FI56676C - Foerfarande foer framstaellning av nya amidderivat av nonapeptid som befraemjar loesgoerandet av aeggceller - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya amidderivat av nonapeptid som befraemjar loesgoerandet av aeggceller Download PDFInfo
- Publication number
- FI56676C FI56676C FI1375/73A FI137573A FI56676C FI 56676 C FI56676 C FI 56676C FI 1375/73 A FI1375/73 A FI 1375/73A FI 137573 A FI137573 A FI 137573A FI 56676 C FI56676 C FI 56676C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- parts
- weight
- pro
- dissolved
- gly
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 46
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 33
- -1 L-norleucyl Chemical group 0.000 claims description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 28
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 14
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 8
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 6
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 125000002112 pyrrolidino group Chemical group [*]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 claims description 2
- 125000002435 L-phenylalanyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims 4
- 125000002061 L-isoleucyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 claims 2
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 2
- 125000003798 L-tyrosyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims 2
- 125000003580 L-valyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 claims 2
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 86
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 72
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 34
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000047 product Substances 0.000 description 26
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 26
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 24
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 24
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 17
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 16
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 16
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 15
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 15
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 13
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 10
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 10
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 10
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 10
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 10
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N tetrahydropyrrole Substances C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 9
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- MNZMECMQTYGSOI-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydron;bromide Chemical compound Br.CC(O)=O MNZMECMQTYGSOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 7
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 7
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 7
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;methanol Chemical compound OC.CCOCC MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 5
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 5
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 5
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 4
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 3
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 3
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 3
- USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- BLGXFZZNTVWLAY-SCYLSFHTSA-N yohimbine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN3C[C@@H]4CC[C@H](O)[C@@H]([C@H]4C[C@H]33)C(=O)OC)=C3NC2=C1 BLGXFZZNTVWLAY-SCYLSFHTSA-N 0.000 description 3
- RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-phenyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 2
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OEIUAJRTESSOCC-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-phenyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]acetic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)NC(C(=O)NCC(=O)O)CC1=CC=CC=C1 OEIUAJRTESSOCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 125000003338 L-glutaminyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical class ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VXDSLUMUNWTSDB-UHFFFAOYSA-N acetic acid;chloroform;methanol Chemical compound OC.CC(O)=O.ClC(Cl)Cl VXDSLUMUNWTSDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- MDFFNEOEWAXZRQ-UHFFFAOYSA-N aminyl Chemical compound [NH2] MDFFNEOEWAXZRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N anthranilic acid Chemical compound NC1=CC=CC=C1C(O)=O RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- SAKUKAQFBMDKGX-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;2-pyridin-2-ylacetic acid;hydrate Chemical compound O.CCCCO.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 SAKUKAQFBMDKGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010034591 carbobenzoxyphenylalanylglycine Proteins 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethoxyethane Chemical compound CCO.CCOCC PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEVKQMBWAPJFSP-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;2-pyridin-2-ylacetic acid;hydrate Chemical compound O.CCOC(C)=O.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 WEVKQMBWAPJFSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N thiocyanic acid Chemical compound SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- KTVPQHFLYINKPT-LVHVEONVSA-N (4s)-4-amino-5-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[(2-amino-2-oxoethyl)carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-o Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 KTVPQHFLYINKPT-LVHVEONVSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- IKMJGHPYOYVETB-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1COCCO1 IKMJGHPYOYVETB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 2,4,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001917 2,4-dinitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1*)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- 102100027909 Folliculin Human genes 0.000 description 1
- 101710182803 Folliculin Proteins 0.000 description 1
- HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N Glu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010058359 Hypogonadism Diseases 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- KYPMKDGKAYQCHO-RYUDHWBXSA-N Tyr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 KYPMKDGKAYQCHO-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- WJRLIVKLXYDXHQ-UHFFFAOYSA-N acetic acid;butan-1-ol;ethyl acetate;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O.CCCCO.CCOC(C)=O WJRLIVKLXYDXHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N acetic acid;butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O.CCCCO MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004442 acylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- WYQMLMJOXRIVJP-UHFFFAOYSA-N carbamohydrazonoyl(hydroxy)carbamic acid Chemical group NN=C(N)N(O)C(O)=O WYQMLMJOXRIVJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010531 catalytic reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000007859 condensation product Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000027046 diestrus Effects 0.000 description 1
- XWBDWHCCBGMXKG-UHFFFAOYSA-N ethanamine;hydron;chloride Chemical compound Cl.CCN XWBDWHCCBGMXKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N glycinamide Chemical compound NCC(N)=O BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000508 hormonal effect Toxicity 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQMRYBIKMRVZLB-UHFFFAOYSA-N methylamine hydrochloride Chemical compound [Cl-].[NH3+]C NQMRYBIKMRVZLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- SKDIPRMGDVUUQO-ZLTKDMPESA-N n-cyclohexylcyclohexanamine;(2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1.CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C SKDIPRMGDVUUQO-ZLTKDMPESA-N 0.000 description 1
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N phosphoramidic acid Chemical compound NP(O)(O)=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- IFGCUJZIWBUILZ-UHFFFAOYSA-N sodium 2-[[2-[[hydroxy-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyphosphoryl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound [Na+].C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NP(O)(=O)OC1OC(C)C(O)C(O)C1O IFGCUJZIWBUILZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-aminoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/13—Luteinizing hormone-releasing hormone; related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Γ-η KUULUTUSjULKAISU „ ΙηβΑ ™ (11) UTLÄGCN I NCSSKRIFT 56676 C myönnetty 10 03 1930 (45) Patent meddelit (51) Kv.lk.*/lnt.CI.* C 0? C 103/52 SUOMI—FINLAND pi) Pit«ttihik«wii-p««iMniBtaini 1375/73 (22) Hakwnisptlvl — Anteknlngtdag 27.0U.73 (23) Alkupllvi—Glttlgheudag 27.0U.73 (41) Tullut (ulklMktl — Bllvlt offentllg 10 73
Patentti· ja rekisterihallitus /44\ Nlhtivlkxlpanon Jt kuuL|ulkalaun pvm. —
Patent- och registerstyrelsen ' ' Antttkan utbgd och utl.ikrlftan publlcand 30.11.79 - (32)(33)(31) Pjry4«ttjr atuolkMi —Begird prlorltet 29.0U. 7 2 2U.II.72 Japani-Japan(JP) U2686/72, 118U52/72 ^ (71) Takeda Chemical Industries, Ltd., 27, Doshomachi 2-chome, Higashi-ku,
Osaka, Japani-Japan(JP) (72) Masahiko Fujino, Hyogo, Shigeru Kohayashi, Osaka, Mikihiko Obayashi,
Osaka, Susumu Shinagawa, Osaka, Tsunehiko Fukuda, Osaka, Japani-Japan(JP) (7U) Oy Borenius & Co Ab (5U) Menetelmä uusien munasolun irtoamista edistävien nonapeptidiamidijohdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya amidderivat av nonapeptid som befrämjar lösgörandet av äggceller Tämä keksintö kohdistuu menetelmään uusien nonapeptidiamidijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on voimakas munasolun irtoamista aiheuttava vaikutus.
Tämä keksintö kohdistuu erikoisesti menetelmään uusien nonapeptidin amidijohdannaisten, joita esittää yleinen kaava (I): H-CPyrjGlu-His-Trp-Ser-A^-Gly-A2-Arg-Pro-Y (I) (missä A1 tarkoittaa ryhmää Tyr tai Phe, A2 on Leu, Ile, Nle, Vai, NVal, Met tai Phe, Y on NHR, jossa R on suora- tai haaraketjuinen 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu hydroksilla, tai vaihtoehtoisesti Y tarkoittaa pyrrolidinoryhmää) sekä niiden farmaseuttisesti kelpaavien suolojen valmistamiseksi.
Selityksessä kauttaaltaan (Pyr)Glu, His, Trp, Ser, Tyr, Phe, Gly,
Leu, ILe, NLe, Vai, NVal, Met, Arg ja Pro tarkoittavat radikaaleja L-pyroglutamiinihappo, L-histidiini, L-tryptofaani, L-seriini, L-tyrosiini, L-fenyylialaniini, glysiini, L-leusiini, L-isoleusiini, L-norleusiini, L-valiini, L-norvaliini, L-metioniini, L-arginiini ja L-proliini, mainitussa järjestyksessä. Radikaalilla tarkoitetaan vastaavasta -aminohaposta johdettua radikaalia poistamalla karbok-syyliryhmän 0H-osa ja oC -aminoryhmän H-osa. Siten L-arginiinin ollessa kysymyksessä esimerkiksi S6676 C-NHCHoCHoCHoCHC00H H 2 2 21 2 NH2 jota voidaan esittää kaavalla NH^-A-COOH (NH2 on <y(. -aminoradikaali), radikaali (-NH-A-CO-) tarkoittaa L-arginiinin radikaaliryhmää ja se lyhennetään ''-Arg-”. Muilla edelläsanottujen -aminphappojen lyhenteillä on sama tarkoitus kuin edellä on selostettu L-arginiinihapon suhteen.
Edelläsanottu substituentti R, joka on suora- tai haaraketjuinen 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä, joka voi olla hydroksilla substituoitu, on esimerkiksi metyyli, etyyli, n-propyyli, hydroksi-etyyli, 2-hydroksietyyli, 2-hydroksi-n-propyyli, 3-hydroksi-n-propyyli, 2,2-dihydroksi-i-propyyli tai niiden tapainen.
Jo useita vuosia on tiedetty, että hypotalamus sisältää tekijöitä, jotka korkeammalla tasolla säätävät trooppisten hormonien erittymistä aivolisäkkeestä. Hiljattain on seurauksena tyropropiinia vapauttavan hormonin (TRH) eristämisestä uutettu sioista ja lampaista puhtaassa muodossa hormonia, joka aikaansaa luteiinihormonin erittymisen, ja sen on osoitettu olevan rakenteeltaan dekapeptidinen: H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
(A.V. Schally et ai. Biochem. Biophys. Res. Commun., 4j3, 1334 (1971), R. Gnillemin et ai., Proc. Nat. Acad. Sei., U.S.A., 6_9 , 278 (1972).
Tätä havaintoa ovat seuranneet useiden samanlaisten peptidien synteesit, ja myös biologisia kokeita on suoritettu näillä analogisilla peptideillä. Mutta vieläpä vähäisetkin muunnokset edelläsanotuissa aminohappokoostumuksissa vähentävät voimakkaasti peptidin fysiologista vaikutusta, ja edellämainitun kemiallisen rakenteen on arvioitu olevan olennaisin maksimaalisen fysiologisen vaikutuksen aikaansaamiseksi. (A.V. Schally et ai., Biochem. Biophys. Res. Commun., 366 (1972)).
3 56676
Keksijöiden on tässä vaiheessa onnistunut valmistaa synteettisesti nonapeptidiamidijohdannaisia (I) samoin kuin niiden farmaseuttisesti kelpaavia suoloja ja he ovat yllättäen havainneet, että näillä yhdisteillä on voimakkaampi munasolun irtoamista edistävä vaikutus kuin luonnossa esiintyvällä dekapeptidillä. Keksijät ovat myös havainneet, että nämä yhdisteet vaikuttavat aivolisäkkeeseen aikaansaaden sekä keltarauhashormonin että munarakkulahormonin erittymisen. Edelleen keksijät ovat havainneet, että nämä yhdisteet eivät ole käyttökelpoisia ainoastaan ihmisten lääkkeenä, esim. lääkkeenä aivolisäkkeen toiminnan diagnoosissa tai gonadotropiinin puutoksessa ja amenorrhean lääkinnässä vaan myös lääkkeenä eläinlääketieteessä, erikoisesti eläinten siemennyksessä. Tämä keksintö perustuu mainittuihin yllättäviin toteamuksiin.
Tämän keksinnön tarkoituksena on aikaansaada menetelmä uusien nonapeptidiamidijohdannaisten (I) ja niiden farmaseuttisesti kelpaa-vien suolojen valmistamiseksi.
Tämän keksinnön mukaan yleiskaavan (I) mukaisia nonapeptidiamidi-johdannaisia tai niiden farmaseuttisesti kelpaavia suoloja valmistetaan menetelmällä, jolle on tunnusomaista se, että reagenssi (A)--- L-pyroglutamiinihappo tai peptidi, jossa on L-pyroglutamiinihappo-osa (ts. H-(Pyr)Glu-)N-päätteessä ja joka samanaikaisesti käsittää siitä lähtien edelläsanotun aminohapposarjän --- kondensoidaan reagenssin (B) kanssa --- amiinikomponentin, joka vastaa edelläsanotun tuotteen, nonapeptidiamidijohdannaisen (I), loppuosaa ---, jolloin sanotut kaksi reagenssia (A) ja (B) ovat valinnaisesti suojatut suojaryhmällä tai -ryhmillä, ja sitten mahdollinen suojaryhmä tai -ryhmät poistetaan, ja saatu tuote muutetaan haluttaessa farmaseuttisesti kelpaavaksi suo-lakseen.
