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JP2023038370A - 増殖性状態の処置または予防 - Google Patents

増殖性状態の処置または予防 Download PDF

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JP2023038370A
JP2023038370A JP2023010993A JP2023010993A JP2023038370A JP 2023038370 A JP2023038370 A JP 2023038370A JP 2023010993 A JP2023010993 A JP 2023010993A JP 2023010993 A JP2023010993 A JP 2023010993A JP 2023038370 A JP2023038370 A JP 2023038370A
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JP
Japan
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mmol
stirred
cyp1b1
compound
added
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Pending
Application number
JP2023010993A
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English (en)
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アルバート エベレット スティーブン
Albert Everett Steven
ウラーク サライ
Ulhaq Saraj
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University of Dundee
Original Assignee
University of Dundee
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Publication date
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Abstract

【課題】癌および他の増殖性状態の治療または予防において使用する新規化合物を提供すること【解決手段】本発明は、たとえば、チトクロムＰ４５０ １Ｂ１（ＣＹＰ１Ｂ１）およびそのアレル改変体を発現する細胞を特徴とする、癌および他の増殖性状態の治療または予防において使用する新規化合物に関する。本発明はまた、医学療法、たとえば、癌または他の増殖性状態の治療または予防において使用するための、１種または複数のそのような化合物を含む医薬組成物、ならびにヒトまたは非ヒト動物患者における癌または他の状態の治療方法も提供する。本発明はまた、たとえばＣＹＰ１Ｂ１およびそのアレル改変体を発現する細胞を特徴とする癌および他の増殖性状態の治療または予防において使用する新規化合物を特定する方法も提供する。本発明はまた、本発明の化合物の癌治療における有効性を判定する方法も提供する。【選択図】図１

Description

本発明は、たとえば、チトクロムＰ４５０ １Ｂ１（ＣＹＰ１Ｂ１）およびそのアレル改変体を発現する細胞を特徴とする、癌および他の増殖性状態の治療または予防において使用する新規化合物に関する。本発明はまた、医学療法、たとえば、癌または他の増殖性状態の予防または治療において使用するための、１種または複数のそのような化合物を含む医薬組成物、ならびにヒトまたは非ヒト動物患者における癌または他の状態の治療方法も提供する。本発明はまた、たとえばＣＹＰ１Ｂ１およびそのアレル改変体を発現する細胞を特徴とする癌および他の増殖性状態の予防の治療において使用するための新規化合物を特定する方法も提供する。本発明はまた、本発明の化合物の癌治療における有効性を決定する方法も提供する。
ＣＹＰ１Ｂ１は、Ｓｕｔｔｅｒら（非特許文献１）が記載しているように、ダイオキシン誘導性ＣＹＰ１遺伝子ファミリーの一員であり、このファミリーには、ＣＹＰ１Ａ１やＣＹＰ１Ａ２も含まれる。ＣＹＰ１Ｂ１は、ステロイド、生体異物、薬物、および／またはプロドラッグを含めた様々な基質を代謝し、活性化することのできるヘムチオレートモノオキシゲナーゼ酵素である。ＣＹＰ１Ｂ１タンパク質は、組織発生タイプの異なる広範なヒト原発癌および転移癌において高頻度に発現され、正常組織では発現されないか、またはごくわずかなレベルである（たとえば、非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４を参照されたい）。
より詳細には、ＣＹＰ１Ｂ１は、膀胱、脳、乳房、結腸、頭頸部、腎臓、肺、肝臓、卵巣、前立腺、および皮膚の癌において発現され、対応する正常組織では発現されないことがわかっている。たとえば、非特許文献５において、ＣＹＰ１Ｂ１が、神経膠芽腫、未分化星状細胞腫、乏突起神経膠腫、および未分化乏突起神経膠腫を含めたグリア腫瘍では過剰発現されたが、冒されていない脳組織では過剰発現されなかったことを報告し、非特許文献６において、ＣＹＰ１Ｂ１が前立腺腺癌（ａｄｅｎｏｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）では過剰発現されたが、対応する正常な前立腺組織では過剰発現されなかったことを報告し、Ｃａｒｎｅｌｌら（２００４年、非特許文献６）は、ＣＹＰ１Ｂ１が膀胱癌の（ｎ＝２２、１００％）でも発現されることも示し、非特許文献７および非特許文献８では、原発性および転移性の卵巣癌においてＣＹＰ１Ｂ１の発現が増加したが、正常な卵巣組織では増加しなかったことが報告され、非特許文献９および非特許文献１０では、ＣＹＰ１Ｂ１が、結腸腺癌において、対応する正常組織と比べて過剰発現されたことが報告されている。
いくつかの研究では、ＣＹＰ１Ｂ１が、乳癌において、対応する正常組織と比べて過剰発現されることが示されている（たとえば、非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３を参照されたい）。
非特許文献１４において、ＣＹＰ１Ｂ１が、悪性黒色腫および播種性疾患では過剰発現されたが、正常な皮膚では過剰発現されなかったことを報告している。Ｃｈａｎｇらは、非特許文献１５において、ＣＹＰ１Ｂ１タンパク質が、正常な肝臓には存在しないことを報告しているが、Ｅｖｅｒｅｔｔら（２００７年、非特許文献１４）は、黒色腫の肝臓へのＩＶ期転移においてＣＹＰ１Ｂ１の過剰発現を確認し、近接する正常な肝臓では確認していない。
Ｇｒｅｅｒらは、非特許文献１６において、頭頸部扁平上皮癌が悪性に進行する際、ＣＹＰ１Ｂ１が過剰発現されたが、正常な上皮では過剰発現されなかったことを報告してい
る。
ＭｃＦａｄｙｅｎらは、非特許文献１７において、腎臓癌ではＣＹＰ１Ｂ１を検出したが、対応する正常組織では検出していない。
Ｍｕｒｒａｙら（２００４年、非特許文献２）は、免疫組織化学を使用して、肺癌細胞におけるＣＹＰ１Ｂ１の過剰発現を正常肺組織と比較して示している。Ｓｕらは、非特許文献１８において、免疫組織化学を使用して、進行したＩＶ期非小細胞肺癌におけるＣＹＰ１Ｂ１の過剰発現を、より早期のこの疾患と比較して示している。
上で引用した数多くの開示から、ＣＹＰ１Ｂ１の発現が、一定範囲の種々の癌および他の増殖性状態の特徴であること、ならびにＣＹＰ１Ｂ１発現を使用して、そうした癌および他の状態の範囲を画定できることは明らかである。正常（非癌性）細胞は、それほどのレベルのＣＹＰ１Ｂ１を発現しないので、ＣＹＰ１Ｂ１を発現する細胞において細胞傷害性を示すが、正常細胞では実質的に非毒性である化合物が、ＣＹＰ１Ｂ１発現を特徴とする癌において標的指向型抗癌剤として有用となることも当然期待できる。「標的指向型」とは、そのような化合物が、全身に送達できるものであり、ＣＹＰ１Ｂ１を発現する癌性細胞の存在下でのみ活性化され、身体の残りの部分には実質的に非毒性のままとなることを意味する。
さらに、いくつかのチトクロムＰ４５０酵素は、様々な抗癌薬を代謝し、解毒することがわかっている。ＭｃＦａｄｙｅｎら（非特許文献１９）は、ＣＹＰ１Ｂ１を発現する細胞では、ＣＹＰ１Ｂ１を発現しない細胞と比べて、ドセタキセルに対する感受性が有意に低下したことを実証している。この知見は、細胞中のＣＹＰ１Ｂ１の存在が、ある種の細胞傷害性薬物に対するその感受性を低減し得ることを示唆している。したがって、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されるプロドラッグは、ＣＹＰ１Ｂ１によって薬剤耐性が媒介される癌の治療に有用となり得る。
さらに、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子は、癌において高度に多形性であり、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子内に含まれるいくつかの一塩基多形は、コードされているタンパク質の発現および／または活性を変更することが突きとめられている。そのうち、ＣＹＰ１Ｂ１＊３（４３２６Ｃ＞Ｇ、Ｌ４３２Ｖ）アレルは、Ｓｉｓｓｕｎｇらの非特許文献２０およびその中で引用されている参照文献に記載されているように、いくつかの基質に対するＣＹＰ１Ｂ１の発現および酵素動力学の増大によって特徴付けられた。この知見は、ＣＹＰ１Ｂ１だけでなく、この酵素のアレル改変体も、プロドラッグの活性化および癌の標的化に寄与し得ることを示唆している。
プロドラッグは、有効性を損なうことなく、薬物の望ましくない毒性または他のいくつかのマイナスの属性を弱める手段として検討されてきた。プロドラッグは、化学的に修飾されて不活性にされているが、投与された後、身体においてその薬物の活性形態へと代謝または別な形で変換される薬物である。非特許文献２の総説にあるように、原発性腫瘍および転移性疾患においてＣＹＰ１Ｂ１が正常組織と比べて過剰発現されることは、標的化による癌治療に向けた、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されるプロドラッグの開発にとって素晴らしい機会となる。非特許文献２１の総説にあるように、実際に、標的化による癌治療のための、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されるプロドラッグの発見および開発は、正常組織で発現されるチトクロムＰ４５０によって活性化されるプロドラッグアルキル化剤のシクロホスファミド、イホスファミド、ダカルバジン、プロカルバジンなど、臨床で使用される、チトクロムＰ４５０によって活性化される既存の非標的指向型プロドラッグに優る薬理学的な利点をもたらしそうである。
ヒトチトクロムＰ４５０ファミリーは、５７種の活性アイソザイムを含んでおり、これらは、正常な代謝において機能し、薬物の薬物動態学に影響を及ぼし、薬物－薬物相互作用によって患者にマイナスの結果をもたらす。チトクロムＰ４５０イソ酵素は、非特許文献２２に記載されているように、ヒトにおいて公知の薬物のおよそ３分の２を代謝し、その８０％が５種のアイソザイム、すなわち、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、およびＣＹＰ３Ａ４によるものである。
非特許文献２３の総説にあるように、ヒトゲノムプロジェクトにおいて最初に発見された遺伝子の中に、ＣＹＰ２Ｒ１、ＣＹＰ２Ｗ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｕ１があるが、これらの遺伝子の機能、多形、および調節については、依然として十分な解明が待たれている。ＣＹＰ１Ｂ１に加えて、これらのチトクロムＰ４５０酸化還元酵素のいくつかが、肝臓外にあり、癌において過剰発現される。ＣＹＰ１Ｂ１、ＣＹＰ２Ａ／２Ｂ、ＣＹＰ２Ｆ１、ＣＹＰ２Ｒ１、ＣＹＰ２Ｕ１、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７、ＣＹＰ４Ｚ１、ＣＹＰ２６Ａ１、およびＣＹＰ５１を含めた幾種類かのチトクロムＰ４５０は、非特許文献７に記載されているように、免疫組織化学および光学顕微鏡によって測定したところ、正常な卵巣よりかなり高いレベルの強度で存在する。さらに、非特許文献２に記載されているように、原発性結腸直腸癌で同様の検出方法を使用すると、正常な結腸と比べて、ＣＹＰ１Ｂ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｕ１、ＣＹＰ３Ａ５、およびＣＹＰ５１を含めた幾種類かのチトクロムＰ４５０が過剰発現される頻度が高い。同じ研究において、ＣＹＰ１Ｂ１、ＣＹＰ２Ａ／２Ｂ、ＣＹＰ２Ｆ１、ＣＹＰ４Ｖ２、およびＣＹＰ３９を含めた幾種類かのチトクロムＰ４５０は、原発性腫瘍におけるその存在と相関があった。非特許文献２４によると、ＣＹＰ２Ｗ１も、結腸直腸癌において過剰発現されることが示されている。ＣＹＰ４Ｚ１は、非特許文献２５および非特許文献２６にそれぞれ記載されているように、乳癌において過剰発現され、また非小細胞肺癌の促進および進行に関連する遺伝子である。
この分野における主要な課題は、特に非特許文献２７の総説にあるように、基質が不明ないわゆる「オーファン」状態のヒトチトクロムＰ４５０の機能を解明することである。ＣＹＰ１Ｂ１のいくつかの基質は公知であり、そのほんの少数がこの酵素によって特異的に代謝され、たとえば、非特許文献２８に記載されているように、７－エトキシレゾルフィンは、ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、およびＣＹＰ１Ｂ１を含めたＣＹＰ１ファミリーのあらゆる構成員によって活性化されたとき、酸化的脱エチル化を経る。いくつかの蛍光発生プローブおよび発光プローブ基質が、チトクロムＰ４５０活性を高感度で評価するのに利用可能であるが、これらの基質は、広範な特異性を示し、したがってＣＹＰ１、ＣＹＰ２、およびＣＹＰ３ファミリーの一定範囲のチトクロムＰ４５０酵素によって代謝される。たとえば、非特許文献２９は、Ｐ４５０－Ｇｌｏと呼ばれる技術でホタルルシフェラーゼ発光に結び付く発光基質の使用を記載している。別の例は、非特許文献３０中の「Ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ７－ｅｔｈｏｘｙｃｏｕｍａｒｉｎ ｔｏ ｍｉｎｉｔｏｒ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＣＹＰ１， ＣＹＰ２， ＣＹＰ３ ｆａｍｉｌｉｅｓ」にＷａｘｍａｎ ＤＪおよびＣｈａｎｇｅ ＴＫＨにより記載されているように、チトクロムＰ４５０を触媒とする７－エトキシクマリンＯ－脱エチル化を経て、蛍光性の強いアニオンを遊離させる７－エトキシクマリンである。
非特許文献３１は、インドールキノンモデルプロドラッグが、無酸素状態においてチトクロムＰ４５０還元酵素（チトクロムＰ４５０と混同すべきでない）によって還元的に切断されて、７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンアニオンを遊離することを記載している。このモデルプロドラッグは、予め選択した発光波長では発光性でなく、速度論的蛍光分光法を使用してクマリンアニオンの生成をモニターする（λｅｘ＝３８０ｎｍ／λｅｍ＝４５０ｎｍ）ことにより、還元的な切断が正確に測定できていた。
限られた種類の化合物（通常は１００未満）とチトクロムＰ４５０アイソザイムの相互作用について、記載されてはいるが、そうした研究の結果は、非特許文献３２に記載されているように、技術、アッセイ条件、およびデータ解析法が異なるために比較が難しい。多くの計算戦略は、チトクロムＰ４５０アイソザイム基質の予測活性モデルを生成するように進歩してきたが、それらは、非特許文献３３に記載されているように、チトクロムＰ４５０アイソザイム活性の大きな単一の多様なデータセットを欠いていることにより限界がある。著者らは、生物発光酵素基質阻害アッセイを用いた定量的ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）を使用し、チトクロムＰ４５０生物活性データベースを構築して、正常組織、主として肝臓で発現され、薬物のいわゆる第１相代謝を担う５種のチトクロムＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、および３Ａ４）に対して１７，１４３種の化学化合物をスクリーニングすることを記載している。このデータベースは、初期段階の創薬事業を支援するためのチトクロムＰ４５０活性の新しい予測モデルの構築および試験に役立つはずであると結論付けられている。
非特許文献３４は、拡張連結性フィンガープリント（ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ）による谷本の類似性探索をベースとする新規なＧａｕｓｓｉａｎ Ｋｅｒｎｅｌ重み付きｋ近傍法（ｋ－ＮＮ）アルゴリズムに基づき、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４の阻害をコンピューターで予測する方法を記載している。データセットは、ヒト肝臓ミクロソームにおけるＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４の阻害について試験した１１５３種および１１８２種の薬物候補のモデル作製が組み込まれたものである。ＣＹＰ２Ｄ６では、分類された試験化合物の８２％が正しいクラスに予測され、ＣＹＰ３Ａ４では、分類された試験化合物の８８％が正しく分類された。
理論上では、チトクロムＰ４５０ ＨＴＳを使用して、腫瘍および正常組織のチトクロムＰ４５０の生物活性についての大規模データベースを構築し、次いで、正常組織チトクロムＰ４５０による第１相代謝に関連する薬理学的な問題について審査しながら、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化される選択的なプロドラッグの設計および合成の基盤としての基質予測モデルを開発することは可能となり得る。しかし、実行に向けた簡略化については、先行技術からは明らかにならず、またプロドラッグの構造、およびチトクロムＰ４５０を発現する腫瘍によって活性化される際の活性薬物への変換機序と向き合って合理化する必要がある。
プロドラッグ設計において、いわゆる「トリガー－リンカー－エフェクター」化学を利用するには、トリガーを活性化し、リンカーの切断を開始して、エフェクター（通常は活性薬物）を遊離させる必要があり、エフェクターの生物学的活性は、プロドラッグ形態では遮蔽されている。ＣＹＰ１Ｂ１などのチトクロムＰ４５０を発現する腫瘍に標的指向化された選択的プロドラッグのモジュール設計には、（１）選択的なトリガー分子の特定、（２）トリガー活性化に続いて（通常は芳香族ヒドロキシル化によって）効率よく切断される生体安定性リンカーの使用、および（３）トリガーによる過程の効率を妨げない適切なエフェクターまたは薬物が必要となる。
ＣＹＰ１Ｂ１ ｍＲＮＡは、正常なすべての肝臓外ヒト組織において構成的に発現されるが、このタンパク質は通常は検出不可能である。対照的に、ＣＹＰ１Ｂ１タンパク質は、腫瘍においては高レベルで発現される。ｉｎ ｖｉｔｒｏでかなりの継代を経ているヒト由来の広範な樹立または不死化腫瘍細胞系（ＭＣＦ－７乳癌細胞など）については、活性ＣＹＰ１Ｂ１タンパク質は構成的に発現されないことが理解される。ＣＹＰ１Ｂ１は、ＭＣＦ－７乳房腫瘍細胞では構成的に発現されないが、ダイオキシンＴＣＤＤなどのアリール炭化水素作動薬で処理することにより、ｍＲＮＡレベルとタンパク質レベルの両方でＣＹＰ１酵素発現を誘導することが可能である。
特許文献１は、担体骨格に結合した薬物部分を含むプロドラッグを記載しており、記載されているプロドラッグは、ＣＹＰ１Ｂ１によってヒドロキシル化されるかのように活性化されて、薬物部分を遊離させる。
国際公開第９９／４０９４４号
Ｓｕｔｔｅｒら、Ｊ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、１９９４年５月６日、２６９巻、１８号、ｐ．１３０９２－１３０９９、 ＭｃＦａｄｙｅｎ ＭＣ、Ｍｅｌｖｉｎ ＷＴ、およびＭｕｒｒａｙ Ｇｌ、「Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ Ｅｎｚｙｍｅｓ： Ｎｏｖｅｌ Ｏｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．、２００４年、３巻、３号、ｐ．３６３－３７１ ＭｃＦａｄｙｅｎ ＭＣおよびＭｕｒｒａｙ Ｇｌ、「Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ １Ｂ１： ａ Ｎｏｖｅｌ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒｇｅｔ」、Ｆｕｔｕｒｅ Ｏｎｃｏｌ．、２００５年、１巻、２号、ｐ．２５９－２６３ Ｓｉｓｓｕｎｇ ＴＭ、Ｐｒｉｃｅ ＤＫ、Ｓｐａｒｒｅｂｏｏｍ Ａ、およびＦｉｇｇ ＷＤ、「Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ １Ｂ１： Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｈｏｒｍｏｎｅ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｔｕｍｏｒ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ａ Ｎｏｖｅｌ Ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ」、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００６年、４巻、３号、ｐ．１３５－１５０ Ｂａｒｎｅｔｔら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００７年、１３巻、１２号、ｐ．３５５９－３５６７ Ｃａｒｎｅｌｌら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｌ Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．、２００４年、５８巻、２号、ｐ．５００－５０９ Ｄｏｗｎｉｅら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００５年、１１巻、２０号、ｐ．７３６９－７３７５ ＭｃＦａｄｙｅｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、２００１年、８５巻、２号、ｐ．２４２－２４６ Ｇｉｂｓｏｎら、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．、２００３年、２巻、６号、ｐ．５２７－５３４ Ｋｕｍａｒａｋｕｌａｓｉｎｇｈａｍら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００５年、１１巻、１０号、ｐ．３７５８－３７６５ Ｍｕｒｒａｙ ＧＩ、Ｔａｙｌｏｒ ＭＣ、ＭｃＦａｄｙｅｎ ＭＣ、ＭｃＫａｙ ＪＡ、Ｇｒｅｅｎｌｅｅ ＷＦ、Ｂｕｒｋｅ ＭＤ、およびＭｅｌｖｉｎ ＷＴ、「Ｔｕｍｏｒ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ ＣＹＰ１Ｂ１」、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９９７年、５７巻、１４号、ｐ．３０２６－３０３１ Ｈａａｓ Ｓ、Ｐｉｅｒｌ Ｃ、Ｈａｒｔｈ Ｖ、Ｐｅｓｃｈ Ｂ、Ｒａｂｓｔｅｉｎ Ｓ、Ｂｒｕｎｉｎｇ Ｔ、Ｋｏ Ｙ、Ｈａｍａｎｎ Ｕ、Ｊｕｓｔｅｎｈｏｖｅｎ Ｃ、Ｂｒａｕｃｈ Ｈ、およびＦｉｓｃｈｅｒ ＨＰ、「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃ ａｎｄ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｈｏｒｍｏｎｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｚｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ」、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、２００６年、１１９巻、８号、ｐ．１７８５－１７９１ ＭｃＫａｙ ＪＡ、Ｍｕｒｒａｙ ＧＩ、Ａｈ－Ｓｅｅ ＡＫ、Ｇｒｅｅｎｌｅｅ ＷＦ、Ｍａｒｃｕｓ ＣＢ、Ｂｕｒｋｅ ＭＤ、およびＭｅｌｖｉｎ ＷＴ、「Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＹＰ１Ａ１ ａｎｄ ＣＹＰ１Ｂ１ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ」、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．、１９９６年、２４巻、２号、３２７Ｓ Ｅｖｅｒｅｔｔら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、２００７年、２５巻、１８Ｓ Ｃｈａｎｇら、Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｓｃｉ．、２００３年、７１巻、１号、ｐ．１１－１９ Ｇｒｅｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００４年、４５巻、ｐ．３７０１ ＭｃＦａｄｙｅｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、２００４年、９１巻、５号、ｐ．９６６－９７１ Ｓｕら、Ａｎｔｉ－Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００９年、２巻、５０９－５１５ ＭｃＦａｄｙｅｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００１年７月１５日、６２巻、２号、ｐ．２０７－２１２ Ｓｉｓｓｕｎｇら、Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．、２００８年、７巻、１号、ｐ．１９－２６ Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ ＬＨおよびＭｕｒｒａｙ ＧＩ、Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ．、２００２年、８巻、１５号、ｐ．１３３５－１３４７ Ｏｒｔｉｚ ｄｅ Ｍｏｎｔｅｌｌａｎｏ， ＰＲ（編）、Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｍｅｃｈａｎｉｓｍ， ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｋｌｕｗｅｒ Ａｃａｄｅｍｉｃ／Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、２００５年 Ｉｎｇｅｌｍａｎ－Ｓｕｎｄｂｅｒｇ， Ｍ．、Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００５年、２０７巻、ｐ．５２－５６ Ｅｌｄｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、４５巻、４号、ｐ．７０５－７１２ Ｒｅｉｇｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００４年、６４巻、７号、ｐ．２３５７－２３６４ Ｂａｎｋｏｖｉｃら、Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ、２０１０年、６７巻、２号、ｐ．１５１－１５９ Ｓｔｒａｋ ＫおよびＧｕｅｎｇｅｒｉｃｈ ＦＰ、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｖ．、２００７年、３９巻、２－３号、ｐ．６２７－６３７ Ｃｈａｎｇ ＴＫおよびＷａｘｍａｎ ＤＪ、Ｍｅｔｈｏｄ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２００６年、３２０巻、ｐ．８５－９０ Ｃａｌｉら、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ Ｔｏｘｉｃｏｌ．、２００６年、２巻、４号、ｐ．６２－４５ Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ＩＲおよびＳｈｅｐｈａｒｄ ＥＡ編、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、２００６年、３２０巻、Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、第２版 Ｅｖｅｒｅｔｔら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００２年、６３巻、ｐ．１６２９－１６３９ Ｒｅｎｄｉｃ， Ｓ．、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｖ．中の「Ｓｕｍｍａｒｙ ｏｆ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｎ ｈｕｍａｎ ＣＹＰ ｅｎｚｙｍｅｓ： ｈｕｍａｎ Ｐ４５０ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｄａｔａ」、２００２年、３４巻、ｐ．８３～４４８ Ｖｅｉｔｈら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２００９年、２７巻、ｐ．１０５０～１０５５ Ｊｅｎｓｅｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００７年、５０巻、ｐ．５０１－５１１
本発明者らは、意外にも、ＷＯ９９／４０９４４に記載のものとは一線を画する本明細書に記載の化合物は、化合物が（たとえばＣＹＰ１Ｂ１発現細胞によって、特に癌性細胞によってなされる）ヒドロキシル化を受けて崩壊する結果として、特定の細胞、特にチトクロムＰ４５０ １Ｂ１（以下ではＣＹＰ１Ｂ１）を発現する細胞において分解されるが、正常細胞では分解されないことを見出した。
したがって、第１の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物
Figure 2023038370000002
 ［式中、
Ｘ１は、－Ｘ１－Ｘ２が、－Ｏ－Ｘ２、－Ｓ－Ｘ２、－ＳＯ２－Ｏ－Ｘ２、－ＳＯ２ＮＺ１０－Ｘ２、共役アルケンメチルオキシ、共役アルケンメチルチオ、共役アルケンメチルＳＯ２－Ｏ、共役アルケンメチル－ＳＯ２ＮＺ１０、または次式
Figure 2023038370000003
 からなるようなものであり、
－Ｘ２は、存在しないか、またはＸ１－Ｘ２－エフェクターが、
Figure 2023038370000004
 のうちの１つであるようなものであり、
各ｎおよびｍは、独立に０または１であり、
ｐは、０、１または２であり、
Ｘ３は、酸素または硫黄であり、加えて、ｍ＝０であるとき、ＳＯ２－Ｏ、ＳＯ２ＮＺ１０、共役アルケンメチルオキシ、共役アルケンメチルチオ、共役アルケンメチル－ＳＯ２－Ｏ、または共役アルケンメチル－ＳＯ２ＮＺ１０でもよく、
Ｙ１、Ｙ２およびＹ３はそれぞれ、独立に炭素または窒素であり、Ｙ１が窒素である場合、Ｚ１は存在せず、Ｙ２が窒素である場合、Ｚ３は存在せず、Ｙ３が窒素である場合、Ｚ５は存在せず、
Ｙ４は、酸素、炭素、もしくは窒素原子、スルホキシド、またはスルホンであり、
－Ｙ５－は、（ｉ）単結合、（ｉｉ）＝ＣＨ－（＝ＣＨ－の二重結合＝は、Ｙ４と結合している）、または（ｉｉｉ）－ＣＨ２－もしくは－ＣＨ２ＣＨ２－のいずれかであるか、あるいは（ｉｉ）の水素原子または（ｉｉｉ）の１つまたは複数の水素原子が置換基Ｚ１１で置き換えられている（ｉｉ）～（ｉｉｉ）の１つであり、Ｚ１１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択され、
Ｚ１～Ｚ４はそれぞれ、存在する場合、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択され、Ｚ５は、存在する場合、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択されるか、またはＺ２とＺ３、Ｚ３とＺ４、およびＺ４とＺ５のうちの１組が、それら
が結合している原子と一緒になって上記化合物の残部と縮合した芳香環を形成するが、但し、Ｚ１、Ｚ２およびＺ４の少なくとも１つは水素であり、
Ｚ６は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、およびアラルキルから選択され、
Ｙ６はどれも窒素原子でなくともよいか、あるいはＹ６の１または２つが窒素原子であって、残りは炭素原子であってもよく、
各Ｚ７は、独立に、水素、アルキル、またはアリールであり、
各Ｚ８は、水素、電子吸引性基、非置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、非置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシ、および置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシから独立に選択され、上記置換アルキルまたは上記置換アルコキシは、エーテル、アミノ、一置換もしくは二置換アミノ、環式Ｃ１～Ｃ５アルキルアミノ、イミダゾリル、Ｃ１～Ｃ６アルキルピペラジニル、モルホリノ、チオール、チオエーテル、テトラゾール、カルボン酸、エステル、アミド、一置換もしくは二置換アミド、Ｎ－結合型アミド、Ｎ－結合型スルホンアミド、スルホキシ、スルホネート、スルホニル、スルホキシ、スルフィネート、スルフィニル、ホスホノオキシ、ホスフェート、およびスルホンアミドから選択される１個または複数の基で置換されており、
各Ｚ９は、独立に酸素または硫黄であり、
Ｚ１０は、水素またはアルキル、たとえばＣ１～４アルキルであり、
エフェクターは、薬理学、診断、またはスクリーニングの機能を有する分子である］
または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を提供する。
第２の態様から見ると、本発明は、本発明の第一の態様による化合物または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物と、薬学的に許容される担体とから構成される組成物を提供する。
第３の態様から見ると、本発明は、医薬として使用するための、本発明の第一の態様による化合物または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を提供する。
第４の態様から見ると、本発明は、増殖性状態を治療または予防する方法において使用するための、本発明の第一の態様による化合物または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を提供する。
第５の態様から見ると、本発明は、治療上または予防上有用な量の本発明の第一の態様による化合物または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することを含む、増殖性状態を治療または予防する方法を提供する。
第６の態様から見ると、本発明は、増殖性状態を治療または予防する方法において使用する医薬を調製するための、本発明の第一の態様による化合物または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物の使用を提供する。
第７の態様から見ると、本発明は、チトクロムＰ４５０酵素によって特異的に活性化される化合物を特定する方法であって、
（ａ）エフェクターがフルオロフォアである、一組の本発明の第一の態様による化合物を前記チトクロムＰ４５０酵素と接触させ、前記接触の結果として前記一組のうちの１種または複数の化合物から前記フルオロフォアが遊離するかを判定するステップと、
（ｂ）前記一組の化合物を対照組織、組織もしくは細胞抽出物、または酵素と接触させ、前記接触の結果として前記一組のうちの１種または複数の化合物から前記フルオロフォアが遊離するかを判定するステップと、
（ｃ）前記チトクロムＰ４５０によって特異的に活性化される前記化合物を、ステップ（ａ）で前記フルオロフォアを遊離させるが、ステップ（ｂ）では遊離させないか、またははるかに少ない程度にしか遊離させない、前記一組の化合物の中の任意の化合物として特定するステップと
を含む方法を提供する。
第８の態様から見ると、本発明は、エフェクターが薬理学的機能を有する分子である本発明の化合物が、癌治療に効果的であるかどうかを判定する方法であって、前記方法は、癌を有する動物に前記化合物を投与することを含み、前記癌は、チトクロムＰ４５０酵素を構成的に発現するように改変された組み換え細胞、腫瘍もしくは癌から直接採取した組織、またはその起源である腫瘍もしくは癌によるレベルと同様のレベルで前記チトクロムＰ４５０酵素を発現する腫瘍もしくは癌から直接採取した組織に由来する早期継代細胞系からの細胞のいずれかを埋め込んだ結果として生じたものである方法を提供する。
本発明のこれ以上の態様および実施形態は、以下に続く論述からわかるであろう。
