JP2010159250A - シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤 - Google Patents

Abstract

【課題】本発明の目的は、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ装用中に点眼された場合に、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性が向上しており、ネオスチグミン及び／又はその塩の角膜到達量を増加できるシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤を提供することである。
【解決手段】(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤を併用して、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤を調製する。
【選択図】なし

Description

本発明は、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させることができる、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤に関する。また、本発明は、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる方法、並びに、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる作用を点眼剤に付与する方法に関する。また、本発明は、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させるための剤に関する。更に、本発明は、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズに対するネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる透過性向上物質をスクリーニングする方法に関する。更に本発明は、非イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの脂質吸着を抑制する方法、及びイオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する方法等に関する。

近年、コンタクトレンズ（CL）の装用者が増えており、中でもソフトコンタクトレンズ（SCL）の装用者が増えている。一般的に、SCLを装用した場合には、大気からの酸素供給量が低下し、その結果として角膜上皮細胞の分裂抑制や角膜肥厚につながる場合があることが指摘されている。そのため、より高い酸素透過性を有するSCLの開発が進められてきた。

シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズは、そのような背景の下、高酸素透過性を有するSCLとして近年開発されてきたものである。シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズは、ハイドロゲルにシリコーンを配合することにより、従来のハイドロゲルコンタクトレンズの数倍の酸素透過性を実現する。従って、SCLの弱点である酸素供給不足を改善することができ、酸素不足に伴う角膜に対する悪影響を大幅に抑制できるものとして、大きく期待されている。

また、SCLは一般にハードコンタクトレンズに比べて大きく、その装用中には角膜表面がほぼ全面的に覆われた状態となる。そして、SCL装用中には、SCLと角膜表面の間から涙液の流入及び流出（即ち、ポンプ作用による涙液交換）は殆ど行われず、SCL下の涙液交換はSCLを介した涙液の透過に依存していることが分かっている（非特許文献１−２参照）。このようにSCL下の涙液交換の殆どは、SCLを介した涙液の透過により行われるため、SCL装用者の眼に対して適用される点眼剤は、配合される薬理成分のSCLへの透過性を十分に高めておくことが求められる。

そのため、SCL装用者の眼に対して適用される点眼剤については、SCLの種類に応じて、安全性等の影響のみならず、薬理活性成分のSCLへの透過性をも十分に考慮して設計することが不可欠である。特に、SCLは素材によってイオン性の有無や含水率等が種々異なるため、SCL装用者の眼に適用される点眼剤は、適用されるSCLの性質に応じて製剤設計を行うことが肝要である。

また近年、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズは、従来のハイドロゲルコンタクトレンズに比べて、涙液層や化粧品などに由来する脂質の汚れが付きやすいことが指摘されている（非特許文献３）。こうした脂質汚れは、レンズのくもりなどを誘発して装用者に不快感を与え、ＱＯＬ（Quality of Life）を害することとなる。また、こうしたコンタクトレンズの汚れは、当該レンズが本来備えるべき視力矯正力にも悪影響を与えるおそれがある。さらに近年、このようなコンタクトレンズの脂質汚れが、角膜ステイニングと呼ばれる角膜上皮障害の発生に影響を与えることも指摘されている。

ところで、花粉症は、花粉に含まれる花粉タンパク質が抗原となって粘膜等と接触することにより引き起こされるアレルギー症状である。近年、花粉症の患者が増加しており、大きな社会問題になりつつある。眼科分野でも、花粉症の予防や悪化抑制に有用な点眼剤の開発が強く求められている。

一方、ネオスチグミン及び／又はその塩は、瞳のピント調節機能を改善する効果を付与することを目的として点眼剤に使用されている（特許文献１参照）。そして、このようなネオスチグミン及び／又はその塩の作用は、ネオスチグミン及び／又はその塩が角膜を通過して角膜の奥に存在する毛様体筋に直接働きかけることにより発揮されることが知られている。しかしながら、これまでに、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズを装用中の眼に対して、ネオスチグミン及び／又はその塩を適用した場合の影響については明らかにはされていない。ましてや、ネオスチグミン及び／又はその塩と界面活性剤とを併用してシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズに適用した場合の影響については、推認すらできないのが現状である。

日本コンタクトレンズ学会誌、第39巻、111〜115、1997 日本コンタクトレンズ学会誌、第44巻、34-37、2002 塩谷浩、あたらしい眼科、Vol.25、No.7、907-912、2008

特開２００６−２３２８２２号公報

本発明者等は、各種SCLに対してネオスチグミン及び／又はその塩を適用した場合の影響について種々の検討を行っていたところ、全く予想していなかったことに、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ（以下、SHCLと略記することもある）では、他のSCLと比較してネオスチグミン及び／又はその塩のレンズ透過量が著しく少ないという全く新しい知見を得た。ネオスチグミン及び／又はその塩は、その作用発揮のためには角膜の奥にある毛様体筋への働きかけが不可欠であるが、このようにレンズ透過量が極めて少ないと、SHCL装用中の眼に対してネオスチグミン及び／又はその塩を含有する点眼剤を適用しても十分な量が角膜に供給されず、満足な効果が得られない恐れがある。

そこで、SHCL装用中に点眼された場合に、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性が向上しており、ネオスチグミン及び／又はその塩の角膜到達量を増加できるSHCL用点眼剤の開発が求められている。

本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討した結果、ネオスチグミン及び／又はその塩に加えて界面活性剤を組み合わせて用いると、ネオスチグミン及び／又はその塩のSHCLに対する透過量を著しく増加できることを見出した。更に本発明者等は検討を進め、ネオスチグミン及び／又はその塩に加えて界面活性剤を組み合わせて用いると、非イオン性SHCLへの脂質吸着を相乗的に著しく抑制でき、またイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積をも効果的に抑制できることを見出した。本発明は、かかる知見に基づいて、更に改良を重ねることにより完成したものである。

即ち、本発明は下記に掲げるSHCL用点眼剤を提供する。
項１． (A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを含有する、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項２． (A)成分として、メチル硫酸ネオスチグミンを含む、項１に記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項３． (B)成分として、非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤及び両性界面活性剤からなる群より選択される少なくとも１種を含む、項１又は２に記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項４． 更に(C)緩衝剤を含有する、項１乃至３のいずれかに記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項５． (A)成分の配合割合が０．０００５〜０．１ｗ／ｖ％である、項１乃至４のいずれかに記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項６． (B)成分の配合割合が０．００１〜１．０ｗ／ｖ％である、項１乃至５のいずれかに記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項７． シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズが非イオン性である、項１乃至６のいずれかに記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
項８． シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズがイオン性である、項１乃至６のいずれかに記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。

また、本発明は、下記に掲げるSHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性向上方法、並びにSHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる作用を点眼剤に付与する方法を提供する。
項９．(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と(B)界面活性剤とを併用することを特徴とする、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの該(A)成分の透過性を向上させる方法。
項１０．(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有するシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤に、(B)界面活性剤を配合することを特徴とする、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの該(A)成分の透過性を向上させる作用を該点眼剤に付与する方法。

また、本発明は、下記に掲げるSHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性向上剤を提供する。
項１１． (B)界面活性剤を含有する、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種の透過性を向上させるための剤。

