JP2002534363A

JP2002534363A - ポリマー性デリバリー剤及びデリバリー剤化合物

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Publication number: JP2002534363A
Application number: JP2000591961A
Authority: JP
Inventors: サム・ジェイ・マイルスタイン; ユージン・エヌ・バランツェヴィッチ; ナイ・ファン・ワン; ジュン・リァオ; ジョン・イー・スマート; リチャード・ディー・コンティセロ; ラファエル・エム・オッテンブライト
Original assignee: エミスフェアー・テクノロジーズ・インク; ヴァージニア・コモンウェルス・ユニヴァーシティ
Priority date: 1999-01-08
Filing date: 2000-01-07
Publication date: 2002-10-15
Also published as: CA2358463A1; IL143962A0; CN1338924A; BR0008590A; US6627228B1; WO2000040203A2; ZA200105213B; AU3581300A; US7208483B2; EP1146860A4; US7727558B2; EP1146860A2; US20070141022A1; US20030232085A1; WO2000040203A3; NZ512581A

Abstract

(57)【要約】 -NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-及び炭素−炭素結合からなる群から選択される連結基を介して修飾アミノ酸又はその誘導体に共役したポリマーを含むポリマー性デリバリー剤（ただし、当該ポリマー性デリバリー剤はポリペプチド又はポリアミノ酸ではない）等の、活性剤のデリバリーに有用なポリマー性デリバリー剤、デリバリー剤化合物、及びそれらを含む組成物を提供する。同様に、投与方法及び製造方法も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】

本発明は、活性剤、特に、生物又は化学活性剤のデリバリーのための組成物に
関する。該組成物は、活性剤の標的へのデリバリーを容易にする、ポリマー性デ
リバリー剤又はデリバリー剤化合物を含む。これらのポリマー性デリバリー剤及
びデリバリー剤化合物は、動物に投与するための活性剤との非共有混合物を形成
するのに十分に適している。そのような組成物の製造方法及び投与方法も開示さ
れる。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】

活性剤のデリバリーのための通常の手段は、多くの場合、生物的、化学的及び
物理的障壁によって厳しく制限されている。典型的には、これらの障壁は、そこ
を通ってデリバリーが生じる環境、デリバリーの標的の環境又は標的そのものに
よって課されている。生物又は化学活性剤は、特にそのような障壁に弱い。

【０００３】動物に対する薬理学的薬剤及び治療剤のデリバリーにおいては、その身体によ
って障壁が課される。皮膚や様々な器官膜等の物理的障壁は、ある種の活性剤に
対して相対的に不透過性であるが、循環系等の標的に達する前に越える必要があ
る。化学的障壁は、これらに限定されないが、胃腸（GI）管でのpH変化及び分解
酵素を含む。

【０００４】多数の生物活性剤又は化学活性剤の経口デリバリーは、生物的、化学的及び物
理的障壁がなければ、動物に対する投与のために選択される経路であろう。経口
投与に対して、典型的には扱いやすくない多数の薬剤は、カルシトニン及びイン
スリン等の生物的又は化学的に活性なペプチド；多糖、特にムコ多糖、これらに
限定されないがヘパリン；ヘパリノイド；抗体；及び他の有機物質である。これ
らの薬剤は、酸加水分解、酵素等によってGI管にて破壊されるか又は単に吸収さ
れない可能性がある。

【０００５】多くのデリバリー剤は明らかに親水性であり、その一方で、多くの活性剤は疎
水性である。デリバリー剤と活性剤との間の水溶解性の違いは、インビボで生物
活性を示す市販の投与製剤のデザインにおいて問題となり得る。つまり、デリバ
リー剤の溶解性を変える性能は、そのバイオアベイラビリティーを最適化するた
めに、その積載物の必要性に合うようにデリバリー剤を適合させることを可能に
するであろう。

【０００６】胃腸管内のpHは、典型的には、約１から約８の範囲であり、一方、多くのデリ
バリー剤は、わずか２〜２．５のpH単位の範囲で溶解したままである。経口デリ
バリーの間、かなりの量のそのようなデリバリー剤が、その局部酸性度のせいで
、胃内に沈殿する可能性がある。沈殿したデリバリー剤は、その後、GI管のさら
に先のポイントに活性剤をデリバリーするためには利用できないであろう。デリ
バリー剤のpH溶解性の範囲の拡大は、より低い濃度で、より効果的な活性剤のデ
リバリーを可能にするであろう。

【０００７】デリバリー剤は、通常、ミセル様の構造へと自己凝集する傾向がある。自己会
合と、活性剤との会合との間の競争は、典型的には、デリバリー剤の少なくとも
一部を、該活性剤の効果的なデリバリーに有用でないものとする。つまり、投与
した活性剤の対応部分はその標的に効果的にデリバリーされない可能性がある。
デリバリー剤の自己凝集を阻害することは、活性剤のデリバリーのためのデリバ
リー剤のアベイラビリティーを増大させるであろう。

【０００８】近年、活性剤の経口投与のための多様なデリバリー剤が開発されている。これ
らのデリバリー剤は、プロテイノイド、修飾植物タンパク質、アシル化又はスル
ホン化アミノ酸ケトン、及び、アシル化又はスルホン化アミノ酸アルデヒドを含
む。米国特許第５，４０１，５１６号；第５，４４３，８４１号；第５，４５１
，４１０号；第５，５４１，１５５号；第５，６２９，０２０号；第５，６４３
，９５７号；第５，６９３，３３８号；第５，７０９，８６１号；第５，７１４
，１６７号；第５，７６６，６３３号；第５，７７３，６４７号；第５，７９２
，４５１号；第５，８２０，８８１号；第５，８６３，９４４号；第５，８６６
，５３６号；及び、ＲＥ３５，８６２を参照。これらのデリバリー剤は、胃腸管
内での活性剤の全身性吸収を促進する。デリバリー剤と活性剤との間の相互作用
は、活性剤と細胞膜との間の相互作用と同様に、吸収にとって重要であろう。米
国特許第号；第５，７１４，１６７号を参照。

【０００９】特定の必要性のためにその溶解性を変えることが可能であり、それによって、
活性剤のデリバリーに有用な可溶性デリバリー剤の濃度を変えることができるデ
リバリー剤が求められている。

【００１０】それゆえに、代替となる、改善されたデリバリー剤が求められている。

【００１１】

【課題を解決するための手段】

本発明は、活性剤のデリバリーにおいて有用なポリマー性デリバリー剤を提供
する。該ポリマー性デリバリー剤は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-
、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHC
H₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-
O-及び炭素−炭素結合からなる群から選択された連結基を介して修飾アミノ酸又
はその誘導体に共役したポリマーを含む。ただし、当該ポリマー性デリバリー剤
は、ポリペプチド又はポリアミノ酸ではない。該修飾アミノ酸は、アシル化又は
スルホン化アミノ酸、アシル化又はスルホン化アミノ酸のケトン又はアルデヒド
、それらの塩、又は、それらのいずれかのポリアミノ酸又はポリペプチドである

【００１２】前記ポリマーは、それらに制限されないが、交互共重合体、ブロック共重合体
及びランダム共重合体を含むあらゆるポリマーであってよく、それらは哺乳類で
の使用に安全である。好ましいポリマーは、それらに制限されないが、ポリエチ
レン；ポリアクリレート；ポリメタクリレート；ポリ（オキシエチレン）；ポリ
（プロピレン）；ポリプロピレングリコール；ポリエチレングリコール（PEG）
；及び、PEG−無水マレイン酸コポリマー等のそれらの誘導体；及び、それらの
誘導体及び組み合わせを含む。該ポリマーの分子量は、典型的には、約１００か
ら約２００，０００ダルトンの範囲である。該ポリマーの分子量は、好ましくは
、２００から約１０，０００ダルトンの範囲である。１つの実施態様では、該ポ
リマーの分子量は、約２００から約６００ダルトンの範囲であり、さらに好まし
くは、約３００から約５５０ダルトンの範囲である。

【００１３】１つの実施態様では、前記ポリマー性デリバリー剤は、式：

【化１８】［式中、R¹は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-
OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-
OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-及び炭素−炭素結合
からなる群から選択される連結基を介して前記ポリマーに結合した修飾アミノ酸
であり；R²はH又は-CH₃であり；そして、R¹⁹はH又は-COOHである］を有する単位又はそれらの塩を含む。好ましくは、R¹は-R³-R⁴であり、R³は、-N
HC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH
-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、
-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-又は炭素−炭素結合であり、そして、R ⁴ は、式

【化１９】［式中、 R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、及びR⁹は、独立して、R³への結合、又は、H、Cl、Br、F
、-OH、-CH₃、-OCH₃又は-(CH₂)_mCH₃であり； R¹⁰は、R³への結合、又は、-COOH又は-C(O)NH-R¹¹-R¹²であり； R¹¹は、約１から約１１の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分
枝状アルキレン、又は、-R¹³-R¹⁴-であり； R¹²は、R³への結合であるか、又は、-COOH、-NH₂、-OH、-C(O)-R¹⁵、-COO
-R¹⁵、-NHR¹⁵、-OR¹⁵、Cl又はBrであり； R¹³は、置換又は非置換フェニレンであり； R¹⁴は、約１から約５の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝
状アルキレンであり； R¹⁵は、R³への結合であり；そして、 mは、約１から約４である］を有する。

【００１４】好ましくは、R⁴は、

【化２０】

【化２１】

【化２２】及びそれらの塩からなる群から選択される。

【００１５】好ましくは、R⁹は、-OCH₃又は-OHである。好ましい実施態様では、R¹⁰は、-NH
-R¹¹-R¹²であり、R¹¹は、-(CH₂)₇-、-(CH₂)₉-、-(C₆H₅)-(CH₂)₃-、-(C₆H₅)-CH₂-
又は-(CH₂)₈-NH-C(O)-CH₂-である。

【００１６】他の実施態様は、式：

【化２３】［式中、R¹⁶は上記R¹として定義され；R¹⁷は、-OH、-OCH₃又は -R¹⁸であり；R¹⁸ は、上記R¹として定義され；R²⁴は、-(CH₂CH₂O)-、-(CH(CH₃)CH₂O)- 又はそれら
の組み合わせの単位を有するポリマーである］の単位又はそれらの塩を有するポリマー性デリバリー剤である。は、典型的にR² ⁴ は、約３から約２００のポリマー単位を含む。R²⁴は、ランダム共重合体又はブ
ロック共重合体であってよい。R¹⁸は、R¹⁶と同じでも又は異なっていてもよい。

【００１７】前記ポリマー性デリバリー剤の好ましい実施態様は、式：

【化２４】［式中、R¹⁶、R¹⁷及びR¹⁸は上述のように定義され；R²³は、H又は-CH₃であり；
そして、nは約３から約２００である］の単位又はそれらの塩を有する。好ましくは、R¹⁶及びR¹⁸は-OOC-R⁴である。好
ましい実施態様では、R¹⁷は-OCH₃である。別の好ましい実施態様では、R¹⁶は-NH
C(O)-R⁴又は-NHC(O)O-R⁴であり、nは約４から約１５の範囲である。

【００１８】さらに別の好ましい実施態様は、式：

【化２５】［式中、R²⁰、R²¹及びR²²は、独立して、H、又は、上記R¹として定義され；a、b
及びcは、独立して、約１から約５０までの整数であり；そして、dは、約２から
約１０の範囲である］の単位又はそれらの塩を有するポリマー性デリバリー剤である。好ましくは、R² ⁰ 、R²¹及びR²²は、独立して、-COO-R⁴である。好ましくは、dは約６である。

【００１９】ポリマー性デリバリー剤及び該ポリマー性デリバリー剤のための単位の例には
、それらに制限されないが、

【化２６】

【化２７】

【化２８】

【化２９】

【化３０】

【化３１】が含まれる。前述のポリマー性デリバリーにおいて指定したポリマー単位の数は
、単位の平均数である。該ポリマー中の単位数は、典型的には、約１０％まで変
化することこができる。

【００２０】別の実施態様は、（Ａ）少なくとも１つの活性剤；及び（ｂ）少なくとも１つ
の前述のポリマー性デリバリー剤を含む組成物を提供する。該活性剤は、好まし
くは、生物学的又は化学的活性剤である。該組成物の製造及び投与方法も提供さ
れる。これらの組成物は、選択した生物学的系への活性剤のデリバリーにおいて
有用であり、また、該デリバリー剤なしでの該活性剤の投与と比較して、該活性
剤のバイオアベイラビリティーを向上させるために有用である。

【００２１】本発明はまた、前述の連結基の１つを介して、修飾アミノ酸をポリマーに共役
させることによって、ポリマー性デリバリー剤を調製する方法も含む。

【００２２】本発明はさらに、式

【化３２】及び、それらに制限されないがナトリウム塩を含むそれらの塩を有するデリバリ
ー剤化合物を含む。これらのデリバリー剤化合物は、活性剤のデリバリーを容易
にするために有用である。別の実施態様は、前述のデリバリー剤化合物の１つと
活性剤とを含む組成物である。