Siten reagenssi (A) on L-pyroglutamiinihappo tai peptidi, jonka N-päätteessä on L-pyroglutamiinihappo-osa ja jossa samanaikaisesti on yleiskaavan (I) esittämä aminohapposarja, ja reagenssi (B), joka kondensoidaan reagenssin (A) kanssa, on amiiniyhdiste, joka vastaa edelläsanotun tuotteen, nonapeptidiamidijohdannaisen (I), loppuosaa, jolloin reagenssit (A) ja (B) ovat valinnaisesti suojattuja.
► 4 56676
Reagenssin (A) ja (B) suhde esitetään seuraavassa.
Menetelmä D ., Λ\ π .
Reagenssi (A) Reagenssi (B)
No___ 1 H-(Pyr)Glu-0H H-His-Trp-Ser-A1-Gly-
A^-Arg-Pro-Y
2 H-(Pyr)Glu-His-OH H-Trp-Ser-A1-Gly-A2~
Arg-Pro-Y
3 H-(Pyr)Glu-His-Trp-OH H-Ser-A^-Gly-A^-Arg-
Pro-Y
4 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-A^-Gly-A2-Arg-Pro-Y
Ser-OH
5 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-Gly-A2-Arg-Pro-Y
Ser-A^-OH
6 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-A2-Arg-Pro-Y
Ser-A1-Gly-OH
7 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-Arg-Pro-Y
Ser-A1-Gly-A2-OH
8 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-Pro-Y
Ser-A^-Gly-A2~Arg-OH
9 H-(Pyr)Glu-His-Trp- H-Y
Ser-A^-Gly-A2~Arg-
Pro-OH
56676
Kun vasemman sarakkeen yhdistettä käytetään reagenssina (A), saman rivin oikeanpuoleisen sarakkeen yhdistettä käytetään reagenssina ‘(B) , joka on reagenssin (A) vastapuoli kondensaatio-reaktiossa. Reagenssit (A) ja/tai (B) voidaan suojata ennen kon-densaatioreaktiota tai aktivoida kondensaatioreaktion aikana, tarkemmin sanottuna ennen peptidisidoksen muodostusta reaktiossa, kuten seuraavassa selostetaan.
Peptidisynteesin tuntijoille on aikaisemmin ollut tunnettua, että kaikenlaisia peptidejä voidaan valmistaa kondensoimalla aminohappoa tai osittaispeptidiä (ts. pienempiä yksiköitä kasit-tävää peptidiä) aminohapolla tai osittaisella peptidillä (ts. pienempiä yksiköitä käsittävällä peptidillä). Ennestään tunnetaan useita menetelmiä kondensaatioreaktioiksi.
Esimerkiksi reaktiokykyinen ryhmä tai ryhmät (esim. amino-, karboksi-, hydroksi-, guanidiiniryhmä), jotka eivät liity peptidisidoksen (ts. -CONH-) muodostumisreaktioon kondensaatioreaktiolla, voidaan suojata suojaryhmällä tai -ryhmillä ennen kondensaatio-reaktiota. Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä myös reagenssi (A) tai (B) voidaan suojata reaktiokykyisen ryhmän tai ryhmien suhteen, jotka eivät ota osaa kondensaatioreaktioon, sinänsä tunnetuilla menetelmillä.
On tunnettua, että ennen peptidinmuodostusreaktiota C-päässä oleva karboksyyliryhmä tai N-päässä oleva aminohapon tai osittaisen peptidin aminoryhmä, joka osallistuu peptidisidoksen muodostus-reaktioon, aktivoidaan jotta peptidisidoksen muodostusreaktio tulisi mahdolliseksi, ja että jos aktivointia ei tapahdu, peptidisidoksen muodostusreaktio suoritetaan vedenpoistoaineen läsnäollessa. Menetelmät C-päätteen karboksyyliryhmän sekä N-päätteen aminoryhmän aktivoimiseksi ovat hyvin tunnettuja. Tässä keksinnössä voidaan käyttää sinänsä tunnettua menetelmää. Toisin sanoen tämän keksinnön mukainen kondensaatio voidaan suorittaa ensimmäisessä vaiheessa aktivoimalla C-päätteen karboksyyliryhmä reagens-sissa (A) tai aktivoimalla reagenssin (B) N-päätteen aminoryhmä, ja toisessa vaiheessa suorittamalla peptidisidoksen muodostumis-reaktio aktivoidun reagenssin (A) ja reagenssin (B) välillä tai
6 SS6H
reagenssin (A) ja aktivoidun reagenssin (B) välillä tai vaihtoehtoisesti suorittamalla peptidisidoksen muodostusreaktio reagenssin (A) ja reagenssin (B) välillä, kun läsnä on vedenpoisto-ainetta ja reagenssit (A) ja (B) ovat valinnaisesti suojattuja.
Edelleen on tunnettua, että kun edellämainittu reaktiokykyinen ryhmä tai ryhmät suojataan suojaryhmällä ta -ryhmillä ennen kondensaatioreaktiota, suojaryhmä tai -ryhmät poistetaan konden-saatioreaktion jälkeen. Myös tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä suojauksen poisto voidaan suorittaa aikaisemmin tunnetun mukaisesti.
Tässä yhteydessä on myös ollut ennestään tunnettua, että suojattu L-glutamyyliryhmä, jota esittää yleiskaava (II): rco-ch2ch2ch(mh2)co- (II) (jossa H on alkoksiryhmä (esim. metoksi, etoksi, n-propoksi, i-propoksi, n-butoksi jne.), aralkyyliryhmä (esim. bentsyylioksi jne.) tai amino) helposti voidaan muuttaa itse L-pyroglutamyyli-ryhmäksi: yy°- saattamalla se kosketukseen emäksen kanssa (esim. ammoniakin jne.) tai hapon kanssa (esim. etikkahapon jne.), ja että ryhmä (II) vastaa tässä tapauksessa itse L-pyroglutamyyliryhmää. Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä asia on tulkittava siten, että L-pyro-glutamyyli (ts. H-(Pyr)Glu-) reagenssissa (A) ei sisällä vain itse L-pyroglutamyyliryhmää vaan myös kaavan (II) suojatun L-gluta-myyliryhmän. Silloin kun reagenssissa (A) H-(Pyr)Glu- esittää ryhmää (II), tämä on helposti muutettavissa L-pyroglutamyyli-ryhnäksi sinänsä tunnetuilla menetelmillä.
Seuraavassa on mainittu muutamia menettelytapoja, joita voidaan edullisesti käyttää tämän keksinnön mukaisessa peptidisidoksen muodostusreaktiossa.
(i) Menetelmä, jolla suojattu tai suojaamaton reagenssi (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on vapaa karboksyyli, saatetaan rea- 7 M676 goimaan suojatun tai suojaamattoman reagenssin (B) kanssa, jonka N-päätteen aminoryhmä on vapaa amino, kun läsnä on kondensoimis-ainetta.
(ii) Menetelmä, jolla suojattu tai suojaamaton reagenssi (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on aktivoitu, saatetaan reagoimaan reagenssin (B) kanssa, jonka N-päätteen aminoryhmä on vapaa amino.
(iii) Menetelmä, jolla suojattu tai suojaamaton reagenssi (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on vapaa karboksyyli, saatetaan reagoimaan suojatun tai suojaamattoman reagenssin (B) kanssa, jonka N-päätteen aminoryhmä on aktivoitu.
Siten L-pyroglutamiinihapon molekyylinsisäisen asyyliaminoryhmän suojaryhmä voi bentsyyloksikabonyyli, t-butoksikarbonyyli, iso-bornyylioksikarbonyyli jne., L-histidiinin iminoryhmän suoja-ryhmä on bentsyyli, tosyyli, 2,4-dinitrofenyyli, t-butoksikarbonyyli, karbobentsoksi jne., L-seriinin hydroksyyliryhmän suoja-ryhmä on esim. eetteriä muodostava ryhmä, kuten bentsyyli, t-butyyli jne., tyrosiinin hydroksyyliryhmän suojaryhmä on esim.
eetteriä muodostava ryhmä, kuten bentsyyli, t-butyyli jne., L-arginiinin guanidiiniryhmän suojaryhmä on esim. nitro, tosyyli, karbobentsoksi, isobomyylioksikarbonyyli, adamantyylioksikarbo-nyyli jne. Edelleen l-arginiinin guanidiiniryhmä voidaan suojata suolanmuodostuksella haposta johdetun protonin avulla (esim, " suolahaposta, bromivetyhaposta jne.) ja on ymmärrettävä, että protoni sisältyy tämän selityksen ja vaatimusten mukaiseen suojaryhmään.
Reagenssin (A) C-päätteen aktivoitu muoto voi olla esimerkiksi vastaava happoanhydridi, kuten karbonihapon monoalkyyliesterin seka-anhydridi, atsidi tai aktiivinen esteri (esim. vastaava alkoholiesteri, kuten pentakloorifenoli, 2,4,5-trikloorifenoli, 2,4, dinitrofenoli, syaanometyylialkoholi, p-nitrofenoli, N-hydromeripihkahappoimidi, N-hydroksi-5-noborneeni-2,3-dikarboksi-imidi, N-hydroksiftaalihappoimidi, N-hydroksibentsotriatsoli jne.).
S6676 Näistä estereistä on edullisin N-hydroksi-5-norborneeni-2,3-dikarboksi-imidiesteri. Vaikkakin aminohappojen tai peptidien N-hydroksi-5-norbornceni-2,3-dikarboksi-imidiesterit ovat uusia, niitä voidaan valmistaa samalla tavalla kuin aminohappojen tai peptidien N-hydroksimeripihkahappoimidiestereitä.
Vastaavasta fosforihappoamidista on esimerkkinä suojatun tai suojaamattoman reagenssin (B) N-päätteen aktivoitu muoto.
Vedenpoistoaineena voidaan käyttää mitä tahansa ainetta, jota voidaan käyttää peptidisynteesissä. Erikoisen edullisia ovat esimerkiksi niinkutsutut karbodi-imidireagenssit, kuten esimerkiksi disykloheksyylikarbodi-imidi.
Tämän keksinnön mukaista kondensaatioreaktiota suoritettaessa voidaan tietenkin panostaa yksi ainoa reaktioastia (1) suojatulla tai suojaamattomalla aineella (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on vapaa, (2) suojatulla tai suojaamattomalla aineella (B), jonka N-päätteen aminoryhmä on vapaa, (3) edellä-sanotulla alkoholilla (esim. N-hydroksi-5-norborneeni-2,3-di-karboksi-imidillä, N-hydroksimeripihkahappoimidillä jne.) sekä (4) vedenpoistoaineella. Tässä tapauksessa ensin suojattu tai suojaamaton aine (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on vapaa, reagoi alkoholin kanssa vedenpoistoaineen avulla, jolloin saadaan suojattua tai suojaamatonta ainetta (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on aktivoitu, ja sitten suojattu tai suojaamaton aine (A), jonka C-päätteen karboksyyliryhmä on aktivoitu, reagoi suojatun tai suojaamattoman aineen (B) kanssa, jonka N-päätteen aminoryhmä on vapaa. Tässä menetelmässä C-päätteen karboksyyli-ryhmän aktivointi ja peptidisidoksen muodostusreaktio suoritetaan yhdessä panostuksessa.
Edellämainittujen peptidien valmistamiseksi voidaan valita yhdistelmiä eri menettelytavoista.
Eräs edullinen tämän keksinnön mukainen sovellutus on selostettu kaavio rnai:; e s t i souraavaesa.
9 M676 (I) H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-A^-Gly-OH (reagenssi (A)3
+ DCC + HONBI
| aktivointi Z
H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-A^-Gly-ONBI + H-A2-Arg-Pro-Y
(aktivoitu reagenssi (A)) (suojattu reagenssi (B)) peptidisidoksen muodostuminen Z,,
H-(Pyr)Glu-Hi s-Trp-S e r-A ^-Gly-A 2-Arg-Pro-Y
suojauksen poisto
H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-A1-Gly-A2-Arg-Pro-Y
Z
(II) H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-A^Gly-OH + H-A^-Arg-Pro-Y
" (reagenssi (A)) (suojattu reagenssi (B))
+ DOC + HONBI
φ aktivointi
(2) peptidisidoksen muodostuminen N' Z
H-(Pyr)Glu-Hi s-Trp-S e r-A ^ Gly-A2-Arg-Pro-Y
j, suojauksen poisto H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-A ^-Gly-A2~Arg-Pro-Y
Edelläesitetyssä DCC tarkoittaa N,N*-disykloheksyylikarbodi-imiaiä, HONBI tarkoittaa N-hydroksi-5-noborneeni-2,3-dikarboksi-imidiä ja Z on L-arginiinihappotähteen guanidiiniryhmän suoja-ryhmä .
