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FR2465000A1 - HETEROPOLYSACCHARIDE S-130 - Google Patents

HETEROPOLYSACCHARIDE S-130 Download PDF

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Publication number
FR2465000A1
FR2465000A1 FR8019244A FR8019244A FR2465000A1 FR 2465000 A1 FR2465000 A1 FR 2465000A1 FR 8019244 A FR8019244 A FR 8019244A FR 8019244 A FR8019244 A FR 8019244A FR 2465000 A1 FR2465000 A1 FR 2465000A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
cpo
fermentation
viscosity
medium
development
Prior art date
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Granted
Application number
FR8019244A
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French (fr)
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FR2465000B1 (en
Inventor
Kenneth S Kang
George T Veeder
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Merck and Co Inc
Original Assignee
Merck and Co Inc
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Publication date
Application filed by Merck and Co Inc filed Critical Merck and Co Inc
Publication of FR2465000A1 publication Critical patent/FR2465000A1/en
Application granted granted Critical
Publication of FR2465000B1 publication Critical patent/FR2465000B1/fr
Granted legal-status Critical Current

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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
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  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

LE NOUVEL HETEROPOLYSACCHARIDE S-130, PREPARE PAR FERMENTATION D'UNE ESPECE D'ALCALIGENES NON DENOMMEE, ATCC31555, A DES PROPRIETES INTERESSANTES COMME AGENT EPAISSISSANT, DE SUSPENSION ET STABILISANT DANS DES SYSTEMES AQUEUX. SA COMPOSITION CHIMIQUE EST COMPRISE ENTRE LES LIMITES SUIVANTES, EN POIDS, CONCERNANT LES SUCRES: 10-20 D'ACIDE GLUCURONIQUE; 10-25 DE MANNOSE; 20-40 DE GLUCOSE; 30-60 DE RHAMNOSE; LE POLYMERE CONTIENT AUSSI 3-5 DE GROUPES ACETYLE.THE NEW HETEROPOLYSACCHARIDE S-130, PREPARED BY FERMENTATION OF AN UNDENTIFIED ALKALIGEN SPECIES, ATCC31555, HAS INTERESTING PROPERTIES AS A THICKENING, SUSPENSION AND STABILIZING AGENT IN AQUEOUS SYSTEMS. ITS CHEMICAL COMPOSITION IS COMPRISED BETWEEN THE FOLLOWING LIMITS, BY WEIGHT, FOR SUGARS: 10-20 GLUCURONIC ACID; 10-25 OF MANNOSE; 20-40 GLUCOSE; 30-60 OF RHAMNOSIS; THE POLYMER ALSO CONTAINS 3-5 ACETYL GROUPS.

Description

-1--1-

La présente invention concerne un hétéro- The present invention relates to a hetero-

polysaccharide dénommé hétéropolysaccharide S-130.  polysaccharide called heteropolysaccharide S-130.

Le produit S-130 penut être préparé par fermentation d'un milieu nutritif approprié avec un organisme n'ayant pas été décrit jusqu'à présent, d'après des études taxonomiques poussées, qui est  The S-130 product can be prepared by fermentation of a suitable nutrient medium with an organism which has not been described so far, according to extensive taxonomic studies, which is

une espèce d'Alcaligens non-dénommée. Un dép8t perma-  an unnamed species of Alcaligens. A permanent depot

nent sans restriction de cet organisme utilisé dans la production du présent hétéropolysaccharide a été effectué avec l'American Type Culture Collection le without restriction of this organism used in the production of this heteropolysaccharide was carried out with the American Type Culture Collection the

27 août 1979 sous le numéro d'inscription ATCC 31555.  August 27, 1979 under registration number ATCC 31555.

Les considérations suivantes rendent justi-  The following considerations justify

fié et nécessaire que cet organisme soit considér& trusted and necessary that this body be considered &

comme une nouvelle espèce d'Alcaligenes. as a new species of Alcaligenes.

Description de la soucheDescription of the strain

A. Caractéristiques de morphologie des colonies Sur gélose nutritive, de petites colonies jaunes apparaissent en un jour à 30 C, le diamètre  A. Characteristics of colony morphology On nutritive agar, small yellow colonies appear in one day at 30 C, the diameter

atteignant environ 1,5 mm après 5 jours d'incubation. reaching approximately 1.5 mm after 5 days of incubation.

Les colonies sont rondes, lisses, convexes, mucoidi-  The colonies are round, smooth, convex, mucoidi-

ques et opaques. La couleur jaune devient plus foncée  ques and opaque. Yellow color becomes darker

et la texture des colonies devient dure après incuba- and the texture of the colonies becomes hard after incubation

tion prolongée.prolonged tion.

Sur gélose YM, de petites colonies jaunes mucoldiques apparaissent en un jour et le diamètre atteint environ 3 mm après 5 jours d'incubation. Les colonies sont rondes, lisses, convexes et opaques, mais le dessus des colonies est plat. On n'observe  On YM agar, small yellow mucoldic colonies appear in one day and the diameter reaches approximately 3 mm after 5 days of incubation. The colonies are round, smooth, convex and opaque, but the top of the colonies is flat. We do not observe

pas de texture dure membraneuse.no hard membranous texture.

B. Caractéristiques de morphologie des cellules  B. Characteristics of cell morphology

La souche S-130 est une bactérie Gram- The S-130 strain is a Gram- bacteria

négative en forme de bâtonnet. Sur gélose nutritive, la grosseur moyenne des cellules est d'environ 0,5-0,6  negative rod-shaped. On nutrient agar, the average cell size is approximately 0.5-0.6

sur 1,2-1,6/um; les extrémités des cellules sont amin- about 1.2-1.6 / µm; the ends of the cells are thin

cies et on observe souvent une courbure. Les dimen-  cies and there is often a curvature. The dimen-

sions et la forme des cellules ne changent pas notable-  sions and the shape of the cells do not change noticeably-

ment après incubation prolongée.ment after prolonged incubation.

Sur gélose YM, les dimensions moyennes des  On YM agar, the average dimensions of

cellules sont de 0,6-0,8 sur 1,6-2,0 "m, mais la cel-  cells are 0.6-0.8 by 1.6-2.0 "m, but the cell

lule devient plus longue (3-4/um); l'accumulation de lule becomes longer (3-4 / µm); the accumulation of

PHB est importante. La motilité est positive. Les co- PHB is important. Motility is positive. The co-

lorations des flagelles (méthode au nitrate d'argent modifiée) montrent que la souche a une flagellation mixte, c'est-à-dire des flagelles polaires et latéraux,  flagella lorations (modified silver nitrate method) show that the strain has a mixed flagellation, that is to say polar and lateral flagella,

aussi bien que des flagelles péritriches. as well as peritrich flagella.