【００２３】

【発明の実施の形態】

これらの組成物は、様々な生物的、化学的及び物理的障壁を通って又は越えて
、多様な活性剤をデリバリーするために使用可能であり、また、特に、環境的な
分解を受ける活性剤をデリバリーするのに適している。本発明の組成物は、特に
、生物又は化学活性剤を動物にデリバリーする又は投与するために有用であり、
該動物には、それらに制限されないが、ニワトリ等の鳥類；齧歯類、ウシ、ブタ
、イヌ、ネコ、霊長類、特にヒト等の哺乳類；及び、昆虫類を含む。

【００２４】本発明の別の有利さは、調製しやすく、高価でない原材料の使用を含む。本発
明の組成物及び方法は、コストに有効であり、実施しやすく、そして商業的生産
のために工業的規模へとすることが容易である。

【００２５】現在開示されている組成物は、特に、経口、鼻内、結腸内、肛門、膣、粘膜、
肺、経皮、皮内、非経口、静脈内、筋肉内及び眼の系において活性剤をデリバリ
ーし、同様に、血液−脳関門を越える。活性剤とポリマー−デリバリー剤複合体
（conjugate）との共投与（coadministration）は、該活性剤単独での投与と比
較して、該活性剤のバイオアベイラビリティーの増大をもたらす。

【００２６】本出願にて使用される用語「塩」は、それらに制限されないが、有機又は無機
の塩、例えば、ナトリウム、カリウム及びリチウム等のアルカリ金属の塩；マグ
ネシウム、カルシウム又はバリウム等のアルカリ土類金属の塩；アンモニウム塩
；リシン又はアルギニン等の塩基性アミノ酸；及び、ジメチルアミン又はピリジ
ン等の有機アミンを含む。好ましくは、該塩はナトリウム塩である。

【００２７】活性剤本発明での使用に適した活性剤は、生物活性剤、及び、それらに制限されない
が殺虫剤、製薬的薬剤及び治療剤を含む化学活性剤を含む。

【００２８】例えば、本発明での使用に適した生物活性剤には、それらに制限されないが、
タンパク質；ポリペプチド；ペプチド；ホルモン；多糖、特にムコ多糖、及びそ
れらの混合物；炭水化物；脂質；他の有機化合物；及び、特に、それ自体では胃
腸管粘膜を通過しない（又は投与量の一部のみが通過する）化合物、及び／又は
、胃腸管内で酸及び酵素によって化学的及び／又は酵素的開裂を受けやすい化合
物；又は、それらのあらゆる組み合わせが含まれる。

【００２９】さらなる例としては、それらに制限されないが、以下の、合成、天然又は組み
替えの原料が含まれる：ヒト成長ホルモン（hGH）、組み替えヒト成長ホルモン
（rhGH）、ウシ成長ホルモン及びブタ成長ホルモンを含む成長ホルモン；成長ホ
ルモン放出ホルモン；α、β、γを含む、インターフェロン；インターロイキン
−１；インターロイキン−２；ブタ、ウシ、ヒト及びヒト組み替えインスリンを
含む、任意にナトリウム、亜鉛、カルシウム及びアンモニウムを含む対イオンを
有する、インスリン；IGF-1を含む、インスリン様成長因子（IGF）；不分別（un
fractionated）ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン、コンドロイチン、低分子
量ヘパリン、極低分子量ヘパリン及び超低分子量ヘパリンを含む、ヘパリン；サ
ケ、ウナギ及びヒトカルシトニンを含む、カルシトニン；エリトロポイエチン；
心房性ナトリウム排泄増加因子；抗原；モノクローナル抗体；ソマトスタチン；
プロテアーゼ阻害剤；アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモ
ン；オキシトシン；黄体形成ホルモン放出ホルモン；卵胞刺激ホルモン；グルコ
セレブロシダーゼ；トロンボポイエチン；フィルグラスティム（filgrastim）；
プロスタグランジン；シクロスポリン；バソプレッシン；クロモリンナトリウム
（クロモグリク酸ナトリウム又はクロモグリク酸二ナトリウム）；バンコマイシ
ン；デフェロキサミン（desferroxamine, DFO）；そのフラグメントを含む、上
皮小体ホルモン（PTH）；抗真菌剤を含む、抗菌剤；ビタミン；これらの化合物
の類似体、フラグメント、擬似体（mimetics）又はポリエチレングリコール（PE
G）で修飾された誘導体；又は、それらのあらゆる組み合わせ。

【００３０】修飾アミノ酸前記修飾アミノ酸は、N−アシル化又はスルホン化アミノ酸、アシル化又はス
ルホン化アミノ酸のケトン又はアルデヒド、それらの塩、及び、それらを含むポ
リアミノ酸又はポリペプチドである。

【００３１】 N−アシル化又はスルホン化アミノ酸、ポリアミノ酸及びペプチドは、それら
に限定されないが、N−アシル化又はスルホン化アミノ酸；及び、存在する少な
くとも１つの遊離アミン基と反応するアシル化又はスルホン化剤を用いて、少な
くとも１つの遊離アミン基をアシル化又はスルホン化することによって、少なく
とも１つのアミノ酸が修飾されたポリアミノ酸及びペプチドを含む。

【００３２】好ましくは、前記修飾アミノ酸は、以下の構造の１つを含む：

【化３３】

【化３４】

【化３５】及び、それらに制限されないがナトリウム塩を含むそれらの塩。

【００３３】前記修飾アミノ酸は、塩の形態であってよい。塩には、それらに限定されない
が、有機又は無機の塩、例えば、ナトリウム、カリウム及びリチウム等のアルカ
リ金属の塩；マグネシウム、カルシウム又はバリウム等のアルカリ土類金属の塩
；アンモニウム塩；リシン又はアルギニン等の塩基性アミノ酸；及び、ジメチル
アミン又はピリジン等の有機アミンを含む。好ましくは、該塩はナトリウム塩で
ある。

【００３４】アミノ酸は、少なくとも１つの遊離アミン基を有するあらゆるカルボン酸であ
り、天然由来及び合成のアミノ酸を含む。ポリアミノ酸は、ペプチド（ペプチド
結合によって結合した２つ以上のアミノ酸）であるか、あるいは、例えばエステ
ル、アルデヒド又は無水物結合のような、連結可能な他の基によって形成された
結合によって連結された２つ以上のアミノ酸である。ペプチドは、２つのアミノ
酸を有するジペプチドから、数百のアミノ酸を有するポリペプチドまでの長さで
変えることができる。１つ以上の該アミノ酸又はペプチド単位は、アシル化又は
スルホン化することができる。

【００３５】 N−アシル化又はスルホン化アミノ酸は、典型的には、前記アミノ酸又はそれ
らのエステルを修飾することによって調製される。これらの化合物の多くは、式
：Ｘ−Ｙ−Ｒ［式中：Ｒは、最終生成物中に示される修飾をもたらす適切な基であり、Ｙは、C=O又はSO₂であり、そしてＸは脱離基である］を有する試薬を用いたアシル化又はスルホン化によって調製される。典型的な脱
離基は、それらに限定されないが、例えば塩素、臭素及びヨウ素等のハロゲンを
含む。付加的に、対応する無水物は変性剤である。

【００３６】 N−アシル化又はスルホン化アミノ酸は、本開示に基づいて、当業者の技術内
の方法によって、アミノ酸から容易に調製可能である。例えば、N−アシル化又
はスルホン化アミノ酸は、アミノ酪酸、アミノカプロン酸及びアミノカプリル酸
から導くことができる。さらに、上記N−アシル化又はスルホン化アミノ酸は、
当該アミノ酸中に存在する遊離アミノ基と反応してアミドを形成する適切な変性
剤とその単純アミノ酸とを反応させることによって調製することができる。保護
基は、当業者に既知であろう望ましくない副反応を避けるために用いることがで
きる。

【００３７】前記アミノ酸は、例えば水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムのような金属水
酸化物の水性アルカリ溶液に溶解させることができ、約５℃から約７０℃、好ま
しくは約１０℃から約４０℃の範囲の温度で、約１時間から約４時間の範囲、好
ましくは約２．５時間の間、加熱することができる。当該アミノ酸中のNH₂基の
当量あたりに用いられるアルカリの量は、通常、約１．２５から約３mmolの間、
好ましくは、NH₂の当量あたり、約１．５から約２．２５mmolの間の範囲である
。その溶液のpHは、通常、約８から約１３の間の範囲、好ましくは約１０から約
１２の間の範囲である。

【００３８】その後、その適当なアミノ変性剤を、撹拌中のアミノ酸溶液に添加する。その
混合物の温度は、約１から約４時間の間の範囲の間、通常、約５℃から約７０℃
の間、好ましくは約１０℃から約４０℃の間の範囲の温度に維持する。アミノ酸
の量に対して用いるアミノ変性剤の量は、当該アミノ酸中の全ての遊離NH₂のモ
ルに基づく。通常、該アミノ変性剤は、当該アミノ酸中の全NH₂基のモル当量あ
たり、約０．５から約２．５モル当量の間、好ましくは約０．７５から約１．２
５当量の間の範囲の量で用いられる。

【００３９】当該混合物のpHを、適当な酸、例えば濃塩酸を用いて、該pHが約２から約３の
間に達するまで調節することによって、その反応を消す。該混合物は、室温での
放置により分離し、透明な上層と、ホワイト又はオフホワイトの沈殿とを形成す
る。該上層を捨てて、その下層から、ろ過又はデカンテーションによって、Ｎ−
アシル化又はスルホン化アミノ酸を回収する。それから、その未精製Ｎ−アシル
化又はスルホン化アミノ酸を、約９から約１３の間、好ましくは約１１から約１
３の間の範囲のpHの水に溶解させる。不溶性物質をろ過によって除去し、ろ液を
減圧下で乾燥させる。Ｎ−アシル化又はスルホン化アミノ酸の収率は、通常、約
３０から約６０％の間の範囲、たいていは約４５％である。

【００４０】望むのであれば、例えばアミノ酸化合物のベンジル、メチル又はエチルエステ
ル等のアミノ酸エステルが、本発明のＮ−アシル化又はスルホン化アミノ酸を調
整するためにしよう可能である。該アミノ酸エステルを、ジメチルホルムアミド
、ピリジン又はテトラヒドロフラン等の適切な有機溶媒に溶解させ、約５℃から
約７０℃の間の範囲、好ましくは２５℃の温度で、約７から約２４時間の範囲の
時間、適切なアミノ変性剤と反応させる。該アミノ酸エステルに対して用いられ
るアミノ変性剤の量は、アミノ酸について上述したのと同様である。この反応は
、例えばトリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミン等の塩基を用いて、
又は用いずに行うことができる。

【００４１】その後、反応溶媒を負圧下で除去し、そして、当該Ｎ−アシル化又はスルホン
化アミノ酸エステルを、適切なアルカリ溶液、例えば１N水酸化ナトリウムを用
い、約５０℃から約８０℃の間の範囲、好ましくは約７０℃の温度で、そのエス
テル基を加水分解して遊離カルボキシル基を有するN−アシル化又はスルホン化
アミノ酸を形成するのに十分な時間、加水分解することによって、そのエステル
官能性を除去する。それから、その加水分解混合物を室温にまで冷却して、例え
ば２５％塩酸水溶液で、約２から約２．５の間の範囲のpHにまで酸性化する。そ
のN−アシル化又はスルホン化アミノ酸を溶液から沈殿させて、ろ過又はデカン
テーション等の通常の手法によって回収する。ベンジルエステルは、遷移金属触
媒を用いて有機溶媒中で水素化することによって取り除くことができる。

【００４２】前記N−アシル化又はスルホン化アミノ酸は、再結晶化、又は、固体カラム支
持体での分別（fractionation）によって精製することができる。適切な再結晶
化溶媒系は、アセトニトリル、メタノール及びテトラヒドロフランを含む。分別
は、移動相としてメタノール／ｎ−プロパノール混合物を用いる、アルミナ等の
適当な固体カラム支持体；移動相としてトリフルオロ酢酸／アセトニトリル混合
物を用いる逆相カラム支持体；及び、移動相として水を用いるイオン交換クロマ
トグラフィーで行うことができる。アニオン交換クロマトグラフィーを行うとき
は、好ましくは、続いての０〜５００mM塩化ナトリウム傾斜（グラジエント）を
用いる。