Edellä kohdissa (i), (ii) ja (iii) mainittu peptidisidoksen muo-" dostusreaktio suoritetaan yleensä sopivassa liuottimessa. liuotin voi olla esimerkiksi kuiva tai vesipitoinen dimetyyliformamidi, dimetyylisulfoksidi, pyridiini, kloroformi, dioksaani, dikloori-metaani, tetrahydrofuraani jne. tai tällaisten liuosten seos.
Vaikkakin reaktiolämpötila tavallisesti on alueella noin -20 °C -noin 30 °C, reaktio voidaan suorittaa alemmissakin lämpötiloissa tai kuumentaen.
10
ttt?S
Peptidididoksen muodostamiseen käytettäviä kahta lähtöainetta käytetään tavallisesti ekvimolaariset määrät, vaikkakin muitakin suhteita voidaan haluttaessa käyttää. Yleensä jokaista toisen lähtöaineen moolia kohti käytetään edullisesti noin 1-2 moolia, ja mieluiten 1-1,4 moolia toista tarvittavaa ainetta. Vedenpoistoaineen osuus on yleensä noin 1-2 moolia suhteessa peptidisidoksen muodostusreaktiossa poistuneeseen veteen.
Tyydyttäviä tuloksia saadaan useissa tapauksissa, kun reaktioaika on välillä noin 6-10 tuntia.
Peptidisidoksen muodostusreaktion tapahduttua reaktiotuote voidaan eristää esimerkiksi saostamalla liuottimena (johon tuote huonosti liukenee) ja sitten ottamalla saatu saostuma talteen suodattamalla.
’ Kun reagenssi (A) ja/tai reagenssi (B) on suojaryhmän tai -ryhmien suojaama, kondensaatiotuotteen molekyylissä on tavallisesti suojaryhmä tai -ryhmiä. Mutta suojaryhmä tai -ryhmät poistetaan tavalliseen tapaan, joka ei häiritse nonapeptidiamidituotteen aminohapposarjaa, ja suojauksen poisto jättää jäljelle nonapeptidiamidi johdannaisen (I), joka on vapaa suojaryhmästä tai -ryhmistä.
Tällaisesta menetelmästä on esimerkkinä katalyyttinen pelkistys esim. palladiumhiili-katalysaattorilla tai platinalla, happo-hydrolyysi esim. fluorivedyllä tai trifluorietikkahapolla ja kemiallinen pelkistys esim. natriummetallilla nestemäisessä ammoniakissa. Minkä tahansa edelläsanotun menetelmän jälkeen haluttu yhdiste voidaan eristää sinänsä tunnetuilla menetelmillä. Tällainen on esim. edelläselostettu saostaminen.
Näin eristetty tuote voidaan puhdistaa sopivalla menetelmällä, kuten pyiväskromatografiällä, esim. karboksimetyyliselluloosaa käyttäen, kaupallisesti saatavilla puhdistusta varten olevilla polymeereillä, kuten Sephadex tai Amberlite XAD-2.
11 Μ*7·
Riippuen käytetyistä reaktio-olosuhteista edellämainittu haluttu tuote saadaan emäksen tai suolan muodossa, joka voi olla farmaseuttisesti kelpaava suola. Suolasta voidaan valmistaa emäs tavallisilla menetelmillä ja emäs voidaan muuttaa suolaksi saattamalla reagoimaan happojen kanssa, jotka sopivat farmaseuttisesti kelpaavien suolojen valmistukseen. Tällaisia happoja ovat useat epäorgaaniset hapot, kuten halogeenivetyhapot, esim. suolahappo, bromivetyhappo, perkloorihappo jne,, typpihappo, tiosyaani-happo, fosforihappo jne., sekä useat orgaaniset hapot, kuten muurahaishappo, etikkahappo, propionihappo, glykolihappo, maitohappo, päärynähappo, oksaalihappo, malonihappo, meripihkahappo, fumaarihappo, antranyylihappo, kanelihappo, naftaleenisulfohappo, sulfanyylihappo jne.
Edellä selostetulla tavalla saatu yhdiste voidaan muuttaa metalli-kompleksi suolaksi sinänsä tunnetuilla menetelmillä. Voidaan esimerkiksi saattaa peptidiamidijohdannainen, joka on saatu selostetulla tavalla, reagoimaan yhden tai useampien seuraavien metallien suolan, hydroksidin tai oksidin kanssa: sinkki, nikkeli, koboltti, kupari ja rauta, ja sitten säädetään pH noin arvoon 6-8, jolloin saadaan heikosti liukenevaa metalliyhdisteen ja nonapeptidiamidijohdannaisen välistä adsorptiokompleksisuolaa.
On huomattu, että näin saaduista erilaisista metallikompleksi-suoloista ovat edullisimpia sinkkikompleksiyhdisteet niiden pysyvän tehon johdosta niitä annettaessa.
Edellä sanotulla tavalla valmistettua nonapeptidiamidijohdannaista tai sen farmaseuttisesti kelpaavaa suolaa voidaan huoletta antaa niiden erittäin vähäisen myrkyllisyyden johdosta, ja yhdisteellä on voimakas munasolun irtoamista edistävä vaikutus.
Kun rotille annetaan erittäin pieni määrä (esim. 50-500 ng/100 g) nonapeptidijohdannaista (I) tai sen farmaseuttisesti kelpaavaa suolaa suoneen, lihakseen tai ihon alle, huomataan jyrkkä nousu veren keltarauhashormonin ja follikuliinin määrässä; kun rottiin ruisku l;etaan 10-200 ng/100 g yhdistettä suoneen tai lihakseen 12 &*6?t tapahtuu noin 50 ssa rottia munasolun irtoaminen ja kun rottiin ruiskutetaan 0,1-5 jig/100 g yhdistettä suoneen tai lihakseen tapahtuu 100 $:ssa rottia munasolun irtoaminen, vaikka rotat olisivat diestruksessakin. Kun annos pidetään vakiona, suonen sisäinen ruiske on yleensä kaksi kertaa niin tehokas kuin ihonalainen ruiske. Selityksessä merkintä "ng” tarkoittaa nanoggrammaa (-grammoja).
Mainitut seikat osoittvat, että tämän keksinnön mukaisilla peptideillä on voimakkaampi hormonivaikutus kuin luonnossa esiintyvillä keltarauhashormonia vapauttavailla hormoneilla.
Ruiskeet voidaan valmistaa liuottamalla kysymyksessä olevia tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä fysiologiseen keittosuolaan.
Koska näillä yhdisteillä on fysiologisesti riittävä vaikutus myös erittäin pieninä määrinä, on sopivaa käyttää niitä lyo-fiilisinä ampullivalmisteina, jotka sisältävät lisäaineena mani tolia.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Näissä esimerkeissä käytetään seuraavia lyhenteitä.
Z-: bentsyylioksikarbonyyli; IB0C-: isobornyylikarbonyyli; B0C-: t-butyylioksikarbonyyli; -OEt: etyyliesteri; -OSU: N-hydroksimeripihkahappoimidiesteri; -OtBu: t-butyyliesteri,* -0ΝΌΡ: 2,4-dinitrofenoliesteri; -ONBI: N-hydroksi-5-norborneeni-2,3-dikarboksi-iraidiesteri; -OEt: etyyliesteri; HONBI: N-hydroksi-5-norborneeni-2,3-dikarboksi-imidi; DCC: N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidi; DMP: Ν,Ν’-dimetyyliformamidi; TLC: ohutkerroskromatografia; DCHA: disykloheksyyliamiini; MeOH: metanoli; EtOH: etanoli; n-BuOH: n-butanoli.
Ohutkerroskromatografiassa käytetään seuraavia kehitysjärjestelmiä.
Rf 1 = kloroformi-metanoli-etikkahappo (9 : 1 : 0,5)
Rf 2 = etyyliasetaatti-pyridiini-etikkahappo-vesi (60 : 20 : 6 t 11) Rf 3 = n-butanoli-etyyliasetaatti-etikkahappo-vesi (1 : 1 : 1 : 1) Rf 4 = n-butanoli-etikkahappo-vesi (4 : 1 : 1)
Rf 5 = n-butanoli-pyridiini-etikkahappo-vesi (30 : 20 : 6 : 24) 13 m/ι
Esimerkeissä "paino-osan (-osien)" suhde "tilavuusosaan (-osiin)" tarkoittaa "gramman (grammojen)" suhdetta "millilitraan (-litroihin)" ja on painot, milloin muuta ei ole mainittu, seka "Amberlite CG-400 (tertiääriamiini-styreeni-divinyylibentseeni-sekapolymeeri, jota valmistaa Lohm & Haas Co., USA)", "Sephadex LH-20 (esteröity dekstraanigeeli, jota valmistaa Pharmacia Pine Chemicals, Ruotsi)", "Amberlite XAD-2 (makro-letikulaari-styreeni-divinyyli-bentseenisekapolymeeri, jota valmistaa Lohm & Haas Co., USA)" sekä "Amberlite IRA-400 (tertiäärinen amiini-styreeni-divinyylibentseenisekapolymeeri, jota valmistaa Lohm & Haas Co., USA)" lyhennetään yksinketaisesti nimityksiksi "Amberlite CG-400", Sephadex LH-20", "Amberlite XAD-2" ja "Amberlite IRA-400".
Esimerkki 1 H-(Pyr)Glu-Hi s-Trp-Ser-Tyr-Gly-Le u-Arg-Pro- NHCgH^tn valmistus a) Z-Arg(N02)-Pro-NHC2H^:n valmistus 10 tilavuusosaan DMP:a liuotetaan 0,901 paino«osaa Z-Arg(N02)-Pro-0H:a ja 0,181 paino-osaa etyyliamiinihydrokloridia, sekä jäähdyttäen 0 °C:ssa 0,38 tilavuusosaa trietyyliamiinia lisätään tipoittain. Sitten lisätään 0,43 paino-osaa HONBIra ja 0,495 paino-osaa DCC:a ja seosta sekoitetaan 0 °C:ssa 5 tunnin ajan ja sitten höoneen lämpötilassa 10 tuntia. Sivutuotteena saatava virtsa-aine erotetaan suodattamalla ja DMF tislataan pois. Jäännös uutetaan kloroformilla, pestään vedellä ja kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella. Kloroforni tislataan pois ja jäännöstä käsitellään eetterillä ja saostetaan uudelleen metanoli-eetteristä. Saalis on 0,692 paino-osaa,
Rf 1 = 0,50; sp. 141-145 °C (hajoaa); (0()^=44,6° (c=1, metanoli). Analyysi kaavalle C21H31°6N7 lasketut arvot C 52,82, H 6,54, N 20,53 saatu C 52,95, H 6,77, N 19,65 b) Z-Leu-Arg(N02)-Pro-NHC2H^:n valmistus 5 tilavuusosaan 25 prosenttista HBr-etikkahappoa liuotetaan 0,572 paino-osaa Z-Arg(N02)-Pro-NHC2H^:a ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan.
14 m?6
Sitten lisätään kuivaa eetteriä reaktioseokseen ja saatu kiteytymä otetaan talteen suodattamalla sekä kuivataan. Toisaalta 0,291 paino-osaa Z-Leu-OH:a liuotetaan 5 tilavuusosaan dioksaa-nia ja siihen lisätään jäähdyttäen 0,247 paino-osaa DCC:a ja 0,215 paino-osaa H0NBI:a. Sekoitetaan 2 tunnin ajan ja sivutuotteena saatava virtsa-aine poistetaan suodattamalla. Suodok-seen lisätään edellämainittu saostuma, joka liuotetaan lisäämällä 3 tilavuusosaa DMF:a. Jäähdyttäen lisätään 0,17 tilavuus-osaa trietyyliamiinia tipoittain ja sitten sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin tislataan pois ja jäännös uutetaan kloroformilla ja pestään vedellä. Kloroformikerros kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella ja kloroformi tislataan pois. Jäännöstä käsitellään eetterillä ja saostetaan uudelleen metanoli-eetteristä. Saalis 0,47 paino-osaa. (72 #); sp. 144-146 °C (hajoaa); Rf 1=0,40; (00)^=58,0° (c=1, metanoli).
c) 25-prosenttiseen HBr-etikkahappoon liuotetaan 0,165 paino-osaa Z-Leu-ArgiNOgJ-Fro-NHCgH^ta ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Sitten reaktioseokseen lisätään kuivaa eetteriä ja muodostunut saostuma otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan hyvin. Saostuma liuotetaan 3 tilavuusosaan DMFsa, ja jäähdyttäen ja sekoittaen lisätään tipoittain 0,05 tilavuusosaa N-etyylimorfoliinia. Tähän liuokseen liuotetaan 0,19 tilavuusosaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Gly-OH-hydrokloridia, minkä jälkeen lisätään 0,054 paino-osaa HONBIia ja 0,062 paino-osaa DCC:a.
