H、K5W、K5Y、及びK5Rからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5C変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5Y変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、K5R変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、YKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号214)、YKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号215)、YKNPDLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号235)、及びYKNPELTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号236)からなる群から選択される配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号214の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号215の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号235の配列を有する。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号236の配列を有する。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくR8A、R8C、R8G、R8S、R8T、R8Q、R8E、R8N、R8D、R8H、R8W、R8Y、及びR8Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8C変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8N変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8K変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8Y変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、R8K変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくF12A、F12C、F12G、F12S、F12T、F12Q、F12E、F12N、F12D、F12R、F12H、F12W、F12Y、及びF12Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくF12A、F12C、F12G、F12S、F12T、F12Q、F12E、F12N、F12D、F12R、及びF12Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12C変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12N変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12R変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12Y変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12K変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくY15A、Y15C、Y15G、Y15S、Y15T、Y15Q、Y15E、Y15N、Y15D、Y15R、Y15H、Y15W、及びY15Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくY15A、Y15C、Y15G、Y15S、Y15T、Y15Q、Y15E、Y15N、Y15D、Y15R、及びY15Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15C変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15N変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15R変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15K変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくL42G、L42C、L42A、L42S、L42T、L42Q、L42E、L42N、L42D、L42R、L42H、L42W、L42Y、及びL42Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくL42G、L42C、L42A、L42S、L42T、L42Q、L42E、L42N、L42D、L42R、及びL42Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42C変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42N変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42R変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42Y変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、L42K変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくF12A、F12C、F12G、F12S、F12T、F12Q、F12E、F12N、F12D、F12R、及びF12Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、並びにY15A、Y15C、Y15G、Y15S、Y15T、Y15Q、Y15E、Y15N、Y15D、Y15R、及びY15Kからなる群から選択される更なるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A及びY15A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12C変異及びY15A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A及びY15C変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくF12A、F12C、F12G、F12S、F12T、F12Q、F12E、F12N、F12D、F12R、及びF12Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、並びにL42G、L42C、L42A、L42S、L42T、L42Q、L42E、L42N、L42D、L42R、及びL42Kからなる群から選択される更なるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F42C及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F42A及びL42C変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくY15A、Y15C、Y15G、Y15S、Y15T、Y15Q、Y15E、Y15N、Y15D、Y15R、及びY15Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、並びにL42G、L42C、L42A、L42S、L42T、L42Q、L42E、L42N、L42D、L42R、及びL42Kからなる群から選択される更なるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15A及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15C及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、Y15A及びL42C変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Bは、配列番号2に基づくF12A、F12C、F12G、F12S、F12T、F12Q、F12E、F12N、F12D、F12R、及びF12Kからなる群から選択されるアミノ酸変異、Y15A、Y15C、Y15G、Y15S、Y15T、Y15Q、Y15E、Y15N、Y15D、Y15R、及びY15Kからなる群から選択される更なるアミノ酸変異、並びにL42G、L42C、L42A、L42S、L42T、L42Q、L42E、L42N、L42D、L42R、及びL42Kからなる群から選択される更なるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A、Y15A、及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12C、Y15A、及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A、Y15C、及びL42G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Bは、F12A、Y15C、及びL42C変異を含む。
ある特定の実施形態では、式(I)の配列Cは、配列番号4に対して少なくとも93%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Cは、配列番号4に対して少なくとも94%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Cは、配列番号4に対して少なくとも96%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Cは、配列番号4に対して少なくとも98%の配列同一性を有する。
ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して5個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して4個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して3個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して2個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して1個のアミノ酸変化を含む。そのようなアミノ酸変化は、アミノ酸欠失、アミノ酸付加、又は1つのアミノ酸の別のアミノ酸との交換、すなわち、変異であってもよい。また、そのような変異は、タンパク質原性アミノ酸の非タンパク質原性アミノ酸との、及びタンパク質原性アミノ酸のD-立体異性体との交換であってもよい。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4と比較して1つのアミノ酸変化も含まず、これはそれが配列番号4の配列を有することを意味する。
ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4に基づくC49A、C49G、C49S、C49T、C49Q、C49E、C49N、C49D、C49H、C49W、C49Y、C49R、C49I、C49L、C49K、C49M、C49F、C49P、及びC49Vからなる群から選択されるアミノ酸変異、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置のものを含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49A変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49G変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49S変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49T変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49Q変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49E変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49D変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49H変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49W変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49Y変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49R変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49I変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49L変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49K変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49M変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49F変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49P変異を含む。ある特定の実施形態では、配列Cは、C49V変異を含む。
ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号3、配列番号4、及び配列番号212からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号3の配列を有する: NFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号3)。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号4の配列を有する: NFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号4)。ある特定の実施形態では、配列Cは、配列番号212の配列を有する: NFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLT (配列番号212)。
ある特定の実施形態では、式(I)の配列AのN末端にあるアラニンは存在せず、すなわち、xは0である。ある特定の実施形態では、式(I)の配列AのN末端にあるアラニンは存在し、すなわち、xは1である。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、精製タグであり、ある特定の実施形態では、これは、アルブミン結合タンパク質、アルカリホスファターゼ、AU1エピトープ、AU5エピトープ、バクテリオファージT7エピトープ(T7タグ)、バクテリオファージV5エピトープ(V5タグ)、ビオチン-カルボキシ担体タンパク質、ブルータングウイルスタグ(Bタグ)、カルモジュリン結合ペプチド、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、セルロース結合ドメイン、キチン結合ドメイン、コリン結合ドメイン、ジヒドロ葉酸還元酵素、E2エピトープ、FLAGエピトープ、ガラクトース結合タンパク質、緑色蛍光タンパク質、Glu-Glu(EEタグ)、グルタチンS-トランスフェラーゼ、ヒトインフルエンザヘマグルチニン、HaloTag(登録商標)、ヒスチジンアフィニティータグ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、HSVエピトープ、ケトステロイドイソメラーゼ、KT3エピトープ、lacz、ルシフェラーゼ、マルトース結合タンパク質、mycエピトープ、NusA、PDZドメイン、PDZリガンド、ポリアルギニン(Argタグ)、ポリアスパラギン酸(Aspタグ)、ポリシステイン(Cysタグ)、ポリヒスチジン(Hisタグ)、ポリフェニルアラニン(Pheタグ)、プロフィニティーeXact、プロテインC、S1タグ、Sタグ、ストレプトアビジン結合ペプチド、ブドウ球菌プロテインA、ブドウ球菌プロテインG、ストレップタグ、ストレプトアビジン、小ユビキチン様修飾因子、タンデムアフィニティー精製、T7エピトープ、チオレドキシン、TrpE、ユビキチン、ユニバーサル(universal)、及びVSV-Gからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、精製タグであり、ある特定の実施形態では、これは、アルブミン結合タンパク質、アルカリホスファターゼ、AU1エピトープ、AU5エピトープ、バクテリオファージT7エピトープ(T7タグ)、バクテリオファージV5エピトープ(V5タグ)、ビオチン-カルボキシ担体タンパク質、ブルータングウイルスタグ(Bタグ)、カルモジュリン結合ペプチド、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、セルロース結合ドメイン、キチン結合ドメイン、コリン結合ドメイン、ジヒドロ葉酸還元酵素、E2エピトープ、FLAGエピトープ、ガラクトース結合タンパク質、緑色蛍光タンパク質、Glu-Glu(EEタグ)、グルタチンS-トランスフェラーゼ、ヒトインフルエンザヘマグルチニン、ヒスチジンアフィニティータグ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、HSVエピトープ、ケトステロイドイソメラーゼ、KT3エピトープ、lacz、ルシフェラーゼ、マルトース結合タンパク質、mycエピトープ、NusA、PDZドメイン、PDZリガンド、ポリアルギニン(Argタグ)、ポリアスパラギン酸(Aspタグ)、ポリシステイン(Cysタグ)、ポリヒスチジン(Hisタグ)、ポリフェニルアラニン(Pheタグ)、プロフィニティーeXact、プロテインC、S1タグ、Sタグ、ストレプトアビジン結合ペプチド、ブドウ球菌プロテインA、ブドウ球菌プロテインG、ストレップタグ、ストレプトアビジン、小ユビキチン様修飾因子、タンデムアフィニティー精製、T7エピトープ、チオレドキシン、TrpE、ユビキチン、ユニバーサル、及びVSV-Gからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、ポリヒスチジン(Hisタグ)、例えば、5個のヒスチジン、6個のヒスチジン、7個のヒスチジン、8個のヒスチジン、9個のヒスチジン、10個のヒスチジン、11個のヒスチジン、12個のヒスチジン、13個のヒスチジン、14個のヒスチジン、又は15個のヒスチジンを含むHisタグである。ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、配列: AHHHHHHGSDDDDK (配列番号234)のHisタグである。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、精製タグであり、ある特定の実施形態では、これは、アルブミン結合タンパク質、アルカリホスファターゼ、AU1エピトープ、AU5エピトープ、バクテリオファージT7エピトープ(T7タグ)、バクテリオファージV5エピトープ(V5タグ)、ビオチン-カルボキシ担体タンパク質、ブルータングウイルスタグ(Bタグ)、カルモジュリン結合ペプチド、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、セルロース結合ドメイン、キチン結合ドメイン、コリン結合ドメイン、ジヒドロ葉酸還元酵素、E2エピトープ、FLAGエピトープ、ガラクトース結合タンパク質、緑色蛍光タンパク質、Glu-Glu(EEタグ)、グルタチンS-トランスフェラーゼ、ヒトインフルエンザヘマグルチニン、HaloTag(登録商標)、ヒスチジンアフィニティータグ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、HSVエピトープ、ケトステロイドイソメラーゼ、KT3エピトープ、lacz、ルシフェラーゼ、マルトース結合タンパク質、mycエピトープ、NusA、PDZドメイン、PDZリガンド、ポリアルギニン(Argタグ)、ポリアスパラギン酸(Aspタグ)、ポリシステイン(Cysタグ)、ポリヒスチジン(Hisタグ)、ポリフェニルアラニン(Pheタグ)、プロフィニティーeXact、プロテインC、S1タグ、Sタグ、ストレプトアビジン結合ペプチド、ブドウ球菌プロテインA、ブドウ球菌プロテインG、ストレップタグ、ストレプトアビジン、小ユビキチン様修飾因子、タンデムアフィニティー精製、T7エピトープ、チオレドキシン、TrpE、ユビキチン、ユニバーサル、及びVSV-Gからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、精製タグであり、ある特定の実施形態では、これは、アルブミン結合タンパク質、アルカリホスファターゼ、AU1エピトープ、AU5エピトープ、バクテリオファージT7エピトープ(T7タグ)、バクテリオファージV5エピトープ(V5タグ)、ビオチン-カルボキシ担体タンパク質、ブルータングウイルスタグ(Bタグ)、カルモジュリン結合ペプチド、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、セルロース結合ドメイン、キチン結合ドメイン、コリン結合ドメイン、ジヒドロ葉酸還元酵素、E2エピトープ、FLAGエピトープ、ガラクトース結合タンパク質、緑色蛍光タンパク質、Glu-Glu(EEタグ)、グルタチンS-トランスフェラーゼ、ヒトインフルエンザヘマグルチニン、ヒスチジンアフィニティータグ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、HSVエピトープ、ケトステロイドイソメラーゼ、KT3エピトープ、lacz、ルシフェラーゼ、マルトース結合タンパク質、mycエピトープ、NusA、PDZドメイン、PDZリガンド、ポリアルギニン(Argタグ)、ポリアスパラギン酸(Aspタグ)、ポリシステイン(Cysタグ)、ポリヒスチジン(Hisタグ)、ポリフェニルアラニン(Pheタグ)、プロフィニティーeXact、プロテインC、S1タグ、Sタグ、ストレプトアビジン結合ペプチド、ブドウ球菌プロテインA、ブドウ球菌プロテインG、ストレップタグ、ストレプトアビジン、小ユビキチン様修飾因子、タンデムアフィニティー精製、T7エピトープ、チオレドキシン、TrpE、ユビキチン、ユニバーサル、及びVSV-Gからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、ポリヒスチジン(Hisタグ)、例えば、5個のヒスチジン、6個のヒスチジン、7個のヒスチジン、8個のヒスチジン、9個のヒスチジン、10個のヒスチジン、11個のヒスチジン、12個のヒスチジン、13個のヒスチジン、14個のヒスチジン、又は15個のヒスチジンを含むHisタグである。ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、配列: AHHHHHHGSDDDDK (配列番号234)のHisタグである。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2のうちの一方は、精製タグであり、例えば、式(I)のTag1は、精製タグであり、式(I)のTag2は、異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、精製タグであり、Tag1は異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2の両方が精製タグであり、これらは同じでもよく、又は異なってもよい。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、安定化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、Fc、Fc断片、IgG、IgG断片、抗体、抗体断片、ヒト血清アルブミン、アルブミン結合断片、トランスフェリン、伸長組換えポリペプチド(XTEN)、プロリン-アラニン-セリンポリマー(PAS)、プロリン-アラニンポリマー(PA)、エラスチン様ペプチド(ELP)、ホモアミノ酸ポリマー(HAP)、ゼラチン様タンパク質(GLK)、又は抗体断片に対するCGβサブユニットからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、安定化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、Fc、Fc断片、IgG、IgG断片、抗体、抗体断片、ヒト血清アルブミン、アルブミン結合断片、トランスフェリン、伸長組換えポリペプチド(XTEN)、プロリン-アラニン-セリンポリマー(PAS)、プロリン-アラニンポリマー(PA)、エラスチン様ペプチド(ELP)、ホモアミノ酸ポリマー(HAP)、ゼラチン様タンパク質(GLK)、又は抗体断片に対するCGβサブユニットからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2のうちの一方は、安定化タグであり、例えば、式(I)のTag1は、安定化タグであり、式(I)のTag2は、異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、安定化タグであり、Tag1は、異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2の両方が安定化タグであり、これは同じでもよく、又は異なってもよい。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、標的化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、抗体、抗体断片、Fab、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、DARPin、Fynomer(登録商標)、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、ナノCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖のみ抗体、VHH抗体又はNanobody(登録商標)、単鎖可変断片(scFv)、及び天然若しくは修飾ペプチド又はタンパク質受容体リガンドからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1は、標的化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、抗体、抗体断片、Fab、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、DARPin、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、ナノCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖のみ抗体、VHH抗体、単鎖可変断片(scFv)、及び天然若しくは修飾ペプチド又はタンパク質受容体リガンドからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、標的化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、抗体、抗体断片、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、DARPin、Fynomer(登録商標)、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、ナノCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖のみ抗体、VHH抗体又はNanobody(登録商標)、単鎖可変断片(scFv)、及び天然若しくは修飾ペプチド又はタンパク質受容体リガンドからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、標的化タグであり、ある特定の実施形態では、これは、抗体、抗体断片、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、DARPin、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、ナノCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖のみ抗体、VHH抗体、単鎖可変断片(scFv)、及び天然若しくは修飾ペプチド又はタンパク質受容体リガンドからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2のうちの一方は、標的化タグであり、例えば、式(I)のTag1は、標的化タグであり、式(I)のTag2は、異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag2は、標的化タグであり、Tag1は、異なる種類のタグであるか、又は存在しない。ある特定の実施形態では、式(I)のTag1及びTag2の両方が標的化タグであり、これは同じでもよく、又は異なってもよい。
ある特定の実施形態では、式(I)の「Tag1」は存在せず、すなわち、yは0である。ある特定の実施形態では、式(I)の「Tag1」は存在し、すなわち、yは1である。ある特定の実施形態では、式(I)の「Tag2」は存在せず、すなわち、zは0である。ある特定の実施形態では、式(I)の「Tag2」は存在し、すなわち、zは1である。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号9の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号9)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号10の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号10)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号37の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号37)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号38の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号38)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号39の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号39)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号40の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号40)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号41の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号41)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号42の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号42)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号216の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号216)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号217の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号217)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号218の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号218)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号219の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号219)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号220の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号220)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号221の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号221)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号222の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号222)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号214の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号223の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPDLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号223)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号224の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号224)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号225の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号225)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号226の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号226)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号227の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号227)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号228の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号228)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号27の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号27)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号28の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号28)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号215の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号29の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPELTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号29)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号12の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号12)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号13の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号13)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号43の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号43)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号44の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号44)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号45の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号45)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号46の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号46)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号47の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号47)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号14の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号48の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFANSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号48)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号15の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号15)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号16の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号16)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号49の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号49)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号50の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号50)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号51の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号51)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号52の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号52)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号53の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号53)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号54の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号54)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号18の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号18)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号19の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号19)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号55の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号55)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号56の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号56)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号57の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号57)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号58の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号58)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号59の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号59)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号20の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号60の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFANSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号60)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号21の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号21)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号22の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号22)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号61の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号61)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号62の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号62)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号63の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号63)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号64の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号64)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号65の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号65)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号66の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号66)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号24の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号24)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号25の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号25)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号67の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号67)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号68の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号68)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号69の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号69)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号70の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号70)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号71の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号71)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号26の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号72の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFANSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号72)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号30の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号30)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号31の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号31)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号73の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号73)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号74の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号74)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号75の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号75)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号76の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号76)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号77の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号77)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号32の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号78の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFANSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号78)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号33の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号33)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号34の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号34)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号79の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号79)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号80の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号80)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号81の配列:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号81)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号82の配列:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号82)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号83の配列:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号83)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号35の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは0である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号84の配列:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEFGNSTQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT (配列番号84)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号204:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号204)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号205:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号205)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号206:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号206)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号207:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号207)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、ポリヒスチジン(Hisタグ)である。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号208:
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLTHHHHHH (配列番号208)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号209:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLTHHHHHH (配列番号209)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは0であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号210:
PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLTHHHHHH (配列番号210)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号36の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号4の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号211:
APASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLTHHHHHH (配列番号211)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号17の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号229:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGNSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号229)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号23の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは0であり、式(I)のzは1であり、式(I)の「Tag2」は、6つのヒスチジンを含むHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号230:
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGNSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLTHHHHHH (配列番号230)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のxは1であり、式(I)の配列Aは、配列番号1の配列を有し、式(I)の配列Bは、配列番号11の配列を有し、式(I)の配列Cは、配列番号3の配列を有し、式(I)のyは1であり、式(I)のzは0であり、式(I)の「Tag1」は、配列番号234の配列を有するHisタグである。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号231:
AHHHHHHGSDDDDKAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGNSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号231)
の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号9、配列番号10、配列番号12、配列番号13、配列番号15、配列番号16、配列番号18、配列番号19、配列番号21、配列番号22、配列番号24、配列番号25、配列番号30、配列番号31、配列番号33、配列番号34、配列番号216、配列番号217、配列番号224、及び配列番号225からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号9、配列番号12、配列番号15、配列番号18、配列番号21、配列番号24、配列番号30、配列番号33、配列番号216、及び配列番号224からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号10、配列番号13、配列番号16、配列番号19、配列番号22、配列番号25、配列番号31、配列番号34、配列番号217、及び配列番号225からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号9の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号10の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号12の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号13の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号15の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号16の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号18の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号19の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号21の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号22の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号24の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号25の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号30の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号31の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号33の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号34の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号216の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号217の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号224の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号225の配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、少なくとも1つのO-結合型N1グリカン、少なくとも1つのO-結合型N2グリカン、少なくとも1つのO-結合型N1と少なくとも1つのO-結合型N2グリカンとの組合せを含んでもよく、又はグリコシル化されていなくてもよい。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、少なくとも1つ、例えば1つの、O-結合型N1グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、少なくとも1つ、例えば1つの、O-結合型N2グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、少なくとも1つ、例えば1つの、O-結合型N1グリカンと少なくとも1つ、例えば1つの、O-結合型N2グリカンとの組合せを含む。ある特定の実施形態では、式(I)の配列Aは、O-グリコシル化されていない。ある特定の実施形態では、O-結合型N1グリカンとO-結合型N2グリカンとの比は、1:1、1:2、1:3又は1:4である。ある特定の実施形態では、O-結合型N1グリカンとO-結合型N2グリカンとの比は、1:1である。ある特定の実施形態では、O-結合型N1グリカンとO-結合型N2グリカンとの比は、1:2である。ある特定の実施形態では、N1グリカンとN2グリカンとの比は、1:3である。ある特定の実施形態では、N1グリカンとN2グリカンとの比は、1:4である。
式(I)のIL-2タンパク質は、ある特定の実施形態では、少なくとも1つのN-結合型二分岐パウチマンノース型グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G0グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G1グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G2グリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G0Bグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G1Bグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G2Bグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G0Fグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G1Fグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G2Fグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G0BFグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G1BFグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、少なくとも1つ、例えば、1つの、N-結合型G2BFグリカンを含む。ある特定の実施形態では、式(I)のタンパク質は、二分岐パウチマンノース型グリカンの混合物を含む。ある特定の実施形態では、式(I)のタンパク質は、2つを上回るGal残基、例えば、3つ、4つ、5つ若しくは6つのGal残基、及び/又は2つを上回るNeuAc残基、例えば、3つ又は4つのNeuAc残基を有するN-結合型四分岐パウチマンノース型グリカンを含む。
ある特定の実施形態では、1つ以上のN-結合型又はO-結合型グリカンは、式(I)のタンパク質の半減期を延長させる。
ある特定の実施形態では、1つ以上のN-結合型又はO-結合型グリカンは、グリコシル化モチーフにより導入された変異を、免疫認識から遮蔽する。ある特定の実施形態では、1つ以上のN-結合型又はO-結合型グリカンは、抗体又はT細胞受容体(TCR)による、グリコシル化モチーフにより導入された変異の認識を遮断する。
ある特定の実施形態では、1つ以上のN-結合型又はO-結合型グリカンを、アフィニティー精製のために使用することができる。例えば、N-結合型グリカンを、レクチンを介するアフィニティー精製のために使用してもよい。
少なくとも1つのグリカンが、配列B部分に存在するが、式(I)のIL-2タンパク質における別の箇所、例えば、配列A又は配列Cにもグリカンがあってもよいことが理解される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、バイアスIL-2である。