【００４３】ポリマー本発明のポリマーは、天然又は合成であってよく、２つ以上のモノマーを含む
。該モノマーは同じでも異なっていてもよく、該ポリマーは線状でも非線状でも
よい。ポリマーは、それらに限定されないが、分枝状又は環状ポリマーを含む。
該ポリマーは、２つ以上の異なるポリマーを含んでいるコポリマー、又は、一種
類のモノマーの繰り返しを含むホモポリマーであってよい。さらに、ポリマーは
、ランダム又は交互の、誘導された、二官能性の、多官能性の、架橋した、正の
格子の（regular lattice）、断続的格子の（intermittent lattice）、又は、
無定形のものであってよい。

【００４４】前記ポリマーは、それらに限定されないが、交互共重合体、ブロック共重合体
及びランダム共重合体を含むあらゆるポリマーであってよく、それらは哺乳類で
の使用に安全である。好ましいポリマーは、それらに制限されないが、ポリエチ
レン；ポリアクリレート；ポリメタクリレート；ポリ（オキシエチレン）；ポリ
（プロピレン）；ポリプロピレングリコール；ポリエチレングリコール（PEG）
；及び、PEG−無水マレイン酸コポリマー等のそれらの誘導体；及び、それらの
誘導体及び組み合わせを含む。該ポリマーの分子量は、典型的には、約１００か
ら約２００，０００ダルトンの範囲である。該ポリマーの分子量は、好ましくは
、約２００から約１０，０００ダルトンの範囲である。１つの実施態様では、該
ポリマーの分子量は、約２００から約６００ダルトンの範囲であり、さらに好ま
しくは、約３００から約５５０ダルトンの範囲である。

【００４５】ポリマーは、１つ以上の塩の形態であってよい。塩は、それらに限定されない
が、有機又は無機の塩、例えば、ナトリウム、カリウム及びリチウム等のアルカ
リ金属の塩；マグネシウム、カルシウム又はバリウム等のアルカリ土類金属の塩
；アンモニウム塩；リシン又はアルギニン等の塩基性アミノ酸；及び、ジメチル
アミン又はピリジン等の有機アミンを含む。好ましくは、該塩はナトリウム塩で
ある。

【００４６】ポリマー性デリバリー剤（複合体（conjugates））上述の連結基の１つを介して、１つ以上の前記修飾アミノ酸を、前記ポリマー
の１つ以上のモノマー単位に共役させる（共有結合で結合させる）ことができる
。

【００４７】そのポリマー性デリバリー剤の多くは、約２００mg/mLより大きい溶解度を有
し、そして、それに対応する修飾アミノ酸単独よりも大きい溶解度を有する。し
かしながら、大部分のポロキサマー（poloxamers）のように、PEG複合体の溶解
度は、高温で減少し、その曇り点又は低臨界共溶温度（LCST）によって特徴付け
することができる。該LCSTは、その複合体中の親水性／疎水性の単位の比に依存
し、容易に変えることができる。

【００４８】通常、本発明のポリマー性デリバリー剤は、下記のように調製することができ
る。PAA及びPAA/MAポリマー等のビニルポリマー性デリバリー剤では、該ポリマ
ー及び修飾アミノ酸は、それぞれ、適当な溶媒、例えばジメチルホルムアミド（
DMF）に別々に溶解させて、それぞれ、溶液Ａ及びＢを得ることができる。溶液
Ｂは、塩基、例えばトリエチルアミンの存在下で、６０〜７０℃にまで加温する
。それから、溶液Ｂを溶液Ａに添加し、その混合物を室温で２４時間撹拌する。
ポリマー性デリバリー剤を、希酸又は塩基の添加によって沈殿させ、遠心分離に
よって回収する。それから、該ポリマー性デリバリー剤を加水分解し、水に対し
て透析し、そして凍結乾燥させる。

【００４９】得られたポリマー性デリバリー剤は、ポリマーの近似の分子量を測定するため
に、サイズ排除クロマトグラフィー（SEC）によって分析することができ、その
複合体の窒素含量は、該ポリマー性デリバリー剤にて該ポリマーに結合した修飾
アミノ酸の量を近似するために用いることができる。好ましくは、該ポリマー性
デリバリー剤中に、約５から１５％w/w結合した修飾アミノ酸があり、さらに好
ましくは、該ポリマー性デリバリー剤中に、約１０から１５％w/w結合した修飾
アミノ酸単位がある。

【００５０】エステル結合を有するPEGデリバリー剤では、カルボキシル含有デリバリー剤
を、トルエン中、１５０〜１６０℃で、触媒としてのｐ−トルエンスルホン酸の
存在中で、３〜４時間、PEG又はPEGメチルエーテルと反応させる。その反応によ
って生じた水は、Dean-Starkトラップで除去する。逆相HPLCが、該反応を観測す
るために用いられる。その反応混合物を飽和NaHCO₃水溶液で洗浄して未反応の出
発物質と触媒とを取り除く。ポリマー性デリバリー剤は、トルエンの蒸発後に得
られる。その構造は、さらに、窒素分析及び¹H NMRによって確認する。

【００５１】アミド、アミノ又はウレタン結合を有するPEGデリバリー剤は、ピリジン中、
７０〜８０℃で４〜５時間、さらに室温で２４時間、アミノ含有修飾アミノ酸と
、適切に活性化されたポリエチレングリコールとの反応によって調製する。それ
から、減圧下で、蒸発によってピリジンを除去する。それから、残留物を有機溶
媒、例えば塩化メチレンに溶解させ、その溶液を、それぞれ希HCl水溶液、及びN
aHCO₃水溶液で洗浄し、不純物を取り除く。その反応とワークアッププロセスと
を観測するために、逆相HPLCを用いる。ポリマー性デリバリー剤は、その有機溶
媒の蒸発後に得られる。その構造は、さらに、窒素分析及び¹H NMRによって確認
する。

【００５２】尿素結合を有するPEGデリバリー剤を調製するために、二段階プロセスを用い
る。最初に、アミノ末端の疎水性化合物と、４−ニトロフェニルクロロホルメー
トとの反応に基づくウレタン誘導体を調製する。該反応は非常に速く、ピリジン
溶液中にて室温で行われる。その中間体ウレタン誘導体は、求核試薬の攻撃によ
って除去可能な良好な脱離基を含む。この中間体がアミノ末端PEGと反応すると
き、４−ニトロフェノールと、尿素結合を有するそのPEG付加物との両方が形成
された。

【００５３】デリバリーシステム本発明の組成物は、１つ以上の活性剤を含むことができる。１つの実施態様で
は、本発明のポリマー性デリバリー剤又はデリバリー剤化合物（矯正的には「デ
リバリー剤」）は、１つ以上のデリバリー剤と当該活性剤とを投与前に単純に混
合することによって、デリバリー剤として直接用いることができる。その投与混
合物は、投与直前に、デリバリー剤の水性溶液と活性成分の水性溶液とを混合す
ることによって調製することができる。また、該デリバリー剤と活性剤とは、製
造過程の間に混合することができる。その溶液は、任意に、ホスフェートバッフ
ァー塩、クエン酸、酢酸、ゼラチン及びアカシアガム等の添加物を含む。

【００５４】安定化添加物を、デリバリー剤溶液に取り込むことができる。いくつかの活性
剤と共に、そのような添加物が存在することは、溶液中におけるその薬剤の安定
性と分散性とを促進させる。該安定化添加物は、約０．１から５％（w/v）の間
の範囲、好ましくは約０．５％（w/v）の濃度で用いることができる。適切な、
しかし非限定的な、安定化添加物の例は、アカシアガム、ゼラチン、メチルセル
ロース、ポリエチレングリコール、カルボン酸及びそれらの塩、及び、ポリリシ
ンを含む。好ましい安定化添加物は、アカシアガム、ゼラチン及びメチルセルロ
ースである。

【００５５】活性剤の量は、その特定の活性剤の目的を達成するのに有効な量である。前記
組成物中のその量は、典型的には、薬理的又は生物的有効量である。しかしなが
ら、その量は、当該組成物が、カプセル剤、錠剤又は散剤等の固体、又は、液剤
等の投与単位形で用いられるとき、薬理的又は生物的有効量未満であってもよい
。なぜならば、該投与単位形は、多数のデリバリー剤又は活性剤組成物を含むこ
とができ、あるいは、分割した、薬理的又は生物的有効量を含むことができるか
らである。そして、その総有効量を、生物的又は薬理的活性剤の薬理的又は生物
的又は化学的に活性な量をトータルで含む累積的単位で投与することができる。

【００５６】用いられるべき活性剤の総量は、当業者によって決定可能である。しかしなが
ら、現在開示されるデリバリー剤は効果的なデリバリーをもたらすので、以前の
投与単位形又はデリバリーシステムで用いられる量よりも少量の生物又は化学活
性剤をその対象に投与することができるが、その一方で、同じ血液レベルと治療
効果を達成することができる。

【００５７】当該組成物中のデリバリー剤の量は、デリバリー有効量であり、当業者に既知
の手法によって、全ての特定の活性剤又は活性剤について決定することができる
。それは、選択されたデリバリー経路によってその活性剤のデリバリーに有効な
この量であろう。

【００５８】投与単位形はまた、賦形剤；希釈剤；崩壊剤；滑沢剤；可塑剤；色素；及び、
それらに限定されないが、水、１，２−プロパンジオール、エタノール、オリー
ブ油又はそれらのあらゆる組み合わせを含む投与ビヒクルを含むこともできる。

【００５９】当該組成物又は投与単位形の投与は、好ましくは、経口、経腸又は経十二指腸
である。特に、本発明の組成物は、経口投与する活性剤、特に、通常は経口的に
は到達できないものに有用である。

【００６０】本発明のデリバリー組成物はまた、１つ以上の酵素阻害剤を含むことができる
。そのような酵素阻害剤としては、それらに限定されないが、アクチノニン又は
エピアクチノニン等の化合物及びそれらの誘導体が含まれる。別の阻害剤として
は、それらに限定されないが、アプロチニン（Trasylol）及びボーマン−バーク
阻害剤を含む。

【００６１】本発明の組成物は、生物又は化学活性剤の動物への投与に有用である。そのシ
ステムは、生物又は化学活性剤のデリバリーに特に有利であり、該活性剤は、別
の状況では、該活性剤がその標的領域（すなわち、該デリバリー組成物中の活性
剤が放出されるべき領域）に達する前に遭遇する条件、及び、それらが投与され
る動物の体内の条件によって破壊されるか又は効果が低下させられる。

【００６２】

【実施例】好ましい実施態様の記載以下の実施例は、本発明を、限定することなく、例示する。全ての部は、特に
記載がない限りは重量当たりで示す。各実施例に特定されたポリマーのポリマー
単位数と分子量は、単位の平均数と平均分子量である。該ポリマー中の単位数と
分子量は、典型的には、約１０％まで変化する。

【００６３】実施例１ａ：８−Ｎ（２−ヒドロキシ−５−アミノメチルベンゾイル）アミノカプリル酸（（I-COOH)-5-CH₂NH₂）塩酸塩の調製８−Ｎ（２−メトキシベンゾイル）アミノカプリル酸（７．５g、２５．６mmo
l、１当量）を、ホルムアルデヒド（３０．７ml、４１０mmol、１６当量）と塩
酸（６２．６ml、３７％、６４４mmol、２５当量）と混合した。混合物を撹拌し
、気体HCl下、室温で３時間通気した。ホルムアルデヒドとHClの除去によって、
粗８−Ｎ（２−メトキシ−５−クロロメチルベンゾイル）アミノカプリル酸（化
合物１）を得た。アセトニトリル（４．５g、５１．４％）中での再結晶化によ
って純粋な化合物１を得た。

【００６４】精製した８−Ｎ（２−メトキシ−５−クロロメチルベンゾイル）アミノカプリ
ル酸（４．５g、１３．２mmol、１当量）とヘキサメチレンテトラミン（１．８
５g、１３．２mmol、１当量）とを、クロロホルム中で１時間還流した。該クロ
ロホルムは蒸発させた。残留物を、メチルアルコール（３０ml）とHCl（１０ml
、３７％）との混合溶液中で２時間還流させた。該混合溶液の除去によって、８
−Ｎ（２−メトキシ−５−アミノメチルベンゾイル）アミノカプリル酸（化合物
２）を得た（３．６g、７６．６％）。化合物２（３．５g、９．７５mmol、１当
量）をジクロロメタン（５０ml）に溶解させた。三臭化ホウ素（１．８４ml、１
９．５mmol、２当量）を、０℃で、その反応混合物に加え、２時間撹拌した。生
成物をろ過し、残留物をジクロロメタン（２０ml×２）で洗浄した。８−Ｎ（２
−ヒドロキシ−５−アミノメチルベンゾイル）アミノカプリル酸塩酸塩が、白色
固体（１．８g、４７．３７％）として得られた。性質は以下に示す： H NMR (300 MHz, DMSO-d⁶)δ: 1.29 (6H, br s). 1.5 (4H, m). 2.18 (2H, t,
J 7.3Hz). 3.30 (2H, q, J 6.17Hz). 3.94 (2H, q, J 6.56Hz). 6.97 (1H, d,
J 8.7Hz). 7.49 (1H, d, J 6.3Hz). 8.0 (1H, s). 8.12 (3H, br s). 12.0 (1H,
s). 12.5 (1H, s). C₁₆H₂₅N₂O₄Clの分析：計算値： C: 55.73; H: 7.26;
N: 8.12; Cl: 10.30. 実測値： C: 55.79; H: 7.38; N: 8.01; Cl: 10.18.

