[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

ES2942443T3 - Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares - Google Patents

Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares Download PDF

Info

Publication number
ES2942443T3
ES2942443T3 ES19728965T ES19728965T ES2942443T3 ES 2942443 T3 ES2942443 T3 ES 2942443T3 ES 19728965 T ES19728965 T ES 19728965T ES 19728965 T ES19728965 T ES 19728965T ES 2942443 T3 ES2942443 T3 ES 2942443T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
acid
tetrahydro
feml
azep
benzot
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES19728965T
Other languages
English (en)
Inventor
Per-Göran Gillberg
Jan Mattsson
Ingemar Starke
Santosh S Kulkarni
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Albireo AB
Original Assignee
Albireo AB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Albireo AB filed Critical Albireo AB
Application granted granted Critical
Publication of ES2942443T3 publication Critical patent/ES2942443T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D281/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D281/02—Seven-membered rings
    • C07D281/04—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4
    • C07D281/08—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D281/10—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/36—Seven-membered rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

La invención se refiere a derivados de 1,5-benzotiazepina y 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I). Estos compuestos son moduladores de ácidos biliares que tienen actividad inhibidora del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT) y/o del transporte hepático de ácidos biliares (LBAT). La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y al uso de estos compuestos en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de ácidos grasos y utilización de glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares
Campo técnico
La invención se refiere a derivados de 1,5-benzotiazepina y 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I). Estos compuestos son moduladores de ácidos biliares que tienen actividad inhibidora del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT) y/o del transporte hepático de ácidos biliares (LBAT). La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y al uso de estos compuestos en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de ácidos grasos y utilización de glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas.
Antecedentes
Los ácidos biliares son detergentes fisiológicos que juegan un papel importante en la absorción y transporte intestinal de lípidos, nutrientes y vitaminas. También son moléculas de señalización que activan los receptores nucleares y las vías de señalización celular que regulan el metabolismo de los lípidos, la glucosa y la energía. Los ácidos biliares son ácidos esteroideos que se sintetizan a partir del colesterol en el hígado y se almacenan en la vesícula biliar como micelas mixtas. Durante la digestión, el duodeno desencadena la liberación de hormonas que hacen que la vesícula biliar se contraiga, liberando así ácidos biliares en el intestino delgado, donde permiten la absorción de vitaminas liposolubles y colesterol. Cuando llegan al íleon, los ácidos biliares se reabsorben en el intestino y se secretan en la sangre portal para regresar al hígado a través de la circulación venosa portal. Más del 90 % de los ácidos biliares se reciclan y regresan al hígado. Estos ácidos biliares luego se transportan a través de la membrana sinusoidal de los hepatocitos y se vuelven a secretar a través de la membrana canalicular hacia la bilis. En este primer paso, el 75-90 % de los ácidos biliares son captados por los hepatocitos, completando una ronda de circulación enterohepática. La fracción de ácidos biliares que escapa a ser depurada en el hígado ingresa a la circulación sistémica donde los ácidos biliares libres son filtrados por el glomérulo renal, recuperados eficientemente en los túbulos proximales y exportados nuevamente a la circulación sistémica. Curiosamente, la mayoría de los ácidos biliares secretados a través de la membrana canalicular hacia la bilis se derivan del reservorio de recirculación y menos del 10 % proviene de nueva síntesis hepática de novo. La pequeña fracción de ácidos biliares que no se reabsorbe en el íleon llega al colon. Dentro del lumen intestinal, los ácidos biliares primarios se transforman en ácidos biliares secundarios bajo la acción de las bacterias intestinales, principalmente por reacciones de deshidroxilación simple o doble del núcleo esteroideo. Los ácidos biliares que escapan a la absorción intestinal se excretan posteriormente en las heces. En general, el sistema de transporte eficiente ayuda a mantener una reserva constante de ácidos biliares, asegurando niveles lo suficientemente altos de ácidos biliares conjugados en el intestino para promover la absorción de lípidos y reducir la carga bacteriana en el intestino delgado. El sistema también minimiza la pérdida de ácidos biliares en las heces y la orina y protege los compartimentos intestinal y hepatobiliar al eliminar los detergentes potencialmente citotóxicos (según lo revisado por Kosters y Karpen (Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071); by Chiang (J. Lipid Res. 2009, vol.
50, p. 1955-1966); y por Dawson (Handb. Exp. Pharmacol. 2011, vol. 201, p. 169-203)).
Se ha descubierto que la regulación del tamaño de la reserva de ácidos biliares desempeña un papel clave en la homeostasis del colesterol mediante la conversión hepática del colesterol en ácidos biliares, lo que representa una ruta principal para la eliminación del colesterol del cuerpo. El hígado juega un papel esencial en la eliminación de compuestos endógenos y xenobióticos del cuerpo. La secreción hepatobiliar normal y la circulación enterohepática son necesarias para la eliminación de compuestos endógenos como el colesterol y la bilirrubina y sus metabolitos del cuerpo, manteniendo así la homeostasis de lípidos y ácidos biliares (Kosters and Karpen, Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071).
La reabsorción de ácidos biliares en el íleon puede ser inhibida por compuestos inhibidores del transportador apical de ácidos biliares dependientes de sodio (ASBT). Se ha informado que la inhibición de la reabsorción de ácidos biliares es útil en el tratamiento de varias enfermedades, que incluyen dislipidemia, diabetes, obesidad, estreñimiento, enfermedades hepáticas colestásicas, esteatohepatitis no alcohólica y otras enfermedades hepáticas. En las últimas décadas se han divulgado varios compuestos inhibidores de ASBT, véase, por ejemplo, WO 93/16055, WO 94/18183, WO 94/18184, WO 96/05188, WO 96/08484, WO 96/16051, WO 97/33882, WO 98/03818, WO 98/07449, WO 98/40375, WO 99/35135, WO 99/64409, WO 99/64410, WO 00/47568, WO 00/61568, WO 00/38725, WO 00/38726, WO 00/38727, WO 00/38728, WO 00/38729, WO 01/66533, WO 01/68096, WO 02/32428, WO 02/50051, WO 03/020710, WO 03/022286, WO 03/022825, WO 03/022830, WO 03/061663, WO 03/091232, WO 03/106482, WO 2004/006899, WO 2004/076430, WO 2007/009655, WO 2007/009656, WO 2011/137135, DE 19825804, EP 864582, EP 489423, EP 549967, EP 573848, EP 624593, EP 624594, EP 624595, EP 624596, EP 0864582, EP 1173205 y EP 1535913.
A pesar de la cantidad de compuestos inhibidores de ASBT que se han informado previamente, existe la necesidad de compuestos moduladores de ácidos biliares adicionales que tengan un perfil optimizado con respecto a la potencia, selectividad y biodisponibilidad.
Descripción detallada de la invención
Se ha descubierto que ciertos derivados de 1,5-benzotiazepina y 1,2,5-benzotiadiazepina son potentes inhibidores del transportador apical de ácidos biliares dependientes de sodio (ASBT) y/o del transportador de ácidos biliares hepáticos (LBAT), y pueden ser útiles para tratar enfermedades en las que es deseable la inhibición de la circulación de ácidos biliares.
En un primer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)
Figure imgf000003_0001
en la que
M se selecciona de -CH2- y -NR7-;
R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C1-4;
R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-4, haloalquilo C1-4, alcoxi C1-4, ciano, nitro, amino, ^-(alquilo C1-4)amino, N,N-di(alquilo C1-4)amino, N-(aril-alquilo C1-4)amino, alquilcarbonilamino C1-6, cicloalquilcarbonilamino C3-6, ^-(alquilo C1-4)aminocarbonilo, N,N-di(alquilo C1-4)aminocarbonilo, alquiloxicarbonilamino C1-4, cicloalquiloxicarbonilamino C3-6, alquilsulfonamido C1-4 y cicloalquilsulfonamido C3-6; n es un número entero 1,2 o 3;
R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, ciano, alquilo C1-4, cicloalquilo C3-6, alcoxi C1-4, cicloalquiloxi C3-6, alquiltio C1-4, cicloalquiltio C3-6, amino, ^-(alquilo C1-4)amino y N,N-di(alquilo C1-4)amino;
uno de R5 y R6 es carboxi, y el otro de R5 y R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, fluoro, alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4;
R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-4; y
R8 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-4;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C2-4. En otras realizaciones, R1 es n-butilo y R2 es alquilo C2-4. En una realización preferida, tanto R1 y R2 son n-butilo. En otra realización preferida, R1 es n-butilo y R2 es etilo. En otra realización preferida, tanto R1 y R2 son etilo.
En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, bromo, hidroxi, metoxi, amino, tert-butoxicarbonilamino, metilsulfonamido y ciclopropilsulfonamido. En una realización preferida, n es 1, es decir, el anillo de fenilo está sustituido con un solo sustituyente R3. En otra realización preferida, R3 está en la posición para.
En algunas realizaciones, R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, bromo, etilo, ciclopropilo, metoxi, metiltio y dimetilamino.
En algunas realizaciones, R5 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y flúor.
En algunas realizaciones, R6 es carboxi.
En algunas realizaciones, R7 es hidrógeno o metilo.
En algunas realizaciones, R8 es hidrógeno.
En una realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-a):
Figure imgf000004_0001
en la que
R1 y R2 son cada uno independientemente etilo o n-butilo;
R4 es fluoro, cloro, bromo, metiltio o etiltio; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-b):
Figure imgf000004_0002
en la que
R1 y R2 son cada uno independientemente etilo o n-butilo;
R4 es cloro o metiltio; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-c):
Figure imgf000004_0003
en la que
R4 es cloro o metiltio; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-d):
Figure imgf000004_0004
en la que
R4 es cloro, metiltio, etiltio o dimetilamino; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-d) en la que R4 es cloro o metiltio;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-e):
Figure imgf000005_0001
en la que
R4 es cloro o metiltio; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-f):
Figure imgf000005_0002
en la que
R1 y R2 son cada uno independientemente etilo o n-butilo;
R4 es cloro o metiltio; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-g):
Figure imgf000005_0003
en la que
R1 y R2 son cada uno independientemente etilo o n-butilo;
R4 es cloro o metiltio; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-h):
Figure imgf000006_0001
en la que
R1 es n-butilo;
R2 es etilo o n-butilo;
R3 se selecciona del grupo que consiste em ^-(alquilo C1-4)amino, N,N-di(alquilo C1-4)amino, N-(aril-alquilo C1-4)amino, alquilcarbonilamino C1-6, alquiloxicarbonilamino C1-4, alquilsulfonamido C1-4y cicloalquilsulfonamido C3-6;
R4 es halógeno o alquiltio C1-4; y
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-i):
Figure imgf000006_0002
en la que
M es CH2 o NH;
R1 es n-butilo;
R2 es etilo o n-butilo;
R5 es hidrógeno o flúor;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular, el compuesto de fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en:
ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido f£J-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido f£J-3-((5-(4-((íerí-butoxicarbonil)amino)fenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido f£J-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (R)-('EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (S)-f£J-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido f£J-3-((3,3-dibutil-7-ciclopropil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido f£J-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopropanosulfonam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(met¡lsulfonam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-metox¡-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-metox¡-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((5-(4-bromofeml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(£)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-metox¡feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((5-(4-(bendlam¡no)feml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('£)-3-((7-bromo-5-(4-((tert-butox¡carboml)am¡no)feml)-3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-((metox¡carboml)am¡no)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(d¡met¡lam¡no)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((5-(4-((tert-butox¡carboml)am¡no)feml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do^ Zj-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (£)-3-((5-(4-((butox¡carboml)am¡no)feml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(3,3-d¡met¡lbutanam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-¡sobut¡ram¡dofen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-(tr¡fluoromet¡l)feml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-¡sobut¡ram¡dofeml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopentanocarboxam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ácido ^Zj-3-((3,3-dibutil-5-(4-(cidopropanocarboxamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido ('£)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(c¡dopentanocarboxam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrahidrobenzol-,5-tiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (E)-3-((3-butil-5-(4-(ddopentanocarboxamido)feml)-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (E)-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (E)-3-((3,3-dibutil-5-(4-butiramidofeml)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do Z)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (R)-Z)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-Z)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do ^Zj-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do ^Zj-3-((3,3-dibutil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ác¡do ^Zj-3-((3-butil-7-doro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (R)-Z)-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (S)-Z)-3-((3-butil-7-doro-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (E)-3-((3-butil-7-doro-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (R)-('E^3-((3-butil-7-doro-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do (S)-(E)-3-((3-butil-7-doro-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do Z)-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do Z)-3-((3,3-dibutil-7-doro-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (E)-3-((3,3-dietil-7-iodo-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (E)-3-((7-bromo-3,3-dietiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do ^Zj-3-((7-bromo-3,3-dietil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (S)-Z)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-¡odo-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-Z)-3-((3-butil-3-etil-7-iodo-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do ^Zj-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do (S)-^Zj-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do (R)-^Zj-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ác¡do (£)-3-((3-but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)feml)-3-et¡M-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ^Zj-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do (R)-^Zj-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-Z)-3-((7-bromo-3-butil-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetral^idro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ác¡do ^Zj-3-((5-(4-(bencilamino)fenil)-3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacríl¡co;
ácido (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ácido (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(¡soprop¡lcarbamo¡l)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-prop¡onam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do ('£)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-met¡lacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((7-bromo-3,3-d¡but¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-c¡ano-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)but-2-eno¡co; ác¡do (Z)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-^Zj-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (R)-^Zj-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡M-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (S)-(£)-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (R)-(E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡M-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡drol,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡M-(met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((5-(4-bromofeml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ácido (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-1-(d¡met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico;
ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(d¡met¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(3,4-d¡fluorofen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; y
ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo.
Como se usa en el presente documento, el térm¡no "halo" se ref¡ere a flúor, cloro, bromo y yodo.
Como se usa en el presente documento, el térm¡no "alqu¡lo Ci-a" se ref¡ere a un grupo alqu¡lo l¡neal o ram¡f¡cado que t¡ene de 1 a 6 átomos de carbono, y el térm¡no "alqu¡lo C1-4" se ref¡ere a un grupo alqu¡lo l¡neal o ram¡f¡cado que t¡ene de 1 a 4 átomos de carbono. Ejemplos de alqu¡lo C1-4 ¡ncluyen met¡lo, et¡lo, n-prop¡lo, ¡soprop¡lo, n-but¡lo, ¡sobut¡lo, secbut¡lo y tert-but¡lo.
Como se usa en el presente documento, el térm¡no "haloalqu¡lo C1.4" se ref¡ere a un grupo alqu¡lo C1.4 l¡neal o ram¡f¡cado, tal como se def¡ne en el presente documento, en el que uno o más átomos de h¡drógeno han s¡do reemplazados por halógeno. Ejemplos de haloalqu¡lo C1-4 ¡ncluyen cloromet¡lo, fluoroet¡lo y tr¡fluoromet¡lo.
Como se usa en este documento, los térm¡nos "alcox¡ C1-4" y "alqu¡lt¡o C1.4" se ref¡ere a un grupo alqu¡lo C1-4 l¡neal o ram¡f¡cado un¡do al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno o azufre, respectivamente.
Como se usa en el presente documento, el térm¡no "c¡cloalqu¡lo C3-a" se ref¡ere a un an¡llo de h¡drocarburo saturado monocícl¡co que t¡ene de 3 a 6 átomos de carbono. Ejemplos de c¡cloalqu¡lo C3-a ¡ncluyen c¡cloprop¡lo, c¡clobut¡lo, c¡clopent¡lo y c¡clohex¡lo.
El térm¡no "ar¡lo" ¡nd¡ca un an¡llo monocícl¡co aromát¡co compuesto por 6 átomos de carbono o un s¡stema de an¡llo b¡cícl¡co aromát¡co compuesto por 10 átomos de carbono. Ejemplos de ar¡lo ¡ncluyen fen¡lo, naft¡lo y azulen¡lo.
El térm¡no "am¡no" se ref¡ere a un grupo -NH2. Como se usa en este documento, los térm¡nos "N-(alqu¡lo C1-4)am¡no" y "N,N-d¡(alqu¡lo C1-4)am¡no" se ref¡ere a un grupo am¡no en el que uno o ambos átomos de h¡drógeno, respectivamente, se reemplazan con un grupo alqu¡lo C1.4 l¡neal o ram¡f¡cado. Ejemplos de N-(alqu¡lo C1-4)am¡no ¡ncluyen met¡lam¡no, et¡lam¡no y tert-but¡lam¡no, y ejemplos de N,N-d¡-(alqu¡lo C1-4)am¡no ¡ncluyen d¡met¡lam¡no y d¡et¡lam¡no.
Como se usa en este documento, el término 'W-(aril-alquilo C ^am ino " se refiere a un grupo amino en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza con un grupo aril-alquilo C1-4. Ejemplos de A/-(ar¡l-alquilo C ^a m in o incluyen bencilamino y feniletilamino. El término "alquilcarbonilamino Ci-a" se refiere a un grupo amino en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza con un Ci-a grupo alquilcarbonilo. Ejemplos de Ci-a alcanoilamino incluyen acetilamino y tertbutilcarbonilamino. El término "C.1-4 alquiloxicarbonilamino" se refiere a un grupo amino en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza con un C1-4 grupo alquiloxicarbonilo. Un ejemplo de C.1-4 alquiloxicarbonilamino es tertbutoxicarbonilamino. Los términos "alquilsulfonamido C1-4" y "cicloalquilsulfonamido C3-a" se refiere a un grupo amino en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza con un alquilsulfonilo C1-4 o un grupo cicloalquilsulfonilo C3-a, respectivamente.
Como se usa en el presente documento, el término "farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son adecuados para el uso farmacéutico humano y que son generalmente seguros, no tóxicos y no indeseables biológicamente ni de alguna otra manera.
Como se usa en el presente documento, el término "aproximadamente" se refiere a un valor o parámetro aquí que incluye (y describe) realizaciones que están dirigidas a ese valor o parámetro per se. Por ejemplo, la descripción que se refiere a "aproximadamente 20" incluye la descripción de "20". Los rangos numéricos incluyen los números que definen el rango. En términos generales, el término "aproximadamente" se refiere al valor indicado de la variable y a todos los valores de la variable que se encuentran dentro del error experimental del valor indicado (por ejemplo, dentro del intervalo de confianza del 95 % para la media) o dentro del 10 % del valor indicado, el que sea mayor.
Los compuestos de 1,5-benzotiazepina y 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, son inhibidores del transportador de ácidos biliares dependiente de sodio apical (inhibidores de ASBT), del transportador de ácidos biliares del hígado (inhibidores de LBAT), o de los transportadores de ácidos biliares hepáticos y dependientes de sodio apicales (inhibidores duales de ASBT/LBAT). Por lo tanto, son útiles en el tratamiento o prevención de afecciones, trastornos y enfermedades en los que es deseable la inhibición de la circulación de ácidos biliares, tales como enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de ácidos grasos y utilización de glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas.
Las enfermedades cardiovasculares y los trastornos del metabolismo de los ácidos grasos y la utilización de la glucosa incluyen, pero no se limitan a, hipercolesterolemia; trastornos del metabolismo de los ácidos grasos; diabetes mellitus tipo 1 y tipo 2; complicaciones de la diabetes, incluidas cataratas, enfermedades micro y macrovasculares, retinopatía, neuropatía, nefropatía y retraso en la cicatrización de heridas, isquemia tisular, pie diabético, arterioesclerosis, infarto de miocardio, síndrome coronario agudo, angina de pecho inestable, angina de pecho estable, ictus, enfermedad oclusiva arterial periférica, cardiomiopatía, insuficiencia cardíaca, trastornos del ritmo cardíaco y reestenosis vascular; enfermedades relacionadas con la diabetes tales como resistencia a la insulina (alteración de la homeostasis de la glucosa), hiperglucemia, hiperinsulinemia, niveles sanguíneos elevados de ácidos grasos o glicerol, obesidad, dislipidemia, hiperlipidemia incluyendo hipertrigliceridemia, síndrome metabólico (síndrome X), aterosclerosis e hipertensión; y para aumentar los niveles de lipoproteínas de alta densidad.
Las enfermedades y los trastornos gastrointestinales incluyen estreñimiento (incluido estreñimiento crónico, estreñimiento funcional, estreñimiento idiopático crónico (CIC), estreñimiento intermitente/esporádico, estreñimiento secundario a diabetes mellitus, estreñimiento secundario a accidente cerebrovascular, estreñimiento secundario a enfermedad renal crónica, estreñimiento secundario a esclerosis múltiple, estreñimiento secundario a enfermedad de Parkinson, estreñimiento secundario a esclerosis sistémica, estreñimiento inducido por fármacos, síndrome del intestino irritable con estreñimiento (IBS-E), síndrome del intestino irritable mixto (IBS-M), estreñimiento funcional pediátrico y estreñimiento inducido por opioides); Enfermedad de Crohn; malabsorción primaria de ácidos biliares; síndrome del intestino irritable (IBS); enfermedad inflamatoria intestinal (IBD); inflamación ileal; y enfermedad por reflujo y complicaciones de la misma, tales como esófago de Barrett, esofagitis por reflujo biliar y gastritis por reflujo biliar.
Una enfermedad hepática como se define aquí es cualquier enfermedad en el hígado y en los órganos conectados con el mismo, tales como el páncreas, la vena porta, el parénquima hepático, el árbol biliar intrahepático, el árbol biliar extrahepático y la vesícula biliar. En algunos casos, una enfermedad hepática es una enfermedad hepática dependiente de ácidos biliares. Las enfermedades y trastornos hepáticos incluyen, pero no se limitan a un trastorno metabólico hereditario del hígado; errores congénitos de la síntesis de ácidos biliares; anomalías congénitas de las vías biliares; atresia biliar; atresia biliar posterior a Kasai; atresia biliar post-trasplante hepático; hepatitis neonatal; colestasis neonatal; formas hereditarias de colestasis; xantomatosis cerebrotendinosa; un defecto secundario de la síntesis de BA; síndrome de Zellweger; enfermedad hepática asociada a fibrosis quística; deficiencia de alfa1-antitripsina; síndrome de Alagilles (ALGS); síndrome de Byler; un defecto primario de la síntesis de ácidos biliares (BA); colestasis intrahepática familiar progresiva (PFIC) que incluye PFIC-1, PFIC-2, PFIC-3 y PFIC no especificada, PFIC posterior a la derivación biliar y PFIC posterior al trasplante de hígado; colestasis intrahepática recurrente benigna (BRIC) que incluye BRIC1, BRIC2 y BRIC no especificado, BRIC posterior a la derivación biliar y BRIC posterior al trasplante de hígado; hepatitis autoinmune; cirrosis biliar primaria (PBC); fibrosis hepática; enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD); esteatohepatitis no alcohólica (NASH); hipertensión portal; colestasis; colestasis del síndrome de Down; colestasis inducida por fármacos; colestasis intrahepática del embarazo (ictericia durante el embarazo); colestasis intrahepática; colestasis extrahepática; colestasis asociada a nutrición parenteral (PNAC); colestasis asociada a niveles bajos de fosfolípidos; síndrome de colestasis de linfedema 1 (LCS1); colangitis esclerosante primaria (PSC); colangitis asociada a inmunoglobulina G4; colangitis biliar primaria; colelitiasis (cálculos biliares); litiasis biliar; coledocolitiasis; pancreatitis por cálculos biliares; enfermedad de Caroli; malignidad de los conductos biliares; malignidad que causa obstrucción del árbol biliar; estenosis biliares; colangiopatía por SIDA; colangiopatía isquémica; prurito debido a colestasis o ictericia; pancreatitis; enfermedad hepática autoinmune crónica que conduce a colestasis progresiva; esteatosis hepática; hepatitis alcohólica; hígado graso agudo; hígado graso del embarazo; hepatitis inducida por fármacos; trastornos por sobrecarga de hierro; defecto congénito de la síntesis de ácidos biliares tipo 1 (defecto BAS tipo 1); lesión hepática inducida por fármacos (DILI); fibrosis hepática; fibrosis hepática congénita; cirrosis hepática; histiocitosis de células de Langerhans (HCL); colangitis esclerosante ictiosis neonatal (NISCH); protoporfiria eritropoyética (EPP); ductopenia idiopática de la edad adulta (IAD); hepatitis neonatal idiopática (INH); escasez no sindrómica de conductos biliares interlobulillares (NS PILBD); cirrosis infantil de indios norteamericanos (NAIC); sarcoidosis hepática; amilosis; enterocolitis necrotizante; toxicidades causadas por ácidos biliares en sueros, incluidas alteraciones del ritmo cardíaco (por ejemplo, fibrilación auricular) en el contexto de un perfil anormal de ácidos biliares en sueros, cardiomiopatía asociada con cirrosis hepática ("colecardia") y atrofia muscular esquelética asociada con enfermedad hepática colestásica; hepatitis viral (incluyendo hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D y hepatitis E); carcinoma hepatocelular (hepatoma); colangiocarcinoma; cánceres gastrointestinales relacionados con ácidos biliares; y colestasis provocada por tumores y neoplasias del hígado, de las vías biliares y del páncreas.
Otras enfermedades que pueden ser tratadas o prevenidas por los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, incluyen síndromes de hiperabsorción (incluyendo abetalipoproteinemia, hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL), enfermedad de retención de quilomicrones (CRD) y sitosterolemia); hipervitaminosis y osteopetrosis; hipertensión; hiperfiltración glomerular; y prurito de insuficiencia renal.
El transporte de ácidos biliares en el cuerpo humano está controlado por la acción de los miembros de la familia SLC10 de proteínas transportadoras de solutos, en particular por el polipéptido cotransportador de Na+-taurocolato (NTCP, también llamado transportador de ácidos biliares hepáticos (LBAT); símbolo del gen SLC10A1), que se expresa en la membrana sinusoidal de los hepatocitos, y por el transportador apical de ácidos biliares dependientes de sodio (ASBT, también llamado transportador ileal de ácidos biliares (IBAT), ISBT, ABAT o NTCP2; símbolo del gen SLC10A2), que se expresa en la membrana apical de enterocitos ileales, células del túbulo renal proximal, epitelio biliar, colangiocitos grandes y células epiteliales de la vesícula biliar. En el hígado, el transportador hepático de ácidos biliares (LBAT) extrae de manera eficiente los ácidos biliares de la sangre portal y la bomba de exportación de sales biliares (BSEP; símbolo del gen ABCB11) los vuelve a secretar a través de la membrana canalicular. La reabsorción de ácidos biliares en el íleon es manejada por el transportador apical de ácidos biliares dependientes de sodio (ASBT), donde comúnmente se le conoce como transportador de ácidos biliares ileales (IBAT). Tanto LBAT como ASBT funcionan como cotransportadores electrogénicos de sodio-soluto que mueven dos o más Na+ iones por molécula de soluto.
Los xenobióticos y endobióticos, incluidos los ácidos biliares, son absorbidos por el hígado desde la sangre portal y secretados a la bilis por distintas proteínas de transporte con especificidades de sustrato individualizadas. Los ácidos biliares conjugados con glicina y taurina existen en forma aniónica y no pueden atravesar las membranas por difusión y, por lo tanto, dependen completamente de las proteínas de transporte de membrana para entrar o salir del hepatocito (Kosters y Karpen, Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071). ASBT y LBAT prefieren las sales biliares conjugadas con glicina y taurina sobre sus contrapartes no conjugadas y demuestran una mayor afinidad por las sales biliares dihidroxi que por las sales biliares trihidroxi. Aún no se han identificado sustratos que no sean ácidos biliares para ASBT, sin embargo, también se encontró que LBAT transporta una variedad de sulfatos de esteroides, hormonas y xenobióticos.
LBAT no está tan completamente caracterizado como ASBT en términos de requisitos de inhibición de fármacos. Dong et al. identificaron fármacos aprobados por la FDA que inhiben LBAT humano y compararon los requisitos de inhibición de LBAT y ASBT. Se realizaron una serie de estudios de inhibición de LBAT utilizando fármacos aprobados por la FDA, junto con el desarrollo de modelos computacionales iterativos. Los estudios de detección identificaron 27 fármacos como nuevos inhibidores de LBAT, incluidos irbesartán (Ki = 11.9 pM) y ezetimiba (Ki = 25.0 pM). El farmacóforo de característica común indicó que dos hidrófobos y un aceptor de enlaces de hidrógeno eran importantes para la inhibición de LBAT. De 72 fármacos examinados in vitro, un total de 31 fármacos inhibieron LBAT, mientras que 51 fármacos (es decir, más de la mitad) inhibieron ASBT. Por lo tanto, si bien hubo superposición de inhibidores, ASBT inesperadamente fue más permisivo para la inhibición de fármacos que LBAT, y esto puede estar relacionado con que LBAT posee menos características de farmacóforo (Dong et al., Mol. Pharm. 2013, vol. 10, p. 1008-1019).
Vaz et al. describen la identificación de la deficiencia de LBAT como un nuevo error congénito del metabolismo con un fenotipo clínico relativamente leve. La identificación de la deficiencia de LBAT confirma que este transportador es el principal sistema de importación de sales biliares conjugadas al hígado, pero también indica que los transportadores auxiliares son capaces de sostener el ciclo enterohepático en su ausencia (Vaz et al., Hepatology 2015, vol. 61, p.
260-267). Estos hallazgos apoyan la hipótesis de que la inhibición de LBAT es un mecanismo de acción seguro, ya que los hepatocitos todavía tienen la posibilidad de captar la cantidad necesaria de ácidos biliares.
Liu et al. describen la identificación de un nuevo tipo de hipercolanemia que se asocia con homocigosidad para la mutación p.Ser267Phe en SLC10A1 (LBAT). La frecuencia alélica de esta mutación en el gen SLC10A1 varía en diferentes poblaciones, con la mayor incidencia en el sur de China (8 % y 12 % en chinos Han y Dai respectivamente) y en Vietnam (11 %). Se creía que esta hipercolanemia "oculta" afectaba al 0.64 % de los Han del sur, al 1.44 % de la población china Dai y al 1.21 % de la población vietnamita. También se observó un aumento en los niveles séricos de BA conjugados y no conjugados en los individuos homocigotos. Liu et al. sugieren que este hallazgo probablemente se deba a la reducción del transporte de BA desde la circulación portal a los hepatocitos. Esto apoya la hipótesis de que la función fisiológica de la circulación enterohepática no es solo reciclar los ácidos biliares sino también eliminar los ácidos biliares de la circulación para lograr la homeostasis (Karpen and Dawson, Hepatology 2015, vol. 61, p. 24­ 27). Alternativamente, el hígado puede sintetizar niveles elevados de ácidos biliares para compensar la recirculación enterohepática reducida en los portadores homocigóticos. Como LBAT también transporta ácidos biliares no conjugados, el aumento de los ácidos biliares no conjugados en este estudio no fue sorprendente (Liu et al., Scientific Reports 2017, 7: 9214, p. 1-7).
Se ha encontrado que LBAT está subregulado en varias formas de lesión hepática colestásica y colestasis, mientras que ASBT está subregulado en una variedad de trastornos gastrointestinales como la enfermedad de Crohn, malabsorción primaria de ácidos biliares, enfermedad inflamatoria intestinal e inflamación ileal, pero sobrerregulado en colestasis. LBAT también funciona como un receptor celular para la entrada viral del virus de la hepatitis B (VHB) y el virus de la hepatitis D (HDV), que a su vez es la principal causa de enfermedad hepática y carcinoma hepatocelular.
La inhibición de ASBT se ha investigado para disminuir los niveles de colesterol en plasma y mejorar la resistencia a la insulina, así como para aliviar la carga de ácidos biliares en el hígado en la enfermedad hepática colestásica. Además, se ha descubierto que la inhibición de ASBT restaura los niveles de insulina y la normoglucemia, lo que establece la inhibición de ASBT como un tratamiento prometedor para la diabetes mellitus tipo 2. Los inhibidores de ASBT también se utilizan para el tratamiento del estreñimiento funcional.
Dado que ASBT se expresa predominantemente en el íleon (donde a menudo se denomina IBAT), no es necesario que los inhibidores de ASBT estén disponibles sistémicamente. Por otro lado, ASBT también se expresa en las células del túbulo proximal de los riñones. Por lo tanto, los inhibidores de ASBT que están disponibles sistémicamente también pueden inhibir la recaptación de ácidos biliares en los riñones. Se cree que esto conduciría a un aumento de los niveles de ácidos biliares en la orina y a una mayor eliminación de ácidos biliares del cuerpo a través de la orina. Por lo tanto, se espera que los inhibidores de ASBT disponibles sistémicamente que ejercen su efecto no solo en el íleon sino también en los riñones conduzcan a una mayor reducción de los niveles de ácidos biliares que los inhibidores de ASBT no disponibles sistémicamente que solo ejercen su efecto en el íleon.
Los compuestos que tienen una alta potencia inhibidora de ASBT son particularmente adecuados para el tratamiento de enfermedades hepáticas que causan colestasis, tales como colestasis intrahepática familiar progresiva (PFIC), síndrome de Alagilles, atresia biliar y esteatohepatitis no alcohólica (NASH).
La atresia biliar es una enfermedad hepática pediátrica rara que implica un bloqueo parcial o total (o incluso la ausencia) de los conductos biliares grandes. Este bloqueo o ausencia provoca colestasis que conduce a la acumulación de ácidos biliares que daña el hígado. En algunas realizaciones, la acumulación de ácidos biliares se produce en el árbol biliar extrahepático. En algunas realizaciones, la acumulación de ácidos biliares se produce en el árbol biliar intrahepático. El estándar actual de atención es el procedimiento de Kasai, que es una cirugía que elimina los conductos biliares bloqueados y conecta directamente una porción del intestino delgado con el hígado. Actualmente no hay tratamientos farmacológicos aprobados para este trastorno.
En el presente documento se proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de la atresia biliar. En algunas realizaciones, el sujeto se ha sometido al procedimiento de Kasai antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, al sujeto se le administra un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes de someterse al procedimiento de Kasai. En algunas realizaciones, el tratamiento de la atresia biliar disminuye el nivel de ácidos biliares en suero en el sujeto. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en suero se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o los ensayos para la medición de ácidos biliares totales como se describe en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en sueros puede disminuir, por ejemplo, del 10 % al 40 %, del 20 % al 50 %, del 30 % al 60 %, del 40 % al 70 %, del 50 % al 80 % o más del 90 % del nivel de ácidos biliares en suero antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el tratamiento de la atresia biliar incluye el tratamiento del prurito.
PFIC es un trastorno genético raro que se estima que afecta a uno de cada 50,000 a 100,000 niños nacidos en todo el mundo y causa una enfermedad hepática progresiva y potencialmente mortal.
Una manifestación de PFIC es el prurito, que a menudo resulta en una calidad de vida severamente disminuida. En algunos casos, PFIC conduce a cirrosis e insuficiencia hepática. Las terapias actuales incluyen la derivación biliar externa parcial (PEBD) y el trasplante de hígado; sin embargo, estas opciones pueden conllevar un riesgo sustancial de complicaciones posquirúrgicas, así como problemas psicológicos y sociales.
Se han identificado tres defectos genéticos alternativos que se correlacionan con tres subtipos separados de PFIC conocidos como tipos 1, 2 y 3.
PFIC, tipo 1, que a veces se denomina "enfermedad de Byler", es causada por una secreción de bilis alterada debido a mutaciones en el gen ATP8B1, que codifica una proteína que ayuda a mantener un equilibrio adecuado de grasas conocidas como fosfolípidos en las membranas celulares en los conductos biliares. Un desequilibrio en estos fosfolípidos se asocia con colestasis y ácidos biliares elevados en el hígado. Los sujetos afectados por PFIC tipo 1 generalmente desarrollan colestasis en los primeros meses de vida y, en ausencia de tratamiento quirúrgico, progresan a cirrosis y enfermedad hepática en etapa terminal antes del final de la primera década de vida.
PFIC, tipo 2, que a veces se denomina "síndrome de Byler", es causado por una secreción deficiente de sales biliares debido a mutaciones en el gen ABCB11, que codifica una proteína, conocida como bomba de exportación de sales biliares, que expulsa los ácidos biliares del hígado Los sujetos con PFIC tipo 2 a menudo desarrollan insuficiencia hepática en los primeros años de vida y tienen un mayor riesgo de desarrollar un tipo de cáncer de hígado conocido como carcinoma hepatocelular.
PFIC, tipo 3, que típicamente se presenta en los primeros años de la infancia con colestasis progresiva, es causada por mutaciones en el gen ABCB4, que codifica un transportador que mueve fosfolípidos a través de las membranas celulares.
Además, se ha propuesto que las mutaciones del gen TJP2, del gen NR1H4 o del gen Myo5b son causas de PFIC. Además, algunos sujetos con PFIC no tienen una mutación en ninguno de los genes ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b. En estos casos, se desconoce la causa de la afección.
Las mutaciones de ejemplo del gen ATP8B1 o la proteína resultante se enumeran en las Tablas 1 y 2, con una numeración basada en la proteína ATP8B1 de tipo salvaje humana (por ejemplo, SEQ ID NO: 1) o gen (por ejemplo, SEQ ID NO: 2). Las mutaciones de ejemplo del gen ABCB11 o la proteína resultante se enumeran en las Tablas 4 y 5, con una numeración basada en la proteína ABCB11 humana de tipo salvaje (por ejemplo, SEQ ID NO: 3) o gen (por ejemplo, SEQ ID NO: 4).
Como pueden apreciar los expertos en la técnica, una posición de aminoácido en una secuencia de proteína de referencia que corresponde a una posición de aminoácido específica en la SEQ ID NO: 1 o 3 se pueden determinar alineando la secuencia de proteína de referencia con la SEQ ID NO: 1 o 3 (por ejemplo, usando un programa de software, tal como ClustaIW2). Los cambios en estos residuos (denominados en el presente documento como "mutaciones") pueden incluir sustituciones de aminoácidos individuales o múltiples, inserciones dentro o flanqueando las secuencias y deleciones dentro o flanqueando las secuencias. Como pueden apreciar los expertos en la técnica, una posición de nucleótido en una secuencia de gen de referencia que corresponde a una posición de nucleótido específica en la SEQ ID NO: 2 o 4 se pueden determinar alineando la secuencia del gen de referencia con la SEQ ID NO: 2 o 4 (por ejemplo, usando un programa de software, tal como ClustaIW2). Los cambios en estos residuos (denominados en el presente documento como "mutaciones") pueden incluir sustituciones de nucleótidos simples o múltiples, inserciones dentro de las secuencias o flanqueándolas, y deleciones dentro de las secuencias o flanqueándolas. Véase también Kooistra, et al., "KLIFS: A structural kinase-ligand interaction database," Nucleic Acids Res. 2016, vol. 44, no. D1, pp. D365-D371.
Secuencia de proteína canónica de ATP8B1 (SEQ ID NO: 1) - ID Uniprot O43520
MSTERDSETT FDEDSQPNDE VVPYSDDETE DELDDQGSAV EPEQNRVNRE AEENREPFRK
ECTWQVKAND RKYHEQPHFM NTKFLCIKES KYANNAIKTY KYNAFTFIPM NLFEQFKRAA
NLYFLALLIL QAVPQISTLA WYTTLVPLLV VLGVTAIKDL VDDVARHKMD KEINNRTCEV
IKDGRFKVAK WKEIQVGDVI RLKKNDFVPA DILLLSSSEP NSLCYVETAE LDGETNLKFK
MSLEITDQYL QREDTLATFD GFIECEEPNN RLDKFTGTLF WRNTSFPLDA DKILLRGCVI
RNTDFCHGLV IFAGADTKIM KNSGKTRFKR TKIDYLMNYM VYTIFVVLIL LSAGLAIGHA
YWEAQVGNSS WYLYDGEDDT PSYRGFLIFW GYIIVLNTMV PISLYVSVEV IRLGQSHFIN
WDLQMYYAEK DTPAKARTTT LNEQLGQ1HY IFSDKTGTLT QNIMTFKKCC INGQIYGDHR
DASQHNHNKI EQVDFSWNTY ADGKLAFYDH YLIEQIQSGK EPEVRQFFFL LAVCHTVMVD
RTDGQLNYQA ASPDEGALVN AARNFGFAFL ARTQNTITIS ELGTERTYNV LAILDFNSDR
KRMSIIVRTP EGNIKLYCKG ADTVIYERLH RMNPTKQETQ DALDIFANET LRTLCLCYKE
IEEKEFTEWN KKFMAASVAS TNRDEALDKV YEEIEKDLIL LGATAIEDKL QDGVPETISK
LAKADIKIWV LTGDKKETAE NIGFACELLT EDTTICYGED INSLLHARME NQRNRGGVYA
KFAPPVQESF FPPGGNRALI ITGSWLNEIL LEKKTKRNKI LKLKFPRTEE ERRMRTQSKR
RLEAKKEQRQ KNFVDLACEC SAVICCRVTP KQKAMVVDLV KRYKKAITLA IGDGANDVNM
IKTAHIGVGI SGQEGMQAVM SSDYSFAQFR YLQRLLLVHG RWSYIRMCKF LRYFFYKNFA
FTLVHFWYSF FNGYSAQTAY EDWFITLYNV LYTSLPVLLM GLLDQDVSDK LSLRFPGLYI
VGQRDLLFNY KRFFVSLLHG VLTSMILFFI PLGAYLQTVG QDGEAPSDYQ SFAVTIASAL
VITVNFQIGL DTSYWTFVNA FSIFGSIALY FGIMFDFHSA G1HVLFPSAF QFTGTASNAL
RQPYIWLTII LAVAVCLLPV VAIRFLSMTI WPSESDKIQK HRKRLKAEEQ WQRRQQVFRR
GVSTRRSAYA FSHQRGYADL ISSGRSIRKK RSPLDAIVAD GTAEYRRTGD S
Secuencia canónica de ADN para ATP8B1 (SEQ ID NO: 2)
ATG AGT ACA GAA AGA GAC TCA GAA ACG ACA TTT GAC GAG GAT TCT CAG CCT
AAT GAC GAA GTG GTT CCC TAC AGT GAT GAT GAA ACA GAA GAT GAA CTT GAT
GAC CAG GGG TCT GCT GTT GAA CCA GAA CAA AAC CGA GTC AAC AGG GAA GCA
GAG GAG AAC CGG GAG CCA TTC AGA AAA GAA TGT ACA TGG CAA GTC AAA GCA
AAC GAT CGC AAG TAC CAC GAA CAA CCT CAC TTT ATG AAC ACA AAA TTC TTG
TGT ATT AAG GAG AGT AAA TAT GCG AAT AAT GCA ATT AAA ACA TAC AAG TAC
AAC GCA TTT ACC TTT ATA CCA ATG AAT CTG TTT GAG CAG TTT AAG AGA GCA
GCC AAT TTA TAT TTC CTG GCT CTT CTT ATC TTA CAG GCA GTT CCT CAA ATC
TCT ACC CTG GCT TGG TAC ACC ACA CTA GTG CCC CTG CTT GTG GTG CTG GGC
GTC ACT GCA ATC AAA GAC CTG GTG GAC GAT GTG GCT CGC CAT AAA ATG GAT
AAG GAA ATC AAC AAT AGG ACG TGT GAA GTC ATT AAG GAT GGC AGG TTC AAA
GTT GCT AAG TGG AAA GAA ATT CAA GTT GGA GAC GTC ATT CGT CTG AAA AAA
AAT GAT TTT GTT CCA GCT GAC ATT CTC CTG CTG TCT AGC TCT GAG CCT AAC
AGC CTC TGC TAT GTG GAA ACA GCA GAA CTG GAT GGA GAA ACC AAT TTA AAA
TTT AAG ATG TCA CTT GAA ATC ACA GAC CAG TAC CTC CAA AGA GAA GAT ACA
TTG GCT ACA TTT GAT GGT TTT ATT GAA TGT GAA GAA CCC AAT AAC AGA CTA
GAT AAG TTT ACA GGA ACA CTA TTT TGG AGA AAC ACA AGT TTT CCT TTG GAT
GCT GAT AAA ATT TTG TTA CGT GGC TGT GTA ATT AGG AAC ACC GAT TTC TGC
CAC GGC TTA GTC ATT TTT GCA GGT GCT GAC ACT AAA ATA ATG AAG AAT AGT
GGG AAA ACC AGA TTT AAA AGA ACT AAA ATT GAT TAC TTG ATG AAC TAC ATG
GTT TAC ACG ATC TTT GTT GTT CTT ATT CTG CTT TCT GCT GGT CTT GCC ATC
GGC CAT GCT TAT TGG GAA GCA CAG GTG GGC AAT TCC TCT TGG TAC CTC TAT
GAT GGA GAA GAC GAT ACA CCC TCC TAC CGT GGA TTC CTC ATT TTC TGG GGC
TAT ATC ATT GTT CTC AAC ACC ATG GTA CCC ATC TCT CTC TAT GTC AGC GTG
GAA GTG ATT CGT CTT GGA CAG AGT CAC TTC ATC AAC TGG GAC CTG CAA ATG TAC TAT GCT GAG AAG GAC ACA CCC GCA AAA GCT AGA ACC ACC ACA CTC AAT GAA CAG CTC GGG CAG ATC CAT TAT ATC TTC TCT GAT AAG ACG GGG ACA CTC ACA CAA AAT ATC ATG ACC TTT AAA AAG TGC TGT ATC AAC GGG CAG ATA TAT GGG GAC CAT CGG GAT GCC TCT CAA CAC AAC CAC AAC AAA ATA GAG CAA GTT GAT TTT AGC TGG AAT ACA TAT GCT GAT GGG AAG CTT GCA TTT TAT GAC CAC TAT CTT ATT GAG CAA ATC CAG TCA GGG AAA GAG CCA GAA GTA CGA CAG TTC TTC TTC TTG CTC GCA GTT TGC CAC ACA GTC ATG GTG GAT AGG ACT GAT GGT CAG CTC AAC TAC CAG GCA GCC TCT CCC GAT GAA GGT GCC CTG GTA AAC GCT GCC AGG AAC TTT GGC TTT GCC TTC CTC GCC AGG ACC CAG AAC ACC ATC ACC ATC AGT GAA CTG GGC ACT GAA AGG ACT TAC AAT GTT CTT GCC ATT TTG GAC TTC AAC AGT GAC CGG AAG CGA ATG TCT ATC ATT GTA AGA ACC CCA GAA GGC AAT ATC AAG CTT TAC TGT AAA GGT GCT GAC ACT GTT ATT TAT GAA CGG TTA CAT CGA ATG AAT CCT ACT AAG CAA GAA ACA CAG GAT GCC CTG GAT ATC TTT GCA AAT GAA ACT CTT AGA ACC CTA TGC CTT TGC TAC AAG GAA ATT GAA GAA AAA GAA TTT ACA GAA TGG AAT AAA AAG TTT ATG GCT GCC AGT GTG GCC TCC ACC AAC CGG GAC GAA GCT CTG GAT AAA GTA TAT GAG GAG ATT GAA AAA GAC TTA ATT CTC CTG GGA GCT ACA GCT ATT GAA GAC AAG CTA CAG GAT GGA GTT CCA GAA ACC ATT TCA AAA CTT GCA AAA GCT GAC ATT AAG ATC TGG GTG CTT ACT GGA GAC AAA AAG GAA ACT GCT GAA AAT ATA GGA TTT GCT TGT GAA CTT CTG ACT GAA GAC ACC ACC ATC TGC TAT GGG GAG GAT ATT AAT TCT CTT CTT CAT GCA AGG ATG GAA AAC CAG AGG AAT AGA GGT GGC GTC TAC GCA AAG TTT GCA CCT CCT GTG CAG GAA TCT TTT TTT CCA CCC GGT GGA AAC CGT GCC TTA ATC ATC ACT GGT TCT TGG TTG AAT GAA ATT CTT CTC GAG AAA AAG ACC AAG AGA AAT AAG ATT CTG AAG CTG AAG TTC CCA AGA ACA GAA GAA GAA AGA CGG ATG CGG ACC CAA AGT AAA AGG AGG CTA GAA GCT AAG AAA GAG CAG CGG CAG AAA AAC TTT GTG GAC CTG GCC TGC GAG TGC AGC GCA GTC ATC TGC TGC CGC GTC ACC CCC AAG CAG AAG GCC ATG GTG GTG GAC CTG GTG AAG AGG TAC AAG AAA GCC ATC ACG CTG GCC ATC GGA GAT GGG GCC AAT GAC GTG AAC ATG ATC AAA ACT GCC CAC ATT GGC GTT GGA ATA AGT GGA CAA GAA GGA ATG CAA GCT GTC ATG TCG AGT GAC TAT TCC TTT GCT CAG TTC CGA TAT CTG CAG AGG CTA CTG CTG GTG CAT GGC CGA TGG TCT TAC ATA AGG ATG TGC AAG TTC CTA CGA TAC TTC TTT TAC AAA AAC TTT GCC TTT ACT TTG GTT CAT TTC TGG TAC TCC TTC TTC AAT GGC TAC TCT GCG CAG ACT GCA TAC GAG GAT TGG TTC ATC ACC CTC TAC AAC GTG CTG TAC ACC AGC CTG CCC GTG CTC CTC ATG GGG CTG CTC GAC CAG GAT GTG AGT GAC AAA CTG AGC CTC CGA TTC CCT GGG TTA TAC ATA GTG GGA CAA AGA GAC TTA CTA TTC AAC TAT AAG AGA TTC TTT GTA AGC TTG TTG CAT GGG GTC CTA ACA TCG ATG ATC CTC TTC TTC ATA CCT CTT GGA GCT TAT CTG CAA ACC GTA GGG CAG GAT GGA GAG GCA CCT TCC GAC TAC CAG TCT TTT GCC GTC ACC ATT GCC TCT GCT CTT GTA ATA ACA GTC AAT TTC CAG ATT GGC TTG GAT ACT TCT TAT TGG ACT TTT GTG AAT GCT TTT TCA ATT TTT GGA AGC ATT GCA CTT TAT TTT GGC ATC ATG TTT GAC TTT CAT AGT GCT GGA ATA CAT GTT CTC TTT CCA TCT GCA TTT CAA TTT ACA GGC ACA GCT TCA AAC GCT CTG AGA CAG CCA TAC ATT TGG TTA ACT ATC ATC CTG GCT GTT GCT GTG TGC TTA CTA CCC GTC GTT GCC ATT CGA TTC CTG TCA ATG ACC ATC TGG CCA TCA GAA AGT GAT AAG ATC CAG AAG CAT CGC AAG CGG TTG AAG GCG GAG GAG CAG TGG CAG CGA CGG CAG CAG GTG TTC CGC CGG GGC GTG TCA ACG CGG CGC TCG GCC TAC GCC TTC TCG CAC CAG CGG GGC TAC GCG GAC CTC ATC TCC TCC GGG CGC AGC ATC CGC AAG AAG CGC TCG CCG CTT GAT GCC ATC GTG GCG GAT GGC ACC GCG GAG TAC AGG CGC ACC GGG GAC AGC TGA
Tabla 1. Mutaciones de ejemplo de ATP8B1
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
Figure imgf000017_0002
Figure imgf000017_0003
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000018_0002
Figure imgf000019_0001
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000020_0002
Figure imgf000020_0003
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000021_0002
Figure imgf000021_0003
Figure imgf000021_0004
Figure imgf000021_0005
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000022_0002
Figure imgf000022_0003
Figure imgf000022_0004
Figure imgf000022_0005
Figure imgf000022_0006
Tabla 2. Mutaciones ATP8B1 seleccionadas asociadas con PFIC-1
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000023_0002
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000024_0002
Figure imgf000024_0003
Figure imgf000024_0004
Figure imgf000025_0001
Referencias para las tablas 1 y 2
1 Folmer et al., Hepatology. 2009, vol. 50(5), p. 1597-1605.
2 Hsu et al., Hepatol Res. 2009, vol. 39(6), p. 625-631.
3 Alvarez et al., Hum Mol Genet. 2004, vol. 13(20), p. 2451-2460.
4 Davit-Spraul et al., Hepatology 2010, vol. 51(5), p. 1645-1655.
5 Vitale et al., J Gastroenterol. 2018, vol. 53(8), p. 945-958.
6 Klomp et al., Hepatology 2004, vol. 40(1), p. 27-38.
7 Zarenezhad et al., Hepatitis Monthly: 2017, vol. 17(2); e43500.
8 Dixon et al., Scientific Reports 2017, vol. 7, 11823.
9 Painter et al., Eur J Hum Genet. 2005, vol. 13(4), p. 435-439.
10 Deng et al., World J Gastroenterol. 2012, vol. 18(44), p. 6504-6509.
11 Giovannoni et al., PLoS One. 2015, vol. 10(12): e0145021.
12 Li et al., Hepatology International 2017, vol. 11, No. 1, Supp. Supplement 1, pp. S180. Abstract Number: OP284.
13 Togawa et al., Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2018, vol. 67, Supp. Supplement 1, pp. S363. Abstract Number: 615.
