ITMI20011632A1 - Composizione solida contenente spore di batteri non patogeni del genere bacillus - Google Patents

Description

Descrizione dell’invenzione che ha per titolo:

“Composizione solida contenente spore di batteri non patogeni del genere Bacillus"

La presente invenzione concerne una composizione solida contenente spore di batteri non patogeni, ad uso farmaceutico, nutrizionale o veterinario, in particolare una composizione contenente spore di batteri del genere Bacillus.

La formulazione delle spore per la loro somministrazione all'uomo o all'animale è difficile e problematica in quanto, trattandosi di materiale vivente, con procedimenti non appropriati si corre il rischio di perdere una parte considerevole di principio attivo.

Sono note diverse composizioni solide a base di spore, realizzate secondo varie tecniche, quali ad esempio la liofilizzazione o lo spray drying, come pure sono note sospensioni liquide di spore o semplici miscele di spore con eccipienti convenzionali della tecnica farmaceutica, come ad esempio WO 99/49877, in cui si descrivono composizioni di spore di bacilli produttori di acido lattico per la riduzione del colesterolo.

Uno degli inconvenienti principali presentati dall'arte nota è la scarsa stabilità delle composizioni risultanti, fattore critico che non ne permette lo stoccaggio per periodi di tempo ragionevolmente lunghi e che rende necessario 1'immagazzinamento e la conservazione della composizione prima del suo uso a basse temperature al fine di preservare quanto più possibile inalterate le proprietà delle spore.

Un altro inconveniente delle composizioni dell'arte nota è la bassa concentrazione di principio attivo, di spore quindi, che può essere incluso nella composizione stessa.

Sono disponibili in commercio composizioni liquide a base di spore, ad esempio la sospensione di spore di bacilli venduta da tempo con il marchio "Enterogermina". Per quanto efficace e da lungo tempo apprezzata presso i consumatori, tale sospensione non è in grado di includere una concentrazione elevatissima di principio attivo.

Scopo della presente invenzione è di fornire una composizione solida a base di spore di batteri non patogeni, qui di seguito solo "spore", che risulti semplice da produrre, maneggevole allo stoccaggio e che contenga una elevata quantità di principio attivo e stabile nel tempo.

Si è ora trovato che facendo adsorbire le spore su un'appropriata matrice, utilizzando la tecnica del letto fluido, si ottiene una forma solida di spore ad altissima concentrazione, facilmente processabile industrialmente e molto stabile.

In particolare si è trovato che tale forma solida, qui di seguito "composizione", permette la fissazione alla matrice di ima enorme quantità di spore dando origine ad una composizione solida ad alta concentrazione avente granulometria molto fine e che presenta una grande area superficiale, condizione questa che la rende particolarmente adatta al rilascio in vivo delle spore lungo tutto il tratto gastro-intestinale.

Si è inoltre trovato che la composizione è dotata di ottime proprietà di scorrevolezza ed è pertanto idonea ad essere trattata industrialmente per la sua formulazione in composizioni mono- o multi-dose, senza la necessità di essere sottoposta ad ulteriori lavorazioni.

Così, secondo uno dei suoi aspetti, l'invenzione concerne una composizione di spore di batteri non patogeni del genere Bacillus adsorbite su una matrice formata almeno da un composto adsorbente insolubile in acqua e da un derivato della cellulosa, ottenibile mediante la tecnica del letto fluido.

Più in particolare, l'invenzione concerne una composizione di spore di batteri non patogeni del genere Bacillus ottenibile mediante un procedimento che comprende coprocessare secondo la tecnica del letto fluido una sospensione liquida di dette spore con una matrice formata almeno da un composto adsorbente insolubile in acqua e da un derivato della cellulosa.

Secondo la presente invenzione, l'espressione "composto adsorbente" designa un qualsiasi composto chimico, o miscela di composti chimici, che sia commestibile e che sia dotato di proprietà adsorbenti; preferibilmente, il composto adsorbente insolubile in acqua è scelto nel gruppo che consiste in argille, caolino, silici colloidali, magnesio alluminio silicato, derivati della cellulosa e bentonite, il caolino essendo particolarmente vantaggioso.

