FI92491B - Menetelmä farmakologisesti aktiivisten nukleosidijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

5 92491

Menetelmä farmakologisesti aktiivisten nukleosidijohdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää virusvastaisten yhdisteiden ja tarkemmin nukleosidijohdannaisten estereiden ja amidien valmistamiseksi, jotka vaikuttavat ihmisen immuuni-puutosvirusta (HIV), retrovirusta, joka aiheuttaa AIDS-tau-10 din, vastaan.

AIDS on suhteellisen uusi tauti. Se löydettiin 1981 ja sen jälkeen taudista on diagnosoitu useita tuhansia tapauksia. On odotettavissa, että lukumäärä kasvaa ainakin useisiin satoihin tuhansiin muutamina seuraavina vuosina. Tilan-15 ne on erityisen vakava useissa Keski-Afrikan maissa. AIDS on kuolemaan johtava tauti, ja noin 40 % kaikista diagnosoiduista tapauksista on päätynyt kuolemaan. Niistä, joiden on diagnosoitu sairastavan AIDS:ia kolme tai useampia vuosia sitten, arvioidaan noin 85 % kuolleen tähän mennessä.

20 Kliinisiä oireita ovat painon lasku, krooninen ripuli, jatkuva kuume ja opportunistiset infektiot T-solujen menetyksen vuoksi, mikä järkyttää puolustusjärjestelmän koko-naistasapainoa. Potilas menettää kykynsä taistella muutoin merkityksettömiä infektioita vastaan.

25 Infektion taltuttamiseksi on kokeiltu useita erilaisia menetelmiä. Kokeiltuja menetelmiä ovat puolustusjärjestelmän stimulointi sekä (sekundaaristen) henkeä uhkaavien infektioiden tavanomainen hoito. Tähän mennessä lupaavin menetelmä on ollut HIV-viruksen replikoitumiseen kohdistuva menetelmä.

30 On kokeiltu useita erilaisia yhdisteitä, jotka häiritsevät replikoitumista, esim. fosfonoformaatti (Foscarnet), sura-miini, Evansin sininen, 3'-atsido-3'-deoksitymidiini (AZT) ja 2',3'-dideoksinukleosidit.

EP-patenttihakemuksessa nro 0 196 185A kuvataan esim.

35 farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät AZT:ta, tunnettua yhdistettä, joka on ollut erittäin lupaava AIDS:n ja AIDS:iin liittyvän kokonaisuuden hoidossa. Uskotaan, että » 92491 » AZT toimii siten, että se estää käänteistranskriptaasia, elinvoimaista entsyymiä retrovirusten elinkaaressa.

5 Lisätutkimuksia on suoritettu sellaisille vaihtoehtoi sille käänteistranskriptaasiestäjille, joiden avulla voitaisiin välttää AZT:n rajoitukset ja haitat, esim. luuytimen häviäminen tai tarve antaa suhteellisen suuria määriä lääkettä usein, ja mainituista yhdisteistä tällaisia ovat olio leet 2',3'-dideoksinukleosidit.

Näiden yhdisteiden synteesi ja vaikutusta on kuvattu (Mitsuya ja Broder, Proc. Natl. Acad. Sei. 83., 1911 (1986)), ja osoitettiin, että sekä 2'- että 3'-asemien täytyy olla substituoimattornia, kun taas 5'-hydroksiryhmän on oltava 15 läsnä, mahdollistaen todennäköisesti muuttumisen vastaaviksi nukleotideiksi in vivo.

EP-patenttihakemuksessa nro 0 206 497A tuodaan esille sytosiini- tai puriiniemästen 2',3'-dideoksiribofuranosidi-johdannaisia virusvas tai sinä yhdisteinä. Vaikka siinä viita-2 0 taan näiden yhdisteiden estereihin mahdollisina metabolisina prekursoreina, siinä ei ole mainintaa siitä, että estereillä voisi olla minkäänlaisia edullisia ominaisuuksia verrattuna 5'-hydroksikantayhdisteisiin, eikä yhtään esteriä nimetä erityisesti tai niiden synteesistä esitetä esimerkkiä. Siinä 25 ei viitata vastaaviin tymidiiniyhdisteisiin tai nukleosidi-johdannaisiin, joissa olisi N-asyloituja aminoryhmiä.

Olemme nyt todenneet, että esteröimällä tai eetteröi-mällä 4- tai 5'-happi ja/tai amidoimalla renkaan ulkopuolella tai renkaassa olevia typpiatomeja, joita on mukana purii-30 ni- tai pyrimidiinirenkaassa, voidaan saada merkittäviä etuja imeytymisessä, kokonaisvaikutuksessa ja vaikutuspaikassa. PCT-hakemuksessamme PCT/GB-88/00224 (vastaa FI-patenttihakemusta 894 397) kuvataan tiettyjä tämäntyyppisiä estereitä ja amideja, joissa on asyyliryhmiä 5'-asemassa tai renkaan ul-35 kopuolella olevissa typissä. Esillä oleva keksintö käsit- 3 92491 tää tämän pääperiaatteen osana läheisesti yhteenliittymien yhdisteiden laajempaa aluetta.

5 Siten keksinnön mukaisesti saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä Y'°~uy z 15 jossa Z on vetyatomi tai atsidoryhmä, Y1 on vetyatomi tai fysiologisesti hyväksyttävä ryhmä, jonka kaava on R1 (0) nC0 (OCR2R3) m - 20 jossa n on 0 tai l, m on 0 tai l ja R1 on mahdollisesti substituoitu alkyyli- tai aryyliryhmä tai, kun n on 0, vetyatomi; R2 ja R3 ovat itsenäisesti vetyatomeja tai alempia alkyyli-25 ryhmiä; ja X on ryhmä, joka on valittu seuraamista: a 3 4

O OY NY Y

30 i I X J j i O^N·^

I I I

(A) (B) (C) 35 4 4 3 4

2 NY NY NYY

X) r'Xci lVi • (D) I (E) | (F) 9249'ι 5 o oy2 γ2^ ϋ Τ - Ν -Ν «I X JJ (ο .ί X il <Η)

I I

O OY2 ''"'ι'Ίΐ—ϊ —Ν

15 Y\*kA„J 111 y‘nAnanJ

I* 1 -I, I

20 jossa ryhmät Y2, Y3 ja Y4 ovat kuten määritettiin ryhmälle Y1, ja ne voivat olla samanlaisia tai erilaisia kuin Y1 tai keskenään samanlaisia tai erilaisia, R4 on vetyatomi tai ryhmä 25 -NY3Y4, jossa Y3:lla ja Y4:llä on edellä annetut merkitykset, ja R5 on vetyatomi tai alempi alkyy li ryhmä, edellyttäen, että ainakin yksi ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4 on ryhmä R1 (0)nC0 (OCR2R3)m-, jossa m = 1, ja/tai niiden suoloja.

