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JP2002311027A - ビーズ、ビーズ製造方法、フローサイトメータ及びプログラム - Google Patents

ビーズ、ビーズ製造方法、フローサイトメータ及びプログラム

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Publication number
JP2002311027A
JP2002311027A JP2001109940A JP2001109940A JP2002311027A JP 2002311027 A JP2002311027 A JP 2002311027A JP 2001109940 A JP2001109940 A JP 2001109940A JP 2001109940 A JP2001109940 A JP 2001109940A JP 2002311027 A JP2002311027 A JP 2002311027A
Authority
JP
Japan
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beads
bead
dna
flow cytometer
reporter
Prior art date
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Pending
Application number
JP2001109940A
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English (en)
Inventor
Sunao Nakao
素直 中尾
Koichi Tatsuguchi
幸市 龍口
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitachi Software Engineering Co Ltd
Original Assignee
Hitachi Software Engineering Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hitachi Software Engineering Co Ltd filed Critical Hitachi Software Engineering Co Ltd
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Priority to US10/120,962 priority patent/US20030190628A1/en
Priority to EP02007925A priority patent/EP1249502A3/en
Publication of JP2002311027A publication Critical patent/JP2002311027A/ja
Priority to US10/914,340 priority patent/US20050009082A1/en
Pending legal-status Critical Current

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Abstract

(57)【要約】 【課題】 常温でも化学的に安定であり、光を浴びても
崩壊することなく安定しており、なおかつ単一波長の光
を照射することで励起され複数蛍光を発光可能であって
フローサイトメータにより識別することができるビー
ズ、ビーズ製造方法、そのためのフローサイトメータ及
びプログラムを提供すること。 【解決手段】 ポリスチレンビーズ１１に半導体ナノ微
粒子１２を蛍光試薬として染色することにより、ビーズ
の識別を行うのと同時にレポーター用の検出用にも蛍光
波長の異なる半導体ナノ微粒子１６を使用し、遺伝子の
ＳＮＰ特定、モニタリング、またはタンパク質などの生
体高分子の濃度を求めることを可能ならしめる。半導体
ナノ微粒子は、粒径を制御することにより、その蛍光波
長が変動し、また、半導体であるために通常の蛍光試薬
と比較した場合の耐久度が高い特徴をもつ。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＳＮＰ（Single N