C. Caractéristiques physiologiques et biochimiques On donne ci-après les résultats d'essais effectu6s:  C. Physiological and biochemical characteristics The results of the tests carried out are given below:

Résultat faible ou négatif avec la cyto- Weak or negative result with cyto-

chrome-oxydase; positif avec la catalase. chromium oxidase; positive with catalase.

L'organisme est capable de développement  The organism is capable of development

à 37 et à 41 C, mais pas à 43 C.at 37 and 41 C, but not at 43 C.

Tolérance à 3,0 % de NaCl, mais pas à 6,5 Tolerance of 3.0% NaCl, but not 6.5

de NaCl.NaCl.

Développement à des pH compris entre 5 et  Development at pH between 5 and

12.12.

De l'acide, mais pas de gaz, est produit  Acid, but no gas, is produced

dans des conditions aérobies à partir de divers hy-  under aerobic conditions from various hy-

drates de carbone, tels que les suivants: D-xylose lactose L-arabinose maltose D-glucose mélibiose fructose sucrose galactose tréhalose mannose raffinose Le lait tournesols est réduit, mais pas peptonisé. Les résultats sont positifs avec ADH, mais  carbon drates, such as the following: D-xylose lactose L-arabinose maltose D-glucose melibiose fructose sucrose galactose trehalose mannose raffinose Sunflower milk is reduced, but not peptone. The results are positive with ADH, but

pas avec LDC, ODC et PDA.not with LDC, ODC and PDA.

Les résultats sont positifs avec 1R, mais négatifs avec VP, l'indole et l'uréase. La gélatine d'esculine et Tween 80 sont faiblement hydrolysés, mais pas la caséine, l'amidon,  The results are positive with 1R, but negative with VP, indole and urease. Esculin gelatin and Tween 80 are weakly hydrolyzed, but not casein, starch,

la cellulose et la pectine.cellulose and pectin.

Pas de phosphatase, et hémolyse négative. No phosphatase, and negative hemolysis.

Pas d'inhibition par 0,1 % de chlorure de triphényltétrazolium. No inhibition with 0.1% triphenyltetrazolium chloride.

Survie à 600 C pendant 30 minutes.Survival at 600 C for 30 minutes.

Les organismes se développent sur la gélose EBL et sur Tellurite Blood, mais pas sur les géloses  Organisms thrive on EBL agar and Tellurite Blood, but not on agars

SS et MacConley.SS and MacConley.

D. Essai de sensibilité aux antibiotiques D. Antibiotic susceptibility testing

La souche S-130 est sensible aux antibio-  The S-130 strain is sensitive to antibiotics

tiques suivants:following ticks:

Kanamycine.............. 0........ug....... Kanamycin .............. 0 ........ ug .......

Néomycine............................. 30ug Chlorotétracycline....... 5g Novobiocine...................O...g. Erythromycine....... . ........ 15pg Tétracycline.. .0g............ g Neomycin ............................. 30ug Chlorotetracycline ....... 5g Novobiocin ......... .......... O ... g. Erythromycin ........ ........ 15pg Tetracycline .. .0g ............ g

Gentamicine.......................... Gentamicin ..........................

Carbénicilline............. 0............ 5 g et n'est pas sensible à: Pénicilline........................... 10 unités Streptomycine............  Carbenicillin ............. 0 ............ 5 g and is not sensitive to: Penicillin ............ ............... 10 units Streptomycin ............

......... 10 /ug /u Colistine............................. 10/ug Polymyxine B.......................... 300 unités E. Caractéristiques de nutrition Des facteurs organiques de développement..DTD: ne sont pas nécessaires et des sels d'ammonium ser-  ......... 10 / ug / u Colistin ............................. 10 / ug Polymyxin B. ......................... 300 units E. Characteristics of nutrition Organic factors of development..DTD: are not necessary and salts of ammonium ser-

vent de seule source d'azote. Un total de 30 composés -4- wind from only nitrogen source. A total of 30 compounds -4-

organiques sont utilisés comme seule source de car- organic are used as the sole source of car-

bone et d'énergie. La plupart des hydrates de carbone bone and energy. Most carbohydrates

sont utilisés.are used.

F. Teneur en G+C de l'ADNS On n'a pas effectué d'analyse de l'ADIN. G. Identification par le système API La souche n'a pas pu être identifiée par  F. G + C Content of DNAs ADIN analysis was not performed. G. Identification by the API system The strain could not be identified by

ce système.this system.

H. Identification La souche S-130 est un organisme aérobie H. Identification The strain S-130 is an aerobic organism

Gram-négatif en forme de bâtonnet. Le mode de fla-  Gram-negative rod-shaped. The mode of fla-

gellation de l'organisme est mixte; on observe des the body's gellation is mixed; we observe

flagelles polaires et péritriches (peut-être des fla- polar and peritrich flagella (perhaps fla-

