JP2000319189A

JP2000319189A - エラスターゼ阻害剤、及びこれを含有して成る老化防止用皮膚外用剤

Info

Publication number: JP2000319189A
Application number: JP11132674A
Authority: JP
Inventors: Hirotake Kiyoutani; 大毅京谷; Megumi Obayashi; 恵大林
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 1999-05-13
Filing date: 1999-05-13
Publication date: 2000-11-21
Anticipated expiration: 2019-05-13
Also published as: JP3839618B2

Abstract

(57)【要約】【課題】一定の安定した品質を有し、ヒト線維芽細胞
に由来するエラスターゼに対して高い特異性及び阻害作
用を示すエラスターゼ阻害剤を得、エラスターゼ活性の
過剰亢進による真皮エラスチンの分解促進に起因する皮
膚の老化症状の防止及び改善に対し、有効な皮膚外用剤
を提供する。【解決手段】ワレモコウ，イタドリ，ハチジョウイタ
ドリ，オオイタドリ，メリッサ，マンネンロウ，ベニバ
ナ，ショウガの各抽出物の１種又は２種以上、或いはワ
レモコウの５０容量％エタノール水溶液による抽出物
を、スチレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィー
にてエタノール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％
エタノール水溶液により溶出される画分を有効成分とし
て含有させて、エラスターゼ阻害剤を得、かかるエラス
ターゼ阻害剤の１種又は２種以上を外用剤基剤に含有さ
せて、老化防止用皮膚外用剤とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヒト線維芽細胞の
産生するエラスターゼに対し、特異的且つ高い活性阻害
作用を有するエラスターゼ阻害剤、及びこれを含有して
成る、皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用
剤に関する。さらに詳しくは、ワレモコウ，イタドリ，
ハチジョウイタドリ，オオイタドリ，メリッサ，マンネ
ンロウ，ベニバナ，ショウガの各抽出物の１種又は２種
以上、或いはワレモコウ抽出物の分画物を含有して成る
エラスターゼ阻害剤、及びこれを含有する老化防止用皮
膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】エラスチンは、動脈，腱，皮膚などの伸
展性に富んだ組織に見られる構成タンパク質であり、エ
ラスターゼにより分解可溶化される。エラスターゼはセ
リンプロテアーゼに類別され、膵臓，白血球，線維芽細
胞等に由来するものが知られている。かかるエラスター
ゼの過剰発現或いは活性化によるエラスチンの過度の分
解は、肺気腫，肺線維症，気管支炎，気管支拡張症，肺
炎，リウマチ関節炎，心筋梗塞等の虚血性疾患，動脈硬
化，膵炎，腎炎，歯周炎，皮膚疾患などの原因となると
考えられている。そこで、過剰に亢進されたエラスター
ゼ活性を抑制するべく、種々のエラスターゼ阻害剤の検
索がなされている。

【０００３】たとえば、ヒト好中球由来のエラスターゼ
に対しては、イミノ誘導体（特開平７−４１４５９），
p-グアニジノ安息香酸フェニルエステル誘導体（特開平
７−１７３０６２），アゼチジノン誘導体（特開平７−
２４２６２４）等が、ヒト白血球由来エラスターゼに対
しては、β-ケト酸誘導体（特開平７−１７３０６
１），ヒドロキサム酸誘導体（特開平７−１７３１２
７），4H-3,1-ベンズオキサジン-4-オン（特開平７−３
１６０５６，同８−１３４０５０）等が開示されてい
る。

【０００４】また、特に皮膚組織に由来するエラスター
ゼの活性を阻害するものとしては、トウダイグサ科植物
（特開平９−８７１３６），セプリク（特開平９−８７
１３７），ツバキ科スチマ属植物（特開平９−９５４２
０），フトモモ科ベッケア属植物（特開平９−９５４３
６），クララ（特開平１０−１７４６０），カユアンギ
ン，ムリコ・ボロン（特開平１０−２９９２５），ジャ
ケツイバラ属植物（特開平１０−２９９２６），ミソハ
ギ科ウドフォルディア属植物（特開平１０−３６２８
１），シソ科スファケレ属植物（特開平１１−９２３５
４）等の抽出物や、ニワトコ抽出物由来のポリペプチド
等、植物由来のものが多く提案されている。

