JP2003520107A

JP2003520107A - 被覆されたインプラント

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Publication number: JP2003520107A
Application number: JP2001552962A
Authority: JP
Inventors: ヒユージエス，ジエラルド・ローレンス; ビク，テレンス・アルバート; ワング，ジン・ハイ
Original assignee: バイオコンパテイブルズ・リミテツド
Priority date: 2000-01-24
Filing date: 2001-01-24
Publication date: 2003-07-02
Anticipated expiration: 2021-01-24
Also published as: US6746686B2; JP5000826B2; ATE310542T1; US20040197585A1; EP1250164A1; AU2001228653A1; EP1250164B1; WO2001052915A1; US20030086957A1; DE60115203T2; DE60115203D1

Abstract

(57)【要約】インプラント、通常ステントは、好ましくは少なくとも０．１μｍの乾燥厚さを有する架橋された、水膨潤性ポリマーマトリックスと製剤学的に活性な化合物の塗膜を有すし、このポリマーはペンダント両性イオン性基とペンダントカチオン性基を有する。この活性体は通常核酸などのアニオン性化合物である。このポリマーは、好ましくは場合によっては高級アルキル（メタ）アクリレートなどのターモノマーと共に、２−メタクリロイルオキシエチル−２'−トリメチルアンモニウムエチルホスフェート内部塩、トリアルキルアンモニウムアルキル（メタ）アクリレート及びω−（トリアルコキシシリル）アルキル（メタ）アクリレートなどの架橋性モノマーから形成される。このステントをポリマーにより被覆し、架橋し、次にポリマーを膨潤させる溶媒中の活性体の溶液または分散液と接触させて、それによりこの活性体をこのポリマーマトリックスの中に吸収させる。このステントが通常の方法により体腔の中に送達され、この活性体が体腔壁及び／またはその中を流れる流体の中に長時間にわたって放出される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、インプラント、特に主として血管の中に導入するためのステントで
あるが、他の体腔の中に導入するためにも有用であるステントであって、配置す
る血管壁に薬剤が直接に送達される貯留として使用される、生体適合性ヒドロゲ
ルポリマーの塗膜を有するものに関する。

【０００２】優先日には公表されなかった本発明者らの以前のＷＯ−Ａ−０１０１９５７に
おいて、本発明者らは、患者の中に送達する直前に薬剤含有溶液中で膨潤させる
、生体適合性架橋ポリマーの塗膜を有するステントを記述した。薬剤は、膨潤し
たヒドロゲルの中に吸収され、そしてこの移植ステントから長時間にわたって放
出される。これらの出願で述べられた系は、１２００Ｄまでの分子量を有する薬
剤と共に使用するためにヨーロッパで販売することが承認された。このような薬
剤の例は、ジピリダモル、ジクロキサシリン、ビタミンＢ１２及びアンジオペプ
チンを含む。

【０００３】本発明者らの以前の出願ＷＯ−Ａ−９８／２２５１６において、本発明者らは
、種々の基材上に生体適合性塗膜を設けるのに有用な、カチオン性モノマーと両
性イオン性モノマーを含むエチレン型不飽和モノマーから形成されるポリマーを
記述した。このカチオン性ポリマーはアニオン性ムコポリサッカライドを引き付
ける。このポリマーにより被覆したステントを捕捉器具として使用して、患者の
循環から全身的なヘパリンを除去してもよい。もしくは、この器具に例えばヘパ
リンを付着することによって、移植ステントから循環のなかへ薬剤を遅延放出す
ることが可能になることが示唆されている。

【０００４】ＥＰ−Ａ−０８０９９９９においては、カルメダ（Ｃａｒｍｅｄａ）ＣＨ５ヘ
パリン塗膜系を用いて、ヘパリンがステントに共有結合されている。

【０００５】血管形成性化合物をステントから送達して、狭窄性障害が治療されている。Ｗ
Ｏ−Ａ−９７／４７２５３においては、例えば、心臓の放射線治療に続いて血管
形成性化合物が送達される。送達はポリマーにより被覆されたステントであって
もよい。

【０００６】ＵＳ−Ａ−５９５４７０６においては、アニオン性ヒドロゲルをステント上に
被覆し、ベンザルコニウム化合物などの一価のカチオン性化合物をこのヒドロゲ
ルの上に被覆し、そしてヘパリンを接触し、このカチオン性化合物に静電的に結
合させている。

【０００７】例えばＷＯ−Ａ−９８／１５５７５においては、センス及びアンチセンスＤＮ
Ａをステントから送達した。このＤＮＡが血管形成性タンパク質をコードしてい
てもよい。

【０００８】ＵＳ−Ａ−５６７４１９２においては、バルーンカテーテル上の膨潤したヒド
ロゲル塗膜から核酸とモノクローナル抗体を絞り出すことにより、これらを送達
する。これらの核酸は、オリゴヌクレオチドまたはウイルス性ベクターであって
もよい。このヒドロゲルは、ポリアクリル酸などのポリカルボン酸であってもよ
い。核酸は血管壁の細胞に送達される。

【０００９】本発明による新しいインプラントは、ａ）少なくとも０．１μｍの乾燥厚さを有する架橋された、水膨潤性ポリマーマ
トリックスとｂ）製剤学的に活性な化合物を含んでなり、ここでこのポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカ
チオン性基を有するものである、外部表面上に塗膜を有する。

【００１０】このインプラントは好ましくはステントである。

【００１１】本発明は、生理的な条件下でアニオン性である製剤学的に活性な化合物を送達
するのに特に有用である。本発明は、また、特に１０００Ｄより大きい、更に好
ましくは１２００Ｄより大きい、例えば５０００Ｄもしくはそれ以上の分子量を
有する、高分子量の活性化合物に対して特に価値がある。

【００１２】この製剤学的活性体は、タンパク質、例えば抗体またはこれらのフラグメント
であってもよい。このような化合物は、一般的にはそして好ましくは、本発明で
は生理的環境においてアニオンに荷電している。本発明は、核酸からなる活性化
合物に対して特に価値がある。この核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡであってもよく
、そして線状もしくは環状、一本もしくは二本鎖であってもよい。この核酸は、
医薬として有用なポリペプチドまたはタンパク質をコードしてもよく、もしくは
この核酸を送達する細胞中の対象とする遺伝子を調節するのに使用される、アン
チセンスオリゴヌクレオチドであってもよい。有用なポリペプチドまたはタンパ
ク質をコードする核酸は、制御領域、または他の配列を含んでいてもよく、この
遺伝子の発現及び／またはその細胞の中への送達及び／またはこのタンパク質の
標的への輸送を可能とせしめてもよい。ターゲティングの目的で他の活性体等に
コンジュゲートされたオリゴヌクレオチドもまた本発明により有用に送達される
。

【００１３】本発明により送達される遺伝子の一つの特に興味ある類は、血管内皮成長因子
または線維芽細胞成長因子などの血管形成性因子、または血小板由来の成長因子
をコードする。少なくとも、調節配列は、特に平滑筋細胞における発現を方向付
ける。例えば、調節配列は、ＷＯ−Ａ−９８／１５５７５に記述されている通り
であってもよい。本発明で使用されるオリゴヌクレオチドは、例えば、少なくと
も５塩基、好ましくは少なくとも１５塩基を有する。

【００１４】本発明の第２の局面によれば、新しいインプラントは、ａ）架橋された、生体安定性のポリマーマトリックスとｂ）製剤学的に有用な核酸を含んでなり、ここでこのポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカ
チオン性基を有する塗膜をその外部表面上に有する。

【００１５】本発明の第３の局面によれば、新しいインプラントは、ａ）架橋された、生体安定性のポリマーマトリックスとｂ）生理的なｐＨでアニオン性に荷電しているタンパク質である製剤学的に活性
な化合物を含んでなり、ここでこのポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカ
チオン性基を有する、塗膜をその外部表面上に有する。