gelles dégénérés). Selon le Bergey's Manual (8ème édition), ces organismes appartiennent au genre Alcaligenes. TABLEAU I: Essais biochimiques et autres essais divers utilisés pour la souche S-130 Oxydase: de Kovac Pathotech Catalase milieu CF: oxydant fermentatif Gaz à partir de glucose Productioide 112S: TSI à partir de cystine Ammonium à partir de peptone p-galactosidase (ONPG) Arginine dihydrolase Lysine décarboxylase Ornithine décarboxylase Tryptophane désaminase Phénylalanine désaminase Uréase Indole Essai MR Essai VP Réduction de nitrate Réduction de nitrite Dénitrification Fixation de N2 Développement dans milieu de Burk Activité de nitrogénase Lalonate (oxydation) Phosphatase + (faible) + (faible + + t NT + + HT + Hydrolyse de Gélatine Caséine Amidon Tween 80 Pectine Alginate Cellulose Chitine ADN Esculine Développement sur divers Gélose EMB Gélose MacConkey Gélose SS Gélose au sel de manni' Gélose TCBS Gélose au sang et au tellurite de Tinsdale Gélose Pseudosel + (faible) + (faible) NT + s milieux + ! %1 tol + NT Production de pigment: Milieu King A Milieu King B + NT Réaction de colorants: Rouge Congo 0' 0. o C> C> C> TABLEAU I (Suite) Hémolyse (sang de mouton) Lait tournesolé: acide, réduction Production de 3-catolactose Survie à 60 C pend. 30 min. TSI: Culture inclinée "Butte" Gaz Réaction au jaune d'oeuf seulement + Acide Pas de développement + = positif - = négatif NT = pas essayé os J'. o o0 0n CD I VI Conditions de fermentation L'hétéropolysaccharide S-130 est produit durant la fermentation aérobie de milieux nutritifs aqueux appropriés dans des conditions contrôlées par inoculation de l'organisme de l'espèce nondénommée d'Alcaligenes. Les milieux sont des milieux usuels, contenant une source de carbone, d'azote et de sels inorganiques. En général, les hydrates de carbone (par degenerated gelles). According to the Bergey's Manual (8th edition), these organisms belong to the genus Alcaligenes. TABLE I: Biochemical tests and other various tests used for the strain S-130 Oxydase: from Kovac Pathotech Catalase CF medium: fermentative oxidant Gas from glucose Productioide 112S: TSI from cystine Ammonium from peptone p-galactosidase (ONPG ) Arginine dihydrolase Lysine decarboxylase Ornithine decarboxylase Tryptophan deaminase Phenylalanine deaminase Urease Indole MR test VP test Nitrate reduction Nitrite reduction Denitrification N2 fixation Development in Burk medium Nitrogenase activity Lalonate (oxidation) Phosphatase + (low + + (weak + +) NT + + HT + Gelatin hydrolysis Casein Starch Tween 80 Pectin Alginate Cellulose Chitin DNA Esculin Development on various EMB agar MacConkey agar SS Manni salt agar TCBS agar Tinsdale tellurite agar Pseudosel agar + (weak) + (low) NT + s media +!% 1 tol + NT Pigment production: King A medium King B medium + NT Color reaction ants: Rouge Congo 0 '0. o C> C> C> TABLE I (Continued) Hemolysis (sheep's blood) Sunflower milk: acid, reduction Production of 3-catolactose Survival at 60 C pend. 30 min. TSI: Inclined culture "Butte" Gas Reaction to egg yolk only + Acid No development + = positive - = negative NT = not tried bone J '. o o0 0n CD I VI Fermentation conditions Heteropolysaccharide S-130 is produced during aerobic fermentation of suitable aqueous nutrient media under conditions controlled by inoculation of the organism of the non-alkaligenic species. The media are usual media, containing a source of carbon, nitrogen and inorganic salts. In general, carbohydrates (for

exemple le glucose, le fructose, le maltose, le su-  example glucose, fructose, maltose, su-

crose, le xylose, le mannitol, etc) peuvent être uti-  crose, xylose, mannitol, etc.) can be used

lisés isolément ou en combinaison comme sources de  read individually or in combination as sources of

carbone assimilable dans le milieu nutritif. La quan- carbon assimilated in the nutrient medium. The quan-

tité exacte de la source ou des sources hydrate de carbone qu'on utilise dans le milieu dépend en partie exact amount of the carbohydrate source or sources used in the environment depends in part

des autres ingrédients dans le milieu, mais, en géné- other ingredients in the middle, but generally

ral, la quantité d'hydrate de carbone varie habituel-  ral, the amount of carbohydrate varies usually-

lement entre 2 et 4 % environ du poids du milieu. De préférence, on utilise 3 % de glucose. Ces sources de -carbone peuvent 8tre utilisées individuellement ou between 2 and 4% approximately of the weight of the medium. Preferably, 3% glucose is used. These carbon sources can be used individually or

plusieurs de ces sources de carbone peuvent être com- many of these carbon sources can be com-

binées dans le milieu. En général, de nombreuses ma-  hoeed in the middle. In general, many ma-

tières protéiques peuvent être utilisées comme sources protein sources can be used as sources

d'azote dans la fermentation. Des sources d'azote uti- nitrogen in fermentation. Sources of nitrogen used

lisables sont, par exemple,des hydrolysats de levures, readable are, for example, yeast hydrolysates,

de la levure primaire, de la farine de soja, de la fa- primary yeast, soy flour, fa-

rine de graines de coton, des hydrolysats de caséine, cottonseed rine, casein hydrolysates,

de la liqueur de macération de maïs, des résidus so-  corn maceration liquor, so-

lubles de distillation, de la pâte de tomates, etc. Les sources d'azote, isolément ou en combinaison, sont utilisées à raison de 0,05 à 0,4 CDU environ du poids distillates, tomato paste, etc. Nitrogen sources, alone or in combination, are used at a rate of about 0.05 to 0.4 CDU by weight

du milieu aqueux.aqueous medium.

Parmi les sels inorganiques nutritifs qui peuvent être incorporés dans les milieux de culture, se trouvent les sels usuels capables de donner des -8ions de sodium, de potassium, d'ammonium, de calcium et des ions phosphate, sulfate, chlorure, carbonate,  Among the nutritive inorganic salts which can be incorporated into the culture media, are the usual salts capable of giving sodium, potassium, ammonium, calcium ions and phosphate, sulfate, chloride, carbonate,

etc. Sont inclus aussi des métaux présents en quanti- etc. Also included are metals present in quanti-

tés de l'ordre de traces comme le cobalt, le manganèse, le fer et le magnésium.  t order of traces such as cobalt, manganese, iron and magnesium.

Il y a lieu de noter que les milieux dé- It should be noted that

crits dans les exemples sont seulement illustratifs de la grande variété de milieux pouvant être utilisés, shown in the examples are only illustrative of the wide variety of media that can be used,

et ne doivent pas être considérés comme limitatifs.  and should not be considered as limiting.

Une caractéristique importante des milieux est que quand la souche S-130 est cultivée dans des conditions de basse teneur en Ca ++, c'est-à-dire dans de l'eau désionisée ou dans un système aqueux ayant moins de 200 ppm d'ions Ca, la gomme résultante a  An important characteristic of the media is that when the strain S-130 is cultivated under conditions of low Ca ++ content, that is to say in deionized water or in an aqueous system having less than 200 ppm d Ca ions, the resulting gum has

des propriétés améliorées de dissolution.  improved dissolution properties.

La fermentation est effectuée à des tempé- Fermentation is carried out at temperatures

ratures comprises entre 25 et 355C environ; toutefois, pour les meilleurs résultats, il est préférable de conduire la fermentation à des températures comprises entre 28 et 32 C environ. Le pH des milieux nutritifs pour le développement de la culture d'Alcaligenes et pour la production du polysaccharide S-130 peut varier  erasures between about 25 and 355C; however, for the best results, it is preferable to conduct the fermentation at temperatures between about 28 and 32 C. The pH of the nutrient media for the development of the Alcaligenes culture and for the production of the polysaccharide S-130 can vary

entre 6 et 8 environ, de préférence entre 6,5 et 7,5.  between 6 and 8 approximately, preferably between 6.5 and 7.5.