On toivottavaa, että jotkut X-ryhmistä, esim. ne, jois-30 sa Y2 on vetyatomi, ovat muiden X-ryhmien tautomeerejä ja esiintyvät tasapainossa niiden kanssa.

Edellä määriteltyjä kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja/tai niiden suoloja voidaan käyttää hoidettaessa tai ennaltaehkäistäessä retrovirusinfektioita, erityisesti neuro-35 trooppisia viruksia ja erikoisesti HIV-infektioita.

Il 5 92491 R^ryhmä on edullisesti alkyyliryhmä, jossa on 1-20 hiiliatomia ja joka voi olla suora tai haaroittunut, tai se on 5 aryyliryhmä, jossa voi olla 6-20 hiiliatomia ja joka voi olla yksi- tai monirenkainen. Substituentteja, joita voi olla läsnä R‘-alkyyliryhmissä, ovat aryyliryhmät, joissa on edullisesti 6-10 hiiliatomia (kuten aralkyyliryhmissä), hyd-roksi- ja karboksiryhmät. Aryyliryhmiä ovat heterosykliset 10 aryyliryhmät, kuten pyridinyyli- ja tienyyliryhmät. Substituentteja, joita voi olla läsnä aryyliryhmissä, ovat alkyy-liryhmät, esim. sellaiset, joissa on 1-6 hiiliatomia, hyd-roksi- ja karboksiryhmät. Esimerkkeinä tällaisista ryhmistä ovat metyyli-, etyyli-, propyyli-, t-butyyli-, pentyyli-, 15 stearyyli-, palmityyli-, karboksietyyli- ja bentsyyliryhmät.

Alemmissa alkyyliryhmissä R2, R3 ja R5 ovat edullisesti 1-6 hiiliatomia. R2 edustaa kuitenkin edullisesti vetyatomia.

R3 on edullisesti vetyatomi tai edullisemmin metyyliryhmä, R5 on edullisesti vetyatomi tai metyyliryhmä.

20 Tulee huomata, että keksinnön mukaisissa yhdisteissä voi olla useampia kuin yksi seuraavista ryhmistä: Y1, Y2, Y3 ja Y4. Yhdisteissä, joiden kaava on (I), D, E, Ija J, on edullista, että m on ryhmässä Y4 0 (nolla) . Y2-ryhmillä on edullisesti seuraava kaava: 25 R1. CO - , R!C0.0. CR2R3 tai R'.O.CO.CR2R3-.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suolat voivat olla happoadditiosuoloja, jotka on muodostettu orgaanisten tai 30 epäorgaanisten happojen, kuten suola- tai fosforihapon tai metaanisulfonihapon, etaanidisulfonihapon, 2-naftyylisul-fonihapon, pivaliinihapon ja pamoiinihapon kanssa. Voidaan käyttää myös virusvastaisia vastaioneja, kuten fosfonofor-maattia tai suramiinia. Orgaanisia tai epäorgaanisia emäs-35 suoloja voidaan muodostaa molekyylissä olevien happamien 92491 6 ryhmien kanssa; sopivia vastaioneja ovat metalli-ionit, kuten natrium- ja kaliumionit, kahdenarvoiset ionit, kuten 5 kalsium- ja sinkki-ionit, ja orgaaniset ionit, kuten tetra-alkyyliammonium ja koliini, tai ionit, jotka on johdettu meglumiinistä tai etyleenidiamiinista. Mainitut suolat voidaan muodostaa reaktiolla, jossa kaavan (I) mukainen yhdiste reagoi sopivan hapon tai emäksen kanssa.

10 Farmaseuttisia koostumuksia voidaan formuloida tunne tulla tavalla sekoittamalla yksi tai useampi tässä edellä määritelty kaavan (I) mukainen yhdiste apuaineiden ja/tai kantaja-aineiden kanssa.

Uskotaan, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet eivät ole 15 itse käänteistranskriptaasin estäjiä, vaan ra muuttuvat in vivo 5-hydroksi-2',3'-dideoksinukleosideiksi. Joka tapauksessa substituoimalla kukin 0- ja N-atomi erikseen, saadaan yllättäviä etuja imeytymisen ja pitkitetyn vaikutuksen suhteen. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat lipofiilisempiä 20 kuin kantayhdisteet ja siten ne imeytyvät maha-suolikanavas-ta nopeasti ja tehokkaasti; imeytyrnisnopeus voidaan optimoida valitsemalla tarkasti substituenttiryhmä, jolla saadaan haluttu lipofiilisyyden ja hydrofiilisyyden tasapaino. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden lipofiilisen luonteen vuoksi 25 molekyylin on mahdollista tunkeutua solukalvoihin helpommin, ja se johtaa suurempiin solunsisäisiin konsentraatioihin, jolloin saadaan parempi annos-vaikutussuhde. Yhdisteiden tasainen hydrolysoituminen varmistaa pitkitetyn aktiivisen yhdisteen konsentraation solussa ja siten pidemmät aikavälit 30 annosten välillä ovat mahdollisia, jolloin voitetaan tunnettujen yhdisteiden, kuten AZT:n huomattava haitta.

Lopuksi, esillä olevan keksinnön mukaiset yhdisteet voivat läpäistä veri-aivoesteen ja siten niiden avulla on mahdollista hoitaa hermostollisia häiriöitä, joiden on ha-35 vaittu liittyvän neurotrooppisten virusten, esim. retrovi-rusten, kuten HIV, ja lentivirusten läsnäoloon (Yarchoan et

II

7 92491 » al, The Lancet, 17. tammikuuta 1987, sivu 132) . Tämä on merkittävä etu verrattuna vastaaviin substituoimattomiin yhdis-5 teisiin tai muihin virusvastaisiin yhdisteisiin, eikä siihen ole viitattu koskaan aikaisemmin, ei esim. EP-A-0 196 I85:ssa tai EP-A-0 206 497:ssä. Yrityksiä näiden hermostollisten häiriöiden hoitamiseksi AZT:llä on tehty, mutta menestys on ollut rajallista.

10 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa sinän sä tunnetulla tavalla siten, että yhdiste, jolla on kaava

XB

15 Y‘0—i /

Lo^/ (II)

20 Z

[jossa Y1 ja Z ovat kuten edellä määritettiin ja XB on kuten edellä määritettiin X:lle paitsi, että kukin ryhmistä Y1, Y2, 25 Y3 ja Y4 voi lisäksi olla suojaryhmä, edellyttäen, että ainakin yksi ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4 on vetyatomi] saatetaan reagoimaan sellaisen reagenssin kanssa, joka liittää edellä määritetyn R1 (O)nCO. (OCR2R3)m-ryhmän, minkä jälkeen tarvittaessa poistetaan näin liitetyt mahdolliset suojaryhmät ja/tai 30 ei-toivotut substituentit.