別の態様では、本発明は、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列に関する。そのようなオリゴヌクレオチド配列は、DNA、RNA、及びcDNA配列からなる群から選択され得る。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、DNA配列である。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、RNA配列である。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、cDNA配列である。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、真核細胞系における、原核細胞系における、又は無細胞系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、真核細胞系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、原核細胞系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド配列は、無細胞系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号7の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号8の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号202の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号203の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号233の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号244の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号245の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNA配列は、配列番号246の配列を有する。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNA配列は、mRNA配列である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列は、原核細胞系、例えば、大腸菌(Escherichia coli)、バシラス属(Bacillus sp.)、例えば、枯草菌(Bacillus subtilis)、コリネバクテリウム属(Corynebacterium sp.)、例えば、コリネバクテリウム・グルタミクム(Corynebacterium glutamicum)、及び蛍光菌(Pseudomonas fluorescens)からなる群から選択される細菌系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、そのようなオリゴヌクレオチドは、プラスミドの形態にあるDNA配列である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列は、真核生物系、例えば哺乳動物系、例えば哺乳動物細胞系、例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞(CHO)、マウス骨髄腫リンパ芽球(例えば、NS0細胞)、Sp2/0細胞、マウス線維芽細胞(例えば、NIH3T3細胞)、並びに完全ヒト細胞、例えば、ヒト胚性腎細胞HEK 293、HeLa細胞、ヒト胚性網膜細胞(例えば、Crucell社のPer.C6)、又はヒト羊水細胞(例えば、Glycotope及びCEVEC)、酵母、例えば、サッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、ヤロウイア・リポリティカ(Yarrowia lipolytica)又はピキア・パストリス(Pichia pastoris)、糸状菌、例えば、アスペルギルス(Aspergillus)、トリコデルマ(Trichoderma)又はミセリオフトーラ・サーモフィラ(Myceliophthora thermophila)、バキュロウイルス感染細胞、例えば、バキュロウイルス感染昆虫細胞、例えば、Sf9、Sf21、Hi-5株、非溶解性昆虫細胞発現系、例えば、Sf9、Sf21、Hi-5、Schneider 2細胞、又はSchneider 3細胞、及び植物又は植物細胞、例えば、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)、ベンサミアナタバコ(Nicotiana benthamiana)、タバコ(Nicotiana tabacum)、アルファルファ(Medicago sativa)、コウキクサ(Lemna minor)、又はニセツリガネゴケ(Physcomitrella patens)、及びそれらの細胞からなる群から選択される真核細胞系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列は、CHO細胞における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列は、哺乳動物系における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、そのようなオリゴヌクレオチドは、プラスミドの形態にあるDNA配列である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、IL-2によって、特にバイアスIL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するためのものである。ある特定の実施形態では、IL-2によって、特にバイアスIL-2によって治療することができる前記疾患は、がんである。ある特定の実施形態では、そのような使用のための、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、DNA、RNA又はcDNA、特に、修飾DNA、修飾RNA又は修飾cDNAである。ある特定の実施形態では、疾患の治療に使用するためのそのようなオリゴヌクレオチドは、患者に投与され、ある特定の実施形態では、これは哺乳動物、例えば、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ヒツジ、非ヒト霊長類又はヒトである。
ある特定の実施形態では、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、DNA分子、特に修飾DNA分子である。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNAは、修飾DNAである。ある特定の実施形態では、DNAの修飾は、骨格修飾、コンフォメーション制約修飾、及び化学修飾からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNAのコンフォメーション拘束修飾は、ロックド核酸(LNA)、拘束2'-O-エチル-(cEt)、及びトリシクロ-DNA(tcDNA)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするDNAの骨格修飾は、2'-O-メチル(2'-OMe)、2'-O-メトキシ-エチル(2'-MOE)、及び2'-フルオロ(2'-F)置換からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、DNAの修飾は、骨格修飾、コンフォメーション拘束修飾、及び化学修飾からなる群から選択される少なくとも2つの修飾の組合せを含む。
ある特定の実施形態では、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、cDNA分子、特に修飾cDNA分子である。
ある特定の実施形態では、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、RNA分子、特に修飾RNA分子である。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAは、修飾RNAである。ある特定の実施形態では、RNAの修飾は、骨格修飾、リボース修飾、コンフォメーション拘束修飾、及び化学修飾からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAのリボース修飾は、RNA骨格内のホスホジエステル(PO)をホスホロチオエート(PS)に置き換えることである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAの骨格修飾は、2'-O-メチル(2'-OMe)、2'-O-メトキシ-エチル(2'-MOE)、及び2'-フルオロ(2'-F)置換からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAの化学修飾は、核酸塩基の変化である。ある特定の実施形態では、核酸塩基の変化は、ホスホロジアミデートモルホリノオリゴマー(PMO)又はペプチド核酸(PNA)である。ある特定の実施形態では、RNAの修飾は、骨格修飾、リボース修飾、コンフォメーション拘束修飾、及び化学修飾からなる群から選択される少なくとも2つの修飾の組合せを含む。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAは、送達の改善のために修飾される。ある特定の実施形態では、送達の改善のための修飾は、ある特定の部分への化学コンジュゲーション、及びナノ粒子担体への組み込み又は結合からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、化学コンジュゲートは、ポリマー、細胞透過性ペプチド(CPP)、脂質、抗体、受容体リガンド、及びアプタマーからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、ポリマーは、デンドリマーである。ある特定の実施形態では、ポリマーは、PEG、(乳酸/グリコール酸)コポリマー(poly(lactide-co-glycolic acid))(PLGA)、及びポリホスファゼンからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、ポリマーは、PEGである。ある特定の実施形態では、ナノ粒子担体は、脂質、ポリマー、及び/又はペプチドを含むナノ粒子担体である。ある特定の実施形態では、脂質を含むナノ粒子担体は、脂質ナノ粒子(LNP)、及びエキソソームからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、ナノ粒子担体は、ポリマー性デンドリマーを含む。ある特定の実施形態では、ナノ粒子担体は、PEG、(乳酸/グリコール酸)コポリマー(PLGA)、及びポリホスファゼンからなる群から選択されるポリマーを含む。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするRNAの送達のために使用される脂質ナノ粒子(LNP)は、三級又は四級アミンを有するイオン化可能又はカチオン性脂質又はポリマー材料、双性イオン性脂質(例えば、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン[DOPE])、コレステロール、ポリエチレングリコール(PEG)-脂質又はそれらの任意の組合せを含む。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、カチオン性脂質、生分解性イオン化可能脂質、脂質ナノ粒子(LNP)への共製剤化、ナノリポソーム、エマルジョン、ポリマー性担体、エレクトロポレーション、リポフェクション、リン酸カルシウム沈降、ナノ粒子ベースのトランスフェクション、ウイルスベースのトランスフェクション、又はカチオン性ポリマー、例えば、DEAE-デキストラン若しくはポリエチレンイミンに基づくトランスフェクションからなる群から選択される方法によって、細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ex vivoで細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、in vivoで細胞内に送達される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ヒト対象の宿主細胞における発現のためのものである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、in vivo又はex vivoで宿主細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、in vivoで宿主細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ex vivoで宿主細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ヒト対象の宿主細胞内に送達され、その細胞はその後に式(I)のIL-2タンパク質を発現する。ある特定の実施形態では、前記宿主細胞は、免疫細胞である。ある特定の実施形態では、前記免疫細胞は、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、骨髄系細胞、樹状細胞、赤血球、マクロファージ、B細胞、又は他の任意の遺伝子改変された免疫細胞型からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ウイルスベクターを使用するウイルスベースのトランスフェクションを介して細胞内に送達される。ある特定の実施形態では、ウイルスベクターは、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、ウイルスベクターは、DNAベースのウイルスベクター及びRNAベースのウイルスベクターからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドを含むDNAベースのウイルスベクターは、ポックスウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、及びヘルペスウイルスからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス1及び単純ヘルペスウイルス2からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、単純ヘルペスウイルス1は、少なくとも1つのウイルス遺伝子、例えば、ICP34.5、ICP6/UL39、及びICP47からなる群から選択される遺伝子の欠失を有する。ある特定の実施形態では、単純ヘルペスウイルス1は、G207、HSV1716、NV1020、及びタリモジーン・ラハーパレプベック(Oncovex-GMCSF)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、DNAベースのウイルスベクターは、腫瘍溶解性ウイルスである。ある特定の実施形態では、DNAベースの腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス1、アデノウイルス、及びポックスウイルスからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、腫瘍溶解性アデノウイルスは、H101、ColoAd1(Ad11p/Ad3)、及びOnyx-015(Ad2/5 dl1520)からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドを含むRNAベースのウイルスベクターは、レンチウイルス、レトロウイルス、アルファウイルス、フラビウイルス、ラブドウイルス、麻疹ウイルス、ポリオウイルス、ヒト泡沫状ウイルス、及びニューカッスル病ウイルスからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、レトロウイルス、例えば、モロニーマウス白血病ウイルス、モロニーマウス肉腫ウイルスおよびマウス幹細胞ウイルスからなる群から選択されるレトロウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、レンチウイルス、例えば、ヒト免疫不全ウイルス1、ヒト免疫不全ウイルス2、及びウマ伝染性貧血ウイルスからなる群から選択されるレンチウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、アルファウイルス、例えば、セムリキ森林ウイルス、シンドビスウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、及びM1ウイルスからなる群から選択されるアルファウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、フラビウイルス、例えば、クンジンウイルス、ウエストナイルウイルス、黄熱ウイルス、及びデングウイルスからなる群から選択されるフラビウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、ラブドウイルス、例えば、狂犬病及び水疱性口内炎ウイルスからなる群から選択されるラブドウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、麻疹ウイルス、例えば、MV-Edmである。ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、ピコルナウイルス、例えば、コクサッキーウイルス及びセネカバレーウイルスからなる群から選択されるピコルナウイルスである。
ある特定の実施形態では、RNAベースのウイルスベクターは、腫瘍溶解性ウイルスである。ある特定の実施形態では、RNAベースの腫瘍溶解性ウイルスは、MV-Edm、ニューカッスル疾患ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、セネカバレーウイルス、及びコクサッキーウイルスからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、ウイルスベクターは、ウイルス様小胞(VLV)である。ある特定の実施形態では、ウイルス様小胞は、2つのウイルスからの構成要素の混成物である。ある特定の実施形態では、ウイルス様小胞は、アルファウイルスであるセムリキ森林ウイルス(SFV)、及びラブドウイルスである水疱性口内炎ウイルス(VSV)からの構成要素の混成物である。
式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドを含むウイルスベクターの宿主細胞内への送達が成功した後に、前記宿主細胞は式(I)のIL-2タンパク質を発現して分泌するであろうことが理解される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドは、ワクチン製剤として送達される。ある特定の実施形態では、前記ワクチン製剤は、DNAベース、RNAベース、細胞ベース、又はウイルスベースのワクチンからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作された細胞は、操作された免疫細胞である。ある特定の実施形態では、操作された免疫細胞は、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、骨髄系細胞、樹状細胞、赤血球、マクロファージ、B細胞、又は他の任意の遺伝子改変された免疫細胞型からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたT細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作されたT細胞は、TCR操作T(TCR-T)細胞、キメラ抗原受容体改変T(CAR-T)細胞、及び普遍的サイトカイン死滅のために再方向付けられたT細胞(T cells redirected for universal cytokine killing)(TRUCK)からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、操作されたT細胞は、TCR-T細胞である。ある特定の実施形態では、操作されたT細胞は、CAR-T細胞である。ある特定の実施形態では、操作されたT細胞は、TRUCKである。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたα/β T細胞で発現される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたγ/δ T細胞で発現される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたナチュラルキラーT細胞で発現される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたNK細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作されたNK細胞は、キメラ抗原受容体改変NK(CAR-NK)細胞である。ある特定の実施形態では、操作されたNK細胞は、リンホカイン活性化キラー(LAK)細胞である。ある特定の実施形態では、操作されたNK細胞は、NK-92細胞である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された骨髄系細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作されたマクロファージは、CAR骨髄系細胞である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された樹状細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作された樹状細胞は、CAR樹状細胞である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたマクロファージで発現される。ある特定の実施形態では、操作されたマクロファージは、CARマクロファージである。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された赤血球で発現される。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された赤血球で発現されて、細胞表面上に提示される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作されたB細胞で発現される。ある特定の実施形態では、操作されたマクロファージは、CAR B細胞である。
操作された免疫細胞で発現された式(I)のIL-2タンパク質は、前記細胞から分泌され得ることが理解される。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質を発現する操作された免疫細胞は、細胞療法のために使用される。ある特定の実施形態では、細胞療法は、養子免疫細胞療法である。ある特定の実施形態では、養子免疫細胞療法は、自己性又は異種性である。ある特定の実施形態では、養子免疫細胞療法は、自己性である。ある特定の実施形態では、養子免疫細胞療法は、異種性である。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質を、細胞、例えば、免疫細胞のin vitro又はex vivo刺激のために使用してもよい。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、操作された免疫細胞の刺激のためのものである。ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質は、T細胞、NK細胞、マクロファージ、及び樹状細胞の群から選択される細胞の刺激のためのものである。
別の態様では、本発明は、式(I)の組換えIL-2タンパク質の発現のための方法に関し、前記方法は、a)式(I)のIL-2タンパク質をコードする1つ以上の遺伝子を発現する宿主細胞を培養するステップ、及びb)宿主細胞培養物から目的の前記組換えIL-2タンパク質を分離するステップを含む。
ある特定の実施形態では、宿主細胞は、原核細胞、例えば細菌細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、大腸菌、バシラス属、例えば、枯草菌、コリネバクテリウム属、例えば、コリネバクテリウム・グルタミクム;及び蛍光菌からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、大腸菌である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バシラス属細菌である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、コリネバクテリウム属細菌である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、蛍光菌である。
ある特定の実施形態では、宿主細胞は、真核細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、酵母、例えば、サッカロミセス・セレビシエ又はピキア・パストリス、糸状菌、例えば、アスペルギルス、トリコデルマ又はミセリオフトーラ・サーモフィラ、バキュロウイルス感染細胞、例えば、バキュロウイルス感染昆虫細胞、例えば、Sf9、Sf21、Hi-5株、又はバキュロウイルス感染哺乳動物細胞、例えば、HeLa、ヒト胚性腎細胞HEK293、若しくはチャイニーズハムスター卵巣細胞(CHO)、哺乳動物細胞系、例えば、マウス骨髄腫リンパ芽球(例えば、NS0細胞)、マウス線維芽細胞(例えば、NIH3T3細胞)、CHO細胞、並びに完全ヒト細胞、例えば、HEK 293細胞、ヒト胚性網膜細胞(例えば、Crucell社のPer.C6)、及びヒト羊水細胞(例えば、Glycotope及びCEVEC)、並びに非溶解性昆虫細胞発現系、例えば、Sf9、Sf21、Hi-5、Schneider 2細胞、又はSchneider 3細胞からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、酵母細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、サッカロミセス・セレビシエ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、ピキア・パストリス細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、糸状菌の細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、アスペルギルス属の細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、トリコデルマ属の細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、ミセリオフトーラ・サーモフィラ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染細胞、例えば、バキュロウイルス感染昆虫細胞、又はバキュロウイルス感染哺乳動物細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染Sf9細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染Sf21細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染Hi-5株の細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染HeLa細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染ヒト腎臓細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染Sf9細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、バキュロウイルス感染CHO細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、哺乳動物細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、マウス骨髄腫リンパ芽球系細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、マウス線維芽細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、CHO細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、HEK 293細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、ヒト胚性網膜細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、ヒト羊水細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、マウス線維芽細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、非溶解性昆虫細胞発現系である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、Sf9細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、Sf21細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、Hi-5細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はSchneider 2細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はSchneider 3細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はアラビドプシス・タリアナ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はニコチアナ・ベンサミアナ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はニオチアナ・タバカム細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はメディカゴ・サティバ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はコウキクサ細胞である。ある特定の実施形態では、宿主細胞はフィスコミトレラ・パテンス細胞である。
ある特定の実施形態では、上記の宿主細胞及び生物は、(遺伝子的又は他の方法で)改変して本来の生物のグリコシル化を変更する、例えばヒト等の哺乳動物に存在するグリコシル化により近い、又は同一であるグリコシル化を得ることができる。
ある特定の実施形態では、宿主細胞は、例えば特定のグリコシルトランスフェラーゼの欠失若しくは過剰発現により、他の生物由来のグリコシルトランスフェラーゼの導入により、又は異なる基質及び／若しくはアクセプター特異性を有する改変グリコシルトランスフェラーゼの導入により、特定のグリコシル化パターン又はより均一なグリコシル化パターンをもたらすように改変される。宿主細胞は、ある特定の実施形態では、天然ではその宿主細胞中に存在しない特定の炭水化物残基を合成するように改変され得る。
目的の分泌タンパク質の収量を増加させる1つの方法は、タンパク質を分泌に導くシグナル又はリーダー配列の切断の機構を改良することである。シグナル配列又はリーダー配列の正しいプロセシングは、成熟分泌タンパク質のN末端を遊離させることから、分泌経路における決定的なステップであり、効率的な分泌を達成するために通常は必要とされる。シグナル配列又はリーダー配列の切断が不完全であれば、典型的には、タンパク質の細胞内蓄積を引き起こすが、場合によっては不完全なプロセシング産物も同様に分泌されることがある。
ほとんどの発現系において、分泌は、分泌されるタンパク質のN末端に融合して、分泌の前に又は分泌と共に宿主細胞の特定のプロセシング酵素によって切断される分泌シグナルペプチドによって誘導される。したがって、式(I)のIL-2タンパク質は、ある特定の実施形態では、分泌の前に又は分泌と共に、宿主細胞の特定のプロセシング酵素によって切断される分泌シグナルペプチドと共に発現される。
哺乳動物発現系において、シグナルペプチドは、ある特定の実施形態では、任意の天然に分泌されるタンパク質のシグナルペプチドである。ある特定の実施形態では、哺乳動物発現系のためのシグナルペプチドは、ある特定の実施形態では、したがって、天然に分泌されるタンパク質のシグナルペプチドである。ある特定の実施形態では、哺乳動物発現系のためのシグナルペプチドは、in silicoで設計された、又は効率的に分泌を導くことが実験的に見出された非天然合成シグナル配列である。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号238、配列番号239及び配列番号240からなる群から選択される配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号238の配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号239の配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号240の配列を有する。
ある特定の実施形態では、シグナルペプチドを有する式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号248、配列番号250及び配列番号252からなる群から選択される配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドを有する式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号248の配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドを有する式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号250の配列を有する。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドを有する式(I)のIL-2タンパク質は、配列番号252の配列を有する。
大腸菌では、タンパク質をペリプラズム分泌に導くシグナル配列は、ペリプラズムに天然に分泌される任意の細菌のシグナルペプチドであり得る。ある特定の実施形態では、大腸菌における式(I)のIL-2タンパク質の発現のためのシグナルペプチドは、phoA、dsbA、gllI、mal、OmpA、OmpC、OmpT、pelB、torA、torT、EOX、STII、SfmC、lamB、MglB、MmAp、及びtolBからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、シグナルペプチドは、in silicoで設計された、又は分泌を効率的に導くことが実験的に見出された非天然配列である。
酵母発現系、例えば、S.セレビシエ及びピキア・パストリスでは、発現を導くリーダー配列は、シグナル配列及びプロペプチドを含んでもよく、そのうちのシグナル配列は、分泌されるタンパク質をERに導き、ER内への輸送に伴って切断され、プロペプチドは、増殖培地中への分泌の前にKex2酵素によってゴルジ装置で切断される。リーダー配列は、天然に分泌される酵素又はフェロモンのリーダー配列であってもよい。ある特定の実施形態では、酵母発現系における発現のための式(I)のIL-2タンパク質のリーダー配列は、したがって、S.セレビシエ接合因子アルファリーダー配列、SUC2リーダー配列、及びVOA1リーダー配列からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、リーダー配列は、別の酵母若しくは糸状菌からの分泌タンパク質に由来するか、又はin silicoで設計された非天然リーダー配列であってもよく、又はフォールディング及び分泌を効率的に導くことが実験的に見出されたリーダー配列であってもよい。また、リーダー配列は、例えば、ランダムなアミノ酸置換の多くの組合せを含む、リーダー配列の大規模なライブラリーから実験的に同定されたものであってもよい。
シグナル又はリーダー配列が宿主細胞の内因性プロセシング酵素によって正しく切断されるかどうかは、切断部位のすぐ後のアミノ酸配列に依存し、これは成熟プロセシングされて分泌される組換えタンパク質のN末端を構成している。目的のタンパク質の特定のN末端アミノ酸配列に加えて、目的のフォールディングしたタンパク質におけるN末端のアクセシビリティは、シグナル配列又はリーダーがどの程度効率的に処理されるかに影響を与える可能性がある。例えば、埋没N末端はプロセシングプロテアーゼにアクセスできないため、分泌戦略にとって問題となる可能性がある。
入手可能な実験データを基にした予測モデルを使用することにより、シグナルペプチダーゼ複合体によってある特定のアミノ酸配列が切断される確率を算出することができる。そのようなツールはオンラインで入手可能であり、当業者であれば、真核生物及び細菌においてシグナルペプチドが正しく処理される見込みを予測することが可能である。酵母発現系では、リーダー配列は典型的には、ER内でシグナルペプチダーゼ複合体によって切断されるシグナル配列、及びゴルジ体でKex2フューリンプロテアーゼによって切断されるプロペプチドの両方を含む。Kex2の認識部位であるKRは、酵母の種にわたり、Kex2の基質間でよく保存されている。Kex2基質のP1'、P2'、P4'位には負荷電アミノ酸が多く存在することが知られている。しかし、Kex2による切断の可能性は、典型的には、ケースバイケースで実験的に検討する必要がある。
シグナル配列又はリーダー配列の正しいプロセシングが、正しくフォールディングした可溶性タンパク質の効率的な分泌のために必要ないくつかの特徴の1つであることは、当業者には周知である。重要な特徴の例は、転写及び翻訳の適切な速度、ERへの翻訳時又は翻訳後の移動、ER内でのフォールディング及び正しいジスルフィド架橋の形成、並びに細胞からの小胞輸送である。したがって、コンピュータによる分泌効率の予測を実験的に検証することが重要である。
正しくフォールディングしていないか又は凝集したタンパク質が細胞内に蓄積すると、宿主細胞の生理機能に悪影響を与え、ストレス応答を誘発し、増殖速度及び細胞の適応度を低下させる可能性があることが知られている。従って、シグナル配列又はリーダー配列のプロセシングを改善することによって細胞内蓄積を回避することは、増殖速度、細胞密度及び細胞の大量生産性の増加をもたらし、目的のタンパク質の全体的な生産性にプラスに貢献する可能性がある。更に、より適合した細胞株は、スケール及び培養条件にわたって強固な挙動をし、プロセスの擾乱により良く対処することができる可能性が高い。更に、正常な増殖速度及び細胞適合性を有する細胞株は、導入遺伝子発現の影響、例えば、産物の細胞内蓄積に起因して増殖速度及び細胞適合性が低下した細胞株よりも不安定性のリスクが低いことが当業者に一般に認識されている。導入遺伝子の発現によって増殖速度が低下した細胞株では、導入遺伝子の発現を低下させる事象(例えば、遺伝子サイレンシング事象、変異、又は直接反復組換えによる導入遺伝子のループアウト)の発生によって、競合上の増殖優位性がもたらされる。発現が低下した細胞は、導入遺伝子を依然として高レベルで発現している集団内の他の細胞を急速に打ち負かし、不安定な発現表現型にさせる。
ある特定の実施形態では、式(I)のIL-2タンパク質をコードする1つ以上の遺伝子を発現する宿主細胞は、そのゲノム内に、式(I)のIL-2タンパク質をコードする1つ以上の遺伝子を含んでもよい。
別の態様では、本発明は、式(I)のIL-2タンパク質のうちの1つ以上を含むコンジュゲートに関する。
ある特定の実施形態では、前記コンジュゲートは、式(I)のIL-2タンパク質にコンジュゲートされた同じであっても異なっていてもよい少なくとも1つ、例えば1つ、2つ、3つ、又は4つの部分Mmodを含む。そのような部分Mmodの結合は、IL-2タンパク質のN末端、C末端、アミノ酸側鎖、又は内部部位であってもよい。ある特定の実施形態では、そのような部分Mmodの結合は、式(I)のIL-2タンパク質のN末端にある。ある特定の実施形態では、そのような部分Mmodの結合は、式(I)のIL-2タンパク質のC末端にある。ある特定の実施形態では、そのような部分Mmodの結合は、IL-2部分の内部部位、例えば、式(I)のIL-2タンパク質のアミノ酸側鎖にある。2つ以上の部分Mmodが、式(I)のIL-2タンパク質に結合される場合、結合は、N末端、C末端、及び内部部位からなる群から選択される結合部位の任意の組合せで起こり得る。
一実施形態では、Mmodは置換基である。好ましくは、そのような置換基は、15Da～1kDaの範囲の分子量を有する。
一実施形態では、Mmodは、ポリマー部分である。そのようなポリマー部分は、直鎖、分岐、又はマルチアームポリマーを含み得る。一実施形態では、ポリマーは、直鎖ポリマーである。別の実施形態では、ポリマーは、分岐ポリマーである。ある特定の実施形態では、そのような分岐ポリマーは、1、2、3、4又は5つの分岐点を有する。各々の分岐点から、2つ、3つ又は4つのポリマーアームが伸びていてもよい。別の実施形態では、ポリマーは、マルチアームポリマーである。そのようなマルチアームポリマーは、3、4、5、6、7、又は8つのポリマーアームを有してもよい。
Mmodがポリマー部分である場合、ある特定の実施形態では、そのようなポリマー部分は、0.5kDa～1000kDa、例えば1kDa～1000kDa、例えば2kDa～500kDa、3kDa～200kDa、5kDa～120kDa、又は7～40kDaの範囲の分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約0.5kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約1kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約2kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約3kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約4kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約5kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、約7.5kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約10kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約15kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約20kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約30kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約40kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約50kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約70kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約80kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約90kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、約100kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、0.5kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、1kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、2kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、3kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、4kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、5kDaの分子量を有する。一実施形態では、そのようなポリマーは、7.5kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、10kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、15kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、20kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、30kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、40kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、50kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、70kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、80kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、90kDaの分子量を有する。別の実施形態では、そのようなポリマー部分は、100kDaの分子量を有する。
Mmodがポリマー部分である場合、そのようなポリマー部分は、好ましくは、2-メタクリロイル-オキシエチルホスホリル(phosphoyl)コリン、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリレート)、ポリ(アクリルアミド)、ポリ(アルキルオキシ)ポリマー、ポリ(アミド)、ポリ(アミドアミン)、ポリ(アミノ酸)、ポリ(酸無水物)、ポリ(アスパルタミド)、ポリ(酪酸)、ポリ(グリコール酸)、ポリブチレンテレフタレート、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(カーボネート)、ポリ(シアノアクリレート)、ポリ(ジメチルアクリルアミド)、ポリ(エステル)、ポリ(エチレン)、ポリ(エチレングリコール)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(エチルホスフェート)、ポリ(エチルオキサゾリン)、ポリ(グリコール酸)、ポリ(ヒドロキシエチルアクリレート)、ポリ(ヒドロキシエチルオキサゾリン)、ポリ(ヒドロキシメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリルアミド)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルオキサゾリン)、ポリ(イミノカーボネート)、ポリ(乳酸)、ポリ(乳酸-co-グリコール酸)、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(メタクリレート)、ポリ(メチルオキサゾリン)、ポリ(オルガノホスファゼン)、ポリ(オルトエステル)、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(プロピレングリコール)、ポリ(シロキサン)、ポリ(ウレタン)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(ビニルアミン)、ポリ(ビニルメチルエーテル)、ポリ(ビニルピロリドン)、シリコーン、セルロース、カルボメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、キチン、キトサン、デキストラン、デキストリン、ゼラチン、ヒアルロン酸及び誘導体、官能化ヒアルロン酸、アルギネート、マンナン、ペクチン、ラムノガラクツロナン、デンプン、ヒドロキシアルキルデンプン、ヒドロキシエチルデンプン、並びに他の炭水化物系のポリマー、キシラン、及びそのコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む。
ある特定の実施形態では、Mmodは、PEG系のポリマーである。
ある特定の実施形態では、Mmodは、ヒアルロン酸系のポリマーである。
ある特定の実施形態では、Mmodは、式(I)のIL-2タンパク質に化学コンジュゲートされ得るペプチド又はタンパク質部分を含む。好ましくは、このペプチド又はタンパク質部分Mmodは、IL-2の断片又はIL-2部分ではない。
ペプチド又はタンパク質部分の形態のMmodは、合成又は天然のタンパク質部分又はその一部若しくはバリアントであり得る。例示的なペプチド及びタンパク質は、アルブミン、抗体ドメイン、例えば免疫グロブリンのFcドメイン又は抗原結合ドメイン、CTP、及びCD25を、各々その天然に存在する形態で、又はそのバリアント若しくは断片のいずれかとして含む。
Mmodの式(I)のIL-2タンパク質に対する結合は、安定な結合を介してもよい。
ある特定の実施形態では、Mmodは、抗体、抗体断片、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファマブ、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、DARPin、Fynomer（登録商標）、Kunitzドメインペプチド、モノボディ、ナノCLAMP、環状ペプチド、ペプチド、重鎖抗体、VHH抗体若しくはNanobody（登録商標）、単鎖可変フラグメント(scFv)、天然若しくは改変ペプチド又はタンパク質受容体リガンド、及び小分子阻害剤からなる群から選択される標的化部分を含む。
ある特定の実施形態では、このコンジュゲートは、式(Ia)又は(Ib)：
Figure 2023540701000017
 ［式中、
-Dは、式(I)のIL-2タンパク質を含み、
-L1-は、-Dに共有結合で且つ可逆的に結合したリンカー部分であり、
-L2-は、化学結合、又はスペーサー部分であり、
-Zは、ポリマー部分、又は置換脂肪酸部分であり、
xは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、又は16からなる群から選択される整数であり、
yは、2、3、4、及び5からなる群から選択される整数である］
のIL-2コンジュゲート又はその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式(Ia)及び(Ib)のコンジュゲートは、式(I)のバイアスIL-2部分又はバイアスIL-2タンパク質を放出し、ここで比配列番号213のIL-2に対する比バイアスIL-2の比は1より大きく、好ましくは2より大きく、好ましくは3より大きく、好ましくは4より大きく、更により好ましくは5より大きい。ある特定の実施形態では、比配列番号213のIL-2に対する比バイアスIL-2の比は10より大きく、20より大きく、50より大きく、70より大きく、100より大きく、150より大きく、又は200より大きい。
式(Ia)及び(Ib)の-Dは、本明細書中に記載したように、少なくとも1つの部分Mmodを含み得る。
式(Ia)又は(Ib)のIL-2コンジュゲートは、少なくとも1つの共有結合で且つ可逆的に結合したポリマー部分及び/又は置換脂肪酸部分-Zを含む。
そのような少なくとも1つの共有結合で且つ可逆的に結合したポリマー部分及び/又は置換脂肪酸部分の付加は、式(I)のIL-2部分の循環半減期の延長をもたらすことができ、その可逆的結合は十分な医薬活性を確保する。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ia)のものであり、置換脂肪酸又はポリマー部分のいずれかである1つの部分-Zを含む。ある特定の実施形態では、-Zは置換脂肪酸である。ある特定の実施形態では、-Zはポリマー部分である。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ib)のものであり、同じ又は異なり得る2つの部分-Zを含む。ある特定の実施形態では、両方の部分-Zが、同じ又は異なり得る置換脂肪酸である。ある特定の実施形態では、両方の部分-Zが、同じ又は異なり得るポリマー部分である。ある特定の実施形態では、一方の部分-Zが置換脂肪酸であり、他方の部分-Zがポリマー部分である。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ib)のものであり、同じ又は異なり得る3つの部分-Zを含む。ある特定の実施形態では、3つ全ての部分-Zが、同じ又は異なり得る置換脂肪酸である。ある特定の実施形態では、3つ全ての部分-Zが、同じ又は異なり得るポリマー部分である。ある特定の実施形態では、1つ又は2つの部分-Zが置換脂肪酸であり、残りの部分／部分（複数）-Zがポリマー部分である。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ib)のものであり、同じ又は異なり得る4つの部分-Zを含む。ある特定の実施形態では、4つ全ての部分-Zが、同じ又は異なり得る置換脂肪酸である。ある特定の実施形態では、4つ全ての部分-Zが、同じ又は異なり得るポリマー部分である。ある特定の実施形態では、1、2、又は3つの部分-Zが置換脂肪酸であり、残りの部分／部分（複数）-Zがポリマー部分である。
-Zが置換脂肪酸部分である場合、これは好ましくは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2005/027978号A2及び国際公開第2014/060512号A1に開示される置換脂肪酸部分である。
-Zがポリマー部分である場合、そのようなポリマー部分は、ある特定の実施形態では、1kDa～1000kDa、例えば、2kDa～500kDa、3kDa～200kDa、5kDa～120kDa、10kDa～100kDa、又は15kDa～80kDaの範囲の分子量を有する。ある特定の実施形態では、-Zは、約2kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約5kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約10kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約15kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約20kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約30kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約40kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約50kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約60kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約70kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約80kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約90kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、約100kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、2kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、5kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、10kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、15kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、20kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、30kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、40kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、50kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、60kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、70kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、80kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、90kDaの分子量を有するポリマー部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、100kDaの分子量を有するポリマー部分である。
ある特定の実施形態では、-Zは、2-メタクリロイル-オキシエチルホスホリル(phosphoyl)コリン、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリレート)、ポリ(アクリルアミド)、ポリ(アルキルオキシ)ポリマー、ポリ(アミド)、ポリ(アミドアミン)、ポリ(アミノ酸)、ポリ(酸無水物)、ポリ(アスパルタミド)、ポリ(酪酸)、ポリ(グリコール酸)、ポリブチレンテレフタレート、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(カーボネート)、ポリ(シアノアクリレート)、ポリ(ジメチルアクリルアミド)、ポリ(エステル)、ポリ(エチレン)、ポリ(エチレングリコール)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(エチルホスフェート)、ポリ(エチルオキサゾリン)、ポリ(グリコール酸)、ポリ(ヒドロキシエチルアクリレート)、ポリ(ヒドロキシエチルオキサゾリン)、ポリ(ヒドロキシメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリルアミド)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルオキサゾリン)、ポリ(イミノカーボネート)、ポリ(乳酸)、ポリ(乳酸-co-グリコール酸)、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(メタクリレート)、ポリ(メチルオキサゾリン)、ポリ(オルガノホスファゼン)、ポリ(オルトエステル)、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(プロピレングリコール)、ポリ(シロキサン)、ポリ(ウレタン)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(ビニルアミン)、ポリ(ビニルメチルエーテル)、ポリ(ビニルピロリドン)、シリコーン、セルロース、カルボメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、キチン、キトサン、デキストラン、デキストリン、ゼラチン、ヒアルロン酸及び誘導体、官能化ヒアルロン酸、アルギネート、マンナン、ペクチン、ラムノガラクツロナン、デンプン、ヒドロキシアルキルデンプン、ヒドロキシエチルデンプン、並びに他の炭水化物系のポリマー、キシラン、及びそのコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含むポリマー部分である。
ある特定の実施形態では、-Zは、ペプチド又はタンパク質部分である。好ましくは、そのようなペプチド又はタンパク質部分は、IL-2部分又はその断片ではない。そのようなペプチド又はタンパク質部分-Zは、-L1-L2-を介して-Dに化学的にコンジュゲートされてもよく、又は可逆的リンカー部分-L1-を介して-Dに翻訳融合されてもよく、ここで、-L1-は、ペプチド又はタンパク質部分であり、-L2-は好ましくは化学結合である。ある特定の実施形態では、そのようなペプチド又はタンパク質部分-Zは、-L1-L2-を介して-Dに化学的にコンジュゲートされる。ある特定の実施形態では、そのようなペプチド又はタンパク質部分-Zは、可逆的リンカー部分-L1-を介して-Dに翻訳融合され、ここで、-L1-はペプチド又はタンパク質部分であり、-L2-は好ましくは化学結合である。そのようなペプチド又はタンパク質可逆的リンカー部分-L1-は、酵素的又は非酵素的に分解可能であり得ることが理解される。酵素的分解を促進するため、-L1-は、プロテアーゼ認識部位を含んでもよい。
-Zがペプチド又はタンパク質部分である場合、これは、ある特定の実施形態では、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第2012/0035101号A1に記載の絨毛性ゴナドトロピンのカルボキシル末端ペプチドを含む部分、アルブミン部分、ランダムコイルタンパク質部分、及びFc融合タンパク質部分からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、-Zは、ランダムコイルペプチド又はタンパク質部分を含む。
ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルペプチド又はタンパク質部分は、少なくとも25個のアミノ酸残基及び多くとも2000個のアミノ酸、例えば、30～1500個のアミノ酸残基又は50～500個のアミノ酸残基を含む。
ある特定の実施形態では、-Zは、ランダムコイルタンパク質部分を形成するアミノ酸の総数の少なくとも80%、例えば、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%、又は少なくとも99%がアラニン及びプロリンから選択されるランダムコイルタンパク質部分を含む。ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルタンパク質部分のアミノ酸残基の総数の少なくとも10%であるが75%未満、例えば65%未満がプロリン残基である。ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルタンパク質部分は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第2011/144756号A1に記載のものである。ある特定の実施形態では、-Zは、国際公開第2011/144756号に開示の配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号51及び配列番号61からなる群から選択される少なくとも1つの部分を含む。アラニン及びプロリンを含むそのようなランダムコイルタンパク質を含む部分は、本明細書において「PA」又は「PA部分」と称される。
したがって、ある特定の実施形態では、-Zは、PA部分を含む。
ある特定の実施形態では、-Zは、ランダムコイルタンパク質部分を形成するアミノ酸の総数の少なくとも80%、例えば、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%又は少なくとも99%がアラニン、セリン及びプロリンから選択されるランダムコイルタンパク質部分を含む。ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルタンパク質部分のアミノ酸残基の総数の少なくとも4%であるが40%未満がプロリン残基である。ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルタンパク質部分は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2008/155134号A1に記載されている通りのものである。ある特定の実施形態では、-Zは、国際公開第2008/155134号A1に開示の配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30、配列番号32、配列番号34、配列番号36、配列番号40、配列番号42、配列番号44、配列番号46、配列番号50、配列番号52、配列番号54及び配列番号56からなる群から選択される少なくとも1つの部分を含む。アラニン、セリン及びプロリンを含むそのようなランダムコイルタンパク質部分を含む部分は、本明細書では「PAS」又は「PAS部分」と称される。
したがって、ある特定の実施形態では、-Zは、PAS部分を含む。
ある特定の実施形態では、-Zは、ランダムコイルタンパク質部分を形成するアミノ酸の総数の少なくとも80%、例えば、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%又は少なくとも99%がアラニン、グリシン、セリン、トレオニン、グルタミン酸及びプロリンから選択されるランダムコイルタンパク質部分を含む。ある特定の実施形態では、そのようなランダムコイルタンパク質部分は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2010/091122号A1に記載されている通りのものである。ある特定の実施形態では、-Zは、国際公開第2010/091122号A1に開示の配列番号182、配列番号183、配列番号184; 配列番号185、配列番号186、配列番号187、配列番号188、配列番号189、配列番号190、配列番号191、配列番号192、配列番号193、配列番号194、配列番号195、配列番号196、配列番号197、配列番号198、配列番号199、配列番号200、配列番号201、配列番号202、配列番号203、配列番号204、配列番号205、配列番号206、配列番号207、配列番号208、配列番号209、配列番号210、配列番号211、配列番号212、配列番号213、配列番号214、配列番号215、配列番号216、配列番号217、配列番号218、配列番号219、配列番号220、配列番号221、配列番号759、配列番号760、配列番号761、配列番号762、配列番号763、配列番号764、配列番号765、配列番号766、配列番号767、配列番号768、配列番号769、配列番号770、配列番号771、配列番号772、配列番号773、配列番号774、配列番号775、配列番号776、配列番号777、配列番号778、配列番号779、配列番号1715、配列番号1716、配列番号1718、配列番号1719、配列番号1720、配列番号1721及び配列番号1722からなる群から選択される少なくとも1つの部分を含む。アラニン、グリシン、セリン、トレオニン、グルタミン酸及びプロリンを含むそのようなランダムコイルタンパク質部分を含む部分は、本明細書では「XTEN」又は「XTEN部分」と称される。