14 Miloh et al., Gastroenterology 2006, vol. 130, No. 4, Suppl. 2, pp. A759-A760. Meeting Info.: Digestive Disease Week Meeting/107th Annual Meeting of the American-Gastroenterological-Association. Los Angeles, CA, USA. May 19.
15 Droge et al., Zeitschrift fur Gastroenterologie 2015, vol. 53, No. 12. Abstract Number: A3-27. Meeting Info: 32. Jahrestagung der Deutschen Arbeitsgemeinschaft zum Studium der Leber. Dusseldorf, Germany. 22 Jan 2016-23 Jan 2016
16 Mizuochi et al., Clin Chim Acta. 2012, vol. 413(15-16), p. 1301-1304.
17 Liu et al., Hepatology International 2009, vol. 3, No. 1, p. 184-185. Abstract Number: PE405. Meeting Info: 19th Conference of the Asian Pacific Association for the Study of the Liver. Hong Kong, China. 13 Feb 2009-16 Feb 2009 18 McKay et al., Version 2. F1000Res. 2013; 2: 32. DOI: 10.12688/f1000research.2-32.v2
19 Hasegawa et al., Orphanet J Rare Dis. 2014, vol. 9:89.
20 Stone et al., J Biol Chem. 2012, vol. 287(49), p. 41139-51.
21 Kang et al., J Pathol Transl Med. 2019 May 16. doi: 10.4132/jptm.2019.05.03. [Epub ahead of print]
22 Sharma et al., BMC Gastroenterol. 2018, vol. 18(1), p. 107.
23 Uegaki et al., Intern Med. 2008, vol. 47(7), p. 599-602.
24 Goldschmidt et al., Hepatol Res. 2016, vol. 46(4), p. 306-311.
25 Liu et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2010, vol. 50(2), p. 179-183.
26 Jung et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2007, vol. 44(4), p. 453-458.
27 Bounford. University of Birmingham. Dissertation Abstracts International, (2016) Vol. 75, No. 1C. Order No.: AAI10588329. ProQuest Dissertations & Theses.
28 Stolz et al., Aliment Pharmacol Ther. 2019, vol. 49(9), p. 1195-1204.
29 Ivashkin et al., Hepatology International 2016, vol. 10, No. 1, Supp. SUPPL. 1, pp. S461. Abstract Number: LBO-38. Meeting Info: 25th Annual Conference of the Asian Pacific Association for the Study of the Liver, APASL 2016. Tokyo, Japan. 20 Feb 2016-24 Feb 2016
30 Blackmore et al., J Clin Exp Hepatol. 2013, vol. 3(2), p. 159-161.
31 Matte et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2010, vol. 51(4), p. 488-493.
32 Squires et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2017, vol. 64(3), p. 425-430.
33 Hayshi et al., EBioMedicine. 2018, vol. 27, p. 187-199.
34 Nagasaka et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2007, vol. 45(1), p. 96-105.
35 Wang et al., PLoS One. 2016; vol. 11(4): e0153114.
36 Narchi et al., Saudi J Gastroenterol. 2017, vol. 23(5), p. 303-305.
37 Alashkar et al., Blood 2015, vol. 126, No. 23. Meeting Info.: 57th Annual Meeting of the American-Society-of-Hematology. Orlando, FL, USA. December 05 -08, 2015. Amer Soc Hematol.
38 Ferreira et al., Pediatric Transplantation 2013, vol. 17, Supp. SUPPL. 1, pp. 99. Abstract Number: 239. Meeting Info: IPTA 7th Congress on Pediatric Transplantation. Warsaw, Poland. 13 Jul 2013-16 Jul 2013.
39 Pauli-Magnus et al., J Hepatol. 2005, vol. 43(2), p. 342-357.
40 Jericho et al., Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2015, vol. 60(3), p. 368-374.
41 van der Woerd et al., PLoS One. 2013, vol. 8(11): e80553.
42 Copeland et al., J Gastroenterol Hepatol. 2013, vol. 28(3), p. 560-564.
43 Droge et al., J Hepatol. 2017, vol. 67(6), p. 1253-1264.
44 Chen et al., Journal of Pediatrics 2002, vol. 140(1), p. 119-124.
45 Jirsa et al., Hepatol Res. 2004, vol. 30(1), p. 1-3.
46 van der Woerd et al., Hepatology 2015, vol. 61(4), p. 1382-1391.
En algunas realizaciones, la mutación en ATP8B1 se selecciona de L127P, G308V, T456M, D554N, F529del, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R.
Secuencia de proteína canónica de ABCB11 (SEQ ID NO: 3) - ID Uniprot O95342
MSDSVILRSI KKFGEENDGF ESDKSYNNDK KSRLQDEKKG DGVRVGFFQL FRFSSSTDIW
LMFVGSLCAF LHGIAQPGVL LIFGTMTDVF IDYDVELQEL QIPGKACVNN TIVWTNSSLN
QNMTNGTRCG LLNIESEMIK FASYYAGIAV AVLITGYIQI CFWVIAAARQ IQKMRKFYFR
RIMRMEIGWF DCNSVGELNT RFSDDINKIN DAIADQMALF IQRMTSTICG FLLGFFRGWK
LTLVIISVSP LIGIGAATIG LSVSKFTDYE LKAYAKAGVV ADEVISSMRT VAAFGGEKRE
VERYEKNLVF AQRWGIRKGI VMGFFTGFVW CLIFLCYALA FWYGSTLVLD EGEYTPGTLV
QIFLSVIVGA LNLGNASPCL EAFATGRAAA TSIFETIDRK PIIDCMSEDG YKLDRIKGEI
EFHNVTFHYP SRPEVKILND LNMVIKPGEM TALVGPSGAG KSTALQLIQR FYDPCEGMVT
VDGHDIRSLN IQWLRDQIGI VEQEPVLFST TIAENIRYGR EDATMEDIVQ AAKEANAYNF
IMDLPQQFDT LVGEGGGQMS GGQKQRVAIA RALIRNPKIL LLDMATSALD NESEAMVQEV
LSKIQHGHTI ISVAHRLSTV RAADTIIGFE HGTAVERGTH EELLERKGVY FTLVTLQSQG
NQALNEEDIK DATEDDMLAR TFSRGSYQDS LRASIRQRSK SQLSYLVHEP PLAVVDHKST
YEEDRKDKDI PVQEEVEPAP VRRILKFSAP EWPYMLVGSV GAAVNGTVTP LYAFLFSQIL
GTFSIPDKEE QRSQINGVCL LFVAMGCVSL FTQFLQGYAF AKSGELLTKR LRKFGFRAML
GQDIAWFDDL RNSPGALTTR LATDASQVQG AAGSQIGMIV NSFTNVTVAM IIAFSFSWKL
SLVILCFFPF LALSGATQTR MLTGFASRDK QALEMVGQIT NEALSNIRTV AGIGKERRFI
EALETELEKP FKTAIQKANI YGFCFAFAQC IMFIANSASY RYGGYLISNE GLHFSYVFRV
ISAVVLSATA LGRAFSYTPS YAKAKISAAR FFQLLDRQPP ISVYNTAGEK WDNFQGKIDF
VDCKFTYPSR PDSQVLNGLS VSISPGQTLA FVGSSGCGKS TSIQLLERFY DPDQGKVMID
GHDSKKVNVQ FLRSNIGIVS QEPVLFACSI MDNIKYGDNT KEIPMERVIA AAKQAQLHDF
VMSLPEKYET NVGSQGSQLS RGEKQRIAIA RAIVRDPKIL LLDEATSALD TESEKTVQVA
LDKAREGRTC IVIAHRLSTI QNADIIAVMA QGVVIEKGTH EELMAQKGAY YKLVTTGSPI S
Secuencia canónica de ADN de ABCB11 (SEQ ID NO: 4)
ATG TCT GAC TCA GTA ATT CTT CGA AGT ATA AAG AAA TTT GGA GAG GAG AAT GAT GGT TTT GAG TCA GAT AAA TCA TAT AAT AAT GAT AAG AAA TCA AGG TTA CAA GAT GAG AAG AAA GGT GAT GGC GTT AGA GTT GGC TTC TTT CAA TTG TTT CGG TTT TCT TCA TCA ACT GAC ATT TGG CTG ATG TTT GTG GGA AGT TTG TGT GCA TTT CTC CAT GGA ATA GCC CAG CCA GGC GTG CTA CTC ATT TTT GGC ACA ATG ACA GAT GTT TTT ATT GAC TAC GAC GTT GAG TTA CAA GAA CTC CAG ATT CCA GGA AAA GCA TGT GTG AAT AAC ACC ATT GTA TGG ACT AAC AGT TCC CTC AAC CAG AAC ATG ACA AAT GGA ACA CGT TGT GGG TTG CTG AAC ATC GAG AGC GAA ATG ATC AAA TTT GCC AGT TAC TAT GCT GGA ATT GCT GTC GCA GTA CTT ATC ACA GGA TAT ATT CAA ATA TGC TTT TGG GTC ATT GCC GCA GCT CGT CAG ATA CAG AAA ATG AGA AAA TTT TAC TTT AGG AGA ATA ATG AGA ATG GAA ATA GGG TGG TTT GAC TGC AAT TCA GTG GGG GAG CTG AAT ACA AGA TTC TCT GAT GAT ATT AAT AAA ATC AAT GAT GCC ATA GCT GAC CAA ATG GCC CTT TTC ATT CAG CGC ATG ACC TCG ACC ATC TGT GGT TTC CTG TTG GGA TTT TTC AGG GGT TGG AAA CTG ACC TTG GTT ATT ATT TCT GTC AGC CCT CTC ATT GGG ATT GGA GCA GCC ACC ATT GGT CTG AGT GTG TCC AAG TTT ACG GAC TAT GAG CTG AAG GCC TAT GCC AAA GCA GGG GTG GTG GCT GAT GAA GTC ATT TCA TCA ATG AGA ACA GTG GCT GCT TTT GGT GGT GAG AAA AGA GAG GTT GAA AGG TAT GAG AAA AAT CTT GTG TTC GCC CAG CGT TGG GGA ATT AGA AAA GGA ATA GTG ATG GGA TTC TTT ACT GGA TTC GTG TGG TGT CTC ATC TTT TTG TGT TAT GCA CTG GCC TTC TGG TAC GGC TCC ACA CTT GTC CTG GAT GAA GGA GAA TAT ACA CCA GGA ACC CTT GTC CAG ATT TTC CTC AGT GTC ATA GTA GGA GCT TTA AAT CTT GGC AAT GCC TCT CCT TGT TTG GAA GCC TTT GCA ACT GGA CGT GCA GCA GCC ACC AGC ATT TTT GAG ACA ATA GAC AGG AAA CCC ATC ATT GAC TGC ATG TCA GAA GAT GGT TAC AAG TTG GAT CGA ATC AAG GGT GAA ATT GAA TTC CAT AAT GTG ACC TTC CAT TAT CCT TCC AGA CCA GAG GTG AAG ATT CTA AAT GAC CTC AAC ATG GTC ATT AAA CCA GGG GAA ATG ACA GCT CTG GTA GGA CCC AGT GGA GCT GGA AAA AGT ACA GCA CTG CAA CTC ATT CAG CGA TTC TAT GAC CCC TGT GAA GGA ATG GTG ACC GTG GAT GGC CAT GAC ATT CGC TCT CTT AAC ATT CAG TGG CTT AGA GAT CAG ATT GGG ATA GTG GAG CAA GAG CCA GTT CTG TTC TCT ACC ACC ATT GCA GAA AAT ATT CGC TAT GGC AGA GAA GAT GCA ACA ATG GAA GAC ATA GTC CAA GCT GCC AAG GAG GCC AAT GCC TAC AAC TTC ATC ATG GAC CTG CCA CAG CAA TTT GAC ACC CTT GTT GGA GAA GGA GGA GGC CAG ATG AGT GGT GGC CAG AAA CAA AGG GTA GCT ATC GCC AGA GCC CTC ATC CGA AAT CCC AAG ATT CTG CTT TTG GAC ATG GCC ACC TCA GCT CTG GAC AAT GAG AGT GAA GCC ATG GTG CAA GAA GTG CTG AGT AAG ATT CAG CAT GGG CAC ACA ATC ATT TCA GTT GCT CAT CGC TTG TCT ACG GTC AGA GCT GCA GAT ACC ATC ATT GGT TTT GAA CAT GGC ACT GCA GTG GAA AGA GGG ACC CAT GAA GAA TTA CTG GAA AGG AAA GGT GTT TAC TTC ACT CTA GTG ACT TTG CAA AGC CAG GGA AAT CAA GCT CTT AAT GAA GAG GAC ATA AAG GAT GCA ACT GAA GAT GAC ATG CTT GCG AGG ACC TTT AGC AGA GGG AGC TAC CAG GAT AGT TTA AGG GCT TCC ATC CGG CAA CGC TCC AAG TCT CAG CTT TCT TAC CTG GTG CAC GAA CCT CCA TTA GCT GTT GTA GAT CAT AAG TCT ACC TAT GAA GAA GAT AGA AAG GAC AAG GAC ATT CCT GTG CAG GAA GAA GTT GAA CCT GCC CCA GTT AGG AGG ATT CTG AAA TTC AGT GCT CCA GAA TGG CCC TAC ATG CTG GTA GGG TCT GTG GGT GCA GCT GTG AAC GGG ACA GTC ACA CCC TTG TAT GCC TTT TTA TTC AGC CAG ATT CTT GGG ACT TTT TCA ATT CCT GAT AAA GAG GAA CAA AGG TCA CAG ATC AAT GGT GTG TGC CTA CTT TTT GTA GCA ATG GGC TGT GTA TCT CTT TTC ACC CAA TTT CTA CAG GGA TAT GCC TTT GCT AAA TCT GGG GAG CTC CTA ACA AAA AGG CTA CGT AAA TTT GGT TTC AGG GCA ATG CTG GGG CAA GAT ATT GCC TGG TTT GAT GAC CTC AGA AAT AGC CCT GGA GCA TTG ACA ACA AGA CTT GCT ACA GAT GCT TCC CAA GTT CAA GGG GCT GCC GGC TCT CAG ATC GGG ATG ATA GTC AAT TCC TTC ACT AAC GTC ACT GTG GCC ATG ATC ATT GCC TTC TCC TTT AGC TGG AAG CTG AGC CTG GTC ATC TTG TGC TTC TTC CCC TTC TTG GCT TTA TCA GGA GCC ACA CAG ACC AGG ATG TTG ACA GGA TTT GCC TCT CGA GAT AAG CAG GCC CTG GAG ATG GTG GGA CAG ATT ACA AAT GAA GCC CTC AGT AAC ATC CGC ACT GTT GCT GGA ATT GGA AAG GAG AGG CGG TTC ATT GAA GCA CTT GAG ACT GAG CTG GAG AAG CCC TTC AAG ACA GCC ATT CAG AAA GCC AAT ATT TAC GGA TTC TGC TTT GCC TTT GCC CAG TGC ATC ATG TTT ATT GCG AAT TCT GCT TCC TAC AGA TAT GGA GGT TAC TTA ATC TCC AAT GAG GGG CTC CAT TTC AGC TAT GTG TTC AGG GTG ATC TCT GCA GTT GTA CTG AGT GCA ACA GCT CTT GGA AGA GCC TTC TCT TAC ACC CCA AGT TAT GCA AAA GCT AAA ATA TCA GCT GCA CGC TTT TTT CAA CTG CTG GAC CGA CAA CCC CCA ATC AGT GTA TAC AAT ACT GCA GGT GAA AAA TGG GAC AAC TTC CAG GGG AAG ATT GAT TTT GTT GAT TGT AAA TTT ACA TAT CCT TCT CGA CCT GAC TCG CAA GTT CTG AAT GGT CTC TCA GTG TCG ATT AGT CCA GGG CAG ACA CTG GCG TTT GTT GGG AGC AGT GGA TGT GGC AAA AGC ACT AGC ATT CAG CTG TTG GAA CGT TTC TAT GAT CCT GAT CAA GGG AAG GTG ATG ATA GAT GGT CAT GAC AGC AAA AAA GTA AAT GTC CAG TTC CTC CGC TCA AAC ATT GGA ATT GTT TCC CAG GAA CCA GTG TTG TTT GCC TGT AGC ATA ATG GAC AAT ATC AAG TAT GGA GAC AAC ACC AAA GAA ATT CCC ATG GAA AGA GTC ATA GCA GCT GCA AAA CAG GCT CAG CTG CAT GAT TTT GTC ATG TCA CTC CCA GAG AAA TAT GAA ACT AAC GTT GGG TCC CAG GGG TCT CAA CTC TCT AGA GGG GAG AAA CAA CGC ATT GCT ATT GCT CGG GCC ATT GTA CGA GAT CCT AAA ATC TTG CTA CTA GAT GAA GCC ACT TCT GCC TTA GAC ACA GAA AGT GAA AAG ACG GTG CAG GTT GCT CTA GAC AAA GCC AGA GAG GGT CGG ACC TGC ATT GTC ATT GCC CAT CGC TTG TCC ACC ATC CAG AAC GCG GAT ATC ATT GCT GTC ATG GCA CAG GGG GTG GTG ATT GAA AAG GGG ACC CAT GAA GAA CTG ATG GCC CAA AAA GGA GCC TAC TAC AAA CTA GTC ACC ACT GGA TCC CCC ATC AGT TGA
Tabla 3. Mutaciones ABCB11 de ejemplo
Figure imgf000029_0001
Figure imgf000029_0002
Figure imgf000030_0001
Figure imgf000030_0002
Figure imgf000031_0001
Figure imgf000032_0001
Figure imgf000032_0002
Figure imgf000033_0001
Figure imgf000034_0001
Figure imgf000034_0002
Figure imgf000035_0001
Figure imgf000036_0001
Figure imgf000037_0001
Figure imgf000037_0002
Figure imgf000037_0003
Figure imgf000037_0004
Figure imgf000037_0005
c.627+5G>T31
c.625A>C/ c.627+5G>T31
696G>T54
c. 784+1G>C49
807T>C54
c.886C>T31
c.890A>G59
c.908+1G>A57
c.908+5G>A55
c.908deIG59
c.909-15A>G66
957A>G54
c.1084-2A>G57
1145 deleción de 1bp90
1281C>T5457
c.1309-165C > T19
c.1434 174G > A19
c.1434 10C > T19
c.1530C>A57
c.1587-1589deICTT31
c.1621A>C3359
c.1638+32T>C66
c.1638+80C>T66
1671C>T54
1791G>T54
1939deIA14
c.2075+3A>G53
c.2081T>A31
c.2093G>A65
2098deIA16
c.2138-8T>G67
2142A>G54
c.2178+1G>T3639
c.2179-17C>A66
c.2344-157T>G66
c.2344-17T>C66
c.2417G>A78
c.2541deIG87
c.2620C>T3233
c.2815-8A>G55
c.3003A>G37
Figure imgf000039_0001
Tabla 4. Mutaciones ABCB11 seleccionadas asociadas con PFIC-2
Figure imgf000039_0002
Figure imgf000040_0001
Figure imgf000041_0001
Figure imgf000042_0001
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000043_0002
Figure imgf000043_0003
Figure imgf000044_0001
Referencias para las tablas 3 y 4
1 Noe et al., J Hepatol. 2005, vol. 43(3), p. 536-543.
2 Lam et al., Am J Physiol Cell Physiol. 2007, vol. 293(5), p. C1709-16.
3 Stindt et al., Liver Int. 2013, vol. 33(10), p. 1527-1735.
4 Gao et al., Shandong Yiyao 2012, vol. 52(10), p. 14-16.
5 Strautnieks et al., Gastroenterology. 2008, vol. 134(4), p. 1203-1214.
6 Kagawa et al., Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2008, vol. 294(1), p. G58-67.
7 Byrne et al., Hepatology. 2009, vol. 49(2), p. 553-567.
8 Chen et al., J Pediatr. 2008, vol. 153(6), p. 825-832.
9 Davit-Spraul et al., Hepatology 2010, vol. 51(5), p. 1645-1655.
10 Droge et al., Sci Rep. 2016, vol. 6: 24827.
11 Lang et al., Pharmacogenet Genomics. 2007, vol. 17(1), p. 47-60.
12 Ellinger et al., World J Gastroenterol. 2017, vol. 23(29), p. :5295-5303.
13 Vitale et al., J Gastroenterol. 2018, vol. 53(8), p. 945-958.
14 Knisely et al., Hepatology. 2006, vol. 44(2), p. 478-86.
15 Ellis et al., Hepatology. 2018, vol. 67(4), p. 1531-1545.
16 Lam et al., J Hepatol. 2006, vol. 44(1), p. 240-242.
17 Varma et al., Hepatology 2015, vol. 62(1), p. 198-206.
18 Treepongkaruna et al., World J Gastroenterol. 2009, vol. 15(34), p. 4339-4342.
19 Zarenezhad et al., Hepatitis Monthly: 2017, vol. 17(2); e43500.
20 Hayashi et al., Hepatol Res. 2016, vol. 46(2), p. 192-200.
21 Guorui et al., Linchuang Erke Zazhi 2013, vol. 31(10), 905-909.
22 van Mil et al., Gastroenterology. 2004, vol. 127(2), p. 379-384.
23 Anzivino et al., Dig Liver Dis. 2013, vol. 45(3), p. 226-232.
24 Park et al., World J Gastroenterol. 2016, vol. 22(20), p. 4901-4907.
25 Imagawa et al., J Hum Genet. 2018, vol. 63(5), p. 569-577.
26 Giovannoni et al., PLoS One. 2015, vol. 10(12): e0145021.
27 Hu et al., Mol Med Rep. 2014, vol. 10(3), p. 1264-1274.
28 Lang et al,. Drug Metab Dispos. 2006, vol. 34(9), p. 1582-1599.
29 Masahata et al., Transplant Proc. 2016, vol. 48(9), p. 3156-3162.
30 Holz et al., Hepatol Commun. 2018, vol. 2(2), p. 152-154.
31 Li et al., Hepatology International 2017, vol. 11, No. 1, Supp. Supplement 1, pp. S180. Abstract Number: OP284.
32 Francalanci et al., Laboratory Investigation 2011, vol. 91, Supp. SUPPL. 1, pp. 360A. Abstract Number: 1526. 33 Francalanci et al., Digestive and Liver Disease 2010, vol. 42, Supp. SUPPL. 1, pp. S16. Abstract Number: T.N.5.
34 Shah et al., J Pediatr Genet. 2017, vol. 6(2), p. 126-127.
35 Gao et al., Hepatitis Monthly 2017, vol. 17(10), e55087/1-e55087/6.
36 Evason et al., Am J Surg Pathol. 2011, vol. 35(5), p. 687-696.
37 Davit-Spraul et al., Mol Genet Metab. 2014, vol. 113(3), p. 225-229.
38 Maggiore et al., J Hepatol. 2010, vol. 53(5), p. 981-6.
39 McKay et al., Version 2. F1000Res. 2013; 2: 32. DOI: 10.12688/f1000research.2-32.v2
40 Liu et al., Pediatr Int. 2013, vol. 55(2), p. 138-144.
41 Waisbourd-Zinman et al., Ann Hepatol. 2017, vol. 16(3), p. 465-468.
42 Griffin, et al., Canadian Journal of Gastroenterology and Hepatology 2016, vol. 2016. Abstract Number: A200. Meeting Info: 2016 Canadian Digestive Diseases Week, CDDW 2016. Montreal, QC, United States. 26 Feb 2016-29 Feb 2016
43 Qiu et al., Hepatology 2017, vol. 65(5), p. 1655-1669.
44 Imagawa et al., Sci Rep. 2017, 7:41806.
45 Kang et al., J Pathol Transl Med. 2019 May 16. doi: 10.4132/jptm.2019.05.03. [Epub ahead of print]
46 Takahashi et al., Eur J Gastroenterol Hepatol. 2007, vol. 19(11), p. 942-6.
47 Shimizu et al., Am J Transplant. 2011, vol. 11(2), p. 394-398.
48 Krawczyk et al., Ann Hepatol. 2012, vol. 11(5), p. 710-744.
49 Sharma et al., BMC Gastroenterol. 2018, vol. 18(1), p. 107.
50 Sattler et al., Journal of Hepatology 2017, vol. 66, No. 1, Suppl. S, pp. S177. Meeting Info.: International Liver Congress / 52nd Annual Meeting of the European-Association-for-the-Study-of-the-Liver. Amsterdam, NETHERLANDS. April 19 -23, 2017. European Assoc Study Liver.
51 Jung et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2007, vol. 44(4), p. 453-458.
52 Sciveres. Digestive and Liver Disease 2010, vol. 42, Supp. SUPPL. 5, pp. S329. Abstract Number: CO18. Meeting Info: 17th National Congress SIGENP. Pescara, Italy. 07 Oct 2010-09 Oct 2010
53 Sohn et al., Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr. 2019, vol. 22(2), p. 201-206.
54 Ho et al., Pharmacogenet Genomics. 2010, vol. 20(1), p. 45-57.
55 Wang et al., Hepatol Res. 2018, vol. 48(7), p. 574-584.
56 Shaprio et al., J Hum Genet. 2010, vol. 55(5), p. 308-313.
57 Bounford. University of Birmingham. Dissertation Abstracts International, (2016) Vol. 75, No. 1C. Order No.: AAI10588329. ProQuest Dissertations & Theses.
58 Stolz et al., Aliment Pharmacol Ther. 2019, vol. 49(9), p. 1195-1204.
59 Jankowska et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2014, vol. 58(1), p. 92-95.
60 Kim. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2016, vol. 62, Supp. SUPPL. 1, pp. 620. Abstract Number: H-P-045. Meeting Info: 49th Annual Meeting of the European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition, ESPGHAN 2016. Athens, Greece. 25 May 2016-28 May 2016.
61 Pauli-Magnus et al., Hepatology 2003, vol. 38, No. 4 Suppl. 1, pp. 518A. print. Meeting Info.: 54th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases. Boston, MA, USA. October 24-28, 2003. American Association for the Study of Liver Diseases.
62 Li et al., Hepatology International 2017, vol. 11, No. 1, Supp. Supplement 1, pp. S362. Abstract Number: PP0347. Meeting Info: 26th Annual Conference of the Asian Pacific Association for the Study of the Liver, APASL 2017. Shanghai, China. 15 Feb 2017-19 Feb 2017.
63 Rumbo et al., Transplantation 2018, vol. 102, No. 7, Supp. Supplement 1, pp. S848. Abstract Number: P.752. Meeting Info: 27th International Congress of The Transplantation Society, TTS 2018. Madrid, Spain. 30 Jun 2018-05 Jul 2018.
64 Lee et al., Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr. 2017, vol. 20(2), p. 114-123.
65 Sherrif et al., Liver international: official journal of the International Association for the Study of the Liver 2013, vol.
33, No. 8, pp. 1266-1270.
66 Blackmore et al., J Clin Exp Hepatol. 2013, vol. 3(2), p. 159-161.
67 Matte et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2010, vol. 51(4), p. 488-493.
68 Lin et al., Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018, vol. 20(9), p. 758-764.
69 Harmanci et al., Experimental and Clinical Transplantation 2015, vol. 13, Supp. SUPPL. 2, pp. 76. Abstract Number: P62. Meeting Info: 1st Congress of the Turkic World Transplantation Society. Astana, Kazakhstan. 20 May 2015-22 May 2015.
70 Herbst et al., Mol Cell Probes. 2015, vol. 29(5), p. 291-298.
71 Moghadamrad et al., Hepatology. 2013, vol. 57(6), p. 2539-2541.
72 Holz et al., Zeitschrift fur Gastroenterologie 2016, vol. 54, No. 8. Abstract Number: KV275. Meeting Info: Viszeralmedizin 2016, 71. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft fur Gastroenterologie, Verdauungs- und Stoffwechselkrankheiten mit Sektion Endoskopie - 10. Herbsttagung der Deutschen Gesellschaft fur Allgemein- und Viszeralchirurgie. Hamburg, Germany. 21 Sep 2016-24 Sep 2016.
73 Wang et al., PLoS One. 2016; vol. 11(4): e0153114.
74 Hao et al., International Journal of Clinical and Experimental Pathology 2017, vol. 10(3), p. 3480-3487.
75 Arnell et al., J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2010, vol. 51(4), p. 494-499.
76 Sharma et al., Indian Journal of Gastroenterology 2017, vol. 36, No. 1, Supp. Supplement 1, pp. A99. Abstract Number: M-20. Meeting Info: 58th Annual Conference of the Indian Society of Gastroenterology, ISGCON 2017. Bhubaneswar, India. 14 Dec 2017-17 Dec 2017.
77 Beauséjour et al., Can J Gastroenterol. 2011, vol. 25(6), p. 311-314.
78 Imagawa et al., Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2016, vol. 63, Supp. Supplement 2, pp. S51. Abstract Number: 166. Meeting Info: World Congress of Pediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition 2016. Montreal, QC, Canada. 05 Oct 2016-08 Oct 2016.
79 Peng et al., Zhonghua er ke za zhi (Chinese journal of pediatrics) 2018, vol. 56, No. 6, pp. 440-444.
80 Tibesar et al., Case Rep Pediatr. 2014, vol. 2014: 185923.
81 Ng et al., Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2018, vol. 66, Supp. Supplement 2, pp. 860. Abstract Number: H-P-127. Meeting Info: 51st Annual Meeting European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition, ESPGHAN 2018. Geneva, Switzerland. 09 May 2018-12 May 2018.
82 Wong et al., Clin Chem. 2008, vol. 54(7), p. 1141-1148.
83 Pauli-Magnus et al., J Hepatol. 2005, vol. 43(2), p. 342-357.
84 Jericho et al., Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60, vol. 3, p. 368-374.
85 Scheimann et al., Gastroenterology 2007, vol. 132, No. 4, Suppl. 2, pp. A452. Meeting Info.: Digestive Disease Week Meeting/108th Annual Meeting of the American-Gastroenterological-Association. Washington, DC, USA. May 19 -24, 2007. Amer Gastroenterol Assoc; Amer Assoc Study Liver Dis; Amer Soc Gastrointestinal Endoscopy; Soc Surg Alimentary Tract.
86 Jaquotot-Haerranz et al., Rev Esp Enferm Dig. 2013, vol. 105(1), p. 52-54.
87 Khosla et al., American Journal of Gastroenterology 2015, vol. 110, No. Suppl. 1, pp. S397. Meeting Info.: 80th Annual Scientific Meeting of the American-College-of-Gastroenterology. Honolulu, HI, USA. October 16 -21,2015. 88 Droge et al., J Hepatol. 2017, vol. 67(6), p. 1253-1264.
89 Liu et al., Liver International 2010, vol. 30(6), p. 809-815.
90 Chen et al., Journal of Pediatrics 2002, vol. 140(1), p. 119-124.
91 U.S. Patent No. 9,295,677
En algunas realizaciones, la mutación en ABCB11 se selecciona de A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.
En el presente documento se divulgan métodos para tratar PFIC (por ejemplo, PFIC-1 y PFIC-2) en un sujeto que incluye realizar un ensayo en una muestra obtenida del sujeto para determinar si el sujeto tiene una mutación asociada con PFIC (por ejemplo, mutación ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b), y administrar (por ejemplo, administrar de manera específica o selectiva) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al sujeto que se determina que tiene una mutación asociado con PFIC. En algunas realizaciones, la mutación es una mutación ATP8B1 o ABCB11. Por ejemplo, una mutación como se proporciona en cualquiera de las Tablas 1-4. En algunas realizaciones, la mutación en ATP8B1 se selecciona de L127P, G308V, T456M, D554N, FS29deI, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R. En algunas realizaciones, la mutación en ABCB11 se selecciona de A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.
También se divulgan métodos para tratar PFIC (por ejemplo, PFIC-1 y PFIC-2) en un sujeto que lo necesite, comprendiendo el método: (a) detectar una mutación asociada con PFIC (por ejemplo, una mutación ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b) en el sujeto; y (b) administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, los métodos para tratar PFIC pueden incluir la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, a un sujeto que tiene una mutación asociada con PFIC (por ejemplo, ATP8B1, ABCB11, ABCB4, mutación TJP2, NR1H4 o Myo5b). En algunas realizaciones, la mutación es una mutación ATP8B1 o ABCB11. Por ejemplo, una mutación como se proporciona en cualquiera de las Tablas 1-4. En algunas realizaciones, la mutación en ATP8B1 se selecciona de L127P, G308V, T456m , D554N, FS29deI, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R. En algunas realizaciones, la mutación en ABCB11 se selecciona de A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.
En algunas realizaciones, se determina que el sujeto tiene una mutación asociada con PFIC en un sujeto o una muestra de biopsia del sujeto mediante el uso de cualquier prueba reconocida en la técnica, incluida la secuenciación de próxima generación (NGS). En algunas realizaciones, se determina que el sujeto tiene una mutación asociada con PFIC usando una prueba o ensayo aprobado por la agencia reguladora, por ejemplo, aprobado por la FDA para identificar una mutación asociada con PFIC en un sujeto o una muestra de biopsia del sujeto o realizando cualquiera de los ejemplos no limitantes de ensayos descritos en este documento. Los métodos adicionales para diagnosticar PFIC se describen en Gunaydin, M. et al., Hepat Med. 2018, vol. 10, p. 95-104.
En algunas realizaciones, el tratamiento de PFIC (por ejemplo, PFIC-1 o PFIC-2) disminuye el nivel de ácidos biliares en suero en el sujeto. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en suero se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o los ensayos para la medición de ácidos biliares totales como se describe en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en suero puede disminuir, por ejemplo, del 10 % al 40 %, del 20 % al 50 %, del 30 % al 60 %, del 40 % al 70 %, del 50 % al 80 % o más del 90 % del nivel de ácidos biliares en suero antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el tratamiento de PFIC incluye el tratamiento del prurito.
Dado que LBAT se expresa en los hepatocitos, LBAT y las sustancias inhibidoras duales de ASBT/LBAT deben tener al menos cierta biodisponibilidad y fracción libre en la sangre. Debido a que los compuestos inhibidores de LBAT solo necesitan sobrevivir desde el intestino hasta el hígado, se espera que una exposición sistémica relativamente baja de dichos compuestos sea suficiente, minimizando así el riesgo potencial de cualquier efecto secundario en el resto del cuerpo. Se espera que la inhibición de LBAT y ASBT tenga al menos efectos aditivos en la disminución de la concentración de ácidos biliares intrahepáticos. También se espera que un inhibidor dual de ASBT/LBAT pueda reducir los niveles de ácidos biliares sin inducir diarrea, tal como se observa a veces con los inhibidores de ASBT.
Se espera que los compuestos que tienen una potencia inhibidora de LBAT alta y una biodisponibilidad suficiente sean particularmente adecuados para el tratamiento de la hepatitis. Se espera que los compuestos que tienen una potencia inhibidora dual de ASBT/LBAT y una biodisponibilidad suficiente sean particularmente adecuados para el tratamiento de la esteatohepatitis no alcohólica (NASH).
NASH es una enfermedad hepática crónica común y grave que se asemeja a la enfermedad hepática alcohólica, pero que ocurre en personas que beben poco o nada de alcohol. En los pacientes con NASH, la acumulación de grasa en el hígado, conocida como enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD) o esteatosis, y otros factores, tal como el colesterol LDL alto y la resistencia a la insulina, inducen una inflamación crónica en el hígado y pueden provocar una cicatrización progresiva del tejido, conocida como fibrosis y cirrosis, seguidas finalmente por insuficiencia hepática y muerte. Se ha encontrado que los pacientes con NASH tienen concentraciones séricas de ácidos biliares totales significativamente más altas que los sujetos sanos en ayunas (aumento de 2.2 a 2.4 veces en NASH) y en todos los puntos de tiempo posprandiales (aumento de 1.7 a 2.2 veces en NASH) Estos son impulsados por un aumento de los ácidos biliares primarios y secundarios conjugados con taurina y glicina. Los pacientes con NASH exhibieron una mayor variabilidad en su perfil de ácidos biliares en ayunas y posprandial. Estos resultados indican que los pacientes con NASH tienen una mayor exposición en ayunas y posprandial a los ácidos biliares, incluidas las especies secundarias más hidrófobas y citotóxicas. El aumento de la exposición a los ácidos biliares puede estar involucrado en la lesión hepática y la patogenia de NAFLD y NASH (Ferslew et al., Dig Dis Sci. 2015, vol. 60, p. 3318-3328). Por lo tanto, es probable que la inhibición de ASBT y/o LBAT sea beneficiosa para el tratamiento de NASH.
NAFLD se caracteriza por esteatosis hepática sin causas secundarias de esteatosis hepática, incluido el consumo excesivo de alcohol, otras enfermedades hepáticas conocidas o el uso a largo plazo de un medicamento esteatogénico (Chalasani et al., Hepatology 2018, vol. 67(1), p. 328-357). NAFLD se puede clasificar en hígado graso no alcohólico (NAFL) y esteatohepatitis no alcohólica (NASH). Según Chalasani et al., NAFL se define como la presencia de esteatosis hepática > 5 % sin evidencia de daño hepatocelular en forma de balonización de hepatocitos. NASH se define como la presencia de > 5 % de esteatosis hepática e inflamación con lesión de los hepatocitos (por ejemplo, balonización), con o sin fibrosis hepática. NASH también se asocia comúnmente con inflamación hepática y fibrosis hepática, que puede progresar a cirrosis, enfermedad hepática en etapa terminal y carcinoma hepatocelular. Si bien la fibrosis hepática no siempre está presente en NASH, la gravedad de la fibrosis, cuando está presente, puede vincularse con resultados a largo plazo.
Se utilizan muchos enfoques para valorar y evaluar si un sujeto tiene NAFLD y, de ser así, la gravedad de la enfermedad, incluida la diferenciación si NAFLD es NAFLD o NASH. En algunas realizaciones, la gravedad de NAFLD se puede evaluar utilizando la NAS. En algunas realizaciones, el tratamiento de NAFLD puede evaluarse utilizando la NAS. En algunas realizaciones, la NAS se puede determinar como se describe en Kleiner et al., Hepatology. 2005, 41(6):1313-1321. Véase, por ejemplo, la Tabla 5 para ver un esquema NAS simplificado adaptado de Kleiner.
Tabla 5. Ejemplo de la Puntuación de Actividad de NAFLD (NAS) con estadio de fibrosis
Figure imgf000049_0001
En algunas realizaciones, la NAS se determina de forma no invasiva, por ejemplo, como se describe en la Publicación de solicitud U.S. No. 2018/0140219. En algunas realizaciones, la NAS se determina para una muestra del sujeto antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la NAS se determina durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, una puntuación NAS más baja durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo indica el tratamiento de NAFLD (por ejemplo, NASH). Por ejemplo, una disminución en la NAS por 1, por 2, por 3, por 4, por 5, por 6 o por 7 indica tratamiento de NAFLD (por ejemplo, NASH). En algunas realizaciones, la NAS tras la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 7 o menos. En algunas realizaciones, la nAs durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos. En algunas realizaciones, la NAS durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 7 o menos. En algunas realizaciones, la NAS durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos. En algunas realizaciones, la NAS después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 7 o menos. En algunas realizaciones, la NAS después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos.
Enfoques adicionales para valorar y evaluar NASH en un sujeto incluyen determinar uno o más de esteatosis hepática (por ejemplo, acumulación de grasa en el hígado); inflamación hepática; biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación hepática, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática (por ejemplo, marcadores séricos y paneles). Otros ejemplos de indicadores fisiológicos de NASH pueden incluir la morfología del hígado, la rigidez del hígado y el tamaño o peso del hígado del sujeto.
En algunas realizaciones, NASH en el sujeto se evidencia por una acumulación de grasa hepática y la detección de un biomarcador indicativo de daño hepático. Por ejemplo, la ferritina sérica elevada y los títulos bajos de autoanticuerpos séricos pueden ser características comunes de NASH.
En algunas realizaciones, los métodos para evaluar NASH incluyen imágenes por resonancia magnética, ya sea por espectroscopia o por fracción de grasa de densidad de protones (MRI-PDFF) para cuantificar la esteatosis, elastografía transitoria (FIBROSCAN®), gradiente de presión venosa hepática (HPVG), medición de la rigidez hepática con MRE para diagnosticar fibrosis y/o cirrosis hepáticas significativas, y evaluar las características histológicas de la biopsia hepática. En algunas realizaciones, la formación de imágenes por resonancia magnética se usa para detectar uno o más de esteatohepatitis (NASH-MRI), fibrosis hepática (Fibro-MRI) y esteatosis. Véase, por ejemplo, Publicaciones de solicitud U.S. Nos. 2016/146715 y 2005/0215882.
En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH puede incluir una disminución de uno o más síntomas asociados con NASH; reducción en la cantidad de esteatosis hepática; una disminución en la NAS; una disminución de la inflamación hepática; una disminución en el nivel de biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática; y una reducción de la fibrosis y/o la cirrosis, la falta de progresión adicional de la fibrosis y/o la cirrosis, o una ralentización de la progresión de la fibrosis y/o la cirrosis en el sujeto después de la administración de una o más dosis de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH comprende una disminución de uno o más síntomas asociados con NASH en el sujeto. Los síntomas de ejemplo pueden incluir uno o más de agrandamiento del hígado, fatiga, dolor en la parte superior derecha del abdomen, hinchazón abdominal, agrandamiento de los vasos sanguíneos justo debajo de la superficie de la piel, agrandamiento de los senos en los hombres, agrandamiento del bazo, palmas rojas, ictericia y prurito. En algunas realizaciones, el sujeto es asintomático. En algunas realizaciones, el peso corporal total del sujeto no aumenta. En algunas realizaciones, el peso corporal total del sujeto disminuye. En algunas realizaciones, el índice de masa corporal (IMC) del sujeto no aumenta. En algunas realizaciones, el índice de masa corporal (IMC) del sujeto disminuye. En algunas realizaciones, la relación de cintura y cadera (WTH) del sujeto no aumenta. En algunas realizaciones, la relación de cintura y cadera (WTH) del sujeto disminuye.
En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH puede evaluarse midiendo la esteatosis hepática. En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH comprende una reducción de la esteatosis hepática después de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, la esteatosis hepática se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en ecografía, tomografía computarizada (TC), formación de imágenes por resonancia magnética, espectroscopia por resonancia magnética (MRS), elastografía por resonancia magnética (MRE), elastografía transitoria (TE) (por ejemplo, FIBROSCAN®), medición del tamaño o peso del hígado, o por biopsia hepática véase, por ejemplo, Di Lascio et al., Ultrasound Med Biol. 2018, vol. 44(8), p. 1585-1596; Lv et al., J Clin Transl Hepatol. 2018, vol. 6(2), p. 217-221; Reeder et al., J Magn Reson Imaging. 2011, vol. 34(4), spcone; y de Lédinghen V, et al., J Gastroenterol Hepatol. 2016, vol. 31(4), p. 848-855). Un sujeto diagnosticado con NASH puede tener más del 5 % de esteatosis hepática, por ejemplo, más del 5 % al 25 %, del 25 % al 45 %, del 45 % al 65 % o más del 65 % de esteatosis hepática. En algunas realizaciones, un sujeto con más de aproximadamente 5 % a aproximadamente 33 % de esteatosis hepática tiene esteatosis hepática en estadio 1, un sujeto con aproximadamente 33 % a aproximadamente 66 % de esteatosis hepática tiene esteatosis hepática en estadio 2 y un sujeto con más de aproximadamente 66 % de esteatosis hepática tiene esteatosis hepática en estadio 3.
En algunas realizaciones, la cantidad de esteatosis hepática se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la cantidad de esteatosis hepática se determina durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, una reducción en la cantidad de esteatosis hepática durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, indica el tratamiento de NASH. Por ejemplo, una reducción en la cantidad de esteatosis hepática de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 75 % o de aproximadamente 50 % a aproximadamente 100 % indica tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, una reducción en la cantidad de esteatosis hepática en aproximadamente 5 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 90 % o aproximadamente 95 % indica tratamiento de NASH.
