FR3072289A1 - Composition cosmetique de prevention active des signes de l'age - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne notamment l'utilisation cosmétique d'au moins un extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris, comme agent pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, en particulier liés à des phénomÚnes d'oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant,
Description
DOMAINE TECHNIQUE DE L’INVENTION
La présente invention concerne le domaine du vieillissement cutané, et plus précisément la prévention de l’apparition des premiers signes de l’âge autrement nommé ‘pré-vieillissement’.
ETAT DE L’ART
Le vieillissement cutané a depuis de nombreuses années mobilisé les efforts de recherche pour identifier de nouveaux actifs et/ou nouvelles technologies visant à diminuer et/ou corriger les signes de l’âge, en particulier les signes visibles tels que les rides, la perte d’élasticité et l’affaissement de la peau qui apparaissent puis augmentent avec l’âge et sont notamment caractéristiques des peaux matures.
Dans le cadre de la présente invention, on s’intéresse à la prévention active de l’apparition des premiers signes de l’âge, domaine pour lequel il subsiste encore le besoin de développer de nouvelles compositions cosmétiques, en particulier adaptées aux peaux jeunes (20-35 ans). On parle de « pré-aging » ou «pré-vieillissement», en amont des phénomènes de vieillissement chronologique, également appelé vieillissement intrinsèque et de vieillissement photo-induit, également appelé vieillissement extrinsèque.
La peau est continuellement soumise à de multiples agressions qui peuvent accélérer son processus naturel de vieillissement. Elle est particulièrement sensible au stress oxydant généré à la fois par le fonctionnement normal de notre organisme et par des éléments extérieurs tels que la pollution atmosphérique, le rayonnement solaire ou encore le tabac. Ce stress oxydant se caractérise par la production d’Espèces Réactives de l’Oxygène (ERO) qui peuvent réagir avec tous les composants cellulaires, entraînant leur modification par oxydation et une altération de leur fonction. Cela conduit notamment à une diminution progressive des fonctions cellulaires suite à l’agrégation (pontage) des macromolécules. Afin de contrer l’action des ERO, les cellules ont développé des mécanismes de défenses, enzymatiques ou non. On parle de ‘système naturel de défense antioxydant de la peau’. Mais ces mécanismes de protection sont également perturbés au cours du vieillissement.
Il a été récemment mis en évidence par l’équipe de Radjei S et al. (Experimental Dermatology, 2016, 25, 475-494) la présence d’un système enzymatique glyoxalase au niveau de l’épiderme, jouant un rôle protecteur contre les dommages oxydatifs induits par les espèces réactives de l’oxygène (ERO) tels que le glyoxal (GO) et le méthylglyoxal (MG). La glyoxalase élimine le glyoxal (GO) et le méthylglyoxal (MG). Ainsi cette enzyme prévient leur accumulation et les phénomènes de glycation subséquents, résultant de la réaction de composés carbonylés tels que GO et MG avec les protéines de la peau conduisant à des produits de glycation avancés (AGE). L’élimination de composés carbonylés (glyoxal et methylglyoxal) est donc primordiale pour protéger la peau des phénomènes de glycation impliqués dans le vieillissement cutané.
Selon un mode particulier, le ‘système naturel de défense antioxydant de la peau’ selon l’invention implique la glyoxalase.
C’est dans ce contexte que la Demanderesse a mis en évidence, de façon surprenante, qu’un extrait d’iris était capable d’augmenter l’activité de la glyoxalase, permettant ainsi d’agir directement sur le système naturel de défense antioxydant de la peau pour le renforcer et retarder ainsi l’apparition des signes de l’âge.
L’utilisation d’un extrait d’iris en cosmétique est déjà connue, notamment de la demande JPS60-201249 de Shiseido publiée en 1987, pour prévenir des signes ‘visibles’ avancés du vieillissement, en particulier la rugosité de la peau et l’affaissement de la peau, plutôt caractéristiques des peaux matures. On connaît aussi des demandes WO 97/003556 de la société L’OREAL et WO 02/234229 de la société SILAB, les effets d’un extrait d’iris sur la diminution des rides via un effet de relaxation du tissu cutané ou une inhibition de l’activité de la collagénase au niveau du derme, visant encore une fois des signes avancés du vieillissement.
Mais à la connaissance de la Demanderesse, c’est la première fois que l’on démontre l’effet d’un extrait d’iris sur l’activité de la glyoxalase et son rôle dans la prévention active de l’apparition des premiers signes de l’âge (‘pré-vieillissement’).
RESUME DE L’INVENTION
Un premier objet de l’invention concerne donc l’utilisation cosmétique d’au moins un extrait d’au moins une Iridacée du genre Iris, comme agent pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané, autrement nommé ‘pré-vieillissement’.
Un autre objet de l’invention est un procédé de soin cosmétique, destiné notamment aux peaux jeunes (sujets ayant entre 20 et 35 ans), pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l’application sur ladite peau d’au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d’Iridacée du genre Iris.