Bien que le polysaccharide S-130 soit pro-  Although polysaccharide S-130 is pro-

duit par culture tant en surface qu'immergée, il est  produced by culture both above and below ground, it is

préféré de conduire la fermentation à l'état immergé. preferred to conduct the fermentation in the submerged state.

On effectue commodément une fermentation à Fermentation is conveniently carried out at

petite échelle en inoculant un milieu nutritif appro- small scale by inoculating a suitable nutrient medium

prié avec la culture et, après transfert à un milieu de production, en permettant à la fermentation de  prayed with the crop and, after transfer to a production medium, allowing the fermentation to

s'effectuer à une température constante de 300C envi- be carried out at a constant temperature of around 300C

ron sur une secoueuse pendant plusieurs jours. ron on a shaker for several days.

La fermentation est commencée dans un flacon stérilisé de milieu par une ou plusieurs étapes de  Fermentation is started in a sterilized medium flask by one or more stages of

développement de germes. Le milieu nutritif pour l'é- germ development. The nutrient medium for e-

-9 --9 -

tape de développement de germes peut être une combi- germ development stage can be a combination of

naison appropriée quelconque de sources de carbone et  any suitable source of carbon sources and

d'azote. Le flacon de développement de germes est se-  nitrogen. The germ development vial is se-

coué dans une chambre à une température constante de 30%0 environ pendant 1 à 2 jours, ou jusqu'à ce que le développement soit satisfaisant, et on utilise un peu du développement végétatif résultant pour inoculer un deuxième étage de développement de germes ou le milieu de production. Les flacons des étages intermédiaires de développement de germes, quand on les utilise, sont lying in a chamber at a constant temperature of about 30% 0 for 1 to 2 days, or until development is satisfactory, and a little of the resulting vegetative development is used to inoculate a second stage of germ development or the production environment. The vials of the intermediate stages of germ development, when used, are

développés essentiellement de la même manière; c'est- developed essentially in the same way; this is-

à-dire qu'une partie du contenu du flacon du dernier étage de développement de germes est utilisée pour inoculer le milieu de production. Les flacons inoculés that is, part of the contents of the vial from the last stage of germ development is used to inoculate the production medium. The inoculated vials

sont secoués à une température constante pendant plu- are shaken at a constant temperature for more

sieurs jours et à la fin de la période d'incubation days and at the end of the incubation period

les contenus des flacons sont recueillis par précipi-  the contents of the vials are collected by precipitation

tation par un alcool approprié comme l'isopropanol.  tation with a suitable alcohol such as isopropanol.

Pour un travail à grande échelle, il est For large-scale work, it is

préférable de conduire la fermentation dans des ré-  preferable to conduct the fermentation in

servoirs appropriés équipés d'un agitateur et d'un moyen pour aérer le milieu de fermentation. Selon ce  appropriate servoirs equipped with an agitator and a means for aerating the fermentation medium. According to what

procédé, le milieu nutritif est préparé dans le ré- process, the nutrient medium is prepared in the re-

servoir et stérilisé par chauffage à des températures allant jusqu'à 121'C environ. Après refroidissement, serve and sterilized by heating to temperatures up to approximately 121 ° C. After cooling,

le milieu stérilisé est inoculé avec des germes obte- the sterilized medium is inoculated with germs obtained

nus précédemment de la culture productrice et on laisse s'effectuer la fermentation pendant un laps de temps de, par exemple, 2 à 4 jours tout et agitant et/ou en aérant le milieu nutritif et en maintenant  previously naked from the producing culture and the fermentation is allowed to take place for a period of, for example, 2 to 4 days while stirring and / or aerating the nutritive medium and maintaining

la température à 3OC environ. Ce procédé de produc-  the temperature at around 3OC. This production process

tion du S-130 convient particulièrement bien pour la tion of the S-130 is particularly suitable for

préparation de grandes quantités.preparation of large quantities.

Le produit est recueilli à partir du milieu The product is collected from the middle

de fermentation par précipitation par un alcool appro-  fermentation by precipitation with a suitable alcohol

-10--10-

prié, comme l'isopropanol.prayed, like isopropanol.

Hétéropolysaccharide S-150Heteropolysaccharide S-150

L'hétéropolysaccharide produit par une es-  The heteropolysaccharide produced by an es-

pèce non dénommée d'Alcaligenes est composé principa-  unspecified species of Alcaligenes is composed mainly

lement d'hydrates de carbone avec 3-5 % de groupes  carbohydrates with 3-5% groups

acétyle comme l'ester à liaison 0-glycosidique.  acetyl as the 0-glycosidic ester.

La portion hydrate de carbone du polysaccha-  The carbohydrate portion of polysaccha-

ride S-130 contient 10-20 % d'acide glucuronique; -25 % de mannose; 20-40 % de glucose; et 30-60 % wrinkle S-130 contains 10-20% glucuronic acid; -25% mannose; 20-40% glucose; and 30-60%

de rhamnose.of rhamnose.

La teneur en groupes acétyle de 5-10 % a été déterminée en traitant une solution aqueuse à 0,2 % de gomme S-130 par un réactif alcalin, l'hydroxylamine,  The acetyl group content of 5-10% was determined by treating a 0.2% aqueous solution of S-130 gum with an alkaline reagent, hydroxylamine,

cela étant suivi d'un traitement par un réactif chlo- this being followed by treatment with a chlorine reagent

rure ferrique acide LS. Hestrin (1949) J. Biol. Chem. acid ferric rure LS. Hestrin (1949) J. Biol. Chem.

, pages 249-261]., pages 249-261].