En algunas realizaciones, la presencia de inflamación hepática se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en biomarcadores indicativos de inflamación hepática y una muestra o muestras de biopsia hepática del sujeto. En algunas realizaciones, la gravedad de la inflamación hepática se determina a partir de una muestra o muestras de biopsia de hígado del sujeto. Por ejemplo, la inflamación hepática en una muestra de biopsia de hígado se puede evaluar como se describe en Kleiner et al., Hepatology 2005, vol. 41(6), p. 1313-1321 y Brunt et al., Am J Gastroenterol 1999, vol. 94, p. 2467-2474. En algunas realizaciones, la gravedad de la inflamación hepática se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la gravedad de la inflamación hepática se determina durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, una disminución en la gravedad de la inflamación hepática durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, indica el tratamiento de NASH. Por ejemplo, una disminución en la gravedad de la inflamación hepática de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 75 % o de aproximadamente 50 % a aproximadamente 100 % indica el tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, una disminución de la gravedad de la inflamación hepática en aproximadamente 5 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 90 % o aproximadamente 95 % indica tratamiento de NASH.
En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH comprende el tratamiento de la fibrosis y/o la cirrosis, por ejemplo, una disminución en la gravedad de la fibrosis, la falta de progresión adicional de la fibrosis y/o la cirrosis, o una ralentización de la progresión de la fibrosis y/o la cirrosis. En algunas realizaciones, la presencia de fibrosis y/o cirrosis se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en elastografía transitoria (por ejemplo, FIBROSCAN®), marcadores no invasivos de fibrosis hepática y características histológicas de una biopsia hepática. En algunas realizaciones, la gravedad (por ejemplo, el estadio) de la fibrosis se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en elastografía transitoria (por ejemplo, FIBROSCAN®), un sistema de puntuación de fibrosis, biomarcadores de fibrosis hepática (por ejemplo, biomarcadores no invasivos) y gradiente de presión venosa hepática (HVPG). Ejemplos no limitativos de sistemas de puntuación de fibrosis incluyen el sistema de puntuación de fibrosis NAFLD véase, por ejemplo, Angulo et al., Hepatology 2007, vol. 45(4), p. 846-54), el sistema de puntuación de fibrosis en Brunt et al., Am. J. Gastroenterol. 1999, vol. 94, p. 2467-2474, el sistema de puntuación de fibrosis en Kleiner et al., Hepatology 2005, vol. 41(6), p. 1313-1321, y el sistema de puntuación de fibrosis ISHAK (véase Ishak et al., J. Hepatol. 1995, vol. 22, p. 696-699).
En algunas realizaciones, la gravedad de la fibrosis se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la gravedad de la fibrosis se determina durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, una disminución en la gravedad de la fibrosis durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, indica el tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, una disminución en la gravedad de la fibrosis, la falta de progresión adicional de fibrosis y/o cirrosis, o una ralentización de la progresión de fibrosis y/o cirrosis indica el tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, la gravedad de la fibrosis se determina utilizando un sistema de puntuación como cualquiera de los sistemas de puntuación de fibrosis descritos en el presente documento, por ejemplo, la puntuación puede indicar el estadio de fibrosis, por ejemplo, estadio 0 (sin fibrosis), estadio 1, estadio 2, estadio 3 y estadio 4 (cirrosis) véase, por ejemplo, Kleiner et al). En algunas realizaciones, una disminución en el estadio de la fibrosis es una disminución en la gravedad de la fibrosis. Por ejemplo, una disminución de 1, 2, 3 o 4 etapas es una disminución de la gravedad de la fibrosis. En algunas realizaciones, una disminución en el estadio, por ejemplo, del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 indica el tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 después de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con las anteriores a la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1 , del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1 , del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, la presencia de NASH está determinada por uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática o sistemas de puntuación de los mismos. En algunas realizaciones, la gravedad de NASH está determinada por uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática o sistemas de puntuación de los mismos. El nivel del biomarcador se puede determinar, por ejemplo, midiendo, cuantificando y controlando el nivel de expresión del gen o ARNm que codifica el biomarcador y/o el péptido o la proteína del biomarcador. Ejemplos no limitativos de biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática y/o sistemas de puntuación de los mismos incluyen el índice de relación de aspartato aminotransferasa (AST) a plaquetas (APRI); la relación de aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa (ALT) (AAR); la puntuación FIB-4, que se basa en el APRI, los niveles de alanina aminotransferasa (ALT) y la edad del sujeto (véase, por ejemplo, McPherson et al., Gut 2010, vol. 59(9), p. 1265-9); ácido hialurónico; citoquinas proinflamatorias; un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (Gg T) combinados con la edad y el sexo del sujeto para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (por ejemplo, FIBROTEST®, FIBRo s Ur E®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinado con la edad y el sexo del sujeto (por ejemplo, HEPASCORE®; véase, por ejemplo, Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol. 51(10), p. 1867-1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa-1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (por ejemplo, FIBROSPECT®); un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP-1), propéptido amino-terminal de procolágeno tipo III (PIIINP) y ácido hialurónico (HA) (por ejemplo, la puntuación de Fibrosis Hepática Mejorada (ELF), véase, por ejemplo, Lichtinghagen R, et al., J Hepatol.
2013 agosto;59(2):236-42). En algunas realizaciones, la presencia de fibrosis está determinada por uno o más de la puntuación FIB-4, un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (g Gt ) combinados con la edad del sujeto y género para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (por ejemplo, FIBROTEST®, FIBROSURE®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinado con la edad y el sexo del sujeto (por ejemplo, HEPASCORE®; véase, por ejemplo, Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol. 51(10), p. 1867-1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa-1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (por ejemplo, FIBROSPECT®); y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP-1), propéptido amino-terminal de procolágeno tipo III (PIIINP) y ácido hialurónico (HA) (por ejemplo, la puntuación de Fibrosis Hepática Mejorada (ELF)).
En algunas realizaciones, el nivel de aspartato aminotransferasa (AST) no aumenta. En algunas realizaciones, el nivel de aspartato aminotransferasa (AST) disminuye. En algunas realizaciones, el nivel de alanina aminotransferasa (ALT) no aumenta. En algunas realizaciones, el nivel de alanina aminotransferasa (ALT) disminuye. En algunas realizaciones, el "nivel" de una enzima se refiere a la concentración de la enzima, por ejemplo, dentro de la sangre. Por ejemplo, el nivel de AST o ALT se puede expresar como Unidades/L.
En algunas realizaciones, la gravedad de la fibrosis está determinada por uno o más de la puntuación FIB-4, un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (GGT) combinados con la edad del sujeto y género para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (por ejemplo, FIBROTEST®, FIBROSURE®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinado con la edad y el sexo del sujeto (por ejemplo, HEPASCORE®; véase, por ejemplo, Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol. 51(10), p. 1867-1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa-1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (por ejemplo, FIBROSPECT®); y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP-1), propéptido amino-terminal de procolágeno tipo III (PIIINP) y ácido hialurónico (HA) (por ejemplo, la puntuación de Fibrosis Hepática Mejorada (ELF)).
En algunas realizaciones, la inflamación hepática está determinada por el nivel de biomarcadores de inflamación hepática, por ejemplo, citoquinas proinflamatorias. Ejemplos no limitantes de biomarcadores indicativos de inflamación hepática incluyen interleucina-(IL) 6, interleucina-(IL) 1p, factor de necrosis tumoral (TNF)-a, factor de crecimiento transformante (TGF)-p, proteína quimiotáctica de monocitos (M CP)-1, proteína C reactiva (PCR), PAI-1 e isoformas de colágeno tal como Col1a1, Col1a2 y Col4a1 véase, por ejemplo, Neuman, et al., Can. J. Gastroenterol. Hepatol.
2014, vol. 28(11), pág. 607-618 y Patente U.S. No. 9,872,844). La inflamación del hígado también puede evaluarse mediante el cambio de infiltración de macrófagos, por ejemplo, midiendo un cambio en el nivel de expresión de CD68. En algunas realizaciones, la inflamación del hígado se puede determinar midiendo o controlando los niveles séricos o los niveles circulantes de uno o más de interleucina-(IL) 6, interleucina-(IL) 1p, factor de necrosis tumoral (TNF)-a, factor de crecimiento transformante (TGF)-p, proteína quimiotáctica de monocitos (MCP)-1 y proteína C-reactiva (CRP).
En algunas realizaciones, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática se determina para una muestra del sujeto antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática se determina durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, una disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática durante el período de tiempo o después del período de tiempo de administración de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, indica el tratamiento de NASH. Por ejemplo, una disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática en al menos un 5 %, al menos un 10 %, al menos un 15%, al menos aproximadamente 20 %, al menos aproximadamente 25 %, al menos aproximadamente 30 %, al menos aproximadamente 35 %, al menos aproximadamente 40 %, al menos aproximadamente 45 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 55 %, al menos al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 65 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 75 %, al menos aproximadamente 80 %, al menos aproximadamente 85 %, al menos aproximadamente 90 %, al menos aproximadamente 95 %, o al menos aproximadamente 99 % indica tratamiento de NASH. En algunas realizaciones, la disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática después de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. , es de al menos un 5 %, al menos un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 % , al menos aproximadamente 45 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 55 %, al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 65 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 75 %, al menos aproximadamente 80 %, al menos al menos aproximadamente 85 %, al menos aproximadamente 90 %, al menos aproximadamente 95 %, o al menos aproximadamente 99 %. En algunas realizaciones, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sustancia farmacéuticamente aceptable sal del mismo, es por lo menos aproximadamente 5 %, al menos aproximadamente 10 %, al menos aproximadamente 15 %, al menos aproximadamente 20 %, al menos aproximadamente 25 %, al menos aproximadamente 30 %, al menos aproximadamente 35 %, al menos aproximadamente 40 %, al menos aproximadamente 45 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 55 %, al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 65 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 75 %, al menos aproximadamente 80 % , al menos aproximadamente 85 %, al menos aproximadamente 90 %, al menos aproximadamente 95 %, o al menos aproximadamente 99 %. En algunas realizaciones, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o un compuesto farmacéuticamente aceptable sal del mismo, es por lo menos aproximadamente 5 %, al menos aproximadamente 10 %, al menos aproximadamente 15 %, al menos aproximadamente 20 %, al menos aproximadamente 25 %, al menos aproximadamente 30 %, al menos aproximadamente 35 %, al menos aproximadamente 40 %, al menos aproximadamente 45 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 55 %, al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 65 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 75 %, al menos aproximadamente 80 % , al menos aproximadamente 85 %, al menos aproximadamente 90 %, al menos aproximadamente 95 %, o al menos aproximadamente 99 %.
En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH reduce el nivel de ácidos biliares en suero en el sujeto. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en suero se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o los ensayos para la medición de ácidos biliares totales como se describe en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200. En algunas realizaciones, el nivel de ácidos biliares en suero puede disminuir, por ejemplo, del 10 % al 40 %, del 20 % al 50 %, del 30 % al 60 %, del 40 % al 70 %, del 50 % al 80 % o más del 90 % del nivel de ácidos biliares en suero antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la NASH es NASH con colestasis concomitante. En la colestasis, se bloquea la liberación de bilis, incluidos los ácidos biliares, del hígado. Los ácidos biliares pueden causar daño a los hepatocitos véase, por ejemplo, Perez MJ, Briz O. World J. Gastroenterol. 2009, vol. 15(14), p. 1677-1689) que probablemente provoque o aumente la progresión de la fibrosis (por ejemplo, cirrosis) y aumente el riesgo de carcinoma hepatocelular véase, por ejemplo, Sorrentino P et al., Dig. Dis. Sci. 2005, vol. 50(6), p. 1130-1135 y Satapathy SK and Sanyal AJ. Semin. Liver Dis. 2015, vol. 35(3), p. 221-235). En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH incluye el tratamiento del prurito. En algunas realizaciones, el tratamiento de NASH con colestasis concomitante incluye el tratamiento del prurito. En algunas realizaciones, un sujeto con NASH con colestasis concomitante tiene prurito.
Los biomarcadores de ejemplo para NASH se proporcionan en la Tabla 6.
Tabla 6. Biomarcadores de ejemplo de NASH
Figure imgf000053_0001
Figure imgf000054_0001
Como se usa en el presente documento, los términos "tratamiento", "trato" y "tratar" se refieren a revertir, aliviar, retrasar el inicio o inhibir el progreso de una enfermedad o trastorno, o uno o más síntomas de los mismos, como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, el tratamiento puede administrarse después de que se hayan desarrollado uno o más síntomas. En otras realizaciones, el tratamiento puede administrarse en ausencia de síntomas. Por ejemplo, el tratamiento puede administrarse a un individuo susceptible antes de la aparición de los síntomas (por ejemplo, a la luz de un historial de síntomas y/o a la luz de factores genéticos u otros factores de susceptibilidad). El tratamiento también puede continuar después de que los síntomas hayan desaparecido, por ejemplo, para prevenir o retrasar su recurrencia.
Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención es, por ejemplo, una sal de adición de base de un compuesto de la invención que sea suficientemente ácida, tal como una sal de metal alcalino (por ejemplo, una sal de sodio o potasio), una sal de metal alcalinotérreo (por ejemplo, una sal de calcio o magnesio), una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporcione un catión fisiológicamente aceptable, por ejemplo, una sal con metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2 -hidroxietil)amina.
Algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden tener centros quirales y/o centros geométricos isoméricos (isómeros E y Z). Debe entenderse que la invención abarca todos los isómeros ópticos, diastereoisómeros e isómeros geométricos que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT. La invención también abarca cualquiera y todas las formas tautoméricas de los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT. Ciertos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden existir en formas no solvatadas así como solvatadas, tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Debe entenderse que la invención abarca todas las formas solvatadas que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT.
En otro aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Los excipientes pueden, por ejemplo incluir agentes de relleno, aglutinantes, desintegrantes, deslizantes y lubricantes. En general, las composiciones farmacéuticas se pueden preparar de forma convencional utilizando excipientes convencionales.
Ejemplos de agentes de relleno adecuados incluyen, pero no se limitan a, fosfato dicálcico dihidratado, sulfato de calcio, lactosa (tal como lactosa monohidratada), sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa, celulosa microcristalina, almidón seco, almidones hidrolizados y almidón pregelatinizado. En determinadas realizaciones, el agente de relleno es manitol y/o celulosa microcristalina.
Ejemplos de aglutinantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, almidón, almidón pregelatinizado, gelatina, azúcares (tales como sacarosa, glucosa, dextrosa, lactosa y sorbitol), polietilenglicol, ceras, gomas naturales y sintéticas (tales como goma arábiga y tragacanto), alginato de sodio, derivados de la celulosa (tales como hidroxipropilmetilcelulosa (o hipromelosa), hidroxipropilcelulosa y etilcelulosa) y polímeros sintéticos (tales como copolímeros de ácido acrílico y ácido metacrílico, copolímeros de ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metilo, copolímeros de metacrilato de aminoalquilo, copolímeros de ácido poliacrílico/ácido polimetacrílico y polivinilpirrolidona (povidona)). En ciertas realizaciones, el aglutinante es hidroxipropilmetilcelulosa (hipromelosa).
Ejemplos de desintegrantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, almidón seco, almidón modificado (tales como almidón (parcialmente) pregelatinizado, glicolato de almidón de sodio y carboximetil almidón de sodio), ácido algínico, derivados de celulosa (tales como carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilcelulosa y hidroxipropilcelulosa de baja sustitución (L-HPC)) y polímeros reticulados (tales como carmelosa, croscarmelosa sódica, carmelosa cálcica y PVP reticulada (crospovidona)). En ciertas realizaciones, el desintegrante es croscarmelosa sódica.
Ejemplos de deslizantes y lubricantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, ácido esteárico, behenato de glicerilo, sílice coloidal, dióxido de silicio acuoso, silicato de magnesio sintético, óxido de silicio granulado fino, almidón, lauril sulfato de sodio, ácido bórico, óxido de magnesio, ceras (tales como la cera de carnauba), aceite hidrogenado, polietilenglicol, benzoato de sodio, polietilenglicol y aceite mineral. En ciertas realizaciones, el deslizante o lubricante es estearato de magnesio o sílice coloidal.
La composición farmacéutica se puede recubrir convencionalmente con una o más capas de recubrimiento. También se contemplan capas de recubrimiento entérico o capas de recubrimiento para la liberación retardada o dirigida del compuesto de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables. Las capas de recubrimiento pueden comprender uno o más agentes de recubrimiento y, opcionalmente, pueden comprender plastificantes y/o pigmentos (o colorantes).
Ejemplos de agentes de recubrimiento adecuados incluyen, pero no se limitan a, polímeros a base de celulosa (tales como etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa (o hipromelosa), hidroxipropilcelulosa, ftalato de acetato de celulosa, acetato succinato de celulosa, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa y ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa), polímeros a base de vinilo (tales como alcohol polivinílico) y polímeros a base de ácido acrílico y derivados del mismo (tales como copolímeros de ácido acrílico y ácido metacrílico, copolímeros de ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metilo, copolímeros de metacrilato de aminoalquilo, copolímeros de ácido poliacrílico/ácido polimetacrílico). En ciertas realizaciones, el agente de recubrimiento es hidroxipropilmetilcelulosa. En otras realizaciones, el agente de recubrimiento es alcohol polivinílico.
Ejemplos de plastificantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, citrato de trietilo, triacetato de glicerilo, citrato de tributilo, ftalato de dietilo, citrato de acetiltributilo, ftalato de dibutilo, sebacato de dibutilo y polietilenglicol. En ciertas realizaciones, el plastificante es polietilenglicol.
Ejemplos de pigmentos adecuados incluyen, pero no se limitan a, dióxido de titanio, óxidos de hierro (tales como óxidos de hierro amarillo, marrón, rojo o negro) y sulfato de bario.
La composición farmacéutica puede estar en una forma que sea adecuada para administración oral, para inyección parenteral (incluyendo inyección intravenosa, subcutánea, intramuscular e intravascular), para administración tópica o para administración rectal. En una realización preferida, la composición farmacéutica está en una forma adecuada para la administración oral, tal como una tableta o una cápsula.
La dosificación requerida para el tratamiento terapéutico o profiláctico dependerá de la vía de administración, la gravedad de la enfermedad, la edad y el peso del paciente y otros factores que normalmente considera el médico tratante, al determinar el régimen y nivel de dosificación adecuados para un paciente particular.
La cantidad del compuesto que se va a administrar variará para el paciente que se esté tratando, y puede variar desde alrededor de 1 pg/kg de peso corporal hasta alrededor de 50 mg/kg de peso corporal por día. Una forma de dosis unitaria, tal como una tableta o cápsula, normalmente contendrá alrededor de 1 a alrededor de 250 mg de ingrediente activo, tal como alrededor de 1 a alrededor de 100 mg, o como alrededor de 1 a alrededor de 50 mg, o tal como alrededor de 1 a aproximadamente 20 mg, por ejemplo alrededor de 2.5 mg, o alrededor de 5 mg, o alrededor de 10 mg, o alrededor de 15 mg. La dosis diaria puede administrarse como dosis única o dividida en una, dos, tres o más dosis unitarias. Una dosis diaria administrada por vía oral de un modulador de ácidos biliares está preferiblemente entre 0.1 y 250 mg, más preferiblemente entre 1 y 100 mg, tal como entre 1 y 5 mg, tal como entre 1 y 10 mg, tal como entre alrededor de 1 y alrededor de 15 mg, o entre alrededor de 1 y alrededor de 20 mg.
En otro aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), o a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como medicamento. La invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, tal como medicamento.
En otro aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento o prevención de cualquiera de las enfermedades enumeradas en el presente documento.
Terapia de combinación
En un aspecto de la invención, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con al menos otro agente terapéuticamente activo, tal como con uno, dos, tres o más agentes terapéuticamente activos. El compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos otro agente terapéuticamente activo pueden administrarse simultáneamente, secuencialmente o por separado. Los agentes terapéuticamente activos que son adecuados para la combinación con los compuestos de fórmula (I) incluyen, pero no se limitan a, agentes activos conocidos que son útiles en el tratamiento de cualquiera de las afecciones, trastornos y enfermedades mencionados anteriormente.
En una realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con otro inhibidor de ASBT. Los inhibidores de ASBT adecuados se divulgan en los documentos WO 93/16055, WO 94/18183, WO 94/18184, WO 96/05188, WO 96/08484, WO 96/16051, WO 97/33882, WO 98/03818, WO 98/07449, WO 98/40375, WO 99/35135, WO 99/64409, WO 99/64410, WO 00/47568, WO 00/61568, WO 00/38725, WO 00/38726, WO 00/38727, WO 00/38728, WO 00/38729, WO 01/66533, WO 01/68096, WO 02/32428, WO 02/50051, WO 03/020710, WO 03/022286, WO 03/022825, WO 03/022830, WO 03/061663, WO 03/091232, WO 03/106482, WO 2004/006899, WO 2004/076430, WO 2007/009655, WO 2007/009656, WO 2011/137135, DE 19825804, EP 864582, EP 489423, EP 549967, EP 573848, EP 624593, EP 624594, EP 624595, EP 624596, EP 0864582, EP 1173205 y EP 1535913.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un aglutinante de ácidos biliares (también denominado secuestrante de ácidos biliares, o una resina), tal como colesevelam, colestiramina o colestipol. En una realización preferida de dicha combinación, el aglutinante de ácidos biliares se formula para su liberación en el colon. Ejemplos de tales formulaciones se divulgan en, por ejemplo, WO 2017/138877, WO 2017/138878, WO 2019/032026 y WO 2019/032027.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de DPP-IV, incluidas gliptinas tales como sitagliptina, vildagliptina, saxagliptina, linagliptina, gemigliptina, anagliptina, teneligliptina, alogliptina, trelagliptina, omarigliptina, evogliptina, gosogliptina y dutogliptina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de la HMG CoA reductasa, tales como fluvastatina, lovastatina, pravastatina, simvastatina, atorvastatina, pitavastatina, cerivastatina, mevastatina, rosuvastatina, bervastatina o dalvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de la absorción de colesterol tal como ezetimiba, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista de PPAR alfa, incluidos fibratos tales como clofibrato, bezafibrato, ciprofibrato, clinofibrato, clofibrida, fenofibrato, gemfibrozilo, ronifibrato y simfribrato, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista de PPAR gamma, incluidas las tiazolidinedionas tales como pioglitazona, rosiglitazona y lobeglitazona, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista dual de PPAR alfa/gamma, incluidos glitazares tales como saroglitazar, aleglitazar, muraglitazar o tesaglitazar, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista dual de PPAR alfa/delta, tal como elafibranor.
En aún otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista de pan PPAR (es decir, un agonista de PPAR que tiene actividad en todos los subtipos: a, y y 6), tal como IVA337.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con moduladores del receptor farnesoide X (FXR), incluidos agonistas de FXR tales como cafestol, ácido quenodesoxicólico, ácido 6a-etil-quenodesoxicólico (ácido obeticólico; INT-747), fexaramina, tropifexor, cilofexor y MET409.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un modulador del receptor TGR5, incluidos los agonistas de TGR5 tal como el ácido 6a-etil-23(S)-metilcólico (INT-777).
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista dual de FXR/TGR5 tal como INT-767.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con ácido ursodesoxicólico (UDCA). En aún otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con ácido nor-ursodesoxicólico (nor-UDCA).
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un modulador de FGF19, tal como NGM282.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista de FGF21, tal como BMS-986036.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de integrinas, tales como PLN-74809 y PLN-1474.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de CCR2/CCR5, tal como cenicriviroc.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de caspasa proteasa, tal como emricasan.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de galectina-3, tal como GR-MD-02.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de estearoil-CoA desaturasa (SCD), tal como aramchol (ácido araquidilamidocolanoico). En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de la quinasa 1 reguladora de la señal de apoptosis (ASK1), tal como selonsertib. En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de LOXL2, tal como simtuzumab.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de ACC, tal como GS-0976.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista del receptor p de la hormona tiroidea, tal como MGL3196.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista de GLP-1 tal como liraglutida.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un péptido similar al glucagón dual y agonistas del receptor de glucagón, tal como SAR425899. En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor del transportador de piruvato mitocondrial, tal como MSDC-0602K.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agente antioxidante, tal como la vitamina E.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de SGLT1, un inhibidor de SGLT2 o un inhibidor dual de SGLT1 y SGLT2. Ejemplos de tales compuestos son dapagliflozina, sotagliflozina, canagliflozina, empagliflozina, LIK066 y SGL5213.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de diacilglicerol O-aciltransferasa 2 (DGAT2), tal como DGAT2RX y PF-06865571. En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de ácido graso sintasa (FASN), tal como TVB-2640.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un activador de proteína quinasa activada por AMP (AMPK), tal como PXL-770.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor de glucocorticoides (GR), un antagonista del receptor de mineralocorticoides (MR) o un antagonista dual de GR/MR. Ejemplos de tales compuestos son MT-3995 y CORT-118335.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor de cannabinoide 1 (CB1), tal como IM102.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un activador del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR) y Klothop (KLB), tal como MK-3655 (anteriormente conocido como NGM-313).
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor del ligando 24 (CCL24) de quimiocina (motivo c-c), tal como CM101.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista A3, tal como PBF-1650.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor P2x7, tal como SGM 1019.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con agonistas del receptor P2Y13, tal como CER-209.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un oxisterol sulfatado, tal como Dur-928.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor de leucotrieno D4 (LTD4), tal como MN-001.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de células T kller natural tipo 1 (NKT1), tal como GRI-0621.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un compuesto antilipopolisacárido (LPS), tal como IMM-124E.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de VAP1, tal como BI1467335.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista del receptor de adenosina A3, tal como CF-102.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un activador de SIRT-1, tal como NS-20.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista del receptor 1 del ácido nicotínico, tal como ARI-3037MO.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista de TLR4, tal como JKB-121.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de cetohexoquinasa, tal como PF-06835919.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un agonista del receptor de adiponectina, tal como ADP-335.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de autotaxina, tal como PAT-505 y PF8380.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor 3 (CCR3) de quimiocina (motivo c-c), tal como bertilimumab.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un estimulador de los canales de cloruro, tal como cobiprostona y lubiprostona.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de la proteína de choque térmico 47 (HSP47), tal como ND-L02-s0201.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor del factor de transcripción de la proteína de unión a elementos reguladores de esteroles (SREBP), tal como CAT-2003 y MDV-4463.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con una biguanidina, tal como metformina.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con insulina.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de glucógeno fosforilasa y/o un inhibidor de glucosa-6-fosfatasa.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con una sulfonilurea, tal como glipizid, glibenklamid y glimepirid.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con una meglitinida, tal como repaglinida, nateglinida y ormiglitinida.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de glucosidasa, tal como acarbosa o miglitol.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de la escualeno sintasa, tal como TAK-475.
En otra realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de PTPB1, tal como trodusquemina, ertiprotafib, JTT-551 y claramina.
Preparación de compuestos
Los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar como un ácido libre o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo mediante los procesos que se describen a continuación. A lo largo de la siguiente descripción de tales procesos se entiende que, cuando sea apropiado, se agregarán grupos protectores adecuados y posteriormente se eliminarán de los diversos reactivos e intermedios de una manera que será fácilmente comprensible para un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los procedimientos convencionales para usar dichos grupos protectores, así como ejemplos de grupos protectores adecuados, se describen, por ejemplo, en Greene's Protective Groups in Organic Synthesis by P.G.M Wutz and T.W. Greene, 4a edición, John Wiley & Sons, Hoboken, 2006.
Métodos generales
Todos los disolventes utilizados fueron de grado analítico. Para las reacciones se utilizaron habitualmente disolventes anhidros disponibles en el mercado. Los materiales de partida estaban disponibles de fuentes comerciales o se prepararon de acuerdo con los procedimientos de la literatura. 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina se prepararon como se describe en WO 02/50051 (método 26). El 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina se puede preparar como se describe en WO 96/16051 (Ejemplo 21). El 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-cloro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina se puede preparar como se describe en WO 02/08211 (Ejemplo 35). 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina y 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina pueden ser preparados como se describe en WO 03/022286 (métodos 23 y 24, respectivamente). La temperatura ambiente se refiere a 20 - 25 °C. Las composiciones de mezclas de disolventes se dan como porcentajes en volumen o relaciones en volumen.
LCMS:
Nombre del instrumento: Agilent 1290 infinity II.
Método A: Fase móvil: A: HCOOH al 0.1 % en agua: ACN (95:5), B: ACN; tasa de flujo: 1.5 ml/min; columna: ZORBAX XDB C-18 (50 x 4.6 mm) 3.5 pM.
Método B: Fase móvil: A: NH4HCO310 mM en agua, B: ACN; tasa de flujo: 1.2 ml/min; columna: XBridge C8 (50 x 4.6 mm), 3.5 pM.
Método C: Fase móvil: A: HCOOH al 0.1 % en agua: ACN (95:5), B: ACN; tasa de flujo: 1.5 ml/min; columna: ATLANTIS dC18 (50 x 4 .6 mm), 5 pM.
Método D: Fase móvil: A: NH4OAC 10 mM en agua, B: ACN; tasa de flujo: 1.2 ml/min; columna: Zorbax Extend C18 (50 x 4 .6 mm) 5 pM.
Método E: Fase móvil: A: 0.1 % TFA en agua: ACN (95:5), B: TFA al 0.1 % en ACN; tasa de flujo: 1.5 ml/min; Columna: XBridge C8 (50 x 4.6 mm), 3.5 pM.
UPLC:
Nombre del instrumento: waters Acquity I Class
Método A: Fase móvil: A: HCOOH al 0.1 % en agua, B: HCOOH al 0.1 % en ACN; Tasa de flujo: 0.8 ml/min; Columna: Acquity UPLC HSS T3 (2.1 x 50) mm; 1.8 pm.
HPLC:
Nombre del instrumento: Los instrumentos de la serie Agilent 1260 Infinity II son los siguientes utilizando % con detección UV (maxplot).
Método A: Fase móvil: A: NH4HCO310 mM en agua, B: ACN; tasa de flujo: 1.0 ml/min; columna: XBridge C8 (50 x 4 .6 mm, 3.5 pm).
Método B: Fase móvil: A: TFA al 0.1 % en agua, B: TFA al 0.1 % en ACN; tasa de flujo: 2.0 ml/min; columna: XBridge C8 (50 x 4.6 mm, 3.5 pm).
Método C: Fase móvil: A: NH4OAc 10 mM en miliq de agua, B: ACN; tasa de flujo: 1.0 ml/min; columna: Phenomenex Gemini C18 (150 x 4 .6 mm, 3.0 pm).
SFC quiral:
Nombre del instrumento: THAR-SFC 80 y THAR-SFC 200 (analítico)
Relación entre CO2 y codisolvente oscila entre 60:40 y 80:20
Método A: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: YMC Amilosa-SA (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
Método B: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Chiralpak AD-H (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
Método C: Fase móvil: amoníaco 20 mM en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Celulosa YMC-SC (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
Método D: Fase móvil: metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Lux A1 (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
Método E: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en metanol; tasa de flujo: 5 ml/min; columna: Lux C4.
Método F: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Celulosa YMC-SC (250 x 4.6 mm, 5 pm).
Método G: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Lux A1 (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
Método H: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Lux A1 (250 x 4 .6 mm, 5 pm). Método I: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: CCS quiral (250 x 4 .6 mm, 5 pm).
HPLC preparativa:
Nombre del instrumento: Agilent 1290 Infinity II
Método A: Fase móvil: A: TFA al 0.1 % en agua; Fase móvil; B: TFA al 0.1 % en CAN; tasa de flujo: 2.0 ml/min; Columna: X-Bridge C8 (50 x 4 . 6 mm, 3.5 pM).
Método B: Fase móvil: A: NH4OAc 10 mM en agua; B: ACN; tasa de flujo: 35 ml/min; columna: X select C18 (30 x 150 mm, 5 pm).
Método C: Fase móvil: A: NH4HCO310 mM en agua; B: ACN; tasa de flujo: 1.0 ml/min; columna: XBridge C8 (50 x 4 .6 mm, 3.5 pm).
Método D: Fase móvil: A: HCOOH al 0.1 % en agua; B: ACN; tasa de flujo: 1.0 ml/min; columna: X-select C18 (30 * 150 mm, 5 |jm).
SFC preparativa quiral:
Nombre del instrumento: PIC SFC 100/PIC SFC 400
Relación entre CO2 y codisolvente oscila entre 60:40 y 80:20
Método A: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: YMC Amilosa-SA (250 * 30 mm, 5 jm).
Método B: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Chiralpak AD-H (250 * 30 mm, 5 jm).
Método C: Fase móvil: amoníaco 20 mM en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Celulosa YMC-SC (250 * 30 mm, 5 jm).
Método D: Fase móvil: metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: CCS quiral (250 * 30 mm, 5 jm).
Método E: Fase móvil: metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Lux A1 (250 * 30 mm, 5 jm).
Método F: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en IPA; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: Lux A1 (250 * 30 mm, 5 jm). Método G: Fase móvil: isopropilamina al 0.5 % en metanol; tasa de flujo: 3 ml/min; columna: CCS quiral (250 * 30 mm, 5 jm ).
Abreviaturas
ACN acetonitrilo
Boc ferf-butoxicarbonilo
DABCO 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano
MCD diclorometano
DIPEA W,W-diisopropiletilamina
DMF dimetilformamida
HATU 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio 3-óxido hexafluorofosfato
IPA alcohol isopropílico
LCMS cromatografía líquida - espectrometría de masas
HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento
PE éter de petróleo
SFC cromatografía de fluidos supercríticos
TFA ácido trifluoroacético
THF tetrahidrofurano
TLC cromatografía en capa fina
Xphos 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo
UPLC cromatografía líquida de ultra rendimiento
La invención se describirá ahora mediante los siguientes ejemplos.
EJEMPLOS
Intermedio 1
(E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000062_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (4 g, 8.93 mmol) en DMF seco (50 ml), (E)-3-bromoacrilato de etilo (2.4 g, 13.4 mmol), carbonato de potasio (2.46 g, 17.87 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.287 g, 0.89 mmol) se añadieron a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 90 °C durante 12 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para producir el compuesto del título como una mezcla de isómeros (E)- y (Z) (relación 1.7:1). Esta mezcla se separó por HPLC preparativa (método A) para proporcionar la primera fracción de elución correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción de elución correspondiente al isómero (E), con un rendimiento global del 73 %.
Isómero (E): Rendimiento: 39 % (1.9 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.72 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.32-7.27 (m, 2H), 7.19-7.16 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.48 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.14-4.07 (m, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.40-1.31 (m, 4H), 1.27-1.08 ( m, 11H), 0.75-0.73 (m, 6H). LCMS: (Método C) 546.1 (M+H), Rt. 3.47 min, 97.89 % (máx.)
Isómero (Z): Rendimiento: 34 % (1.65 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.47 (s, 1H), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.20-7.19 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 1H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.26 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.43-1.36 (m , 2H), 1.33-1.30 (m, 2H), 1.22 (m, 3H), 1.10-0.98 (m, 8H), 0.76­ 0.73 (m, 6H). LCMS: (Método C) 546.1 (M+H), Rt. 3.34 min, 98.32 % (máx.).
Intermedio 2
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000062_0002
A una solución agitada de ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (Ejemplo 1; 1.0 g, 1.93 mmol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (10 ml), se añadió gota a gota h No 3 (65%, 0.183 g, 2.90 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (5 ml) a 0 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM y la capa orgánica se lavó con agua (30 ml) y solución de NaHCO3 saturado (30 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2So4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El compuesto crudo se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 92 % (1 g, sólido color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, CDCl3): 58.14 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.69 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H ), 3.20 (s, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.38-1.24 (m, 12H), 0.89 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 562.0 (M+H), Rt. 2.73 min, 98.4 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.67 min, 99.3 % (máx.). Intermedio 3
(E)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000063_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (0.5 g, 1.1 mmol) en DMF seco (20 ml), (E)-3-bromoacrilato de etilo (0.59 g, 3.3 mmol), carbonato de sodio (0.35 g, 3.3 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.035 g, 0.1 mmol) se añadieron a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 85-90 ° C durante 5 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo como una mezcla de los isómeros (E)- y (Z) (relación 1:1). La mezcla se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 8-9 % EtOAc/PE; Gel de sílice: malla 230-400) para producir la primera fracción de elución correspondiente al isómero (E) y la segunda fracción eluyente correspondiente al isómero (Z)
Isómero (E): Rendimiento: 32 % (0.28 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.80 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.38-7.25 (m, 4H), 7.10-7.04 (m, 2H), 5.47 (d, J = 12.3 Hz, 1H ), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.81-3.78 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 1.54-1.50 (m, 1H), 1.43-1.30 (m, 3H), 1.21 ( t, J = 7.08 Hz, 3H), 1.12-0.98 (m, 4H), 0.74-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 552.1 (M 2), Rt. 3.33 min, 97.8 % (máx.).
Isómero (Z): Rendimiento: 41 % (0.23 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO- de): 57.60 (s, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.21-7.19 (m, 3H), 7.07-7.03 (m, 2H), 5.32 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.78-3.74 (m, 2H), 3.42-3.38 (m, 2H), 1.51-1.29 (m, 4H), 1.22 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.08-1.01 (m, 4H), 0.73-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 552.1(M 2), Rt. 3.18 min, 98.2 % (máx.).
Intermedio 4
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-ciclopropil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000063_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (3 g, 6.1 mmol) en una mezcla de tolueno y agua (30 ml, 9:1), se añadieron 2-ciclopropil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2.04 g, 12.1 mmol) y KíPO4 (3.86 g, 18.0 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 10 min. Entonces se añadió Pd(dppf)Cl2 • DCM (0.25 g, 0.3 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se filtró a través de celite, se lavó con EtOAc y la parte orgánica combinada se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (EtOAc al 5-8 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 99 % (3 g, crudo, goma de color amarillo).
LCMS: (Método A) 456.2 (M+H), Rt. 3.58 min, 92.56 % (máx.).
Intermedio 5
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-ciclopropil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000063_0003
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-ciclopropil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 4; 3 g, 6.6 mmol) en DCM (30 ml) a 0 °C, se añadió BBr3 (3.2 ml, 33.0 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C. Se añadieron gota a gota EtoAc (10 ml) y agua enfriada con hielo (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A continuación, la mezcla de reacción se sometió a partición entre agua (15 ml) y DCM (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 20-23 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 69 % (2 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 510.04 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.18-7.14 (m, 2H), 6.88-6.86 (m, 2H), 6.80-6.78 (m, 1H), 6.40 (s, 1H) , 3.61 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.08-2.04 (m, 1H), 1.41-1.31 (m, 4H), 1.20-1.06 (m, 8H), 0.88-0.86 (m, 2H) , 0.79-0.77 (m, 6H), 0.44-0.43 (m, 2H). LCMS: (Método A) 442.1 (M+H), Rt. 3.22 min, 92.53 % (máx.).
Intermedio 6
(E)-3-((3,3-dibutil-7-ciclopropil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((3,3-dibutil-7-ciclopropil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000064_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-ciclopropil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 5; 2 g, 4.5 mmol) en tolueno seco (20 ml), (E)-3-bromoacrilato de etilo (1.22 g, 6.8 mmol), Na2CO3 (0.96 g, 9.0 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.13 g, 0.4 mmol) se añadieron a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para dar el material crudo. El material obtenido que contenía una relación de 1:1 del isómero (E)- y el (Z) se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400). La mezcla obtenida se purificó adicionalmente por HPLC preparativa (método A) para proporcionar la primera fracción de elución correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción de elución correspondiente al isómero (E). Isómero (Z): Rendimiento: 26 % (0.65 g, goma blanquecina). 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.47 (s, 1H), 7.28-7.24 (m, 3H), 7.07-7.06 (m, 2H), 6.96-6.93 (m, 1H), 6.42 (s, 1H), 5.24 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.12-2.11 (m, 1H), 1.41-1.39 (m, 2H), 1.33-1.30 (m, 2H), 1.10-1.07 (m, 5H), 1.00-0.95 (m, 4H), 0.76-0.72 (m, 6H), 0.51-0.50 (m, 2H). LCMS: (Método A) 540.3 (M+H), Rt.
3.51 min, 98.18 % (máx.).
Isómero (E): Rendimiento: 12 % (0.29 g, goma blanquecina). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 57.81 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.29-7.26 (m, 2H), 7.13-7.10 (m, 2H), 6.99-6.95 (m, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.44 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.14­ 4.10 (m, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.16 (s, 2H), 1.94-1.91 (m, 1H), 1.41-1.31 (m, 4H), 1.22-1.18 (m, 4H), 1.09-1.07 (m, 6H), 1.01- 0.89 (m, 3H), 0.75-0.74 (m, 6H), 0.43-0.41 (m , 2H). LCMS: (Método A) 540.3 (M+H), Rt. 3.65 min, 97.68 % (máx.).
Intermedio 7
1.1- dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000064_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (0.8 g, 1.6 mmol) en tolueno (8 ml), se añadieron dimetilamina (2M en THF; 2.4 ml, 4.8 mmol), Cs2CO3 (1.31 g, 4.0 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 10 min. Entonces se añadieron Pd(OAc)2 (0.036 g, 0.16 mmol) y XPhos (0.077 g, 0.16 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 90 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc. La parte orgánica combinada se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 13-15 % de EtOAc/PE, gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 54 % (0.4 g, goma de color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.27 (s, 1H), 7.23-7.19 (m, 2H), 7.00-6.98 (m, 2H), 6.86-6.82 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 3.85 (s, 3H) , 3.65 (s, 2H), 3.20 (s, 2H), 2.66 (s, 6H), 1.40-1.32 (m, 4H), 1.20-1.12 (m, 8H), 0.79-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 459.3 (M+H), Rt. 3.40 min, 92.77 % (máx.).
Intermedio 8
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000065_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 7; 0.4 g, 0.87 mmol) en DCM (4 ml) a 0 °C, se añadió BBr3 (0.42 ml, 4.3 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C. La reacción se inactivó mediante la adición gota a gota de metanol (5 ml) y luego se añadió agua enfriada con hielo (10 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (2 * 15 ml), se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para dar el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15-18 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 66 % (0.33 g, goma de color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.83 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.20-7.16 (m, 2H), 6.94-6.92 (m, 2H), 6.81-6.79 (m, 1H), 6.31 (s, 1H) , 3.62 (s, 2H), 3.14 (s, 2H), 2.66 (s, 6H), 1.34-1.24 (m, 4H), 1.16-1.06 (m, 8H), 0.85-0.77 (m, 6H). LCMS: (Método A) 445.2 (M+H), Rt. 3.10 min, 81.86 % (máx.)
Intermedio 9
(E)-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000065_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 8; 2 g, 4.5 mmol) en tolueno (20 ml), se añadieron (E)-3-bromoacrilato de etilo (1.22 g, 6.8 mmol), carbonato de sodio (0.96 g, 9.0 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.13 g, 0.4 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 14 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en EtOAc (25 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y luego se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 30 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título como una mezcla de los isómeros (Z) y (E). La mezcla obtenida se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (método B) para proporcionar la primera fracción eluida correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluida correspondiente al isómero (E).
Isómero (Z): Rendimiento: 13 % (0.05 g, sólido gomoso blanco). 1H RMN (300 MHz, DMSO-CÍ6): 57.36 (s, 1H), 7.30­ 7.25 (m, 2H), 7.14-7.12 (m, 2H), 7.02 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.98-6.95 (m, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.20 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.13­ 4.06 (m, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.71 (s, 6H), 1.41- 1.32 (m, 4H), 1.20 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 1.10-1.01 (m, 8H), 0.76-0.72 (m, 6H). lCm S: (Método A) 543.3 (M+h ), Rt. 3.52 min, 87.35 % (máx.). Isómero (E): Rendimiento: 20 % (0.08 g, sólido gomoso blanco). LCMS: (Método A) 543.3 (M+H), Rt. 3.65 min, 95.73 % (máx.).
Intermedio 10
fZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000066_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (12.0 g, 26.80 mmol) en DMF (120 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH al 60 % (2.6 g, 53.60 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. A continuación, se añadió gota a gota 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (10.88 g, 53.60 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua enfriada con hielo (150 ml). La parte acuosa se extrajo con EtOAc (200 ml). Luego, la capa orgánica se lavó con salmuera (150 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 12-13 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 72 % (8.2 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.67 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.32-7.30 (m, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.00 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.44-1.30 (m, 4H) , 1.11-0.99 (m, 8H), 0.76 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 550.1 (M++H), Rt. 3.30 min, 98.40 % (máx.).
Intermedio 11
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-7-vinil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000066_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (1.2 g, 24.2 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (13 ml; 12:1), se añadieron éster de pinacol de ácido vinil borónico (0.56 g, 36.3 mmol) y carbonato de potasio (1.0 g, 72.6 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 10 min. Luego se añadió Pd(dppf)2Cl2 (0.09 g, 0.12 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se filtró a través de celite. El filtrado resultante se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 19 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 85 % (0.91 g, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.28 (s, 1H), 7.20-7.13 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.00-6.90 (m, 2H), 6.87-6.83 (m, 2H), 5.68 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.66-3.80 (m, 2H), 3.30 (s, 2H), 2.00-1.31 (m, 4H), 1.18-1.04 (m, 8H), 0.79-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método C) 442.1 (M+H), Rt. 3.47 min, 91.5% (máx.).
Intermedio 12
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000066_0003
A una solución desgasificada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-7-vinil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 11; 0.6 g, 1.35 mmmol) en etanol (10 ml), se añadió Pd/C (60 mg, 10 %) y la mezcla resultante se agitó durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por Lc Ms ), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con etanol. El filtrado resultante se concentró al vacío para dar el compuesto del título. Rendimiento: 91.3 % (0.55 g, sólido gomoso blanco).
LCMS: (Método A) 444.2 (M+H), Rt. 3.63 min, 67.11 % (máx.).
Intermedio 13
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000067_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 12; 0.55 g, 1.23 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C, se añadió BBr3 (0.59 ml, 6.19 mmol) gota a gota y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con metanol (0.5 ml) y luego se añadió agua (15 ml). La capa acuosa se separó, se extrajo con DCM (2 x 15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para dar el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 40 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 76 % (0.4 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 59.96 (s, 1H), 7.35-7.32 (m, 1H), 7.30-7.16 (m, 2H), 6.93-6.87 (m, 2H), 6.81-6.77 (m, 2H), 5.79-3.55 (m, 2H), 3.20 (s, 2H), 1.40-1.24 (m, 4H), 1.18-1.14 (m, 10H), 1.10-1.00 (m, 9H). LCMS: (Método A) 430.1 (M+H), Rt. 3.22 min, 53.5% (máx.).
Intermedio 14
(Z)-3-((3,3-dibutil-7-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (E)-3-((3,3-dibutil-7-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000067_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 13; 0.4 g, 0.92 mmol) en una mezcla de tolueno (5 ml) y DMF (2 ml), se añadieron (E)- 3-bromoacrilato de etilo (0.33 g, 1.86 mmol), carbonato de sodio (0.25 g, 2.32 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.03 g, 0.09 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 14 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en EtOAc (25 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y concentró al vacío. El material crudo obtenido se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 30 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título como una mezcla de los isómeros (Z) y (E).
Isómero (Z): Rendimiento: 19.5 % (96 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.51 (s, 1H), 7.34­ 7.26 (m, 3H), 7.11-7.13 (m, 2H), 7.00-6.94 (m, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.25 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.81­ 3.61 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 1.51-1.32 (m, 5H), 1.24-1.20 (m, 5H), 1.07-1.03 (m, 8H), 0.77-0.73 (m, 8H). LCMS: (Método D) 528.2 (M+H), Rt. 3.44 min, 79.78 % (máx.).
Isómero (E): Rendimiento: 24.5 % (120 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.80 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.17-7.16 (m, 1H), 7.91-6.99 (m, 2H), 6.85 (s, 1H), 5.48 ( d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.15-4.10 (m, 2H), 3.82-3.71 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 1.49-1.31 (m, 4H), 1.27-1.20 (m, 6H), 1.09-1.02 (m, 8H), 1.01-0.99 (m, 8H). LCMS: (Método A) 528.2 (M+H), Rt. 3.7 min, 74.4 % (máx.).
Intermedio 15
1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000068_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (1 g, 2.21 mmol) en metóxido de sodio (21 %, 4.42 ml, 4.42 mmol), se añadió CuBr (0.1 g, 0.31 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se calentó durante 6 h a 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y la masa cruda resultante se sometió a partición entre EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml), la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 5 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 41 % (0.36 g, sólido color rosa pálido).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.71 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.19 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.80 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 2.45 (s, 2H), 1.62-1.51 (m, 2H), 1.40-1.31 (m, 2H), 1.28-1.18 (m, 4H), 0.78-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método A) 404.2 (M+H), Rt. 2.64 min, 94.56 % (máx.).