Tulisi huomata, että kun lähtöaineessa useampi kuin yksi ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4, on vety, voi ilmetä moninkertaisia reaktioita.

Kun halutaan varmistaa, että asylointi tai alkylointi 35 suoritetaan samalla, kun yksi tai useampi ryhmistä 92491 8 Υ1, Υ2, Υ3 ja Υ4 säilyy vetyatomina, saattaa olla toivottavaa suojata viimeksi mainitut ryhmät ensin, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa yksi tai useampi ryhmistä Υ1, Y2, Y3 ja Y4 on suojaryhmä, ja nämä poistetaan 5 halutun asyyli- tai eetteriryhmän liittämisen jälkeen. Tällaisia suojaryhmiä voivat itse asiassa olla N- tai O-suojaryhmät, kuten R1COO-ryhmät, jotka voidaan poistaa valikoiden sellaisen ryhmän (ryhmien) läsnä ollessa, jotka on tarkoitus jättää jäljelle. Siten esimerkiksi N-bent-10 syylioksikarbonyyliä voidaan käyttää suojattaessa renkaan ulkopuolella olevaa aminoryhmää, ja mikäli jäljelle jääväksi tarkoitettu ryhmä ei ole sellainen, joka voidaan poistaa pelkistämällä, esimerkiksi suoraketjuinen alkoksi-karbonyyliryhmä, N-bentsyylioksikarbonyyliryhmä voidaan 15 helposti poistaa selektiivisesti käyttäen vetyä ja jalome-tallikatalyyttiä, kuten palladiumia. Voidaan käyttää myös trisubstituoituja silyyliryhmiä suojaryhminä, erityisesti 5'-happiatomille, ja tällaisia ovat trialkyylisilyyli-, esim. trimetyylisilyyli-, dimetyyli-t-butyylisilyyli- ja 20 teksyylidimetyylisilyyliryhmät.

Yleisesti ottaen, kun useampi kuin yksi seuraavista ryhmistä Υ1, Y2, Y3 ja Y4 on vety ja valmistetaan yhdisteiden seosta, yksittäiset komponentit voidaan helposti erottaa, esimerkiksi kromatografioimalla.

25 Kun suoritetaan 5'-O-monoalkylointi (se on Y3-ryh- män, jossa m on 1, liittäminen), on erityisen tehokasta muodostaa nukleosidin kaksoisioni (esim. saattamalla se reagoimaan natriumhydridin kanssa) ja saattamalla tämä reagoimaan yhden ekvivalentin kanssa alkyloivaa ainetta. 30 On edelleen tietysti mahdollista käyttää nukleosidien suo jattuja muotoja, esimerkiksi asyloimalla nukleofiilinen typpiatorni ennen suolan muodostusta natriumhydridin kanssa.

Sopivia asyloivia aineita, joita voidaan käyttää 35 reaktiossa, ovat sellaiset, joiden kaava on Ac-L, jossa L

II

9 92491 on lähtevä ryhmä. Kun asyyliryhmä Ac- johdetaan karbok-syylihaposta, joka on kaavan R^CO- mukainen, niin sopivia asyloivia aineita ovat happohalogenidit ja happoanhydri-dit, edullisesti emäksen läsnä ollessa; kun asyyliryhmä 5 johdetaan hiilihaposta, joka on kaavan R^O.CO- mukainen, asyloivia aineita ovat halogeeniformaattiesterit ja reaktiiviset hiilihappodiesterit. Tällaisissa reagensseissa halogeeni voi esimerkiksi olla kloori tai bromi. Emäs, jota käytetään reaktiossa happohalogenidin tai -anhydridin 10 kanssa, voi olla esimerkiksi heterosyklinen emäs, kuten pyridiini tai 4-dimetyyliaminopyridiini. Viimeksi mainittu aine lisää reaktionopeutta ja sitä voidaan käyttää edullisesti pyridiinin kanssa. Reaktio suoritetaan tavallisesti inertin liuottimen läsnä ollessa, esim. substi-15 tuoidun amidiliuottimen, kuten dimetyyliformamidin, dime-tyyliasetamidin tai halogenoidun hiilivedyn, kuten dikloo-rimetaanin läsnä ollessa.

Yleisesti ottaen, olemme todenneet, että käytettäessä happoanhydridejä asyloivina aineina R1CO-ryhmän 20 liittämiseksi, 5'-aseman O-asylointi tapahtuu nopeammin kuin N-asylointi, kun taas käytettäessä happohalogenideja, N-asylointi tai jopa N-diasylointi on vallitseva. N-asyy-liryhmät R1C0- voidaan kuitenkin poistaa selektiivisesti esimerkiksi reaktiolla fenolin, kuten p-metyylifenolin 25 kanssa. Kun halutaan saada aikaan monisubstituutio, vah-vempi emäs, kuten natriumhydridi, voi olla edullinen.

Sopivia asyylioksialkyloivia aineita, joita voidaan käyttää keksinnössä, ovat yleisesti kaavan R^O.O.CR2R3L tai R1O.CO.O.CR2R3L mukaisia, ja kaavoissa L on lähtevä ryhmä. 30 Siten ryhmä L voi olla esimerkiksi halogeeniatomi, kuten . kloori- tai bromiatomi tai hiilivety-sulfonyylioksiryhmä, kuten tosyylioksi- tai mesyylioksiryhmä.

Alkylointireaktio suoritetaan tavallisesti emäksen läsnä ollessa, tarkoituksenmukaisesti epäorgaanisessa kar-35 bonaatissa, kuten kaliumkarbonaatissa, tai alkalimetalli- 10 9249" hydridissä, kuten natriumhydridissä. Emäkset, joita käytettiin asylointiin, voivat myös olla käyttökelpoisia.

5 Kaavan (II) mukaiset lähtöaineyhdisteet, joissa Y1, Y2, Y3 ja Y4 ovat kaikki vetyatomeja, ovat kirjallisuudessa hyvin kuvattuja - katso esim. Lin et ai, J. Med. Chem. 30., 440 (1987) . Lähtöyhdisteitä, joissa yksi tai useampi seuraavista Y1, Y2, Y3 ja Y4 on jokin muu kuin vety, voidaan valmistaa edellä kuva-10 tuilla esireaktioilla.