L’invention porte également sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :
(i) un extrait d’Iridacée du genre Iris, de préférence de l’espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome de l’espèce Iris florentina (ii) un extrait d’algue rouge, de préférence de l’espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L’INVENTION
Le ‘vieillissement cutané’ est un processus physiologique normal, impliquant des facteurs intrinsèques (génétique, hormonal, maladies...) et extrinsèques (UV, stress, agressions climatiques, pollution...), et qui s’amplifie au cours de la vie d’un individu du fait d’un déclin de son système de défense et de son besoin croissant en antioxydants.
Les modifications au niveau de la couche cornée, de l’épiderme, de la jonction épidermique et du derme varient en fonction de l’âge de l’individu et se manifestent par des ‘signes visibles’ du vieillissement, qui progressent avec l’âge, plus ou moins vite en fonction de l’individu et de son environnement (facteurs intrinsèques et extrinsèques). Ces ‘signes visibles’ de l’âge sont notamment la perte d’élasticité, de tonicité et/ou de fermeté de la peau, les rides au niveau du front, du contour des yeux et des lèvres, au niveau du cou, la perte des volumes du visage, et les tâches pigmentaires.
Par ‘pré-vieillissement’ au sens de la présente invention, on entend les ‘signes invisibles’ en amont de l’apparition des signes visibles de l’âge. Ces ‘signes invisibles’ ou ‘signes cellulaires’ de l’âge, par opposition à ‘signes visibles’ autrement nommés ‘signes cliniques’ de l’âge, comprennent les dommages cellulaires induits par un stress oxydant et impliquant notamment des oxydations, glycations ou glycoxydations de protéines.
Il a en effet été démontré que sur des peaux de donneurs d’âges différents, la proportion de protéines carbonylées et glyquées augmente de manière significative en fonction de l’âge (Petropoulos, I. et al. (2000) : Increase of oxidatively modified protein is associated with a decrease of protéasome activity and content in aging epidermal cells. The Joumals of Gerontology Sériés a: Biological Sciences and Medical Sciences, 55(5), B220-7.).
Le but de l’invention et donc d’agir sur ces phénomènes cellulaires de ‘pré-vieillissement’, en amont du ‘vieillissement’, afin d’avoir une peau plus résistante aux effets du stress oxydant, pour une peau qui paraît jeune plus longtemps.
La présente invention vise ainsi à renforcer le système naturel de défense antioxydant de la peau et prévenir et/ou retarder ainsi activement l’apparition des premiers signes de l’âge (‘pré-vieillissement’).
Par ‘premiers signes de l’âge’, on entend les tous premiers signes de l’âge, distincts des signes cliniques avancés du vieillissement, décrits ci-dessus et dans l’art antérieur. Ces premiers signes résultent des premiers dommages cellulaires induits par un stress oxydant et impliquant notamment des oxydations, glycations ou glycoxydations de protéines.
L’invention porte donc notamment sur l’utilisation d’au moins un extrait d’au moins une Iridacée du genre Iris dans une composition cosmétique, comme agent pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané (‘pré-vieillissement’).
Selon un mode particulier de l’invention, l’extrait d’Iridacée du genre Iris est mis en œuvre en une teneur allant de 0,0001% à 0,1% en poids de matière sèche (matière active), de préférence de 0,001% à 0,01% en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total de la composition le contenant.
Selon un mode particulier, l’invention permet de diminuer les phénomènes d’oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant et ainsi prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes de l’âge.
Ainsi selon un mode particulier, l’extrait d’iris prévient et/ou retarde l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané liés à des phénomènes d’oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant.
Par ‘stress oxydant’ selon l’invention, on entend notamment un stress résultant des effets toxiques de composés dicarbonylés (ex : glyoxal et méthylglyoxal) sur les protéines. On parle plus généralement de ‘stress oxydant’ généré par le fonctionnement normal de notre organisme et par des éléments extérieurs (pollution, rayonnement UV), qui se caractérise par la production d’espèces réactives de l’oxygène (ERO ou ROS) qui peuvent réagir avec tous les composants cellulaires, en particulier les protéines et l’ADN, entraînant leur modification par oxydation.
Par ‘phénomènes d’oxydation et/ou glycoxydation’ selon l’invention (on parle aussi généralement de ‘glycation’), on entend notamment la réaction d’un sucre réducteur (glucose) ou des composés dicarbonylés précités (glyoxal et méthylglyoxal), avec les protéines, conduisant à la formation des produits de glycation avancés (AGE). La présence de ces adduits de glycation sur les protéines entraîne leur dénaturation et l’inactivation des enzymes.
Selon un mode particulier de l’invention, l’extrait d’iris de l’invention renforce le système naturel de défense antioxydant de la peau.
Selon un mode particulier de l’invention, l’extrait d’iris de l’invention augmente l’activité de la glyoxalase des cellules de la peau, en particulier des cellules souches épidermiques.
Par ‘cellules souches épidermiques’ selon l’invention, on entend notamment des cellules à fort potentiel de clonogénicité localisées préférentiellement au niveau de la couche basale de l’épiderme. Lesdites cellules, qui constituent une petite population de cellules de la peau, possèdent la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies comparativement à d’autres cellules cutanées.
