JP2011503231A - Ｈｃｖ感染処置のためのペプチド - Google Patents

Abstract

【課題】ボセプレビルの誘導体である新規ペプチドを提供する。
【解決手段】本発明はペプチド誘導体である新規化合物および薬剤的に受容可能なその塩に関する。より明確には、本発明はボセプレビルの誘導体である新規ペプチドに関する。本発明はまた、本発明の１以上の化合物およびキャリアを含む組成物、ならびにボセプレビルのような、ＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４Ａプロテアーゼ阻害剤を投与することによって有益に処置される疾患および状態を処置する方法における開示された化合物および組成物の使用を提供する。
【選択図】なし

Description

関連する出願
本出願は２００７年１１月２０日に出願された、米国仮出願第６１／００３，８５７号の利益を主張する。上記出願の教示はすべて参照として本明細書に援用される。

ＳＣＨ−５０３０３４、またはＮ−（４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）−３−（２−（３−ｔｅｒｔ−ブチルウレイド）−３，３−ジメチルブタノイル）−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミドとしても公知のボセプレビルはＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼを阻害する。ＨＣＶは非−Ａ、非−Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）における主要な原因因子と考えられてきた、（＋）−センス１本鎖ＲＮＡウイルスである。ＨＣＶプロテアーゼに含まれるいくつかの非−構造蛋白質（ＮＳ１、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４ａ、ＮＳ５ａ、およびＮＳ５ｂ）の中でＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼはＮＳ３／ＮＳ４ａ、ＮＳ４ａ／ＮＳ４ｂ、ＮＳ４ｂ／ＮＳ５ａ、およびＮＳ５ａ／ＮＳ５ｂ接合部でのポリペプチドの蛋白質分解に関与し、従ってウイルス複製中に５種のウイルス蛋白質を生み出すことに関与する。ＮＳ４ａ蛋白質はＮＳ３のセリンプロテアーゼ活性の補因子である（国際特許公開第ＷＯ ２００２００８２４４号を参照されたい）。

ボセプレビルは現在Ｃ型肝炎処置のための第ＩＩＩ相臨床試験中である。
一般に、ボセプレビルはＣ型肝炎患者において十分に耐容性が見られる。有害事象はまれで、頭痛、発熱および筋痛症が認められた（Ｓａｒｒａｚｉｎ，Ｃら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００７，１３２（４）：１２７０およびＺｅｕｚｅｍ，Ｓら，５６ｔｈ Ａｎｎｕ Ｍｅｅｔ Ａｍ Ａｓｓｏｃ Ｓｔｕｄｙ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓ，２００５，（１１月１１−１５日，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）：Ａｂｓｔ ２０１）。

ボセプレビルの有益な活性にもかかわらず、Ｃ型肝炎を処置するための新規な化合物に対する継続した必要性が存在する。

本発明はペプチド誘導体である新規化合物および薬剤的に受容可能なその塩に関する。より明確には、本発明はボセプレビルの誘導体である新規ペプチドに関する。本発明はまた、１以上の本発明の化合物および薬剤的に受容可能なキャリアを含む医薬組成物、ならびにボセプレビルのような、ＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４Ａプロテアーゼ阻害剤を投与することによって有益に処置される疾患および状態を処置する方法における開示された化合物および組成物の使用を提供する。

“改良する（ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ）”および“処置する（ｔｒｅａｔ）”という用語は相互に交換可能に使用され、治療的処置および予防的処置（発症の可能性を軽減する）の両方を含む。両方の用語は、疾患（たとえば、本明細書で詳細に説明する疾患または障害）の発症または進行を減少させる（ｄｅｃｒｅａｓｅ）、抑制する（ｓｕｐｐｒｅｓｓ）、弱める（ａｔｔｅｎｕａｔｅ）、減らす（ｄｉｍｉｎｉｓｈ）、阻む（ａｒｒｅｓｔ）、もしくは安定させる（ｓｔａｂｉｌｉｚｅ）、疾患の重症度を緩和する（ｌｅｓｓｅｎ）または疾患に関連する症状を改善する（ｉｍｐｒｏｖｅ）ことを意味する。

“疾患”は、細胞、組織、または器官の正常な機能を損なうか、または妨げるいずれかの状態または障害を意味する。
合成に使用される化学物質の起源に依存して、合成された化合物に天然の同位体存在比の多少の変動が起こることは認められるであろう。従って、ボセプレビルの調製物は固有に少量の重水素化アイソトポローグ（ｉｓｏｔｏｐｏｌｏｇｕｅ）を含むことになる。この変動にもかかわらず、天然に存在する安定水素同位体の濃度は低く、本発明の化合物の安定同位体置換の程度に比較して取るに足らない。たとえば、Ｗａｄａ，Ｅら，Ｓｅｉｋａｇａｋｕ，１９９４，６６：１５；Ｇａｎｅｓ，ＬＺら，Ｃｏｍｐ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｍｏｌ Ｉｎｔｅｇｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９９８，１１９：７２５を参照されたい。

本発明で使用する“化合物”という用語は、式（１）の重水素化部位として明示された部位に存在するそれぞれの重水素原子に対して少なくとも３０００（４５％重水素取り込み）の最小同位体濃縮係数を有する組成の物質を表すという点で本発明の化合物はそのような天然に存在する重要でない形態から識別される。

本発明の化合物では、特有の同位体として特に明示されないいずれかの原子は、特記しない限り、その原子のいずれかの安定同位体を表すことを意味する。特記しない限り、ある位置が特に“Ｈ”または“水素”と明示される場合、その位置はその天然の存在比の同位体組成において水素を有すると理解される。さらに特記しない限り、ある位置が特に“Ｄ”または“重水素”と明示される場合、その位置は０．０１５％である天然の重水素の存在比の少なくとも３０００倍の存在比で重水素を有すると理解される（すなわち、少なくとも４５％の重水素の取り込み）。

本明細書で使用する“同位体濃縮係数”という用語は、特定された同位体の同位体存在比と天然の存在比間の比を意味する。
他の態様では、本発明の化合物は化合物の潜在的な重水素化部位として明示された部位に存在するそれぞれの重水素に対して、少なくとも３５００（５２．５％重水素取り込み）少なくとも４０００（６０％重水素取り込み）、少なくとも４５００（６７．５％重水素取り込み）、少なくとも５０００（７５％重水素取り込み）、少なくとも５５００（８２．５％重水素取り込み）、少なくとも６０００（９０％重水素取り込み）、少なくとも６３３３．３（９５％重水素取り込み）、少なくとも６４６６．７（９７％重水素取り込み）、少なくとも６６００（９９％重水素取り込み）、または少なくとも６６３３．３（９９．５％重水素取り込み）の同位体濃縮係数を有する。

本明細書で表した構造式は、ある位置の原子が同位体濃縮されているかどうかを示してもよく、示さなくてもよい。最も一般的な態様では、特有の位置が同位体濃縮されているかどうかに関して構造式から判断できない場合、特有の位置における安定同位体が天然の存在比で存在するか、あるいは、その特有の位置が１以上の天然に存在する安定同位体に関して同位体濃縮されていると理解すべきである。より特定の態様では、同位体濃縮されていると特に明示されない化合物のすべての位置において安定同位体は天然の存在比で存在する。

“アイソトポローグ”という用語は、その同位体組成においてだけ本発明の特定の化合物と異なる化学種を表す。アイソトポローグは１以上の位置における同位体濃縮のレベルにおいて、および／または同位体濃縮の位置において異なることが可能である。

本発明の化合物に言及する場合、“化合物”という用語は分子の構成原子間に同位体変動が存在してもよいことを除いて、同一の化学構造を有する分子の集まりを表す。従って、示された重水素原子を含む特有の化学構造によって表される化合物が、その構造中の１以上の明示された重水素位置に水素原子を有する、より少ない量のアイソトポローグを同様に含むであろうことは当業者には明らかであろう。本発明の化合物におけるそのようなアイソトポローグの相対量は、化合物を作るために使用される重水素化試薬の同位体純度、および化合物を調製するために使用される種々の合成ステップにおける重水素の取り込みの効率を含むいくつかの因子に依存することになる。しかし、先に説明したように、そのようなアイソトポローグの相対量は全体として化合物の５５％未満であろう。他の態様では、そのようなアイソトポローグの相対量は全体として化合物の５０％未満、４７．５％未満、４０％未満、３２．５％未満、２５％未満、１７．５％未満、１０％未満、５％未満、３％未満、１％未満、または０．５％未満であろう。

本発明はまた、本発明の化合物の塩、溶媒和物または水和物を提供する。
本発明の化合物の塩は、酸と化合物の塩基性基、たとえばアミノ官能基、または塩基と化合物の酸性基、たとえばカルボキシル官能基の間で形成される。別の態様に従って、該化合物は薬剤的に受容可能な酸付加塩である。