ucleotide Polymorphism：一塩基変異多型）の検出のた
めのプローブなどの標識として用いて好適なビーズ、そ
のビーズ製造方法、そのビーズを検出するフローサイト
メータ及びそのフローサイトメータに用いるプログラム
に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来から、フローサイトメトリーは細胞
内に存在する粒子状の物質、たとえば赤血球や白血球と
いった形状をしらべるためのツールとして知られてい
る。図６は、従来のフローサイトメトリーの概略構成を
示す図である。粒子状のサンプルを含む溶液は筒状の管
３１に注ぎ込まれ（サンプルインジェクション）、その
管からサンプルが流れ出ると、その周りを流れるシース
液による流体力学的絞りによりサンプル流は細く絞ら
れ、これら粒子状の物質の粒子一つ一つが測定を行う際
に重複しないように流量を調整し、細い管の中の粒子状
のサンプルにレーザー３２からレーザー光を照射する。
【０００３】レーザー光で励起された蛍光物質から蛍光
が放射され、フィルター３３、３４で蛍光波長を分離
し、それぞれの蛍光波長に関してPMT（光電子増倍管）
３５、３６等でその蛍光強度を求める。さらに、前方散
乱光及び側方散乱光をフォトダイオード３７、３８によ
って検出する。
【０００４】図７は、従来のフローサイトメータを使用
した測定結果を示す図である。FL1には蛍光物質としてF
ITC（イソチオシアン酸フルオレセイン）、FL2には蛍光
物質としてPE（フィコエリスリン）を用いて測定した。
それぞれの蛍光物質は通常は抗体などのタンパク質と結
合させておき、細胞表面に存在する抗原部位との抗原抗
体反応により、抗原部位に反応した抗体-蛍光物質から
放射される蛍光を定量的に測定することにより、細胞表
面に存在する抗原の割合を間接的に測定することが可能
である。
【０００５】近年になりこれらの技術を使用して、細胞
の代わりに担体としてポリスチレンのビーズを使用し、
ビーズの識別をフローサイトメトリーの技術を使用して
行うという試みがされており、実際に製品化した商品も
販売されている。これらのビーズは、あらかじめ濃度を
変化させた蛍光物質で染色することで、フローサイトメ
ータのFL1やFL2で測定を行い、FL1,FL2の濃度差によ
り、ビーズの識別を行うという技術である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従来からフローサイト
メトリーで使用してきた蛍光物質としてPEやFITCが存在
し、最近では市販品としてＵＶレーザーを搭載したフロ
ーサイトメータも登場し、DAPI（４‘−６−ジイミド−
２−フェニルインドール）やヘキストダイ（ビスベンズ
イミドＨ３３２５８）といったものも励起、測定できる
ようになった。
【０００７】しかしながらこれらの有機系の蛍光試薬は
レーザー光はもちろん、通常の太陽光にも弱く、光に暴
露することによって物質が崩壊し、蛍光強度が弱くなる
といった欠点を持ち合わせている。それゆえに、前述で
ビーズを蛍光試薬で染色した場合においても同様の欠点
を有し、その保存には遮光や冷凍を要し、注意を払わね
ばならない。
【０００８】本発明は、上記問題点に鑑み、常温でも化
学的に安定であり、光を浴びても崩壊することなく安定
しており、なおかつ単一波長の光を照射することで励起
され複数蛍光を発光可能であってフローサイトメータに
より識別することができるビーズ、ビーズ製造方法、そ
のためのフローサイトメータ及びプログラムを提供する
ことを目的とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明のビーズは、粒径
が１〜１０nmである半導体ナノ微粒子を表面に有する。
また、前記半導体ナノ微粒子は、電磁波による励起によ
り複数の波長でピークを有する光を発光するように複数
の粒径のものから成ることで、多くのビーズを識別する
ことができる。
【００１０】また、本発明のビーズ製造方法は、ビーズ
表面にＤＮＡを共有結合するステップと、所望のｍＲＮ
Ａを鋳型とし、前記ＤＮＡをプライマーとし、少なくと
も１種類の塩基に標識を施した塩基を材料として逆転写
反応を行ってビーズ表面に前記標識をレポーターとして