【０００５】しかしながら、上記したようなエラスター
ゼ阻害剤には、好中球や白血球に由来するエラスターゼ
に対して特異性を示すものの、線維芽細胞由来のエラス
ターゼに対する特異性の低いものもあり、その他、特殊
な植物を原料とするため、一定品質のものを入手するの
が困難であるといった問題があった。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、一定品質のものを容易に入手することができ、さら
にヒト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い
特異性及び阻害作用を示し、エラスターゼ活性の過剰亢
進に起因する真皮マトリックスの弾性低下を有効に防止
することのできるエラスターゼ阻害剤を得ることを目的
とした。またさらに、真皮エラスチンの分解促進に基づ
く皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用剤を
提供することを目的とした。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するべ
く種々検討した結果、本発明者らは、ワレモコウ，イタ
ドリ，ハチジョウイタドリ，オオイタドリ，メリッサ，
マンネンロウ，ベニバナ，ショウガの各抽出物に高いエ
ラスターゼ阻害活性が存することを見いだし、本発明を
完成するに至った。

【０００８】すなわち本発明においては、ワレモコウ
（Sanguisorba officinalis L.），イタドリ（Polygonu
m cuspidatum Sieb. et Zucc.），ハチジョウイタドリ
（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. var. hachidy
oense Ohwi），オオイタドリ（Polygonum sachalinense
Fr. Schm.），メリッサ（Melissa officinalis L.），
マンネンロウ（Rosmarinus officinalis L.），ベニバ
ナ（Carthamus tinctorius L.），ショウガ（Zingiber
officinale Roscoe）の各植物抽出物の１種又は２種以
上、或いはワレモコウ（Sanguisorba officinalis L.）
の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、スチレ
ンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノ
ール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノール
水溶液により溶出される画分を有効成分として、担体又
は基剤に含有させてエラスターゼ阻害剤とする。さら
に、前記エラスターゼ阻害剤より１種又は２種以上を選
択して外用剤基剤に含有させ、老化防止用皮膚外用剤を
得る。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明において用いるワレモコウ
（Sanguisorba officinalis L.）は、日本各地に自生す
るバラ科に属する多年草で、根部を採取し乾燥したもの
が生薬「チユ」として用いられる。

【００１０】次いで、本発明において用いるイタドリ
（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.）は、日本各
地の山野に自生するタデ科に属する多年草で、根は生薬
「虎杖根」として用いられる。近縁植物であるハチジョ
ウイタドリ（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. va
r. hachidyoense Ohwi）及びオオイタドリ（Polygonums
achalinense Fr. Schm.）をも用いることができる。

【００１１】次に、本発明において用いるメリッサ（Me
lissa officinalis L.）は、シソ科に属し、ヨーロッパ
南部地中海，黒海，小アジアに自生又は栽培される多年
草である。

【００１２】続いて、本発明において用いるマンネンロ
ウ（Rosmarinus officinalis L.）は、シソ科に属する
常緑低木で、ヨーロッパ南部において多く栽培されてい
る。

【００１３】また、本発明において用いるベニバナ（Ca
rthamus tinctorius L.）は、日本でも栽培されるキク
科に属する２年草で、花は生薬「コウカ」として用いら
れる。

【００１４】最後に、本発明において用いるショウガ
（Zingiber officinale Roscoe）は、ショウガ科に属す
る多年草で、世界各国で栽培されている。根茎を乾燥し
たものは、生薬「ショウキョウ」として用いられる。

【００１５】本発明においては、上記各植物の溶媒によ
る抽出物を用いる。抽出には、上記各植物の花，葉，
茎，果実，根茎，根等の各部位を用いることができ、ま
た全草又は全木を用いてもよいが、それぞれ生薬として
用いられる部位、すなわちワレモコウについては根及び
根茎、イタドリ，ハチジョウイタドリ及びオオイタドリ
については根、メリッサ及びマンネンロウについては
葉、ベニバナについては花、ショウガについては根茎を
用いることが好ましい。

【００１６】上記植物は生のまま抽出操作に供してもよ
いが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理
を行った後抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶
媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行った
り、抽出溶媒中でホモジナイズすることもできる。抽出
温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度
とするのが適切である。抽出時間は、４時間〜１４日間
程度とするのが適切である。