【００６５】実施例１ｂ：Ｎ−（５−アミノメチルサリシロイル）−４−（４−アミノフェニル）酪酸（(II-COOH)-5-CH₂NH₂）サリチル酸（５０g）を１２０ｇのホルマリン溶液（３７％）中に懸濁させた
。その混合物に、０℃で、機械的に撹拌しながら、塩酸ガスを通気した。５分後
に、触媒として、ZnCl₂（１０ｇ）を加えた。塩酸ガスは、該混合物に、０〜１
５℃で２時間（ｈ又はｈｒ）、それから室温でさらに３時間、撹拌しながら、ゆ
っくりと通気させた。その反応混合物を一晩冷蔵した。形成された沈殿をろ過に
よって回収し、空気中で乾燥させた。その粗生成物（７５ｇ、融点１１５〜１３
０℃）をベンゼンから再結晶させ、純生成物５−クロロメチルサリチル酸（２８
．５ｇ、４２％）、融点１４４〜１４７℃、を生じた。

【００６６】無水酢酸（１．４ｇ）と氷酢酸（１．７ｇ）の溶液に対して、撹拌しながら、
５−クロロメチルサリチル酸（１．９ｇ）と、濃硫酸一滴（ピペットを使用）と
を添加した。その反応混合物を６５〜７０℃にまでゆっくり加熱し、１時間維持
した。室温に冷却した後、該反応混合物を徐々に、５０ｍｌの冷水に加えた。２
時間後、形成された沈殿をろ過によって回収し、減圧下で乾燥させた。ベンゼン
からの再結晶によって、生成物O−アセチル−５−クロロメチルサリチル酸（１
．７ｇ、７５％）、融点１１９〜１２１℃、を得た。

【００６７】 O―アセチルー５−クロロメチルサリチル酸（２．９ｇ、１２．７mmol）と塩
化チオニル（１５ｇ、１２６mmol）を３０mlのベンゼンに加えた。混合物を、撹
拌しながら２時間還流した。ベンゼンと過剰の塩化チオニルの蒸発によって、シ
ロップ状の残留物が生じ、これに対して３０mlのベンゼンを加えて、その溶媒を
再度蒸発させた。残留物を真空中で一晩乾燥させて、生成物O−アセチル−５−
クロロメチルサリシロイルクロライドから残留SOCl₂を除去した。

【００６８】４−（４−アミノフェニル）酪酸（５g）を４０mlのメタノールに溶解させた
。該溶液に塩酸ガスに通気させる間に、該溶液を、撹拌しながら８０〜９０℃で
４時間還流させた。その反応混合物を室温に冷却した後、エチルエーテル（１０
０ml）を添加した。二層に分離した該混合物を一晩冷蔵した。結晶状の生成物を
ろ過によって回収し、完全に乾燥させた。ろ液を、乾燥するまで蒸発させ、その
残留物をMeOH/ベンゼンから再結晶させた。得られた生成物４−（４−アミノフ
ェニル）ブチレート塩化水素の総量は５．６g（８７．５％）であった。融点１
４３〜１４５℃。

【００６９】メチル−４−（４−アミノフェニル）ブチレート・塩化水素（２．３ｇ、２２
．６mmol）とトリエチルアミン（２．３ｇ、２２．６mmol）を２０mlの塩化メチ
レンに加えた（溶液A）。O−アセチル−５−クロロメチルサリシロイルクロライ
ド（２．８ｇ、１１．３mmol）を２０mlの塩化メチレンに加えた（溶液B）。溶
液Aを溶液Bに、０℃で撹拌しながら滴下した。添加後、その混合物を、室温で、
さらに２時間撹拌した。それから、その反応混合物を、０．１N HCl水溶液で２
回（５０ml×２）、そして飽和NaCl水溶液で２回（５０ml×２）洗浄した。有機
層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、シロ
ップ状の生成物[N- O−アセチル−５−クロロメチルサリシロイル]−４−４（４
−アミノフェニル）酪酸メチルエステルを得た。これは、さらに精製することな
く、次の工程に用いた。

【００７０】上に得られたシロップ状生成物を２０mlのクロロホルムに溶解させた（溶液C
）。ヘキサメチレンテトラミン（１．５８ｇ、１１．３mmol）を温（約３０℃）
クロロホルムに溶解させた（溶液D）。溶液Dを溶液Cに添加し、その反応混合物
を、撹拌しながら、６０〜８０℃で２時間還流させた。それから、該反応混合物
を、一晩、室温で放置した。溶媒の蒸発は、前述の生成物とヘキサメチレンテト
ラミンとの複合体のシロップを生じた。これは、真空中で数時間乾燥させた後、
固体化した。

【００７１】上に得られた固体複合体を５mlのMeOHに溶解させた。この溶液に対し、５mlの
濃HCl溶液を添加した。反応混合物を４０〜５０℃で４時間撹拌した。それから
、反応混合物を一晩冷蔵した。沈殿物（NH₄Cl）をろ過して除いた。ろ液に対し
て、５０mlのMeOHを添加した。減圧下で溶媒を除去し、シロップ状の生成物[N-
（ O−アセチル−５−クロロメチルサリシロイル）]−４−４（４−アミノフェ
ニル）酪酸メチルエステル・塩化水素を得た。これは、さらに精製することなく
、直接、次の脱保護工程に用いた。

【００７２】上記シロップを５mlのMeOHに溶解させた。この溶液に対し、１５mlの２N NaOH
を添加した。その乳液様の溶液を、室温で４時間撹拌し、その間、そのpHを、Na
OH溶液を添加することによって、１０から１２に維持した。その清澄な溶液をpH
５にまで酸性化して生成物を沈殿させ、それをろ過によって回収し、水及びエタ
ノールで洗浄して、空気中で乾燥させた。¹H NMRで純度８０％と確認された粗生
成物（３．０g）を得た。該粗生成物を、３０mlの９５％アルコール中で１０分
間還流し、それからろ過した。その不溶性の物質を、pH１０から１１の２０mlの
水に溶解させた。それから、その溶液をpH５にまで酸性化した。沈殿した生成物
をろ過によって回収し、完全に乾燥させ；２．４gの[Ｎ−（５−アミノメチルサ
リシロイル）]−４−（４−アミノフェニル）酪酸（(II-COOH)-5-CH₂NH₂）（最
後の５工程で５８％）を得た。融点は２４０℃より高かった。¹H NMR (300 MHz,
DMSO-d₆)δppm: 1.75 (2H, t). 2.2 (2H, t). 2.55 (2H, t). 3.95 (2H, s).
7.05 (1H, s). 7.15 (1H, s). 7.5 (1H, d). 7.65 (1H, d). 8.18 (1H, s
). 8.35 (1H, br.s).

【００７３】実施例２：I-COOHのXI-COOHへの合成化合物I-COOH は以下のように調製することができる：３Lの三頚丸底フラスコを、オーバーヘッドメカニカルスターラーと温度計と
一緒に固定し、該フラスコを氷浴上で冷却した。２M水性水酸化ナトリウム（１
．４L）中の８−アミノカプリル酸（１００．０g、０．６５mol）の溶液を該丸
底フラスコに入れた。該溶液の温度を約５℃に維持し、O−アセチルサリシロイ
ルクロライド（１９８．６ｇ、０．７６mmol、１．２当量）を少しずつ７時間か
けて添加した。その混合物を５℃で１２時間撹拌し、黄色の均一な溶液を得た。
該溶液を、１M塩酸で酸性化してpH６．８とし、酢酸エチル（２×６００mL）で
抽出した。その水性層のpHを６．３に再調整し、さらに酢酸エチル（２×６００
mL）で抽出した。それらの有機層を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、
ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物を、最少量の２M水性水酸化ナトリウムに
再溶解させた。その溶液のpHは９．５から１０の間であった。その混合物を、撹
拌しながら、１M塩酸を用いて、約６．２のpHに酸性化し、固体を形成させた。
該固体をろ過し、水（３×３００mL）で洗浄し、５５％メタノール／水（v／v）
から再結晶させて、化合物I-COOHをオフホワイトの固体として得た（９９．７g
、５７％）。融点１１６〜１１７℃。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)δ: 12.70 (
1H, br s). 11.95 (1H, br s). 8.81 (1H, t). 7.82 (1H,m). 7.38 (1H,m). 5.8
4 (2H, m). 2.36 (2H,q). 2.18 (2H, t). 1.50 (4H, br m). 1.28 (6H, m). C₁ ₅ H₂₁NO₄の分析：計算： C: 64.50; H: 7.58;1 N, 5.02. 実測： C: 64.26;
H: 7.81; N: 4.93.

【００７４】化合物III-COOHも、これと同様の方法で、Tyger Scientific, Inc. (Monmouth
Junction, NJ)から入手可能な１０−アミノカプリル酸を用いて調製することが
できる。

【００７５】化合物VIII-COOH及びIX-COOHも、I-COOHの調製と同様の方法で、適切な出発物
質を用いて調製することができる。

【００７６】化合物II-COOH は以下のように調製することができる。アセチルサリシロイルク
ロライド（４７．００ｇ、０．２４mmol、１当量）を、水性水酸化ナトリウム（
２M、３００mL）中の４−（４−アミノフェニル）酪酸（５０．００g、０．２８
mol、１．２当量）混合物に、少しずつ添加した。その反応物を２５℃で２時間
撹拌し、得られた溶液を、水性塩酸（１M）で酸性化してpH２．１とした。得ら
れた沈殿を、ろ過し、水性塩酸（１M、３×１００mL）と水とで洗浄し、化合物I
I-COOHを淡桃色の固体として得た（３１．８９g、５２％）。 ¹H NMR (300 MHz
, DMSO-d₆)δ: 7.74 (1H, dd). 7.38 (2H, d). 7.21 (3H,m). 6.67 (1H,m). 6.5
7 (1H, m). 2.48 (2H,t). 2.07 (2H, t). 1.71 (2H, m). C₁₇H₁₇NO₄の分析：
計算： C, 68.20; H, 5.73;1 N, 4.70. 実測： C, 68.22; H, 5.61; N, 4.66
.

【００７７】化合物VI-COOH及びVII-COOHは、この方法で、適切な出発物質を用いて調製す
ることができる。

【００７８】化合物IV-COOHは以下のように調製することができる。塩化メチレン（５００m
L）中の８−アミノカプリル酸（７５．０g、０．４７１mol）のスラリーをクロ
ロトリメチルシラン（１０２．３４g、０．９４２mol）で処理し、二時間加熱還
流させた。その反応混合物を０℃にまで冷却し、それから、トリエチルアミン（
１４２．９８g、１．４１３mol）で処理し、続いて、４−メトキシ−２−アセチ
ルベンゾイルクロライド（１０７．７１g、０．４７１mol）を滴下した。その反
応混合物を、０℃で０．５時間、そして２５℃で２日間撹拌した。真空中で塩化
メチレンを除去した。NaOH溶液（２N）を残留物に添加した。この混合物を、濃
塩酸でpH＝１にまで酸性化する前に、２時間撹拌させた。生じた固体をろ過によ
って回収し、塩化メチレン／ヘキサン（１/１）中で数回再結晶させた。構造は¹ H NMRによって確認した。３８％収率の純生成物。８−N−（４−メトキシサリシ
ロイル）アミノカプリル酸（５９．５８g、０．１９３mol）。

【００７９】化合物V-COOH は以下のように調製することができる。１、８−ジアミノオクタン（１．４４g、１０mmol）を５０mLのテトラヒドロ
フラン（THF）に溶解させた。その溶液に対して、２０mL THF中の無水コハク酸
（１．０g、１０mmol）を、室温で、撹拌しながら滴下した。すぐに沈殿が形成
された。添加後、その反応混合物を、さらに３０分間撹拌した。沈殿を、ろ過に
よって回収し、THFで完全に洗浄し、空気中で乾燥させた。それを、pH１０の水
１０mlに溶解させた。それから、１N HCl溶液を用いて、そのpHを１に調整した
。沈殿を、ろ過して除いた。ろ液を凍結乾燥させて、固体粉末とし、それをエタ
ノールで抽出した。エタノールを蒸発させて８−アミノオクチルコハク酸モノア
ミド・塩化水素２．２g（７８％）を得て、これを、さらに精製することなく次
の反応に用いた。８−アミノオクチルコハク酸モノアミド・塩化水素（２．２g
、７．８mmol）を２５mlの１N NaOH水溶液に溶解させた。その溶液に対し、O-ア
セチルサリシロイルクロライド（１．５５g、７．８mmol）を、３回に分けて、
２時間かけて、室温で、撹拌しながら添加した。その混合物をさらに２時間撹拌
した。その反応混合物のpHを７にあわせた。形成された沈殿をろ過して除いた。
それから、ろ液のpHを２にあわせた。その溶液を２時間室温に維持した。沈殿を
ろ過によって回収し、空気中で乾燥させた。それを、エタノール/水から再結晶
させ、１．５g（５５％）の８−サリシロイルアミノオクチルコハク酸モノアミ
ド化合物V-COOH、融点１２３〜１２５℃、を得た。C₁₉H₂₈N₂O₅の元素分析：計
算値： C: 62.63; H: 7.269; N: 7.69. 実測値： C: 62.84; H: 7.60; N: 7.
60. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆, ppm) 12.7 (br, 1H). 12.0 (br, 1H). 8.8
(t, 1H). 7.8 (q, 1H). 7.35 (h, 1H). 6.8 (q, 2H). 3.2 (m, 2H). 8.0 (1H, s
). 2.95 (m, 2H). 2.35(t, 2H). 2.2 (t, 2H). 1.5 (m, 2H).及び 1.2 (m, 10H)
.