Extrait d’iris
Selon un mode préféré de l’invention, l’extrait d’au moins une Iridacée du genre Iris est choisi parmi un extrait d’une espèce choisie parmi le groupe constitué d’iris florentins, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentins.
Selon un mode particulier, il s’agira d’un extrait de rhizome, de préférence d’un extrait de rhizome d’iris florentins.
L’extrait d’iris peut être mélangé sous forme de poudre à une composition pour application topique sur la peau, ou peut être sous la forme d’un extrait liquide obtenu par extraction en présence d’un solvant approprié, de préférence au moins un solvant polaire cosmétiquement acceptable.
Préalablement à l’étape d’extraction elle-même, le matériel végétal peut avoir été séché et/ou broyé.
L’extrait peut être préparé par différents procédés d’extraction connus de l’homme du métier.
Avantageusement, l’extraction est de préférence réalisée par mise en contact du matériel végétal sélectionné avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Selon la présente invention, l’expression « solvant polaire » signifie que le solvant a une valeur d’indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L’indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d’état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d’une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230.
Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d’un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H.
A titre de solvant polaire particulièrement préféré, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l’eau, les alcools en C1-C4, tel que l’éthanol, les glycols, tels que l’éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et leurs mélanges. Selon une mise en oeuvre préférée, on extrait le matériel végétal à l’aide d’eau.
L’extraction peut être menée à chaud par reflux ou bien par macération à température ambiante.
On utilise avantageusement les ultrasons en cours d’extraction afin d’améliorer le rendement massique de ladite extraction.
Le procédé d’extraction comprend avantageusement une étape de filtration visant à séparer la phase liquide du matériel végétal épuisé.
On peut reproduire le cycle d’extraction puis filtration, plusieurs fois afin d’épuiser le matériel végétal des substances ayant une affinité pour le solvant d’extraction.
Le procédé d’extraction peut également comprendre au moins une étape de décoloration et/ou de purification, par exemple sous la forme d’un traitement de l’extrait par une solution d’au moins un solvant polaire en présence de particules de charbon actif. On élimine ainsi notamment la chlorophylle extraite par le solvant.
Le procédé d’extraction peut en outre être complété par une étape d’élimination partielle ou totale des solvants d’extraction.
On peut avantageusement concentrer l’extrait en éliminant une partie du solvant ou du mélange du solvant d’extraction.
On peut ainsi obtenir un concentré aqueux dépourvu d’une quantité significative de solvants organiques ou bien encore, en éliminant tout le solvant d’extraction, obtenir un résidu sec.
De façon alternative, le produit de l’étape d’extraction peut être, lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d’une poudre.
L’extrait végétal polaire tel que décrit précédemment peut être utilisé dans une composition cosmétique sous la forme d’une poudre ou bien être remis en solution ou en suspension dans au moins un solvant cosmétiquement acceptable, qui peut être identique ou différent de celui ayant servi à l’extraction.
Selon une variante préférée, l’extrait concentré d’iris est remis en solution dans de l’eau. On parlera de solution d’extrait d’iris ou extrait aqueux d’iris selon l’invention. L’extrait aqueux comprend en outre avantageusement au moins un agent antioxydant, en particulier du phénoxyéthanol.
Selon un mode particulier, l’extrait d’iris, en particulier d’iris florentina est susceptible d'être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes :
- le broyage du rhizome de la plante,
- extraction de la matière végétale par entraînement à la vapeur d’eau (« steam distillation »),
- filtration puis éventuellement remise en solution de l’extrait obtenu dans un solvant ou un mélange de solvants polaires.
On pourra utiliser alternativement les formes poudre, liquide concentré ou liquide dilué (solution d’extrait ou extrait aqueux) de l’extrait d’iris dans la préparation de compositions cosmétiques. Selon un mode particulier et préféré de l’invention, on utilisera l’extrait d’iris selon l’invention sous forme de solution d’extrait d’iris (extrait aqueux) dans la préparation de compositions cosmétiques.
Selon un mode particulier préféré, l’extrait d’iris se présente sous la forme d’un extrait aqueux d’/r/s florentina, de préférence d’un extrait aqueux de rhizome d’iris florentina.
En particulier, l’extrait d’iris florentina obtenu par hydrodistillation du rhizome d’iris florentina est en solution dans l’eau et comprend avantageusement un antioxydant, tel que le phénoxyéthanol.
On utilisera avantageusement l’extrait d’iris de dénomination INCI ‘Water and Iris Florentina root extract and phénoxyéthanol’ tel que celui commercialisé sous la dénomination Vegebios® d’iris de Florence 1,5P par la société SOLABIA. La quantité d’extrait sec (matière sèche = matière active) dans cette solution commerciale aqueuse est d’environ 0,5% en poids d’extrait sec par rapport au poids total de la solution commerciale.
L’invention porte également sur un procédé de soin cosmétique, notamment destiné aux peaux jeunes (sujets ayant de 20 à 35 ans), pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l’application sur ladite peau d’au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d’Iridacée du genre Iris.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique comprenant au moins un extrait d’Iridacée du genre Iris est appliquée sur une peau jeune, en particulier sur la peau d’un sujet ayant de 20 à 40 ans, de préférence de 20 à 35 ans, de préférence encore de 20 à 30 ans.
Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du corps et/ou du visage et/ou du cou, en particulier la peau du visage et/ou du cou, en particulier la peau du visage.
Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d’un sujet de 20 à 25 ans.
Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d’un sujet de 25 à 30 ans.
Selon un autre mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d’un sujet de 30 à 35 ans.
Selon un mode particulier et préféré, le procédé de soin cosmétique selon l’invention comprend l’application sur la peau d’une composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :
(i) un extrait d’Iridacée du genre Iris, de préférence de l’espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome d’iris florentina, (ii) un extrait d’algue rouge, de préférence de l’espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.
Selon un mode particulier et préféré, une telle composition est appliquée sur la peau d’un sujet ayant de 20 à 40 ans, de préférence de 20 à 35 ans, de préférence encore de 20 à 30 ans.
Actifs additionnels
Selon un mode préféré de l’invention, la composition cosmétique comprend en outre au moins un agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules de l’épiderme, en particulier des cellules souches épidermiques.
Par ‘agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules épidermiques’ selon l’invention, on entend notamment un agent capable de maintenir le nombre et/ou l’activité des cellules épidermiques, par exemple en condition de stress oxydant. Un tel agent peut par exemple être sélectionné pour son effet sur la protection des télomères, qui retarde l’entrée en sénescence des cellules.
On peut notamment utiliser comme agent à effet protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules épidermiques, un extrait d’algue rouge, un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, et de préférence leur mélange.
Par « extrait d’algue rouge » selon l’invention, on entend notamment un extrait obtenu à partir de l’espèce Kappaphycus alvarezii.
Selon un mode particulier, on utilisera un extrait d’algue rouge (Kappaphycus alvarezii) riche en galactanes, tel que celui commercialisé par la société SILAB sous la dénomination TELOSOMYL®. Un tel extrait, décrit dans la demande de brevet FR 3047172 (SILAB), est obtenu par hydrolyse d’une poudre d’algues rouge de l’espèce Kappaphycus alvarezii, séparation des phases soluble et insoluble, et filtration de façon à collecter la fraction aqueuse comprenant en particulier des biopolymères. Cet extrait limite l’altération du télosome, la coiffe protectrice des télomères. En effet, TELOSOMYL® stimule l’expression des protéines du télosome, limitant ainsi le raccourcissement des télomères. TELOSOMYL® préserve le potentiel réplicatif des fibroblastes. La longévité est maintenue, et le vieillissement programmé de la peau, retardé.
La teneur en extrait d’algue rouge dans la composition de l’invention ira notamment de 0,001% à 1% en poids, de préférence de 0,01 à 0,1% en poids d’extrait sec (matière active) par rapport au poids total de la composition.
Par ‘agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules souches épidermiques’ selon l’invention, on entend notamment un agent capable de maintenir le nombre et/ou l’activité des cellules souches épidermiques, par exemple en condition de stress oxydant. Un tel agent peut par exemple être sélectionné par un test de clonogénicité qui repose sur la capacité qu’ont les cellules souches à adhérer à un support et se diviser pour former de larges colonies (>4mm2).
Il est admis que l'homéostasie de l'épiderme interfolliculaire, compartiment cutané qui est en renouvellement permanent, est maintenue par une petite population de cellules dites souches, localisée dans la couche cellulaire basale de l'épiderme.
Pour étudier cette population de cellules, le test effectué, dit de clonogénicité, repose sur la capacité qu'ont ces cellules souches à adhérer à un support et à se diviser pour former une population importante de cellules filles regroupées sous forme de colonies (Barrandon et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84 (1987), 2302-2306). L'analyse du nombre et de la taille des colonies permet de caractériser les cellules souches de l'épiderme et d’évaluer notamment l'action protectrice d'un actif (‘agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules souches épidermiques’) lors d'un stress.
La première étape d'isolation de ces cellules consiste à préparer une suspension de cellules épidermiques que l'on ensemence ensuite sur une couche nourricière de fibroblastes 3T3 dont l'activité mitotique est bloquée par la mitomycine.
Ce support permet : (1) de sélectionner les cellules basales de l'épiderme contenant les cellules souches et (2) d’assurer la croissance des cellules à forte capacité de division qui forment alors des colonies de cellules filles. Les cellules possédant la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies (>4mm2) sont issues de la population souche épidermique. Les colonies de plus petites tailles ne sont pas issues des cellules souches.
Comme agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules souches épidermiques, on peut citer notamment le phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, dont l’effet protecteur sur les cellules souches est illustré ci-après dans les exemples.
Par « vitamine E phosphate » ou « phosphate de tocophérol » selon l’invention, on entend notamment un phosphate de tocophérol sous la forme d’une base ou d’un sel cosmétiquement acceptable. Dans le cas d’un sel de phosphate de tocophérol, on préfère un sel de métal alcalin, de préférence de sel de sodium.
Avantageusement, le phosphate de tocophérol est l’alpha-tocophérol phosphate, le bétatocophérol phosphate, le delta-tocophérol phosphate ou le gamma-tocophérol phosphate, et plus particulièrement l’alpha tocophérol phosphate autrement nommé alpha tocophéryl phosphate.