【００１７】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール，ブタノ
ール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール，プ
ロピレングリコール，ジプロピレングリコール，1,2-ペ
ンタンジオール，グリセリン等の多価アルコール、エチ
ルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エ
チル，酢酸ブチル等のエステル類、アセトン，エチルメ
チルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒、及びこれ
らの２種以上による混合溶媒が好ましく用いられ、５０
容量％のエタノール水溶液が特に好ましい。また、生理
食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用い
てもよい。

【００１８】上記植物の抽出物は、そのままでもエラス
ターゼ阻害剤に添加できるが、濃縮，乾固したものを水
や極性有機溶媒に再度溶解したり、或いはエラスターゼ
阻害作用を損なわない範囲で脱色，脱臭等の精製処理を
行った後に添加してもよい。また保存のためには、精製
処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いること
が好ましい。

【００１９】さらに本発明においては、ワレモコウ根部
の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、スチレ
ンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノ
ール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノール
水溶液により溶出される画分を用いることができる。ス
チレンポリマー製の吸着ゲルとしては、ＭＣＩＧＥＬ
（三菱化学株式会社製）等が好ましく使用できる。

【００２０】本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、上記
各植物の抽出物の１種又は２種以上、或いはワレモコウ
抽出物の分画物をそのまま用い、又は担体に添加して得
る。担体としては、水、エタノール，プロパノール，ブ
タノール等低級アルコールなどの極性有機溶媒、これら
の混合液といった液状担体、各種乳濁液、各種クリーム
基剤、軟膏基剤、ゲル、粉体などが用いられる。従っ
て、本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、ローション
剤，懸濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏剤，ゲル剤，粉末
剤等の形態で提供することができる。また、リポソーム
やマイクロカプセルに内包させた状態とすることもでき
る。なお、本発明に係るエラスターゼ阻害剤には、本発
明の特徴を損なわない範囲で、抗酸化剤，防菌防黴剤，
紫外線吸収剤等の安定化剤や、吸収促進剤等を添加する
こともできる。

【００２１】さらに本発明においては、上記に記載した
エラスターゼ阻害剤の１種又は２種以上を外用剤基剤に
含有させて、皮膚の老化防止及び改善に有効な皮膚外用
剤を提供する。かかる皮膚外用剤は、ローション剤，懸
濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏剤，ゲル剤等の形状で提
供することができる。また、化粧水，乳液，クリーム，
パック剤等皮膚用の化粧料や、化粧下地用ローション又
はクリーム、乳液状，クリーム状，軟膏状，固形状の各
種ファンデーション等のメイクアップ化粧料、日焼け止
めローション又はクリーム等の日焼け止め化粧料、ハン
ドローション又はクリーム，レッグローション又はクリ
ーム，ボディローション又はクリーム等のボディ化粧料
などとしても提供することができる。

【００２２】本発明に係る老化防止用皮膚外用剤におい
ても、上記エラスターゼ阻害剤の他に、本発明の特徴を
損なわない範囲で、各種油分，界面活性剤，低級一価ア
ルコール，保湿剤，多価アルコール，細胞賦活剤，抗酸
化剤，美白剤，紫外線吸収剤，防菌防黴剤，顔料，色素
類，香料等、一般的な皮膚外用剤添加成分を加えること
ができる。

【００２３】

【実施例】さらに実施例により、本発明の特徴について
詳細に説明する。

【００２４】［実施例１〜実施例６］ワレモコウ根
部，イタドリ根部，メリッサ葉，マンネンロウ葉，ベニ
バナ花及びショウガ根茎をそれぞれ乾燥したもの各１０
０ｇを粉砕し、５０容量％エタノール水溶液９００ｍｌ
中に加えて、２５℃にて７日間撹拌抽出を行った。抽出
液をろ過してろ液を回収し、それぞれ実施例１〜実施例
６とした。

【００２５】［実施例７］上記実施例１に係るワレモ
コウ根部の５０容量％エタノール水溶液による抽出物
を、ＭＣＩＧＥＬ（三菱化学株式会社製）を用いたカ
ラムクロマトグラフィーにかけ、エタノール−水混合溶
媒により分画した。そして、３０容量％エタノール水溶
液により溶出される画分を回収して、実施例７とした。