Les sucres neutres du polysaccharide S-130 ont été déterminés en dissolvant 10 mg du produit dans The neutral sugars of polysaccharide S-130 were determined by dissolving 10 mg of the product in

2 cm3 de solution 211 de H2S04 et en chauffant le mé- 2 cm3 of solution 211 of H2S04 and by heating the

lange à 100 C pendant 4 heures. La solution résultante a été refroidie, neutralisée par l'hydroxyde de baryum swaddle at 100 ° C for 4 hours. The resulting solution was cooled, neutralized with barium hydroxide

et on a porté le pH à 5-6 au moyen d'anhydride carbo-  and the pH was brought to 5-6 using carbon dioxide

nique solide. Le précipité résultant de sulfure de baryum a été éliminé par centrifugation et le liquide surnageant a été concentré à l'état d'un sirop sous pression réduite. On a tenté d'identifier les sucres dans l'hydrolysat par chromatographie gaz-liquide de solid picnic. The resulting barium sulfide precipitate was removed by centrifugation and the supernatant was concentrated to a syrup under reduced pressure. Attempts have been made to identify the sugars in the hydrolyzate by gas-liquid chromatography of

leurs dérivés aldononitrile acétate sur un chromato- their aldononitrile acetate derivatives on a chromato-

graphe modèle 5750 de Hewqlett-Packard en utilisant 3 %, en poids d'OV225 sur Gas Chrom Q en particules  Hewqlett-Packard model 5750 graph using 3%, by weight of OV225 on Gas Chrom Q in particles

de 0,149 à 0,177 mm à 210 C. On a identifié et déter-  from 0.149 to 0.177 mm at 210 C. We have identified and determined

miné quantitativement les sucres par comparaison avec des étalons authentiques {J.K. Baird, M.J. Holroyde, quantitatively mined the sugars by comparison with authentic standards {J.K. Baird, M.J. Holroyde,

et D.C. Ellwood [1973) Carbohydr. Res. 27 pages 464- & D.C. Ellwood [1973) Carbohydr. Res. 27 pages 464-

467].467].

-11 --11 -

Les divers sucres neutres des polysaccha- The various neutral sugars of polysaccha-

rides ont été caractérisés aussi par utilisation de chromatographie descendante sur papier sur du papier pour chromatographie Whatman N I en utilisant comme solvant la couche supérieure d'un mélange pyridine:  wrinkles were also characterized by the use of descending chromatography on paper on Whatman N I chromatography paper using as solvent the upper layer of a pyridine mixture:

acétate d'éthyle: eau (2:5:5). On a coloré les chro-  ethyl acetate: water (2: 5: 5). We colored the chro-

matogrammes en utilisant une immersion dans le ni- matograms using immersion in ni-

trate d'argent et un réactif pour pulvérisation phta-  silver trate and phta spray reagent

late d'alanine acide. Les sucres constituants ont été identifiés par cochromatographie avec des étalons de sucres et par la réaction de couleur spécifique avec  acid alanine late. The constituent sugars were identified by cochromatography with sugar standards and by the specific color reaction with

le réactif phtalate d'alanine.alanine phthalate reagent.

La teneur en acide glucuronique du poly- The glucuronic acid content of poly-

saccharide a été déterminée par deux méthodes sépa- saccharide was determined by two separate methods

rées. Dans une méthode, l'échantillon a été décarboxy-  rees. In one method, the sample was decarboxy-

lé par de l'acide chlorhydrique à 19 % et l'anhydride carbonique libéré a été recueilli dans de l'hydroxyde de sodium normal et on a effectué des déterminations par titrage en retour L B.L. Browning (1967) Methods of Wood Chemistr2 II, pages 632-633] et par la méthode colorimétrique au carbazole LT. Bitter et H.M. Muir  lated with 19% hydrochloric acid and the released carbon dioxide was collected in normal sodium hydroxide and back titration determinations were carried out L BL Browning (1967) Methods of Wood Chemistr2 II, pages 632-633] and by the carbazole LT colorimetric method. Bitter and H.M. Muir

(1962) Anal. BioDhem. 4 pages 330-334]. (1962) Anal. BioDhem. 4 pages 330-334].

On a utilisé une électrophorèse sur papier pour la séparation et la tentative d'identification de l'acide glucuronique présent dans l'hydrolysat Paper electrophoresis was used to separate and attempt to identify the glucuronic acid present in the hydrolyzate

acide neutralisé décrit ci-dessus. Des portions ali- neutralized acid described above. Food portions

quotes de ce dernier et des étalons connus d'acide glucuronique ont été appliqués sur du papier pour électrophorèse Camag 'E 68-011 et-on a effectué une électrophorèse pendant 2,0 heures dans un tampon au pH 2,7 en utilisant un appareil d'électrophorèse Camag modèle huVE. Les chromatogrammes ont été colorés avec le réactif pour immersion au nitrate d'argent  quotes of the latter and known glucuronic acid standards were applied to Camag 'E 68-011 electrophoresis paper and electrophoresis was performed for 2.0 hours in pH 2.7 buffer using an apparatus Camag electrophoresis model huVE. Chromatograms were stained with the silver nitrate immersion reagent

afin de localiser les acides glucuroniques séparés.  in order to locate the separated glucuronic acids.

Le polysaccharide S-130 donne de la viscosité -12- à un milieu aqueux quand il est dissous dans l'eau à de faibles concentrations. Pour cette raison et aussi pour sa sensibilité au cisaillement et sa rhéologie d'ensemble, il est utile comme épaississant, agent de suspension, émulsionnant, stabilisant, lubrifiant, The polysaccharide S-130 gives viscosity -12- to an aqueous medium when it is dissolved in water at low concentrations. For this reason and also for its shear sensitivity and its overall rheology, it is useful as a thickener, suspending agent, emulsifier, stabilizer, lubricant,

agent filmogène ou liant, spécialement dans des sys- film-forming or binding agent, especially in sys-

tèmes aqueux. En particulier, il a des utilisations  aqueous temes. In particular, it has uses

dans les applications suivantes ou les produits sui- in the following applications or the following products

vants: adhésifs, ciments pour joints de murs, mor- vants: adhesives, cements for wall joints, mortar

tiers liquides et mortiers retenant l'eau, enduits pour bouchage de fissures, étanchéité des bottes de conserve, produits pour chaudières, crémage du latex, fondants pour baguettes de soudure, pâtes à braser, vernis céramiques et extrusions, produits de nettoyage et de brillantage, jouets, émulsions (latex, asphalte, water-retaining liquids and mortars, coatings for sealing cracks, sealing of canning boots, products for boilers, latex creaming, fluxes for welding rods, solder paste, ceramic varnishes and extrusions, cleaning and polishing products , toys, emulsions (latex, asphalt,

silicone), récupération de l'argent, enrobages de se- silicone), silver recovery, coating of

mences, réglage de la pulvérisation pour pesticides ou herbicides, pesticides et herbicides fluides et concentrés émulsionnables, liants pour tabac, encres mences, spray control for pesticides or herbicides, emulsifiable fluids and concentrated pesticides and herbicides, tobacco binders, inks

à base d'eau, solutions pour distributeurs lithogra-  water-based, solutions for lithographic distributors

phiques, produits de finition pour cuir, hydro-paillage  phiques, leather finishing products, hydro-mulching

et hydro-sémis, impression et finition de tissus, addi- and hydro-semis, printing and finishing of fabrics, addi-

tifs pour papier à ajouter dans la partie humide, ad- tifs for paper to be added in the wet part, ad-

juvant de rétention et de formation pour papier à ajouter dans la partie humide, produits anti-adhésifs, agents de démoulage, résines liquides, explosifs en bouillie et emballés, boues de forage pour puits de pétrole et puits d'eau, fluides de stimulation pour pétrole, produits de beauté, suspensions et émulsions  retention and training agent for paper to be added to the wet part, non-stick products, release agents, liquid resins, porridge and packaged explosives, drilling muds for oil and water wells, stimulation fluids for petroleum, cosmetics, suspensions and emulsions

pharmaceutiques.pharmaceutical.