図１は、形質移入されたＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１／ＣＰＲ細胞系におけるＣＹＰ１Ｂ１発現（パネルＡ）および形質移入されたＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１／ＣＰＲ細胞系におけるＣＹＰ１Ａ１発現（パネルＢ）の検出を示すウエスタンブロットを示す図である。詳細は以下の実験の部で示す。 図２ａは、ＣＹＰ１Ｂ１によって誘発される本発明の化合物（本明細書ではＳＵ０２５－０４と呼ぶ）の３－ヒドロキシル化に続く、細胞傷害性エフェクター分子（Ｎ，Ｎ’－ビス（２－クロロエチル）ホスホロジアミデート（ＩＰＭクロリドとしても知られる）の１，４脱離による自発的遊離の機序を示す図である。 図２ｂは、ＣＹＰ１Ｂ１によって誘発される本発明の化合物（本明細書ではＳＵ０２５－０４と呼ぶ）の４－ヒドロキシル化に続く、細胞傷害性エフェクター分子（Ｎ，Ｎ’－ビス（２－クロロエチル）ホスホロジアミデート（ＩＰＭクロリドとしても知られる）の１，６脱離による自発的遊離の機序を示す図である。 図２ｃは、ＣＹＰ１Ｂ１によって誘発される本発明の化合物（本明細書ではＳＵ０２５－０４と呼ぶ）の６－ヒドロキシル化に続く、細胞傷害性エフェクター分子（Ｎ，Ｎ’－ビス（２－クロロエチル）ホスホロジアミデート（ＩＰＭクロリドとしても知られる）の１，８脱離による自発的遊離の機序を示す図である。 図３は、ＣＹＰ１Ｂ１によって誘発される本発明の化合物（本明細書ではＳＵ０２４－１－０３と呼ぶ）の６－ヒドロキシル化に続く、１，８脱離によるエフェクター分子の自発的遊離の機序を示す図である。
本発明は、以下でより詳細に述べるような細胞増殖抑制性分子、細胞傷害性分子、診断用分子、またはスクリーニング用分子であってよい、いわゆるエフェクター分子が、それを反応させることにより化学的に修飾され、そうすることにより式（Ｉ）の化合物を生成するプロドラッグを提供することから生まれる。本発明者らは、式（Ｉ）の化合物がヒドロキシル化、特にＣＹＰ１Ｂ１によって誘発されるヒドロキシル化を受けると、直接のヒドロキシル化またはエポキシド生成を介したヒドロキシル化を経て自発的に起こる式（Ｉ）の化合物の崩壊によって、エフェクター分子が遊離することを見出した。
概略を述べると、式（Ｉ）の化合物の構造は、トリガー領域、リンカー、およびエフェクター分子の３つの部分を含むと考えることができる。トリガーは、通常はＣＹＰ１Ｂ１によって誘発されるヒドロキシル化の基質として働くものであり、式（Ｉ）の左手側に示される二環式部分およびその置換基を含む、すなわち、Ｙ１～Ｙ５、Ｚ１～Ｚ６、および
これら部分のいくつかが結合している残りの炭素原子を含んでいる化合物部分を含むと一般に理解することができる。化合物のトリガー領域は、Ｃ（Ｚ７）－Ｘ１－Ｘ２単位を含むリンカー領域を介して、そのようなものとして示されているエフェクター分子に結合している。
式（Ｉ）の化合物のこれら３領域、すなわちトリガー、リンカー、およびエフェクター領域の構成および可変性についてここで述べる。
以下の論述において、いくつかの用語に言及するが、それら用語は、文脈からそうでないと規定されない限り、以下で示す意味を有すると理解されたい。
アルキルとは、本明細書では、直鎖でも環式でも分枝鎖でもよい（文脈からそうでないと規定されない限り通常は直鎖）飽和ヒドロカルビルラジカルを意味する。アルキル基が１つまたは複数の不飽和部位を有する場合、それらの部位は、炭素－炭素二重結合または炭素－炭素三重結合によって構成されたものであってよい。アルキル基が炭素－炭素二重結合を含む場合、それはアルケニル基となり、炭素－炭素三重結合が存在すると、アルキニル基となる。通常、アルキル、アルケニル、およびアルキニル基は、１～２５個の炭素原子、より通例では１～１０個の炭素原子、さらに通例では１～６個の炭素原子を含み、当然、アルケニル基およびアルキニル基における下限は、２個の炭素原子であり、シクロアルキル基では３個の炭素原子であることは理解される。
アルキル、アルケニル、またはアルキニル基は、たとえば、１回、２回、または３回、たとえば１回置換されていてもよく、すなわち、アルキル基の１個または複数の水素原子が形式的に置き換えられている。そのような置換基の例は、ハロ（たとえば、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨード）、アリール ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、アルコキシ、アルキルチオ、カルボキシ、シアノ、チオ、ホルミル、エステル、アシル、チオアシル、アミド、スルホンアミド、カルバメートなどである。
カルボキシとは、本明細書では、脱プロトン化された形（ＣＯ２ －）でもよい、官能基ＣＯ２Ｈを意味する。
ハロとは、フルオロ、ブロモ、クロロ、またはヨードである。
アシルおよびチオアシルとは、それぞれ式－Ｃ（Ｏ）－アルキルまたは－Ｃ（Ｓ）－アルキルである官能基を意味し、アルキルは、上で定義したとおりである。
エステルとは、－ＯＣ（＝Ｏ）－部分を含む官能基を意味する。
アミド（ａｍｉｄｏ）とは、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝Ｏ）－部分を含む官能基を意味し、カルバメートとは、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－部分を含む官能基を意味し、スルホンアミドとは、－ＳＯ２Ｎ（Ｈ）２－部分を含む官能基を意味し、示した各水素原子は、（スルホンアミドでは独立に）アルキルまたはアリールで置き換えられていてもよい。
アルキルオキシ（アルコキシと同義）およびアルキルチオ部分は、それぞれ式－Ｏ－アルキルおよび－Ｓ－アルキルのものであり、アルキルは、上で定義したとおりである。
同様に、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルケニルチオ、およびアルキニルチオは、式－Ｏアルケニル、－Ｏアルキニル、－Ｓアルケニル、およびＳアルキニルのものであり、アルケニルおよびアルキニルは、上で定義したとおりである。
アミノ基とは、本明細書では、式－Ｎ（Ｒ）２の基を意味し、各Ｒは、独立に、水素、アルキル、もしくはアリール、たとえば、メチルやエチルなどの不飽和非置換Ｃ１～６アルキルであり、または窒素原子Ｎに結合している２個のＲは連なっている。これの一例は、－Ｒ－Ｒ－が、通常は末端炭素原子から２個の水素原子が抜けているアルカンから形式的に導かれるアルキレンジラジカルを形成して、それによってアミンの窒素原子と一緒に環を形成しているものである。環式アミン中のジラジカルが必ずしもアルキレンである必要がないことは公知であるように、モルホリン（－Ｒ－Ｒ－は、－（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２－である）は、その一例であり、これから環式アミノ置換基を調製することができる。
アミノへの言及は、本明細書では、そうしたアミノ基を含む化合物から生じた四級化またはプロトン化されたアミン誘導体もその範囲に包含すると理解される。後者の例は、塩酸塩などの塩であると理解することもできる。
アリールとは、本明細書では、芳香族化合物から水素原子が抜けることにより形式的に生成したラジカルを意味する。
アリーレンジラジカルは、形式的には２個の水素原子が抜けることにより芳香族部分から導かれ、文脈からそうでないと特に規定されない限り、単環式の、たとえばフェニレンであってよく、また通常はそうである。当業者には公知であるように、ヘテロ芳香族部分は、１個または複数の炭素原子およびそれに結合している水素原子の代わりに１個または複数のヘテロ原子、通常はＯ、ＮまたはＳを含む、芳香族部分の部分セットである。例となるヘテロ芳香族部分として、たとえば、ピリジン、フラン、ピロール、およびピリミジンが挙げられる。ヘテロ芳香環の別の例として、ピルジジル（ｐｙｒｄｉｄｙｌ）、ピリダジン（芳香族６員環において２個の窒素原子が近接している）、ピラジン（６員芳香環において２個の窒素が１，４－配置にある）、ピリミジン（６員芳香環において２個の窒素原子が１，３－配置にある）、または１，３，５－トリアジン（６員芳香環において３個の窒素原子が１，３，５－配置にある）が挙げられる。
アリールまたはアリーレンラジカルは、電子吸引性基（たとえば、ハロ、シアノ（－ＣＮ）、ハロアルキル、アミド、ニトロ、ケト（－ＣＯＲ）、アルケニル、アルキニル、第四級アミノ（－Ｎ＋Ｒ３）、エステル、アミド（－ＣＯＮＲ２）、Ｎ－結合型アミド（－ＮＲ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ）、Ｎ－結合型スルホンアミド（－ＮＲ－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ）、スルホキシ（－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ）、スルホネート（Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ）、スルホニル（Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ）、およびスルホンアミド（－Ｓ（＝Ｏ）２－ＮＲ２）から選択される基、ここで、（各）Ｒは、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ２０ヘテロ環式基、またはＣ３～Ｃ２０アリール基から独立に選択され、通常はＣ１～Ｃ６アルキル基である）、非置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシ、および置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシで１または複数回置換されていてもよく、置換アルキルまたはアルコキシは、エーテル、アミノ、一置換もしくは二置換アミノ、環式Ｃ１～Ｃ５アルキルアミノ、イミダゾリル、Ｃ１～Ｃ６アルキルピペラジニル、モルホリノ、チオール、チオエーテル、テトラゾール、カルボン酸、エステル、アミド、一置換もしくは二置換アミド、Ｎ－結合型アミド（－ＮＲ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ）、Ｎ－結合型スルホンアミド（－ＮＲ－Ｓ（＝Ｏ）２－Ｒ）、スルホキシ（－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ）、スルホネート（Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ）、スルホニル（Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ）、スルホキシ（Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ）、スルフィネート（Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ）、スルフィニル（Ｓ（＝Ｏ）Ｒ）、ホスホノオキシ（－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ホスフェート（ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）２）、およびスルホンアミド（－Ｓ（＝Ｏ）２－ＮＲ２）から選択される１個または複数の基で置換されており、（各）Ｒは、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ２０ヘテロ環式基、またはＣ３～Ｃ２０アリール基から独立に選択される。
式（Ｉ）の化合物のトリガー領域は、一般に、第二の環と縮合している（表示のとおりにＹ２およびＹ３部分を含む）芳香環を含む二環式部分を含み、上記第二の環は（Ｙ１、Ｙ４およびＹ５部分を含み、）芳香族でも非芳香族でもよい。
理論に縛られはしないが、たとえばＣＹＰ１Ｂ１によってなされるヒドロキシル化の基質としての式（Ｉ）の化合物の活性は、Ｚ２もしくはＺ４が水素であるとき、またはＹ１－Ｚ１がＣ－Ｈであるときにヒドロキシル化を受けやすいトリガー部分の構造により、ある程度実現され、それ故、Ｚ２およびＺ４が結合している炭素原子およびＹ１（Ｙ１は炭素である）の３つの炭素原子のうちの１箇所でヒドロキシル化が起こると考えられている。図２に示すように、ＳＵ０２５－０４と命名した本発明の代表的化合物におけるこれらの位置のいずれかがヒドロキシル化を受けると、化合物は、これらの位置のどこでヒドロキシル化が起こるかに応じて、１，４－、１，６－、または１，８－脱離のいずれかの脱離過程によって自発的に崩壊する。
式（Ｉ）の化合物の構造から、Ｚ２およびＺ４が結合している炭素原子は、Ｙ１を介してリンカー部分に共役するために、化合物が自発的に分解する３つの機序のいずれもが、化合物のＺ６－Ｙ４－Ｙ５領域の性質とは無関係に起こり得ることに留意される。したがって、以下で論述するように、式（Ｉ）の化合物のこの領域の広範な性質を許容することができる。また、共役の領域の延長は、特に、本明細書に記載の共役Ｘ１部分を使用して達成される。
式（Ｉ）の化合物において、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３によって示される原子はそれぞれ、独立に炭素原子または窒素原子であってよい。当該原子が窒素原子である場合、銘々の置換基（それぞれＺ１、Ｚ３またはＺ５）は存在しない。本発明の特定の実施形態では、Ｙ２またはＹ３が炭素原子である。本発明の特定の実施形態では、Ｙ２およびＹ３が両方とも炭素原子である。これら実施形態のいずれか、すなわち、Ｙ２もしくはＹ３が炭素原子であるか、またはＹ２およびＹ３が炭素原子であるか、あるいはＹ２もＹ３も炭素原子でない実施形態によれば、Ｙ１は、炭素原子であってよい。
置換基Ｚ１、Ｚ２およびＺ４は、一般に請求項１に記載するとおりであってよい。しかし、これら部分の少なくとも１つは、化合物のヒドロキシル化のための部位を見込んで、水素原子とする。本発明の一部の実施形態では、Ｚ２またはＺ４のいずれかが水素である。他の実施形態では、Ｚ２およびＺ４が水素である。これら実施形態のいずれか、すなわち、Ｚ２もしくはＺ４が水素原子であるか、またはＺ２およびＺ４が両方とも水素原子であるか、あるいはＺ２もＺ４も水素原子でない実施形態において、Ｚ１は水素であってよい。本発明の特定の実施形態では、Ｚ１、Ｚ２およびＺ４はそれぞれ、水素原子である。
芳香環上の近接する置換基（すなわち、それぞれＺ２もしくはＺ４、またはＺ３もしくはＺ５）と一緒になったＺ３またはＺ４のいずれかは、これら置換基が結合している芳香環の原子と一緒になって、化合物の残部と縮合した芳香環を形成していてもよい。すなわち、Ｚ２およびＺ３は、Ｚ２が結合している炭素原子、およびＹ２と一緒になって、芳香環を形成していてもよい。同様に、たとえば、Ｚ４、Ｚ５、Ｚ４が結合している炭素原子、およびＹ３が、一緒になって芳香環を形成していてもよい。
本発明の特定の実施形態では、置換基Ｚ２とＺ３、Ｚ３とＺ４、およびＺ４とＺ５の対のうち、一緒に縮合芳香環を形成するものは存在しないか、または２組だけである。したがって、特定の実施形態では、Ｙ２およびＹ３を含む芳香環と縮合している芳香環は存在しない。
詳細には、置換基Ｚ３およびＺ５は通常、式（Ｉ）の化合物の残部と縮合した芳香環の
一部ではない。そうなる場合では、すなわちこれらの部分が個別の置換基である場合では、Ｚ３は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノであってよく、Ｚ５は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノであってよい。本発明の特定の実施形態では、Ｚ３は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノであってよい。
本発明の特定の実施形態では、Ｚ３およびＺ５は、水素原子以外の個別の置換基である。Ｚ３およびＺ５が同じ置換基であるかまたはそうでない場合、Ｚ３およびＺ５は、本発明の特定の実施形態によれば、アルコキシ、アルキルチオキシ、アリールオキシ、アリールチオキシなどの電子供与性基である。本発明の特定の実施形態では、Ｚ３またはＺ５は、両方がアミノまたはアルコキシ、たとえばＣ１～Ｃ６アルコキシである。そのようなアルコキシ基の例として、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ｎ－プロポキシなどが挙げられる。本発明の特定の実施形態では、Ｚ３もしくはＺ５、またはＺ３およびＺ５が、メトキシである。本発明の特定の実施形態では、Ｚ３およびＺ５は、同じものであり、すぐ前で述べた置換基、または置換基群のいずれかである。上述のように、式（Ｉ）の化合物は、Ｚ６－Ｙ４－Ｙ５を含む位置においてその構造が著しく変わり得る。すなわち、Ｙ４は、Ｚ６置換基が存在しない（ｐ＝０）なら酸素、硫黄、スルホキシド、もしくはスルホンでも、窒素（ｐ＝０または１である）でも、またはｐ＝１もしくは２であれば炭素原子でもよい。本発明の特定の実施形態では、ｐ＝０であり、Ｙ４は、酸素、硫黄、スルホン、またはスルホキシドである。本発明の特定の実施形態では、ｐ＝０であり、Ｙ４は、酸素または硫黄である。本発明の特定の実施形態では、ｐ＝０であり、Ｙ４は酸素である。
－Ｙ５－は、（ｉ）単結合（この場合では、この実施形態においてＹ５は事実上存在しないので、トリガー部分は、Ｙ２－およびＹ３－を含んでいる６員芳香環が５員環と縮合したものを主体とする、または（ｉｉ）二重結合＝がＹ４に連結されている＝ＣＨ－の一方であってよい。したがって、本発明のこれらの実施形態では、トリガー部分は、縮合した２つの芳香環で構成され、当業者なら、－Ｙ５－が＝ＣＨ－である場合、Ｙ４は、窒素原子でありｐ＝０であるか、または炭素原子でありｐ＝１であることがわかるであろう。最後に、－Ｙ５－は、（ｉｉｉ）－ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２－でもよく、この場合では、トリガー部分は、Ｙ２およびＹ３で置換されている芳香族６員環と縮合した６員または７員環を含む二環系を含む。本発明の特定の実施形態では、－Ｙ５－の選択肢（ｉｉ）および（ｉｉｉ）において指定した唯一または１個もしくは複数の水素または水素原子は、Ｚ１１部分、たとえば、アルキルまたはハロ部分で置き換えられていてもよい。本発明の特定の実施形態では、Ｚ１１は存在しない。本発明の特定の実施形態では、－Ｙ５－は単結合であり、たとえば、ｐ＝０でありＹ４は酸素、硫黄、スルホン、またはスルホキシド、ｐ＝０でありＹ４は酸素または硫黄、特にｐ＝０でありＹ４は酸素である。
ここでリンカー部分ＣＨ（Ｚ７）－Ｘ１－Ｘ２について述べる。
Ｚ７は、水素であるか、またはアルキルもしくはアリール基であり、このアルキルもし
くはアリール基は本発明の特定の実施形態では置換されていない。本発明の特定の実施形態では、唯一のＺ７または各々のＺ７が、アルキル基、たとえば、非置換Ｃ１～Ｃ６アルキル基などの非置換アルキル基である。Ｚ７部分の例として、メチルおよびエチルが挙げられる。本発明の特定の実施形態では、Ｚ７＝水素となって、－ＣＨ（Ｚ７）－がメチレンになる。他の実施形態では、唯一または各々のＺ７部分が、置換アルキル基、たとえば、置換メチル基またはエチル基である。そのような実施形態の例として、アミノ置換アルキル基、たとえば、モルホリノもしくはピペリジニルアルキル基、または水溶解性を向上させる他の基が挙げられる。あるいは、唯一、各々、または少なくとも１個のＺ７は、任意選択で置換されている、ピリジルなどのヘテロアリール部分でもよい。
Ｘ１は、様々なリンカー原子または二価のリンカー部分であってよく、たとえば、Ｘ１は、酸素、硫黄、スルホンアミド、またはスルホネートエステルであってよい。加えて、Ｘ１は、エタン－１，２－ジイルビス（メチルカルバメート）または共役アルケンメチルオキシ部分でもよい。
共役アルケンメチルオキシ部分とは、式（＝ＣＨ－ＣＨ）ｑ＝ＣＨ－ＣＨ２－Ｏ－［式中、ｑは、０～６の整数、たとえば０～３、たとえば０または１である］の部分を意味する。当業者なら、アルケンメチルオキシ部分中に示される酸素原子は、硫黄原子で置換されているもの（ＳＯ２－ＯまたはＳＯ２ＮＺ１０部分）でもよく、それによって上文で列挙した共役アルケンメチルスルホネートまたは共役アルケンメチルスルホンアミド部分となり、酸素もしくは硫黄原子、またはスルホンアミド部分のスルホネート（ＳＯ２－ＯおよびＳＯ２－ＮＺ１０）が、Ｘ２、またはこれが存在しないならエフェクターに結合していることは理解される。
本発明の特定の実施形態によれば、Ｘ１は、酸素または硫黄である。本発明の多くの実施形態では、Ｘ１は酸素である。
Ｘ２は、存在しないか、またはＸ１とエフェクター部分の間に挿入される、取捨選択可能な追加のリンカー部分である。
Ｘ２は、本明細書に記載の様々な部分から構成されていてもよく、存在しなくともよい。本発明の特定の実施形態では、Ｘ２は存在しないか、またはＸ１－Ｘ２－エフェクターが、
Figure 2023038370000005
 のうちの一方になる。
たとえば、Ｘ２は、アリーレン－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３部分（以下では－ＡｒＣＨ（Ｚ７）Ｘ３－部分）および／またはアミド部分を含むものであってよい。存在する場合では、－Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３－部分は、１つまたは２つのアミドまたはチオアミド基（Ｃ（Ｚ９）ＮＨ）を側面に有してよい。１個のアミドまたはチオアミド基を側面に有する場合、その基は、－Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３部分のＸ１部分と芳香環の間に直接配置されても（ｎ＝１である）、またはＸ３とエフェクター部分の間に挿入されてもよい（ｍ＝１である）。あるいは、アミドまたはチオアミド基は、これらの位置の両方に存在しても、どちらにも存在しなくてもよい。本発明の特定の実施形態では、ｎ＝０でありｍ＝１である。Ｘ２が－Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３－部分を含むとき、これが１つまたは２つのアミドまたはチオアミド部分を側面に有していてもいなくても、芳香環に直接またはアミドもしくはチオアミド部分を介して間接的に結合しているＸ１部分は、芳香環における２通りの位置、すなわち、－Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３系のＣＨ（Ｚ７）Ｘ３部分に対してオルトまたはパラ位のいずれかで結合していてよい。Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３－部分を含むＸ２部分の芳香環においてこれらの結合点を巧みに配置すると、エフェクター分子の１，４－、１，６－、または１，８－脱離が可能になる。Ｘ２の特定の実施形態において存在するアリーレン基は、ヘテロ芳香族であってよい、換言すれば、１個または２個または原子Ｙ６が窒素原子であり、残りの原子が炭素原子であってよいことは理解される。そのようなヘテロアリーレン部分の例は、１個のＹ６が窒素原子であるピリジレンである。本発明の多くの実施形態では、各Ｙ６は、存在する場合、炭素原子である。
Ｘ２部分中にアリーレン基が存在するとき、アリーレン基は、（アリーレン基を式（Ｉ）の化合物のエフェクターおよびトリガー末端に連結しない）４箇所の位置のいずれかが、請求項１に記載のとおりに独立に選択されたものであってよい置換基Ｚ８によって、示されるとおりに置換されていてもよい。
Ｘ２が１つまたは複数のアミドまたはチオアミド部分－ＣＨ（Ｚ９）ＮＨを含む場合では、通常、存在する場合、（各）Ｚ９は酸素であり、それによって１つまたは複数のアミ
ド部分となるが、２個以上のＺ９が存在する場合では、各Ｚ９は、独立に選択されたものであってよい。
最後に、式（Ｉ）の化合物のエフェクター部は、細胞、通常はＣＹＰ１Ｂ１が発現される細胞に目的の所望の効果をもたらす部分である。エフェクター構成部は、式（Ｉ）の化合物から遊離したとき、薬理学、診断、またはスクリーニングの機能を有する任意の分子であってよい。薬理学的機能または診断機能とは、エフェクター構成部が、遊離したとき、その遊離が起こる細胞に認識可能な薬理学的または診断上の効果をもたらすことを意味する。
当業者には、式（Ｉ）の化合物中のエフェクター構成部（エフェクター）は、遊離したとき、Ｘ１の一部、たとえば酸素または硫黄原子、またはＸ２の一部、たとえばＸ３、たとえば酸素または硫黄原子としての本明細書に記載の原子を含んでもよいことが理解される。しかし、式（Ｉ）の化合物のトリガー、リンカー、およびエフェクター部分の区別は、本発明の化合物の説明を単に補助するためになされることは言うまでもなく、当業者なら、本発明の化合物中のエフェクター部分は、ヒドロキシル化によって誘発される分解を受けて遊離するエフェクター分子の大部分を構成するが、遊離するエフェクター分子中の原子の１個またはいくつかは、Ｘ１、Ｘ１またはＸ２の一部であると本明細書に記載の原子によって、また実際には他の場所（たとえば、水分子から取り上げられた水素原子）で提供されてもよいことは承知される。あるいは、エフェクター分子は、式（Ｉ）の化合物の残部に、たとえばケトまたはホルミル基を介して結合していてもよい。
エフェクター分子は、薬理学的効果を有する場合、たとえば、それを遊離させる働きをする細胞（たとえば、ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞）に対して細胞増殖抑制性効果または細胞傷害性効果を有する任意の化学物質であってよい。公知のように、細胞傷害性分子は、細胞に対して有毒な分子であるのに対し、細胞増殖抑制剤は、細胞の増殖および／または複製を抑制する分子である。
本発明の特定の実施形態では、エフェクター分子は、細胞傷害剤である。使用することのできる細胞傷害剤の例として、限定はしないが、アルキル化剤、有糸分裂阻害剤、葉酸代謝拮抗薬、代謝拮抗薬、ＤＮＡ傷害剤、および酵素阻害剤（たとえば、チロシンキナーゼ阻害剤）が挙げられる。考えられる細胞傷害性薬物部分の具体例としては、限定はしないが、ビス（ハロエチル）ホスホロアミデート、シクロホスファミド、ゲムシタビン、シタラビン、５－フルオロウラシル、６－メルカプトプリン、カンプトテシン、トポテカン、ドキソルビシン、ダウノルビシン デュオカルマイシン、エトポシド、デュエトポシド（ｄｕｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、コンブレタスタチンＡ－４、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ＡＱ４Ｎ、ヒドロキシ尿素、メイタンシン、エンジイン（ｅｎｅｄｉｙｅｎｅ）、エポチロン、タキサン、ブレオマイシン、カリケアマイシン、コルヒチン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、エピルビシン、エピルビシン誘導体、フルダラビン、ヒドロキシ尿素ペンタトスタチン（ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａｐｅｎｔａｔｏｓｔａｔｉｎ）、メトトラキセート（ｍｅｔｈｏｔｒａｘａｔｅ）、マイトマイシン、ミトキサントロン、カルボプラチン、シスプラチン、タキセル、６－チオグアニン、ビンカアルカロイド、白金配位錯体、アントラセンジオン、置換尿素、メチルヒドラジン誘導体、およびナイトロジェンマスタードが挙げられる。
本発明の特定の実施形態では、エフェクター分子は、ホスホラミドマスタード、すなわち、リン酸のヒドロキシル基の１個または２個、通常は２個が、ナイトロジェンマスタード、または酸素もしくは硫黄を含んでいるその類似体と交換され、場合によりＰ（＝Ｏ）がＰ（＝Ｓ）で置き換えられているリン酸誘導体である。ナイトロジェンマスタードとは、本明細書では、硫黄原子が窒素原子で置き換えられ、場合により、１本のクロロエチル
（Ｃｈｌｏｒｅｔｈｙｌ）側鎖が水素原子もしくはアルキル基で置き換えられ、または一方もしくは両方の末端クロロ置換基が、ブロモ、ヨード、メシレート（－ＯＳＯ２ＣＨ３）などの脱離基で置き換えられている、構造的にはマスタードガス（１，５－ジクロロ－３－チアペンタン）と関連した非特異的アルキル化アミンであると定義される。ホスホラミドマスタードの例としては、ホスホラミドマスタード（ＰＭ）およびイソホスホラミドマスタード（ＩＰＭ）として知られる化合物が挙げられる。
Figure 2023038370000006
 したがって、化合物ＰＭは、ヒドロキシル基の１つがナイトロジェンマスタードと交換されている（他のヒドロキシル基はアミノ基（ＮＨ２）と交換されている）リン酸の誘導体であるとみなしてよいので、ホスホラミドマスタードとして知られる化合物の一例、ならびに部類名であることは留意されたい。
エフェクター分子が、リン酸誘導体のヒドロキシル基の１個または２個、通常は２個が、酸素または硫黄を含んでいるナイトロジェンマスタード類似体と交換されているホスホラミドマスタードである、本発明の実施形態では、ホスホラミドマスタードは、ナイトロジェンマスタードが、一方のクロロエチルアームが存在せず、窒素原子が硫黄または酸素原子と交換されている類似体で置き換えられている、ホスホラミドマスタードの類似体を意味する。
本発明の特定の実施形態では、エフェクター分子は、化合物の残部に酸素または硫黄原子を介して連結されており、－エフェクターは、次式（ＩＩ）のもの
Figure 2023038370000007
 （式中、
Ｚ１２は、酸素または硫黄であり、
各Ｘ４は、独立に、酸素、硫黄、またはＮＺ１３であり、各－Ｚ１３は、独立に、－（ＣＨ２）２－Ｚ１４、－アルキル、または－水素であり、
各Ｚ１４は、独立に、クロロ、ブロモ、ヨード、またはメシレートである）である。
本発明の特定の実施形態では、Ｚ１２は酸素である。これらおよび他の詳細な実施形態において、各Ｘ４は同じものである。これらおよび他の詳細な実施形態において、各Ｘ４はＮＺ１３である。これらおよび他の詳細な実施形態において、各Ｚ１３は水素である。
本発明のこれらおよび他の詳細な実施形態において、各Ｚ１４は、同じものであり、かつ／またはブロモもしくはクロロである。本発明の特定の実施形態では、存在する各Ｚ１４（２個、３個、または４個のＺ１４部分となり得る）は、ブロモである。
あるいは、エフェクター分子は、たとえばＣＹＰ１Ｂ１が発現される腫瘍を識別し、またはその性質をより十分に理解するのを可能にする診断の機能を果たすものでもよい。診断用分子である部類のエフェクター分子の一例は、フルオロフォア分子である。これらは、癌性細胞の診断において有用であり得る。フルオロフォア化合物の例としては、クマリン、レゾルフィン、フルオレセイン、およびローダミンが挙げられ、実際に、クマリンをエフェクター分子として含む本発明の化合物で実施した幾例かの実験を通して、本発明の実現性が実証された（以下の実施例の部を参照されたい）。
すなわち、エフェクターが診断機能を果たす式（Ｉ）の化合物は、診断方法において役立てることができ、そうした方法は、本発明の別の態様を構成することがわかる。したがって、本発明は、増殖性状態、たとえば、前悪性または悪性の細胞増殖、癌、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害、またはアテローム性動脈硬化症（ａｒｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、たとえば、膀胱、脳、乳房、結腸、頭頸部、腎臓、肺、肝臓、卵巣、前立腺、および皮膚の癌から選択される増殖性状態の診断方法において使用するための、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を提供し、前記方法は、そのような増殖性状態に罹患しているまたはその疑いのある被験体に一定量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を投与するステップと、被験体における遊離したエフェクター分子の分布をモニターし、それによって診断がなされるようにするステップとを含む。
あるいは、エフェクターは、ＣＹＰ１Ｂ１およびそのアレル改変体によって活性化されたとき切断されるトリガーとリンカーの組合せを特定するために、たとえば、モデルプロドラッグライブラリーコレクションの一環として、スクリーニングの機能を果たすものでもよい。エフェクター分子の部類の一例は、フルオロフォア分子である。フルオロフォア化合物の例としては、周知のクマリン、レゾルフィン、フルオレセイン、およびローダミンが挙げられる。実際に、クマリンをエフェクター分子として含む本発明の化合物で実施した幾例かの実験を通して、本発明の実現性が実証された（以下の部の実施例１を参照されたい）。すなわち、エフェクターがスクリーニング機能を果たす式（Ｉ）の化合物は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されるプロドラッグの設計および合成のために、トリガーとリンカーの組合せを特定するのに役立てることができ、そうした方法は、本発明の別の態様を構成することがわかるであろう。
したがって、エフェクターがモデルプロドラッグライブラリーコレクションの一環としてスクリーニング機能を果たす式（Ｉ）の化合物を、チトクロムＰ４５０基質予測モデルと組み合わせて使用して、たとえば、ＣＹＰ１Ｂ１、およびＣＹＰ１Ｂ１＊３などのそのアレル改変体に対して選択性を有するプロドラッグの設計および合成を先導できることは納得がいく。明瞭にする目的で、モデルプロドラッグライブラリーを基質予測モデルと組み合わせることは、基本の設計原理であるＣＹＰ１Ｂ１によるプロドラッグの活性化および切断に、基質特異性を結び付けるものである。したがってさらに、エフェクターがスクリーニング機能を果たす式（Ｉ）の化合物をチトクロムＰ４５０基質予測モデルと組み合わせて使用して、ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、およびＣＹＰ３Ａ４を例とする正常組織チトクロムＰ４５０によって活性化されないプロドラッグの設計および合成を先導できることも納得がいく。基質予測モデルの例は、限定はしないが拡張連結性フィンガープリントなどの記述子による谷本の類似性探索をベースとするＧａｕｓｓｉａｎ Ｋｅｒｎｅｌ重み付きｋ－ＮＮアルゴリズムである。プロドラッグ設計のためのチトクロムＰ４５０基質予測モデルは、構造が多様な化合物コ
レクションのチトクロムＰ４５０ ＨＴＳから得られた生物活性データベースにおいて構築することができる。実際に、ＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルと組み合わせて使用するエフェクター分子としてクマリンを含む本発明の化合物で実施した幾例かの実験を通して、本発明の実現性が実証された（実施例１および２を参照されたい）。
あるいは、エフェクターは、癌および他の増殖性状態において過剰発現されるＣＹＰ１Ｂ１および／または他のチトクロムＰ４５０ならびにそのアレル改変体によって活性化されたとき切断されるトリガーとリンカーの組合せを特定するために、モデルプロドラッグライブラリーコレクションの一環としてスクリーニング機能を果たすものでもよい。エフェクター分子の部類の一例は、フルオロフォア分子である。フルオロフォア化合物の例として、クマリン、レゾルフィン、フルオレセイン、およびローダミンが挙げられる。癌において過剰発現される、ＣＹＰ１Ｂ１以外のチトクロムＰ４５０の例としては、ＣＹＰ２Ａ／２Ｂ、ＣＹＰ２Ｆ１、ＣＹＰ２Ｒ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｕ１、ＣＹＰ２Ｗ１、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７、ＣＹＰ４Ｚ１、ＣＹＰ２６Ａ１、およびＣＹＰ５１が挙げられる。
したがって、エフェクターがモデルプロドラッグライブラリーコレクションの一環としてスクリーニング機能を果たす式（Ｉ）の化合物を、チトクロムＰ４５０基質予測モデルと組み合わせて使用して、癌および他の増殖性状態において過剰発現されるＣＹＰ１Ｂ１および／または他のチトクロムＰ４５０ならびにそのアレル改変体に対して選択性を有するプロドラッグの設計および合成を先導できることは納得がいく。エフェクター分子の部類の一例は、フルオロフォア分子である。フルオロフォア化合物の例として、クマリン、レゾルフィン、フルオレセイン、およびローダミンが挙げられる。癌において過剰発現される、ＣＹＰ１Ｂ１以外のチトクロムＰ４５０の例としては、ＣＹＰ２Ａ／２Ｂ、ＣＹＰ２Ｆ１、ＣＹＰ２Ｒ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｕ１、ＣＹＰ２Ｗ１、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７、ＣＹＰ４Ｚ１、ＣＹＰ２６Ａ１、およびＣＹＰ５１が挙げられる。基質予測モデルの例は、限定はしないが拡張連結性フィンガープリントなどの記述子による谷本の類似性探索をベースとするＧａｕｓｓｉａｎ Ｋｅｒｎｅｌ重み付きｋ－ＮＮアルゴリズムである。プロドラッグ設計のためのチトクロムＰ４５０基質予測モデルは、構造が多様な化合物コレクションのチトクロムＰ４５０ ＨＴＳから得られた生物活性データベースにおいて構築することができる。
エフェクターがスクリーニング機能を果たす本発明の態様および実施形態によれば、たとえば、本発明の第７の態様によれば、一組の化合物は、通常は複数種の化合物を含み、たとえば、少なくとも１０種、たとえば少なくとも２０種の化合物を含む。特定の実施形態では、一組は、１００種、１０００種、１０，０００種、またはさらには１００，０００種までの化合物を含んでよい。このような一組の化合物の類、すなわち、エフェクターがフルオロフォアである、本発明の第１の態様による複数種の化合物の類、ならびにエフェクターがそう限定されず、かつ／または化合物が薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物でもよい他の複数種の化合物の類は、本発明のさらに別の態様を構成する。
本発明の第７の態様の実施形態によれば、化合物がステップ（ａ）ではフルオロフォアを遊離させるが、ステップ（ｂ）では遊離させないか、またははるかに少ない程度にしか遊離させない場合では、これは、Ｐ４５０酵素が、通常、ステップ（ａ）において、ステップ（ｂ）と比べて少なくとも１０倍、たとえば少なくとも２０倍の前記フルオロフォアを遊離させることを意味する。
たとえば本発明の第７の態様の実施形態によるスクリーニングによって、ヒット、たとえば、また通常は、ステップ（ａ）ではフルオロフォアを遊離させるが、ステップ（ｂ）
では遊離させないか、またははるかに少ない程度にしか遊離させない化合物が得られた場合、本発明の第７の態様の方法は、追加の、
（ｄ）フルオロフォアが、前記チトクロムＰ４５０酵素の活性部位に結合する薬理学的機能を有する分子で置き換えられていることを除き、ステップ（ｃ）で特定した化合物と構造が同一である化合物のモデルを作製するステップと、
（ｅ）前記チトクロムＰ４５０酵素の基質であると予測されている、ステップ（ｄ）でモデルを作製した化合物を合成するステップと
を場合により含む。