【００１６】第２及び第３の局面においては、このポリマーマトリックスは少なくとも０．
１μｍの乾燥厚さを有することが、必須ではないが好ましい。更には、このポリ
マーマトリックスは水膨潤性であることが必須ではないとしても好ましい。核酸
及びタンパク質などのアニオン性活性体、特に、１ＫＤ以上の分子量を有するも
のは、主としてカチオン性基と両性イオン性基を有するポリマーの表面に吸着さ
れて、ポリマー体の中には僅かしか吸収されないことを本発明者らは見出した。
この理由のために、膨潤性と厚さは、第１の局面におけるよりは重要性が少ない
。

【００１７】このインプラントは好ましくはステントである。この明細書の以降の部分にお
いては、この器具をステントの形で記述するが、他のインプラントをステントに
置き換えてもよいことは理解されるであろう。

【００１８】このポリマーマトリックスの架橋は、ステント上の塗膜を安定化し、塗膜を生
体安定性とする。架橋密度の調節は、本来的に概ね水性の膨潤性溶媒中でのこの
ポリマーの膨潤する程度を若干コントロールする。更に、この架橋密度は、この
ポリマーマトリックスの孔のサイズに影響する。この孔のサイズは、次には本発
明の第１の局面に特に関係するこのマトリックスの中に吸着される製剤学的に活
性な化合物の最大分子サイズに影響すると考えられる。このポリマーは、２０モ
ル％未満の架橋性モノマーを含むエチレン型不飽和モノマーから形成されるのが
好ましい。

【００１９】本発明で使用されるポリマーは、ａ）式ＩＹＢＸＩ（式中、Ｂは結合である、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキレン
−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であって
、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含むも
のであり、Ｘは両性イオン性部分を有する有機基であり、そしてＹはエチレン型不飽和重合性基である）の両性イオン性モノマーとｂ）式ＩＩＹ¹Ｂ¹Ｑ¹ ＩＩ（式中、Ｂ¹は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ¹はエチレン型不飽和重合性基であり、そしてＱはカチオン性もしくはカチオン化し得る部分を有する有機基である）のカチオン性のモノマーと、ｃ）一般式ＩＶＹ³Ｂ³Ｑ³ ＩＶ（式中、Ｂ³は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ³はエチレン型不飽和の重合性基であり、そしてＱ³はこのポリマーを架橋することができる反応性基を有する有機基である）を有する架橋性モノマーーを含むエチレン型不飽和モノマーから好ましくは形成される。

【００２０】このコモノマーを架橋するのに使用される好ましい反応性コモノマーＩＶは、
Ｑ³が架橋性シンナミル、エポキシ、−ＣＨＯＨＣＨ₂ＨａＩ（式中、Ｈａｌはハ
ロゲン原子である）、メチロール、反応性シリル、アセチレン、ジアセチレン、
ビニルまたはジビニル基などのエチレン型不飽和の架橋性基、またはアセトアセ
トキシまたはクロロアルキルスルホン、好ましくはクロロエチルスルホン基を含
有するものである。最適な架橋のためには、反応性シリル基（例えば、各Ｒ⁴が
Ｃ_1-4アルコキシ基またはハロゲン原子である基−ＳｉＲ⁴ ₃）を含むモノマーが
ヒドロキシル基を含むさらなるモノマー、例えば、式ＩＶ’ Ｙ³Ｂ³Ｑ４ＩＶ’ （式中、Ｙ³及びＢ³は化合物ＩＶにおいて定義されている通りであり、Ｑ⁴はヒ
ドロキシル基である）を有するものと組み合わせて使用される。

【００２１】このポリマーが形成されるエチレン型不飽和モノマーは、式ＩＩＩＹ²Ｂ²Ｑ² ＩＩＩ（式中、Ｂ²は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ²はエチレン型不飽和重合性基であり、そしてＱ²は少なくとも６個の炭素原子を有するアルキル基、フッ素置換アルキ
ル基及び少なくとも一つのシロキサン置換基を有するアルキル基から選ばれる疎
水性基を有する有機基である）のターモノマーを更に含むことができる。

【００２２】最適の膜形成性と疎水性表面の被覆能力のためには、これらのポリマーは、好
ましくは１０モル％より多く、更に好ましくは２０モル％より多くこのようなタ
ーモノマーを含有する。

【００２３】これらのポリマーは希釈剤コモノマーを含んでもよい。９０モル％までの、通
常５０モル％未満の量でこのような希釈剤コモノマーを使用してもよい。Ｃ_1-24 アルキル（メタ）アクリレート、及び−（メタ）アクリルアミドとヒドロキシＣ _1-24 アルキル（メタ）アクリレート及び−（メタ）アクリルアミドなどの共重合
性の非イオン性モノマーを使用してもよい。

【００２４】モノマーＩからＩＶの各々においては、このエチレン型不飽和基は、好ましく
はＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ₆Ｈ₄）−Ｋ−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−Ａ−、ＣＨ₂＝Ｃ
（Ｒ）ＣＨ₂−Ｏ−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）−ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｏ
Ｃ（Ｏ）−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｏ−及びＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ
’）−から選ばれる。式中、Ｒは水素またはＣ₁−Ｃ₄アルキル基であり、Ａは−Ｏ−または−ＮＲ¹［ここで、Ｒ¹は水素またはＣ₁−Ｃ₄アルキル基である
か、もしくは場合によってＲ¹は−Ｂ−Ｘ、Ｂ¹Ｑ¹、Ｂ²Ｑ²またはＢ³Ｑ³（ここ
で、Ｂ、Ｂ¹、Ｂ²、Ｂ³、Ｑ¹、Ｑ²及びＱ³及びＸは式ＩからＩＶのそれぞれ一つ
の中で上で定義されている通りである）である］であり、そしてＫは基−（ＣＨ ₂ ）_pＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_pＣ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）_pＯＣ（Ｏ）Ｏ−、
−（ＣＨ₂）_pＮＲ²−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_pＣ（Ｏ）Ｎ
Ｒ²−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）_pＯＣ（Ｏ）ＮＲ²−、−
（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）ＮＲ²−（ここで、基Ｒ²は同一もしくは異なる）、−
（ＣＨ₂）_pＯ−、−（ＣＨ₂）_pＳＯ₃−、または場合によってはＢと組み合わさ
って原子価結合であり、そしてｐは１から１２であり、そしてＲ²は水素または
Ｃ₁−Ｃ₄アルキル基である。

【００２５】好ましくは、一緒に共重合されるすべてのモノマーのエチレン型不飽和基は、
アクリレートタイプであるか、もしくはスチレンタイプ（ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｃ（
Ｏ）Ａ−またはＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ₆Ｈ₄）−Ｋ−）であり、最も好ましくは各々は
同一の式を有する。好ましくは、両性イオン性、カチオン性及び架橋性モノマー
及び任意のターモノマーのアクリレートタイプのエチレン型不飽和基の基Ａは、
同一であり、最も好ましくはすべて−Ｏ−である。

【００２６】両性イオン性基Ｘは、好ましくはアニオンとしてホスフェートエステル基また
はチオエステル類似体またはアミド類似体またはホスホネートを有する。このカ
チオン性部分は、好ましくは４級アンモニウム基であるが、スルホニウムもしく
はホスホニウム基であってもよい。好ましくは、このカチオン性基は、基Ｂから
遠い基Ｘの末端にある。

【００２７】好ましくは、Ｘは、式Ｖ

【００２８】

【化３】

【００２９】の基である。式中、部分Ｘ¹及びＸ²は、同一もしくは異なり、−Ｏ−、−Ｓ−、
−ＮＨ−または原子価結合、好ましくは−Ｏ−であり、そしてＷ⁺はアンモニウ
ム、ホスホニウムもしくはスルホニウムのカチオン性基とアニオン性及びカチオ
ン性部分を連結する基であって、好ましくはＣ_1-12アルキレン基である基を含ん
でなる基である。