本明細書で使用する“薬剤的に受容可能”という用語は、適切な医学的判断の範囲内で過度な毒性、痛み、アレルギー反応などを起こさずにヒトおよび他の哺乳動物の組織と接触する使用に適し、そして適当な利益／リスク比に対応する成分を表す。“薬剤的に受容可能な塩”は、受容者への投与時に、本発明の化合物を直接または間接のいずれかで提供することが可能ないずれかの非毒性塩を意味する。“薬剤的に受容可能なカウンターイオン”は、受容者への投与時に塩から遊離した場合に毒性でない、塩のイオン性部分である。

薬剤的に受容可能な塩を形成するために一般に利用される酸には、二硫化水素、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸およびリン酸のような無機酸、およびパラ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、酒石酸、ビ酒石酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ベシル酸、フマル酸、グルコン酸、グルクロン酸、ギ酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、乳酸、蓚酸、パラ−ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸および酢酸のような有機酸、ならびに関連する無機酸および有機酸が挙げられる。そのような薬剤的に受容可能な塩には、従って硫酸塩、ピロ硫酸塩、硫酸水素塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、クロリド、ブロミド、ヨージド、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソブチル酸塩、カプリン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、蓚酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベレート、セバケート、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、マンデル酸塩および他の塩が挙げられる。一態様では、薬剤的に受容可能な酸付加塩には、塩酸および臭化水素酸のような鉱酸と共に形成されるもの、およびとりわけマレイン酸のような有機酸と共に形成されるものが挙げられる。

本明細書で使用する“水和物”という用語は、非共有結合分子間力によって結合した化学量論的、または非化学量論的量の水をさらに含む化合物を意味する。
本明細書で使用する“溶媒和物”という用語は、非共有結合分子間力によって結合した化学量論的、または非化学量論的量の溶媒、たとえば水、アセトン、エタノール、メタノール、ジクロロメタン、２−プロパノールなどをさらに含む化合物を意味する。

本発明の化合物（たとえば、式Ｉの化合物）は、たとえば重水素置換または別の方法の結果として、非対称炭素原子を含んでいてもよい。そのようなものとして本発明の化合物は別個のエナンチオマー、または２つのエナンチオマーの混合物のいずれかとして存在することができる。従って、本発明の化合物は両方のラセミ体混合物、そしてさらに別の可能性のある立体異性体を実質的に含まない別個のそれぞれの立体異性体を含むことになる。本明細書で使用する“実質的に他の立体異性体を含まない”という用語は他の立体異性体の２５％未満、好ましくは他の立体異性体の１０％未満、より好ましくは他の立体異性体の５％未満、そしてもっとも好ましくは他の立体異性体の２％未満、または他の立体異性体の“Ｘ”％未満（ここでＸは０〜１００までの間の数である）が存在することを意味する。与えられた化合物の別個のエナンチオマーを得るか、または合成する方法は当該技術分野で公知であり、最終化合物に、または出発物質もしくは中間体に実行可能なものとして適用されてもよい。

本明細書で使用する“安定な化合物”という用語は、それらの工業的合成を可能にするために十分な安定性を有し、そして本明細書で詳細に記載された目的（たとえば治療薬に反応性の疾患または状態を処置するための治療用製品、治療用化合物の生産における使用のための中間体、分離可能または貯蔵可能な中間体化合物への製剤）に対して有用であるように十分な期間完全性を維持する化合物を表す。

“Ｄ”は重水素を表す。“立体異性体”はエナンチオマーとジアステレオマーの両方を表す。
本明細書を通して、可変記号は一般的に（たとえば“それぞれのＲ”）表されてもよく、あるいは明確に（たとえば、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３など）表されてもよい。特記しない限り、可変記号が一般的に表される場合、その特有の可変記号のすべての特定の態様を含むことを意味する。

治療用化合物
本発明は式Ｉの化合物：

または薬剤的に受容可能なその塩を提供し、式中：
環Ａは０〜７個の重水素原子を有するシクロブチル環であり；
Ｒ^１およびＲ^２のそれぞれは独立して−Ｃ（ＣＨ_３）_３であり、式中１〜９個の水素原子は場合により重水素原子に置換され；
それぞれのＲ^３は独立して−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｄ、−ＣＨＤ_２、および−ＣＤ_３から選択され；
それぞれのＹは独立して水素および重水素から選択され；そして
Ｒ^１およびＲ^２が同時に−Ｃ（ＣＨ_３）_３であり、Ｒ^３が−ＣＨ_３であり、そして環Ａが重水素原子を持たない場合、少なくとも１つのＹは重水素である。

式Ｉの化合物の一態様では：
環Ａは重水素原子を持たないか、または７個の重水素原子を有するシクロブチル環であり；
Ｒ^１およびＲ^２は同じであり；
それぞれのＲ^３は同じであり；そして
それぞれのＹは同じである。

式Ｉの化合物の別の態様では：
環Ａは重水素原子を持たないか、または７個の重水素原子を有するシクロブチル環であり；
Ｒ^１およびＲ^２は同じであり、そしてＣ（ＣＨ_３）_３および−Ｃ（ＣＤ_３）_３から選択され；そして
それぞれのＲ^３は同じであり、そして−ＣＨ_３、および−ＣＤ_３から選択される。

式Ｉの化合物の他の態様には以下のものが挙げられ、式中：
ａ）Ｒ^１は−Ｃ（ＣＨ_３）_３および−Ｃ（ＣＤ_３）_３から選択され；
ｂ）Ｒ^２は−Ｃ（ＣＨ_３）_３および−Ｃ（ＣＤ_３）_３から選択され；
ｃ）それぞれのＲ^３は同じであり；
ｄ）それぞれのＲ^３は独立して−ＣＨ_３および−ＣＤ_３から選択され；
ｅ）環Ａは０または７個の重水素原子を有するシクロブチル環であるか；または
ｆ）それぞれのＹ^２は同じである。

別の態様では、式Ｉの化合物は先のａ）からｆ）までの１以上において説明した特徴を有し；そしてＲ^１およびＲ^２の少なくとも１つは−Ｃ（ＣＤ_３）_３であるか；またはそれぞれのＲ^３は−ＣＤ_３である。たとえば、少なくともＲ^１およびＲ^２の１つは−Ｃ（ＣＤ_３）_３であるか；またはそれぞれのＲ^３は−ＣＤ_３であり、そして環Ａは０〜７個の重水素原子を有するシクロブチル環である、または少なくともＲ^１およびＲ^２の１つは−Ｃ（ＣＤ_３）_３であるか；またはそれぞれのＲ^３は−ＣＤ_３であり、そしてそれぞれのＹ^２は同じである。

さらに別の態様では、式Ｉの化合物は先のａ）からｆ）までの２以上において説明した特徴を有する。そのような組み合わせには、以下のものが挙げられるが、それらに限定されない：ａとｂ；ａとｃ；ｂとｃ；ａ、ｂとｃ；ａとｄ；ｂとｄ；ａ、ｂとｄ；ａ、ｃとｄ；ｂ、ｃ、とｄ；ａ、ｂ、ｃとｄ；ｅとｃ；ｅとｄ；ｅとａ；ｅとｂ；ｅ、ｂとａ；ｅ、ｃとａ；ｅ、ｃとｂ；ｅ、ｃ、ｂとａ；ｅ、ｄとａ；ｅ、ｄとｂ；ｅ、ｄ、ｂとａ；ｅ、ｄ、ｃとａ；ｅ、ｄ、ｃとｂ；ｅ、ｄ、ｃ、ｂとａ；ａとｆ；ｂとｆ；ａ、ｂとｆ；ｃとｆ；ａ、ｃ、とｆ；ｂ、ｃとｆ；ａ、ｂ、ｃとｆ；ｄとｆ；ｂとｆ；ａ、ｂ、ｄとｆ；ａ、ｃ、ｄとｆ；ｂ、ｃ、ｄとｆ；ａ、ｂ、ｃ、ｄ、とｆ。

さらに別の態様では、Ｒ^１およびＲ^２のそれぞれは−Ｃ（ＣＤ_３）_３であり、それぞれのＲ^３は同じであり、そして−ＣＤ_３および−ＣＨ_３から選択され、それぞれのＹ^２は同じであり、そして環Ａは重水素原子を持たないシクロブチル環および７個の重水素原子を有するシクロブチル環から選択される。

特定の式Ｉの化合物の例は以下の表１に示される。これらの例では、Ｙ^２ａはＹ^２ｂと同じであり、そして環Ａは重水素原子を持たない（Ｈ_７）か、または利用可能な環炭素位置において水素原子と入れ替わった７個の重水素原子（Ｄ_７）を有する。

表１．特定の式Ｉの化合物の例

または薬剤的に受容可能な上記化合物のいずれかの塩。
さらに別の態様では、該化合物は：

または薬剤的に受容可能な上記化合物のいずれかの塩から選択される。
別の態様のセットでは、先に説明した態様のいずれかにおいて重水素と明示されないいずれかの原子はその天然の同位体存在比で存在する。