あるいは、これらのステップ（（ｄ）および（ｅ））は、本発明の第７の態様の必須ステップ（すなわち（ａ）～（ｃ））とは別個に実施して、本発明のさらに別の実施形態を構成してもよい。
通常、チトクロムＰ４５０酵素は、ＣＹＰ１Ｂ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｗ１、ＣＹＰ４Ｚ１、およびこれらのアレル改変体、たとえば、ＣＹＰ１Ｂ１およびそのアレル改変体、たとえばＣＹＰ１Ｂ１からなる群から選択される。
本発明の一態様は、切除した癌標本に由来するｉｎ ｖｉｔｒｏ早期継代（回数＜２０）のヒト原発性腫瘍細胞系の使用である。以下の実施例４および５に記載の原発性頭頸部扁平上皮癌細胞系ＵＴ－ＳＣＣは、ｍＲＮＡおよびタンパク質レベルでＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現する細胞系であり、免疫不全マウス（たとえば、ヌードマウスまたは重症複合型免疫不全ＳＣＩＤマウス）の皮下に高い生着率で移植されて、チトクロムＰ４５０タンパク質発現の構成的な発現が、患者における元々の腫瘍の発現と一致する、ヒト原発性腫瘍異種移植片を生成することができる。したがって、こうしたヒト原発性腫瘍異種移植片モデルは、チトクロムＰ４５０のｍＲＮＡ／タンパク質発現を元々の患者の腫瘍と同様に維持することにより、癌治療において、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である、本発明の化合物の有効性の評価に使用することができる。さらに、臨床においては、こうしたヒト原発性腫瘍異種移植片モデルを使用して、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である本発明の化合物の反応が、臨床的な反応および成果と相関し、個人化された化学療法に有用であることが示されるかチェックすることができる。またヒト原発性腫瘍モデルを使用して、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である、請求項１の化合物の有効性を、標準の化学療法治療計画と比較し、したがって単独または他の化学療法薬と組み合わせた請求項１の化合物にとって最も有効な治療計画を割り出すことができる。
さらに、本発明の一環として、患者から直接切除して採取した腫瘍組織を直接埋め込み、たとえばヌードマウス、ＳＣＩＤマウス、および非肥満糖尿病／重症複合型免疫不全（ＮＯＤ／ＳＣＩＤ）マウスの皮下に埋め込むことにより、ヒト原発性腫瘍異種移植片を得ることが可能である。元々の腫瘍の組織学的および遺伝学的特徴を保持し、そういうものとしてＣＹＰ１Ｂ１ ｍＲＮＡ／タンパク質を元々の腫瘍と同様のレベルで構成的に発現する、一定範囲の異なる癌の初代ヒト原発性腫瘍異種移植片を作製することが可能である。したがって、こうしたヒト原発性腫瘍異種移植片モデルは、ＣＹＰ１Ｂ１ ｍＲＮＡ／タンパク質発現を元々の患者の腫瘍と同様に維持することにより、癌治療において、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である、本発明の化合物の有効性の評価に使用することができる。さらに、臨床においては、こうしたヒト原発性腫瘍異種移植片モデルを使用して、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である請求項１の化合物の反応が、臨床的な応答および転帰と相関し、個人向けとされた化学療法に有用であることが示されるかチェックすることができる。またヒト原発性腫瘍モデルを使用して、エフェクター部分が薬理活性を有する薬剤である、本発明の化合物の有効性を、標準の化学療法治療計画と比較し、したがって単独または他の化学療法薬と組み合わせた本発明の化合物にとって最も有効な治療計画を割り出すことができる。
本発明の第８の態様に従って、癌が、その起源である腫瘍または癌によるレベルと同様のレベルで前記チトクロムＰ４５０酵素を発現する腫瘍または癌から直接採取した組織に由来する早期継代細胞系からの細胞を埋め込んだ結果として生じたものである場合では、その起源である腫瘍または癌のレベルから１０％の範囲内、たとえば５％の範囲内であるなら、レベルが同様であるとみなしてよい。
本発明による使用では、本明細書に記載の化合物または生理的に許容されるその塩、溶媒和物、エステル、もしくはアミドは、化合物または生理的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは生理的機能を有する他の誘導体と共に、それのための１種または複数の薬学的に許容される担体を含み、場合により他の治療的および／または予防的成分も含む医薬製剤としてもたらされてもよい。任意の（１種または複数の）担体は、製剤の他の成分と適合性があり、その受容者にとって有害でないという意味で許容されるものである。
本発明による化合物の生理的に許容される塩の例として、酢酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、ピルビン酸、シュウ酸、フマル酸、オキサロ酢酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、コハク酸などの有機カルボン酸；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸；および塩化水素酸、硫酸、リン酸、スルファミン酸などの無機酸と形成される酸付加塩が挙げられる。
生理的に許容されるエステルまたはアミド、特にエステルの決定は、十分に当業者の技量の範囲内にある。
記載する使用／方法のいずれか１つにおいて使用することのできる、本明細書に記載の化合物の対応する溶媒和物を調製し、精製し、および／または取り扱うことが好都合であり、または望ましい場合もある。溶媒和物という用語は、本明細書では、化合物または化合物の塩などの溶質と溶媒の複合体を指すように使用される。溶媒が水であるなら、溶媒和物は、水和物、たとえば、基体１分子あたりの存在する水分子の数に応じて、一水和物、二水和物、三水和物などと呼ぶことができる。
本発明の化合物は、種々の立体異性体形態で存在してもよく、上で規定した本発明の化合物は、鏡像異性体およびラセミ混合物を含めたすべての立体異性体形態およびその混合物を包含することは承知される。本発明は、その範囲内に、このような任意の立体異性体形態または立体異性体の混合物（式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の個々の鏡像異性体、ならびにそうした鏡像異性体の完全または部分的なラセミ混合物を含む）の使用を包含する。
本明細書に記載のプロドラッグなどの抗癌プロドラッグは、腫瘍標的化ペプチド、たとえば、ファージディスプレイによるペプチドライブラリーの開発を経て特定された小ペプチドなどの腫瘍標的化部分（例えば、腫瘍標的化ペプチド）を取り付けることにより、特定の腫瘍を標的にできることも、当業者には理解される。そのようなペプチドまたは他の部分は、それを含むコンジュゲートを、特定の癌、特に固形腫瘍に導く助けとなり得る。したがって、そのようなコンジュゲート、すなわち腫瘍標的化部分に結合させた本発明の化合物の提供は、本発明の別の態様となり、そのようなコンジュゲートを含む、またはその使用を包含する本明細書に記載の組成物、使用、および方法も同様である。
本発明の化合物は、当業界で容易に利用可能な試薬および技術、および／または以下で記載する例示的な方法を使用して調製することができる。本発明の化合物は、ＣＹＰ１Ｂ１酵素を発現する細胞において細胞傷害性を示すが、ＣＹＰ１Ｂ１を発現しない正常細胞
では実質的に毒性でないことが判明している。本発明の化合物は、ＣＹＰ１Ａ１酵素を発現する細胞でも細胞傷害性を示し得る。したがって、実際には、本発明の化合物は、（通常はＣＹＰ１Ｂ１によって）細胞傷害剤に変換される非毒性のプロドラッグである。
本発明の化合物は、細胞傷害性ＩＣ５０値が、以下で規定するとおりか、または１０μＭ未満、有利な例では５μＭ未満、たとえば、１．０μＭ未満または０．５μＭ未満であることが適切である。
一部の実施形態では、本発明の化合物の細胞傷害性は、種々の段階希釈の化合物を、ＣＹＰ１Ｂ１を発現するように操作した細胞と共にインキュベートすることにより測定できる。適切な例では、前記細胞は、組み換え型ＣＹＰ１Ｂ１およびチトクロムＰ－４５０還元酵素（ＣＰＲ）を含んでいてもよい、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞であってよい。ヒトＰ－４５０還元酵素と同時発現される場合、高レベルの機能性酵素は、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）遺伝子増幅を使用して実現することができる。通常、操作された細胞を、化合物と共にインキュベートし、適度な時間（たとえば、９６時間）経過後、適切なアッセイ試薬と共にさらに（たとえば、１．５時間）インキュベートして、培養物中の生存細胞の数を表示させることができる。適切なアッセイ試薬は、細胞による生体還元を受けて組織培養培地に可溶性であるホルマザン産物となる、ＭＴＳ（以下を参照されたい）である。ホルマザン産物の吸光度は、５１０ｎｍで直接測定することができ、４９０ｎｍまたは５１０ｎｍでの光吸収の量によって測定される定量的なホルマザン産物は、培養物中の生存細胞の数に正比例する。本発明による化合物のＩＣ５０値を決定する詳細な方法は、以下の実施例３に記載する。
比較として、本発明の化合物のＩＣ５０値は、ＣＹＰ１Ｂ１を含んでいない細胞（たとえば、チャイニーズハムスター卵巣細胞）、たとえば、野生型ＣＨＯ細胞でも測定することができる。本発明の化合物は、適切な例では、ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞に対する選択性倍率が少なくとも２００であってよく、ここで「選択性倍率」とは、ＣＹＰ１非発現細胞における所与の化合物のＩＣ５０値と、ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞における同じ化合物のＩＣ５０値の比率であると定義される。
一部の実施形態では、本発明の化合物の細胞傷害性は、実施例４に記載するように、種々の段階希釈の化合物を、頭頸部扁平上皮癌患者に由来する原発性頭頸部腫瘍細胞と共にインキュベートして測定することもできる。
一部の実施形態では、実施例５に記載するように、ＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現する原発性頭頸部扁平上皮癌腫瘍細胞をヌードマウスの側腹部の皮下に埋め込んで、ヒト原発性腫瘍異種移植片モデルを作製し、プロドラッグ治療が腫瘍成長に与える効果を測定することにより、本発明の化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの有効性を測定することもできる。
そのため、本発明はまた、ヒトまたは動物身体の治療による処置、特に、本発明の特定の実施形態においてＣＹＰ１Ｂ１を発現する細胞を特徴とする増殖性状態を含めて、ヒトおよび非ヒト動物における、たとえば増殖性障害や増殖性疾患などの増殖性状態の治療または予防において使用するための、前述の薬学的に許容されるエステル、アミド、塩、溶媒和物、およびプロドラッグを含めた本発明の化合物の１種または複数の使用も包含する。より詳細には、本発明は、本発明の特定の実施形態においてＣＹＰ１Ｂ１発現を特徴とする癌を治療するための、本発明の化合物の１種または複数の使用を包含する。
「増殖性状態」とは、本明細書では、ｉｎ ｖｉｔｒｏであろうとｉｎ ｖｉｖｏであろうと、腫瘍性または過形成性増殖などの、所望されない過度または異常な細胞の好ましくないかまたは制御されない細胞増殖を特徴とする疾患または障害を意味する。増殖性状
態の例は、悪性新生物および腫瘍、癌、白血病、乾癬、骨疾患、（たとえば結合組織の）線維増殖性障害、ならびにアテローム性動脈硬化症を含めた前悪性および悪性の細胞増殖である。
前記増殖性状態は、本発明の特定の実施形態においてＣＹＰ１Ｂ１を発現する細胞を特徴とするものであってよい。
前記増殖性状態は、膀胱、脳、乳房、結腸、頭頸部、腎臓、肺、肝臓、卵巣、前立腺、および皮膚の癌から選択されるものであってよい。一部の実施形態では、前記増殖性状態は、固形腫瘍を含んでよい。
「治療」とは、本明細書では、ヒトが被験体であろうと（たとえば、獣医学的適用において）非ヒト動物が被験体であろうと、増殖性状態に対して多少の所望の治療効果、たとえば、進行速度の減速、進行速度の停止を含めた障害の進行の阻止、障害の回復、または状態の治癒が実現される、治療による処置を意味する。予防手段としての治療も含まれる。本明細書では、本明細書における予防または予防法への言及は、状態の完全な予防を示唆または要求せず、その代わりとして、状態の発現は、本発明による予防または予防法によって軽減させるか、または遅らせることができる。「治療有効量」とは、本明細書では、妥当な利益／リスク比に応じた、そのような治療効果を生み出すのに有効である、１種もしくは複数の本発明の化合物、またはその１種もしくは複数の化合物を含む医薬製剤の量を意味する。
したがって、本発明の化合物は、抗癌剤として使用されるものであってよい。用語「抗癌剤」とは、本明細書では、癌を治療する化合物（すなわち、癌治療において有用である化合物）を意味する。本発明の化合物の抗癌効果は、細胞増殖の調節、血管新生の阻害、転移の阻止、浸潤の阻止、またはアポトーシスの促進を含めた１つまたは複数の機序によって生じるものであってよい。
本発明の化合物の適切な投与量は、患者により様々に変わり得ることは承知される。最適な投与量の決定には、本発明の治療の何らかのリスクまたは有害な副作用に対する治療利益のレベルのバランスを取ることが一般に必要となる。選択される投与量レベルは、特定の化合物の活性、投与経路、投与時期、化合物の排泄率、治療期間、組み合わせて使用する他の薬物、化合物、または材料、ならびに患者の年齢、性別、体重、状態、全身の健康、および既往歴を含めた様々な要素に応じて決まる。（１種または複数の）化合物の量および投与経路は、最終的には医師の裁量に任せられるが、投与量は一般に、所望の効果が得られるような作用部位の局所濃度を実現するものとなる。
ｉｎ ｖｉｖｏでの投与は、治療の過程を通して１用量で、連続的に、または断続的に行うことができる。投与の最も有効な手段および投与量を決定する方法は、当業者に周知されており、治療に使用する製剤、治療の目的、治療する標的細胞、および治療を受ける被験体によって様々となる。単回投与または複数回投与を、治療を行う医師によって決定される用量レベルおよびパターンで実施することができる。
医薬製剤には、経口、局所（経皮、頬側、および舌下を含める）、直腸、または非経口（皮下、皮内、筋肉内、および静脈内を含める）、経鼻、およびたとえば吸入による経肺投与に適する製剤が含まれる。製剤は、適切な場合では、別々の投与量単位でもたらされると好都合であり得、薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製することができる。方法は通常、活性化合物を液体担体、細かく砕いた固体担体、またはこれら両方と合わせるステップ、次いで必要なら、製品を所望の製剤に造形するステップを包含する。
経口投与に適する、担体が固体である医薬製剤は、それぞれが予め決められた量の活性化合物を含有する、巨丸剤、カプセル剤、または錠剤などの単位用量製剤としてもたらされることが最も好ましい。錠剤は、場合により１種または複数の副成分と共に圧縮または成形して製造することができる。圧縮錠剤は、粉末や顆粒などの流動性の形態の活性化合物を、場合により結合剤、滑沢剤（ｌｕｂｒｉｃａｎｔ）、不活性希釈剤、滑沢剤（ｌｕｂｒｉｃａｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、界面活性剤、または分散剤と混合して、適切な機械で圧縮することにより調製できる。成形錠剤は、活性化合物を不活性液体希釈剤と共に成形することにより製造できる。錠剤は、場合によりコーティングしてもよく、コーティングしないなら、場合により刻み目を入れてもよい。カプセル剤は、単独または１種または複数の副成分と混和した活性化合物をカプセルの殻に充填し、次いで常法どおりにそれを密封することにより調製できる。カシェ剤は、カプセル剤と似通っており、活性化合物を、（１種または複数の）任意の副成分と一緒に、ライスペーパーの包みに入れて密封する。活性化合物は、たとえば、投与前に水に懸濁させ、または食品に散在させることのできる、分散性顆粒として製剤化してもよい。顆粒は、たとえば小袋に包装することができる。経口投与に適する、担体が液体である製剤は、水性もしくは非水性液体の溶液もしくは懸濁液、または水中油型液体エマルジョンとして与えられることができる。
経口投与用の製剤には、徐放性剤形、たとえば、活性化合物が適切な徐放マトリクス中に製剤化されるか、または適切な徐放フィルムでコーティングされている錠剤が含まれる。そのような製剤は、予防的な使用に特に好都合となる場合がある。
直腸投与に適する、担体が固体である医薬製剤は、単位用量坐剤としてもたらされることが最も好ましい。適切な担体としては、カカオ脂、および当分野で通常使用される他の材料が挙げられる。坐剤は、活性化合物を、軟化または融解させた（１種または複数の）担体と混和した後、型に入れて冷やし、造形することにより好都合に生成できる。
非経口投与に適する医薬製剤としては、活性化合物を水性または油性媒体に溶解または懸濁させた滅菌溶液または懸濁液が挙げられる。
注射用調製物は、大量注射または持続注入に適合させたものであってよい。このような調製物は、製剤の導入後、使用するのに必要となるまで密封される単位用量または複数用量容器中に入れてもたらされることが好都合である。あるいは、活性化合物は、使用前に、発熱物質を含まない滅菌水などの適切な媒体で戻される粉末形態にしてもよい。
活性化合物は、筋肉内注射によって、またはたとえば皮下もしくは筋肉内への埋め込みによって投与することのできる、長時間作用型のデポー調製物として製剤化してもよい。デポー調製物は、たとえば、適切なポリマー材料もしくは疎水性材料、またはイオン交換樹脂を含んでよい。このような長時間作用型製剤は、予防的な使用に特に好都合である。
頬腔からの経肺投与に適する製剤は、活性化合物を含有し、望ましくは直径が０．５～７ミクロンの範囲にある粒子が、受容者の気管支樹の中に送達されるようにもたらされる。
一つの可能性として、このような製剤は、細かく粉砕された粉末形態であり、その粉末は、好都合には、吸入装置に入れて使用するための、たとえばゼラチン製であることが適切な穴開け可能なカプセルに入れてもたらすことも、または別法として、活性化合物と、適切な液体もしくは気体噴射剤と、場合により、界面活性剤および／もしくは固体希釈剤などの他の成分とを含む自己噴射型製剤としてもたらすこともできる。適切な液体噴射剤としては、プロパンおよびクロロフルオロカーボンが挙げられ、適切な気体噴射剤としては、二酸化炭素が挙げられる。活性化合物が溶液または懸濁液の液滴の形で供給される自
己噴射型製剤を用いることもできる。
このような自己噴射型製剤は、当業界で公知のものと類似しており、確立された手順によって調製することができる。こうした製剤は、所望のスプレー特性を有する、手動操作または自動機能の弁を設けた容器に入れてもたらされることが適切であり、弁は、その各動作につき決まった体積、たとえば２５～１００マイクロリットルを送達する、計量式のものであると有利である。
別の可能性として、活性化合物は、加速空気流または超音波撹拌を用いて、吸入用の微細なしぶきの霧を生成する、アトマイザーまたはネブライザーにて使用する溶液または懸濁液の形態にすることもできる。
経鼻投与に適する製剤としては、上で経肺投与について述べた調製物と一般に類似した調製物が挙げられる。このような製剤は、供給されるとき、望ましくは、鼻腔での停留を可能にするために、１０～２００ミクロンの範囲の粒径を有するべきであり、これは適宜、適切な粒径の粉末を使用し、または適切な弁を選択して実現することができる。他の適切な製剤として、鼻の間近で保持した容器から鼻腔路を通して素早く吸入することにより投与される、粒径が２０～５００ミクロンの範囲にある粗い粉末、および水性または油性の溶液または懸濁液中に０．２～５％ｗ／ｖの活性化合物を含む点鼻薬が挙げられる。
上述の医薬製剤は、前述の担体成分に加えて、適切な１種または複数の追加の担体成分、たとえば、希釈剤、緩衝剤、着香剤、結合剤、界面活性剤、贈粘剤、滑沢剤、保存剤（抗酸化剤を含める）等、および製剤を目的の受容者の血液と等張性にする目的で含める物質も含んでよいことは理解されたい。
薬学的に許容される担体は、当業者に周知されており、限定はしないが、０．１Ｍ、好ましくは０．０５Ｍリン酸緩衝液、または０．８％食塩水が含まれる。加えて、薬学的に許容される担体は、水性または非水性の溶液、懸濁液、および乳濁液でもよい。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体としては、食塩水および緩衝媒質を含めて、水、アルコール／水溶液、乳濁液、または懸濁液が挙げられる。非経口媒体としては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースと塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、または固定油が挙げられる。たとえば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなどの保存剤および他の添加剤も存在してよい。
局所製剤に適する製剤は、たとえば、ゲル、クリーム、または軟膏として提供することができる。
また、治療する部位、たとえば創傷または潰瘍に直接スプレーするか、または振りかけることのできる液体または粉末製剤を提供することもできる。あるいは、絆創膏、ガーゼ、メッシュなどの担体に製剤をスプレーし、または振りかけ、次いで治療する部位に適用することもできる。
獣医学で使用する治療製剤は、好都合には、粉末または液体の濃縮形態にすることができる。標準の獣医学的製剤実務によれば、ラクトースやスクロースなどの好都合な水溶性賦形剤を粉末に混ぜて、その物性を向上させることができる。したがって、特に適切な本発明の粉末は、５０～１００％ｗ／ｗ、好ましくは６０～８０％ｗ／ｗの（１種または複数の）活性成分と、０～５０％ｗ／ｗ、好ましくは２０～４０％ｗ／ｗの従来の獣医学用賦形剤とを含む。こうした粉末は、たとえば中間プレミックスとして動物試料に加えてもよいし、または動物の飲用水で希釈してもよい。
本発明の液体濃縮物は、化合物またはその誘導体もしくは塩を適切に含有し、場合により、獣医学的に許容される水混和性溶媒、たとえば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、グリセロールホルマール、またはそうした溶媒に３０％ｖ／ｖまでのエタノールを混合したものを含んでもよい。液体濃縮物は、動物の飲用水に投与することができる。
一般に、１種または複数の本発明の化合物の適切な用量は、１日あたり約１μｇ～約５０００μｇ／被験体体重ｋｇの範囲、たとえば、１日あたり１、５、１０、２５、５０、１００、２５０、１０００、２５００または５０００μｇ／ｋｇであってよい。（１種または複数の）化合物が塩、溶媒和物、またはプロドラッグなどである場合、投与する量は、親化合物をもとに算出することができ、したがって使用する実際の重量は、その分だけ増加し得る。
一部の実施形態では、１種または複数の本発明の化合物を、上述の種類の増殖性状態を治療するための併用療法において、すなわち他の治療薬と共に、使用することができる。そのような他の治療薬の例としては、限定はしないが、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、ＤＮＡ結合剤、および微小管阻害剤（チューブリン標的薬）、たとえば、シスプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、エトポシド、イリノテカン、フルダラビン、５ＦＵ、タキサン、またはマイトマイシンＣが挙げられる。他の治療薬は、当業者には明らかである。活性化合物を他の療法と組み合わせる場合について、２種以上の治療は、個々に様々な投与スケジュールで、異なる経路から施してもよい。
上で挙げた薬剤と本発明の化合物の組合せは、医師の裁量に委ねられることになり、医師は、その通常の一般的知識および当業者に公知の投与計画を用い、投与量を選択することになる。
本発明の化合物を、１種、２種、３種、４種、またはそれ以上、好ましくは１種または２種、好ましくは１種の他の治療薬との併用療法において投与する場合、化合物は、同時に投与しても、逐次投与してもよい。逐次投与するとき、各薬剤は、（たとえば５～１０分間の）短い間隔で、または（たとえば、１、２、３、４時間、もしくはそれ以上の時間を空け、または必要に応じてさらに長い期間を空けた）より長い間隔で投与することができ、厳密な投薬計画は、（１種または複数の）治療薬の性質に相応しいものである。
本発明の化合物は、放射線療法、光力学療法、遺伝子療法、手術、および栄養制限食などの、非化学療法的治療と連携して投与してもよい。
ここで、本発明を、以下の非限定的な実施例に即して例示する。
化合物の調製
一般事項
１Ｈ、１３Ｃ、および３１Ｐ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、表示する溶媒で、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ ５００ＭＨｚまたはＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ３００ＭＨｚのいずれかの分光計によって記録した。化学シフトは、ｐｐｍで表示する。シグナル分裂パターンは、一重線（ｓ）、ブロード一重線（ｂｓ）、二重線（ｄ）、三重線（ｔ）、四重線（ｑ）、多重線（ｍ）、またはこれらの組合せとして記載する。低分解能エレクトロスプレー（ＥＳ）質量スペクトルは、メタノール／水（９５：５）または水
アセトニトリル（１：１）＋０．１％ギ酸のいずれかを移動相として使用し、陽イオンモードで運転するＢｒｕｋｅｒ Ｍｉｃｒｏｔｏｆ質量分析計で記録した。高分解能エレ
クトロスプレー測定は、Ｂｒｕｋｅｒ Ｍｉｃｒｏｔｏｆ質量分析計で実施した。ＬＣ－ＭＳ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ１１００（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ
Ｃｏｌｕｍｎ ５μ Ｃ１８ １１０Å ５０×３．０ｍｍ、溶離液：０～２０％のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ）およびダイオードアレイ検出器に続いて、Ｂｒｕｋｅｒ Ｍｉｃｒｏｔｏｆ質量分析計を用いて実施した。カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（２３０～４００メッシュ）またはＲｅｄｉＳｅｐ（商標）４、１２、４０もしくは８０ｇシリカ充填済カラムを用いて実施した。出発材料はすべて、市販されており、さらに精製することなく使用した。反応はすべて、別段記載しない限り、無水かつ不活性な条件下で実施した。
［括弧付き短剣符
Figure 2023038370000008
 を付した以下に示す化合物は、本発明の実施例ではないが、本発明の実施例をより深く理解するために組み込んでいる。］
１．ホスホロアミデートマスタードプロドラッグ
Figure 2023038370000009
 ホスホロアミデートプロドラッグＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４の合成
１．プロドラッグのトリガー構成部の合成
Figure 2023038370000010
 ２－ブロモ－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（１）
３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（１２．６ｇ、７６ｍｍｏｌ）を酢酸（３５０ｍＬ）に溶解させた。得られた無色の溶液を０℃に冷却した。臭素（３．９ｍＬ）のエタン酸（５０ｍＬ）溶液を１時間かけて滴下した。加え終えたとき、氷浴を取り外し、得られた淡緑色の溶液を室温で終夜撹拌した。溶液に冷水を加えた。得られた白色の固体を真空濾過によって収集し、水ですすいだ。次いで固体をＥｔＯＡｃに再溶解させ、シリカゲルに吸着させた。生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１（１２．５ｇ、６６％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000011
 ２－ヒドロキシ－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（２）
撹拌子、セプタムキャップ、滴下漏斗、温度計、およびアルゴン導入口を備え付けた三口丸底フラスコに、モルホリン（２．０５ｇ、２４ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（４０ｍＬ）を入れた。フラスコをドライアイス－アセトン浴で－５０℃に冷却し、ｎ－ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ、１５ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）を１回ですべて加えた。１０分後、１（４．９ｇ、２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液をシリンジで４分間かけて滴下し、混合物を２０分かけて約－７５℃に冷却した。次いでｎ－ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ、２０ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）を、温度を－７５℃に保ちながら４５分かけて滴下した。ｎ－ＢｕＬｉを全部加えた後、溶液を３５分間撹拌した。ニトロベンゼン（６．９０ｇ、４６ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＴＨＦに溶かした溶液を、温度を－７５℃に保ちながら滴下漏斗から加えた。得られた黒ずんだ混合物を－７５℃で４時間撹拌し、次いで室温に温めた。これを６Ｎ ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、１５分間撹拌した。ブライン（１００ｍＬ）で希釈した後、真空中でＴＨＦを除去した。水溶液をジエチルエーテル（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて２Ｎ ＮａＯＨ（３×４０ｍＬ）で抽出した。ＮａＯＨ抽出物を合わせてジエチルエーテル（３×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで濃ＨＣｌでｐＨ１に酸性化した。得られた混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を合わせてブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、シリカゲルに吸着させた。生成物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：２）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。純粋な２（２．０ｇ、５５％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000012
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（３）
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に２（１．１ｇ、６．０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．０ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（０．９３ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却し
た後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３（１．２ｇ、６７％）を透明な油状物として得た。
Figure 2023038370000013
 ５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－カルバルデヒド（４）
３（１．２ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を酢酸（３５ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を１６時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４（２３０ｍｇ、２８％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000014
 （５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール（５）
化合物４（４６０ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（１０２ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５（３８８ｍｇ、８２％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000015
 ２．プロドラッグのエフェクター構成部の合成
Figure 2023038370000016
 Ｎ，Ｎ－ビス（２－クロロエチル）ホスホンアミド酸（６）
２－クロロエチルアミン塩酸塩（７．２ｇ、６２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１１０ｍＬ）懸濁液に、ＰＯＣｌ３（２．８４ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）を－７８℃で激しく撹拌しながら１５分かけて加えた後、ＴＥＡ（１７．５ｍＬ、１２４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）溶液を４時間かけて加えた。反応混合物を－７８℃で１時間撹拌し、次いで室温に温め、２時間撹拌した。得られた固体を濾過し、冷ＥｔＯＡｃで洗浄した。固体を廃棄した。濾液を真空中で約５ｍＬに濃縮し、ＥｔＯＡｃを加えた（１０ｍＬ）。得られた懸濁液を濾過し、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で洗浄した。固体をここでも廃棄した。濾液を真空中で濃縮乾燥した。次いで残渣をＴＨＦ（７ｍＬ）に溶解させた後、ＮａＢｒ水溶液（１００ｍＬの水中にＮａＢｒ（５ｇ））を０℃で２０分かけて加えた。次いで混合物を室温に温め、水浴に浸して１５時間撹拌した。反応混合物から白色の固体が沈殿した。次いで混合物を冷凍庫で２時間－２０℃に保った。結晶質の固体を濾過し、冷水（２×５０ｍＬ、０℃）および冷ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ、０℃）で洗浄した。真空中にて室温で終夜乾燥させた後、生成物６（１．８ｇ、２６％）が白色の固体として得られた。
Figure 2023038370000017
 Ｎ，Ｎ－ビス（２－ブロモエチル）ホスホンアミド酸（７）
化合物７は、上と同様の方法を使用して合成した。この化合物は、収率１８％（１．６４ｇ）で得られた。
Figure 2023038370000018
 ３．ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４を合成するカップリング反応
Figure 2023038370000019
 ５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチルＮ，Ｎ’－ビス（２－クロロエチル）ホスホロジアミデート（８）ＳＵ０２５－０４
５（３００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）、６（４７９ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）、およびＰＰｈ３（５６５ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に懸濁させた懸濁液に、ＤＩＡＤ（０．４２６ｍＬ、２．１６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。得られた懸濁液を室温に温め、２時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（７０％のアセトンのトルエン溶液）によって精製して、８（２５０ｍｇ、４２％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000020
 ５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチルＮ，Ｎ’－ビス（２－ブロモエチル）ホスホロジアミデート（９）ＳＵ０４６－０４
化合物９（ＳＵ０４６－０４）は、上と同様の方法を使用して合成した。この化合物は、収率２５％（１０ｍｇ）で得られた。
Figure 2023038370000021
 ２．エーテルによりおよびチオエーテルにより連結されたモデルプロドラッグ
Figure 2023038370000022
Figure 2023038370000023
 エーテルによりおよびチオエーテルにより連結されたプロドラッグの合成
７－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１０）ＴＬＥ－Ｍ２－ＳＵ０１０Ａ
Figure 2023038370000024
 ２－（ブロモメチル）ベンゾフラン（１０）