したがって、ある特定の実施形態では、-Zは、XTEN部分を含む。
ある特定の実施形態では、-Zは、ヒアルロン酸系ポリマーである。
ある特定の実施形態では、-ZはPEG系部分、例えば直鎖、分枝、又はマルチアームPEG系部分である。ある特定の実施形態では、-Zは分岐PEG系部分、例えば、1、2、3、4、5又は6つの分岐点を有する分岐PEG系部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、1つ、2つ又は3つの分岐点を有する分岐PEG系部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、1つの分岐点を有する分岐PEG系部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、2つの分岐点を有する分岐PEG系部分である。ある特定の実施形態では、-Zは、3つの分岐点を有する分岐PEG系部分である。
各分岐点は、-N<、-CH<及び>C<からなる群から独立して選択され得る。
ある特定の実施形態では、-Zは、式(A)
Figure 2023540701000018
 ［式中、
-BP1<、-BP2<、-BP3<が、-N<及び-C(R8)<からなる群から互いに独立して選択され、
R8が、H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から選択され、
-P1、-P2、-P3、-P4が、互いに独立して、少なくとも40%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖であり、
-C1-、-C2-が、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R10)-、-S(O)2N(R10)-、-S(O)N(R10)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R10)S(O)2N(R10a)-、-S-、-N(R10)-、-OC(OR10)(R10a)-、-N(R10)C(O)N(R10a)-、及び-OC(O)N(R10)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各々のTが、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって独立して任意選択で置換され、
各々のR9が、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COOR11、-OR11、-C(O)R11、-C(O)N(R11R11a)、-S(O)2N(R11R11a)、-S(O)N(R11R11a)、-S(O)2R11、-S(O)R11、-N(R11)S(O)2N(R11aR11b)、-SR11、-N(R11R11a)、-NO2、-OC(O)R11、-N(R11)C(O)R11a、-N(R11)S(O)2R11a、-N(R11)S(O)R11a、-N(R11)C(O)OR11a、-N(R11)C(O)N(R11aR11b)、-OC(O)N(R11R11a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々のR10、R10a、R11、R11a、及びR11bが、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される］
の部分を含む。
ある特定の実施形態では、式(A)の-P1、-P2、-P3、-P4は、互いに独立して、少なくとも50% PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖である。ある特定の実施形態では、-P1、-P2、-P3、-P4は、互いに独立して、少なくとも60%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖である。ある特定の実施形態では、-P1、-P2、-P3、-P4は、互いに独立して、少なくとも70%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖である。ある特定の実施形態では、-P1、-P2、-P3、-P4は、互いに独立して、少なくとも80%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖である。
ある特定の実施形態では、式(A)の部分-P1、-P2、-P3、及び-P4の分子量は、互いに独立して5～30kDa、例えば5～25kDa、又は8～20kDaの範囲である。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約5kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約7kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約10kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約12kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約15kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約20kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約25kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は約30kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は7kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は10kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は12kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は15kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は20kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は25kDaであり得る。ある特定の実施形態では、部分-P1、-P2、-P3、又は-P4の分子量は30kDaであり得る。
ある特定の実施形態では、式(A)の-P1、-P2、-P3、及び-P4は、同じ構造を有する。
ある特定の実施形態では、式(A)の-BP1<は、-N<である。
ある特定の実施形態では、式(A)の-BP2<及び-BP3<は、同じ構造を有する。ある特定の実施形態では、式(A)の-BP2<及び-BP3<は、いずれも-CH<である。
ある特定の実施形態では、式(A)の-C1-及び-C2-は同じ構造を有する。ある特定の実施形態では、式(A)の-C1-及び-C2-は、-O-、-C(O)N(R10)-、及び3～10員ヘテロシクリルからなる群から選択される1つ以上の基によって中断されるC1-50アルキルであり、ここで、3～10員ヘテロシクリルは、少なくとも1つのオキソ(=O)によって置換される。
ある特定の実施形態では、式(A)の-C1-及び-C2-は、式(A-a)
Figure 2023540701000019
 ［式中、
星印を付けた破線は、-BP1-に対する結合を示し、
印を付けていない破線はそれぞれ、-BP2-又は-BP3-に対する結合を示し、
q1は、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
q2は、1、2、3、4、及び5からなる群から選択され、
q3は、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
q4は、1、2、及び3からなる群から選択される］
のものである。
ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は、4、5、6、7、及び8からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は、5、6、及び7からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は1である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は2である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は3である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は4である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は5である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は6である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は7である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq1は8である。
ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は、1、2、及び3からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は1である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は2である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は3である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は4である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq2は5である。
ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は、2、3、4、及び5からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は、2、3、及び4からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は1である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は2である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は3である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は4である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は5である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は6である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は7である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq3は8である。
ある特定の実施形態では、式(A-a)のq4は1である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq4は2である。ある特定の実施形態では、式(A-a)のq4は3である。
ある特定の実施形態では、式(A)の-P1、-P2、-P3、及び-P4は、互いに独立して式(A-b)
Figure 2023540701000020
 ［式中、
破線は、-Zの残部に対する結合を示し、
mは、0又は1であり、
pは、70～900の範囲の整数であり、
qは、1、2、3、4、5、及び6からなる群から選択される］
のものである。
ある特定の実施形態では、式(A-b)のmは0である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のmは1である。
ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約115である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約160である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約225である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約270である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約340である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約450である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のpは約560である。
ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは1である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは2である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは3である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは4である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは5である。ある特定の実施形態では、式(A-b)のqは6である。
ある特定の実施形態では、式(Ia)又は(Ib)の-Zは、式(A-c)
Figure 2023540701000021
 ［式中、
p1、p2、p3、p4は、互いに独立して、70～900の範囲の整数である］
の部分を含む。
ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約115である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約160である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約225である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約270である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約340である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約450である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1は約560である。
ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約115である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約160である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約225である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約270である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約340である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約450である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp2は約560である。
ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約115である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約160である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約225である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約270である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約340である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約450である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp3は約560である。
ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約115である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約160である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約225である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約270である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約340である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約450である。ある特定の実施形態では、式(A-c)のp4は約560である。
ある特定の実施形態では、式(A-c)のp1、p2、p3、及びp4は同一である。ある特定の実施形態では、p1、p2、p3、及びp4は、220～240の範囲である。
ある特定の実施形態では、-Zは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2012/02047号A1に開示される部分である。
ある特定の実施形態では、-Zは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2013/024048号A1に開示される部分である。
ある特定の実施形態では、式(I)の1つ以上のIL-2タンパク質又はその薬学的に許容される塩を含むコンジュゲートは、複数の部分-Dを含み、これは少なくとも1つの部分-L1-L2-を介して少なくとも1つの部分Z'にコンジュゲートされた式(I)の前記IL-2タンパク質であり、部分-L1-は可逆的結合を介して-Dにコンジュゲートされており、部分-L2-はZ'にコンジュゲートされており、-L1-及び-L2-は式(Ia)及び(Ib)に関して定義された通りに使用され、Z'は水不溶性のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、そのようなハイドロゲルZ'は、2-メタクリロイル-オキシエチルホスホリルコリン、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリレート)、ポリ(アクリルアミド)、ポリ(アルキルオキシ)ポリマー、ポリ(アミド)、ポリ(アミドアミン)、ポリ(アミノ酸)、ポリ(酸無水物)、ポリ(アスパルタミド)、ポリ(酪酸)、ポリ(グリコール酸)、ポリブチレンテレフタレート、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(カーボネート)、ポリ(シアノアクリレート)、ポリ(ジメチルアクリルアミド)、ポリ(エステル)、ポリ(エチレン)、ポリ(アルキレングリコール)、例えばポリ(エチレングリコール)及びポリ(プロピレングリコール)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(エチルホスフェート)、ポリ(エチルオキサゾリン)、ポリ(グリコール酸)、ポリ(ヒドロキシエチルアクリレート)、ポリ(ヒドロキシエチルオキサゾリン)、ポリ(ヒドロキシメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリルアミド)、ポリ(ヒドロキシプロピルメタクリレート)、ポリ(ヒドロキシプロピルオキサゾリン)、ポリ(イミノカーボネート)、ポリ(乳酸)、ポリ(乳酸-co-グリコール酸)、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(メタクリレート)、ポリ(メチルオキサゾリン)、ポリ(オルガノホスファゼン)、ポリ(オルトエステル)、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(プロピレングリコール)、ポリ(シロキサン)、ポリ(ウレタン)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(ビニルアミン)、ポリ(ビニルメチルエーテル)、ポリ(ビニルピロリドン)、シリコーン、セルロース、カルボメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、キチン、キトサン、デキストラン、デキストリン、ゼラチン、ヒアルロン酸及び誘導体、官能化ヒアルロン酸、マンナン、ペクチン、ラムノガラクツロナン、デンプン、ヒドロキシアルキルデンプン、ヒドロキシエチルデンプン、並びに他の炭水化物系のポリマー、キシラン、及びそのコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む。
ある特定の実施形態では、-Z'は、ポリ(アルキレングリコール)系又はヒアルロン酸系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、-Z'は、ポリ(プロピレングリコール)系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、-Z'は、PEG系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、-Z'は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2011/012715号A1又は国際公開第2014/056926号A1に開示されるPEG系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、-Z'は、ヒアルロン酸系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、-Z'は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2018/175788号A1に開示されるヒアルロン酸系のハイドロゲルである。
ある特定の実施形態では、Z'は、国際公開第2013/036847号A1に開示されるハイドロゲルである。特に、ある特定の実施形態では、Z'は、少なくとも第1の反応性ポリマーを切断可能な架橋剤化合物と反応させるステップを含む方法によって生成されるハイドロゲルであり、前記切断可能な架橋剤化合物は、第1の反応性ポリマーと反応する第1の官能基-Y1を含み、生理的条件下で脱離によって切断される部分を更に含み、前記部分は第2の反応性ポリマーと反応する第2の官能基-Y2を含む。ある特定の実施形態では、切断可能な架橋剤化合物は式(PL-1)
Figure 2023540701000022
 ［式中、
mは、0又は1であり、
-Xは、生理的条件下で脱離の対象となる反応性ポリマーに連結可能な官能基、及び前記第2の官能基-Y2を含み、
-R1、-R2及び-R5のうちの少なくとも1つは、ポリマーに連結可能な前記第1の官能基-Y1を含み、
-R1及び-R2のうちの1つであって1つのみは、-H、アルキル、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
任意選択で、-R1及び-R2は、結合して3～8員環を形成してもよく、
-R1及び-R2の少なくとも一方又は両方は、-CN、-NO2、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、-COR3、-SOR3、-SO2R3、及び-SR4からなる群から独立して選択され、
-R3は、-H、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、-OR9、及び-NR9 2からなる群から選択され、
-R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
各々の-R5は、-H、アルキル、アルケニルアルキル、アルキニルアルキル、pが1～1000の範囲の整数である(OCH2CH2)pO-アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルからなる群から独立して選択され、
各々の-R9は、-H及びアルキルからなる群から独立して選択されるか、又は両方の-R9は、それらが結合している窒素と一緒になって、複素環式環を形成し、
式(PL-1)の部分は、更に置換されてもよい］
のものである。
以下の段落では、そのようなハイドロゲルについてより詳細に記載する。
ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Xは、スクシンイミジルカーボネート、スルホスクシンイミジルカーボネートハライド、チオエーテル、エステル、ニトロフェニルカーボネート、クロロホルメート、フルオロホルメート、場合により置換されているフェノール、及び式(PL-2)
Figure 2023540701000023
 ［式中、
破線は、式(PL-1)の残部に対する結合を示し、
-T*-は、-O-、-S-、及び-NR6-からなる群から選ばれ、
zは、1、2、3、4、5、及び6からなる群から選択される整数であり、
-X'-は、存在しないか、又は-OR7-及び-SR7-からなる群から選択され、
-Y2は、反応性ポリマーと連結され得る官能基であり、
-R6は、-H、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
-R7は、アルキレン、フェニレン、及びpが1～1000の範囲の整数である(OCH2CH2)pからなる群から選択される)
からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Xは、スクシンイミジルカーボネート、スルホスクシンイミジルカーボネート、又はニトロフェニルカーボネートなどの活性化カーボネートを含む。ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Xは、カルボニルハライド、例えば、O(C=O)Cl又はO(C=O)Fを含む。ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Xは、式(PL-2)を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Xは、OR7又はSR7であり、ここでR7は、場合により置換されているアルキレン、場合により置換されているフェニレン又は(OCH2CH2)pであり、pは1～1000である。
ある特定の実施形態では、式(PL-2)のpは、1～100の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-2)のpは、1～10の範囲の整数である。
ある特定の実施形態では、式(PL-1)の-Y1、及び式(PL-2)の-Y2は、独立して、N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、マレイミド、-CO2H、-CO2 tBu、1,3-ジエン、シクロペンタジエン、フラン、アルキン、シクロオクチン、アクリレート、又はアクリルアミドを含み、ここでtBuはtert-ブチルであり、-Y1又は-Y2の一方がN3を含む場合、他方はアルキン又はシクロオクチンを含まず、-Y1又は-Y2の一方がSHを含む場合、他方はマレイミド、アクリレート、又はアクリルアミドを含まず、-Y1又は-Y2の一方がNH2を含む場合、他方はCO2Hを含まず、-Y1又は-Y2の一方が1,3-ジエン又はシクロペンタジエンを含む場合、他方はフランを含まない。
ある特定の実施形態では、切断可能な架橋剤化合物は、式(PL-3)
Figure 2023540701000024
 ［式中、
mは、0又は1であり、
nは、1～1000から選択される整数であり、
sは、0、1又は2であり、
tは、2、4、8、16、及び32からなる群から選択され、
-W-は、-O(C=O)O-、-O(C=O)NH-、-O(C=O)S-、-O(C=O)NR6CH2O-、及び-O(C=O)NR6S-からなる群から選択され、
-Qは、結合価=tを有するコア基であり、開裂型架橋化合物の複数のアームを連結し、
tは、2、4、8、16、及び32から選択される整数であり、
-R1、-R2、及び-R5は、式(PL-1)中のように定義される］
のものである。
ある特定の実施形態では、式(PL-3)のtは2である。ある特定の実施形態では、式(PL-3)のtは4である。ある特定の実施形態では、式(PL-3)のtは8である。ある特定の実施形態では、式(PL-3)のtは16である。ある特定の実施形態では、式(PL-3)のtは32である。
ある特定の実施形態では、式(PL-3)の-Qは、
Figure 2023540701000025
 からなる群から選択される構造を有し、
式中、破線は、切断可能な架橋剤化合物の残部に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(PL-3)の-Qは、(PL-3-i)の構造を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-3)の-Qは、(PL-3-ii)の構造を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-3)の-Qは、(PL-3-iii)の構造を有する。
ある特定の実施形態では、切断可能な架橋剤化合物は、式(PL-3)のものであり、式中、mは0であり、nはおよそ100であり、sは0であり、tは4であり、-W-は-O(C=O)NH-であり、-Qは(PL-3i)の構造を有し、-R2はHであり、一方の-R5は-Hであり、他方の-R5は(CH2)5N3であり、-R1は、(4-クロロフェニル)SO2、-SO2で置換されたフェニル、モルホリノ-SO2、又は-CNである。
ある特定の実施形態では、式(PL-3)の-Y1は、N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、マレイミド、CO2H、CO2 tBu、1,3-ジエン、シクロペンタジエン、フラン、アルキン、シクロオクチン、アクリレート、又はアクリルアミドを含み、ここでtBuはtert-ブチルである。
ある特定の実施形態では、式(PL-1)又は(PL-3)の各々の-Y1、及び式(PL-2)の-Y2は、独立して、N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、マレイミド、CO2H、CO2 tBu、1,3-ジエン、シクロペンタジエン、フラン、アルキン、シクロオクチン、アクリレート、又はアクリルアミドを含む。
ある特定の実施形態では、-Y1及び-Y2の一方はアジドであり、他方は、アセチレン、シクロオクチン、及びマレイミドからなる群から選択される反応性官能基である。ある特定の実施形態では、-Y1及び-Y2の一方はチオールであり、他方は、マレイミド、アクリレート、アクリルアミド、ビニルスルホン、ビニルスルホンアミド、及びハロカルボニルからなる群から選択される反応性官能基である。ある特定の実施形態では、-Y1及び-Y2の一方はアミンであり、他方は、カルボン酸及び活性化カルボン酸から選択される選択的な反応性官能基である。ある特定の実施形態では、-Y1及び-Y2の一方はマレイミドであり、他方は、1,3-ジエン、シクロペンタジエン、及びフランからなる群から選択される選択的な反応性官能基である。
ある特定の実施形態では、第1のポリマー及び任意の第2のポリマーは、適切な反応性官能基を含むか、又は式[Y3-(CH2)s(CH2CH2O)n]tQのものである(式中、-Y3は反応性官能基であり、sは0、1、又は2であり、nは、10～1000の範囲の群から選択される整数であり、-Qは、結合価tを有するコア基であり、tは、2、4、8、16、及び32からなる群から選択される整数である)、ホモポリマー性又はコポリマー性のポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリ(N-ビニルピロリドン)、ポリメタクリレート、ポリホスファゼン、ポリラクチド、ポリアクリルアミド、ポリグリコレート、ポリエチレンイミン、アガロース、デキストラン、ゼラチン、コラーゲン、ポリリジン、キトサン、アルギネート、ヒアルロナン、ペクチン及びカラギーナンからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、マルチアームポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも3つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも4つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも5つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも6つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも7つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、少なくとも8つのアームを含む。
ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、マルチアームポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも3つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも4つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも5つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも6つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも7つのアームを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、少なくとも8つのアームを含む。
ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、2アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、4アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、8アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、16アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第1のポリマーは、32アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。
ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、2アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、4アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、8アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、16アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。ある特定の実施形態では、第2のポリマーは、32アームのポリエチレングリコールポリマーを含む。
ある特定の実施形態では、第1及び第2の反応性ポリマーを、順次又は同時に、前記切断可能な架橋剤化合物と反応させる。
ある特定の実施形態では、第1の官能基及び第2の官能基は、同じである。
式(PL-1)、(PL-2)及び(PL-3)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「生理的条件下で脱離によって切断可能な部分」は、基H-C-(CH=CH)m-C-X'(ここでmは0又は1であり、X'は脱離基である)を含む構造を指し、HX'の要素を除去する上記の脱離反応は、pH及び温度の生理的条件下での反応の半減期が1～10,000時間となる速度で起こり得る。好ましくは、反応の半減期は、pH及び温度の生理的条件下で、1～5,000時間、より好ましくは1～1,000時間である。pH及び温度の生理的条件とは、pHが7～8、温度が30～40℃を意味する。
「反応性ポリマー及び反応性オリゴマー」という用語は、最も好ましくはペプチド、タンパク質、及び他の生体分子の安定性要件に適合する穏やかな条件下で、他の官能基に対して反応性である官能基を含むポリマー又はオリゴマーを指す。反応性ポリマーに見出される適切な官能基としては、マレイミド、チオール若しくは保護されたチオール、アルコール、アクリレート、アクリルアミド、アミン若しくは保護されたアミン、カルボン酸又は保護されたカルボン酸、アジド、シクロアルキンを含むアルキン、シクロペンタジエン及びフランを含む1,3-ジエン、α-ハロカルボニル、並びにN-ヒドロキシスクシンイミジル、N-ヒドロキシスルホスクシンイミジル、又はニトロフェニルエステル若しくはカーボネートが挙げられる。
用語「反応性ポリマーに連結され得る官能基」は、反応性ポリマーの対応する官能基と反応して、ポリマーに対する共有結合を形成する官能基を指す。反応性ポリマーに連結され得る適切な官能基としては、マレイミド、チオール若しくは保護されたチオール、アクリレート、アクリルアミド、アミン若しくは保護されたアミン、カルボン酸若しくは保護されたカルボン酸、アジド、シクロアルキンを含むアルキン、シクロペンタジエン及びフランを含む1,3-ジエン、α-ハロカルボニル、並びにN-ヒドロキシスクシンイミジル、N-ヒドロキシスルホスクシンイミジル、又はニトロフェニルエステル若しくはカーボネートが挙げられる。
用語「置換されている」は、1つ以上の水素原子の代わりに1つ以上の置換基を含む、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基を意味する。置換基は、一般に、ハロゲン(-F、-CI、-Br及び-Iを含む)、低級アルキル(直鎖状、分岐状及び環状のものを含む)、低級ハロアルキル(フルオロアルキル、クロロアルキル、ブロモアルキル及びヨードアルキルを含む)、-OH、低級アルコキシ(直鎖状、分岐状及び環状のものを含む)、-SH、低級アルキルチオ(直鎖状、分岐状及び環状のものを含む)、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シリル(アルキルシリル、アルコキシシリル及びアリールシリルを含む)、ニトロ、シアノ、カルボニル、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、アミノカルボニル、アミノアシル、カルバメート、尿素、チオカルバメート、チオ尿素、ケトン、スルホン、スルホンアミド、アリール(フェニル、ナフチル及びアントラセニルを含む)、ヘテロアリール(ピロール、イミダゾール、フラン、チオフェン、オキサゾール、チアゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、テトラゾールをはじめとする5員ヘテロアリール、ピリジン、ピリミジン、ピラジンをはじめとする6員ヘテロアリール、並びにベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサゾール、ベンズイミダゾール、インドール、ベンゾチアゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンズイソチアゾールをはじめとする縮合ヘテロアリールを含む)から選択され得る。
R1及びR2の特性は、電子供与性又は電子求引性の置換基の任意選択的な付加によって調節することができる。用語「電子供与基」は、R1R2CHの酸性度の低下をもたらす置換基を意味し、電子供与基は、典型的には負のハメットσ(Hammett σ)又はタフトσ*(Taft σ*)定数を伴い、物理有機化学の技術分野では周知である(ハメット定数はアリール/ヘテロアリール置換基を指し、タフト定数は非芳香族部分上の置換基を指す)。適切な電子供与性置換基の例としては、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、及びシリルが挙げられる。
用語「電子求引基」は、R1R2CH基の酸性度の増加をもたらす置換基を指し、電子求引基は典型的には正のハメットσ又はタフトσ*定数を伴い、物理有機化学の技術分野では周知である。適切な電子求引性置換基の例としては、ハロゲン、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ニトロ、シアノ、C(=O)-Rxが挙げられ、ここで-Rxは、H、低級アルキル、低級アルコキシ、又はアミノ、又はS(O)mRYであり、mは1又は2であり、-RYは低級アルキル、アリール又はヘテロアリールである。当技術分野において周知であるように、置換基の電子的影響は置換基の位置に依存し得る。例えば、アリール環のオルト位又はパラ位のアルコキシ置換基は電子供与性であり、負のハメットσ定数によって特徴付けられ、一方、アリール環のメタ位のアルコキシ置換基は電子求引性であり、正のハメットσ定数によって特徴付けられる。
用語「アルキル」、「アルケニル」及び「アルキニル」は、炭素1～8個又は炭素1～6個又は炭素1～4個の直鎖、分岐又は環状の炭化水素基を含み、アルキルは飽和炭化水素であり、アルケニルは1つ以上の炭素-炭素二重結合を含み、アルキニルは1つ以上の炭素-炭素三重結合を含む。他に明記していない限り、これらは1～6個の炭素を含有する。
用語「アリール」は、フェニル、ナフチル、アントラセニルなどの基をはじめとする、炭素6～18個、好ましくは炭素6～10個の芳香族炭化水素基を含む。「ヘテロアリール」は、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、インデニル及びこれらに類するものなどの基をはじめとする、3～15個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含有する、好ましくは、3～7個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含有する、芳香族環を含む。
用語「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを含む。
用語「マレイミド」は、式
Figure 2023540701000026
 の基である。
ある特定の実施形態では、Z'は、国際公開第2020/206358号A1に開示されているハイドロゲルである。特に、ある特定の実施形態では、Z'は、
(a)マルチアームポリマー-P2を含む第1のプレポリマーを提供するステップであって、前記第1のプレポリマーが、式(PL-4)
Figure 2023540701000027
 ［式中、
nは、0、1、2、3、4、5、及び6から選択される整数であり、
rは、2より大きい整数であり、
-Yは、前記第1のプレポリマーを第2のプレポリマーに連結するための反応性官能基であり、
-R1及び-R2は、独立して、電子求引基、アルキル、又は-Hであり、ここで-R1及び-R2の少なくとも1つは電子求引基であり、
各々の-R4は、独立してC1-C3アルキルであるか、又は2つの-R4は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、3～6員環を形成し、
-W-は、存在しないか、又は
Figure 2023540701000028
 (式中、
星印を付けた破線は、-NH-に対する結合を示し、印を付けていない破線は、-P2に対する結合を示し、
x、y、及びzの各々は、独立して、0、1、2、3、4、5、及び6から選択される整数であり、-B'は、-NH2、-ONH2、ケトン、アルデヒド、-SH、-OH、-CO2H、カルボキサミド基、又はシクロオクチン若しくはビシクロノニンを含む基であり、
-C*は、カルボキサミド、チオエーテル、チオスクシンイミジル、トリアゾール、又はオキシムである)
である］
のものである、ステップ、
(b)マルチアームポリマー-P1を含む第2のプレポリマーを提供するステップであって、各々のアームが、ステップ(a)の-Yと反応する反応性官能基-Y''によって終結している、ステップ、
(c)ステップ(a)及び(b)の2つのプレポリマーを、-Yと-Y''が反応して結合-Y*-を形成する条件下で混合するステップ、並びに任意選択で、
(d)得られたハイドロゲルを単離するステップ、
を含む方法によって生成されるハイドロゲルである。
したがって、-Z'は、上記の方法から得ることができるハイドロゲルである。ある特定の実施形態では、前述の方法によって生成されるハイドロゲルは分解性である。
ある特定の実施形態では、-Y及び-Y''は、ステップ(c)の下で反応して、式(PL-4')
Figure 2023540701000029
 の架橋を含む不溶性ハイドロゲルマトリックスを形成し、式中、n、r、-P1、-Y*-、-R4、-R1、-R2、-W-、及び-P2は、上記に定義された通りである。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のnは、1、2、3、4、5、及び6から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のnは、1、2、及び3から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のnは、0、1、2、及び3から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のnは1である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)のnは2である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のnは3である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のマルチアーム-P2は、rアームのポリマーであり、rは、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、及び12から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは、2、3、4、5、6、7、及び8から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは、2、4、6、及び8から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは2である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは4である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは6である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')のrは8である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、少なくとも1kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～100kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～80kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～60kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～40kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～20kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～10kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、1～5kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、約20kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、約40kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、約60kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、約80kDaの分子量を有する。
ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、rアームのポリマーであり、rは2、3、4、5、6、7、8、9、10、11及び12から選択される整数である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは、2、3、4、5、6、7、及び8から選択される整数である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは、2、4、6、及び8から選択される整数である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは2である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは4である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは6である。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアーム-P1は、rアームのポリマーであり、rは8である。
ある特定の実施形態では、ステップ(b)の-P1は少なくとも1kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～100kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～80kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～60kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～40kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～20kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～10kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、1～5kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、約20kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、約40kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、約60kDaの分子量を有する。ある特定の実施形態では、ステップ(b)のマルチアームポリマー-P1は、約80kDaの分子量を有する。
ある特定の実施形態では、ステップ(b)の-P1、及び式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、ポリ(エチレングリコール)(PEG)、ポリ(エチレンオキシド)(PEO)、ポリ(エチレンイミン)(PEI)、デキストラン、ヒアルロン酸又はそれらのコポリマーを含む。ある特定の実施形態では、ステップ(b)の-P1、及び式(PL-4)又は(PL-4')のP2は、PEG系ポリマーである。ある特定の実施形態では、ステップ(b)の-P1、及び式(PL-4)又は(PL-4')の-P2は、ヒアルロン酸系ポリマーである。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2は、独立して、電子求引基、アルキル、又は-Hであり、-R1及び-R2の少なくとも一方は、電子求引基である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、-CN、-NO2、場合により置換されているアリール、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、-COR3、-SOR3又は-SO2R3(ここで、-R3は、-H、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリールアルキルである)、-OR8若しくは-NR8 2(ここで、各々の-R8は、独立して-H、若しくは場合により置換されているアルキルであるか、又は両方の-R8基は、それらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成する)、又は-SR9(ここで、-R9は、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールアルキルである)である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、-CNである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、-NO2である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、炭素6～10個の、場合により置換されているアリールである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、場合により置換されているフェニル、ナフチル、又はアントラセニルである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、炭素3～7個を含み、少なくとも1つのN、O、又はS原子を含有する場合により置換されているヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、場合により置換されているピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、又はインデニルである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、2～20個の炭素原子を含有する場合により置換されているアルケニルである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、2～20個の炭素原子を含有する場合により置換されているアルキニルである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、-COR3、-SOR3、又は-SO2R3であり、ここで-R3は、-H、1～20個の炭素原子を含有する場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリールアルキル、-OR8又は-NR8 2であり、ここで各々の-R8は、独立して-H、若しくは1～20個の炭素原子を含有する場合により置換されているアルキルであるか、又は両方の-R8基は、それらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成する。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の電子求引基は、-SR9であり、ここで-R9は、1～20個の炭素原子を含有する場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールアルキルである。ある特定の実施形態では、-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN又は-SO2R3である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN、-SOR3又は-SO2R3である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN又は-SO2R3である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN又は-SO2R3であり、ここで-R3は、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、又は-NR8 2である。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN、-SO2N(CH3)2、-SO2CH3、-SO2で置換されたフェニル、-SO2及び-Clで置換されたフェニル、-SO2N(CH2CH2)2O、-SO2CH(CH3)2、-SO2N(CH3)(CH2CH3)、又は-SO2N(CH2CH2OCH3)2である。
ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の各々の-R4は、独立してC1-C3アルキルであるか、又は一緒になって3～6員環を形成してもよい。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の各々の-R4は、独立して、C1-C3アルキルである。ある特定の実施形態では、式(PL-4)又は(PL-4')の-R4は両方ともメチルである。
ある特定の実施形態では、-Y及び-Y''は、独立して、アミン、アミノオキシ、ケトン、アルデヒド、マレイミジル、チオール、アルコール、アジド、1,2,4,6-テトラジニル、trans-シクロオクテニル、ビシクロノニル、シクロオクチニル、及びそれらの保護されたバリアントからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、Y及びY''は、互いに、例えば、選択的に反応し得る。例えば、-Yがアミンである場合、-Y''はカルボン酸、活性エステル、又は活性カーボネートであり、アミド又はカルバメートである残留連結官能基-Y*-が生じる。別の例として、-Yがアジドである場合、-Y''はアルキニル、ビシクロノニル、又はシクロオクチニルであり、1,2,3-トリアゾールである残留連結官能基-Y*-が生じる。別の例として、-Yが-NH2Oである場合、-Y''はケトン又はアルデヒドであり、オキシムである残留連結官能基-Y*-が生じる。別の例として、-Yが-SHである場合、-Y''はマレイミド又はハロカルボニルであり、チオスクシンイミジル又はチオエーテルである残留連結官能基-Y*-が生じる。同様に、-Y及び-Y''のこれらの役割を逆にして、反対の向きの-Y*-を生じさせることもできる。
ある特定の実施形態では、-Y*-は、アミド、オキシム、1,2,3-トリアゾール、チオエーテル、チオスクシンイミド、又はエーテルを含む。ある特定の実施形態では、-Y*-は-L2-である。
これらのコンジュゲーション反応は、当技術分野で公知の条件下で行うことができ、例えば、-Yがアジドであり、-Y''がシクロオクチンである場合、コンジュゲーションは、両方の成分が適切な溶解性を示す任意の溶媒中で起こるが、水溶液が、より好都合な反応速度を示すことが公知である。適切な溶媒中で、典型的には、-Y及び-Y''がアジド/シクロオクチンである場合はpH2～7、-Y及び-Y''が活性化エステル及びアミンである場合はpH6～9の水性緩衝液中で混合すると、-Y及び-Y''基が反応して、式(PL-4')の架橋を含む不溶性ハイドロゲルマトリクスを形成する。この過程は、バルク相で、又は、注射に適した微粒子懸濁液、例えばミクロスフェアを形成するように、有機/水性混合系において乳化条件下で実施することができる。
ある特定の実施形態では、ハイドロゲルZ'を含むコンジュゲートは、
(a)式(PL-4)の第1のプレポリマーを提供するステップ、
(b)式(PL-4)のプレポリマーを、式(PL-5)
Figure 2023540701000030
 ［式中、
n、-R1、-R2、-R4、及び-Yは、式(PL-4)中で定義された通りであり、
-Dは、薬物部分であり、
-X-は、-Dがアミンを介して連結された薬物部分である場合には、存在せず、又は、-Dがフェノール、アルコール、チオール、チオフェノール、イミダゾール、若しくは非塩基性アミンを介して連結された薬物部分である場合には、-X-は、-N(R6)CH2-であり、ここで、-R6は、場合により置換されているC1-C6アルキル、場合により置換されているアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールであり、
その結果、式(PL-5)の-Yは、式(PL-4)の-B'と反応する］
のリンカー薬物と反応させるステップ、
(c)マルチアームポリマー-P1を含む第2のプレポリマーを提供するステップであって、各々のアームが、ステップ(a)の-Yと反応する反応性官能基-Y''で終結しており、-P1に関する実施形態が上記の通りである、ステップ、
(d)ステップ(a)及び(b)の2つのプレポリマーを、-Yと-Y''が反応して、残留連結官能基-Y*-を形成する条件下で混合するステップ、並びに任意選択で、
(e)得られたハイドロゲルを単離するステップ、
を含む方法によって生成される。
ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、ハイドロゲルZ'を式(PL-5)のリンカー薬物と反応させるステップを含む方法によって得られ、ここでハイドロゲルZ'上の-B'は、式(PL-5)の-Yと反応する。
式(PL-4)、(PL-4')及び(PL-5)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「アルキル」は、炭素原子1～20個、1～12個、1～8個、1～6個又は1～4個の直鎖、分岐又は環状飽和炭化水素基を指す。ある特定の実施形態では、アルキルは、直鎖又は分岐状であり得る。直鎖又は分岐アルキル基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチル、n-ノニル及びn-デシルが挙げられる。ある特定の実施形態では、アルキルは環状である。環状アルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンタジエニル及びシクロヘキシルが挙げられる。
用語「アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、シクロプロポキシ及びシクロブトキシをはじめとする、酸素に結合しているアルキル基を指す。
用語「アルケニル」は、炭素-炭素二重結合、及び2～20個、2～12個、2～8個、2～6個又は2～4個の炭素原子を有する非芳香族不飽和炭化水素を指す。
用語「アルキニル」は、炭素-炭素三重結合、及び2～20個、2～12個、2～8個、2～6個又は2～4個の炭素原子を有する非芳香族不飽和炭化水素を指す。
用語「アリール」は、フェニル、ナフチル及びアントラセニルなどの基をはじめとする、炭素6～18個、好ましくは6～10個の芳香族炭化水素基を指す。用語「ヘテロアリール」は、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル及びインデニルなどの基をはじめとする、3～15個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、好ましくは、3～7個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、芳香族環を指す。
ある特定の実施形態では、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分は、アルキル結合を通して分子の残部に結合していることもある。これらの状況下では置換基はアルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルと称され、これらは、アルキレン部分が、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分と、該アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリールが結合している分子との間にあることを示す。
用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、ブロモ、フルオロ、クロロ及びヨードを指す。