L'espressione "derivato della cellulosa" designa secondo l'invenzione un qualsiasi derivato commestibile della cellulosa, quali ad esempio la cellulosa microcristallina, la metilcellulosa, l'idrossipropil-metil-cellulosa, ecc., di cui sono disponibili vaste gamme commerciali, la cellulosa microcristallina essendo particolarmente preferita.

È inteso che, anche laddove non espressamente indicato, tutti i componenti della composizione dell'invenzione sono di tipo commestibile per l'uomo e/o per l'animale. In particolare, la natura e la qualità dei componenti saranno scelti in funzione dell'utilizzo ultimo della composizione e saranno quindi del tipo e del grado di purezza adatti e compatibili con gli impieghi finali della composizione; quindi, a titolo illustrativo, quando la composizione è destinata alla terapia farmacologica, i componenti dovranno essere di tipo e di grado di purezza farmaceuticamente accettabile, e così via.

Le quantità relative dei due componenti formanti la matrice possono variare entro un ampio intervallo, ad esempio il rapporto in peso tra composto adsorbente e derivato della cellulosa può essere compreso tra 90:10 e 10:90, preferibilmente tra 70:30 e 30:70, ancor più preferibilmente tra 60:40 e 40:60, i due componenti essendo vantaggiosamente presenti nella matrice in un rapporto in peso di circa 50:50.

In ogni caso, la matrice dell'invenzione è una miscela insolubile in acqua e inerte verso le spore, dove per "inerte verso le spore" si intende che non interferisce negativamente con le spore.

Le spore che possono essere impiegate nella presente invenzione sono preferibilmente spore di batteri non patogeni particolarmente utili in campo farmaceutico, nutrizionale e/o veterinario. La composizione della presente invenzione può comprendere spore di un solo Bacillus o spore di Bacilli diversi in miscela tra loro.

Secondo un aspetto preferito, la composizione deH'invenzione comprende spore di Bacillus Subtilis o di Bacillus Clausii.

Secondo un aspetto particolarmente preferito, la composizione dell'invenzione comprende una miscela di quattro ceppi di spore di Bacillus clausii (in precedenza sotto la denominazione tassonomica di Bacillus subtilis) depositati ai sensi del Trattato di Budapest presso il CNCM Institut Pasteur con i seguenti numeri d'ordine: 1-273, 1-274, 1-275, 1-276. Alternativamente, la composizione dell'invenzione può comprendere solo alcuni dei quattro ceppi di spore sopra menzionati.

Per la preparazione della composizione, si utilizza la tecnica del letto fluido ben nota all'esperto del ramo.

Secondo questa tecnica, si spruzza una sospensione acquosa contenente le spore, qui di seguito "sospensione madre", su una matrice, ottenuta per miscelazione di almeno un composto adsorbente e un derivato della cellulosa e mantenuta in agitazione mediante un flusso di aria durante tutta la durata del processo, in un impianto opportuno quale ad esempio un granulatore a letto fluido.

La sospensione madre è una sospensione acquosa ad altissima concentrazione di spore. Generalmente, la sospensione madre che può contenere fino a 20 miliardi di spore per grammo di soluzione e che deve essere di norma conservata in forma congelata per via della sua alta instabilità alla temperatura ambiente. In questo caso particolare, la sospensione madre sarà scongelata poco prima dell'uso nel procedimento della presente invenzione.

Alternativamente la sospensione madre può essere una sospensione estemporanea di spore conservate in forma liofilizzata in acqua.

La temperatura del flusso di aria è compresa tra la temperatura ambiente e la temperatura massima sopportata dalle spore; secondo un aspetto preferito, il procedimento è operato a una temperatura compresa tra 40 e 90°C, vantaggiosamente tra 60 e 80°C.