導入するステップとを備える。これにより、目的とする
ｍＲＮＡの定量を行うことが可能となる。
【００１１】また、本発明のビーズ製造方法は、ビーズ
表面にＤＮＡを共有結合するステップと、所望のｍＲＮ
Ａ又はｃＤＮＡを鋳型とし、前記ＤＮＡをプライマーと
し、少なくとも１種類の塩基に標識を施した塩基を材料
としてＰＣＲを行ってビーズ表面に前記標識をレポータ
ーとして導入するステップとを備える。これにより、少
量しか発現していないｍＲＮＡの定量を行うことが可能
となる。
【００１２】また、前記共有結合するステップは、末端
に置換基が存在する塩基をビーズ表面に固定し、ビーズ
を生物反応器内に充填した後に、前記置換基に対してさ
らに塩基を連結結合することによりＤＮＡ合成を固相ビ
ーズ上で行うことで、通常はＤＮＡ合成とビーズへの共
有結合を１つの反応器の中で行うことが可能となり、ビ
ーズチップの生産能を増す。
【００１３】また、本発明のフローサイトメータは、サ
ンプルを励起するＵＶレーザー光を発光するＵＶレーザ
ーと、サンプルから発光される複数の蛍光をそれぞれ検
出する複数の蛍光検出手段と、該蛍光検出手段からの出
力信号を、ビーズ識別用とレポーター検出用とに切換え
る切換え手段と、を備える。
【００１４】また、本発明は、コンピュータを、サンプ
ルを励起するＵＶレーザー光を発光するＵＶレーザー
と、サンプルから発光される複数の蛍光をそれぞれ検出
する複数の蛍光検出手段と、該蛍光検出手段からの出力
信号を、ビーズ識別用とレポーター検出用とに切換える
切換え手段と、を備えるフローサイトメータとして機能
させるためのプログラムである。
【００１５】
【発明の実施の形態】近年になり、半導体のナノ微粒子
が生産可能となり生体高分子への結合も応用可能なこと
が証明された（Sience,vol.281,p2013(1998年)）。半導
体ナノ微粒子は、その性質として粒径により蛍光波長が
可変するという特徴を有する無機化合物である。また、
励起するためのエネルギーはバンドギャップを超えるエ
ネルギーを与えれば励起可能なために、通常の半導体ナ
ノ微粒子はＵＶ側の高エネルギーを出力するレーザーで
多種の粒径の半導体ナノ微粒子を励起することが可能で
ある。
【００１６】半導体ナノ微粒子の製作方法は、様々な方
法が報告されており、蒸着法、有機化学的合成法、マイ
クロ波を利用した作成方法（特許第３００５６８３号公
報参照）などがある。半導体のナノ微粒子を蛍光物質と
して利用するためには、蛍光波長がシャープに発光する
必要性があり、そのためには粒径の均一な半導体ナノ微
粒子を作成する必要がある。
【００１７】図８は、半導体ナノ微粒子（CdSe-ZnS）の
蛍光波長とナノ微粒子の粒径との関係を示す図である。
本発明では上述のような方法などにより、半導体ナノ微
粒子を作成し、ポリスチレン製などのビーズの表面に存
在するようにしてビーズの識別をフローサイトメータに
より可能とするためのビーズ、ビーズ製造方法、フロー
サイトメータ及びプログラムを提供する。以下に本発明
の実施の形態を詳細に述べる。
【００１８】まず、２種類の蛍光波長の異なる半導体ナ
ノ微粒子（4.2nmの粒径と5.5nmの粒径）を用意し、ポリ
スチレンビーズ（0.1μ〜１００μｍの範囲内で特に１
μｍ〜１０μｍの粒径が望ましい）に結合する。この際
のビーズの材料及び結合方法は特に問わない。ここで
は、２種類の蛍光試薬として半導体ナノ微粒子の混合比
を変えて溶媒に溶解した状態で、ポリスチレンビーズに
染色する。
【００１９】図１は、半導体ナノ微粒子の混合割合と、
発光される蛍光強度との関係を示す図である。粒径が4.
2nmの半導体ナノ微粒子と粒径が5.5nmの半導体ナノ微粒
子とを混合する。その混合割合を（１０：１）から（１
０：７）までに変えて、それぞれポリスチレンビーズＡ
〜Ｇを染色する。ビーズＡ（4.2nm半導体ナノ微粒子：
5.5nm半導体ナノ微粒子＝１０：１）とビーズＢ（１
０：２）についてフローサイトメータで測定した結果を
示す。4.2nm半導体ナノ微粒子に相当する570nmの波長に
おける光強度ピークはＡ、Ｂの両者ほとんど同じである
が、5.5nm半導体ナノ微粒子に相当する625nmの波長の光
強度ピークは、ビーズＡに対してビーズＢは570nmの光
強度ピークに対する相対強度がほぼ２倍となっている。