ベンゾフラン－２イルメタノール（１．０ｇ、６．７ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍＬ）に溶解させ、ピリジン（６５３μＬ、８．１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（７６０μＬ、８．１ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。混合物をＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去し、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１０（７８０ｍｇ、５５％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000025
 ７－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１１）ＴＬＥ－Ｍ２－ＳＵ０１０Ａ
ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（７７ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に１０（２００ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１１（３５ｍｇ、１２％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000026
 ７－（（５－フルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１６）ＶＧ０１５－０５
Figure 2023038370000027
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－５－フルオロベンズアルデヒド（１２）
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に２－ヒドロキシ－５－フルオロベンズアルデヒド（５００ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５２４ｍｇ、１３．７９ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（０．６ｍＬ、３．９３ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１２（３００ｍｇ、３３％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000028
 ５－フルオロベンゾフラン－２－カルバルデヒド（１３）
１２（３００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を２４時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１３（１８０ｍｇ、９４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000029
 （５－フルオロベンゾフラン－２－イル）メタノール（１４）
化合物１３（１８０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１２ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（４５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１４（１５０ｍｇ、９１％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000030
 ２－（ブロモメチル）－５－フルオロベンゾフラン（１５）
化合物１４（１５０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）をトルエン（１０ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１０２μＬ、１．０８ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１５（１５０ｍｇ、７２％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000031
 ７－（（５－フルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１６）ＶＧ０１５－０５
ＤＭＦ（３ｍｌ）に０℃でナトリウムエトキシド（８．９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２５．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に１５（３０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１６（９．０ｍｇ、２１％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３２５．２０（Ｍ＋Ｈ）。
７－（（５，７－ジフルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１９）ＶＧ０１６－０５
Figure 2023038370000032
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－３，５－ジフルオロベンズアルデヒド（１７）
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に２－ヒドロキシ－３，５－フルオロベンズアルデヒド（１．０ｇ、６．３２ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（９６０ｍｇ、６．９５ｍｍｏｌ）を含み撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（１．０７ｍＬ、６．９５ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１７（３８０ｍｇ、２２％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000033
 ２－（ブロモメチル）－５，７－ジフルオロベンゾフラン（１８）
１７（３８０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を２４時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物（３００ｍｇ）をＥｔ
ＯＨ（５ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（７３ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣（２８０ｍｇ）をトルエン（２０ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１４２μＬ、１．５２ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１８（２１０ｍｇ、６１％）を得た。
Figure 2023038370000034
 ７－（（５，７－ジフルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（１９）ＶＧ０１６－０５
ＤＭＦ（３ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（８．９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２５．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）－５－フルオロベンゾフラン（３０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１９（８．８ｍｇ、２１％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３４３．１２（Ｍ＋Ｈ）。
７－（（５，７－ジフルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（２２）（ＶＧ０１７－０５）
Figure 2023038370000035
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－５－フルオロ－３－メチルベンズアルデヒド（２０）
ＤＭＦ（８ｍＬ）中に５－フルオロ－２－ヒドロキシ－３－メチルベンズアルデヒド（１．０ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（９８０ｍｇ、７．１０ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（１．１０ｍＬ、７．１５ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を除去した。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶出して、２０（３５０ｍｇ、２０％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000036
 ２－（ブロモメチル）－５－フルオロ－７－メチルベンゾフラン（２１）
２０（３５０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を２４時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物（３００ｍｇ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（７８ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣（２６０ｍｇ）をトルエン（２０ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１３５μＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２１（２００ｍｇ、３６％）を得た。
Figure 2023038370000037
 ７－（（５，７－ジフルオロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（２２）ＶＧ０１７－０５
ＤＭＦ（３ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（８．９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２５．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に２１（３０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２２を白色の固体（１１ｍｇ、２６％）として得た。ｍ／ｚ＝３３．２０（Ｍ＋Ｈ）。
７－（（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（２７）ＶＧ０２７－０５
Figure 2023038370000038
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－５－メトキシベンズアルデヒド（２３）
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中に２－ヒドロキシ－５－メトキシベンズアルデヒド（２．０ｇ、１３．１６ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２．１８ｇ、１５．７９ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（２．４３ｍＬ、１５．７９ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶出して、目的化合物２３（１．１０ｇ、３１％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000039
 ５－メトキシベンゾフラン－２－カルバルデヒド（２４）
２３（１．０ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を１６時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２４（１６０ｍｇ、２４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000040
 （５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール（２５）
化合物２４（３．５ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（２０ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（９５７ｍｇ、２５．８７ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２５（３．０ｇ、８５％）を白色の固体と
して得た。
Figure 2023038370000041
 ２－（ブロモメチル）－５－メトキシベンゾフラン（２６）
化合物２５（４０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をトルエン（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（２１μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２６（４０ｍｇ、７４％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000042
 ７－（（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（２７）ＶＧ０２７－０５
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（３２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に２６（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２７（１７ｍｇ、３０％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３３７．０４（Ｍ＋Ｈ），６７３．１３（２Ｍ＋Ｈ）。
７－（（７－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（３１）ＶＧ０２９－０５
Figure 2023038370000043
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－３－メトキシベンズアルデヒド（２８）
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中に２－ヒドロキシ－３－メトキシベンズアルデヒド（４．０ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４．３６ｇ、３１．６０ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（４．８６ｍＬ、３１．６０ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２８（２．６０ｇ、３６％）を得た。
Figure 2023038370000044
 ７－メトキシベンゾフラン－２－カルバルデヒド（２９）
２８（２．０ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を２４時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２９（４５０ｍｇ、３４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000045
 ２－（ブロモメチル）－７－メトキシベンゾフラン（３０）
化合物２９（４５０ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（１０４ｍｇ、２．８１ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。得られた未精製アルコール残渣をトルエン（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（２４０μＬ、２．５６ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３０（１５０ｍｇ、２４％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000046
 ７－（（７－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（３１）ＶＧ０２９－０５
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（３２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に３０（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３１（１４ｍｇ、２５％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ３３７．０４（Ｍ＋Ｈ），６７３．１３（２Ｍ＋Ｈ）。
７－（（５－ブロモベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（３２）ＶＧ０３５－０４
Figure 2023038370000047
 ７－（（５－ブロモベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（ＶＧ０３５－０４）
ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（７６ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２１５ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、５－ブロモ－２－（クロロメチル）ベンゾフラン（２５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３２（１２０ｍｇ、３１％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000048
 ７－（（５－クロロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（３６）ＶＧ０２８－０５
Figure 2023038370000049
 ５－クロロ－２－（２，２－ジエトキシエトキシ）ベンズアルデヒド（３３）
５－クロロ－２－ヒドロキシベンズアルデヒド（５．０ｇ、３２．１ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４．８７ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍＬ）の撹拌懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（５．４３ｍＬ、３５．３ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶出して、３３（４．１０ｇ、３８％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000050
 ５－クロロベンゾフラン－２－カルバルデヒド（３４）
３３（４．１０ｇ、１５．０７ｍｍｏｌ）を酢酸（２０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を２４時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３４（５５０ｍｇ、２０％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000051
 ２－（ブロモメチル）－５－クロロベンゾフラン（３５）
化合物３４（１６０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（３６ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。得られた未精製アルコール残渣をトルエン（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（９２μＬ、０．９８ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。次いで混合物を室
温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３５（１２８ｍｇ、５７％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000052
 ７－（（５－クロロベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（３６）ＶＧ０２８－０５
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（６０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）－５－メトキシベンゾフラン（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、目的化合物を白色の固体（２．７ｍｇ、３％）として得た。ｍ／ｚ ３４１．１０（Ｍ＋Ｈ）。
７－（（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４２）ＶＧ０３５－０５
Figure 2023038370000053
 ２－ブロモ－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（３７）
３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（１２．６ｇ、７６ｍｍｏｌ）を酢酸（３５０ｍＬ）に溶解させた。得られた無色の溶液を０℃に冷却した。臭素（３．９ｍＬ）の酢酸（５０ｍＬ）溶液を１時間かけて滴下した。滴下が完了したとき、氷浴を取り外し、得られた淡緑色の溶液を室温で終夜撹拌した。溶液に冷水を加えた。得られた白色の固体を真空濾過によって収集し、水ですすいだ。次いで固体をＥｔＯＡｃに再溶解させ、シリカゲル
に吸着させた。生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３７（１２．５ｇ、６６％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000054
 ２－ヒドロキシ－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（３８）
撹拌子、セプタムキャップ、滴下漏斗、温度計、およびアルゴン導入口を備え付けた、乾燥した三口丸底フラスコに、モルホリン（２．０５ｇ、２４ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（４０ｍＬ）を入れた。フラスコをドライアイス－アセトン浴で－５０℃に冷却し、ｎ－ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ、１５ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）を１回ですべて加えた。１０分後、２－ブロモ－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド３７（４．９ｇ、２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液をシリンジで４分間かけて滴下し、混合物を２０分かけて約－７５℃に冷却した。次いでｎ－ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ、２０ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）を、温度を－７５℃に保ちながら４５分かけて滴下した。ｎ－ＢｕＬｉを全部加えた後、溶液を３５分間撹拌した。ニトロベンゼン（６．９０ｇ、４６ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＴＨＦに溶かした溶液を、温度を－７５℃に保ちながら滴下漏斗から加えた。得られた黒ずんだ混合物を－７５℃で４時間撹拌し、次いで室温に温めた。これを６Ｎ ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、１５分間撹拌した。ブライン（１００ｍＬ）で希釈した後、真空中でＴＨＦを除去した。水溶液をジエチルエーテル（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて２Ｎ ＮａＯＨ（３×４０ｍＬ）で抽出した。ＮａＯＨ抽出物を合わせてジエチルエーテル（３×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで濃ＨＣｌでｐＨ１に酸性化した。得られた混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、シリカゲルに吸着させた。生成物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：２）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３８（２．０ｇ、５５％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000055
 ２－（２，２－ジエトキシエトキシ）－３，５－ジメトキシベンズアルデヒド（３９）
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に３８（１．１ｇ、６．０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．０ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を含む撹拌した懸濁液に、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（０．９３ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を４時間還流させた。冷却した後、沈殿を濾別し、真空中で溶媒を蒸発させた。未精製残渣をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶出して、３９（１．２ｇ、６７％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000056
 ５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－カルバルデヒド（４０）
３９（１．２ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を酢酸（３５ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液を１６時間還流させた。冷却した後、溶液を蒸発乾燥させた。粗生成物をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４０（２３０ｍｇ、２８％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000057
 （５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール（４１）
化合物３９（４６０ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（１０２ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分、次いで室温で１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。残渣をシリカゲルに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４１（３８８ｍｇ、８２％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000058
 ７－（（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４２）ＶＧ０３５－０５
化合物４１（１３０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）をトルエン（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（６４μＬ、０．６９ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣を次のステップで使用した。ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（８０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）－５－メトキシベンゾフラン（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４２（２．７ｍｇ、３％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３６７．０５（Ｍ＋Ｈ），７３３．１５（２Ｍ＋Ｈ）。
４－メチル－７－（ナフタレン－１－イルメトキシ）－２Ｈ－クロメン－２－オン（４３）ＴＬＥ－Ｍ１－ＳＵ００１Ａ
Figure 2023038370000059
 １－ナフタレンメタノール（２．０ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍＬ）に溶解させ、ピリジン（１．０２ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１．１９ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。混合物をＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、１－（ブロモメチル）ナフタレン（１．５ｇ、５３％）を無色の油状物として得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１６９ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４３８ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、１－（ブロモメチル）ナフタレン（５００ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４３（２００ｍｇ、２８％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000060
 ４－メチル－７－（ナフタレン－２－イルメトキシ）－２Ｈ－クロメン－２－オン（４４）ＶＧ０４０－０３
Figure 2023038370000061
 ナフタレン－２－イルメタノール（２．０ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍＬ）に溶解させ、ピリジン（１．０２ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１．１９ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで混合物を室温にし、１時間撹拌した。混合物をＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、未精製の１－（ブロモメチル）ナフタレンを得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１６９ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４３８ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、１－（ブロモメチル）ナフタレン（５００ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４４（１．４４ｇ、３６％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000062
 ７－（ベンズヒドリルオキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４５）ＴＬＥ－Ｍ１－ＳＵ００４Ａ
Figure 2023038370000063
 ＤＭＦに０℃でナトリウムエトキシド（１６５ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４２８ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、ジフェニルメチルブロミド（５００ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×３０ｍＬ）、水（２×３０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４５（２００ｍｇ、２９％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000064
 ４－メチル－７－（１－（ナフタレン－２－イル）エトキシ）－２Ｈ－クロメン－２－オン（４６）ＶＧ０３９－０３
Figure 2023038370000065
 １－（ナフタレン－２－イル）エタノール（２．０ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍＬ）に溶解させた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１．０９ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。混合物をＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、未精製の２－（１－ブロモエチル）ナフタレンを得た。この中間体を次のステップで使用した。
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（６３．４ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（１４７ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、２－（１－ブロモエチル）ナフタレン（２００ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４６（６０ｍｇ、２１％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000066
 ７－（アントラセン－９－イルメトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４８）ＳＵ０６－０２
Figure 2023038370000067
 ９－（ブロモメチル）アントラセン（４７）
トルエン（１００ｍｌ）中の９－アントラセンメタノール（２．０ｇ、９．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に０℃で撹拌しながら、ＰＢｒ３（１．２ｍＬ、１２．５１ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を０℃で１時間撹拌した。次いで反応混合物を室温にし、さらに１時間撹拌した。混合物が黄色の溶液に変わった。Ｋ２ＣＯ３（１０ｍＬ）を加えて反応をクエンチした。真空中でトルエンを留去した。残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、飽和Ｋ２ＣＯ３水溶液、水、およびブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去し、未精製残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４７（１．４ｇ、５４％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000068
 ７－（アントラセン－９－イルメトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４８）ＳＵ０６－０２ ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１５１ｍｇ、
２．２１ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（３９０ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に４７（５００ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４８（２００ｍｇ、３０％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000069
 ７－（ビス（４－メトキシフェニル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（４９）ＳＵ０１０－０２
Figure 2023038370000070