【００８０】化合物X-COOHとXI-COOHは、Aldrich (Milwaukee, WI)から市販されている。

【００８１】実施例３：複合体１の調製７７mlのトリエチルアミン及び７５０mlのクロロホルム中のN-ヒドロキシスク
シンイミド（５７．６g）の溶液に、０℃で、４０分かけて、塩化アクリロイル
（４５ml）を滴下した。その反応混合物を、室温で、さらに４０分間撹拌し、そ
れを、３００mlの氷水と３００mlの飽和NaCl溶液とで洗浄した。有機層を、５０
mgの４−ブチルピロカテコールの存在下で、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。
ろ過後、ろ液を蒸発させて１００mlとし、これに、３５０mlのｎ−へキサン/酢
酸エチル（６：１）を、激しく撹拌しながら添加して、生成物を沈殿させた。そ
の混合物を一晩冷蔵し、沈殿をろ過して、真空下で乾燥させた。酢酸エチル/ヘ
キサン（１：１）からの再結晶によって、５５gの純生成物N−アクリルオキシス
クシンイミド、融点６０〜７０℃、を得た。その母液から、さらに１２gの該生
成物を単離した。全体の収率は９１％であった。

【００８２】１００mlのベンゼンに、１５g（０．８９mol）の生成物N−アクリルオキシス
クシンイミドと、８１mgのAIBN（２，２'−アゾビスイソブチロニトリル）（０
．４９mmol）とを溶解させた。その溶液に、窒素ガスを１０分間通気させて、そ
のフラスコを封じた。その反応混合物を、６０℃で２４時間、油浴中に置いた。
ポリマー沈殿物をろ過し、ベンゼンで洗浄し、真空中で乾燥させた。ポリ（N−
アクリルオキシスクシンイミド）の生成は、１５g（定性的）であった。

【００８３】５５mlのDMFに、３．７５g（２２mmol）の生成物ポリ（N−アクリルオキシス
クシンイミド）を溶解させた（溶液E）。実施例１で調製した、０．８g（２．６
mmol）のN−（５−アミノメチルサリシロイル）−８−アミノカプリル酸を、６
０〜７０℃で、５５mlのDMF及び０．５２gのトリエチルアミンに溶解させた（溶
液F）。その温溶液Fを徐々に溶液Eに添加し、その混合物を、室温で２４時間撹
拌した。ポリ（N−アクリルオキシスクシンイミド）とN−（５−アミノメチルサ
リシロイル）−８−アミノカプリル酸とのポリマー複合体（未加水分解ポリマー
複合体（unhydrolyzed polymer conjugate））を、０．１N希塩酸で沈殿させ、
遠心分離によって回収した。それから、未加水分解ポリマー複合体を、室温で４
８時間、４０mlの４％NaHCO₃溶液中にて加水分解し、Spectra/Por透析膜（MWカ
ットオフ１０００）（Spectrum Inc., Laguna Hills, CA）を用いて、４８時間
、水に対して透析を行った。その溶液を凍結乾燥させ、２．２３g（８５％）の
複合体１（I-COOH）-５-CH₂NH-PAAを得た。SEC分析では、低分子量化合物は見出
されなかった。Mw=131,300, Mw/Mn=1.72。該複合体中の窒素含有量は１．３９％
であった。これは、該複合体中のデリバリー剤の１４．７％に相当する。

【００８４】実施例４：複合体２の調製実施例１の生成物の代わりに実施例２のN−（５−アミノメチルサリシロイル
）−４−（４−アミノフェニル）酪酸を用い、そして、共役後に、（０．１N HC
lではなく）２％NaHCO₃溶液を用いてポリマーを沈殿させたことを除いて、（II-
COOH）-５-CH₂NH-PAA複合体を、実施例３に述べた方法によって調製した。収率
は８０%であった。SEC分析：Mw=210,900, Mn=118,600, Mw/Mn=1.79。該複合体
中の窒素含有量は、０．９５％、又は、該複合体中のデリバリー剤の１２％であ
った。

【００８５】実施例５：コンジュゲート３の調製 Shearwater Polymers, Inc. (Huntsville, Alabama)から入手したM-PEGアリル
エーテルと無水マレイン酸との交互コポリマーを用いた。該コポリマーは、該コ
ポリマー単位内PEG鎖の、約１５００Dの平均分子量と、１４，０００Dの総分子
量とを有する。２．４５gの該コポリマーを、３０mlのDMFに溶解させた。２mlの
Et₃Nを添加した７０mlのDMFに、４６４mgの実施例１の生成物（I-COOH-５-CH₂NH ₂ ）を溶解させた。両方の溶液を一緒に混合し、室温で２４時間撹拌した。反応
は、HPLC分析によって観測した。それから、その溶液を真空中で減少させた。そ
の固体を１００mlの水に溶解させ、その溶液のpHを１０．５〜１１．０に合わせ
た。この溶液を、全部で７２時間、水に対して透析した（Mw_cutoff=3,000）。２
．０５g（７０％）の（I-COOH）-５-CH₂NH-PEG/無水マレイン酸を得た。その最
終生成物を、逆相HPLC、SEC及びNMRで分析した。HPLCデータによれば、それは、
１．５％より多くの実施例１の生成物を含んではいなかった。SECデータ：Mw=20
,100, Mn=11,200, Mw/Mn=1.79。該複合体中の窒素含有量は、１．０７％、又
は、該ポリマーに結合したデリバリー剤の１０．５％（w/w）であった。

【００８６】実施例６：ポリ（エチレングリコール）[PEG]−デリバリー剤エステル化反応を介して調製した複合体分子量と官能性とが異なったPEG−デリバリー剤を多数、線状モノ−及びジヒ
ドロキシ末端PEG Mw=200~4,500と、Shearwater Polymers, Inc. (Huntsville, A
L)から入手したMW=1,770及び10,000の分枝状多官能性PEGとを用いて調製した。P
EG、及び、該エステル化反応に用いられるデリバリー剤の構造を以下に示す。

【化３６】

【００８７】実施例６a：前記反応を、コンデンサー及びDean-Starkトラップを備えた０．５
Ｌ丸底フラスコ内で行った。３０gのPEG MW=300（Carbowax 300）及び５gのI-CO
OHを１７５mLのトルエンに溶解させた。０．６gの触媒ｐ−トルエンスルホン酸
一水和物を添加した。その溶液を３０〜４０分間還流させ、それから、第二部の
I-COOH（５g）を添加した。その反応は、逆相HPLCによって観測し、そのクロマ
トグラムにわずかに３〜５％の未反応I-COOHが見出されたときに停止させた。こ
れは通常３〜４時間かかり、この事例ではおよそ３時間かかった。その溶液を、
室温に冷却し、７５０mLのわずかに塩基性の水（NaHCO₃飽和溶液でpH=7.5~8.0に
調整）に注いで、分離漏斗内に３〜４時間放置した。３つの層：上層のトルエン
層、中間の水層、及び、目的とする複合体を含む下層が形成された。下層を分離
して、真空下で減少させた。１３．２g（６３％）の油性生成物が得られた。NMR
で確認した該複合体の構造：-COOCH₂- δ=4.13 ppm (トリプル）及びCOOH基の欠
如。窒素含有量は２．５４％（計算値は２．５３％）であった。該複合体の計算
分子量は〜６００である。該複合体の構造を以下に示す。 I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₅CH₂CH₂OH 共役物４

【００８８】以下の複合体を、適切な出発物質を用いて、同様の方法によって調製した。そ
れらのPEGの分子量は、かっこ内に示す。複合体１４（３００）、１５（３００
）、１６（４００）、２４（３５０）、２５（５５０）、２６（３５０）、２７
（４００）、３７（１０，０００）、３８（１０，０００）、３９（２，０００
）（分離漏斗内で沈殿させた生成物）、４１（３００）（分離漏斗内で沈殿させ
た生成物）、４２（３００）、４３（５５０）、４４（６００）、４５（１，０
００）、４６（１，０００）、４７（６００）を、適切な出発物質を用い、この
方法によって調製した。

【００８９】実施例６ｂ：Carbowax 200とデリバリー剤I-COOHとをベースとする複合体の調製
に、６ａと同様の手順を用いた。該共役物の収率は６７％であった。窒素含有量
は３．０１％であった。計算分子量は４７０Dである。その構造を以下に示す。 I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₃CH₂CH₂OH 複合体５

【００９０】実施例６ｃ：反応は、６ａと同様の装置を用いて行った。５．６gのポリ（エチ
レングリコール）メチルエーテルMW=350（Aldrich）と、３．６gのI-COOHとを８
０mLのトルエンに溶解させた。０．３gの触媒ｐ−トルエンスルホン酸一水和物
を添加した。その溶液を３時間還流させた。それから、その溶液を室温に冷却し
、分離漏斗に移した。５３mLの水と７mLのNaHCO₃飽和溶液との混合物を添加した
。上層のトルエン層を分離し、水で洗浄して、真空下で減少させた。最終生成物
は粘性のある油で、収率は９２％、窒素含有量は２．２５％であった。計算分子
量は６２０Dである。その構造を以下に示す： I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₅CH₂OCH₃ 複合体６

【００９１】以下の共役物を、適切な出発物質を用いて、同様の方法によって調製した。そ
れらのPEGの分子量はかっこ内に示す。複合体１３（７５０）、２１（５５０）
、４０（１，９００）及び４８（３５０）。

【００９２】実施例６ｄ：Carbowax 400とデリバリー剤I-COOHとをベースとする複合体の調製
に、６ａと同様の手順を用いた。該複合体の収率は６３％であった。窒素含有量
は２．４％であった。計算分子量は７００Dである。その構造を以下に示す。 I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₇CH₂CH₂OH 複合体７

【００９３】実施例６e：Carbowax 300（PEG MW=300）とデリバリー剤II-COOHとをベースとす
る複合体の調製に、６ａと同様の手順を用いた。該複合体の収率は６５％であり
、窒素含有量は２．０６であった。計算分子量は６００Dである。その構造を以
下に示す。 II-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₅CH₂CH₂OH 複合体８

【００９４】 PEG MW=300の代わりに、それぞれ、MW=550及びMW=350のPEGメチルエーテルを
用いたことを除いて、複合体１９及び２０を、これと同様の方法によって調製し
た。

【００９５】実施例６ｆ：Carbowax 400とデリバリー剤III-COOHとをベースとする複合体の調
製に、６ａと同様の手順を用いた。該複合体の収率は６１％であった。窒素含有
量は１．９８％であった。計算分子量は７００である。その構造を以下に示す。 III-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₇CH₂CH₂OH 複合体９

【００９６】実施例６ｇ：Carbowax 600とデリバリー剤I-COOHとをベースとする複合体の調製
に、６ａと同様の手順を用いた。該複合体の収率は７１％であった。窒素含有量
は１．０５％であった。計算分子量は９００である。その構造を以下に示す。 I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₁₁CH₂CH₂OH 複合体１０

【００９７】実施例６ｈ：１５．０g（０．００６５当量）のPEG MW=4600（「Carbowax 4600N
F」）、１．６５g（０．００５８当量）のI-COOH及び０．４５gのｐ−トルエン
スルホン酸一水和物を、１２０mLのトルエンに溶解させた。その反応混合物を１
３時間還流させた。反応は、HPLCによって観測し、残留する未反応I-COOHの量が
ごくわずかであったときに停止させた。その溶液を真空下で減少させた。１５．
３g （９２％）の固体ワックス状生成物を回収した。その複合体は、NMR、HPLC
及び元素分析（N−０．４３％）によって同定した。計算分子量は５，１００で
ある。その構造を以下に示す。 I-COO-CH₂CH₂O(CH₂CH₂O)₁₀₂CH₂CH₂-OOC-I 複合体１１