Un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels peut ainsi avantageusement être utilisé dans la composition de l’invention, en association avec l’extrait d’iris de l’invention, pour obtenir un effet protecteur des cellules souches épidermiques.
On associe de préférence un extrait d’iris forentina et le phosphate de tocopherol ou un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique de dénomination INCI : sodium tocopheryl phosphate.
La teneur en phosphate de tocophérol dans la composition de l’invention ira notamment de 0,001% à 0,1% en poids, de préférence de 0,01% à 0,1% en poids par rapport au poids total de la composition.
La composition peut en outre comprendre d’autres dérivés du tocopherol, tels que des esters de tocophérol différents du phosphate de tocophérol, pour produire un effet antioxydant protecteur de la composition cosmétique mais dépourvu d’effet biologique. On citera par exemple l’acétate de tocophérol comme ester de tocopherol antioxydant de la composition.
Ainsi, selon un mode préféré de l’invention, la composition cosmétique de l’invention comprend un extrait d’Iridacée du genre Iris et au moins un agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules épidermiques choisi dans le groupe constitué par un extrait d’algue rouge, le phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels et de préférence leur mélange.
La composition cosmétique de l’invention comprendra avantageusement :
un extrait d’Iridacée du genre Iris pour son effet au niveau moléculaire en diminuant la production des espèces réactives à l’oxygène ;
un extrait d’algue rouge pour son effet au niveau cellulaire par une action sur la protection des télomères, qui retarde l’entrée en sénescence des cellules ;
un phosphate de tocophérol, en particulier l’alpha-tocophérol phosphate, ou l’un de ses sels, pour son effet au niveau tissulaire par une action sur la protection des cellules souches.
L’invention porte donc également sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :
(i) un extrait d’Iridacée du genre Iris, de préférence de l’espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome d’iris florentina.
(ii) un extrait d’algue rouge, de préférence de l’espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.
Selon un mode particulier et préféré, l’extrait d’Iridacée du genre Iris, l’extrait d’algue rouge et le phosphate de tocophérol sont conditionnés dans une même composition cosmétique.
La composition cosmétique de l’invention peut également comprendre d’autres actifs qui peuvent être notamment choisis parmi des agents hydratants tels que l’acide hyaluronique ou le glycérol, des agents lissants ou encore des agents anti-rides tels que l’adénosine, des complexes de polymères naturels ou synthétiques produisant sur la peau des films tenseurs au moment de l’application sur la peau, ou bien encore des actifs anti-âge, plus particulièrement des extraits de plantes obtenus par des procédés connus de l’homme du métier et qui agissent sur des cibles biologiques des couches superficielles ou profondes de la peau en particulier, l’épiderme, et le derme, pour maintenir l’élasticité de la peau, produire un effet repulpant, assurer le renouvellement ou la réparation des tissus, le maintien de la barrière cutanée ou agissant sur le teint de la peau. Il peut également s’agir d’actifs éclaircissants ou blanchissants agissant sur les tâches pouvant apparaître avec l’âge, notamment sur les mains.
Galénique
La composition cosmétique de l’invention comprendra généralement au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
Par ‘excipient cosmétiquement acceptable’, on entend une substance dépourvue d’effet cosmétique ou biologique en tant que telle, mais utile à l’incorporation de l’agent actif dans la composition cosmétique, à la mise en forme de ladite composition, ou encore à sa stabilité au cours du temps.
L’excipient est avantageusement choisi parmi des solvants, des co-solvants (éthanol, le glycérol, l'alcool benzylique), des épaississants, des diluants, des antioxydants, des colorants, des filtres chimiques ou physiques contre les rayonnements solaires de type UVA et UVB tels que les filtres de synthèse associés ou non à des filtres constitués de particules capables d’atténuer les effets de ce rayonnement sur la peau, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d’odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, des oligo-éléments, des polymères filmogènes, des filtres chimiques ou minéraux, des agents hydratants ou des eaux thermales, des polymères naturels tels que des polysaccharides ou des polypeptides, des dérivés de cellulose, ou encore des polymères synthétiques, et de façon optionnelle en outre au moins un autre agent actif cosmétique.
La composition cosmétique selon l’invention comprend avantageusement une phase aqueuse et peut avantageusement se présenter sous toutes les formes normalement utilisées pour une application topique, sous forme d’une solution aqueuse, hydro-alcoolique ou huileuse, d’une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile, d’un gel aqueux, ou sous toute autre forme pour application topique.
Cette composition peut être plus ou moins fluide et avoir l’aspect d’une crème blanche ou colorée, d’une pommade, d’un lait, d’une lotion, d’un sérum, d’une pâte, d’une mousse ou d’un gel. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d’aérosol ou au moyen d’un patch ou d’un masque ou d’un applicateur.
Avantageusement, la composition cosmétique selon l’invention est une émulsion sous la forme d’une crème de jour, d’une crème de nuit, d’une crème solaire ou d’une crème aprèssoleil.