De plus, cette gomme est utile dans des pro- In addition, this eraser is useful in pro-

duits alimentaires tels que des Gelées et d'autres produits d'une haute teneur en sucre, des boissons comprenant des boissons à base d'acide citrique, des v5 produits laitiers comprenant la crème glacée et le  food products such as jellies and other high sugar products, beverages including citric acid beverages, dairy products including ice cream and

2:4650002: 465000

-13- yaourt, des assaisonnements pour salade, des mélanges secs, des glaçages, des sirops, les gâteaux dits puddings, des aliments farineux, des aliments en boites de conserve et passés à l'autoclave et des produits de remplissage pour boulangerie. Une utilité particulièrement intéressante se trouve dans le domaine des boues de forage pour puits de pétrole et puits d'eau. Cn trouvera ci-après  -13- yogurt, salad dressings, dry mixes, frostings, syrups, so-called pudding cakes, floury foods, canned and autoclaved foods and bakery fillers. A particularly interesting utility is found in the field of drilling muds for oil wells and water wells. You will find below

des exemples plus détaillés illustrant cette utilisa-  more detailed examples illustrating this use

tion préférée.preferred tion.

Bien que la gomme S-130 possède une proprié-  Although S-130 gum has one property

té générale consistant à donner de la viscosité, son profil particulier de propriétés en solution est une  general tee consisting in giving viscosity, its particular profile of properties in solution is a

caractéristique distinctive qui permet de la distin-  distinctive feature which allows the distinction

guer des autres hétéropolysaccharides. war with other heteropolysaccharides.

Brièvement, la gomme est d'une haute visco- Briefly, the gum is of a high viscosity

sité en présence de 0,1 % de KCl (1650 cPo) et d'eau DI (1470 cPo). Elle présente une excellente stabilité à l'acide acétique à chaud (+36 A) et à la chaleur (-1 %). Un gel se forme en présence de chaleur et de sited in the presence of 0.1% KCl (1650 cPo) and DI water (1470 cPo). It has excellent stability to hot acetic acid (+36 A) and to heat (-1%). A gel forms in the presence of heat and

1 % de NaOH. Cette gomme est réactive à KOl, présen-  1% NaOH. This gum is reactive to KOl, present

tant un accroissement de viscosité de plus de 16 % en présence de 0,1 % et de 2,5 % de ÉCl. Il se forme both an increase in viscosity of more than 16% in the presence of 0.1% and 2.5% of Cl. It is formed

un film fragile, d'une faible résistance à la trac-  a fragile film with low resistance to traction

tion.tion.

Les propriétés suivantes de la gomme: bonne viscosité dans la saumure (KCl et ITaCl) et dans l'eau de mer, bonne stabilité aux acides et à la chaleur, viscosité constante dans des plages de pH de 1,5 à 12,1 et bonne stabilité au cisaillement, la rendent The following properties of the gum: good viscosity in brine (KCl and ITaCl) and in sea water, good acid and heat stability, constant viscosity in pH ranges from 1.5 to 12.1 and good shear stability, make it

spécialement utilisable pour des applications indus- specially usable for industrial applications

trielles comme dans des fluides de forage et des fluides pour l'industrie du pétrole. Spécialement, la gomme S-130 a une excellente stabilité à la chaleur et il ne se produit pas de perte de viscosité lors -14- d'un passage à l'autoclave à 121 C et à 1,05 kg/cm2  such as in drilling fluids and fluids for the petroleum industry. Especially, the S-130 gum has excellent heat stability and there is no loss of viscosity during an autoclave at 121 C and 1.05 kg / cm2

pendant 15-20 minutes.for 15-20 minutes.

1. Viscosité et cisaillement A. Brookfield Di H20 DIK2O + 0,1 % i C1 1. 1, 0,0 à 60 tpm 1470 cPo 1650 cPo à 6 tpm 10 400 cPo Rotor N 3 2. 0,1% (adaptateur UL)a 45 cPo 30 cPo 3. 0,5 % Uells-Brookfield à 9,6 s 680 cPo 1180 cPo B. Cisaillementb 1. n à 19,2 s 10 110 cPo 2. n à 9,6 s1 2 200 cPo 3. n à 76,8 s-1 320 cPo 4. n à 384 s-1 60 cPo  1. Viscosity and shear A. Brookfield Di H20 DIK2O + 0.1% i C1 1. 1, 0.0 at 60 rpm 1470 cPo 1650 cPo at 6 rpm 10 400 cPo Rotor N 3 2. 0.1% (UL adapter ) a 45 cPo 30 cPo 3. 0.5% Uells-Brookfield at 9.6 s 680 cPo 1180 cPo B. Shear b 1. n at 19.2 s 10 110 cPo 2. n at 9.6 s1 2,200 cPo 3 .n at 76.8 s-1320 cPo 4. n at 384 s-1 60 cPo

82 -1 6OF82 -1 6OF

5. n à 3&82 scPo 6. n à 9,6 s-1 1 800 cPo C. Stockage à 4,400 C  5. n at 3 & 82 scPo 6. n at 9.6 s-1 1,800 cPo C. Storage at 4,400 C

2050 cPo à 60 tpm avec rotor N 4, écoule- 2050 cPo at 60 rpm with N 4 rotor, flow

ment très saccadé, accroissement de viscosité de 39 % very jerky, 39% increase in viscosity

par rapport à la viscosité à la température ambiante. relative to viscosity at room temperature.