更に、本発明は、下記に掲げる透過性向上物質のスクリーニング方法を提供する。
項１２． シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズに対する、ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種のネオスチグミン類の透過性を向上させる透過性向上物質のスクリーニング方法であって、
(a)ネオスチグミン類を含むコントロール溶液、並びにネオスチグミン類と被験物質とを含む被験溶液を、試験溶液として各々調製する工程、
(b)上記試験溶液を各々、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズの片側面のみに所定時間接触させ、該レンズの上記試験溶液を接触させていない他方の片側面から滲出したネオスチグミン類の量を測定することにより、各試験溶液のネオスチグミン類の透過量を求める工程、並びに
(c)上記工程(b)において測定されたネオスチグミン類の透過量が、コントロール溶液よりも多い被験溶液を選び、該被験溶液に含まれる被験物質を上記透過性向上物質として選択する工程、
を含むスクリーニング方法。

また、本発明は、下記に掲げる非イオン性SHCLへの脂質の吸着を抑制する方法を提供する。
項１３．(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを含有するシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤を、非イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズと接触させることを特徴とする、非イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの脂質の吸着を抑制する方法。

また、本発明は、下記に掲げるSHCL用点眼剤に非イオン性SHCLへの脂質の吸着を抑制する作用を付与する方法を提供する。
項１４．シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤に、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを配合することを特徴とする、非イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの脂質の吸着を抑制する作用を該点眼剤に付与する方法。

また、本発明は、下記に掲げるイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する方法を提供する。
項１５．(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを含有するシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤を、イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズと接触させることを特徴とする、イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する方法。

更に、本発明は、下記に掲げる、SHCL用点眼剤にイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する作用を付与する方法を提供する。
項１６．シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤に、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを配合することを特徴とする、イオン性シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する作用を該点眼剤に付与する方法。

本発明のSHCL用点眼剤によれば、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を顕著に向上させることができるので、SHCL装用中に点眼しても、ネオスチグミン及び／又はその塩の角膜への到達量を増加させ、ひいては目のピント調節機能を有効に改善することが可能になる。

更に、本発明のスクリーニング方法は、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させ得る透過性向上物質の取得を可能にするので、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性が向上されており、SHCL装用中に使用してもピント調節機能を有効に改善できるSHCL用の点眼剤の開発に有用である。

また、非イオン性SHCLには脂質が吸着し易いという特有の課題があることが本発明者等の研究により明らかとなっているが、本発明のSHCL用点眼剤によれば、かかる非イオン性SHCLへの脂質吸着を顕著に抑制することができる。従って、本発明のSHCL用点眼剤によれば、非イオン性SHCLの脂質汚れを防止して、非イオン性SHCLのくもりなどを防止し、また非イオン性SHCL本来の視力矯正力を維持することができ、さらに非イオン性SHCLへの脂質吸着により引き起こされる角膜ステイニングなどの角膜上皮障害を効果的に防止して、快適且つ安全に非イオン性SHCLを使用することが可能になる。

更に、イオン性SHCLには花粉タンパク質が著しく吸着し易いという特有の課題があることも本発明者等の研究により明らかとなっている。一般に、タンパク質は、SHCLに対しては吸着し難いと考えられており、かかる知見は全く意外なものである。そして一般的に、コンタクトレンズ装用時には、眼が乾き易くなり、その結果、涙液による洗浄作用が低下して、花粉等の異物が眼に滞留し易くなるため、花粉症の発症リスクが高くなると考えられている。そのうえ、コンタクトレンズに花粉タンパク質が多量に吸着し蓄積していくとすれば、花粉症の発症リスクを著しく高めることになり、アレルギー症状を誘発する一因にもなりかねない。更に、コンタクトレンズに吸着した花粉タンパク質の除去が不十分になれば、コンタクトレンズの装用感が損なわれて不快感を誘発し、使用期間が短縮化されることにもなる。然るに、本発明のSHCL用点眼剤によれば、イオン性SHCLの装用中に花粉タンパク質とイオン性SHCLが接触しても、イオン性SHCLからの花粉タンパク質の除去を促進し、再付着も防止することで、イオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制できる。従って、本発明のSHCL用点眼剤によれば、花粉症又は花粉症予備軍の使用者にとってアレルギー症状の発症リスクを低減させることができ、またイオン性SHCLを清潔に保持することもできる。

参考試験例１において、メチル硫酸ネオスチグミンのSCLへの透過性を評価した結果を示す図である。 試験例１において、点眼剤（実施例１−３及び比較例１）のメチル硫酸ネオスチグミンのSHCLへの透過性を評価した結果を示す図である。 試験例２において、点眼剤（実施例４及び比較例１）のメチル硫酸ネオスチグミンのSHCLへの透過性を評価した結果を示す図である。 参考試験例２において、点眼剤（参考例１−２）の塩酸ピリドキシンのSHCLへの透過性を評価した結果を示す図である。 参考試験例３において、各種ソフトコンタクトレンズにおける脂質の吸着特性を評価した結果を示す図である。 試験例３において、試験液（実施例５及び比較例２−４）について、非イオン性SHCLへの脂質の吸着に及ぼす影響を評価した結果を示す図である。 参考試験例４において、各種ソフトコンタクトレンズへの花粉タンパク質の吸着性を評価した結果を示す図である。 試験例４において、試験液（実施例６及び比較例５−６）がイオン性SHCLに吸着した花粉タンパク質を除去する効果を評価した結果を示す図である。

(I) SHCL用点眼剤
本発明のSHCL用点眼剤は、ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種（以下、(A)成分と表記することもある）を含有する。ネオスチグミンは、N-(-3-ジメチルカルバモイルオキシフェニル)-N,N,N-トリメチルアンモニウムとも称される化合物である。ネオスチグミン及びその塩は、目のピント調節機能改善剤として公知の化合物であり、公知の方法により合成してもよく市販品として入手することもできる。

本発明で使用される上記(A)成分の内、ネオスチグミンの塩としては、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容されるものであれば、特に制限されないが、具体的には、メチル硫酸塩（メチル硫酸ネオスチグミン）、臭化物塩（臭化ネオスチグミン）等が例示される。これらの塩の中でも、好ましくはメチル硫酸塩が挙げられる。これらのネオスチグミンの塩は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

本発明のSHCL用点眼剤には、(A)成分として、ネオスチグミン及びその塩の中から、１種のものを選択して単独で使用してもよく、２種以上のものを任意に組み合わせて使用してもよい。界面活性剤によるSHCL透過性向上効果をより一層有効に奏させるという観点から、本発明に使用される(A)成分として、好ましくはネオスチグミンの塩、更に好ましくはメチル硫酸ネオスチグミンが挙げられる。ここで例示する(A)成分は、非イオン性SHCLへの脂質吸着抑制作用を一層高める、或いはイオン性SHCLに対する花粉タンパク質蓄積抑制効果を一層高めるという観点からも好適である。

本発明のSHCL用点眼剤において、上記(A)成分の配合割合は、該(A)成分の種類、他の配合成分の種類等に応じて適宜設定されるが、一例として、該点眼剤の総量に対して、該(A)成分が総量で０．０００５〜０．１w/v％、好ましくは０．００１〜０．０５w/v％、更に好ましくは０．００５〜０．０１w/v％が例示される。