【００２６】上記実施例１〜実施例７について、エラス
ターゼ阻害率を測定した。まず、ヒト線維芽細胞を５(w
/v)％の牛胎仔血清を含有するダルベッコ基礎培地（Ｄ
ＭＥＭ）に播種し、３７℃で２４時間培養してコンフル
エントとした後、０．５(w/v)％トリトンＸ-100水溶液
にて細胞を溶解し、酵素液とした。前記酵素液に、合成
基質であるサクシニル-アラニル-アラニル-アラニル-p-
ニトロアニリド（最終濃度１．２ｍＭ）及び試料（実施
例１〜実施例７）を添加し、３７℃で２時間インキュベ
ートして、生成するp-ニトロアニリドの量を４０５ｎｍ
における吸光度を測定して求めた。この際試料の濃度と
しては、実施例１〜実施例６については最終濃度にして
１００μｇ／ｍｌ、実施例７については最終濃度にして
５０μｇ／ｍｌとした。エラスターゼ阻害率（％）は、
試料を添加した場合の前記吸光度（Ａ_s）を、試料を添
加しない対照について同様に測定した吸光度（Ａ_c）で
除した値（Ａ_s／Ａ_c）を求め、（１−Ａ_s／Ａ_c）×１０
０により算出した。結果は表１に示した。

【００２７】

【表１】

【００２８】表１より明らかなように、本発明の実施例
１〜実施例６は、それぞれ１００μｇ／ｍｌの低濃度で
２０％以上の有意なエラスターゼ阻害率を示していた。
特に実施例１は、６８．７％と高い阻害率を示してい
た。また実施例７については、５０μｇ／ｍｌの濃度
で、７４．０％と非常に高い阻害率が認められていた。
なお、今回エラスターゼ阻害率の評価に用いたヒト線維
芽細胞由来のエラスターゼは、紫外線曝露により放出さ
れるサイトカインであるインターロイキン-1αにより活
性化されることから、この酵素活性に対し阻害作用を有
する本発明の実施例１〜実施例７は、紫外線による皮膚
の光老化の防止，改善に有効であることが示唆される。

【００２９】続いて、本発明に係る老化防止用皮膚外用
剤についての実施例の処方を示す。

【００３０】［実施例８］皮膚老化防止用ローション剤（１）エタノール１０．００（重量％）（２）ヒドロキシエチルセルロース１．００（３）エラスターゼ阻害剤（実施例１）０．０２（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（５）精製水８８．８８製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。

【００３１】［実施例９］皮膚老化防止用乳剤（１）ステアリン酸０．２０（重量％）（２）セタノール１．５０（３）ワセリン３．００（４）流動パラフィン７．００（５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸１．５０エステル（６）酢酸トコフェロール０．２５（７）グリセリン５．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）トリエタノールアミン１．００（10）精製水８０．４０（11）エラスターゼ阻害剤（実施例２）０．０５製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃に保つ。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。

【００３２】［実施例１０］皮膚老化防止用ゲル剤（１）ジプロピレングリコール１０．００（重量％）（２）カルボキシビニルポリマー０．５０（３）水酸化カリウム０．１０（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（５）精製水８９．２５（６）エラスターゼ阻害剤（実施例３）０．０５製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加，混
合する。

【００３３】［実施例１１］皮膚老化防止用クリーム（水中油型）（１）ミツロウ６．０（重量％）（２）セタノール５．０（３）還元ラノリン８．０（４）スクワラン２７．５（５）グリセリル脂肪酸エステル４．０（６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル２．０（７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン５．０モノラウリン酸エステル（８）プロピレングリコール５．０（９）パラオキシ安息香酸メチル０．１（10）精製水３７．３（11）エラスターゼ阻害剤（実施例４）０．１製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(8)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に
前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサー
にて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(11)を添加，混合
する。

【００３４】［実施例１２］皮膚老化防止用水中油型乳剤性軟膏（１）白色ワセリン２５．００（重量％）（２）ステアリルアルコール２５．００（３）グリセリン１２．００（４）ラウリル硫酸ナトリウム１．００（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（６）精製水３６．８９（７）エラスターゼ阻害剤（実施例７）０．０１製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して均一とし、
７５℃に加熱する。一方、(5)を(6)に溶解して７５℃に
加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後
４０℃にて(7)を添加，混合する。