【００９８】実施例６ｉ：６．３gの分枝状８アームのPEG2000（実際、MW=1770）、４．０gの
I-COOH及び０．２gのｐ−トルエンスルホン酸一水和物を、３０mLのトルエン中
で２．５時間還流させた。トルエン蒸発後、油性の生成物が得られた。HPLCデー
タによれば、その共役物は、ごくわずかな量の未反応の元のI-COOHを含むことが
わかった。NMRスペクトルによって、エステル基の存在が示され（δ＝４．２ppm
）、該複合体中にカルボキシル基がないことが確認された。収率は８５％であり
、窒素含有量は０．６２％であった。計算分子量は２８００である。化合物I-CO
Oは、８「アーム」の４つにおいて、エステル結合を介してPEG-OH基に結合して
いる。このコンジュゲートを「コンジュゲート１２」と称す。

【００９９】実施例７：I-CH₂NH₂、及びその塩化水素塩の調製 O−アセチルサリチル酸（３６g、０．２mol）及びＮ−ヒドロキシスクシンイ
ミド（２３g、０．２mol）を２００mlのDMFに溶解させた。その溶液に、５０ml
のクロロホルム中の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（４０．５g、０
．２mol）を、０℃で、撹拌しながら、滴下した。その混合物を、室温で、さら
に２０時間撹拌した。沈殿をろ過して除いた。減圧下でろ液を蒸発させ、シロッ
プ状の残留物を得た。それを、２００mlのクロロホルムに再溶解させた。該溶液
を冷凍庫に２時間保持した。沈殿を再びろ過して除いた。ろ液を、４％の重炭酸
ナトリウム（２００ml×３）、１０％NaCl（２００ml×２）、０．１N HCl（２
００ml×２）及び１０％NaCl（２００ml×２）水溶液それぞれによって洗浄した
。それを無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。クロロホルムを蒸発させ、シロップ
状の生成物（５０g、９０％）を得て、これを、真空下で一晩乾燥させた後、酸
性化した。

【０１００】５００mlの塩化メチレン中の１，８−ジアミノオクタン（２６g、１８０mmol
）に、１５０mlの塩化メチレン中の、上で得られた活性なエステル（２５g、９
０mmol）を、２〜３時間かけて滴下した（１秒当たり１滴）。その混合物をさら
に１５時間撹拌した。沈殿物を、ろ過によって回収し、塩化メチレンで洗浄して
、空気中で乾燥させた。それを、撹拌しながら、３００mlの０．１N HCl水溶液
で、３０分間抽出した。不溶の物質をろ過して除いた。ろ液を、４０％水酸化ナ
トリウムを用いてpH８から９にあわせた。このとき沈殿が生じた。それを、室温
で３時間保持した。沈殿をろ過によって回収した。それを空気中で完全に乾燥さ
せ、１０g（４２％）を得た。融点１５５〜１５６℃。この化合物を、さらに、
エタノール又は水から再結晶することができる。逆相HPLC：t_R= ２．８５分。¹H
NMR (300 MHz, DMSO-d₆), δ(ppm): 1.25 (8H, m), 1.45(4H, m), 2.1(2H, t),
3.2(2H, m), 6.45(1H, h), 6.6(1H, q), 7.1(1H, h), 7.7(1H, q), 6.5(3H, br
), 10.8(1H, br). C₁₅H₂₄O₂N₂ (+0.25H₂O)の元素分析：計算値：C 67.04, H
9.12, N 10.43; 実測値：C 67.13, H 9.37, N 10.64. 水含有量はKFによっ
て測定した（．２５％）。

【０１０１】上記化合物I-CH₂NH₂（０．３g、１．１mmol）からの生成物を、１０mlの温（
約５０℃）無水エタノールに溶解させた。無水塩化水素ガスをその溶液に１０分
間通気した。それから、該溶液に、乾燥空気を１０分間通した。溶媒を蒸発させ
て固体残留物を得て、それをEtOH/Et2Oから再結晶させて、化合物I-CH₂NH₂の塩
化水素塩（０．３１g、９１％）、融点１１９〜１２１℃、を得た。逆相HPLC：t _R = ２．９分； ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆), δ(ppm): 1.2(8H, m), 1.5(4H, m
), 2.7(2H, m), 3.2(2H, m), 6.85(2H, m), 7.35(1H, h), 7.8(1H, q), 7.9(3H,
br), 8.9(1H, t), 12.7(1H, br). C₁₅H₂₅O₂N₂Clの元素分析：計算値：C 59.
90, H 8.32, N 9.32; 実測値：C 60.02, H 8.21, N 9.28.

【０１０２】実施例８：複合体１７の調製モノメトキシポリエチレングリコール３５０（２g、５．７mmol）を、４mlの
ピリジンを含む２０mlの塩化メチレンに溶解させた。この溶液に対し、０℃で、
１．２g（５．８mmol）の４−ニトロフェニルクロロホルメートと、触媒として
の８５mgの４−ジメチルアミノピリジンとを添加した。その反応混合物を、０℃
で２時間、さらに室温で２時間撹拌した。反応は逆相HPLCで観測した。塩化メチ
レンを蒸発させてシロップ状の生成物を得た。これを、さらに精製することなく
、次の工程の反応に直接用いた。

【０１０３】上記実施例７で調製した１−Ｎ−サリシロイル−１，８−ジアミノオクタン（
１．５g、５．７mmol）を、２５mlの７０〜８０℃のピリジンに溶解させた。そ
の溶液を、前の反応から得られたｐ−ニトロフェニルモノメトキシポリエチレン
グリコール３５０カルボネートと混合した。その反応混合物を、室温で５０時間
撹拌した。減圧下でのピリジンの蒸発によってシロップ状の原料を得た。それを
、２００mlの塩化メチレンに溶解させた。その溶液を、０．１N HCl（２００ml
×３）、１０％NaCl（２００ml×２）、４％重炭酸ナトリウム（２００ml×３）
及び１０％NaCl（２００ml×２）水溶液によって洗浄した。それを無水硫酸ナト
リウムで乾燥させた。その反応とワークアッププロセスとを観測するために、逆
相HPLCを用いた。塩化メチレンの蒸発によって、生成物１．９g（５３％）を得
た。その構造は逆相HPLC（t_R= ５．４３分）、N分析（計算値は４．３２％、実
測値は４．０４％）及びNMRによって確認した。１つのアミドプロトンに対する
新しいトリプレット（三重線）ピークが７．２ppmに見られ；出発物質の遊離ア
ミノ基に結合したメチレンプロトンのケミカルシフトは、該アミノ基がウレタン
に転換されたとき、２．６ppmから３．０ppmにシフトした。計算分子量は６４０
である。

【０１０４】複合体３４も、実施例１で調製した生成物とPEG MW=2,000を用いて、この方法
によって調製した。

【０１０５】実施例９：複合体１８の調製モノメトキシポリエチレングリコール３５０（３．５g、１０mmol）を、１．
８g（１８mmol）のトリエチルアミンを含む２０mlのクロロホルムに溶解させた
。この溶液に対し、２．０gの塩化トシル（１０．５mmol）を、撹拌しながら添
加した。その反応混合物を室温で一晩撹拌した。沈殿をろ過して除いた。ろ液を
１０mlのクロロホルムで希釈した。それから、その溶液を、０．１N HCl（１０
０ml×３）、１０％NaCl（１００ml×２）、４％重炭酸ナトリウム（１００ml×
２）及び１０％NaCl（１００ml×２）水溶液で洗浄した。そのクロロホルム層を
無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。クロロホルムの蒸発によって、トシル化モノ
メトキシポリエチレングリコール３５０を得た。これを次の反応に用いた。

【０１０６】１−Ｎ−サリシロイル−１，８−ジアミノオクタン（２．６４g、１０mmol）
、Ｄ３２、を、３０mlの７０〜８０℃のピリジンに溶解させた。その溶液に対し
、２０mlのピリジン中の、前の反応から得られたトシル化モノメトキシポリエチ
レングリコール３５０を、４０分かけて、撹拌しながら滴下した。その反応物を
、７０℃で５時間、そして室温で一晩撹拌した。沈殿をろ過して除いた。ろ液を
減圧下で蒸発させ、乾燥させて、シロップ状の原料を得た。それを、１５０mlの
塩化メチレンに溶解させた。その溶液を、０．１N HCl（１５０ml×３）及び１
０％NaCl（１５０ml×２）水溶液によって洗浄した。その塩化メチレン溶液を回
収し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。塩化メチレンの蒸発後、油性物質を得
た。それを２００mlの水に溶解させた。得られた乳液状の溶液は、ジエチルエー
テルで５回（２００ml×２）抽出した後、清澄になった。それから、その清澄な
水溶液を２００mlの塩化メチレンで抽出した。該塩化メチレン層を回収し、無水
硫酸ナトリウムで乾燥させた。その反応とワークアッププロセスとを、逆相HPLC
によって観測した。塩化メチレンの蒸発によって、生成物０．８g（２９％）を
得た。その構造は逆相HPLC（t_R= ３．７３分）、N分析（計算値は３．６５％、
実測値は３．３９％）及びNMRによって確認した。２つのアミン塩のピークが８
．５ppmに見られた。ｐ−トルエンスルホン酸の４つの芳香族プロトンが７．１p
pmと７．５ppmに見られた。出発物質の遊離アミノ基に結合したメチレン基の２
つのメチレンプロトンは、該アミノ基がｐ−トルエンスルホン酸塩の形態に転換
されたとき、２．６ppmから３．６ppmにシフトした。計算分子量は７６８である
。

【０１０７】実施例１０：複合体２２の調製５０mlの塩化メチレン中の２−（モノメトキシポリエチレングリコール３５０
）酢酸（MW=350）（２．０g、２９．４mmol）を、８mlのDMF及び２０mlの塩化メ
チレン中の４．０g（３５mmol）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドの溶液に添加
した。この溶液に、３０mlの塩化メチレン中の７．４g（３６mmolのDCCを添加し
た。その混合物を、室温で２４時間撹拌した。沈殿をろ過して除いた。ろ液を冷
凍庫に２時間保持した。再度、沈殿をろ過して除いた。ろ液を１００mlの塩化メ
チレンで希釈した。該溶液を、０．１N HCl（２００ml×３）、１０％NaCl（２
００ml×２）、４％重炭酸ナトリウム（２００ml×３）及び１０％NaCl（２００
ml×２）水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。塩化メチレンを蒸
発させ、PEG酢酸活性エステル中間体８．８g（５８％）を得て、これを、さらに
精製することなく、次の反応に用いた。。

【０１０８】１−Ｎ−サリシロイル−１，８−ジアミノオクタン（３．６g、１３．６mmol
）を、４５mlの７０〜８０℃のピリジンに溶解させた。その溶液に対し、上で調
製した６．９g（１３．６mmol）のPEG酢酸活性エステルを添加した。その反応混
合物を、窒素雰囲気下で、７０℃で４時間撹拌した。それを室温で一晩放置した
。反応を観測するために逆相HPLCを用いた。ピリジンを蒸発させて、シロップ状
の原料を得た。それを、２００mlの塩化メチレンに溶解させた。その溶液を、０
．１N HCl（２００ml×３）、１０％NaCl（２００ml×２）、４％重炭酸ナトリ
ウム（２００ml×３）及び１０％NaCl（２００ml×２）水溶液によって洗浄した
。その塩化メチレン溶液を回収し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。塩化メチ
レンの蒸発後、シロップ状生成物（６．６g、７４％）を得て、さらに、以下の
ように精製した。該シロップ状生成物を２００mlの蒸留水に溶解させた。その溶
液を一晩冷蔵した（５〜１０℃）。それから、沈殿を、清澄なろ液が得られるま
でろ過して除いた。その溶液を１００mlの塩化メチレンで２回抽出した。その塩
化メチレン溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。塩化メチレンの蒸発によっ
て、生成物６．３gを得た。その生成物に窒素を通気させることによって、該シ
ロップ状生成物からわずかな塩化メチレン溶液が除去される。その構造は、逆相
HPLC（t_R= ４．６分）、窒素分析（計算値は４．２８％、実測値は４．１８％）
及びNMRによって確認した。１つのアミドプロトンに対する新しいトリプレット
ピークが７．６５ppmに見られた。出発物質の遊離アミノ基に結合したメチレン
プロトンのケミカルシフトは、該アミノ基がアミドに転換されたとき、２．６pp
mから３．１ppmにシフトした。計算分子量は６５４である。