Seosta sekoitetaan 0 °C:ssa 2 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa yön yli. Sivutuotteena saatu virtsa-aine poistetaan suodattamalla ja DMF tislataan pois. Jäännöstä käsitellään etyyliasetaatilla, jolloin saadaan 0,32 paino-osaa jauhetta.
Tätä tuotetta käsitellään pylväässä Amberlite XAD-2:lla ja desorboidaan suoralla eluoinnilla 5-prosenttisesta etanolista etanoliin. Pääfraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,11 tilavuusosaa puhdasta H-iPyrJ-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-ArgiNOg)-Pro-NHCgHfjia. Tätä tuotetta käsitellään 4 tilavuusosalla fluorivetyä 0 °C:ssa 1 tunnin ajan, kun läsnä on 0,02 tilavuus-osaa merkaptoetanolia. Fluorivety tislataan pois ja sitten, 13 66676 kuivaamisen jälkeen, jäännös liuotetaan veteen. Liuoksen annetaan kulkea Amberlite IRA-400-(asetaattimuoto) pylvään läpi ja sitten se saatetaan absorboitumaan karboksimetyyliselluloosa-pylvääseen. Pylväs eluoidaan 0,005 N ammoniumasetaatin vesi-liuoksesta 0,2 N ammoniumasetaatin vesiliuokseen ja pääfraktio lyofiloidaan. Menetelmällä saadaan 0,087 paino-osaa puhdasta H-fPyrjGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-HHCgH^:a. Rf 3=0,36; (oc)^=-56,2° (c=0,5, 5-prosenttinen etikkahappo).
Aminohappoanalyysi: His 0,95(1); Arg 0,98(1); Ser 0,95(1); Glu 0,98(1); Pro 1,00(1); Gly 1,00(1); Leu 1,00(1);
Tyr 1,00(1); NHgCgHj 1,10(1).
Suluissa olevat numerot tarkoittavat teoreettisia arvoja.
Esimerkki 2 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-
Nt^H^OHtn valmistus.
a) Z-ArgCNOgJ-Pro-NHCgH^OHtn valmistus 5 tilavuusosaan DMF:a liuotetaan 0,9 paino-osaa Z-ArgiNOg)-Pro-0H:a ja 0,43 paino-osaa H0NBI:a, ja jäähdyttäen 0 °C;een lisätään 0,495 paino-osaa DCC:a. Sekoitetaan yön yli. Eronnut virtsa-aine suodatetaan pois ja suodokseen lisätään 0,1832 paino-osaa etanoliamiinia, minkä jälkeen sekoitetaan yli yön.
DMF tislataan pois alennetussa paineessa ja jäännökseen lisätään dioksaania. Liukenematon aines erotetaan suodattamalla. Dioksaani tislataan pois alennetussa painee3a ja jäännös uutetaan n-buta-nolilla. Uute pestään vedellä, laimealla suolahapolla, vedellä, natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja vedellä mainitussa järjestyksessä, ja sitten n-butanoli tislataan pois alennetussa paineessa. Jäännöstä käsitellään eetterillä ja se saostetaan uudelleen metanoli-eetteristä. Saalis 0,625 paino-osaa (63»3 $); sp. 124-128 °C (hajoaa); Rf 2= 0,23; (^)^=-36,6° (c=0,5, etanoli).
b) Z-Leu-ArgiNOgJ-Pro-NHCgH^OHm valmistus 2 tilavuusosaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa liuotetaan 0,493 paino-osaa Z-ArgiNOgJ-Pro-NHCgH^OHza ja luioksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Sitten lisätään kuivaa eetteriä ja saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla 16 $6676 , ja kuivataan, jolloin saadaan jauhemainen tuote. Toisaalta liuotetaan 0,282 paino-osaa Z-Leu-0H:a ja 0,215 paino-osaa H0NBI:a 3 tilavuusosaan DMF: a ja lisätään jäähdyttäen 0 °C:een 0,248 paino-osaa DCC:a, minkä jälkeen sekoitetaan 2 tunnin ajan. Liuokseen lisätään edellä valmistettu jauhemainen tuote ja lisätään tipoittain 0,15 tilavuusosaa tri e tyyli Suniini a. Sekoitetaan yön yli. Virtsa-aine suodatetaan pois ja DMF tislataan pois alennetussa paineessa. Jäännös saatetaan adsorboitumaan pylväässä, jossa on 50 paino-osaa piigeeliä ja desor-boidaan liuotinsysteemillä kloroformi-metanoli-etikkahappo (9:1:0,5). Liuottimet tislataan pois ja jäännös kiteytetään eetteristä. Saalis 0,153 paino-osaa; sp. 110-113 °C (hajoaa);
Rf 1=0,49; (©0^°=-46,6° (c=0,5, etanoli).
c) Kun läsnä on 0,1 tilavuusosaa anisolia, 0,152 paino-osaa Z-Leu-Arg(N02)-Pro-NHC2H^0H:a liuotetaan 3 tilavuusosaan fluorivetyä. Liuosta sekoitetaan 0 °C:ssa tunnin ajan. Fluori-vety tislataan pois ja jäännös kuivataan hyvin sekä liuotetaan veteen. Kun on lisätty pieni määrä väkevää suolahappoa, liuos pestään eetterillä ja vesikerros lyofiloidaan. Saatu jauhe liuotetaan 5 tilavuusosaan DMFPa yhdessä 0,19 tilavuusosan kanssa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hydrokloridia ja 0,0493 paino-osaa H0NBI:a. Liuos jäähdytetään 0 °C:een ja lisätään 0,0567 paino-osaa DCC:a ja 0,07 tilavuusosaa N-etyyli-morfoliinia. Koko seosta sekoitetaan yön yli. DMF tislataan pois alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan veteen. Liukenematon aines suodatetaan pois ja suodos saatetaan kulkemaan Amberlite IRA-400-pylvään läpi (asetaattimuoto). Ulos virtaava neste kerätään ja lyofiloidaan. Tätä tuotetta käytetään Amberlite-XAD-2-pylvääseen ja desorboidaan suoraviivaisessa eluointijärjestelmässä, jossa liuotin on vesi-metanoli. Pää-fraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,023 paino-osaa puhdasta H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-NHC2H^0H:a. Rf 3= 0,28; (oc)p°=-54,4° (c=0,5, 5-prosenttinen etikkahapon vesiliuos). Aminohappoanalyysi: His 1,00(1); Arg 1,05(1); Ser 0,95(1);
Glu 1,00(1); Pro 1,05(1); Gly 1,00(1); Leu 0,95(1);
Tyr 0,76(1). Sulkeissa olevat numerot tarkoittavat teoreettisia arvoja.
17
Mt7|
Esimerkki 3 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro- NHCH^:n valmistus a) Z~Arg(N02)-Pro-NHCH^:n valmistus 5 tilavuusosaan DMP:a liuotetaan 0,675 paino-osaa Z-Arg(N02)-Pro-OH:a ja 0,101 paino-osaa metyyliamiinihydrokloridia, ja samalla kun liuos jäähdytetään 0 °C:een lisätään tipoittain 0,21 tilavuusosaa trietyyliamiinia.
Sitten lisätään 0,322 paino-osaa HONBIsa ja 0,37 paino-osaa DOC:a ja koko seosta sekoitetaan 0 °C:ssa 5 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa 10 tuntia. Sivutuotteena saatu virtsa-aine suodatetaan pois ja DMF tislataan pois. Jäännös uutetaan kloroformilla, pestään vedellä ja kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella. Kloroformi tislataan pois ja jäännöstä käsitellään etanolilla ja saostetaan uudelleen metanoli-eetteristä. Saalis 0,612 paino-osaa (88 i<>)\ Rf 1=0,30; sp. 137-143 °C (hajoaa); (0^)^=-41,5° (c=1, metanoli).
Analyysi kaavalle C20H29°6N7 lasketut arvot C 51,82, H 6,31 f N 21,15 saatu C 51,84, H 6,54, N 21,57 b) Z-Leu-Arg(N02J-Pro-NHCH^ίη valmistus 5 paino-osaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa liuotetaan 0,556 paino-osaa Z-Arg(N02)-Pro-NHCHya ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Sitten lisätään kuivaa eetteriä, ja saadut kiteet otetaan talteen suodattamalla sekä kuivataan. Toisaalta luiotetaan 0,312 paino-osaa Z-Leu-0H:a 5 tilavuusosaan dioksaani-etyyliasetaattia (1:1) ja liuoksen jäähtyessä lisätään 0,268 paino-osaa DCC:a ja 0,232 paino-osaa HONBI:a. Koko seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan. Sivutuotteena saatu virtsa-aine poistetaan suodattamalla ja edelläsanotulla tavalla valmistetu kiteet lisätään suodokseen ja liuotetaan, samalla kun lisätään 3 tilavuusosaa DMF:a. Jäähdyttäen lisätään 0,17 tilavuusosaa trietyyliamiinia. Sekoitetaan huoneen lämpötilassa yli yön. Liuotin tislataan pois. Jäännös uutetaan kloroformilla ja pestään vedellä. Kloroformikerros kuivataan 18 &66?6 vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella ja sitten kloroformi tislataan pois. Jäännöstä käsitellään eetterillä ja saostetaan uudelleen metanoli-eetteristä.
Saalis 0,45 paino-osaa (78 #); Rf 1=0,25.
Analyysi kaavalle C26H40°7N8 lasketut arvot C 54,15, H 7,02, N 19,43 saatu C 54,37, H 6,98, N 19,52 c) 5 tilavuusosaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa liuotetaan 0,144 paino-osaa Z-Leu-ArgCNOgJ-Pro-NHCH^ra ja liuoksen seistyä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan lisätään kuivaa eetteriä. Saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan hyvin. Sitten se liuotetaan 3 tilavuusosaan DMF:a ja jäähdyttäen ja sekoittaen lisätään tipoittain 0,05 tilavuus-osaa N-etyylimorfoliinia.
Tähän liuokseen liuotetaan 0,19 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Ser-Tyr-Gly-OH-hydrokloridia, minkä jälkeen lisätään 0,054 paino-osaa H0NBI:a ja 0,062 paino-osaa DCC:a. Koko seosta sekoitetaan 0 °C:ssa 2 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa yön yli. Sivutuote-virtsa-aine suodatetaan pois ja DMF tislataan pois. Jäännös viedään Amberlite XAD-2-pylvääseen ja desorboidaan suoraviivaisella eluointisysteemillä, jossa on 5-prosenttista etanolin vesiliuosta ja etanolia. Pääfraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,137 paino-osaa puhdasta H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-ArgiNOgJ-Pro-NHCH^ia. 0,09 paino-osaa edellä-sanottua tuotetta käsitellään 4 paino-osalla fluorivetyä, kun läsnä on 0,02 tilavuusosaa anisolia ja 0,02 tilavuusosaa merkaptoetanolia, 0 °C:ssa 1 tunnin ajan. Pluorivety tislataan pois ja kuivaamisen jälkeen jäännös liuotetaan veteen. Liuos saatetaan kulkemaan Amberlite IRA-400:n (asetaattimuoto) läpi ja sitten se adsorboidaan karboksimetyyliselluloosa-pylväässä. Pylväs eluoidaan suoraviivaisella eluointisysteemillä, jossa on 0,005 N ammoniumasetaatin vesiliuosta - 0,2 N ammonium-asetaatin vesiliuosta ja pääfraktio lyofiloidaan. Menetelmällä saadaan 0,06 paino-osaa puhdasta H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-NHCH^:a.