 ビス（４－メトキシフェニル）メタノール（２．０ｇ、８．２ｍｍｏｌ）をトルエン（６０ｍＬ）に溶解させ、ピリジン（６６１μＬ、８．２ｍｍｏｌ））を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（７６８μＬ、８．２ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。反応混合物を室温に温め、１時間撹拌した。混合物をＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、粗生成物４，４’－（ブロモメチレン）ビス（メトキシベンゼン）（７８０ｍｇ、３１％）を無色の油状物として得た。これをそれ以上精製せずに次の反応ステップで使用した。ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１３３ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（３４５ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、４，４’－（ブロモメチレン）ビス（メトキシベンゼン（５００ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマ
トグラフィーによって精製して、４９（１００ｍｇ、１５％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000071
 ７－（（１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（５０）ＶＧ０３３－０３
Figure 2023038370000072
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（８２ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２５３ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（クロロメチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール（２００ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５０（２００ｍｇ、５４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000073
 ７－（ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イルメトキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（５１）ＶＧ０１４－０４
Figure 2023038370000074
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（７７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（クロロメチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５１（２５ｍｇ、１８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３２４．０６（Ｍ＋Ｈ），６４７．１２（２Ｍ＋Ｈ）。
４－メチル－７－（４－（チオフェン－２－イル）ベンジルオキシ）－２Ｈ－クロメン－２－オン（５２）ＶＧ０１５－０４
Figure 2023038370000075
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（２７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（７０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（クロロメチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール（１００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５２（３０ｍｇ、１８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３４９．０９（Ｍ＋Ｈ），６９７．１６（２Ｍ＋Ｈ）。
６－（ベンズヒドリルチオ）－９Ｈ－プリン（５３）（ＶＧ０１５－０２）
Figure 2023038370000076
 ６－メルカプトプリン（１５１ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。Ｋ２ＣＯ３（１２２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加え、得られた懸濁液に、ジフェニルメチルブロミド（ｄｉｐｈｅｎｙｌ ｍｅｔｈｙｌｂｒｏｍｉｄｅ）（２００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。混合物を氷上に注ぎ、得られた沈殿を濾過によって分離し、エーテルで洗浄し、真空乾燥して、５３（３５ｍｇ、１４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000077
 ３．カルバメートにより連結されたヌクレオシド類似体プロドラッグ
Figure 2023038370000078
 ナフタレン－１－イルメチル１－（３，４－ジヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（５５）ＳＵ００１－０３
Figure 2023038370000079
 ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＣＯＣｌ２（１３．３ｍＬ、２０％のＣＯＣｌ２のトルエン溶液として）に、ナフタレン－１－イルメタノール（３．０ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）を１回で加えた。反応液を室温で２時間撹拌した。減圧下で過剰のＣＯＣｌ２およびＴＨＦを除去した。固体残渣を熱ヘキサンに溶解させ、濾過した。次いで真空中でヘキサンをゆっくりと留去して、クロロホルメート中間体５４を白色の固体として得た。これを次のステップで直ちに使用した。５４（３３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＫＨＣＯ３（２５２ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を、シタラビンＨＣｌ（２４３ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）のジメチルアセトアミド（５ｍＬ）溶液に加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を、２．５％～１２％の勾配でＭｅＯＨのＤＣＭ溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５５（３８ｍｇ、１０％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４２８．１５（Ｍ＋Ｈ）。
ナフタレン－１－イルメチル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（５６）ＳＵ００２３－０２
Figure 2023038370000080
 ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＣＯＣｌ２（４．４ｍＬ、２０％のＣＯＣｌ２のトルエン溶液として）に、ナフタレン－１－イルメタノール（１．０ｇ、６．３ｍｍｏｌ）を１回で加えた。反応液を室温で２時間撹拌した。減圧下で過剰のＣＯＣｌ２およびＴＨＦを除去した。固体残渣を熱ヘキサンに溶解させ、濾過した。次いで真空中でヘキサン溶媒をゆっく
りと留去して、クロロホルメート中間体５４を白色の固体として得た。これを次のステップで直ちに使用した。ゲムシタビンＨＣｌ（２００ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（２ｍＬ）に溶解させた。これに、酢酸エチル（５ｍＬ）に予め溶解させたＫＨＣＯ３（６７ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）および５４（１４７ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を、３％のＭｅＯＨの酢酸エチル溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５６（１５ｍｇ、５％）を油状物として得た。ｍ／ｚ＝４４８．１３（Ｍ＋Ｈ）。
ベンジル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（５７）ＳＵ００４４－２ａ／０２
Figure 2023038370000081
 ゲムシタビンＨＣｌ（２００ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（２ｍＬ）に溶解させた。これに、酢酸エチル（５ｍＬ）に予め溶解させたＫＨＣＯ３（６７ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびカルボノクロリド酸ベンジル（９５μＬ、０．６７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を、３％のＭｅＯＨ酢酸エチル溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５７（４０ｍｇ、１５％）を油状物として得た。ｍ／ｚ＝３９８．１２（Ｍ＋Ｈ）。
ベンジル１－（３，４－ジヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（５８）ＳＵ００４４－３ａ／０２
Figure 2023038370000082
 シタラビンＨＣｌ（２００ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（２ｍＬ）に溶解させた。これに、酢酸エチル（５ｍＬ）に予め溶解させたＫＨＣＯ３（７２ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）およびカルボノクロリド酸ベンジル（１０７μＬ、０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を、３％のＭｅＯＨの酢酸エチル溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５８
（４０ｍｇ、１５％）を油状物として得た。ｍ／ｚ＝３７８．１３（Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾフラン－２－イルメチル４－ニトロフェニルカーボネート（６０）および（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチル４－ニトロフェニルカーボネート（６１）
Figure 2023038370000083
 ベンゾフラン－２－イルメチル４－ニトロフェニルカーボネート（６０）
ベンゾフラン－２－イルメタノール５９（３００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＥＡ（２８０μＬ、２．０３ｍｍｏｌ）を滴下した後、クロロギ酸ｐ－ニトロフェニル（２８２ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた溶液を室温で２時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、未精製残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６０（３５０ｍｇ、５４％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000084
 （５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチル４－ニトロフェニルカーボネート（６１）
（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール６（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＥＡ（６９μＬ、０．４８ｍｍｏｌ）を滴下した後、クロロギ酸ｐ－ニトロフェニル（１００ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた溶液を室温で２時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、未精製残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６１（１２０ｍｇ、６７％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000085
 ベンゾフラン－２－イルメチル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（６５）ＳＵ０５０－０３および（５，７－ジメトキシベ
ンゾフラン－２－イル）メチル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）－テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（６６）ＳＵ０４８－０４
Figure 2023038370000086
 ４－アミノ－１－（９，９－ジフルオロ－２，２，４，４－テトライソプロピルテトラヒドロ－６Ｈ－フロ［３，２－ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン－８－イル）ピリミジン－２（１Ｈ）－オン（６２）
ゲムシタビンＨＣｌ（１．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）をピリジン（１０ｍＬ）中で１０分間撹拌した（２×５ｍＬ）。ピリジンを留去した。ピリジン（１０ｍＬ）を加え、１，１，３，３，－テトライソプロピルジシロキサン（１．１７ｍＬ、３．６３ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を１００℃で１６時間撹拌した。さらに１，１，３，３，－テトライソプロピルジシロキサン（１ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、真空中で溶媒を留去した。得られた未精製固体をＥｔＯＡｃ／エーテル（１：１）から再結晶させて、６２（６００ｍｇ、３６％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝５０６．２３（Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾフラン－２－イルメチル１－（９，９－ジフルオロ－２，２，４，４－テトライソプロピルテトラヒドロ－６Ｈ－フロ［３，２－ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン－８－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（６３）
６２（３００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液に、ベンゾフラン－２－イルメチル４－ニトロフェニルカーボネート（２２３ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を１００℃で４日間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製して、６３（３５０ｍｇ、８７％）を油状物として得た。ｍ／ｚ＝６８０．０（Ｍ＋Ｈ），１３５９．４９（２Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾフラン－２－イルメチル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（６５）ＳＵ０５０－０３
化合物６３（２００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１．５ｍＬ）に溶解させた。これに、フッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウムを加え、得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。生成物を、５％のＭｅＯＨのＥｔＯＡｃ溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６５（３０ｍｇ、２３％）を油状物として得た。ｍ／ｚ＝４３８．１４（Ｍ＋Ｈ），８７４．２４（２Ｍ＋Ｈ）。
（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチル１－（３，３－ジフルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）－テトラヒドロフラン－２－イル）－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イルカルバメート（６６）ＳＵ０４８－０４
６２（１０８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液に、６１（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を１００℃で４日間撹拌した。真空中で溶媒を留去して、６４を油状物として得た。これをそれ以上精製せずに次のステップに使用した。化合物６４（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１．５ｍＬ）に溶解させた。これにフッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウムを加え、得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。生成物を、５％のＭｅＯＨのＥｔＯＡｃ溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６６（１８ｍｇ、２６％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000087
 ４．カルバメートにより連結された窒素およびアニリンマスタードプロドラッグ
Figure 2023038370000088
 ベンゾフラン－２－イルメチル４－（ビス（２－クロロエチル）アミノ）フェニルカルバメート（ＶＧ０４２－０４）
Figure 2023038370000089
 ２，２’－（４－ニトロフェニラザンジイル）ジエタノール（６７）
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（１．０ｇ、７．０９ｍｍｏｌ）に、ジエタノールアミン（２．７０ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１４０℃で３．５時間撹拌した。溶液を室温に冷却し、真空中で溶媒を留去した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解させ、水（３×１０ｍＬ）およびブライン（３×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去し、生成物を、ＥｔＯＡｃを溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６７（４００ｍｇ、２５％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000090
 Ｎ，Ｎ－ビス（２－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルオキシ）エチル）－４－ニトロアニリン（６８）
６７（４００ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（４８１ｍｇ、７．０８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶かした冷却した溶液に、塩化ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル（２．７２ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を室温に到達させ、４８時間撹拌した。真空中で溶媒を留去し、生成物を、１０％のＥｔＯＡｃのエーテル溶液を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６８（２００ｍｇ、２５％）を黄色の固体として得た。
Figure 2023038370000091
 ベンゾフラン－２－イルメチル４－（ビス（２－クロロエチル）アミノ）フェニルカルバメート（６９）ＶＧ０４２－０４
１０％Ｐｄ担持炭素（２０ｍｇ）の存在下、化合物６８（２００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を水素で処理した。１６時間撹拌した後、混合物をセライトで濾過し、真空中で溶媒を留去して、中間体アミノアニリン生成物を得た。次いでこれを、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中にてトリエチルアミン（２６０μＬ、０．７０ｍｍｏｌ）の存在下でトリホスゲン（１９５ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）と反応させた。室温で１時間撹拌した後、白色の沈殿を濾別
し、真空中で溶媒を留去して、イソシアネートアニリンの未精製残渣を得た。これを次のステップで直ちに使用した。イソシアネート中間体をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。溶液を０℃に冷却した。ベンゾフラン－２－イルメタノール５９（１００ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を氷上で冷却し、ＴＢＡＦ（９９６μＬ、３．３８ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下した。得られた混合物を室温に温め、次いで２０分間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。中間体をピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、これにメタンスルホニルクロリド（１２．５μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でピリジンを留去し、粗生成物を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６９（５ｍｇ、２％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４０８．０７（Ｍ＋Ｈ），８３７．１６（２Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾフラン－２－イルメチルビス（２－クロロエチル）カルバメート（７０）ＶＧ０４５－０４
Figure 2023038370000092
 ビス（２－クロロエチルアミン）塩酸塩（２２７ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）のピリジン（２５ｍＬ）溶液に、６０（２００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）のピリジン（３ｍＬ）溶液を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、混合物を２％クエン酸溶液（２×５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去し、生成物を、ＣＨ２Ｃｌ２：ヘキサン（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、７０（１２５ｍｇ、６２％）を油状物として得た。
Figure 2023038370000093
 ５．エーテルにより連結されたトポイソメラーゼＩ阻害剤プロドラッグ
Figure 2023038370000094
 ５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチル－カンプトテシン（７１）ＳＵ０３７－０４
Figure 2023038370000095
 化合物４１（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）をトルエン（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（４６μＬ、０．４８ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下した。次いで反応混合物を室温にし、１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去した。未精製残渣を次のステップで使用した。
ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（１５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。カンプトテシン（８１ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、前のステップからの未精製残渣２－（ブロモメチル）－５，７－ジメトキシベンゾフラン（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、目的の化合物を白色の固体（１０ｍｇ、１０％）として得た。ｍ／ｚ＝５５５．１９（Ｍ＋Ｈ）。
６．エーテルにより連結されたチロシンキナーゼ阻害剤プロドラッグ
Figure 2023038370000096
 Ｎ－（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）キナゾリン－２－イル）－４，６，７－トリメチルキナゾリン－２－アミン（７２）ＶＧ０４８－０４
Figure 2023038370000097
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（３ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を５分間撹拌した。２－（４，６－ジメチルキナゾリン－２－イルアミノ）キナゾリン－４－オール（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）ベンゾフラン（１６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去して、未精製の白色の固体を得た。これを冷エーテルおよびＥｔＯＡｃでの洗浄によって精製して、７２（３ｍｇ、１１％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４６２．２（Ｍ＋Ｈ）。
７－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）－５－イソプロピル－２－メチル－［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリミジン（７３）ＳＵ０１－Ａ－０４
Figure 2023038370000098
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（７．２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を５分間撹拌した。５－イソプロピル－２－メチル－［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－７－オール（２０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）ベンゾフラン（１６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去して、未精製の白色の固体を得た。これを、半分取ＨＰＬＣによって精製して、７３（６．３ｍｇ、１９％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３２３．１３（Ｍ＋Ｈ），６４５．２７（２Ｍ＋Ｈ）。
７－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）－２－メチル－５－（（４－メチルピリミジン－２－イルチオ）メチル）－［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリミジン（７４）ＳＵ０１－Ｂ－０４
Figure 2023038370000099
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（４．７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を５分間撹拌した。２－メチル－５－（（４－メチルピリミジン－２－イルチオ）メチル）－［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－７－オール（２０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に１０（１６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去して、未精製の白色の固体を得た。これを、半分取ＨＰＬＣによって精製して、７４（５．２ｍｇ、１８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４１９．０９（Ｍ＋Ｈ），８３７．２３（２Ｍ＋Ｈ）。
７－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）－１－（２－フルオロベンジル）－４－メチル－１Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリダジン（７５）ＳＵ０１－Ｃ－０４
Figure 2023038370000100
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（５．２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を５分間撹拌した。１－（２－フルオロベンジル）－４－メチル－１Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリダジン－７－オール（２０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（ブロモメチル）ベンゾフラン（１６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去して、未精製の白色の固体を得た。これを半分取ＨＰＬＣによって精製して、７５（３ｍｇ、１０％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３９０．０７（Ｍ＋Ｈ），８０１．１２（２Ｍ＋Ｎａ）。
７．カルバメートにより連結されたモデルクマリンプロドラッグ
Figure 2023038370000101
Figure 2023038370000102
 ７－イソシアナト－４－メチルクマリン（７６）
Figure 2023038370000103
 ドライアイス冷却器および磁気撹拌子を備え付けた２００ｍＬの三口フラスコに、２０％のホスゲンのトルエン溶液（２．０ｍＬ）およびジオキサン（８０ｍＬ）からなる溶液を入れた。この混合物に、７－アミノ－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（２．００ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１２時間撹拌した。当初の黄色の色合いが消え、白色の固体が沈殿した。追加の２０％のホスゲンのトルエン溶液（７．０ｍＬ）を加え、混合物をさらに５時間加熱し、この時点で溶液が透明になった。溶液に窒素ガスを通気して、過剰のホスゲンおよび微量のＨＣｌを除去した。濁った溶液を濾過して未反応の７－アミノ－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オンを除去し、濃縮して、７６（０．５ｇ、２５％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000104
 ナフタレン－１－イルメチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（７７）ＶＧ０２０－０２
Figure 2023038370000105
 ナフタレン－１－イルメタノール（５６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）および７６（２００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、７７（３ｍｇ、５％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３６０．１４（Ｍ＋Ｈ），７１９．２７（２Ｍ＋Ｈ）。
（２－クロロキノリン－３－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（７８）ＳＵ０３０－７－０３
Figure 2023038370000106
 （２－クロロキノリン－３－イル）メタノール（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）および７６（１５５ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、７８（３８ｍｇ、１９％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３９５．０８（Ｍ＋Ｈ）。
ベンズヒドリル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（７９）ＳＵ００２１－０２
Figure 2023038370000107
 （２－クロロキノリン－３－イル）メタノール（１１９ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）および７６（７０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、７９（５０ｍｇ、３７％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３８６．１６（Ｍ＋Ｈ）。
ベンズヒドリル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８０）ＳＵ００２１－０２
Figure 2023038370000108
 （４－メチル－２－フェニルピリミジン－５－イル）メタノール（１００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）および７６（１５１ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８０（７０ｍｇ、３５％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４０２．１５（Ｍ＋Ｈ）。
（１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８１）ＶＧ０３２－０３
Figure 2023038370000109
 （１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メタノール（２００ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）および７６（２７２ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８１（８０ｍｇ、１７％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３５０．１２（Ｍ＋Ｈ）。
（２Ｈ－クロメン－３－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８２）ＳＵ０３３－０３
Figure 2023038370000110
 ２Ｈ－クロメン－３－カルバルデヒド（５００ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）に溶解させた。激しく撹拌しながらＮａＢＨ４（１１９ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。懸濁液を０℃で１５分間、次いで室温で１．５時間撹拌した。真空中で溶媒を留去して、アルコール中間体を油状物として得た。これをＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させ、７６（１５５ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８２（８０ｍｇ、８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３６４．１２（Ｍ＋Ｈ），７２７．２３（２Ｍ＋Ｈ）。
ナフタレン－２－イルメチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８３）ＶＧ０３７－０３
Figure 2023038370000111