Terminato lo spruzzo e l'adsorbimento della sospensione madre sulla matrice, la composizione risultante è ulteriormente tenuta in sospensione mediante il flusso di aria riscaldata fino al raggiungimento dell'umidità residua desiderata, preferibilmente, fino a che l'umidità residua è inferiore al 3%, vantaggiosamente inferiore o pari al 2%.

La durata del processo è determinata dalla quantità di sospensione madre da spruzzare, dalla velocità dello spruzzo e anche dalla temperatura del flusso di aria. Di norma, per il trattamento di quantità intorno ai 30 kg di matrice sono necessarie circa due ore per completare il processo.

Il processo per la preparazione della composizione costituisce un ulteriore oggetto della presente invenzione.

Come indicato sopra, la composizione dell'invenzione può essere ottenuta in forma altamente concentrata e presentare una concentrazione compresa ad esempio tra 1 e 20 miliardi di spore per grammo di composizione finale, vantaggiosamente di circa 10 miliardi di spore per grammo, rendendo così possibile la somministrazione di consistenti quantità di spore in piccoli volumi. Questa importante proprietà rende la composizione particolarmente versatile e adatta per esempio ad essere inclusa in piccole capsule, o ad essere facilmente incorporata in nutrimenti o in altre composizioni. Se desiderato, la composizione può anche essere somministrata dopo essere stata risospesa in acqua o altri liquidi opportuni.

La composizione dell'invenzione è risultata essere stabile, mantenendo inalterato il suo titolo, per lungo tempo anche a temperature superiori alla temperatura ambiente.

Come detto, la composizione dell'invenzione presenta una grande area superficiale grazie ad una granulometria molto fine, fino ad arrivare al 90% delle particelle della composizione aventi una granulometria inferiore o pari a 100 micron, preferibilmente con il 60% delle particelle della composizione aventi una granulometria inferiore o pari a 50 micron.

La composizione è inoltre priva di odore e di sapore e può essere così aggiunta ad alimenti e bevande o ad altre composizioni senza alterarne il sapore originale.

Se desiderato, la composizione può contenere additivi opportunamente scelti in funzione del consumatore finale, della modalità di assunzione o del tipo di trattamento ulteriore a cui la si desidera sottoporre, con l'unica condizione di essere inerti verso le spore.

Ad esempio, potranno essere inclusi agenti lubrificanti, diluenti, leganti, ecc., o quant'altro si desidera per aumentarne ulteriormente la scorrevolezza o per esaltarne altre particolari proprietà fisiche al fine di facilitare le eventuali lavorazioni ulteriori della composizione. Ad esempio, qualora si desideri incapsulare in capsule di gelatina dura la composizione, può essere utile aggiungere del magnesio stearato e/o della cellulosa microcristallina.

Alternativamente o congiuntamente agli additivi di cui sopra, potranno essere inclusi degli aromatizzanti nel caso in cui si desideri conferire alla composizione particolari profumi o sapori.

Gli eventuali ulteriori componenti possono essere aggiunti alla matrice prima dell'adsorbimento delle spore o più semplicemente alla composizione finale ottenuta dal procedimento dell'invenzione.

Se desiderato, la composizione può essere ulteriormente sottoposta a lavorazioni; la composizione può quindi essere granulata secondo le tecniche note, nel caso in cui si desideri procedere alla sua compressione o essa può venire trattata in modo da ottenere composizioni a rilascio controllato secondo, le tecniche ben note, per modificarne il tempo di rilascio nel'intestino.

La composizione può essere assunta in quantità variabili a seconda delle necessità per cui è somministrata. In generale, per la somministrazione nell'uomo, si può prevedere l'assunzione di 10 miliardi di spore o anche più, al giorno, vantaggiosamente da 1 a 8 miliardi di spore al giorno, ad esempio 2, 4 o 6 miliardi di spore al giorno, la somministrazione essendo possibile in una volta sola o in modo ripetuto.

Per la sua somministrazione la composizione dell'invenzione può essere eventualmente formulata in unità di dosaggio; grazie alle sue qualità, la composizione è ad esempio facilmente formulabile in capsule di gelatina, quali capsule opercolate di gelatina dura formato 0, 1 o 2, scelte dal tecnico del ramo a seconda del dosaggio.