$6676 « 19
Rf 3=0,37» (<λ)·^=-55,6° (c=0,5, 5-prosenttisessa etikkahapon vesi-liuoksessa)
Aminohappoanalyysi: His 0,96(1); Arg 0,98(1); Ser 0,96(1);
Glu 1,00(1); Pro 1,00(1); Gly 1,00(1); Leu 0,98(1);
Tyr 0,98(1); NHgCH^ 1,12(1). Sulkeissa olevat numerot tarkoittavat teoreettisia arvoja.
Esimerkki 4 H-(Pyr)G-lu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-pyrro- lidiinin valmistus a) IBOC-Pro-pyrrolidiinin valmistus _ 30 tilavuusosaan asetonitriiliä liuotetaan 11,7 paino-osaa IB0C-Pro-0SU:a ja 2,3 tilavuusosaa pyrrolidiinia, ja liuosta sekoitetaan yli yön. Asetonitriili tislataan pois ja jäännös uute-^ taan etyyliasetaatilla. Uute pestään vedellä ja kuivataan vedettö män natriumsulfaatin yläpuolella. Etyyliasetaatti tislataan pois ja saadut kiteet kiteytetään uudelleen etyyliasetaattipetroli-bensiinistä. Saalis 8,4 tilavuusosaa (80,2 %), sp. 84-84,5 °C; (o$)-ip=-83,40 (c=1,0, metanoli).
Analyysi kaavalle ^20^32^3^2 lasketut arvot C 68,93» H 9,26, H 8,04 saatu C 68,93, H 9,43, N 8,17 b) IBOC-ArgiNOgJ-Pro-pyrrolidiinin valmistus 30 tilavuusosaan trifluorietikkahappoa liuotetaan 6,96 paino-osaa IBOC-Pro-pyrrolidinia ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Sitten liuokseen lisätään kuivaa eetteriä, ja saatu öljy otetaan talteen dekantoimalla ja kuivataan natriumhydroksidia sisältävässä eksikkaattorissa. Toisaalta liuotetaan 7,98 paino-osaa IBOC-ArgiNO^J-OHia 40 tilavuusosaan asetonitriiliä, ja samalla kun liuos jäähdytetään 0 °C:een lisätään 4,0 paino-osaa dinitrofenolla ja 4,6 paino-osaa DCC:a, minkä jälkeen sekoitetaan 2 tunnin ajan. Sivutuotteena saatu virtsa-aine suodatetaan pois ja edellä saatu öljy lisätään suodokseen. Seos jäähdytetään 0 °C:een ja lisätään siihen tipoittain 2,5 tilavuusosaa N-etyylimorfoliinia. Sekoitetaan huoneen lämpötilassa yli yön. Asetonitriili tislataan pois ja jäännös adsorboidaan 100 paino-osaan piigeeliä ja desor-boidaan 5-prosenttisella metanolin vesiliuoksella. Tämän puhdis- 20 6(676 tusmenetelmän jälkeen liuotin tislataan pois, jolloin saadaan 6,0 paino-osaa jauhetta. Saalis 54,5 sp. 190-193 °C (hajoaa); (ct)^=-59,7° (c=1, metanoli).
Analyysi kaavalle ^26Η430 lasketut arvot C 56,82, H 7,88, N 17,84 saatu C 57,00, H 8,26, N 17,51 c) IBOC-Leu-ArgCNOgJ-Pro-pyrrolidiinin valmistus 30 tilavuusosaan trifluorietikkahappoa liuotetaan 5,49 paino-osaa IBOC-ArgtlMI^-Pro-pyrrolidiinia ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 3C minuutin ajan. Sitten lisätään kuivaa eetteriä ja saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan hyvin, jolloin saadaan jauhetta. Toisaalta liuotetaan 3,95 paino-osaa IB0C«Leu-0H:a 20 tilavuusosaan dioksaania. Liuoksen jäähtyessä 0 °C:een lisätään 1,52 paino-osaa N-hydroksimeri-pihkahappoimidiä ja 2,7 paino-osaa DGGsa ja koko seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan. Sivutuotteena erottunut virtsa-aine poistetaan suodattamalla ja edellä valmistetut jauheet lisätään suodok-seen, minkä jälkeen lisätään 10 tilavuusosaa tetrahydrofuraania. Seos jäähdytetään 0 °C:een ja lisätään tipoittain 1,4 tilavuus-osaa trietyyliamiinia. Sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin tislataan pois ja jäännös uutetaan etyyliasetaatilla.
Uute pestään 5-prosenttisella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja 10-prosenttisella sitruunahapon vesiliuoksella. Sitten se pestään vedellä ja kuivataan vedettömän natriumsulfaatin yläpuolella. Etyyliasetaatti tislataan pois ja jäännöstä käsitellään petrolibensiinillä. Sitten se saostetaan uudelleen etyyliasetaatti-petrolibensiinistä.
Saalis 5,8 paino-osaa; sp. 185-6 °C (hajoaa); («*)-j|p=-53,60 (c=0,98, metanoli)
Analyysi kaavalle ^2^4^^80¾0 lasketut arvot C 56,45, H 8,29, N 16,46 saatu C 56,97, H 8,17, N 15,25 d) 50 tilavuusosaan metanolia liuotetaan 0,22 paino-osaa IBOC-Leu-ArgiNOgJ-Pro-pyrrolidiinia ja liuosta pelkistetään palladium- 21 56676 hiilen läsnäollessa 8 tunnin ajan. Metanoli tislataan pois ja jäännöstä käsitellään eetterillä. Saatu jauhe liuotetaan seokseen, joka käsittää 5 tilavuusosaa trifluorietikkahappoa ja 1 tilavuusosan 2 N-HCl-etikkahappoa, ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 40 minuutin ajan. Trifluorietikkahappo tislataan pois ja lisätään kuivaa eetteriä. Saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan hyvin. Tämä jauhe (0,153 paino-osaa) liuotetaan 3 tilavuusosaan DMF:a yhdessä 0,24 paino-osan kanssa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hydrokloridia, minkä jälkeen lisätään 0,0742 paino-osaa DCC:a, 0,0644 paino-osaa H0NBI:a ja 0,084 tilavuusosaa N-etyylimorfoliinia. Sekoitetaan 0 °G:ssa 5 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa yli yön. Sivutuotteena saatu virtsa-aine suodatetaan pois ja suodokseen lisätään etyyliasetaattia. Erottunut saostuma otetaan talteen suodattamalla, jolloin sakka painaa 0,26 paino-osaa. 0,2 paino-osaa tätä tuotetta saatetaan absorboitumaan Amberlite XAD-2-pylväässä ja desorboidaan suoraviivaisessa eluointisysteemissä 5-prosentti-sella etanolin vesiliuoksella (180 tilavuusosaa) - 50-prosentti-sella etanolin vesiliuoksella. Feaktiot, jotka antavat tarkat vyöhykkeet TLC:lla (piigeeli) kerätään ja lyofiloidaan. Saalis on 0,02 paino-osaa. (°0D =-91,0 (c=o,5, 5-prosenttinen etikka- happo); paperikromatografia, Rf= 0,72 (n-butanoli-pyridiini-etikkahappo-vesi=30:20:6:24).
Aminohappoanalyysi: His 1,09(1); Arg 0,96(1); Ser 0,82(1);
Glu 1,00(1); Pro 0,96(1); Gly 1,00(1); Leu 1,00(1);
Tyr 0,96(1).
Esimerkki 5 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Nle-Arg-Pro-NH-CHgCH^rn valmistus a) Z-d'iLe-ArgtNOgJ-Pro-NH-CK^CH^n valmistus 4 tilavuusosaan 25-prosenttista bromivety-etikkahappoa liuotetaan 0,4775 paino-osaa Z-ArgilK^-Pro-NH-CH^CH^sa ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Sitten reaktioseokseen.lisätään 50 tilavuusosaa kuivaa eetteriä, ja saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla, pestään hyvin eetterillä ja kuivataan natrivunhydroksidin yläpuolella alennetussa paineessa. Toisaalta liuotetaan 0,2653 paino-osaa Z-NLe-011:a seokseen, joka sisältää 2 tilavuusosaa. etyyliasetaattia ja 22 S6676 12 tilavuusosaa dioksaania. Liuoksen jäähtyessä 0 °C„een lisätään 0,197 paino-osaa H0NBI:a ja 0,226 paino-osaa DCC:a ja koko seosta sekoitetaan 3 tunnin ajan. Erottunut sivutuote-virtsa-aine suodatetaan pois ja suodos lisätään edellä saadun saostuman liuokseen 1 tilavuusosassa DMF:a, minkä jälkeen lisätään tipoittain 0,28 tilavuusosaa trietyyliamiinia. Sekoitetaan yön yli. Liuotin tislataan pois ja jäännös uutetaan 100 tilavuusosalia kloroformia. Uute pestään 5-prosenttisella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, vedellä, 0,5 N-suolahapolla ja vedellä, sekä kuivataan sitten vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella. Kloroformi tislataan pois ja jäännöstä käsitellään eetterillä ja saostetaan se uudelleen etanoli-eetteristä. Saalis on 0,41 paino-osaa, sp. 109-111 °G (hajoaa); (o#)22=_50>4° (c=o,5, EtOH).
Analyysi kaavalle 02^Η^20γΝ8.1/2 HgO
lasketut arvot C 54,07, H 7,22, N 18,68 saatu 0 53,79, H 7,09, N 18,24 2 tilavuusosaan 25-prosenttista bromivety-etikkahappoa liuotetaan 0,155 paino-osaa Z-NLe-ArgiNOg^Pro-NH-CHgCH^ja ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan.
Sitten reaktioseokseen lisätään 50 tilavuusosaa kuivaa eetteriä ja saatu saostuma otetaan talteen suodattamalla, pestään hyvin eetterillä ja kuivataan natriumhydroksidin yläpuolella alennetussa paineessa.
Sitten se liuotetaan 2 tilavuusosaan DMF:a ja sitten, jäähdyttäen 0 °C:een, lisätään 0,19 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hydrokloridia, 0,09 paino-osaa H0NBI:a, 0,103 paino-osaa DCC:a ja 0,1 tilavuusosaa N-etyylimorfoliinia mainitussa järjestyksessä. Sekoitetaan 0 °C:ssa 5 tunnin ajan ja huoneen lämpötilassa 10 tuntia. Sivutuote-virtsa-aine, joka on erottunut, suodatetaan pois ja DMF tislataan pois alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 4 tilavuusosaan 5-prosenttista etanolin vesi-liuosta yhdessä 0,2 paino-osan kanssa virtsa-ainetta, ja liuos saatetaan adsorboitumaan Amberlite XAD-2-pylväässä sekä desor-boidaan suorassa eluutiosysteemissä 5-prosenttisesta etanolin vesiliuoksesta 80-prosenttiseen etanoliin. Pääfraktio lyofiloi-daan, jolloin saadaan 0,067 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser- 23 Μβ7*
Tyr-Gly-NLe-Arg(N02)-Pro-NH-CH2CH^:a. 0,060 paino-osaa tätä tuotetta liuotetaan 4 tilavuusosaan fluorivetyä -50 °C:ssa, kun läsnä on 0,05 tilavuusosaa anisolia ja 0,02 tilavuusosaa 2-merkaptoetanolia, ja liuosta sekoitetaan 0 °C:ssa 1 tunnin ajan. Pluorivety tislataan pois alennetussa paineesa ja jäännös kuivataan ekssikkaattorissa, joka sisältää natriumhydroksidia. Jäännös liuotetaan 20 tilavuusosaan vettä ja liuos saatetaan kulkemaan Amberlite CG-400:n läpi (asetaatimuoto). Saatu neste lyo-filoidaan ja johdetaan karboksimetyyliselluloosa-pylvääseen. Se desorboidaan eluointisysteemissä, jossa on 0,005 N-ammonium-' asetaattia - 0,2 N-ammoniumasetaattia. Pääfraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,035 paino-osaa haluttua tuotetta. Tämä tuote johdetaan vielä Sephadex LH-20-pylvääseen ja desorboidaan 0,1 ^ N-etikkahapolla. Homogeeninen fraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,028 paino-osaa puhdasta H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Nle-Arg-Pro-NH-CHgCH^:a.
(«6)^p=-52,2° (c=0,5, 5-prosenttinen etikkahappo).
Aminohappoanalyysi: His 1,00(1); Arg 1,02(1); Trp 100(1);
Ser 0,91(1); Glu 1,00(1); Pro 1,05(1); Gly 0,98(1);
Tyr 1,00(1); NLe 1,02(1).