【００３０】好ましくは、Ｗは、カチオン性基としてアンモニウム基、更に好ましくは４級
アンモニウム基を含有する。

【００３１】基Ｗ⁺は、例えば式−Ｗ¹−Ｎ⁺Ｒ⁶ ₃、−Ｗ¹−Ｐ⁺Ｒ⁷ ₃、−Ｗ¹−Ｓ⁺Ｒ⁷ ₂または
−Ｗ¹−Ｈｅｔの基であってもよい。式中、Ｗ¹は場合によっては１個もしくはそれ以上のエチレン型不飽和の二重も
しくは三重結合を含有する、１個もしくはそれ以上の、好ましくは２−６個の炭
素原子のアルキレン、二置換アリール、アルキレンアリール、アリールアルキレ
ン、またはアルキレンアリールアルキレン、二置換シクロアルキル、アルキレン
シクロアルキル、シクロアルキルアルキレンまたはアルキレンシクロアルキルア
ルキレンであり、基Ｗ¹は１つもしくはそれ以上のフッ素置換基及び／または１
つもしくはそれ以上の官能基を場合によっては含有し、そして基Ｒ⁶は同一もしくは異なり、そして各々は水素または１から４個の炭素原子の
アルキル、好ましくはメチル、またはフェニルなどのアリールであるか、もしく
は基Ｒ⁶の２つが結合する窒素原子と一緒になって５から７個の原子を含有する
ヘテロ環を形成するか、もしくは基Ｒ⁶の３つはそれらが結合する窒素原子と一
緒になって各環中に５から７個の原子を含有する縮合環構造を形成し、そして１つもしくはそれ以上の基Ｒ⁶は親水性官能基により場合によっては置換され、
そして基Ｒ⁷は同一もしくは異なり、各々はＲ⁶または基ＯＲ⁶（ここで、Ｒ⁶は上で定義
されている通りである）であり、もしくはＨｅｔは芳香族の窒素、リンもしくはイオウ、好ましくは窒素を含有する環、例
えばピリジンである。

【００３２】好ましくは、Ｗ¹は直鎖アルキレン基、最も好ましくは１，２−エチレンであ
る。

【００３３】式Ｖの好ましい基Ｘは式ＶＩの基である。

【００３４】式（ＶＩ）の基は、

【００３５】

【化４】

【００３６】であり、式中、基Ｒ⁸は同一もしくは異なり、そして各々は水素またはＣ_1-4アル
キルであり、そしてｅは１から６である。

【００３７】好ましくは、基Ｒ⁸は同一である。また、基Ｒ⁸の少なくとも一つは、メチルで
あることが好ましく、基Ｒ⁸はすべてメチルであることが更に好ましい。

【００３８】好ましくは、ｅは２または３、更に好ましくは２である。

【００３９】Ｘが式（ＶＩ）の基である場合には、好ましくは、Ｂは式−（ＣＲ⁹ ₂）−また
は−（ＣＲ⁹ ₂）₂−、例えば−（ＣＨ₂）−または−（ＣＨ₂ＣＨ₂）−の基である
。

【００４０】好ましくは、この両性イオン性モノマーは、一般式ＶＩＩ

【００４１】

【化５】

【００４２】を有する。式中、Ｒ、Ａ及びＢは上で定義されており、基Ｒ³は同一もしくは異なり、そして各々は水素、Ｃ_1-1アルキル、アリール、ア
ルクアリール、アラルキルであるか、もしくは基Ｒ³の２つまたは３つは、それ
らが結合する窒素原子と共に飽和もしくは不飽和のヘテロサイクル環を形成し、
そしてｅは１から６まで、好ましくは２から４までである。

【００４３】基Ｑ¹中のカチオン化し得る部分は、概ね容易にプロトン化され、例えば水性
の環境中ｐＨ７でプロトン化されて、カチオン性に変わることができる基である
。

【００４４】このカチオン性モノマーの基Ｑ¹は、好ましくは基Ｐ⁺Ｒ⁵ ₃またはＳ⁺Ｒ⁵ ₂であ
る。式中、基Ｒ⁵は同一もしくは異なり、そして各々は水素、Ｃ_1-4アルキルまた
はアリール（好ましくはフェニル）であるか、もしくは基Ｒ⁵の２つはそれらが
結合するヘテロ原子と一緒になって５から７個の原子を含有する飽和もしくは不
飽和のヘテロ環を形成する。好ましくは、基Ｑ¹は永久にカチオン性である。す
なわち、各Ｒ⁵は水素以外である。好ましくは、Ｑ¹はＮ⁺Ｒ⁵ ₃であり、式中、各
Ｒ⁵はＣ_1-4アルキル、好ましくはメチルである。

【００４５】両性イオン性モノマー対カチオン性モノマーの分子中における両性イオン性ペ
ンダント基対カチオン性ペンダント基の相対比（当量）は、１：１００から１０
０：１（両性イオン性対イオン性）好ましくは１：１０から１０：１、更に好ま
しくは１：２から２：１の範囲にある。

【００４６】一般的に、この架橋性基を含むポリマーは、ステント上に被覆され、塗膜の後
、架橋される。架橋は、一般的に、湿気の存在下、例えば少なくとも４０°Ｃ、
好ましくは少なくとも６０°Ｃ、例えば７０°Ｃ近傍で場合によっては加熱する
ことによる。

【００４７】この化合物と架橋性ポリマーの両方を含有する組成物から共被覆されることに
より、このポリマーマトリックスの中にこの製剤学的に活性な化合物を装填させ
てもよい。もしくは、そして好ましくは、このポリマーをステント上に被覆し、
架橋した後にこの薬剤をこのマトリックスの中にもしくは上に吸収させる。この
装填段階は、場合によっては予備膨潤段階の後に、ポリマーマトリックスに浸透
することができる製剤学的に活性な化合物の溶媒中の溶液または分散液とこの被
覆されたステントを接触することにより行われる。普通、製薬学的活性体に対す
る溶媒は、このポリマーを膨潤させる溶媒である。好適な充填用組成物は水を含
んでなり、加えてもしくは代わって、アルコールを含んでなる。製剤学的活性体
を含有する膨潤したマトリックスからこの溶媒を除去してもよいが、もしくは例
えば、貯蔵時には、もしくはこのステントを患者に直ちに送達することによりこ
のポリマーの中に溶媒を保持させてもよい。

【００４８】活性体の適当な装填量を得るように、装填条件が決められる。この温度は、こ
のポリマーに好適な性質をもたらすように選ばれる。この温度は、普通０と６０
°Ｃの間、好ましくは室温から約４０°Ｃ、例えば２０から４０°Ｃまで、最も
好ましくは３７°Ｃ近傍である。この溶液または分散液は、この付着温度で適当
な流動性を得るように選ばれた溶媒を含有してもよい。

【００４９】装填前後で例えばガンマ線照射により、このステントを殺菌してもよい。

【００５０】薬剤の適切な装填量を提供するために、この塗膜ポリマーの塗膜は、少なくと
も０．５μｍ、更に好ましくは少なくとも１μｍ厚（乾燥厚さ）であることが好
ましい。場合によっては、この厚さは少なくとも２μｍ厚である。このステント
をインプラントする血管壁の中に製剤学的活性体を直接に送達するステントの外
側の上にのみ、このポリマー塗膜と製剤学的に活性な化合物を被覆してもよい。
しかしながら、好ましくは、更に厚い塗膜を、もしくは好ましくは外部塗膜より
も薄い塗膜をこのステントの腔表面にも付けるように、ポリマーの全体の塗膜を
このステントに付ける。

【００５１】このステントは、形状記憶金属ステント、自己膨張性ステントまたはバルーン
膨張型ステントでもよい。例えば、自己膨張性ステントは、圧延シート器具また
は編網器具でもよい。最も好都合には、このステントは、エッチングされた管バ
ルーン膨張型ステントである。送達器具上に搭載した時に本発明における薬剤を
このステントに付着させてもよい。決められた塗膜に上に両性イオン性ポリマー
のオーバーコートを塗布して、使用時の放出を制御してもよい。

【００５２】

【実施例】

次の実施例は本発明を例示する。略号ＭＰＣ：２−メタクリロイルオキシエチル−２'−トリメチルアンモニウムエチ
ルホスフェートＬＭ：ラウリルメタアクリレートＨＰＭ：ヒドロキシプロピルメタアクリレート−（７０％３−ヒドロキシプロピ
ル：３０％２−ヒドロキシ−１−メチルエチル）ＸＬ：３−（トリメトキシシリル）プロピルメタクリレートＣＭ：コリンメタアクリレートＤＭＡ：ジメチルアクリルアミドこれらのモノマー比は、重合で使用したモノマー量を基準とした重量ベースの
ものである。（実施例１）この目的は、各種ポリマー上への一本鎖のオリゴヌクレオチド（ＡＳＯＮ、ｃ
−ｍｙｃ）の装填量を比較して、ポリマー膜へのＡＳＯＮ装填量に対する疎水性
、親水性、架橋密度及びカチオン電荷のレベルの重要性を評価することである。