【００３５】［実施例１３］日焼け止め用油中水型クリーム（１）スクワラン３８．００（重量％）（２）グリセリルジイソステアリン酸エステル３．００（３）パラメトキシ桂皮酸2-エチルヘキシル３．００（４）オキシベンゾン１．５０（５）有機変性ベントナイト１．５０（６）シリコーン処理酸化チタン３．００（７）1,3-ブチレングリコール５．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）エラスターゼ阻害剤（実施例５）０．０５（10）エラスターゼ阻害剤（実施例６）０．０５（11）精製水４４．７０（12）香料０．１０製法：(1)〜(5)を混合，加熱して溶解し、(6)を分散し
て７０℃とし、油相とする。一方、(8)を(7)に溶解して
(9)，(10)とともに(11)に加えて混合し、７０℃に加熱
する。前記油相に水相を添加し、ホモジナイザー処理し
て乳化後冷却し、４０℃にて(12)を添加，混合する。

【００３６】［実施例１４］メイクアップベースクリーム（１）ステアリン酸１２．００（重量％）（２）セタノール２．００（３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル２．５０（４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸２．００エステル（５）プロピレングリコール１０．００（６）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（７）水酸化カリウム０．３０（８）精製水６９．４７（９）酸化チタン１．００（10）ベンガラ０．１０（11）黄酸化鉄０．４０（12）エラスターゼ阻害剤（実施例２）０．０３（13）香料０．１０製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(5)〜(8)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(9)〜(11)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(12)，(13)
を添加，混合する。

【００３７】［実施例１５］乳液状ファンデーション（１）ステアリン酸２．００（重量％）（２）スクワラン５．００（３）ミリスチン酸オクチルドデシル５．００（４）セタノール１．００（５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル９．００（６）1,3-ブチレングリコール６．００（７）水酸化カリウム０．１０（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水５３．５９（10）酸化チタン９．００（11）タルク７．４０（12）ベンガラ０．５０（13）黄酸化鉄１．１０（14）黒酸化鉄０．１０（15）エラスターゼ阻害剤（実施例１）０．０１（16）香料０．１０製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(6)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(10)〜(14)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(15)，(16)
を添加，混合する。

【００３８】［実施例１６］ハンドクリーム（１）セタノール４．００（重量％）（２）ワセリン２．００（３）流動パラフィン１０．００（４）グリセリルモノステアリン酸エステル１．５０（５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル２．５０イソステアリン酸エステル（６）酢酸トコフェロール０．５０（７）グリセリン２０．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水５９．３７（10）エラスターゼ阻害剤（実施例４）０．０２（11）エラスターゼ阻害剤（実施例７）０．０１製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(7)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて
均一に乳化し、冷却後４０℃にて(10)，(11)を添加，混
合する。

【００３９】上記本発明に係る老化防止用皮膚外用剤に
ついての実施例のうち、実施例８〜実施例１２につい
て、紫外線によるしわの発生に対する防止効果を評価し
た。なお各実施例において、配合した実施例１〜実施例
４及び実施例７のエラスターゼ阻害剤を、それぞれこれ
らにおいて溶媒として用いた５０容量％エタノール水溶
液及び３０容量％エタノール水溶液に代替したものをそ
れぞれ比較例１〜比較例５とし、同時に評価を行った。
しわの発生防止効果は、ヘアレスマウス５匹を１群と
し、各群について実施例及び比較例各０．２ｇをそれぞ
れ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／ｃｍ²／週の長波長紫
外線（ＵＶＡ）を５０週間照射し、ヘアレスマウスにお
けるしわの発生状況を観察し、表２に示す判定基準に従
って点数化して行った。この際、精製水のみを塗布した
群を対照とした。結果は各群の平均値を算出し、ＵＶＡ
照射日数との関係により表３に示した。

【００４０】

【表２】

【００４１】

【表３】

【００４２】表３に示されるように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を超える頃には形成された
しわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深いしわ
の発生が認められていた。これに対し本発明の実施例塗
布群では、いずれにおいても有意なしわの発生の抑制が
認められ、５０週後において微小ないし軽微なしわが認
められた程度であった。特に、実施例１又は実施例７を
含有する実施例８及び実施例１２塗布群においては、顕
著なしわの発生抑制が認められていた。一方比較例塗布
群では、酢酸トコフェロールを含有する比較例２塗布群
で発生したしわの程度の軽減が若干認められた他は、有
意なしわの発生抑制或いは軽減は認められなかった。