Esimerkki 6 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Pro-NH-C^CH^m valmistus a) Z-Ser-Phe-Gly-OEt:n valmistus Z-Phe-Gly-OEt:a (2,5 paino-osaa) liuotetaan metanoliin (50 tilavuusosaa) ja liuosta pelkistetään katalyyttisestä 5-pro-senttisen pälladiumhiilen avulla 4 tunnin ajan. Katalysaatori poistetaan suodattamalla ja liuotin tislataan pois. Jäännös liuotetaan dimetyyliformamidiin (20 tilavuusosaa) ja sitten lisätään Z-Ser-ODNP:a (2,6 paino-osaa), minkä jälkeen sekoitetaan 8 tunnin ajan. Liuotin tislataan pois ja jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin. Liuos pestään 5-prosenttisella natriumvety-karbonaatin vesiliuoksella, 1 N-suolahapolla ja vedellä sekä kuivataan sitten magnesiumsulfaatin yläpuolella. Liuotin tislataan pois ja kiinteä jäännös kiteytetään etyyliasetaatti-petro-bensiinistä. Saalis on 1,75 paino-osaa (74,2 %); sp. 128-129 °C; (oo)22=..26,2°, (c=0,6 , EtOH).
24
Analyysi kaavalle C24H29°7N3 666 ?6 lasketut arvot C 61,13, H 6,20, N 8,91 saatu C 60,47, H 6,00, N 8,88 b) Z-Ser-Phe-Gly-NHNH2:n valmistus Z-Ser-Phe-0Et:a (1,65 paino-osaa) liuotetaan metanoliin (20 tilavuusosaa) ja sitten lisätään hydratsiinihydraattia (0,71 tilavuusosaa). Seoksen annetaan seistä 8 tuntia ja saadut kiteet otetaan talteen ja pestään metanoli-eetterillä (1:1). Saalis on 1,6 paino-osaa (100 %); sp. 191-193 °0; (c*0^p=-23,O° (c=2, DMF).
Analyysi kaavalle C22^27^5^6 lasketut arvot C 57,76, H 5,95, N 15,31 saatu C 57,32, H 6,21, N 15,53.
g) Z-S er-Phe-Gly-Leu-Arg(NO2)-Pro-NH-CHgCH^:n valmistus Z-Ser-Phe-Gly-NHNH2:a (0,8 paino-osaa) liuotetaan DMF:een (10 tilavuusosaa) ja liuos jäähdytetään. Sitten lisätään 2 N-suolahappoa (3,5 tilavuusosaa). Sekoittaen -6 °0:ssa lisätään 2 N-natriumnitriitin vesiliuosta ja seoksen annetaan reagoida 10 minuutin ajan. Toisaalta liuotetaan saostuma lisäämällä DMP:a (10 tilavuusosaa). Reaktioseokseen lisätään kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta, minkä jälkeen uutetaan etyyliasetaatilla. Uutteeseen lisätään pesunesteet ja liuos pestään 5-prosenttisella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella sekä kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Etyyliasetaatti-kerros (80 tilavuusosaa) kuivataan natriumsulfaatin yläpuolella ja sitten liuokseen lisätään liuos (20 tilavuusosaa), jossa on H-Leu-Arg(N02)-Pro-NH-CH2CH^:a (1,04 paino-osaa) DMP:ssa. Etyyliasetaatti tislataan pois jäähauleella ja saatua homogeenista liuosta sekoitetaan 3 °C:ssa 2 päivänä ajan. Liuotin tislataan pois ja jäännös puhdistetaan kromatograafisesti pii-geelillä. Kromatogrammi kehitetään liuotinsysteemillä, joka käsittää etyyliasetaatin-pyridiinin-etikkahapon-veden (60:20:6:10) ja aktiivinen fraktio erotetaan ja tislataan liuottimien poistamiseksi. Jäännökseen lisätään vettä ja saatu 25 see?· kiinteä aine otetaan talteen suodattamalla. Saalis on 0,87 paino-osaa (61 >2 %); sp. 108 °C; (pc)^=-59° (c=P,7, EtOH).
Analyysi kaavalle C^-jH^gO^N^ .HgO
lasketut arvot C 54,72, H 6,83, N 17,12 saatu C 54,95, H 6,84, N 16,74 d) Z-Ser-Phe-Gly-Leu-ArgCiTC^-Pro-NH-C^CH^ja (0,836 paino-osaa) liuotetaan metanoliin ja sitten lisätään 1 N-suolahappoa (1 tilavuusosa). Liuosta pelkistetään katalyyttisesti palladium-^ hiilellä. Katalysaattori poistetaan suodattamalla ja liuotin tislataan pois. Jäännös liuotetaan DMF:een (10 tilavuusosaa) ja sitten liuotetaan H-(Pyr)Glu-His-Trp-OH:a (0,83 paino-osaa) ^ ja H0NBI:a (0,36 paino-osaa). Seos jäähdytetään -5 °C:een ja sitten lisätään DOC:a (0,412 paino-osaa). Seoksen annetaan reagoida 2 päivän ajan, minkä jälkeen saostuma suodatetaan pois ja DI®1 tislataan pois. Jäännös puhdistetaan kromatograafisesti käyttäen Amberlite XAD-2-pylvästä suoraviivaisessa eluointisys-teemissä, missä liuotin on 5-prosenttisesta etanolin vesiliuoksesta 80-prosenttiseen etanoliin. Aktiiviset fraktiot erotetaan ja tislataan etanolin poistamiseksi, ja jäljelle jäävä vesiliuos lyofiloidaan. Saatu jauhe puhdistetaan edelleen ioninvaihto-kromatograafisesti karboksimetyyliselluloosalla suoraviivaisella eluointisysteemillä, jossa käytetään 0,005 N-0,1 N-ammonium-asetaatin vesiliuosta. Aktiivinen fraktio lyofiloidaan, jolloin saadaan puhdasta valkeaa jauhetta. Saalis on 0,424 paino-osaa; (ca^)^ =-55 (c=0,5, 5-prosenttinen etikkahappo): Aminohappoana- lyysi: His 1,02(1); Arg 1,01(1); Trp 0,91(1); Ser 0,90(1);
Glu 1,00(1); Pro 1,00(1); Gly 0,98(1); Leu 1,00(1); etyyli-amiini 1,06(1). Trp:n talteenottosaaliin määrittämiseksi koko aminohappoanalyysi suoritetaan happohydrolyysillä 5,7 N-HCl:lla tioglykolihapon läsnäollessa
Esimerkki 7 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Gly-ILe-Arg-Pro-NHC^^jn valmistus a) H-(pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Gly-OtBu:n valmistus 1,57 paino-osaa H-Gly-OtBu:a ja 4,0 paino-osaa Z-Phe,03U:a liuotetaan 20 tilavuusosaan etyyliasetaattia, ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yöm yli. Heaktioseos pestään 5-prosent- 26 U676 tisella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, N-suolahapolla ja vedellä, kuivataan magnesiumsulfaatin yläpuolella ja väkevöidään alennetussa paineessa. Jäännökseen lisätään petrolieetteriä ja saostuma kerätään suodattamalla, jolloin saadaan 3,5 paino-osaa (85 %) Z-Phe-Gly=OtBu:a, joka sulaa lämpötilassa 78-79 °C.
(βς)6,7° (c=1,0, EtOH).
Analyysi kaavalle ^23^28^½ lasketut arvot C 66,97, H 6,87, N 6,79 saatu C 67,14, H 6,64, N 6,88 7,0 paino-osaa Z-Phe-Gly-OtBu:a liuotetaan 50 tilavuusosaan meta-nolia. liuosta pelkistetään katalyyttisesti käyttäen katalysaattorina palladiumhiiltä, ja pelkistys kestää 5 tuntia. Heaktio-seos suodatetaan ja suodos väkevöidään haihduttamalla liuotin. Jäännös liuotetaan 10 tilavuusosaan asetonitriiliä, minkä jälkeen lisätään 1,62 paino-osaa Z-SerODNP:a. Saatua seosta sekoitetaan huoneen lämmössä 1 päivän ajan ja asetonitriili haihdutetaan pois. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin. Liuos pestään 10-prosentti-sella ammoniakkiveaellä, N-suolahapolla ja vedellä, kuivataan vedettömän magnesiumkloridin yläpuolella ja väkevöidään haihduttamalla liuotin. Jäännös kootaan käyttäen petrolieetteriä ja kiteytetään etyyliasetaatti-petrolieetteristä, jolloin saadaan 1,41 paino-osaa (70 %) Z-Ser-Phe-Gly-OtBu:a, joka sulaa lämpötilassa 105-106 °C. (cv)2jy=-26,6° (c=0,74, EtOH).
Analyysi kaavalle ^26Η33°7Ν3 lasketut arvot C 62,50, H 6,66, N 8,41 saatu C 62,91, H 6,38, N 8,12 1,34 paino-osaa Z-Ser-Phe-Gly-0tBu:a liuotetaan 50 tilavuusosaan metanolia. Liuosta pelkistetään katalyyttisesti käyttäen palladium-hiiltä katalysaattorina, ja suodos väkevöidään, jolloin saadaan jäännös. Tämä jäännös ja 1,27 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-OH:a ja 0,83 paino-osaa HONBIia liuotetaan 20 tilavuusosaan DMF:a, minkä jälkeen jäähdytetään jäillä. Seokseen lisätään 0,95 paino-osaa DCC:a, ja saadun seoksen annetaan reagoida yli yön. Saostuma poistetaan suodattamalla ja suodos väkevöidään. Jäännökseen «»6676 27 lisätään asetönitriiliä, minkä jälkeen kuumennetaan. Seoksen jauheet kerätään suodattamalla ja seostetaan uudelleen 50-prosenttisesta etanolin vesiliuoksesta, jolloin saadaan 1,8 paino-osaa (87 %) H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Gly-Ot'Bu:a. (^)^=-20,6° (0=1,0, DMF).
Analyysi kaavalle Ο^Η^Ο^Ν^.21^0 lasketut arvot C 58,59, H 6,52, N 15,38 saatu C 59,02, H 6,62, N 15,23 b) Z-ILe-ArgiNOgJ-Pro-NHCgHtj :n valmistus 1,43 paino-osaa Z-ArgiiK^-Pro-NHCgH^:a liuotetaan 10 tila-vuusoaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa ja seoksen annetaan ^ seistä huoneen lämpötilassa 40 minuutin ajan. 80 tilavuusosaa kuivattua eetteriä lisätään ja saostuma kerätään suodattamalla sekä kuivataan, jolloin saadaan jauhetta.
Toisaalta liuotetaan 0,795 paino-osaa Z-ILe-0H:a 10 tilavuus-osaan dioksaania, minkä jälkeen jäähdytetään 0 °C:een. Liuokseen lisätään 0,59 paino-osaa HONBIsa ja 0,68 paino-osaa DCC:a ja seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan. Seos suodatetaan sakan poistamiseksi ja suodokseen lisätään edellä valmistettu jauhe. Vielä lisätään 0,84 tilavuusosaa trietyyliamiinia ja seista sekoitetaan huoneen lämpötilassa 12 tunnin ajan. Liuottimena ole\ra dioksaani poistetaan haihduttamalla. Jäännös liuotetaan 100 tilavuusosaan kloroformia. Liuos pestään 0,1 N-suolahapolla, 5-prosenttisella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja vedellä, kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella ja väkevöi-dään haihduttamalla kloroformi. Jäännös hierretään eetterillä, jolloin saadaan saostuma, joka saostetaan uudelleen etanoli-eetteristä, jolloin saadaan 1,1 paino-osaa Z-ILe-ArgCNOgJ-Pro-KHCgHjjta, joka sulaa lämpötilassa 103-105°C (hajoten).
(bc)|5=_58,1° (o=1 , MeOH)
Analyysi kaavalle C27H42®7%4H2^ lasketut arvot C 54,08, H 7,23, N 18,68 saatu C 53,80, H 7,15, N 18,84 *6676 28 c) 0,177 paino-osaa Z-ILe-ArgtNOgJ-Pro-NHC^^ja liuotetaan 3 tilavuusosaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan, minkä jälkeen lisätään 50 tilavuusosaa kuivattua eetteriä. Saostuma kerätään suodattamalla, pestään hyvin eetterillä ja kuivataan, jolloin saadaan amiiniaineosa.
Toisaalta liuotetaan 0,221 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Oly-OtE^a 5 tilavuusosaan trifluorietikkahappoa ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 4-0 minuutin ajan.
0,05 tilavuusosaa 5,7 N-suolahappoa lisätään liuokseen, minkä jälkeen vielä lisätään 50 tilavuusosaa eetteriä. Saostuma kerätään suodattamalla, kuivataan ja liuotetaan 3 tilavuusosaan DMF:a, minkä jälkeen jäähdytetään 0 °C:een. Liuokseen lisätään edellävalmistettu amiiniosa, 0,097 paino-osaa H0NBI:a, 0,111 paino-osaa DCC:a ja 0,126 tilavuusosaa trietyyliamiinia.