【００５３】次の薬剤／化合物を評価し、比較した。（ｉ）アンチセンス一本鎖オリゴヌクレオチド（ＡＳＯＮ）（ｉｉ）ジピリダモル−抗血小板薬剤（ｉｉｉ）ＦＩＴＣ標識したデキストランポリマー系は２つのタイプをベースとした。（１）参照１．１ＥＰ９９３０４１４０．９のポリマーＭＰＣ₂₉ＬＭ₅₁ＨＰＭ₁₅ＸＬ₅
１．２疎水性のバリエーション品ＭＰＣ₁₅ＬＭ₆₅ＨＰＭ₁₅ＸＬ₅ １．３親水性のバリエーション品ＭＰＣ₄₅ＬＭ₃₅ＨＰＭ₁₅ＸＬ₅ １．４架橋剤の増加ＭＰＣ₃₀ＱＬＭ₅₀ＨＰＭ₁₀ＸＬ₁₀ １．５ＥＰ９９３０４０９２．２のポリマーＭＰＣ₃₇ＬＭ₆₃ （２）本発明２．１標準ＭＰＣ₂₉ＬＭ₅₀ＣＭ₅ＨＰＭ₁₂ＸＬ₄ ２．２電荷の増加ＭＰＣ₂₁．₅ＬＭ_42.5ＣＭ₂₀ＨＰＭ₁₂ＸＬ₄ ２．３親水性のバリエーション品ＭＰＣ₄₈ＬＭ₃₀ＣＭ₆ＨＰＭ₁₂ＸＬ₄ ２．４架橋剤の低減ＭＰＣ₂₅ＬＭ₅₀ＣＭ₆ＨＰＭ₁₄ＸＬ₂ ２．５親水性ポリマーＭＰＣ₂₈ＬＭ₂₀ＣＭ₆ＨＰＭ₁₂ＸＬ₄ＤＭＡ₃₀ ２．６高カチオン性ＭＰＣ₁₈ＬＭ₃₁ＣＭ₃₅ＨＰＭ₁₂ＸＬ₄ ポリマー調製ポリマー１．１を例外としてＷ０９８／２２５１６に述べられているようなポ
ンプによる供給方法によりすべてのポリマーを調製した。開始剤としてＡＩＢＮ
を使用してイソプロパノールと酢酸イソプロピル（沸点８３°Ｃ）の還流するブ
レンドにイソプロパノール溶液中のモノマーを２時間にわたってポンプ供給した
。スチール片の塗膜スチール片（１ｃｍ×１．５ｃｍ）をジクロロメタン中で１０分間超音波浴を
用いてクリーニングした。５０ｍｇ／ｍｌのポリマー溶液２００μｌをこのスチ
ール片上に均一に被覆した。各ポリマー試料に対して７個のスチール片を被覆し
た。次に、被覆したスチール片をオーブン中で７０°Ｃで一夜乾燥して、このポ
リマー膜を硬化させた。ポリマーへの薬剤の装填１ｍｇ／ｍｌの薬剤溶液を入れた穴の中で６個の被覆したスチール片を、ポリ
マー側を下にして入れた。一つのコントロール試料には薬剤を装填させなかった
。このスチール片を１時間浸した。次に、このスチール片を穴から取り出し、表
面をティシュで軽くたたくことにより過剰の薬剤を除去した。次に、このスチー
ル片を室温で更に３０分間乾燥した。次に、各試料をきれいなＰＢＳ溶液中に迅
速に浸漬し、この塗膜から過剰な薬剤を除去した（３秒浸漬）。次に、各スチー
ル片をバイアルに入れた３ｍｌのＰＢＳ溶液中に入れた。次に、この薬剤をこの
ポリマー塗膜から抽出するために、各バイアルを３５°Ｃの浴温で２０分間超音
波を照射した。次に、各溶液を蛍光分光法を用いて測定して、薬剤取り込み量を
求めた。

【００５４】注−ジピリダモルの場合、薬剤の溶解度のためにＰＢＳの代わりに５０：５０
ＰＢＳ／エタノール溶液を使用した。ＡＳＯＮとＦＴＩＣ−デキストランの場合
には、３ｍｌのＰＢＳでなく合計６０ｍｌのＰＢＳ／エタノール溶液の中に試料
を抽出した。実施例１：１ポリマー膜へのＡＳＯＮの装填

【００５５】

【表１】

【００５６】ＡＳＯＮを装填した１．１及び１．２ポリマーバリエーション品に対する初期
の結果は、ポリマー１．１がいかなるＡＳＯＮも取り込まず、その一方でポリマ
ー２．１が少量のこの薬剤を取り込むことを示した。第１には、ポリマー２．１
の中へのＡＳＯＮの付着は、このポリマー上の電荷の存在と関連するように思わ
れる。また、この結果は、電荷レベルを増加する場合に、このポリマー塗膜が更
なる量の薬剤を取り込まないように見えることを示す。電荷の増加の主なメリッ
トは、活性化合物（ＡＳＯＮ）の放出速度をスローダウンさせることである。

【００５７】ポリマー２．１におけるＡＳＯＮの取り込みは、ＡＳＯＮ分子に関連する負電
荷とこのポリマー塗膜中のＣｍの存在に関連する正電荷の相互作用によるのかも
しれない。

【００５８】試料２．１及び２．２に更に１時間の超音波を照射して、それ以上のＡＳＯＮ
がいくらかでも放出されるかどうかを求めた。この結果は、２０分後に観測され
た結果と差異を示さず、恐らく１．６及び１．８μｇが全装填量であることを示
した。実施例１：２ＡＳＯＮ分子が大きすぎてこのポリマー塗膜中に浸透することができるかどう
かを調べるために、膜厚に対する薬剤取り込みを評価することにより更なる実験
を行った。この実験の目的は、ポリマーへのＡＳＯＮの浸透が起こったかどうか
を示すことであった。

【００５９】５０ｍｇ／ｍｌのポリマーストック溶液２００、５００、及び８００μｌで種
々の量の２．１及び１．１ポリマーによりスチール片を被覆した。次に、各スチ
ール片を前述の方法によりＡＳＯＮを付着させた。得られた結果を表２に示す。

【００６０】

【表２】

【００６１】結果は、全体としての電荷を持たないポリマーはＡＳＯＮを吸収せず、カチオ
ン性ポリマーは吸収することを示す。カチオン性ポリマーの場合の薬剤の取り込
みは、表面積だけでなくポリマー容積に関係すると思われる。実施例１：３これまでの観察は、ＡＳＯＮはカチオン性タイプポリマーにより吸収されるの
みであることを示した。次のアプローチは、このようなポリマーの疎水性、親水
性及び架橋密度の影響を試験して、ポリマー網目の変化がＡＳＯＮの装填度を増
加させるかどうかを決めることであった。２００μｌの塗膜に対して得た結果を
表３に示す。

【００６２】

【表３】

【００６３】得られた結果は、このカチオン性ポリマーはＡＳＯＮを吸収するが、ポリマー
組成の変化は低架橋ポリマー系を例外としてポリマー塗膜中の取り込みの度合い
を増加させないようであるという点で以前の発見を確認した。この親水性コポリ
マーは、塗膜性の点で最適でなく、結果として、見かけ上薬剤を吸収できないの
かもしれない。実施例１：４装填量に及ぼす薬剤分子量の影響ポリマー塗膜中への薬剤分子量の装填量への影響を試験するために、蛍光によ
り検出することができる種々の分子量の化合物を同定しなければならなかった。
このような化合物の一つは、フルオレッセインイソチオシアネートデキストラン
（ＦＩＴＣ−デキストラン）であった。これは中性の化合物である。ＦＩＴＣ−
デキストランは単純なポリサッカライドであり、ある範囲の分子量、すなわち４
４００Ｄ、９５００Ｄ、１９５００Ｄ、４２０００Ｄ、及び７７００００で入手
できる。