式Ｉの化合物の合成は通常の技術の合成化学者によって容易に達成することができる。そのような方法は、本明細書で詳細に説明した化合物を合成するための、対応する重水素化され、そして場合により、他の同位体を含む試薬および／または中間体を利用することにより、または化学構造に同位体原子を導入するための当該技術分野で公知の標準合成プロトコルを実施することにより実行することができる。適切な手順および中間体はたとえば、ＰＣＴ公開ＷＯ ２００４／１１３２９４、米国特許公開ＵＳ２００７０００４６３５において、またはＶｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００６，４９：６０７４において開示される。該化合物は以下に示したスキームに例証したように調製することができる。

スキーム１．式Ｉの化合物を調製するための一般経路

先のスキーム１は式Ｉの化合物を調製するための一般経路を示す。Ｖｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００６，４９：６０７４−６０８６によって記載された手順を使用して、重水素化３，４−ジメチルシクロプロピルプロリン３７は重水素化Ｎ−Ｂｏｃ−ｔｅｒｔ−ロイシン試薬２９と縮合し、ジペプチド３８を与える。ＨＣｌによるＢｏｃ基の酸性除去および対応するアミンと重水素化ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネート３１（塩酸およびその後のトリホスゲンによる処理により、対応して重水素化されたアミンＲ^１−ＮＨ_２ ３０から調製される）との反応はジペプチド３９を与える。アルファ‐ヒドロキシアミド２３への最終カップリングはヒドロキシアミド４０を生み、次にそれは酸化されて式Ｉの化合物を与える。

スキーム２．中間体２３を調製するための経路

スキーム２はスキーム１において有用な、重水素化シクロブチルメチルアルファ‐ヒドロキシアミド２３を調製するための経路を示す。Ｈｅｉｓｉｇ，ＧＢら，Ｏｒｇ Ｓｙｎｔｈ １９５５，３：２１３−２１５により記載された手順を使用した、ナトリウムエトキシドの存在下でのジエチルマロネート１１による重水素化ジブロモプロパン１０（たとえば、市販のジブロモプロパン−ｄ_６）の処理は、対応するエチル−１，１−シクロブタンジカルボキシレート１２を与える。先に述べた参考文献中の手順を使用した、水酸化ナトリウムまたは重水酸化ナトリウムによる１２中のエチルエステル部分の鹸化、その後の塩酸または重塩酸による脱炭酸は重水素化シクロブタンカルボン酸１３を与える。Ｉｎｇｏｌｄ，ＫＵ，ら，Ｊ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ ＩＩ １９８１，ｐｐ９７０−９７４に記載された手順を使用した、重水素化リチウムアルミニウムまたは水素化リチウムアルミニウム（ＬｉＡｌ（Ｙ^２）_４）による１３の還元は重水素化シクロブチルメタノール１４を与える。その後のＩｎｇｏｌｄの手順を使用した、対応するメシレートとしての１４のアルコール部分の活性化およびリチウムブロミドによる置換は対応するシクロブチルメチルブロミド１５を与える。

シクロブチルメチルブロミド１５はその後、Ｖｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００６，４９：６０７４−６０８６によって記載されたプロトコルを使用してエチルＮ−（ジフェニルメチレン）グリシネート１６（カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドによる１６の処理によりｉｎ ｓｉｔｕで生成される）と結合し、対応するグリシン誘導体１７を与える。１７のジフェニルイミン部分の加水分解、その後のアミンのＢｏｃ保護はＢｏｃ‐保護アミノエステル１８を生じる。Ｙ^１基は水酸化ナトリウムまたは重水酸化ナトリウムのいずれかによる１８の処理により取り込まれ、その後生じた酸は、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンとベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−ｔｒｉｓ−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）による処理によって対応するＷｅｉｎｒｅｂアミド１９に変換される。アミド１９の対応するアルデヒド２０への変換はＴＨＦ中のＬｉＡｌＨ_４による処理により達成される。アルデヒド２０はトリエチルアミン中のアセトンシアノヒドリンにより処理され、シアノヒドリン２１を生じる。シアノヒドリン２１のヒドロキシアミド２２への加水分解はＬｉＯＨと過酸化水素による処理により成し遂げられる。この後、２２中のＢｏｃ基の酸に触媒された開裂により重水素化アルファ‐ヒドロキシアミド２３が形成される。

スキーム３．中間体２９の合成

先のスキーム３はスキーム１において有用な重水素化Ｎ−Ｂｏｃ−ｔｅｒｔ−ロイシン中間体２９の合成を示す。重水素化Ｇｒｉｇｎａｒｄ試薬は、重水素化２−クロロ−２−メチルプロパン２４（たとえば市販の２−クロロ−２−メチルプロパンーｄ_９）とマグネシウム金属との反応によりｉｎ ｓｉｔｕで生成される。Ｇｒｉｇｎａｒｄ試薬はＮａｚａｒｓｋｉ ＲＢら，Ｂｕｌｌ Ｓｏｃ Ｃｈｉｍ Ｂｅｌｇ １９９２，１０１：８１７−８１９によって記載された手順に従って、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドにより処理され、対応するピバルデヒド（ｐｉｖａｌｄｅｈｙｄｅ）２５を与える。Ｂｏｅｓｔｅｎ，ＷＨら，Ｏｒｇ Ｌｅｔｔ ２００１，３：１１２１−１１２４によって記載された手順に従った（Ｒ）−フェニルグリシンアミドによるピバルデヒド２５の処理、その後の対応するキラルイミンとシアン化ナトリウムの反応はアルファ‐アミノニトリル２６を与える。ニトリル２６からジアミドへの加水分解、続くフェニルアセトアミド基の水素化分解はアルファ‐アミノアミド２７を与える。最後に、ｔｅｒｔ−ロイシンアミドの６Ｎ ＨＣｌによる加水分解は対応する酸２８を与え、その後それはＢｏｃ−保護され、所望するＮ−Ｂｏｃ−ｔｅｒｔ−ロイシン試薬２９を形成する。

スキーム４．中間体３７の合成

スキーム４はスキーム１において有用な、重水素化３，４−ジメチルシクロプロピルプロリン３７の合成を示す。Ｍａｄａｌｅｎｇｏｉｔｉａ，ＪＳら，Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ １９９９，６４：５４７−５５５によって記載された手順に従った、（３Ｒ，７ａＳ）−テトラヒドロ−３−フェニル−３Ｈ，５Ｈ−ピロロール，２−コキサオール−５−オンのカリウムエノラート（市販の（３Ｒ，７ａＳ）−テトラヒドロ−３−フェニル−３Ｈ，５Ｈ−ピロロール，２−コキサオール−５−オン３２とヘキサメチルジシラザンカリウムとの反応によりｉｎ ｓｉｔｕで生成される）のフェニル塩化セレンによる処理、その後のセレノキシドの酸化および除去は、アルファ，ベータ−不飽和ラクタム３３を与える。Ａｈｍａｄ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００１，４４：３３０２−３３１０に記載された手順を使用した、重水素化イソプロピルホスホニウムイリド３４（重水素化イソプロピルブロミド（たとえば、市販のｄ_６−イソプロピルブロミド）からｉｎ ｓｉｔｕで調製される、Ｂｒａｖｅｒｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ １９９０，１１２：５８３０−５８３７を参照されたい）によるラクタムの処理は、対応するジメチルシクロプロピルラクタム３５を与える。ラクタム３５は、Ｖｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００６，４９：６０７４−６０８６によって記載された方法に従って、必須のシクロプロピルプロリンメチルエステル３７に変換される。

先に示した特定の研究方法および化合物は限定することを意図しない。本明細書のスキームにおける化学構造は、同じ可変記号名（すなわち、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３など）によって確認されるかどうかにかかわらず、本明細書の化合物式の対応する位置の化学基定義（部分、原子など）と同一基準でここに定義された可変記号を表す。別の化合物の合成における使用のための化合物構造における化学基の適合性は当業者の知識の範囲内である。

本明細書のスキームにおいて明白に示されない経路内のものを含む、式Ｉの化合物およびそれらの合成前駆体を合成する付加的な方法は、当該技術分野の通常の化学者の手段の範囲内である。反応条件を最適化し、そして必要な場合、競合する副産物を最少化するための方法は当該技術分野で公知である。適用可能な化合物を合成することにおいて有用な、合成化学変換および保護基方法論（保護および脱保護）は当該技術分野で公知であり、たとえばＬａｒｏｃｋ Ｒ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９８９）；Ｇｒｅｅｎｅ ＴＷら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３版，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ（１９９９）；Ｆｉｅｓｅｒ Ｌら，Ｆｉｅｓｅｒ ａｎｄ Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ（１９９４）；ならびにＰａｑｕｅｔｔｅ Ｌ編，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ（１９９５）およびその続版に記載されたものが挙げられる。

本発明によって予想される置換基および可変記号の組み合わせは安定な化合物の形成に帰着するものだけである。
組成物
本発明はまた、有効量の式Ｉの化合物（たとえば、本明細書の式のいずれかを含む）、または該化合物の薬剤的に受容可能な塩；および受容可能なキャリアを含む発熱物質を含まない医薬組成物を提供する。キャリアは製剤の他の成分と適合するという意味において、そして薬剤的に受容可能なキャリアの場合において“受容可能”であって、薬剤に使用される量においてその受容者に有害でない。