更に、本発明のSHCL用点眼剤は、上記(A)成分に加えて、界面活性剤（以下、(B)成分と表記することもある）を含有する。このように界面活性剤を配合することによって、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させることが可能になり、また非イオン性SHCLへの脂質吸着を顕著に抑制することが可能となり、さらにはイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を効果的に抑制することも可能となる。

上記(B)成分として使用される界面活性剤としては、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容されることを限度として特に制限されず、非イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤等が例示される。

上記(B)成分として配合可能な非イオン性界面活性剤としては、具体的には、モノラウリン酸POE(20)ソルビタン（ポリソルベート20）、モノパルミチン酸POE（20）ソルビタン（ポリソルベート40）、モノステアリン酸POE（20）ソルビタン（ポリソルベート60）、トリステアリン酸POE（20）ソルビタン（ポリソルベート65）、モノオレイン酸POE(20)ソルビタン(ポリソルベート80)、等のPOEソルビタン脂肪酸エステル類；ポロクサマー407、ポロクサマー235、ポロクサマー188、ポロクサマー403、ポロクサマー237、ポロクサマー124等のPOE・POPブロックコポリマー類； POE(60)硬化ヒマシ油（ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60）等のPOE硬化ヒマシ油類；POE(9)ラウリルエーテル等のPOEアルキルエーテル類；POE(20)POP(4)セチルエーテル等のPOE-POPアルキルエーテル類；POE(10)ノニルフェニルエーテル等のPOEアルキルフェニルエーテル類等が挙げられる。なお、上記で例示する化合物において、POEはポリオキシエチレン、POPはポリオキシプロピレン、及び括弧内の数字は付加モル数を示す。

また、上記(B)成分として配合可能な両性界面活性剤（即ち、分子内に陽イオン性部位と陰イオン性部位の両方の性質を有する界面活性剤）としては、具体的には、アルキルジアミノエチルグリシン及びその塩（塩酸アルキルジアミノエチルグリシン）等が例示される。

また、上記(B)成分として配合可能な陽イオン性界面活性剤としては、具体的には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等の第４級アンモニウム塩型の陽イオン性界面活性剤；クロルヘキシジン塩（グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジンなど）、ポリヘキサメチレンビグアニド塩（塩酸ポリヘキサメチレンビグアニドなど）等のアミン塩型の陽イオン性界面活性剤等が例示される。

また、上記(B)成分として配合可能な陰イオン性界面活性剤としては、具体的には、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸塩、脂肪族α−スルホメチルエステル、αオレフィンスルホン酸等が例示される。

本発明のSHCL用点眼剤において、上記界面活性剤は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を組み合わせて使用してもよい。

上記(B)成分の中でも、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる作用が格段高められるという観点から、好ましくは非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、両性界面活性剤；より好ましくは非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤；更に好ましくは、POEソルビタン脂肪酸エステル類、POE硬化ヒマシ油類、POE・POPブロックコポリマー類、第４級アンモニウム塩型陽イオン性界面活性剤；更に好ましくはPOEソルビタン脂肪酸エステル類、POE硬化ヒマシ油類、第４級アンモニウム塩型陽イオン性界面活性剤；特に好ましくはポリソルベート80、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、塩化ベンザルコニウムが例示される。ここで例示する(B)成分は、非イオン性SHCLへの脂質吸着抑制効果をより一層高める、或いはイオン性SHCLへの花粉タンパク質蓄積抑制効果をより一層高めるという観点からも好適である。

本発明のSHCL用点眼剤において、上記(B)成分の配合割合は、該(B)成分の種類、他の配合成分の種類等に応じて適宜設定されるが、一例として、該点眼剤の総量に対して、該(B)成分が総量で０．００１〜１w/v％、好ましくは０．００５〜０．５w/v％、更に好ましくは０．０１〜０．３w/v％が例示される。

本発明のSHCL用点眼剤において、上記(A)成分に対する上記(B)成分の比率については、前述する配合割合を満たす限り特に制限されるものではないが、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性をより効果的に向上させるという観点から、上記(A)成分の総量１００重量部当たり、上記(B)成分の総量が１０〜２００００重量部、好ましくは５０〜１００００重量部、更に好ましくは１００〜６０００重量部となる比率を充足することが望ましい。また、上記比率を充足することによって、非イオン性SHCLへの脂質吸着をより一層有効に抑制すること、或いはイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を一層有効に抑制することも可能となる。

本発明のSHCL用点眼剤は、更に上記(A)及び(B)成分に加えて、緩衝剤を含有してもよい。本発明のSHCL用点眼剤に配合できる緩衝剤としては、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容されるものであれば、特に制限されない。かかる緩衝剤の一例として、ホウ酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、炭酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、トリス緩衝剤、イプシロン−アミノカプロン酸、アスパラギン酸、アスパラギン酸塩等が挙げられる。これらの緩衝剤は組み合わせて使用しても良い。好ましい緩衝剤は、ホウ酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、炭酸緩衝剤、及びクエン酸緩衝剤であり、更に好ましい緩衝剤は、ホウ酸緩衝剤、及びリン酸緩衝剤であり、特に好ましい緩衝剤は、ホウ酸緩衝剤である。ホウ酸緩衝剤としては、ホウ酸、又はホウ酸アルカリ金属塩、ホウ酸アルカリ土類金属塩等のホウ酸塩が挙げられる。リン酸緩衝剤としては、リン酸、又はリン酸アルカリ金属塩、リン酸アルカリ土類金属塩等のリン酸塩が挙げられる。炭酸緩衝剤としては、炭酸、又は炭酸アルカリ金属塩、炭酸アルカリ土類金属塩等の炭酸塩が挙げられる。クエン酸緩衝剤としては、クエン酸、又はクエン酸アルカリ金属塩、クエン酸アルカリ土類金属塩等が挙げられる。また、ホウ酸緩衝剤又はリン酸緩衝剤として、ホウ酸塩又はリン酸塩の水和物を用いてもよい。より具体的な例として、ホウ酸緩衝剤として、ホウ酸又はその塩(ホウ酸ナトリウム、テトラホウ酸カリウム、メタホウ酸カリウム、ホウ酸アンモニウム、ホウ砂等)；リン酸緩衝剤として、リン酸又はその塩(リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸一水素カルシウム、リン酸二水素カルシウム等)；炭酸緩衝剤として、炭酸又はその塩（炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸水素カリウム、炭酸マグネシウム等）；クエン酸緩衝剤として、クエン酸又はその塩（クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、クエン酸カルシウム、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸二ナトリウム等）；酢酸緩衝剤として、酢酸又はその塩（酢酸アンモニウム、酢酸カリウム、酢酸カルシウム、酢酸ナトリウム等）；トリス緩衝剤として、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン又はその塩（塩酸塩、酢酸塩、スルホン酸塩等）；アスパラギン酸又はその塩（アスパラギン酸ナトリウム、アスパラギン酸マグネシウム、アスパラギン酸カリウム等）等が例示できる。これらの緩衝剤は１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