【００６４】これらの化合物のサイズは、５０００Ｄの分子量を有するＡＳＯＮに類似して
いる。

【００６５】この実験は、いずれのポリマー塗膜においてもこのＦＩＴＣ−デキストラン（
分子量４４００）を検出することができなかったことを示した。ポリマー２．１
はいかなるデキストランも吸収しないという観察は、ポリマー２．１塗膜への取
り込みに対する分子上の負電荷の重要性と必要性を示す。前にも示したように、
ポリマー１．１は、分子量＞４４００Ｄの化合物／薬剤を取り込まない。実施例２二本鎖オリゴヌクレオチド（ＤＳＯＮ）（分子量１００００Ｄ）この溶液の中にこのステントを数回浸漬し、中間で乾燥し、取り出す自動化ス
テント塗膜器具の上にＢｉｏｄｉｖＹｓｉｏステントを次の条件を使用して被覆
した。ポリマー：２５ｍｇ／ｍｌエタノール中浸漬回数：×５空気圧（真空）：６バール浸漬速度：５ｍｍ／秒（電源パック上で２５Ｖ）真空下の乾燥時間：浸漬サイクル当り２分次に、ステントを７０°Ｃで一夜硬化させた。装填試験リン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）中１ｍｇ／ｍｌの濃度でＤＳＯＮを入れた穴の中に
浸漬することにより、このステントにＤＳＯＮを装填させた。各ステントに１時
間付着させた。装填が完了したら、このステントを穴から取り出し、ステントを
ティシューで軽くたたくことにより過剰のＤＳＯＮを除去した。

【００６６】このステントをＰＢＳ（２ｍｌ）中に入れ、１時間超音波を照射して、ステン
トから吸収／吸着ＤＳＯＮを除去した。２つの方法を使用して、充填された材料
の量を確認した。（１）蛍光（吸収５００ｎｍ／発光５２５ｎｍ）全薬剤装填量２ｍｇ／ｍｌ溶液（ＤＳＯＮ、水中）：４μｇ１ｍｇ／ｍｌ溶液（ＤＳＯＮ、水／ＰＢＳ５０：５０中）：５μｇ繰り返し試験−１ｍｇ／ｍｌ溶液（ＤＳＯＮ、水／ＰＢＳ５０：５０中）：６μ
ｇ（２）ＵＶ（＠２５８ｎｍ）全薬剤装填量１ｍｇ／ｍｌ溶液（ＤＳＯＮ、ＰＢＳ中）：ｌ６μｇ（濾過前）１ｍｇ／ｍｌ溶液（ＤＳＯＮ、ＰＢＳ中）：１２μｇ（濾過後）装填させたステントを超音波照射浴に約１時間入れた後、全装填量に対する値
を得た。結果は、超音波照射時にポリマー塗膜の一部がこのステントからはずれ
て、予想よりも大きな値を生じることを示す。それゆえ、分析の前にこの溶液を
濾過することが必要であると感じられた。図１のグラフは、ＰＣ被覆のＢｉｏｄ
ｉｖＹｓｉｏステントからのオリゴヌクレオチドの放出を示す。

【００６７】このＢｉｏｄｉｖＹｓｉｏステントに１ｍｇ／ｍｌのＰＢＳ（５０：５０水：
ＰＢＳ）中からＡＳＯＮとＤＳＯＮを付着させた。ほぼ１−２μｍでポリマー２
．１により被覆された１５ｍｍＢｉｏｄｉｖＹｉｓｏステントへの取り込みは、
ＡＳＯＮ５．３μｇ（１０ｍｇ／ｍｌ−５２μｇ）、ＤＳＯＮ５−１０μｇであ
った。

【００６８】ＰＢＳ中への溶離を上で示した通りに求めた。

【００６９】ガンマ線照射したポリマー２．１被覆の１５ｍｍＢｉｏｄｉｖＹｓｉｏステン
トを用いて、ＡＳＯＮの付着と放出を調べるこの試験を繰り返した。この結果は
、ガンマ線照射しないポリマー被覆のステントに対して同じであった。これは、
照射後にこのポリマーの化合物の吸収／吸着能力に変化がないことを示す。実施例３プラスミドＤＮＡこの試験計画の目的は、ポリマー被覆の円板からのプラスミドＤＮＡ（分子量
約５０ｋＤａ）の装填と薬剤放出プロフィールを求めることであった。

【００７０】１３ｍｍの直径でスチール円板を切断した。各円板を充分に洗浄した。次に、
この円板を空気中で２時間乾燥した。ポリマー２．２もしくは１．１の塗膜溶液
（１５ｍｇｍｌ^-1）２０μｌの容積を各円板の片側に添加し、２時間乾燥させた
。次に、各円板の逆側を同じ方法で被覆した。この被覆した円板を７０°Ｃで４
時間加熱架橋した。加えて、塗膜無しのスチール円板を比較のために試験した。

【００７１】ＤＮＡ−プラスミド溶液（２．３２５μｇ／μｌ）２０μｌの容積を各円板の
片側に添加した。この円板を３時間乾燥した。この手順をもう一方の側で繰り返
した。

【００７２】この円板の一部をオーバーコートした。ポリマー被覆し、装填させた円板をエ
タノール中のポリマー１．５の２０ｍｇ／ｍｌ溶液で噴霧塗膜することにより、
オーバーコートを行った。

【００７３】この装填させた円板を２ｍｌのＰＢＳ中に入れた。一定時間後、１ｍｌの溶液
を取り出し、プラスチックバイアルの中に入れた。この１ｍｌの溶液を１ｍｌの
新しいＰＢＳで置き換えた。この手順を異なる時間間隔で繰り返した。ＤＮＡを
紫外／可視分光光度計を用いて定量する。放出データをグラフで表す（図２０−
２２を参照）。図２０は、オーバー塗膜の有り及び無しの２つの塗膜からのＤＮ
Ａ−プラスミドの放出を示す。このデータは、経時的な損失パーセントの形で表
される。ほぼ９０−１００μｇのＤＮＡプラスミドを各円板に装填させた。図２
１は、オーバー塗膜有り及び無しの２つの塗膜からのＤＮＡ−プラスミドの放出
を再度示す。このデータは、実際のＤＮＡ−プラスミドの経時的な損失量の形で
表される。図２２は、類似の結果を示すが、ポリマー被覆の円板に比較した非被
覆のスチール円板からの放出を示す。

【００７４】このＤＮＡ−プラスミドは、カチオン性ポリマー塗膜２．２から中性塗膜（ポ
リマー１．１）よりもゆっくりと放出するように見える。６０分後には、ポリマ
ー２．２塗膜上に著しい量のＤＮＡ−プラスミドが存在し、この時間の後は、極
めて少量しかポリマー１．１塗膜上に残存しないように見える。

【００７５】多分、ポリマー２．２被覆のスチール円板上には、正に荷電した表面と強く相
互作用する材料である著しい量のＤＮＡ−プラスミドが数時間後に残存する。非
被覆のスチール円板に比較して、ポリマー１．１塗膜からの速度と全溶離の間に
さほどの差はない。このプラスミドのオーバー塗膜は、両方のポリマータイプに
対する溶離の全速度を低減させる。実施例４被覆したＢｉｏｄｉｖＹｓｉｏステントを用いるヘパリンの装填と放
出ａ）ポリマー２．１を装填させたステントこの試験は、ポリマー２．１被覆のステントがほぼ１００００Ｄの平均分子量
の未分別ヘパリンが試料を取り込み、放出する能力を調べた。被覆ステントをＰ
ＢＳ中のヘパリン溶液の中に浸漬することにより、付着を行った。ある範囲の条
件を使用して、このステントの中への装填を調べた。