薬剤的に受容可能なキャリアには、本発明の医薬組成物において使用してもよいアジュバントおよびベヒクルが挙げられる。薬剤的に受容可能なキャリアには、１以上の塩、電解質、可溶化剤、溶媒、バッファー、乳化剤、香味剤、着色剤、甘味剤、フィラー、潤滑剤、希釈剤、懸濁化剤、増粘剤、分散剤、湿潤剤、生物学的利用能促進剤、および吸収促進剤が挙げられる。特定の薬剤的に受容可能なキャリアには、１，３−ブタンジオール、２−オクチルドデカノール、アラビアゴム、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、蜜蝋、ベンジルアルコール、リン酸塩、セルロースを基礎にした物質、セテアリルアルコール、セチルエステルワックス、ココアバター、コロイド状シリカ、コーンスターチ、リン酸水素二ナトリウム、乳化ワックス、エチレンオキシド−プロピレンオキシドブロックコポリマー、ゼラチン、グリセリン、グリシン、ヒト血清アルブミン、イオン交換剤、等張性塩化ナトリウム、ラクトース、レシチン、液化石油、長鎖アルコール、ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）、ステアリン酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム、マンニトール、鉱物油、オレイン酸およびそのグリセリド誘導体、オリーブオイルまたはとりわけポリオキシエチル化された型のひまし油、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）、ポリアクリレート、ポリエチレングリコール、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリソルベート６０、ポリビニルピロリドン、リン酸水素カリウム、ソルビン酸カリウム、プロピレングリコール、硫酸プロタミン、リンゲル液、血清蛋白質、カルボキシメチルセルロースナトリウム、塩化ナトリウム、ソルビン酸、モノステアリン酸ソルビタン、スクロース、トラガカント、Ｔｗｅｅｎ８０、水、ワックス、白色ワセリン、羊毛脂、および亜鉛塩が挙げられるが、それらに限定されない。

本発明の医薬組成物には、経口、直腸内、鼻腔内、局所（口腔内および舌下を含む）、膣内、非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内を含む）および経皮投与に適したものが挙げられる。それぞれの組成物の型と共に利用するための適切な薬剤的に受容可能なキャリアの選択は当該技術分野で公知である。同様に、本発明の種々の医薬組成物の単位剤形を作り出すための活性成分とキャリアを結び合わせるための方法も当該技術分野で公知である。たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ（１７版，１９８５）を参照されたい。

別の態様では、本発明の組成物はさらに第２治療薬を含む。第２治療薬は、ボセプレビルと同じ作用機序を有する化合物と一緒に投与された場合、好都合な特性を有することが公知であるか、またはそのような特性を証明するいずれの化合物または治療薬から選択されてもよい。そのような薬剤には、限定するものではないが、ＷＯ ２００６１３０６６６，ＷＯ ２００６１３０６２８，ＷＯ ２００７０９２６１６，およびＷＯ ２００７０９２６４５に記載されたものを含む、ボセプレビルとの組み合わせにおいて有用であると示されたものが挙げられる。

好ましくは、第２治療薬はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に関連する障害から選択される疾患もしくは状態の処置または予防に有用な薬剤である。

一態様では、第２治療薬はＰＥＧ‐インターフェロンアルファ‐２ａ、ＰＥＧ‐インターフェロンアルファ‐２ｂ、リバビリン、テラプラビル、ニタゾキサニドおよび前記薬剤の２種以上の組み合わせから選択される。

いっそう特定の態様では、第２治療薬はＰＥＧ‐インターフェロンアルファ‐２ａとリバビリンの組み合わせである。
別の態様では、本発明は本発明の化合物と１以上の先に記載の第２治療薬のいずれかの別個の剤形を提供し、ここで該化合物および第２治療薬はお互いに関連する。本明細書で使用する“お互いに関連する”という用語は、別個の剤形が一緒に売られ、そして（お互いに２４時間以内に連続して、または同時に）投与されることを意図していることが容易に明らかであるように、別個の剤形が一緒に包装されるか、または他の方法でお互いに結びつけられていることを意味する。

本発明の医薬組成物では、本発明の化合物は有効量で存在する。本明細書で使用する“有効量”という用語は、適切な投与計画で投与される場合、標的障害を（治療的に、または予防的に）処置するために十分である量を表す。たとえば、有効量は処置されることになる障害の重症度、持続期間または進行を軽減するか、もしくは改良する、処置されることになる障害の増悪を妨げる、処置されることになる障害の退行を引き起こす、または別の療法の予防もしくは治療効果を高めるか、もしくは改善するために十分である。

動物およびヒトの投薬量（ミリグラム／ｍ^２体表面積に基づく）の相互関係はＦｒｅｉｒｅｉｃｈら，（１９６６）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ５０：２１９に記載される。体表面積は患者の身長および体重から概算で決定されてもよい。たとえば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔａｂｌｅｓ，Ｇｅｉｇｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ａｒｄｓｌｅｙ，Ｎ．Ｙ．，１９７０，５３７を参照されたい。

一態様では、本発明の化合物の有効量は処置毎に約１ｍｇから約８０００ｍｇまでの範囲で変化しうる。より特定の態様では、範囲は処置毎に約１０から４０００ｍｇまで、または２０から１６００ｍｇまで、または最も明確には約１００から８００ｍｇまでである。処置は典型的には１日に１回から３回まで投与される。

有効服用量はまた、当業者に認識されているように、処置される疾患、疾患の重症度、投与経路、患者の性、年齢および健康状態、賦形剤の使用、他の薬剤の使用のような他の治療的処置との同時使用の可能性および処置する医師の判断に依存して変化することになる。たとえば、有効服用量を選択するための指針は臨床試験に使用されているボセプレビルの投薬量を参照することによって決定することができる。

第２治療薬を含む医薬組成物の場合、第２治療薬の有効量はその薬剤だけを使用するモノテラピー計画において通常利用される投薬量の約２０％〜１００％の間である。好ましくは、有効量は通常のモノテラピー服用量の約７０％〜１００％の間である。これらの第２治療薬の通常のモノテラピー投薬量は当該技術分野で公知である。たとえば、Ｗｅｌｌｓら編，Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，２版，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ａｎｄ Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，Ｃｏｎｎ．（２０００）；ＰＤＲ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｏｃｋｅｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ２０００，デラックス版，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｌｏｍａ Ｌｉｎｄａ，Ｃａｌｉｆ．（２０００）を参照されたい。これらの参考文献のそれぞれはそのまま参照として本明細書に援用される。

先に参照した第２治療薬のいくつかは本発明の化合物と相乗的に作用することが期待される。このことが起こる場合、第２治療薬および／または本発明の化合物の有効投薬量はモノテラピーにおいて必要とされる量から軽減されることが可能になるであろう。このことは、第２治療薬または本発明の化合物のいずれかの毒性副作用の最少化、効力の相乗的改善、投与または使用のたやすさの改善、および／または化合物調製または製剤の全体費用の軽減という利点を有する。

処置の方法
別の態様では、本発明は、本明細書に記載の１以上の式Ｉの化合物と感染した細胞を接触させることを含む、そのような細胞におけるＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４Ａプロテアーゼの活性を遮断する方法を提供する。

別の態様に従って、本発明はボセプレビルによって有益に処置される疾患を処置することが必要な患者におけるそのような処置の方法を提供し、該方法は有効量の本発明の化合物または組成物を該患者に投与するステップを含む。そのような疾患は当該技術分野で公知であり、限定はしないが以下の特許および公開された特許出願：ＷＯ ２００２００８２４４、およびＷＯ ２００３０６２２６５に開示されている。そのような疾患には、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に関連した障害が挙げられるが、それらに限定されない。

特有の一態様では、本発明の方法はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を処置することが必要な患者においてそのような感染を処置するために使用される。
本明細書に詳細に説明された方法は、患者が特有の確定した処置を必要とすると確認される場合の方法を含む。そのような処置が必要な患者を確認することは患者またはヘルスケア専門家の判断に属してよく、そして主観的（たとえば、意見）または客観的（たとえば、試験または診断法によって測定可能）でありうる。

別の態様では、上記の処置方法のいずれかは、１以上の第２治療薬を該患者に同時投与する付加的なステップを含む。第２治療薬の選択は、ボセプレビルとの同時投与に有用であることが公知のいずれかの第２治療薬から行われてもよい。第２治療薬の選択はまた、処置されることになる特有の疾患または状態に依存する。本発明の方法において利用されてもよい第２治療薬の例としては、本発明の化合物および第２治療薬を含む組み合わせ組成物における使用のために先に説明したものが挙げられる。

とりわけ、本発明の併用療法は（徴候：Ｃ型肝炎に従って括弧に示される特有の第２治療薬（ＰＥＧ‐インターフェロン、およびリバビリン）と共に）以下の状態の処置のために式Ｉの化合物および第２治療薬を同時投与することを含む。（ｈｔｔｐ：／／ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／においてＳＣＨ−５０３０３４に関する臨床試験を参照されたい）。