Intermedio 16
(EJ-3-((3-butil-3-etil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y fZj-3-((3-butil-3-etil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000068_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 15; 0.36 g, 0.89 mmol) en DMF (10 ml), se añadieron (E)-3-bromoacrilato de etilo (0.32 g, 1.78 mmol), carbonato de potasio (0.25 g, 1.78 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (5 mg, 0.016 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 90 °C durante 24 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante (1:1 para ambos diastereoisómeros) se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (método B) para proporcionar la primera fracción eluida correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluida correspondiente al isómero (E) con un rendimiento combinado del 53 %.
Isómero (Z): Rendimiento: 0.13 g (sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.49 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.03-6.91 (m, 2H), 6.55 (s, 1H), 5.16 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.90-3.72 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.31 (s, 2H), 1.42-1.33 (m, 3H), 1.32-1.29 (m, 4H), 1.19- 1.02 (m, 4H), 0.76-0.71 (m, 6H). LCm S: (Método c ) 502.1 (M+H), Rt. 3.03 min, 99.13 % (máx.). Isómero (E): Rendimiento: 0.12 g (sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.72 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 2H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.40 ( d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.92-3.75 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.31 (m, 2H), 1.36-1.31 (m, 3H), 1.24-1.20 (m, 4H), 1.21- 0.95 (m, 4H), 0.76-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método C) 502.1 (M+H), Rt. 3.12 min, 99.23 % (máx.).
Intermedio 17
1.1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000068_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (0.8 g, 1.62 mmol) en DCM (20 ml) a 0 °C, se añadió BBr3 (0.78 ml, 8.1 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C. Se añadieron gota a gota EtOAc (10 ml) y agua enfriada con hielo (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Luego, la mezcla de reacción se sometió a partición entre agua (15 ml) y DCM (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 90 % (700 mg, sólido blanquecino, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.83 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.23 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.99 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.88 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.80-3.72 (m, 2H), 3.27 (s, 2H), 1.34-1.31 (m, 4H), 1.13-0.99 (m, 8H), 0.75-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 480.1 (M+), Rt. 3.19 min, 89.95 % (máx.).
Intermedio 18
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000069_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 17; 0.9 g, 1.87 mmol) en metóxido de sodio (21 %, 10 ml, 10.2 mmol), se añadió CuBr (0.15 g, 1.05 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 6 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y la masa cruda resultante se sometió a partición entre EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 5 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 78 % (0.63 g, goma color rosa claro).
UPLC: (Método A) 432.5 (M+H), Rt. 1.93 min, 90.07 % (máx.).
Intermedio 19
(EJ-3-((3,3-dibutil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y fZj-3-((3,3-dibutil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000069_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 18; 0.63 g, 1.45 mmol) en DMF (10 ml), se añadieron (EJ-3-bromo-acrilato de etilo (0.52 g, 2.90 mmol), carbonato de sodio (0.39 g, 3.62 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0.05 g, 0.14 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 90 °C durante 24 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante, que contenía una relación de 1:1 de isómeros (E) y (Z), se purificó más mediante HPLC preparativa (método B) para proporcionar la primera fracción eluida correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluida correspondiente al isómero (E) con un rendimiento combinado del 60 %. Isómero (Z): Rendimiento: 0.23 g (sólido blanquecino); 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.46 (s, 1H), 7.28-7.27 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 2H), 7.01-7.00 (m, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.14 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 7 Hz, 2H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.32-3.30 (m, 2H), 1.21-1.19 (m, 4H), 1.18-1.07 (m, 11H), 0.75-0.73 (m, 6H).
Isómero (E): Rendimiento: 0.23 g (sólido blanquecino); 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 7.69 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 2H), 7.01-6.99 (m, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.37 ( d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.85 (bs, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.32 (s, 2H), 1.40-1.31 (m, 4H), 1.21-1.09 (m, 11H), 1.07-1.00 ( m, 6H).
Intermedio 20
1,1 -dióxido de 5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000070_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (2 g, 4.47 mol) en DMF seca (20 ml), se añadió gota a gota N-bromosuccinimida (0.875 g, 4.92 mmol) disuelta en Dm F seca (20 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se vertió en hielo picado. El sólido resultante se filtró, se lavó con agua (2 x 20 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 89 % (2.1 g, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.65 (bs, 1H), 7.32 - 7.30 (m, 3H), 6.82 - 6.81 (m, 2H), 6.75 (s, 1H), 3.80 - 3.50 (m, 2H), 3.25 -3.15 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.46 - 1.26 (m, 4H), 1.16 -1.08 (m, 8H), 0.82 -0.80 (m, 6H). UPLC: (Método A) 526.4 (M+H), Rt. 1.42 minutos, 94.32 %.
Intermedio 21
(E)-3-((5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000070_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 20; 0.49 g, 0.93 mmol) en DMF (5 ml), se añadieron (E)-3-bromoacrilato de etilo (0.25 g, 4.92 mmol) y carbonato de potasio (0.26 g, 1.86 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se calentó a 100 °C durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (20 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante, que contenía una relación de 1:1 de los isómeros (E) y (Z), se purificó por HPLC preparativa (Método D) para proporcionar la primera fracción eluida correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluyente correspondiente al isómero (E) con un rendimiento combinado del 50 %.
Isómero (Z): Rendimiento: 0.12 g (sólido blanquecino); 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.49 (s, 1H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.01 - 6.99 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.29 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.92 - 3.55 (m, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.45 - 1.05 (m, 14H), 0.80 - 0.77 (m, 6H). LCMS: (Método C) 624.0 (M), Rt. 3.43 min, 96.50 % (máx.).
Isómero (E): Rendimiento: 0.13 g (sólido blanco); 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.77 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 2H), 7.42 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.06 -7.04 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.55 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.92 - 3.55 (m, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.45 - 1.04 (m, 14H), 0.80 - 0.77 (m, 6H). LCMS: (Método C) 624.0 (M), Rt.
3.54 min, 97.99 % (máx.).
Intermedio 22
1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000071_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (1.0 g, 2 mmol) en DMF seca (15 ml) a 0 °C, se añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral) (0.09 mg, 2.40 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 10 min. Luego se añadió yoduro de metilo (0.4 ml, 6 mmol) a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua enfriada con hielo (2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 96 % (900 mg, sólido gomoso de color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.45 (s, 1H), 7.26 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 -7.16 (m, 1H), 7.06 -7.04 (m, 2H), 6.93 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.70 -3.61 (m, 2H), 3.10 (s, 2H), 1.51 -0.90 (m, 8H), 0.80 -0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 468.1 (M 2), Rt. 3.21 min, 96.82 % (máx.).
Intermedio 23
1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000071_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 22; 0.9 g, 1.90 mmol) en DMF seca (15 ml), se añadió tiometóxido de sodio (687 mg, 9.5 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se inactivó con agua enfriada con hielo (2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 93 % (750 mg, sólido color marrón pálido).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.16 -7.12 (m, 3H), 6.85 -6.83 (m, 2H), 6.71 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 3.74 -3.61 (m, 2H), 3.12 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.70 - 1.08 (m, 8H), 0.80 - 0.74 (m, 6H). UPLC: (Método A) 420.5 (M+H), Rt.
1.86 min, 91.84 % (máx.).
Intermedio 24
(EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y fZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato etilo
Figure imgf000071_0003
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 23, 0.75 g, 1.79 mmol) en DMF seca (20 ml), se añadieron (E)-3-bromoacrilato de etilo (480 mg, 2.68 mmol) y carbonato de potasio (494 mg, 3.57 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 90 °C durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2S o4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante, que contenía una relación 1: 1 de los isómeros (E) y (Z), se purificó por HPLC preparativa (Método D) para producir la primera fracción de elución correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluyente correspondiente al isómero (E) con un rendimiento combinado del 55 %.
Isómero (Z): Rendimiento: 29 % (0.21 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DM SO d): 57.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.31 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.00 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 5.51 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.85 - 3.62 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.43 - 1.00 (m, 11H), 0.76 - 0.73 (m, 6H). LCMS: (Método C) 518.1 (M+H), Rt. 3.25 min, 99.38 % (máx.).
Isómero (E): Rendimiento: 26 % (0.22 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.48 (s, 1H), 7.29 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.27 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.75 - 3.74 (m, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.55 - 0.98 (m, 11H), 0.76 - 0.75 (m, 6H). LCMS: (Método C) 518.1 (M+H), Rt. 3.15 min, 98.88 % (máx.).
Intermedio 25
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000072_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 20; 1.5 g, 2.84 mmol) en DMF seco (5 ml), se añadieron metóxido de sodio (5 ml, 20 % en metanol) y CuBr (0.06 g, 0.284 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 24 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (15 ml). La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 44 % (0.600 g, sólido gomoso de color marrón). LCMS: (Método C) 477.68 (M+H), Rt. 3.51 min, 76.40 % (máx.).
Intermedio 26
(E)-3-((3,3-dibutil-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (Z)-3-((3,3-dibutil-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000072_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 25; 0.65 g, 1.36 mmol) en DMF seco (10 ml), se añadieron a temperatura ambiente 3-(E)-bromoacrilato de etilo (0.88 g, 4.92 mmol) y carbonato de potasio (0.56 g, 4.08 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por t Lc ), la mezcla de reacción se inactivó con agua (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante, que contenía una relación 1: 1 de los isómeros (E) y (Z), se purificó por HPLC preparativa (Método D) para producir la primera fracción de elución correspondiente al isómero (Z) y la segunda fracción eluyente correspondiente al isómero (E) con un rendimiento combinado del 51 %.
Isómero (Z): Rendimiento: 25 % (0.20 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.42 (s, 1H), 7.25 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.43 (s, 1H), 5.22 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.82 - 3.65 (m, 5H), 3.40 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.42 - 0.99 (m, 15H), 0.76 - 0.73 (m, 6H).
Isómero (E): Rendimiento: 26 % (0.21 g, sólido blanquecino).1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.69 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 5.42 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.82 - 3.65 (m, 5H), 3.42 (s, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.42 - 0.97 (m, 15H), 0.79 - 0.75 (m, 6H).
Intermedio 27
('EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-hidroxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000073_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 26; 0.10 g, 0.17 mmol) en DCM (5 ml) a -78 °C, BBr3 (1 M en DCM, 0.3 ml, 0.26 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se añadieron gota a gota EtoAc (10 ml) y agua enfriada con hielo (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Luego, la mezcla de reacción se sometió a partición entre agua (15 ml) y DCM (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 100 mg (sólido gomoso de color marrón crudo). LCMS: (Método C) 562.2 (M+H), Rt. 3.09 min, 73.17 %(máx.).
Intermedio 28
('EJ-3-((3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-acrilato de etilo
Figure imgf000073_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 3; 0.35 g, 0.64 mmol) en una mezcla de MeOH y agua (10 ml, relación 4:1), se añadieron NH4Cl (0.03 g, 5.08 mmol) y polvo de Zn (0.21 g, 3.18 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 65 °C durante 2 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 15 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 52 % (0.150 g, sólido gomoso blanco).
LCMS: (Método A) 472.1 (M+H), Rt. 3.12 min, 98.24 % (máx.).
Intermedio 29
Ácido f£J-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi) acrílico
Figure imgf000073_0003
A una solución agitada de ácido (EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (Ejemplo 4; 0.56 g, 1.07 mol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (l0 ml), se añadió HNO3 (65 %; 0.101 g 1.6 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (5 ml) gota a gota a 0 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El material crudo se envió como tal al siguiente paso. Rendimiento: 500 mg (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método A) 565.0 (M+-H), Rt.2.53 min, 70.98 % (Max).
Intermedio 30
Ácido (EJ-3-((5-(4-enil)-7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000074_0001
A una solución agitada de ácido (EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)ácido (intermedio 29; 0.225 g, 0.39 mol) en THF (10 ml), HCl concentrado (0.1 ml) y SnCl2 (0.225 g 1.19 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml), se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con EtOAc (2 * 15 ml). El filtrado resultante se lavó con agua (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La capa orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 160 mg (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método A) 537.8 (M+H), Rt. 2.17 min, 90.93 % (máx.).
Intermedio 31
(EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000074_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 1; 0.33 g, 0.59 mmol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (3 ml), se añadió HNO3 (65 %, 0.056 g, 0.89 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (1 ml) a 0 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El material crudo se envió como tal al siguiente paso. Rendimiento: 300 mg (sólido color marrón, crudo).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.04 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.65 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 9.6 Hz, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.31-1.25 (m, 2H), 1.23-1.14 (m, 10H), 0.83-0.81 ( m, 6H). LCMS: (Método D) 591.2 (M++H), Rt. 4.04 min, 93.4% (máx.).
Intermedio 32
f£J-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo
Figure imgf000075_0001
A una solución agitada de ácido etil (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi) acrílico (intermedio 31; 0.8 g, 1.42 mol) en DCM, se añadió cloruro de oxalilo (0.24 ml, 2.84 mmol) a 0 °C. Luego se añadió DMF (0.05 ml) a esta temperatura y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 0 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con MeOH (10 ml) y se diluyó con DCM (15 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y solución de NaHCO3 saturado (15 ml). A continuación, la capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El material crudo se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 775 mg (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método C) 577.1 (M++H), Rt. 3.07 min, 78.21 % (máx.).
Intermedio 33
Metilo (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato
Figure imgf000075_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo (intermedio 32; 0.775 g, 1.34 mol) en THF (10 ml), se añadieron HCl concentrado (1 ml) y SnCl2 (1.01 g, 5.37 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado (25 ml), se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con EtOAc (15 ml). El filtrado resultante se lavó con agua (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 0.7 g (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método C) 547.1 (M++H), Rt. 2.87 min, 79.4 % (máx.).
Intermedio 34
(EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-((metoxicarbonil)amino)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1.5 benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo
Figure imgf000075_0003
A una solución agitada de f£J-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo (intermedio 33, 0.06 g, 0.1 mol) en DCM (5 ml), trietilamina (0.03 g, 0.3 mmol) a 0 °C. Luego se añadió cloroformiato de metilo (0.014 g, 0.15 mmol) a la mezcla de reacción y se agitó durante 3 ha TA. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml) y la capa orgánica se lavó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El material crudo se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 60 mg (sólido blanquecino, crudo).
LCMS: (Método A) 605.2 (M+H), Rt. 2.97 min, 66.2 % (máx.).
Intermedio 35
('EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000076_0001
A una solución agitada de ('EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 31; 0.4 g, 0.67 mmol) en THF (5 ml), se añadieron HCl concentrado (0.1 ml) y SnCl2 (0.512 g, 2.71 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 12 h a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml), se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con EtOAc (2 x 15 ml). El filtrado resultante se lavó con agua (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La capa orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional.
Rendimiento: 0. 38 g (sólido color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.66 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.04 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 6.59 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 6.31 (s, 1H), 5.37 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.10 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.45-1.36 (m, 4H), 1.19-1.01 (m, 8H), 0.91 (t, J = 14.4 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 561.2 (M++H), Rt. 2.99 min, 89.73 % (máx.).
Intermedio 36
('EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(dimetilamino)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo
Figure imgf000076_0002
A una solución de (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 35; 100 mg, 0.18 mmol) en metanol (3 ml) y AcOH (0.5 ml), se añadió formaldehído (37 %, 9.2 mg, 0.18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Entonces se añadió NaCNBH3 (23 mg, 0.366 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 70 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título (producto de transesterificación en presencia de metanol). Rendimiento: 43 % (46 mg, sólido color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.70 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.20 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.76 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.38 (s, 1H), 5.45 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 2.89 (s, 6H), 2.08 (s, 3H), 1.48-1.31 (m, 4H) , 1.24-0.84 (m, 8H), 0.74 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 575.3 (M+-H), Rt. 3.39 min, 96.49 % (máx.). Intermedio 37
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-5-(4-n¡trofen¡l)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000077_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co (Ejemplo 11; 2.4 g, 4.48 mmol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (24 ml), se añad¡ó HNO3 (65 %, 0.42 g, 6.70 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (12 ml) gota a gota a 0 °C. A cont¡nuac¡ón, la reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (25 ml) y la capa orgán¡ca se lavó con agua (3 x 20 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera (2 * 20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. El d¡solvente se evaporó al vacío para proporc¡onar el compuesto del título en crudo, que se env¡ó al s¡gu¡ente paso como tal s¡n n¡nguna pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.
Rend¡m¡ento: 2.53 g (sól¡do color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.71 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8 .8 Hz, 2H), 7.70-7.65 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 7.01-6.86 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 2.67 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.59-1.55 (m, 2H), 1.31-1.14 (m, 10H), 0.84-0.80 (m, 6 H). LCMS: (Método E) 579.2 (M+-H), Rt. 3.26 m¡n, 93.55 % (máx.).
Intermed¡o 38
Ácido (ZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000077_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-5-(4-n¡trofen¡l)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co (¡ntermed¡o 37; 2.53 g, 4.30 mmol) en THF (25.3 ml) se añad¡eron HCl concentrado (2.53 ml) y SnCl2 (3.29 g, 17.40 mmol) a temperatura amb¡ente y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 80 °C durante la noche. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), se añad¡ó agua (20 ml) a la mezcla de reacc¡ón y el sól¡do resultante se f¡ltró a través de una capa de cel¡te que se lavó con EtOAc (50 ml). La parte orgán¡ca se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 6-7 % en DCM; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 89 % (2.14 g, sól¡do blanquec¡no).
LCMS: (Método C) 548.9 (M-H), Rt. 2.47 m¡n, 95.69 % (máx.).
Intermed¡o 39
('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000078_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((5-(4-aminofeml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de et¡lo (¡ntermed¡o 35; 0.06 g, 0.1 mol) en DCM (5 ml) se añad¡ó tr¡et¡lam¡na (0.03 ml, 0.21 mmol) a 0 °C. Luego se añad¡ó cloruro de p¡valoílo (0.016 g, 0.12 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (15 ml) y la parte orgán¡ca se lavó con soluc¡ón de NaHCO3 saturado (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío para proporc¡onar el compuesto del título en crudo, que se env¡ó al s¡gu¡ente paso s¡n n¡nguna pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. Rend¡m¡ento: 65 mg (sól¡do blanquec¡no, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.16 (s, 1H), 7.72 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.16 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 6.60 (s, 1H), 5.48 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.12 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 3.74 (bs, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.32-1.22 (m, 6H), 1.20-1.18 (m, 6H), 1.11 (t, J = 18.4 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 645.3 (M++H), Rt. 3.21 m¡n, 91.1 % (máx.).
Intermed¡o 40
('EJ-3-((5-(4-((butox¡carbon¡l)am¡no)fen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1.5 benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000078_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 35; 0.035 g, 0.06 mmol) en DCM (3 ml), se añad¡ó gota a gota a 0 °C tr¡et¡lam¡na (0.012 g, 0.12 mmol). Luego, se añad¡ó carbonoclor¡dato de but¡lo (0.011 g, 0.08 mmol) a la mezcla de reacc¡ón y se cont¡nuó ag¡tando durante 2 ha TA. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (5 ml) y la capa de DCM se lavó con soluc¡ón de NaHCO3 saturado (20 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío para proporc¡onar el compuesto del título en crudo que se env¡ó al s¡gu¡ente paso s¡n n¡nguna pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. Rend¡m¡ento: 41 mg (sól¡do blanquec¡no, crudo). LCMS: (Método A) 660.9 (M++H), Rt. 3.32 m¡n, 85.01 % (máx.).
Intermed¡o 41
('EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(3,3-dimetilbutanamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000079_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((5-(4-aminofeml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8 -il)oxi)acrilato de et¡lo Se añad¡ó tr¡et¡lam¡na (0.074 g, 0.53 mmol) gota a gota a 0 °C a (¡ntermed¡o 35; 0.150 g, 0.26 mmol) en DCM (5 ml). Luego se añad¡ó cloruro de 3,3-d¡met¡lbutanoílo (0.054 g, 0.4 mmol) a la mezcla de reacc¡ón y se cont¡nuó ag¡tando durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (morntorizada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (5 ml) y la capa orgán¡ca se lavó con soluc¡ón de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío para proporc¡onar el compuesto del título en crudo, que se env¡ó al s¡gu¡ente paso s¡n n¡nguna purificación ad¡c¡onal. Rend¡m¡ento: 150 mg (sól¡do blanquec¡no, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.74 (s, 1H), 7.72 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.18 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.47 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 10.0 Hz, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.15 (s, 2H), 1.42-1.32 (m, 3H), 1.27-1.08 (m, 6 H), 1.02 (s, 9H), 0.98-0.91 (m, 6 H), 0.7 (t, J = 8.4 Hz, 6 H). LCMS: (Método C) 659.3 (M++H), Rt. 3.30 m¡n, 93.37 % (máx.).
Intermed¡o 42
7-bromo-3,3-d¡but¡l-8-metox¡-5-(4-(tr¡fluoromet¡l)fen¡l)-2,3-d¡h¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-4(5H)-ona
Figure imgf000079_0002
A una soluc¡ón desgas¡f¡cada brevemente de 7-bromo-3,3-d¡but¡l-8-metox¡-2,3-d¡h¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-4(5H)-ona (2 g, 5.01 mmol) en 4-bromobenzotr¡fluoruro ( 6 ml) se añad¡eron tr¡s[2-(2-metox¡etox¡)-et¡l]am¡na (0.16 g, 0.5 mmol), Cul (0.19 g, 1.0 mmol) y K2CO3 seco (1.38 g, 10.02 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó durante 24 horas a 130 °C. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo resultante se recog¡ó en agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 19 %/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 73 % (2.2 g, goma de color amarillo).
LCMS: (Método C) 544.1 (M+H), Rt. 3.54 m¡n, 89.96 % (máx.).
Intermed¡o 43
7-bromo-3,3-d¡but¡l-8-metox¡-5-(4-(trifluoromet¡l)fen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000079_0003
A una soluc¡ón ag¡tada de 7-bromo-3,3-d¡but¡l-8-metox¡-5-(4-(trifluoromet¡l)fen¡l)-2,3-d¡h¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-4(5H)-ona (lntermed¡o 42; 2 g, 3.68 mmol) en THF seco (20 ml) a 0 °C, se añad¡ó gota a gota d¡met¡lsulfuro de borano (1 M en THF; 7.5 ml, 7.37 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 80 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con metanol (15 ml) a 0 °C y se calentó durante 1 hora a 80 °C. A continuación, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo resultante se tomó en agua (15 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 4 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 62 % (1.21 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método D) 532.1 (M+H), Rt. 3.26 min, 81.24 % (máx.).
Intermedio 44
1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000080_0001
A una solución agitada de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 43; 1.21 g, 2.26 mmol) en una mezcla de acetona y agua (12 ml, 3:1) se añadió oxona (7 g, 2.27 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 48 horas a temperatura ambiente. La reacción se controló por TLC y LCMS que indicaron la formación de productos tanto de sulfóxido como de sulfona. Luego, la mezcla de reacción se filtró a través de celite para eliminar el exceso de oxona y el filtrado se diluyó con agua (30 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (40 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 3 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 68 % (0.87 g, sólido color amarillo pálido).
LCMS: (Método D) 562.1 (M++H), Rt. 4.39 min, 95.43 % (máx.).
Intermedio 45
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000080_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 44; 0.87 g, 1.54 mmol) en DMF (5 ml), se añadió NaSMe (0.57 g, 7.73 mmol) y la solución se calentó durante 4 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (15 ml) y se agitó durante 5 minutos. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 71 % (0.57 g, goma de color amarillo).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.95 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.32 (s, 1H), 6.92-6.85 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.25 (s, 3H) , 1.52-1.39 (m, 2H), 1.26-1.13 (m, 10H), 0.82-0.79 (m, 6H). LCMS: (Método C) 516.1 (M+H), Rt. 3.09 min, 81.04 % (máx.).
Intermedio 46
(EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000081_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 45; 0.15 g, 0.29 mmol) en THF (3 ml), DABCO (0.003 g, 0.029 mmol) y propiolato de etilo (0.043 g, 0.43 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 8 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (8 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 40 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 50 % (0.09 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.81 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.08-7.04 (m, 3H), 5.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.53-1.41 (m, 2H), 1.33-1.31 (m, 1H), 1.27-1.20 ( m, 12H), 0.81-0.77 (m, 6H). LCMS: (Método D) 614.2 (M+H), Rt. 4.35 min, 91.98% (máx.). Intermedio 47
(EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-isobutiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000081_0002
A una solución agitada de etilo (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 35, 0.125 g, 0.22 mmol) en DMF (5 ml) se añadieron DIPEA (0.11 ml, 0.66 mmol), ácido isobutírico (0.023 g, 0.26 mmol) y HATU (0.17 g, 0.44 mmol) a 0 °C, y luego la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (10 ml) y el sólido obtenido se recogió por filtración para proporcionar el compuesto del título. El compuesto se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 130 mg (sólido blanquecino, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.78 (s, 1H), 7.72 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.18 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.47 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.35-3.34 (m, 1H), 3.39 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.44-1.33 (m, 4H), 1.28-1.19 ( m, 6H), 1.11-1.05 (m, 11H), 0.77 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 630.9 (M++H), Rt. 3.15 min, 82.1 % (máx.).
Intermedio 48
f£j-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000081_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 23; 1.5 g, 3.57 mmol) en THF (15 ml) se añadieron dA bCO (0.04 g, 0.35 mmol) y propiolato de etilo (0.42 g, 4.28 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo que se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 10 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 81 % (1.5 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.74 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.99 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.50 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.53-1.44 (m, 1H), 1.42-1.22 (m, 3H), 1.17 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 1.09-0.99 (m, 4H), 0.7 (t, J = 6.0 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 518.1 (M++H), Rt. 3.21 min, 98.39 % (máx.).
Intermedio 49
(EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000082_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 48; 1.3 g, 2.51 mmol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (15 ml) a 0 °C se añadió HNO3 (65 %, 0.238 g, 3.77 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (5 ml). Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como material crudo que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 1.4 g (sólido color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.05 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.84 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.99 (bs, 2H), 5.67 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.14 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.84 (bs, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.66-1.40 (m, 2H), 1.38-1.31 (m, 4H), 1.28-1.19 ( m, 5H), 0.82 (t, J = 6.40 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 562.8 (M++H), Rt.3.01 min, 97.69 % (máx.).
Intermedio 50
f£j-3-((5-(4-aminofenil)-3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000082_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 49; 1.4 g, 2.49 mmol) en THF (20 ml) a temperatura ambiente se añadieron HCl concentrado (1 ml) y SnCl2 (1.88 g, 9.96 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml) y se filtró a través de un lecho de celite. El lecho de celite se lavó con EtOAc (2 x 15 ml) y el filtrado resultante se lavó con agua (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como material crudo, que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 1.3 g (sólido color marrón, crudo).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.67 (dd, J = 12.2, 1.52 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 6.60 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 6.31 (s, 1H), 5.38 (dd, J = 12.3, 1.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.73 (bs, 2H), 3.42 (s, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.52-1.38 ( m, 4H), 1.36-1.22 (m, 4H), 1.20 (t, J = 5.52 Hz, 3H), 0.76 (t, J = 5.48 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 532.8 (M++H), Rt. 2.73 min, 91.68 % (máx.).
Intermedio 51
('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000083_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (lntermed¡o 50; 0.12 g, 0.22 mmol) en DCM (5 ml) se añad¡ó tr¡et¡lam¡na (0.045 g, 0.45 mmol) a 0 °C. Luego se añad¡ó cloruro de p¡valoílo (0.032 g, 0.27 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (15 ml) y la capa orgán¡ca se lavó con soluc¡ón de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío para proporc¡onar el compuesto del título en crudo, que se env¡ó como tal al s¡gu¡ente paso s¡n n¡nguna pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. Rend¡m¡ento: 135 mg (sól¡do blanquec¡no, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.17 (s, 1H), 7.73 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 5.49 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.74 (bs, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.54-1.42 (m, 4H), 1.36 (s, 9H), 1.35-1.08 (m, 4H), 0.79-0.76 (m, 3H), 0.7 (t, J = 7.2 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 616.9 (M++H), Rt. 3.08 m¡n, 94.2 % (máx.).
Intermed¡o 52
('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(c¡clopentanocarboxam¡do)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000083_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 35; 0.125 g, 0.22 mmol) en DMF (3 ml) a 0 °C, se añad¡eron DIPEA (0.12 ml, 0.66 mmol), ác¡do c¡clopentanocarboxíl¡co (0.038 g, 0.33 mmol) y HATU (0.17 g, 0.44 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se vert¡ó en agua enfr¡ada con h¡elo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo obten¡do se env¡ó como tal al s¡gu¡ente paso s¡n n¡nguna pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. Rend¡m¡ento: 140 mg (sól¡do blanquec¡no, crudo).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.83 (s, 1H), 7.72 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.18 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 6.57 (s, 1H), 5.47 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 9.6 Hz, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.55­ 2.52 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.91-1.83 (m, 4H), 1.81-1.72 ( m, 4H), 1.69-1.64 (m, 6H), 1.63-1.41 (m, 6H), 1.36-1.08 (m, 3H), 0.8 (t, J = 8.8 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 657.2 (M++H), Rt. 3.74 m¡n, 93.37 % (máx.).
Intermedio 53
('EJ-3-((3-but¡l-5-(4-(c¡clopentanocarboxamido)fen¡l)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de et¡lo
Figure imgf000084_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3-butil-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)acr¡lato de etilo (intermedio 50; 0.125 g, 0.23 mmol) en DMF (3 ml) a 0 °C se añadieron DIPEA (0.12 ml, 0.7 mmol), ácido ciclopentanocarboxílico (0.040 g, 0.35 mmol) y HATU (0.178 g, 0.46 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 140 mg (sólido blanquecino, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.83 (s, 1H), 7.73 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.48 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.74 (bs, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.77-2.74 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.85-1.83 (m, 2H), 1.74-1.72 ( m, 4H), 1.69-1.55 (m, 3H), 1.54-1.44 (m, 3H), 1.38-1.35 (m, 3H), 1.31-1.21 (m, 4H), 0.8 (t, J = 6.3 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 629.2 (M++H), Rt. 3.57 min, 90.68 % (máx.).
Intermedio 54
Ácido 2-(((2-Amino-5-metox¡fen¡l)t¡o)met¡l)-2-etilbutano¡co
Figure imgf000084_0002
A una solución agitada de 6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (339 g, 1.88 mol) en agua (3390 ml), se añadió KOH (1688 g, 30.09 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente. A continuación, se añadió gota a gota ácido 2-(bromometil)-2-etilbutanoico (590 g, 2.82 mol; disuelto en 1500 ml de THF) y la mezcla se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 4000 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (1000 ml) y salmuera (500 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2S o4 anhidro y se concentró al vacío hasta obtener el compuesto del título crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 650 g (goma cruda, color marrón).
LCMS: (Método A) 284 (M+H), Rt. 1.82 min, 88.77 % (máx.).
Intermedio 55
3,3-Diet¡l-8-metox¡-2,3-d¡h¡dro-1,5-benzotiazep¡n-4(5H)-ona
Figure imgf000084_0003
A una solución agitada de ácido 2-(((2-amino-5-metox¡fen¡l)t¡o)met¡l)-2-etilbutano¡co (Intermedio 54; 650 g, 2.29 mol) en EtOAc (2500 ml) a 0 °C, se añadieron gota a gota trietilamina (463 g, 4.586 mol) y solución de anhídrido 1-propanofosfónico (50 % en EtOAc; 1021 g, 3.211 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), se añadió agua (2000 ml) a la mezcla de reacción y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 2000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó lavando con metanol para producir el compuesto del título. Rendimiento: 65 % (295 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 59.56 (s, 1H), 7.06-7.03 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.87-6.86 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.96 (s, 2H), 1.67- 1.66 (m, 2H), 1.56-1.54 (m, 2H), 0.79-0.77 (m, 6H). LCMS: (Método A) 266.1 (M++H), Rt. 2.30 min, 99.45% (máx.).
Intermedio 56
7-Bromo-3,3-dietil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000085_0001
A una solución agitada de 3,3-dietil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 55; 100 g, 0.376 mol) en una mezcla 1:1 de DCM y acetonitrilo (1000 ml), se añadió en porciones N-bromo succinimida (80 g, 0.452 mol) y la solución se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró y el material crudo obtenido se trató con acetonitrilo frío y se agitó durante 30 minutos. El precipitado obtenido se filtró y se lavó con acetonitrilo frío (2 x 80 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 180 g (sólido color marrón, crudo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 59.63 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.98 (s, 2H), 1.64-1.66 (m, 2H), 1.50-1.52 ( m, 2H), 0.76-0.78 (m, 6H). LCMS: (Método A) 344.1 (M++H), Rt. 2.47 min, 96.70 % (máx.).
Intermedio 57
7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona y 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi -5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000085_0002
A una solución agitada de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 56; 180 g, 0.522 mol) en yodobenceno (1400 ml) se añadieron yoduro de cobre (I) (20 g, 0.104 mol) y K2CO3 (144 g, 1.044 mol) y la solución se purgó con nitrógeno durante 20 minutos para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (16.8 g, 0.052 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 40 horas a 135 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y la capa de celite se lavó con EtOAc (2000 ml). El filtrado se concentró al vacío para dar el material crudo que se cristalizó con éter de petróleo frío. El precipitado obtenido se filtró y se lavó con éter de petróleo frío para proporcionar una mezcla de los compuestos del título. Rendimiento: 200 g (crudo, sólido color amarillo claro).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.37-7.37 (m, 2H), 7.23-7.28 (m, 2H), 7.08-7.09 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.48-3.48 (m, 1H), 3.42-3.42 (m, 3H), 3.24 (s, 2H), 3.15 (d, J = 3.28 Hz, 2H), 2.64-2.65 (m, 1H), 1.46-1.48 (m, 4H), 0.77-0.77 (m, 6H). LCMS: (Método A) 420.1 (M++H) 30.8 %; 468.1 (M++H) 51.8 %; Rt. 2.97 y 2.98 min, 82.6 % (máx.).
Intermedio 58
7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000085_0003
A una solución agitada de una mezcla de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona y 3,3-dietil -7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 57; 100 g, 0.2378 mol) en THF (1000 ml) a 0° C se añadió gota a gota dimetilsulfuro de borano (2 M en THF; 356 ml, 0.713 mol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 40 horas a 75 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con metanol (200 ml). La solución resultante se calentó durante 2 horas a 65 °C, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para proporcionar una mezcla de los compuestos del título. El material crudo obtenido se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 120 g (líquido crudo, marrón oscuro).
LCMS: (Método A) 407.0 (M++H), 41.3 % y 454.0 (M++H) 53.1 %; Rt. 3.81 y 3.95 min, 94.4 % (máx.).
Intermedio 59
1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1-dióxido de 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000086_0001
A una solución agitada de una mezcla de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 58; 120 g, 0.295 mol) en Th F (600 ml) a temperatura ambiente se añadió agua (600 ml) y oxona (907 g, 2.95 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtoAc (2 x 2500 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (1000 ml) y salmuera (500 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna (eluyente: 8-10 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para producir una mezcla de los compuestos del título. Rendimiento: 73 % (95 g, sólido amarillento).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 57.33-7.34 (m, 2H), 7.19-7.22 (m, 2H), 6.87-6.89 (m, 2H), 4.26 (t, J = 7.04 Hz, 1H), 3.90-3.92 (m, 3H), 3.67-3.69 (m, 2H), 2.41-2.43 (m, 1H), 2.11-2.13 (m, 2H), 1.50-1.52 (m, 2H) ), 1.30-1.31 (m, 2H), 0.71-0.73 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 440.0 (M++H), 486.0 (M++H), Rt. 2.98 min y 2.99 min, 80.7 % (máx.).
Intermedio 60
1,1-dióxido de 3,3-Dietil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000086_0002
A una solución agitada de una mezcla de 1,1-dióxido de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1-dióxido de 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 59; 95 g, 0.216 mmol) en DMF (950 ml) se añadió tiometóxido de sodio (45.6 g, 0.650 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 16 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió agua (500 ml) a la mezcla de reacción y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 1000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna (eluyente: 15-20 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 59 % (50 g, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 10.57 (s, 2H), 7.31 (s, 2H), 7.16-7.18 (m, 2H), 6.89 (d, J = 7.68 Hz, 2H), 6.76-6.78 (m, 2H), 6 .6 6 (s, 2H), 3.64 (s, 1H), 3.20 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.53-1.55 (m, 2H), 1.38-1.30 (m, 2H), 0.74-0.76 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 392.1 (M++H), Rt. 2.54 min, 74.77 % (máx.).
Intermedio 61
f£J-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000087_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dietil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 60; 0.3 g, 0.76 mmol) en THF seco (6 ml), se añadieron propiolato de etilo (0.11 g, 1.14 mmol) y DABCO (8.6 mg, 0.076 mmol) y la solución se agitó durante 30 minutos. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). Luego, la parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 45 % (0.17 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): d 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 57.76 (dd, J = 12.2, 0.8 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 0.80 Hz, 1H), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.14 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 5.53 (dd, J = 12.0, 1.2 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 0.8 Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54-1.52 (m, 2H), 1.39-1.34 (m, 2H), 1.24-1.20 ( m, 6H).
Intermedio 62
(EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-butiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000087_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 35; 0.125 g, 0.22 mmol) en DCM (3 ml) a 0 °C, se añadió trietilamina (0.045 g, 0.45 mmol) y luego cloruro de butirilo (0.029 g, 0.27 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml) y la capa orgánica se lavó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo, que se envió al siguiente paso como tal sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 145 mg (sólido blanquecino, crudo).
1H RMN (400 MHz, CDCls): 57.69 (d, J = Hz, 1H), 7.64 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 7.17-7.11 (m, 3H), 6.56 (s, 1H), 5.54 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.21 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.77 (bs, 2H), 3.22 (s, 2H), 2.45 (t, J = 9.60 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.84-1.79 (m, 2H), 1.76-1.68 (m, 3H), 1.53-1.44 (m, 6H), 1.41-1.20 (m, 9H), 0.99-0.93 (m, 6H). LCMS: (Método A) 631.3 (M++H), Rt. 2.86 min, 92.69 % (máx.).
Intermedio 63
fZj-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000087_0003
A una solución de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 23; 0.2 g, 0.5 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C se añadió en porciones NaH al 60 % (0.024 g, 1.02 mmol) y la solución se agitó durante 15 minutos. Se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.21 g, 1.02 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C y la reacción se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se trituró adicionalmente con éter dietílico. El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 46 % (0.11 g, goma color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.70-7.65 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.32-7.30 (m, 2H), 7.15-7.13 (m, 2H), 7.00-6.98 (m, 1H), 6.69 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.43-1.41 (m, 4H), 1.18-1.10 (m, 4H), 0.74 (t, J = 4.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 522.3 (M++H), Rt. 3.01 min, 89.38 % (máx.).
Intermedio 64
(ZJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)- 2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000088_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dietil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 60; 0.2 g, 0.5 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C, se añadió NaH al 60 % (0.024 g, 1.02 mmol) en porciones y la mezcla se agitó durante 15 minutos. Se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.21 g, 1.02 mmol) y la mezcla de reacción se calentó hasta 85 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se trituró adicionalmente con éter dietílico. El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 25 % (0.06 g, sólido blanquecino).
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 57.71-7.65 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.12-7.09 (m, 2H), 6.99-6.94 (m, 1H), 6.72 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.56-1.54 (m, 2H), 1.40-1.37 (m, 2H), 0.73 (t, J = 6.90 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 550.2 (M++H), Rt. 2.87 min, 93.92 % (máx.).
Intermedio 65
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000088_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (0.5 g, 1.01 mmol) en una mezcla de MeOH y agua (10 ml, 4:1), se añadieron NH4Cl (0.86 g, 8.08 mmol) y polvo de Zn (0.32 g, 5.06 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 3 horas a 65 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 15 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 66 % (0.28 g, sólido blanco).1 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.52 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.30-7.24 (m, 2H), 7.05-7.03 (m, 2H), 6.99-6.93 (m, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.72 (s, 2H), 3.20 (s, 2H), 1.53-1.41 (m, 4H), 1.28-1.12 (m, 8H), 1.00-0.91 (m, 6H). LCMS: (Método A) 416.2 (M+H), Rt. 3.29 min, 88.66 % (máx.).
Intermedio 66
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000089_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 65; 0.28 g, 0.67 mmol) en DCM seco (6 ml) a 0 °C se añadió BBr3 (1 M, 1.4 ml, 1.34 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió y se inactivó con solución de Na2CO3 saturado (6 ml). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera (6 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo, que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 74 % (200 mg, goma color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.99 (s, 1H), 7.29 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 6.97-6.89 (m, 4H), 6.81 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.24 (s, 2H), 1.42-1.39 (m, 4H), 1.35-1.24 (m, 8H), 1.17-1.14 (m, 6H). LCMS: (Método A) 402.2 (M+H), Rt. 2.98 min, 83.09 % (máx.).
Intermedio 67
(ZJ-3-((3,3-dibutil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000089_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 66; 0.2 g, 0.49 mmol) en d Mf (2 ml) a 0 °C, se añadió NaH (60 % en aceite mineral; 0.03 g, 0.75 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. A continuación, se añadió gota a gota 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.15 g, 0.74 mmol) y la mezcla se calentó durante 16 horas a 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con HCl diluido (3 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 35 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 32 % (0.08 g, sólido color marrón).
LCMS: (Método E) 504.2 (M+H), Rt. 2.98 min, 24.81 % (máx.).
Intermedio 68
5-cloro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina
Figure imgf000089_0003
A una solución agitada de 3-cloro-4-metoxianilina (10 g, 63.4 mmol) en ácido acético (100 ml) a temperatura ambiente se le añadió tiocianato de amonio (5.3 g, 69.8 mmol) y luego la mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió bromo (3.2 ml, 63.4 mmol) disuelto en ácido acético (20 ml) gota a gota a la mezcla de reacción a 15 °C y la mezcla resultante se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, el sólido obtenido se filtró, se lavó con ácido acético (20 ml) y luego se secó al vacío. Luego, el sólido se suspendió en agua (20 ml) y se alcalinizó con una solución de NaOH al 10 % hasta aproximadamente pH 10. El sólido se filtró, se lavó con agua (3 x 25 ml) y luego se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 80 % (11 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 7.53 (s, 1H), 7.41 (bs, 2H), 7.36 (s, 1H), 3.82 (s, 3H). LCMS: (Método A) 215.0 (M++H), Rt. 1.39 min, 97.22 % (máx.).
Intermedio 69
Ácido 2-(((2-amino-4-cloro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico
Figure imgf000090_0001
A una solución agitada de 5-cloro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (intermedio 6 8 ; 8 g, 0.037 mol) en agua (120 ml) se añadió KOH (34 g, 0.596 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente. Se añadió gota a gota ácido 2-(bromometil)-2-etilhexanoico (13.29 g, 0.0558 mol; disuelto en 40 ml de THF) y luego la mezcla se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Luego, la capa orgánica combinada se lavó con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío hasta obtener el material crudo. El material crudo obtenido se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 21 g (goma cruda, color marrón).
UPLC: (Método A) 345.8 (M++H), Rt. 1.58 min, 90.21 % (máx.).
Intermedio 70
3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000090_0002
A una solución agitada de ácido 2-(((2-amino-4-cloro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico (Intermedio 69; 21 g, 0.0607 mol) en EtOAc (130 ml) a 0 ° C, se añadieron gota a gota trietilamina (12.26 g, 0.1214 mol) y solución de anhídrido 1 -propanofosfónico (EtOAc al 50 %; 23.16 g, 0.073 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), se añadió agua (25 ml) a la mezcla de reacción y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 55 % (11 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.61 (s, 1H), 7.16 (d, J = 14.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.98 (s, 2H), 1.51-1.53 (m, 4H), 1.32-1.26 (m , 4H), 0.92-0.91 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 328.1 (M++H), Rt. 2.60 min, 95.79 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.51 min, 97.62 % (máx.).
Intermedio 71
3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000090_0003
A una solución agitada de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 70; 11 g, 0.034 mol) en yodobenceno (110 ml) se añadieron yoduro de cobre (I) (0.640 g, 0.0034 mol) y K2CO3 (9.25 g, 0.067 mol) y la solución se purgó con nitrógeno durante 20 minutos para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (2.16 g, 0.0067 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 40 h a 135 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y la capa de celite se lavó con EtOAc (25 ml). El filtrado se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 3-5 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 86 % (11.7 g, sólido color marrón pálido).1
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 57.40-7.39 (m, 3H), 7.29 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 6.96 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 1.57-1.55 (m, 4H), 1.19 (d, J = 6.9 Hz, 5H), 0.79 (t, J = 6.3 Hz, 7H). LCMS: (Método A) 404.1 (M++H), Rt. 3.19 min, 98.20 % (máx.).
Intermedio 72
3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000091_0001
A una solución agitada de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 71; 11.7 g, 0.029 mol) en THF (110 ml) a 0 °C se añadió gota a gota dimetilsulfuro de borano (2 M en THF; 73 ml, 0.144 mol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 40 horas a 75 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con metanol (50 ml). La solución resultante se calentó durante 2 horas a 65 °C, luego se enfrió hasta TA y se concentró al vacío. El material crudo obtenido se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 8-10 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 90 % (10.2 g, líquido incoloro).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.19 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.08 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.79 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.76 (s, 2H), 1.26-1.24 (m, 9H), 0.76-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 390.2 (M++H), Rt. 3.01 min, 99.61 % (máx.).
Intermedio 73
1,1 -dióxido de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000091_0002
A una solución agitada de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 72; 10.2 g, 0.0261 mol) en 1,4-dioxano (100 ml) a temperatura ambiente se añadieron agua (100 ml) y oxona (81 g, 0.2615 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 56 % (6.2 g, sólido amarillento).
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 57.50 (s, 1H), 7.27 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.07-7.04 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 3.33 (s, 2H), 1.52-1.37 (m, 8H), 0.77-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método A) 422.1 (M++H), Rt. 3.18 min, 98.51 % (máx.).
Intermedio 74
1,1 -dióxido de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000091_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 73; 1.1 g, 2.60 mmol) en DCM (11 ml) a 0 °C se añadió BBr3 (solución 1 M en DCM, 13.03 ml, 13.03 mmol) y la solución se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió metanol gota a gota a 0 °C hasta que cesó la efervescencia. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con agua (2 x 20 ml) y salmuera (20 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 30-32 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 94 % (1.0 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.83 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.23 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.97 (s, 1H), 6.88 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.28 (s, 2H), 1.51-1.34 (m, 4H), 1.12-1.02 (m, 4H), 0.77-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 408.2 (M++H), Rt. 2.87 min, 93.25 % (máx.).
Intermedio 75
(ZJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)- 2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000092_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-7-doro-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 74; 1.0 g, 2.45 mmol) en DMF (10 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH al 60 % (0.18 g, 7.35 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.99 g, 4.90 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y diluida con agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se trituró adicionalmente con éter dietílico. El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 59 % (0.74 g, goma de color amarillo pálido). LCMS: (Método A) 510.1 (M+H), Rt. 3.13 min, 94.43 % (máx.).
Intermedio 76
(EJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000092_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-7-cloro-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 74; 0.95 g, 2.33 mmol) en THF (10 ml), DABCO (0.026 g, 0.23 mmol) y propiolato de etilo (0.28 ml, 2.8 mmol) se añadieron a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 8-9% EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 84.7 % (1.0 g, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.81 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.28-7.26 (m, 2H), 7.09 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.48 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.81 (bs, 2H), 3.46 (s, 2H), 1.55-1.50 (m, 4H), 1.34 (t, J = 10.00 Hz, 3H), 1.30-1.15 (m, 4H), 0.92 (t, J = 4.40 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 506.1(M+), Rt. 3.28 min, 97.07 % (máx.).
Intermedio 77
fZJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000093_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óxido-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrilato de met¡lo (¡ntermed¡o 64; 1.0 g, 1.97 mmol) en una mezcla 1:1 de DCM y AcOH (15 ml) a 0 °C se añad¡ó HNO3 (65 %; 0.186 g, 2.95 mmol) en una mezcla de DCM y AcOH (5 ml). Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo del título que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 900 mg (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método A), Rt.2.62 min, 88 % (Max).