【００７６】

【表４】

【００７７】表６ヘパリンの装填と放出の条件と結果の要約注−＊放出ヘパリンが最大に達する時間；＊＊放出実験の間に放出されたヘパ
リンの最大重量（放出プロフィールの最大点を参照、図２）図２：ヘパリンの装填量に及ぼす装填時間の影響図３：ヘパリン２ｍｇ／ｍｌを４時間装填させたステントのヘパリン放出プロ
フィールヘパリン試験の結果は、予期した通り、これがポリマー２．１被覆のステント
にヘパリンを吸着／吸収することができ、このステントからヘパリンを長時間に
わたって放出することを示す。ｂ）ポリマー２．２を被覆したステント２ｍｇ／ｍｌの水溶液からポリマー２．２により被覆されたステントに放射性
標識した（³⁵Ｓ）ヘパリン（分子量８−１０ｋＤａ）を装填させた。全装填量を
求めるために、このステントを液体シンチレーション剤の中に入れ、放射能を測
定するために被覆した。ヘパリンの平均取り込みはステント当り１１μｇであっ
た。このステントを各々多量のＰＢＳの中に入れて、４時間にわたってヘパリン
の溶離速度を求めた。このステントの中に残存するヘパリンのパーセントの形で
示される、この結果を図１８に示す。この結果は、多分ゆるく結合したヘパリン
が直ぐに洗い出されることにより、初期にはバーストとしてヘパリンが放出され
、それに緩慢な放出相が続くことを示す。放出データの外挿は、恐らく１００％
のヘパリンが約２４時間後に起こることを示す。実施例５装填レベルに及ぼす装填時の時間、温度及びオリゴマーサイズとポリ
マーのカチオン含量の影響この試験の目的は、短いＤＮＡオリゴヌクレオチドをＰＣ被覆の１５ｍｍのＢ
ｉｏｄｉｖＹｓｉｏ薬剤送達ステントに付着させるフィージビリティを試験し、
薬剤の装填に影響する種々のパラメーターを最適化することであった。種々の条
件を用いて、１５マー及び３２マーの³²Ｐ放射性標識した一本鎖のＤＮＡオリゴ
ヌクレオチドを３００μｌ溶液からＰＣ被覆ステント（上述のポリマー２．１、
２．２及び２．６を用いた）に装填させた。温度（２３、３７、４５、６５°Ｃ
）、薬剤溶液への露光時間（５、１０、２０、３０分）、薬剤活性（濃度）（１
１−５００μＣｉ／３００μｌ）及びポリマー中のカチオン性モノマー含量（５
、２０及び３５重量％）の影響を試験した。全装填量をシンチレーションカウン
ター中で評価した。すべての装填実験は成功した。

【００７８】ポリマー２．１により被覆されたステント上に３７°Ｃで装填させた１５マー
に対する露光時間の装填レベルに及ぼす影響を図４に示す。

【００７９】装填溶液中の１５マーの濃度を変える（ポリマー２．１、３０分の塗膜時間及
び３７°Ｃの温度を用いて）ことの装填レベルに及ぼす影響を図５に示す。

【００８０】薬剤溶液の温度を変える（ポリマー２．１、３０分の塗膜時間及び７５μＣｉ
の１５マーの濃度を用いて）ことの装填レベルに及ぼす影響を図６に示す。

【００８１】このポリマー中のカチオン性モノマーのレベルを変え、この塗膜を脱イオン水
により１時間前浸漬する（１５マーと３２マーのオリゴヌクレオチドの両方に対
して３００μｌ中の２１１ｐＣｉの初期濃度の薬剤により３０分の塗膜時間と３
７°Ｃの温度を用いて）ことの装填レベルに及ぼす影響を図７ないし９に示す。

【００８２】この溶液にステントを１０分暴露した後に全薬剤装填量のプラトーが得られ、
３７°Ｃ（ｐ，０．０５）で最大装填量を得た。これらのパラメーターを用いる
装填効率は１０％であった。薬剤濃度の増加と共に最適な装填を実現し、４５８
ｐＣｉ（３４μｇＤＮＡ）溶液を用いて、４５．８ｐＣｉ（３．２７μｇＤＮＡ
）を装填させた。また、他の濃度（０及び６％に対してｐ＜０．０５）に比較し
て、このステント上のこのポリマーのＣＭ含量を２０％まで増加することは、最
大装填量を改善した。実施例６ステントからのオリゴヌクレオチドのインビトロの溶離ポリマー２．１、２．２及び２．６により被覆され、１５マーまたは３２マー
の³²Ｐ標識のオリゴマーを装填（３７°Ｃ、３０分、脱イオン水中の前浸漬の有
りもしくは無しで、浸漬溶液中３００μｌの濃度で２１１μＣｉで）させたステ
ントをヒトの血液またはＤＭＥＭ細胞培養媒体中３７°Ｃでインキュベーション
した。このインキュベーション媒体の試料をある時間にわたって採取し、放射能
を評価した。この結果を使用して、ある時間後このステント上に残存する％オリ
ゴマーを計算した。

【００８３】図１０は、血液と細胞培養媒体中でインキュベーションしたポリマー２．１に
より被覆されたステントからの１５マーに対する溶離プロフィールを示す。

【００８４】図１１は、血液と共のインキュベーション時の、異なるポリマーにより被覆さ
れたステントからの１５マーと３２マーの溶離プロフィール及び脱イオン水中で
前含浸したポリマー２．１に対する溶離プロフィールを示す。実施例７インビボのオリゴマーの放出ａ）ポリマー２．１により被覆されたステント（１５ｍｍ×３．５ｍｍ）にス
テント当り１２ｐＣｉの全標識装填量で³²Ｐ標識した１５マーのＡＴＧＣＣＣＣ
ＴＣＡＡＣＧＴＧ（配列ＩＤ１）を装填させた。次に、装填させたステントを
ブタのＬＣ×動脈の中に配備した。このブタを３０分後に屠殺した。血液試料を
採取し、このステントを回収し、１５マーのレベルをこの血液、ステント、動脈
壁及びバルーンに対して求めた。この結果を図１２に示す。

【００８５】ｂ）ポリマー２．２により被覆されたステント上の高装填量の３２マーを用い
たことを除いて、類似の実験を行った。０時、配備後３０分、２４時及び屠殺時
４８時で血液試料を採取した。この結果を図１３に示す。

【００８６】ｃ）ポリマー２．１により被覆され、実験８ｃ）で使用のと同じ³²Ｐ標識した
３２マーを装填させたステントをバルーンカテーテル上に搭載し、インビボでブ
タの頚動脈の中に送達した。０、３．６及び７２時間と８及び１４日の各時点に
対して２ないし３匹の動物を使用した。送達後の特定の時点で、このステント上
に残存する³²Ｐ標識のレベルとこのステントから動脈及び心筋の中へのオリゴヌ
クレオチドの組織取り込みをシンチレーション計数により測定した。

【００８７】この結果を図１５及び１６に示す。結論実施例７ａ）−ｃ）の結果は、オリゴヌクレオチドがこのステントを取り囲む
血管壁の中にインビボで放出され、このステントを移植した血管に隣接する組織
では殆ど検出されないことを示す。このように、実施例７ｃ）においては、心筋
の中で検出された放射能は殆どなかった。送達効率は、局所的な薬剤送達カテー
テルの空気入れポンプ（ｉｎｆｉｌｔｒａｔｏｒ）（ＴＭ）を使用するよりずっ
と高い。比較の結果は、１６８０ｐＣｉの³²Ｐ標識ＯＤＮの投与量を送達するこ
とは、結果として、３時間と６時間で組織中で同一レベルの標識が得られ、ステ
ントからの投与として僅か１００μｇであったことを示す。これらの化合物の更
に低い投与量を使用して、標的組織に送達してもよい。実施例８蛍光標識したオリゴヌクレオチドａ）ポリマー２．２被覆のステント上の取り込みと放出生理食塩水中の５ｍｇ／ｍｌのＤＮＡ溶液中に３０分間浸漬することにより、
ポリマー２．２により被覆されたステントに蛍光標識により標識した１５マーの
ｃ−ｍｙｃアンチセンスオリゴヌクレオチドＡＡＣＧＴＴＧＡＧＧＧＧＣＡＴ（
配列ＩＤ２）を装填させた。