本発明のSHCL用点眼剤に緩衝剤を配合する場合、該緩衝剤の配合割合については、使用する緩衝剤の種類、他の配合成分の種類や量、該点眼剤の用途等に応じて異なり、一律に規定することはできないが、例えば、該点眼剤の総量に対して、該緩衝剤が総量で０．０１〜１０w/v％、好ましくは０．１〜５w/v％、更に好ましくは０．５〜２w/v％となる割合が例示される。

本発明のSHCL用点眼剤は、更に等張化剤を含有していてもよい。本発明のSHCL用点眼剤に配合できる等張化剤としては、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容されるものであれば、特に制限されない。かかる等張化剤の具体例として、例えば、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、グリセリン、プロピレングリコール等が挙げられる。これらの等張化剤の中でも、より確実に本発明の効果を奏させるという観点から、好ましくは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、グリセリン、及びプロピレングリコールが挙げられる。これらの等張化剤は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

本発明のSHCL用点眼剤に等張化剤を配合する場合、該等張化剤の配合割合については、使用する等張化剤の種類等に応じて異なり、一律に規定することはできないが、例えば、該等張化剤が総量で０．０１〜１０w/v％、好ましくは０．０５〜５w/v％、更に好ましくは０．１〜３w/v％となる割合が例示される。

本発明のSHCL用点眼剤のｐＨについては、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容される範囲内であれば特に限定されるものではない。本発明のSHCL用点眼剤のｐＨの一例として、４．０〜９．５、好ましくは５．０〜８．５、より好ましくは、５．５〜８．０、更に好ましくは６．０〜８．０となる範囲が挙げられる。

また、本発明のSHCL用点眼剤の浸透圧については、生体に許容される範囲内であれば、特に制限されない。本発明のSHCL用点眼剤の浸透圧比の一例として、好ましくは０．７〜５．０、更に好ましくは０．９〜３．０、特に好ましくは１．０〜２．０となる範囲が挙げられる。浸透圧の調整は無機塩、多価アルコール、糖アルコール、糖類等を用いて、当該技術分野で既知の方法で行うことができる。浸透圧比は、第十五改正日本薬局方に基づき0.9w/v％塩化ナトリウム水溶液の浸透圧に対する試料の浸透圧の比とし、浸透圧は日本薬局方記載の浸透圧測定法（氷点降下法）を参考にして測定する。浸透圧比測定用標準液は、塩化ナトリウム（日本薬局方標準試薬）を500〜650℃で40〜50分間乾燥した後、デシケーター（シリカゲル）中で放冷し、その0.900ｇを正確に量り、精製水に溶かし正確に100ｍＬとして調製するか、市販の浸透圧比測定用標準液（0.9w/v％塩化ナトリウム水溶液）を用いる。

本発明のSHCL用点眼剤は、本発明の効果を妨げない限り、上記成分の他に、種々の薬理活性成分や生理活性成分を組み合わせて適当量含有してもよい。かかる成分は特に制限されず、例えば、一般用医薬品製造（輸入）承認基準２０００年版（薬事審査研究会監修）に記載された眼科用薬における有効成分が例示できる。具体的には、本発明のSHCL用点眼剤において用いられる成分としては、次のような成分が挙げられる。
抗ヒスタミン剤：例えば、イプロヘプチン、ジフェンヒドラミン、マレイン酸クロルフェニラミン等。
充血除去剤：テトラヒドロゾリン、ナファゾリン、エピネフリン、エフェドリン、メチルエフェドリン等。
殺菌剤：例えば、アクリノール、セチルピリジニウム等。
ビタミン類：フラビンアデニンジヌクレオチドナトリウム、シアノコバラミン、酢酸レチノール、パルミチン酸レチノール、塩酸ピリドキシン、パンテノール、パントテン酸カルシウム、酢酸トコフェロール等。
アミノ酸類：アスパラギン酸カリウム、アスパラギン酸マグネシウム、アミノエチルスルホン酸等。
消炎剤：例えば、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸、プラノプロフェン、サリチル酸メチル、サリチル酸グリコール、アラントイン、アズレン、アズレンスルホン酸、グアイアズレン、トラネキサム酸、ε−アミノカプロン酸、ベルベリン、リゾチーム、甘草等。収斂剤：例えば、亜鉛華、乳酸亜鉛、硫酸亜鉛等。
その他：例えば、フマル酸ケトチフェン、クロモグリク酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、スルファメトキサゾール、インドメタシン、イブプロフェン、イブプロフェンピコノール、ブフェキサマク、フルフェナム酸ブチル、ベンダザック、ピロキシカム、ケトプロフェン、フェルビナク、紫根、セイヨウトチノキ、及びこれらの塩等。

また、本発明のSHCL用点眼剤には、発明の効果を損なわない範囲であれば、その用途や形態に応じて、常法に従い、様々な添加物を適宜選択し、１種又はそれ以上を併用して適当量含有させてもよい。それらの添加物として、例えば、医薬品添加物事典２００５（日本医薬品添加剤協会編集）に記載された各種添加物が例示できる。代表的な成分として次の添加物が挙げられる。
担体：例えば、水、含水エタノール等の水性担体。
増粘剤：例えば、カルボキシビニルポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、アルギン酸、ポリビニルアルコール（完全、又は部分ケン化物）、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム等。
糖類：例えば、グルコース、シクロデキストリン等。
糖アルコール類：例えば、キシリトール、ソルビトール、マンニトールなど。これらはｄ体、ｌ体又はｄｌ体のいずれでもよい。
防腐剤、殺菌剤又は抗菌剤：例えば、安息香酸ナトリウム、エタノール、クロロブタノール、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、硫酸オキシキノリン、フェネチルアルコール、ベンジルアルコール、ビグアニド化合物、グローキル（ローディア社製商品名）等。
ｐＨ調節剤：例えば、塩酸、ホウ酸、アミノエチルスルホン酸、イプシロン−アミノカプロン酸、クエン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、ホウ砂、トリエタノールアミン、モノエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、硫酸、リン酸、ポリリン酸、プロピオン酸、シュウ酸、グルコン酸、フマル酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、グルコノラクトン、酢酸アンモニウム等。
安定化剤：ジブチルヒドロキシトルエン、トロメタモール、ナトリウムホルムアルデヒドスルホキシレート（ロンガリット）、トコフェロール、ピロ亜硫酸ナトリウム、モノエタノールアミン、モノステアリン酸アルミニウム、モノステアリン酸グリセリン等。
香料又は清涼化剤：メントール、アネトール、オイゲノール、カンフル、ゲラニオール、シネオール、ボルネオール、リモネン、リュウノウ等。これらは、ｄ体、ｌ体又はｄｌ体のいずれでもよく、また精油（ハッカ油、クールミント油、スペアミント油、ペパーミント油、ウイキョウ油、ケイヒ油、ベルガモット油、ユーカリ油、ローズ油等）として配合してもよい。

本発明のSHCL用点眼剤は、例えば、精製水、生理食塩水等の水性担体等に、上記(A)及び(B)成分、必要に応じて他の配合成分を所望の濃度となるように添加し、常法に準じて調製される。