用語「複素環式環」又は「ヘテロシクリル」は、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、3員～15員芳香族又は非芳香族環を指す。例としては、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジン及びテトラヒドロフラニル、並びに用語「ヘテロアリール」について上で提供した例示的な基が挙げられる。ある特定の実施形態では、複素環式環又はヘテロシクリルは非芳香族である。ある特定の実施形態では、複素環式環又はヘテロシクリルは芳香族である。
用語「任意選択で置換された」は、置換されていなくてもよく、又は同じであっても異なっていてもよい1つ以上(例えば、1つ、2つ、3つ、4つ又は5つ)の置換基によって置換されていてもよい基を指す。置換基の例としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、-CN、-ORaa、-SRaa、-NRaaRbb、-NO2、-C=NH(ORaa)、-C(O)Raa、-OC(O)Raa、-C(O)ORaa、-C(O)NRaaRbb、-OC(O)NRaaRbb、-NRaaC(O)Rbb、-NRaaC(O)ORbb、-S(O)Raa、-S(O)2Raa、-NRaaS(O)Rbb、-C(O)NRaaS(O)Rbb、-NRaaS(O)2Rbb、-C(O)NRaaS(O)2Rbb、-S(O)NRaaRbb、-S(O)2NRaaRbb、-P(O)(ORaa)(ORbb)、ヘテロシクリル、ヘテロアリール又はアリールが挙げられ、ここでアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール及びアリールはそれぞれ独立して-Rccによって任意選択で置換されており、-Raa及び-Rbbはそれぞれ独立して-H、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール若しくはアリールであるか、又は-Raa及び-Rbbはそれらが結合している窒素原子と協働してヘテロシクリルを形成し、それはアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ又は-CNによって任意選択で置換されており、各-Rccは独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール、-CN又は-NO2である。
部分-L1-は、式(I)のIL-2部分を通して、特に前記IL-2部分のアミノ酸残基を通して、又は-Dに存在する修飾部分Mmodを通して-Dに結合していてもよい。ある特定の実施形態では、-L1-は、IL-2部分を通して、特にIL-2部分のアミノ酸残基を通して-Dに結合している。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートに存在する全ての部分-L1-が、-Dのアミノ酸残基に結合している。
-L1-がIL-2部分のアミノ酸残基に結合する場合、そのようなアミノ酸残基は、-Dのタンパク質原性又は非タンパク質原性アミノ酸残基であり得る。特定の実施形態では、-L1-は、非タンパク質原性アミノ酸残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-の結合は、タンパク質原性アミノ酸残基に対するものである。結合がタンパク質原性アミノ酸残基で起こる場合、前記タンパク質原性アミノ酸残基は、ある特定の実施形態では、システイン、メチオニン、ヒスチジン、リジン、トリプトファン、セリン、トレオニン、チロシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、及びアルギニンからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、そのようなタンパク質原性アミノ酸残基は、システイン、ヒスチジン、リジン、トリプトファン、セリン、トレオニン、チロシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、及びアルギニンからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、-Dのシステイン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、-Dのヒスチジン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、リジン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、トリプトファン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、セリン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、トレオニン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、チロシン残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、アスパラギン酸残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、グルタミン酸残基に結合している。ある特定の実施形態では、-L1-は、アルギニン残基に結合している。
ある特定の実施形態では、少なくとも1つの部分-L1-は、-Dのアミノ酸残基に結合しており、1つ以上の更なる部分-L1-は、-Dに存在する修飾部分に結合している。
部分-L1-は、可逆的である限り、任意のタイプの結合を通して-Dに連結され得る。ある特定の実施形態では、-L1-は、アミド、エステル、カルバメート、アセタール、アミナール、イミン、オキシム、ヒドラゾン、ジスルフィド、及びアシルグアニジンからなる群から選択される結合を通して-Dに連結される。ある特定の実施形態では、-L1-は、アミド、エステル、カルバメート、及びアシルグアニジンからなる群から選択される連結を介して-Dに連結される。これらの連結は、それ自体可逆的でなくてもよいが、可逆性は、-L1-に存在する特定の原子群又は部位の作用であり得ることが理解される。
ある特定の実施形態では、-L1-はエステル結合を通して-Dに連結される。ある特定の実施形態では、-L1-は、カルバメート結合を通して-Dに連結される。ある特定の実施形態では、-L1-は、アシルグアニジンを通して-Dに連結される。ある特定の実施形態では、-L1-は、アミド結合を通して-Dに連結される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、-Dのリジン残基の側鎖のアミン官能基の窒素を介して-Dに連結される。ある特定の実施形態では、-L1-は、-Dのリジン残基の側鎖のアミン官能基の窒素を介して-Dに連結され、-Dと-L1-との間で形成される結合は、カルバメートである。
ある特定の実施形態では、-L1-は、WO 2009/095479 A2に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、部分-L1-は、式(II):
Figure 2023540701000031
 ［式中、
破線は、アミド結合を形成することによる、-Dの窒素に対する結合を示し、
-X-は、-C(R4R4a)-、-N(R4)-、-O-、-C(R4R4a)-C(R5R5a)-、-C(R5R5a)-C(R4R4a)-、-C(R4R4a)-N(R6)-、-N(R6)-C(R4R4a)-、-C(R4R4a)-O-、-O-C(R4R4a)-、又は-C(R7R7a)-であり、
X1は、C、又はS(O)であり、
-X2-は、-C(R8R8a)-、又は-C(R8R8a)-C(R9R9a)-であり、
=X3は、=O、=S、又は=N-CNであり、
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R6、-R8、-R8a、-R9、-R9aは、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、
-R3、-R3aは、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、但し、-R3、-R3aの一方又は両方が-H以外である場合、それらは、それらが結合しているNに、sp3混成炭素原子を通して連結され、
-R7は、-N(R10R10a)、又は-NR10-(C=O)-R11であり、
-R7a、-R10、-R10a、-R11は、互いに独立して、-H、又はC1-6アルキルであり、
任意選択で、ペア-R1a/-R4a、-R1a/-R5a、-R1a/-R7a、-R4a/-R5a、-R8a/-R9aのうちの1つ以上は、化学結合を形成し、
任意選択で、ペア-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R4/-R4a、-R5/-R5a、-R8/-R8a、-R9/-R9aのうちの1つ以上は、それらが結合している原子と一緒になって、C3-10シクロアルキル又は3～10員ヘテロシクリルを形成し、
任意選択で、ペア-R1/-R4、-R1/-R5、-R1/-R6、-R1/-R7a、-R4/-R5、-R4/-R6、-R8/-R9、-R2/-R3のうちの1つ以上は、それらが結合している原子と一緒になって、環Aを形成し、任意選択で、-R3/-R3aは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、3～10員複素環を形成し、
Aは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル及び8～11員ヘテロビシクリルからなる群から選択される］
のものであり、
-L1-は、少なくとも1つの-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換され、但し式(II)中の星印を付けた水素は、-L2-Z、-L2-Z'又は置換基によって置き換えられない。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(II)のものであり、破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(II)のものであり、破線は、-DのN-末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
好ましくは、式(II)の-L1-は、1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、式(II)の-L1-は、更に置換されない。
式(II)の-R3/-R3aが、それらが結合している窒素原子と一緒になって3～10員複素環を形成する場合、窒素に直接結合している原子がsp3混成炭素原子である、そのような3～10員複素環のみが形成され得ることが理解される。言い換えると、-R3/-R3aとそれらが結合している窒素原子とによって形成されるそのような3～10員複素環は、以下の構造を有する:
Figure 2023540701000032
 ［式中、
破線は、-L1-の残部に対する結合を示し、
環は、少なくとも1個の窒素原子を含む、3～10個の原子を含み、並びに
R#及びR##は、sp3混成炭素原子を表す］。
3～10員複素環が更に置換されてもよいことも理解される。
式(II)の-R3/-R3aとそれらが結合している窒素原子とによって形成される適切な3～10員複素環の例示的実施形態は、下記のものである:
Figure 2023540701000033
 ［式中、
破線は、分子の残部に対する結合を示し、
-Rは、-H及びC1-6アルキルからなる群から選択される］。
式(II)の-L1-は、任意選択で、更に置換されてもよい。一般に、切断の原則に影響を与えない限りいずれの置換基を使用してもよく、すなわち、式(II)中の星印を付けた水素は置き換えられず、式(II)の部分
Figure 2023540701000034
 の窒素は、一級、二級又は三級アミンの一部のままであり、すなわち、-R3及び-R3aは、互いに独立して-Hであるか、又はsp3混成炭素原子を通して-N<に連結されている。
ある特定の実施形態では、式(II)の-R1又は-R1aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R2又は-R2aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R3又は-R3aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R4は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R5又は-R5aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R6は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R7又は-R7aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R8又は-R8aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。ある特定の実施形態では、式(II)の-R9又は-R9aは、-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、国際公開第2016/020373号A1に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、部分-L1-は、式(III):
Figure 2023540701000035
 ［式中、
破線は、それぞれ、-Dの一級若しくは二級アミン又はヒドロキシルへのアミド又はエステル結合を形成することによる結合を示し、
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3及び-R3aは、-H、-C(R8R8aR8b)、-C(=O)R8、-C≡N、-C(=NR8)R8a、-CR8(=CR8aR8b)、-C≡CR8及び-Tからなる群から互いに独立して選択され、
-R4、-R5及び-R5aは、-H、-C(R9R9aR9b)及び-Tからなる群から互いに独立して選択され、a1及びa2は、互いに独立して、0又は1であり、
各-R6、-R6a、-R7、-R7a、-R8、-R8a、-R8b、-R9、-R9a、-R9bは、-H、ハロゲン、-CN、-COOR10、-OR10、-C(O)R10、-C(O)N(R10R10a)、-S(O)2N(R10R10a)、-S(O)N(R10R10a)、-S(O)2R10、-S(O)R10、-N(R10)S(O)2N(R10aR10b)、-SR10、-N(R10R10a)、-NO2、-OC(O)R10、-N(R10)C(O)R10a、-N(R10)S(O)2R10a、-N(R10)S(O)R10a、-N(R10)C(O)OR10a、-N(R10)C(O)N(R10aR10b)、-OC(O)N(R10R10a)、-T、C1-20アルキル、C2-20アルケニル、及びC2-20アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-R11によって任意選択で置換され、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R12)-、-S(O)2N(R12)-、-S(O)N(R12)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R12)S(O)2N(R12a)-、-S-、-N(R12)-、-OC(OR12)(R12a)-、-N(R12)C(O)N(R12a)-、及び-OC(O)N(R12)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各-R10、-R10a、-R10bは、-H、-T、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルからなる群から独立して選択され、-T、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-R11によって任意選択で置換され、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R12)-、-S(O)2N(R12)-、-S(O)N(R12)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R12)S(O)2N(R12a)-、-S-、-N(R12)-、-OC(OR12)(R12a)-、-N(R12)C(O)N(R12a)-、及び-OC(O)N(R12)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各Tは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、及び8～11員ヘテロビシクリルからなる群から互いに独立して選択され、各Tは、独立して、同じ又は異なる1つ以上の-R11によって任意選択で置換され、
各-R11は、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COOR13、-OR13、-C(O)R13、-C(O)N(R13R13a)、-S(O)2N(R13R13a)、-S(O)N(R13R13a)、-S(O)2R13、-S(O)R13、-N(R13)S(O)2N(R13aR13b)、-SR13、-N(R13R13a)、-NO2、-OC(O)R13、-N(R13)C(O)R13a、-N(R13)S(O)2R13a、-N(R13)S(O)R13a、-N(R13)C(O)OR13a、-N(R13)C(O)N(R13aR13b)、-OC(O)N(R13R13a)、及びC1-6アルキルから互いに独立して選択され、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各-R12、-R12a、-R13、-R13a、-R13bは、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
任意選択で、ペア-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R3/-R3a、-R6/-R6a、-R7/-R7aのうちの1つ以上は、それらが結合している原子と一緒になって、C3-10シクロアルキル又は3～10員ヘテロシクリルを形成し、
任意選択で、ペア-R1/-R2、-R1/-R3、-R1/-R4、-R1/-R5、-R1/-R6、-R1/-R7、-R2/-R3、-R2/-R4、-R2/-R5、-R2/-R6、-R2/-R7、-R3/-R4、-R3/-R5、-R3/-R6、-R3/-R7、-R4/-R5、-R4/-R6、-R4/-R7、-R5/-R6、-R5/-R7、-R6/-R7のうちの1つ以上は、それらが結合している原子と一緒になって、環Aを形成し、
Aは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、及び8～11員ヘテロビシクリルからなる群から選択される］のものであり、
-L1-は、少なくとも1つの-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
式(III)の-L1-の任意選択のさらなる置換基は、好ましくは、上に記載した通りである。
好ましくは、式(III)の-L1-は、1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、式(III)の-L1-は、更に置換されない。
ある特定の実施形態では、-L1-は、参照により本明細書に組み込まれる欧州特許第1536334号B1、WO2009/009712A1、WO2008/034122A1、WO2009/143412A2、WO2011/082368A2、及び米国特許第8,618,124号B2に開示されている構造を有する。
ある特定の実施形態では、-L1-は、米国特許第8,946,405号B2及び米国特許第8,754,190号B2に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IV):
Figure 2023540701000036
 ［式中、
破線は、-OH、-SH及び-NH2からなる群から選択される-Dの官能基を通した-Dに対する結合を示し、
mは、0又は1であり、
-R1及び-R2の少なくとも一方又は両方は、-CN、-NO2、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、任意選択で置換されているアルケニル、任意選択で置換されているアルキニル、-C(O)R3、-S(O)R3、-S(O)2R3、及び-SR4からなる群から互いに独立して選択され、
-R1及び-R2の一方及び一方のみは、-H、任意選択で置換されているアルキル、任意選択で置換されているアリールアルキル、及び任意選択で置換されているヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
-R3は、-H、任意選択で置換されているアルキル、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているアリールアルキル、任意選択で置換されているヘテロアリール、任意選択で置換されているヘテロアリールアルキル、-OR9及び-N(R9)2からなる群から選択され、
-R4は、任意選択で置換されているアルキル、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているアリールアルキル、任意選択で置換されているヘテロアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
各-R5は、-H、任意選択で置換されているアルキル、任意選択で置換されているアルケニルアルキル、任意選択で置換されているアルキニルアルキル、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているアリールアルキル、任意選択で置換されているヘテロアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールアルキルからなる群から独立して選択され、
-R9は、-H及び任意選択で置換されているアルキルからなる群から選択され、
-Y-が存在せず、-X-が-O-若しくは-S-であるか、又は
-Y-が-N(Q)CH2-であり、-X-が-O-であり、
Qは、任意選択で置換されているアルキル、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているアリールアルキル、任意選択で置換されているヘテロアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
任意選択で、-R1と-R2が一緒になって、3～8員環を形成してもよく、
任意選択で、両方の-R9は、それらが結合している窒素と一緒になって、複素環式環を形成する］
のものであり、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
式(IV)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
ここで使用される用語「アルキル」は、炭素1～8個、又は一部の実施形態では炭素原子1～6個又は1～4個の直鎖、分岐又は環状飽和炭化水素基を含む。
用語「アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、シクロプロポキシ、シクロブトキシ及びこれらに類するものをはじめとする、酸素に結合しているアルキル基を含む。
用語「アルケニル」は、炭素-炭素二重結合を有する非芳香族不飽和炭化水素を含む。
用語「アルキニル」は、炭素-炭素三重結合を有する非芳香族不飽和炭化水素を含む。
用語「アリール」は、フェニル、ナフチル及びアントラセニルなどの基をはじめとする、炭素6～18個、好ましくは炭素6～10個の芳香族炭化水素基を含む。用語「ヘテロアリール」は、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、インデニル及びこれらに類するものなどの基をはじめとする、3～15個の炭素原子を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含有する、好ましくは、3～7個の炭素原子を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含有する、芳香族環を含む。
場合によっては、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分は、アルキレン結合を通して分子の残部にカップリングされていることもある。これらの状況下では置換基はアルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルと称され、これらは、アルキレン部分が、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分と、該アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリールがカップリングされている分子との間にあることを示す。
用語「ハロゲン」は、ブロモ、フルオロ、クロロ及びヨードを含む。
用語「複素環式環」は、3～7個の炭素原子と少なくとも1個のN、O又はS原子とを含む、4～8員芳香族又は非芳香族環を指す。例は、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジン及びテトラヒドロフラニル、並びに用語「ヘテロアリール」について上で提供した例示的な基である。
環系が任意選択で置換されているとき、適切な置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル又はさらなる環からなる群から選択され、これらの各々は、任意選択で更に置換されている。上記のものを含むいずれかの基に対する任意選択の置換基としては、ハロ、ニトロ、シアノ、-OR、-SR、-NR2、-OCOR、-NRCOR、-COOR、-CONR2、-SOR、-SO2R、-SONR2、-SO2NR2が挙げられ、ここで各Rは、独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール若しくはヘテロアリールであるか、又は2つのR基は、それらが結合している原子と協働して環を形成する。
好ましくは、式（IV)の-L1-は1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換されている。
ある特定の実施形態では、-L1-は、WO2013/036857A1に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、-L1-は、式(V):
Figure 2023540701000037
 ［式中、
破線は、-Dのアミン官能基を通した-Dに対する結合を示し、
-R1は、任意選択で置換されているC1-C6直鎖、分岐又は環状アルキル、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、アルコキシ、及び-NR5 2からなる群から選択され、
-R2は、-H、任意選択で置換されているC1-C6アルキル、任意選択で置換されているアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールからなる群から選択され、
-R3は、-H、任意選択で置換されているC1-C6アルキル、任意選択で置換されているアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールからなる群から選択され、
-R4は、-H、任意選択で置換されているC1-C6アルキル、任意選択で置換されているアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールからなる群から選択され、
各-R5は、-H、任意選択で置換されているC1-C6アルキル、任意選択で置換されているアリール、及び任意選択で置換されているヘテロアリールからなる群から互いに独立して選択され、又は協働する場合、2つの-R5がシクロアルキル若しくはシクロヘテロアルキルになりうる］
のものであり、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
式(V)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
「アルキル」、「アルケニル」及び「アルキニル」は、炭素1～8個、又は1～6個、又は1～4個の直鎖、分岐又は環状炭化水素基を含み、ここで、アルキルは飽和炭化水素であり、アルケニルは1つ以上の炭素-炭素二重結合を含み、アルキニルは1つ以上の炭素-炭素三重結合を含む。他に明記していない限り、これらは1～6個のCを含む。
「アリール」は、フェニル、ナフチル及びアントラセニンなどの基をはじめとする、炭素6～18個、好ましくは炭素6～10個の芳香族炭化水素基を含む。「ヘテロアリール」は、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、インデニル及びこれらに類するものなどの基をはじめとする、3～15個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、好ましくは、3～7個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、芳香族環を含む。
用語「置換されている」は、1個以上の水素原子の代わりに1つ以上の置換基を含む、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基を意味する。置換基は、一般に、ハロゲン(F、Cl、Br及びIを含む)、低級アルキル(直鎖状のもの、分岐したもの及び環状のものを含む)、低級ハロアルキル(フルオロアルキル、クロロアルキル、ブロモアルキル及びヨードアルキルを含む)、OH、低級アルコキシ(直鎖状のもの、分岐したもの及び環状のものを含む)、SH、低級アルキルチオ(直鎖状のもの、分岐したもの及び環状のものを含む)、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シリル(アルキルシリル、アルコキシシリル及びアリールシリルを含む)、ニトロ、シアノ、カルボニル、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、アミノカルボニル、アミノアシル、カルバメート、尿素、チオカルバメート、チオ尿素、ケトン、スルホン、スルホンアミド、アリール(フェニル、ナフチル及びアントラセニルを含む)、ヘテロアリール(ピロール、イミダゾール、フラン、チオフェン、オキサゾール、チアゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、オキサジアゾール及びテトラゾールをはじめとする5員ヘテロアリール、ピリジン、ピリミジン及びピラジンをはじめとする6員ヘテロアリール、並びにベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾール、インドール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソオキサゾール及びベンゾイソチアゾールをはじめとする縮合ヘテロアリールを含む)から選択され得る。
ある特定の実施形態では、式（V)の-L1-は1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、米国特許第7,585,837号B2に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、-L1-は、下記の式(VI):
Figure 2023540701000038
 ［式中、
破線は、-Dのアミン官能基を通した-Dに対する結合を示し、
R1及びR2は、水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、アリール、アルカリル、アラルキル、ハロゲン、ニトロ、-SO3H、-SO2NHR5、アミノ、アンモニウム、カルボキシル、PO3H2及びOPO3H2からなる群から独立して選択され、
R3、R4及びR5は、水素、アルキル及びアリールからなる群から独立して選択される］
のものであり、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
式(VI)の適切な置換基は、アルキル(例えば、C1-6アルキル)、アルケニル(例えば、C2-6アルケニル)、アルキニル(例えば、C2-6アルキニル)、アリール(例えば、フェニル)、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアリール(例えば、芳香族4～7員複素環)又はハロゲン部分である。
式(VI)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「アルキル」、「アルコキシ」、「アルコキシアルキル」、「アリール」、「アルカリル」及び「アラルキル」は、炭素原子1～8個、好ましくは1～4個のアルキルラジカル、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル及びブチル、並びに炭素原子6～10個のアリールラジカル、例えば、フェニル及びナフチルを意味する。用語「ハロゲン」は、ブロモ、フルオロ、クロロ及びヨードを含む。
ある特定の実施形態では、式（VI)の-L1-は1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換されている。
ある特定の実施形態では、-L1-は、WO2002/089789A1に開示されている構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、-L1-は、下記の式(VII):
Figure 2023540701000039
 ［式中、
破線は、-Dのアミン官能基を通した-Dに対する結合を示し、
Y1及びY2は、独立して、O、S又はNR7であり、
R2、R3、R4、R5、R6及びR7は、水素、C1-6アルキル、C3-12分岐アルキル、C3-8シクロアルキル、C1-6置換アルキル、C3-8置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、C1-6ヘテロアルキル、置換C1-6ヘテロアルキル、C1-6アルコキシ、フェノキシ及びC1-6ヘテロアルコキシからなる群から独立して選択され、
Arは、式(VII)に含まれる場合、多置換芳香族炭化水素又は多置換複素環式基を形成する部分であり、
Xは、化学結合、又は標的細胞に能動輸送される部分、疎水性部分、又はこれらの組合せであり、
yは、0又は1である］
のものであり、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
式(VII)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「アルキル」は、例えば、アルコキシ、C3-8シクロアルキル又は置換シクロアルキルなどをはじめとする直鎖、分岐、置換C1-12アルキルを含むことが理解されるものとする。
用語「置換されている」は、1個以上の異なる原子を付加すること、又は1個以上の異なる原子で官能基又は化合物に含まれる1個以上の原子を置き換えることを含むことが理解されるものとする。
置換アルキルは、カルボキシアルキル、アミノアルキル、ジアルキルアミノ、ヒドロキシアルキル及びメルカプトアルキルを含み、置換シクロアルキルは、4-クロロシクロヘキシルなどの部分を含み、アリールは、ナフチルなどの部分を含み、置換アリールは、3-ブロモ-フェニルなどの部分を含み、アラルキルは、トルイルなどの部分を含み、ヘテロアルキルは、エチルチオフェンなどの部分を含み、置換ヘテロアルキルは、3-メトキシチオフェンなどの部分を含み、アルコキシは、メトキシなどの部分を含み、及びフェノキシは、3-ニトロフェノキシなどの部分を含む。ハロ-は、フルオロ、クロロ、ヨード及びブロモを含むことが理解されるものとする。
ある特定の実施形態では、式（VII)の-L1-は1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換されている。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(VIII)のサブ構造
Figure 2023540701000040
 ［式中、
星印を付けた破線は、アミド結合を形成することによる、-Dの窒素に対する結合を示し、印の付いていない破線は、-L1-の残部に対する結合を示す］
を含み、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(VIII)のものであり、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(VIII)のものであり、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(VIII)の-L1-は、1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、式(VIII)の-L1-は、更に置換されない。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX)のサブ構造
Figure 2023540701000041
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素へのカルバメート結合を形成することによる結合を示し、印の付いていない破線は、-L1-の残部に対する結合を示す］
を含み、
-L1-は、-L2-Z又は-L2-Z'で置換され、任意選択で、-L1-は更に置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX)のものであり、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX)のものであり、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(IX)の-L1-は、1つの部分-L2-Z又は-L2-Z'で置換される。
ある特定の実施形態では、式(IX)の-L1-は、更に置換されない。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-a)
Figure 2023540701000042
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、印を付けていない破線は、-L2-Z又は-L2-Z'に対する結合を示し、
nは、0、1、2、3、又は4であり、
=Y1は、=O及び=Sからなる群から選択され、
-Y2-は、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y3-は、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y4-は、-O-、-NR5-、及び-C(R6R6a)-からなる群から選択され、
=Y5は、=O及び=Sからなる群から選択され、
-R3、-R5、-R6、-R6aは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択され、
-R4は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から選択され、
-W-は、C3-10シクロアルキル、8～30員カルボポリシクリル、3～10員ヘテロシクリル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキルからなる群から選択され、
-Nuは、-N(R7R7a)、-N(R7OH)、-N(R7)-N(R7aR7b)、-S(R7)、-COOH、
Figure 2023540701000043
 からなる群から選択される求核剤であり、
-Ar-は、
Figure 2023540701000044
 （式中、
破線は、-L1-の残部に対する結合を示し、
-Z1-は、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択され、
-Z2-は、-N(R7)-である）
からなる群から選択され、
-R7、-R7a、-R7bは、-H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から互いに独立して選択される］
のものであり、
-L1-は、任意選択で更に置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-a)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-a)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-DのN-末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)の-L1-は、更に置換されない。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-b)
Figure 2023540701000045
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、印を付けていない破線は、-L2-Z又は-L2-Z'に対する結合を示し、
nは、0、1、2、3、又は4であり、
=Y1は、=O及び=Sからなる群から選択され、
-Y2-は、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y3-は、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y4-は、-O-、-NR5-、及び-C(R6R6a)-からなる群から選択され、
=Y5は、=O及び=Sからなる群から選択され、
-R2、-R3、-R5、-R6、-R6aは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択され、
-R4は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から選択され、
-W-は、C3-10シクロアルキル、8～30員カルボポリシクリル、3～10員ヘテロシクリル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキルからなる群から選択され、
-Nuは、-N(R7R7a)、-N(R7OH)、-N(R7)-N(R7aR7b)、-S(R7)、-COOH、
Figure 2023540701000046
 からなる群から選択される求核剤であり、
-Ar-は、
（式中、
破線は、-L1-の残部に対する結合を示し、
-Z1-は、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択され、
-Z2-は、-N(R7)-である）
からなる群から選択され、
-R7、-R7a、-R7bは、-H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から互いに独立して選択される］
のものであり、
-L1-は、任意選択で更に置換される。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-b)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-b)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(IX-b)の-L1-は、更には置換されない。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の=Y1は=Oである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)-の-Y2-は-O-である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-Y3-は-O-である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-Y4-は-NR5-である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の=Y5は=Oである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のnは0又は1である。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のnは0である。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のnは1である。
ある特定の実施形態では、(IX-b)の-R2は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-b)の-R2は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-b)の-R2は、-H、メチル、及びエチルから選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-b)の-R2は-Hである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R3は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R3は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R3は、-H、メチル、及びエチルから選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R3は-Hである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の各々の-R4は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R4は、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R4は、メチル及びエチルから選択される。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R5は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R5は、-H、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R5は、メチル及びエチルから選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R5は、メチルである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R6及び-R6aは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルからなる群から独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R6及び-R6aは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルからなる群から独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R6及び-R6aは、-H、メチル、及びエチルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R6及び-R6aは、いずれも-Hである。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のArはフェニルである。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のArは、
Figure 2023540701000048
 ［式中、破線は、式(IX-a)及び(IX-b)の部分の残部に対する結合を示す］
である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のWは、C3-10シクロアルキル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-によって任意選択で中断されるC1-20アルキルである。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のWは、C3-10シクロアルキル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-によって任意選択で中断されるC1-10アルキルである。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のWは、C3-10シクロアルキル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-によって任意選択で中断されるC1-6アルキルである。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)のWは、
Figure 2023540701000049
 ［式中、
破線は、それぞれ、式(IX-a)又は(IX-b)の部分の残部に対する結合を示す］
である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-Nuは、-N(R7R7a)である。
ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R7、-R7a、及び-R7bは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチルからなる群から互いに独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R7、-R7a、及び-R7bは、-H、メチル、エチル、n-プロピル、及びイソプロピルから互いに独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R7、-R7a、及び-R7bは、メチル又はエチルから互いに独立して選択される。ある特定の実施形態では、式(IX-a)及び(IX-b)の-R7、-R7a、及び-R7bは、いずれもメチルである。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-c)
Figure 2023540701000050
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
印を付けていない破線は、-L2-Z又は-L2-Z'に対する結合を示し、
s1は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、及び10からなる群から選択される整数である］
のものである。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-c)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-c)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は、1、2、3、4、及び5からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は1である。ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は2である。ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は3である。ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は4である。ある特定の実施形態では、式(IX-c)のs1は5である。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-d)
Figure 2023540701000051
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
印を付けていない破線は、-L2-Z又は-L2-Z'に対する結合を示す］
のものである。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-d)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-d)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、国際公開第2020/206358号A1に開示の構造を有する。したがって、ある特定の実施形態では、部分-L1-は、式(X):
Figure 2023540701000052
 ［式中、
印を付けていない破線は、-Dに対する結合を示し、
星印を付けた破線は、-L2-Z又は-L2-Z'に対する結合を示し、
nは、0、1、2、3、4、5、及び6からなる群から選択される整数であり、
-R1及び-R2は、独立して、電子求引基、アルキル、又は-Hであり、-R1又は-R2の少なくとも一方は電子求引基であり、
各々の-R4は、独立して、C1～C3アルキルであるか、又は2つの-R4が、それらが結合している炭素原子と一緒になって3～6員環を形成し、
-Y-は、-Dがアミンを介して連結された薬物部分である場合には、存在せず、又は、-Dがフェノール、アルコール、チオール、チオフェノール、イミダゾール、若しくは非塩基性アミンを介して連結された薬物部分である場合には、-Y-は、-N(R6)CH2-であり、ここで、-R6は、場合により置換されているC1～C6アルキル、場合により置換されているアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールである］
のものである。
ある特定の実施形態では、式(X)のnは、1、2、3、4、5、及び6から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(X)のnは、1、2、及び3から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(X)のnは、0、1、2、及び3からの整数である。ある特定の実施形態では、式(X)のnは1である。ある特定の実施形態では、式(X)のnは2である。ある特定の実施形態では、式(X)のnは3である。
ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、-CN、-NO2、場合により置換されているアリール、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、-COR3、-SOR3、若しくは-SO2R3(ここで-R3は、-H、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリールアルキルである)、-OR8若しくは-NR8 2(ここで各々の-R8は、独立して、-H、若しくは場合により置換されているアルキルであるか、又は両方の-R8基が、それらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成する)、又は-SR9(ここで-R9は、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールアルキルである)からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、-CNである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、-NO2である。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、炭素6～10個を含む、場合により置換されているアリールである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、場合により置換されているフェニル、ナフチル、又はアントラセニルである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、炭素3～7個を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、場合により置換されているヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、場合により置換されているピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、又はインデニルである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、2～20個の炭素原子を含む、場合により置換されているアルケニルである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、2～20個の炭素原子を含む、場合により置換されているアルキニルである。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、-COR3、-SOR3、又は-SO2R3(ここで-R3は、-H、1～20個の炭素原子を含む、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリールアルキルである)、-OR8又は-NR8 2(ここで各々の-R8は、独立して、-H、又は1～20個の炭素原子を含む、場合により置換されているアルキルであるか、又は両方の-R8基が、それらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成する)である。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の電子求引基は、-SR9であり、ここで-R9は、1～20個の炭素原子を含む、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、場合により置換されているアリールアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、又は場合により置換されて
いるヘテロアリールアルキルである。
ある特定の実施形態では、式(X)の-R1又は-R2の少なくとも一方は、-CN、-SOR3、又は-SO2R3である。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN、又は-SO2R3である。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN、又は-SO2R3であり、ここで-R3は、場合により置換されているアルキル、場合により置換されているアリール、又は-NR8 2である。ある特定の実施形態では、式(X)の-R1及び-R2の少なくとも一方は、-CN、-SO2N(CH3)2、-SO2CH3、-SO2で置換されたフェニル、-SO2及び-Clで置換されたフェニル、-SO2N(CH2CH2)2O、-SO2CH(CH3)2、-SO2N(CH3)(CH2CH3)、又は-SO2N(CH2CH2OCH3)2である。
ある特定の実施形態では、式(X)の各々の-R4は、独立して、C1～C3アルキルである。ある特定の実施形態では、両方の-R4は、メチルである。
ある特定の実施形態では、式(X)の-Y-は存在しない。ある特定の実施形態では、式(X)の-Y-は、-N(R6)CH2-である。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-CNであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2N(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1はSO2CH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2CHCH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2及び-Clによって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2Oであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2CH(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2N(CH3)(CH2CH3)であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2N(CH2CH2OCH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは1であり、-R1は-SO2及び-CH3によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-CNであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2N(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1はSO2CH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2CHCH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2及び-Clによって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2Oであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2CH(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2N(CH3)(CH2CH3)であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2N(CH2CH2OCH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは2であり、-R1は-SO2及び-CH3によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-CNであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2N(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1はSO2CH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2CHCH3であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2及び-Clによって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2N(CH2CH2)2Oであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2CH(CH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2N(CH3)(CH2CH3)であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2N(CH2CH2OCH3)2であり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。ある特定の実施形態では、-L1-は式(X)のものであり、式中、nは3であり、-R1は-SO2及び-CH3によって置換されたフェニルであり、-R2は-Hであり、-R4は-CH3である。
式(x)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「アルキル」は、炭素原子1～20個、1～12個、1～8個、1～6個又は1～4個の直鎖、分岐又は環状飽和炭化水素基を指す。ある特定の実施形態では、アルキルは、直鎖又は分岐状であり得る。直鎖又は分岐アルキル基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチル、n-ノニル及びn-デシルが挙げられる。ある特定の実施形態では、アルキルは環状である。環状アルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンタジエニル及びシクロヘキシルが挙げられる。
用語「アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、シクロプロポキシ及びシクロブトキシをはじめとする、酸素に結合しているアルキル基を指す。
用語「アルケニル」は、炭素-炭素二重結合、及び2～20個、2～12個、2～8個、2～6個又は2～4個の炭素原子を有する非芳香族不飽和炭化水素を指す。
用語「アルキニル」は、炭素-炭素三重結合、及び2～20個、2～12個、2～8個、2～6個又は2～4個の炭素原子を有する非芳香族不飽和炭化水素を指す。
用語「アリール」は、フェニル、ナフチル及びアントラセニルなどの基をはじめとする、炭素6～18個、好ましくは6～10個の芳香族炭化水素基を指す。用語「ヘテロアリール」は、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル及びインデニルなどの基をはじめとする、3～15個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、好ましくは、3～7個の炭素を含み、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、芳香族環を指す。
ある特定の実施形態では、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分は、アルキル結合を通して分子の残部に結合していることもある。これらの状況下では置換基はアルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルと称され、これらは、アルキレン部分が、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール部分と、該アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリールが結合している分子との間にあることを示す。