【００８８】３個のステントを各々３ｍｌのＰＢＳの中に入れ、３０分間超音波照射するこ
とにより、全装填量を求めた。この蛍光標識を定量した。この装填量は、ステン
ト当り約２０μｇであることが判明した。ＰＢＳの中への放出を図１９に示す。ｂ）ブタ頚動脈中での放出と取り込みポリマー２．１被覆のステントに８ａで使用した同じオリゴヌクレオチドを装
填させた。このステントをウイック（ｗｉｃｋ）乾燥した。バルーン上に搭載し
、この切片中でバルーンを膨らませることにより、各ステントをブタ頚動脈の５
０ｍｍの長さの切片中に配備した。次に、動脈のこの切片を培養媒体を充填した
室中でカニューレ上に搭載した。更なる培養媒体をシリコーン管の回路と、それ
から動脈の切片から６０ｍｌ分^-1の速度で流動させた。１、６、１２もしくは２
４時間後、ステント移植した切片をこの回路から取り外し、このステントから近
位及び遠位の血管の末端をＯＤＮを定量するために取り出した。血管のこのステ
ント化セグメントをこのステントから静かに引き離した。３つの血管セグメント
すべてを液体窒素中でスナップ（ｓｎａｐ）冷凍し、粉末化し、そして溶解緩衝
液中で一夜インキュベーションした。超音波照射と遠心分離に続いて、この上澄
みを蛍光について測定して、ＯＤＮと結合した状態と考えられる標識濃度を求め
た。この結果を図１４に示す。この循環液体中の蛍光標識のレベルを各実験の終
わりで検出し、これが読み取り器の検出レベル以下であることを見出した。血管
の開始切片の一つを全蛍光標識の分析をする代わりに、切片し、そして臭化エチ
ジウム染色の後共焦点顕微鏡下で観察した。この結果は、オリゴヌクレオチドが
核の位置を示すと考えられる臭化エチジウムを含有することを示す。実施例９Ａｂｃｉｘｍａｂ装填とインビトロの溶離Ａｂｃｉｘｍａｂは、血栓形成を最少化するためのステント術の前後に全身的
に投与されるグリコタンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａに対する抗体（分子量、約５０
ｋＤａ）である。Ａｂｃｉｘｍａｂは、潜在的に平滑筋細胞上に存在し、そして
平滑筋細胞遊走を仲介する役割のαＶβ３と反応し、それにより再狭窄にプラス
に影響する。これは全体としてアニオン電荷を有する。

【００８９】この試験においては、このステントを０．００１％ポリソルベート８０を含有
するリン酸塩緩衝液中の２ｍｇ／ｍｌの薬剤溶液の中に浸漬して、溶解を室温で
３０分間を助けることにより、¹²⁵Ｉ標識したａｂｃｉｘｉｍａｂを、ポリマー
２．２により被覆されたステント上に、もしくは比較としてむきだしのステント
（ポリマー無し）上に装填させる。このステントを除去し、ウイック乾燥した。
次に、アルブミンを含有する再循環（２０ｍｌ／分）リン酸塩緩衝液の分離した
回路の一部を形成するチャンネルの中に３７°Ｃでこのステントを入れる。循環
するＰＢＳ中の標識のレベルを２４または４８時間にわたって測定することによ
り、このステント上に残存する¹²⁵Ｉ標識のレベルを求め、パーセントの形で示
した。この結果を図１７に示す。また、ステント上の薬剤の全装填量を求め、そ
れがポリマー２．２により被覆されたステントに対してステント当り約５μｇで
あることも判明した。

【００９０】この結果は、むきだしのステントからよりもこのカチオン性ポリマーからの方
が更に長い時間にわたってこの活性剤を放出することを示す。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例２の結果を示す。

【図２及び３】実施例４ａの結果を示す。

【図４ないし９】実施例５の結果を示す。

【図１０及び１１】実施例６の結果を示す。

【図１２及び１３】実施例７ａ及びｂの結果を示す。

【図１４】実施例８ｂの結果を示す。

【図１５及び１６】実施例７ｃの結果を示す。

【図１７】実施例９の結果を示す。

【図１８】実施例４ｂの結果を示す。

【図１９】実施例８ａの結果を示す。

【図２０ないし２２】実施例３の結果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ビク，テレンス・アルバートイギリス・サリージーユー９８キユーエル・フアーナム・ウエイドンレイン・フアーナムビジネスパーク・チヤプマンハウス・バイオコンパテイブルズ・リミテツド (72)発明者ワング，ジン・ハイイギリス・サリージーユー９８キユーエル・フアーナム・ウエイドンレイン・フアーナムビジネスパーク・チヤプマンハウス・バイオコンパテイブルズ・リミテツドＦターム(参考） 4C081 AC16 BB06 CA06 CA08 CA10 CA13 CB04 CC03 CC05 CE02 DC04 4C167 AA46 BB01 BB06 CC08 GG16 GG42