Intermedio 78
(ZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de metilo
Figure imgf000093_0002
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-5-(4-nitrofen¡l)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo (Intermedio 77; 0.9 g, 1.67 mmol) en THF (15 ml) a temperatura ambiente se añadieron HCl concentrado (1 ml) y SnCl2 (1.26 g, 6.69 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml) y se filtró a través de celite. La almohadilla de celite se lavó con EtOAc (2 x 15 ml) y el filtrado resultante se lavó con agua (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como material crudo, que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 650 mg (crudo, sólido color amarillo).
Intermedio 79
(ZJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-pivalam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000093_0003
A una solución agitada de fZJ-3-((5-(4-aminofen¡l)-3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de metilo (Intermedio 78; 0.15 g, 0.29 mmol) en DCM (5 ml) se añadieron TEA (0.082 ml, 0.59 mmol) y cloruro de pivaloílo (0.038 ml, 0.44 mmol) a 0 °C y la reacción la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml) y se lavó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como material crudo, que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 180 mg (goma cruda, blanca).
Intermedio 80
(ZJ-3-((3,3-dibutil-7-cloro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000094_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-cloro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (300 mg, 0.688 mmol) en DMF (3 ml) a 0 °C se añadió en porciones NaH (60 %; 138 mg, 3.44 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (419 mg, 2.06 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 ha 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 617 mg (líquido rosa, crudo).
Intermedio 81
1,1 -dióxido de 3,3-Dietil-8-hidroxi-7-yodo-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000094_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dietil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (obtenida por purificación HPLC preparativa (Método B) de la mezcla de 7-bromo y 7-yodo del Intermedio 59; 250 mg, 0.52 mmol) en DCM (5 ml) se añadió gota a gota BBr3 (solución 1 M en DCM, 0.80 ml, 0.77 mmol) a -40 °C y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota MeOH hasta que cesó la efervescencia. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml), salmuera (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 45-50 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 82 % (200 mg, sólido color amarillo pálido). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 10.92 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.23-7.19 (m, 2H), 6.94-6.81 (m, 3H), 3.63 (m, 1H), 3.25 (s, 2H), 1.55-1.48 (m, 2H), 1.36-1.23 (m, 2H), 0.73 (t, J = 9.6 Hz, 6 H). LCMS: (Método A) 472.1 (M++H), Rt. 2.49 minutos, 93.10 %.
Intermedio 82
('EJ-3-((3,3-dietil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000094_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dietil-8-hidroxi-7-yodo-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 81; 100 mg, 0.212 mmol) en THF (3 ml) a 0 °C se añadieron DABCO (3 mg, 0.021 mmol) y propiolato de tert-butilo (32 mg, 0.2545 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como material crudo, que se envió al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 130 mg (sólido blanquecino, crudo). LCMS: (Método A) 542.1 (M+-tBu+H), Rt. 3.03 min, 76.11 % (máx.).
Intermedio 83
1,1 -dióxido de 7-Bromo-3,3-dietil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000095_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dietil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (obtenida por purificación HPLC preparativa (Método B) de la mezcla de 7-bromo y 7-yodo del Intermedio 59; 750 mg, 1.71 mmol) en DCM (10 ml) se añadió gota a gota BBr3 (solución 1 M en DCM, 2.6o ml, 2.57 mmol) a -40 °C y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota MeoH hasta que cesó la efervescencia. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (25 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml), salmuera (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 45-50 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 80 % (580 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.89 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.24-7.13 (m, 3H), 6.96-6.83 (m, 3H), 3.64 (m, 1H), 3.32 (s, 2H), 1.53 -1.48 (m, 2H), 1.37-1.30 (m, 2H), 0.73 (t, J = 9.6 Hz, 6 H). LCMS: (Método A) 424.0 (M), Rt. 2.44 min, 98.18 %.
Intermedio 84
(EJ-3-((7-bromo-3,3-dietil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000095_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dietil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 83; 200 mg, 0.471 mmol) en THF ( 6 ml), se añadieron DABCO (5.3 mg, 0.047 mmol) y propiolato de etilo (56 mg, 0.566 mmol) a 0 °C, luego la mezcla de reacción se agitó 1 h a TA. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para dar el material crudo. El material crudo obtenido se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 250 mg (sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método A) 522.2 (M++H), Rt. 2.40 min, 86.64 % (máx.).
Intermedio 85
fZj-3-((7-bromo-3,3-dietil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000095_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dietil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 83; 200 mg, 0.4713 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %; 95 mg, 2.356 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (290 mg, 1.414 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se trituró adicionalmente con éter dietílico. El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 250 mg (goma cruda, color marrón). UPLC: (Método A) 528.5 (M++2), Rt. 1.88 min, 39.34 % (máx.).
Intermedio 86
Ácido 2-(((2-Amino-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico
Figure imgf000096_0001
A una solución agitada de 6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (270 g, 1.498 mol) en agua (2700 ml), se añadió KOH (1345 g, 23.96 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente. A continuación, se añadió gota a gota una solución de ácido 2-(bromometil)-2-etilhexanoico (533 g, 2.25 mol) en THF (1000 ml) y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 4000 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (1000 ml) y salmuera (1000 ml). A continuación, la parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío hasta obtener el material crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 590 g (goma cruda, color marrón).
LCMS: (Método A) 312.1 (M++H), Rt. 2.24 min, 97.34 % (máx.).
Intermedio 87
3-butil-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000096_0002
A una solución agitada de ácido 2-(((2-amino-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico (Intermedio 86; 590 g, 1.89 mol) en EtOAc (2500 ml) a 0 °C, se añadieron trietilamina (530 ml, 3.78 mol) y solución de anhídrido 1-propanofosfónico (50 % en EtOAc; 785 g, 2.46 mol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), se añadió agua (2000 ml) a la mezcla de reacción y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 2000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (800 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó lavando con metanol para producir el compuesto del título. Rendimiento: 48 % (265 g, sólido blanquecino).1
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 59.53 (s, 1H), 7.04-7.01 (m, 2H), 6.87-6.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.50 (s, 2H), 1.68­ 1.66 (m, 4H) , 1.50-1.48 (m, 4H), 0.79-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 294.3 (M++H), Rt. 2.68 min, 99.47 % (máx.). Intermedio 88
7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000096_0003
A una solución agitada de 3-butil-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 87; 265 g, 0.903 mol) en una mezcla 1:1 de DCM y acetonitrilo (2650 ml), se añadió en porciones N-bromo succinimida (209 g, 1.17 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró. El material crudo obtenido se trató con acetonitrilo frío y se agitó durante 30 minutos. El precipitado obtenido se filtró y se lavó con acetonitrilo frío (2 x 100 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 179 g (79 %, sólido color marrón, crudo).
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 59.61 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.98 (s, 2H), 1.70-1.68 (m, 4H), 1.48-1.45 (m, 4H), 0.84-0.82 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 372.0 (M++H), Rt. 2.83 min, 99.20 % (máx.).
Intermedio 89
7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona y 3-butil-3-etil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000097_0001
A una solución agitada de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 8 8 ; 179 g, 0.483 mol) en yodobenceno (1800 ml), se añadieron yoduro de cobre (I) (18.5 g, 0.096 mol) y K2CO3 (134 g, 0.967 mol) y la solución se purgó con nitrógeno durante 20 minutos para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (15.6 g, 0.04834 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 40 horas a 135 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y la capa de celite se lavó con EtOAc (2000 ml). El filtrado se concentró al vacío para dar el material crudo que se cristalizó con éter de petróleo frío. El precipitado obtenido se filtró y se lavó con éter de petróleo frío para proporcionar una mezcla del compuesto del título. Rendimiento: 180 g (83 %, sólido color amarillo claro, crudo).
1H RMN (400 MHz, D M S O d): 57.42-7.40 (m, 2H), 7.30-7.28 (m, 2H), 7.10-7.09 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.15 (s, 2H), 1.58-1.52 (m, 8 H), 0.83-0.81 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 448.0 (M++H) 40.8 %; 496.0 (M++H) 53.98 %; Rt. 3.27 y 3.28 min, 94.7 % (máx.).
Intermedio 90
7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 3-butil-3-etil-7-yodo-8- metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000097_0002
A una solución agitada de una mezcla de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona y 3-butil -3-etil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 89; 180 g, 0.40178 mol) en THF (1800 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota dimetilsulfuro de borano (2 M en THF; 602 ml, 1.2053 mol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 40 ha 75 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con metanol (400 ml). La solución resultante se calentó a 65 °C durante 2 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para producir una mezcla de los compuestos del título. El material crudo obtenido se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 195 g (líquido crudo, color marrón oscuro).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.22-7.20 (m, 2H), 7.04-6.93 (m, 1H), 6.88-6.83 (m, 3H), 6.81-6.79 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 2.76 (s, 2H), 1.41-1.40 (m, 8 H), 0.80-0.78 (m, 6 H). LCMS: (Método A) 448.1 (M++H), 89.8% y 482.2 (M++H) 8.18 %; Rt. 3.02 y 3.19 min, 97.98 % (máx.).
Intermedio 91
1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-7 -yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000098_0001
A una solución agitada de una mezcla de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 3-butil-3- etil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 90; 195 g, 0.4488 mol) en THF (1950 ml), se añadieron agua (1950 ml) y oxona (1380 g, 4.488 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtOAc (2 x 2000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (1000 ml) y salmuera (1000 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y luego se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para producir una mezcla de los compuestos del título.
Rendimiento: 60 % (126 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.45 (s, 1H), 7.36-7.32 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.16-7.06 (m, 2H), 6.93 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 3.90 (s , 3H), 3.78 (s, 2H), 1.52-1.41 (m, 2H), 1.36-1.34 (m, 4H), 1.27-1.24 (m, 4H), 1.00-0.80 (m, 6H). LCMS: (Método B) 468.1 (M++H) 91.72 %, 514.2 (M++H) 5.70 %, derecho. 1.76 min y 1.88 min, 97.42 % (máx.).
Intermedio 92
1,1 -dióxido de 7-Bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-yodo-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000098_0002
A una solución agitada de una mezcla de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina y 1,1-dióxido 3-butil-3-etil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 91; 6.5 g, 13.93 mmol) en DCM (65 ml) a 0 °C se añadió gota a gota BBr3 (solución 1 M en DCM; 69.67 ml, 69.67 mmol) y la solución se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota MeOH hasta que cesó la efervescencia. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (100 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 * 50 ml) y salmuera (100 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. A continuación, la parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 30-32 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para producir una mezcla de los compuestos del título. Rendimiento: 95 % (6.0 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 452.1(M+) y 498.0 (M+-H), Rt. 3.00 y 3.02 min, 92.15 % (total máx.).
Intermedio 93
(E)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (E)-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5- benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000098_0003
A una solución agitada de una mezcla de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepinay 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-yodo-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 92; 6 g, 13.26 mmol) en THF (60 ml) a 0 °C, se añadieron DABCO (0.15 g, 1.32 mmol) y luego propiolato de etilo (1.61 ml, 15.91 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 17-18 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para producir una mezcla de los compuestos del título. Rendimiento: 90 % (6.6 g, goma incolora). LCMS: (Método C) 598.1 (M++H) y 550.1 (M+), Rt. 3.03 min, 93.95 % (máx.).
Intermedio 94
Ácido (E)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000099_0001
A una solución agitada de una mezcla de (E)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo y (E)-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 93; 6.6 g, 11.98 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (60 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (1.01 g, 23.97 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 15 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x 100 ml). La parte orgánica combinada se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 3 % MeOH/DCM, gel de sílice: malla 230-400) para producir una mezcla de los compuestos del título. Rendimiento: 54 % (3.38 g, sólido blanco).
LCMS: (Método A) 520.9 (Bromo, Yodo M-H), Rt. 2.90 min, 97.86 % (máx.).
Intermedio 95
1,1 -dióxido de 5-(4-bromofenil)-3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000099_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 23; 2 g, 4.76 mmol) en DMF (15 ml) a -10 °C, se añadió gota a gota N-bromosuccinimida (0.93 g, 5.24 mmol) en DMF (5 ml) y la mezcla de reacción se dejó en agitación durante 1 hora por debajo de 0 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en hielo picado y se agitó vigorosamente durante 5 minutos. El sólido que precipitó se separó por filtración, se lavó con agua enfriada con hielo y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 98 % (2.37 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 496.1 (M+-2H), Rt. 2.97 min, 90.53 % (máx.).
Intermedio 96
4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il) benzonitrilo
Figure imgf000099_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 5-(4-bromofenil)-3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 95; 2.37 g, 4.75 mmol) en DMF (24 ml), se añadió cianuro de zinc (2.23 g, 19 mmol) y la solución se desgasificó con N2 por 30 minutos. Luego se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (0.54 g, 0.47 mmol) y la solución se calentó durante 24 horas a 100 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (50 ml), salmuera (50 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente:
EtOAc al 15 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 52 % (1.1 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 10.84 (s, 1H), 7.54 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.87-6.85 (m, 2H), 3.51 (bs, 2H), 3.65 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.65-1.41 (m, 2H), 1.42-1.22 (m, 6H), 0.84-0.65 (m, 6H). LCMS: (Método A) 445.1 (M++H), Rt. 2.53 min, 96.66 % (máx.).
Intermedio 97
ácido 4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzoico
Figure imgf000100_0001
A una solución agitada de 4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzonitrilo (intermedio 96; 0.5 g, 1.12 mmol) en una mezcla de etanol y agua (4:1,20 ml), se añadió NaOH (0.45 g, 11.2 mmol) y la solución se calentó durante 4 días a 100 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (50 ml), salmuera (50 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 9 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 50 % (0.16 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 464.1 (M++H), Rt. 2.19 min, 95.59 % (máx.).
Intermedio 98
N-(fe/f-butil)-4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzamida
Figure imgf000100_0002
A una solución agitada de ácido 4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzoico (intermedio 97; 1 60 mg, 0.34 mmol) en DMF (3 ml) trietilamina (0.1 ml, 0.41 mmol), fe/f-butilamina (104 mg, 1.03 mmol) y HATU (230 mg, 0.64 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en agua enfriada con hielo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo ( 10 ml), salmuera ( 10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 35-40 EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título.
Rendimiento: 28 % (50 mg, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 517.3 (M+-H), Rt. 2.56 min, 95.71 % (máx.).
Intermedio 99
('EJ-3-((3-but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fenil)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)acrilato de et¡lo
Figure imgf000101_0001
A una solución agitada de N-(fe/f-but¡l)-4-(3-but¡l-3-etil-8-h¡drox¡-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-¡l)benzam¡da (intermedio 98; 50 mg, 0.096 mmol) en THF (2 ml), se añadieron DABCO (1 mg, 0.0096 mmol) y propiolato de etilo (14.18 mg, 0.14 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en agua enfriada con hielo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml), la capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml) y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se envió tal cual al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 50 mg (goma cruda, color marrón).
LCMS: (Método A) 617.3 (M++H), Rt. 2.74 min, 12.07 % (máx.).
Intermedio 100
(ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de metilo
Figure imgf000101_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-et¡l-8-h¡drox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azepina (0.5 g, 1.11 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.08 g, 3.31 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 minutos a 0 °C. Se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.45 g, 2.2 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se trituró adicionalmente con Et2O El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 90 % (0.55 g, goma incolora).
LCMS: (Método A) 556.1 (M++2), Rt. 3.09 min, 85.5 % (máx.).
Intermedio 101
1,1 -dióxido de 3,3-d¡butil-7-(et¡lt¡o)-8-h¡drox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000101_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibut¡l-8-metox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazep¡na (2.0 g, 4.04 mmol) en DMF seca (20 ml), se añadió tioetóxido de sodio (1.7 g, 20.24 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se inactivó con agua enfriada con hielo (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título.
Rendimiento: 65 % (1.2 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 510.44 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.20 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 6.94 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 6.82 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 3.65 (bs, 2H), 3.22 (s, 2H), 2.69 (q, J = 9.6 Hz, 2H), 1.40-1.35 (m, 4H), 1.14-1.05 (m , 11H), 0.59-0.81 (m, 6H). LCMS: (Método A) 462.1 (M++H), Rt. 3.18 min, 94.69% (máx.).
Intermedio 102
('EJ-3-((3,3-dibutil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000102_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(etiltio)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 101; 0.2 g, 0.43 mmol) en THF seco (3 ml), se añadieron propiolato de etilo (0.043 g, 0.52 mmol) y Da Bc O (5 mg, 0.04 mmol), y luego la solución se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) y la parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título.
Rendimiento: 93 % (0.23 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 57.86 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.35-7.32 (m, 2H), 7.20-7.14 (m, 2H), 7.02 (t, J = 9.6 Hz, 1H ), 6.65 (s, 1H), 5.47 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.78 (bs, 2H), 3.47 (s, 2H), 2.76 (q , J = 10.8 Hz, 2H), 1.40-1.33 (m, 3H), 1.28 (t, J = 7.60 Hz, 4H), 1.23-1.18 (m, 11H), 0.87-0.62 (m, 6H).
Intermedio 103
4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzonitrilo
Figure imgf000102_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 20; 4.4 g, 8.36 mmol) en DMF (40 ml) a temperatura ambiente, se añadió cianuro de zinc (4.9 g, 41.01 mmol) y luego la mezcla se desgasificó con N2 durante 30 minutos. A continuación, se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (0.96 g, 0.83 mmol) y la mezcla se calentó durante 24 horas a 100 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (25 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (30 ml), salmuera (30 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 90-100 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 48 % (1.9 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 10.83 (s, 1H), 7.54 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.92-6.71 (m, 3H), 3.62 (bs, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.65-1.35 (m, 3H), 1.29-1.14 (m, 9H), 0.82 (t, J = 8.8 Hz, 6H).
LCMS: (Método A) 473.2 (M++H), Rt. 2.67 min, 87.18 % (máx.).
Intermedio 104
Ácido 4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzoico
Figure imgf000103_0001
A una solución agitada de 4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H) -il)benzonitrilo (Intermedio 103; 1.5 g, 3.17 mmol) en una mezcla de etanol y agua (4:1,20 ml), se añadió NaOH (1.9 g, 47.67 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 72 horas a 100 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y se acidificó con HCl concentrado a 0 °C a pH ~2. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 * 50 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (50 ml) y salmuera (50 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 9 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 58 % (0.76 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 492.1 (M++H), Rt. 2.37 min, 38.32 % (máx.).
Intermedio 105
N-(fe/f-butil)-4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzamida
Figure imgf000103_0002
A una solución agitada de ácido 4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzoico (intermedio 104, 150 mg, 0.3 mmol) en DMF (3 ml) a temperatura ambiente, se añadió trietilamina (92.4 mg, 0.91 mmol), fe/f-butilamina (44.6 mg, 0.61 mmol) y hAt U (232 mg, 0.61 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua fría (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (10 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 35-40 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 42 % (70 mg, sólido color amarillo pálido).
LCMS: (Método A) 547.2 (M++H), Rt. 2.78 min, 87.33 % (máx.).
Intermedio 106
('£J-3-((3,3-dibutil-5-(4-(tert-butilcarbamoil)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5- benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000104_0001
A una solución agitada de N-(fe/f-but¡l)-4-(3,3-d¡but¡l-8-h¡drox¡-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzamida (¡ntermed¡o 105; 70 mg, 0.12 mmol) en THF (2 ml) a temperatura amb¡ente, se añad¡eron DAbCo (1.4 mg, 0.012 mmol) y prop¡olato de et¡lo (18.9 mg, 0.19 mmol). A cont¡nuac¡ón, la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 30 m¡n a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo resultante se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfr¡ada con h¡elo (2 ml) y EtOAc (2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 3 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfr¡ada con h¡elo (3 ml) y salmuera (3 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el mater¡al crudo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 30 %/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 66 % (55 mg, goma de color amarillo pál¡do).
LCMS: (Método A) 645.3 (M++H), Rt. 3.14 m¡n, 94.44 % (máx.).
Intermed¡o 107
4-(3,3-d¡but¡l-8-h¡drox¡-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-5(2H)-¡l)-N-¡soprop¡lbenzam¡da
Figure imgf000104_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do 4-(3,3-d¡but¡l-8-h¡drox¡-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-5(2H)-¡l) benzo¡co (¡ntermed¡o 104; 0.23 g, 0.46 mmol) en Dm F (3 ml) se añad¡eron tr¡et¡lam¡na (0.19 ml, 1.4 mmol), ¡soprop¡lam¡na (0.55 g, 0.93 mmol) y HATU (0.36 g, 0.93 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo resultante se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfriada con h¡elo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfriada con h¡elo (10 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 50 %/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 28 % (70 mg, sól¡do color marrón pál¡do).1
1H RMN (400 MHz, CDCls): 57.65-7.63 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 6.92 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.81 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.32-4.28 (m, 1H), 3.65 (bs, 2H), 3.15 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.41-1.21 (m, 18H), 0.87-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método A) 533.3 (M++H), Rt. 2.58 m¡n, 84.35 % (máx.).
Intermed¡o 108
('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(¡soprop¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo
Figure imgf000105_0001
A una solución agitada de 4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)-N-isopropilbenzamida (intermedio 107; 70 mg, 0.12 mmol) en THF (5 ml), se añadieron DABCO (1.5 mg, 0.013 mmol) y propiolato de etilo (19.3 mg, 0.19 mmol) y se agitó la mezcla de reacción durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (2 ml) y EtOAC (2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 70 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 50 % (50 mg, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 631.3 (M++H), Rt. 2.96 min, 70.99 % (máx.).
Intermedio 109
Z)-3-((3,3-dibutil-7-(etiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)- 2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000105_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(etiltio)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 101; 0.4 g, 0.86 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.06 g, 2.6 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.35 g, 1.7 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se trituró con Et2O El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 73 % (0.36 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 564.1 (M++H), Rt. 3.47 min, 54.37 % (máx.).
Intermedio 110
1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-7-(etiltio)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000105_0003
A una solución agitada de una mezcla de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepinay 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-7-yodo-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 91; 1.2 g, 2.3 mmol) en Se añadió DMF seco (12 ml), tioetóxido de sodio (0.98 g, 11.6 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 100 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se inactivó con agua enfriada con hielo (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro.
La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 72 % (0.72 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.48 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 7.22-7.17 (m, 2H), 6.96-6.91 (m, 1H), 6.79-6.72 (m, 1H), 3.65 (bs, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.70 ( q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.34-1.30 (m, 4H), 1.15-1.07 (m, 7H), 0.79 (t, J = 7.20 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 434.2 (M++H), Rt. 2.92 min, 98.63 % (máx.).
Intermedio 111
Z)-3-((3-butil-3-etil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000106_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-(etiltio)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 110, 0.4 g, 0.92 mmol) en DMF (4 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.07 g, 2.7 mmol) y la mezcla se agitó a esta temperatura durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.37 g, 1.8 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 h a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15-20 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 47 % (0.23 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.68 (s, 1H), 7.63-7.62 (m, 1H), 7.30 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18-7.15 (m, 2H), 6.99 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.78 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.71 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.43-1.31 (m, 4H), 1.17­ 1.03 (m, 7H), 0.72 (t, J = 4.40 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 536.2 (M++H), Rt. 3.17 min, 89.63 % (máx.).
Intermedio 112
f£J-3-((3-butil-3-etil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo
Figure imgf000106_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-(etiltio)-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 110, 0.3 g, 0.69 mmol) en THF seco (3 ml), se añadieron propiolato de etilo (0.081 g, 0.83 mmol) y DABCO (8 mg, 0.06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml), y luego la parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15-20 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 95 % (0.36 g, goma incolora).
LCMS: (Método A) 532.3 (M++H), Rt. 3.34 min, 95.17 % (máx.).
Intermedio 113
f£J-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-metilacrilato de metilo
Figure imgf000107_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (0.5 g, 0.88 mmol) en DMF seca (4 ml), (E)-3-bromo-2-metilacrilato de metilo (0.32 g, 1.76 mmol) y carbonato de potasio (0.37 g, 2.64 mmol) se añadió y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 50 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 12 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 6 8 % (0.4 g, sólido color marrón).
Intermedio 114
ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8 -il)oxi)-2 -metilacrílico
Figure imgf000107_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-metilacrilato de metilo (Intermedio 113; 0.2 g, 0.29 mol)) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (2:1, 6 ml), se añadió hidróxido de litio (0.03 g, 0.59 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua ( 8 ml) y salmuera ( 8 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 0.2 g (goma cruda, blanquecina).
LCMS: (Método E) 653.2 (M++H), Rt. 3.02 min, 89.63 % (máx.)
Intermedio 115
1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000107_0003
A una solución agitada de una mezcla de 1,1-dióxido 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (1.0 g, 1.62 mmol) en DCM (20 ml), se añadió gota a gota BBr3 (solución 1 M en DCM; 1.94 ml, 1.94 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. La reacción se monitorizó mediante UPLC, que indicó la formación de producto desprotegido con PMB. Se añadió de nuevo BBr3 (solución 1 M en DCM; 3.89 ml, 3.89 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se dejó en agitación durante 48 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con MeOH (10 ml). A continuación, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 16 % (130 mg, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 10.54 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 7.09 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 6.95 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.00 (s, 2H), 1.49-1.45 (m, 2H), 1.39-1.31 (m, 2H), 1.23-1.14 (m, 3H), 1.09-0.94 (m, 5H), 0.73 (t, J = 8.0 Hz, 6H). Intermedio 116
(E)-3-((7-bromo-3,3-dibutil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi) acrilato de tert-butilo
Figure imgf000108_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 115; 0.1 g, 0.20 mmol) en THF (5 ml) se añadieron DABCO (0.002 g, 0.02 mmol) y propiolato de tert-butilo (0.04 g, 0.31 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para dar el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 15 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 87 % (0.11 g, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.78 (bs, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.18 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.18 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.02 (bs, 2H), 1.51-1.35 (m, 13H), 1.26­ 1.01 (m, 4H), 0.90-0.80 (m, 4H), 0.80-0.60 (m, 6H). LCMS: (Método A) 605.2 (M+-2H), Rt. 3.78 min, 90.48 % (máx.). Intermedio 117
Clorhidrato de 2-aminobutanoato de etilo
Figure imgf000108_0002
A una solución agitada de ácido 2-aminobutanoico (100 g, 0.97 mol) en etanol (750 ml), se añadió cloruro de tionilo (78 ml, 1.07 mol) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 80 °C. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo que se usó tal cual para el paso siguiente sin purificación adicional.
Rendimiento: 93 % (152 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.66 (bs, 3H), 4.25-4.16 (m, 2H), 3.98-3.85 (m, 1H), 1.84 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.23 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
Intermedio 118
f£J-2-(bencilidenamino) butanoato de etilo
Figure imgf000108_0003
A una solución agitada de clorhidrato de 2-aminobutanoato de etilo (intermedio 117; 152 g, 0.91 mol) en DCM (900 ml), se añadió trietilamina (152 ml, 1.09 mol) a 0 °C durante un período de 30 minutos. Se añadió sulfato de magnesio (98 g, 0.82 mol) en porciones a la mezcla de reacción a 0 °C. Luego se añadió benzaldehído (84 ml, 0.82 mol) a la mezcla de reacción a 0 °C durante un período de 20 minutos y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El producto crudo resultante se disolvió en éter de petróleo (1000 ml) y se filtró de nuevo a través de celite. Luego, el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. Este material crudo se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 90 % (180 g, líquido color marrón pálido).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.40 (s, 1H), 7.79-7.76 (m, 2H), 7.49-7.47 (m, 3H), 4.16-4.10 (m, 2H), 3.98-3.95 (m, 1H), 1.92-1.89 (m, 1H), 1.79-1.74 (m, 1H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.85 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Intermedio 119
(EJ-2-(bencilidenamino)-2-etilhexanoato de etilo
Figure imgf000109_0001
A una solución agitada de NaH (60 %, 32.8 g, 0.82 mol) en DMF (100 ml) a 0 °C, se añadió lentamente (E)-2-(bencilidenamino)butanoato de etilo (Intermedio 118; 180 g, 0.82 mol) en d Mf (800 ml) durante un período de 30 minutos. A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 1.5 horas a temperatura ambiente. Se añadió yoduro de n-butilo (93 ml, 0.82 mol) a la mezcla de reacción a 0 °Cy la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con 2-propanol (100 ml) a 0 °C y luego se diluyó con agua (1000 ml). La capa acuosa se extrajo con éter de petróleo (1000 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (200 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 88 % (200 g, líquido amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.34 (s, 1H), 7.80 - 7.77 (m, 2H), 7.47-7.44 (m, 3H), 4.16 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.51­ 1.79 (m, 4H), 1.31-1.18 (m, 7H), 0.88 - 0.84 (m, 6H).
Intermedio 120
2-amino-2-etilhexanoato de etilo
Figure imgf000109_0002
A una solución agitada de f£j-2-(bencilidenamino)-2-etilhexanoato de etilo (intermedio 119; 200 g, 0.73 mol) en éter de petróleo (500 ml), se añadió Hcl diluido (1000 ml, 1.5 N) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente. durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la capa orgánica se separó y la capa acuosa se lavó con EtOAc (2 x 100 ml). A continuación, la capa acuosa se alcalinizó (pH ~8.5) utilizando bicarbonato de sodio sólido (200 g) y se extrajo con EtOAc (2 * 200 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. El material crudo se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 80 % (110 g, líquido amarillo pálido).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 54.08 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.68 - 1.00 (m, 13H), 0.85 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.77 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Intermedio 121
2-Amino-2-etil-N-fenilhexanamida
Figure imgf000109_0003
A una solución agitada de anilina (48.3 ml, 534 mmol) en THF (250 ml) a -78 °C, se añadió gota a gota n-BuLi (2.6 M en hexanos; 205 ml, 534 mmol) durante un período de 30 minutos, y la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos de -25 °C a -30 °C. Luego se añadió 2-amino-2-etilhexanoato de etilo (intermedio 120; 50 g, 267 mmol) en THF (250 ml) a la mezcla de reacción a -78 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a -78 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (500 ml) a -78 °C. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título en crudo. El producto crudo se disolvió en éter de petróleo (1000 ml). La parte orgánica se lavó con metanol al 30 % en agua (2 x 250 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 66 g (crudo, líquido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.64 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.30 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 1.76-1.07 (m, 10H), 0.86-0.77 (m, 6H).
Intermedio 122
2-etil-N1-fenilhexano-1,2-diamina
Figure imgf000110_0001
A una solución agitada de 2-amino-2-etil-N-fenilhexanamida (Intermedio 121; 66 g, 0.28 mol) en THF (600 ml), se añadió dimetilsulfuro de borano (2 M en THF, 253 ml, 0.51 mol) a 0 °C y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con metanol (300 ml) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se calentó durante 2 horas a 70 °C. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se disolvió en EtOAc (1000 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 150 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 40 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 82 % (50 g, líquido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.04 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.49 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.39 -1.17 (m, 10H), 0.88-0.79 (m, 6H).
Intermedio 123
1,2-bis(2,4-dibromo-5-metoxifenil)disulfano
Figure imgf000110_0002
A una solución agitada de 3-metoxibencenotiol (100 g, 0.7 mol) en metanol (1000 ml), se añadió bromo (73 ml, 1.4 mol) gota a gota a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y el producto crudo obtenido se diluyó con EtOAc (2000 ml) y se lavó con agua (2 x 500 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se disolvió en ácido acético glacial (600 ml), se añadió gota a gota bromo (20 ml) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. El sólido obtenido se filtró, se trituró con DCM y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título puro. Rendimiento: 37 % (78 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.69 (s, 2H), 7.17 (s, 2H), 3.84 (s, 6H).
Intermedio 124
Cloruro de 2,4-dibromo-5-metoxibencenosulfonilo
Figure imgf000110_0003
A una suspensión agitada de 1,2-bis(2,4-dibromo-5-metoxifenil)disulfano (Intermedio 123; 20.0 g, 33.67 mmol) y nitrato de potasio (17.02 g, 168.35 mmol) en acetonitrilo (200 ml) se añadió gota a gota se añadió cloruro de sulfurilo (13.6 ml, 168.35 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en hielo picado y el sólido obtenido se separó por filtración. El sólido se lavó con agua y se secó al vacío para dar el compuesto del título puro. Rendimiento: 91 % (22.5 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 58.05 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 4.01 (s, 3H).
Intermedio 125
2,4-d¡bromo-5-metox¡-N-(3-((fen¡lamino)met¡l)heptan-3-¡l)bencenosulfonam¡da
Figure imgf000111_0001
A una solución agitada de 2-etil-N1-fenilhexano-1,2-d¡am¡na (Intermedio 122; 4.9 g, 22.34 mmol) en THF (10 ml) se añadieron cloruro de 2,4-dibromo-5-metoxibencenosulfonilo (Intermedio 124; 10.5 g, 28.91 mmol) y trietilamina (9.3 ml, 67.02 mmol) a 0 °Cy la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 10 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 59 % (7.2 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 58.01 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.03 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 6.54 -6.46 (m, 3H), 4.80 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.07-2.96 (m, 2H), 1.66-1.41 (m, 4H), 1.15-0.95 (m, 4H), 0.78-0.69 (m, 6H). Intermedio 126
1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-et¡l-8-metox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azepina
Figure imgf000111_0002
A una solución agitada de 2,4-d¡bromo-5-metox¡-N-(3-((fen¡lamino)met¡l)heptan-3-¡l)benceno-sulfonam¡da (Intermedio 125; 7.2 g, 13.1 mmol) en DMF (50 ml) se añadieron carbonato de potasio (3.62 g, 26.2 mmol) y polvo de cobre ( 834 mg, 13.1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 24 horas a 150 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (25 ml). La parte del filtrado se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 20 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 83 % (5.1 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.43-7.30 (m, 4H), 7.15-7.13 (m, 2H), 7.03-7.01 (m, 2H), 4.00-3.60 (m, 5H), 1.62-1.34 (m, 4H), 1.08- 0.95 (m, 4H), 0.74-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 467.0 (M+), Rt. 3.06 min, 95.31 % (máx.).
Intermedio 127
1,1 -dióxido de 7-bromo-3-but¡l-3-etil-8-metox¡-2-(4-metox¡benc¡l)-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡na
Figure imgf000111_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 12620.0 g, 42.7 mmol) en N-metil-2-pirrolidona (100 ml) se añadieron Cs2CO3 (27.8 g, 85.5 mmol) y bromuro de p-metoxibencilo (7.98 ml, 39.5 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 50 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 10 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 64 % (16 g, sólido blanco).
LCMS: (Método A) 587.2 (M+), Rt. 3.51 min, 92.94 % (máx.).
Intermedio 128
1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000112_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 127; 16.0 g, 27.2 mmol) en DMF (120 ml), se añadió tiometóxido de sodio (9.5 g, 136.1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 ml) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 50 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 10 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 65 % (9.2 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 10.37 (bs, 1H), 7.31-7.22 (m, 5H), 7.01-6.65 (m, 6H), 4.32-4.13 (m, 2H), 4.10-3.90 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.62-1.34 (m, 4H), 1.08-0.98 (m, 4H), 0.74-0.65 (m, 6H). LCMS: (Método E) 541.2 (M++H), Rt. 2.86 min, 93.67 % (máx.).
Intermedio 129
(EJ-3-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000112_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepina (intermedio 128, 1.0 g, 1.85 mmol) en THF (10 ml) se añadieron Da BCO (0.02 g, 0.18 mmol) y propiolato de t-butilo (0.28 g, 2.22 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 * 15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 15 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 49 % (0.6 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.66 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.37 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.20 -7.14 (m, 3H), 6.87 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.48 -6.25 (m, 1H), 5.27 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.30-4.10 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.50-1.36 (m, 13H), 1.18-0.84 ( m, 4H), 0.72-0.48 (m, 6H). LCMS: (Método A) 611.2 (M+-fBu+H), Rt. 3.94 min, 98.16 % (máx.).
Intermedio 130
Z)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrilato de met¡lo
Figure imgf000113_0001
A una suspens¡ón de NaH (60 %, 29 mg, 1.21 mmol) en DMF (1 ml) a 0 °C, N-(tert-but¡l)-4-(3,3-d¡but¡l-8-h¡drox¡-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-5(2H)-¡l)benzam¡da (Intermed¡o 105; 550 mg, 1.0 mmol) en DMF (2 ml) y la mezcla se ag¡tó durante 30 m¡nutos a temperatura amb¡ente. Luego se añad¡ó 3-bromo-2,2-d¡fluoroprop¡onato de met¡lo (164 mg, 0.8 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se calentó durante 8 horas a 65 °C. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó hasta 0 °C, se ¡nact¡vó con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml) y la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío. El producto crudo obten¡do se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfriada con h¡elo (15 ml) y EtOAc (15 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfriada con h¡elo (10 ml), salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 40 %/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 14 % (90 mg, sól¡do color marrón pál¡do). LCMS: (Método E) 649.3 (M++H), Rt. 2.76 m¡n, 73.56 % (máx.). Intermed¡o 131
1,1 -d¡óx¡do de 3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-8-metox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000113_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de 1,1 -d¡óx¡do de 7-bromo-3,3-d¡but¡l-8-metox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na (3 g, 6.43 mmol) en tolueno (10 ml), se añad¡ó Cs2CO3 (5.2 g, 16.1 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se desgas¡f¡có con N2 durante 10 m¡nutos. Luego se añad¡eron d¡met¡lam¡na (2M en THF; 6.4 ml, 12.8 mmol), Pd(OAc)2 (0.04 g, 0.16 mmol) segu¡do de X-Phos (0.08 g, 0.16 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó durante 16 horas a 90 °C. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se f¡ltró a través de cel¡ta y se lavó con EtOAc (100 ml). La parte orgán¡ca comb¡nada se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 13-15 % de EtOAc/PE, gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 26 % (0.7 g, goma de color amarillo).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.28 (s, 1H), 7.22-7.18 (m, 2H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.83 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.34 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 (bs, 2H), 3.29 (s, 2H), 2.66 (s, 6H), 1.54-1.41 (m, 2H), 1.35-1.24 (m, 2H), 1.20-1.12 ( m, 4H), 0.85-0.75 (m, 6H). LCMS: (Método A) 431.2 (M++H), Rt. 3.19 m¡n, 83.34 % (máx.).
Intermed¡o 132
1,1 -d¡óx¡do de 3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-8-h¡drox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000114_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 131; 1.9 g, 4.41 mmol) en DMF (15 ml) a temperatura ambiente, se añadió tiometóxido de sodio (1.54 g, 22.06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 80 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se inactivó con agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para proporcionar el compuesto crudo que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 1.8 g (goma cruda, color marrón).
LCMS: (Método E) 417.2 (M++H), Rt. 2.11 min, 55.04 % (máx.).
Intermedio 133
(E)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il) oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000114_0002
A una solución agitada de 3,1,1 -dióxido de 3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 132; 0.1 g, 0.24 mmol) en THF seco (3 ml), se añadieron propiolato de tert-butilo (0.046 g, 0.36 mmol) y DABCO (2.7 mg, 0.024 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 85 % (0.11 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.56 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 6.97 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.38 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.72 (bs, 2H), 3.29 (s, 2H), 2.67 (s, 6H), 1.44 ( s, 9H), 1.37-1.30 (m, 4H), 1.17-0.95 (m, 4H), 0.75-0.70 (m, 6H). LCMS: (Método A) 543.3 (M++H), Rt. 3.5 min, 97.69 % (máx.).
Intermedio 134
5-Fluoro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina
Figure imgf000114_0003
A una solución agitada de 3-fluoro-4-metoxianilina (5 g, 0.04 mmol) en ácido acético (50 ml), se añadió tiocianato de amonio (2.96 g, 0.04 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos a temperatura ambiente. Luego se añadió bromo (5.7 g, 0.04 mmol) disuelto en ácido acético (10 ml) gota a gota a la mezcla de reacción a 15 °C y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, el sólido obtenido se filtró y el sólido se lavó con ácido acético (10 ml) y luego se secó al vacío. El sólido resultante se suspendió en agua (20 ml), se alcalinizó con solución de NaOH al 10 % (pH ~10) y se filtró. El sólido obtenido se lavó con agua (3 x 20 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 84 % (5.9 g, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.52 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.18 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H). LCMS: (Método A) 199.04 (M++H), Rt. 1.08 min, 98.24 % (máx.).
Intermedio 135
Ácido 2-(((2-Amino-4-fluoro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-butilhexanoico
Figure imgf000115_0001
A una solución agitada de 5-fluoro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (intermedio 134; 5.9 g, 0.03 mmol) en agua (60 ml), se añadió KOH (27 g, 0.47 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente. A continuación, se añadió gota a gota ácido 2-(bromometil)-2-butilhexanoico (4.5 g, 0.04 mmol) (disuelto en 20 ml de THF) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Después del consumo del material de partida (controlado por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 12.5 g (goma cruda, color marrón).
LCMS: (Método A) 358.2 (M++H), Rt. 2.67 min, 61.03 % (máx.).
Intermedio 136
3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000115_0002
A una solución agitada de ácido 2-(((2-amino-4-fluoro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-butilhexanoico (Intermedio 135; 12.5 g, 0.04 mmol) en EtOAc (80 ml) a 0° C, se añadieron gota a gota trietilamina (9.04 g, 0.07 mmol) y solución de anhídrido 1-propanofosfónico (50 % en EtOAc; 16.7 g, 0.05 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se inactivó con agua (100 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con una solución de salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 48 % (5.7 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, D M SO d): 59.60 (s, 1H), 7.18 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.98 (s, 2H), 1.64- 1.50 (m, 2H), 1.49-1.45 (m, 2H), 1.22-1.17 (m, 8H), 0.83 (t, J = 6.7 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 340.2 (M++H), Rt. 2.96 min, 99.47 % (máx.).
Intermedio 137
3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000115_0003
A una solución agitada de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 136; 5.7 g, 0.02 mol) en yodobenceno (30 ml) se añadieron yoduro de cobre (I) (0.67 g, 0.003 mol) y K2CO3 (4.84 g, 0.035 mol) y la solución se purgó con nitrógeno durante 20 minutos para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (0.56 ml, 0.017 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 40 horas a 135 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y la capa de celite se lavó con EtOAc (100 ml). El filtrado se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 3-5 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 63% (4.6 g, sólido color marrón pálido). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 57.44-7.38 (m, 3H), 7.29-7.26 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 11.96 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.46 (s, 2H), 1.37-1.38 (m, 4H), 1.18-1.37 (m, 8H), 0.79-0.81 (m, 6H). LCMS: (Método A) 416.3 (M++H), Rt. 3.32 min, 99.63 % (máx.).
Intermedio 138
3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000116_0001
A una solución agitada de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 137; 4.6 g, 11.07 mmol) en THF (45 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota dimetilsulfuro de borano (2 M en THF; 17.2 ml, 33.2 mmol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 40 horas a 75 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con metanol (10 ml) y se calentó durante 2 horas a 65 °C. A continuación, la mezcla de reacción resultante se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 5 g (líquido crudo, incoloro).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.20 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 6.81 (t, J = 7.1 Hz, 1H) , 6.62 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.33 (s, 2H), 2.73 (s, 2H), 1.18-1.11 (m, 12H), 0.79-0.78 (m, 6H ). LCMS: (Método D) 402.4 (M++H), Rt. 3.9 min, 99.4 % (máx.).
Intermedio 139
1.1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000116_0002
A una solución agitada de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 138; 5 g, 0.01 mmol) en THF (75 ml) y agua (7.5 ml), se añadió oxona (38.3 g, 0.13 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a esa temperatura. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 59 % (3.2 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método D) 434.2 (M++H), Rt. 3.21 min, 92.6 % (máx.).
Intermedio 140
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000116_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 139; 1.0 g, 2.3 mmol) en DCM (10 ml), se añadió BBr3 (1 M en DCM; 7 ml, 6.92 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió gota a gota metanol (10 ml) a 0 °C hasta que cesó la efervescencia. Luego, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml). La capa de DCM se lavó con agua (2 x 20 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 25-30 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 93 % (0.9 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.45 (s, 1H), 7.48 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.90 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.27 (s, 2H), 1.40-1.32 (m, 4H), 1.18-1.01 (m, 8H ), 0.75 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 420.3 (M++H), Rt. 2.99 min, 95.69 % (máx.).
Intermedio 141
(E)-3-((3,3-dibutil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000117_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-fluoro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 140; 0.15 g, 0.35 mmol) en THF seco (5 ml), se añadieron propiolato de etilo (0.067 g, 0.53 mmol) y DABCO (4.0 mg, 0.035 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtoAc (2 x 15 ml). La parte orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 82 % (0.16 g, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.73 (s, 1H), 7.71 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.37 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.11 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.83 (bs, 2H), 3.47 (s, 2H), 1.42 (m, 11H), 1.35-1.28 (m, 2H), 1.27-1.08 (m, 4H), 1.05-1.01 (m, 4H), 0.73 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 490.2 (M-fBu+H), Rt. 3.78 min, 95.03 % (máx.).
Intermedio 142
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-7-carbonitrilo
Figure imgf000117_0002
A una solución desgasificada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (2 g, 4.03 mmol) en DMA (10 ml), carbonato de sodio (0.42 g, 4.03 mmol) y K4[Fe(CN)]6 (1.7 g, 4.03 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 15 minutos. Pd(AcO)2 (90 mg, 0.4 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 24 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. La masa resultante se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAC (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (50 ml) y salmuera (50 ml) y se secó sobre Na2sO 4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 90-100 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 44 % (1.2 g, sólido color amarillo brillante).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.56 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.28 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.96 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.40-1.30 (m, 4H), 1.20-1.00 (m, 8H), 0.75 (t, J = 6.1 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 441.3 (M++H), Rt. 3.15 min, 87.84% (máx.).
Intermedio 143
1,1-dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-7-carbonitrilo
Figure imgf000118_0001
A una solución de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-7-carbonitrilo (Intermedio 142; 0.76 g, 1.72 mmol) en DCM (10 ml) a -10 °C, se añadió BBr3 (1 M en DCM, 3.4 ml, 3.45 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con agua enfriada con hielo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (10 ml) y salmuera ( 10 ml) y se secó sobre Na2sO 4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 30 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 2 8 % (0.21 g, sólido color amarillo).
1H RMN (400 MHz, CDCls): 57.68 (s, 1H), 7.34 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.11-7.05 (m, 4H), 3.75 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 1.42­ 1.27 (m, 4H), 1.18-1.04 (m, 8 H), 0.80 ( t, J = 6 . 8 Hz, 6 H). LCMS: (Método E) 427.2 (M++H), Rt. 2.76 min, 68.44 % (máx.).
Intermedio 144
(E)-3-((3,3-dibutil-7-ciano-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il) oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000118_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-7-carbonitrilo (Intermedio 143; 0.21 g, 0.49 mmol) en THF (2 ml), se añadieron DABCO (5.50 mg, 0.05 mmol) y propiolato de tert-butilo (81 mg, 0.69 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml) y salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 81 % (220 mg, sólido color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.80 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.37 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 7.29 (d, J = 6 . 8 Hz, 2H), 7.11 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.57 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 1.46-1.27 (m, 13H), 1.21-0.85 (m, 8 H ), 0.74 (t, J = 6.4 Hz, 6 H). LCMS: (Método E) 497.2 (M+-tBu+H), Rt.3.09 min, 80.74 % (máx.).
Intermedio 145
(E)-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1.2, 5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2 -enoato de metilo
Figure imgf000118_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (0.5 g, 0.88 mmol) en THF (10 ml), se añadieron a temperatura ambiente DABCO (0.09 g, 0.88 mmol) y 2-butinoato de metilo (0.13 g, 1.32 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 50 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (30 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 7 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 64 % (0.38 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.41-7.34 (m, 3H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.16-7.13 (m, 3H), 6.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.34 (s, 1H ), 4.76 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.56 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 2.42 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.00-1.75 (m, 2H), 1.50-1.32 (m, 2H), 1.20-0.75 (m, 8H), 0.75-0.50 (m, 6H). LCMS: (Método A) 667.3 (M++H), Rt.
3.84 min, 99.29 % (máx).
Intermedio 146
Ácido (E)-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2-enoico
Figure imgf000119_0001
A una solución agitada de (E)-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1.2, 5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2-enoato de metilo (intermedio 145; 0.38 g, 0.56 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (10 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.047 g , 1.13 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1 ml, 1.5 N). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml) y la capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 20 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 40 % (150 mg, sólido blanco). Lc MS: (Método E) 653.2 (M++H), Rt. 3.01 min, 98.64 % (máx.)