本発明のSHCL用点眼剤において、適用対象となるSHCLの種類については特に制限されず、現在市販されている、或いは将来市販される全てのSHCLを適用対象にできる。中でも非イオン性SHCLは、イオン性SHCLに比べて、ネオスチグミン及び／又はその塩の透過性が低い傾向がある。本発明のSHCL用点眼剤によれば、このように透過性が低いSHCLに対しても、ネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を有効に改善することができる。かかる本発明の効果に鑑みれば、本発明のSHCL用点眼剤の好適な適用対象の一例として、非イオン性SHCLが挙げられる。また、非イオン性SHCLは非常に脂質を吸着し易いという特有の課題が明らかとなっており、本発明のSHCL用点眼剤によれば、この非イオン性SHCLへの脂質吸着を有効に抑制することができる。この点からも、好適な適用対象の一例として非イオン性SHCLを挙げることができる。更に別の観点から、イオン性SHCLは花粉タンパク質を多量に吸着し易いという特有の課題が見つかっており、本発明のSHCL用点眼剤によれば、このイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を効果的に抑制することができる。かかる本発明の効果に鑑みれば、本発明のSHCL用点眼剤の好適な適用対象の一例として、イオン性SHCLを挙げることもできる。ここで非イオン性とは、当業者が通常理解するように、米国FDA（米国食品医薬品局）基準に則り、コンタクトレンズ素材中のイオン性成分含有率が1mol%未満であることを言い、イオン性とは、米国FDA基準に則り、コンタクトレンズ素材中のイオン性成分含有率が1mol%以上であることを言う。また、適用対象となるSHCLの含水率についても特に制限されず、例えば、９０%以下、好ましくは６０%以下、更に好ましくは５０%以下が挙げられる。なお、SHCLはハイドロゲル素材を含むものであるため、少なくとも０％より多い水分を含む。

また、非イオン性SHCLでは、含水率が低くなるにつれて、ネオスチグミン及び／又はその塩の透過性が低くなる傾向がある。本発明のSHCL用点眼剤によれば、このように透過性が低いSHCLに対しても、ネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を有効に改善することができる。かかる本発明のレンズ透過性向上効果に鑑みれば、本発明のSHCL用点眼剤の好適な適用対象の一例として、含水率が低く５０％以下の非イオン性SHCLが挙げられる。

ここでSHCLの含水率とは、SHCL中の水の割合を示し、具体的には以下の計算式により求められる。

含水率（%）=（含水した水の重量／含水状態のSHCLの重量）×100
かかる含水率は、ISO18369-4:2006の記載に従って重量測定方法により測定され得る。

また、一般に材質が柔らかい非シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズに比べ、材質が硬いSHCLは、異物の吸着によるレンズの変形や濡れ性低下により、使用感の悪化を感じさせ易く、眼粘膜障害を引き起こし易い傾向にある。本発明のSHCL用点眼剤によれば、このように使用感悪化や眼粘膜障害を引き起こし易い硬い材質のSHCLへの脂質や花粉タンパク質の吸着や蓄積を有効に抑制することができ、それによりレンズの変形や変質を防いで、使用感の悪化や眼粘膜障害を効果的に防止することもできる。かかる本発明の効果に鑑みれば、本発明のSHCL用点眼剤の好適な適用対象として、硬度が比較的高いSHCLが挙げられる。好ましくは、適用対象となるSHCLの硬度は、下記のテクスチャーアナライザーによる測定方法により測定した場合の硬度が、３ｇ以上、好ましくは４ｇ以上、より好ましくは６ｇ以上、更に好ましくは８ｇ以上である。また、適用対象となるSHCLの硬度の上限値については、特に制限されないが、好ましくは１５ｇ以下、更に好ましくは１２ｇ以下である。

コンタクトレンズの硬度は、テクスチャーアナライザー（製品名：TA.XT.plus TEXTURE ANALYSER（Stable Micro Systems Limited製））を用いて、具体的に以下のようにして測定され得る。

まず、測定対象となるコンタクトレンズをパッケージから取り出し、余分な水分をふき取って、生理食塩水（0.9％塩化ナトリウム溶液）で濯いだ後、生理食塩水を満たしたプラスチックシャーレの底に凸面が上方になるように配置する。次いで、測定器のプローブの真下に該コンタクトレンズが来るように調節し、以下の測定条件下で測定を行う。

［測定条件］
測定器の設定：
テストモード 圧縮測定
プローブタイプ φ10mmシリンダープローブ
Target Mode Distance
Distance 2.5mm
Triger Type Auto
Triger Force 0.1g
Test Speed 1.0mm/sec
プローブがレンズ頂点を押し下げ始めてから2.5mm（2.5秒）レンズを押しつぶす際の応力を測定し、その最大値を硬度として記録する。

本発明のSHCL用点眼剤は、SHCLを装着中の眼に直接点すことができる。

本発明のSHCL用点眼剤は、ネオスチグミン及び／又はその塩の角膜への到達量を増加できるので、目のピント調節機能の改善に有効であり、目の疲れ（疲れ目）の改善剤として、とりわけ、コンタクトレンズ装用により誘発される目の疲れの改善剤（例えば、過矯正度数のコンタクトレンズを使用した場合や、コンタクトレンズを装用したまま長時間にわたりパソコンなどの近見作業をした場合などに生じる目の疲れ等の改善剤）として有用である。

また、角膜に分布する三叉神経の切断は、神経伝達物質であるアセチルコリンの量を減少させ、それにより角膜上皮細胞の細胞分裂速度を減少させてしまうと言われている。コリンエステラーゼ阻害剤の一種であるネオスチグミンは、コリンエステラーゼ活性を阻害して神経末端のアセチルコリン濃度を上昇させることで、角膜上皮細胞の分裂速度の減少を抑え、角膜上皮細胞の恒常性を維持することができる。本発明のSHCL用点眼剤は、ネオスチグミン及び／又はその塩の角膜への到達量を増加できるので、かかる角膜上皮細胞の恒常性維持のためにも有益に用いられ得る。

更に、本発明のSHCL用点眼剤は、非イオン性SHCLへの脂質吸着が一因となって引き起こされる角膜ステイニング等の角膜上皮障害を効果的に防止できるので、かかる点からも角膜上皮障害の予防剤として用いられることができる。また、本発明のSHCL用点眼剤は、イオン性SHCL装用中に手軽に使用できるので、イオン性SHCL装用中に花粉タンパク質が吸着し蓄積していくのを効果的に抑制でき、イオン性SHCL装用中の不快感を防止して快適にイオン性SHCLを装用することを可能にする。よって、コンタクトレンズ上に吸着された花粉タンパク質が、長時間眼に接触し続けるのを防ぎ、花粉によるアレルギーの予防や悪化の防止にも有効である。従って、花粉症又は花粉症予備軍のイオン性SHCL使用者への適用にも好適である。

(II)SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性の向上方法、並びにSHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる作用を点眼剤に付与する方法
前述するように、SHCLへの上記(A)成分の透過性を上記(B)成分によって向上させることができる。

従って、本発明は、更に別の観点から、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と(B)界面活性剤とを併用することを特徴とする、SHCLへの該(A)成分の透過性を向上させる方法を提供する。また、本発明は、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有するSHCL用点眼剤に、(B)界面活性剤を配合することを特徴とする、SHCLへの該(A)成分の透過性を向上させる作用を該点眼剤に付与する方法をも提供する。

当該方法において、使用する(A)及び(B)成分の種類や配合割合、その他に配合される成分の種類や配合割合、SHCL用点眼剤の適用対象となるSHCLの種類等については、前記「(I)SHCL用点眼剤」と同様である。