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ａ）少なくとも０．１μｍの乾燥厚さを有する架橋された、
水膨潤性ポリマーマトリックスとｂ）製剤学的に活性な化合物を含んでなり、ここで該ポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカチ
オン性基を有する外部表面上に塗膜を有するインプラント。
【請求項２】該製剤学的に活性な化合物が核酸を含んでなる請求項１に記
載のインプラント。
【請求項３】ａ）架橋された、生体安定性ポリマーマトリックスとｂ）核酸である製剤学的に活性な化合物を含んでなり、ここで該ポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカチ
オン性基を有する外部表面上に塗膜を有するインプラント。
【請求項４】ａ）架橋された、生体安定性ポリマーとｂ）生理的ｐＨでアニオンに荷電するタンパク質である製剤学的に活性な化合物
を含んでなり、ここで該ポリマーがペンダント両性イオン性基とペンダントカチ
オン性基を有する外部表面上に塗膜を有するインプラント。
【請求項５】該タンパク質が抗体またはこれらのフラグメントである請求
項４に記載のインプラント。
【請求項６】該ポリマーが２０モル％未満の架橋性モノマーを含むエチレ
ン型不飽和モノマーから形成される前出の請求項のいずれかに記載のインプラン
ト。
【請求項７】該ポリマーがａ）式ＩＹＢＸＩ（式中、Ｂは結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキレ
ン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であっ
て、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含む
ものであり、Ｘは両性イオン性部分を有する有機基であり、そしてＹはエチレン型不飽和重合性基である）の両性イオン型モノマーと、ｂ）式ＩＩＹ¹Ｂ¹Ｑ¹ ＩＩ（式中、Ｂ¹は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ¹はエチレン型不飽和重合性基であり、そしてＱはカチオン性もしくはカチオン化し得る部分を有する有機基である）のカチオン性モノマーと、ｃ）一般式ＩＶＹ³Ｂ³Ｑ³ ＩＶ（式中、Ｂ³は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ³はエチレン型不飽和重合性基であり、そしてＱ³はこのポリマーを架橋することができる反応性基を有する有機基である）を有する架橋性モノマーを含むエチレン型不飽和モノマーから形成される先行する請求項のいずれかに記
載のインプラント。
【請求項８】Ｑ³が架橋性シンナミル、エポキシ、−ＣＨＯＨＣＨ₂Ｈａｌ
（式中、Ｈａｌはハロゲン原子である）、メチロール、または反応性シリル、ア
セチレン、ジアセチレン、ビニルまたはジビニル基などのエチレン型不飽和架橋
性基（例えば、アセチレン、ジアセチレン、ビニルもしくはジビニル基）、また
はアセトアセトキシまたはクロロアルキルスルホン、好ましくはクロロエチルス
ルホン基を含有する請求項７に記載のインプラント。
【請求項９】Ｑ³が基ＳｉＲ⁴ ₃（ここで、各Ｒ⁴はＣ_1-4アルコキシ（好ま
しくはメトキシ）基またはハロゲン原子である）である請求項８に記載のインプ
ラント。
【請求項１０】該モノマーが更に化合物を含む請求項９に記載のインプラ
ント。
【請求項１１】Ｘが式Ｖ【化１】（式中、部分Ｘ¹及びＸ²は、同一もしくは異なり、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−ま
たは原子価結合、好ましくは−Ｏ−であり、そしてＷ⁺はアンモニウム、ホスホ
ニウムもしくはスルホニウムのカチオン性基とアニオン性及びカチオン性部分を
連結する基であって、好ましくはＣ_1-12−アルキレン基である基を含んでなる基
である）の基である請求項７ないし１０のいずれかに記載のインプラント。
【請求項１２】一緒に共重合されたすべてのモノマーのエチレン型不飽和
基がアクリレートタイプであるか、もしくはスチレンタイプ（ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）
Ｃ（Ｏ）Ａ−またはＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ₆Ｈ₄）Ｋ−）であり、好ましくは各々が同
一の式を有する請求項１１に記載のインプラント。
【請求項１３】Ｗ¹が直鎖アルキレン基、最も好ましくは１，２−エチレ
ンである請求項１２に記載のインプラント。
【請求項１４】Ｘが式ＶＩ【化２】（式中、基Ｒ⁸は同一もしくは異なり、各々は水素またはＣ_1-4アルキルであり、
そしてｅは１から６であり、好ましくは全てのＲ⁸は同一で、かつ、更に好まし
くはＣＨ₃であり、そしてＣは好ましくは２または３である）の基である請求項１１ないし１３のいずれかに記載のインプラント。
【請求項１５】Ｑ¹が基Ｎ⁺Ｒ⁵ ₃、Ｐ⁺Ｒ⁵ ₃またはＳ⁺Ｒ⁵ ₂ （ここで、基Ｒ⁵は同一もしくは異なり、そして各々は水素、Ｃ_1-4アルキルまた
はアリール（好ましくはフェニル）であるか、もしくは基Ｒ⁵の２つは、それら
が結合するヘテロ原子と一緒になって５から７個の原子を含有する飽和もしくは
不飽和のヘテロ環を形成する請求項７ないし１４のいずれかに記載のインプラン
ト。
【請求項１６】該モノマーが式ＩＩＩＹ²Ｂ²Ｑ² ＩＩＩ（式中、Ｂ²は結合であるか、あるいは直鎖もしくは分岐のアルキレン、アルキ
レン−オキサ−アルキレンまたはアルキレン−オリゴオキサ−アルキレン基であ
って、このいずれかは１つもしくはそれ以上のフッ素置換基を場合によっては含
むものであり、Ｙ²はエチレン型不飽和の重合性基であり、そしてＱ²は少なくとも６個の炭素原子を有するアルキル基、フッ素置換アルキル基及
び少なくとも一つのシロキサン置換基を有するアルキル基から選ばれる疎水性基
を有する有機基である）のターモノマーを更に含む請求項６ないし１５のいずれかに記載のインプラント
。
【請求項１７】Ｙ、Ｙ¹、Ｙ²、Ｙ³及び／またはＹ³が、場合によってＣＨ＝ＣＨ（Ｃ₆Ｈ₄）−Ｋ−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−Ａ−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ
）−ＣＨ₂−Ｏ−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）−ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）ＯＣ
（０）−、ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｏ−、及びＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ¹ ）− （式中、Ｒは水素またはＣ₁−Ｃ₄アルキル基であり、Ａは−Ｏ−または−ＮＲ¹−［ここで、Ｒ¹は水素またはＣ₁−Ｃ₄アルキル基であ
るか、もしくはＲ¹は場合によって−Ｂ−Ｘ、Ｂ¹Ｑ¹、Ｂ²Ｑ²またはＢ³Ｑ³（こ
こで、Ｂ、Ｂ¹、Ｂ²、Ｂ³、Ｑ¹、Ｑ²とＱ³及びＸは上で式ＩないしＩＶのそれぞ
れ一つにおいて定義されている通りである）であることができる］であり、そし
てＫは基−（ＣＨ₂）_pＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_pＣ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）_pＯ
Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ ₂ ）_pＣ（Ｏ）ＮＲ²−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）_pＯＣ（Ｏ
）ＮＲ²−、−（ＣＨ₂）_pＮＲ²Ｃ（Ｏ）ＮＲ²−（ここで、基Ｒ²は同一もしくは
異なる）、−（ＣＨ₂）_pＯ−、−（ＣＨ₂）_pＳＯ₃−、または場合によってはＢ
と組み合わさって原子価結合であり、そしてｐは１から１２であり、そしてＲ²
は水素またはＣ₁−Ｃ₄アルキル基である）から独立に選ばれる請求項７ないし１６のいずれかに記載のインプラント。
【請求項１８】一緒に共重合されたすべてのモノマーの該エチレン型不飽
和基がアクリレートタイプであるか、もしくはスチレンタイプ（ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ
）Ｃ（Ｏ）Ａ−またはＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ₆Ｈ₄）−Ｋ−）であり、そして好ましく
は各々が同じ式、更に好ましくは式ＣＨ₂＝Ｃ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ａ（式中、ＲはＨ
またはＣＨ₃であり、Ａは−ＮＨまたは−Ｏ−であり、最も好ましくはＡは−Ｏ
−である）を有する請求項１７に記載のインプラント。
【請求項１９】該ポリマーマトリックスが少なくとも０．５μｍ、好まし
くは少なくとも１μｍの乾燥厚さを有する先行する請求項のいずれかに記載のイ
ンプラント。
【請求項２０】該核酸がＤＮＡまたはＲＮＡであり、そして線状もしくは
環状、一本鎖もしくは二本鎖であることができる請求項２または請求項３に記載
のインプラント。
【請求項２１】該製剤学的に活性な化合物が１ｋＤよりも大きい、好まし
くは１．２ｋＤよりも大きい分子量を有する請求項１、請求項３または請求項４
に記載のインプラント。
【請求項２２】該ポリマーがエチレン型不飽和両性イオン性モノマーとエ
チレン型不飽和カチオン性モノマーから形成され、該ポリマーの形成に使用され
る両性イオン性モノマー対カチオン性モノマーの比が１：１００ないし１００：
１、好ましくは１：１０ないし１０：１、更に好ましくは１：２ないし２：１の
範囲にある先行する請求項のいずれかに記載のインプラント。
【請求項２３】ステントである先行する請求項のいずれかに記載のインプ
ラント。
【請求項２４】架橋された、水膨潤性ポリマーマトリックスの空（製剤学
的活性体の）の塗膜を外部表面上に有する空のインプラントを溶媒中の製剤学的
活性体の溶液または分散液と接触させて、それによって製剤学的活性体または核
酸をポリマーマトリックス中もしくはポリマーマトリックス上に吸着させる先行
する請求項のいずれかに記載のインプラントを作製する方法。
【請求項２５】該溶媒が該ポリマーマトリックスを部分的に膨潤させるこ
とができ、そしてそれを該方法で膨潤させる請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】上記溶液または分散液と接触させる場合に、該ポリマーマ
トリックスが実質的に溶媒を含まない請求項２４または請求項２５に記載の方法
。
【請求項２７】上記溶液または分散液と接触させる場合に、該ポリマーマ
トリックスが膨潤性液体により予め膨潤させた請求項２４もしくは２５に記載の
方法。
【請求項２８】上記溶液または分散液が水性である請求項２４ないし２７
のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】上記溶液または性質が有機溶媒を含んでなり、そして該方
法が処理されたインプラントから該有機溶媒を、好ましくは蒸発により除去する
乾燥段階を含む請求項２４ないし２７のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】多量の溶液または分散液の中に浸漬すことにより、該イン
プラントを上記溶液または分散液と接触させる請求項２４ないし２９のいずれか
に記載の方法。
【請求項３１】該インプラントがステントである請求項３０に記載の方法
。
【請求項３２】該ステントを送達器具、好ましくはカテーテルの上に搭載
する請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】溶液または分散液とインプラントの接触時間が少なくとも
３０秒、好ましくは少なくとも２分、更に好ましくは少なくとも５分である請求
項２４ないし３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】上記溶液または分散液が０ないし６０°Ｃ、好ましくは２
０ないし４０°Ｃ、更に好ましくは約３７°Ｃの範囲の温度にある請求項２４な
いし３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】インプラントを架橋性ポリマーにより被覆し、このポリマ
ーを架橋する予備的段階を含む請求項２４ないし３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】請求項１ないし２３のいずれかに記載のインプラントを液
体の媒体を含んでなる環境の中に置き、それによって該製剤学的活性体を液体媒
体中に放出させる方法。
【請求項３７】該環境がヒトまたは動物の体内、好ましくはヒトの中、最
も好ましくは血管の中のインビボである請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】該環境がインビトロの試験方法であり、そして引き続いて
該インプラントをヒトまたは動物に送達しない請求項３６に記載の方法。