用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、ブロモ、フルオロ、クロロ及びヨードを指す。
用語「複素環式環」又は「ヘテロシクリル」は、少なくとも1個のN、O又はS原子を含む、3員～15員芳香族又は非芳香族環を指す。例としては、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジン及びテトラヒドロフラニル、並びに用語「ヘテロアリール」について上で提供した例示的な基が挙げられる。ある特定の実施形態では、複素環式環又はヘテロシクリルは非芳香族である。ある特定の実施形態では、複素環式環又はヘテロシクリルは芳香族である。
用語「任意選択で置換された」は、置換されていなくてもよく、又は同じであっても異なっていてもよい1つ以上(例えば、1つ、2つ、3つ、4つ又は5つ)の置換基によって置換されていてもよい基を指す。置換基の例としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、-CN、-ORaa、-SRaa、-NRaaRbb、-NO2、-C=NH(ORaa)、-C(O)Raa、-OC(O)Raa、-C(O)ORaa、-C(O)NRaaRbb、-OC(O)NRaaRbb、-NRaaC(O)Rbb、-NRaaC(O)ORbb、-S(O)Raa、-S(O)2Raa、-NRaaS(O)Rbb、-C(O)NRaaS(O)Rbb、-NRaaS(O)2Rbb、-C(O)NRaaS(O)2Rbb、-S(O)NRaaRbb、-S(O)2NRaaRbb、-P(O)(ORaa)(ORbb)、ヘテロシクリル、ヘテロアリール又はアリールが挙げられ、ここでアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール及びアリールはそれぞれ独立して-Rccによって任意選択で置換されており、-Raa及び-Rbbはそれぞれ独立して-H、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール若しくはアリールであるか、又は-Raa及び-Rbbはそれらが結合している窒素原子と協働してヘテロシクリルを形成し、それはアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ又は-CNによって任意選択で置換されており、各-Rccは独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール、-CN又は-NO2である。
ある特定の実施形態では、-L2-は、化学結合である。ある特定の実施形態では、-L2-は、スペーサー部分である。
ある特定の実施形態では、-L2-は、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択され、ここで、-T-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-、及び-OC(O)N(Ry3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
-Ry1及び-Ry1aは、-H、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-、及び-OC(O)N(Ry4)-からなる群から選択される1以上の基によって任意選択で中断され、
各々のTは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって独立して任意選択で置換され、
各々の-Ry2は、ハロゲン、-CN、オキソ(＝O)、-COORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2N(Ry5Ry5a)、-S(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5aRy5b)、-SRy5、-N(Ry5Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5aRy5b)、-OC(O)N(Ry5Ry5a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々の-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a及び-Ry5bは、-H、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される。
ある特定の実施形態では、-L2-は、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択され、ここで、-T-、C1-20アルキル、C2-20アルケニル、及びC2-20アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-20アルキル、C2-20アルケニル及びC2-20アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-、及び-OC(O)N(Ry3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
-Ry1及び-Ry1aは、-H、-T、C1-10アルキル、C2-10アルケニル及びC2-10アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T、C1-10アルキル、C2-10アルケニル、及びC2-10アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-10アルキル、C2-10アルケニル、及びC2-10アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-、及び-OC(O)N(Ry4)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、；
各々のTは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって独立して任意選択で置換され、
-Ry2は、ハロゲン、-CN、オキソ(＝O)、-COORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2N(Ry5Ry5a)、-S(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5aRy5b)、-SRy5、-N(Ry5Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5aRy5b)、-OC(O)N(Ry5Ry5a)、及びC1-6アルキルからなる群から選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々の-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a及び-Ry5bは、-H、及びC1-6アルキルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される。
ある特定の実施形態では、-L2-は、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択され、ここで、-T-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル及びC2-50アルキニルは、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-、及び-OC(O)N(Ry3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
-Ry1及び-Ry1aは、-H、-T、C1-10アルキル、C2-10アルケニル、及びC2-10アルキニルからなる群から独立して選択され、
各々のTは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、
各-Ry2は、ハロゲン及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、
各-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a及び-Ry5bは、-H及びC1-6アルキルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、C1-6アルキルは、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される。
ある特定の実施形態では、-L2-はC1-20アルキル鎖であり、それは-O-、-T-及び-C(O)N(Ry1)-から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、そのC1-20アルキル鎖は、-OH、-T及び-C(O)N(Ry6Ry6a)から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で置換され、ここで、-Ry1、-Ry6、-Ry6aは、H及びC1-4アルキルからなる群から独立して選択され、Tはフェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、-L2-は、14g／mol～750g／molの範囲の分子量を有する。
ある特定の実施形態では、-L2-は、
Figure 2023540701000053
Figure 2023540701000054
［式中、
破線は、それぞれ、-L1-、-L2-の残部、又は-Zに対する結合を示し、
-R及び-Raは、-H、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル及びヘキシルからなる群から互いに独立して選択される］
からなる群から選択される部分を含む。
ある特定の実施形態では、-L2-は、式（IX-e）：
Figure 2023540701000055
 ［式中、星印を付けた破線は、-L1-に対する結合を示し、
印の付いていない破線は、-Zに対する結合を示し、
s2は0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19及び20からなる群から選択される整数である］
のものである。
ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11及び12からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、1、2、3、4、5、6、7及び8からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、1である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、2である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、3である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、4である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、5である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、6である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、7である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、8である。
ある特定の実施形態では、部分-L1-L2-は、式（IX-f）
Figure 2023540701000056
 ［式中、星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
印の付いていない破線は、-Zに対する結合を示し、
s1は1、2、3、4、5、6、7、8、9及び10からなる群から選択される整数であり、
s2は0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19及び20からなる群から選択される整数である］
のものである。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-f)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-は、式(IX-f)のものであり、ここで、星印を付けた破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
したがって、式（IX-f）の化合物において形成される部分-L1と-Dとの間の結合は、カルバメートである。
ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、1、2、3、4及び5からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、1である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、2である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、3である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、4である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は、5である。
ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11及び12からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、1、2、3、4、5、6、7及び8からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、1である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、2である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、3である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、4である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、5である。ある特定の実施形態では、式（IX-e）のs2は、6である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、7である。ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs2は、8である。
ある特定の実施形態では、式（IX-f）のs1は3であり、式（IX-f）のs2は3である。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ia)のものである。ある特定の実施形態では、xは1である。ある特定の実施形態では、xは2である。ある特定の実施形態では、xは3である。ある特定の実施形態では、xは4である。
ある特定の実施形態では、IL-2コンジュゲートは、式(Ib)のものである。ある特定の実施形態では、yは2である。ある特定の実施形態では、yは3である。ある特定の実施形態では、yは4である。
ある特定の実施形態では、部分-L1-L2-Zは、式(XI)
Figure 2023540701000057
 ［式中、
破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
s1は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、及び10からなる群から選択される整数であり、
s2は、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、及び20からなる群から選択される整数であり、
p1、p2、p3、p4は、互いに独立して、70～900の範囲の整数である］
のものである。
ある特定の実施形態では、-L1-L2-Zは、式(XI)のものであり、破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-L2-Zは、式(XI)のものであり、破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
したがって、式(XI)の化合物において形成される部分-L1-と-Dとの間の結合は、カルバメートである。
ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は、1、2、3、4、及び5からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は1である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は2である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は3である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は4である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は5である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、及び12からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は1である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は2である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は3である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は4である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は5である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は6である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は7である。ある特定の実施形態では、式(XI)のs2は8である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のs1は3であり、式(XI)のs2は3である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp1は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp2は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp3は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI)のp4は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI)のp1、p2、p3、及びp4は、同一である。ある特定の実施形態では、p1、p2、p3及びp4は、220～240の範囲である。
ある特定の実施形態では、部分-L1-L2-Zは、式(XI-a)
Figure 2023540701000058
 ［式中、
破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
p1、p2、p3、p4は、互いに独立して、70～900の範囲の整数である］
のものである。
ある特定の実施形態では、-L1-L2-Zは、式(XI-a)のものであり、破線は、-Dのリジン側鎖のアミンの窒素に対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、-L1-L2-Zは、式(XI-a)のものであり、破線は、-DのN末端のアミンの窒素に対する結合を示す。
したがって、式(XI-a)の化合物において形成される部分-L1-と-D間の結合は、カルバメートである。
ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp2は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp3は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は、115～680の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は、115～560の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は、185～450の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は、220～240の範囲の整数である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約115である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約160である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約225である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約270である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約340である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約450である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp4は約560である。
ある特定の実施形態では、式(XI-a)のp1、p2、p3、及びp4は、同一である。ある特定の実施形態では、p1、p2、p3及びp4は、220～240の範囲である。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号10のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号13のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号16のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号19のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号22のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号25のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号31のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号34のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号217のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、配列番号225のIL-2部分を含み、そのIL-2部分に対して式(XI-a)の部分が、IL-2部分のN末端又はリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされており、p1、p2、p3及びp4は220～240の範囲である。ある特定の実施形態では、b3は約112である。ある特定の実施形態では、式(XI-a)の部分は、IL-2部分のリジン側鎖残基の一級アミンの窒素にコンジュゲートされている。
本発明の別の態様は、本明細書に記載の少なくとも1つの式(I)のIL-2タンパク質、又は少なくとも1つのIL-2コンジュゲート、及び少なくとも1つの賦形剤を含む、医薬組成物である。ある特定の実施形態では、そのような医薬組成物は、pH 3～pH 8の範囲(両端を含む)のpHを有する。
ある特定の実施形態では、そのような医薬組成物は、液体製剤である。ある特定の実施形態では、そのような医薬組成物は、懸濁製剤である。ある特定の実施形態では、そのような医薬組成物は、乾燥製剤である。
そのような液体、懸濁剤又は乾燥医薬組成物は、少なくとも1つの賦形剤を含む。非経口製剤に使用される賦形剤は、例えば、緩衝剤、等張性調節剤、保存剤、安定剤、吸着防止剤（anti-adsorption agent）、酸化保護剤、増粘剤（viscosifier）/粘度増強剤（viscosity enhancing agent）、又は他の助剤として分類されうる。しかし、場合によっては、1つの賦形剤が二重又は三重の機能を有することもある。ある特定の実施形態では、本発明の医薬組成物に含まれる少なくとも1つの賦形剤は、以下からなる群から選択される:
(i)緩衝剤:pHを所望の範囲内で維持するための生理学的に許容される緩衝剤、例えば、リン酸ナトリウム、重炭酸塩、コハク酸塩、ヒスチジン、クエン酸塩及び酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、塩化物、ピルビン酸塩；制酸剤、例えばMg(OH)2又はZnCO3も使用され得る;
(ii)等張性調節剤:注射デポーでの浸透圧差に起因する細胞損傷の結果として生じうる疼痛を最小にするためのもの;グリセリン及び塩化ナトリウムが例である;有効濃度は、血清についての285～315mOsmol/kgの想定されるモル浸透圧濃度を使用して浸透圧測定により決定することができる;
(iii)保存剤及び/又は抗菌剤:複数回投与用非経口製剤には注射によって患者が感染するリスクを最小にするために十分な濃度の保存剤の添加が必要であり、対応する規制要件は確立されている;典型的な保存剤としては、m-クレゾール、フェノール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、クロロブタノール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメロサール（thimerosol）、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、安息香酸、クロロクレゾール及び塩化ベンザルコニウムが挙げられる;
(iv)安定剤:安定化は、タンパク質安定化力の強化によって、変性状態の不安定化によって、又は賦形剤のタンパク質への直接結合によって達成される;安定剤は、アミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グリシン、ヒスチジン、リジン、プロリン）、糖（例えば、グルコース、スクロース、トレハロース）、ポリオール（例えば、グリセロール、マンニトール、ソルビトール）、塩（例えば、リン酸カリウム、硫酸ナトリウム）、キレート剤（例えば、EDTA、六リン酸塩）、配位子（例えば、二価金属イオン(亜鉛、カルシウムなど)）、他の塩又は有機分子（例えば、フェノール系誘導体）であり得る;加えて、オリゴマー又はポリマー、例えば、シクロデキストリン、デキストラン、デンドリマー、PEG若しくはPVP又はプロタミン若しくはHSAが使用され得る;
(v)吸着防止剤:主としてイオン性若しくは非イオン性界面活性剤又は他のタンパク質若しくは可溶性ポリマーが、製剤容器の内面を被覆するため、又は該内面に競合的に吸着させるために使用される;例えば、ポロキサマー(Pluronic F-68)、PEGドデシルエーテル(Brij 35)、ポリソルベート20及び80、デキストラン、ポリエチレングリコール、PEG-ポリヒスチジン、BSA及びHSA並びにゼラチン;選択される賦形剤濃度及びタイプは、回避すべき作用に依存するが、典型的には、CMC値直上で界面活性剤の単層が界面に形成される;
(vi)酸化保護剤:酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸、エクトイン、メチオニン、グルタチオン、モノチオグリセロール、モリン、ポリエチレンイミン(PEI)、没食子酸プロピル及びビタミンE;キレート剤、例えば、クエン酸、EDTA、六リン酸塩、及びチオグリコール酸も使用され得る;
(vii)増粘剤又は粘度増強剤:バイアル及び注射器内での粒子の沈降を遅延させるものであり、粒子の混合及び再懸濁を助長するために並びに懸濁液をより注射しやすく(すなわち、注射器プランジャーに対する力が小さい)するために使用される;適切な増粘剤又は粘度増強剤は、例えば、カルボマー増粘剤（例えば、Carbopol 940、Carbopol Ultrez 10）、セルロース誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(ヒプロメロース、HPMC)又はジエチルアミノエチルセルロース(DEAE若しくはDEAE-C)）、コロイド状ケイ酸マグネシウム(Veegum)又はケイ酸ナトリウム、ヒドロキシアパタイトゲル、リン酸三カルシウムゲル、キサンタン、カラギーナン（例えば、Satia gum UTC 30）、脂肪族ポリ(ヒドロキシ酸)（例えば、ポリ(D,L-又はL-乳酸)(PLA)及びポリ(グリコール酸)(PGA)並びにこれらのコポリマー(PLGA)、D,L-ラクチドとグリコリドとカプロラクトンのターポリマー）、ポロキサマー、ポリ(オキシエチレン)-ポリ(オキシプロピレン)-ポリ(オキシエチレン)の3ブロック（triblock）(例えば、Pluronic(登録商標))を構成するための親水性ポリ(オキシエチレン)ブロック及び疎水性ポリ(オキシプロピレン)ブロック、ポリエーテルエステルコポリマー（例えば、ポリエチレングリコールテレフタレート/ポリブチレンテレフタレートコポリマー）、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル(SAIB)、デキストラン又はその誘導体、デキストランとPEGの組合せ、ポリジメチルシロキサン、コラーゲン、キトサン、ポリビニルアルコール(PVA)及び誘導体、ポリアルキルイミド、ポリ(アクリルアミド-co-ジアリルジメチルアンモニウム(DADMA))、ポリビニルピロリドン(PVP)、グリコサミノグリカン(GAG)（例えば、デルマタン硫酸、コンドロイチン硫酸、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、ヒアルロナン）、疎水性Aブロック（例えばポリラクチド(PLA)又はポリ(ラクチド-co-グリコリド)(PLGA)）と親水性Bブロック（例えばポリエチレングリコール(PEG)又はポリビニルピロリドン）とで構成される、ABAトリブロック又はABブロックコポリマーである;そのようなブロックコポリマー及び上述のポロキサマーは、逆熱ゲル化挙動(室温では流動状態で投与を促進し、注射後の体温でのゾル-ゲル転移温度より高い温度ではゲル状態)を示し得る;
(viii)展着（spreading）又は拡散剤:組織の繊維内空間（intrastitial space）の細胞外マトリックスの成分(例えば、限定されないが、結合組織の細胞間空間において見いだされる多糖類であるヒアルロン酸)の加水分解により結合組織の透過性を調節する;展着剤、例えば、限定されないが、ヒアルロニダーゼは、細胞外マトリックスの粘度を一時的に減少させ、注射された薬物の拡散を促進する;及び
(ix)他の助剤:湿潤剤、粘度調節剤、抗生物質、ヒアルロニダーゼなど;塩酸及び水酸化ナトリウムなどの酸及び塩基は、製造中のpH調整に必要な助剤である。
別の態様は、医薬として使用するための、本明細書に記載の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物に関する。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、本明細書に記載の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物に関する。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患を治療するための医薬の製造のための、本明細書に記載の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物に関する。
別の態様は、IL-2によって治療することができる1つ以上の疾患の治療を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒト患者において治療する、制御する、遅延させる、又は予防する方法であって、それを必要とする前記患者に、治療有効量の本明細書に記載の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物を投与するステップを含む方法に関する。
ある特定の実施形態では、IL-2によって治療することができる疾患は、がんである。そのようながんは、液性腫瘍、固形腫瘍、及びリンパ腫からなる群から選択され得る。
液性リンパ腫は、白血病又は骨髄性新生物、例えば、慢性リンパ性白血病(CLL)、慢性骨髄性白血病(CML)、ヘアリーセル白血病、リンパ芽球性白血病、骨髄性白血病、形質細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病(ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、骨髄異形成症候群(MDS)、骨髄増殖性腫瘍(MPN)、MPN後AML、MDS後AML、del(5q)関連高リスクMDS又はAML、急性転化期の慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、慢性骨髄増殖性障害、形質細胞腫瘍、及びワルデンシュトロームマクログロブリン血症であり得る。
固形腫瘍又はリンパ腫は、口唇及び口腔がん、口腔がん、肝臓がん/肝細胞がん、原発性肝がん、肺がん、リンパ腫、悪性中皮腫、悪性胸腺腫、皮膚がん、眼内黒色腫、原発不明転移性扁平頸部がん、小児多発内分泌腫瘍症候群、菌状息肉症、鼻腔副鼻腔がん、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、中咽頭がん、卵巣がん、膵臓がん、副甲状腺がん、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、副腎皮質がん、AIDS関連悪性腫瘍、肛門がん、胆管がん、膀胱がん、脳神経系がん、乳がん、気管支腺腫/カルチノイド、消化管カルチノイド腫瘍、癌種、直腸結腸がん、子宮内膜がん、食道がん、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管がん、胆嚢がん、胃がん、妊娠性絨毛腫瘍、頭頸部がん、下咽頭がん、膵島細胞がん(膵内分泌部)、腎がん/腎細胞がん、喉頭がん、胸膜肺芽腫、前立腺がん、腎盂尿管移行上皮がん、網膜芽細胞腫、唾液腺がん、肉腫、セザリー症候群、小腸がん、泌尿生殖器がん、悪性胸腺腫、甲状腺がん、ウィルムス腫瘍、胆管がん、並びにそれらに関連する異常な細胞増殖の初期段階、例えば、異形成、腺腫、及び上皮内がんからなる群から選択され得る。
ある特定の実施形態では、がんは、肝がん/肝細胞がんである。ある特定の実施形態では、がんは、肺がんである。ある特定の実施形態では、がんは、リンパ腫である。ある特定の実施形態では、がんは、悪性胸腺腫である。ある特定の実施形態では、がんは、皮膚がんである。ある特定の実施形態では、がんは、原発不明転移性扁平頸部がんである。ある特定の実施形態では、がんは、神経芽細胞腫である。ある特定の実施形態では、がんは、卵巣がんである。ある特定の実施形態では、がんは、膵臓がんである。ある特定の実施形態では、がんは、胆管がんである。ある特定の実施形態では、がんは、膀胱がんである。ある特定の実施形態では、がんは、脳神経系がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳がんである。ある特定の実施形態では、がんは、消化管カルチノイド腫瘍である。ある特定の実施形態では、がんは、癌腫である。ある特定の実施形態では、がんは、大腸がんである。ある特定の実施形態では、がんは、肝外胆管がんである。ある特定の実施形態では、がんは、胆嚢がんである。ある特定の実施形態では、がんは、胃がんである。ある特定の実施形態では、がんは、頭頸部がんである。ある特定の実施形態では、がんは、腎がん/腎細胞がんである。ある特定の実施形態では、がんは、前立腺がんである。ある特定の実施形態では、がんは、肉腫である。ある特定の実施形態では、がんは、小腸がんである。ある特定の実施形態では、がんは、泌尿生殖器がんである。
肺がんの例には、非小細胞肺がん及び小細胞肺がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、非小細胞肺がんである。ある特定の実施形態では、がんは小細胞肺がんである。
リンパ腫の例には、AIDS関連リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、T細胞リンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、妊娠中のホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、妊娠中の非ホジキンリンパ腫、及び血管免疫芽球性リンパ腫がある。
皮膚がんの例には、黒色腫及びメルケル細胞がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、皮膚がんである。ある特定の実施形態では、がんは、メルケル細胞がんである。
卵巣がんは、例えば、上皮がん、胚細胞性腫瘍、又は低悪性度腫瘍であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、上皮性がんである。ある特定の実施形態では、がんは、胚細胞性腫瘍である。ある特定の実施形態では、がんは、低悪性度腫瘍である。
膵臓がんは、例えば、外分泌腫瘍/腺がん、膵内分泌腫瘍(PET)、又は神経内分泌腫瘍(NET)であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、外分泌腫瘍/腺がんである。ある特定の実施形態では、腫瘍は、膵臓内分泌腫瘍である。ある特定の実施形態では、がんは、神経内分泌腫瘍である。
脳神経系がんの例には、髄芽腫、例えば小児髄芽腫、星細胞腫、上衣腫、神経外胚葉性腫瘍、神経鞘腫、髄膜腫、下垂体腺腫、及び神経膠腫がある。ある特定の実施形態では、がんは、髄芽腫である。ある特定の実施形態では、がんは、小児髄芽腫である。ある特定の実施形態では、がんは、星細胞腫である。ある特定の実施形態では、がんは、上衣腫である。ある特定の実施形態では、がんは、神経外胚葉性腫瘍である。ある特定の実施形態では、腫瘍は、神経膠腫である。ある特定の実施形態では、がんは、髄膜腫である。ある特定の実施形態では、がんは、下垂体腺腫である。ある特定の実施形態では、がんは、神経膠腫である。
星細胞腫は、巨細胞性膠芽腫、膠芽腫、二次性膠芽腫、原発性成人膠芽腫、原発性小児性膠芽腫、乏突起神経膠腫、乏突起膠腫、退形成性乏突起膠腫、乏突起星細胞腫瘍、乏突起星細胞腫、退形成性乏突起膠腫、乏突起星細胞腫瘍、乏突起星細胞腫、退形成性乏突起星細胞腫、退形成性星細胞腫、毛様細胞性星細胞腫、上衣下巨細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、多形性黄色星細胞腫、小脳星細胞腫からなる群から選択され得る。
神経外胚葉性腫瘍の例には、松果体原始神経外胚葉性腫瘍、及びテント上原始神経外胚葉性腫瘍がある。
上衣腫は、上衣下腫、上衣腫、粘液乳頭状上衣腫、及び退形成性上衣腫からなる群から選択され得る。
髄膜腫は、非定型髄膜腫、又は退形成性髄膜腫であり得る。
神経膠腫は、多形性膠芽腫、傍神経節腫、テント上未分化原始外胚葉腫瘍(sPNET)、脳幹神経膠腫、小児脳幹神経膠腫、視床下部視路神経膠腫、小児視床下部視路神経膠腫、及び悪性神経膠腫からなる群から選択され得る。
乳がんの例には、妊娠中の乳がん、トリプルネガティブ乳がん、非浸潤性乳管がん(DCIS)、浸潤性乳管がん(IDC)、乳房管状がん、乳房髄様がん、乳房粘液性がん、乳房乳頭がん、乳房篩状がん、浸潤性小葉がん(ILC)、炎症性乳がん、非浸潤性小葉がん(LCIS)、男性乳がん、乳頭パジェット病、乳房葉状腫瘍、及び転移性乳がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、妊娠中の乳がんである。ある特定の実施形態では、がんは、トリプルネガティブ乳がんである。ある特定の実施形態では、がんは、非浸潤性乳管がんである。ある特定の実施形態では、がんは、浸潤性乳管がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳房管状がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳房髄様がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳房粘液性がんである。ある特定の実施形態では、がんは乳房乳頭がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳房篩状がんである。ある特定の実施形態では、がんは、浸潤性小葉がんである。ある特定の実施形態では、がんは、炎症性乳がんである。ある特定の実施形態では、がんは、非浸潤性小葉がんである。ある特定の実施形態では、がんは、男性乳がんである。ある特定の実施形態では、がんは、乳頭パジェット病である。ある特定の実施形態では、がんは、乳房葉状腫瘍である。ある特定の実施形態では、がんは、転移性乳がんである。
癌種の例には、神経内分泌がん、副腎皮質がん、及び膵島細胞がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、神経内分泌がんである。ある特定の実施形態では、がんは、副腎皮質がんである。ある特定の実施形態では、がんは、膵島細胞がんである。
結腸直腸がんの例には、結腸がん、及び直腸がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、結腸がんである。ある特定の実施形態では、がんは、直腸がんである。
肉腫は、カポジ肉腫、骨肉腫/骨悪性線維性組織球腫、軟部組織肉腫、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、横紋筋肉腫、腱鞘明細胞肉腫、中心性軟骨肉腫、中心性及び骨膜性軟骨腫、線維肉腫、及び子宮肉腫からなる群から選択され得る。ある特定の実施形態では、がんは、カポジ肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、骨肉腫/骨悪性線維性組織球腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは軟部組織肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、横紋筋肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、腱鞘明細胞肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、中心性軟骨肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、中心性及び骨膜性軟骨腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、線維肉腫であり得る。ある特定の実施形態では、がんは、子宮肉腫であり得る。
泌尿生殖器がんの例には、精巣がん、尿道がん、膣がん、子宮頸がん、陰茎がん、及び外陰部がんがある。ある特定の実施形態では、がんは、精巣がんであり得る。ある特定の実施形態では、がんは、尿道がんであり得る。ある特定の実施形態では、がんは、膣がんであり得る。ある特定の実施形態では、がんは、子宮頸がんであり得る。ある特定の実施形態では、がんは、陰茎がんであり得る。ある特定の実施形態では、がんは、膣がんであり得る。
ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物による治療は、腫瘍の外科的除去又は放射線療法の前に、それと同時に、又はその後に開始することができる。更に、そのような治療は、任意選択で、少なくとも1つの他のがん治療法、例えば、全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法と組み合わせることができる。少なくとも1つのがん治療法、例えば、全身免疫療法の例は、ある特定の実施形態において、本発明の医薬組成物中に存在し得る1つ以上の更なる薬物について、本明細書中の他の箇所に提示されている。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、放射線療法又は注入腫瘍の外科的除去の前に、少なくとも1つの全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法との組合せの前に、それと同時に、又はその後に全身投与される。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、導入された腫瘍の放射線療法又は外科的除去の前に、少なくとも1つの全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法との組合せの前に、それと同時に、又はその後に腫瘍内に投与される。ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲート、その薬学的に許容される塩、又は医薬組成物は、腫瘍の放射線療法又は外科的除去の後に、少なくとも1つの全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法との組合せの前に、それと同時に、又はその後に腫瘍内に投与される。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、腫瘍の外科的除去又は放射線療法の前に、それと同時に、又はその後に、腫瘍流入領域リンパ節内に投与される。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、腫瘍の外科的切除又は放射線療法の前に、それと同時に、又はその後に、少なくとも1つの全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法との組合せの前に、それと同時に、又はその後に、腫瘍流入領域リンパ節に投与される。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、原発腫瘍の外科的除去又は放射線療法の前に、又はその後に生じ得る転移性腫瘍に腫瘍内投与される。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、原発腫瘍の外科的除去又は放射線療法の前に、それと同時に、又はその後に、少なくとも1つの全身免疫療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法との組合せの前に、同時に、又はその後に生じ得る転移性腫瘍に腫瘍内投与される。ある特定の実施形態では、少なくとも1つの全身療法が、腫瘍の外科的除去又は放射線療法の前に施され、その後に、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物の全身投与又は腫瘍内投与又はリンパ節内投与が行われる。ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物の腫瘍内投与がまず行われ、その後に、少なくとも1つの全身療法又は局所腫瘍内免疫療法又はリンパ節内免疫療法と組合せた治療が行われる。ある特定の実施形態では、少なくとも1つの全身療法が腫瘍の外科的除去の前に施され、その後に、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物が、手術後に全身に、若しくは流入領域リンパ節に、若しくは腫瘍床に、又は手術によって除去されなかった腫瘍への腫瘍内投与によって投与される。
ある特定の実施形態では、本発明の式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート、又は医薬組成物は、1つ以上の更なる薬物の投与前に、それと同時に、又はその後に患者に投与され、その1つ以上の更なる薬物は、ある特定の実施形態では、パターン認識受容体アゴニスト(PRRA)、細胞毒性/化学療法剤、免疫チェックポイント阻害剤若しくはアンタゴニスト、免疫チェックポイントアゴニスト、免疫活性化受容体アゴニスト、多重特異性薬剤、抗体-薬物コンジュゲート(ADC)、抗体-アジュバントコンジュゲート(AAC)、放射性核種若しくは標的放射性核種治療薬、DNA損傷修復阻害剤、腫瘍代謝阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、ケモカイン及び化学誘引物質受容体アゴニスト、ケモカイン若しくはケモカイン受容体アンタゴニスト、サイトカイン受容体アゴニスト、細胞死受容体アゴニスト、CD47若しくはSIRPαアンタゴニスト、腫瘍溶解薬、シグナル変換タンパク質、エピジェネティック修飾剤、腫瘍ペプチド若しくは腫瘍ワクチン、熱ショックタンパク質(HSP)阻害剤、タンパク質分解酵素、ユビキチン及びプロテアソーム阻害剤、接着分子アンタゴニスト、ホルモンペプチド及び合成ホルモンを含むホルモン、並びに養子細胞療法、例えば、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)療法、キメラ抗原受容体(CAR)療法、T細胞療法、ナチュラルキラー(NK)細胞療法、CAR-T療法、CAR-NK療法、CAR-γδ療法、CAR-マクロファージ療法、又は遺伝子改変若しくは遺伝子未改変免疫細胞型による任意の他の細胞療法からなる群から選択される。
PRRAは、Toll様受容体(TLR)アゴニスト、NOD様受容体アゴニスト(NLR)、RIG-I様受容体アゴニスト、細胞質DNAセンサーアゴニスト、STINGアゴニスト、及びアリール炭化水素受容体アゴニスト(AhR)からなる群から選択され得る。
ある特定の実施形態では、PRRAは、Toll様受容体アゴニスト、例えば、TLR1/2のアゴニスト、例えば、ペプチドグリカン、リポタンパク質、Pam3CSK4、アムプリバント(Amplivant)、SLP-AMPLIVANT、HESPECTA、ISA101、ISA201;TLR2のアゴニスト、例えば、LAM-MS、LPS-PG、LTA-BS、LTA-SA、PGN-BS、PGN-EB、PGN-EK、PGN-SA、CL429、FSL-1、Pam2CSK4、Pam3CSK4、ザイモサン、CBLB612、SV-283、ISA204、SMP105、加熱死リステリア菌(Listeria monocytogenes);TLR3のアゴニスト、例えば、ポリ(A:U)、ポリ(I:C)(ポリ-ICLC)、リンタトリモド(rintatolimod)、アポキシム(apoxxim)、IPH3102、ポリ-ICR、PRV300、RGCL2、RGIC.1、リボキシム(Riboxxim)(RGC100、RGIC100)、リボキソール(Riboxxol)(RGIC50)、合成天然又は改変二本鎖RNA、合成天然又は改変核酸オリゴマー及びリボキソン(Riboxxon);TLR4のアゴニスト、例えば、リポ多糖(LPS)、ネオセプチン-3、グルコピラノシル脂質アジュバント(GLA)、GLA-SE、G100、GLA-AF、臨床センター基準エンドトキシン(CCRE)、モノホスホリルリピドA、グラスMATA MPL(grass MATA MPL)、PEPA10、ONT-10(PET-リピドA、オンコセリオン)、G-305、ALD046、CRX527、CRX675(RC527、RC590)、GSK1795091、OM197MPAC、OM294DP、腫瘍標的TLR4アゴニスト、及びSAR439794;TLR2/4のアゴニスト、例えば、リピドA、OM174、PGN007；TLR5のアゴニスト、例えば、フラジェリン、エントリモド、モビラン、プロテクタンCBLB501;TLR6/2のアゴニスト、例えば、ジアシル化リポタンパク質、ジアシル化リポペプチド、FSL-1、MALP-2、及びCBLB613;TLR7のアゴニスト、例えば、CL264、CL307、イミキモド(R837)、TMX-101、TMX-201、TMX-202、TMX302、ガルドキモド、S-27609、851、UC-IV150、852A(3M-001、PF-04878691)、ロキソリビン、ポリウリジル酸、GSK2245035、GS-9620、RO6864018(ANA773、RG7795)、RO7020531、イサトレビン、AN0331、ANA245、ANA971、ANA975、DSP0509、DSP3025(AZD8848)、GS986、MBS2、MBS5、RG7863(RO6870868)、ソチリモド、SZU101、合成天然又は改変一本鎖RNA、合成核酸、合成天然又は改変核酸オリゴマー、腫瘍標的TLR7アゴニスト、及びTQA3334;TLR8のアゴニスト、例えば、ssPolyUridine、ssRNA40、TL8-506、XG-1-236、VTX-2337(モトリモド)、VTX-1463、VTX378、VTX763、DN1508052、SBT6050、合成天然又は改変一本鎖RNA、合成核酸、合成天然又は改変核酸オリゴマー、腫瘍標的TLR8アゴニスト、GS9688;TLR7/8のアゴニスト、例えば、TransCon(商標)TLR7/8アゴニスト、CL075、CL097、ポリ(dT)、レシキモド(R-848、VML600、S28463)、MEDI9197(3M-052)、NKTR262、DV1001、IMO4200、IPH3201、合成天然又は改変一本鎖RNA、合成核酸、合成核酸オリゴマー、BDC-1001、他の腫瘍標的TLR7/8アゴニスト及びVTX1463;TLR9のアゴニスト、例えば、CpG DNA、CpG ODN、レフィトリモド(MGN1703)、SD-101、QbG10、CYT003、CYT003-QbG10、DUK-CpG-001、CpG-7909(PF-3512676)、GNKG168、EMD 1201081、IMO-2125、IMO-2055、CpG10104、AZD1419、AST008、IMO2134、MGN1706、IRS 954、1018 ISS、actilon(CPG10101)、ATP00001、AVE0675、AVE7279、CMP001、DIMS0001、DIMS9022、DIMS9054、DIMS9059、DV230、DV281、EnanDIM、heplisav(V270)、kappaproct(DIMS0150)、NJP834、NPI503、SAR21609、合成天然又は改変核酸オリゴマー及びtolamba；並びにTLR7/9のアゴニスト、例えばDV1179からなる群から選択されるToll様受容体アゴニストである。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR1/2のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR2のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR3のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR4のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR2/4のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR5のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR6/2のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR7のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR8のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR7/8のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、TLR9のアゴニストである。
CpG ODNの例には、ODN 1585、ODN 2216、ODN 2336、ODN 1668、ODN 1826、ODN 2006、ODN 2007、ODN BW006、ODN D-SL01、ODN 2395、ODN M362、及びODN D-SL03がある。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、レシキモドである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、イミキモドである。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、その遊離形態にあるレシキモドである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、式(A-i)
Figure 2023540701000059
 ［式中、
破線は、ポリマーに対する結合を示し、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、又は20からなる群から選択される整数である］
の1つ以上の部分がコンジュゲートされているポリマーを含むコンジュゲートである。
ある特定の実施形態では、式(A-i)の1つ以上の部分がコンジュゲートされているポリマーは、水溶性ポリマーである。ある特定の実施形態では、そのような水溶性ポリマーは、PEG系又はヒアルロン酸系ポリマーである。ある特定の実施形態では、ポリマーは、PEG系ポリマーである。ある特定の実施形態では、ポリマーは、ハイドロゲル、例えば、PEG系又はヒアルロン酸系ハイドロゲルである。ある特定の実施形態では、ハイドロゲルは、PEG系ハイドロゲルである。ある特定の実施形態では、式(A-i)のnは1である。ある特定の実施形態では、式(A-i)のnは2である。ある特定の実施形態では、式(A-i)のnは3である。ある特定の実施形態では、式(A-i)のnは4である。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、多数の式(A-i)の部分がコンジュゲートされたPEG系ハイドロゲルを含むコンジュゲートであり、式(A-i)のnは2である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、国際公開第2020/141221号A1による、それぞれ217ページ及び219ページに示されている化合物12又は14であり、これらは参照により本明細書に組み込まれる。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、国際公開第2020/141221号A1による、217ページに示されている化合物12である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、国際公開第2020/141221号A1による、219ページに示されている化合物14である。化合物12及び14は、国際公開第2020/141221号A1に開示されている通りに合成することができる。
ある特定の実施形態では、PRRAは、NOD様受容体アゴニストである。1つ以上の更なる薬物がNOD様受容体アゴニストである場合、そのようなNOD様受容体アゴニストは、NOD1のアゴニスト、例えば、C12-iE-DAP、C14-Tri-LAN-Gly、iE-DAP、iE-Lys及びTri-DAP;並びにNOD2のアゴニスト、例えば、L18-MDP、MDP、M-TriLYS、ムラブチド及びN-グリコリル-MDPからなる群から選択され得る。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、NOD1のアゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、NOD2のアゴニストである。
ある特定の実施形態では、PRRAは、RIG-I様受容体アゴニストである。1つ以上の更なる薬物がRIG-I様受容体アゴニストである場合、そのようなRIG-I様受容体アゴニストは、3p-hpRNA、5'ppp-dsRNA、5'ppp RNA(M8)、捻れ(kink)を有する5'OH RNA(CBS-13-BPS)、5'ppp SLR、KIN100、KIN101、KIN1000、KIN1400、KIN1408、KIN1409、KIN1148、KIN131A、ポリ(dA:dT)、SB9200、RGT100、及びヒルトノール(hiltonol)からなる群から選択され得る。
ある特定の実施形態では、PRRAは、細胞質DNAセンサーアゴニストである。1つ以上の更なる薬物が細胞質DNAセンサーアゴニストである場合、そのような細胞質DNAセンサーアゴニストは、cGASアゴニスト、dsDNA-EC、G3-YSD、HSV-60、ISD、ODN TTAGGG(A151)、ポリ(dG:dC)、及びVACV-70からなる群から選択され得る。
ある特定の実施形態では、PRRAは、STINGアゴニストである。1つ以上の更なる薬物がSTINGアゴニストである場合、そのようなSTINGアゴニストは、MK-1454、ADU-S100(MIW815)、2'3'-cGAMP、3'3'-cGAMP、c-di-AMP、c-di-GMP、cAIMP(CL592)、cAIMPジフルオロ(CL614)、cAIM(PS)2ジフルオロ(Rp/Sp)(CL656)、2'2'-cGAMP、2'3'-cGAM(PS)2(Rp/Sp)、フッ素化3'3'-cGAM、フッ素化c-di-AMP、2'3'-c-di-AMP、2'3'-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、フッ素化c-di-GMP、2'3'-c-di-GMP、c-di-IMP、c-di-UMP、及びDMXAA(バジメザン、ASA404)からなる群から選択され得る。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、MK-1454である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、ADU-S100(MIW815)である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、2'3'-cGAMPである。
ある特定の実施形態では、PRRAは、アリール炭化水素受容体アゴニストである。1つ以上の更なる薬物がアリール炭化水素受容体(AhR)アゴニストである場合、そのようなAhRアゴニストは、FICZ、ITE、及びL-キヌレニンからなる群から選択され得る。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、細胞毒性/化学療法剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、免疫チェックポイント阻害剤又はアンタゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、免疫活性化受容体アゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、多重特異性薬剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、抗体-薬物コンジュゲート(ADC)である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、抗体-アジュバントコンジュゲート(AAC)である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、放射性核種又は標的放射性核種治療薬である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、DNA損傷修復阻害剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬剤は、腫瘍代謝阻害剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、パターン認識受容体アゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、プロテインキナーゼ阻害剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、ケモカイン及び化学誘引物質受容体アゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、ケモカイン又はケモカイン受容体アンタゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、サイトカイン受容体アゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、細胞死受容体アゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、CD47アンタゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、SIRPαアンタゴニストである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、腫瘍溶解薬である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、シグナル変換タンパク質である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、エピジェネティック修飾剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、腫瘍ペプチド又は腫瘍ワクチンである。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、熱ショックタンパク質(HSP)阻害剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、タンパク質分解酵素である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、ユビキチン及びプロテアソーム阻害剤である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、接着分子拮抗薬である。ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、ホルモンペプチド及び合成ホルモンを含むホルモンである。