Selon un mode particulier, la composition selon l’invention est une crème présente dans un kit cosmétique comprenant en outre au moins un sérum comprenant au moins un antioxydant.
L’invention va désormais être illustrée par les exemples non limitatifs suivants.
Sauf indication contraire, les pourcentages sont exprimés en poids par rapport au poids total de ladite composition.
EXEMPLES
Exemple 1 : Effet d’un extrait d’iris sur l’activité de la glyoxalase
1.1 Matériels et méthodes
Culture de cellules
250000 cellules KHN967 P6 sont ensemencées dans des puits de plaque 6 (Costar) dans le milieu Epilife complet (Life Technologies). Pendant 4 jours à 37°C dans une atmosphère humide avec 5%. Chaque point est réalisé en triplicate.
Traitement
La solution de VEGEBIOS® IRIS FLORENCE 1.5P, comprend 0,5% en poids de matière sèche de rhizome d’iris florentina, est ajoutée à 0,31% en poids dans le milieu Epilife complet puis filtrée sur 0,22μΜ.
Le milieu est remplacé par ce milieu de traitement pendant 6h.
Extraction des protéines
Après traitement, les tapis cellulaires sont lavés avec du PBS 1X (Invitrogen) afin d’éliminer les cellules mortes, les différents débris cellulaires et le sérum du milieu, inhibiteur de la trypsine.
500 pi de TrypLE™ Express Enzyme (Invitrogen) sont ajoutés et laissés pendant 10 minutes à 37°C pour dissocier les cellules.
Les cellules sont collectées dans un tube Protein LoBind Eppendorf. Les puits sont rincés avec 500 μΙ de DMEM supplémentés et ajoutés dans chaque tube. Après centrifugation à 1500 x g pendant 5 minutes, le culot cellulaire est rincé 2 fois avec 1ml de tampon PBS 1X. Les culots cellulaires sont repris dans 70μΙ de Tampon de lyse Cellytic (Sigma) et sont conservés à -80°C.
Les extraits cellulaires sont décongelés et la lyse des cellules est complétée mécaniquement par sonification au Bioruptor (Diagenode) ; en 5 cycles de 8 secondes ΌΝ’ et 30 secondes OFF’ à 4°C. Les surnageants sont récupérés et conservés à 4°C après centrifugation 15 minutes, 4°C, 14 000 x g.
Dosage des protéines (PC protein assay ; Biorad)
Réactif B (500-0114)
Réactif A (500-0113)
Réactif S (500-0115)
Les réactifs B, A et S sont les réactifs dudit kit DC protein assay de Biorad.
• Préparation de la gamme étalon et réactif
Solution mère de BSA: 5mg/ml (Sigma ; A2153 ; 4°C), aliquotée et congelée à -20°C.
La gamme est préparée dans des tubes Eppendorf conservée à 4°C maximum 2 mois.
Tableau 1 :
| Solutions stocks En pg/tube final | Qté Prot. (pg/pl) | BSA (μΙ) | H2O (μΙ) |
| 0 | 0 | 0 | 250 |
| 1 | 0,2 | 10 | 240 |
| 2 | 0,4 | 20 | 230 |
| 3 | 0,6 | 30 | 220 |
| 4 | 0,8 | 40 | 210 |
| 5 | 1,0 | 50 | 200 |
| 6 | 1,6 | 80 | 170 |
| 7 | 2,0 | 100 | 150 |
| 8 | 3,0 | 150 | 100 |
| 9 | 4,0 | 200 | 50 |
| 10 | 5,0 | 250 | 0 |
Le réactif A est préparé extemporanément (stable pendant une semaine) ; 20pL de réactifs sont ajoutés à 1 ml de réactif A (le réactif S est ajouté si les échantillons contiennent des détergents).
Les réactifs A, B et S du kit se conservent à température ambiante.
• Protocole
Dans une plaque 96 puits (Costar) sont introduits en quadruplicate :
- 5 pl d’H20 pour le zéro
- 5 μΙ de tampon de lyse pour le blanc échantillon
- 5 μΙ de solution stock pour la gamme
- 5 μΙ d’échantillon à doser (dilué au 1/2,5 ) μΙ de réactif A’ sont introduits dans chaque puits et agités fortement.
Après 5 minutes, 200 μΙ de réactif B sont ajoutés dans chaque puits.
Après agitation de la plaque ; l’absorbance est lue à 750 nm après 15min.
Dosage de l’activité glyoxalase I (GLO1) • Réactifs
- Tampon sodium phosphate 100 mM pH 6,6 :
200ml de solution phosphate monophasique (Sigma) à 100mM sont ajustés au pH 6,6 avec une solution de phosphate dibasique (Sigma) environ 6,6ml.
- Solution de Methylglyoxal (MG) à 10mM :
15,8 μΙ à partir de la solution de Methylglyoxal à environ 40% dans l’eau (Sigma) sont ajouté à 10ml de tampon sodium phosphate 100 mM pH 6,6.
- Solution de L-Glutathione reduced (GSH) à 10mM:
30,7 mg de Glutathione reduced (Sigma) sont solubilisés dans 10ml le tampon phosphate.