本明細書で使用する“同時投与された”という用語は、単一剤形（たとえば本発明の化合物と先に記載の第２治療薬を含む本発明の組成物）の一部として、または別個の複数の剤形として、第２治療薬が本発明の化合物と一緒に投与されてもよいことを意味する。あるいは、本発明の化合物の投与の前に、投与と連続して、または投与後に付加的な薬剤が投与されてもよい。そのような併用療法処置では、本発明の化合物と第２治療薬の両方が慣用の方法によって投与される。本発明の化合物と第２治療薬の両方を含む本発明の組成物の患者への投与は、処置の経過中の別の時期における該患者への同じ治療薬、いずれか他の第２治療薬または本発明のいずれかの化合物の別個の投与を除外しない。

これらの第２治療薬の有効量は当業者に公知であり、投薬のための指針は本明細書で参照した特許および公開された特許出願において、ならびにＷｅｌｌｓら編，Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，２版，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ａｎｄ Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，Ｃｏｎｎ．（２０００）；ＰＤＲ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｏｃｋｅｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ２０００，デラックス版，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｌｏｍａ Ｌｉｎｄａ，Ｃａｌｉｆ．（２０００）、および他の医学教科書の中に見出すことができる。しかし、第２治療薬の最適有効量の範囲を決定することはまさに当業者の権限内にある。

第２治療薬が対象に投与される本発明の一態様では、本発明の化合物の有効量は、第２治療薬が投与されない場合の本発明の化合物の有効量より少ない。別の態様では、第２治療薬の有効量は本発明の化合物が投与されない場合の第２治療薬の有効量より少ない。このようにして、いずれかの薬剤の高服用量に伴う望ましくない副作用が最少化されてもよい。他の潜在的な利点（限定しないが、改善された投薬計画および／または軽減された薬物費用を含む）は当業者に明らかであろう。

さらに別の側面では、本発明は先に説明した疾患、障害または症状の患者における処置または予防のための、単一組成物、または別個の剤形のいずれかとしての医薬品の工業的製造における、式Ｉの化合物の単独、または１以上の先に記載の第２治療薬と一緒の使用を提供する。本発明の別の側面は、本明細書で詳細に説明した疾患、障害または症状の患者におけるその処置または予防における使用のための式Ｉの化合物である。

診断方法およびキット
本発明はまた、Ｃ型肝炎ウイルス感染を処置するために使用するキットを提供する。これらのキットは、（ａ）包装体に入った式Ｉの化合物またはその塩を含む医薬組成物；および（ｂ）Ｃ型肝炎ウイルス感染を処置するための医薬組成物を使用する方法を記載する説明書を含む。

包装体は該医薬組成物を保持することができるいずれかの容器、または他の密閉もしくは密閉可能な器具であってもよい。例としては、瓶、アンプル、それぞれの区画またはチャンバーが該組成物の単一服用量を含む、分割された、もしくは複数のチャンバーを持つホルダー瓶、それぞれの区画が該組成物の単一服用量を含む分割されたホイルパケット、または該組成物の単一服用量を分配するディスペンサーが挙げられる。包装体は、薬剤的に受容可能な材料、たとえば紙もしくは段ボール箱、ガラスもしくはプラスチック瓶もしくはジャー、（たとえば、異なる包装体への配置のための錠剤の補充品を保持するための）再密封可能な袋、または治療スケジュールに従ってパックから押し出すための個々の服用量の入ったブリスターパックから作られる当該技術分野で公知のいずれの慣用の形状または形態でもありうる。利用される包装体は含まれる剤形そのものに依存してよく、たとえば慣用の段ボール箱は一般に液体懸濁液を保持するために使用されないであろう。単一剤形を市販するための単一パッケージの中で１つ以上の包装体が一緒に使用されうることは蓋然性がある。たとえば、錠剤が瓶に含まれ、その瓶が今度は箱の中に含まれてもよい。一態様では、包装体はブリスターパックである。

本発明のキットはまた、医薬組成物の単位服用量を投与するため、または計り取るための装置を含んでいてもよい。そのような装置は、該組成物が吸入可能な組成物である場合のインヘラー；該組成物が注射可能な組成物である場合のシリンジと針；該組成物が経口液体組成物である場合の容量目盛りの付いた、または付かないシリンジ、スプーン、ポンプ、もしくは容器；またはキットに存在する組成物の投薬製剤に適切ないずれか他の測定もしくは送達装置を含んでいてもよい。

ある態様では、本発明のキットは、本発明の化合物との同時投与への使用のための先に挙げたものの１つのような、第２治療薬を含む医薬組成物を別個の包装体の中の容器に含んでいてもよい。

代謝安定性の評価
ある種のｉｎ ｖｉｔｒｏでの肝臓代謝研究は以下の参考文献に以前に記載されていて、それらのそれぞれはそのまま参照として本明細書に援用される：Ｏｂａｃｈ，ＲＳ，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐ，１９９９，２７：１３５０；Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＪＢら，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｖ，１９９７，２９：８９１；Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＪＢ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９４，４７：１４６９；Ｉｗａｔｓｕｂｏ，Ｔら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ，１９９７，７３：１４７；およびＬａｖｅ，Ｔら，Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ，１９９７，１４：１５２。

ミクロソームアッセイ：ヒト肝臓ミクロソーム（２０ｍｇ／ｍＬ）はＸｅｎｏｔｅｃｈ，ＬＬＣ（Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ）から得られる。β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸還元型（ＮＡＤＰＨ）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入される。インキュベーション混合物は表４に従って調製される：

代謝安定性の測定：この反応混合物の２アリコートが本発明の化合物に対して使用される。アリコートは３７℃で３分間、振盪水浴中でインキュベーションされる。その後それぞれのアリコートに試験化合物が最終濃度０．５μＭで添加される。反応は１アリコート（ＮＡＤＰＨを欠如する他のアリコートは陰性対照として役立つ）への補因子（ＮＡＤＰＨ）の添加により開始される。その後両アリコートは振盪水浴中、３７℃でインキュベーションされる。インキュベーション混合物５０マイクロリットル（μＬ）は０、５、１０、２０、および３０分においてそれぞれのアリコートからトリプリケートで採取され、５０μＬの氷冷したアセトニトリルと合わせて反応を停止する。ボセプレビルおよび陽性対照である７−エトキシクマリンに対しても同じ手順が行われる。試験はトリプリケートで行われる。

データ解析：試験化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ半減期（ｔ_１／２）は以下の式を使用して親化合物の残存％（Ｉｎ）対インキュベーション時間の関係の直線回帰の傾きから計算される。

ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｔ_１／２＝０．６９３／ｋ
ｋ＝−［親化合物の残存％（Ｉｎ）対インキュベーション時間の直線回帰の傾き］
データ解析はマイクロソフトエクセルソフトウェア（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して実施される。

式Ｉの化合物の代謝安定性はプールされた肝臓ミクロソームインキュベーションを使用して試験される。次に主要代謝産物を検出するためにフルスキャンＬＣ−ＭＳ分析が実施される。プールされたヒト肝臓ミクロソームに暴露された試験化合物の試料はＨＰＬＣ−ＭＳ（またはＭＳ／ＭＳ）検出を使用して分析される。代謝安定性を測定する場合、試験化合物の消失を測定するために多重反応モニタリング（ＭＲＭ）が使用される。代謝産物検出の場合、主要代謝産物を検出するためのサーベイスキャンとしてＱ１フルスキャンが使用される。

ＳＵＰＥＲＳＯＭＥＳ（登録商標）アッセイ。種々のヒトシトクロムＰ４５０−特異的ＳＵＰＥＲＳＯＭＥＳ（登録商標）はＧｅｎｔｅｓｔ（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ，ＵＳＡ）から購入される。１００ｍＭリン酸カリウムバッファー（ｐＨ７．４）中２５ｐｍｏｌｅのＳＵＰＥＲＳＯＭＥＳ（登録商標）、２．０ｍＭ ＮＡＤＰＨ、３．０ｍＭ ＭｇＣｌ、および１μＭの試験化合物を含む１．０ｍＬの反応混合物は、３７oＣにおいて、トリプリケートでインキュベーションされた。陽性対照は試験化合物のかわりに１μＭのボセプレビルを含む。陰性対照はＧｅｎＴｅｓｔ（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ，ＵＳＡ（５０μＬ）から購入したＣｏｎｔｒｏｌ Ｉｎｓｅｃｔ Ｃｅｌｌ Ｃｙｔｏｓｏｌ（ヒト代謝酵素をいずれも欠如する昆虫細胞ミクロソーム）を使用した。アリコート（５０μＭ）はそれぞれの試料から採取され、種々の時点（たとえば、０、２、５、７、１２、２０、および３０分）でマルチ−ウェルプレートのウェルに入れられ、反応を停止するために内部標準としての３μＭハロペリドールを含む氷冷アセトニトリル５０μＬがそれぞれのアリコートに添加される。