細胞毒性又は化学療法剤は、アルキル化剤、アントラサイクリン、ピロロベンゾジアゼピン、ナイトロジェンマスタード、白金製剤、代謝拮抗剤、抗微小管薬、トポイソメラーゼ阻害剤、細胞毒性抗生物質、アウリスタチン、エンジイン、レキシトロプシン、デュオカルマイシン、シクロプロピルピロロインドール、ピューロマイシン、ドラスタチン、メイタンシン誘導体、アルキルスルフォネート(alkylsufonate)、トリアゼン、及びピペラジンからなる群から選択され得る。
アルキル化剤は、ナイトロジェンマスタード、例えば、メクロレタミン、シクロホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、イホスファミド、及びブスルファン;ニトロソウレア、例えば、N-ニトロソ-N-メチル尿素、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、フォトムスチン、及びストレプトゾトシン;テトラジン、例えば、ダカルバジン、ミトゾロミド、及びテモゾロミド;エチレンイミン、例えば、アルトレタミン;アジリジン、例えば、チオテパ、マイトマイシン、及びジアジコン;シスプラチン及び誘導体、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン;並びに非古典的アルキル化剤、例えば、プロカルバジン及びヘキサメチルメラミンからなる群から選択され得る。
代謝拮抗剤は、抗葉酸剤、例えば、メトトレキサート及びペメトレキセド;フルオロピリミジン、例えば、フルオロウラシル及びカペシタビン;デオキシヌクレオシド類似体、例えば、シタラビン、ゲムシタビン、デシタビン、アザシチジン、フルダラビン、ネララビン、クラドリビン、クロファラビン及びペントスタチン;並びにチオプリン、例えば、チオグアニン及びメルカプトプリンからなる群から選択され得る。
抗微小管薬は、ビンカアルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、及びビンフルニン;タキサン、例えば、パクリタキセル及びドセタキセル;ポドフィロトキシン及び誘導体、例えば、ポドフィロトキシン、エトポシド、及びテニポシド;スチルベノイドフェノール及び誘導体、例えば、ジブレスタット(CA4P);並びにBNC105からなる群から選択され得る。
トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼI阻害剤、例えば、イリノテカン、トポテカン、及びカンプトテシン;並びにトポイソメラーゼII阻害剤、例えば、エトポシド、ドキソルビシン、ミトキサントロン、テニポシド、ノボビオシン、メルバロン、及びアクラルビシンからなる群から選択され得る。
細胞毒性抗生物質は、アントラサイクリン、例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、及びイダルビシン;ピラルビシン、アクラルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシンC、ミトキサントロン、アクチノマイシン、ダクチノマイシン、アドリアマイシン、ミトラマイシン、並びにティラパザミンからなる群から選択され得る。
アウリスタチンは、モノメチルアウリスタチンE(MMAE)及びモノメチルアウリスタチンF(MMAF)からなる群から選択され得る。
エンジインは、ネオカルジノスタチン、リダマイシン(C-1027)、カリケアマイシン、エスペラミシン、ダイネミシン、及びゴルフォマイシンAからなる群から選択され得る。
メイタンシン誘導体は、アンサミトシン、メルタンシン(エムタンシン、DM1)、及びラヴタンシン(ソラブタンシン、DM4)からなる群から選択され得る。
免疫チェックポイント阻害剤又はアンタゴニストは、CTLA-4(細胞傷害性Tリンパ球関連タンパク質4)の阻害剤、例えば、イピリムマブ、トレメリムマブ、MK-1308、FPT155、PRS010、BMS-986249、BPI-002、CBT509、JS007、ONC392、TE1254、IBI310、BR02001、CG0161、KN044、PBI5D3H5、BCD145、ADU1604、AGEN1884、AGEN1181、CS1002、及びCP675206;PD-1(programmed death 1)の阻害剤、例えば、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピディリズマブ、AMP-224、BMS-936559、セミプリマブ、及びPDR001;PD-L1(programmed cell death protein 1)の阻害剤、例えば、MDX-1105、MEDI4736、アテゾリズマブ、アベルマブ、BMS-936559、及びデュルバルマブ;PD-L2(programmed death-ligand 2)の阻害剤;KIR(キラー細胞免疫グロブリン様受容体)の阻害剤、例えば、リルマブ(IPH2102)及びIPH2101;B7-H3の阻害剤、例えば、MGA271;B7-H4の阻害剤、例えば、FPA150;BTLA(B及びTリンパ球アテニュエーター)の阻害剤;LAG3(リンパ球活性化遺伝子3)の阻害剤、例えば、IMP321(エフティラギモドα)、リラトリマブ、MK-4280、AVA017、BI754111、ENUM006、GSK2831781、INCAGN2385、LAG3Ig、LAG525、REGN3767、Sym016、Sym022、TSR033、TSR075、及びXmAb22841;TIM-3(T細胞免疫グロブリン及びムチン-ドメイン含有-3)の阻害剤、例えば、LY3321367、MBG453、及びTSR-022;VISTA(T細胞活性化のVドメインIgサプレッサー)の阻害剤、例えば、JNJ-61610588;ILT2/LILRB1(Ig様転写物2/白血球Ig様受容体1)の阻害剤;ILT3/LILRB4(Ig様転写物3/白血球Ig様受容体4)の阻害剤;ILT4/LILRB2(Ig様転写物4/白血球Ig様受容体2)の阻害剤、例えば、MK-4830;TIGIT(Igドメイン及びITIMドメインを有するT細胞免疫受容体)の阻害剤、例えば、MK-7684、PTZ-201、RG6058、及びCOM902;NKG2Aの阻害剤、例えば、IPH-2201;PVRIGの阻害剤、例えば、COM701;TREM1の阻害剤、例えば、PY314;並びにTREM2の阻害剤、例えばPY159からなる群から選択され得る。
CTLA-4の阻害剤の一例は、抗CTLA4コンジュゲート又はその薬学的に許容される塩であり、前記コンジュゲートは、ポリマー部分Zに少なくとも1つの部分-L1-L2-を介して共有結合でコンジュゲートされた複数の抗CTLA4部分-DCTLA4を含み、ここで、-L1-は、-DCTLA4に共有結合で且つ可逆的にコンジュゲートされており、-L2-は、Zに共有結合でコンジュゲートされており、-L1-はリンカー部分であり、-L2-は化学結合又はスペーサー部分であり、部分-L1-、-L2-、及びZは、本発明のコンジュゲートに関して本明細書中の他の箇所に記載されている通りである。ある特定の実施形態では、-DCTLA4は、野生型Fc抗CTLA4抗体、エフェクター機能増強Fc/FcγR結合抗CTLA4抗体、腫瘍微小環境において条件的に活性な抗CTLA4抗体、抗CTLA4低分子、CTLA4アンタゴニスト融合タンパク質、抗CTLA4アンチカリン、抗CTLA4ナノボディ、及び抗体、scFV又は他のフォーマットに基づく抗CTLA4多重特異性生物製剤からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、-DCTLA4は、イピリムマブである。ある特定の実施形態では、-DCTLA4は、トレメリムマブである。ある特定の実施形態では、抗CTLA4コンジュゲートは、以下の構造を有する:
Figure 2023540701000060
 式中、
星印を付けた破線は、-DCTLA4のアミン官能基の窒素、特にイピリムマブのアミン官能基の窒素に対する結合を示し、
印を付けていない破線は、Z、例えばハイドロゲル、特に架橋ヒアルロン酸ハイドロゲルに対する結合を示す。
Zがハイドロゲル、例えば、架橋ヒアルロン酸ハイドロゲルである場合、多数の部分-DCTLA4-L1-L2-がZに連結されることが理解される。
ある特定の実施形態では、-DCTLA4、特にイピリムマブのアミン官能基の窒素は、リジン残基のアミンである。ある特定の実施形態では、-DCTLA4、特にイピリムマブのアミン官能基の窒素は、N末端アミンである。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、上記のようなCTLA4の阻害剤である。
免疫活性化受容体アゴニストは、CD27のアゴニスト、例えば、HERA-CD27L及びバルリルマブ(CDX-1127)などの組換えCD70;CD28のアゴニスト、例えば、組換えCD80、組換えCD86、TGN1412、及びFPT155;CD40のアゴニスト、例えば、組換えCD40L、CP-870,893、ダセツズマブ(SGN-40)、Chi Lob 7/4、ADC-1013、及びCDX1140;4-1BB(CD137)のアゴニスト、例えば、組換え4-1BBL、ウレルマブ、ウトミルマブ、及びATOR-1017;OX40のアゴニスト、例えば、組換えOX40L、MEDI0562、GSK3174998、MOXR0916、及びPF-04548600;GITRのアゴニスト、例えば、組換えGITRL、TRX518、MEDI1873、INCAGN01876、MK-1248、MK-4166、GWN323、及びBMS-986156;並びにICOSのアゴニスト、例えば、組換えICOSL、JTX-2011、及びGSK3359609からなる群から選択され得る。
多重特異性薬剤は、生物製剤及び低分子免疫チェックポイント阻害剤からなる群から選択され得る。生物製剤の例には、多重特異性免疫チェックポイント阻害剤、例えば、CD137/HER2多重特異性薬剤、PD-(L)1/LAG3アンタゴニスト(例えば、FS118、MGD013)、CTLA4/LAG3アンタゴニスト(例えば、XmAb22841)、及びCTLA4/PD-(L)1アンタゴニスト(例えば、XmAb20717、MGD019);多重特異性免疫活性化受容体アゴニスト、免疫サイトカイン、並びに多重特異性免疫チェックポイントアゴニストがある。そのような多重特異性免疫チェックポイントアゴニストは、Igスーパーファミリーアゴニスト、例えば、ALPN-202、FPT155、TGN1412、GSK3359609、JTX-2011;TNFスーパーファミリーアゴニスト、例えばFAP-4-1BBL(RG7826)、OX40-41BB(FS120)ATOR-1015、ATOR-1144、ALG.APV-527、リポカリン/PRS-343、PRS344/ONC0055、FAP-CD40 DARPin、MP0310 DARPin、FAP-0X40 DARPin、EGFR-CD40 DARPin、EGFR41BB/CD137 DARPin、EGFR-0X40/DARFPin、HER2-CD40 DARPin、HER2-41BB/CD137 DARPin、HER2-0X40 DARPin、フィブロネクチンED-B-CD40 DARPin、フィブロネクチンED-B-41BB/CD137、及びフィブロネクチンED-B-0X40 DARPin;CD3多重特異性アゴニスト、例えば、ブリナツモマブ、ソリトマブ、MEDI-565、エルツマキソマブ、抗HER2/CD3、1Fab-免疫グロブリンG TDB、GBR 1302、MGD009、MGD007、EGFRBi、EGFR-CD Probody、RG7802、PF-06863135、PF-06671008、AMG212/BAY2010112、CD3-5T4、XmAb14045、XmAb13676、XmAb18087、S80880、REGN1979、REGN5458、REGN4018、RG6026、モスネツズマブ、EM801、ERY974、RG6194、AMG420、AMG330、AMG212、AMG596、AMG160、AMG427、AMG562、AMG673、AMG701、AMG757、AFM13、AMF24、AFM26、AFM11、TNB-486、TNB-383B、GEN3013、JNJ-63709178、JNJ-63898081、JNJ-64007957、JNJ-64407564、JNJ-67571244、AMV564、APVO414(MOR209、ES414)、APVO436、HPN424、HPN536、HPN217、HPN 328、及び、腫瘍細胞抗原又はウイルス抗原若しくは発現細胞に対するT細胞活性を標的とするγδ TCRアゴニストを含む、他の多重特異性CD3アゴニスト又はT細胞受容体(TCR)アゴニスト;活性化NK受容体及び標的腫瘍細胞抗原を標的とするナチュラルキラー(NK)細胞受容体多重特異性アゴニスト、例えば、NKG2D多重特異性アゴニスト、NKp30多重特異性アゴニスト、NKp44多重特異性アゴニスト、NKp46多重特異性アゴニスト、NKp80多重特異性アゴニスト、NKG2C多重特異性アゴニスト、2B4(CD244)多重特異性アゴニスト、CD32a多重特異性アゴニスト、CD64多重特異性アゴニスト、腫瘍抗原の他に活性化受容体、例えばNKG2D若しくはNKp30又は上に挙げた他のNK受容体にも結合し、更にFc受容体、例えばTriNKeTsにも結合する多重特異性アゴニスト、並びにCD16多重特異性アゴニスト、例えば、1633 BiKE、161533 TriKE、OXS-3550、OXS-C3550、AFM13及びAFM24;並びに標的抗原の他にFc受容体、例えば、CD16、CD32a、CD64にも結合することができる他の治療用抗体からなる群から選択され得る。
免疫活性化受容体アゴニストの他の例としては、デクチンアゴニスト(Imprime PGG)、組換えNKG2Dリガンド、γδ TCRシグナルのリガンド又は調節剤、例えば、抗BTN3A1 mAb若しくは抗BTN2A1 mAb、又はVγ9/Vδ2 TCR活性化リガンド、例えば、ホスホ抗原及びピロリン酸抗原、又は内因性Vγ9/Vδ2リガンドを増加させる薬剤、例えば、ビスホスホネート、例えば、パミドロン酸及びゾレドロン酸が挙げられる。
低分子免疫チェックポイント阻害剤の例には、CA-327(TIM3/PD-L1アンタゴニスト)がある。
抗体-薬物コンジュゲートは、造血器がんを標的とするADC、例えば、ゲムツズマブ オゾガマイシン、ブレンツキシマブ ベドチン、イノツズマブ オゾガマイシン、SAR3419、BT062、SGN-CD19A、IMGN529、MDX-1203、ポラツズマブ ベドチン(RG7596)、ピナツズマブ ベドチン(RG7593)、RG7598、ミラツズマブ ドキソルビシン、及びOXS-1550;並びに固形腫瘍抗原を標的とするADC、例えば、トラスツズマブ エムタンシン、グレンバツモマブ ベドチン、SAR56658、AMG-172、AMG-595、BAY-94-9343、BIIB015、ボルセツズマブ マホドチン(SGN-75)、ABT-414、ASG-5ME、エンホルツマブ ベドチン(ASG-22ME)、ASG-16M8F、IMGN853、インデュサツマブ ベドチン(MLN-0264)、バドルツズマブ(vadortuzumab)ベドチン(RG7450)、ソフィツブマブ ベドチン(RG7458)、リファスツズマブ ベドチン(RG7599)、RG7600、DEDN6526A(RG7636)、PSMA TTC、Progenics Pharmaceuticals社の1095、ロルボツズマブ メルタンシン、ロルボツズマブ エムタンシン、IMMU-130、サシツズマブ ゴビテカン(IMMU-132)、PF-06263507、及びMEDI0641からなる群から選択され得る。
抗体-アジュバントコンジュゲートは、ボルトボディ、例えば、国際公開第2018112108号A1及び国際公開第2018009916号A1に記載のボルトボディであり得る。ある特定の実施形態では、ボルトボディは、BDC-1001及びBDC-2034からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、ボルトボディはBDC-1001である。ある特定の実施形態では、ボルトボディはBDC-2034である。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは式(BT-I)
Figure 2023540701000061
 ［式中、
Abは、抗体部分であり、
Aは、抗体部分の非改変アミノ酸側鎖、又は抗体部分の改変アミノ酸側鎖であり、
Zは、連結部分であり、
Adjは、アジュバント部分であり、
r、は1～10から選択される整数である］
の構造を有する。
式(BT-I)の部分Abのr個のアミノ酸側鎖は、部分Adj-Zに連結されていることが理解される。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)のAは、アミン官能基を含む抗体部分にアミノ酸側鎖を含む。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、式(BT-II)
Figure 2023540701000062
 ［式中、
Abは、抗体部分であり、
Figure 2023540701000063
 は、Abのリジン残基の側鎖を表し、ここで、印を付けていない破線は、Zに対する結合を示し、星印を付けた破線は、リジン残基のα炭素に対する結合を示し、
Adjは、アジュバント部分であり、
rは1～10から選択される整数であり、
Zは、エチレングリコール基又はグリシン残基を有する二価連結部分である］
の構造を有する。
式(BT-II)の部分
Figure 2023540701000064
 は、式(BT-I)のAに対応することが理解される。同様に、式(BT-II)の部分Abのrリジン側鎖部分は、部分Adj-Zに連結されていることが理解される。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、アミド結合、C-N単結合、C-O単結合、又はC-C単結合を介してAdjに結合され、アミド結合又はC-N単結合を介してAbに結合される。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、Adjの窒素基及びAbの窒素基に結合している。そのような実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、アミド結合、C-N単結合、又はそれらの組合せを介して、隣接する窒素基に結合している。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、PEG部分を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、少なくとも2個のエチレングリコール基、例えば、少なくとも3個のエチレングリコール基、少なくとも4個のエチレングリコール基、少なくとも5個のエチレングリコール基、少なくとも6個のエチレングリコール基、少なくとも7個のエチレングリコール基、少なくとも8個のエチレングリコール基、少なくとも9個のエチレングリコール基、少なくとも10個のエチレングリコール基、少なくとも11個のエチレングリコール基、少なくとも12個のエチレングリコール基、少なくとも13個のエチレングリコール基、少なくとも14個のエチレングリコール基、少なくとも15個のエチレングリコール基、少なくとも16個のエチレングリコール基、少なくとも17個のエチレングリコール基、少なくとも18個のエチレングリコール基、少なくとも19個のエチレングリコール基、少なくとも20個のエチレングリコール基、少なくとも21個のエチレングリコール基、少なくとも22個のエチレングリコール基、少なくとも23個のエチレングリコール基、少なくとも24個のエチレングリコール基、又は少なくとも25個のエチレングリコール基を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、2個のエチレングリコール基、3個のエチレングリコール基、4個のエチレングリコール基、5個のエチレングリコール基、6個のエチレングリコール基、8個のエチレングリコール基、12個のエチレングリコール基、24個のエチレングリコール基、又は25個のエチレングリコール基を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、グリシン残基を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、少なくとも2個のグリシン残基、例えば、少なくとも3個のグリシン残基、少なくとも4個のグリシン残基、少なくとも5個のグリシン残基、少なくとも6個のグリシン残基、少なくとも7個のグリシン残基、少なくとも8個のグリシン残基、少なくとも9個のグリシン残基、少なくとも10個のグリシン残基、少なくとも11個のグリシン残基、少なくとも12個のグリシン残基、少なくとも13個のグリシン残基、少なくとも14個のグリシン残基、少なくとも15個のグリシン残基、少なくとも16個のグリシン残基、少なくとも17個のグリシン残基、少なくとも18個のグリシン残基、少なくとも19個のグリシン残基、少なくとも20個のグリシン残基、少なくとも21個のグリシン残基、少なくとも22個のグリシン残基、少なくとも23個のグリシン残基、少なくとも24個のグリシン残基、又は少なくとも25個のグリシン残基を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、2個のグリシン残基、3個のグリシン残基、4個のグリシン残基、5個のグリシン残基、6個のグリシン残基、8個のグリシン残基、12個のグリシン残基、24個のグリシン残基、又は25個のグリシン残基を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のZは、二価シクロヘキシレン基を更に含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、CDH1、CD19、CD20、CD29、CD30、CD38、CD40、CD47、CEA、EpCAM、MUC1、MUC16、EGFR、VEGF、HER2、SLAMF7、PDGFRa、gp75、CTLA4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、B7-H4、KIR、TNFRSF4、OX40L、IDO-1、IDO-2、CEACAM1、BTLA、TIM3、A2Ar、VISTA、CLEC4C(BDCA-2、DLEC、CD303、CLECSF7)、CLEC4D(MCL、CLECSF8)、CLEC4E(Mincle)、CLEC6A(デクチン-2)、CLEC5A(MDL-1、CLECSF5)、CLEC1B(CLEC-2)、CLEC9A(DNGR-1)、及びCLEC7A(デクチン-1)からなる群から選択される抗原に結合する抗体結合ドメインを含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、HER2に結合する抗体結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、EGFRに結合する抗体結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、CCR8と結合する抗体結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、PD-L1に結合する抗体結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、CEAに結合する抗体結合ドメインを含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、イピリムマブ、オビヌツズマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リツキシマブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ダラツムマブ、エタネルセプト、オララツマブ、エロツズマブ、マルゲツキシマブ、及びそれらのバイオシミラーからなる群から選択される抗体を含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、トラスツズマブを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、ペムブロリズマブを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAbは、ニボルマブを含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、PRRAを含む。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、toll様受容体(TLR)アゴニスト、c型レクチン受容体(CLR)アゴニスト、NOD様受容体(NLR)アゴニスト、Rig-I様受容体(RLR)アゴニスト、インターフェロン遺伝子刺激因子(STING)アゴニスト、及びこれらの組合せからなる群から選択されるPRRAである。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、TLRアゴニスト、例えば、TLR1アゴニスト、TLR2アゴニスト、TLR3アゴニスト、TLR4アゴニスト、TLR5アゴニスト、TLR6アゴニスト、TLR7アゴニスト、TLR7/8アゴニスト、TLR8アゴニスト、TLR9アゴニスト、TLR10アゴニスト、TLR11アゴニスト、及びそれらの組合せからなる群から選択されるTLRアゴニストである。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、CL264、CL401、CL413、CL419、CL553、CL572、Pam3CSK4、及びPam2CSK4からなる群から選択されるTLRアゴニストである。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、
Figure 2023540701000065
 ［式中、
各々の-Jは、-H、-OR4、及び-R4からなる群から独立して選択され、
各々の-R4は、-H、1、2、3、4、5、6、7、又は8個の炭素単位を含むアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキル基からなる群から独立して選択され、
-Q-は、存在しないか、又は1、2、3、4、5、6、7、若しくは8個の炭素単位を含むアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
破線は、Zに対する結合を示す］
からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、式
Figure 2023540701000066
 ［式中、
各々の-Jは、-H、-OR4、又は-R4からなる群から独立して選択され、
各々の-R4は、-H、1、2、3、4、5、6、7、又は8個の炭素単位を含むアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から独立して選択され、
各々の-U-は、独立して、-CH-又は-N-であり、ここで少なくとも1つの-U-は-N-であり、各々のtは、独立して、1、2、及び3から選択される整数であり、
-Q-は、存在しないか、又は1、2、3、4、5、6、7、若しくは8個の炭素単位を含むアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
破線は、Zに対する結合を示す］
のものである。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、式
Figure 2023540701000067
 からなる群から選択され、
式中、破線は、Zに対する結合を示す。
ある特定の実施形態では、式(BT-I)及び(BT-II)のAdjは、国際公開第2018112108号A1の段落[118]～[136]に開示されたアジュバント部分から選択される。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、2つ以上の異なるアジュバント部分を含む。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、式(BT-VI)
Figure 2023540701000068
 ［式中、
Abは、抗体部分であり、
Figure 2023540701000069
 は、Abのリジン残基の側鎖を表し、ここで、印を付けていない破線は、Zへの結合を示し、星印を付けた破線は、リジン残基のα炭素に対する結合を示し、
rは、1～10から選択される整数であり、
Zは、少なくとも1個のエチレングリコール基、又は少なくとも1個のグリシン残基を含む二価の連結部分である］
の構造を有する。
ある特定の実施形態では、式(BT-VI)のZは、式(BT-I)及び(BT-II)について定義された通りに使用される。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、式(BT-VII)
Figure 2023540701000070
 ［式中、
Abは、(i)抗原結合ドメイン、及び(ii)Fcドメインを含む抗体部分であり、
Adjは、式(BT-IVb)
Figure 2023540701000071
 (式中、
-R4は、1～8個の炭素を含むアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、
各々の-Jは、-Hであり、
各々の-U-は、-N-であり、
各々のtは、2であり、
-Q-は、存在せず、
破線は、G1に対する結合を示し、
-G1-は、結合であり、
aは、1～40から選択される整数であり、
rは、1～10から選択される整数である)
のアジュバント部分である］
の構造を有する。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、式(BT-VII)
Figure 2023540701000072
 ［式中、
Abは、トラスツズマブであり、
Adjは、式(BT-IVb)
Figure 2023540701000073
 (式中、
-R4は、ブチルであり、
各々の-Jは、-Hであり、
各々の-U-は、-N-であり、
各々のtは、2であり、
-Q-は存在せず、
破線は、-G1-に対する結合を示し、
-G1-は、結合であり、
aは、1～40から選択される整数であり、
rは、1～4から選択される整数である)
のアジュバント部分である］
の構造を有する。
ある特定の実施形態では、ボルトボディは、式(BT-VIII)
Figure 2023540701000074
 ［式中、
rは、1～10から選択される整数であり、
nは、約2～約25から選択される整数であり、
Abは、抗体部分である］
の構造を有する。
ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のrは、1である。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のrは、2である。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のrは、3である。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のrは、4である。
ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のnは、6、7、8、9、10、11、及び12から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のnは、8、9、10、11、及び12から選択される整数である。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のnは、10である。
ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のAbは、HER2、EGFR、PD-L1、又はCEAに結合する抗原結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)の抗体部分は、HER2に結合する抗原結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のAbは、EGFRに結合する抗原結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のAbは、PD-L1に結合する抗原結合ドメインを含む。ある特定の実施形態では、式(BT-VIII)のAbは、CEAに結合する抗原結合ドメインを含む。
式(BT-IIIa)、(BT-IIIb)、(BT-IIIc)、(BT-IIId)、(BT-IVa)、及び(BT-IVb)との関連でのみ、使用される用語は、以下の意味を有する:
用語「アルキル」は、示された数の炭素原子を有する直鎖又は分岐の飽和した脂肪族基を指す。アルキルは、任意の数の炭素、例えば、C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C1-7、C1-8、C1-9、C1-10、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6、及びC5-6を含み得る。例えば、C1-6アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルを含む。アルキルはまた、炭素原子30個までのアルキル基、例えば、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルも含み得る。アルキル基は、置換されていてもよく、又は非置換であってもよい。「置換アルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、及びアルコキシから選択される1つ以上の基で置換されていてもよい。
用語「アリール」は、任意の適切な数の環原子及び任意の適切な数の環を有する芳香族環系を指す。アリール基は、任意の適切な数の環原子、例えば、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、又は16個の環原子、並びに6～10、6～12、又は6～14環員を含み得る。アリール基は、単環式であってもよく、縮合して二環式若しくは三環式基を形成してもよく、又は結合によって連結されてビアリール基を形成してもよい。代表的なアリール基としては、フェニル、ナフチル、及びビフェニルが挙げられる。他のアリール基としては、メチレン連結基を有するベンジルが挙げられる。いくつかのアリール基は、6～12環員を有し、例えば、フェニル、ナフチル、又はビフェニルである。他のアリール基は、6～10環員を有し、例えばフェニル又はナフチルである。
用語「炭素環」は、3～12個の環原子、又は示された数の原子を含有する飽和又は部分不飽和、単環式、融合二環式、又は架橋多環式の環集合体を指す。炭素環は、任意の数の炭素、例えば、C3-6、C4-6、C5-6、C3-8、C4-8、C5-8、C6-8、C3-9、C3-10、C3-11、及びC3-12を含み得る。飽和単環式炭素環としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロオクチルが挙げられる。飽和二環式及び多環式炭素環としては、例えば、ノルボルナン、[2.2.2]ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレン、及びアダマンタンが挙げられる。炭素環基は、環内に1つ以上の二重結合又は三重結合を有する部分不飽和であってもよい。部分不飽和である代表的な炭素環式基としては、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン(1,3-及び1,4-異性体)、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン(1,3-、1,4-及び1,5-異性体)、ノルボルネン、及びノルボルナジエンが挙げられるが、これらに限定されない。
用語「ヘテロアルキル」は、1つ以上の炭素原子が、任意選択で独立して、N、O、Sから選択されるヘテロ原子で置き換えられたアルキル基を指す。
用語「複素環」は、ヘテロシクロアルキル基及びヘテロアリール基を指す。「ヘテロアリール」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、5～16個の環原子を含む単環式又は縮合二環式又は三環式芳香環集合体を指し、環原子の1～5個は、ヘテロ原子、例えば、N、O又はSである。更なるヘテロ原子、例えば、B、Al、Si及びPも有用であり得る。ヘテロ原子は、酸化されて、-S(O)-及び-S(O)2-などの部分を形成してもよい。ヘテロアリール基は、任意の数の環原子、例えば、3～6、4～6、5～6、3～8、4～8、5～8、6～8、3～9、3～10、3～11、又は3～12環員を含み得る。任意の適切な数のヘテロ原子がヘテロアリール基に含まれてもよく、例えば、1、2、3、4、若しくは5個、又は1～2、1～3、1～4、1～5、2～3、2～4、2～5、3～4、又は3～5個であってもよい。ヘテロアリール基としては、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン(1,2,3-、1,2,4-、及び1,3,5-異性体)、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、及びイソキサゾールなどの基が挙げられる。また、ヘテロアリール基が、芳香環系、例えばフェニル環と縮合して、ベンゾピロール、例えば、インドール及びイソインドール、ベンゾピリジン、例えば、キノリン及びイソキノリン、ベンゾピラジン(キノキサリン)、ベンゾピリミジン(キナゾリン)、ベンゾピリダジン、例えば、フタラジン及びシノリン、ベンゾチオフェン、並びにベンゾフランなどのメンバーを形成してもよい。他のヘテロアリール基としては、結合によって連結されたヘテロアリール環、例えば、ビピリジンが挙げられる。ヘテロアリール基は、置換されていてもよく、又は非置換であってもよい。「置換ヘテロアリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、及びアルコキシから選択される1つ以上の基で置換されていてもよい。ヘテロアリール基は、環上の任意の位置を介して連結されていてもよい。例えば、ピロールには1-、2-、及び3-ピロールが含まれ、ピリジンには2-、3-、及び4-ピリジンが含まれ、イミダゾールには1-、2-、4-、及び5-イミダゾールが含まれ、ピラゾールには1-、3-、4-、及び5-ピラゾールが含まれ、トリアゾールには1-、4-、及び5-トリアゾールが含まれ、テトラゾールには1-及び5-テトラゾールが含まれ、ピリミジンには2-、4-、5-、及び6-ピリミジンが含まれ、ピリダジンには3-及び4-ピリダジンが含まれ、1,2,3-トリアジンには4-及び5-トリアジンが含まれ、1,2,4-トリアジンには3-、5-、及び6-トリアジンが含まれ、1,3,5-トリアジンには2-トリアジンが含まれ、チオフェンには2-及び3-チオフェンが含まれ、フランには2-及び3-フランが含まれ、チアゾールは2-、4-、及び5-チアゾールが含まれ、イソチアゾールには3-、4-、及び5-イソチアゾールが含まれ、オキサゾールには2-、4-、及び5-オキサゾールが含まれ、イソキサゾールには3-、4-、及び5-イソキサゾールが含まれ、インドール、例えば、1-、2-、及び3-インドール、イソインドール、例えば、1-及び2-イソインドール、キノリン、例えば、2-、3-、及び4-キノリン、イソキノリン、例えば、1-、3-、及び4-イソキノリン、キナゾリン、例えば、2-及び4-キナゾリン、シノリン、例えば、3-及び4-シノリン、ベンゾチオフェン、例えば、2-及び3-ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、例えば、2-及び3-ベンゾフランがある。
用語「ヘテロシクロアルキル」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、3～12の環員、並びに1～4個のヘテロ原子、N、O及びSを有する飽和環系を指す。更なるヘテロ原子、例えば、B、Al、Si及びPも有用であり得る。ヘテロ原子は、酸化されて、-S(O)-及び-S(O)2-などの部分を形成してもよい。ヘテロシクロアルキル基は、任意の数の環原子、例えば、3～6、4～6、5～6、3～8、4～8、5～8、6～8、3～9、3～10、3～11、又は3～12環員を含み得る。ヘテロシクロアルキル基には、任意の適切な数のヘテロ原子が含まれてよく、例えば、1、2、3、又は4個、あるいは1～2、1～3、1～4、2～3、2～4、又は3～4個である。ヘテロシクロアルキル基としては、例えば、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、キヌクリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン(1,2-、1,3-及び1,4-異性体)、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、オキサン(テトラヒドロピラン)、オキセパン、チイラン、チエタン、チオラン(テトラヒドロチオフェン)、チアン(テトラヒドロチオピラン)、オキサゾリジン、イソキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、ジオキソラン、ジチオラン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサン、又はジチアンなどの基が挙げられる。ヘテロシクロアルキル基が、芳香族又は非芳香族環系と縮合して、インドリンのようなメンバーを形成してもよい。ヘテロシクロアルキル基は、非置換であってもよく、又は置換されていてもよい。「置換ヘテロシクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ及びアルコキシから選択される1つ以上の基で置換されてもよい。ヘテロシクロアルキル基は、環上の任意の位置を介して連結されていてもよい。例えば、アジリジンは1-又は2-アジリジンであってもよく、アゼチジンは1-又は2-アゼチジンであってもよく、ピロリジンは1-、2-、又は3-ピロリジンであってもよく、ピペリジンは1-、2-、3-、又は4-ピペリジンであってもよく、ピラゾリジンは1-、2-、3-、又は4-ピラゾリジンであってもよく、イミダゾリジンは1-、2-、3-、又は4-イミダゾリジンであってもよく、ピペラジンは1-、2-、3-、又は4-ピペラジンであってもよく、テトラヒドロフランは1-又は2-テトラヒドロフランであってもよく、オキサゾリジンは2-、3-、4-、又は5-オキサゾリジンであってもよく、イソキサゾリジンは2-、3-、4-、又は5-イソキサゾリジンであってもよく、チアゾリジンは2-、3-、4-、又は5-チアゾリジンであってもよく、イソチアゾリジンは2-、3-、4-、又は5-イソチアゾリジンであってもよく、モルホリンは2-、3-、又は4-モルホリンであってもよい。
用語「アリールアルキル」は、アルキル基の任意のアリール誘導体を指す。ある特定の実施形態では、1つ以上のアリール部分が、アルキル結合を通して分子の残部にカップリングされてもよい。そのような状況下では、置換基はアリールアルキルと称され、アルキレン部分が、アリール部分とアリールがカップリングしている分子との間にあることを示す。代表的なアリールアルキル基としては、フェニルメチル、フェニルエチル、フェニルプロピル、フェニルイソプロピル、フェニルブチル、フェニルイソブチル、フェニル-sec-ブチル、フェニル-tert-ブチル、フェニルペンチル、フェニルイソペンチル、フェニルヘキシル、ナフチルメチル、ナフチルエチル、ナフチルプロピル、ナフチルイソプロピル、ナフチルブチル、ナフチルイソブチル、ナフチル-sec-ブチル、ナフチル-tert-ブチル、ナフチルペンチル、ナフチルイソペンチル、ナフチルヘキシル、ビフェニルメチル、ビフェニルエチル、ビフェニルプロピル、ビフェニルイソプロピル、ビフェニルブチル、ビフェニルイソブチル、ビフェニル-sec-ブチル、ビフェニル-tert-ブチル、ビフェニルペンチル、ビフェニルイソペンチル及びビフェニルヘキシルが挙げられる。
用語「ヘテロアリールアルキル」は、1つ以上の炭素原子が、独立して、N、O、及びSから選択されるヘテロ原子で置き換えられていてもよいアリールアルキル基を指す。
ある特定の実施形態では、1つ以上の更なる薬物は、β放射体、例えば、177ルテニウム、166ホルミウム、186レニウム、188レニウム、67銅、149プロメチウム、199金、77臭素、153サマリウム、105ロジウム、89ストロンチウム、90イットリウム、131ヨウ素;α線放出核種、例えば、213ビスマス、223ラジウム、225アクチニウム、211アスタチン;オージェ電子放出核種、例えば、77臭素、111インジウム、123ヨウ素、125ヨウ素からなる群から選択され得る放射性核種である。
標的化放射性核種治療薬は、ゼヴァリン(90Y-イブリツモマブ チウキセタン)、ベクサー(131I-トシツモマブ)、オンコリム(131I-Lym 1)、リンホサイド(90Y-エプラツズマブ)、コタラ(131I-chTNT-1/B)、ラベツズマブ(90Y又は131I-CEA)、セラギン(theragyn)(90Y-ペムツモマブ)、リカルチン(licartin)(131I-メツキシマブ)、ラドレツマブ(radretumab)(131I-L19)PAM4(90Y-クリバツズマブ テトラキセタン)、ゾーフィゴ(223Ra二塩化物)、ルタテラ(177Lu-DOTA-Tyr3-オクトレオテート)、及び131I-MIBGからなる群から選択され得る。
DNA損傷修復阻害剤は、ポリ(ADP-リボース)ポリメラーゼ(PARP)阻害剤、例えば、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、ベリパリブ、CEP 9722、及びE7016;CHK1/CHK2二重阻害剤、例えば、AZD7762、V158411、CBP501、及びXL844;CHK1選択性阻害剤、例えば、PF477736、MK8776/SCH900776、CCT244747、CCT245737、LY2603618、LY2606368/プレキサセルチブ、AB-IsoG、ARRY575、AZD7762、CBP93872、ESP01、GDC0425、SAR020106、SRA737、V158411及びVER250840;CHK2阻害剤、例えば、CCT241533及びPV1019;ATM阻害剤、例えば、AZD0156、AZD1390、KU55933、M3541、及びSX-RDS1;ATR阻害剤、例えば、AZD6738、BAY1895344、M4344、及びM6620(VX-970);並びにDNA-PK阻害剤、例えば、M3814からなる群から選択され得る。
腫瘍代謝阻害剤は、アデノシン経路の阻害剤、トリプトファン代謝の阻害剤、及びアルギニン経路の阻害剤からなる群から選択され得る。
アデノシン経路の阻害剤の例には、A2AR(アデノシンA2A受容体)の阻害剤、例えば、ATL-444、イストラデフィリン(KW-6002)、MSX-3、プレラデナント(SCH-420,814)、SCH-58261、SCH412,348、SCH-442,416、ST-1535、カフェイン、VER-6623、VER-6947、VER-7835、ビパデナン(BIIB-014)、ZM-241,385、PBF-509及びV81444;CD73の阻害剤、例えば、IPH53及びSRF373;並びにCD39の阻害剤、例えば、IPH52がある。
トリプトファン代謝の阻害剤の例には、IDOの阻害剤、例えば、インドキシモド(NLG8189)、エパカドスタット、ナボキシモド、BMS-986205、及びMK-7162;TDOの阻害剤、例えば、680C91;並びにIDO/TDO二重阻害剤がある。
アルギニン経路の阻害剤の例には、アルギナーゼの阻害剤、例えば、INCB001158である。
プロテインキナーゼ阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、細胞内キナーゼ阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、ホスホイノシチド-3キナーゼ阻害剤、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ阻害剤、核因子κ-βキナーゼ(IKK)の阻害剤、及びWee-1阻害剤からなる群から選択され得る。
受容体チロシンキナーゼ阻害剤の例には、EGF受容体阻害剤、例えば、アファチニブ、セツキシマブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ペルツズマブ、マルゲツキシマブ;VEGF受容体阻害剤、例えば、アキシチニブ、レンバチニブ、ペガプタニブ、リニファニブ(ABT-869);C-KIT受容体阻害剤、例えば、CDX0158(KTN0158);ERBB2(HER2)阻害剤、例えば、ハーセプチン(トラスツズマブ);ERBB3受容体阻害剤、例えば、CDX3379(MEDI3379、KTN3379)及びAZD8931(サピチニブ);FGF受容体阻害剤、例えば、エルダフィチニブ;AXL受容体阻害剤、例えば、BGB324(BGB324、R 428、R428、ベムセメンチニブ)及びSLC391;並びにMET受容体阻害剤、例えば、CGEN241がある。
細胞内キナーゼ阻害剤の例には、ブルトンチロシンキナーゼ(BTK)阻害剤、例えば、イブルチニブ、アカラブルチニブ、GS-4059、スペブルチニブ、BGB-3111、HM71224、ザヌブルチニブ、ARQ531、BI-BTK1、及びベカブルチニブ;脾臓チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ホスタマチニブ;Bcr-Ablチロシンキナーゼ阻害剤、例えば、イマチニブ及びニロチニブ;Janusキナーゼ阻害剤、例えば、ルキソリチニブ、トファシチニブ、及びフェドラチニブ;並びに多重特異性チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ボスチニブ、クリゾチニブ、カボザンチニブ、ダサチニブ、エントレクチニブ、ラパチニブ、ムブリチニブ、パズパニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、SU6656、及びバンデタニブがある。
チロシンキナーゼ阻害剤の一例は、チロシンキナーゼ阻害剤(「TKI」)コンジュゲート又はその薬学的に許容される塩であり、前記コンジュゲートは、ポリマー部分Zに少なくとも1つの部分-L1-L2-を介して共有結合でコンジュゲートされた複数のTKI部分-DTKIを含み、ここで、-L1-は-DTKIに共有結合で且つ可逆的にコンジュゲートされており、-L2-はZに共有結合でコンジュゲートされており、-L1-はリンカー部分であり、-L2-は化学結合又はスペーサー部分であり、部分-L1-、-L2-及びZは、本発明のコンジュゲートについて本明細書の他の箇所に記載される通りである。ある特定の実施形態では、-DTKIは、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、細胞内キナーゼ阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、ホスホイノシチド-3キナーゼ(PI3K)阻害剤、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ阻害剤、核因子κ-βキナーゼ(IKK)の阻害剤、及びWee-1阻害剤からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、-DTKIはアキシチニブである。ある特定の実施形態では、-DTKIは、レンバチニブである。ある特定の実施形態では、-DTKIは、ペガプタニブである。ある特定の実施形態では、-DTKIはリニファニブである。
サイクリン依存性キナーゼ阻害剤の例には、リボシクリブ、パルボシクリブ、アベマシクリブ、トリラシクリブ、プルバラノールA、オルムシンII、及びMK-7965がある。
ホスホイノシチド(phophoinositide)-3-キナーゼ阻害剤の例には、IPI549、GDc-0326、ピクチリシブ、セラベリシブ、IC-87114、AMG319、セレタリシブ、イデアリシブ、及びCUDC907がある。
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ阻害剤の例には、Ras/ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えば、チピラフィニブ及びLB42708;Raf阻害剤、例えば、レゴラフェニブ、エンコラフェニブ、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、ソラフェニブ、PLX-4720、GDC-0879、AZ628、リフィラフェニブ、PLX7904、及びRO5126766;MEK阻害剤、例えば、コビメチニブ、トラメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、ピマセルチブ、レファメチニブ、及びPD0325901;ERK阻害剤、例えば、MK-8353、GDC-0994、ウリクセルチニブ、及びSCH772984がある。
核因子κ-βキナーゼ(IKK)の阻害剤の例には、BPI-003、及びAS602868がある。
Wee-1阻害剤の一例は、アダボセルチブである。
ケモカイン受容体及び化学誘引物質受容体アゴニストは、CXCケモカイン受容体、CCケモカイン受容体、Cケモカイン受容体、CX3Cケモカイン受容体及び化学誘引物質受容体からなる群から選択され得る。
CXCケモカイン受容体は、CXCR1アゴニスト、例えば、組換えCXCL8及び組換えCXCL6;CXCR2アゴニスト、例えば、組換えCXCL8、組換えCXCL1、組換えCXCL2、組換えCXCL3、組換えCXCL5、組換えCXCL6、MGTA 145、及びSB251353;CXCR3アゴニスト、例えば、組換えCXCL9、組換えCXCL10、組換えCXCL11、及び組換えCXCL4;CXCR4アゴニスト、例えば、組換えCXCL12、ATI2341、CTCE0214、CTCE0324、及びNNZ4921;CXCR5アゴニスト、例えば、組換えCXCL13;CXCR6アゴニスト、例えば、組換えCXCL16;CXCL7アゴニスト、例えば、組換えCXCL11からなる群から選択され得る。
CCケモカイン受容体は、CCR1アゴニスト、例えば、組み換えCCL3、ECI301、組み換えCCL4、組み換えCCL5、組み換えCCL6、組み換えCCL8、組み換えCCL9/10、組み換えCCL14、組み換えCCL15、組み換えCCL16、組み換えCCL23、PB103、PB105、及びMPIF1;CCR2アゴニスト、例えば、組換えCCL2、組換えCCL8、組換えCCL16、PB103、及びPB105;CCR3アゴニスト、例えば、組換えCCL11、組換えCCL26、組換えCCL7、組換えCCL13、組換えCCL15、組換えCCL24、組換えCCL5、組換えCCL28、及び組換えCCL18;CCR4アゴニスト、例えば、組換えCCL3、ECI301、組換えCCL5、組換えCCL17、及び組換えCCL22;CCR5アゴニスト、例えば、組換えCCL3、ECI301、組換えCCL5、組換えCCL8、組換えCCL11、組換えCCL13、組換えCCL14、組換えCCL16、PB103、及びPB105;CCR6アゴニスト、例えば、組換えCCL20;CCR7アゴニスト、例えば、組換えCCL19及び組換えCCL21;CCR8アゴニスト、例えば、組換えCCL1、組換えCCL16、PB103、及びPB105;CCR9アゴニスト、例えば、組換えCCL25;CCR10アゴニスト、例えば、組換えCCL27及び組換えCCL28;並びにCCR11アゴニスト、例えば、組換えCCL19、組換えCCL21、及び組換えCCL25からなる群から選択され得る。
Cケモカイン受容体は、XCR1アゴニスト、例えば、組換えXCL1、又は組換えXCL2であり得る。
CX3Cケモカイン受容体は、CX3CR1アゴニスト、例えば、組換えCX3CL1であり得る。
化学誘引物質受容体は、ホルミルペプチド受容体アゴニスト、例えば、N-ホルミルペプチド、N-ホルミルメチオニン-ロイシル-フェニルアラニン、エンフビルチド、T21/DP107、アネキシンA1、Ac2-26、及びAc9-25;C5a受容体アゴニスト;並びにケモカイン様受容体1アゴニスト、例えば、ケメリンからなる群から選択され得る。
ケモカインアンタゴニストは、CXCLケモカインの阻害剤、例えば、UNBS5162;CXCL8の阻害剤、例えば、BMS986253及びPA620;CXCL10の阻害剤、例えば、TM110、エルデルマブ、及びNI0801;CXCL12の阻害剤、例えば、NOX-A12及びJVS100;CXCL13の阻害剤、例えば、VX5;CCL2の阻害剤、例えば、PA508、ABN912、AF2838、BN83250、BN83470、C243、CGEN54、CNTO888、NOXE36、VT224、及びSSR150106;CCL5の阻害剤、例えば、HGS1025及びNI0701;CCL2/CCL5の阻害剤、例えば、BKTP46;CCL5/FMLP受容体の阻害剤、例えば、RAP160;CCL11の阻害剤、例えば、ベルティリムマブ及びRAP701;CCL5/CXCL4の阻害剤、例えば、CT2008及びCT2009;CCL20の阻害剤、例えば、GSK3050002;並びにCX3CL1の阻害剤、例えば、クエトモリマブからなる群から選択され得る。
ケモカイン受容体アンタゴニストは、CXCR1の阻害剤、例えば、レペルタキシン、CCX832、FX68、及びKB03;CXCR2の阻害剤、例えば、AZD5069、AZD5122、AZD8309、GSK1325756、GSK1325756H、PS291822、SB332235、及びSB656933;CXCR1/CXCR2の阻害剤、例えば、DF1970、DF2156A、DF2162、DF2755A、レパリキシン、SX576、SX682、PACG31P、AZD4721、及びPA401;CXCR3の阻害剤;CXCR4の阻害剤、例えば、BL8040;CXCR4/E-セレクチンの阻害剤、例えば、GMI1359;CXCR6の阻害剤、例えば、CCX5224;CCR1の阻害剤、例えば、AZD4818、BAY865047、BMS817399、CCX354、CCX634、CCX9588、CP481715、MLN3701、MLN3897、PS031291、PS375179、及びPS386113;CCR2の阻害剤、例えば、AZD2423、BL2030、BMS741672、CCX140、CCX598、CCX872、CCX915、CNTX6970、INCB3284、INCB3344、INCB8696、JNJ17166864、JNJ27141491、MK0812、OPLCCL2LPM、PF4136309、セロシオン、STIB0201、STIB0211、STIB0221、STIB0232、STIB0234、TAK202、TPI526;CCR2/CCR5の阻害剤、例えば、PF04634817、RAP103、及びTBR652;CCR2/CCR5/CCR8の阻害剤、例えば、RAP310;CCR3の阻害剤、例えば、ASM8、AXP1275、BMS639623、CM101、DPC168、GW766994、GW824575、MT0814、OPLCCL11LPM、及びQAP642;CCR4の阻害剤、例えば、AT008、AZD2098、CCX6239、FLX193、FLX475、GBV3019、GSK2239633、IC487892、及びポテリジオ;CCR5の阻害剤、例えば、5P12-RANTES、AZD5672、AZD8566、CMPD167、ESN196、GSK706769、GW873140、HGS004、INCB15050、INCB9471、L872、殺菌剤、PF232798、PRO140、RAP101、SAR113244、SCH350634、SCH351125、SCH417690、シーエルセントリ、TAK779、TBR220、TD0232、及びVX286;CCR5/CXCR4の阻害剤、例えば、AMD887、ND401、及びSP01A;CCR6の阻害剤、例えば、CCX507、CCX9664、及びSTIB100X;CCR6の阻害剤、例えば、CCX025、CCX507、CCX807、eut22、MLN3126、POL7085、トラフィセット(traficet)-EN;CXCR3の阻害剤、例えば、AMG487、AT010、STIA120X;CXCR4の阻害剤、例えば、AD114、AD214、ALX0651、ALX40-4C、AMD070、AT007、AT009、BKT170、BMS936564、セリキサフォール(celixafor)、CTCE9908、GBV4086、GSK812397、KRH2731、KRH3140、LY2510924、LY2624587、モゾビル、OPLCXCL12LPM、PF06747143、POL6326、Q122、レビキシル(revixil)、TG0054、USL311、X4P001、及びX4P002;並びにCXCR7の阻害剤、例えば、CCX650及びCCX662からなる群から選択され得る。
サイトカイン受容体アゴニストは、IL-2、IL-15、IL-7、IL-10、IL-12、IL-21、IFNαIL-17、IFNβ、IFNγ、IL-18、IL-27、TNFα、GM-CSF、FLT3L、LTα、LTβ、及びTRAILの遺伝子をコードするmRNA、DNA、又はプラスミド、並びに組換えタンパク質、例えばIL-2/IL-15β/γ受容体のアゴニスト、IL-10受容体のアゴニスト、IL-12受容体のアゴニスト、IL-18受容体のアゴニスト、IL-21受容体のアゴニスト、IL-7受容体のアゴニスト、IFNα/β受容体のアゴニスト、IFNγ受容体のアゴニスト、FLT3受容体のアゴニスト、GM-CSF受容体のアゴニスト、LTα受容体のアゴニスト、LTβ受容体のアゴニスト、及びTNFα受容体のアゴニストからなる群から選択され得る。
IL-10受容体のアゴニストの例には、AG011、デカビル、EG10、IL10Nanocap、イロデカキン、AM0010、テノビル、及びVT310 VIRONがある。
IL-12受容体のアゴニストの例には、組換えIL-12 p70、組換えIL-12 p35、AM0012、AS1409、ドデキン、HemaMax、LipoVIL12、MSB0010360N、Ad-RTS-hIL-12、タボキノジン テルスプラスミド、exoIL-12、及びNHS-IL12がある。
IL-18受容体のアゴニストの例には、SB485232がある。
IL-21受容体のアゴニストの例には、BMS982470(デネニコキン)がある。
IL-7受容体のアゴニストの例には、CYT107、CYT99007、及びGX-I7がある。
FLT3Rのアゴニストの例には、CDX-301がある。
TNFα受容体のアゴニストの例には、L19-TNFα、オーリミューン(aurimune)、ベロムン(beromun)、BreMel/TNFα、フィブロムン(fibromun)、レフノット(refnot)、及びTNFPEG20がある。
細胞死受容体アゴニストは、TRAILR1/DR4アゴニスト、例えば、AMG951(デュラネルミン)、APG350、APG880、HGSETR1(マプツムマブ)、及びSL231;並びにTRAILR2/DR5アゴニスト、例えば、AMG655、DS8273、HGSETR2(レキサツムマブ)、HGSTR2J、IDD004/GEN1029、INBRX109、LBY135、MEDI3039、PRO95780、RG7386、及びTAS266からなる群から選択され得る。
CD47アンタゴニストは、ALX148、CC-90002、Hu5F9G4、SRF231、TI061、TTI-621、TTI-622、AO176、IBI188、IMC002、組み換えSIRPα、及びLYN00301からなる群から選択され得る。
SIRPαアンタゴニストの例には、FSI89又は組換えCD47がある。
腫瘍溶解薬の例には、CAVATAK、BCG、モビラン、TG4010、Pexa-Vec(JX-594)、JX-900、JX-929、及びJX-970がある。
シグナル変換タンパク質の例には、Fn14-TRAIL(KAHR101)、CD80-Fc(FTP155)、CTLA4-FasL(KAHR102)、PD1-41BBL(DSP105)、PD-L1-41BB(PRS-344、NM21-1480、FS222)、PD1-CD70(DSP106)及びSIRPα-41BBL(DSP 107)がある。
エピジェネティック修飾剤は、DNAメチルトランスフェラーゼ阻害剤、リジン特異的デメチラーゼ1阻害剤、Zesteホモログ2阻害剤、ブロモドメイン、及びエクストラターミナルモチーフ(BET)タンパク質阻害剤、例えば、GSK525762、並びにヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)阻害剤、例えば、ベレオダック、SNDX275、及びCKD-M808からなる群から選択され得る。
腫瘍ペプチド/ワクチンの例は、NY-ESO、WT1、MART-1、IO102、及びPF-06753512、並びに患者由来の腫瘍配列又はネオ抗原を使用する個別化されたがんワクチンである。
熱ショックタンパク質(HSP)阻害剤の例には、PF-04929113(SNX-5422)などのHSP90の阻害剤がある。
タンパク質分解酵素の例には、組換えヒアルロニダーゼ、例えば、rHuPH20及びPEGPH20がある。
ユビキチン及びプロテアソーム阻害剤は、ユビキチン特異的プロテアーゼ(USP)阻害剤、例えば、P005091;20Sプロテアソーム阻害剤、例えば、ボルテジミブ、カーフィルゾミブ、イキサゾミブ、オプロゾミブ、デランゾミブ、及びセラストロール;並びに免疫プロテアソーム阻害剤、例えば、ONX-0914からなる群から選択され得る。
接着分子アンタゴニストは、β2-インテグリンアンタゴニスト及びセレクチンアンタゴニストからなる群から選択され得る。
ホルモンは、ホルモン受容体アゴニスト及びホルモン受容体アンタゴニストからなる群から選択され得る。