(III) SHCLへのネオスチグミン及び/又はその塩の透過性を向上させるための剤
前述するように、SHCLへの上記(A)成分の透過性を上記(B)成分によって向上せることができる。

従って、本発明は、更に別の観点から、(B)界面活性剤を有効成分として含有する、SHCLへの(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種の透過性を向上させるための剤を提供する。

該剤において、有効成分である(B)成分の種類、適用対象となるSHCL、SHCLへの透過性の対象となる(A)成分の種類等については、前記「(I)SHCL用点眼剤」と同様である。

(IV)SHCLに対するネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させる物質のスクリーニング方法
また、前述するように、本発明者によって、上記(A)成分がSHCLへの透過性が著しく低いという新たな知見が得られている。そこで、更に、本発明は、SHCLに対する、ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種のネオスチグミン類の透過性を向上させる透過性向上物質をスクリーニングする方法をも提供する。具体的には、本スクリーニング方法は、下記(a)〜(c)工程を包含する方法である。
(a) ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種のネオスチグミン類を含むコントロール溶液、並びにネオスチグミン類と被験物質とを含む被験溶液を、試験溶液として各々調製する工程、
(b)上記試験溶液を各々、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズの片側面のみに所定時間接触させ、該レンズの上記試験溶液を接触させていない他方の片側面から滲出したネオスチグミン類の量を測定することにより、各試験溶液のネオスチグミン類の透過量を求める工程、並びに
(c)上記工程(b)において測定されたネオスチグミン類の透過量が、コントロール溶液よりも多い被験溶液を選び、該被験溶液に含まれる被験物質を上記透過性向上物質として選択する工程。

本スクリーニング方法において、被験物質とは、スクリーニングに供される上記透過性向上物質の候補物質である。また、候補物質は、SHCL用点眼剤に配合できるように、医薬上、薬理学的に（製薬上）又は生理学的に許容されるものであることが望ましい。

上記(a)工程において、被験溶液は、水や緩衝液等の水性担体にネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種のネオスチグミン類を例えば０．０００５〜０．１w/v％となるように添加し、更に被験物質を適当量添加することにより調製され
る。ここで、被験物質は段階的に希釈しておき、複数の濃度の被験物質を含む被験溶液を調製しておくことが望ましい。また、ネオスチグミン類を含有するコントロール溶液は、被験物質を添加しないこと以外は、被験溶液と同組成とすることが望ましい。斯くして調製した被験溶液及びコントロール溶液を試験溶液として用いて、次の(b)工程に供する。

上記(b)工程は、溶液を収容可能な２つの区画（セル）を有し且つこれらの２つの区画はSHCLを介して隔てられている装置等を用いて実施することができる。このような装置としては、例えばビードレックス社製の膜透過実験装置が使用できる。具体的には、上記装置の一方の区画に上記試験溶液（コントロール溶液又は被験溶液）を充填し、更に他方の区画には何も充填しないか、或いは好ましくはネオスチグミン類を含まない溶液（以下、ブランク溶液と表記する）等を充填して、所定時間（例えば４〜２４時間程度）経過後に、SHCLを介して上記他方の区画（ブランク溶液を充填した場合には、該ブランク溶液）側に移行したネオスチグミン類の量を定量する。斯くして定量されるネオスチグミン類の量が、上記(b)工程で求められるネオスチグミン類の透過量である。なお、上記ブランク溶液は、充填される試験溶液（コントロール溶液又は被験溶液）と浸透圧が同等であることが望ましい。

また、上記透過性向上物質の選択に関する工程(c)において、SHCLへのネオスチグミン類の透過性を向上させる作用が強い透過性向上物質を選択するには、(b)工程において求められたネオスチグミン類の透過量がコントロール溶液よりも多い被験溶液を選べばよい。

本スクリーニング方法により得られる透過性向上物質は、SHCLへのネオスチグミン及び／又はその塩の透過性を向上させることを目的として、ネオスチグミン及び/又はその塩を含むSHCL用点眼剤に配合することができる。

(V)非イオン性SHCLへの脂質吸着の抑制方法、及び非イオン性SHCLへの脂質吸着を抑制する作用の付与方法
前述するように、上記(A)及び(B)成分を併用することによって、非イオン性SHCLへの脂質の吸着を抑制することができる。

従って、本発明は、更に別の観点から、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを含有するSHCL用点眼剤を、非イオン性SHCLと接触させることを特徴とする、非イオン性SHCLへの脂質の吸着を抑制する方法を提供する。更には、SHCL用点眼剤に、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、(B)界面活性剤とを配合することを特徴とする、非イオン性SHCLへの脂質の吸着を抑制する作用を該点眼剤に付与する方法を提供する。

当該方法において、(A)及び(B)成分の種類や配合割合、配合される他の成分の種類や配合割合、SHCL用点眼剤の製剤形態、適用対象となる非イオン性SHCLの種類等については、前記「（Ｉ）SHCL用点眼剤」と同様である。

(VI)イオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する方法、並びにイオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する作用を点眼剤に付与する方法
前述するように、上記(A)及び(B)成分を併用することによって、イオン性SHCL装用眼が花粉に晒されても、イオン性SHCLからの花粉タンパク質の除去を促進して再付着を防止でき、イオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制することが可能になる。

従って、本発明は、更に別の観点から、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と(B)界面活性剤とを含有するSHCL用点眼剤を、イオン性SHCLと接触させることを特徴とする、イオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する方法を提供する。更には、SHCL用点眼剤に、(A)ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と(B)界面活性剤とを配合することを特徴とする、イオン性SHCLへの花粉タンパク質の蓄積を抑制する作用を該点眼剤に付与する方法を提供する。

当該方法において、使用する(A)及び(B)成分の種類や配合割合、その他に配合される成分の種類や配合割合、適用対象となるイオン性SHCLの種類等については、前記「(I)SHCL用点眼剤」と同様である。

以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
参考試験例１：メチル硫酸ネオスチグミンのＳＣＬ透過性の比較評価
表１で示されるSCLを用いて、メチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過性について評価した。

メチル硫酸ネオスチグミンのSCL透過性評価の測定は、膜透過実験装置（ビードレックス社製）を用いて以下の方法に従い実施した。表１に示す各ソフトコンタクトレンズを膜透過実験装置にセットし、一方のセルIには生理食塩水（０．９w/v％塩化ナトリウム）を５ｍｌ、他方のセルIIには０．１w/v％メチル硫酸ネオスチグミン含有溶液（ホウ酸０．５w/v％、ホウ砂 適量、塩化ナトリウム０．７w/v％；ｐＨ７．５）を５ｍｌ充填した。次いで、４時間後に生理食塩水側の液を１ｍｌ採取し、常法に従いHPLC法にてメチル硫酸ネオスチグミンの濃度を測定し、セルIに移行したメチル硫酸ネオスチグミンの量を算出した。斯くして算出されたセルIに移行したメチル硫酸ネオスチグミンの量から、メチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過率を下式に従って算出した。

結果を図１に示す。図１から明らかなように、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズであるレンズＡ及びＢでは、ハイドロゲルコンタクトレンズであるレンズＣと比較して、著しくメチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過性が悪いことが判明した。