採取したアリコートを含むプレートは冷却するために−２０℃のフリーザーに１５分間入れられる。冷却後、１００μＬの脱イオン水がプレート中のすべてのウェルに添加される。その後、プレートは３０００ｒｐｍで１０分間、遠心分離される。次に上清の一部（１００μＬ）が採取され、新しいプレートに入れられ、質量分析法を使用して分析される。

実施例１．（Ｓ）−２−（Ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタン酸（５６）の合成。 中間体５６は以下のスキーム６に概説し、以下に記載したように調製した。

スキーム６．中間体５６の調製。

ピバルアルデヒド−ｄ_９（５１）の合成。メカニカルスターラー、還流冷却器、滴下ロートおよび温度計を備えた３−Ｌの４口丸底フラスコ中に、少量のヨウ素結晶、続いてマグネシウムターニング（ｔｕｒｎｉｎｇ）（２４．７ｇ、１．０３ｍｏｌ）を入れた。フラスコの底はヨウ素が気化し始めるまでヒートガンで加熱した。フラスコを冷やながら無水エーテル中のｔ−ブチルクロリドーｄ_９５０（１００．０ｇ、１．０３ｍｏｌ、Ｃａｍｂｔｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ、９８％同位体純度）を滴下ロートに入れた。エーテル（３〜５ｍＬ）中の５０の溶液の一部は乾燥マグネシウムに直接添加した。さらに無水エーテル（１Ｌ）および少量のヨウ素結晶を添加し、生じた混合物は０．５時間（ｈ）加熱して反応を開始させた。エーテル中の５０の溶液の残余物は１秒間に１滴より速くない速度で、攪拌しながら添加した。混合物はハライドーエーテル添加中、還流させ、外部冷却は行わなかった。生じた混合物は、ほとんどすべてのマグネシウムが消失するまで数時間加熱還流した。混合物は−２０℃に冷やし、エーテル（１００ｍＬ）中の無水ＤＭＦ（７３．０ｇ、１．０ｍｏｌ）の溶液は、反応温度が−１５度を超えないような速度で３５分間（ｍｉｎ）かけて添加した。その後無水ＤＭＦ（７３．０ｇ、１．０ｍｌ）の第２溶液を−８℃で素早く添加した。さらに５分後、ヒドロキノン（０．５ｇ）を添加し、攪拌を停止し、冷却浴を除去し、混合物を窒素下で室温（ｒｔ）に一晩放置した。混合物は５℃に冷やし、水性４Ｍ ＨＣｌ（６００ｍＬ）を数回に分けて添加し、反応を停止した。生じた混合物は水（４００ｍＬ）で希釈し、層を分離した。水層はエーテル（３ｘ２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層は乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過した。濾液は窒素雰囲気下で分別蒸留を行い、エーテルの大部分を除去した。残渣は小さいフラスコに移し、分別蒸留を続け、６５〜７５℃において無色オイルとして所望する化合物５１を３９．５ｇ（収率４０％）得た。化合物５１は窒素下でフリーザー中に貯蔵した。

（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−シアノ−２，２−ジ（メチル−ｄ_３）−３−ｄ_３−プロピルアミノ）−２−フェニルアセトアミド（５２）の合成。 水（４００ｍＬ）中の（Ｒ）−フェニルグリシンアミド（６０．７ｇ、４００ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液にｒｔで化合物５１（３９．５ｇ、４１５ｍｍｏｌ）を添加した。この後、３０％水性ＮａＣＮ溶液（６８．８ｇ、４２０ｍｍｏｌ）と氷酢酸（２５．４ｇ、４２３ｍｍｏｌ）を３０分間かけて同時に添加し、その間反応温度は３４℃に上昇した。混合物は２時間、３０℃で攪拌し、その後７０℃で２０時間攪拌した。３０℃に冷却後、生成物は濾過により分離した。固体は水（５００ｍＬ）で洗浄し、真空下、５０℃で乾燥し、［α］_Ｄ＝−２９８°（ｃ＝１．０、ＣＨＣｌ_３）の黄褐色固体として所望する化合物５２（９０．０ｇ、収率８８％）を得た。

（Ｓ）−２−（（Ｒ）−２−アミノ−２−オキソ−１−フェニルエチルアミノ）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタンアミド（５３）の合成。 ジクロロメタン（５００ｍＬ）中の化合物５２（６４．２ｇ、２５２．４ｍｍｏｌ）の溶液は氷浴で冷却しながら、１５〜２０℃で滴下ロートから濃硫酸（９６％、３５０ｍＬ）に添加した。生じた混合物はｒｔで１時間攪拌し、その後氷上に注ぎ、ＮＨ_４ＯＨ溶液の添加により注意深くｐＨ９まで中和した。混合物はジクロロメタンで抽出し、合わせた有機層は水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮して［α］_Ｄ＝−１４０°（ｃ＝１．０、ＣＨＣｌ_３）の黄色泡状物として所望する化合物５３（５５．０ｇ、収率８０％）を得た。

（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタンアミド（５４）の合成。 エタノール（１．２Ｌ）中の化合物５３（７７．０ｇ、２８２．７ｍｍｏｌ）、１０％ Ｐｄ／Ｃ（およそ５０％水、２０ｇ）および酢酸（５０ｍＬ）の混合物（は、ＬＣＭＳが終了した反応を示すまで３０ｐｓｉ、ｒｔにおいて数日間水素添加した。生じた混合物はＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、固体はＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液は真空下で濃縮し、残渣は水（１Ｌ）で希釈し、１Ｍ ＮａＯＨ溶液でｐＨ９まで塩基性化した。混合物はジクロロメタンで抽出し、水性層は容積が半分になるまで真空下で濃縮し、固体ＮａＣｌで飽和し、ＴＨＦで抽出した。合わせた抽出物は乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、そして真空下で濃縮した。残渣はトルエンですすぎ、残っている水を除去し、続いてジクロロメタンで粉砕し、白色固体として所望する化合物５４（３８．０ｇ、収率９６％）を得た。

（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタンアミド塩酸（５５）の合成。 ６Ｍ水性ＨＣＬ溶液（１．５Ｌ）中の化合物５４（３１．０ｇ、２２２．６ｍｍｏｌ）の混合物は２４時間加熱還流した。生じた混合物は真空下で濃縮し、固体を残し、それを水（５００ｍＬ）に再び溶かし、ＥｔＯＡｃ（２ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、前のステップに由来する不純物を除去した。次に水性層を真空下で濃縮し、トルエンですすぎ、そして真空下、５０℃で乾燥し、白色固体としてＨＣｌ塩５５（３３．６ｇ、収率８５％）を得た。

（Ｓ）−２−（Ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタン酸（５６）の合成。 ジオキサン（１０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）の混合物中の化合物５５（１．００ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（３．１６ｍＬ、２２．６ｍｍｏｌ）続いてジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．４８ｇ、６．７９ｍｍｏｌ）を添加した。生じた混合物はｒｔで６時間攪拌し、その後ヘプタン（２ｘ２０ｍＬ）で抽出した。水性画分は氷浴で冷やし、ｐＨは１Ｍ ＨＣｌで２に調節し、その後画分は酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物は乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮して、黄色オイルとして５６（１．１０ｇ、収率８１％）を得た。

実施例２．（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル６，６−ジ（メチル−ｄ _３ ）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート塩酸（６３）の合成 中間体６３は以下のスキーム７に概説したように調製した。合成の詳細は以下の通りである。

スキーム７．中間体６３の調製。

（イソプロピル−ｄ_７）トリフェニルホスホニウム（５８）の合成。 ２−ブロモプロパン−ｄ_７５７（３．６２ｍＬ、３８．５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ、同位体純度９８％）およびトリフェニルホスフィン（１０．０９ｇ、３８．５ｍｍｏｌ）は１５０℃で１５時間、密閉した圧フラスコ（ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｆｌａｓｋ）中で攪拌した。反応混合物はｒｔに冷やし、生成物はエタノールおよびジエチルエーテルから結晶化させた。生成物は濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として５８（９．９５ｇ、収率６６％）を得た。ＭＳ（Ｍ−Ｂｒ）：３１２．３。

中間体６０の合成。 ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のウィッティヒ（Ｗｉｔｔｉｎｇ）塩５８（１．９５ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、２．１９ｍＬ、５．４８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物は０℃に温め、３０分間攪拌した。生じた赤色溶液は−７８℃に冷やし、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のラクタム５９（１．００ｇ、４．９８ｍｍｏｌ、Ｅｎａｍｉｎｅ Ｂｕｉｌｄｉｎｇ Ｂｌｏｃｋｓから市販される）を添加した。生じた混合物は０℃で２時間、その後さらにｒｔで１５時間攪拌した。その後反応は飽和ＮａＨＣＯ_３で停止し、酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層は合わせ、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、１０〜３０％ ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製し、淡黄色固体として６０（１６９ｍｇ、収率１４％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２５０．２。