Farmaseuttiset koostumukset voidaan formuloida farmasian teknologiassa hyvin tunnetuilla tavoilla, ja ne voidaan antaa millä tahansa tarkoituksenmukaisella tavalla, esim. suun kautta, peräsuoleen, emättimeen, suonensisäisesti tai lihakseen. 15 Esimerkkeinä sopivista formulaatioista ovat tabletit ja kapselit, vesiformulaatiot, jotka annetaan suonensisäisenä injektiona, ja öljypohjaiset formulaatiot, jotka annetaan injektiona lihakseen. Sopivat annostukset ovat välillä 0,1-100 mg kiloa ruumiinpainoa kohden vuorokaudessa. Farmaseuttiset koostu-20 mukset voivat myös sisältää muita aktiivisia virusvastaisia aineita, esim. asykloviriä, fosfonoformaattia, suramiinia, Evansin sinistä, interferoneja tai AZT:tä.

Keksintöä valaistaan seuraavilla esimerkeillä (lähtöaineet ovat joko tunnettuja aineita tai ne valmistetaan PCT-ha-25 keinuksemme PCT/GB88/00224 mukaan) . Capsugel on tavaramerkki.

Esimerkki 1 3-asetoksimetyyli-2',3'-dideoksiuridiini (kaava (I)A Y2 = asetoksimetyyli, R5 = Y1 = H)

Seosta, jossa on 2',3'-dideoksiuridiinia (1 mmol) ja 30 kaliumkarbonaattia (0,8 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetami-dissa (20 ml), sekoitetaan ympäristön lämpötilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (0,7 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetamidissa (5 ml), li- I! u 92491 sätään tipoittain sekoittaen, seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 36 tuntia, se suodatetaan, suodos haihdutetaan ja tuote puhdistetaan tuikekromatografioimalla silikageelillä, käyttäen etyyliasetaatti:petrolieetteriä.

5 Esimerkki 2 3,5'-O-bis(asetoksimetyyli)-2',3'-dideoksiuridiini (kaava (I)A, Y1 =Y2=asetoksimetyyli, R5 = H) ja , O4, 5'-O-bis(asetoksimetyyli-2',3'-dideoksiuridiini kaava (I)B, Y1=Y2*asetoksimetyyli, R5=H) 10 Seosta, jossa on 2', 3' -dideoksiuridiinia (1 nunol) ja natriumhydridiä (2 mmol) kuivassa DMFrssa (50 ml), sekoitetaan ympäristön lämpötilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (2 mmol) kuivassa DMF:ssa (10 ml), lisätään tipoittain sekoittaen, seosta sekoite-15 taan ympäristön lämpötilassa 24 tuntia, se suodatetaan, suodos haihdutetaan ja tuoteseos erotetaan tuikekromatograf ioimalla silikageelillä, käyttäen etyyliasetaatti:pet-rolieetteriä.

Esimerkki 3 20 3-asetoksimetyyli-5'0-palmitoyyli-2', 31 -dideoksity- midiini kaava (I)A, Y2=asetoksimetyyli, Y1=palmitoyyli, R5=me tyyli)

Seosta, jossa on 5O-palmitoyyli-2',3'-dideoksity-midiiniä (1 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,8 mmol) kuivas-25 sa N,N-dimetyyliasetamidissa (20 ml), sekoitetaan ympäris tön lämpötilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (0,7 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetamidis-sa (5 ml), lisätään tipoittain sekoittaen, seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 24 tuntia, se suodatetaan, 30 suodos haihdutetaan ja tuote puhdistetaan tuikekromatogra- fioimalla silikageelillä, käyttäen etyyliasetaatti:petro-- lieetteriä.

► 12 92491

Esimerkki 4 N4,5 ' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli) -N4pivaloyyliok-simetyyli-2',3'-dideoksisytidiini (kaava (l)C, YX=Y4 bentsyylioksikarbonyyli, Y3 = pivaloyylioksimetyyli) ja 3-piva-5 loyylioksimetyyli-N4,5 ' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli) 4-imino-3,4-dihydro-231-dideoksisytidiini (kaava (I) D, Y2=pivaloyylioksimetyyli, Yl= Y4 = bentsyylioksikarbonyyli) N4,5'-O-di(bentsyylioksikarbonyyli)-2',3'-dideok-sisytidiiniä (1 mmol) liuotetaan kuivaan DMF:in (20 ml), 10 liuos jäähdytetään 0 °C:eseen, lisätään natriumhydridiä (1,1 mmol), seosta sekoitetaan 0 eC:ssa yksi tunti, kun vedyn kupliminen on päättynyt, pivaloyylioksimetyyliklori-dia (1,1 mmol), joka on kuivassa DMFtssa (10 ml) lisätään tipoittain, syntynyttä seosta sekoitetaan ympäristön läm-15 pötilassa 36 tuntia, suurin osa liuottimesta poistetaan lämpötilassa, joka on alle 40 °C, käyttäen öljypumppua, vettä lisätään jäännökseen ja seos uutetaan etyyliasetaatilla. Kuivattu (MgS04) etyyliasetaattiliuos haihdutetaan ja jäännös tuikekromatografioidaan, käyttäen petrolieette-20 ri:etyyliasetaattia, joka eluoi otsikon yhdisteen.

Esimerkki 5 N4-pivaloyylioksimetyyli-2 ' , 3 ' -dideoksisytidiini (kaava (I)C, YX=Y4=H, Y3=pivaloyylioksimetyyli) N4,5 ' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli)-l^-pivaloyyliok-25 simetyyli-2',3'-dideoksisytidiiniä (0,2 mmol) lisätään suspensioon, jossa on 5 % palladioitua hiiltä (25 mg) etanolissa (25 ml), ilma poistetaan tyhjössä ja seosta hydra-taan ilmanpaineessa, kunnes hydrautuminen on päättynyt (noin kolme tuntia). Seos suodatetaan sitten, suodos 30 haihdutetaan alennetussa paineessa ja tuote puhdistetaan suodattamalla (kromatografia) neutraalilla silikageelillä, käyttäen kloroformi:etanolia.

Il 9249’

Esimerkki 6 3-pivaloyylioksimetyyli-3 f-deoksitymidiini i) 3'-deoksitymidiiniä (0,0449 g, 0,198 mmol) ja imidatsolia (0,0328 g, 0,482 mmol) liuotettiin DMF:ään 5 (0,5 ml). Teksyylidimetyylisilyylikloridia (0,047 ml, 0,238 mmol) lisättiin ja reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 19 tuntia. Liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja kloroformia (15 ml) lisättiin jäännökseen, se pestiin vedellä (5 ml x 2), kuivattiin (MgS04) ja 10 haihdutettiin. Jäännös kromatografioitiin piidioksidilla, käyttäen etyyliasetaatti-heksaania (7:3); saanto 0,0578 g (79 %) 5'-0-teksyylidimetyylisilyyli-3 *-deoksitymidiiniä valkoisena jauheena. S.p. 109 - 110 °C (korjaamaton).