Intermedio 147
(Z)-3-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil1-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000119_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepina (intermedio 128; 1 g, 1.85 mmol) en d Mf (10 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.037 g, 9.25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos a 0 °C. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (1.1 g, 5.55 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 80 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 30 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 33 % (0.04 g, goma color marrón). LCMS: (Método A) 643.2 (M++H), Rt. 3.35 min, 90.58 % (máx.).
Intermedio 148
Ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil1-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000120_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1.2 ,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (Intermedio 147; 0.04 g, 0.62 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (10 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.13 g , 3.11 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4), y luego se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se evaporó al vacío y el producto crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 89.9 % (350 mg, goma color marrón claro).
LCMS: (Método A) 629.1 (M++H), Rt. 3.08 min, 87.52 % (máx.).
Intermedio 149
1,1 -dióxido 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000120_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 126; 1.0 g, 2.13 mmol) en DCM (10 ml), se añadió BBr3 (0.32 ml, 3.37 mmol) a -78 °C y luego la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con metanol (10 ml) y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 24 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 51 % (0.5 g, goma incolora).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 10.58 (s, 1H), 7.37-7.35 (m, 2H), 7.27 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.06-7.04 (m, 2H), 6.97­ 6.94 (m, 2H), 3.83 (bs, 2H), 1.61-1.58 (m, 2H), 1.50-1.41 (m, 2H), 1.37-1.33 (m, 4H), 0.73 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 455.1 (M++2H), Rt 2.81 min, 94.49 % (máx.).
Intermedio 150
f£J-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000121_0001
A una solución agitada de 1,1-dióxido 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 149, 0.5 g, 1.10 mmol) ) en THF (5 ml), se añadieron DABCO (12.3 mg, 0.1 mmol) y Propiolato de tertbutilo (0.22 ml, 1.60 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 8 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 73 % (0.46 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.75 (bs, 1H), 7.65 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45-7.42 (m, 2H), 7.33-7.31 (m, 2H), 7.19-7.15 (m, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.19 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.02 (bs, 2H), 1.60-1.51 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.28­ 0.75 (m, 6H), 0.72-0.47 (m, 6H). LCMS: (Método A) 577.2 (M+-2H), Rt. 3.41 minutos, 94.96 %.
Intermedio 151
1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000121_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 126; 2 g, 4.27 mmol) en N-metil-2-pirrolidona (10 ml) se añadieron Cs2CO3 (2.78 g, 8.53 mmol) y yoduro de metilo (1.33 ml, 21.36 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 8 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 8 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 65 % (1.3 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.37-7.32 (m, 3H), 7.22-7.11 (m, 2H), 7.05-7.01 (m, 2H), 4.02-3.93 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 1.85-1.73 (m, 2H), 1.55-1.46 (m, 2H), 1.20-0.91 (m, 4H), 0.78-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método E) 483.2 (M++2H), Rt. 2.95 min, 96.64 % (máx).
Intermedio 152
1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-metil-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000121_0003
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 151; 1.3 g, 2.7 mmol) en DMF (10 ml), se añadió tiometóxido de sodio (0.72 g, 13.50 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro, se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 7 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 72 % (0.87 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO- de): 510.35 (s, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 7.01-6.99 (m, 2H), 6.87 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 3.82 (bs , 2H), 2.68 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.84-1.71 (m, 2H), 1.54-1.47 (m, 2H), 1.24-0.95 (m, 4H), 0.86-0.68 (m , 6 H). LCMS: (Método E) 435.2 (M++H), Rt. 2.69 min, 97.42 % (máx).
Intermedio 153
('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fenil-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de tert-butilo
Figure imgf000122_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-but¡l-3-etil-8-h¡drox¡-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 152; 200 mg, 0.46 mmol) en THF seco (3 ml), se añadieron DABCO (5.10 mg, 0.05 mmol) y propiolato de tert-butilo (0.1 ml, 0.7 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se diluyó con agua enfriada con hielo (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se evaporó al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 6 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 75 % (190 mg, sólido blanco).
H RMN (400 MHz, DMSO- de): 57.61 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 8.0 Hz, 3H), 7.30 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 6.46 (s, 1H), 5.31 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.92-1.86 (m, 1H), 1.82­ 1.76 (m, 1H), 1.55-1.43 (m, 10H), 1.19-1.08 (m, 5H), 0.83-0.62 (m, 6 H).
LCMS: (Método A) 505.2 (M+-tBu+H), Rt. 3.65 minutos, 97.40 %.
Intermedio 154
1,1 -dióxido de 3-butil)-3-et¡l)-8-metox¡-7-(met¡l)am¡no)-5-fen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000122_0002
A una solución agitada de una mezcla de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-et¡l-8-metox¡-5-fenil-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepinay 1,1-dióxido de 3-butil-3-et¡l-7-yodo-8-metox¡-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazep¡na (Intermedio 91; 1. 0 g, 2 .1 mmol) en tolueno ( 10 ml), se añadió Cs2CO3 (1.74 g, 5.3 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó durante 10 min con N2. Entonces Pd(OAc)2 (0.048 g, 0.2 mmol) seguido de X-Phos (0.102 g, 0.2 mmol) y metilamina (solución de THF 2 M; 2.14 ml, 4.3 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 ha 90 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (15 ml). La parte orgánica combinada se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 13-15 % de EtOAc/PE, gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 62 % (0.55 g, goma incolora).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.19 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.15 (s, 2H), 6.93 (s, 2H), 6.79 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 3.85 ( s, 3H), 3.62 (bs, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.57 (d, J = 2.8 Hz, 3H), 1.36-1.29 (m, 4H), 1.18-1.08 (m, 4H), 0.75 (t, J = 9.20 Hz, 6 H). LCMS: (Método A) 417.1 (M++H), Rt. 2.78 min, 98.76% (máx.).
Intermedio 155
1,1-dióxido de 3-but¡l-3-etil-8-h¡drox¡-7-(met¡lam¡no)-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡na
Figure imgf000123_0001
A una solución agitada de 3-butil-3-etil-8-metoxi-7-(metilamino)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina 1,1-dióxido (Intermedio 154; 1.0 g, 2.4 mmol) en DMF (10 ml) a temperatura ambiente, se añadió tiometóxido de sodio (0.84 g, 12.01 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 80 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se inactivó con agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío para dar el material crudo que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 0.6 g (goma cruda, color marrón). LCMS: (Método A) 403.1 (M++H), Rt. 2.76 min, 78.51 % (máx.).
Intermedio 156
('EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000123_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metilamino)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 1550.15 g, 0.37 mmol) en THF seco (5 ml), se añadieron propiolato de tert-butilo (0.07 g, 5.59 mmol) y dA b CO (4 mg, 0.037 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se sometió a partición entre agua (10 ml) y EtOAc (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 89 % (0.18 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.64 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.32 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.23­ 7.20 (m, 2H), 7.02 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.44 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.81 (bs, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.97 (s, 3H) ), 1.48-1.25 (m, 13H), 1.09-1.05 (m, 4H), 0.74 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 527.0 (M++H), Rt. 3.65 min, 97.28 % (máx.).
Intermedio 157
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000123_0003
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 20; 5 g, 4.74 mmol) en DMF (30 ml) a temperatura ambiente, se añadió NaOMe (30 %, 2 ml, 9.50 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó durante 15 minutos bajo N2. Luego se añadió Cu(I)Br (68 mg, 0.47 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 48 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (100 ml) y salmuera (100 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 30-40 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 69 % (3.1 g, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.29 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 3.71 ( s, 3H), 3.66 (bs, 2H), 3.23 (s, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.46-1.26 (m, 4H), 1.11-1.02 (m, 8H), 0.76 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método E) 478.1 (M++H), Rt. 2.80 min, 80.65 % (máx.).
Intermedio 158
(ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000124_0001
A una suspensión de NaH (60 %, 0.85 g, 21.2 mmol) en DMF (15 ml) a 0 °C se le añadió gota a gota 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 157; 3.1 g, 6.5 mmol) en DMF (7.5 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente . Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropionato de etilo (3.5 g, 16.2 mmol) en DMF (7.5 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se calentó durante 8 horas a 65 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, 20 ml) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se disolvió en agua enfriada con hielo (100 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (100 ml) y salmuera (100 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 40 % (1.5 g, goma de color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.56-7.52 (m, 2H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.42 (s, 1H), 4.27-4.24 (m, 2H ), 3.78-3.73 (m, 5H), 3.40 (s, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.42-1.34 (m, 7H), 1.27-0.99 (m, 8H), 0.75-0.73 (m, 6H ). LCMS: (Método A) 594.2 (M++H), Rt. 3.36 min, 93.27 % (máx.).
Intermedio 159
(ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-hidroxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000124_0002
A una solución agitada de fZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-metoxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (1.5 g, 2.52 mmol) en DCM (20 ml) a -78 °C, se añadió BBr3 (1 M en DCM, 5.1 ml, 5.0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 6 horas a -10 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (50 ml) y salmuera (50 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc PE al 31 %; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 36 % (0.52 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.39 (s, 1H), 7.53-7.49 (m, 2H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.34 (s, 1H), 4.24 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.43-1.24 (m, 4H), 1.16-1.11 (m, 3H) , 1.09-0.98 (m, 8H), 0.75 (t, J = 7.2 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 580.2 (M++H), Rt. 2.99 min, 98.42 % (máx.).
Intermedio 160
5-fluoro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina
Figure imgf000125_0001
A una solución agitada de 3-fluoro-4-metoxianilina (50 g, 0.354 mol) en ácido acético (300 ml), se añadió tiocianato de amonio (29.69 g, 0.39 mol) a temperatura ambiente y luego la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añadió gota a gota bromo (57 g, 0.354 mol) disuelto en ácido acético (100 ml) a la mezcla de reacción a 15 °Cy la mezcla de reacción resultante se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, el sólido obtenido se filtró, se lavó con ácido acético (50 ml) y luego se secó al vacío. El sólido resultante se suspendió en agua (200 ml) y se alcalinizó con solución de NaOH al 10 % (pH~10). El sólido obtenido se filtró, se lavó con agua (3 x 200 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 86 % (60 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 199.0 (M++H), Rt. 1.12 min, 90.09% (máx.).
Intermedio 161
Ácido 2-(((2-amino-4-fluoro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico
Figure imgf000125_0002
A una solución agitada de 5-fluoro-6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (Intermedio 160; 30 g, 0.151 mol) en agua (300 ml), se añadió KOH (135 g, 2.42 mol) y la reacción la mezcla se agitó durante 16 horas a 120 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente. Luego se añadió gota a gota ácido 2-(bromometil)-2-etilhexanoico (43.05 g, 0.18 mol) (disuelto en 100 ml de THF) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl concentrado (pH ~2). La parte acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (30 ml) y salmuera (30 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el material crudo que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 60 g (goma cruda, color marrón).
Intermedio 162
3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000125_0003
A una solución agitada de ácido 2-(((2-amino-4-fluoro-5-metoxifenil)tio)metil)-2-etilhexanoico (Intermedio 161; 60 g, 0.18 mol) en EtOAc (600 ml) a 0° C, se añadieron gota a gota trietilamina (36.7 g, 0.3642 mol) y solución de anhídrido 1-propanofosfónico (50 % en EtOAc; 69.5 g, 0.2185 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), se añadió agua (500 ml) a la mezcla de reacción y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 500 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (250 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 30 % (17 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 312.3 (M++H), Rt. 2.64 min, 99.63 % (máx.).
Intermedio 163
3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000126_0001
A una solución agitada de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 162; 17 g, 0.05 mol) en yodobenceno (170 ml), se añadieron yoduro de cobre (I) (1.03 g, 0.01 mol) y K2CO3 (15.08 g, 0.11 mol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 20 minutos para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (3.52 g, 0.01 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 40 horas a 135 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (250 ml). El filtrado se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 3-5 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 86 % (16 g, sólido color marrón pálido).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.37-7.39 (m, 2H), 7.29 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 12.00 Hz, 2H), 3.89 ( s, 3H), 3.46 (s, 2H), 1.37-1.38 (m, 4H), 1.18-1.37 (m, 4H), 0.79-0.81 (m, 6H). LCMS: (Método A) 387.9 (M+), Rt. 3.09 min, 99.25 % (máx.).
Intermedio 164
3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000126_0002
A una solución agitada de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 163; 16 g, 0.04 mol) en THF (160 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota BH3.DMS (2 M en THF, 62 ml, 0.12 mol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 40 horas a 75 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se inactivó con metanol (100 ml). La solución resultante se calentó durante 2 horas a 65 °C y luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. La mezcla cruda resultante se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 100 % (15 g, líquido incoloro). LCMS: (Método A) 374.3 (M++H), Rt. 2.72 min, 92.66 % (máx.).
Intermedio 165
1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000126_0003
A una solución agitada de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 164; 15 g, 0.04 mol) en THF (100 ml) se añadieron agua (45 ml) y oxona (125 g, 0.40 mol) a temperatura ambiente, y luego la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (250 ml) y salmuera (250 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 92 % (15 g, sólido amarillento).
1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 57.52 (d, J = 8.70 Hz, 1H), 7.23-7.25 (m, 2H), 7.04-7.07 (m, 2H), 6.93-6.95 (m, 1H), 6.80 (d, J = 12.60 Hz) , 1H), 3.90 (s, 3H), 3.28 (s, 2H), 3.31 (m, 2H), 1.17-1.24 (m, 4H), 0.93-0.95 (m, 4H), 0.73-0.83 (m, 6H ). LCMS: (Método A) 406.2 (M++H), Rt. 3.04 min, 95.49 % (máx.).
Intermedio 166
1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000127_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 165; 15 g, 0.036 mol) en DCM (200 ml), se añadió BBr3 (1 M en dCm ; 74 ml, 0.074 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió gota a gota metanol (100 ml) a 0 °C hasta que cesó la efervescencia. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (100 ml) y la capa de DCM se lavó con agua (2 x 200 ml) y salmuera (200 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 30-32 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 94 % (7 g, sólido blanquecino).
1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 57.48 (d, J = 9.60 Hz, 2H), 7.22 (t, J = 7.50 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 7.80 Hz, 2H), 6.74­ 6.79 (m, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 1.36-1.47 (m, 4H), 1.01-1.10 (m, 4H), 0.73- 0.75 (m, 6H). LCMS: (Método A) 392.2 (M++H), Rt. 2.08 min, 96.59 % (máx.).
Intermedio 167
(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)- 2-fluoroacrilato de metilo
Figure imgf000127_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 166; 0.5 g, 0.2 mol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.10 g, 0.02 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de metilo (0.29 g, 0.02 mol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 85 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, pH ~4) y luego se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15-18 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 25 % (0.12 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 494.2 (M++H), Rt. 3.04 min, 85 % (máx.).
Intermedio 168
1-óxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000127_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (1.0 g, 1.81 mmol) en tolueno (10 ml) se añadieron dimetilamina (2M en THF; 2.7 ml, 5.44 mmol) y Cs2CO3 (1.31 g, 4.0 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 10 minutos. Entonces se añadieron Pd(OAc)2 (0.036 g, 0.16 mmol) y X-Phos (0.077 g, 0.16 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 90 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (15 ml). La parte orgánica combinada se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 13-15 % de EtOAc/PE, gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 50 % (0.53 g, goma de color amarillo).
LCMS: (Método A) 580.3 (M++H), Rt. 2.63 min, 85.42 % (máx.).
Intermedio 169
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000128_0001
A una solución agitada de 1-óxido dev3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-metoxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 168; 0.53 g, 0.91 mmol) en DMF seca (5 ml), se añadió tiometóxido de sodio (320 mg, 4.57 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se inactivó con agua enfriada con hielo (2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 87 % (450 mg, sólido blanquecino). LCMS: (Método A) 566.3 (M++H), Rt. 3.31 min, 70.45 % (máx.).
Intermedio 170
Z)-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-2-(4-metoxibencil)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000128_0002
A una solución agitada de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 169; 0.25 g, 0.44 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.058 g, 1.43 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de etilo (0.24 g, 1.1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 65 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, pH ~4), y luego se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con solución de salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío. A continuación, el material crudo resultante se trituró con Et2O y secado al vacío. El compuesto obtenido se volvió a purificar por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 20 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 64 % (0.02 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 682.3 (M++H), Rt. 3.18 min, 80.56 % (máx.).
Intermedio 171
ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-2-(4-metoxibencil)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2- fluoroacrílico
Figure imgf000129_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-2-(4-metoxibencil)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato_de etilo (Intermedio 170; 0.02 g, 0.28 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (5 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.04 g, 0.84 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua (5 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 98 % (0.18 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 654.3 (M+H), Rt. 3.00 min, 78.1 % (máx.).
Intermedio 172
(ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000129_0002
A una suspensión de NaH (60 %, 118 mg, 4.91 mmol) en DMA (3 ml) a 0 °C se le añadió una solución de 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-metil-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 152; 0.4 g, 0.92 mmol) en DMA (3 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Luego se añadió gota a gota etil-3-bromo-2,2-difluoropropionato (0.26 ml, 2.00 mmol) en DMA (3 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se calentó durante 3 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (10 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 10 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 78 % (390 mg, goma incolora).
Intermedio 173
(E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo
Figure imgf000130_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-3-etil-7-fluoro-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 166; 500 mg, 1.28 mmol) en THF (5 ml) a temperatura ambiente, se añadieron DABCO (14 mg, 0.13 mmol) y propiolato de tert-butilo (161 mg, 1.28 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 5 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 76 % (500 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.70-7.72 (m, 2H), 7.27-7.29 (m, 4H), 7.10 (t, J = 7.16 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 12.16 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 12.20 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.45 (s, 2H), 1.53-1.54 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.27-1.30 (m, 2H), 0.96-0.98 ( m, 4H), 0.69-0.70 (m, 6H). LCMS: (Método E) 462.1 (M+-fBu+H), Rt. 3.04 min, 98.65 % (máx.).
Intermedio 174
4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-dihidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)-N,N-dimetilbenzamida
Figure imgf000130_0002
A una solución agitada de ácido 4-(3-butil-3-etil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-dihidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)benzoico (intermedio 104; 500 mg, 1.01 mmol) en DMF (5 ml), se añadieron trietilamina (0.4 g, 4.04 mmol), N,N-dimetilamina (165 mg, 2.03 mmol) y HATU (772 mg, 2.03 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 7 %/DCM; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 99 % (0.6 g, sólido color amarillo).
LCMS: (Método A) 519.3 (M++H), Rt. 2.53 min, 91.00% (máx.).
Intermedio 175
fZj-3-((3,3-dibutil-5-(4-(dimetilcarbamoil)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000130_0003
A una suspensión de NaH (60 %, 90 mg, 3.75 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C se le añadió gota a gota una solución de 4-(3,3-dibutil-8-hidroxi-7-(metiltio)-1,1-dioxido-3,4-dihidro-1,5-benzotiazepin-5(2H)-il)-N,N dimetilbenzamida (Intermedio 175; 600 mg, 1.15 mmol) en DMF (3 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. Luego se añadió gota a gota 3-bromo-2,2-difluoropropionato de etilo (627 mg, 2.89 mmol) en DMF (3 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se calentó durante 8 horas a 65 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2sO 4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 50 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 61 % (450 mg, goma de color amarillo).
1H RMN (400 MHz, CDCls): 57.68 (s, 1H), 7.40-7.30 (m, 3H), 7.05 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.79 (s, 1H), 4.57-4.51 (m, 2H), 3.19 (s, 2H), 3.16 (s, 6 H), 3.07 (s, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.62-1.33 (m, 7H), 1.32-1.15 (m, 8 H), 0.91-0.69 (m, 6 H ). LCMS: (Método E) 635.3 (M++H), Rt. 2.69 min, 94.79 % (máx.).
Intermedio 176
(ZJ-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8 -il)oxi)-2 -fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000131_0001
A una suspensión de NaH (60 %, 183 mg, 4.5 mmol) en DMA seca (3 ml) a 0 °C, se añadió una solución de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-8-hidroxi-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (0.8 g, 1.40 mmol) en DMA (3 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a temperatura ambiente. Luego se añadió gota a gota etil-3-bromo-2,2- difluoropropionato a 0 °C (0.41 ml, 3.10 mmol) en d Ma (3 ml) y la mezcla de reacción se calentó durante 3 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (10 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 15 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 83 % (800 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.63 (s, 2H), 7.37 (s, 2H), 7.28-7.14 (m, 6 H), 6.87 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.49 (bs, 2H), 4.33-4.22 (m, 3H), 3.73 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.40 (bs, 2H), 1.27-1.24 (m, 6 H), 1.01-0.98 (m, 8 H), 0.86-0.65 (m, 6 H ). LCMS: (Método E) 685.2 (M++H), Rt. 3.18 min, 92.22 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 7.46 min, 96.07 % (máx.). Intermedio 177
(ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000131_0002
A una solución agitada de etilo fZJ-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato (intermedio 176; 0.8 g, 1.10 mmol) en DCM seco (3 ml), TFA (3 ml) y trietilsilano a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 5 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 76 % (500 mg, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 565.2 (M++H), Rt. 3.28 min, 97.21 % (máx.).
Intermedio 178
(ZJ-3-((3,3-dibutil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000132_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,S-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (intermedio 177; 0.5 g, 0.88 mmol) en N-metil-2-pirrolidona (5 ml), se añadieron Cs2C o3 (0.57 g, 1.75 mmol) y yoduro de metilo (0.28 ml, 4.49 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 98 % (0.5 g, goma color marrón).
Intermedio 179
1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000132_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina) (Intermedio 126; 1 g, 2.10 mmol) en N-metil-2-pirrolidona (10 ml), se añadieron Cs2CO3 (1.39 g, 4.20 mmol) y yoduro de metilo (0.66 ml, 10.6 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 15 ml). La parte orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 88 % (900 mg, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 481.1 (M+), Rt. 2.97 min, 61.59 % (máx.).
Intermedio 180
1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina
Figure imgf000132_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 179; 0.75 g, 1.50 mmol) en DCM (10 ml), se añadió BBr3 (1 M en DCM, 2.33 ml, 2.30 mmol) a -78 °C y luego la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con metanol (10 ml) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se disolvió en DCM (20 ml) y la parte orgánica se lavó con salmuera (20 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 23 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 27 % (0.27 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 469.0 (M++2), Rt. 2.74 min, 86.35 % (máx.).
Intermedio 181
Z)-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-2-metil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000133_0001
A una suspensión de NaH (0.05 g, 1.39 mmol) en DMA seca (2 ml) a 0 °C se le añadió una solución de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-hidroxi-2-metil-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (intermedio 180; 0.2 g, 0.43 mmol) en DMA (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a temperatura ambiente. Luego se añadió gota a gota 3-bromo-2,2-difluoropropionato de etilo (0.12 ml, 0.96 mmol) en DMA (3 ml) a 0 °Cy la mezcla de reacción se calentó durante 3 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml, pH~4) y se concentró al vacío. El residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (20 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 8 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 60 % (150 mg, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 585.1 (M++2) derecho 3.01 minutos, 88.73 %
Intermedio 182
7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona
Figure imgf000133_0002
A una solución agitada de 7-bromo-3,3-dibutil-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (3.0 g, 0.007 mol) en 3,4-difluoro bromobenceno (5 ml), se añadieron yoduro de cobre (I) (0.286 mg, 0.0015 mol) y K2CO3 (2.07 g, 0.015 mol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 20 min para la desgasificación. Luego se añadió tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina (0.242 ml, 0.00075 mol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 16 horas a 130 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y la capa de celite se lavó con EtOAc (50 ml). El filtrado se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 8-10 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 74 % (2.8 g, sólido color marrón pálido).
LCMS: (Método E) 512.1 (M+), Rt. 3.07 min, 85 % (máx.).
Intermedio 183
7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000134_0001
A una solución agitada de 7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3-dihidro-1,5-benzotiazepin-4(5H)-ona (Intermedio 182; 2.8 g, 0.0054 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota dimetilsulfuro de borano (2 M en THF, 8 ml, 0.016 mmol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 3 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por UPLC), la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con metanol (10 ml) y luego se calentó durante 2 horas a 60 °C. La mezcla de reacción resultante se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo, que se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 1.49 g (líquido crudo e incoloro).
Intermedio 184
1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000134_0002
A una solución agitada de 7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 183; 1.49 g, 0.01 mmol) en THF (75 ml) y agua (7.5 ml) a temperatura ambiente, se añadió oxona (38.3 g, 0.13 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de un embudo Büchner y el filtrado se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (25 ml) y salmuera (25 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10-12 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 62 % (1 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método A) 532.0 (M++2), Rt. 3.31 min, 93.84 % (máx.).
Intermedio 185
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000134_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 7-bromo-3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 184; 500 mg, 0.9757 mmol) en DMF (5 ml), se añadió tiometóxido de sodio (102 mg, 1.46 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calentó durante 2 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió agua (10 ml) a la mezcla de reacción y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (500 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 18 - 20 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 82 % (0.45 g, sólido blanquecino).
LCMS: (Método E) 498.2 (M++H), Rt. 3.57 min, 90.72 % (máx.).
Intermedio 186
1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina
Figure imgf000135_0001
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-metoxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 185; 450 mg, 0.9042 mmol) en DCM (5 ml), se añadió BBr3 (1 M en DCM; 3 ml, 2.712 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió gota a gota metanol (10 ml) a 0 °C hasta que cesó la efervescencia. Luego, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 100 %; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 91 % (0.4 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.63 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.28-7.19 (m, 1H), 7.03-6.98 (m, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.64­ 6.59 (m, 1H), 3.62 (bs, 2H), 3.22 (s, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.40-1.34 (m, 4H), 1.15-1.05 (m, 8H), 0.79 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 484.2 (M++H), Rt. 2.97 min, 94 % (máx.).
Intermedio 187
(ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000135_0002
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-8-hidroxi-7-(metiltio)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (intermedio 186; 0.1 g, 0.021 mmol) en d Ma (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.03 g, 0.67 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos a 0 °C. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de etilo (0.112 g, 0.052 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 5 horas a 60 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se trituró con Et2O. El compuesto obtenido se secó al vacío y se envió como tal al siguiente paso sin ninguna purificación adicional. Rendimiento: 56 % (0.07 g, goma incolora).
Intermedio 188
(ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000135_0003
A una solución agitada de 1,1 -dióxido de 3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-8-hidroxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepina (Intermedio 132, 0.2 g, 0.48 mmol) en DMA (5 ml) a 0 °C, se añadió en porciones NaH (60 %, 0.04 g, 1.56 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 15 min a 0 °C. Luego se añadió 3-bromo-2,2-difluoropropanoato de etilo (0.26 g, 1.20 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 3 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la masa de reacción se enfrió hasta 0 °C, se inactivó con HCl 1.5 N (pH ~4) y se diluyó con agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml), la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15-20 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 27 % (0.07 g, goma incolora). LCMS: (Método A) 533.2 (M++H), Rt. 3.37 min, 80.27 % (máx.).
Intermedio 189
(S)-(ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo y (RJ-(Z)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo
Figure imgf000136_0001
Los dos enantiómeros de (ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato racémico (0.340 g, 0.64 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Método G); Longitud de onda: 280nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1; Rendimiento: 38 % (130 mg, sólido blanquecino). LCMS: (Método E) 533.1 (M++H), Rt. 3.35 min, 95.24 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.63 min, 96.05 % (máx.). SfC: (Método I) Rt. 2.35 min, 100 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 44 % (150 mg, sólido blanquecino). LCMS: (Método E) 533.1 (M++H), Rt. 3.35 min, 93.83 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.63 min, 97.12 % (máx.). SfC: (Método I) Rt. 2.97 min, 99.54 % (máx.).
Ejemplo 1
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000136_0002
A una solución agitada de ('EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 1; 0.32 g, 0.58 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (6 ml, 2:1), se añadió hidróxido de litio (0.037 g, 0.88 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo obtenido se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la parte acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo se purificó mediante HPLC preparativa (Método B) para producir el compuesto del título.
Rendimiento: 86 % (300 mg, sólido blanco).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 55 12.28 (bs, 1H), 7.66 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.33-7.29 (m, 2H), 7.18 (bs, 2H), 7.01 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 5.42 (dd , J = 12.0, 4.4 Hz, 1H), 3.76 (bs, 2H), 3.38 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.16 (d, J = 4.40 Hz, 3H), 1.41-1.33 (m, 4H), 1.08-1.01 (m, 8H), 0.75 (t, J = 5.60 Hz, 6H). LCMS:
(Método D) 518.3 (M+H), Rt. 3.04 min, 98.5 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.75 min, 99.10 % (máx.).
Ejemplo 2
Ácido f£J-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000137_0001
A una solución agitada de ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-(4-nitrofenil)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (intermedio 2; 0.9 g, 1.60 mmol) en THF (20 ml), se añadieron HCl concentrado (1 ml) y SnCl2 (1.2 g, 6.40 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se inactivó con solución de NaHCO3 saturado, se filtró a través de un lecho de celite y luego se lavó con EtOAc. La parte orgánica se lavó con agua (25 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 94 % (800 mg, sólido color marrón, crudo).
LCMS: (Método A) 533.9 (M+H), Rt. 2.32 min, 81.07 % (máx.).
Ejemplo 3
Ácido (EJ-3-((5-(4-((tert-butoxicarbonil)amino)fenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000137_0002
A una solución agitada de ácido (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (Ejemplo 2; 0.2 g, 0.37 mol) en 1,4-dioxano (5 ml) a 0 °C, se añadió una solución de NaOH (0.03 g, 0.56 mmol) en agua (1 ml), seguido de bocanhidrido (0.16 g, 0.75 mmol). Se continuó agitando durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con ácido cítrico (pH ~3-4) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (método C) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 30 % (70 mg, sólido blanquecino). 1H r Mn (400 MHz, DMSO-de): 512.24 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.64 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.41 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.18 ( d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.38 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.43­ 1.40 (m, 2H), 1.35-1.29 (m, 2H), 1.13-1.02 (m, 8H), 0.77-0.75 (m, 6H); LCMS: (Método B) 577.3 (M-fbu), Rt. 3.14 min, 97.7 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.95 min, 99.6 % (máx.).
Ejemplo 4
Ácido (EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000137_0003
A una solución agitada de f£J-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 3; 0.28 g, 0.48 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml; 5:1), se añadió hidróxido de litio (0.04 g, 0.96 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo obtenido se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la parte acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 60 % (150 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.29 (s, 1H), 7.73 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.65-7.64 (m, 1H), 7.37-7.34 (m, 2H), 7.28­ 7.25 (m, 2H), 7.09-7.05 (m, 2H), 5.39 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.88-3.73 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 1.52-1.34 (m, 4H), 1.08­ 0.98 (m, 4H), 0.72-0.69 (m, 6H). LCMS: (Método A) 296.0 (M+H), Rt. 2.86 min, 95.59 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt.
6.03 min, 97.02 % (máx.).
Ejemplos 5 y 6
Ácido (R)-(EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (S)-(EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000138_0001
Los dos enantiómeros del ácido (EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico ((Ejemplo 4; 150 mg, 0.29 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Método A); fase móvil: CO2: IPA (70:30); Longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 17 % (25 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 12.29 (s, 1H), 7.73 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.27-7.26 (m, 2H), 7.10-7.05 (m, 2H), 5.39 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.80- 3.78 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 1.52-1.34 (m, 4H), 1.08-0.98 (m, 4H ), 0.72-0.69 (m, 6H). LCMS: (Método A) 521.8 (M+), Rt. 2.86 min, 99.14 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.99 min, 96.82 % (máx.). SFC: (método A) Rt. 4.88 minutos, 99.31 %.
Enantiómero 2: Rendimiento: 20 % (30 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO): 512.28 (s, 1H), 7.73 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.26-7.24 (m, 2H) ), 7.10-7.05 (m, 2H), 5.39 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.80- 3.75 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 1.51-1.30 (m, 4H), 1.17- 0.98 (m, 4H), 0.76-0.68 (m, 6H). LCMS: (Método A) 524.0 (M+2), Rt. 2.96 min, 98.77 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.99 min, 97.71 % (máx.). SFC: (método A) Rt. 5.95 minutos, 98.99 %.
Ejemplo 7
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-ciclopropil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000138_0002
A una solución agitada de f£j-3-((3,3-dibutil-7-ciclopropil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 6; 0.150 g, 0.28 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (6 ml, 5:1), se añadió hidróxido de litio (24 mg, 0.06 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener un residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) . La parte orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 50 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 34 % (48 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.19 (bs, 1H), 7.76 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.28 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.41 (s, 1H), 5.37 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.73 (bs, 2H), 3.36 (s, 2H), 1.97­ 1.90 (m, 1H), 1.42-1.34 (m, 2H), 1.31-1.24 (m, 2H), 1.10-1.03 (m, 8H), 1.00-0.98 (m, 2H), 0.9 (t, J = 4.4 Hz, 6H), 0.420.41 (m, 2H). LCMS: (Método A) 512.2 (M+H), Rt. 3.13 min, 99.21 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.05 min, 98.83 % (máx.).
Ejemplo 8
Ácido (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000139_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (Intermed¡o 9; 0.08 g, 0.15 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (6 ml, 5:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.012 g, 0.29 mmol) y la mezcla resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío hasta obtener un res¡duo crudo que se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) . La parte orgán¡ca se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo se pur¡f¡có por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 4-5 %/DCM; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. El material obten¡do se purificó ad¡c¡onalmente med¡ante HPLC preparat¡va (método A) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 9 % (7 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.16 (s, 1H), 7.58 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.17-7.15 (m, 2H), 6.99-6.96 (m, 2H), 6.26 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.29 (s, 2H), 2.68 (s, 6H), 1.41-1.32 ( m, 4H), 1.15-1.00 (m, 8H), 0.77-0.73 (m, 6H). LCMS: (Método C) 515.2 (M+2H), Rt. 3.13 m¡n, 97.01 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.80 m¡n, 94.38 % (máx.).
Ejemplo 9
Ácido ('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(c¡clopropanosulfonam¡do)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000139_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do (EJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co (Ejemplo 2; 0.12 g, 0.22 mmol) en p¡r¡d¡na (3 ml), se añad¡eron DMAP (0.03 mg, 0.02 mmol) y cloruro de c¡clopropanosulfon¡lo (0.063 mg, 0.45 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (25 ml). A cont¡nuac¡ón, la capa orgán¡ca se lavó con NaHCO3 saturado (15 ml) y agua (15 ml). La parte orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro, se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método C) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 14 % (20 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.45-7.40 (m, 2H), 7.17 (m, 4H), 6.60 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.73 (m, 2H), 3.54 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.89 (s, 1H), 1.42-1.30 (m, 4H), 1.12-1.08 (m, 8H), 1.04-1.03 (m, 4H), 0.88-0.85 (m, 6H ). LCMS: (Método B) 635.2 (M+-H), Rt. 3.14 m¡n, 94.6 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.28 m¡n, 99.49 % (máx.).
Ejemplo 10
Á cid o (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(met¡lsulfonam¡do)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000140_0001
A una solución agitada de ácido (EJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi) acrílico (Ejemplo 2; 0.11 g, 0.18 mmol) en piridina (3 ml), se añadieron DMAP (0.03 mg, 0.02 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0.03 ml, 0.28 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml). A continuación, la capa orgánica se lavó con NaHCO3 saturado (15 ml) y agua (15 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro, se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (método B) para producir el compuesto del título. Rendimiento: 5 % (7 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 7.79 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.66 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.56 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.75 (bs, 2H), 3.22 (s, 2H), 3.02 (d, J = 5.60 Hz, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.57-1.52 (m, 2H), 1.48-1.41 (m, 6H), 1.28-1.21 (m, 2H), 1.19-1.08 (m, 2H), 0.8 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método D) 609.2 (M+-H), Rt. 2.42 min, 91.68 % (máx.). HPLC: (Método C) Rt. 9.87 min, 96.13 % (máx.).
Ejemplo 11
Ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000140_0002
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)- 2-fluoroacrilato de metilo (intermedio 10; 8.2 g, 15.0 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (82 ml, 4:1), se añadió UOH.H2O (1.25 g, 30.0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl 1.5 N (pH~4) y se diluyó con agua (100 ml). La parte acuosa se extrajo con EtOAc (150 ml) y la capa orgánica luego se lavó con salmuera (100 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La capa orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 3-4 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 52 % (6.73 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.59 (s, 1H), 7.56 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.30 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.99 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.43-1.41 (m, 2H), 1.36­ 1.30 (m, 2H), 1.18-1.01 (m, 8H), 0.77-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 536.1 (M++H), Rt. 3.19 min, 97.92 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.45 min, 99.04 % (máx.).
Ejemplo 12
Ácido f£J-3-((3,3-dibutil-7-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000140_0003
A una solución agitada de f£J-3-((3,3-dibutil-7-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 14; 0.055 g, 0.1 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (6 ml, 5:1), se añadió hidróxido de litio (8 mg, 0.2 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener un residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 80 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 14.4 % (7.5 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.74 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.17-7.15 (m, 2H), 6.98 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.88-3.65 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.49-2.48 (m, 2H), 1.41­ 1.24 (m, 6H), 1.09-1.04 (m, 6H), 1.01-0.97 (metro, 4H), 0.80-0.75 (metro, 6H), LCMS: (Método A) 500.3 (M+H), Rt.
3.16 min, 98.8 % (máx.). HpLC: (Método B) Rt. 6.58 min, 97.03 % (máx.).
Ejemplo 13
Ácido (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000141_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 16; 0.125 g, 0.24 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3.5 ml; 6:1), se añadió hidróxido de litio (32 mg, 0.74 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener un residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 80 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 21 % (23 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.12 (s, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.30 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.17­ 7.15 (m, 2H), 6.98 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.31 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.85-3.65 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.31 (s , 2H), 1.53-1.31 (m, 2H), 1.28-1.25 (m, 2H), 1.24-1.09 (m, 4H), 0.75-0.71 (m, 6H).
LCMS: (Método D) 474.2 (M+H), Rt. 2.55 min, 99.31 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.59 min, 98.87 % (máx.). Ejemplo 14
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000141_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-7-metoxi-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 19; 0.23 g, 0.43 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (7 ml, 6:1), se añadió hidróxido de litio (0.13 g, 3.03 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener un residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 80 % EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230­ 400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 75 % (160 mg, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.64 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.30 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.00 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.30 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.76 (bs, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.31 (s, 2H), 1.42-1.33 (m, 2H), 1.29-1.20 (m, 2H), 1.10-0.98 ( m, 8H), 0.86-0.84 (m, 6H). LCMS: (Método C) 502.1 (M+H), Rt.2.99 min, 96.68 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.12 min, 96.05 % (máx.).
Ejemplo 15
Ácido (EJ-3-((5-(4-bromofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000142_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (E)-3-((5-(4-bromofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 21; 0.10 g, 0.16 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4 ml, 3:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (33 mg, 0.80 mmol) y la mezcla resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 16 horas. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por LCMS), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío hasta obtener un res¡duo crudo que se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método D) para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 89 % (35 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.26 (bs, 1H), 7.71 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 3H), 7.12 - 6.91 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.48 - 5.44 (m, 1H), 3.85 - 3.62 (m, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.44 - 1.05 (m, 12H), 0.85 - 0.75 (m, 6H). LCMS: (Método D) 596.1 (M+H), Rt. 3.23 m¡n, 97.39 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.63 m¡n, 97.05 % (máx.).
Ejemplo 16
Ácido (EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000142_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 24; 0.3 g, 0.58 mmol)) en una mezcla de 1,4-d¡oxano (10 ml) y agua (3 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.12 g, 2.89 mmol) y la mezcla resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 16 horas. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por LCMS), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío hasta obtener un res¡duo crudo que se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método D) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 42 % (120 mg, sól¡do color marrón pál¡do).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.28 (bs, 1H), 7.67 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.30 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.99 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.43 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.82 - 3.62 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.56 - 1.32 (m, 4H), 1.20 - 1.02 (m, 4H), 0.75 - 0.69 (m, 6H).
LCMS: (Método C) 490.0 (M+H), Rt. 2.89 m¡n, 97.98 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.84 m¡n, 96.52 % (máx.). Ejemplos 17 y 18
Ác¡do (R)-('£J-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co y ác¡do (S)-('£J-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000142_0003
Los enantiómeros del ácido (EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)acrílico racém¡co (Ejemplo 16; 100 mg, 0.20 mmol) se separaron med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (método B); fase móv¡l: CO2: IPA (70:30); long¡tud de onda: 220nm; T¡empo del c¡clo: 5 m¡nutos; contrapres¡ón: 100 bares. El mater¡al se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracc¡ón que eluyó propordonó el enant¡ómero 1 con una pureza qu¡ral del 98.01 % y la segunda fracc¡ón propordonó el segundo enant¡ómero como una mezcla. Esta mezcla se separó med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (método C); fase móv¡l: CO2: amon¡aco en metanol (70:30); long¡tud de onda: 220nm; T¡empo del c¡clo: 5 m¡nutos; contrapres¡ón: 100 bares La pr¡mera fracc¡ón elu¡da se concentró al vacío a 40 °C para proporc¡onar el segundo enant¡ómero con una pureza qu¡ral del 100 %. Se desconoce la conf¡gurac¡ón absoluta de los dos enant¡ómeros.
Enant¡ómero 1: Rend¡m¡ento: 20 % (20 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 57.58 - 7.57 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.29 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.43 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.82 - 3.62 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.54 - 0.98 (m, 8H), 0.76 - 0.72 (m, 6H). LCMS: (Método C) 490.1 (M+H), Rt. 2.87 m¡n, 95.62 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.86 m¡n, 97.74 % (máx.). Pureza qu¡ral: (Método B, SFC qu¡ral) Rt. 4.69 m¡n, 98.01 % (máx.).
Enant¡ómero 2: Rend¡m¡ento: 13 % (15 mg, sól¡do blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.66 - 7.63 (m, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 5.42 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.82 - 3.62 (m, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.53 - 0.98 (m, 8H), 0.76 - 0.72 (m, 6H). LCMS: (Método C) 490.1 (M+H), Rt. 2.87 m¡n, 98.68 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.86 m¡n, 98.65 % (máx.). Pureza qu¡ral: (Método B, SFC qu¡ral) Rt. 5.28 m¡n, 100 % (máx.).
Ejemplo 19
Ácido (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-metox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000143_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-metox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 26; 0.10 g, 0.17 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano (10 ml) y agua (3 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.04 g, 0.85 mmol) y la mezcla resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 16 horas. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por LCMS), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío hasta obtener el res¡duo crudo que se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método D) para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 89 % (35 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.35 - 7.33 (m, 2H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.94 - 6.91 (m, 2H), 6.42 (s, 1H), 5.35 (d, J = 11.6 Hz, 1H ), 3.82 - 3.68 (m, 5H), 3.39 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.41 - 0.95 (m, 12H), 0.75 -0.72 (m, 6H). LCMS: (Método B) 548.2 (M+H), Rt. 2.97 m¡n, 98.03 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.28 m¡n, 99.26 % (máx.).
Ejemplo 20
Ácido f£J-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000143_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de f£J-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 27; 0.09 g, 0.17 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano (10 ml) y agua (3 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.04 g, 0.85 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener el residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método D) para producir el compuesto del título. Rendimiento: 21 % (20 mg, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.61 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.35 (s, 1H), 5.33 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 2H), 3.45 - 3.39 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.43 - 0.98 (m, 12H), 0.77 - 0.73 (m, 6H). LCMS: (Método B) 534.2 (M+H), Rt. 2.71 min, 95.25 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.51 min, 95.27 % (máx.).
Ejemplo 21
Ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000144_0001
A una solución agitada de (E)-3-((3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 28; 0.156 g, 0.33 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (10 ml) y agua (3 ml), se añadió hidróxido de litio (0.03 g, 0.85 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se concentró al vacío hasta obtener el residuo crudo que se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 21 % (25 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.64 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.35-7.26 (m, 3H), 7.13 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 6.96 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 5.49 (d, J = 12.1 Hz, 1H ), 3.77-3.74 (bs, 2H), 3.38-3.33 (bs, 2H), 1.52-1.35 (m, 4H), 1.33-1.15 (m, 4H), 1.01-0.96 (m, 6H). LCMS: (Método A) 441.9 (M-H), Rt. 2.69 min, 96.87 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.25 min, 99.10 % (máx.).
Ejemplo 22
Ácido (E)-3-((5-(4-(bencilamino)fenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000144_0002
A una solución agitada de ácido (E)-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (Ejemplo 2; 0.1 g, 0.18 mol) en MeOH (6 ml) a 0 °C, se añadieron benzaldehído (0.04 g, 0.37 mmol) y ácido acético (0.05 ml). Se continuó agitando durante 1 hora a temperatura ambiente. Entonces se añaió NaCNBH3 (0.03 g, 0.37 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se basificó con solución de NaHCO3 saturado (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml), salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método C) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 16 % (17.79 mg, sólido blanquecino).1
1RMN H (400 MHz, DMSO-de): 57.45 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.35-7.28 (m, 5H), 7.23-7.19 (m, 1H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.31 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.30 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.71 (bs, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.45-1.37 (m, 4H), 1.11-1.07 (m, 8H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 6H); LCMS: (Método C) 623.2 (M++H), Rt. 3.18 min, 97.02 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.08 min, 97.17 % (máx.).
Ejemplo 23
Ácido (E)-3-((7-bromo-5-(4-((tert-butoxicarbonil)amino)fenil)-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000145_0001
A una solución agitada de ácido (E)-3-((5-(4-aminofenil)-7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (intermedio 30; 0.12 g, 0.22 mol) en 1,4-dioxano (5 ml) a 0 °C se añadió una solución de NaOH (0.013 g, 0.33 mmol) en agua (1 ml) seguido por bocanhidruro (0.097 g, 0.44 mmol). Se continuó agitando durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con ácido cítrico (~pH 3-4) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (método C) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 10 % (16 mg, sólido blanquecino).
1RMN H (400 MHz, DMSO-de): 5 12.15 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.85 (s, 1H), 5.33 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.76 (bs, 2H), 3.48 (s, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.33­ 1.31 (m, 4H), 1.11-1.07 (m, 2H), 1.01-0.97 ( m, 2H), 0.73 (t, J = 6.80 Hz, 6H); LCMS: (Método B) 635.1 (M+-H), Rt. 2.96 min, 97.27 % (máx.). HPlC: (Método A) Rt. 5.19 min, 97.97 % (máx.).
Ejemplo 24
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-((metoxicarbonil)amino)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1.5 benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000145_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-((metoxicarbonil)amino)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1.5 benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de metilo (intermedio 34; 0.06 g, 0.09 mol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (5 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (6 mg, 0.14 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica se lavó con agua (8 ml) y salmuera (8 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa (método C) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 29 % (17 mg, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.62 (s, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.38 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.74 (bs, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.40 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.24-1.13 (m, 2H), 1.11-1.10 (m, 2H), 1.02-1.00 (m, 8H), 0.7 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método B) 591.2 (M++H), Rt. 2.78 min, 98.32 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.18 min, 98.08 % (máx.).
Ejemplo 25
Á cid o ('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(d¡met¡lam¡no)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000146_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(d¡met¡lam¡no)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 36; 46 mg, 0.08 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (5 ml, 4:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (6.7 mg, 0.16 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 1 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 1o ml). La parte orgán¡ca se lavó con agua (10 ml), salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo resultante se tr¡turó con metanol frío para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 29 % (13 mg, sól¡do color amarillo pál¡do).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 12.19 (s, 1H), 7.62 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.20 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 6.76 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 6.38 (s, 1H), 5.33 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.89 (s, 6H), 2.09 (s, 3H), 1.44-1.39 (m, 4H), 1.34-0.99 (m, 8H), 0.76-0.73 (m, 6H). LCMS: (Método C) 561.2 (M+H), Rt. 2.85 m¡n, 96.89 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 4.45 m¡n, 97.85 % (máx.).
Ejemplo 26
Ácido (ZJ-3-((5-(4-((tert-butox¡carbon¡l)am¡no)fen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000146_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do (ZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co (¡ntermed¡o 38; 0.24 g, 0.43 mol) en 1,4-d¡oxano (2.4 ml) a 0 °C, se añad¡eron NaOH (0.026 g, 0.65 mmol) en agua (0.48 ml) y segu¡do de bocanhídr¡do (0.19 g, 0.87 mmol) y se cont¡nuó ag¡tando durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con ác¡do cítrico (~pH 3-4) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método D) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 5 % (15 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.57 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.50-7.47 (m, 2H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.40-1.35 (m, 4H) , 1.16-1.03 (m, 8H), 0.77-0.74 (m, 6H); LCMS: (Método A) 651.3 (M+H), Rt. 3.01 m¡n, 95.75 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.46 m¡n, 95.23 % (máx.).