（（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−３−ベンジル−６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−イル）メタノール（６１）の合成。 ＴＨＦ（３ｍＬ）中の６０（３７６ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でＬＡＨ（ＴＨＦ中２Ｍ、１．５１ｍＬ、３．０２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は３時間加熱還流し、その後０℃に冷やし、１０％水性ＫＨＳＯ_４を滴下して加えることにより反応を停止した。生じたスラリーは酢酸エチルで希釈し、濾過した（濾過ケーキは酢酸エチル（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した）。濾液は水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層はブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、真空下で濃縮して６１（３５０ｍｇ、収率９８％）を得て、それをそれ以上精製せずに使用した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２３８．３。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｔｅｒｔ−ブチル２−（ヒドロキシメチル）−６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボキシレート（６２）の合成。 メタノール（１５ｍＬ）中の６１（３５０ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）の溶液にギ酸アンモニウム（５７１ｍｇ、９．０６ｍｍｏｌ）、続いて１０％パラジウム炭素（７０ｍｇ、２０ｗｔ．％）を添加した。冷却器内側でのギ酸アンモニウムの昇華を制限するように注意しながら、生じた混合物を加熱還流した。還流しながら２時間攪拌した後、混合物はｒｔに冷やし、Ｃｅｌｉｔｅを通して濾過した。Ｃｅｌｉｔｅパッドはメタノール（２ｘ１０ｍＬ）、続いてジクロロメタン（２ｘ２０ｍＬ）で洗浄した。その後生じた溶液は真空下で濃縮し、所望する重水素化アミノアルコールを得た。この物質（およそ１．４８ｍｍｏｌ）はジクロロメタン（５ｍＬ）に溶かし、トリエチルアミン（２７３μＬ、１．９６ｍｍｏｌ）、続いてジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４２８ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物はｒｔで１５時間攪拌し、その後１Ｍ ＨＣｌ（１５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層はブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、その後真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０〜２０％ ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製し、６２（３１１ｍｇ、８３％−２ステップ収率）を得た。ＭＳ（Ｍ−^ｔＢｕ）：１９２．３。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート塩酸（６３）の合成。 酢酸エチル（１０ｍＬ）およびアセトニトリル（１０ｍＬ）中の６２（３１１ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、水（１５ｍＬ）中の三塩化ルテニウム一水和物（５．５０ｍｇ、０．０２５２ｍｍｏｌ）および過ヨウ素酸ナトリウム（２．１６ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物はｒｔで１時間攪拌し、Ｃｅｌｉｔｅを通して濾過した。Ｃｅｌｉｔｅパッドは酢酸エチル（３ｘ５ｍＬ）で洗浄し、生じた溶液は真空下で濃縮した。生じた残渣は１Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｘ２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、１Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮して、暗黄褐色固体として粗な重水素化された酸を得た。この酸（３１３ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）はベンゼン（５．０ｍＬ）とメタノール（０．５０ｍＬ）の混合物に溶解し、ヘキサン（７８０μＬ、１．５６ｍｍｏｌ）中のトリメチルシリルジアゾメタンの２Ｍ溶液を滴下して加えた。黄色溶液はｒｔで１５時間攪拌し、その後発泡が止むまで酢酸を滴下して加えることにより反応を停止した。次に反応物は真空下で濃縮し、ヘプタン希釈／濃縮を数回反復して過剰な酢酸を除去した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０−３０％ ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製し、純粋な重水素化された６３のメチルエステル（１５４ｍｇ）を得た。この物質にジオキサン（５．０ｍＬ）中の４Ｍ ＨＣｌを添加し、生じた溶液はｒｔで２時間攪拌した。その後反応物は真空下で濃縮し、無色固体として純粋な塩酸塩６３（１２８ｍｇ、４１％−３ステップ収率）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１７６．２（遊離アミン）。

実施例３．（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ−（４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）−３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ _９ ）ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ _３ ）−４−ｄ _３ −ブタノイル）−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミド（１０９）の合成。

化合物１０９は、以下のスキーム８に概説したように１０９とそのジアステレオマーの混合物として調製した。合成の詳細は以下に説明する。
スキーム８．化合物１０９の調製。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル３−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート（６４）の合成。 ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＤＭＦ（６ｍＬ、１：１）中の５６（２５８ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）およびアミン塩酸塩６３ａ（２６５ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、調製に関してはＶｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２００６，４９：６０７４−６０８６を参照されたい）の溶液に、０℃でＮ−メチルモルホリン（３５３μＬ、３．２１ｍｍｏｌ）およびベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−ｔｒｉｓ−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（“ＢＯＰ試薬”、５７１ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物はｒｔで１５時間攪拌し、１Ｍ ＨＣｌで希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、その後真空下で濃縮した。所望する重水素化メチルエステル６４を含む生じた残渣はそれ以上精製せずに使用した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３９２．４。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ_９）−ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート（６５）の合成。

ジオキサン（７ｍＬ）中の４Ｍ ＨＣｌ中の６４（およそ１．２９ｍｍｏｌ）の溶液はｒｔで３時間攪拌し、その後真空下で濃縮して対応する６４のアミン塩酸塩を得た。この物質はジオキサン（１．００ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（４５０μＬ、３．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物は−７８℃に冷やし、ｔ−ブチルイソシアネート−ｄ_９（２０ｍＬのヘプタン／ジオキサン１：１中３２４ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ、Ｇｉｒｉｂｏｎｅ，Ｄら，Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｏｍｐｄ Ｒａｄｉｏｐａｒｍ．，２０００，４３：９３３−９４１に従ってｔ−ブチルアミン−ｄ_９（ＣＤＮ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ９９％同位体純度））から合成））を添加した。反応混合物はｒｔで１５時間攪拌し、真空下で濃縮し、１Ｍ ＨＣｌで希釈し、その後ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、そして真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０〜２０％ アセトン／ヘプタン）により精製し、乾燥した白色泡状物として６５（１２５ｍｇ、３０％−３ステップ）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）：４２２．４。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ−（４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）−３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ_９）ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミド（１０９）の合成。 ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ（４ｍＬ、１：１）の混合物中の６５（１２５ｍｇ、０．３１３ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化リチウム（１１．０ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物は３時間攪拌し、１Ｍ ＨＣｌで反応を停止し、真空下で濃縮してＴＨＦを除去した。生じた水性溶液はＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層は乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。残渣はＣＨ_２Ｃｌ_２／ＤＭＦ（４ｍＬ、１：１）の混合物に溶解し、生じた溶液は−２０℃に冷やした。この溶液にアミン塩酸塩６６（８６．０ｍｇ、０．４１１ｍｍｏｌ、調製に関してはＶｅｎｋａｔｒａｍａｎ，Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２００６，４９：６０７４−６０８６を参照されたい）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸、（“ＥＤＣ”、９８．０ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（“ＨＯＢｔ”、６９．０ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）、およびＮ−メチルモルホリン（１５０μＬ、１．３７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は−２０℃で４８時間攪拌し、真空下で濃縮した。生じた残渣は１Ｍ ＨＣｌで希釈し、この溶液はＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮して、明るい黄色の泡状物を提供した。トルエン／ＤＭＳＯ（６ｍＬ、１：１）の混合物中のこの物質の溶液に、０℃でＥＤＣ（５３３ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）およびジクロロ酢酸（１１５μＬ、１．３９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物はｒｔで４時間攪拌し、その後飽和ＮａＨＣＯ_３で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は飽和ＮａＨＣＯ_３、１Ｍ ＨＣｌ、およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０−３０％ アセトン／ヘプタン）により精製し、白色固体としてジアステレオマーの混合物である１０９（６２．０ｍｇ、３７％−３ステップ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ８．２７（ｄ，０．８Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１７（ｄ，０．２Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．０２（ｓ，０．８Ｈ），７．９７（ｓ，０．２Ｈ），７．７６（ブロード ｓ，１．０Ｈ），７．３４（ｓ，０．５Ｈ），６．９０（ｓ，０．４Ｈ），５．９４（ｓ，０．８Ｈ），５．９３（ｓ，０．２Ｈ），５．８７−５．７９（ｍ，１Ｈ），５．００−４．９０（ｍ，０．８Ｈ），４．９０−４．８１（ｍ，０．２Ｈ），４．２８（ｓ，０．８Ｈ），４．２７（ｓ，０．２Ｈ），４．１６−４．０６（ｍ，１Ｈ），４．００−３．９０（ｍ，１Ｈ），３．８０−３．６９（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．４２（ｍ，０．８Ｈ），２．４０−２．２９（ｍ，０．２Ｈ），２．０４−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．６８（ｍ，３Ｈ），１．６８−１．５２（ｍ，３Ｈ），１．４５−１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．１８（ｍ，１Ｈ），１．０３−０．９７（ｍ，３Ｈ），０．８９−０．８０（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）：５６０．３；（Ｍ＋Ｈ）５３８．５。

実施例４．（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ−（４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）−３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ _９ ）ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ _３ ）−４−ｄ _３ −ブタノイル）−６，６−ジ（メチル−ｄ _３ ）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミド（１０３）の合成。