ホルモン受容体アゴニストの例には、ソマトスタチン受容体アゴニスト、例えば、ソマトスタチン、ランレオチド、オクトレオチド、FX125L、FX141L、及びFX87Lがある。
ホルモン受容体アンタゴニストの例には、抗アンドロゲン、抗エストロゲン、及び抗プロゲストゲンがある。抗アンドロゲンの例には、ステロイド性抗アンドロゲン、例えば、酢酸シプロテロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、スピロノラクトン、オキセンドロン、酢酸オサテロン;非ステロイド系抗アンドロゲン、例えば、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、トピルタミド、エンザルタミド、及びアパルタミド;アンドロゲン合成阻害剤、例えば、ケトコナゾール、酢酸アビラテロン、セビテロネル、アミノグルテチミド、フィナステリド、デュタステリド、エプリステリド、及びアルファトラジオールがある。抗エストロゲンの例には、選択的エストロゲン受容体調整薬(SERM)、例えば、タモキシフェン、クロミフェン、ファレストン、ラロキシフェン;ERサイレントアンタゴニスト及び選択的エストロゲン受容体分解薬(SERD)、例えば、フルベストラント;アロマターゼ阻害剤、例えば、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、ホルメスタン、及びファドロゾール;並びに抗ゴナドトロピン、例えば、テストステロン、黄体ホルモン、及びGnRH類似体がある。抗プロゲストゲンの例には、ミフェプリストン、リロプリストン、及びオナプリストンがある。
細胞療法の例としては、CAR療法、例えば、CAR-T療法、例えば、チサゲンレクロイセル、アキシカブタゲン シロロイセル、bb21217、LCAR-B38M、JCARH125、MCARH171、JNJ-4528、イデカブタジェン ビクロイセル(bb2121)、SCRI-CAR19x22;腫瘍抗原を標的とするCAR療法、例えば、CD19発現細胞を標的とするCAR療法、CD22発現細胞を標的とするCAR療法、BCMA発現細胞を標的とするCAR療法、HER2発現細胞を標的とするCAR療法、CD138発現細胞を標的とするCAR療法、CD133発現細胞を標的とするCAR療法、BCMA発現細胞を標的とするCAR療法、CEA発現細胞を標的とするCAR療法、クローディン18.2発現細胞を標的とするCAR療法、EGFR発現細胞を標的とするCAR療法、EGFRvIII発現細胞を標的とするCAR療法、Eph2A発現細胞を標的とするCAR療法、EpCAM発現細胞を標的とするCAR療法、GD2発現細胞を標的とするCAR療法、GPC3発現細胞を標的とするCAR療法、MSLN発現細胞を標的とするCAR療法、5T4発現細胞を標的とするCAR療法、LMP1発現細胞を標的とするCAR療法、PD-L1発現細胞を標的とするCAR療法、PSMA発現細胞を標的とするCAR療法、FRα発現細胞を標的とするCAR療法、及びMUC1発現細胞を標的とするCAR療法が挙げられる。細胞治療の例としては、TIL療法、NK療法、サイトカイン誘導性メモリーNK細胞療法、ex vivo増大細胞によるNK細胞療法が挙げられる。細胞療法の例には、腫瘍抗原若しくは腫瘍ネオ抗原特異的T細胞受容体を発現するように操作され得る、又は腫瘍抗原若しくは腫瘍ネオ抗原に関連して増大され得るαβ又はγδ T細胞による治療法が含まれる。
ある特定の実施形態では、患者は、哺乳動物患者、例えば、ヒト患者である。
本明細書に記載される式(I)のIL-2タンパク質、IL-2コンジュゲート又は医薬組成物の投与は、外用、注射又は注入によって行われてよく、これには関節内、関節周囲、皮内、皮下、筋肉内、静脈内、骨内、腹膜内、髄腔内、嚢内、眼窩内、硝子体内、腫瘍内、鼓室内、膀胱内、心臓内、経気管、表皮下、被膜下、クモ膜下、脊髄内、脳室内（intraventricular）、胸骨内注射及び注入、脳組織又は脳液への本発明等の送達を可能にする埋め込みデバイス(例えば、オンマイヤーレザバー)を介した脳への直接送達、直接脳室内注射又は注入、脳又は脳関連領域への注射又は注入、脈絡膜下腔への注射、後眼窩注射及び点眼が含まれ、好ましくは皮下注射を介して行われる。ある特定の実施形態では、投与は皮下注射を介する。
別の態様では、本発明は、式(I-i)：
(Tag1)y-(X1)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z(I-i)
［式中、
配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、
配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、かつ少なくとも1個のグリコシル化モチーフを含み、
配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、
Tag1及びTag2は、独立してタグ部分であり、
X1は、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸残基であり、
xは0又は1であり、
yは0又は1であり、そして
zは0又は1である］
のIL-2タンパク質配列に関する。
配列A、配列B、配列C、Tag1、Tag2、x、y及びzについての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質について開示されている通りである。
ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はアルギニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はアスパラギン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はアスパラギン酸残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はセリン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はグルタミン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はグルタミン酸残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はグリシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はヒスチジン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はイソロイシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はロイシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はリジン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はメチオニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はフェニルアラニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はセリン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はトレオニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はトリプトファン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はチロシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-i)のX1はバリン残基である。
別の態様では、本発明は、式(I-i)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列に関する。そのようなオリゴヌクレオチドについての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質を式(I-i)のIL-2タンパク質に置き換える以外は、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドについて、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様では、本発明は、式(I-i)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むコンジュゲートに関する。式(I-i)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むこのコンジュゲートについての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質を式(I-i)のIL-2タンパク質に置き換える以外は、式(I)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むコンジュゲートについて、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様では、本発明は、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質、又は1つ以上のそのような式(I-i)のIL-2タンパク質を含む少なくとも1つのIL-2コンジュゲート、及び少なくとも1つの賦形剤を含む医薬組成物に関する。そのような医薬組成物についての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質を式(I-i)のIL-2タンパク質に置き換える以外は、少なくとも1つの式(I)のIL-2タンパク質、又は式(I)のIL-2タンパク質の1つ以上を含む少なくとも1つのIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物について、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、医薬として使用するための、式(I-i)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、式(I-i)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患の治療のための医薬の製造のための、式(I-i)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、IL-2によって治療することができる1つ以上の疾患の治療を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒト患者において治療する、制御する、遅延させる、又は予防する方法であって、それを必要とする前記患者に、治療有効量の式(I-i)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物を投与するステップを含む方法に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
ある特定の実施形態では、式(I-i)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-i)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物は、1つ以上の更なる薬物の投与の前に、それと同時に、又はその後に患者に投与される。そのような1つ以上の更なる薬物についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様では、本発明は、式(I-ii)：
(Tag1)y-(X1)x-配列A-配列D-配列C-(Tag2)z(I-ii)
［式中、
配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、
配列Dは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、
配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、
Tag1及びTag2は、独立してタグ部分であり、
X1は、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸残基であり、
xは0又は1であり、
yは0又は1であり、そして
zは0又は1である］
のIL-2タンパク質配列に関する。
配列A、配列C、Tag1、Tag2、x、y及びzについての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に開示されている通りである。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも78%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも80%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも82%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも84%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも87%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも89%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも91%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも93%の配列同一性を有する。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に対して少なくとも95%の配列同一性を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して11個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して10個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して9個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して8個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して7個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して6個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して5個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して4個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して3個のアミノ酸変化を含む。ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2と比較して2個のアミノ酸変化を含む。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、
YKNPFADSTLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号346)、
YKNPKLTFADSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号347)、
YKNPKLTRFADSTFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号348)、
YKNPKLTRMLFADSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号349)、
YKNPKLTRMLTFADSTPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号350)、
YKNPKLTRMLTFFADSTKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号351)、
YKNPKLTRMLTFKFADSTKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号352)、
YKNPKLTRMLTFKFFADSTATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号353)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFADSTLEEVLNLAQSK (配列番号354)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEFADSTEEVLNLAQSK (配列番号355)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNFADST (配列番号356)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、
YKNPFGDSTLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号357)、
YKNPKLTFGDSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号358)、
YKNPKLTRFGDSTFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号359)、
YKNPKLTRMLFGDSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号360)、
YKNPKLTRMLTFGDSTPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号361)、
YKNPKLTRMLTFFGDSTKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号362)、
YKNPKLTRMLTFKFGDSTKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号363)、
YKNPKLTRMLTFKFFGDSTATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSK (配列番号364)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGDSTLEEVLNLAQSK (配列番号365)、
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEFGDSTEEVLNLAQSK (配列番号366)、及び
YKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNFGDST (配列番号367)
からなる群から選択される配列を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)の配列Dは、配列番号2に基づくK5、R8、M9、T11、F12、K13、F14、Y15、E31、E32、及びL42からなる群から選択されるアミノ酸位置、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に生じる少なくとも1つのアミノ酸変異を更に含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくF12、Y15、E31、E32、及びL42からなる群から選択されるアミノ酸位置、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置K5、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置R8、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置M9、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置T11、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置F12、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置K13、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置F14、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置Y15、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置E31、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置E32、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも1つのアミノ酸変異は、配列番号2に基づくアミノ酸位置L42、又はそのホモログ若しくはバリアントの対応する位置に変異を含む。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、アルギニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、アスパラギン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、アスパラギン酸残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、システイン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、グルタミン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、グルタミン酸残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、グリシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、ヒスチジン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、イソロイシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、ロイシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、リジン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、メチオニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、フェニルアラニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、セリン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、トレオニン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、トリプトファン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、チロシン残基である。ある特定の実施形態では、式(I-ii)のX1は、バリン残基である。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGDSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号334)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFADSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号335)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGDSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号336)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFADSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号337)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGDSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号338)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFADSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号339)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFGDSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号340)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTFADSTKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号341)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFGDSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号342)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLFADSTMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号343)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFGDSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号344)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、配列
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEFADSTLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT (配列番号345)
を有する。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、式(I)又は(I-i)のIL-2タンパク質からのN-結合型又はO-結合型グリカンの酵素的又は化学的除去によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質は、ペプチド-N-グリコシダーゼF(PNgアーゼF)によって媒介される、式(I)又は(I-i)のIL-2タンパク質からの1つ以上のN-結合型グリカンの酵素的除去によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号334のIL-2タンパク質を、配列番号9のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号340のIL-2タンパク質を、配列番号10のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号335のIL-2タンパク質を、配列番号12のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号341のIL-2タンパク質を、配列番号13のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号336のIL-2タンパク質を、配列番号15のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号342のIL-2タンパク質を、配列番号16のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号337のIL-2タンパク質を、配列番号18のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号343のIL-2タンパク質を、配列番号19のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号338のIL-2タンパク質を、配列番号21のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号344のIL-2タンパク質を、配列番号22のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号339のIL-2タンパク質を、配列番号24のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
ある特定の実施形態では、配列番号345のIL-2タンパク質を、配列番号25のIL-2タンパク質のPNgアーゼF処理によって得ることができる。
別の態様では、本発明は、式(I-ii)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド配列に関する。そのようなオリゴヌクレオチドについての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質が式(I-ii)のIL-2タンパク質に置き換えられることを除き、式(I)のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチドについて本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様では、本発明は、式(I-ii)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むコンジュゲートに関する。式(I-ii)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むこのコンジュゲートについての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質が式(I-ii)のIL-2タンパク質に置き換えられることを除き、式(I)のIL-2タンパク質の1つ以上を含むコンジュゲートについて本明細書中の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様では、本発明は、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質、又は式(I-ii)の1つ以上のそのようなIL-2タンパク質を含む少なくとも1つのIL-2コンジュゲート、及び少なくとも1つの賦形剤を含む医薬組成物に関する。そのような医薬組成物についての具体的な実施形態は、式(I)のIL-2タンパク質が式(I-ii)のIL-2タンパク質に置き換えられることを除き、少なくとも1つの式(I)のIL-2タンパク質を含む医薬組成物、又は式(I)のIL-2タンパク質の1つ以上を含む少なくとも1つのIL-2コンジュゲートについて本明細書中の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、医薬として使用するための、式(I-ii)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患の治療に使用するための、式(I-ii)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、IL-2によって治療することができる疾患の治療のための医薬の製造のための、式(I-ii)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
別の態様は、IL-2によって治療することができる1つ以上の疾患の治療を必要とする哺乳動物患者、例えばヒト患者において治療する、制御する、遅延させる、又は予防する方法であって、それを必要とする前記患者に、治療有効量の式(I-ii)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物を投与するステップを含む方法に関する。IL-2によって治療することができる疾患についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
ある特定の実施形態では、式(I-ii)のIL-2タンパク質、少なくとも1つの式(I-ii)のIL-2タンパク質を含むIL-2コンジュゲート、又はそのようなIL-2タンパク質若しくはIL-2コンジュゲートを含む医薬組成物は、1つ以上の更なる薬物の投与の前、それと同時に、又はその後に患者に投与される。そのような1つ以上の更なる薬物についての具体的な実施形態は、本明細書の他の箇所に記載されている通りである。
材料及び方法
材料
他に指定していない限り、材料は全て市販のものとした。
方法
タンパク質濃度の決定
タンパク質濃度は、Eppendorf BioSpectrometer(登録商標)basicで、製造元による既定の設定を使用し、算出された分子消衰係数及び分子量を使用して決定した。
PNGアーゼFアッセイ
精製されたIL-2バリアントを、PNGアーゼF(Promega、#V4831、LOT# 0000386354)と共に又は伴わずに混合し、製造元の指示に従って処理した。その後に試料を還元して、加熱処理した後に、SDS-PAGEゲルにロードした。タンパク質バンドを、Bio-Safe Coomassie G-250色素(Bio-Rad、#161078)により、製造元の指示に従って染色した。HEK293-6E及びCHO細胞で発現されたグリコシル化IL-2バリアントは、SDS-PAGEにおいておよそ18～20kDaの二重バンドとして移動した。PNGアーゼFによる処理の後に、およそ15～17kDaへの顕著なダウンシフトが観察され、このことはCHO細胞で発現されたIL-2バリアントの効率的なN-グリコシル化を示している。
ペプチドマップ分析
IL-2バリアントの10μgを、Pierce(商標)トリプシン/Lys-Cプロテアーゼ(Thermo Fisher)の1μgと、100mM Hepesバッファー、pH 8.0中で混合した。この反応混合物を37±1℃で18±1時間インキュベートした。未消化の試料対照を、プロテアーゼを入れずに同じバッファー中に調製した。インキュベーション後に、試料/対照を短時間遠心処理し、20μLのUPLC-MS水を添加した。希釈した試料を、QTof質量分析計に接続したAgilent 1290 UHPLCシステムを使用して分析した。分析は、水中の0.075%(V/V)トリフルオロ酢酸(移動相A)、MeCN中の0.06%(V/V)トリフルオロ酢酸(移動相B)を利用して行った。Halo C18、100×2.1、2.7μm、90Åカラムを使用し、以下の表1に示す勾配を流した。
Figure 2023540701000075
［実施例1 HEK293-6Eにおけるグリコシル化IL2の発現］
ベクターの構築
IL-2グリコシル化バリアントは受注作製として外部の供給元から調達し、タンパク質の発現は293-6E細胞から行い、次いで当業者に公知の標準的な精製戦略を行った。以下のタンパク質を調製した:
配列番号7のDNA配列に対応するタンパク質1a(配列番号205)、配列番号8のDNA配列に対応するタンパク質1b(配列番号229)、配列番号202のDNA配列に対応するタンパク質1c(配列番号230)、及び配列番号203のDNA配列に対応するタンパク質1d(配列番号232)。
配列番号205、配列番号229、配列番号230、及び配列番号232をコードするコード性DNA配列を、N末端ヒトκ軽鎖リーダー配列及びC末端ヘキサヒスチジンタグを含め、ヒト発現のためにコドン最適化した上で、pTT5哺乳動物発現ベクターのEcoRI及びBamHI部位に挿入した。構築したプラスミドを大腸菌(E. coli)株(DH5a/TOP10)に形質転換のために導入し、適切な規模でそれぞれ増殖させた。大規模プラスミド生成のためにNucleoBond Xtra Maxi Plus EFキット(MN 740426)を使用した。精製したプラスミドをアガロースゲルによって検査し、シークエンシングによって確かめた。
タンパク質の発現:
哺乳動物細胞での発現のために、各タンパク質用のプラスミドを、CNRC-NRC("Conseil National de Recherches Canada")から入手したHEK293-6E細胞に、PEI(Polyscience、Cat# 23966)を用いてトランスフェクトした。細胞を、インキュベーター振盪機の中で標準的な細胞培養条件で培養した。トランスフェクションの6～7日後に馴化培地を収集した。
タンパク質の精製及び品質管理:
馴化培地(CM)を遠心分離によって回収して細胞残渣を廃棄し、次いで濾過した。清澄化されたCMをNi-excel(GE)カラムにロードして、タンパク質精製を製造元の指示に従って行った。次いで、濃縮した材料を、superdex 75カラム(GE)で更に精製した。
精製されたタンパク質を、SDS-PAGE(PNGアーゼF(NEB)前処理を伴うか又は伴わない)、SEC-HPLC、及びEndosafe-PTSキット(Charles River)によるエンドトキシン測定によって分析した。
結果:
記載した構築物のうち、タンパク質1aは、非N-グリコシル化IL-2対照(タンパク質1d、1.0mg)について認められたのと同程度の収量(0.97mg)で良好に発現された。驚いたことに、タンパク質1aの少なくとも90%は、対照非N-グリコシル化IL-2タンパク質1d(15kDa)と比較して、より高い分子量で移動し(およそ18kDa)、このことは1aにN-グリカンが存在し、それがSDS-PAGEにおける移動度を低下させたことを示唆する。タンパク質1aをプロテインN-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で処理してN-グリカンを除去した場合、処理したタンパク質は、野生型IL-2(タンパク質1d)と同程度におよそ16kDaで均一に移動し、タンパク質1aのほぼ全てがN-グリコシル化されたことを示す。予想された通り、PNGアーゼFで処理したウェルでは、PGNアーゼF自体の分子量に対応する更なる約36kDaバンドも存在した。
［実施例2 切断可能HISタグを有するグリコシル化IL2のCHO細胞における発現］
ベクターの構築:
IL-2グリコシル化バリアントは受注作製として外部の供給元から調達し、タンパク質の発現はCHO細胞から行い、次いで当業者に公知の標準的な精製戦略を行った。以下のタンパク質を調製した:
配列番号233のDNAに対応するタンパク質1e(配列番号231)。
タンパク質1eをその後、EnteroKinaseで処理して、最終産物であるタンパク質1f(配列番号10)を作成した。
配列番号233のコード性DNA配列を、N末端ヒトκ軽鎖リーダー配列、N末端ヘキサヒスチジンタグ、及びHisタグを除去するためのN末端エンテロキナーゼ切断部位を含め、CHO発現のためにコドン最適化した上で、pTT5哺乳動物発現ベクターに挿入した。構築したプラスミドを大腸菌(E. coli)株(DH5a/TOP10)に形質転換のために導入し、適切な規模でそれぞれ増殖させた。大規模プラスミド生成のためにNucleoBond Xtra Maxi Plus EFキット(MN 740426)を使用した。精製されたプラスミドをアガロースゲルによって検査し、シークエンシングによって確かめた。
タンパク質の発現:
各タンパク質用のプラスミドを、Thermo Fisher社から入手したEXPI-CHO細胞に、PEI Max(Polyscience、Cat# 24765)を用いてトランスフェクトした。細胞を、インキュベーター振盪機の中で標準的な細胞培養条件で培養した。トランスフェクションの9日後に馴化培地を収集した。
タンパク質の精製及び品質管理:
馴化培地(CM)を遠心分離によって回収して細胞残渣を廃棄し、次いでSartopore 2フィルター(Sartorius)を使用して濾過した。清澄化されたCMをNi-excel(GE)カラムにロードし、タンパク質精製を製造元の指示に従って行った。溶出したタンパク質を、EKプロテアーゼ(GenScript、Z03004-100)と共にインキュベートして、Hisタグを切断した。材料を、別のニッケルカラム、その後にsuperdex 75カラム(GE)により更に精製した。精製されたタンパク質を、SDS-PAGE、SEC-HPLC、及びEndosafe-PTSキット(Charles River)によるエンドトキシン測定によって分析した。
結果:
293細胞で認められたN-グリコシル化IL2(タンパク質1a)の発現と同様に、CHO細胞で発現されたN-グリコシル化IL2(タンパク質1eに由来するタンパク質1f)の少なくとも90%は、対照IL2(約15kDa)を用いる別の実験と比較して、およそ17KDaという移動度の低下したより高いバンドを均一に示し、このことは驚いたことに、タンパク質1fの効率的なN-グリコシル化を示している。CHO由来のHisタグが除去されたN-グリコシル化IL2(タンパク質1f)の移動パターンは、予想通り、293で発現されたHisタグを含有する構築物(約18kDa、タンパク質1a)よりも幾分小さく(約17kDa)、これは6×HisタグのMWである840Daに一致する。
［実施例3 ヒト初代細胞pSTAT5アッセイにおける293産生グリコシル化IL2の生物活性］
実施例1からの293発現による対照野生型IL2タンパク質1d、並びに糖が操作されたIL2タンパク質1aの生物活性を、外部ベンダーにより、ヒト血液を使用して試験した。近位IL2受容体シグナル伝達バイオマーカーであるSTAT5のリン酸化(pSTAT5)について、タンパク質1d又はタンパク質1aによる試料の処理後に検討した。ヘパリン添加したヒト全血を採取し、室温に平衡化してプレートに分注した上で、37℃に加温し、その後にタンパク質1d又はタンパク質1aを添加した。タンパク質1d又はタンパク質1aの用量漸増物を調製し、37℃に予熱した後に細胞に添加した。タンパク質1d又はタンパク質1aの添加後に、細胞を37℃で30分間インキュベートした。インキュベーション期間の終了時に、赤血球を溶解させて、細胞を固定した。洗浄後に細胞を表面抗原に関して染色し、洗浄して、メタノールにより透過化処理し、その後に洗浄して、pSTAT5及び更なる系列マーカーに対する細胞内染色を行った。以下のマーカーを使用して、目的の細胞集団を定義した:CD8+ T細胞はCD3+ CD4- CD8+と定義し、CD4+ T細胞はCD3+ CD4+ CD8-と定義し、制御性T細胞(Treg)はCD3+ CD4+ CD8- CD25+ FOXP3+と定義し、ナチュラルキラー(NK)細胞はCD3- CD56又はCD16+と定義した。
結果:
CD8+ T細胞、NK細胞及びTregに対する半数有効濃度(EC50)を、野生型IL-2対照(1d)又はN-グリコシル化IL2(1a)のいずれかによる処理後に決定した。重要なこととして、CD8+ T細胞及びNK細胞は、IL-2受容体の高親和性αサブユニット(IL2Rα/CD25)を低い静止レベルで発現し、一方、Tregは高レベルのIL2Rα(CD25)を発現する。この理由から、CD8+ T細胞又はNK細胞とTregとの間でのIL-2バリアントの相対的効力の変化の分析は、IL-2Rβγに対する活性(CD8+及びNK細胞の効力に反映される)と、Treg効力に反映されるIL-2Rαβγに対する活性とを比較する上での良い尺度となる。本発明者らは、pSTAT5の蛍光強度中央値(MFI)並びにpSTAT5陽性細胞の割合の両方を定量することにより、これらの3つの細胞サブセットにわたる効力について検討した。pSTAT5 MFI EC50値の概要を表2に示す:
Figure 2023540701000076
pSTAT5 MFI計量を使用したところ、N-グリコシル化IL-2タンパク質1aは、野生型IL-2対照と比較して、CD8+ T細胞及びNK細胞に対して同程度の効力を示した(野生型IL-2と比較して、効力がそれぞれ1.44分の1及び1.34分の1に低下した、表2)。しかし、N-グリコシル化IL-2タンパク質1aは、野生型IL-2対照と比較して、Tregに対して著しい効力低下を示した(効力が436.56分の1に低下、表2)。
pSTAT5陽性パーセントEC50値の概要を表3に示す:
Figure 2023540701000077
同様に、pSTAT5陽性パーセント計量を使用したところ、N-グリコシル化IL-2タンパク質1aは、野生型IL-2対照と比較して、CD8+ T細胞及びNK細胞に対して同程度の効力を示した(野生型IL-2と比較して、効力がそれぞれ1.58分の1及び2.01分の1に低下)。しかし、N-グリコシル化IL-2タンパク質1aは、野生型IL-2(1d)対照と比較して、Tregに対して著しい効力低下を示した(効力が598.46分の1に低下、表3)。
これらのデータは、N-グリコシル化IL-2バリアントタンパク質1aが、野生型IL-2(1d)と比較して、同程度のIL-2Rβγ活性(CD8+及びNK細胞の効力に反映される)を示すが、IL-2Rαβγ活性(Treg効力に反映される)は低いことを示している。これらのデータは、タンパク質1aの「非IL-2Rα」バイアスを示す。
［実施例4 ヒト初代細胞pSTAT5アッセイにおける(Hisタグ除去)CHO産生グリコシル化IL2の生物活性］
実施例2からのCHO細胞発現による対照野生型IL2タンパク質1d、並びに糖が操作されたIL2タンパク質1fの生物活性を、外部ベンダーにより、ヒト血液を使用して試験した。近位IL2受容体シグナル伝達バイオマーカーであるSTAT5のリン酸化(pSTAT5)について、タンパク質1d又はタンパク質1fによる試料の処理後に検討した。ヘパリン添加ヒト全血を採取し、室温に平衡化してプレートに分注した上で、37℃に加温し、その後にタンパク質1d又はタンパク質1fを添加した。タンパク質1d又はタンパク質1fの用量漸増物を調製し、37℃に予熱した後に細胞に添加した。タンパク質1d又はタンパク質1fの添加後に、細胞を37℃で30分間インキュベートした。インキュベーション期間の終了時に、赤血球を溶解させて、細胞を固定した。洗浄後に細胞を表面抗原に関して染色し、洗浄して、メタノールにより透過化処理し、その後に洗浄して、pSTAT5及び更なる系列マーカーに対する細胞内染色を行った。以下のマーカーを使用して、目的の細胞集団を定義した:CD8+ T細胞はCD3+ CD4- CD8+と定義し、CD4+ T細胞はCD3+ CD4+ CD8-と定義し、制御性T細胞(Treg)はCD3+ CD4+ CD8- CD25+ FOXP3+と定義し、ナチュラルキラー(NK)細胞はCD3- CD56又はCD16+と定義した。
結果:
CD8+ T細胞、NK細胞及びTregに対する半数有効濃度(EC50)を、野生型IL-2対照(1d)又はN-グリコシル化IL2(1f)のいずれかによる処理後に決定した。重要なこととして、CD8+ T細胞及びNK細胞は、IL-2受容体の高親和性αサブユニット(IL2Rα/CD25)を低い静止レベルで発現し、一方、Tregは高レベルのIL2Rα(CD25)を発現する。この理由から、CD8+ T細胞又はNK細胞とTregとの間でのIL-2バリアントの相対的効力の変化の分析は、IL-2Rβγに対する活性(CD8+及びNK細胞の効力に反映される)と、Treg効力に反映されるIL-2Rαβγに対する活性とを比較する上での良い尺度となる。本発明者らは、pSTAT5の蛍光強度中央値(MFI)並びにpSTAT5陽性細胞の割合の両方を定量することにより、これらの3つの細胞サブセットにわたる効力について検討した。pSTAT5 MFI EC50値の概要を表4に示す:
Figure 2023540701000078
pSTAT5 MFI計量を使用したところ、N-グリコシル化IL-2タンパク質1fは、野生型IL-2対照と比較して、CD8+ T細胞及びNK細胞に対して同程度の効力を示した(野生型IL-2と比較して、効力がそれぞれ2.13分の1及び1.22分の1に低下した、表4)。しかし、N-グリコシル化IL-2タンパク質1fは、野生型IL-2対照と比較して、Tregに対して著しい効力低下を示した(効力が371.83分の1に低下、表4)。
これらのデータは、N-グリコシル化IL-2バリアントタンパク質1fが、野生型IL-2(1d)と比較して、同程度のIL-2Rβγ活性(CD8+及びNK細胞の効力に反映される)を示すが、IL-2Rαβγ活性(Treg効力に反映される)は低いことを示している。これらのデータは、CHO細胞で発現されたタンパク質1fの「非IL-2Rα」バイアスを示す。
［実施例5 CHO細胞におけるグリコシル化IL2の発現］
ベクターの構築:
タンパク質2a(配列番号237)及びタンパク質1f(配列番号10)のアミノ酸配列を逆翻訳して、CHO細胞における発現のためにコドン最適化し、それぞれを3つの異なるN末端分泌シグナルペプチド(シグナルペプチド3a(配列番号238)、シグナルペプチド3b(配列番号239)及びシグナルペプチド3c(配列番号240))と組み合わせて、タンパク質2b(配列番号247; シグナルペプチド3a + タンパク質2a)、タンパク質2c(配列番号251; シグナルペプチド3c + タンパク質2a)、タンパク質2d(配列番号249; シグナルペプチド3b + タンパク質2a)、タンパク質2e(配列番号248; シグナルペプチド3a + タンパク質1f)、タンパク質2f(配列番号252; シグナルペプチド3c + タンパク質1f)及びタンパク質2g(配列番号250; シグナルペプチド3b + タンパク質1f)を得た。
その結果得られたタンパク質2b(配列番号241)、タンパク質2c(配列番号243)、タンパク質2d(配列番号242)、タンパク質2e(配列番号244)、タンパク質2f(配列番号246)及びタンパク質2g(配列番号245)をコードするDNA配列を合成し、発現ベクターpPur中にクローニングした。その結果得られたプラスミドを、大腸菌(E.coli)DH5α培養物(Invitrogen)から、PureLink HiPure Plasmid Maxiprep Kit(Invitrogen)を使用してマキシ調製した。
タンパク質の発現:
CHO細胞に上記のプラスミドをトランスフェクトし、安定な細胞プール(プール4a:タンパク質2bを発現する; プール4b:タンパク質2cを発現する; プール4c:タンパク質2dを発現する; プール4d:タンパク質2eを発現する; プール4e:タンパク質2fを発現する;及びプール4f:タンパク質2gを発現する)を開発した。タンパク質発現のために、安定なプールを振盪フラスコ内でフェドバッチ様式で培養した。フェドバッチ培養は第10日に終了したが、ただしプール4fについては、培養を第7日に終了した。細胞の数及び生存率を、Guava(登録商標)Easycyte HT(Merck Millipore)を使用して評価した。安定な細胞プール(プール4a、4b、4c、4d、4e、及び4f)を、Ambr15 Bioreactors(Sartorius)内でも、市販の増殖及び供給培地を使用してフェドバッチ様式で合計14日にわたって培養した。細胞の数及び生存率をBioProfile(登録商標)FLEX2(Nova)によって分析した。
分析方法:
上清中のIL-2タンパク質をELISA(IL-2ヒトキット、Abcam #ab100566、Lot #GR3344842)によって定量し、ウサギ抗ヒトIL-2(Abcam、Cat. Ab9618)を一次抗体として、ロバ抗ウサギIgG-HRP(Jackson Cat. 711-036-152)を二次抗体として使用するウエスタンブロットによって定性的に分析した。ウエスタンブロット検出は、TMB(3,3',5,5'-テトラメチルベンジジン)基質を使用して吸光度によって行った。ウエスタンブロット分析におけるサイズ参照として、分子量ラダー(Novex(登録商標)Sharp Pre-Stained Protein Standard、Invitrogen、Cat no LC5801)及び組換え大腸菌(E.coli)由来hIL-2(Abcam、Cat no ab9619)を使用した。
タンパク質の精製:
工程1: IL-2バリアントを、Superdex 200 16/600サイズ排除クロマトグラフィーカラム(GE Healthcare)への清澄化CMのローディングによって精製した。画分を収集し、SDS-PAGE及びCoomassie Blue染色によって分析した。モノマーIL2に対応するバンドをまとめて、HiScreen Capto Qアニオン交換クロマトグラフィーカラム(GE Healthcare)へのローディングのためにバッファーを交換した。線形NaCl勾配を適用し、続いて第2の線形NaCl勾配を適用することによってタンパク質を溶出させた。画分を収集し、SDS-PAGE及びCoomassie Blue染色によって分析して、モノマーIL-2に対応するバンドを同定した。精製されたIL-2を濃縮して、以後の実験のために貯蔵用及び/又はアッセイ用バッファーにバッファー交換した。
工程2: 4つのカラムステップからなる工程を使用して、IL-2バリアントを別の方法で精製した。ここでは、清澄化CMをpH 6.0にpH調整して、濃縮した。次いで細胞上清をHiScreen Capto MMCカラム(GE Healthcare)にロードした。カラムを洗浄した後に、IL-2タンパク質を溶出させ、その後に線形NaCl勾配を行った。画分を収集し、SDS-PAGE及びCoomassie Blue染色によって分析した。モノマーIL2に対応するバンドをまとめて、HiScreen Capto Blueクロマトグラフィーカラム(GE Healthcare)へのローディングのためにpH 7.4にpHを調整した。段階的NaCl勾配を適用することによってタンパク質を溶出させ、次いで線形NaCl画分を回収し、SDS-PAGE及びCoomassie Blue染色によって分析して、モノマーIL-2を含有する画分を同定した。Capto Blueに通した後にまとめたIL-2画分を、HiScreen Capto Adhereカラム(GE Healthcare)にロードして、フロースルークロマトグラフィーステップで精製した。モノマーIL-2画分をSDS-PAGE及びCoomassie染色によって同定し、バッファーを交換して、濃縮した。このIL-2タンパク質試料を次いでHiScreen Capto MMCカラム(GE Healthcare)にロードし、上記の通りに精製した。精製されたIL-2を約0.5mg/mLに濃縮し、以後の実験のために貯蔵用及び/又はアッセイ用バッファーにバッファー交換した。
結果:
振盪フラスコ内での発現に関して、タンパク質2a(4a、4b及び4c)及びタンパク質1f(4d、4e及び4f)を発現する細胞株における培養上清中の組換えIL-2タンパク質の濃度を、フェドバッチ培養の第8日及び第10日にELISAによって測定した(表5)。第8日及び第10日の両方とも、タンパク質1fの濃度は、タンパク質2aの濃度の数倍の高さであった。シグナルペプチド3aを有する構築物では、タンパク質1fの発現レベルは、第8日にはタンパク質2aの11.0倍の高さであり、第10日には10.0倍の高さであった。シグナルペプチド3cを有する構築物では、変化倍数は第8日には3.7倍、第10日には6.0倍であり、シグナルペプチド3bを有する構築物では、第7日のタンパク質1fの発現レベルは、第8日のタンパク質2a発現レベルの12.9倍の高さであった。
Figure 2023540701000079
第10日のフェドバッチ培養物の4a、4b及び4c培養上清からの非還元試料のウエスタンブロットでは、サイズ14～15kDaに二重バンドが示され、これは非グリコシル化及びO-グリコシル化形態のIL-2がCHO細胞によって産生されるという予想によく対応した。非グリコシル化タンパク質2a産物に対応するより低い産物バンドは、同じゲルにロードした大腸菌(E.coli)由来の非グリコシル化wt hIL-2参照標準と同じサイズであった。対照的に、4d(第10日)、4e(第10日)及び4f(第7日)からの非還元試料のウエスタンブロットでは、4a、4b及び4c試料並びにhIL-2参照標準と比較して産物サイズの明らかな上方シフトが示され、このことはタンパク質1fの効率的なN-グリコシル化を示す。このシフトはほぼ完全であり、非グリコシル化hIL-2に対応するサイズでは、ごく弱い辛うじて見えるバンドが存在するのみであった。4d、4e及び4fの産物バンドは、ウエスタンブロットで二重バンドの形態も有しており、このことはN-グリコシル化産物がO-グリコシル化産物の画分を含有したことを示す。タンパク質2a(4a、4b及び4c)及びタンパク質1f(4d、4e及び4f)の両方の、ウエスタンブロットでは、記載したバンドに加えて主な産物バンドのおよそ2倍のサイズのより弱い産物バンドも検出され、このことは一部のダイマー形成を示す。
Ambr15バイオリアクター内での発現に関して、タンパク質2a(4a、4b及び4c)及びタンパク質1f(4d、4e及び4f)を発現する細胞株の培養上清における組換えIL-2ムテインの濃度を、フェドバッチ培養の第10日及び第14日にELISAによって測定した(表6)。第10日及び第14日の両方とも、タンパク質1fの濃度は、タンパク質2aの濃度の数倍の高さであった。シグナルペプチド3aを有する構築物では、タンパク質1fの発現レベルは、第10日にはタンパク質2aの10.1倍の高さ、第14日には10.9倍の高さであり、シグナルペプチド3cを有する構築物では、倍数変化は第10日には4.5倍、第14日には2.8倍であった。シグナルペプチド3bを有する構築物では、タンパク質2aの力価は第10日には非常に低く(0.03g/L)、第14日には検出不能であったが、タンパク質1fでは第10日及び第14日で相当量であった(それぞれ0.56g/L及び1.1g/L)。
Figure 2023540701000080
［実施例6 CHO細胞で発現されたグリコシル化IL-2の実体分析］
タンパク質1f(配列番号10)の実体を、ペプチドマップを実行して確認した。野生型に存在するO-グリコシル化部位を同定し、異種グリコシル化パターンの特徴付けを行った。導入されたN-グリコシル化部位を同定し、異種グリコシル化パターンの特徴付けを行った。「遊離」LTFGNSTKは検出することができなかった(検出限界内で)。このことは全てのIL-2バリアントが、指定して導入されたN-グリコシル化部位にN-グリコシル化を保有することを示している。
［実施例7 IL-2化合物のSPR分析］
タンパク質5a(配列番号213のIL-2; Peprotech、cat # AF-200-02)及びタンパク質1f(配列番号10)の結合動態を、Biacore機器(T200、GE Healthcare)をIL-2受容体サブユニットの固定化された細胞外ドメインと共に用いる、表面プラズモン共鳴(SPR)分光法を使用して評価した。手短に述べると、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ(CM5、GE Healthcare)を、N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド(EDC)及びN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)により、供給元の指示に従って活性化した。モノクローナルマウス抗ヒトIgG(Fc)抗体の固定化も、供給元の指示(GE Healthcare、注文番号BR-1008-39)に従って行った。
IL-2Rαに対する結合動態の決定のためには、以下のチップ調製物を使用した:ヒトIL-2受容体α、Fc-Tag(Symansis、New Zealand)を、HBS-EPランニングバッファー(GE Healthcare、10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA、0.05%サーファクタントP20、pH 7.4)中に希釈しておよそ0.67μg/mLとし、流速50μL/分で60秒間固定化して、80～100反応単位(RU)を達成した。
IL-2Rβに対する結合動態の決定のためには、以下のチップ調製物を使用した:ヒトIL-2受容体β、Fc-Tag(Symansis、New Zealand)を、HBS-EPランニングバッファー(GE Healthcare、10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA、0.05%サーファクタントP20、pH 7.4)中に希釈して0.80μg/mL前後にし、流速50μL/分で60秒間固定化して、140～180反応単位(RU)を達成した。
両方の受容体サブユニット構成での動態測定については、タンパク質5a又はタンパク質1fを多サイクル動態で分析し、このため、少なくとも5つの異なる濃度で25℃のHBS-EPランニングバッファーに注入した(流速50μL/分、接触時間60秒間、解離時間300秒間)。二重参照データ(参照フローセル及びバッファーのみの試料からの差分データ)を動態適合(1:1結合モデル)を介して分析して、KD、ka、及びkdを決定した。各サイクル後の再生は、3M MgCl2により行った。
得られたデータを表7にまとめる。
Figure 2023540701000081
これらの結果は、タンパク質1fが、タンパク質5aと比較して、IL-2Rαに対して大きく低下した親和性を有し、一方、IL-2Rβへの親和性は同程度の範囲であることを示している。
［実施例8 バイアス比の計算］
タンパク質1fがバイアスIL-2であるか否かを検証するために、以下の要件が満たされるかどうかを計算した。
Figure 2023540701000082
 式中、
Figure 2023540701000083
Figure 2023540701000084
であり、
「IL-2Rαに対するタンパク質1fのKD」は、IL-2Rαに対するタンパク質1fのKDであり、
「IL-2Rβに対するタンパク質1fのKD」は、IL-2Rβに対するタンパク質1fのKDであり、
「IL-2Rαに対するタンパク質5aのKD」は、IL-2Rαに対するタンパク質5aのKDであり、
「IL-2Rβに対するタンパク質5aのKD」は、IL-2Rβに対するタンパク質5aのKDである。
上記の式を使用すると、比タンパク質1fと比タンパク質5aとの算出比が200よりも大きいため、タンパク質1fは明らかにバイアスIL-2である。
［実施例9 安定なクローンCHO細胞株におけるグリコシル化IL-2タンパク質6の発現］
タンパク質6(配列番号10)を発現する安定なクローンCHO細胞株を樹立するために、安定な細胞プール4d(実施例5)からの細胞に、細胞プール4d(配列番号244、実施例5参照)を構築するために使用した発現ベクターと同じIL-2をコードするDNA配列を含有し、ただし異なる選択マーカーを保有する第2の発現ベクターをスーパートランスフェクトした。スーパートランスフェクションの後に、ClonePix-2機器(Molecular Devices)を使用して個々のクローン候補を単離し、個々のクローンを、増殖(Celigo S、Nexcelom)及び上清中のタンパク質6の力価(実施例5に記載したELISA)に関してスクリーニングした。選択した個々のクローンを、市販の増殖及び供給培地を使用してAmbr15バイオリアクター(Sartorius)内でのフェドバッチ培養によって合計14日にわたって評価した。細胞の数、生存率、及びタンパク質6の力価を、実施例5に記載した通りにフェドバッチ培養の時間経過にわたり測定した。細胞培養成績及びタンパク質6の力価に基づいて、安定なクローン細胞株9を、更なる材料作成に使用するための最上位クローンとして選択した。クローン細胞株9の安定性を検証するために、細胞を5mLスピンチューブで合計60世代にわたって継代させ、試験の最初、中間及び最後に得られた（banked）細胞の成績を、フェドバッチ培養において比較した。その結果、この細胞株は安定であり、60世代にわたって最終的なタンパク質6力価が低下しないことが示された。
タンパク質6を発現する安定なクローン細胞株9を、市販の増殖用及び供給用培地を使用して振盪フラスコ内でフェドバッチ様式で培養し、第10日に収集した。細胞の数及び生存率を、ViCell BLU細胞計数器(Beckman Coulter)によって分析した。
［実施例10 安定なクローンCHO細胞株からのタンパク質6の精製］
実施例5の工程2に記載した通りにタンパク質6を精製した。以後の実験のために、精製したタンパク質のバッファーを貯蔵用及び/又はアッセイ用バッファーに交換し、1mg/mLに濃縮した。
［実施例11 コンジュゲート7の調製］
Figure 2023540701000085
破線はタンパク質6のN末端又はリジン側鎖の一級アミンの窒素に対する結合を示し、各nは200から250までの整数である。
20mMリン酸ナトリウム、140mM NaCl、pH 7.4中に3.47mg/mLで用意された2.5mLのタンパク質6のバッファーを、AKTAシステムに接続したHiPrep 26/10脱塩カラムを使用して、100mMホウ酸、pH 9.0に交換した。収集したタンパク質溶液を、遠心フィルター(MWCO 3kDa)を使用して濃縮して、最終容量1.55mLの溶液を得、濃度は消衰係数0.662mL・mg-1・cm-1を使用した280nmでの測光濃度決定を介して4.80mg/mLと決定された。40kDa mPEGリンカー試薬の0.0932g(合成は、国際公開第2009/133137号特許の実施例7に化合物17caに関して記載された通りに、同特許の化合物16c及び1Aを使用して行うことができる)を1.07mLの冷水に溶解して、2.1*10-3mol/Lの原液を得た。この溶液を氷上で保存した。このタンパク質溶液1.55mLを100mMホウ酸、pH 9.0の添加によって4mg/mLに希釈した。次いで、冷却した40kDa mPEGリンカー試薬原液933μLを添加した(タンパク質について4mol当量に相当)。コンジュゲーション混合物を14℃の水浴中に2時間置いた。933μLの水及び3.732mLの200mM酢酸ナトリウム、pH 3.6の添加によってpHをpH 4に移行させた。25℃での一晩インキュベーションの後に、AKTAシステムに接続したHiScreen Capto MMC ImpResカラムを使用して、反応混合物から単一の40kDa mPEGリンカーが結合したコンジュゲート(モノコンジュゲート)を単離した。10mMコハク酸、pH 5.0から10mMコハク酸、800mM NaCl、pH 5.0までの、12カラム容量の線形塩勾配を、1.2mL/分で適用した。勾配の間に溶出した主にモノコンジュゲートを含有するピークを収集した。この画分のNaCl含有量を、10mMコハク酸、pH 5.0の添加によって150mMに調整した。遠心フィルター(MWCO 10kDa)を使用して2.18mLで1.49mg/mLの濃度として、試料を115μLの10mMコハク酸、150mM NaCl、1% Tween20、pH 5.0及び963μLの10mMコハク酸、150mM NaCl、0.05% Tween20、pH 5.0で希釈して、最終濃度1mg/mLのタンパク質6等価物(グリコシル化を考慮せず、タンパク質の分子量に基づく)として、コンジュゲート7を作成した。