 ナフタレン－２－イルメタノール（２００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）および７６（２７９ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８３（２６ｍｇ、６％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３６０．１３（Ｍ＋Ｈ），７１９．２５（２Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾフラン－２－イルメチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８４）ＳＵ０１８－０３
Figure 2023038370000112
 ベンゾフラン－２－イルメタノール（３００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）および７６（４０７ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８４（１３０ｍｇ、１８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３５０．０９（Ｍ＋Ｈ），６９９．１７（２Ｍ＋Ｈ）。
ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イルメチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８５）ＳＵ０２４－３－０３
Figure 2023038370000113
 ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イルメタノール（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）および７６（３６５ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８５（９０ｍｇ、２０％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３６７．０２（Ｍ＋Ｈ），７３３．１３（２Ｍ＋Ｈ）。
４－（フラン－２－イル）ベンジル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８６）ＳＵ０２４－３－０３
Figure 2023038370000114
 （４－（フラン－２－イル）フェニル）メタノール（１００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）および７６（１３９ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、目的の化合物（２０ｍｇ、９％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３７６．１１（Ｍ＋Ｈ），７５１．２２（２Ｍ＋Ｈ）。
（５－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８７）ＳＵ０３０－４－０３
Figure 2023038370000115
 （５－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メタノール（１００ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）および７６（１３６ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで５０℃で３時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８７（３８ｍｇ、１８％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３８０．０９（Ｍ＋Ｈ），７５９．１７（２Ｍ＋Ｈ）。
（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８８）ＶＧ０３２－０５
Figure 2023038370000116
 （５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール２５（２００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）および７６（１９０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで室温で１６時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８８（２０ｍｇ、５％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝３８０．１３（Ｍ＋Ｈ），７５９．２６（２Ｍ＋Ｈ）。
（５－ブロモベンゾフラン－２－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（８９）ＶＧ０３６－０５
Figure 2023038370000117
 （５－ブロモベンゾフラン－２－イル）メタノール（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および７６（１０６ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１５分間、次いで８０℃で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、８９（５．０ｍｇ、３％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４２９．１０（Ｍ＋Ｈ）。
（５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メチル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（９０）ＶＧ０４１－０５
Figure 2023038370000118
 （５，７－ジメトキシベンゾフラン－２－イル）メタノール５（５０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）および７－イソシアナト－４－メチルクマリン（５８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。残渣をシリカに吸着させ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９０（５．０ｍｇ、３％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４１０．０４（Ｍ＋Ｈ）。
８．延長リンカー：オキシベンジルエーテル、カルバメートベンジルエーテル、オキシベンジルカルバメート
Figure 2023038370000119
Figure 2023038370000120
 ４－メチル－７－（４－ナフタレン－１－イルメトキシ）ベンジルオキシ）－２Ｈ－クロメン－２－オン（９１）ＴＬＥ－Ｍ１－ＳＵ００１Ｂ
Figure 2023038370000121
 ナトリウムエトキシド（９２４ｍｇ、１３．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ懸濁液を０℃で１０分間撹拌した。４－ヒドロキシ安息香酸エチル（２．２６ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、１－（ブロモメチル）ナフタレン（２．０ｇ、９．０ｍｍｏｌ）［（ＤＭＦ（５ｍＬ）に予め溶解させたもの］を滴下した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ
ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で溶媒を留去して、エチル４－（ナフタレン－１－イルメトキシ）ベンゾエート（１．７ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を得た。次いでこれをＴＨＦに溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（２１１ｍｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で３時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（ナフタレン－１－イルメトキシ）フェニル）メタノール（１．３ｇ、４．９ｍｍｏｌ）を粗生成物として得た。これをそれ以上精製せずに次の反応ステップで使用した。
（４－（ナフタレン－１－イルメトキシ）フェニル）メタノール（１．０ｇ、３．８ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍＬ）に溶解させ、ピリジン（３０５μＬ、３．８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（３５９μＬ、３．８ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。混合物を室温にし、１時間撹拌した。それをＫ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、１－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）ナフタレン（６６０ｍｇ、５３％）を得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦに０℃でナトリウムエトキシド（１５６ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（４０３ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物を０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、１－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）ナフタレン（５００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９１（２００ｍｇ、３１％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000122
 ７－（４－（ベンズヒドリルオキシ）ベンジルオキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（９２）ＴＬＥ－Ｍ１－ＳＵ００４Ｂ
Figure 2023038370000123
 ＤＭＦ（５ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（６６１ｍｇ、９．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を１５分間撹拌した。４－ヒドロキシ安息香酸エチル（１．６１ｇ、９．７ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、ジフェニルメチルブロミド（２．０ｇ、８．１ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で溶媒を留去して、エチル４－（ベンズヒドリルオキシ）ベンゾエート（１．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を得た。次いでこれをＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（１１４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で３時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（ベンズヒドリルオキシ）フェニル）メタノール（７６０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を粗生成物として得た。これをそれ以上精製せずに次の反応ステップで使用した。
（４－（ベンズヒドリルオキシ）フェニル）メタノール（５００ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍｌ）に溶解させ、ピリジン（１３９μＬ、１．７２ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１６３μＬ、１．７２ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いでそれを飽和Ｋ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、（（４－（ブロモメチル）フェ
ノキシ）メチレン）ジベンゼンを油状物（４５０ｍｇ、７４％）として得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦ（３ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（８７ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（２２５ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、（（４－（ブロモメチル）－フェノキシ）メチレン）ジベンゼン（３００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９２（８０ｍｇ、２１％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000124
 ７－（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）ベンジルオキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（９４）ＳＵ０１０Ｂ－０２
Figure 2023038370000125
 エチル４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）ベンゾエート（９３）
ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（５８０ｍｇ、８．５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を１５分間撹拌した。４－ヒドロキシ安息香酸エチル（１．４ｇ、８．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、ＤＭＦ（５ｍＬ）に予め溶解させた１０（１．５ｇ、７．１ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン、水、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で溶媒を留去して、９３を白色の固体（９２０ｍｇ、４４％）として得た。
Figure 2023038370000126
 ７－（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）ベンジルオキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（９４）Ｕ０１０Ｂ－０２
化合物９３（４００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（４９ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）フェニル）メタノール（２２０ｍｇ、６７％）を粗生成物として得た。これをトルエン（１０ｍＬ）に溶解させた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（９８μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いでこれを飽和Ｋ２ＣＯ３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中で溶媒を留去して、２－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）ベンゾフランを無色の油状物（１３２ｍｇ）として得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦに０℃でナトリウムエトキシド（４３ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（１１０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に９３（１３２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９４（８０ｍｇ、４７％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000127
 ナフタレン－１－イルメチル４－（（４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７イルオキシ）メチル）フェニルカルバメート（９５）ＶＧ０２１－０３
Figure 2023038370000128
 ナフタレンメタノール（４．０ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶かし撹拌した溶液に、ＴＥＡ（１００μＬ）を加えた。これに、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に予め溶解させたシアノ安息香酸エチル（４．０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を留去して、未精製の中間体エチル４－（（ナフタレン－１－イルメトキシ）カルボニルアミノ）ベンゾエート（１．３ｇ）を得た。次いでこれをＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（１４１ｍｇ、３．７５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（ナフタレン－１－イルメチル４－（ヒドロキシメチル）フェニルカルバメート（５００ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を粗生成物として得た。これをトルエン（１０ｍＬ）に溶解させた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（１５４μＬ、１．６２ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去して、ナフタレン－１－イルメチル４－（ブロモメチル）フェニルカルバメートを油状物（３００ｍｇ）として得た。この中間体をそれ以上精製せずに次の反応で使用した。
ＤＭＦに０℃でナトリウムエトキシド（４４ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（１１４ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に、２－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）ベンゾフラン（２００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、ブライン（２×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）、および１Ｍ ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９５（１６０ｍｇ、６３％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000129
 ４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）ベンジル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（９６）ＳＵ０２４－１－０３）
Figure 2023038370000130
 化合物９３（３００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（３８ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）フェニル）メタノール（１５０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を粗生成物として得た。これをそれ以上精製せずに次のステップで使用した。
ＤＭＦに０℃でナトリウムエトキシド（４０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。（４－（ベンゾフラン－２－イルメトキシ）フェニル）メタノール（１５０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に７６（１３０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去した。未精製残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、目的の化合物（２０ｍｇ、８％）を白色の固体として得た。
Figure 2023038370000131
 ７－（４－（（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）ベンジルオキシ）－４－メチル－２Ｈ－クロメン－２－オン（９７）ＶＧ０４０－０５
Figure 2023038370000132
 ＤＭＦ（３ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（６２ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を１５分間撹拌した。４－ヒドロキシ安息香酸エチル（１４８ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで室温に到達させた。この混合物に２６（１８０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物を室温で１時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去して、未精製の中間体（１５０ｍｇ）を得た。次いでこれをＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（３４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で１時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メトキシ）フェニル）メタノール（１２０ｍｇ）を粗生成物として得た。これをトルエン（４ｍＬ）に溶解させた。溶液を０℃に冷却した。ＰＢｒ３（８４μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。真空中で溶媒を留去して、２－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）－５－メトキシベンゾフランを無色の油状物（９０ｍｇ）として得た。この中間体を次の反応で使用した。
ＤＭＦ（２ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（２２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を１０分間撹拌した。７－ヒドロキシ－４－メチルクマリン（５４ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で０．５時間撹拌した。この混合物に、２－（（４－（ブロモメチル）フェノキシ）メチル）－５－メトキシベンゾフラン（９０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣を、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（１：１）を溶離液としてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９４（２２ｍｇ、７％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４４３（Ｍ＋Ｈ）。
４－（ベンズヒドリルオキシ）ベンジル４－メチル－２－オキソ－２Ｈ－クロメン－７－イルカルバメート（９８）ＳＵ０３２－０２
Figure 2023038370000133
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）に０℃でナトリウムエトキシド（３００ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を１０分間撹拌した。４－ヒドロキシ安息香酸エチル（７３９ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物をこの温度で２０分間撹拌した。この混合物にジフェニルメチルブロミド（１．０ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空中でＤＭＦを留去し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水およびブラインで洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で溶媒を留去して、エチル４－（ベンズヒドリルオキシ）ベンゾエート（８３０ｍｇ）を得た。次いでこれをＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させ、激しく撹拌しながらＬｉＡｌＨ４（１１４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。懸濁液を室温で３時間撹拌した。真空中でＴＨＦを留去した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。真空中でＥｔＯＡｃを留去して、（４－（ベンズヒドリルオキシ）フェニル）メタノール（７６０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を粗生成物として得た。これをそれ以上精製せずに次の反応ステップで使用した。
（４－（ベンズヒドリルオキシ）フェニル）メタノール（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および７６をトルエン（１０ｍｌ）に溶かした溶液を、２時間還流させた。反応液を室温に冷まし、その結果生成した沈殿を濾過し、冷エーテルおよびＥｔＯＡｃで洗浄して、９８（１００ｍｇ、６０％）を白色の固体として得た。ｍ／ｚ＝４９１．５５（Ｍ＋Ｈ）。
生物学的活性
（実施例１）
プロドラッグのＣＹＰ１Ｂ１代謝
ベンゾフランエーテル連結クマリンおよびカルバメート連結クマリンのＣＹＰ１イソ酵素およびヒト肝臓ミクロソーム（ＨＬＭ）による切断に対する置換基の効果
市販のＳｕｐｅｒｓｏｍａｌ（商標）ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ１Ｂ１、およびプールしたヒト肝臓ミクロソーム（供給元：ＢＤ Ｇｅｎｔｅｓｔ、英国オックスフォード）が酵素スクリーンを構成しており、この酵素スクリーンは肝臓を含めた正常組織で発現されるチトクロムＰ４５０酵素を基準として、癌において発現されるＣＹＰ１Ｂ１によるプロドラッグ切断の効率および選択性を制御する構造上の特長の根底にある構造と活性の関係（ＳＡＲ）を明らかにするものであった。ＨＬＭは、ヒト患者肝臓由来であり、供給業者によれば、ＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１を含まないが、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｅ１、ＣＹＰ３Ａ４、およびＣＹＰ４Ａを含む、一群のチトクロムＰ４５０を含有する。
典型的なＳｕｐｅｒｓｏｍａｌ（商標）ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ１Ｂ１酵
素の代謝研究では、３７℃でｐＨ７．４の１０ｍｍｏｌ ｄｍ－３のリン酸カリウム緩衝液中の１０ｐｍｏｌの酵素、１００μｍｏｌ ｄｍ－３のＮＡＤＰＨを使用した。Ｓｕｐｅｒｓｏｍａｌ（商標）酵素の代謝は、ＤＭＳＯに溶解させたプロドラッグの保存液を加えて最終濃度を１０μｍｏｌ ｄｍ－３のプロドラッグおよび０．５％のＤＭＳＯとすることにより始動させた。ＨＬＭスクリーニングでは、３７℃でｐＨ７．４の１０ｍｍｏｌ
ｄｍ－３のリン酸カリウム緩衝液中の６０マイクロリットルのミクロソーム、１００μｍｏｌ ｄｍ－３のＮＡＤＰＨを、１．５ｍｌの合計反応体積で使用した。
本発明の化合物は、７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンのヒドロキシル基および７－アミノ－４－メチルクマリンへのエーテルリンカーおよびカルバメートリンカーにそれぞれ結合した一連のヘテロ芳香族トリガーを含む。本発明の別の例は、ヘテロ芳香族トリガーが、７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンのヒドロキシル基に、いわゆる延長オキシベンジルエーテルリンカー（－Ａｒ－ＣＨ（Ｚ７）Ｘ３－＝－フェニル－ＣＨ２Ｏ－）を介して結合している化合物を含む。本発明の別の例は、ヘテロ芳香族トリガーが、７－アミノ－４－メチルクマリンのアミノ基に、いわゆる延長オキシベンジルカルバメートリンカーを介して結合している化合物を含む。本発明の別の例は、ヘテロ芳香族トリガーが、７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンのヒドロキシル基に、カルバメートベンジルエーテルリンカーを介して結合している化合物を含む。
７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンおよび７－アミノ－４－メチルクマリンは両方とも、生理的なｐＨ７．４で部分的に脱プロトン化され、どちらのクマリンアニオンも、それぞれ４５０ｎｍおよび４４５ｎｍの最大蛍光発光波長で高い蛍光性を有する。クマリンが本発明に記載のリンカーを介してヘテロ芳香族トリガーに結合しているとき、クマリンアニオンの蛍光は消光する。したがって、ヘテロ芳香族トリガーの酵素的なヒドロキシル化、およびその結果として起こるリンカーの切断は、速度論的蛍光定量によるクマリンアニオンの遊離によってリアルタイムでモニターすることができる。このプロドラッグ設計戦略は、モノオキシゲナーゼ酵素であるＣＹＰ１Ｂ１と混同すべきでないＰ４５０還元酵素による、いわゆる生体還元性低酸素活性化型プロドラッグの切断をモニターするのに使用されて成功を収めている（たとえば、Ｅｖｅｒｅｔｔ ＳＡら、「Ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ
ｒａｔｅｓ ｏｆ ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｅａｖｉｎｇ ｇｒｏｕｐｓ ｆｒｏｍ ｉｎｄｏｌｅｑｕｉｎｏｎｅ ｐｒｏｄｒｕｇｓ： ａ
ｋｅｙ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｈｙｐｏｘｉａ－ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｒｕｇ ｒｅｌｅａｓｅ」、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、６３巻：１６２９～３９頁、２００２年を参照されたい）。
リンカー切断の指標であるクマリンアニオンの遊離を、Ｃａｒｙ Ｅｃｌｉｐｓｅ速度論的蛍光光度計において路長１ｃｍの蛍光セルを使用し、励起および発光スリットを５ｎｍにセットしてモニターした。本発明の化合物からのクマリンアニオンの遊離は、励起波長λｅｘ＝３５０ｎｍおよび発光波長λｅｍ＝４５０ｎｍで検出した。蛍光強度の変化は、酵素代謝に関するものと同じ計器設定を使用し、１０ｍｍｏｌ ｄｍ－３のリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中のクマリン濃度（０～３．５μｍｏｌ ｄｍ－３）に対する蛍光強度の線形キャリブレーションプロットに当てはめて定量化した。
ＣＹＰ１イソ酵素およびＨＬＭによって活性化された、ベンゾフランエーテル連結クマリンおよびカルバメート連結クマリンからのクマリンの切断および遊離についての特異的切断活性（ｐｍｏｌクマリン／分／ｐｍｏｌチトクロムＰ４５０）を表３に示す。ベンゾフランの５位および７位の両方または一方に電子供与性置換基（Ｍｅ、ＭｅＯ）または電子吸引性置換基（Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ）があると、切断特異性および効率の両方に有意な効果がもたらされる。ベンゾフランの４位および６位は、提案する機序によれば、エーテルまたはカルバメートリンカー切断を誘発するのに必要な酵素的ヒドロキシル化が起こる見込
みのある位置であるので、置換されないままである（Ｒ４およびＲ６＝Ｈ）。ベンゾフランの５位および７位での置換基効果、ならびにＣＹＰ１イソ酵素による切断効率および選択性に影響する構造と活性の関係（ＳＡＲ）は、エーテルまたはカルバメートリンカー切断については予測不可能である。
エーテルで連結されたクマリンを有する、Ｚ３＝Ｈ、Ｚ５＝ＨであるＳＵ１０Ａ（以下の表３を参照されたい）は、ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、およびＣＹＰ１Ｂ１、ならびにＨＬＭによって切断される。ＨＬＭでは、１０μｍｏｌ ｄｍ－３のα－ナフトフラボン（ＣＹＰ１選択的酵素阻害剤）が混入すると、ＳＵ１０Ａ切断が阻害され、ＣＹＰ１Ａ２が、ＨＬＭにより媒介されるクマリンの遊離を単独で担っていることが示唆される。したがって、ベンゾフランは、エーテルで連結されたプロドラッグのＣＹＰ１イソ酵素による切断を促進することのできる一般的なトリガー部分である。
Ｚ３＝Ｆ、Ｚ５＝ＦであるＶＧ０１６－０４（同じく以下の表３を参照されたい）では、ベンゾフラン上に電子吸引性置換基があるために、ＣＹＰ１イソ酵素およびＨＬＭによるエーテルリンカーの切断が阻害される。しかし、Ｚ３＝ＭｅＯ、Ｚ５＝ＭｅＯであるＶＧ０３５－０５（同じく以下の表３を参照されたい）では、電子供与性置換基がある結果、ＣＹＰ１ＡまたはＨＬＭについてはリンカー切断が認められず、エーテル結合がＣＹＰ１Ｂ１特異的に切断される。ＶＧ０３５－０５に対するＣＹＰ１Ｂ１による特異的な切断活性は、１３．６５±１．００ｐｍｏｌクマリン／分／ｐｍｏｌチトクロムＰ４５０であり、調査された種々のベンゾフランエーテル連結クマリンの中で最も高い効率である（以下の表３を参照されたい）。したがって、５，７－ジメトキシベンゾフラン部分を使用すると、癌において過剰発現されるＣＹＰ１Ｂ１酵素による、エーテルで連結されたプロドラッグの切断を特異的に誘発することができる。
（エーテルで連結されたクマリンを含んでいる）ＶＧ０３５－０４とは明らかに対照的に、（対応するカルバメートで連結されたクマリンを含んでいる）Ｚ３＝ＭｅＯ、Ｚ５＝ＭｅＯであるＶＧ０４１－０５は、ＣＹＰ１Ａ１によって選択的に切断され（ＣＹＰ１Ａ２またはＣＹＰ１Ｂ１によって切断されない）、特異的切断活性は、５．５１±０．０６ｐｍｏｌクマリン／分／ｐｍｏｌチトクロムＰ４５０である。以下の表３によれば、カルバメートリンカーを含んでいる構造Ｂの化合物実施例はすべて、ＣＹＰ１Ａ１によって切断されても、ＣＹＰ１Ｂ１によって切断されない。唯一の例外は、Ｘ３＝ＭｅＯ、Ｚ５＝ＭｅＯであるＶＧ０３２－０５であり、１．５３±０．０９ｐｍｏｌクマリン／分／ｐｍｏｌチトクロムＰ４５０のＣＹＰ１Ｂ１特異的切断活性を示すが、これは、エーテルリンカーを含んでいるＶＧ０２７－０５の約６分の１である。
（実施例２）
モデルプロドラッグライブラリーをＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルと組み合わせると、プロドラッグの活性化および切断に基質特異性が結び付けられる
ハイスループットスクリーン（ＨＴＳ）を実施して、ＣＹＰ１Ｂ１の生物活性データセットを構築する
活性に差異を生じさせる基礎構造および大きな生物活性データセット（これらから基質特異性モデルを構築する）を特定する目的で、ＣｈｅｍＤｉｖ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙの５０，０００種の試験化合物コレクションおよびＣｈｅｍＤｉｖ Ｋｉｎａｓｅ Ｔａｒｇｅｔｅｄの１０，０００種の試験化合物コレクションを含めた２通りの市販のライブラリーに対して、目的酵素ＣＹＰ１Ｂ１のスクリーニングを行った。ＨＴＳは、液体ハンドラー（Ｂｅｃｋｍａｎ ＦＸｐ）、バルクディスペンサー（Ｍａｔｒｉｘ Ｗｅｌｌｍａｔｅ）、および発光プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ａｎａｌｙｓｔ ＡＤ ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ）を使用して、小型化した３８４ウェルフォーマットで実施した。Ｐ４５０－Ｇｌｏ（商標）Ａｓｓａｙｓは、チトクロムＰ４５０活性を