• Protocole
Les lysats protéiques sont décongelés puis centrifugés à 4°C à 150000 x g pendant 15 minutes.
Dans une plaque Plaque UV-Star 96 puits (Dutscher), on dépose 15 pg de protéines par puits.
Le mélange réactionnel est préparé extemporanément et incubé 5 min à 37°C.
Tableau 2 :
| Par puits (200 pl) | Pour n puits | |
| GSH à 10mM | 40 pl | n x 40 pl |
| MG à 10mM | 40 pl | n x 40 pl |
| Tampon P 100 mM pH 6,6 | 120 pl | n x 120 pl |
Puis 200 μΙ de mélange réactionnel sont mélangés aux 15 pg de protéines.
La formation du lactoylglutathione absorbé à 240 nm est mesurée toutes les minutes pendant 10 min au spectrophotomètre Fluostar Oméga (BMG) dans une atmosphère à 37°C.
1.2 Résultats
A l’aide du logiciel Mars, la pente correspondant à la vitesse de réaction est calculée dans la phase exponentielle (au temps T initial et au temps T final) à partir de la fluorescence émise en Unités de Fluorescence (FU) toutes les 2 minutes après soustraction de la fluorescence émise dans le Blanc.
• Vitesse AAbs/AT = [ABS essai Ζ40ηπι- ABS blanc Ζ40ηπι1 final- [ABS essai Ζ40ηπι- ABS blanc Ζ40ηπι1 initial T final-T initial • Activité = Vitesse/mg de protéines • Effet actif en % = (Activité traité - activité témoin) X 100 Activité témoin
Les résultats sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous.
Tableau 3
| KHN967 P6 | N.1 O6 Cells/ mI | protéine en uG/ uL | Vitesse en AAbs/ m in | Activité en AAbs/ in in/ ing | variance | Test F | P | effet produit | ||||
| moyenne | écarttype | moyenne | écarttype | d | e proteine « | |||||||
| moyenne | écarttype | |||||||||||
| 0,700 | 1,56 | 0,20 | 0,0552 | 0,0014 | 3,680 | 3,744 | 0,112 | 0,01 | ||||
| Tem oui | 0,697 | 1,54 | 0,10 | 0,0581 | 0,0031 | 3,873 | ||||||
| 0,670 | 1,50 | 0,20 | 0,0552 | 0,0018 | 3,680 | |||||||
| I ris | 0,685 | 1,50 | 0,10 | 0,0653 | 0,0021 | 4,353 | 4,376 | 0,028 | 0,00 | 0,1165 | 0,007 | 17% |
| 0.31 7. | 0,684 | 1,55 | 0,20 | 0,0661 | 0,0058 | 4,407 | g** | |||||
| 0,668 | 1,13 | 0,10 | 0,0655 | 0,0036 | 4,367 |
**significatif quand p<0,01
Le Méthylglyoxal (MG) en présence de gluthation réduit (GSH) comme cofacteur à 2μΜ chacun sont incubés 5min à 37°C dans un tampon phosphate de sodium à 50mM au pH 6,6 pour produire l’hémithioacétate, le substrat de la Glyoxalase 1 (GLO1). Après addition de 15pg de protéines de lysat épidermique, l’activité de l’enzyme est évaluée par la mesure toutes les minutes pendant 10 minutes de l’augmentation de l’absorbance mesurée à 240 nm lié au S-Dlactoylglutathion formé.
Selon les conditions de dosage l’extrait d'iris florentins augmente significativement l’activité glyoxalase de 17%.
Exemple 2 : Effet de l’alpha tocopheryl phosphate sur la protection des cellules souches épidermiques
Pour étudier l’effet de l’alpha tocopheryl phosphate sur une population de cellules souches épidermiques, le test effectué, dit de clonogénicité, repose sur la capacité qu'ont ces cellules souches à adhérer à un support et à se diviser pour former une population importante de cellules filles regroupées sous forme de colonies (Barrandon et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84 (1987), 2302-2306). L'analyse du nombre et de la taille des colonies permet de caractériser les cellules souches de l'épiderme et d’évaluer notamment l'action protectrice d'un actif lors d'un stress.
La première étape d'isolation de ces cellules consiste à préparer une suspension de cellules épidermiques que l'on ensemence ensuite sur une couche nourricière de fibroblastes 3T3 dont l'activité mitotique est bloquée par la mitomycine.
Ce support permet: (1) de sélectionner les cellules basales de l'épiderme contenant les cellules souches et (2) d’assurer la croissance des cellules à forte capacité de division qui forment alors des colonies de cellules filles. Les cellules possédant la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies (>4mm2) sont issues de la population souche épidermique. Les colonies de plus petites tailles ne sont pas issues des cellules souches L'effet protecteur de l’alpha tocophéryl phosphate est mis en évidence selon cette méthode de culture. Dans une première étape, les kératinocytes sont traités avec 1 pg/ml de d’alpha tocophéryl phosphate pendant 24H puis soumises à un stress oxydatif par le peroxyde d'hydrogène pendant 15 min. Elles sont réensemencées à très faible densité ce qui permet leur croissance individualisée. Après 7 jours de culture, les colonies cellulaires formées à partir de chaque kératinocyte sont colorées, dénombrées par analyse d’image en fonction de leur taille pour évaluer la quantité de cellules souches de la culture cellulaire initiale
On constate que le traitement par l’alpha tocophéryl phosphate dans ces conditions permet de maintenir le nombre important de larges colonies (supérieures à 4mm2) lors d'un stress oxydatif de +104% comparé au nombre de larges colonies en absence de traitement Les larges colonies étant issues de cellules souches, l’alpha tocophéryl phosphate protège donc cette population particulière de cellules.