試験例１：メチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過試験１：
表２に示す点眼剤（実施例１−３、及び比較例１）を用いて、メチル硫酸ネオスチグミンのSHCL透過性について評価した。

メチル硫酸ネオスチグミンのSHCL透過性評価の測定は、膜透過実験装置（ビードレックス社製）を用いて以下の方法に従い実施した。表１に示すレンズＡ（SHCL）を膜透過実験装置にセットし、一方のセルIには生理食塩水（０．９w/v％塩化ナトリウム）を５ｍＬ、他方のセルIIには表２に示す各点眼剤を５ｍＬ正確に充填した。尚、各点眼剤の浸透圧はほぼ同じとなるように揃えた。次いで、２４時間後に生理食塩水側の液を１ｍＬ採取し、常法に従いHPLC法によりメチル硫酸ネオスチグミンの濃度を測定し、セルIに移行したメチル硫酸ネオスチグミンの量を算出した。斯くして算出されたセルIに移行したメチル硫酸ネオスチグミンの量から、参考試験例１と同様の方法でメチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過率（％）を算出した。

結果を図２に示す。図２から明らかなように、実施例１−３の点眼剤ではネオスチグミンのレンズ透過率が比較例１の点眼剤と比較して著しく増加していることが判明した。即ち、メチル硫酸ネオスチグミンと非イオン性界面活性剤（ポリソルベート80又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60）を併用することによって、SHCLへのメチル硫酸ネオスチグミンの透過性が向上することが明らかとなった。

試験例２：メチル硫酸ネオスチグミンのレンズ透過試験２：
表３に示す点眼剤（実施例４、及び比較例１）を用いて、上記試験例１と同様の方法で、メチル硫酸ネオスチグミンのSHCL透過性について評価した。

結果を図３に示す。図３から分かるように、実施例４の点眼剤では、ネオスチグミンのレンズ透過率が比較例１の点眼剤と比較して著しく高い値を示した。即ち、本結果から、メチル硫酸ネオスチグミンと陽イオン性界面活性剤（塩化ベンザルコニウム）を併用することによっても、SHCLへのメチル硫酸ネオスチグミンの透過性が向上することが確認された。

参考試験例２：塩酸ピリドキシンのレンズ透過性試験
塩酸ピリドキシンは、角膜細胞の新陳代謝を促進し、目の疲れを緩和させる作用を発揮することが知られている。そのため、SHCL用点眼剤に塩酸ピリドキシンを配合するにも、ネオスチグミン及び／又はその塩を配合する場合と同様に、塩酸ピリドキシンがSHCLを透過して角膜に到達できるように製剤設計することが求められる。そこで、SHCLへの塩酸ピリドキシンの透過性を評価するために、以下の試験を実施した。

具体的には、表４に示す点眼剤（参考例１−２）を用いて、上記試験例１と同様の方法で試験を行い、塩酸ピリドキシンのSHCL透過性について評価した。

結果を図４に示す。この結果から、塩酸ピリドキシンは、ネオスチグミン及び／又はその塩と同様にSHCL透過性が低いものの、界面活性剤（ポリソルベート80）を併用してもSHCL透過性は向上しないことが確認された。

レンズ透過性試験に関する総合考察
以上の結果から、ネオスチグミン及び／又はその塩と界面活性剤を併用した点眼剤は、SHCL装用中の眼に適用しても有効量のネオスチグミン及び／又はその塩が角膜に到達でき、ネオスチグミン及び／又はその塩に基づく薬理効果を有効に奏し得ることが確認された。また、このような界面活性剤との併用による有効成分のSHCL透過性の向上は、有効成分としてネオスチグミン及び／又はその塩を選択することによって認められる特有の効果であることも確認された。

参考試験例３：各種ＳＣＬの脂質吸着性の評価
表５に示す各種ソフトコンタクトレンズを用いて以下の実験を実施し、ソフトコンタクトレンズの脂質吸着性を評価した。なお、本試験に使用したソフトコンタクトレンズは、いずれも市販品である。

まず、蛍光標識された脂質（N-(fluorescein-5-thiocarbamoyl)-1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine, triethylammonium salt；invitrogen製）を１mg/mLの濃度で含むクロロホルム溶液とメタノールとを１：４の容量比で混合した混合液500μLに、生理食塩水（0.9w/v％塩化ナトリウム）を加え、全量20mLにしたものを蛍光脂質溶液として用意した。各ソフトコンタクトレンズは一晩以上生理食塩水中に浸漬させて試験前処理を実施した。サンプル群は、24ウェルマイクロプレートにおいて蛍光脂質溶液１mL中に各ソフトコンタクトレンズを一枚ずつ浸漬させ、34℃で24時間振とう処理を行った。また、ブランク群として生理食塩水１mL中に各ソフトコンタクトレンズを一枚ずつ浸漬させ、サンプル群と同様の振とう処理を行った。24時間後、各ソフトコンタクトレンズを新しい生理食塩水１mLが入ったプレートに移し、蛍光プレートリーダー（Thermo Fisher Scientific Inc.製）を用いて、各ウェルの蛍光強度を測定した（励起波長：485nm、蛍光波長：538nm）。サンプル群の蛍光強度からブランク群の蛍光強度を減算した値を、吸着脂質量の指標として算出した。

結果を図５に示す。図５より明らかなように、非イオン性SHCL（レンズＩ及びII）の脂質吸着量は、イオン性SHCL（レンズIII）及び、従来のハイドロゲルレンズ（レンズIV〜VI）と比較して著しく多く、脂質汚れの問題が深刻であることが確認された。

試験例３：非イオン性SHCL脂質吸着抑制評価
上記参考試験例３で顕著な脂質吸着が認められた非イオン性SHCL（レンズＩ）を用い、下記表６に示す各試験液を使用して、非イオン性SHCLの脂質吸着に及ぼす影響について検討を行った。

まず、蛍光標識された脂質（N-(fluorescein-5-thiocarbamoyl)-1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine, triethylammonium salt；invitrogen製）の１mg/mLクロロホルム溶液とメタノールとを１：４の容量比で混合した混合液500μLに、生理食塩水（0.9w/v％塩化ナトリウム）を加え、全量20mLにしたものを蛍光脂質溶液として用意した。レンズＩは一晩以上生理食塩水中に浸漬させて試験前処理を実施した。次いで、24ウェルマイクロプレートの各ウェルに500μLの各試験液（実施例５及び比較例２−４）及び1500μLの蛍光脂質溶液を入れ、その中に試験前処理を終えたレンズＩを一枚ずつ浸漬して34℃で24時間振とう処理を行った（サンプル群）。また、ブランク群として500μLの各試験液（実施例５及び比較例２−４）及び1500μLの生理食塩水を入れたウェルを作成し、その中に試験前処理を終えたレンズＩを一枚ずつ浸漬して同様に振とう処理を行った（ブランク群）。24時間後、振とう処理を終えた各レンズＩを新しい生理食塩水１mLが入ったプレートに移し、蛍光プレートリーダー（Thermo Fisher Scientific Inc.製）を用いて、各ウェルの蛍光強度を測定した（励起波長：485nm、蛍光波長：538nm）。各サンプル群の蛍光強度からブランク群の蛍光強度を減算した値を吸着脂質量の指標として求め、コントロール（比較例２）の吸着脂質量を100％とした場合の各試験液の吸着脂質量の相対値（％）を算出した。