測定する発光法を提供するものである。従来の反応は、組み換え酵素のヒトＳｕｐｅｒｓｏｍａｌ ＣＹＰ１Ｂ１プラス還元酵素（ＢＤ Ｇｅｎｔｅｓｔ（商標）、英国）を発光性のチトクロムＰ４５０基質、すなわち、ＣＹＰ１Ｂ１の基質であるがルシフェラーゼの基質ではない、ルシフェリン６’クロロエチルエーテル（ルシフェリン－ＣＥＥ）と共にインキュベートすることにより実施される。ルシフェリン－ＣＥＥは、ルシフェリン産物に変換され、この産物が、Ｌｕｃｉｆｅｒｉｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ（米国マディソン）のＣＹＰ１Ｂ１ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ、Ｐ４５０－Ｇｌｏ（商標））との第二の反応において検出される。この試薬は、同時にチトクロムＰ４５０反応を停止させ、半減期が２時間を超える安定した発光シグナルを起こさせる。第二の反応で生じた光の量は、ＣＹＰ１Ｂ１の活性に比例する。生化学的な終点は、ルシフェリン－ＣＥＥの見かけのＫｍ（２０μｍｏｌ ｄｍ－３）で働く酵素（０．５ｐｍｏｌ／ウェル）の基質阻害であった。このアッセイは、３８４ウェルフォーマットで実施したとき、通常は０．６より大きい優秀なＺ’因子（Ｚ’＝１．０は、完璧に強固な再現性の高いアッセイであることを示す）を特徴とする。負の対照は、酵素ターゲットの変更されていない状態を定めた活性のレベルであった一方で、正の対照は、ヒットを定めた活性のレベルであった。負の対照は、ＣＹＰ１Ｂ１／ＫＰＯ４／ＮＡＤＰＨ／基質の反応混合物と、試験化合物の可溶化に使用した等濃度の１％ＤＭＳＯを含有するものであった。アッセイの正の対照は、ＣＹＰ１Ｂ１／ＫＰＯ４／ＮＡＤＰＨ 基質の反応混合物に、最終濃度５μｍｏｌ ｄｍ－３でＣＹＰ１Ｂ１酵素活性を完全に阻害するα－ナフトフラボンを加えたものを含有するものであった。正および負の対照をすべての３８４ウェルプレートの外側の各列に配置し、試験化合物を残りの３２０ウェルに配置した。ヒットの定義は、０．５μｍｏｌ ｄｍ－３の濃度でＣＹＰ１Ｂ１活性を８０～１００％阻害する基質阻害剤である試験化合物である。
大量のデータを簡素化および統合して、ＣＹＰ１Ｂ１ ＨＴＳからＳＡＲを特定するために、ＵＣＳＦ ＳＭＤＣのコンピューター系科学者による援助を受けて、Ｐｉｐｅｌｉｎｅ Ｐｉｌｏｔ（Ｓｃｉｔｅｇｉｃ、米国サンディエゴ）を使用した。このソフトウェアを使用して、（１）ヒット対非ヒットの予備的なＳＡＲ結果を特定し、（２）ヒット母集団の物理化学的性質、たとえば、分子量、ｌｏｇＰ計算値、Ｈ原子ドナー／アクセプター相互作用を決定し、（３）環状断片および官能基の出現率を決定し、（４）ＣＹＰ１Ｂ１基質阻害を予測するためのｉｎ ｓｉｌｉｃｏモデルを、将来のプロドラッグ設計の基盤として定義した。重要な点として、かなりの数（約１０％）のヒットが、４００～５００の間の分子量を有し、５００は、両方の化合物コレクションにおいて利用可能な試験化合物の最大分子量であった。この情報によって、許容可能でありながらＣＹＰ１Ｂ１基質特異性を維持するプロドラッグの最大分子量が明確になった。ＣＨＥＭＡＰＰＳ（商標）（米国カリフォルニア州Ｌａ Ｊｏｌｌａ）のＳＡＲｖｉｓｉｏｎ ｖ２でヒット骨格の構造分析を行うと、試験化合物が、スキーム１で概説したカップリング化学に直接統合するための正しい官能基（たとえば、トリガーのヒドロキシメチル置換基）を支持していないことが確認された。しかし、ヒット対非ヒットにおいて出現率の高い環状断片を特定することにより、カップリング反応のために適切に後に官能化させられ得る、トリガー部分の鋳型を特定することは可能であった。
プロドラッグ設計を支援してチトクロムＰ４５０基質阻害を予測するためのｉｎ ｓｉｌｉｃｏモデル
プロドラッグ設計における主要な課題は、目的酵素に対する基質特異性を維持しながら、トリガー、リンカー、およびエフェクター化学を統合する戦略を明確にすることである。ＣＹＰ１Ｂ１ ＨＴＳは、潜在的なトリガー部分を特定する際に極めて価値あるものであったが、リンカーおよびエフェクター薬物を組み込む、後続の「ヒットからリードへの」化学は、最終プロドラッグ構造が目的酵素による活性化に最適にならないかもしれないことを意味する場合もあった。（総計６０，０００種の試験化合物になる）２通りのＨＴ
Ｓスクリーンからの膨大な量の構造データの最適な用い方は、拡張連結性フィンガープリントによる谷本の類似性探索をベースとするＧａｕｓｓｉａｎ Ｋｅｒｎｅｌ重み付きｋ近傍法（ｋ－ＮＮ）アルゴリズムを使用して、チトクロムＰ４５０ １Ｂ１基質阻害のｉｎ ｓｉｌｉｃｏ予測モデルを開発することにより実現した。ＣＹＰ１Ｂ１カーネル重み付きｋ－ＮＮモデルの最適なパラメータは、ＣｈｅｍＤｉｖのＤｉｖｅｒｓｅおよびＫｉｎａｓｅライブラリーからの４５，０００種および９，０００種の試験化合物から選択された訓練セットについて、ｌｅａｖｅ－ｏｎｅ－ｏｕｔ交差検定を使用して選択した。総計６，０００種の残りの試験化合物は、基質阻害を予測するモデルの精度を確認するために内部試験セットとして使用した。２０％を上回るが８０％を下回る阻害を示す任意の試験化合物は、非分類に指定した。モデルは、分類された非基質阻害剤の８９％および分類された基質阻害剤の９５％を正確に予測した。ＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルプロトコールは、推定上のプロドラッグ構造を、インターフェースを介して、ＣｈｅｍＤｒａｗ／ＩｓｉｓＤｒａｗなどの標準の化学描画パッケージと結合させるのを容易にするために、Ｓｃｉｔｅｇｉｃ Ｗｅｂ Ｐｏｒｔにアップロードした。
化合物の外部試験セットを使用するＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルの検証
ＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルの外部試験セットを構成する３８４ウェルストックプレートを構築し、このストックプレートには（１）公知のＣＹＰ１Ｂ１基質阻害剤（たとえば、テトラメトキシスチルベン、β－エストラジオール、α－ナフトフラボン、エトキシレゾルフィン、リスベラトロールなどが挙げられる）、（２）ＣＹＰ１Ｂ１基質阻害剤でない化合物（たとえば、キニジン（ＣＹＰ２Ｄ６の強力な特異的阻害剤）、スルファフェナゾール（ＣＹＰ２Ｃ９の強力な特異的阻害剤）などが挙げられる）、（３）モデルプロドラッグＶＧ０１６－０５およびＶＧ０３５－０５、ならびに（４）ホスホロアミデートマスタードプロドラッグＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４を組み込んだ。外部試験セット保存濃度は、ＤＭＳＯ中に１０ｍｍｏｌ ｄｍ－３であり、主要なＣＹＰ１Ｂ１ ＨＴＳについて記載した同じ方法を使用して、０．５ｍｍｏｌ ｄｍ－３の最終濃度でのＣＹＰ１Ｂ１基質阻害百分率を決定した。実験を３通りに実施して、ＣＹＰ１Ｂ１活性の平均基質阻害％±標準偏差を得た。すべての外部試験セット構造を、Ｓｃｉｔｅｇｉｃ Ｗｅｂ Ｐｏｒｔを介してＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルに照会として送信して、ＣＹＰ１Ｂ１の基質阻害％の予測値を生成し、基質阻害％の生化学的実測値と比較した。
比較上のＣＹＰ１Ｂ１の実測および予測の基質阻害％値は、以下のとおりであった。
Figure 2023038370000134
 ＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルは、化合物の外部試験セットを使用した、広範囲の活性を確かめるモデルの検証で、いくつもの部類の化合物にわたってのＣＹＰ１Ｂ１の基質阻害％の予測が正確であった。重要なこととして、進歩性の点から、このモデルは、プロドラッグ切断の効率および７－ヒドロキシ－４－メチルクマリンアニオンの遊離と直接関連付けることのできるＣＹＰ１Ｂ１基質阻害に関して、２種のモデルプロドラッグＶＧ０１６－０５およびＶＧ０３５－０５の活性を正確に予測することができた。表３によれば、ベンゾフラントリガーのＲ５およびＲ７における電子供与性または電子吸引性置換基は、これらのモデルプロドラッグの芳香族ヒドロキシル化および切断を発動させる。ＶＧ０１６－０５のように、Ｒ５およびＲ７＝Ｆ、すなわち電子吸引性置換基であるとき、モデルプロドラッグは、正確に予測されたとおり、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されず、結果としてリンカーの切断はない。著しく対照的に、ＶＧ０３５－０５のように、Ｒ５およびＲ７＝ＭｅＯ、すなわち電子供与性置換基であるとき、モデルプロドラッグは、正確に予測されたとおりＣＹＰ１Ｂ１によって活性化され、リンカーが良好な効率で切断される。ジメトキシベンゾフラントリガー部分をホスホロアミデートマスタードプロドラッグＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４に組み込むと、ＣＹＰ１Ｂ１の良好な基質阻害剤になると正確に予測される化合物が生成する。結論として、モデルプロドラッグライブラリーと、ＣＹＰ１Ｂ１生物活性のデータベースに基づくＣＹＰ１Ｂ１基質予測モデルを組み合わせると、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化される特定のプロドラッグの設計が容易になる。
（実施例３）
野生型ＣＨＯ細胞ならびにＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１アイソザイムを発現するように操作したＣＨＯ細胞におけるプロドラッグ細胞傷害性
操作したＣＨＯ細胞を使用して、ＣＹＰ１発現を媒介とする選択的な細胞死滅を実証した。以下に記載する実験において、ＣＹＰ１Ａ１（ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１）またはＣＹＰ１Ｂ１（ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１）のいずれかの酵素を発現するように操作した野生型ＣＨＯ細胞に化合物を曝した。
ＣＨＯ細胞：文献の方法（Ｄｉｎｇ Ｓら、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．、３４８巻：４０３～４１０頁、１９９７年（その内容を参照により本明細書に援用する））に従い、１０％のＦＣＳ、それぞれ１単位／ｍｌのヒポキサンチンおよびチミジン、さらにペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を補足したα－ＭＥＭにおいて、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）ＤＵＫＸＢ
１１細胞を、標準の細胞培養条件下で増殖させた。細胞は、５％のＣＯ２を加えた加湿雰囲気中にて３７℃で増殖させた。
ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１およびＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１細胞：文献に記載の方法（前掲書）に従い、組み換え型ＣＹＰ１Ａ１および組み換え型ＣＹＰ１Ｂ１を同時に発現するＰ４５０還元酵素を含んでいるＣＨＯ細胞、すなわち、それぞれ（ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１）および（ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１）を、０．４ｍｇ／ｍｌのＧ４１８二硫酸塩および０．３μＭのメトトレキサート（Ｓｉｇｍａ／Ａｉｄｒｉｃｈ Ｃｏ．、英国ドーセット州Ｇｉｌｌｉｎｇｈａｍ）を補足したＣＨＯ細胞用標準培地を使用して培養した。細胞は、５％のＣＯ２を加えた加湿雰囲気中にて３７℃で増殖させた。
組み換え型ＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１発現
ＣＨＯ細胞におけるヒトｃＤＮＡ ＣＹＰ１Ａ１またはｃＤＮＡ ＣＹＰ１Ｂ１のジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）遺伝子増幅を使用して、ヒトＰ４５０還元酵素と同時に発現される高レベルの機能性酵素を得た（前掲書；Ｄｉｎｇ Ｓら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．、３５６巻（２部）：６１３～９頁、２００１年）。改変ＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１ ｃＤＮＡを消化し、哺乳動物発現ベクターｐＤＨＦＲに連結して、プラスミドｐＤＨＦＲ／１Ａ１およびｐＤＨＦＲ／１Ｂ１をそれぞれ作製した（前掲書）。細胞培養およびＣＨＯ ＤＵＫＸＢ１１へのＤＮＡ形質移入は、文献に記載の方法に従って実施し、形質移入された細胞は、ヌクレオシド欠如培地で増殖させることにより、ＤＨＦＲ＋表現型を選抜した（前掲書）。形質移入したＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１ ｃＤＮＡを増幅させるために、ＤＨＦＲ＋クローンをプールし、徐々に増大させたＭＴＸ濃度（０．０２～０．１μＭ）で増殖させた。０．１ｍＭのＭＴＸ選別で残存した細胞クローンを単離し、０．３μＭのＭＴＸでさらに選抜した。得られた細胞系を、ＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１発現について免疫ブロット法によって分析した。文献（前掲書）に記載の方法に従って、高レベルの各酵素を発現する細胞系に、全長ヒトチトクロムＰ４５０還元酵素（ＣＰＲ）ｃＤＮＡを含んでいるプラスミドｐｃＤＮＡ／ＨＲを安定に形質移入し、Ｇ４１８（０．８ｍｇ／ｍｌ）およびＭＴＸ（０．３μＭ）で選抜した。耐性のあるクローンを単離した後、Ｇ４１８の濃度を０．４ｍｇ／ｍｌに下げ、クローン化を繰り返して細胞系の均一性を確実なものにした。ｃＤＮＡ ＣＹＰ１Ａ１を運搬するプラスミドを形質移入し、引き続いてＣＰＲ ｃＤＮＡを形質移入したＣＨＯ細胞系をＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１と称し、ｃＤＮＡ ＣＹＰ１Ｂ１を運搬するプラスミドを形質移入し、引き続いてＣＰＲ ｃＤＮＡを形質移入したＣＨＯ細胞系をＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１と称した。
ＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１の免疫化学的検出
文献（Ｄｉｎｇ Ｓら、１９９７年（その内容を参照により本明細書に援用する））にある標準の方法を使用して、細胞を収集し、超音波処理によって溶解させた。タンパク質（通常は５０μｇの溶解質）をＳＤＳ／ＰＡＧＥによって分離し、ニトロセルロース膜に移し、標準の方法（Ｐａｉｎｅ ＭＪら、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．、３２８巻：３８０～３８８頁、１９９６年（その内容も参照により本明細書に援用する））を使用して探索した。ヒトＣＹＰ１Ａ１プラス還元酵素Ｓｕｐｅｒｓｏｍｅｓ（商標）、ヒトＣＹＰ１Ａ２プラス還元酵素Ｓｕｐｅｒｓｏｍｅｓ（商標）、およびＣＹＰ１Ｂ１プラス還元酵素Ｓｕｐｅｒｓｏｍｅｓ（商標）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、英国オックスフォード）を、細胞系における酵素発現を免疫化学的に検出するための正の対照（通常は０．０３～０．３ｐｍｏｌ）として使用した。ＷＢ－１ Ｂ１一次抗体（１：１５００希釈、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、英国オックスフォード）、およびＣＹＰ１Ａ１と交差反応する抗ＣＹＰ１Ａ２抗体（１：２０００希釈、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、英国ロンドン）を使用して、それぞれＣＹＰ１Ｂ１発現およびＣＹＰ１Ａ１発現を検出した。二次抗体は、１：５００希釈で使用したヤギ抗ウサギＩｇＧであった。Ｅｎｈａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ（ＥＣＬ）
ウエスタンブロット検出キット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｍｅｒｓｈａｍ、英国バッキンガムシア）を使用して免疫ブロットを展開した。
操作されたＣＨＯ細胞におけるＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１発現のウエスタンブロットによる特徴付け
添付の図面の図１ａは、形質移入していないＣＨＯ ＤＵＫＸＢ１１細胞またはＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１細胞系ではどちらにおいても検出できない、ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１細胞系由来の溶解質におけるＣＹＰ１Ｂ１タンパク質発現の検出を示す、典型的なウエスタンブロットである。バンドは、５６ｋＤａの分子量に相当し、ヒトＣＹＰ１Ｂ１ Ｓｕｐｅｒｓｏｍａｌ（商標）酵素のバンドと一致する。図１ｂは、形質移入していないＣＨＯ ＤＵＫＸＢ１１細胞またはＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１細胞系ではどちらにおいても検出できない、ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１細胞系由来の溶解質におけるＣＹＰ１Ａ１タンパク質発現の検出を示す典型的なウエスタンブロットである。バンドは、６０ｋＤａの分子量に相当し、抗ＣＹＰ１Ａ２抗体の交差反応性によって検出されるヒトＣＹＰ１Ａ１ Ｓｕｐｅｒｓｏｍａｌ（商標）酵素のバンドと一致する。
機能性ＣＹＰ１酵素活性
エトキシキシレゾルフィンＯ－脱エチル化（ＥＲＯＤ）アッセイは、機能性のＣＹＰ１活性を確認するのに広く使用される（Ｃｈａｎｇ ＴＫおよびＷａｘｍａｎ ＤＪ、「Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃＤＮＡ－Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ Ｈｕｍａｎ ＣＹＰ１Ａ１， ＣＹＰ１Ａ２， ａｎｄ ＣＹＰ１Ｂ１ ｗｉｔｈ ７－Ｅｔｈｏｘｙｒｅｓｏｒｕｆｉｎ ａｓ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３２０巻：８５～９０頁、２００６年（その内容を参照により本明細書に援用する））。このアッセイでは、５８０ｎｍでの蛍光発光によって継続的にモニターされる、酵素産物のレゾルフィンを生じる、７－エトキシレゾルフィンのＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２、およびＣＹＰ１Ｂ１によるＯ－脱アルキル化を測定する。酵素活性を測定する別のアッセイは、Ｃａｌｉ ＪＪら、Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ Ｔｏｘｉｃｏｌ．、２巻（４号）：６２９～４５頁、２００６年（その内容を参照により本明細書に援用する）にある、ルシフェリン－ＣＥＥをＣＹＰ１酵素の発光基質として利用する、市販のＰｒｏｍｅｇａ Ｐ４５０－Ｇｌｏ（商標）Ａｓｓａｙである。ＥＲＯＤアッセイおよびＰｒｏｍｅｇａ Ｐ４５０－Ｇｌｏ（商標）Ａｓｓａｙを選択的および非選択的ＣＹＰ１阻害剤と共に使用して、上で言及したＣＨＯ細胞系が、予想されたＣＹＰ１酵素を機能しうる形で発現していることを確認した。
阻害剤の非存在下では、（野生型ＣＨＯ細胞でなく）ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１およびＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１は、７－エトキシレゾルフィンをレゾルフィンに、またはルシフェリン－ＣＥＥをルシフェリンに変換し、その結果これらの細胞において機能性のＣＹＰ１発現が確認された（以下の表１を参照されたい）。
予想どおり、広域スペクトルＣＹＰ１阻害剤のα－ナフトフラボンを加えると、両方のＣＹＰ１発現細胞系で活性が消失した（以下の表１を参照されたい）。選択的阻害剤のテトラメトキシスチルベンは、ＣＹＰ１Ｂ１に対する選択性がＣＹＰ１Ａ１の３０倍である（Ｃｈｕｎ ＹＪ、Ｋｉｍ Ｓ、Ｋｉｍ Ｄ、Ｌｅｅ ＳＫ、およびＧｕｅｎｇｅｒｉｃｈ ＦＰ、「Ａ Ｎｅｗ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ Ｐｏｔｅｎｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ １Ｂ１ ａｎｄ ｉｔｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ Ａｎｔｉｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ」、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６１巻（２２号）：８１６４～７０頁、２００１年）。テトラメトキシスチルベンは、高濃度で両方のＣＹＰ１発現細胞系において活性を消失させ、より低い濃度では、ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞の活性を（ＣＹＰ１Ａ１発現細胞と比べて）優先的に低下させた（以下の表１を参照されたい）。
これらの結果によって、ＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１の発現レベルが予想どおりであることが個別に確認される。
ＣＨＯ、ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１、およびＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１細胞系における細胞傷害性ＩＣ５０値の決定
ＣＨＯ、ＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１、またはＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１を１００μｌの必要な細胞培地に懸濁させた単一細胞懸濁液を、９６ウェルプレートにウェルあたり１５００細胞の細胞密度で播種し、３７℃で２４時間恒温器に入れた。次いで試験化合物のＤＭＳＯ保存液を、１００、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１、０．００３、０．００１、０μＭの濃度範囲になるように加えた。ＤＭＳＯの最終濃度０．２％は、種々のＣＨＯ細胞系の増殖特性に影響を及ぼさないことがわかった。細胞を試験化合物と共に７２時間または９６時間インキュベートし、その後培地をすべて吸引し、１００μｌの新鮮な培地に取り替えて、蒸発による培地の損失を埋め合わせた。細胞を２０μｌのＭＴＳアッセイ試薬と共に１．５時間インキュベートし、プレートリーダーを使用して、５１０ｎｍでのウェルあたりの吸光度を測定した。各試験化合物濃度についての吸光度平均値および標準偏差を、（ａ）細胞プラス培地、（ｂ）０．２％のＤＭＳＯを含有する細胞プラス培地、（ｃ）培地のみ、および（ｄ）０．２％のＤＭＳＯおよび０～１００μｍｏｌ ｄｍ－３の範囲の濃度の試験化合物を含有する培地を含めた一連の対照に対して算出した。細胞傷害性ＩＣ５０値は、細胞増殖百分率（１００％の細胞増殖は、未処置の対照細胞に相当する）を試験化合物濃度に対してプロットすることにより算出した。
細胞傷害性ＩＣ５０値とは、本明細書では、細胞の５０％を死滅させる化合物の濃度であると定義され、選択性倍率は、非ＣＹＰ１発現細胞におけるＩＣ５０を、ＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１発現細胞におけるＩＣ５０で除することにより算出される。示差的細胞傷害性ＩＣ５０比は、正常ＣＨＯ細胞における化合物ＩＣ５０を、ＣＹＰ１Ａ１またはＣＹＰ１Ｂ１を形質移入したＣＨＯ細胞におけるＩＣ５０で除したものから算出される。
Ｐｒｏｍｅｇａ（商標）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ Ｎｏｎ－Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ（ＭＴＳ）Ａｓｓａｙ
市販のＭＴＳアッセイは、増殖、細胞傷害性、または化学感受性アッセイにおいて生細胞数を決定するための均一系比色法である。このアッセイは、テトラゾリウム化合物［３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－５－（３－カルボキシメトキシフェニル）－２－（４－スルホフェニル）－２Ｈ－テトラゾリウム分子内塩、ＭＴＳ］および電子結合試薬ＰＭＳ（フェナジンメトスルフェート）の溶液から構成される。ＭＴＳは、細胞による生体還元を受けて、組織培養培地に可溶性であるホルマザン産物になる。ホルマザン産物の５１０ｎｍでの吸光度は、９６ウェルアッセイプレートから直接測定することができる。４９０ｎｍまたは５１０ｎｍでの吸光度の量によって測定されるホルマザン産物の量は、培養物中の生細胞の数に正比例する。
本発明の２種の化合物（ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４）は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されたとき、それぞれホスホロアミデートマスタードのＮ，Ｎ’－ビス（２－クロロ－エチル）ホスホラミド（Ｃｌ－ＩＰＭ）およびＮ，Ｎ’－ビス（２－ブロモ－エチル）ホスホラミド（Ｂｒ－ＩＰＭ）を遊離するように設計されている。２種のホスホロアミデートマスタードＣｌ－ＩＰＭおよびＢｒ－ＩＰＭの高い毒性は、それぞれプロドラッグＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４に組み込まれると、かなり低下する。ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４は両方とも、７２時間または９６時間曝露での野生型ＣＨＯ細胞における細胞傷害性ＩＣ５０値が１０μｍｏｌ ｄｍ－３以上であり、７２時間曝露後の野生型ＣＨＯ細胞における細胞傷害性ＩＣ５０値が０．００７μｍｏｌ
ｄｍ－３未満であるＣｌ－ＩＰＭおよびＢｒ－ＩＰＭとは著しく対照的である（以下の表２を参照されたい）。２種のプロドラッグが活性化する機序は、ＣＨＯ－野生型（ＣＹＰ１酵素発現を欠く）、ＣＨＯ／１Ａ１、およびＣＨＯ／ＣＹＰ１Ｂ１細胞におけるそれらの相対的な細胞傷害性ＩＣ５０値から論理的に推理することができる。たとえば、ＳＵ０２５およびＳＵ０４６は、野生型ＣＨＯ細胞では低い毒性を示すが、ＣＨＯ／１Ｂ１細胞に対しては毒性が高く、７２時間曝露で示差的細胞傷害性ＩＣ５０比がそれぞれ１６８９および５０７５となる。９６時間のより長い曝露時間では、ＣＹＰ１Ｂ１選択的プロドラッグＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４は、ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞に対する毒性が非ＣＹＰ１Ｂ１発現細胞の３３６７倍および５４００倍である（以下の表２を参照されたい）。したがって、化合物ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されるプロドラッグであることが証明される。ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４は、野生型ＣＨＯおよびＣＨＯ／ＣＹＰ１Ａ１細胞に対しても同様に低い細胞傷害性を示し、７２時間曝露での示差的細胞傷害性ＩＣ５０比は１未満であるので、毒性の高いホスホロアミデートマスタードは、ＣＹＰ１Ａ１活性化によって遊離しないことが示唆される（以下の表２を参照されたい）。文献から推測されるとおり、臨床で使用される２種のプロドラッグであるイホスファミドおよびシクロホスファミドは、ＣＹＰ２Ｂ６およびＣＹＰ３Ａ４によって活性化されたとき、同様にアルキル化イソホスホアミデートマスタードを生じるがＣＹＰ１酵素では活性化されず（たとえば、ＭｃＦａｄｙｅｎ
ＭＣ、Ｍｅｌｖｉｎ ＷＴ、およびＭｕｒｒａｙ Ｇｌ、「Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ Ｅｎｚｙｍｅｓ： Ｎｏｖｅｌ Ｏｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．、３巻（３号）：３６３～７１頁、２００４年）、この細胞傷害性アッセイで使用した１００μｍｏｌ ｄｍ－３の最高濃度かつ９６時間の最長曝露時間で、両方とも非毒性である（これも以下の表２を参照されたい）。
（実施例４）
ヒト原発性腫瘍細胞系におけるプロドラッグの細胞傷害性
ＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現するヒト原発性頭頸部扁平上皮癌腫瘍細胞系（ＵＴ－ＳＣＣ－１４）におけるプロドラッグの細胞傷害性
Ｇｒｅｅｒらは、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、４５巻：３７０１頁、２００４年において、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）が悪性に進行する際、ＣＹＰ１Ｂ１が過剰発現されたが、正常な上皮では過剰発現されなかったことを報告している。原発性ＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞系をＨＮＳＣＣの癌患者から単離した（たとえば、Ｙａｒｏｍｉｎａら、Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ．、８３巻：３０４～１０頁、２００７年、およびＨｅｓｓｅｌら、Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉｏｌ．、８０巻、７１９～２７頁、２００４年を参照されたい）。患者は、２５才の男性であり、以下の臨床病理学的パラメータを特徴とするＨＮＳＣＣに罹患していた。すなわち、位置：舌扁平上皮癌；Ｔ３、Ｎ１、Ｍ０；部位：舌；病巣：原発；段階：Ｇ２。ＵＴ－ＳＣＣ－１４細胞系は、ｍＲＮＡおよびタンパク質のレベルでＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現しており、これを使用して、ＣＹＰ１Ｂ１の過剰発現を特徴とするヒト癌に由来する癌細胞における化合物の細胞傷害性を実証した（Ｇｒｅｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、４５巻：３７０１頁、２００４年）。
ＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞：文献の方法（Ｈｅｓｓｅｌら、Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉｏｌ．、８０巻、７１９～２７頁、２００４年（その内容を参照により本明細書に援用する））に従い、ウシ胎児血清（５０ｍｌ）、非必須アミノ酸（１００×、５ｍｌ）、ピルビン酸ナトリウム（１００ｍｍｏｌ ｄｍ－３、５ｍｌ）、Ｌ－グルタミン（２００ｍｍｏｌ ｄｍ－３、５ｍｌ）に加え、ペニシリン１００ＩＵ／ｍｌ／ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ、５ｍｌ）を補足したＥＭＥＭ（５００ｍｌ）において、標準の細胞培養条件下でＨＮＳＣＣ細胞系を増殖させた。
原発性頭頸部腫瘍細胞系においてプロドラッグの細胞傷害性ＩＣ５０値を決定する
９６ウェルプレート上のウェルあたり２０００細胞のＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞懸濁液に、必要ならば新鮮な培地を加えて、ウェルあたりの総体積を１００μｌとした。恒温器において４時間かけて細胞を付着させた。４時間後、細胞が９６ウェルプレートの底面に接着していることを顕微鏡で確認し、次いで培地を除去し、試験化合物の保存液を含有する新鮮な培地に取り替えて、ウェルあたり１００μｌの最終体積での最終濃度を、０、０．００１、０．００３、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０、３０、１００μｍｏｌ ｄｍ－３とした。エタノールの最終濃度０．２％は、ＵＴ－ＳＣＣ－１４細胞系の増殖特性をもたらさないことがわかった。ＵＴ－ＳＣＣ－１４細胞を試験化合物と共に７２時間インキュベートし、その後すべて吸引し、１００μｌの新鮮な培地に取り替えて、蒸発による培地の損失を埋め合わせた。細胞を２０μｌのＭＴＳアッセイ試薬と共に１．５時間インキュベートし、プレートリーダーを使用して、５１０ｎｍでのウェルあたりの吸光度を測定した。各試験化合物濃度についての吸光度平均値および標準偏差を、（ａ）細胞プラス培地、（ｂ）０．２％のエタノールを含有する細胞プラス培地、（ｃ）培地のみ、および（ｄ）０．２％のエタノールおよび０～１００μｍｏｌ ｄｍ－３の範囲の濃度の試験化合物を含有する培地を含めた一連の対照に対して算出した。細胞傷害性ＩＣ５０値は、細胞増殖百分率（１００％の細胞増殖は、未処置の対照細胞に相当する）を試験化合物濃度に対してプロットすることにより算出した。
細胞傷害性ＩＣ５０値とは、本明細書では、ＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞の５０％を死滅させる化合物の濃度であると定義される。市販のＭＴＳアッセイは、増殖、細胞傷害性、または化学感受性アッセイにおいて生細胞数を決定するための均一系比色法であり、これを上の本実施例３で予め記載したとおりに使用した。
本発明の２種の化合物（ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４）は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されたとき、それぞれホスホロアミデートマスタードのＮ，Ｎ’－ビス（２－クロロ－エチル）ホスホラミドマスタード（Ｃｌ－ＩＰＭ）およびＮ，Ｎ’－ビス（２－ブロモ－エチル）ホスホラミドマスタード（Ｂｒ－ＩＰＭ）を遊離するように設計されている。７２時間曝露後のＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞におけるＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４についての細胞傷害性ＩＣ５０値は、それぞれ０．０５±０．０１μｍｏｌ ｄｍ－３および０．０２±０．０１μｍｏｌ ｄｍ－３であった。データは、ＣＹＰ１Ｂ１を過剰発現するＨＮＳＣＣに罹患している癌患者からのＵＴ－ＳＣＣ１４細胞系におけるＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４の強力な細胞傷害性を示している。
ＳＵ０２５－０４およびＳＵ０４６－０４を、ＵＴ－ＳＣＣ－１４と同じ条件下で培養したＵＴ－ＳＣＣ－８、ＵＴ－ＳＣＣ－９、およびＵＴ－ＳＣＣ－１０を含めた３種の追加の原発性頭頸部細胞系で評価した。ＳＵ０２５－０４については、７２時間の曝露後、細胞傷害性ＩＣ５０は、μｍｏｌ ｄｍ－３単位で、ＵＴ－ＳＣＣ－８（０．３１±０．０６）、ＵＴ－ＳＣＣ－９（０．４３±０．０７）、ＵＴ－ＳＣＣ－１０（０．２２±０．０３）であった。ＳＵ０２５－０４については、７２時間の曝露後、細胞傷害性ＩＣ５０は、μｍｏｌ ｄｍ－３単位で、ＵＴ－ＳＣＣ－８（０．０６±０．０２）、ＵＴ－ＳＣＣ－９（０．１５±０．０２）、ＵＴ－ＳＣＣ－１０（０．０９±０．０３）であった。データは、ＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現する一連の原発性頭頸部細胞系にわたって、ＳＵ０４６－０４がＳＵ０２５－０４より強力な細胞毒であることを示唆している。
本発明の一化合物であるＳＵ０３７－０４は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されたとき、カンプトテシンを遊離するように設計した。ＳＵ０３７－０４では、７２時間の曝露後、各原発性腫瘍細胞系についての細胞傷害性ＩＣ５０は、μｍｏｌ ｄｍ－３単位で、ＵＴ－ＳＣＣ－８（０．５６±０．０４）、ＵＴ－ＳＣＣ－９（０．２２±０．０８）、Ｕ
Ｔ－ＳＣＣ－１０（０．２１±０．０４）、ＵＴ－ＳＣＣ－１４（０．１２±０．０７）であった。
本発明の一化合物であるＳＵ０４８－０４は、ＣＹＰ１Ｂ１によって活性化されたとき、ゲムシタビンを遊離するように設計した。ＵＴ－ＳＣＣ－１４腫瘍細胞系におけるＳＵ０４８－０４についての細胞傷害性ＩＣ５０は、７２時間の曝露後、０．９４±０．０２μｍｏｌ ｄｍ－３であった。１０μｍｏｌ ｄｍ－３のα－ナフトフラボン（強力なＣＹＰ１Ｂ１阻害剤）と同時にインキュベートすると、ＳＵ０４８－０４の毒性が１２．２±０．２μｍｏｌ ｄｍ－３に有意に低下し、それによって、細胞中で構成的に発現されるＣＹＰ１Ｂ１によってプロドラッグが活性化されたことの間接的な証拠が得られた。
（実施例５）
ＣＹＰ１Ｂ１を構成的に発現するヒト原発性腫瘍異種移植片モデルにおけるＳＵ０４６－０４の抗腫瘍活性
原発性ＵＴＳＣＣ－１４細胞系３×１０６個を、ヌードマウスの側腹部の皮下に埋め込んだ。腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３になったとき、マウスを１群あたり１０匹にランダム化した。ＰＢＳ中１２、２５および５０ｍｇ／ＫｇのＳＵ０４６－０４、または対する媒体のみを、５日間毎日／２日間休止を２サイクルする間、腹腔内投与した。キャリパーを使用して、腫瘍体積を４日毎に測定した。３治療群すべてにおいて、媒体のみと比べて、腫瘍成長の有意な阻害が観察された。２８日時点での腫瘍成長の遅れは、１２ｍｇ／Ｋｇで３１％、２５ｍｇ／Ｋｇで５６％、５０ｍｇ／Ｋｇで９０％であり、４／１０が完全な応答であった。最高の２５０ｍｇ／Ｋｇの曝露後、有害作用または有意な体重減少は認められなかった。
Figure 2023038370000135
Figure 2023038370000136
Figure 2023038370000137
本発明の好ましい実施形態によれば、例えば、以下が提供される。
（項目１）
式（Ｉ）の化合物
Figure 2023038370000138

［式中、
Ｘ１は、－Ｘ１－Ｘ２が、－Ｏ－Ｘ２、－Ｓ－Ｘ２、－ＳＯ２－Ｏ－Ｘ２、－ＳＯ２ＮＺ１０－Ｘ２、共役アルケンメチルオキシ、共役アルケンメチルチオ、共役アルケンメチルＳＯ２－Ｏ、共役アルケンメチル－ＳＯ２ＮＺ１０、または次式