2. Stabilité aux acides, aux bases et à la chaleur A. Stabilité 1. Acide acetique plus chaleur valeur initiale de n: 2500 cPo valeur finale de n: 5600 cPo % de changement: +36 2. I G HC1l plus chaleur valeur initiale de n: 1230 cPo valeur finale de n: perte totale % de changement: perte totale 3. 1 % NIaOH plus chaleur valeur initiale de n: 1380 cPo -15- valeur finale de n: Gel % de changement: Gel 4. Chaleur seulement valeur initiale de n: 2130 cPo valeur f inale de n: 2100 cPo % de changement: -1 B. Effet du pH 1. Acide acétique & 5 % pH Wl7 2560 cPoC 2. NH40H à 5% pH _11,09 200 cPoc 3. Compatibilité avec les sels et les colorants A. Sels 1. CaCl2 (saturé) compatible 2. Polyphosphate d'ammonium précipité 3. NI{4I03 à 60 % compatible 4. 1 % A1203(SO4)3.18H20 compatible 5. 1 % CaCl22H20 coM2atible 6. 1% KC1 comatible 7. 0,1 % OCl 2560 cPo 8. 2,5 % KCl 2560 cPo B. Colorants 1. Vert ';illing"' compatible 2. Bleu de méthylène précipité 4. Propriétés texture/écoulement  2. Stability to acids, bases and heat A. Stability 1. Acetic acid plus heat initial value of n: 2500 cPo final value of n: 5600 cPo% change: +36 2. IG HC1l plus heat initial value of n: 1230 cPo final value of n: total loss% of change: total loss 3. 1% NIaOH plus heat initial value of n: 1380 cPo -15- final value of n: Freeze% of change: Gel 4. Heat only value initial of n: 2130 cPo final value of n: 2100 cPo% change: -1 B. Effect of pH 1. Acetic acid & 5% pH Wl7 2560 cPoC 2. NH40H at 5% pH _11.09 200 cPoc 3. Compatibility with salts and dyes A. Salts 1. Compatible CaCl2 (saturated) 2. Precipitated ammonium polyphosphate 3. NI {4I03 at 60% compatible 4. 1% A1203 (SO4) 3.18H20 compatible 5. 1% CaCl22H20 coM2atible 6. 1% KC1 comatible 7. 0.1% OCl 2560 cPo 8. 2.5% KCl 2560 cPo B. Dyes 1. Green; illing "compatible 2. Methylene blue precipitate 4. Texture / flow properties

Gomme d'une haute viscosité, écoulement sac-  High viscosity rubber, sack flow

cadé, pas de gélification, gommeux au toucher.  framed, no gelling, gummy to the touch.

5. Synergie et enz7umesc n à 1% à 0 heure à 2 heures _ du mélange du mélange A. Guar 2320 cPo 2560 cPo 2560 cPo B. H.P. Guar 1960 cPo 1950 cPo 2560 cPo C. CIC 870 cPo 1310 cPo 97o cPo D. HEC 440 cPo 870 cPo 1180 cPo E. SMS 47-6 2150 cPo -16- Viscosité prévisible Synergie A. Guar 2230 cPo + 15 % B. H.P. Guar 2050 cPo +25 % C. CLC 1360 cPo 0 % D. HEC 97 cPo +22 % 6. Réactivité avec le lait A. Dispersion: excellent B. Séparation du petit-lait: 1er jour C. Autres observations: 7. Formation de film S'étend de manière irrégulière; un film se forme, non plastique, très fragile, faible résistance 5. Synergy and enz7umesc n at 1% at 0 hours to 2 hours _ of the mixture of mixture A. Guar 2320 cPo 2560 cPo 2560 cPo BHP Guar 1960 cPo 1950 cPo 2560 cPo C. CIC 870 cPo 1310 cPo 97o cPo D. HEC 440 cPo 870 cPo 1180 cPo E. SMS 47-6 2150 cPo -16- Predictable viscosity Synergy A. Guar 2230 cPo + 15% BHP Guar 2050 cPo +25% C. CLC 1360 cPo 0% D. HEC 97 cPo +22% 6 Reactivity with milk A. Dispersion: excellent B. Separation of whey: 1st day C. Other observations: 7. Film formation Spreads irregularly; a film is formed, non-plastic, very fragile, low resistance

à la traction.tensile.

aviscosit mesurée sur un viscosimètre Brookfield  aviscosit measured on a Brookfield viscometer

modèle LVF à 6 tpm avec le rotor IN 1 et un adapta- LVF model at 6 rpm with the IN 1 rotor and an adapter

teur UL.-UL -

bToutes mesures effectuées sur un viscosimètre Wells- bAll measurements made on a Wells viscometer-

Brookfield modèle RVT-c/p.Brookfield model RVT-c / p.

CViscosité mesurée sur un micro-viscosimètre Wells-  CViscosity measured on a Wells micro-viscometer

-1-1

Brookfield modèle RVT-c/p à 9,6 s1.  Brookfield model RVT-c / p at 9.6 s1.

Exemple 1Example 1

Procédé de fermentation pour la production d'hétéro-  Fermentation process for the production of hetero

polysaccharide S-130 A. Entretien de la culture L'organisme Alcaligenes non-dénommé, ATCC 51555, pousse très bien sur gélose NA, avec une  polysaccharide S-130 A. Cultivation maintenance The non-named Alcaligenes organism, ATCC 51555, grows very well on NA agar, with a

bonne morphologie des colonies. La température d'incu- good colony morphology. Incubation temperature

bation est de 50 C. L'organisme produit un pigment  bation is 50 C. The body produces a pigment

jaune.yellow.

B. Preparation de germes Des germes en ballons sont préparés dans du bouillon YlM mis à incuber à 50 C pendant 24 heures, puis utilisés pour inoculer un milieu de production de germes qui est le m me que dans le fermenteur -17-  B. Preparation of germs Germs in flasks are prepared in YlM broth incubated at 50 ° C. for 24 hours, then used to inoculate a medium for producing germs which is the same as in the fermenter -17-

final. On utilise un inoculum à 5 % pour le fermen-  final. A 5% inoculum is used for the fermen-

teur de 14 litres.14 liters.

C. Milieu dans le fermenteur finalC. Medium in the final fermenter

Le milieu suivant donne des résultats ac-  The following medium gives ac-

ceptables dans le fermenteur de 14 litres et peut  ceptables in the 14 liter fermenter and can

8tre utilisé pour des fermenteurs de plus grande ca-  8be used for larger fermenters

pacité, de 20 litres et de 70 litres: Glucose............................. * 3,0 %  capacity, 20 liters and 70 liters: Glucose ............................. * 3.0%

K2HPO4.............................. 0,05 %  K2HPO4 .............................. 0.05%

* Promosoy............................ 0,05 % NHeO3.. 6.. *.........a.0,09 %é* Promosoy ............................ 0.05% NHeO3 .. 6 .. * ......... a.0.09% é

NH4N05, /.........................0C0  NH4N05, /.........................0C0

MgS04.7H20.0,1 % Fe+. ............. 1 ppm Sels HoLe....................... .1 ml/L On règle le pH entre 6,5 et 7,5. A O heure, le pH est de 7,3 et la quantité de source de carbone résiduelle mesurée est de 5,07 %. Après 25,5 heures, le pH est de 7,0 et la viscosité mesurée de la bière est de 2350. Après 63,5 heures, le pH est de 6,3 et MgS04.7H20.0.1% Fe +. ............. 1 ppm HoLe salts ........................ 1 ml / L The pH is adjusted between 6.5 and 7.5. At 0 o'clock, the pH is 7.3 and the amount of residual carbon source measured is 5.07%. After 25.5 hours, the pH is 7.0 and the measured viscosity of the beer is 2350. After 63.5 hours, the pH is 6.3 and

la viscosité de la bière de 3950 et on arrête la réac- the viscosity of the beer of 3950 and the reaction is stopped

tion en ajoutant 4 % d'isopropanol.tion by adding 4% isopropanol.