1H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 0,14 (s, 6H), 0,86 - 0,90 15 (m, 12H), 1,64 (m,lH), 1,91 (s, 3H), 1,93 - 2,02 (m,3H), 2,26 - 2,41 (m, 1H), 3,66 - 3,96 (ABX,2H), 4,08 - 4,17 (m,1H), 6,05 (dd, 1H), 7,51 (d, 1H), 8,50 (b,lH).

13C NMR (CDCI3) 6 : -3,51, -3,43, 12,47, 18,31, 18,41, 20,12 20,32, 25,32, 25,38, 32,30, 33,91, 64,24, 80,76, 85,68, 20 110,18, 135,53, 150,14, 163,59.

ii) 5'-O-teksyylidimetyylisilyyli-3'-deoksitymidiini (0,0254 g, 0,0689 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0111 g, 0,0803 mmol) suspensoitiin DMF:in (1 ml) ja sekoitettiin 1,5 tuntia huoneenlämpötilassa. Seos jäähdy- 25 tettiin 0 °C:seen ja lisättiin kloorimetyylipivalaattia (0,013 ml, 0,0895 mmol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin pois alennetussa paineessa. Jäännös kromatografioitiinn piidioksidilla, käyttäen etyyliasetaatti-heksaania (35:65); 30 saanto 0,031 g (93 %) 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-O-teksyylidimetyylisilyyli-3 1-deoksitymidiiniä lasimaisena aineena .

XH NMR (CDCI3, 300 MHz) δ : 0,14( s, 6H), 0,87 - 0,90(m,12H), l,17(s, 9H), 1,56 - l,70(m,lH), l,94(d,3H), 35 1,95 - 2,02(m,3H), 2,30 - 2,44 (m,lH), 3,67 - 3,97 14 92491 (ABX,2H), 4,11 - 4,17(m, 1H), 5,90 - 5,98 (AB,2H), 6,06 (dd,1H), 7,54 (d,1H).

13C NMR (CDC13) 6 : -3,49, -3,42, 13,09, 18,31, 20,12, 20,33, 25,34, 26,92, 32,37, 33,91, 38,71, 64,22, 5 64,90, 80,92, 86,35, 109,37, 134,50, 150,23, 162,58, 177,43.

iii) 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-O-teksyylidimetyy-lisilyyli-3'-deoksitymidiini (0,029 g, 0,061 mmol) liuotettiin THF:in (0,5 ml) ja 0,25 M liuos tetrabutyyliammo-10 niumfluoridia THFrssa (0,5 ml) lisättiin. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia ennen kuin liuotin haihdutettiin. Jäännös liuotettiin kloroformiin (7 ml) ja pestiin vedellä (1 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04), haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin valmistavalla TLCtllä. Levyt 15 eluoitiin dietyylieetterillä (3x) ja tuote uutettiin pääjoukosta kloroformi-etanolilla (9:1); saanto 0,0170 g (83 %) otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena. S.p. 64 - 66 °C (korjaamaton) XH NMR (CDCI3, 300 MHz) δ : 1,17 (s,9H), 1,93 20 (d,3H), 1,95 - 2,15( m,4H), 2,32 - 2,48 (m,lH), 3,72 - 4,03 (ABX,2H), 4,14 - 4,21 (m,lH), 5,90 - 5,97 (AB,2H), 6,10 (dd, 1H), 7,60 (d, 1H).

13C NMR (CDCI3) δ : 13,12, 24,91, 26,90, 32,22, 38,71, 63,42, 64,89, 81,10, 86,73, 109,62, 135,04, 150,26, .. 25 162,51, 177,47.

Esimerkki 7 3,5' -0-di (pivaloyylioksimetyyli) -3' -deoksitymidiini 3'-deoksitymidiiniä (0,050 g, 0,221 mmol) liuotettiin DMF:in (1 ml) ja jäähdytettiin 0 °C:eseen. Natrium-30 hydridiä (0,0147 g, 80 % öljyssä, 0,49 mmol) lisättiin ja seosta sekoitettiin 0 eC:ssa yksi tunti ennen kuin kloo-rimetyylipivalaattia lisättiin. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti ja sitten huoneenlämpötilassa 20 tuntia. TLC osoitti osittaisen muuttumisen dialkyloiduksi 35 tuotteeksi, ja seos jäähdytettiin 0 °C:eseen ja lisättiin 11 92491 natriumhydridiä (0,0027 g, 80 % öljyssä, 0,090 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti ennen kuin kloo-rimetyylipivalaattia (0,013 ml, 0,090 mmol) lisättiin. Seosta sekoitettiin yksi tunti ennen kuin liuotin haihdu-5 tettiin alennetussa paineessa. Kloroformia (10 ml) lisättiin jäännökseen ja seos pestiin kylläisellä natriumklori-dilla (5 ml x 2) ja vedellä (5 ml x 2). Kloroformifaasi kuivattiin (MgS04), haihdutettiin ja jäännös ajettiin valmistavalla TLCrllä. Levyt eluoitiin dietyylieetteri-pen-10 taani-metanolilla (50:50:0,1) (7x) ja tuote uutettiin pääjoukosta kloroformi-metanolilla; saanto 0,042 g (42 %) värittömänä öljynä.

*H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,19 (s, 9H), 1,24 (s, 9H), 1,95 - 2,10 (m,6H), 2,30 - 2,50 (m,lH), 3,74 -4,06 15 (ABX,2H), 4,20 - 4,30 (m,lH), 5,33 - 5,40 (AB,2H), 5,92- 5,99 (AB,2H), 6,10 - 6,16 (M,1H), 7,66 (d,lH).

13C NMR (CDC13) 6 : 13,04, 25,13, 26,91, 32,51, 38,70, 38,84, 64,87, 70,16, 79,42, 86,40, 88,49, 109,44, 134,83, 150,24, 162,53, 177,39, 177,75.

20 Esimerkki 8 5'-0-pivaloyylioksimetyyli-3'-deoksitymidiini Seosta, jossa oli 3'-deoksitymidiiniä (0,0103 g, 0,046 mmol) ja natriumhydridiä (0,0029 g, 80 % öljyssä, 0,097 mmol) DMF:ssa (0,5 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa yksi . 25 tunti. Kloorimetyylipivalaattia (0,0070 ml, 0,048 mmol) lisättiin ja seosta sekoitettiin 0 eC:ssa kolme tuntia. Lisättiin IM ammoniumkloridia (3 ml) ja seos uutettiin dietyylieetterillä (3 ml). Eetteriuute pestiin kylläisellä natriumkloridilla (3 ml x 2), kuivattiin (MgS04) ja 30 haihdutettiin. Jäännös kromatografioitiin piidioksidilla, käyttäne kloroformi-metanolia; saanto 0,0068 g, (43 %) lasimaisena aineena.

XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 : 1,23 (s,9H), 1,90 - 2,10 (m,6H), 2,30 - 2,50 (m,lH), 3,73 - 4,05 (ABX,2H), 4,18 - 1β 92491 1 Ο 4,28 (m, 1H), 5,33 - 5,39 (AB, 2H), 6,08 - 6,14 (m,lH), 7,62 (d,1H), 8,44 (b,lH).

13C NMR (CDC13) δ : 12,59, 25,29, 27,03, 32,58, 38,97, 70,33, 79,40, 85,83, 88,60, 110,37, 136,01, 150,26, 5 163,69, 177,92.

Esimerkki 9 5 ' -0-pivaloyylioksimetyyli-3' -atsido-3' -deoksitymi- diini

Seosta, jossa oli 3'-atsido-3'-deoksitymidiiniä 10 (0,0335 g, 0,125 mmol) ja natriumhydridiä (0,0079 g, 80 % öljyssä, 0,263 mmol) DMFtssa (1,5 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa 1,5 tuntia. Kloorimetyylipivalaattia (0,020 ml, 0,138 mmol) lisättiin ja seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti. Lisättiin etikkahappoa (0,0072 ml, 0,126 mmol) ja 15 liuotin haihdutettiin. Jäännös kromatografioitiin pii dioksidilla, käyttäen kloroformi-metanolia; saanto 0,031 g (63 %) öljynä.

*H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,22 (s,9H), 1,94 (d,3H), 2,20 - 2,50 (m,2H), 3,76 - 4,02 (m,3H), 4,22 - 20 4,32 (m,1H), 5,34 (s,2H), 6,23 (t,lH), 7,44 (d,lH), 9,35 (b,1H).

13C NMR (CDCI3) δ : 12,51, 26,91, 37,71, 38,90, 59,91, 68,49, 82,58, 84,55, 88,27, 111,32, 135,39, 150,38, 163,88, 177,88.

25 Esimerkki 10 N4-bentsyylioksikarbonyyli-5'-0-pivaloyylioksimetyy-li-2',3'-dideoksisytosiini

Seosta, jossa oli N4-bentsyylioksikarbonyyli-2',3'-dideoksisytosiinia (0,022 g, 0,0637 mmol) ja natriumhydri-30 diä (0,0044 g, 80 % öljyssä, 0,147 mmol) DMF:ssa (1,5 ml), .. sekoitettiin 0 eC:ssa 1,5 tuntia. Seos jäähdytettiin -50 eC:eseen ja lisättiin kloorimetyylipivalaattia (0,0102 ml, 0,0702 mmol). Kylläistä ammoniumkloridia (1 ml) lisättiin ja liuottimet haihdutettiin. Jäännös

II

92491 17 kromatografioitiin piidioksidilla, käyttäen kloroformi-metanolia; saanto: 0,0145 g (50 %) öljynä.

XH NMR (CDC13, 300 MHz) 6 : 1,24 (s,9H), 1,80 - 2,00 (m, 2H), 2,10 - 2,25 (m,lH), 2,42 - 2,60 (m,lH), 3,73 - 5 4,12 (ABX,2H), 4,22 - 4,34 (m,lH), 5,23 (s,2H), 5,27 - 5,43 (AB,2H), 6,07 (dd, 1H), 7,15 - 7,30 (b,lH), 7,30 -7,48 (m,6H), 8,32 (d,lH).

Esimerkki 11 5'-O-pivaloyylioksimetyyli-2',3'-dideoksisytosiini 10 N4-bentsyylikarbonyyli-5'-O-pivaloyylioksimetyyli- 2',3'-dideoksisytosiinia (0,05 mmol) lisätään suspensioon, jossa on 5 % palladioitua hiiltä (5 mg) etanolissa (2 ml). Sekoitettu suspensio hydrataan ilmanpaineessa, käyttäen Brownin laitteistoa, jossa H2-kaasu kehitetään säädettäväl-15 lä tavalla lisäämällä 3N HCl:a liuokseen, jossa on nat-riumboorihydridiä erillisellä osastossa. Reaktion annetaan edetä yksi tunti huoneenlämpötilassa, seos suodatetaan ohuen Celite-kerroksen läpi, suodos haihdutetaan ja tuote puhdistetaan kromatografioimalla silikageelipylvääs-20 sä, käyttäen CHC13:EtOH:ta (9:1) eluointiin.

Esimerkki 12 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiini 3 ' -atsido-3 ' -deoksitymidiiniä (0,0504 g, 0,189 mmol) 25 ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (0,0023 g, 0,019 mmol) liuotettiin pyridiiniin (2 ml) ja jäähdytettiin 0 eC:seen. Propionianhydridiä (0,0265 ml, 0,206 mmol) lisättiin ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa typpiatmosfäärissä 24 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa 30 paineessa. Tolueenia lisättiin ja se haihdutettiin alen-• netussa paineessa, ja jäännös kromatografioitiin piidiok sidilla, käyttäen kloroformia ja kloroformi-metanolia (98,2); saanto 0,060 g (98 %) 5'-0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiiniä värittömänä öljynä.

18 9249« 5 ' -O-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiiniä (0,042 g, 0,130 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0198 g, 0,143 mmol) suspensoitiin DMF:in (1 ml) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa typpiatmosfäärissä 1,5 tuntia. Seos 5 jäähdytettiin 0 °C:eseen ja kloorimetyylipivalaattia (0,0226 ml, 0,156 mmol) lisättiin. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 30 minuuttia ja sitten huoneenlämpötilassa 19 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös kromatografioitiin piidioksidilla, 10 käyttäen etyyliasetaatti-heksaania (4:6); saanto 0,045 g (81 %) värittömänä öljynä.

NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,19 (s) ja 1,19 (t) [12H], 196 (d, 3H), 2,29 - 2,57 (m) ja 2,41 (q) [4H], 4,06 - 4,15 (m,1H), 4,16 - 4,25 (m,lH), 4,31 - 4,42 15 (ABX,2H ), 5,91 - 5,98 (AB,2H), 6,15 (t,lH), 7,27 (d,H-6).

13C NMR (CDC13) δ : 9,03, 13,27, 27,02, 27,43, 37,73, 38,84, 60,54, 63,19, 64,95, 81,91, 86,10, 110,49, 134,10, 150,04, 162,27, 173,72, 177,48.

Esimerkki 13 20 3-a- (etyylioksikarbonyylioksi) etyyli-5 ' -O-propio nyyli-3 '-deoksitymidiini 3’-deoksitymidiiniä (0,0352 g, 0,156 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (0,0020 g, 0,016 mmol) liuotettiin pyridiiniin (3 ml) ja jäähdytettiin 0 °C:eseen. Pro-25 pionianhydridiä (0,0241 ml, 0,187 mmol) lisättiin ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa typpiatmosfäärissä 24 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Tolueenia lisättiin ja se haihdutettiin alennetussa paineessa, ja jäännös kromatografioitiin pii-30 dioksidilla, käyttäen kloroformia ja kloroformi-metanolia (98,2); saanto 0,0435 g (99 %) 5’-O-propionyyli-3'-deoksitymidiiniä puolikiinteänä aineena.