Figure 2023038370000139

からなるようなものであり、
－Ｘ２は、存在しないか、またはＸ１－Ｘ２－エフェクターが、
Figure 2023038370000140

のうちの１つであるようなものであり、
各ｎおよびｍは、独立に０または１であり、
ｐは、０、１または２であり、
Ｘ３は、酸素または硫黄であり、加えて、ｍ＝０であるとき、ＳＯ２－Ｏ、ＳＯ２ＮＺ１０、共役アルケンメチルオキシ、共役アルケンメチルチオ、共役アルケンメチル－ＳＯ２－Ｏ、または共役アルケンメチル－ＳＯ２ＮＺ１０でもよく、
Ｙ１、Ｙ２およびＹ３はそれぞれ、独立に炭素または窒素であり、Ｙ１が窒素である場合、Ｚ１は存在せず、Ｙ２が窒素である場合、Ｚ３は存在せず、Ｙ３が窒素である場合、Ｚ５は存在せず、
Ｙ４は、酸素、炭素、もしくは窒素原子、スルホキシド、またはスルホンであり、
－Ｙ５－は、（ｉ）単結合、（ｉｉ）＝ＣＨ－（＝ＣＨ－の二重結合＝は、Ｙ４と結合している）、または（ｉｉｉ）－ＣＨ２－もしくは－ＣＨ２ＣＨ２－のいずれかであるか、あるいは（ｉｉ）の水素原子または（ｉｉｉ）の１つまたは複数の水素原子が置換基Ｚ１１で置き換えられている（ｉｉ）～（ｉｉｉ）の１つであり、Ｚ１１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択され、
Ｚ１～Ｚ４はそれぞれ、存在する場合、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、ハロ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択され、Ｚ５は、存在する場合、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから独立に選択されるか、またはＺ２とＺ３、Ｚ３とＺ４、およびＺ４とＺ５のうちの１組が、それらが結合している原子と一緒になって該化合物の残部と縮合した芳香環を形成するが、但し、Ｚ１、Ｚ２およびＺ４の少なくとも１つは水素であり、
Ｚ６は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、およびアラルキルから選択され、
Ｙ６はどれも窒素原子でなくともよいか、あるいはＹ６の１または２つが窒素原子であって、残りは炭素原子であってもよく、
各Ｚ７は、独立に、水素、アルキル、またはアリールであり、
各Ｚ８は、水素、電子吸引性基、非置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、非置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシ、および置換Ｃ１～Ｃ６アルコキシから独立に選択され、該置換アルキルまたは該置換アルコキシは、エーテル、アミノ、一置換もしくは二置換アミノ、環式Ｃ１～Ｃ５アルキルアミノ、イミダゾリル、Ｃ１～Ｃ６アルキルピペラジニル、モルホリノ、チオール、チオエーテル、テトラゾール、カルボン酸、エステル、アミド、一置換もしくは二置換アミド、Ｎ－結合型アミド、Ｎ－結合型スルホンアミド、スルホキシ、スルホネート、スルホニル、スルホキシ、スルフィネート、スルフィニル、ホスホノオキシ、ホスフェート、およびスルホンアミドから選択される１個または複数の基で置換されており、
各Ｚ９は、独立に酸素または硫黄であり、
Ｚ１０は、水素またはアルキル、たとえばＣ１～４アルキルであり、
エフェクターは、薬理学的または診断機能を有する分子である］
または薬学的に許容されるその塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２）
唯一のＺ７または各Ｚ７が水素である、項目１に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３）
Ｘ１が酸素である、項目１または項目２に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目４）
Ｙ１が炭素である、項目１から３のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目５）
Ｚ１がアルコキシまたはアミノである、項目４に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目６）
Ｚ１が水素である、項目４に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目７）
Ｚ２および／またはＺ４が水素である、項目１から６のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目８）
Ｙ４が窒素、酸素、または硫黄である、項目１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目９）
Ｙ４が酸素または硫黄であり、ｐ＝０である、項目８に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１０）
Ｙ４が酸素である、項目９に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１１）
－Ｙ５－が単結合である、項目１から１０のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１２）
Ｙ２およびＹ３が、それぞれ炭素である、項目１から１１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１３）
Ｚ３およびＺ５が、それぞれアルコキシまたはアミノである、項目１２に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１４）
Ｚ３およびＺ５が、それぞれＣ１～６アルコキシである、項目１２に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１５）
Ｚ３およびＺ５が、それぞれメトキシである、項目１２に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１６）
Ｚ３が、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、アルキルチオキシ、アルケニルチオキシ、アルキニルチオキシ、アリールチオキシ、アラルキルチオキシ、アミノ、ヒドロキシ、チオ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、およびシアノから選択される、項目１から１２のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１７）
Ｘ１が、－Ｘ１－Ｘ２が－Ｏ－Ｘ２、－Ｓ－Ｘ２、－ＳＯ２－ＯＸ２、または－ＳＯ２
ＮＺ１０－Ｘ２であるようなものである、項目１から１６のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１８）
Ｘ１が、－Ｘ１－Ｘ２が－Ｏ－Ｘ２であるようなものである、項目１から１７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目１９）
Ｘ２が存在する、項目１から１８のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２０）
Ｘ２が存在しないか、またはＸ１－Ｘ２－エフェクターが、式
Figure 2023038370000141

からなる、項目１から１８のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２１）
ｎおよびｍの一方が０であるか、またはｎおよびｍが両方とも０である、項目１９または項目２０に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２２）
唯一のＺ９または各Ｚ９が酸素である、項目１９から２１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２３）
どのＹ６も窒素でないか、あるいはＹ６の１個が窒素である、項目１９から２２のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２４）
Ｘ２が存在しない、項目１から１８のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２５）
前記エフェクターが細胞傷害剤または細胞増殖抑制剤である、項目１から２４のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２６）
前記エフェクターが、酸素または硫黄原子を介して前記化合物の残部に連結されており、前記－エフェクターが、式（ＩＩ）
Figure 2023038370000142

［式中、
Ｚ１２は、酸素または硫黄であり、
各Ｘ４は、独立に、酸素、硫黄、またはＮＺ１３であり、各－Ｚ１３は、独立に、－（ＣＨ２）２－Ｚ１４、－アルキル、または－水素であり、
各Ｚ１４は、独立に、クロロ、ブロモ、ヨード、またはメシレートである］
からなる、項目２５に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２７）
Ｚ１２が酸素である、項目２６に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２８）
各Ｘ４がＮＺ１３である、項目２６または項目２７に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目２９）
各Ｚ１３が水素である、項目２８に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３０）
各Ｚ１４がブロモまたはクロロである、項目２６から２９のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３１）
各Ｚ１４がブロモである、項目３０に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３２）
項目１から３１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を、薬学的に許容される担体と共に含む組成物。
（項目３３）
医療で使用するための、項目１から３１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３４）
増殖性状態の治療または予防または方法において使用するための、項目１から３１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３５）
前記増殖性状態が、前悪性もしくは悪性の細胞増殖、癌、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害、またはアテローム性動脈硬化症である、項目３４に記載の治療または予防または方法において使用するための化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３６）
前記増殖性状態が、膀胱、脳、乳房、結腸、頭頸部、腎臓、肺、肝臓、卵巣、前立腺、および皮膚の癌から選択される、項目３５に記載の治療または予防または方法において使用するための化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物。
（項目３７）
治療上または予防上有用な量の項目１から３１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することを含む、増殖性状態を治療または予防する方法。
（項目３８）
増殖性状態の治療または予防または方法において使用する医薬を調製するための、項目１から３１のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容される塩、エステル、アミド、もしくは溶媒和物の使用。
（項目３９）
前記エフェクターが、診断機能を有する分子である、項目１から２４のいずれか一項に記載の化合物。
（項目４０）
前記エフェクターがフルオロフォアである、項目３９に記載の化合物。
（項目４１）
前記フルオロフォアが、クマリン、レゾルフィン、フルオレセイン、およびローダミンからなる群から選択される、項目４０に記載の化合物。
（項目４２）
前記フルオロフォアがクマリンである、項目４１に記載の化合物。
（項目４３）
チトクロムＰ４５０酵素によって特異的に活性化される化合物を特定する方法であって、
（ａ）項目４０に記載の化合物の一組を該チトクロムＰ４５０酵素と接触させ、該接触の結果として該一組のうちの１種または複数の化合物から前記フルオロフォアが遊離するかを判定するステップと、
（ｂ）該一組の化合物を対照組織、組織もしくは細胞抽出物、または酵素と接触させ、該接触の結果として該一組のうちの１種または複数の化合物から該フルオロフォアが遊離するかを判定するステップと、
（ｃ）該チトクロムＰ４５０によって特異的に活性化される該化合物を、ステップ（ａ）で該フルオロフォアを遊離させるが、ステップ（ｂ）では遊離させないか、またははるかに少ない程度にしか遊離させない、該一組の化合物の中の任意の化合物として特定するステップと
を含む方法。
（項目４４）
前記Ｐ４５０酵素によって特異的に活性化される前記化合物が、ステップ（ａ）において、ステップ（ｂ）と比べて少なくとも１０倍の前記フルオロフォアを遊離させる、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記一組の化合物が少なくとも１０種の異なる化合物を含む、項目４３または項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記一組の化合物が少なくとも２０種の異なる化合物を含む、項目４３から４５のいず
れか一項に記載の方法。
（項目４７）
（ｄ）前記フルオロフォアが、前記チトクロムＰ４５０酵素の活性部位に結合する薬理学的機能を有する分子で置き換えられていることを除き、ステップ（ｃ）で特定した化合物と構造が同一である化合物のモデルを作製するステップと、
（ｅ）該チトクロムＰ４５０酵素の基質であると予測されている、ステップ（ｄ）でモデルが作製された化合物を合成するステップとをさらに含む、項目４３から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記チトクロムＰ４５０酵素が、ＣＹＰ１Ｂ１、ＣＹＰ２Ｓ１、ＣＹＰ２Ｗ１、ＣＹＰ４Ｚ１、およびこれらのアレル改変体からなる群から選択される、項目４３から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記エフェクターが薬理学的機能を有する分子である項目１に記載の化合物が、癌治療に効果的であるかどうかを判定する方法であって、前記方法は、癌を有する動物に該化合物を投与することを含み、前記癌は、チトクロムＰ４５０酵素を構成的に発現するように改変された組み換え細胞、腫瘍もしくは癌から直接採取した組織、またはその起源である腫瘍もしくは癌によるレベルと同様のレベルで該チトクロムＰ４５０酵素を発現する腫瘍もしくは癌から直接採取した組織に由来する早期継代細胞系からの細胞のいずれかを埋め込んだ結果として生じるものである方法。

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  1. 癌治療における有効性。
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Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0907551D0 (en) 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions
PL223225B1 (pl) * 2012-02-21 2016-10-31 Centrum Badań Molekularnych i Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów
CN102993157B (zh) * 2012-11-21 2015-04-01 上海交通大学 α-萘黄酮衍生物及其制备方法、用途
DK3076972T3 (da) * 2013-10-11 2022-01-03 Beyondspring Inc Cancerbehandling med kombination af plinabulin og taxan
KR20160145640A (ko) 2014-04-15 2016-12-20 다우 아그로사이언시즈 엘엘씨 살진균제로서의 금속효소 억제제 화합물
EP3131399A4 (en) 2014-04-15 2018-02-14 Dow AgroSciences LLC Metalloenzyme inhibitor compounds as fungicides
KR102623404B1 (ko) 2015-03-06 2024-01-11 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 뇌 종양 치료 방법
EP3265090A4 (en) 2015-03-06 2018-08-01 Beyondspring Pharmaceuticals Inc. Method of treating cancer associated with a ras mutation
PE20180528A1 (es) 2015-07-13 2018-03-19 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Composiciones de plinabulina
MX2018009413A (es) 2016-02-08 2019-05-15 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Composiciones que contienen tucaresol o sus analogos.
KR20240091084A (ko) 2016-06-06 2024-06-21 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 호중구감소증을 줄이는 조성물 및 방법
WO2018071282A1 (en) * 2016-10-12 2018-04-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Kdm5 inhibitors
EP3565812B1 (en) 2017-01-06 2023-12-27 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Tubulin binding compounds and therapeutic use thereof
US11400086B2 (en) 2017-02-01 2022-08-02 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Method of reducing chemotherapy-induced neutropenia
CA3089226A1 (en) 2018-01-24 2019-08-01 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Composition and method for reducing thrombocytopenia via the administration of plinabulin
SG11202007381YA (en) * 2018-02-02 2020-08-28 Maverix Oncology Inc Novel small molecule drug conjugates of gemcitabine derivatives
EP3746134A1 (en) * 2018-02-02 2020-12-09 Maverix Oncology, Inc. Small molecule drug conjugates of gemcitabine monophosphate
GR1009958B (el) * 2019-04-24 2021-03-18 ΕΝΟΡΑΣΙΣ ΑΝΩΝΥΜΗ ΕΜΠΟΡΙΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΦΑΡΜΑΚΕΥΤΙΚΩΝ ΚΑΙ ΙΑΤΡΙΚΩΝ ΥΛΙΚΩΝ ΚΑΙ ΜΗΧΑΝΗΜΑΤΩΝ με δ.τ. "ΕΝΟΡΑΣΙΣ Α.Ε." Παραγωγα γεμσιταβινης και μεθοδοι δημιουργιας παραγωγων γεμσιταβινης
JP2021195368A (ja) * 2020-06-10 2021-12-27 アムジエン・インコーポレーテツド シクロブチルジヒドロキノリンスルホンアミド化合物
US11691971B2 (en) 2020-06-19 2023-07-04 Incyte Corporation Naphthyridinone compounds as JAK2 V617F inhibitors
US11753413B2 (en) 2020-06-19 2023-09-12 Incyte Corporation Substituted pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine compounds as JAK2 V617F inhibitors
US11767323B2 (en) 2020-07-02 2023-09-26 Incyte Corporation Tricyclic pyridone compounds as JAK2 V617F inhibitors
JP2023533724A (ja) 2020-07-02 2023-08-04 インサイト・コーポレイション Ｊａｋ２ ｖ６１７ｆ阻害剤としての三環式尿素化合物
WO2022046989A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Incyte Corporation Tricyclic urea compounds as jak2 v617f inhibitors
CN112409368B (zh) * 2020-11-23 2021-10-01 昆明医科大学 一类c-4位取代香豆素类化合物及其制备方法和应用
WO2022140231A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 Incyte Corporation Deazaguaine compounds as jak2 v617f inhibitors
EP4298099A1 (en) 2021-02-25 2024-01-03 Incyte Corporation Spirocyclic lactams as jak2 v617f inhibitors
AU2023235313A1 (en) 2022-03-17 2024-10-03 Incyte Corporation Tricyclic urea compounds as jak2 v617f inhibitors

Family Cites Families (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU389090A1 (ru) * 1971-05-17 1973-07-05 Ташкентский государственный медицинский институт Библиотека
US4526988A (en) 1983-03-10 1985-07-02 Eli Lilly And Company Difluoro antivirals and intermediate therefor
US5229272A (en) 1989-04-25 1993-07-20 Igen, Inc. Catalytic antibody components
ZA859008B (en) 1984-12-04 1987-07-29 Lilly Co Eli The treatment of tumors in mammals
IL77133A (en) 1984-12-04 1991-01-31 Lilly Co Eli Antineoplastic pharmaceutical compositions containing pentofuranoside derivatives,some new such compounds and their preparation
DE3786834T2 (de) * 1986-04-30 1994-03-03 Otsuka Pharma Co Ltd 5-Fluoro-Uracil-Derivate.
US6702705B1 (en) 1988-05-04 2004-03-09 Igen International, Inc. Prodrugs activated by targeted catalytic proteins
EP0418292A4 (en) * 1988-05-25 1991-09-25 Research Corporation Technologies, Inc Phosphoramides useful as antitumor agents
DE3834860A1 (de) * 1988-10-13 1990-04-19 Basf Ag Heterocyclisch substituierte alkoxycumarine, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende therapeutische mittel
DE3834861A1 (de) * 1988-10-13 1990-04-19 Basf Ag Arylalkoxycumarine, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende therapeutische mittel
US6258360B1 (en) 1989-05-04 2001-07-10 Igen International, Inc. Prodrugs activated by targeted catalytic proteins
US6060592A (en) 1990-01-11 2000-05-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine nucleoside compounds and oligonucleoside compounds containing same
US5401838A (en) 1992-06-22 1995-03-28 Eli Lilly And Company Stereoselective fusion glycosylation process for preparing 2'-deoxy-2',2'-difluoronucleosides and 2'-deoxy-2'-fluoronucleosides
PL180681B1 (pl) 1993-06-08 2001-03-30 Cancer Res Campaign Tech Nowe zwiazki, pochodne Q6 -alkiloguaniny, sposób ich wytwarzania i kompozycja farmaceutyczna zawierajaca te zwiazki PL PL PL PL PL
DE59712561D1 (de) * 1996-03-12 2006-04-13 Sanofi Aventis Deutschland Neuartige Prodrugs für die Therapie von Tumoren und entzündlichen Erkrankungen
WO1998011484A1 (fr) 1996-09-13 1998-03-19 Hitachi, Ltd. Processeur de commande a memoire d'historique
EP0986570B9 (en) 1997-01-24 2004-01-02 ConPharma AS Gemcitabine derivatives
NZ330360A (en) 1997-06-02 1999-03-29 Hoffmann La Roche 5'-deoxy-cytidine derivatives, their manufacture and use as antitumoral agents
TW434252B (en) 1997-07-23 2001-05-16 Univ Georgia Res Found Process for the preparation of 2'-fluoro-5-methyl-β-L-arabino-furanosyluridine
ES2226332T3 (es) 1998-02-06 2005-03-16 De Montfort University Profarmacos activados mediante hidroxilacion.
CA2319837C (en) 1998-02-12 2009-10-27 De Montfort University Hydroxylation activated drug release
DE19834751A1 (de) 1998-08-01 2000-02-03 Boehringer Ingelheim Pharma Disubstituierte bicyclische Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US6175001B1 (en) 1998-10-16 2001-01-16 The Scripps Research Institute Functionalized pyrimidine nucleosides and nucleotides and DNA's incorporating same
MXPA02008931A (es) * 2000-03-16 2003-02-10 Hoffmann La Roche Derivados de acido carboxilico como antagonistas ip.
GB0007401D0 (en) 2000-03-27 2000-05-17 Cancer Res Campaign Tech Substituted chalcones as therapeeutic compounds
US6875751B2 (en) 2000-06-15 2005-04-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′-prodrugs of 2′-deoxy-β-L-nucleosides
US7115585B2 (en) 2000-08-21 2006-10-03 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Compositions for treating epithelial and retinal tissue diseases
JP3692927B2 (ja) 2000-11-07 2005-09-07 日本電気株式会社 ファクシミリ装置
UA74852C2 (en) * 2000-12-08 2006-02-15 3M Innovative Properties Co Urea-substituted imidazoquinoline ethers
AU2002253061B2 (en) * 2001-03-02 2005-04-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Alkoxycarbonylamino benzoic acid or alkoxycarbonylamino tetrazolyl phenyl derivatives as IP antagonists
JP2005526696A (ja) * 2001-09-14 2005-09-08 バイエル・フアーマシユーチカルズ・コーポレーシヨン ベータ−３アドレナリン受容体アゴニストとして有用なベンゾフランおよびジヒドロベンゾフラン誘導体
EP1300403A1 (en) * 2001-10-02 2003-04-09 Aventis Pharma S.A. Process for the manufacture of hypoxyxylerone derivatives
GB0123777D0 (en) 2001-10-03 2001-11-21 Cancer Res Ventures Ltd Substituted chalcones as therapeutic agents
GB0123780D0 (en) 2001-10-03 2001-11-21 Cancer Res Ventures Ltd Substituted chalcones as therapeutic agents
WO2004041203A2 (en) 2002-11-04 2004-05-21 Xenoport, Inc. Gemcitabine prodrugs, pharmaceutical compositions and uses thereof
BRPI0407374A (pt) 2003-02-19 2006-01-10 Univ Yale Análogos de nucleosìdeo antiviral e métodos para tratar infecções virais, especialmente infecções de hiv
ZA200507752B (en) * 2003-03-28 2007-01-31 Threshold Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for treating cancer
EP1689716A1 (en) * 2003-12-04 2006-08-16 Wyeth Biaryl sulfonamides and methods for using same
DK1706414T3 (da) 2003-12-22 2008-10-13 Hoffmann La Roche Fremgangsmåde til fluorcytidinderivater
WO2005072061A2 (en) 2004-02-02 2005-08-11 Biosight Ltd. Conjugates for cancer therapy and diagnosis
US8026366B2 (en) * 2004-06-18 2011-09-27 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted thiazoloquinolines and thiazolonaphthyridines
GB0421294D0 (en) 2004-09-24 2004-10-27 Angiogene Pharm Ltd Bioreductively-activated prodrugs
MX2007007228A (es) 2004-12-17 2007-08-14 Lilly Co Eli Profarmaco de amida de gemcitabina, composiciones y uso del mismo.
EP1676834A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-05 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Fused bicyclic carboxamide derivates for use as CXCR2 inhibitors in the treatment of inflammation
NO322682B1 (no) 2005-03-18 2006-11-27 Clavis Pharma Asa Anvendelse av gemcitabinderivater for fremstilling av orale doseringsformer ved kreftbehandling, samt slike orale doseringsformer
KR20080053931A (ko) * 2005-10-06 2008-06-16 사노피-아벤티스 4-옥시-ｎ-[1,3,4]-티아디아졸-2-일-벤젠 설폰아미드, 이의제조방법 및 약제로서의 이의 용도
CA2640463A1 (en) 2006-02-06 2007-10-18 Dr. Reddy's Laboratories Ltd. Preparation of gemcitabine
US20080085871A1 (en) 2006-02-23 2008-04-10 Tam Joemy C Novel polysaccharide pro-drug 5-fluorouracil (5-FU) with enhanced target specificity for colorectal cancer and its preparation methods
US20070225248A1 (en) 2006-03-21 2007-09-27 Clavis Pharma As Oral dosage forms of gemcitabine derivatives
GB0722769D0 (en) * 2007-11-21 2008-01-02 Biolipox Ab New compounds
CN101765369A (zh) 2007-03-19 2010-06-30 俄勒冈州由俄勒冈州立大学代表州高等教育委员会行使 曼尼希碱n-氧化物药物
CN100475832C (zh) 2007-05-31 2009-04-08 南京卡文迪许生物工程技术有限公司 一种新颖的高立体选择性合成吉西他滨工艺及中间体
JO2778B1 (en) 2007-10-16 2014-03-15 ايساي انك Certain vehicles, installations and methods
TWI415858B (zh) 2007-11-06 2013-11-21 Pharmaessentia Corp β－核苷之新穎合成技術
GB0907551D0 (en) * 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions

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