Exemple 3 : Formulations
Crème de jour (émulsion huile-dans-eau)
On prépare la composition suivante
| Extrait de rhizome d’iris florentina (1) | 0,005% (% M.S*) |
| Extrait de Kappaphycus Alvarezii (2) | 0,03% (% M.S*) |
| Tocopheryl phosphate sodique | 0,02% |
| Glycéryl stéarate + PEG-100 stéarate | 5,0% |
| Polyisobutène hydrogéné | 4,0% |
| Magnésium ascorbyl phosphate | 3,0% |
| Tricaprylate /caprate de glycérol | 3,0% |
| Squalane | 3,0% |
| Glycérine | 3,0% |
| Beurre de karité | 1,5% |
| Cétéaryl octanoate | 1,5% |
| Alcool cétylique | 1,0% |
| Alcool stéarylique | 1,0% |
| Diméthicone | 1,0% |
| Gomme xanthane | 0,3% |
| Acide citrique | 0,1% |
| Citrate de sodium | 0,1% |
| Adenosine | 0,05% |
| Neutralisant, Parfum, Conservateurs | qs. |
| Eau | qsp. 100% |
% M.S* : % de matière sèche dans la composition totale.
(1) : VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P à 0,5% en poids de matière sèche d’extrait (2) TELOSOMYL®, 0,6% de matière sèche d’extrait
La phase aqueuse et la phase huileuse sont préparées séparément puis mélangées sleon le mode classique de formulation d’une émulsion.
L’utilisation de cette crème, de par son action son action anti-oxydante et la protection de la matrice extracellulaire permet également d'atténuer ou retarder les tout premiers signes de vieillissement de la peau chez des sujets jeunes de moins de 35 ans.
Sérum Visage éclaircissant
On prépare un sérum selon la composition ci-dessous :
| Extrait de rhizome d’iris florentina (1) Extrait de Kappaphycus Alvarezii (2) Tocopheryl phosphate sodique Glycérine Gomme xanthane | 0,01% (M.S*) 0,05% (M.S*) 0,02% 2 % 0,25 % |
| Polymethylsilsesquioxane Alcool ethylique Acide lactique Polyacrylate Diméthicone copolyol Neutralisant, Parfum, Conservateur Eau | 2 % 2 % 1 % 0,50% 0,25% qs qsp 100% |
% M.S* : % de matière sèche dans la composition totale.
(1) : VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P à 0,5% en poids de matière sèche d’extrait (2) TELOSOMYL®, 0,6% de matière sèche d’extrait
Une goutte sérum, s’applique sur le visage généralement avant l’application d’une crème pour le visage. Ce sérum s’utilise habituellement par cures d’une à deux semaines
Claims (10)
- REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d’au moins un extrait d’au moins une Iridacée du genre Iris, comme agent pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané.
- 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, dans laquelle l’extrait cflris prévient et/ou retarde l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané liés à des phénomènes d’oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant.
- 3. Utilisation selon l’une des revendications 1 ou 2, dans laquelle l’extrait d’iris augmente l’activité de la glyoxalase des cellules de la peau, en particulier des cellules souches épidermiques.
- 4. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle l’extrait d’Iridacée du genre Iris est mis en œuvre en une teneur allant de 0,001% à 0,1% en poids de matière sèche, de préférence de 0,001% à 0,01% en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition.
- 5. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle l’extrait d’au moins une Iridacée du genre Iris est choisi parmi un extrait d’une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Ins florentina.
- 6. Procédé de soin cosmétique pour prévenir et/ou retarder l’apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l’application sur ladite peau d’au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d’Iridacée du genre Iris.
- 7. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 6, caractérisé en ce que la composition cosmétique comprenant au moins un extrait d’Iridacée du genre Iris est appliquée sur une peau jeune, en particulier un sujet ayant de 20 à 40 ans, en particulier de 20 à 35 ans, de préférence de 20 à 30 ans.
- 8. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que la composition cosmétique comprend en outre au moins un agent protecteur et/ou stimulant l’activité des cellules épidermiques, en particulier choisi parmi le groupe constitué par un extrait d’algue rouge, un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, et de préférence leur mélange.
- 9. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 8, caractérisé en ce que la composition cosmétique comprend, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :(i) un extrait dllridacée du genre Iris, de préférence de l’espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome d’iris florentina, (ii) un extrait d’algue rouge, de préférence de l’espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.
- 10. Composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :(i) un extrait d’Iridacée du genre Iris, de préférence de l’espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome d’iris florentina, (ii) un extrait d’algue rouge, de préférence de l’espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l’un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.
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-
2018
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