Saatua seosta sekoitetaan 0 °G:ssa 5 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa vielä 10 tuntia. Seos suodatetaan näin muodostuneen disykloheksyylivirtsa-aineen poistamiseksi, ja suodos väkevöidään alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 10 tilavuusosaan 10-prosenttista etanolin vesiliuosta ja liuos kaadetaan pylvääseen, joka sisältää Amberlite XAD-2:a. Desorptio suoritetaan suoraviivaisella eluutiosysteemillä 10-prosentti-sesta vesiliuoksesta 80-prosenttiseen etanoliin. Tuotteen sisältävät fraktiot kerätään, väkevöidään haihduttamalla liuottimena oleva etanoli sekä lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,085 paino-osaa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Phe-Gly-Ile-Arg(N02)-Pro-HHCgH^a.
0,07 paino-osaa tuotetta liuotetaan seokseen, joka sisältää 0,02 tilavuusosaa anisolia, 0,02 tilavuusosaa 2-merkaptoetanolia ja 4 tilavuusosaa vedetöntä fluorivetyä. Liuosta sekoitetaan 0 °C;ssa 1 tunnin ajan, minkä jälkeen fluorivety haihdutetaan pois alennetussa paineessa. Jäännös kuivataan ekssikkaattorissa, liuotetaan 50 tilavuusosaan vettä ja saatetaan kulkemaan Amberlite IRA-400:lla (asetaattimuoto) täytetyn pylvään läpi. Pylvään läpi kulkenut liuos lyofiloidaan, jolloin saadaan 0,075 paino-osaa raakatuotetta. Tuote saatetaan absorboitumaan karboksimetyyliselluloosa- 29
**67S
pylvääseen ja desorboidaan suoraviivaisella eluutiosysteemillä liuottimen ollessa 0,005 N-ammoniumasetaatti-O,2 N-ammonium-asetaatti. Halutun tuotteen sisältävät fraktiot lyofiloidaan.
Siten saatu tuote liuotetaan 0,1 N-etikkahapon vesiliuokseen ja saatetaan kulkemaan Sephadex LH-20-pylvään läpi. Pylvään läpi kulkenut liuos lyofiloidaan sitten, jolloin saadaan 0,043 paino-osaa ouhdasta tuotetta. Rf 3=0,41; ^)]) =.59 40 (c=0 5 5-prosenttinen etikkahappo). Aminohappoanalyysi: His 1,1(1),
Arg 1,1(1), Trp 0,87(1), etyyliamiini 1,0(1), Ser 0,81(1),
Glu 1,03(1), Pro 1,0(1), Gly 1,0(1), ILe 1,06(1), Phe 0,97(1), sulkeissa olevat numerot tarkoittavat teoreettisia arvoja.
Esimerkki 8 H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Mrt, Arg-Pro-NHOgH^tn valmistus a) BOC-Met-Arg-Pro-ire^H^ :n valmistus 1,91 paino-osaa Z-ArgiNOgJ-Pro-ITHC^^ta liuotetaan 10 tila-vuusosaan 25-prosenttista HBr-etikkahappoa ja liuoksen annetaan seistä 30 minuutin ajan, minkä, jälkeen lisätään kuivaa eetteriä. Saostuma kerätään talteen suodattamalla, pestään hyvin eetterillä ja kuivataan, jolloin saadaan amiiniaineosa.
Toisaalta liuotetaan 1,75 paino-osaa B0C-Met-0H-DCHA:a 100 tila-vuusosaan eetteriä, minkä jälkeen pestään kahdesti 50 tilavuus-osalla 0,2 H rikkihapon vesiliuosta ja kuivataan vedettömän natriumsulfaatin yläpuolella. Eetteri haihdutetaan pois ja jäännös liuotetaan 20 tilavuusosaan dioksaania. Liuos jäähdytetään 0 °C:een ja siihen lisätään 0,905 paino-osaa DOC:a ja 0,79 paino-osaa HOITUI:a. Sekoitetaan 2 tunnin ajan. Muodostunut disykloheksyyli ^ suodatetaan pois ja suodos väkevöidään. Jäännökseen lisätään 5 tilavuusosaa DMF:a ja koko edellä valmistettu amiiniaineosa.
Saatu liuos jäähdytetään, minkä jälkeen lisätään 1,12 tilavuus-osaa trietyyliamiinia. Sekoitetaan huoneen lämpötilassa 12 tunnin ajan ja DMF haihdutetaan pois. Jäännös liuotetaan 100 tilavuusosaan kloroformia, pestään 0,1 N-suolahapolla, 5-prosentti-sella natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja vedellä, kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin yläpuolella ja väkevöidään haihduttamalla kloroformi pois. Jäännökseen lisätään eetteriä, 30 &6t76 jolloin saadaan kiinteää ainetta. Kiinteä aine saostetaan uudelleen etyyliasetaatti-eetteristä, jolloin saadaan 1,4 paino-osaa BOC-Met-Arg-Pro-BHCjjH^ra, joka sillaa lämpötilassa 101-104 °C (hajoten). (ct)22=-64,4° (c=1,0, MeOH).
Analyysi kaavalle C23H4207N8S* 1/2H20 lasketut arvot C 47,33, H 7,42, N 19,20, S 5,49 saatu C 47,67, H 7,23, N 18,94, S 5,48 b) II-(Pyr)Glu-His-Trp—Ser-Tyr-Gly-Met-Arg-Pro-NHC^^ 0,275 paino-osaa B0C-Met-Arg(N02)-Pro-MC2H^:a liuotetaan seokseen, joka sisältää 0,1 tilavuusosaa 2-raerkaptoetanolia ja 5 tilavuusosaa trifluorietikkahappoa, ja annetaan seistä huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Seokseen lisätään 0,085 tilavuusosaa 5,7 IT-suolahappoa.
Saatu seos jäähdytetään ja siihen lisätään 50 tilavuusosaa eetteriä. Saostuma kerätään suodattamalla, pestään eetterillä, kuivataan, liuotetaan DMPieen ja jäähdytetään 0 °C:een. Liuokseen lisätään 0,318 paino-osaa N-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hydrokloridia, 0,107 paino-osaa H0NBI:a, 0,124 paino-osaa DCC:a ja 0,17 tilavuusosaa N-etyylimorfoliinia, ja saatua seosta sekoitetaan 12 tunnin ajan. Saostunut disykloheksyyli-virtsa-aine poistetaan suodattamalla ja suodos väkevöidään alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 5 tilavuusosaan 5-prosenttista etanolin vesiliuosta, kaadetaan Amberlite XAD-2-pylvääseen ja desorboidaan suoraviivaisella eluutiosysteemillä liuottimena 5-prosenttinen etanolin vesiliuos - 80-prosenttinen eatnoli. Pääfraktiot lyofiloidaan ja kuivataan, jolloin saadaan 0,135 paino-osaa H-(PyrjGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Met-ArgCNOgJ-Pro-NHCgH^sa. 0,1 paino-osaa tuotteesta liuotetaan seokseen, joka 'oältää 0,02 tilavuusosaa anisolia, 0,02 tilavuusosaa etanolia ja 0,02 tilavuusosaa 2-merkaptoetanolia sekä 6 tilavuusosaa fluorivetyä, ja sekoitetaan 0 °C:ssa 1 tunnin ajan. Pluorivety poistetaan haihduttamalla alennetussa paineessa ja jäännös kuivataan ekssikkaattorissa. Jäännös liuotetaan 20 tilavuusosaan vettä ja saatetaan kulkemaan Amberlite CG-400-(asetaattimuoto) »6676 31 pylvään läpi. Pylvään läpi kulkenut liuos lyofiloidaan. Jäännös liuotetaan 20 tilavuusosaan vettä, ja siihen lisätään 0,4 tilavuus-osaa tioglykolihappoa. Seoksen annetaan seistä 60 °C:ssa 10 tunnin ajan. Reaktioseos laimennetaan 50 tilavuusosalla vettä, adsorboidaan karboksimetyyliselluloosa-pylvääseen sekä desorboidaan suoraviivaiseen eluutiosysteemiin, jossa liuottimena on 0,005 N-ammoniumasetaatti - 0,2 N-ammoniumasetaatti. Pääfraktiot lyo-filoidaan, jolloin saadaan 0,02 paino-osaa haluttua tuotetta epäpuhtaana. Tuote saatetaan adsorboituinaan Sephadex LH-20-pylvää-seen ja eluoidaan 0,1 N-etikkahapolla. Eluoitu liuos lyofiloidaan, ^ jolloin saadaan puhdistettua tuotetta, TLG: Rf=0,31 (piigeeli); n-butanoli:etikkahappo:etyyliasetaatti:vesi= 1:1:1:1) 2° (c=0,25, 5-prosenttinen etikkahappo).
^ Aminohappoanalyysi: His 0,9(1), Arg 0,9(1), Trp 0,8(1),
Ser 0,7(1), Glu 0,9(1), Pro 1,1(1), Gly 1,0(1), Met 0,9(1),
Tyr 0,7(1), etyyliamiini 0,9(1). Sulkeissa olevat numerot tarkoittavat teoreettisia arvoja.
Tämän keksinnön mukaisa nonapeptiamidijohdannaisia annettiin diestroiduille rotille ihon alle, ja määritettiin niiden munasolun irtoamista edistävä vaikute.
Taulukko Munasolun irtoamista edistävä vaikutus diestroi-duissa rotissa A-, A2 Y ED50(ng/l00g.
_ruumiinpainoa
Tyr Leu NH-CH^ 165,o
Tyr Leu NH-CHg-OH^ 32,0
Tyr Leu NH-CH^-CHg -CH^ 56,0
Tyr Leu NH-CH2-CH2-0H 170,0
Tyr Leu HH-CH(CH5)2 76,0
Tyr Hie NH-CH2-CH3 53,6
Tyr Met NH-CHg-CH^ 35,0
Ph e Leu NH-CHgCH-^ 84,0
Phe ILe NH-CH2-0H3 115,0
Tyr Leu Gly-NH2 215 ± 12 ng.