【０１０９】 MW=350材料の代わりに２−（モノメトキシポリエチレングリコール５５０）酢
酸（MW=550）を用いたことを除いて、この方法によって複合体２３も調製した。

【０１１０】出発物質が、（１−Ｎ−サリシロイル−１，８−ジアミノオクタンの代わりに
）２−（モノメトキシポリエチレングリコール３５０）酢酸及び実施例１からの
生成物(I-COOH)-5-CH₂-NH₂であったことを除いて、この方法によって複合体３０
も調製した。

【０１１１】実施例１１：複合体３１の調製実施例７で調製した、５．０g（１８．９mmol）の１−Ｎ−サリシロイル−１
，８−ジアミノオクタン（化合物I-CH₂-NH₂）を１００mLの９０〜１００℃ピリ
ジンに溶解させ、室温にまで冷却した。得られたＮ−サリシロイル−１，８−ジ
アミノオクタンの懸濁液を、ピペットによって、１００mLのピリジンに溶解した
５．７３g（２８．４mmol）の４−ニトロフェニルクロロホルメートに添加し、
１５分間撹拌した。溶媒を蒸発によって除去すると、沈殿を含む赤色のオイルが
残った。該オイルを１００mLのジクロロメタンに溶解させ、沈殿をろ過して除い
た。ジクロロメタン溶液を、０．１N HCl（１００ml、３回）、５％重炭酸ナト
リウム（７５ml、３回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させて、収
率５３％の、４．３gの橙褐色の固体のＮ−（４−オキシカルボニル−ニトロベ
ンゼン）−Ｎ−サリシロイル−１，８−ジアミノオクタンを得た。

【０１１２】それから、上記生成物を、Huntsman (Houston, TX)製造のメトキシポリ（オキ
シエチレン／オキシプロピレン）−２−プロピルアミン HTJ-506（以降はメトキ
シPEG_1,000-NH₂と称する）と反応させた。１．９５g（４．５４mmol）の上記生
成物を２０mLのアセトニトリルに溶解させ、沈殿（およそ２２０mg）をろ過して
除いた。その溶液を、２０mLのアセトニトリルに溶解した４．９０g（４．５５m
mol）のメトキシPEG_1,000-NH₂に添加した。反応は、HPLCを用いて観測し、室温
で３．５時間後に完了した。蒸発によって溶媒を除去し、６．５gの黄橙色のオ
イルを得た。該オイルを４０mLのジクロロメタンに溶解させた。この溶液を５０
mLの０．１N HClで２回（未反応のメトキシPEG_1,000-NH₂を除去するため）、１
０％NaCl溶液で１回洗浄し、続いて、４−ニトロフェニルが除去されるまで（逆
相HPLCによって測定）、５０mLずつの５％重炭酸ナトリウムで洗浄した。その溶
液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させて、３．５gの黄橙色の固体を得た。
それから、この固体を５０mLの蒸留水に溶解させ、３０mLのジエチルエーテルで
洗浄した。水層を回収し、最終生成物を、水から、ジクロロメタンを用いて抽出
し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させて、５７％収率で、複合体３１の、３
．１gの黄橙色のワックスを得た。それをＮ−ＰＥＧ−Ｎ’−（Ｎ−サリシロイ
ル）−ヘプチルアミン尿素と命名している。その純度と構造は、逆相HPLC、元素
分析（Nの計算値は３．０２％、実測値は３．０９％）及びNMRによって確認した
。置換尿素の特徴である、同等の強度の、δ＝５．５７ppm及び５．７９ppmの新
しい２つのマルチプレット（多重線）ピークが見られ、出発物質のアミノ基の次
のメチレンプロトンの２．６ppmのピークが消えた。計算上のMWは〜１４００で
ある。

【０１１３】実施例１２：組み替えヒト成長ホルモン（rhGH）の経口／結腸内デリバリー水、リン酸塩緩衝液（PB）又は５％水性エタノール中のデリバリー剤化合物の
経口栄養（PO）及び／又は結腸内（IC）投与溶液を調製した。典型的には、複合
体溶液を、水中で混合し、撹拌することによって調製した。最終的な投与溶液は
、該複合体溶液と、rhGHストック溶液（典型的には１５mg rhGH/ml）とを混合し
、所望の容量（通常３．０ml）にまで希釈することによって調製した。該化合物
とrhGHの投与量は、下記の表１に示す。

【０１１４】２００〜２５０gの重量のオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間絶食させ
、投与の１５分前に、ケタミン（４４mg/kg）とクロルプロマジン（１．５mg/kg
）とを与えた。５匹のラットの投与群１つに、１種類の投与溶液を与えた。経口
栄養（PO）については、11cm Rusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを
備えた１mlシリンジに適応させた。カテーテルを通じて該溶液を吸い取ることに
よって該シリンジを投与溶液で満たし、それを拭って乾燥させた。該カテーテル
を、その管をラットの門歯から１cm残して食道に入れた。溶液を、シリンジのプ
ランジャーを押すことによって投与した。結腸内（IC）投与については7.5cm Ru
sch カテーテル管（French8又は6）を、Eppendorfピペットチップを備えたシリ
ンジに適応させた。カテーテル管を通じて該溶液を吸い取ることによって、該シ
リンジを０．５ml投与溶液で満たした。そのカテーテル管を拭って乾燥させた。
K〜Yのゼリーを、チップに入れ、管が眼に接触しないようにして、その管を、肛
門を介して、その管が見えなくなるまで挿入した。溶液を、シリンジのプランジ
ャーを押すことによって投与し、管を取り除いた。

【０１１５】尾動脈から、典型的には、経口の場合は時間＝０、１５、３０、４５、６０及
び９０分のときに、IC投与の場合は０、１０、２０、３０、６０及び９０のとき
に、血液サンプルを回収した。血清rhGH濃度は、rhGH免疫試験キット（Genzyme
Corporation Inc., Cambridge, MAのKit # K1F4015）によって定量した。前の研
究は、およそゼロのベースライン値を示した。

【０１１６】 PO投与の結果は下記表１に示され、そこでは、rhGHを（ａ）デリバリー剤I単
独、（ｂ）複合体１、及び（ｃ）複合体３と一緒に投与した。それらの実験は、
該複合体の濃度の１／１０のデリバリー剤濃度で行った。つまり、２００mg/kg
の投与量で、該デリバリー剤の実際の投与量は２０mg/kgであった。ポリマーと
複合体を形成したデリバリー剤のそのような濃度によって、全身性のデリバリー
が証明された。

【０１１７】

【表１】

【０１１８】 IC投与の投与量は、１ml/kgであった。rhGH投与は１mg/kgであった。IC投与に
ついては、各時間の５つのサンプルをプールし、各群の最大濃度（C_max）を以下
の表２に示した。

【０１１９】

【表２】

【０１２０】実施例１３：上皮小体ホルモンデリバリー（PTH 1-34）経口／結腸内デリバリー水及び下記表３に示した多様な水性溶液（PEG 300及びPEG 350はAldrich (Mil
waukee, WI)から入手可能である）中のデリバリー剤化合物及びヒト上皮小体ホ
ルモン残基１−３４（PTH）の経口栄養（PO）及び／又は結腸内（IC）投与溶液
。Kollidon 17PFは、Aldrich から入手可能なポリビニルピロリドンである。PG
はプロピレングリコールである。典型的には、複合体の溶液を、適切な溶媒中で
撹拌し、調製した。最終的な投与溶液は、該複合体溶液と、PTHストック溶液（
典型的には５mg PTH/ml）とを混合し、所望の容量（通常３．０ml）にまで希釈
することによって調製した。最終化合物、PTH及び容量投与量、及び、用いた投
与媒体は、下記の表３に示す。

【０１２１】２００〜２５０gの重量のオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間絶食させ
、投与の１５分前に、ケタミン（４４mg/kg）とクロルプロマジン（１．５mg/kg
）とを与えた。５匹のラットの投与群１つに、１種類の投与溶液を与えた。経口
栄養（PO）については、11cm Rusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを
備えた１mlシリンジに適応させた。カテーテルを通じて該溶液を吸い取ることに
よって該シリンジを投与溶液で満たし、それを拭って乾燥させた。該カテーテル
を、その管をラットの門歯から１cm残して食道に入れた。溶液を、シリンジのプ
ランジャーを押すことによって投与した。結腸内（IC）投与については、7.5cm
Rusch カテーテル管（French8又は6）を、Eppendorfピペットチップを備えたシ
リンジに適応させた。カテーテル管を通じて該溶液を吸い取ることによって、該
シリンジを投与溶液で満たした。そのカテーテル管を拭って乾燥させた。K〜Yの
ゼリーを、チップに入れ、管が眼に接触しないようにして、その管を、肛門を介
して、その管が見えなくなるまで挿入した。溶液を、シリンジのプランジャーを
押すことによって投与し、管を取り除いた。

【０１２２】尾動脈から、典型的には、経口の場合は時間＝０、１５、３０、４５、６０及
び９０分のときに、IC投与の場合は０、１０、２０、３０、６０及び９０のとき
に、血液サンプルを回収した。血清PTH濃度は、PTHラジオイムノアッセイキット
（Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CAのKit # RIK 6101）によって
定量した。前の研究は、およそゼロのベースライン値を示した。各群の５匹のラ
ットから得られた結果を、各時点について平均した。その最大値と曲線下面積（
AUC）は、以下の表３に示す。

【０１２３】

【表３】

【０１２４】 PTHはまた、PO及びIC経路を介して、カプセル剤によって投与した。総容量２
５μLの、Torpac Inc. (Fairfield, NJ, USA)製造の小さいハードゲルカプセル
剤（サイズ９）を用いた。IC投与については、２５μｇPTC／カプセルと、１５
μｇ／カプセルの複合体２２を用いた。PO投与については、１００μｇPTC／カ
プセルと、２０ｍｇ／カプセルの複合体２２を用いた。PTHの粉末を、油性のコ
ンジュゲートと、上述の割合で、バイアル中で混合した。清澄な溶液が得られた
。溶液を、シリンジで添加し、近似の重量に達するように重量測定した。

【０１２５】カプセルを、以下の変更を伴って、上述のように投与した。PO投与については
、ラット／ハムスターカプセルディスペンサー（Torpac Inc., Fairfield, NJか
ら入手可能）を投与末端から１０cmにマークした。カプセルをディスペンサー内
に置き、これを口に挿入し、その１０cmマークが門歯に達するまで食道に入れた
。プランジャーを押し、引き抜いた。続いて、任意に、（PO投与の溶液として）
約１．０mlの水を投与した。IC投与については、ラット／ハムスターカプセルデ
ィスペンサーを投与末端から７．５cmにマークした。カプセルをディスペンサー
内に置いた。少量のKYゼリーを該ディスペンサーのチップに入れて、該ディスペ
ンサーを７．５cmマークまで、肛門に挿入した。プランジャーを押し、引き抜い
た。

【０１２６】上述のような結果が得られ、それを以下の表４に示す。

【０１２７】

【表４】

【０１２８】実施例３：ヘパリンデリバリー結腸内デリバリー２５％水性プロピレングリコール中に共役物及びヘパリンナトリウムUSPを含
む結腸内（IC）投与溶液を調製した。典型的には、その油性複合体と粉末状のヘ
パリン（約１６６〜１８２IU/mg）とを、２５％v/v水性プロピレングリコールに
溶解させ、ボルテックスをかけて、ソニケーター（約３７℃）内に置いた。その
pHを、水性NaOH（2N）で約７（６．５から８．５）にあわせた。投与溶液に音波
をかけて、清澄な溶液を得た。最終的な容量は、３．０mlに調節した。最終的な
複合体投与量、ヘパリン投与量及び容量投与量は、下記の表５に示す。

【０１２９】２７５〜３５０gの重量のオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間絶食させ
、投与の直前に、筋肉内投与で、塩酸ケタミン（８８mg/kg）で麻酔した。５匹
のラットの投与群１つに、１種類の投与溶液を与えた。結腸内（IC）投与につい
ては、7.5cm, 8fr Rusch カテーテルを、ピペットチップを備えた１mlシリンジ
に適応させた。投与カテーテルを、その管が見えなくなるまで、肛門を通して挿
入した。該投与溶液は、ゆっくりと結腸内に現れた。

【０１３０】ケタミン（８８mg/kg）投与に続いて、典型的には、時間＝０．２５、０．５
、１．０及び１．５時間のときに、クエン酸化した血液サンプルを心臓穿刺（ca
rdiac puncture）によって回収した。ヘパリン活性は、Hebry, J.B., Clinical
Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Philadelphia, PA, W.B. S
anders (1979)の方法に従って、活性化部分トロンボプラスチン時間（activated
partial thromboplastin time, APTT）を利用することによって測定した。前の
研究は、約２０秒のベースライン値を示した。各群の５匹のラットから得られた
結果は、各時間について平均した。その最大値を以下の表５に示す。