5'-O-propionyyli-3'-deoksitymidiiniä (0,063 g, 0,2 - 23 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0339 g, 0,245 35 mmol) suspensoitiin DMF:in (2 ml) ja sekoitettiin huoneen-

II

19 924 91 lämpötilassa typpiatmosfäärissä 1,5 tuntia. Seos jäähdytettiin 0 eC:seen ja 1-kloorietyyietyylikarbonaattia (0,039 ml, 0,291 mmol) lisättiin. Seosta sekoitettiin 0 eC:ssa 30 minuuttia ja huoneenlämpötilassa kaksi tuntia.

5 Lämpötila nostettiin 60 eC:eseen ja seosta sekoitettiin 19,5 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös kromatografioitiin piidioksidilla, käyttäen etyyliasetaatti-heksaania (50:50) (Rf 0,17); saanto 0,0477 g (54 %) öljynä.

10 XH NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,18 (t,3H), 1,29 (t,3H), 1,70 - 1,87 (m) ja 1,86 (d) [4H], 1,94 (d,3H), 1,97 - 2,14 (m, 2H), 2,35 - 2,52 (m) ja 2,40 (q) [3H], 4,12 - 4,25 (m,2H), 4,26 - 4,40 (m,3H), 6,07 - 6,12 (m,1H), 7,20 - 7,28 (m,lH), 7,36 (d, 1H).

15 13C NMR (CDC13) 6 : 9,09, 13,23 ja 13,36*, 14,15, 17,86 ja 17,94*, 25,81 ja 25,84*, 27,48, 32,25 ja 32,35*, 64,34, 64,79, 77,49, 78,46 ja 78,56*, 86,52 ja 86,58*, 109,81 ja 109,84*, 133,92 ja 133,97*, 149,82, 153,81 ja 153,85*, 162,57 ja 162,59*, 174,06.

20 * Erilaiset siirtymät kahdelle enantiomeerille (-CH(CH3) -N): n havaitsemisen vuoksi.

Esimerkki 14 5'-O-propionyyli-3-α-(tienyylioksikarbonyylioksi)-etyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiini 25 5 ’ -0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiiniä : (0,051 g, 0,158 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,024 g, 0,174 mmol) suspensoitiin DMF:in ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa typpiatmosfäärissä yksi tunti. Seos jäähdytettiin 0 eC:eseen ja 1-kloorietyylitienyylikarbonaattia 30 (0,046 g, 0,208 mmol) lisättiin. Seosta sekoitettiin huo neenlämpötilassa 9 tuntia. Liuotin haihdutettiin alenne-tussa paineessa ja jäännös kromatografioitiin piidioksidilla käyttäen kloroformia ja kloroformi-metanolia (99:1). Tuotetta sisältävät fraktiot, Rf 0,3 (kloroformi-metanoli 35 (99:1) koostuivat kahdesta diastereoisomeerikomponentista, 20 92431

Rf 0,18 ja Rf 0,22 (etyyliasetaatti-heksaani (4:6); saanto 0,050 g.

Esimerkki 15 N6-bentsyylioksikarbonyyli-5'-O-pivaloyylioksimetyy-5 li-2',3’-dideoksiadenosiini 2',3'-dideoksiadenosiinia (0,1 mmol) ja 4-dimetyy-liaminopyridiiniä (0,1 mmol) liuotettiin pyridiiniin ja seos jäähdytettiin 0 °C:eseen. Bentsyylikloroformaattia (0,2 mmol) lisättiin ja syntynyttä seosta sekoitettiin 10 huoneenlämpötilassa typpiatmosfäärissä 24 tuntia. Lisät tiin 4-dimetyyliaminopyridiiniä (0,1 mmol) ja seos jäähdytettiin 0 °C:eseen. Lisättiin bentsyylikloroformaattia (0,2 mmol) ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 24 tuntia. 4-dimetyyliaminopyridiinin ja bentsyylikloro-15 formaatin lisäys toistettiin kolme kertaa, sekoittaen 24 tuntia kunkin lisäyksen välillä, ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös kromatogra-fioitiin piidioksidilla, käyttäen kloroformia, kloroformi-metanolia (99:1) ja kloroformi-metanolia (9:1), ja näin 20 saatiin N6-bentsyylioksikarbonyyli-2',3'-dideoksiadenosiinia . N6-bentsyylioksikarbonyyli-2',3’-dideoksiadenosiinia (0,1 mmol) ja natriumhydridiä (80 % öljyssä, 0,21 mmol), jotka olivat DMF:ssa (2 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti. Seos jäähdytettiin 50 °C:eseen ja lisättiin kloo-25 rimetyylipivalaattia (0,1 mmol). Seosta sekoitettiin nel jä tuntia ennen kuin lisättiin etikkahappoa (0,1 mmol). Liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa ja jäännös kromatografioitiin piidioksidilla, käyttäen kloroformia ja kloroformi-metanolia (99:1), ja näin saatiin otsikon yh-30 diste.

. Farmaseuttinen esimerkki A

Suun kautta nautittavien kapseleiden valmistus

Aktiivinen yhdiste 50 mg

Amylym maydis q.s.

li 92491 21

Jauhe sekoitetaan ja täytetään koviin gelatiinikap-seleihin (Capsugel koko 00).

Farmaseuttinen esimerkki B Voiteen valmistus 5 Aktiivinen yhdiste 1 g

Nestemäinen parafiini 100 g

Valkoinen pehmeä parafiini ad 1 000 g

Valkoinen pehmeä parafiini sulatetaan ja yhdistetään nestemäiseen parafiiniin ja sekoitetaan, kunnes seos 10 on kylmää. Aktiivinen yhdiste jauhetaan osan kanssa perusainetta ja vähitellen lisätään jäljellä oleva perusaine. Voide täytetään lakattuihin alumiiniputkiin (20 g) ja suljetaan. Voide sisältää 0,1 % aktiivista yhdistettä. Farmaseuttinen esimerkki C

15 Ruoansulatuskanavan ulkopuolelle annettava suspen sio

Aktiivinen yhdiste 200 grammaa

Polysorbaatti 80 3 grammaa

Sorbitoli 400 grammaa 20 Bentsyylialkoholi 8 grammaa

Vesi ad 1 000 ml IM HC1 g.s.