Les sels HoLe sont une solution d'oligo- HoLe salts are a solution of oligo-

éléments contenant du tartrate, du molybdate de magné-  elements containing tartrate, magnesium molybdate

sium, CoC13, ZnCl2, CuC12, de l'acide borique, du  sium, CoC13, ZnCl2, CuC12, boric acid,

chlorure de manganèse et du sulfate ferreux. manganese chloride and ferrous sulfate.

Les vitesses initiales d'agitation et d'aé- The initial agitation and aeration rates

ration sont de 400 tpm et de 3L/M, respectivement.  ration are 400 rpm and 3L / M, respectively.

L'aération reste constante pendant toute la fermenta-  Aeration remains constant throughout the fermentation.

tion. On augmente l'agitation suivant le besoin durant tion. Agitation is increased as needed during

la fermentation pour assurer un bon mélange. L'agita- fermentation to ensure a good blend. The restlessness

tion maximale est de 1600 tpm.maximum tion is 1600 rpm.

Quand on désire un produit d'une basse te-  When you want a product of a low te-

neur en calcium, on utilise le milieu ci-dessus avec  neur in calcium, we use the above medium with

de l'eau désionisée.deionized water.

-18- D. Recueil La bière de fermentation est pasteurisée à 0 pendant 1015 minutes. De bonnes fibres sont produites dans des conditions de précipitation donnant 58-60 % d'IPA usé. E. Séchage Le produit est recueilli après séchage à -55 C pendant une heure environ dans un séchoir à  -18- D. Collection The fermentation beer is pasteurized at 0 for 1015 minutes. Good fibers are produced under precipitation conditions giving 58-60% of spent IPA. E. Drying The product is collected after drying at -55 C for approximately one hour in a

plateaux à air forcé.forced air trays.

Le produit préparé dans cet exemple pré-  The product prepared in this example pre-

sente une viscosité à 1 % de 1490 dans l'eau désioni- feels a viscosity at 1% of 1490 in deionized water

sée et de 2400 à 1 % dans de l'eau DI contenant 1 % de KCl ajouté. Il contient d'après l'analyse 12 % d'acide glucuronique, 28 % de glucose, 13 % de mannose, 59 % de rhamnose, 3,5 % de groupes acétyle et pas de pyruvate. Les mesures sur cette gomme indiquent un excellent développement de la viscosité dans KC1 à 2, avec une excellente stabilité à TTaCl et une excellente conservation de la viscosité jusqu'à au moins 149 C; on observe une légère gélification de la gomme dans  2400-1% in DI water containing 1% KCl added. According to the analysis, it contains 12% glucuronic acid, 28% glucose, 13% mannose, 59% rhamnose, 3.5% acetyl groups and no pyruvate. The measurements on this gum indicate an excellent development of the viscosity in KC1 to 2, with excellent stability at TTaCl and excellent retention of the viscosity up to at least 149 C; there is a slight gelling of the gum in

K01 à 2 %..K01 at 2%.

Exemple 2Example 2

Composition de boue à l'eau de mer S-130 est utile dans des boues utilisées pour le forage de puits de pétrole. Une formule et des résultats pour une boue à base d'eau de mer sont les suivants: S-130 1,0 kg Eau de mer 350 litres Résultats de viscosité Fann Vitesse (tpm) 3 6 100 200 300 600C Lecture sur le cadran 3,4 3,8 8,5 11,0 13,2 17,2 pH = 7,1  Seawater mud composition S-130 is useful in mud used for drilling oil wells. A formula and results for a seawater-based mud are as follows: S-130 1.0 kg Seawater 350 liters Viscosity results Fann Speed (rpm) 3 6 100 200 300 600C Reading on the dial 3 , 4 3.8 8.5 11.0 13.2 17.2 pH = 7.1

2465000.2,465,000.

-19--19-

Exemple 3Example 3

Composition d'un fluide de fracturation hydraulique  Composition of a hydraulic fracturing fluid

Exemple de fluide de fracturation hydrau- Example of hydraulic fracturing fluid

lique - pour températures élevées (au-dessus de 93 C): - lique - for high temperatures (above 93 C): -

pour 1000 litres: H20 % de méthanol ou 500 ppma de sulfite de sodium Z KCl 19,8 kg Persulfate d'ammonium 1,20 kg S-130 4,80 kg Viscosité du fluide ci-dessus: Fann 55 tpm 600 300 200 100 6 3 Viscosité, cPo 15,0 24, 2 5533,4 55,3 450 813  per 1000 liters: H20% methanol or 500 ppma sodium sulfite Z KCl 19.8 kg Ammonium persulfate 1.20 kg S-130 4.80 kg Viscosity of the above fluid: Fann 55 rpm 600 300 200 100 6 3 Viscosity, cPo 15.0 24, 2,533.4 55.3 450,813

Z465000Z465000

-20--20-

Claims (2)

- REVENDICALTIOITS -- CLAIMS - 1 - Hétéropolysaccharide S-130 contenant -20 % d'acide glucuronique; 1025 % de mannose; -40 % de glucose; 30-60 % de rhamnose; et 3-5 % de groupes acétyle, préparé par fermentation dans des conditions contrôlées d'une culture de ATCC 31555, 1 - S-130 heteropolysaccharide containing -20% glucuronic acid; 1025% mannose; -40% glucose; 30-60% rhamnose; and 3-5% of acetyl groups, prepared by fermentation under controlled conditions of a culture of ATCC 31555, une espèce d'Alcaligenes.a species of Alcaligenes. 2 - Produit selon la revendication 1, carac-  2 - Product according to claim 1, charac- térisé en ce qu'il contient moins de 200 ppm d'ions  terized in that it contains less than 200 ppm of ions Ca++.Ca ++.
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