［実施例12 コンジュゲート放出混合物8の調製物］
150μLのコンジュゲート7のpHを、62μLの50mMホウ酸pH 10.0による希釈によってpH 9.0に移行させた。試料をインキュベーター内で37℃で24時間インキュベートし、その結果、コンジュゲート放出混合物8を得た。インキュベーション後に、放出されたタンパク質6の割合を、HPLCシステム上でAcquity UPLCペプチドBEH C18カラム(Waters、300Å、2.1×50mm、1.7μm)を使用するRP-HPLCによって測定した。カラム温度は30℃に維持し、流量は0.25mL/分に設定した。UV検出は215nm及び280nmで行った。分析は、水中の0.05%(V/V)トリフルオロ酢酸(溶離液A)及びアセトニトリル中の0.04%(V/V)トリフルオロ酢酸(溶離液B)を利用して行った。HPLC勾配は表8に記載されている。
Figure 2023540701000086
放出されたタンパク質6の含有量を、同じRP-HPLC条件を適用した、6つの異なる濃度の精製された参照材料の較正曲線を使用して決定した。UV検出は280nmで行った。コンジュゲート放出混合物8は精製せず使用したため、主としてタンパク質6を含有する他、切断された40kDa mPEGリンカー、並びに10%超の残存コンジュゲート7も含有する。
［実施例13 コンジュゲート7からのタンパク質6のin vitro放出動態］
コンジュゲート7からのタンパク質6のin vitro放出動態を、生理的pH及び温度条件を模したpH 7.4及び37℃で測定した。この目的のために、コンジュゲート7のバッファーを、Aktaシステム及び2つの連結されたHiTrap脱塩カラム(Cytiva)を2mL/分の流速並びに215nm及び280nmでのUV検出で使用して、25mM HEPES、135mM NaCl、1mM EDTA、10mM L-メチオニン、2mg/mL Pluronic F-68、pH 7.4に交換した。バッファー交換した試料を水浴中で、温度制御条件下で37℃で最大1週間(168h)インキュベートした。リンカー切断及びタンパク質6の放出の測定を、試料の酸性化の後、Acquity UPLCペプチドBEH C18カラム(300Å、1.7μm、2.1mM×50mm)を備えた1260 Infinity IIシステム(Agilent Technologies)による逆相高圧液体クロマトグラフィーにより行った。分析は、水中の0.05%(V/V)トリフルオロ酢酸(溶離液A)及びMeCN中の0.04%(V/V)トリフルオロ酢酸(溶離液B)を利用して行った。HPLC勾配は実施例12の表8に記載されている。
コンジュゲート7及び放出関連種(タンパク質6及び切断された40kDa mPEGリンカー種)のピークを215nmでの各々のRP-HPLCクロマトグラムに統合することによって、放出を5つの異なる時点で定量した。遊離した種の割合をインキュベーション時間に対してプロットし、曲線適合ソフトウェアを使用して非線形一相関連適合(プラトーを95%に設定)を適用して、リンカー切断動態の半減期を決定した。in vitroでのリンカー半減期は、pH 7.4及び37℃で65時間と決定された(95%信頼区間=52～83時間)。
［実施例14 ヒト末梢血単核細胞リンパ球サブセットにおける、対照IL-2、又は安定なクローンCHOで産生されたタンパク質6の生物活性］
初代ヒト細胞における対照IL-2(1d)、又は安定なクローンCHOで産生されたタンパク質6の細胞型特異的免疫刺激作用を評価するために、2人のドナー由来のヒト末梢血単核細胞(PBMC)を様々な濃度の1d又は6と共に30分間インキュベートして、固有の細胞サブセット、例えば、IL-2Rα/β/γを主に発現するTregの他、IL-2Rβ/γを主に発現するCD8+ T細胞(CD8)及びNK細胞におけるリン酸化STAT5(pSTAT5)の細胞内レベルをフローサイトメトリーによって分析した。全てのサブセットでpSTAT5の蛍光強度中央値を分析し、全ての細胞型にわたって各化合物のEC50値を算出した。
1dと比較して、6はTregにおいて大幅に低下した効力を示し、一方、CD8+ T細胞及びNK細胞に対してはほぼ同一の効力を維持した。例えば、ヒト血液中では、1dはTregにおいてpSTAT5のEC50値として0.02ng/mlを示したが、6は38.01ng/mlとかなり高いEC50値を示した。対照的に、1dはヒトNK細胞においてpSTAT5のEC50値として15.91ng/mlを示したが、6は11.66ng/mlとほぼ同一なEC50値を示した。NK細胞に関して認められた結果と同様に、1dはヒトCD8+ T細胞においてpSTAT5のEC50値として82.98ng/mlを示したが、6は78.82ng/mlとほぼ同一なEC50値を示した(表9)。これらの結果は、6がIL-2Rα/β/γ+細胞、例えば、Tregに対しては大幅に低下した(約1900分の1の低さの)効力を示すが、IL-2Rβ/γ+細胞、例えば、NK細胞及びCD8+ T細胞に対しては効力を維持することを示唆する。
Figure 2023540701000087
［実施例15 IL-2Rα及びIL2-Rβ結合実験におけるタンパク質6の受容体結合、並びにバイアスの計算］
タンパク質5a(配列番号213のIL-2; Peprotech、cat # AF-200-02)及びタンパク質6(配列番号10)の結合動態を、Biacore機器(T200、GE Healthcare)をIL-2受容体サブユニットの固定化された細胞外ドメインと共に用いる、表面プラズモン共鳴(SPR)分光法を使用して評価した。手短に述べると、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ(CM5、GE Healthcare)を、N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド(EDC)及びN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)により、供給元の指示に従って活性化した。モノクローナルマウス抗ヒトIgG(Fc)抗体の固定化も、供給元の指示(GE Healthcare、注文番号BR-1008-39)に従って行った。
IL-2Rαに対する結合動態の決定のためには、以下のチップ調製物を使用した:ヒトIL-2受容体α、Fc-Tag(Symansis、New Zealand)を、HBS-EPランニングバッファー(GE Healthcare、10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA、0.05%サーファクタントP20、pH 7.4)中に希釈しておよそ0.25μg/mLにし、流速50μL/分で60秒間固定化して、90～110反応単位(RU)を達成した。
IL-2Rβに対する結合動態の決定のためには、以下のチップ調製物を使用した:ヒトIL-2受容体β、Fc-Tag(Symansis、New Zealand)を、HBS-EPランニングバッファー(GE Healthcare、10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA、0.05%サーファクタントP20、pH 7.4)中に希釈して0.25μg/mL前後にし、流速50μL/分で60秒間固定化して、300～330反応単位(RU)を達成した。
両方の受容体サブユニット構成での動態測定については、タンパク質5a又はタンパク質1fを多サイクル動態で分析し、このため、少なくとも5つの異なる濃度で25℃のHBS-EPランニング緩衝液に注入した(流速50μL/分、接触時間60秒間、解離時間300秒間)。二重参照データ(参照フローセル及び緩衝液のみの試料からの差分データ)を動態適合(1:1結合モデル)を介して分析して、KD、ka、及びkdを決定した。各サイクル後の再生は、3M MgCl2により行った。
Figure 2023540701000088
これらの結果は、タンパク質6が、タンパク質5aと比較して、IL-2Rαに対して大きく低下した親和性を有し、一方、IL-2Rβへの親和性は同程度の範囲であることを示している。(表10)。
タンパク質6がバイアスIL-2であるか否かを検証するために、以下の要件が満たされるかどうかを計算した。
Figure 2023540701000089
 式中、
Figure 2023540701000090
 であり、
「IL-2Rαに対するタンパク質6のKD」は、IL-2Rαに対するタンパク質6のKDであり、
「IL-2Rβに対するタンパク質6のKD」は、IL-2Rβに対するタンパク質6のKDであり、
「IL-2Rαに対するタンパク質5aのKD」は、IL-2Rαに対するタンパク質5aのKDであり、
「IL-2Rβに対するタンパク質5aのKD」は、IL-2Rβに対するタンパク質5aのKDである。
上記の式を使用すると、比タンパク質6と比タンパク質5aとの算出比が100よりも大きいため、タンパク質6は明らかにバイアスIL-2である。
［実施例16 HH pSTAT5及びCTLL-2 pSTAT5アッセイにおける、安定なクローンCHOで産生されたタンパク質6の生物活性］
対照野生型IL2タンパク質5a、並びに糖が操作されたIL2タンパク質6の生物活性を、外部ベンダーにより、HH及びCTLL-2細胞株を用いるSTAT5リン酸化アッセイ(pSTAT5)を使用して試験した。HH細胞株は、皮膚T細胞リンパ腫の患者の血液に由来する、IL-2-Rβ/γを発現するヒトTリンパ芽球細胞株である。CTLL-2細胞株は、IL-2-Rα/β/γを発現するマウスTリンパ球細胞株である。HH及びCTLL-2細胞についてSTAT5リン酸化の半数有効濃度(EC50)を二重反復試験で測定して、4パラメーターロジスティック適合によって分析した。
Figure 2023540701000091
これらの結果は、タンパク質6が、タンパク質5aと比較して、IL-2Rα/β/γ+(CTLL-2細胞)に対して大きく低下した効力を有し、一方、IL-2Rβ/γ+(HH細胞)に対する効力は同程度の範囲であることを示している(表11)。コンジュゲート放出混合物8についても同様の結果が得られており、これもタンパク質5aと比較して、IL-2Rα/β/γ+(CTLL-2細胞)に対して大きく低下した効力を示し、一方、IL-2Rβ/γ+(HH細胞)に対する効力は同程度の範囲であることを示している(表11)。したがって、コンジュゲート放出混合物8は、タンパク質6と比較して、効力及びIL-2R優先性の有意な低下を全く示さない。
タンパク質6がバイアスIL-2であるか否かを検証するために、以下の要件が満たされるかどうかを計算した。
Figure 2023540701000092
 式中、
Figure 2023540701000093
 であり、
「CTLL-2細胞に対するタンパク質6のEC50」は、CTLL-2細胞に対するタンパク質6のEC50であり、
「HH細胞に対するタンパク質6のEC50」は、HH細胞に対するタンパク質6のEC50であり、
「CTLL-2細胞に対するタンパク質5aのEC50」は、CTLL-2細胞に対するタンパク質5aのEC50であり、
「HH細胞に対するタンパク質5aのEC50」は、HH細胞に対するタンパク質5aのEC50である。
上記の式を使用すると、比タンパク質6と比タンパク質5aとの算出比が250よりも大きいため、タンパク質6は明らかにバイアスIL-2である。また、コンジュゲート放出混合物8もIL-2Rβ/γへのバイアスを示す。
Figure 2023540701000094
上記の式を使用すると、比タンパク質6と比タンパク質5aとの算出比が250よりも大きいため、タンパク質6は明らかにバイアスIL-2である。また、コンジュゲート放出混合物8もIL-2Rβ/γへのバイアスを示す。

本出願は、以下を提供する。
１． 式(I)
(Tag1)y-(Ala)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z (I)
［式中、
配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、
配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、少なくとも1つのグリコシル化モチーフを含み、
配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、
Tag1及びTag2は、独立して、タグ部分であり、
Alaは、アラニン残基であり、
xは、0又は1であり、
yは、0又は1であり、
zは、0又は1である］
のIL-2タンパク質配列。
２． 配列Aが、配列番号1及び配列番号36からなる群から選択される、上記1に記載のIL-2タンパク質。
３． 配列Bにおける少なくとも1つのグリコシル化モチーフが、N-グリコシル化モチーフ又はO-グリコシル化モチーフである、上記1又は2に記載のIL-2タンパク質。
４． 配列Bにおける少なくとも1つのN-グリコシル化モチーフが、アミノ酸配列X1X2NX3X4(配列番号254)
［式中、
X1は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
X2は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
Nは、アスパラギンであり、
X3は、プロリン以外の任意のタンパク質原性又は非タンパク質原性アミノ酸であり、
X4は、トレオニン、セリン及びシステインからなる群から選択される］
を有する、上記1～3のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
５． 配列Bにおける少なくとも1つのN-グリコシル化モチーフが、FGNST(配列番号307)又はFANST(配列番号331)である、上記1～4のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
６． 配列Bが、配列番号11、配列番号14、配列番号17、配列番号20、配列番号23、配列番号26、配列番号32、配列番号35、配列番号214及び配列番号215からなる群から選択される、上記1～5のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
７． 配列Bが、配列番号11の配列を有する、上記1～6のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
８． 配列Cが、配列番号3、配列番号4、及び配列番号212からなる群から選択される、上記1～7のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
９． 式(I)のxが1である、上記1～8のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
１０． 式(I)のy及びzが、0である、上記1～9のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
１１． 配列番号10、配列番号13、配列番号16、配列番号19、配列番号22、配列番号25、配列番号31、配列番号34、配列番号217、及び配列番号225からなる群から選択される配列を有する、上記1～10のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
１２． 配列番号10の配列を有する、上記1～11のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
１３． バイアスIL-2である、上記1～12のいずれかに記載のIL-2タンパク質。
１４． 上記1～13のいずれかに記載のIL-2タンパク質のうちの1つ又は複数を含むコンジュゲート。
１５． コンジュゲートが、
式(Ia)又は(Ib)
Figure 2023540701000115
 ［式中、
-Dは、式(I)のIL-2タンパク質を含み、
-L1-は、-Dに共有結合で且つ可逆的に結合したリンカー部分であり、
-L2-は、化学結合、又はスペーサー部分であり、
-Zは、ポリマー部分、又は置換脂肪酸部分であり、
xは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、及び16からなる群から選択される整数であり、
yは、2、3、4、及び5からなる群から選択される整数である］
のIL-2コンジュゲート又はその薬学的に許容される塩である、上記14に記載のコンジュゲート。
１６． -Zが、ポリマー部分である、上記14又は15に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
１７． -Zが、1kDa～1000kDaの範囲の分子量を有するポリマー部分である、上記14から16のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
１８． -Zが、PEG系のポリマー部分である、上記14から17のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
１９． -Zが、式(A)
Figure 2023540701000116
 ［式中、
-BP1<、-BP2<、-BP3<が、-N<及び-C(R8)<からなる群から互いに独立して選択され、
R8が、H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から選択され、
-P1、-P2、-P3、-P4が、互いに独立して、少なくとも40%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖であり、
-C1-、-C2-が、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R10)-、-S(O)2N(R10)-、-S(O)N(R10)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R10)S(O)2N(R10a)-、-S-、-N(R10)-、-OC(OR10)(R10a)-、-N(R10)C(O)N(R10a)-、及び-OC(O)N(R10)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各々のTが、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって独立して任意選択で置換され、
各々のR9が、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COOR11、-OR11、-C(O)R11、-C(O)N(R11R11a)、-S(O)2N(R11R11a)、-S(O)N(R11R11a)、-S(O)2R11、-S(O)R11、-N(R11)S(O)2N(R11aR11b)、-SR11、-N(R11R11a)、-NO2、-OC(O)R11、-N(R11)C(O)R11a、-N(R11)S(O)2R11a、-N(R11)S(O)R11a、-N(R11)C(O)OR11a、-N(R11)C(O)N(R11aR11b)、-OC(O)N(R11R11a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々のR10、R10a、R11、R11a、及びR11bが、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される］
の部分を含む、上記14から18のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２０． C1及びC2が、式(A-a)
Figure 2023540701000117
 ［式中、
星印を付けた破線が、BP1に対する結合を示し、
印を付けていない破線がそれぞれ、BP2又はBP3に対する結合を示し、
q1が、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
q2が、1、2、3、4、及び5からなる群から選択され、
q3が、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
q4が、1、2、及び3からなる群から選択される］
のものである、
上記19に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２１． P1、P2、P3、及びP4が、互いに独立して式(A-b)
Figure 2023540701000118
 ［式中、
破線が、-Zの残部に対する結合を示し、
mが、0又は1であり、
pが、70～900の範囲の整数であり、
qが、1、2、3、4、5、及び6からなる群から選択される］、
のものである、上記19又は20に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２２． BP1が-N<である、上記19から21のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２３． BP2及びBP2が、いずれも-CH<である、上記19から22のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２４． -Zが、式(A-c):
Figure 2023540701000119
 ［式中、
p1、p2、p3、p4は、互いに独立して70～900の範囲の整数である］
の部分を含む、上記14から23のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２５． -L1-が、式(IX-a)
Figure 2023540701000120
 ［式中、
星印を付けた破線が、-Dの窒素に対する結合を示し、印を付けていない破線が、-L2-Zに対する結合を示し、
nが、0、1、2、3、又は4であり、
=Y1が、=O及び=Sからなる群から選択され、
-Y2-が、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y3-が、-O-及び-S-からなる群から選択され、
-Y4-が、-O-、-NR5-、及び-C(R6R6a)-からなる群から選択され、
=Y5が、=O及び=Sからなる群から選択され、
-R3、-R5、-R6、-R6aが、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択され、
-R4が、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から選択され、
-W-が、C3-10シクロアルキル、8～30員カルボポリシクリル、3～10員ヘテロシクリル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキルからなる群から選択され、
-Nuが、-N(R7R7a)、-N(R7OH)、-N(R7)-N(R7aR7b)、-S(R7)、-COOH、
Figure 2023540701000121
 からなる群から選択される求核剤であり、
-Ar-が、
Figure 2023540701000122
 （式中、
破線が、-L1-の残部に対する結合を示し、
-Z1-が、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択され、
-Z2-が、-N(R7)-であり、
-R7、-R7a、-R7bが、-H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から互いに独立して選択される）
からなる群から選択される］
のものであり、
-L1-が、任意選択で更に置換される、
上記14から24のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２６． -L1-が、式(IX-c)
Figure 2023540701000123
 ［式中、
星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
印の付いていない破線は、-L2-Zに対する結合を示し、
s1は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、及び10からなる群から選択される整数である］
のものである、上記14から25のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２７． s1が、3である、上記26に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２８． -L2-が、スペーサーである、上記14から27のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
２９． -L2-が、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択され、ここで、-T-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-、及び-OC(O)N(Ry3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
-Ry1及び-Ry1aが、-H、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-、及び-OC(O)N(Ry4)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
各々のTが、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって独立して任意選択で置換され、
各々の-Ry2が、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2N(Ry5Ry5a)、-S(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5aRy5b)、-SRy5、-N(Ry5Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5aRy5b)、-OC(O)N(Ry5Ry5a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
各々の-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a、及び-Ry5bが、-H、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される、
上記14から28のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
３０． -L2-が、-O-、-T-、及び-C(O)N(Ry1)-から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキル鎖であり、C1-20アルキル鎖が、-OH、-T、及び-C(O)N(Ry6Ry6a)から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で置換され、-Ry1、-Ry6、-Ry6aが、H及びC1-4アルキルからなる群から独立して選択され、Tがフェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から選択される、上記14から29のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
３１． -L2-が、式(IX-e)
Figure 2023540701000124
 ［式中、
星印を付けた破線が、-L1-に対する結合を示し、
印を付けていない破線が、-Zに対する結合を示し、
s2が、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、及び20からなる群から選択される整数である］
のものである、上記14から30のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
３２． s2が、3である、上記31に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
３３． 少なくとも1つの上記1から13のいずれかに記載のIL-2タンパク質又は少なくとも1つの上記14から32のいずれかに記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩、及び少なくとも1つの賦形剤を含む、医薬組成物。
３４． 医薬として使用するための、上記1から13のいずれかに記載のIL-2タンパク質、上記14から32のいずれかに記載のコンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は上記33に記載の医薬組成物。
３５． がんを治療する方法に使用するための、上記1から13のいずれかに記載のIL-2タンパク質、上記14から32のいずれかに記載のコンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は上記33に記載の医薬組成物。
３６． がんが、肉腫、脊索腫、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮細胞がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺がん、髄様がん、気管支原性がん、腎細胞がん、肝がん、胆管がん、絨毛がん、精上皮腫、胎児性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣がん、胃がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、上皮がん、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、網膜芽腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、及び白血病からなる群から選択される、上記35に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
３７． IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物が、1つ以上の更なる薬物の投与前、投与と同時、又は投与後に患者に投与される、上記34又は35に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
３８． 1つ以上の更なる薬物が、パターン認識受容体アゴニスト(PRRA)、細胞毒性/化学療法剤、免疫チェックポイント阻害剤若しくはアンタゴニスト、免疫チェックポイントアゴニスト、免疫活性化受容体アゴニスト、多重特異性薬剤、抗体薬物コンジュゲート(ADC)、抗体-アジュバントコンジュゲート(AAC)、放射性核種若しくは標的放射性核種治療薬、DNA損傷修復阻害剤、腫瘍代謝阻害剤、パターン認識受容体アゴニスト、プロテインキナーゼ阻害剤、ケモカイン及び化学誘引物質受容体アゴニスト、ケモカイン若しくはケモカイン受容体アンタゴニスト、サイトカイン受容体アゴニスト、細胞死受容体アゴニスト、CD47若しくはSIRPαアンタゴニスト、腫瘍溶解薬、シグナル変換タンパク質、エピジェネティック修飾剤、腫瘍ペプチド若しくは腫瘍ワクチン、熱ショックタンパク質(HSP)阻害剤、タンパク質分解酵素、ユビキチン及びプロテアソーム阻害剤、接着分子アンタゴニスト、ホルモンペプチド及び合成ホルモンを含むホルモン、並びに養子細胞療法、例えば、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)療法、キメラ抗原受容体(CAR)療法、T細胞療法、ナチュラルキラー(NK)細胞療法、CAR-T療法、CAR-NK療法、CAR-γδ療法、CAR-マクロファージ療法、又は遺伝子改変若しくは遺伝子未改変免疫細胞型による他の細胞療法からなる群から選択される、上記37に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
３９． 上記1に記載のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド。
４０． DNA、RNA及びcDNAからなる群から選択される、上記39に記載のオリゴヌクレオチド。
４１． IL-2、特にバイアスIL-2で治療することができる疾患の治療における使用のための、上記39又は40に記載のオリゴヌクレオチド。
４２． in vivo又はex vivoで宿主細胞中に送達される、上記41に記載の使用のための、上記39又は40に記載のオリゴヌクレオチド。
４３． 宿主細胞が免疫細胞である、上記42に記載のオリゴヌクレオチド。

Claims (43)

  1. 式(I)
    (Tag1)y-(Ala)x-配列A-配列B-配列C-(Tag2)z (I)
    ［式中、
    配列Aは、配列番号1に対して少なくとも89%の配列同一性を有し、
    配列Bは、配列番号2に対して少なくとも76%の配列同一性を有し、少なくとも1つのグリコシル化モチーフを含み、
    配列Cは、配列番号4に対して少なくとも91%の配列同一性を有し、
    Tag1及びTag2は、独立して、タグ部分であり、
    Alaは、アラニン残基であり、
    xは、0又は1であり、
    yは、0又は1であり、
    zは、0又は1である］
    のIL-2タンパク質配列。
  2. 配列Aが、配列番号1及び配列番号36からなる群から選択される、請求項1に記載のIL-2タンパク質。
  3. 配列Bにおける少なくとも1つのグリコシル化モチーフが、N-グリコシル化モチーフ又はO-グリコシル化モチーフである、請求項1又は2に記載のIL-2タンパク質。
  4. 配列Bにおける少なくとも1つのN-グリコシル化モチーフが、アミノ酸配列X1X2NX3X4(配列番号254)
    ［式中、
    X1は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
    X2は、任意のタンパク質原性若しくは非タンパク質原性アミノ酸であるか、又は存在せず、
    Nは、アスパラギンであり、
    X3は、プロリン以外の任意のタンパク質原性又は非タンパク質原性アミノ酸であり、
    X4は、トレオニン、セリン及びシステインからなる群から選択される］
    を有する、請求項1～3のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  5. 配列Bにおける少なくとも1つのN-グリコシル化モチーフが、FGNST(配列番号307)又はFANST(配列番号331)である、請求項1～4のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  6. 配列Bが、配列番号11、配列番号14、配列番号17、配列番号20、配列番号23、配列番号26、配列番号32、配列番号35、配列番号214及び配列番号215からなる群から選択される、請求項1～5のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  7. 配列Bが、配列番号11の配列を有する、請求項1～6のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  8. 配列Cが、配列番号3、配列番号4、及び配列番号212からなる群から選択される、請求項1～7のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  9. 式(I)のxが1である、請求項1～8のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  10. 式(I)のy及びzが、0である、請求項1～9のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  11. 配列番号10、配列番号13、配列番号16、配列番号19、配列番号22、配列番号25、配列番号31、配列番号34、配列番号217、及び配列番号225からなる群から選択される配列を有する、請求項1～10のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  12. 配列番号10の配列を有する、請求項1～11のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  13. バイアスIL-2である、請求項1～12のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質。
  14. 請求項1～13のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質のうちの1つ又は複数を含むコンジュゲート。
  15. コンジュゲートが、
    式(Ia)又は(Ib)
    Figure 2023540701000095
     ［式中、
    -Dは、式(I)のIL-2タンパク質を含み、
    -L1-は、-Dに共有結合で且つ可逆的に結合したリンカー部分であり、
    -L2-は、化学結合、又はスペーサー部分であり、
    -Zは、ポリマー部分、又は置換脂肪酸部分であり、
    xは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、及び16からなる群から選択される整数であり、
    yは、2、3、4、及び5からなる群から選択される整数である］
    のIL-2コンジュゲート又はその薬学的に許容される塩である、請求項14に記載のコンジュゲート。
  16. -Zが、ポリマー部分である、請求項14又は15に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  17. -Zが、1kDa～1000kDaの範囲の分子量を有するポリマー部分である、請求項14から16のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  18. -Zが、PEG系のポリマー部分である、請求項14から17のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  19. -Zが、式(A)
    Figure 2023540701000096
     ［式中、
    -BP1<、-BP2<、-BP3<が、-N<及び-C(R8)<からなる群から互いに独立して選択され、
    R8が、H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から選択され、
    -P1、-P2、-P3、-P4が、互いに独立して、少なくとも40%PEGを含み、3～40kDaの範囲の分子量を有するPEG系の鎖であり、
    -C1-、-C2-が、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R10)-、-S(O)2N(R10)-、-S(O)N(R10)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R10)S(O)2N(R10a)-、-S-、-N(R10)-、-OC(OR10)(R10a)-、-N(R10)C(O)N(R10a)-、及び-OC(O)N(R10)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
    各々のTが、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTが、同じ又は異なる1つ以上のR9によって独立して任意選択で置換され、
    各々のR9が、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COOR11、-OR11、-C(O)R11、-C(O)N(R11R11a)、-S(O)2N(R11R11a)、-S(O)N(R11R11a)、-S(O)2R11、-S(O)R11、-N(R11)S(O)2N(R11aR11b)、-SR11、-N(R11R11a)、-NO2、-OC(O)R11、-N(R11)C(O)R11a、-N(R11)S(O)2R11a、-N(R11)S(O)R11a、-N(R11)C(O)OR11a、-N(R11)C(O)N(R11aR11b)、-OC(O)N(R11R11a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
    各々のR10、R10a、R11、R11a、及びR11bが、-H及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される］
    の部分を含む、請求項14から18のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  20. C1及びC2が、式(A-a)
    Figure 2023540701000097
     ［式中、
    星印を付けた破線が、BP1に対する結合を示し、
    印を付けていない破線がそれぞれ、BP2又はBP3に対する結合を示し、
    q1が、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
    q2が、1、2、3、4、及び5からなる群から選択され、
    q3が、1、2、3、4、5、6、7、及び8からなる群から選択され、
    q4が、1、2、及び3からなる群から選択される］
    のものである、
    請求項19に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  21. P1、P2、P3、及びP4が、互いに独立して式(A-b)
    Figure 2023540701000098
     ［式中、
    破線が、-Zの残部に対する結合を示し、
    mが、0又は1であり、
    pが、70～900の範囲の整数であり、
    qが、1、2、3、4、5、及び6からなる群から選択される］、
    のものである、請求項19又は20に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  22. BP1が-N<である、請求項19から21のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  23. BP2及びBP2が、いずれも-CH<である、請求項19から22のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  24. -Zが、式(A-c):
    Figure 2023540701000099
     ［式中、
    p1、p2、p3、p4は、互いに独立して70～900の範囲の整数である］
    の部分を含む、請求項14から23のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  25. -L1-が、式(IX-a)
    Figure 2023540701000100
     ［式中、
    星印を付けた破線が、-Dの窒素に対する結合を示し、印を付けていない破線が、-L2-Zに対する結合を示し、
    nが、0、1、2、3、又は4であり、
    =Y1が、=O及び=Sからなる群から選択され、
    -Y2-が、-O-及び-S-からなる群から選択され、
    -Y3-が、-O-及び-S-からなる群から選択され、
    -Y4-が、-O-、-NR5-、及び-C(R6R6a)-からなる群から選択され、
    =Y5が、=O及び=Sからなる群から選択され、
    -R3、-R5、-R6、-R6aが、-H、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から互いに独立して選択され、
    -R4が、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプロピル、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチル、2,3-ジメチルブチル、及び3,3-ジメチルプロピルからなる群から選択され、
    -W-が、C3-10シクロアルキル、8～30員カルボポリシクリル、3～10員ヘテロシクリル、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキルからなる群から選択され、
    -Nuが、-N(R7R7a)、-N(R7OH)、-N(R7)-N(R7aR7b)、-S(R7)、-COOH、
    Figure 2023540701000101
     からなる群から選択される求核剤であり、
    -Ar-が、
    Figure 2023540701000102
     （式中、
    破線が、-L1-の残部に対する結合を示し、
    -Z1-が、-O-、-S-、及び-N(R7)-からなる群から選択され、
    -Z2-が、-N(R7)-であり、
    -R7、-R7a、-R7bが、-H、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、及びC2-6アルキニルからなる群から互いに独立して選択される）
    からなる群から選択される］
    のものであり、
    -L1-が、任意選択で更に置換される、
    請求項14から24のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  26. -L1-が、式(IX-c)
    Figure 2023540701000103
     ［式中、
    星印を付けた破線は、-Dの窒素に対する結合を示し、
    印の付いていない破線は、-L2-Zに対する結合を示し、
    s1は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、及び10からなる群から選択される整数である］
    のものである、請求項14から25のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  27. s1が、3である、請求項26に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  28. -L2-が、スペーサーである、請求項14から27のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  29. -L2-が、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から選択され、ここで、-T-、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-、及び-OC(O)N(Ry3)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
    -Ry1及び-Ry1aが、-H、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルからなる群から互いに独立して選択され、ここで、-T、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって任意選択で置換され、C1-50アルキル、C2-50アルケニル、及びC2-50アルキニルが、-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-、及び-OC(O)N(Ry4)-からなる群から選択される1つ以上の基によって任意選択で中断され、
    各々のTが、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から独立して選択され、各々のTは、同じ又は異なる1つ以上の-Ry2によって独立して任意選択で置換され、
    各々の-Ry2が、ハロゲン、-CN、オキソ(=O)、-COORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2N(Ry5Ry5a)、-S(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5aRy5b)、-SRy5、-N(Ry5Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5aRy5b)、-OC(O)N(Ry5Ry5a)、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換され、
    各々の-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a、及び-Ry5bが、-H、及びC1-6アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-6アルキルが、同じ又は異なる1つ以上のハロゲンによって任意選択で置換される、
    請求項14から28のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  30. -L2-が、-O-、-T-、及び-C(O)N(Ry1)-から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で中断されるC1-20アルキル鎖であり、C1-20アルキル鎖が、-OH、-T、及び-C(O)N(Ry6Ry6a)から独立して選択される1つ以上の基によって任意選択で置換され、-Ry1、-Ry6、-Ry6aが、H及びC1-4アルキルからなる群から独立して選択され、Tがフェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、C3-10シクロアルキル、3～10員ヘテロシクリル、8～11員ヘテロビシクリル、8～30員カルボポリシクリル、及び8～30員ヘテロポリシクリルからなる群から選択される、請求項14から29のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  31. -L2-が、式(IX-e)
    Figure 2023540701000104
     ［式中、
    星印を付けた破線が、-L1-に対する結合を示し、
    印を付けていない破線が、-Zに対する結合を示し、
    s2が、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、及び20からなる群から選択される整数である］
    のものである、請求項14から30のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  32. s2が、3である、請求項31に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩。
  33. 少なくとも1つの請求項1から13のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質又は少なくとも1つの請求項14から32のいずれか一項に記載のコンジュゲート又はその薬学的に許容される塩、及び少なくとも1つの賦形剤を含む、医薬組成物。
  34. 医薬として使用するための、請求項1から13のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質、請求項14から32のいずれか一項に記載のコンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は請求項33に記載の医薬組成物。
  35. がんを治療する方法に使用するための、請求項1から13のいずれか一項に記載のIL-2タンパク質、請求項14から32のいずれか一項に記載のコンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は請求項33に記載の医薬組成物。
  36. がんが、肉腫、脊索腫、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮細胞がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺がん、髄様がん、気管支原性がん、腎細胞がん、肝がん、胆管がん、絨毛がん、精上皮腫、胎児性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣がん、胃がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、上皮がん、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、網膜芽腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、及び白血病からなる群から選択される、請求項35に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
  37. IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物が、1つ以上の更なる薬物の投与前、投与と同時、又は投与後に患者に投与される、請求項34又は35に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
  38. 1つ以上の更なる薬物が、パターン認識受容体アゴニスト(PRRA)、細胞毒性/化学療法剤、免疫チェックポイント阻害剤若しくはアンタゴニスト、免疫チェックポイントアゴニスト、免疫活性化受容体アゴニスト、多重特異性薬剤、抗体薬物コンジュゲート(ADC)、抗体-アジュバントコンジュゲート(AAC)、放射性核種若しくは標的放射性核種治療薬、DNA損傷修復阻害剤、腫瘍代謝阻害剤、パターン認識受容体アゴニスト、プロテインキナーゼ阻害剤、ケモカイン及び化学誘引物質受容体アゴニスト、ケモカイン若しくはケモカイン受容体アンタゴニスト、サイトカイン受容体アゴニスト、細胞死受容体アゴニスト、CD47若しくはSIRPαアンタゴニスト、腫瘍溶解薬、シグナル変換タンパク質、エピジェネティック修飾剤、腫瘍ペプチド若しくは腫瘍ワクチン、熱ショックタンパク質(HSP)阻害剤、タンパク質分解酵素、ユビキチン及びプロテアソーム阻害剤、接着分子アンタゴニスト、ホルモンペプチド及び合成ホルモンを含むホルモン、並びに養子細胞療法、例えば、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)療法、キメラ抗原受容体(CAR)療法、T細胞療法、ナチュラルキラー(NK)細胞療法、CAR-T療法、CAR-NK療法、CAR-γδ療法、CAR-マクロファージ療法、又は遺伝子改変若しくは遺伝子未改変免疫細胞型による他の細胞療法からなる群から選択される、請求項37に記載の使用のための、IL-2タンパク質、コンジュゲート若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物。
  39. 請求項1に記載のIL-2タンパク質をコードするオリゴヌクレオチド。
  40. DNA、RNA及びcDNAからなる群から選択される、請求項39に記載のオリゴヌクレオチド。
  41. IL-2、特にバイアスIL-2で治療することができる疾患の治療における使用のための、請求項39又は40に記載のオリゴヌクレオチド。
  42. in vivo又はex vivoで宿主細胞中に送達される、請求項41に記載の使用のための、請求項39又は40に記載のオリゴヌクレオチド。
  43. 宿主細胞が免疫細胞である、請求項42に記載のオリゴヌクレオチド。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3178074A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Nina Gunnarsson Il-2 sequences and uses thereof
WO2023161371A1 (en) * 2022-02-25 2023-08-31 Danmarks Tekniske Universitet Engineered bacteria secreting cytokines for use in cancer immunotherapy
WO2024054527A1 (en) * 2022-09-06 2024-03-14 The Research Institute At Nationwide Children's Hospital Genetically engineered bone marrow derived myeloid cells for treatment of central nervous system tumors

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6624142B2 (en) 1997-12-30 2003-09-23 Enzon, Inc. Trimethyl lock based tetrapartate prodrugs
US7332164B2 (en) 2003-03-21 2008-02-19 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Heterobifunctional polymeric bioconjugates
AU2004228793B2 (en) 2003-04-08 2009-10-08 Yeda Research And Development Co. Ltd. Reversible pegylated drugs
US7690003B2 (en) 2003-08-29 2010-03-30 Fuller Jeffrey C System and method for increasing data throughput using thread scheduling
EP2932981B1 (en) 2003-09-19 2021-06-16 Novo Nordisk A/S Albumin-binding derivatives of GLP-1
BRPI0508470A (pt) * 2004-03-05 2007-07-31 Chiron Corp sistema de teste in vitro para prever toleráncia do paciente aos agentes terapêuticos
US8450269B2 (en) 2006-02-03 2013-05-28 Prolor Biotech Ltd. Long-acting growth hormone and methods of producing same
MX2009002859A (es) 2006-09-15 2009-03-30 Enzon Pharmaceuticals Inc Enlazadores biodegradables a base de ester impedido para suministro de oligonucleotidos.
DE602008005596D1 (de) 2007-06-21 2011-04-28 Univ Muenchen Tech Biologisch aktive proteine mit erhöhter in-vivo- und/oder in-vitro-stabilität
EP2175878A4 (en) 2007-07-11 2014-12-03 Belrose Pharma Inc POLYMER DRUG DISPENSING SYSTEM WITH A MULTIPLE SUBSTITUTED AROMATIC PART
EP2596805B1 (en) 2008-02-01 2021-10-27 Ascendis Pharma A/S Prodrug comprising a drug-linker conjugate
LT2279007T (lt) 2008-04-29 2016-10-10 Ascendis Pharma Growth Disorders Division A/S Pegiliuoto rekombinantinio žmogaus augimo hormono junginiai
CA2723263A1 (en) 2008-05-23 2009-11-26 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Polymeric systems containing intracellular releasable disulfide linker for the delivery of oligonucleotides
ES2825173T3 (es) * 2009-01-21 2021-05-14 Amgen Inc Composiciones y métodos de tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias
BRPI1008061B1 (pt) 2009-02-03 2022-01-25 Amunix Pharmaceuticals, Inc. Polipeptídeos recombinantes estendidos (xten), proteína de fusão isolada compreendendo os mesmos e método de aprimoramento de uma propriedade de uma proteína biologicamente ativa
SG177761A1 (en) 2009-07-31 2012-03-29 Ascendis Pharma As Biodegradable polyethylene glycol based water-insoluble hydrogels
WO2011082368A2 (en) 2009-12-31 2011-07-07 Enzon Pharmaceuticals, Inc Polymeric conjugates of aromatic amine containing compounds including releasable urea linker
JP5964815B2 (ja) 2010-05-05 2016-08-03 プロリンクス リミテッド ライアビリティ カンパニー 固体担体からの放出制御薬物
DK2566335T3 (en) 2010-05-05 2016-10-03 Prolynx Llc Controlled release of active ingredients from macromolecular CONJUGATES
CN102959585B (zh) 2010-06-30 2016-03-30 日本电气方案创新株式会社 属性确定方法、属性确定装置及属性确定系统
US20140243254A1 (en) 2011-08-12 2014-08-28 Ascendis Pharma A/S Polymeric Hyperbranched Carrier-Linked Prodrugs
WO2013036857A1 (en) 2011-09-07 2013-03-14 Prolynx Llc Sulfone linkers
AU2012304337B2 (en) 2011-09-07 2015-05-07 Prolynx Llc Hydrogels with biodegradable crosslinking
WO2014056926A1 (en) 2012-10-11 2014-04-17 Ascendis Pharma A/S Hydrogel prodrugs
WO2014060512A1 (en) 2012-10-17 2014-04-24 Novo Nordisk Health Care Ag Fatty acid acylated amino acids for growth hormone delivery
US11633487B2 (en) 2014-08-06 2023-04-25 Ascendis Pharma A/S Prodrugs comprising an aminoalkyl glycine linker
CN115317603A (zh) 2016-07-07 2022-11-11 小利兰·斯坦福大学托管委员会 抗体佐剂缀合物
AU2017376460A1 (en) 2016-12-13 2019-06-20 Bolt Biotherapeutics, Inc. Antibody adjuvant conjugates
IL269506B2 (en) 2017-03-22 2024-04-01 Genentech Inc Hyaluronic acid cross-linked hydrogel preparations and methods
US20210024602A1 (en) 2018-03-28 2021-01-28 Ascendis Pharma Oncology Division A/S IL-2 Conjugates
EP3854805A4 (en) * 2018-09-21 2022-08-24 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. NOVEL INTERLEUKIN 2 AND ITS USE
CN113557033A (zh) 2019-01-04 2021-10-26 阿森迪斯药物肿瘤股份有限公司 模式识别受体激动剂的缀合物
CA3134838A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Prolynx Llc Improved conjugation linkers

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