Ejemplo 27
Á cid o f£J-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000147_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de et¡lo (¡ntermed¡o 39; 0.065 g, 0.1 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (3 ml, 4:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.013 g, 0.31 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgán¡ca se lavó con agua (8 ml) y salmuera (8 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó med¡ante Hp LC preparat¡va (método C) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 48 % (30 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.24 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.61 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.74 (bs, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.22-1.14 (m, 2H), 1.13-1.11 (m, 2H), 1.09 (s, 9H), 1.06-1.05 (m, 8H), 0.8 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método B) 617.2 (M++H), Rt. 2.92 m¡n, 97.89 % (máx.). HPlC: (Método C) Rt. 6.04 m¡n, 95.46 % (máx.).
Ejemplo 28
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríNco
Figure imgf000147_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do (ZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co (¡ntermed¡o 38; 0.81 g, 1.40 mol) en DCM (8.1 ml) a 0 °C se añad¡ó tr¡et¡lam¡na (0.61 ml, 4.40 mmol). Luego se añad¡ó cloruro de p¡valoílo (0.22 ml, 1.76 mmol) y se cont¡nuó ag¡tando durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (15 ml) y la capa orgán¡ca se lavó con agua fría (15 ml) y salmuera (15 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío para dar el material crudo. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método B) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 21 % (0.2 g, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de)B362441: 513.58 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.59-7.49 (m, 4H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.46-1.43 (m, 2H), 1.36-1.30 (m, 2H), 1.22 (s, 9H), 1.13-1.07 (m, 8H), 0.78-0.75 (m, 6H); LCMS (B361751): (Método A) 635.2 (M++H), Rt. 2.88 m¡n, 96.98 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt.
6.12 m¡n, 97.61 % (máx.).
Ejemplo 29
Á cid o ('EJ-3-((5-(4-((butox¡carbon¡l)am¡no)fen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1.5 benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000148_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((5-(4-((butoxicarbonil)amino)fenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1.5 benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 40; 0.041 g, 0.06 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.008 g, 0.19 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante Hp LC preparativa (método C) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 20% (6.1 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.23 (bs, 1H), 9.58 (s, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.44-7.42 (m, 3H), 7.19 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.38 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.62-1.58 (m, 2H), 1.43-1.39 (m, 5H), 1.37-1.33 ( m, 5H), 1.24-1.10 (m, 4H), 0.9 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.7 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 633.2 (M++1), Rt. 3.06 min, 98.93 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.41 min, 97.46 % (máx.).
Ejemplo 30
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(3,3-dimetilbutanamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000148_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(3,3-dimetilbutanamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 41; 0.15 g, 0.22 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.038 g, 0.91 mmol) a 0 °C y luego la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El compuesto crudo obtenido se purificó por cristalización fraccionada usando una combinación de DCM/metanol y hexano. Rendimiento: 59 % (84.5 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.22 (s, 1H), 9.75 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.59 (s, 1H), 5.39 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.75 (bs, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.16 (s, 2H), 1.43-1.32 (m, 4H), 1.13-1.07 (m, 8H), 1.02 (s, 9H), 0.8 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 631.2 (M++H), Rt. 2.97 min, 96.38 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.14 min, 97.17 % (máx.).
Ejemplo 31
Á cid o fZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-isobutiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000149_0001
A una solución agitada de ácido (ZJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (intermedio 38; 0.2 g, 0.36 mmol) en DMF (2 ml) se añadieron ácido isobutírico (0.041 g, 0.47 mmol), HATU (0.27 g, 0.73 mmol) y N-metilmorfolina (0.12 ml, 1.10 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió agua (5 ml) y la mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante Hp LC preparativa (método B) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 10 % (10 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.77 (s, 1H), 7.57-7.51 (m, 4H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.60 (s, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.59-2.57 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.44-1.42 (m, 2H), 1.36-1.30 (m, 2H), 1.11-1.09 (m, 14H), 0.78-0.76 (m, 6H). LCMS: (método A) 621.2 (M+H), Rt. 2.71 min, 93.97 % (máx.). HPLC: (método B) Rt. 5.75 min, 93.01 % (máx.).
Ejemplo 32
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000149_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-(trifluorometil)-fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 46; 0.09 g, 0.14 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (5 ml, 4:1) se añadió hidróxido de litio (0.012 g, 0.29 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 8 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (8 ml), se secó sobre Na2S o4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: DCM de MeOH al 5 %; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 16 % (0.014 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.31 (s, 1H), 7.75 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.54-7.51 (m, 3H), 7.07-7.05 (m, 3H), 5.53 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.51-1.48 (m, 2H), 1.33-1.11 (m, 10H), 0.82-0.75 ( m, 6H). LCMS: (Método C) 585.8 (M++H), Rt. 3.07 min, 99.24 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.50 min, 93.77 % (máx.).
Ejemplo 33
Á cid o f£J-3-((3,3-dibutil-5-(4-isobutiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000150_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-isobutiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 47; 0.13 g, 0.206 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml, 4:1) se añadió hidróxido de litio (0.035 g, 0.82 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 4 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (método C). Rendimiento: 29 % (36 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.23 (s, 1H), 9.79 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.73 (bs, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.35-3.34 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.44-1.33 (m, 4H), 1.25-1.20 ( m, 6H), 1.11-1.01 (m, 8H), 0.8 (t, J = 5.6 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 603.2 (M++H), Rt. 2.81 min, 95.01 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.7 min, 95.73 % (máx.).
Ejemplo 34
Ácido (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-pivalamidofenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000150_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-pivalamido-fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 51; 0.135 g, 0.21 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (5 ml, 4:1) a 0 °C se añadió hidróxido de litio (0.027 g, 0.65 mmol) y luego la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 4 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (método C). Rendimiento: 46 % (58 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.22 (bs, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.65 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.61 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.73 (bs, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.51­ 1.41 (m, 4H), 1.21 (s, 9H), 1.14-1.07 (m, 4H), 0.77 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método B) 587.2 (M+-H), Rt. 2.69 min, 98.5 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.57 min, 99.14 % (máx.).
Ejemplo 35
Á cid o fZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(ciclopentanocarboxamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000151_0001
A una solución agitada de ácido (ZJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (intermedio 38; 0.05 g, 0.091 mmol) en DMF (0.5 ml) se añadieron ácido ciclopentanocarboxílico (0.016 g, 0.13 mmol), HATU (0.069 g, 0.18 mmol) y N-metilmorfolina ( 0.03 ml, 0.27 milimoles). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió agua (5 ml) a la mezcla de reacción y el sólido resultante se filtró y se secó al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa (método A) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 16 % (10 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.56 (s, 1H), 9.82 (s, 1H), 7.57-7.52 (m, 4H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.77-2.73 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.85-1.83 (m, 2H), 1.73-1.69 (m, 4H), 1.56-1.54 (m, 2H), 1.44-1.42 (m, 2H), 1.36-1.30 (m, 2H), 1.12-1.06 (m, 8H), 0.77-0.76 (m, 6H). LCMS: (Método C) 647.2 (M+H), Rt. 3.07 min, 94.09 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.08 min, 95.76 % (máx.).
Ejemplo 36
Ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(ciclopropanocarboxamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000151_0002
A una solución agitada de ácido (ZJ-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (intermedio 38; 0.2 g, 0.36 mmol) en DMF (2 ml) se añadieron ácido ciclopropanocarboxílico (0.041 g, 0.47 mmol), HATU (0.27 g, 0.73 mmol) y N-metilmorfolina (0.12 ml, 1.10 milimoles). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió agua (5 ml) a la mezcla de reacción y el sólido resultante se filtró y se secó al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa (método B) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 20 % (45 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 510.14 (s, 1H), 7.55-7.48 (m, 3H), 7.37-7.33 (m, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.57 (s, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.77-1.75 (m, 1H), 1.43-1.40 (m, 2H), 1.37-1.31 (m, 2H), 1.12-1.08 (m, 8H), 0.78-0.74 (m, 10H). LCMS: (Método C) 619.0 (M++H), Rt. 2.80 min, 99.01 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.71 min, 97.39 % (máx.).
Ejemplo 37
Á cid o f£J-3-((3,3-dibutil-5-(4-(ciclopentanocarboxamido)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000152_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(c¡clopentanocarboxam¡do)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de et¡lo (¡ntermed¡o 52; 0.14 g, 0.21 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (3 ml, 4:1) a 0 °C, se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.036 g, 0.85 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 4 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgán¡ca se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo se purificó por HPLC preparat¡va (método C). Rend¡m¡ento: 11 % (14.8 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.35 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 7.63 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.40 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.74 (bs, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.77-2.74 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.85-1.84 (m, 2H), 1.71-1.69 ( m, 4H), 1.56-1.44 (m, 2H), 1.41-1.33 (m, 4H), 1.12-1.04 (m, 8H), 0.8 (t, J = 6.0 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 629.2 (M++H), Rt. 2.89 m¡n, 97.32 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.08 m¡n, 96.14 % (máx.).
Ejemplo 38
Ácido (EJ-3-((3-but¡l-5-(4-(c¡clopentanocarboxam¡do)fen¡l)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000152_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((3-but¡l-5-(4-(c¡clopentanocarboxam¡do)fen¡l)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5- benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 53; 0.14 g, 0.22 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (3 ml, 4:1) a 0 °C, se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.037 g, 0.89 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. El material crudo se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método C) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 25 % (33 mg, sól¡do blanquec¡no).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.83 (s, 1H), 7.62 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.59 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.38 (bs, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.75-2.74 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.85-1.83 (m, 2H), 1.74-1.70 ( m, 4H), 1.70-1.56 (m, 3H), 1.55-1.54 (m, 3H), 1.38-1.11 (m, 4H), 0.70 (t, J = 7.2 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 601.2 (M++H), Rt. 2.67 m¡n, 99.09 % (máx.).
HPLC: (Método B) Rt. 5.61 m¡n, 98.96 % (máx.).
Ejemplo 39
Ácido f£J-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000153_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 61; 0.17 g, 0.34 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.03 g, 0.70 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa (método A) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 42 % (68 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.25 (s, 1H), 7.70 (dd, J = 12.2, 2.0 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 6.97 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 5.44 (dd, J = 12.0, 2.4 Hz, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.55-1.53 (m, 2H), 1.39-1.34 (m, 2H), 0.73 ( yo, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 462.1 (M+H), Rt. 2.33 min, 97.56 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 5.29 min, 97.10 % (máx.).
Ejemplo 40
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-butiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000153_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-butiramidofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 62; 0.145 g, 0.22 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (0.038 g, 0.91 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El compuesto crudo se purificó por HPLC preparativa (método C). Rendimiento: 28.2 % (39.3 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.22 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.57 (s, 1H), 5.39 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.75 (bs, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.27 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.64-1.60 (m, 2H), 1.58-1.36 (m, 4H), 1.33-1.08 (m, 4H), 1.04-1.02 (m, 4H), 0.9 (t, J = 4.0 Hz, 3H), 0.7 (t, J = 8.0 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 603.3 (M++H), Rt. 2.49 min, 97.34 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.71 min, 98.16 % (máx.).
Ejemplo 41
Ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000153_0003
A una solución agitada de fZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo (intermedio 63; 0.11 g, 0.21 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml, 4:1) se añadió hidróxido de litio (0.018 g, 0.42 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió la mezcla de reacción acidificada con HCl diluido (1.5 N, 3 ml) y agua (5 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 42-44 % EtOAc/PE, gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 62 % (68 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.57 (s, 1H), 7.59-7.56 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.14-7.12 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 3.76-3.75 (m, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54-1.43 (m, 4H), 1.18-1.11 (m, 4H), 0.74 (t, J = 5.60 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 506.2 (M+-H), Rt. 2.85 min, 97.26 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.96 min, 96.72 % (máx.).
Ejemplos 42 y 43
Ácido (R)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico y ácido (S)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000154_0001
Los dos enantiómeros del ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi ácido )-2-fluoroacrílico racémico (Ejemplo 41; 50 mg, 0.098 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Método A); fase móvil: CO2: IPA (70:30); Longitud de onda: 280nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 40 % (20 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.57-7.56 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.14-7.12 (m, 2H), 6.99-6.97 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 2.20 (s, 3H), 11.42­ 1.35 (m, 4H), 1.11-1.03 (m, 4H), 0.75-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método E) 508.2 (M+H), Rt. 2.68 min, 96.09 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.96 min, 97.80 % (máx.). s Fc : (Método A) Rt. 6.23 min, 100 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 16 % (8 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.54-7.46 (m, 2H), 7.30-7.27 (m, 2H), 7.13-7.12 (m, 2H), 6.98-6.96 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54 (s, 1H), 1.43-1.32 (m, 3H), 1.11-1.01 (m, 4H), 0.75-0.74 (m, 6H) . LCMS: (Método A) 508.2 (M++H), Rt. 2.85 min, 99.63% (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.99 min, 98.89 % (máx.). SFC: (Método A) Rt. 7.38 min, 97.68 % (máx.).
Ejemplo 44
Ácido (ZJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000154_0002
A una solución agitada de (Z)-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5- benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo (intermedio 64; 0.06 g, 0.12 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (3 ml, 4:1) se añadió hidróxido de litio (0.01 g, 0.24 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió la mezcla de reacción acidificada con HCl diluido (1.5 N, 3 ml) y agua (5 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método A) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 24 % (37 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.55 (s, 1H), 7.57-7.56 (m, 2H), 7.29-7.27 (m, 2H), 7.10-7.08 (m, 2H), 6.96-6.94 (m, 1H), 6.72 (s, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.57-1.55 (m, 2H), 1.38-1.36 (m, 2H), 0.72 (t, J = 7.60 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 480.1 (M+H), Rt. 2.63 min, 99.01 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.42 min, 99.46 % (máx.).
Ejemplo 45
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000155_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (Z)-3-((3,3-d¡but¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l) ox¡)-2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 67; 0.08 g, 0.15 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (3 ml, 4:1) se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.013 g, 0.31 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1 ml, 1.5 N) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La parte orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (8 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método A) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 45 % (35 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.44 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.30-7.24 (m, 3H), 7.10-7.08 (m, 2H), 6.98-6.91 (m, 3H), 3.73 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 1.37- 1.31 (m, 4H), 1.14-1.00 (m, 8H), 0.85-0.69 (m, 6H). LCMS: (Método C) 490.1 (M+H), Rt. 3.22 m¡n, 98.94 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 6.27 m¡n, 99.58 % (máx.).
Ejemplo 46
Ácido (ZJ-3-((3-but¡l-7-cloro-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000155_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((3-but¡l-7-cloro-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 75; 0.74 g, 1.45 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (8 ml, 4:1) se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.12 g, 2.90 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante la noche a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml) y se añad¡ó agua (10 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 3-4 % MeOH/DCM, gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 72 % (0.52 g, sól¡do blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.57 (s, 1H), 7.59-7.56 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.14-7.12 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 3.76-3.75 (m, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54-1.43 (m, 4H), 1.18-1.11 (m, 4H), 0.74 (t, J = 5.60 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 497.2 (M++H), Rt. 2.86 m¡n, 97.24 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.06 m¡n, 95.11 % (máx.).
Ejemplos 47 y 48
Ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-7-cloro-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co y ác¡do (S)-fZj-3-((3-but¡l-7-cloro-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000155_0003
Los dos enant¡ómeros del ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-7-cloro-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co racém¡co (Ejemplo 46; 0.52 g, 1.05 mmol) se separaron med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (Método A); fase móv¡l: CO2 : IPA (70:30); Long¡tud de onda: 280nm; T¡empo del c¡clo: 5 m¡nutos; Contrapres¡ón: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 1 y la segunda fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 2. Se desconoce la conf¡gurac¡ón absoluta de los dos enant¡ómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 26 % (140 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 513.62 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.60 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.06 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 1.53-1.32 (m, 4H), 1.10-1.05 (m, 4H), 0.72-0.72 ( m, 6H). LCMS: (Método C) 494.0 (M+-H), Rt. 3.03 min, 98.39 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.05 min, 97.65 % (máx.). SfC: (Método A) Rt.2.82 min, 99.06 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 30 % (160 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 513.61 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.59 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.06 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 1.53-1.32 (m, 4H), 1.12-1.07 (m, 4H), 0.73-0.70 ( m, 6H). LCMS: (Método C) 494.1 (M+-H), Rt. 3.03 min, 97.42 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.04 min, 96.90 % (máx.). SFC: (Método A) Rt. 3.35 min, 98.76 % (máx.).
Ejemplo 49
Ácido (EJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000156_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (Intermedio 76; 1.0 g, 1.97 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (10 ml; 5:1), se añadió hidróxido de litio (0.25 g, 5.92 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 12 horas. a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo obtenido se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la parte acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 64 % (600 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.29 (s, 1H), 7.75 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.27-7.25 (m, 2H), 7.09 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.81 (bs, 2H), 3.47 (s, 2H), 1.54­ 1.51 (m, 1H), 1.45-1.34 (m, 3H), 1.11-0.98 (m, 4H), 0.74 ( yo, J = 4.40 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 522.0 (M+), Rt. 2.78 min, 98.84 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.95 min, 98.16 % (máx.).
Ejemplos 50 y 51
Ácido (R)-(EJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (S)-(EJ-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000156_0002
Los dos enantiómeros del ácido (E)-3-((3-butil-7-cloro-3-etil-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5- ácido benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico (Ejemplo 49; 600 mg, 1.25 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Instrumento: imagen SFC 10-150); fase móvil: CO2 : metanol; Columna: Lux A1; Tasa de flujo: 3 ml/min; longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 37 % (222 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 12.32 (bs, 1H), 7.74 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.27-7.25 (m, 2H), 7.08 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.81 (bs, 2H), 3.47 (s, 2H), 1.54-1.36 (m, 4H), 1.34-1.04 (m, 4H), 0.73 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 480.0 (M++2), Rt. 2.91 min, 99.26 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.95 min, 98.81 % (máx.). SFC: (Método D) Rt. 3.2 min, 100 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 32 % (195 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 12.37 (bs, 1H), 7.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.27 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.11-7.09 (m, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.80 (bs, 2H), 3.40 (s, 2H), 1.53-1.38 (m, 2H), 1.36-1.33 (m, 2H), 1.09-1.07 (m, 2H), 1.04- 1.01 (m, 2H), 0.72 (t, J = 4.8 Hz, 6H). LCMS: (Método C) 479.1.0 (M++H), Rt. 2.91 min, 97.56 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.95 min, 95.56 % (máx.). SfC: (Método D) Rt. 4.51 min, 99.16 % (máx.).
Ejemplo 52
Ácido (ZJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-pivalamidofenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000157_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-pivalamidofenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo (Intermedio 79; 0.18 g, 0.3 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (10 ml; 5:1), se añadió hidróxido de litio (0.038 g, 0.91 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo obtenido se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la parte acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío hasta obtener el material crudo que se purificó por HPLC preparativa (método A). Rendimiento: 25 % (42 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.14 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.48-7.43 (m, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.65 (s, 1H), 3.72 (bs, 2H), 3.35 (s, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.42-1.34 (m, 2H), 1.22 (s, 9H), 0.71 (t, J = 7.20 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 579.2 (M++H), Rt. 2.42 min, 99.24 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.17 min, 99.04 % (máx.).
Ejemplo 53
Ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-cloro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000157_0002
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-cloro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de metilo (intermedio 80; 617 mg, 1.14 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (10 ml, 5:1) se añadió hidróxido de litio (241 mg, 41.96 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), se añadió la mezcla de reacción acidificada con HCl diluido (1.5 N, 3 ml) y agua (5 ml). Luego, la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (método C). Rendimiento: 20 % (70 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.61 (s, 1H), 7.33 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.26 - 7.20 (m, 3H), 7.04 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.38 (d, J = 35.8 Hz, 3H), 1.42 - 1.32 (m, 4H), 1.14 - 1.08 (m, 8H), 0.75 (s, 6H). LCMS: (Método B) 522.2 (M+-2H), Rt. 2.46 min, 99.75 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.12 min, 99.28 % (máx.).
Ejemplo 54
Ácido f£J-3-((3,3-dietil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000158_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-yodo-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)acrilato de fe/f-but¡lo (Intermed¡o 82; 130 mg, 0.2l75 mmol) en DCM (2 ml) a 0 °C, se añad¡ó TFA (2 ml) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se vert¡ó en agua enfriada con h¡elo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2S o4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método B) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 21 % (25 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.28 (s, 1H), 7.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 -7.17 (m, 5H), 7.03 (t, J = 15.2 Hz, 1H), 5.39 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.41 (s, 2H), 1.53 - 1.48 (m, 2H), 1.37 - 1.32 (m, 2H), 0.69 (t, J = 14.4 Hz, 6H). LCMS: (Método B) 542.0 (M++H), Rt. 2.09 m¡n, 95.08 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.47 m¡n, 93.13 % (máx.).
Ejemplo 55
Ácido (EJ-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000158_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 84; 250 mg, 0.478 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (5 ml, 4:1) se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (100 mg, 2.3925 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante la noche a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), se añad¡ó la mezcla de reacc¡ón ac¡d¡f¡cada con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método C) y la fracc¡ón obten¡da se concentró a pres¡ón reduc¡da para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 10 % (15 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.28 (s, 1H), 7.72 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.34 (t, J = 15.6 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 15.6 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 1.52 -1.49 (m, 2H), 1.38 - 1.34 (m, 2H), 0.69 (t, J = 14.4 Hz, 6H). LCMS: (Método E) 494.0 (M++H), Rt. 2.48 m¡n, 98.56 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.43 m¡n, 98.18 % (máx.).
Ejemplo 56
Ácido (ZJ-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000158_0003
A una soluc¡ón ag¡tada de fZJ-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 85; 250 mg, 0.475 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (5 ml, 4:1) se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (100 mg, 2.376 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante la noche a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), se añad¡ó la mezcla de reacc¡ón ac¡d¡f¡cada con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método C) y la fracción obtenida se concentró al vacío para producir el compuesto del título. Rendimiento: 10 % (15 mg, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.69 (s, 1H), 7.58 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.32 (t, J = 15.6 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.10 (s, 1H), 7.03 (t, J = 14.4 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.41 (s, 2H), 1.54 - 1.49 (m, 2H), 1.37 - 1.32 (m, 2H), 0.69 (t, J = 14.8 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 512.0 (M++H), Rt. 2.63 min, 99.15 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt.
5.56 min, 95.79 % (máx.).
Ejemplos 57 y 58
Ácido (S)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (R)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000159_0001
Los enantiómeros del ácido ('EJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico y ácido (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-yodo-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico (Intermedio 94; 3.38 g, 5.93 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Instrumento: imagen SFC 10-150); fase móvil: CO2: Isopropilamina al 0.5 % en IPA (70:30); columna: Lux A1; tasa de flujo: 3 ml/min; longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 de los Ejemplos 5 y 6; la segunda fracción eluida correspondió a una mezcla del enantiómero 2 de los Ejemplos 5 y 6 y el enantiómero 1 del compuesto del título; y la tercera fracción correspondió al enantiómero 2 del compuesto del título.
La mezcla del enantiómero 2 de los Ejemplos 5 y 6 y el enantiómero 1 del compuesto del título se volvió a separar mediante SFC preparativa quiral (Instrumento: imagen SFC 10-150); fase móvil: CO2: Isopropilamina al 0.5 % en IPA (70:30); columna: YMC Celulosa-SB; Tasa de flujo: 3 ml/min; Longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 2 del Ejemplo 5 y 6 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 1 del compuesto del título. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros del compuesto del título.
Enantiómero 1: Rendimiento: 9 % (0.305 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 512.27 (s, 1H), 7.71 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.37-7.33 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.09-7.07 (m, 1H), 5.38 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.43 (s, 2H), 1.53-1.51 (m, 1H), 1.35-1.32 (m, 3H), 1.14-0.99 (m, 4H), 0.74- 0.73 (m, 6H). LCMS: (Método A) 568.1 (M+-H), Rt. 2.92 min, 97.41 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.03 min, 95.00 % (máx.). SFC: (Método A) Rt.
3.55 min, 99.53 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 3.5 % (0.12 g, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 512.27 (s, 1H), 7.71 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.37-7.33 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.09-7.07 (m, 1H), 5.38 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.43 (s, 2H), 1.51-1.50 (m, 1H), 1.37-1.30 (m, 3H), 1.14-0.98 (m, 4H), 0.75-0.74 (m, 6H. LCMS: (Método A) 568.1 (M+-H), Rt. 2.92 min, 96.49 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.03 min, 96.77 % (máx.). SFC: (Método A) Rt.
6.78 min, 94.72 % (máx.).
Ejemplo 59
Ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000159_0002
A una solución agitada de fZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 24; 0.3 g, 0.58 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (13 ml, 10:3), se añadió hidróxido de litio (0.12 g, 2.89 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo crudo se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método D) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 56 % (160 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.13 (bs, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.29 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.20 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.74 - 3.71 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.55 - 1.31 (m, 4H), 1.10 - 0.98 (m, 4H), 0.75 - 0.72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 490.2 (M+H), Rt. 2.70 min, 99.89 % (máx.). Hp Lc : (Método B) Rt. 5.69 min, 99 % (máx.).
Ejemplos 60 y 61
Ácido (S)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (R)-(Z)-3-{{3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000160_0001
Los dos enantiómeros del ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico (Ejemplo 59; 97 mg, 0.20 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (método B); fase móvil: CO2: IPA (70:30); Longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros. Enantiómero 1: Rendimiento: 20 % (20 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 12.07 (bs, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.29 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.21 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.74-3.71 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54-1.31 (m, 4H), 1.16-0.89 (m, 4H), 0.75- 0.72 (m, 6H). LCMS: (Método C) 490.1 (M++H), Rt. 2.78 min, 98.11 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.69 min, 97.25 % (máx.). SFC quiral: (Método B) Rt. 8.86 min, 100 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 18 % (18 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 11.92 (bs, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.21 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.74-3.71 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.54-1.31 (m, 4H), 1.16-0.89 (m, 4H), 0.75- 0.72 (m, 6H). LCMS: (Método C) 490.0 (M++H), Rt. 2.78 min, 98.21 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.69 min, 96.69 % (máx.). Pureza quiral: (Método B) Rt. 9.84 min, 98.07 % (máx.).
Ejemplo 62
Ácido (EJ-3-((3-butil-5-(4-(tert-butilcarbamoil)fenil)-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000160_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-5-(4-(tert-butilcarbamoil)fenil)-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1, 5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de etilo (intermedio 99; 50 mg, 0.08 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4:1, 5 ml), se añadió hidróxido de litio (6.8 mg, 0.16 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en agua enfriada con hielo (2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml), salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 10 %/DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 12 % (5.9 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.72-7.67 (m, 3H), 7.53 (s, 2H), 6.98-6.94 (m, 3H), 5.51 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.85­ 3.65 (m, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.59-1.49 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.33-1.29 ( m, 2H), 1.24-1.13 (m, 4H), 0.83­ 0.79 (m, 6H). LCMS: (Método B) 589.3 (M++H), Rt. 2.11 min, 95.20 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 5.21 min, 96.87 % (máx.).
Ejemplo 63:
Ácido (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000161_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)- 2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 100; 0.55 g, 0.99 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.08 g, 1.98 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml, pH~4) y luego se d¡luyó con agua enfriada con h¡elo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó luego con agua (8 ml), salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 40-45 % de EtOAc/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 49 % (0.26 g, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.62 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.37-7.33 (m, 2H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.22­ 7.08 (m, 2H) , 3.78 (bs, 2H), 3.43 (s, 2H), 1.38-1.30 (m, 4H), 1.11-1.03 (m, 4H), 0.73 (t, J = 6.40 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 538.0 (M+- 2H), Rt. 2.84 m¡n, 98.53 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.09 m¡n, 99.67 % (máx.).
Ejemplos 64 y 65
Ác¡do (R)-(ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co y ác¡do (S)-(ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000161_0002
Los dos enant¡ómeros del ác¡do (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co racém¡co (Ejemplo 63; 0.24 g, 4.44 mmol) se separó med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (método F); fase móv¡l: CO2 : ¡soprop¡lam¡na al 0.5 % en IPA (70:30); Long¡tud de onda: 280nm; T¡empo del c¡clo: 5 m¡nutos; Contrapres¡ón: 100 bares. El mater¡al se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 1 y la segunda fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 2. Se desconoce la conf¡gurac¡ón absoluta de los dos enant¡ómeros.
Enant¡ómero 1: Rend¡m¡ento: 14 % (34 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 513.68 (bs, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.56 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.08-7.06 (m, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.43 (s, 2H), 1.54-1.45 (m, 1H), 1.41-1.28 (m, 3H), 1.17- 0.80 (m, 4H), 0.76-0.64 (m, 6H). LCMS: (Método A) 540.1 (M+), Rt. 2.93 m¡n, 98.05 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.09 m¡n, 95.88 % (máx.). SfC: (Método F) Rt. 6.98 m¡n, 99.57 % (máx.).
Enant¡ómero 2: Rend¡m¡ento: 14 % (35 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 513.59 (bs, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 2H), 7.21 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.08-7.04 (m, 2H), 3.76 (bs, 2H), 3.43 (s, 2H), 1.55 -1.53 (m, 1H), 1.42 - 1.30 (m, 3H), 1.18-0.90 (m, 4H), 0.68-0.78 (m, 6H). LCMS: (Método A) 540.2 (M+), Rt.
2.92 m¡n, 97.84 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.09 m¡n, 93.15 % (máx.). SFC: (Método F) Rt. 8.38 m¡n, 97.28 % (máx.).
Ejemplo 66
Ácido (ZJ-3-((5-(4-(benc¡lam¡no)fen¡l)-3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000162_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 78; 0.02 g, 0.03 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml) a temperatura amb¡ente, se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.01 g, 0.07 mmol) y la mezcla se ag¡tó durante 1 hora a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con una soluc¡ón de HCl 1.5 N (3 ml) y se d¡luyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml), salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el mater¡al crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método A) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 17 % (3.5 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.43 (s, 1H), 7.37-7.30 (m, 5H), 7.24 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.24 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.52 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 1.40 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 0.64 (t, J = 7.20 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 585.1 (M++H), Rt. 2.63 m¡n, 90.29 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 4.33 m¡n, 93.44 % (máx.).
Ejemplo 67
Ácido (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000162_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (Intermed¡o 102; 0.23 g, 0.41 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.07 g, 1.64 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método A) para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 42 % (68 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.24 (s, 1H), 7.68 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.32 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.03 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.40 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.78 (bs, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.69 (q, J = 6.92 Hz, 2H), 1.43-1.39 (m, 3H), 1.36-1.13 (m, 12H), 0.86-0.67 (m, 6H). LCMS: (Método A) 532.2 (M++H), Rt. 3.13 m¡n, 97.39 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.07 m¡n, 96.57 % (máx.).
Ejemplo 68
Á cid o f£J-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000163_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5- benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (Intermed¡o 106; 55 mg, 0.08 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml) a temperatura amb¡ente, se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (7.17 mg, 0.17 mmol ) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 6 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo resultante se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfr¡ada con h¡elo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfr¡ada con h¡elo (5 ml) y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el mater¡al crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 55 %/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400). El compuesto obten¡do se volv¡ó a purificar med¡ante HPLC preparat¡va (Método A) para proporc¡onar el compuesto del título puro. Rend¡m¡ento: 4 % (2.1 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.75-7.68 (m, 3H), 7.52 (s, 2H), 6.99-6.92 (m, 3H), 5.51 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.75 (bs, 2H), 3.42 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.46-1.57 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.22-1.11 (m, 10H), 0.80 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS:
(Método A) 617.3 (M++H), Rt. 2.74 m¡n, 96.23 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.91 m¡n, 93.46 % (máx.).
Ejemplo 69
Ácido (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(¡soprop¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000163_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(¡soprop¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 108; 50 mg, 0.08 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1, 5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (6.6 mg, 0.16 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo resultante se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfriada con h¡elo (2 ml) y EtOAc (2 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfriada con h¡elo (5 ml) y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 9 %/DCM; gel de síl¡ce: malla 230­ 400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 10 % (5 mg, sól¡do blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.28 (bs, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75-7.72 (m, 3H), 7.53 (s, 1H), 7.03-7.01 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 5.51 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.11-4.06 (m, 1H), 3.78 (bs, 2H), 3.29 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.58-1.45 (m, 2H), 1.38-1.25 ( m, 2H), 1.18-1.10 (m, 14H), 0.80 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 603.2 (M++H), Rt. 2.52 m¡n, 91.99 % (máx.). HPLC:
(Método b) Rt. 5.51 m¡n, 85.91 % (máx.).
Ejemplo 70
Á cid o (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000164_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrilato de met¡lo (¡ntermed¡o 109; 0.36 g, 0.64 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (5 ml, 4:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.05 g, 1.3 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml) a pH~4 y se d¡luyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 40-45 % de EtOAc/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 18 % (70 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.55 (s, 1H), 7.56 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.31 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 3.76 (bs, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.71 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.44-1.42 (m, 2H), 1.36-1.30 (m, 2H), 1.18-1.10 (m, 3H), 1.07-1.04 (m, 8H), 0.75 (t, J = 6.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 550.2 (M++1), Rt. 3.19 m¡n, 97.86 % (máx.). HPLC: (Método A) Rt. 6.2 m¡n, 98.44 % (máx.).
Ejemplo 71
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-prop¡onam¡dofen¡l)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000164_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ác¡do fZJ-3-((5-(4-am¡nofen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co (¡ntermed¡o 38; 0.15 g, 0.27 mol) en DCM (5 ml) a 0 °C, se añad¡ó tr¡et¡lam¡na (0.06 g, 0.54 mmol) segu¡do de cloruro de prop¡on¡lo (0.03 g, 0.32 mmol) y se cont¡nuó ag¡tando durante 1 hora a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (15 ml) y se lavó con soluc¡ón de NaHCO3 saturado (10 ml) y salmuera (10 ml). Luego, la capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 5 % en DCM; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 37 % (60 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.81 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.30 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 3.72 (bs, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.30 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.43-1.36 (m, 4H), 1.24­ 1.06 (m, 11H), 0.88-0.65 (m, 6H). LCMS: (Método C) 604.6 (M+-2H), Rt. 2.90 m¡n, 91.45 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.57 m¡n, 93.38 % (máx.).
Ejemplo 72
Ácido (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000164_0003
A una solución agitada de (ZJ-3-((3-butil-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de met¡lo (¡ntermed¡o 111; 0.23 g, 0.42 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.04 g, 0.85 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se d¡luyó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 * 10 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 35-40 % EtOAc/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 30 % (0.07 g, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.58 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.30 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.99 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 3.74 (bs, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.75-2.68 (m, 2H), 1.53-1.32 (m, 4H), 1.08-1.01 ( m, 7H), 0.74 (t, J = 4.80 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 522.1 (M++H), Rt. 2.94 m¡n, 99.01 % (máx.). HPLC: (Método a ) Rt. 5.74 m¡n, 95.24 % (máx.).
Ejemplo 73
Ácido (EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000165_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(et¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 112; 0.36 g, 0.67 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.6 g, 1.35 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡ficó con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 2 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (método B) para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 54 % (180 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.25 (s, 1H), 7.68 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.31 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.01 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.77 (bs, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.70 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 1.56-1.32 (m, 4H), 1.18-1.03 (m, 7H), 0.73 (t, J = 5.20 Hz, 6H).
LCMS: (Método A) 504.1 (M++H), Rt. 2.88 m¡n, 99.31 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.02 m¡n, 96.02 % (máx.). Ejemplo 74
Ácido ('EJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-met¡lacríl¡co
Figure imgf000165_0002
A una soluc¡ón ag¡tada del ác¡do (EJ-3-((3,3-d¡but¡l-2-(4-metox¡benc¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5 benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-met¡lacríl¡co (Intermed¡o 114; 0.2 g, 0.30 mmol) en DCM seco (2 ml) se añad¡eron TFA (0.6 ml) y tr¡et¡ls¡lano (0.6 ml) a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con agua enfriada con h¡elo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se evaporó al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 20 %/PE; gel de síl¡ce: 230-400 mesh) y el producto obten¡do se trituró ad¡c¡onalmente con éter d¡etíl¡co para produc¡r el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 46 % (75 mg, sól¡do blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.31 (s, 1H), 7.50 (s, 2H), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.29-7.23 (m, 2H), 7.16-7.02 (m, 1H), 6.52 (s, 1H) , 4.18-3.71 (bs, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.80 (s, 3H), 1.58-1.46 (m, 2H), 1.41-1.35 (m, 2H), 1.29-1.18 (m, 3H) , 1.17-1.04 (m, 2H), 1.03-0.92 (m, 3H), 0.74-0.72 (m, 6H). LCMS: (Método E) 533.2 (M++H), Rt. 2.81 min, 95.34 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.39 min, 95.95 % (máx.).
Ejemplo 75
Ácido (EJ-3-((7-bromo-3,3-d¡but¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000166_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((7-bromo-3,3-d¡but¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de tert-but¡lo (Intermed¡o 116; 0.11 g, 0.18 mmol) en DCM (5 ml) a 0 °C, se añad¡ó TFA (2 ml) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se vert¡ó en agua enfr¡ada con h¡elo (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 25 % en hexano; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 25 % (28 mg, sól¡do color marrón claro).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.23 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.68 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.17 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.27 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.01 (bs, 2H), 1.60-1.42 (m, 2H), 1.42-1.35 (m, 2H), 1.30-1.11 (m, 2H), 1.00-1.12 (m, 2H), 1.00-0.80 (m, 4H), 0.80-0.60 (m, 6H). LCMS: (Método A) 553.1 (M++2H), Rt. 2.98 m¡n, 96.92 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.28 m¡n, 98.09 % (máx.).
Ejemplo 76
Ácido (EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000166_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-(4-metox¡benc¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1.2 ,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de tert-but¡lo (Intermed¡o 129; 0.6 g, 0.9 mmol) en DCM seco (5 ml) se añad¡eron TFA (2.5 ml) y tr¡et¡ls¡lano (2.5 ml) a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 3 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por LCMS), la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con agua enfriada con h¡elo (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se evaporó al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 60 % en hexano; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 68 % (0.3 g, sól¡do blanco).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.20 (bs, 1H), 7.64 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.54-7.51 (m, 1H), 7.39-7.32 (m, 3H), 7.27­ 7.21 (m, 2H), 7.11-7.08 (m, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.32 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.11-3.97 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.63-1.62 (m, 1H), 1.50-1.36 (m, 3H), 1.24-0.93 (m, 4H), 0.86-0.70 (m, 6H). LCMS: (Método A) 491.1 (M++H), Rt. 2.73 m¡n, 95.09% (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.66 m¡n, 94.36 % (máx.).
Ejemplos 77 y 78
Ác¡do (S)-('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co y ác¡do (R)-('EJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000167_0001
Los dos enantiómeros del ácido (EJ-3-((3-butil-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico racém¡co (Ejemplo 77; 0.3 g, 0.61 mmol) med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (método E); fase móv¡l: CO2 : Isoprop¡lam¡na al 0.5 % en metanol (50:50); Long¡tud de onda: 210nm; T¡empo del c¡clo: 5 m¡nutos; Contrapres¡ón: 100 bares. El mater¡al se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracc¡ón elu¡da correspondí al enant¡ómero 1 y la segunda fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 2. Se desconoce la conf¡gurac¡ón absoluta de los dos enant¡ómeros.
Enant¡ómero 1: Rend¡m¡ento: 33.3 % (100 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 12.21 (bs, 1H), 7.64 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 7.36 - 7.10 (m, 6H), 6.51 (s, 1H), 5.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.02-3.87 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.63-1.39 (m, 4H), 1.24-0.93 (m, 4H), 0.86-0.70 (m, 6H). LCMS: (Método A) 491.1 (M++H), Rt.
2.71 m¡n, 96.91 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.70 m¡n, 95.47 % (máx.). SFC: (Método E) Rt. 2.03 m¡n, 96.17 % (máx.).
Enant¡ómero 2: Rend¡m¡ento: 34 % (110 mg, sól¡do blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.21 (bs, 1H), 7.64 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 1H), 7.39-7.36 (m, 3H), 7.27-7.21 (m, 2H), 7.11 -7.08 (m, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.02-3.87 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.62-1.38 (m, 4H ), 1.24-0.91 (m, 4H), 0.89-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 491.2 (M++H), Rt.2.71 m¡n, 97.88 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.70 m¡n, 98.57 % (máx.). SFC: (Método E) Rt. 2.31 m¡n, 97.27 % (máx.).
Ejemplo 79
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000167_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡óx¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrilato de met¡lo (Intermed¡o 130; 90 mg, 0.14 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml) se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (11.7 mg, 0.27 mmol) y la mezcla se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo se som etí a p a r t í ín entre agua enfriada con h¡elo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfriada con h¡elo (5 ml) y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (Método A) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 13 % (11.3 mg, sól¡do blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.67 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.51-7.47(m, 2H), 7.27-7.23 (m, 1H), 6.94-6.90 (m, 3H), 3.71 (bs, 2H), 3.42 (s, 2H), 2.28 ( s, 3H), 1.61-1.58 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.31-1.07 (m, 10H), 0.80 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 635.2 (M++H), Rt. 2.83 m¡n, 97.38 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.96 m¡n, 96.71 % (máx.).
Ejemplo 80
Á cid o (EJ-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000168_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo (intermedio 133; 0.11 g, 0.20 mmol) en DCM (3 ml), se añadió TFA (0.02 g, 2.02 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa orgánica se lavó con agua (5 ml) y salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 % en DCM, gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 51 % (50 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.59 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.28 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.96 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.41 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.76 (bs, 2H), 3.28 (s, 2H), 2.72 (s, 6H), 1.37-1.30 (m, 4H), 1.24-1.07 (m, 4H), 0.74 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 487.2 (M++H), Rt. 2.81 min, 95.8 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 5.75 min, 95.33 % (máx.).
Ejemplo 81
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000168_0002
A una solución agitada de (EJ-3-((3,3-dibutil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo (intermedio 141; 0.16 g, 0.29 mmol) en DCM (5 ml), se añadió TFA (0.2 ml, 2.93 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre EtOAc (10 ml) y agua (10 ml). La capa orgánica se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por Isolera (eluyente: EtOAc al 20 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título.
Rendimiento: 55 % (78 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.26 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73-7.70 (m, 1H), 7.36 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.82 (bs, 2H), 3.45 (s, 2H), 1.43-1.28 (m, 4H), 1.13-0.99 (m, 8H) , 0.73 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 490.2 (M++H), Rt. 3.0 min, 97.39 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 6.28 min, 97.94 % (máx.).
Ejemplo 82
Ácido f£j-3-((3,3-dibutil-7-ciano-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000168_0003
A una solución agitada de f£J-3-((3,3-dibutil-7-ciano-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo (intermedio 144; 220 mg, 0.39 mmol) en DCM (2 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota TFA (0.15 ml, 2.0 mmol) y luego la mezcla de reacción se agitó durante 6 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml) y salmuera (5 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 35 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 24 % (49 mg, sólido color amarillo).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.85 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.36 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.28 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 7.10 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 1.42-1.24 (m, 4H), 1.17-0.99 (m, 8H), 0.74 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 497.2 (M++H), Rt. 2.91 min, 98.47 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.17 min, 98.03 % (máx.).
Ejemplo 83
Ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2-enoico
Figure imgf000169_0001
A una solución agitada de ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5 benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2-enoico (intermedio 146; 0.15 g, 0.22 mmol) en DCM seco (10 ml) a 0 °C, se añadieron TFA (0.4 ml) y trietilsilano (0.4 ml). A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se diluyó con agua enfriada con hielo (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 14 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 40 % (50 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 11.88 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.41-7.32 (m, 5H), 7.15-7.13 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.60-1.30 (m, 4H), 1.30-1.15 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 2H), 1.05-0.85 (m, 4H), 0.72 (s, 6H). LCMS: (Método A) 533.3 (M++H), Rt. 2.99 min, 98.60 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.36 min, 98.35 % (máx.).
Ejemplo 84
Ácido (Z)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000169_0002
A una solución agitada de ácido (Z)-3-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (Intermedio 148; 0.35 g, 0.55 mmol) en DCM seco (5 ml) a 0 °C (2.5 ml) y trietilsilano (2.5 ml). A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por LCMS), la mezcla de reacción se diluyó con agua enfriada con hielo (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se evaporó al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método D) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 35 % (100 mg, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.49 (bs, 1H), 7.52-7.34 (m, 5H), 7.32-7.22 (m, 2H), 7.09-7.08 (m, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.15 - 3.62 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.63-1.36 (m, 4H), 1.24-1.06 (m, 4H), 0.93-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 509.2 (M++H), Rt. 2.72 min, 98.96 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.77 min, 99.77 % (máx.).
Ejemplos 85 y 86
Ácido (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico y ác¡do (R)-(Z)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡na-8- y¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000170_0001
Los dos enant¡ómeros de ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co racém¡co (Ejemplo 84; 0.08 g, 0.16 mmol) se separaron med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral; fase móv¡l: CO2: ¡soprop¡lam¡na al 0.5 % en metanol (70:30); Columna: YMC Celulosa-SC; Tasa de flujo: 3 ml/m¡n; Long¡tud de onda: 210nm; T¡empo del c¡clo: 7 m¡nutos; Contrapres¡ón: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 1 y la segunda fracc¡ón elu¡da correspond¡ó al enant¡ómero 2. Se desconoce la conf¡gurac¡ón absoluta de los dos enant¡ómeros.
Enant¡ómero 1: Rend¡m¡ento: 25% (20 mg, sól¡do blanquec¡no). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 513.58 (bs, 1H), 7.57­ 7.31 (m, 5H), 7.32-7.22 (m, 2H), 7.15-7.14 (m, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.04-3.82 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.69-1.42 (m, 4H), 1.30-1.13 (m, 4H), 0.94-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 509.1 (M++H), Rt. 2.74 m¡n, 98.86 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.77 m¡n, 98.84 % (máx.). SFC: (Método F) Rt. 5.25 m¡n, 100 % (máx.).
Enant¡ómero 2: Rend¡m¡ento: 25 % (20 mg, sól¡do color marrón pál¡do). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 5 13.50 (bs, 1H), 7.57-7.43 (m, 3H), 7.36 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.39-7.18 (m, 2H), 7.09-7.07 (m, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.04-3.82 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.62-1.36 (m, 4H), 1.24-1.06 (m, 4H), 0.94-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 509.2 (M++H), Rt. 2.72 m¡n, 98.97 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.77 m¡n, 99.50 % (máx.). SFC: (Método F) Rt. 5.93 m¡n, 95.00 % (máx.). Ejemplo 87
Ácido (EJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000170_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de ('EJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acr¡lato de te/t-but¡lo (Intermed¡o 150; 0.2 g, 0.34 mmol) en DCM seco (5 ml), TFA (2 ml) se añad¡ó a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 2 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó med¡ante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 28 % en hexano; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 81 % (148 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 12.23 (s, 1H), 7.74 (bs, 1H), 7.68 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.41 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.16 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.85 (bs, 1H), 5.26 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.03 (bs, 2H), 1.60­ 1.55 (m, 1H), 1.54-1.35 (m, 3H), 1.29-0.98 (m, 2H), 0.95-0.81 (m, 2H), 0.75-0.61 (m, 6H). LCMS: (Método A) 525.2 (M++2H), Rt. 2.76 m¡n, 90.66 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.77 m¡n, 90.61 % (máx.).
Ejemplo 88
Ácido f£J-3-((3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co
Figure imgf000170_0003
A una solución agitada de ('EJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin -8-il)oxi)acrilato de fe/f-butilo (intermedio 153; 190 mg, 0.33 mmol) en DCM seco (3 ml), TFA (2 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y se diluyó con agua enfriada con hielo (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se evaporó al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 20 % en hexano; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 80 % (148 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO- de): 5 12.22 (s, 1H), 7.66 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.40-7.36 (m, 3H), 7.30 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.39 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.12 (bs, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.90-1.87 (m, 2H), 1.52-1.49 (m, 2H), 1.16-0.90 ( m, 4H), 0.82-0.61 (m, 6H). LCMS: (Método A) 504.9 (M+), Rt. 2.91 min, 97.98 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.01 min, 97.03 % (máx.).