このように570nmの光強度ピークに対する625nmの光強度
ピークの相対強度をシグナルとして、どのビーズである
かの識別を行うことができる。作成したビーズＡ〜Ｇに
Ａ，Ｔ，Ｃ，Ｇの４塩基のいずれかを固定する。固定し
た後にビーズを反応器に充填し、ＤＮＡ合成を行う。
【００２０】図２は、パラレルアレイ法によりＤＮＡを
合成する方法の概略を示す図である。パラレルアレイ法
では、β-シアノエチル化学反応の連続によってＤＮＡ
を合成する。各サイクルは、固定担体２に固定されたフ
ァーストヌクレオチドからトリチル基１をはずして５'-
水素基をフリーにする「脱保護」、ＤＮＡを流し込んで
次のヌクレオチドを結合させる「カップリング」、ヌク
レオチドが結合しそこなったところにフタをする「キャ
ッピング」、セカンドヌクレオチドが結合したところを
安定化させる「酸化」(図示せず)、セカンドヌクレオチ
ドの「脱保護」、というような過程を繰り返す。ここで
の固定担体２はビーズである。
【００２１】上記のように、ビーズ上で合成を行っても
よいし、あらかじめ末端の修飾を施した状態でＤＮＡを
合成した後に、ビーズに結合してもかまわない。このよ
うな過程を経て、ＤＮＡが表面に共有結合した状態のビ
ーズは、そのＤＮＡとの相補鎖に対してハイブリダイゼ
ーションを行うことができる。
【００２２】図３は、ビーズによって異なる処理をする
例を示す図である。たとえば、ビーズＡ上に配列（5'-C
AG GCC AAG TAA CTT CTT CG-3'）の合成を、ビーズＢ上
に配列（5'-TCC TTC TGC ATC CTG TCG GCA-3'）の合成
を行う。ビーズＡ上の配列はルシフェラーゼ（lucifera
se）由来の遺伝子であり、通常の人が発現しているｍＲ
ＮＡ中に相補鎖は存在しない。また、ビーズＢ上の配列
は人のβアクチン遺伝子のｍＲＮＡと相補鎖になってお
り、通常の人トータルＲＮＡ中のｍＲＮＡとハイブリダ
イゼーションを行えることが判明している。βアクチン
は通常どこの細胞ででも発現しているハウスキーピング
遺伝子として広く知られている。
【００２３】このようにビーズ識別用半導体ナノ微粒子
１２で染色され、それぞれ異なるＤＮＡ１３を固定した
ビーズ１１を２種を用意し、人由来のトータルＲＮＡと
逆転写酵素を使用し、逆転写反応を行う。この際に使用
する４種類のｄＮＴＰ（デオキシヌクレオチド）の内、
１種類にビオチンで修飾したｄＵＴＰ（Biotin-11-dUTP
アマシャムファルマシア RPZ2001）を用い、逆転写反
応を行う。トータルＲＮＡの中にビーズに結合している
ＤＮＡの相補鎖が存在すれば、逆転写反応が行われ、ビ
オチン（三角形で図示）で修飾したdUTPが取り込まれ、
ビオチン修飾ＤＮＡ１４が結合されることになる。ここ
までの処理により、ビーズＢはビオチンで修飾され、ビ
ーズＡはビオチンで修飾されていないことになる。
【００２４】ここで、ビーズＡ及びビーズＢが存在する
溶液の中に、2.3nmの半導体ナノ微粒子１６をストレプ
トアビジン１５に結合したコンジュゲイトを添加する
と、ビオチン-ストレプトアビジンの結合により、ビー
ズＢには間接的に2.3nmの半導体ナノ微粒子１６が修飾
され、ビーズＡには修飾されない。
【００２５】図４は、ＵＶレーザー搭載のＦＡＣＳ（セ
ルソーサー）で測定した結果を示す図である。図でわか
るとおり、ビーズＢの方には結合したレポーターに標識
されている蛍光物質による460nmの蛍光波長が強くでて
いる。これは実験に使用したトータルＲＮＡの中にβア
クチン遺伝子のｍＲＮＡが存在することを示している。
また逆にビーズＡの方には460nmの蛍光波長がまったく
でていないことより、人由来のトータルＲＮＡにはルシ
フェラーゼ遺伝子のｍＲＮＡは発現していないことを示
している。
【００２６】さらに、少量のｍＲＮＡしか発現していな
いような遺伝子に関しては、通常ＲＴ−ＰＣＲ法により
その存在量を測定することができる。ＲＴ−ＰＣＲ法と
は、ｍＲＮＡの逆転写により作成したｃＤＮＡを元にし
て、ＰＣＲ反応を行う方法である。この方法はＰＣＲ反
応を行うことにより、少量しか発現していないｍＲＮＡ
をＤＮＡの形で増幅を行うことによりその可否を確かめ
る方法である。
【００２７】このＲＴ−ＰＣＲ法もビーズに結合してい
るＤＮＡをプライマーとして使用することにより行うこ