luonnon dekapeptidi
Claims (1)
- 32 S6676 Patenttivaatimus Menetelmä munasolun irtoamista edistävien nonapeptidiamidijohdannaisten, joilla on yleiskaava: L-pyroglutamyyli-L-histidyyli-L-tryptofyyli-L-seryyli-A^-glysyyli-A2" L-arginyyli-L-prolyyli-Y (jossa kaavassa A^ on L-tyrosyyli tai L-fenyylialanyyli, A2 on L-leusyy-li, L-isoleusyyli, L-norleusyyli, L-valyyli, L-norvalyyli, L-metionyyli tai L-fenyylialanyyli, Y tarkoittaa ryhmää NHR, jossa R on suora- tai haaraketjuinen 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu hydroksilla, tai vaihtoehtoisesti Y tarkoittaa pyrrolidi-noa) tai niiden farmaseuttisesti kelpaavien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että reagenssi (A) --- L-pyroglutamiinihappo tai peptidi, jonka N-päätteessä on L-pyroglutamiinihappo-osa, sekä joka siitä lähtien käsittää mainitun aminohapposarjän --- kondensoidaan reagenssin (B) kanssa --- amiinikomponentin, joka vastaa edellämainitun tuotteen, nonapeptidiamidijohdannaisen, loppuosaa ---, jolloin sanotut reagenssit (A) ja (B) ovat valinnaisesti suojaryhmän tai -ryhmien suojaamia, sekä suojaryhmä tai -ryhmät, milloin näitä on, poistetaan ja saatu tuote muutetaan haluttaessa farmaseuttisesti kelpaavaksi suo-lakseen. Förfarande för framställning av ett nonapeptidamidderivat som befrämjar lösgörandet av äggceller, vilka derivat har den allmänna formeln: L-pyroglutamyl-L-histidyl-L-tryptofyl-L-seryl-A1-glycyl-A2-L-arginyl-L-prolyl-Y (i vilken formel A^ är L-tyrosyl eller L-fenylalanyl; A2 är L-leucyl, L-isoleucyl, L-norleucyl, L-valyl, L-norvalyl, L-metionyl eller L-fenylalanyl; Y betecknar NHR, där R är en alkylgrupp med 1-3 kolatomer med rak eller grenad kedja, vilken grupp kan vara substituerad med hydroxi eller alternativt Y betecknar pyrrolidino) eller dessas farmaceutiskt användbart sait, kännetecknat därav, att reagenset (A) --- L-pyroglutaminsyra eller en peptid som har i s in N-ände en L-pyro- glutaminsyradel och därvid omfattar ovan nämnda aminosyraserie --- kondenseras med reagenset (B) ---- en aminkomponent motsvarande slutdelen
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4268672 | 1972-04-29 | ||
| JP4268672A JPS5324423B2 (fi) | 1972-04-29 | 1972-04-29 | |
| JP11845272 | 1972-11-24 | ||
| JP11845272A JPS5324424B2 (fi) | 1972-11-24 | 1972-11-24 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI56676B FI56676B (fi) | 1979-11-30 |
| FI56676C true FI56676C (fi) | 1980-03-10 |
Family
ID=26382407
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI1375/73A FI56676C (fi) | 1972-04-29 | 1973-04-27 | Foerfarande foer framstaellning av nya amidderivat av nonapeptid som befraemjar loesgoerandet av aeggceller |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3853837A (fi) |
| AT (1) | AT333988B (fi) |
| AU (1) | AU453931B2 (fi) |
| CA (1) | CA1005815A (fi) |
| CH (1) | CH580065A5 (fi) |
| CS (1) | CS188162B2 (fi) |
| DE (2) | DE2321174C2 (fi) |
| DK (1) | DK147851C (fi) |
| ES (1) | ES414197A1 (fi) |
| FI (1) | FI56676C (fi) |
| FR (1) | FR2183021B1 (fi) |
| GB (1) | GB1403642A (fi) |
| HU (1) | HU168696B (fi) |
| NL (2) | NL176856C (fi) |
| NO (1) | NO139560C (fi) |
| PL (1) | PL95790B1 (fi) |
| SE (1) | SE397520B (fi) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3931138A (en) * | 1973-03-13 | 1976-01-06 | Abbott Laboratories | N-carbobenzoxy-pyroglutamyl-histidine |
| CS180644B2 (en) * | 1973-09-29 | 1978-01-31 | Takeda Chemical Industries Ltd | Process for preparing nonapeptides |
| GB1532211A (en) * | 1974-10-25 | 1978-11-15 | Wellcome Found | Lh-rh peptide analogues |
| US4338305A (en) * | 1975-03-24 | 1982-07-06 | American Home Products Corporation | Use of LRH and LRH agonists |
| AU497512B2 (en) * | 1975-04-15 | 1978-12-14 | Ici Australia Limited | Nona and deca-peptides |
| US4034082A (en) * | 1976-03-01 | 1977-07-05 | Abbott Laboratories | Method to prevent reproduction in warm-blooded female animals with nonapeptides |
| DE2905502C2 (de) * | 1979-02-14 | 1982-07-15 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung von LH-RH bzw. LH-RH-Analoga und Pyroglutamyl-N↑i↑m↑-dinitrophenyl-histidin |
| DE3020941A1 (de) * | 1980-06-03 | 1981-12-17 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Nonapeptid, verfahren zu seiner herstellung, dieses enthaltendes mittel und seine verwendung |
| US4675189A (en) * | 1980-11-18 | 1987-06-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Microencapsulation of water soluble active polypeptides |
| US4659696A (en) * | 1982-04-30 | 1987-04-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use |
| HU193607B (en) * | 1985-07-18 | 1987-11-30 | Innofinance Altalanos Innovaci | Process for production of sexual products applyable for natural or artificial insemination for mammates |
| US4897268A (en) * | 1987-08-03 | 1990-01-30 | Southern Research Institute | Drug delivery system and method of making the same |
| US5068221A (en) * | 1989-05-09 | 1991-11-26 | Mathias John R | Treatment of motility disorders with a gnrh analog |
| JP2653255B2 (ja) | 1990-02-13 | 1997-09-17 | 武田薬品工業株式会社 | 長期徐放型マイクロカプセル |
| CA2050425A1 (en) | 1990-09-03 | 1992-03-04 | Yoshiaki Uda | Pharmaceutical composition and its mucous use |
| ZA918168B (en) | 1990-10-16 | 1993-04-14 | Takeda Chemical Industries Ltd | Prolonged release preparation and polymers thereof. |
| US5434136A (en) * | 1990-12-14 | 1995-07-18 | Mathias; John R. | Treatment of motility disorders with a GNRH analog |
| US5518730A (en) * | 1992-06-03 | 1996-05-21 | Fuisz Technologies Ltd. | Biodegradable controlled release flash flow melt-spun delivery system |
| DK0582459T3 (da) | 1992-08-07 | 1998-04-27 | Takeda Chemical Industries Ltd | Fremstilling af mikrokapsler af vandopløselige lægemidler |
| EP0668073B1 (en) * | 1994-02-21 | 1999-04-14 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Polyester matrix for a pharmaceutical sustained-release preparation |
| US6117455A (en) * | 1994-09-30 | 2000-09-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Sustained-release microcapsule of amorphous water-soluble pharmaceutical active agent |
| US5837281A (en) | 1995-03-17 | 1998-11-17 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Stabilized interface for iontophoresis |
| US7833543B2 (en) * | 1995-06-07 | 2010-11-16 | Durect Corporation | High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device |
| US6413536B1 (en) | 1995-06-07 | 2002-07-02 | Southern Biosystems, Inc. | High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device |
| CA2192782C (en) | 1995-12-15 | 2008-10-14 | Nobuyuki Takechi | Production of microspheres |
| CA2192773C (en) | 1995-12-15 | 2008-09-23 | Hiroaki Okada | Production of sustained-release preparation for injection |
| US5908400A (en) * | 1996-06-20 | 1999-06-01 | Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. | Device structure for iontophoresis |
| US20060025328A1 (en) * | 1997-05-28 | 2006-02-02 | Burns Patrick J | Compositions suitable for controlled release of the hormone GnRH and its analogs |
| US6051558A (en) * | 1997-05-28 | 2000-04-18 | Southern Biosystems, Inc. | Compositions suitable for controlled release of the hormone GnRH and its analogs |
| EP0882736A1 (en) * | 1997-06-02 | 1998-12-09 | Laboratoire Theramex S.A. | LH-RH peptide analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them |
| JP4414517B2 (ja) | 1999-09-01 | 2010-02-10 | 久光製薬株式会社 | イオントフォレーシス用デバイス構造体 |
| US20040001889A1 (en) | 2002-06-25 | 2004-01-01 | Guohua Chen | Short duration depot formulations |
| US8133507B2 (en) | 2002-12-13 | 2012-03-13 | Durect Corporation | Oral drug delivery system |
| GEP20094831B (en) | 2004-09-17 | 2009-11-25 | Durect Corp | Control release system |
| US20070027105A1 (en) | 2005-07-26 | 2007-02-01 | Alza Corporation | Peroxide removal from drug delivery vehicle |
| PL2117521T3 (pl) | 2006-11-03 | 2012-11-30 | Durect Corp | Transdermalne systemy dostarczania zawierające bupiwakainę |
| WO2009075782A1 (en) | 2007-12-06 | 2009-06-18 | Durect Corporation | Methods useful for the treatment of pain, arthritic conditions, or inflammation associated with a chronic condition |
| US20100260844A1 (en) | 2008-11-03 | 2010-10-14 | Scicinski Jan J | Oral pharmaceutical dosage forms |
| TW201521769A (zh) | 2013-03-15 | 2015-06-16 | Durect Corp | 具有流變改質劑以減少溶解變異性之組成物 |
| CN115666621A (zh) | 2020-01-13 | 2023-01-31 | 度勒科特公司 | 具有减少的杂质的持续释放药物递送系统及相关方法 |
-
1973
- 1973-04-10 NO NO1481/73A patent/NO139560C/no unknown
- 1973-04-18 AU AU54676/73A patent/AU453931B2/en not_active Expired
- 1973-04-25 FR FR7315044A patent/FR2183021B1/fr not_active Expired
- 1973-04-25 DK DK225073A patent/DK147851C/da not_active IP Right Cessation
- 1973-04-25 US US00354381A patent/US3853837A/en not_active Expired - Lifetime
- 1973-04-26 DE DE2321174A patent/DE2321174C2/de not_active Expired
- 1973-04-26 SE SE7305905A patent/SE397520B/xx unknown
- 1973-04-26 DE DE2366379A patent/DE2366379C2/de not_active Expired
- 1973-04-27 CA CA169,683A patent/CA1005815A/en not_active Expired
- 1973-04-27 CH CH606673A patent/CH580065A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-04-27 CS CS733045A patent/CS188162B2/cs unknown
- 1973-04-27 NL NLAANVRAGE7305995,A patent/NL176856C/xx active Protection Beyond IP Right Term
- 1973-04-27 FI FI1375/73A patent/FI56676C/fi active
- 1973-04-27 AT AT377173A patent/AT333988B/de not_active IP Right Cessation
- 1973-04-28 HU HUTA1249A patent/HU168696B/hu unknown
- 1973-04-28 PL PL1973162210A patent/PL95790B1/pl unknown
- 1973-04-28 ES ES414197A patent/ES414197A1/es not_active Expired
- 1973-04-30 GB GB2042773A patent/GB1403642A/en not_active Expired
-
1993
- 1993-02-04 NL NL930004C patent/NL930004I1/nl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO139560B (no) | 1978-12-27 |
| NL176856C (nl) | 1985-06-17 |
| DE2321174A1 (de) | 1973-11-08 |
| AU5467673A (en) | 1974-10-17 |
| HU168696B (fi) | 1976-06-28 |
| GB1403642A (en) | 1975-08-28 |
| SE397520B (sv) | 1977-11-07 |
| ES414197A1 (es) | 1976-05-01 |
| AT333988B (de) | 1976-12-27 |
| DK147851B (da) | 1984-12-24 |
| DK147851C (da) | 1986-03-10 |
| ATA377173A (de) | 1976-04-15 |
| CH580065A5 (fi) | 1976-09-30 |
| NL930004I1 (nl) | 1993-04-01 |
| FR2183021A1 (fi) | 1973-12-14 |
| NO139560C (no) | 1979-04-04 |
| DE2366379C2 (de) | 1985-01-17 |
| CA1005815A (en) | 1977-02-22 |
| US3853837A (en) | 1974-12-10 |
| AU453931B2 (en) | 1974-10-17 |
| PL95790B1 (pl) | 1977-11-30 |
| CS188162B2 (en) | 1979-02-28 |
| NL7305995A (fi) | 1973-10-31 |
| FI56676B (fi) | 1979-11-30 |
| DE2321174C2 (de) | 1982-04-15 |
| FR2183021B1 (fi) | 1976-04-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI56676C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya amidderivat av nonapeptid som befraemjar loesgoerandet av aeggceller | |
| FI60553B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ovulationsframkallande nonapeptidamidderivat | |
| US4008209A (en) | Nonapeptide amide analogs of luteinizing releasing hormone | |
| FI71567C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av gonadoliberinderivat. | |
| JPH0314599A (ja) | ペプチド誘導体類 | |
| CS199673B2 (en) | Method of producing polypeptides | |
| HU185920B (en) | Process for producing new polypeptides | |
| DK149862B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af lh-rh-analoge dekapeptidamider eller et salt eller et metalkompleks deraf | |
| DK148905B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af lh-rh-analoge nonapeptidderivater | |
| US4003884A (en) | Peptides having LH-RH/FSH-RH activity | |
| US6235876B1 (en) | Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides | |
| US4490364A (en) | CCK Agonists II | |
| EP0082568B1 (en) | Retro-inverso analogues of c-terminal penta and hexapeptides of substance p. | |
| JPS6340199B2 (fi) | ||
| US4638046A (en) | Retro-inverso C-terminal hexapeptide analogues of substance P | |
| Izeboud et al. | Synthesis of substance P via its sulfoxide by the repetitive excess mixed anhydride (REMA) method | |
| US3862927A (en) | Process for preparation of vasoactive intestinal peptide | |
| FI85866B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya gonadoliberinderivat vilka foermaor frigoera luteniserande eller follikelstimulerande hormon. | |
| Van Nispen et al. | INVESTIGATION OF THE ROLE OF TRYPTOPHAN IN α‐MSH*: Replacement by L‐Pentamethylphenylalanine and L‐Phenylalanine | |
| Thierry et al. | Synthesis and activity of NAcSerAspLysPro analogs on cellular interactions between T-cell and erythrocytes in rosette formation | |
| US4001199A (en) | Novel polypeptides useful for treating diabetes and hypercholesteremia | |
| US3801561A (en) | Derivatives of salmon thyrocalcitonin | |
| EP0227410A2 (en) | Peptide derivatives, their production and use | |
| US4018754A (en) | Novel polypeptides having ACTH-like action | |
| US4018753A (en) | Polypeptides with ACTH-like activities |