この結果を図６に示す。図６に示されるように、メチル硫酸ネオスチグミンと界面活性剤とを組み合わせて用いることにより、それぞれ単独で用いた場合よりも、非イオン性SHCLへの脂質吸着を相乗的に抑制できることが明らかとなった。

参考試験例４：SCLに対する花粉タンパク質吸着特性の評価
表７に示す４種のソフトコンタクトレンズを試験に用いて、ソフトコンタクトレンズに対する花粉タンパク質の吸着特性を評価した。

まず、試験に使用するレンズを、生理食塩液４ｍLに１枚ずつ浸漬させ、室温にて一晩保存した（レンズの前処理）。

花粉タンパク質抗原（(株)エル・エス・エル社製 Cedar Pollen Extract-Ja、性状：凍結乾燥粉末(Cedar Pollen粗抽出物 Mountain ceder、Juniperus Asheiiの花粉から抽出)）を、生理食塩液に溶解し、5mg/30ｍL花粉タンパク質液を調製した。24穴プレートの各穴に、花粉タンパク質液１.0ｍLを入れ、前処理済みのレンズの余分な水分をふき取った後に浸漬し、34℃120rpmにて18時間振とうを行った。次いで、レンズを取り出し、生理食塩液100ｍLに素早く（約1秒）浸漬させて余分な液をすすいだ後、ビーカーのふちを使って軽く水分を切り、24穴プレートの各穴に入れた花粉タンパク質分離用液（1％炭酸ナトリウム及び1％SDS含有水溶液）1mLに浸漬させた。34℃120rpmで３時間振とうし、レンズに吸着した花粉タンパク質を花粉タンパク質分離用液中に分離させた。

マイクロBCAアッセイキット（Thermo SCIENTIFIC，Pierce #23235）を用いて、花粉タンパク質分離用液中の花粉タンパク質量を、アルブミン換算値として定量し、レンズに対する花粉タンパク質吸着量を求めた。

なお、各ソフトコンタクトレンズの硬度は、上述のようにテクスチャーアナライザー（製品名：TA.XT.plus TEXTURE ANALYSER（Stable Micro Systems Limited製））を用いて測定した値である。

結果を図７に示す。図７に示されるように、イオン性SHCLであるレンズ１を用いた場合には、非シリコンソフトコンタクトレンズであるレンズ３及びレンズ４や、非イオン性SHCLであるレンズ２と比較すると、顕著に高い花粉タンパク質の吸着が認められた。この結果から、花粉タンパク質は、ソフトコンタクトレンズの中でもイオン性SHCLに対して極めて多量に吸着する傾向があり、イオン性SHCLには、花粉タンパク質を非常に吸着し易いという特有の課題が存在することが確認された。

試験例４：イオン性SHCLに対する花粉タンパク質の蓄積抑制の評価
上記参考試験例４にて花粉タンパク質の顕著な吸着が確認されたレンズ１（イオン性SHCL）を用いて、下記の試験を実施した。

先ず、レンズ１を、５mLの生理食塩液に１枚ずつ浸漬させ、５時間室温にて保存した（レンズの前処理）。花粉タンパク質抗原（(株)エル・エス・エル社製 Cedar Pollen Extract-Ja、性状：凍結乾燥粉末(Cedar Pollen粗抽出物 Mountain ceder、Juniperus Asheiiの花粉から抽出)）を生理食塩液に溶解し、5mg/50mL花粉タンパク質液を調製した。24穴プレートの各穴に、1.0mLの花粉タンパク質液を入れ、前処理したレンズの余分な水分をふき取った後に浸漬させ、34℃、400rpmで24時間振とうを行った。

花粉タンパク質液に浸漬させたレンズ１を取り出し、生理食塩水100mLに素早く（約1秒）浸漬させて余分な液をすすいだ後、水分をふき取り、24穴プレートに入れた表８に記載の各試験液（実施例６、比較例５−６、及びコントロール）1.0mLにそれぞれ浸漬して34℃、400rpmで18時間振とうを行った。その後、レンズ１を取り出し、生理食塩水100mLに素早く（約1秒）浸漬させて余分な液をすすいだ後、ビーカーのふちを使って、軽く水分を切り、24穴プレートに入れた花粉タンパク質分離用液（1％炭酸ナトリウム及び1％SDS含有水溶液）0.5mLに浸漬させた。34℃、400rpmで３時間振とうし、レンズに吸着していた花粉タンパク質を花粉タンパク質分離用液中に分離させた。

また、各試験液の影響を差し引くことによって、より正確に花粉タンパク質吸着量を算出するために、ブランク群として、花粉タンパク質液で処理する工程を生理食塩水での処理に変更した以外は、上記と同様に各試験液での処理と花粉タンパク質分離用液での処理を行ったものを用意した。

マイクロBCAアッセイキット（Thermo SCIENTIFIC，Pierce #23235）を用いて、花粉タンパク質分離用液中に存在する花粉タンパク質の量を、アルブミン換算値として定量し、レンズ１から脱離した花粉タンパク質の量（花粉タンパク質吸着量）を求めた。なお、花粉タンパク質吸着量の算出に際して、各サンプルの吸光度から、上記ブランク群の吸光度を差し引いて、アルブミン換算値として算出することにより、花粉タンパク質吸着量を求めた。次いで、次式に従い、コントロール試験液を用いた場合の花粉タンパク質吸着量に対する、各実施例又は比較例の試験液を用いた場合の花粉タンパク質吸着量の割合から、花粉タンパク質吸着改善率（％）を算出した。

結果を図８に示す。その結果、メチル硫酸ネオスチグミンと界面活性剤とを組み合わせて用いた場合には、非常に高い花粉タンパク質吸着改善率が達成され、イオン性SHCLに対する花粉タンパク質の吸着量を効果的に低減でき、蓄積を抑制することができることが明らかとなった（実施例６）。

製剤例
表９に記載の処方で、SHCL用点眼剤（実施例７−２１）が調製される。

Claims (4)

1. （Ａ）ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種と、（Ｂ）界面活性剤とを含有する、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
2. （Ａ）成分として、メチル硫酸ネオスチグミンを含む、請求項１に記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
3. （Ｂ）成分として、非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤及び両性界面活性剤からなる群より選択される少なくとも１種を含む、請求項１又は２に記載のシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤。
4. シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズに対する、ネオスチグミン及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種のネオスチグミン類の透過性を向上させる透過性向上物質のスクリーニング方法であって、
   (a)ネオスチグミン類を含むコントロール溶液、並びにネオスチグミン類と被験物質とを含む被験溶液を、試験溶液として各々調製する工程、
   (b)上記試験溶液を各々、シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズの片側面のみに所定時間接触させ、該レンズの上記試験溶液を接触させていない他方の片側面から滲出したネオスチグミン類の量を測定することにより、各試験溶液のネオスチグミン類の透過量を求める工程、並びに
   (c)上記工程(b)において測定されたネオスチグミン類の透過量が、コントロール溶液よりも多い被験溶液を選び、該被験溶液に含まれる被験物質を上記透過性向上物質として選択する工程、
   を含むスクリーニング方法。

Images