Le unità di dosaggio, in particolare le unità di dosaggio farmaceutiche contenenti la composizione dell'invenzione costituiscono un ulteriore oggetto della presente invenzione. Tali unità di dosaggio possono ad esempio contenere da 1 a 10 miliardi di dette spore, vantaggiosamente da 2 a 5 miliardi, da 50 a 500 mg, ad esempio 50 a 250 mg, di caolino e da 50 a 600 mg, ad esempio da 50 a 300 mg, di cellulosa microcristallina.

Tali unità di dosaggio possono essere somministrate una o più volte al giorno.

Trattandosi di materiale vivente, si comprenderà che il titolo microbiologico è soggetto a variazioni; di conseguenza un eccesso di spore del 10-20% rispetto al teorico è preferibilmente contemplato nella preparazione della composizione. Considerando l'assenza di tossicità del prodotto tale eccesso eventuale non crea tuttavia alcun problema. Se desiderato, la composizione può essere sottoposta a ulteriori lavorazioni; per modificarne ad esempio il tempo di transito neH'intestino, essa può venire trattata in modo da ottenere composizioni a rilascio controllato, secondo le tecniche ben note.

L'uso della composizione dell'invenzione in campo farmaceutico, nutrizionale e o veterinario è un ulteriore oggetto della presente invenzione.

La composizione dell'invenzione, esercita una azione benefica sull'intestino e sul sistema immunitario.

Vantaggiosamente per esercitare tale effetto sull'intestino e sul sistema immunitario si utilizza la composizione contenente spore di Bacillus subtilis o di Bacillus clausii, preferibilmente la composizione che contiene tutti o solo alcuni dei 4 ceppi di cui sopra. Secondo un altro dei suoi aspetti quindi l'invenzione concerne l'uso della composizione dell'invenzione per il trattamento e la profilassi del dismicrobismo intestinale, per il ripristino della flora microbica intestinale e per il trattamento delle disvitaminosi da antibiotici e chemioterapici.

Secondo un ulteriore aspetto, l'invenzione concerne l'uso della composizione dell'invenzione come immunomodulatore /immunostimolante per il trattamento di malattie caratterizzate da immunocompromissione, quali ad esempio il mieloma multiplo, la leucemia linfoblastica acuta, le allergie alimentari e le infezioni ricorrenti dell'apparato respiratorio.

Si è inoltre trovato che la composizione dell'invenzione, in particolare quando contiene spore di Bacillus subtilis o di Bacillus clausii, vantaggiosamente quando contiene tutti o solo alcuni dei 4 ceppi sopra citati, è utile come coadiuvante nel trattamento dell'Helicobacter pylori di cui ne facilita l'eradicazione e, in particolare, può essere impiegata per migliorare l'efficacia della terapia antibiotica abitualmente adottata nel trattamento delHelicobacter pylori.

L'uso della composizione per la preparazione di un medicamento coadiuvante della terapia antibiotica per l'eradicazione dell' Helicobacter pylori costituisce un ulteriore aspetto della presente invenzione.

Gli esempi che seguono illustrano l'invenzione senza limitarla in alcun modo.

ESEMPIO 1

In un impianto di processo a letto fluido, si caricano 15 kg di caolino di grado farmaceutico e 15 kg di cellulosa microcristallina di grado farmaceutico e si preriscalda la miscela per alcuni minuti con un flusso di aria a 60°C. Sotto cappa a flusso laminare, si caricano in un serbatoio dotato di pompa peristaltica collegata a ugelli di 1,2 mm di diametro e collegati all'impianto a letto fluido, 15 kg di una sospensione acquosa di una miscela di spore di Bacillus clausii 1-273, 1-274, 1-275 e 1-276 (sospensione madre) alla concentrazione di 20 miliardi di spore per grammo. Si spruzza quindi la sospensione di spore sulla miscela riscaldata con una pressione di 2 bar e ima velocità di 135 ml/minuto mantenendo in sospensione la miscela con aria a 60°C. Dopo circa 110 minuti si arresta il sistema, si lascia raffreddare e si recupera la composizione. Si ottiene così una composizione avente le seguenti caratteristiche:

- titolo di 10 miliardi di spore/g;

- umidità residua < 2%;

- granulometria: 90% delle particelle < 100 micron

60% delle particelle < 50 micron

ESEMPIO 2

A 240 g di una composizione dell'Esempio 1 vengono aggiunti 57 g di cellulosa microcristallina e 3 g di magnesio stearato. Dopo miscelazione la composizione risultante è ripartita in capsule opercolate di gelatina dura di tipo 1, ognuna contenente 300 mg della composizione seguente:

Claims (20)

1. RIVENDICAZIONI 1. Composizione di spore di batteri non patogeni del genere Bacillus adsorbite su una matrice formata almeno da un composto adsorbente insolubile in acqua e da un derivato della cellulosa, ottenibile mediante la tecnica del letto fluido.
2. 2. Composizione secondo la rivendicazione 1, che è ottenibile mediante un procedimento che comprende coprocessare secondo la tecnica del letto fluido una sospensione liquida di dette spore con una matrice formata almeno da un composto adsorbente insolubile in acqua e da un derivato della cellulosa.
3. 3. Composizione secondo la rivendicazione 1, che comprende da 1 a 20 miliardi di dette spore per grammo di composizione.
4. 4. Composizione secondo la rivendicazione 3, che comprende circa 10 miliardi di dette spore per grammo di composizione.
5. 5. Composizione secondo le rivendicazioni da 1 a 4, in cui detto composto adsorbente è il caolino.
6. 6. Composizione secondo le rivendicazioni da 1 a 5, in cui detto derivato della cellulosa è la cellulosa microcristallina.
7. 7. Composizione secondo le rivendicazioni da 1 a 6 in cui il rapporto in peso tra detto composto adsorbente e detto derivato della cellulosa è compreso tra 90:10 e 10:90.
8. 8. Composizione secondo la rivendicazione 7 in cui detto rapporto è compreso tra 70:30 e 30:70.
9. 9. Composizione secondo la rivendicazione 8 in cui detto rapporto è 50:50.
10. 10. Composizione secondo le rivendicazioni da 1 a 9 in forma di unità di dosaggio.
11. 11. Composizione secondo la rivendicazione 10, comprendente per ogni unità di dosaggio da 1 a 10 miliardi di dette spore, da 50 a 500 mg di caolino e da 50 a 600 mg di cellulosa microcristallina.
12. 12. Composizione secondo la rivendicazione 11, comprendente per ogni unità di dosaggio da 2 a 5 miliardi di dette spore, da 50 a 250 mg di caolino e da 50 a 300 mg di cellulosa microcristallina.
13. 13. Composizione secondo la rivendicazione 12, comprendente per ogni unità di dosaggio da 2 miliardi di dette spore in capsule opercolate di gelatina dura.
14. 14. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti in cui dette spore sono spore di Bacillus subtilis o Bacillus clausii.
15. 15. Composizione secondo la rivendicazione 14, in cui dette spore sono una miscela di tutti o alcuni dei quattro ceppi di spore di Bacillus clausii 1-273, 1-274, 1-275 e 1-276.
16. 16. Composizione secondo le rivendicazioni da 1 a 13 in cui dette spore sono una miscela di spore di Bacilli diversi.
17. 17. Uso della composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, per la preparazione di un medicamento destinato al trattamento e alla profilassi del dismicrobismo intestinale, al ripristino della flora microbica intestinale e al trattamento delle disvitaminosi da antibiotici e chemioterapici, o destinato al trattamento di malattie caratterizzate da immunocompromissione.
18. 18. Uso della composizione delle rivendicazioni 14 o 15 per la preparazione di un medicamento coadiuvante della terapia antibiotica per l'eradicazione dell' Helicobacter pylori.
19. 19. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazio medicamento.
20. 20. Medicamento comprendente come principio attivo la composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 1 a 16.