化合物１０３は先のスキーム８に一般的に概説したように、１０３とそのジアステレオマーの混合物として調製した。合成の詳細は以下に説明する。
（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル３−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート（３８、Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）の合成。 ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＤＭＦ（３ｍＬ、１：１）中の５６（１２１ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ、実施例１を参照されたい）およびアミン塩酸塩６３（１２８ｍｇ、０．６０７ｍｍｏｌ、実施例２を参照されたい）の溶液に０℃でＮ−メチルモルホリン（１６７μＬ、１．５２ｍｍｏｌ）およびＢＯＰ試薬（２６９ｍｇ、０．６０７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物はｒｔで１５時間攪拌し、１Ｍ ＨＣｌで希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０−２０％ アセトン／ヘプタン）で精製し、３８（Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）（１１２ｍｇ、収率５６％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）：４２０．４；（Ｍ＋Ｈ）：３９８．３。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−メチル３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ_９）−ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキシレート（３９、Ｒ^１＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）の合成。 ジオキサン（５ｍＬ）中の４Ｍ ＨＣｌ中の３８（Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）（１１２ｍｇ、０．２８２ｍｍｏｌ）はｒｔで３時間攪拌し、真空下で濃縮した。生じたアミン塩酸塩はジオキサン（３００μＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１９７ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）を攪拌しながら添加した。混合物は−７８℃に冷やし、ｔｅｒｔ−ブチルイソシアネート−ｄ_９（１０ｍＬ中のヘプタン／ジオキサン１：１中１３０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、上記を参照されたい）を添加し、反応混合物はｒｔで１５時間攪拌した。生じた混合物は真空下で濃縮し、１ Ｍ ＨＣｌで希釈し、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで飽和し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０〜２０％ アセトン／ヘプタン）により精製し、乾燥白色泡状物として３９（Ｒ^１＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）（７４ｍｇ、６５％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）：４２８．５。

（１Ｓ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ−（４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）−３−（（Ｓ）−２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ｄ_９）ウレイド）−３，３−ジ（メチル−ｄ_３）−４−ｄ_３−ブタノイル）−６，６−ジ（メチル−ｄ_３）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミド（１０３）の合成。 ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ（２ｍＬ、１：１）の混合物中の３９（Ｒ^１＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^２＝（ＣＤ_３）_３Ｃ；Ｒ^３＝ＣＤ_３）（７４ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化リチウム（７．００ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は３時間攪拌し、１Ｍ ＨＣｌで反応を停止し、減圧下で濃縮し、ＴＨＦを除去した。生じた水性溶液はＥｔＯＡｃ（３ｘ１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層は乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣はＣＨ_２Ｃｌ_２／ＤＭＦ（２ｍＬ、１：１）の混合物に溶解し、−２０℃に冷やした。この溶液にアミン塩酸塩６６（４６．０ｍｇ、０．２１８ｍｍｏｌ、先の実施例３を参照されたい）、ＥＤＣ（５２．０ｍｇ、０．２７３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３７．０ｍｇ、０．２７３ｍｍｏｌ）、およびＮ−メチルモルホリン（８０．０μＬ、０．７２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は−２０℃で４８時間攪拌し、その後真空下で濃縮した。生じた残渣は１ Ｍ ＨＣｌで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮して、明るい黄色の泡状物を提供した。この物質はトルエン／ＤＭＳＯ（３ｍＬ、１：１）の混合物に０℃で溶解し、続いてＥＤＣ（３０５ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）およびジクロロ酢酸（６５．０μＬ、０．７９５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物はｒｔで４時間攪拌し、その後飽和ＮａＨＣＯ_３で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層は飽和ＮａＨＣＯ_３、１Ｍ ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣はカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、０〜３０％ アセトン／ヘプタン）により精製し、白色固体としてジアステレオマーの混合物としての１０３（２０．２ｍｇ、２３％−３ステップ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ８．２７（ｄ，０．７Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１７（ｄ，０．３Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．０２（ｓ，０．７Ｈ），７．９７（ｓ，０．３Ｈ），７．７６（ｂｒ．ｓ，１．０Ｈ），７．３４（ｓ，０．６Ｈ），６．９０（ｓ，０．６Ｈ），５．９４（ｓ，０．７Ｈ），５．９３（ｓ，０．３Ｈ），５．８７−５．７９（ｍ，１Ｈ），５．００−４．９０（ｍ，０．７Ｈ），４．９０−４．８１（ｍ，０．３Ｈ），４．２８（ｓ，０．７Ｈ），４．２７（ｓ，０．３Ｈ），４．１６−４．０６（ｍ，１Ｈ），４．００−３．９０（ｍ，１Ｈ），３．８０−３．６９（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．４２（ｍ，０．７Ｈ），２．４０−２．２９（ｍ，０．３Ｈ），２．０４−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８２−１．６８（ｍ，３Ｈ），１．６８−１．５２（ｍ，３Ｈ），１．４５−１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．１８（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）：５６６．５；（Ｍ＋Ｈ）５４４．５。

特記しない限り、当業者は先の説明および例証となる実施例を使用して、本発明の化合物を作り、利用し、そして主張された方法を実行することができると考えられる。前述の検討および実施例は単にある種の好ましい態様の詳細な説明を提示するだけであることを理解すべきである。本発明の意図および範囲から逸脱することなく、種々の改変物および等価物が作製されうることは当業者には明らかであろう。先に検討した、または引用したすべての特許、雑誌記事、および他の文書は参照として本明細書に援用される。

Claims (19)

1. 式：
   

   

   の化合物、または薬剤的に受容可能なその塩であって、式中：
   環Ａが０から７までの重水素原子を有するシクロブチル環であり；
   Ｒ^１とＲ^２のそれぞれが独立して−Ｃ（ＣＨ_３）_３であり、ここで１〜９の水素原子は場合により重水素原子により置換され；
   それぞれのＲ^３が−ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｄ、−ＣＨＤ_２、および−ＣＤ_３から独立して選択され；
   それぞれのＹが水素および重水素から独立して選択され；そして
   Ｒ^１とＲ^２が同時に−Ｃ（ＣＨ_３）_３であり、Ｒ^３が−ＣＨ_３であり、そして環Ａが重水素原子を持たない場合に少なくとも１つのＹが重水素である、上記化合物。
2. Ｒ^１が−Ｃ（ＣＨ_３）_３および−Ｃ（ＣＤ_３）_３から選択される、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^２が−Ｃ（ＣＨ_３）_３および−Ｃ（ＣＤ_３）_３から選択される、請求項２に記載の化合物。
4. それぞれのＲ^３が同じである、請求項３に記載の化合物。
5. それぞれのＲ^３が−ＣＨ_３および−ＣＤ_３から選択される、請求項４に記載の化合物。
6. Ｒ^１とＲ^２の少なくとも１つが−Ｃ（ＣＤ_３）_３であるか、またはそれぞれのＲ^３が−ＣＤ_３である、請求項５に記載の化合物。
7. 環Ａが重水素原子を持たないか、または７つの重水素原子を有する、請求項６に記載の化合物。
8. それぞれのＹ^２が同じである、請求項７に記載の化合物。
9. Ｒ^１とＲ^２のそれぞれが−Ｃ（ＣＤ_３）_３であり；
   それぞれのＲ^３が同じであり、そして−ＣＤ_３、および−ＣＨ_３から選択され；そして
   環Ａが重水素原子を持たないシクロブチル環および７つの重水素原子を有するシクロブチル環から選択される、請求項８に記載の化合物。
10. Ｄ_７が７つの重水素原子を有するシクロペンチル環を表し；そしてＨ_７が重水素原子を持たないシクロペンチル環を表す以下の表：
    

    

    

    

    

    

    に説明した化合物、または薬剤的に受容可能な上記化合物のいずれかの塩のいずれか１つから選択される、請求項１に記載の化合物。
11. 以下の化合物：
    

    

    

    または薬剤的に受容可能な上記化合物のいずれかの塩から選択される、請求項１０に記載の化合物。
12. 重水素と明示されないいずれかの原子がその天然の同位体存在比で存在する、請求項１に記載のいずれか１つの化合物。
13. 請求項１に記載の化合物および薬剤的に受容可能なキャリアを含む、発熱物質を含まない医薬組成物。
14. Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染の処置または予防において有用な第２治療薬をさらに含む、請求項１３に記載の組成物。
15. 第２治療薬がＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ａ、ＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ｂ、リバビリン、テラプラビル、ニタゾキサニドおよび上記化合物のいずれか２つ以上の組み合わせから選択される、請求項１４に記載の組成物。
16. 第２治療薬がＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ａとリバビリンの組み合わせである、請求項１５に記載の組成物。
17. 患者に有効量の請求項１に記載の化合物または請求項１３に記載の組成物を投与するステップを含む、患者におけるＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を処置する方法。
18. ＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ａ、ＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ｂ、リバビリン、テラプラビル、ニタゾキサニドおよび上記化合物のいずれか２つ以上の組み合わせから選択される第２治療薬の同時投与が必要な患者にそのような同時投与をするステップをさらに含む、請求項１７に記載の方法。
19. 第２治療薬がＰＥＧ−インターフェロンアルファ−２ａとリバビリンの組み合わせである、請求項１８に記載の方法。