【００４３】次に、女性パネラーによる使用試験を行っ
た。この際にも、各実施例において配合した実施例１〜
実施例７のエラスターゼ阻害剤を、５０容量％エタノー
ル水溶液又は３０容量％エタノール水溶液に代替したも
のを比較例１〜比較例９とした。使用試験は、２０才代
〜５０才代の通常戸外で作業する女性２０名を１群と
し、５月中旬〜６月中旬の１カ月間、各群に実施例及び
比較例のそれぞれをブラインドにて１日２回使用させ、
使用前後の皮膚のしわ及び皮膚弾性の変化を観察して行
った。皮膚のしわについては写真撮影後の目視評価及び
レプリカ法により評価し、皮膚弾性についてはキュート
メーターによる測定により評価した。結果は、各パネラ
ーについて使用後の皮膚のしわ及び皮膚弾性を使用前と
比べて、「改善」，「やや改善」，「変化なし」，「や
や悪化」，「悪化」の５段階にて評価し、各評価を得た
パネラー数にて表４に示した。

【００４４】

【表４】

【００４５】表４より明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、皮膚のしわ及び皮膚弾性
の悪化傾向を認めたパネラーはおらず、皮膚のしわにつ
いては６５％以上、皮膚弾性については９０％以上のパ
ネラーにおいて、改善又はやや改善されたと評価されて
いた。特に、実施例１又は実施例７のエラスターゼ阻害
剤を含有する実施例８，実施例１２，実施例１５及び実
施例１６、紫外線吸収剤を併用する実施例１３の各使用
群で、高い改善傾向が認められた。これに対し比較例使
用群では、皮膚のしわ及び皮膚弾性について明確に改善
されたと評価されたパネラーは存在せず、皮膚のしわに
ついては８５％以上、皮膚弾性については７０％以上の
パネラーで症状の改善が見られなかった。また、皮膚の
しわについては１０〜４０％、皮膚弾性については１５
〜５５％のパネラーにおいて、各症状の悪化傾向を認め
ていた。

【００４６】なお、本発明の実施例８〜実施例１６につ
いては、上記の使用期間中に含有成分の析出，分離，凝
集，変色，変臭といった状態変化は全く見られなかっ
た。また各実施例使用群において、皮膚刺激性反応や皮
膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。

【００４７】

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、ヒ
ト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い特異
性及び阻害作用を示し、紫外線曝露等により惹起される
エラスターゼ活性の過剰亢進に起因する真皮マトリック
スの弾性低下を有効に防止し得るエラスターゼ阻害剤を
得ることができた。なお、本発明に係るエラスターゼ阻
害剤の原料とする植物は容易に入手することができるた
め、一定の品質のものを安定供給することが可能であ
る。また本発明により、紫外線曝露等による真皮エラス
チンの分解促進に基づく皮膚の老化症状の防止及び改善
において、有効な皮膚外用剤を提供することができた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｋ 7/42 7/42 7/48 7/48 Ａ６１Ｐ 17/00 31/00 ６１７Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC342 AC402 AC422 AC472 AC482 AC542 AC782 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE11 EE12 EE17 4C088 AB26 AB38 AB43 AB51 AB81 AC01 AC03 AC04 AC05 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 CA04 CA14 MA07 MA63 NA14 ZA36 ZA40 ZA45 ZA59 ZA66 ZA67 ZA81 ZA89 ZB15 ZC20

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ワレモコウ（Sanguisorba officinalis
L.），イタドリ（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zuc
c.），ハチジョウイタドリ（Polygonum cuspidatum Sie
b. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi），オオイタドリ
（Polygonum sachalinense Fr. Schm.），メリッサ（Me
lissa officinalis L.），マンネンロウ（Rosmarinus o
fficinalis L.），ベニバナ（Carthamus tinctorius
L.），ショウガ（Zingiber officinale Roscoe）の各植
物抽出物の１種又は２種以上を含有して成る、エラスタ
ーゼ阻害剤。
【請求項２】ワレモコウ（Sanguisorba officinalis
L.）の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、ス
チレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエ
タノール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノ
ール水溶液により溶出される画分を含有して成るエラス
ターゼ阻害剤。
【請求項３】請求項１及び請求項２に記載のエラスタ
ーゼ阻害剤より選択した１種又は２種以上を含有して成
る、老化防止用皮膚外用剤。