とも可能である。ＰＣＲ反応の際に逆転写反応の際と同
じようにビオチン修飾したdUTPを使用することにより標
識する。その後ストレプトアビジン-半導体ナノ微粒子
（粒径2.3nm）で２次標識を行うことによりＵＶレーザ
ー搭載のＦＡＣＳで検出を行うことが可能である。
【００２８】図５は、ビーズ識別用とレポーター検出用
とに蛍光種を変更できる検出器の概略を示す図である。
ここまでで使用してきた半導体ナノ微粒子は３種類であ
るが、さらに種類を増やすことによりビーズ識別用又は
レポーター検出用に用いる蛍光の数を増やすことが可能
である。また、通常の蛍光試薬は蛍光波長が異なると蛍
光物質を励起するための励起波長も異なるために、ビー
ズ識別用とレポーター検出用の蛍光物質をあらかじめ決
めておく必要があった。しかし、半導体ナノ微粒子の場
合はＵＶレーザー２１による励起によりそれぞれの蛍光
すべてを発光させることが可能であるために、ビーズ識
別用の蛍光とレポーター検出用の蛍光を自在に入れ替え
ることが可能である。
【００２９】たとえば、ビーズの識別に蛍光１色につき
１０段階の濃度を識別可能であるとすると、ビーズ識別
用に２色使用した場合は１００種類のビーズを識別可能
である。そして、ＵＶレーザーの励起により各半導体ナ
ノ微粒子から発光される蛍光の波長が５段階に切り分け
可能とすると、図５に示すようにビーズを使用したアッ
セイ方法は４種類存在することになる。すなわち、設定
１においては、ビーズ識別用に４種類の蛍光を用いて１
００００種類のビーズを識別し、レポーター検出用に１
種類の蛍光を用いて１種類のレポーターを検出する。設
定２においては、ビーズ識別用に３種類の蛍光を用いて
１０００種類のビーズを識別し、レポーター検出用に２
種類の蛍光を用いて２種類のレポーターを検出する。設
定３においては、ビーズ識別用に２種類の蛍光を用いて
１００種類のビーズを識別し、レポーター検出用に３種
類の蛍光を用いて３種類のレポーターを検出する。設定
４においては、ビーズ識別用に１種類の蛍光を用いて１
０種類のビーズを識別し、レポーター検出用に４種類の
蛍光を用いて４種類のレポーターを検出する。このよう
に、１つのハードウェア構成に対してソフトウェア的な
制御を施すだけで、それぞれの設定に可変可能である。
【００３０】この応用例としては、たとえばＳＮＰ特定
用として、判定はオンオフだけでもよいが、ビーズの種
類が多量に必要な場合は設定１を使用し、判定を行いた
い部分は少量であるが、４つの検体に対して同時にアッ
セイを行いたい場合は設定４を使用すればよいことにな
る。なお、本発明は上記実施の形態に限定されるもので
はない。ビーズ表面にＤＮＡを結合するという場合のビ
ーズは半導体ナノ微粒子でもよい。また、本発明のフロ
ーサイトメータは、コンピュータを本フローサイトメー
タとして機能させるためのプログラムでも実現される。
このプログラムは、コンピュータで読み取り可能な記録
媒体に格納されていてもよい。
【００３１】このプログラムを記録した記録媒体は、フ
ローサイトメータに装填されているＲＯＭそのものであ
ってもよいし、また、外部記憶装置としてＣＤ−ＲＯＭ
ドライブ等のプログラム読取装置が設けられ、そこに記
録媒体を挿入することで読み取り可能なＣＤ−ＲＯＭ等
であってもよい。また、上記記録媒体は、磁気テープ、
カセットテープ、フロッピー（登録商標）ディスク、ハ
ードディスク、ＭＯ／ＭＤ／ＤＶＤ等、又は半導体メモ
リであってもよい。
【００３２】
【発明の効果】以上のように、本発明によれば、常温で
も化学的に安定であり、光を浴びても崩壊することなく
安定しており、なおかつ単一波長の光を照射することで
励起され複数蛍光を発光可能であってフローサイトメー
タにより識別することができるビーズ、ビーズ製造方
法、そのためのフローサイトメータ及びプログラムを提
供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】半導体ナノ微粒子の混合割合と、発光される蛍
光強度との関係を示す図である。
【図２】パラレルアレイ法によりＤＮＡを合成する方法
の概略を示す図である。
【図３】ビーズによって異なる処理をする例を示す図で
ある。
【図４】ＵＶレーザー搭載のＦＡＣＳで測定した結果を
示す図である。
【図５】ビーズ識別用とレポーター検出用とに蛍光種を