Polysorbaatti 80, sorbitoli ja bentsyylialkoholi liuotetaan 500 mitan tislattua vettä. Aktiivinen yhdiste . 25 siivilöidään 0,15 mm seulan läpi ja dispergoidaan liuok seen voimakkaasti sekoittaen. pH säädetään arvoon 4,5 lisäämällä tipoittain IM HC1. Vettä lisätään 1 000 mitään asti, suspensio täytetään 1 ml tn lääkepulloihin. Lääke-pullot steriloidaan gamma-säteilytyksellä. Kukin lääke-30 pullo sisältää 200 mg aktiivista yhdistettä.

• 92491 22

Farmaseuttinen esimerkki D

Tablettien valmistus grammaa

Aktiivinen yhdiste 200 5 Laktoosi 85

Polyvinyylipyrrolidoni 5 Tärkkelys 42

Talkkijauhe 15

Magnesiumstearaatti 3 10 Aktiivinen yhdiste ja laktoosi siivilöidään 0,15 mm seulan läpi ja niitä sekoitetaan yhdessä 10 minuuttia. Sekoitettu jauhe kostutetaan polyvinyylipyrrolidonin vesi-liuoksella. Massa rakeistetaan ja kuivatut (40 °C) rakeet sekoitetaan tärkkelyksen, talkkijauheen ja magnesiumstea-15 raatin kanssa. Rakeet puristetaan tableteiksi. Tabletin halkaisija on 11 mm, tabletin paino on 350 mg ja kukin tabletti sisältää 200 mg aktiivista yhdistettä.

Farmaseuttinen esimerkki E

Peräsuoleen annettavan suspension valmistus 20 Metyyli-p-hydroksibentsoaattia (70 mg) ja propyyli- jD-hydroksibentsoaattia (15 mg) liuotetaan veteen (100 ml) 90 °C:ssa. Kun on jäähdytetty 30 °C:eseen, lisätään me-tyyliselluloosaa (2 g) ja seosta sekoitetaan kolme tuntia. Yksi gramma aktiivista yhdistettä siivilöidään 0,15 mm 25 seulan läpi ja dispergoidaan liuokseen voimakkaasti sekoittaen. Suspensio täytetään 100 ml:n putkeen. Suspensio sisältää 10 mg aktiivista yhdistettä/ml.

Il 92491 23

Farmaseuttinen esimerkki F

Suun kautta nautittavan suspension valmistus grammaa

Aktiivinen yhdiste 10 5 Karboksimetyyliselluloosa 1,5

Sorbitoli 200

Natriumbentsoaatti 1,0

Appelsiiniesanssi 0,3

Aprikoosiesanssi 0,7 10 Etanoli 50

Vesi 236,5

Karboksimetyyliselluloosa, sorbitoli ja natriumbentsoaatti liuotetaan veteen, sekoittaen kaksi tunti. Lisätään liuos, jossa on esanssit etanolissa. Aktiivinen 15 yhdiste siivilöidään 0,15 mm seulan läpi ja dispergoidaan liuokseen voimakkaasti sekoittaen. Suspensio (10 grammaa) täytetään 20 ml:n putkeen. Kukin putki sisältää 200 mg aktiivista yhdistettä.

Farmaseuttinen esimerkki G 20 Injektioliuoksen valmistus 10 mg aktiivista yhdistettä liuotetaan 10 ml:an 0,9 % natriumkloridia. pH säädetään arvoon 4,5 IN HClrlla. Liuos steriilisuodatetaan ja täytetään 10 ml:n lääkepulloon. Liuos sisältää 1 mg aktiivista yhdistet-25 tä/ml.

Farmaseuttinen esimerkki H

Tablettien valmistus (säädetysti lääkeainetta vapauttava formulaatio) grammaa 30 Aktiivinen yhdiste 500

Hydroksipropyylimetyyliselluloosa 120 (Methocel K15)

Laktoosi 45

Povidoni 30 35 Magnesiumstearaatti 5 92491 24

Aktiivista yhdistettä, hydrokspropyylimetyylisellu-loosaa ja laktoosia sekoitetaan yhdessä 20 minuuttia ja ne rakeistetaan povidoniliuoksella. Magnesiumstearaattia lisätään ja seos puristetaan tableteiksi. Tabletin halkai-5 sija on 13 mm, tabletin paino on 700 mg ja kukin tabletti sisältää 500 mg aktiivista yhdistettä.

Claims (3)

1. I (A) (B) (c)

35. NY4 NY4 nyV όώ όσ ' I (E) I (F) ·: 40 92491 o or2 S γ^_Ν Λ,-Q AAJ , o 1 0, 1 aXI-L.* i" Jxj "' !’ 1 J, i 15 jossa ryhmät Y2, Y3 ja Y4 ovat kuten määritettiin ryhmälle Y1, ja ne voivat olla samanlaisia tai erilaisia kuin Y1 tai kes-20 kenään samanlaisia tai erilaisia, R4 on vetyatomi tai ryhmä -NY3Y4, jossa Y3:lla ja Y4:llä on edellä annetut merkitykset, ja R5 on vetyatomi tai alempi alkyyliryhmä, tai sen suolojen valmistamiseksi, edellyttäen, että ainakin yksi ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4 on ryhmä R1 (O)nCO(OCR2R3)m-, jossa m=l, tunnettu 25 siitä, että yhdiste, jolla on kaava XB Y'O—j L-o-J (II) äo w z 35 [jossa Y1 ja Z ovat kuten edellä määritettiin ja XB on kuten edellä määritettiin X:lle paitsi, että kukin ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4 voi lisäksi olla suojaryhmä, edellyttäen, että ainakin yksi ryhmistä Y1, Y2, Y3 ja Y4 on vetyatomi] saatetaan 40 reagoimaan sellaisen reagenssin kanssa, joka liittää edellä määritetyn R1 (0)„C0. (OCR2R3)m-ryhmän, minkä jälkeen tarvitta- 92491 essa poistetaan näin liitetyt mahdolliset saojaryhmät ja/tai ei-toivotut substituentit.

1. Menetelmä farmakologisesti aktiivisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava

5 X Y‘0—I ^•o^J (I) V z jossa Z on vetyatomi tai atsidoryhmä, Y1 on vetyatomi tai fysiologisesti hyväksyttävä ryhmä, jonka kaava on 15 R1 (O) nC0 (OCR2R3) m - jossa n on 0 tai l, m on 0 tai 1 ja R1 on mahdollisesti substituoitu alkyyli- tai aryyliryhmä 20 tai, kun n on 0, vetyatomi; R2 ja R3 ovat itsenäisesti vetyatomeja tai alempia alkyyli-ryhmiä; j a X on ryhmä, joka on valittu seuraavista: 0 oy2 nvV Y''N·Ν\ί*! " i 1 |

30 O^N-S

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 5 että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on mahdollisesti substituoitu Cj.20-alkyyliryhmä tai C^-aryyliryhmä.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 on vety- 10 atomi ja R3 on vetyatomi tai metyyliryhmä.