【０１３１】

【表５】

【０１３２】上に述べた特許、出願、試験方法及び出版物は、それら全てが、参照としてこ
こに取り込まれる。

【０１３３】当業者に対し、本発明の多数の変形が、上記の詳細な説明の見地において提案
されるであろう。そのような明らかな変形は全て、特許請求の範囲の意図する全
範囲内である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ユージン・エヌ・バランツェヴィッチアメリカ合衆国・ニューヨーク・10583・スカースデール・ガース・ロード・198・アパートメント・５ビー (72)発明者ナイ・ファン・ワンアメリカ合衆国・ニューヨーク・11104・ロング・アイランド・シティ・フォーティセカンド・ストリート・41−42・アパートメント・２Ｃ (72)発明者ジュン・リァオアメリカ合衆国・ニューヨーク・10591・タリータウン・クレセント・ドライブ・ 1430 (72)発明者ジョン・イー・スマートアメリカ合衆国・ニューヨーク・10536・カトナ・ホリー・ヒル・ロード・22 (72)発明者リチャード・ディー・コンティセロアメリカ合衆国・ニューヨーク・10562・オッシニング・エリス・プレイス・10 (72)発明者ラファエル・エム・オッテンブライトアメリカ合衆国・ヴァージニア・23113・ミッドローティアン・イー・ブリッグストック・ロード・2781 Ｆターム(参考） 4C076 AA11 AA30 AA36 AA53 AA95 BB01 BB06 BB07 CC05 CC07 CC11 CC22 CC29 CC30 CC32 CC41 EE03 EE08 EE10 EE12 EE23 EE48 FF04 FF06 FF09 FF13 FF53

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 -NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O
-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O
-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-及び炭素−炭素
結合からなる群から選択された連結基を介して修飾アミノ酸又はその誘導体に共
役したポリマーを含むポリマー性デリバリー剤（ただし、当該ポリマー性デリバ
リー剤はポリペプチド又はポリアミノ酸ではない）。
【請求項２】前記修飾アミノ酸が、アシル化又はスルホン化アミノ酸、ア
シル化又はスルホン化アミノ酸のケトン又はアルデヒド、それらの塩、又は、そ
れらのいずれかのポリアミノ酸又はポリペプチドである、請求項１記載のポリマ
ー性デリバリー剤。
【請求項３】前記ポリマーが、ポリエチレン；ポリアクリレート；ポリメ
タクリレート；ポリ（オキシエチレン）；ポリ（プロピレン）；ポリプロピレン
グリコール；ポリエチレングリコール（PEG）；PEG−無水マレイン酸コポリマー
；及び、それらの誘導体及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１記
載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項４】前記ポリマーが、約１００から約２００，０００ダルトンの
分子量を有する、請求項１記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項５】前記分子量が、２００から約１０，０００ダルトンである、
請求項４記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項６】前記分子量が、約２００から約６００ダルトンである、請求
項５記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項７】式：【化１】［式中、 R¹は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)N
H-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(
O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-及び炭素−炭素結合からな
る群から選択される連結基を介して前記ポリマーに結合した修飾アミノ酸であり
； R²はH又は-CH₃であり；そして、 R¹⁹はH又は-COOHである］を有する単位又はそれらの塩を含む、請求項１記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項８】 R¹が−R³−R⁴であり、R³が、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O
)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、
-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-
、-NH-、-O-又は炭素−炭素結合であり、そして、R⁴が、式【化２】［式中、 R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、及びR⁹は、独立して、R³への結合、又は、H、Cl、Br、F、-O
H、-CH₃、-OCH₃又は-(CH₂)_mCH₃であり； R¹⁰は、R³への結合、又は、-COOH又は-C(O)NH-R¹¹-R¹²であり； R¹¹は、約１から約１１の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状
アルキレン、又は、-R¹³-R¹⁴-であり； R¹²は、R³への結合であるか、又は、-COOH、-NH₂、-OH、-C(O)-R¹⁵、-COO-R¹⁵ 、-NHR¹⁵、-OR¹⁵、Cl又はBrであり； R¹³は、置換又は非置換フェニレンであり； R¹⁴は、約１から約５の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状ア
ルキレンであり； R¹⁵は、R³への結合であり；そして、 mは、約１から約４である］を有する、請求項７記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項９】 R⁴が、【化３】【化４】【化５】及びそれらの塩からなる群から選択される、請求項８記載のポリマー性デリバリ
ー剤。
【請求項１０】式：【化６】［式中、 R¹⁶は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)
NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C
(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O- 及び炭素−炭素結合から
なる群から選択される連結基を介して前記ポリマーに結合した修飾アミノ酸であ
り； R¹⁷は、-OH、-OCH₃又は -R¹⁸であり； R¹⁸は、上記R¹⁵として定義され； R²⁴は、-(CH₂CH₂O)-、-(CH(CH₃)CH₂O)- 又はそれらの組み合わせの単位を有す
るポリマーである］を有する単位又はそれらの塩を含む、請求項１記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項１１】式：【化７】［式中、 R²³は、H又は-CH₃であり； nは約３から約２００である］を有する単位又はそれらの塩を含む、請求項１０記載のポリマー性デリバリー剤
。
【請求項１２】 R¹⁶及びR¹⁸が、独立して、−R³−R⁴であり、R³が、-NHC(O
)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-
NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC
(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-又は炭素−炭素結合であり、そして、R⁴が
、式【化８】［式中、 R⁵、R⁶、R⁷、R⁸及びR⁹は、独立して、R³への結合、又は、H、Cl、Br、F、-OH
、-CH₃、-OCH₃又は-(CH₂)_mCH₃であり； R¹⁰は、R³への結合、又は、-COOH又は-C(O)NH-R¹¹-R¹²であり； R¹¹は、約１から約１１の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状
アルキレン、又は、-R¹³-R¹⁴-であり； R¹²は、R³への結合であるか、又は、-COOH、-NH₂、-OH、-C(O)-R¹⁵、-COO-R¹⁵ 、-NHR¹⁵、-OR¹⁵、Cl又はBrであり； R¹³は、置換又は非置換フェニレンであり； R¹⁴は、約１から約５の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状ア
ルキレンであり； R¹⁵は、R³への結合であり；そして、 mは、約１から約４である］を有する、請求項１１記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項１３】 R⁴が、【化９】【化１０】【化１１】及びそれらの塩からなる群から選択される、請求項１２記載のポリマー性デリバ
リー剤。
【請求項１４】式：【化１２】［式中、 R²⁰、R²¹及びR²²は、独立して、H、又は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、
-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂NH-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(
O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-N
H-、-O- 及び炭素−炭素結合からなる群から選択される連結基を介して前記ポリ
マーに結合した修飾アミノ酸であり； a、b及びcは、独立して、約１から約５０までの整数であり；そして dは、約２から約１０である］を有する単位又はそれらの塩を含む、請求項１記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項１５】 R²⁰、R²¹及びR²²が、独立して、−R³−R⁴であり、R³が、-
NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH₂N
H-、-NHCH₂-、-CH₂NHC(O)O-、-OC(O)NHCH₂-、-CH₂NHCOCH₂O-、-OCH₂C(O)NHCH₂-
、-NHC(O)CH₂O-、-OCH₂C(O)NH-、-NH-、-O-又は炭素−炭素結合であり；そして
、R⁴が、式【化１３】［式中、 R⁵、R⁶、R⁷、R⁸及びR⁹は、独立して、R³への結合、又は、H、Cl、Br、F、-OH
、-CH₃、-OCH₃又は-(CH₂)_mCH₃であり； R¹⁰は、R³への結合、又は、-COOH又は-C(O)NH-R¹¹-R¹²であり； R¹¹は、約１から約１１の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状
アルキレン、又は、-R¹³-R¹⁴-であり； R¹²は、R³への結合であるか、又は、-COOH、-NH₂、-OH、-C(O)-R¹⁵、-COO-R¹⁵ 、-NHR¹⁵、-OR¹⁵、Cl又はBrであり； R¹³は、置換又は非置換フェニレンであり； R¹⁴は、約１から約５の鎖長を有する、置換又は非置換の、線状又は分枝状ア
ルキレンであり； R¹⁵は、R³への結合であり；そして、 mは、約１から約４である］を有する、請求項１４記載のポリマー性デリバリー剤。
【請求項１６】 R⁴が、【化１４】【化１５】【化１６】及びそれらの塩からなる群から選択される、請求項１５記載のポリマー性デリバ
リー剤。
【請求項１７】（ａ）活性剤；及び（ｂ）請求項１記載のポリマー性デリバリー剤を含む組成物。
【請求項１８】（ａ）活性剤；及び（ｂ）請求項７記載のポリマー性デリバリー剤を含む組成物。
【請求項１９】（ａ）活性剤；及び（ｂ）請求項１０記載のポリマー性デリバリー剤を含む組成物。
【請求項２０】（ａ）活性剤；及び（ｂ）請求項１４記載のポリマー性デリバリー剤を含む組成物。
【請求項２１】前記活性剤が、生物活性剤、化学活性剤及びそれらの組み
合わせからなる群から選択される、請求項１７記載の組成物。
【請求項２２】前記生物活性剤が、少なくとも１つのタンパク質、ポリペ
プチド、ペプチド、ホルモン、多糖、ムコ多糖、炭水化物又は脂質を含む、請求
項２１記載の組成物。
【請求項２３】前記生物活性剤が、ヒト成長ホルモン、組み替えヒト成長
ホルモン、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、
インターフェロン、α−インターフェロン、β−インターフェロン、γ−インタ
ーフェロン、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インスリン、ブタ
インスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組み替えインスリン、イン
スリン様成長因子（IGF）、IGF-1、ヘパリン、不分別ヘパリン、ヘパリノイド、
デルマタン、コンドロイチン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分
子量ヘパリン、カルシトニン、ヒトカルシトニン、エリトロポイエチン、心房性
ナトリウム排泄増加因子、抗原、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、プロテ
アーゼ阻害剤、アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン、オ
キシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブ
ロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスティム、プロスタグランジン、
シクロスポリン、バソプレッシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナト
リウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、上皮小体ホルモン、上
皮小体ホルモンのフラグメント；デフェロキサミン、抗菌剤、抗真菌剤、ビタミ
ン；これらの化合物の類似体、フラグメント、擬似体、及びポリエチレングリコ
ールで修飾された誘導体；及び、それらのあらゆる組み合わせからなる群から選
択される、請求項２２記載の組成物。
【請求項２４】前記活性剤が、インスリン、不分別ヘパリン、低分子量ヘ
パリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、上皮小体ホ
ルモン、エリトロポイエチン、ヒト成長ホルモン、組み替えヒト成長ホルモン、
又は、それらの組み合わせを含む、請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】（Ａ）請求項１７記載の組成物；及び、（Ｂ）（ａ）賦形剤（ｂ）希釈剤（ｃ）崩壊剤（ｄ）滑沢剤（ｅ）可塑剤（ｆ）色素（ｇ）投与ビヒクル、又は（ｈ）それらのあらゆる組み合わせを含む投与単位形。
【請求項２６】錠剤、カプセル剤、散剤又は液剤を含む、請求項２５記載
の投与単位形。
【請求項２７】生物活性剤を、該活性剤を必要としている動物に投与する
方法であって、経口、結腸内及び十二指腸内からなる群から選択される経路を介
して、請求項１７の組成物を前記動物に投与することを含む方法。
【請求項２８】（Ａ）活性剤；（Ｂ）請求項１のポリマー性デリバリー剤；及び、（Ｃ）任意に、投与ビヒクルを混合することを含む、組成物の製造方法。
【請求項２９】【化１７】及びそれらの塩からなる群から選択される化合物。
【請求項３０】（ａ）活性剤；及び（ｂ）請求項２９の化合物を含む組成物。
【請求項３１】（Ａ）請求項３０記載の組成物；及び、（Ｂ）（ａ）賦形剤（ｂ）希釈剤（ｃ）崩壊剤（ｄ）滑沢剤（ｅ）可塑剤（ｆ）色素（ｇ）投与ビヒクル、又は（ｈ）それらのあらゆる組み合わせを含む投与単位形。
【請求項３２】錠剤、カプセル剤、散剤又は液剤を含む、請求項３１記載
の投与単位形。
【請求項３３】生物活性剤を、該活性剤を必要としている動物に投与する
方法であって、経口、結腸内及び十二指腸内からなる群から選択される経路を介
して、請求項３０の組成物を前記動物に投与することを含む方法。
【請求項３４】（Ａ）活性剤；（Ｂ）請求項２９の化合物；及び、（Ｃ）任意に、投与ビヒクルを混合することを含む、組成物の製造方法。