変更できる検出器の概略を示す図である。
【図６】従来のフローサイトメトリーの概略構成を示す
図である。
【図７】従来のフローサイトメータを使用した測定結果
を示す図である。
【図８】半導体ナノ微粒子（CdSe-ZnS）の蛍光波長とナ
ノ微粒子の粒径との関係を示す図である。
【符号の説明】
１１ ビーズ １２ ビーズ識別用半導体ナノ微粒子 １３ ＤＮＡ １４ ビオチン修飾ＤＮＡ １５ ストレプトアビジン １６ レポーター検出用半導体ナノ微粒子 ２１ ＵＶレーザー ３１ 管 ３２ レーザー ３３、３４ フィルター ３５、３６ ＰＭＴ ３７、３８ フォトダイオード
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｇ０１Ｎ 21/64 Ｇ０１Ｎ 33/543 ５９７ 33/543 ５９７ 33/566 33/566 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＦ (72)発明者 龍口 幸市 神奈川県横浜市中区尾上町６丁目81番地 日立ソフトウエアエンジニアリング株式会 社内 Ｆターム(参考） 2G043 AA04 BA16 CA03 DA02 DA05 EA01 EA13 EA14 FA06 GA07 GB19 HA09 KA02 KA03 KA09 LA01 LA02 NA06 4B024 AA11 AA19 CA01 CA09 CA11 HA13 HA14 4B029 AA07 AA21 AA23 BB20 CC01 CC03 CC13 FA12 FA15 4B063 QA01 QA13 QA17 QQ41 QQ42 QQ53 QR08 QR32 QR38 QR42 QR56 QR62 QR83 QS25 QS34 QX02

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 粒径が１〜１０nmである半導体ナノ微粒
    子を表面に有することを特徴とするビーズ。
  2. 【請求項２】 前記半導体ナノ微粒子は、電磁波による
    励起により複数の波長でピークを有する光を発光するよ
    うに複数の粒径のものから成ることを特徴とする請求項
    １記載のビーズ。
  3. 【請求項３】 ビーズ表面にＤＮＡを共有結合するステ
    ップと、 所望のｍＲＮＡを鋳型とし、前記ＤＮＡをプライマーと
    し、少なくとも１種類の塩基に標識を施した塩基を材料
    として逆転写反応を行ってビーズ表面に前記標識をレポ
    ーターとして導入するステップとを備えることを特徴と
    するビーズ製造方法。
  4. 【請求項４】 ビーズ表面にＤＮＡを共有結合するステ
    ップと、 所望のｍＲＮＡ又はｃＤＮＡを鋳型とし、前記ＤＮＡを
    プライマーとし、少なくとも１種類の塩基に標識を施し
    た塩基を材料としてＰＣＲを行ってビーズ表面に前記標
    識をレポーターとして導入するステップとを備えること
    を特徴とするビーズ製造方法。
  5. 【請求項５】 前記共有結合するステップは、末端に置
    換基が存在する塩基をビーズ表面に固定し、ビーズを生
    物反応器内に充填した後に、前記置換基に対してさらに
    塩基を連結結合することによりＤＮＡ合成を固相ビーズ
    上で行うことを特徴とする請求項３又は４記載のビーズ
    製造方法。
  6. 【請求項６】 サンプルを励起するＵＶレーザー光を発
    光するＵＶレーザーと、 サンプルから発光される複数の蛍光をそれぞれ検出する
    複数の蛍光検出手段と、 該蛍光検出手段からの出力信号を、ビーズ識別用とレポ
    ーター検出用とに切換える切換え手段と、を備えること
    を特徴とするフローサイトメータ。
  7. 【請求項７】 コンピュータを、 サンプルを励起するＵＶレーザー光を発光するＵＶレー
    ザーと、サンプルから発光される複数の蛍光をそれぞれ
    検出する複数の蛍光検出手段と、該蛍光検出手段からの
    出力信号を、ビーズ識別用とレポーター検出用とに切換
    える切換え手段と、を備えるフローサイトメータとして
    機能させるためのプログラム。
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