Ejemplos 89 y 90
Ácido (S)-('EJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil1-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (R)-('EJ-3-{{3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidrol,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000171_0001
Los dos enantiómeros del ácido ('EJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico (Ejemplo 88; 0.14 g, 0.27 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (Método F); fase móvil: CO2: isopropilamina al 0.5 % en metanol; Longitud de onda: 280nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 28 % (40 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO- de): 5 12.20 (bs, 1H), 7.66 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.40-7.36 (m, 5H), 7.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.39 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.12 (bs, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.91-1.87 (m, 1H), 1.79-1.72 (m, 1H), 1.56-1.50 ( m, 2H), 1.24-1.05 (m, 4H), 0.76-0.70 (m, 6H). LCMS: (Método A) 505.2 (M++H), Rt. 2.89 min, 97.38 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.99 min, 98.97 % (máx.). SFC: (Método E) Rt. 2.77 min, 100 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 28 % (40 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO- de): 5 12.19 (bs, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 8.0 Hz, 3H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.11 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.38 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.91-1.86 (m, 1H), 1.78-1.76 (m, 1H), 1.55-1.52 ( m, 2H), 1.46­ 0.90 (m, 4H), 0.81-0.62 (m, 6H), LCMS: (Método E) 505.1 (M++H), Rt. 2.69 min, 97.32 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.99 min, 97.57 % (máx.). s Fc : (Método E) Rt. 3.06 min, 93.78 % (máx.).
Ejemplo 91
Ácido (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000171_0002
A una solución agitada de ('EJ-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de tert-butilo (intermedio 156; 0.18 g, 0.33 mmol) en DCM (5 ml), se añadió TFA (0.04 g, 3.31 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se sometió a partición entre EtOAc (5 ml) y agua (5 ml). La capa orgánica se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 2-3 % en DCM; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 58 % (90 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.15 (s, 1H), 7.64 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.25 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.90 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.34 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.69 (bs, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.67 (s, 3H), 1.54-1.41 (m, 2H), 1.37-1.30 (m, 2H), 1.11-1.00 ( m, 4H), 0.75 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 473.3 (M++H), Rt. 2.67 min, 98.1 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.59 min, 97.1 % (máx.).
Ejemplos 92 y 93
Ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi) acrílico y ácido (R)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000172_0001
Los dos enantiómeros del ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi) acrílico racémico (Ejemplo 91; 80 mg, 0.16 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (método E); Longitud de onda: 220nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 11 % (10 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.38 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.23 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.88 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.23 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.37 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.67 (bs, 2H), 3.19 (s, 2H), 2.51 (s, 3H) ), 1.52-1.32 (m, 2H), 1.30-1.01 (m, 6H), 0.73 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 473.3 (M++H), Rt. 2.67 min, 95.41 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.60 min, 97.83 % (máx.). SFC quiral: (Método D) Rt. 2.95 min, 95.67 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 18% (15 mg, sólido blanco). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.39 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.23 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.88 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.23 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.37 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.71 (bs, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.67 (s, 3H), 1.52-1.35 (m, 2H), 1.30-1.08 (m, 6H), 0.73 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 473.2 (M++H), Rt. 2.69 min, 91.43 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.6 min, 96.86 % (máx.). SFC quiral: (Método D) Rt. 3.77 min, 95.82 % (máx.).
Ejemplo 94
Ácido (Z)-3-((5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000172_0002
A una solución agitada de ácido (Z)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (Ejemplo 11; 100 mg, 0.18 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, se añadió N-bromosuccinimida (35.5 mg, 0.2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 0 °C . Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (5 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (5 ml) y salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 60 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 52 % (60 mg, sólido color marrón).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.47 (bs, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.40 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.01-6.99 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 3.48 (bs, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.55-1.39 (m, 2H), 1.47-1.21 (m, 2H), 1.20-1.04 (m, 8H), 0.79 (t, J = 6.8 Hz, 6H). LCMS: (Método E) 616.0 (M++2H), Rt.2.92 min, 96.99 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt.6.61 min, 97.49 % (máx.).
Ejemplo 95
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000173_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡fen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 159; 0.51 g, 0.88 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1, 10 ml) a temperatura amb¡ente, se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (74 mg, 1.75 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 30 m¡nutos a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y el res¡duo obten¡do se somet¡ó a part¡c¡ón entre agua enfriada con h¡elo (10 ml) y EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua enfriada con h¡elo (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2sO 4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 8 %/DCM; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 42 % (235 mg, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 59.37 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.42 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.34 (s, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.42-1.35 (m, 4H), 1.11-1.07 (m, 4H), 1.04-0.97 (m, 4H), 0.76-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método A) 552.1 (M++H), Rt. 2.58 m¡n, 97.48 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.52 m¡n, 97.70 % (máx.).
Ejemplo 96
Ácido (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000173_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-fluoro-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de met¡lo (¡ntermed¡o 167; 0.12 g, 0.24 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1, 5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.05 g, 1.22 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 4 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se d¡luyó con agua enfriada con h¡elo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (5 ml) y salmuera (5 ml) y se secó sobre Na2SO4 anh¡dro. La parte orgán¡ca se concentró al vacío y el material crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: 18-20 % EtOAc/PE; gel de síl¡ce: malla 230-400) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 43 % (50 mg, sól¡do blanquec¡no).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 18.00 Hz, 1H), 7.32-7.30 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 2H), 7.07 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 6.40 Hz, 2H), 3.38 (m, 2H), 1.24-1.20 (m, 4H), 1.06-1.05 (m, 4H), 0.84-0.60 (m, 6H). LCMS: (Método E) 480.1 (M++H), Rt. 2.61 m¡n, 99.74 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.84 m¡n, 98.24 % (máx.).
Ejemplo 97
Ácido fZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000174_0001
A una solución agitada de ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-2-(4-metoxibencil)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico (intermedio 171; 0.02 g, 0.27 mmol) en DCM seco (2 ml), se añadieron ácido trifluoroacético (1 ml) y trietilsilano (1 ml) a 0° C y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre EtOAc (5 ml) y agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se evaporó al vacío. El producto crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (método A) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 11 % (17 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.42 (s, 1H), 7.37-7.35 (m, 3H), 7.33-7.30 (m, 2H), 7.26 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.15 (s, 1H), 4.05 (bs, 2H), 2.59 (s, 6H), 1.51-1.36 (m, 4H), 1.33-1.19 (m, 4H), 1.09-0.95 (m, 4H), 0.72 (t, J = 8.00 Hz, 6H). LCMS: (Método E) 534.2 (M++H), Rt. 2.75 min, 99.62 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.12 min, 98.21 % (máx.).
Ejemplo 98
Ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000174_0002
A una solución agitada de (ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (Intermedio 172; 0.39 g, 0.70 mmol) en una mezcla de THF y agua (10 ml, 4:1), se añadió hidróxido de litio (89 mg, 2.12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método D) para producir el compuesto del título. Rendimiento: 35 % (130 mg, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 57.50 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.08 (bs, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.91-1.76 (m, 2H) , 1.55-1.47 (m, 2H), 1.24­ 0.90 (m, 4H), 0.77-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 523.2 (M++H), Rt. 2.90 min, 99.26 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.07 min, 99.61 % (máx.)
Ejemplos 99 y 100
Ácido (S)-fZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico y ácido (R)-fZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000174_0003
Los dos enantiómeros del ácido fZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico racémico (Ejemplo 98; 0.13 g, 0.25 mmol) se separaron mediante SFC preparativa quiral (método F); Longitud de onda: 280nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 38 % (50 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 513.5 (bs, 1H), 7.53 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.36 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.08 (bs, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.90-1.78 (m, 2H), 1.56-1.47 (m, 2H), 1.25-0.90 (m, 4H), 0.77-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método E) 523.1 (M++H), Rt. 2.72 min, 98.30 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.07 min, 97.89 % (máx.). SFC: (Método H) Rt. 5.71 min, 99.46 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 40 % (52 mg, sólido blanquecino). 1HRMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.50-7.35 (m, 4H), 7.25 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.09 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.08 (s, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.91-1.76 (m, 2H), 1.55-1.49 (m, 2H), 1.26-1.23 (m, 1H), 1.18-1.07 (m, 2H), 0.96-0.81 (m, 1H), 0.77-0.73 (m, 6H). LCMS: (Método E) 523.1 (M++H), Rt. 2.72 min, 98.06 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.07 min, 97.19 % (máx.). SFC: (Método H) Rt. 6.7 min, 98.20 % (máx.).
Ejemplo 101
Ácido (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000175_0001
A una solución agitada de (EJ-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrilato de fe/t-butilo (Intermedio 173; 0.5 g, 0.97 mmol) en DCM (3 ml) a 0 °C, se añadió gota a gota TFA (3 ml) y se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 14-15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 90 % (400 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 512.26 (s, 1H), 7.74 (t, J = 9.20 Hz, 2H), 7.36 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 7.27 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 7.09 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 5.43 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 3.80 (d, J = 14.80 Hz, 2H), 3.45 (s, 2H), 1.29-1.32 (m, 4H), 0.95-0.97 (m, 4H), 0.69-0.71 (m, 6H). LCMS: (Método E) 462.1 (M++H), Rt. 2.59 min, 96.24 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.73 min, 97.13 % (máx.).
Ejemplos 102 y 103
Ácido (R)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico y ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico
Figure imgf000175_0002
Los dos enantiómeros del ácido f£j-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico racémico (Ejemplo 101; 0.40 g, 0.87 mmol se separaron mediante SFC preparativa quiral (Método E); Longitud de onda: 280nm; Tiempo del ciclo: 5 minutos; Contrapresión: 100 bares. El material se concentró al vacío a 40 °C. La primera fracción eluida correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción eluida correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.
Enantiómero 1: Rendimiento: 26 % (85 mg, sólido blanquecino). 1H RMN (400 MHz, D M SO d): 57.69 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 7.35 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 7.25-7.27 (m, 2H), 7.08 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 5.43 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 1.36-1.38 (m, 1H), 1.31-1.32 (m, 3H), 1.10-1.11 (m, 4H), 0.69- 0.71 (m, 6H). LCMS: (Método E) 462.1 (M++H), Rt. 2.61 min, 95.03 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.73 min, 97.89 % (máx.). SFC: (Método D) Rt. 3.47 min, 99.44 % (máx.).
Enantiómero 2: Rendimiento: 30 % (160 mg, sólido blanquecino). 1HRMN (400 MHz, DMSO-CÍ6): 57.64 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.60 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 7.06 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 3.79 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.41-1.53 (m, 1H), 1.31-1.32 (m, 3H), 0.99­ 1.02 (m, 4H), 0.71-0.73 (m, 6H). LCMS: (Método E) 462.1 (M++H), Rt. 2.61 min, 95.27 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.73 min, 96.74 % (máx.). SFC: (Método D) Rt. 4.04 min, 95.44 % (máx.).
Ejemplo 104
Ácido (Z)-3-((3,3-dibutil-5-(4-(dimetilcarbamoil)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1.5 benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000176_0001
A una solución agitada de (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(dimetilcarbamoil)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (intermedio 175; 450 mg, 0.7 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4:1,5 ml), se añadió hidróxido de litio (59.5 mg, 0.16 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se sometió a partición entre agua enfriada con hielo (10 ml) y EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua enfriada con hielo (15 ml) y salmuera (15 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna Isolera (eluyente: MeOH al 18 %/DCM; gel de sílice: malla 230­ 400). El compuesto obtenido se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (Método A) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 3 % (7 mg, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-^): 57.50 (s, 1H), 7.43-7.33 (m, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.03-7.01 (m, 2H), 6.87 (s, 1H), 3.92 (bs , 2H), 3.35 (s, 2H), 2.94 (s, 6H), 2.27 (s, 3H), 1.44-1.29 (m, 4H), 1.23-1.03 (m, 8H), 0.77 (t, J = 6.4 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 607.3 (M++H), Rt. 2.50 min, 95.26 % (máx.). HPLC: (Método E) Rt. 5.38 min, 97.77 % (máx.).
Ejemplo 105
Ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000176_0002
A una solución agitada de (Z)-3-((3,3-dibutil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro- 1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (Intermedio 178; 0.5 g, 0.86 mmol) en una mezcla de THF y agua (10 ml, 4:1), hidróxido de litio (108 mg, 2.57 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc al 55 %/PE; gel de sílice: malla 230-400) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 36 % (0.17 g, sólido blanco).
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 513.46 (bs, 1H), 7.53 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.39-7.35 (m, 2H), 7.28 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.11 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.12 (bs, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.51­ 1.45 (m, 2H), 1.24-0.95 (m, 8H), 0.76-0.74 (m, 6H). LCMS: (Método E) 551.2 (M++H), Rt. 2.88 min, 97.46 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.55 min, 97.54 % (máx.).
Ejemplo 106
Ácido (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡na-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000177_0001
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡l-2-met¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡na-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 181; 0.15 g, 0.25 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (5 ml, 4:1), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (32 mg, 0.77 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 1.5 ml, pH~4) y se d¡luyó con agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo resultante se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va (método D) para proporc¡onar el compuesto del título. Rend¡m¡ento: 42 % (60 mg, sól¡do blanco).
1RMN H (400 MHz, DMSO-da): 57.57 (s, 1H), 7.46-7.29 (m, 5H), 7.16 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.12 (bs, 2H), 2.89 (s, 3H), 1.88-1.75 (m, 2H), 1.54-1.48 (m, 2H), 1.17-1.13 (m, 2H), 1.07-0.96 (m, 2H), 0.87-0.85 (m, 6H). LCMS: (Método E) 555.0 (M+), Rt. 2.73 m¡n, 98.87 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.67 m¡n, 99.69 % (máx.)
Ejemplo 107
Ácido (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(3,4-d¡fluorofen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000177_0002
A una soluc¡ón ag¡tada de (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(3,4-d¡fluorofen¡l)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacr¡lato de et¡lo (¡ntermed¡o 187; 0.05 g, 0.083 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano y agua (4:1,5 ml), se añad¡ó h¡dróx¡do de l¡t¡o (0.01 g, 0.25 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 4 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón (mon¡tor¡zada por TLC), la mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có con HCl d¡lu¡do (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se d¡luyó con agua enfr¡ada con h¡elo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml) y la capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con agua (5 ml) y salmuera (5 ml). La parte orgán¡ca se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró al vacío. El mater¡al crudo resultante se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto del título puro. Rend¡m¡ento: 32 % (0.015 g, sól¡do blanquec¡no).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 513.63 (bs, 1H), 7.59-7.54 (m, 2H), 7.34-7.24 (m, 2H), 6.81-6.78 (m, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.35 (s, 2H) , 2.28 (s, 3H), 1.35-1.33 (m, 4H), 1.23-1.13 (m, 8H), 0.79-0.76 (m, 6H). LCMS: (Método A) 572.1 (M++H), Rt. 2.98 m¡n, 95.80 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 6.36 m¡n, 98.43 % (máx.).
Ejemplo 108
Ácido fZJ-3-((3-but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co
Figure imgf000177_0003
A una solución agitada de (Z)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrilato de etilo (intermedio 188; 0.07 g, 0.13 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4:1,5 ml), se añadió hidróxido de litio (0.02 g, 0.39 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua enfriada con hielo (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (método A). Rendimiento: 39 % (0.026 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-^): 57.39 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.03 (s, 1H), 6.92 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 3.70 (bs, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.70 (s, 6H), 1.54-1.51 (m, 1H), 1.42-1.30 (m, 3H), 1.24-1.01 (m, 4H), 0.77-0.75 (m, 6H). LCMS: (Método A) 505.1 (M++H), Rt. 2.88 min, 99.93 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.88 min, 98.74 % (máx.).
Ejemplos 109 y 110
Ácido (S)-(Z)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico y ácido (R)-(Z)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico
Figure imgf000178_0001
A una solución agitada del enantiómero 1 del Intermedio 189 (0.13 g, 0.24 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4:1, 5 ml), se añadió hidróxido de litio (0.021 g, 0.48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua enfriada con hielo (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml). La parte orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material resultante se trituró con Et2O y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título. La configuración absoluta del enantiómero no se conoce. Rendimiento: 39 % (0.026 g, sólido blanquecino).
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.39 (s, 1H), 7.25 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 6.91 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 3.69 (bs, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.70 (s, 6H), 1.52-1.41 (m, 1H), 1.40-1.30 (m, 3H), 1.24-1.02 (m, 4H), 0.75 (t, J = 6.40 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 505.2 (M++H), Rt. 2.84 min, 99.51 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.87 min, 98.75 % (máx.). SFC: (Método F) Rt. 8.93 min, 100 % (máx.).
A una solución agitada del enantiómero 2 del Intermedio 189 (0.15 g, 0.28 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano y agua (4:1, 5 ml), se añadió hidróxido de litio (0.024 g, 0.56 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitorizada por TLC), la mezcla de reacción se acidificó con HCl diluido (1.5 N, 3 ml, pH~4) y se diluyó con agua enfriada con hielo (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (8 ml) y salmuera (10 ml) y luego se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material resultante se trituró con Et2O para proporcionar el compuesto del título. La configuración absoluta del enantiómero no se conoce. Rendimiento: 39 % (0.026 g, sólido blanquecino).1
1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 57.40 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.15 (s, 1H), 7.09 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.92 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 3.69 (bs, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.69 (s, 6H), 1.51-1.49 (m, 1H), 1.35-1.32 (m, 3H), 1.21-1.11 (m, 4H), 0.73 (t, J = 7.20 Hz, 6H). LCMS: (Método A) 505.2 (M++H), Rt. 2.85 min, 96.20 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5.87 min, 99.29 % (máx.). SFC: (Método F) Rt. 9.62 min, 98.93 % (máx.).
ENSAYOS BIOLÓGICOS
protocolo de ensayo ASBT (h/m)
Se sembraron 10,000 células (células que sobreexpresan ASBT humanas o de ratón) en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 200 ^l de medio MEM-alfa (Gibco 12571-063) suplementado con FBS al 10 % (Gibco 10438026) que contenía puromicina (Gibco A1113803) (10 ^g/ml) y se incubaron a 37 °C en CO2 al 5 % durante 48 horas. Después de la incubación, el medio se decantó de los pocillos y las células se lavaron dos veces con 300 ^l de medio MEM-alfa basal (sin FBS). Después de decantar el medio MEM-alfa basal cada vez, las placas se golpearon contra una toalla de papel para garantizar la eliminación máxima de los medios residuales.
Las diluciones del inhibidor de prueba (la concentración de prueba más alta es 10 nM, dilución en serie de 3 veces, 10 puntos) preparadas en d Ms O (Sigma D2650) se agregaron a la mezcla de incubación (manteniendo una concentración final de DMSO del 0.2 %) que contenía 0.25 pM de ácido 3H-taurocólico (ARC A r T-1368) y 5 pM de ácido taurocólico frío (Sigma T4009). A continuación, se añadieron a los pocillos (por duplicado) 50 pl de la mezcla de incubación que contenía inhibidores de la prueba y las placas se incubaron durante 20 minutos en una incubadora de CO2 a 37 °C. Después de la incubación, la reacción se detuvo manteniendo las placas en una mezcla de hielo y agua durante 2-3 minutos y luego la mezcla de incubación se aspiró por completo de los pocillos. Los pocillos se lavaron dos veces con 250 pl de ácido taurocólico 1 mM sin marcar enfriado disuelto en HBSS tamponado con HEPES (Gibco 15630080) (10 mM) (Gibco 14175079) (pH 7.4). Las placas se golpearon contra una toalla de papel después de cada lavado para asegurar la máxima eliminación del tampón de bloqueo.
Se agregaron 100 pl de MicroScint-20 (PerkinElmer 6013621) a los pocillos y se mantuvieron durante la noche a temperatura ambiente antes de leer las placas en el Contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer bajo el protocolo de prueba 3H (establecido en 120 segundos de tiempo de lectura por pocillo).
Protocolo de ensayo LBAT (h/m)
Se sembraron 20,000 células (células que sobreexpresan LBAT humana o de ratón) en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 100 pl de medio MEM-alfa (Gibco 12571-063) suplementado con FBS al 10 % (Gibco 10438026) que contenía Geneticina (Gibco 10131- 027) (1 mg/ml) y se incubaron a 37 °C en CO2 al 5 % durante 24 horas. Después de la incubación, el medio se decantó de los pocillos y las células se lavaron dos veces con 300 pl de medio MEM-alfa basal (sin FBS). Después de decantar el medio MEM-alfa basal cada vez, las placas se golpearon contra una toalla de papel para garantizar la eliminación máxima de los medios residuales.
Para LBAT humano, la mezcla de incubación se preparó agregando diluciones de inhibidor de prueba (dilución en serie de 3 veces en DMSO (Sigma D2650), 10 puntos) en MEM-alfa (sin FBS) que contenía 0.3 pM de ácido 3H-taurocólico (ARC ART-1368) y ácido taurocólico frío 7.5 pM (Sigma T4009) (manteniendo una concentración final de DMSO al 0.2 %). Para LBAT de ratón, la mezcla de incubación se preparó agregando diluciones de inhibidor de prueba (dilución en serie de 3 veces en DMSO, 10 puntos) en MEM-alfa (sin FBS) que contenía ácido 3H-taurocólico 0.3 pM y ácido taurocólico frío 25 pM manteniendo una concentración final de DMSO al 0.2 %). A continuación, se añadieron a los pocillos (por duplicado) 50 pl de la mezcla de incubación que contenía inhibidores de la prueba y las placas se incubaron durante 20 minutos en una incubadora de CO2 a 37 °C. Después de la incubación, la reacción se detuvo manteniendo las placas en una mezcla de hielo y agua durante 2-3 minutos y luego la mezcla de incubación se aspiró por completo de los pocillos. Los pocillos se lavaron dos veces con 250 pl de ácido taurocólico 1 mM sin marcar enfriado disuelto en HBSS tamponado con HEPES (Gibco 15630080) (10 mM) (Gibco 14175079) (pH 7.4). Las placas se golpearon contra una toalla de papel después de cada lavado para asegurar la máxima eliminación del tampón de bloqueo.
Se agregaron 100 pl de MicroScint-20 (PerkinElmer 6013621) a los pocillos y se mantuvieron durante la noche a temperatura ambiente antes de leer las placas en el Contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer con el protocolo de prueba 3H (ajustado a 120 segundos de tiempo de lectura por pocillo, con la orientación normal de la placa).
Protocolo de ensayo basado en HepaRG
Un vial crioconservado de células HepaRG diferenciadas (Biopredic International HPR116080) se descongeló en HepaRG Thawing/Plating/General Purpose Medium (Biopredic International ADD670C) complementado con 200 mM Glutamax (Gibco 35050061) siguiendo el protocolo proporcionado por Biopredic International. Se sembraron 70,000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 100 pl de medio HepaRG Thawing/Plating/General Purpose Medium suplementado con 200 mM Glutamax e incubado a 37 °C en CO2 al 5 % durante 24 horas. Después de la incubación, el medio de siembra se reemplazó por medio de mantenimiento/metabolismo HepaRG (Biopredic International ADD620C) y se incubó durante 6 días, con reposición de medio de mantenimiento/metabolismo HepaRG nuevo cada 48 horas. Después de 7 días de incubación después de la siembra, el medio de incubación se decantó de los pocillos y las células se lavaron dos veces con 250 pl de Medio Basal E de William (Gibco 12551032). Después de decantar el medio basal E de William cada vez, las placas se golpearon contra una toalla de papel para garantizar la eliminación máxima de los medios residuales.
La mezcla de incubación se preparó añadiendo diluciones del inhibidor de prueba (dilución en serie de 3 veces en DMSO (Sigma D2650)) en medio E de William (basal) que contenía ácido 3H-taurocólico 0.3 pM (ARC ART-1368) y ácido taurocólico frío 7.5 pM (Sigma T4009) (manteniendo una concentración final de DMSO al 0.2 %). A continuación, se añadieron a los pocillos (por duplicado) 50 pl de mezcla de incubación que contenía inhibidores de la prueba y las placas se incubaron durante 30 minutos en incubadora de CO2 al 5 % a 37 °C. Después de la incubación, la reacción se detuvo manteniendo las placas en una mezcla de hielo y agua durante 2-3 minutos y luego la mezcla de incubación se aspiró por completo de los pocillos. Los pocillos se lavaron dos veces con 250 pl de ácido taurocólico 1 mM sin marcar enfriado disuelto en Hb Ss tamponado con HEPES (Gibco 15630080) (10 mM) (Gibco 14175079) (pH 7.4). Las placas se golpearon contra una toalla de papel después de cada lavado para asegurar la máxima eliminación del tampón de bloqueo.
Se agregaron 100 |jl de MicroScint-20 (PerkinElmer 6013621) a los pocilios y se mantuvieron durante la noche a temperatura ambiente antes de leer las placas en el Contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer con el protocolo de prueba 3H (ajustado a 120 segundos de tiempo de lectura por pocillo, con la orientación normal de la placa).
Preparación de diluciones de compuestos de prueba
Todos los compuestos de prueba se proporcionaron en forma de polvo a temperatura ambiente. Se prepararon reservas de DMSO 10 mM de los compuestos de prueba, se dividieron en alícuotas y se almacenaron a -20 °C. A partir de la reserva de DMSO 10 mM de los compuestos, se preparó una dilución en serie de 3 veces en DMSO para obtener un total de 10 diluciones de los compuestos de prueba. Se añadieron 0.5 j l de esta dilución en DMSO a 250 j l de medio basal libre de FBS que contenía ácido 3H-taurocólico y ácido taurocólico frío para preparar la mezcla de incubación.
Estudios de biodisponibilidad
Se utilizaron ratones C57BL/6 de 8-9 semanas de edad. Para cada compuesto de prueba, se usaron dos grupos de 3 animales cada uno. A un grupo se le administró una dosis intravenosa única de 1 mg/kg (vehículo 100 % DMSO) a través de la vena de la cola y al otro grupo se le administró una dosis oral única de 10 mg/kg a través de una aguja de sonda. El grupo al que se le administró una dosis oral estuvo en ayunas durante la noche. Se recogieron muestras de sangre después de 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas después de la administración intravenosa, y después de 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas después de la administración oral. Se tomaron muestras de sangre de la vena safena. Se usó EDTA al 0.2 % como anticoagulante. Las muestras se analizaron mediante un método bioanalítico de grado de descubrimiento desarrollado para la estimación del compuesto de prueba en plasma, utilizando un sistema LC-MS/MS.
Resultados
Los datos biológicos de los compuestos de los ejemplos se muestran en la Tabla 7 a continuación.
Tabla 7
Figure imgf000180_0001
Figure imgf000181_0001
Figure imgf000182_0001
Figure imgf000183_0001
Modelo PD: Evaluación del compuesto de prueba sobre los niveles de ácidos biliares totales en ratones macho C578L6.
Se utilizan ratones C57BL/6N Tac de 8-9 semanas de edad para estudiar el efecto de los moduladores de ácidos biliares sobre los niveles de ácidos biliares. Después de completar el período de cuarentena y aclimatación, los animales se distribuyen al azar según el peso corporal en x grupos experimentales: (i) control de vehículo, y (ii) compuesto de prueba y mg/kg por una vez al día. Los animales se tratan con el compuesto de ensayo durante 7 días. El día 5 del estudio, los animales se alojan individualmente en jaulas frescas. El día 7, se recogen las heces de cada jaula, seguido de la extracción de sangre de cada animal por vía retroorbital. Los animales se sacrifican para recoger el hígado y el íleon terminal de cada animal para su posterior análisis. El peso corporal y el consumo de alimentos se miden dos veces por semana. Los perfiles de lípidos en suero se analizan en muestras de suero del día 7. Los ácidos biliares totales en suero se miden en las muestras de suero del día 7. La excreción de bilis fecal se mide en la muestra fecal del día 7. La expresión hepática de CYP7A1 y SHP se cuantifica en las muestras de hígado del día 7. Los triglicéridos hepáticos y el colesterol total se analizan en las muestras de hígado del día 7.
Modelo de ácido biliar en orina: Evaluación de los compuestos de prueba sobre los niveles de ácidos biliares en orina en ratones macho C578L/6N.
Se utilizan ratones C57BL/6N Tac de 8-9 semanas de edad para estudiar el efecto de los moduladores de ácidos biliares sobre los niveles de ácidos biliares. Después de completar el período de cuarentena y aclimatación, los animales se distribuyen al azar según el peso corporal en x grupos experimentales: (i) control de vehículo, y (ii) compuesto de prueba y mg/kg po una vez al día. Los animales se tratan con el compuesto de ensayo durante 7 días. El día 6 del estudio, los animales se transfieren a una jaula metabólica. El día 7, se recogen las heces y la orina de cada jaula metabólica, seguido de la extracción de sangre de cada animal por vía retroorbital. Los animales se sacrifican para recoger el riñón de cada animal para su posterior análisis. El peso corporal se mide dos veces por semana. Los ácidos biliares totales en suero se miden en muestras de suero del día 7. La excreción fecal de ácidos biliares se mide en la muestra fecal del día 7. La excreción urinaria de ácidos biliares se mide en la muestra del día 7. Se cuantifica la expresión renal de ASBT, OSTa, OSTAb y MRP2 en las muestras del día 7.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula (I)
Figure imgf000184_0001
en la que
M se selecciona de -CH2- y -NR7-;
R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C1-4;
R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-4 , haloalquilo C1-4 , alcoxi C1-4 , ciano, nitro, amino, ^-(alquilo C1-4)amino, N,N-di(alquilo C1-4)amino, N-(aril-alquilo C1-4)amino, alquilcarbonilamino C1-6, cicloalquilcarbonilamino C3-6, ^-(alquilo C1-4)aminocarbonilo, N,N-di(alquilo C1-4)aminocarbonilo, alquiloxicarbonilamino C1-4, cicloalquiloxicarbonilamino C3-6, alquilsulfonamido C1-4 y cicloalquilsulfonamido C3-6; n es un número entero 1,2 o 3;
R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, ciano, alquilo C1-4, cicloalquilo C3-6, alcoxi C1-4, cicloalquiloxi C3-6, alquiltio C1-4, cicloalquiltio C3-6, amino, ^-(alquilo C1-4)amino y N,N-di(alquilo C1-4)amino;
Uno de R5 y R6 es carboxi, y el otro de R5 y R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, fluoro, alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4; y
R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-4;
R89se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-4 ; o una sal farmacéuticamente aceptable o una forma hidratada o solvatada de la misma.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son cada uno n-butilo.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son cada etilo.
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 es n-butilo y R2 es etilo.
5. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, bromo, hidroxi, metoxi, amino, fe/f-butoxicarbonilamino, metilsulfonamido y ciclopropilsulfonamido.
6. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, bromo, etilo, ciclopropilo, metoxi, metiltio y dimetilamino.
7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 , en el que R5 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y flúor.
8. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que R6 es carboxi.
9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en:
ácido (EJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido f£j-3-((5-(4-aminofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (EJ-3-((5-(4-((fe/f-butoxicarbonil)amino)fenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8 -il)oxi)acrílico;
ácido f£j-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (R)-f£j-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (S)-(E)-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ácido (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-c¡doprop¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(d¡met¡lam¡no)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopropanosulfonam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(met¡lsulfonam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-metox¡-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-metox¡-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((5-(4-bromofeml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-metox¡feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (£)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-h¡drox¡feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((5-(4-(benc¡lam¡no)fen¡l)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((7-bromo-5-(4-((tert-butox¡carbon¡l)am¡no)fen¡l)-3-but¡l-3-et¡l-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-((metox¡carboml)am¡no)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(d¡met¡lam¡no)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((5-(4-((tert-butox¡carboml)am¡no)feml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((5-(4-((butox¡carboml)am¡no)feml)-3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do ('E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(3,3-d¡met¡lbutanam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-¡sobut¡ram¡dofeml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-(tr¡fluoromet¡l)feml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (£)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-¡sobut¡ram¡dofeml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ácido ('E)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-il)oxi)acrílico;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopentanocarboxam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopropanocarboxam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-(ddopentanocarboxam¡do)feml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3-but¡l-5-(4-(ddopentanocarboxam¡do)feml)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((3,3-d¡but¡l-5-(4-but¡ram¡dofeml)-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (S)-(ZJ-3-(((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (R)-('E)-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(£)-3-((3-but¡l-7-doro-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-(4-p¡valam¡dofeml)-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((3,3-d¡but¡l-7-doro-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (E)-3-((3,3-d¡et¡l-7-¡odo-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (E)-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((7-bromo-3,3-d¡et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ác¡do (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-¡odo-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-¡odo-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (S)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (R)-(ZJ-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co; ác¡do (E)-3-((3-but¡l-5-(4-(tert-but¡lcarbamo¡l)feml)-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡ox¡do-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ác¡do (ZJ-3-((7-bromo-3-but¡l-3-et¡M,1-d¡ox¡do-5-feml-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,5-benzot¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacríl¡co; ácido (R)-(ZJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (S)-(ZJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ácido (ZJ-3-((5-(4-(bencilamino)feml)-3,3-dietil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacríl¡co;
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-5-(4-(tert-butilcarbamoil)feml)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-5-(4-(isopropilcarbamoil)feml)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-¡l)ox¡)acríl¡co;
ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-(4-propionamidofeml)-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-(etiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido ('E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-metilacrílico;
ácido (E)-3-((7-bromo-3,3-dibutiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (R)-('£)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(tert-butilcarbamoil)feml)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (E)-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-ciano-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (E)-3-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)but-2-enoico; ácido (Z)-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (S)-Z)-3-((3-but¡l-3-et¡l-7-(met¡lt¡o)-1,1-d¡oxido-5-fen¡l-2,3,4,5-tetrah¡dro-1,2,5-benzot¡ad¡azep¡n-8-¡l)ox¡)-2-fluoroacrílico;
ácido (R)-^Zj-3-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (E)-3-((7-bromo-3-butil-3-etiM,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (R)-(E)-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidrol,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-feml-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (R)-('E)-3-((3-butil-3-etil-7-(metilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (ZJ-3-((5-(4-bromofenil)-3,3-dibutil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-hidroxifenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-7-(dimetilamino)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (S)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (R)-(ZJ-3-((3-butil-3-etil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico;
ácido (R)-('E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (S)-(E)-3-((3-butil-3-etil-7-fluoro-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)acrílico; ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(4-(dimetilcarbamoil)fenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZE3-((3,3-dibutil-2-metil-7-(metiltio)-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((7-bromo-3-butil-3-etil-2-metil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3,3-dibutil-5-(3,4-difluorofenil)-7-(metiltio)-1,1-dioxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
ácido (S)-(ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico; y
ácido (R)-(ZJ-3-((3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-1,1-dioxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,5-benzotiazepin-8-il)oxi)-2-fluoroacrílico;
o una sal farmacéuticamente aceptable o una forma hidratada o solvatada del mismo.
10. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
11. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para uso como un medicamento.
12. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad cardiovascular, tal como hipercolesterolemia; diabetes mellitus tipo 1 y tipo 2; complicaciones de la diabetes seleccionadas del grupo que consiste en cataratas, enfermedades micro y macrovasculares, retinopatía, neuropatía, nefropatía y retraso en la cicatrización de heridas, isquemia tisular, pie diabético, arteriesclerosis, infarto de miocardio, síndrome coronario agudo, angina de pecho inestable, angina de pecho estable, apoplejía, enfermedad oclusiva arterial periférica, cardiomiopatía, insuficiencia cardíaca, trastornos del ritmo cardíaco y reestenosis vascular; enfermedades relacionadas con la diabetes seleccionadas del grupo que consiste en resistencia a la insulina (alteración de la homeostasis de la glucosa), hiperglucemia, hiperinsulinemia, niveles sanguíneos elevados de ácidos grasos o glicerol, obesidad, dislipidemia, hiperlipidemia incluyendo hipertrigliceridemia, síndrome metabólico (síndrome X), aterosclerosis e hipertensión; y para aumentar los niveles de lipoproteínas de alta densidad.
13. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno gastrointestinal, tal como estreñimiento (incluyendo estreñimiento crónico, estreñimiento funcional, estreñimiento idiopático crónico (CIC), estreñimiento intermitente/esporádico, estreñimiento secundario a diabetes mellitus, estreñimiento secundario a accidente cerebrovascular, estreñimiento secundario a enfermedad renal crónica, estreñimiento secundario a esclerosis múltiple, estreñimiento secundario a enfermedad de Parkinson, estreñimiento secundario a esclerosis sistémica, estreñimiento inducido por fármacos, síndrome del intestino irritable con estreñimiento (IBS-C), síndrome del intestino irritable mixto (IBS-M), estreñimiento funcional pediátrico y estreñimiento inducido por opioides); enfermedad de Crohn; malabsorción primaria de ácidos biliares; síndrome del intestino irritable (IBS); enfermedad inflamatoria intestinal (IBD); inflamación ileal; y enfermedad por reflujo y complicaciones de la misma, tales como esófago de Barrett, esofagitis por reflujo biliar y gastritis por reflujo biliar.
14. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno hepático, tal como un trastorno metabólico hepático hereditario; errores congénitos de la síntesis de ácidos biliares; anomalías congénitas de las vías biliares; atresia biliar; atresia biliar posterior a Kasai; atresia biliar post-trasplante hepático; hepatitis neonatal; colestasis neonatal; formas hereditarias de colestasis; xantomatosis cerebrotendinosa; un defecto secundario de la síntesis de BA; síndrome de Zellweger; enfermedad hepática asociada a fibrosis quística; deficiencia de alfa1-antitripsina; síndrome de Alagilles (ALGS); síndrome de Byler; un defecto primario de la síntesis de ácidos biliares (BA); colestasis intrahepática familiar progresiva (PFIC) que incluye PFIC-1, PFIC-2, PFIC-3 y PFIC no especificada, PFIC posterior a la derivación biliar y PFIC posterior al trasplante de hígado; colestasis intrahepática recurrente benigna (BRIC) que incluye BRIC1, BRIC2 y BRIC no especificado, BRIC posterior a desviación biliar y BRIC posterior a trasplante de hígado; hepatitis autoinmune; cirrosis biliar primaria (PBC); fibrosis hepática; enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD); esteatohepatitis no alcohólica (NASH); hipertensión portal; colestasis; colestasis del síndrome de Down; colestasis inducida por fármacos; colestasis intrahepática del embarazo (ictericia durante el embarazo); colestasis intrahepática; colestasis extrahepática; colestasis asociada a nutrición parenteral (PNAC); colestasis asociada a niveles bajos de fosfolípidos; síndrome de colestasis de linfedema 1 (LCS1); colangitis esclerosante primaria (PSC); colangitis asociada a inmunoglobulina G4; colangitis biliar primaria; colelitiasis (cálculos biliares); litiasis biliar; coledocolitiasis; pancreatitis por cálculos biliares; enfermedad de Caroli; malignidad de los conductos biliares; malignidad que causa obstrucción del árbol biliar; estenosis biliares; colangiopatía por SIDA; colangiopatía isquémica; prurito debido a colestasis o ictericia; pancreatitis; enfermedad hepática autoinmune crónica que conduce a colestasis progresiva; esteatosis hepática; hepatitis alcohólica; hígado graso agudo; hígado graso del embarazo; hepatitis inducida por fármacos; trastornos por sobrecarga de hierro; defecto congénito de la síntesis de ácidos biliares tipo 1 (defecto BAS tipo 1); lesión hepática inducida por fármacos (DILI); fibrosis hepática; fibrosis hepática congénita; cirrosis hepática; histiocitosis de células de Langerhans (HCL); colangitis esclerosante ictiosis neonatal (NISCH); protoporfiria eritropoyética (EPP); ductopenia idiopática de la edad adulta (IAD); hepatitis neonatal idiopática (INH); escasez no sindrómica de conductos biliares interlobulillares (NS PILBD); cirrosis infantil de indios norteamericanos (NAIC); sarcoidosis hepática; amilosis; enterocolitis necrotizante; toxicidades causadas por ácidos biliares en sueros, que incluyen alteraciones del ritmo cardíaco (por ejemplo, fibrilación auricular) en el marco de un perfil anormal de ácidos biliares en sueros, cardiomiopatía asociada con cirrosis hepática ("colecardia") y atrofia muscular esquelética asociada con enfermedad hepática colestática; hepatitis viral (incluyendo hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D y hepatitis E); carcinoma hepatocelular (hepatoma); colangiocarcinoma; cánceres gastrointestinales relacionados con ácidos biliares; y colestasis provocada por tumores y neoplasias del hígado, de las vías biliares y del páncreas.
15. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento o prevención de abetalipoproteinemia, hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL), enfermedad de retención de quilomicrones (CRD) y sitosterolemia; hipervitaminosis y osteopetrosis; hipertensión; hiperfiltración glomerular; y prurito de insuficiencia renal.
ES19728965T 2018-06-05 2019-06-05 Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares Active ES2942443T3 (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IN201811021016 2018-06-05
SE1850915 2018-07-18
IN201911000892 2019-01-08
PCT/EP2019/064602 WO2019234077A1 (en) 2018-06-05 2019-06-05 Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2942443T3 true ES2942443T3 (es) 2023-06-01

Family

ID=66776342

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES19728965T Active ES2942443T3 (es) 2018-06-05 2019-06-05 Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares

Country Status (8)

Country Link
US (1) US11306064B2 (es)
EP (1) EP3802504B1 (es)
JP (1) JP7391048B2 (es)
CN (1) CN112449637B (es)
CA (1) CA3100113A1 (es)
ES (1) ES2942443T3 (es)
TW (1) TW202015699A (es)
WO (1) WO2019234077A1 (es)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK3400944T3 (da) 2010-11-08 2020-10-12 Albireo Ab Ibat-inhibitorer til behandling af leversygdomme
KR102560954B1 (ko) 2014-06-25 2023-07-31 이에이 파마 가부시키가이샤 고형 제제 및 그의 착색 방지 또는 착색 감소 방법
CA3100113A1 (en) 2018-06-05 2019-12-12 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
US11801226B2 (en) 2018-06-20 2023-10-31 Albireo Ab Pharmaceutical formulation of odevixibat
EP3810581A1 (en) 2018-06-20 2021-04-28 Albireo AB Crystal modifications of odevixibat
US11007142B2 (en) 2018-08-09 2021-05-18 Albireo Ab Oral cholestyramine formulation and use thereof
US10975045B2 (en) 2019-02-06 2021-04-13 Aibireo AB Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
US10941127B2 (en) 2019-02-06 2021-03-09 Albireo Ab Benzothiadiazepine compounds and their use as bile acid modulators
JP7504110B2 (ja) 2019-02-06 2024-06-21 アルビレオ・アクチボラグ ベンゾチアゼピン化合物及び胆汁酸モジュレータとしてのそれらの使用
WO2021110886A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
ES2972045T3 (es) 2019-12-04 2024-06-10 Albireo Ab Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores del ácido biliar
AR120679A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como moduladores ácido biliar
CN114761018A (zh) 2019-12-04 2022-07-15 阿尔比里奥公司 苯并硫杂二氮杂环庚三烯化合物及其作为胆汁酸调节剂的用途
ES2973549T3 (es) 2019-12-04 2024-06-20 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como moduladores de los ácidos biliares
AR120682A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzotiadiazepina y su uso como moduladores del ácido biliar
AR120683A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como ácido biliar
JP2023504643A (ja) 2019-12-04 2023-02-06 アルビレオ・アクチボラグ ベンゾチア（ジ）アゼピン化合物及び胆汁酸モジュレータとしてのそれらの使用
WO2021110887A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Albireo Ab Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
US11014898B1 (en) 2020-12-04 2021-05-25 Albireo Ab Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
WO2021226258A1 (en) * 2020-05-06 2021-11-11 Corcept Therapeutics Incorporated Formulations of pyrimidine cyclohexyl glucocorticoid receptor modulators
CA3186857A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 Per-Goran Gillberg Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
WO2022029101A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
KR20230106651A (ko) 2020-11-12 2023-07-13 알비레오 에이비 진행성 가족성 간내 담즙정체증(pfic)을 치료하기 위한 오데빅시바트
BR112023010799A2 (pt) 2020-12-04 2023-10-03 Albireo Ab Compostos de benzotia(di)azepina e seus usos como moduladores de ácidos biliares
WO2023164181A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Assembly Biosciences, Inc. Benzothia(dia)zepine compounds for treatment of hbv and hdv
WO2023164183A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Assembly Biosciences, Inc. Benzothia(dia)zepine compounds for treatment of hbv and hdv
WO2023164179A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Assembly Biosciences, Inc. Benzothia(dia)zepine compounds for treatment of hbv and hdv
WO2023164186A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Assembly Biosciences, Inc. Benzothia(dia)zepine compounds for treatment of hbv and hdv
WO2023203248A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Albireo Ab Subcutaneous administration of an asbt inhibitor
WO2023237728A1 (en) 2022-06-09 2023-12-14 Albireo Ab Treating hepatitis
WO2024008766A1 (en) 2022-07-05 2024-01-11 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
US20240207286A1 (en) 2022-12-09 2024-06-27 Albireo Ab Asbt inhibitors in the treatment of renal diseases

Family Cites Families (162)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3539380A (en) 1968-01-08 1970-11-10 Upjohn Co Methylcellulose and polyalkylene glycol coating of solid medicinal dosage forms
GB1573487A (en) 1977-05-23 1980-08-28 Bristol Myers Co Bile acid binding composition
EP0049500B1 (de) 1979-04-30 1984-02-22 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Tyrosinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Synthese von Peptiden
US5167965A (en) 1987-02-09 1992-12-01 The Dow Chemical Company Palatable cholestyramine granules, tablets and methods for preparation thereof
CA1313135C (en) 1987-02-09 1993-01-26 The Dow Chemical Company Cholestyramine composition and process for its preparation
US4900757A (en) 1988-12-08 1990-02-13 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Hypocholesterolemic and antiatherosclerotic uses of bix(3,5-di-tertiary-butyl-4-hydroxyphenylthio)methane
JP2800242B2 (ja) 1989-03-30 1998-09-21 大正製薬株式会社 粒剤の製造方法
DE3930168A1 (de) 1989-09-09 1991-03-14 Knoll Ag Verbesserte verabreichungsform fuer colestyramin
IL95574A (en) 1989-09-09 1994-11-11 Knoll Ag Colstiramine preparation
JP2542122B2 (ja) 1990-04-18 1996-10-09 旭化成工業株式会社 球状核、球形顆粒およびその製造方法
US5250524A (en) 1990-12-06 1993-10-05 Hoechst Aktiengesellschaft Bile acid derivatives, process for their preparation and use of these compounds as pharmaceuticals
US5430116A (en) 1991-12-20 1995-07-04 Hoechst Aktiengesellschaft Polymers and oligomers of bile acid derivatives, process for their preparation and their use as pharmaceuticals
JPH05186357A (ja) 1991-12-31 1993-07-27 Shigeo Ochi 飲食物消化分解産物吸収抑制手段
GB9203347D0 (en) 1992-02-17 1992-04-01 Wellcome Found Hypolipidaemic compounds
IT1257793B (it) 1992-05-18 1996-02-13 Composizione farmaceutica a base di acidi biliari in microgranuli a rilascio controllato
ATE160783T1 (de) 1992-06-12 1997-12-15 Hoechst Ag Gallensäurederivate, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung dieser verbindungen als arzneimittel
US5350584A (en) 1992-06-26 1994-09-27 Merck & Co., Inc. Spheronization process using charged resins
ZA941003B (en) 1993-02-15 1995-08-14 Wellcome Found Hypolipidaemic compounds
IL108634A0 (en) 1993-02-15 1994-05-30 Wellcome Found Hypolipidaemic heterocyclic compounds, their prepatation and pharmaceutical compositions containing them
TW289020B (es) 1993-05-08 1996-10-21 Hoechst Sktiengesellschaft
TW289021B (es) 1993-05-08 1996-10-21 Hoechst Ag
TW289757B (es) 1993-05-08 1996-11-01 Hoechst Ag
EP0624593A3 (de) 1993-05-08 1995-06-07 Hoechst Ag Gallensäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung dieser Verbindungen als Arzneimittel.
ZA956647B (en) 1994-08-10 1997-02-10 Wellcome Found Hypolipidaemic compounds.
CN1084741C (zh) 1994-09-13 2002-05-15 孟山都公司 具有回肠胆汁酸转运和牛磺胆酸盐摄入抑制剂作用的新的苯并硫杂䓬
US6262277B1 (en) 1994-09-13 2001-07-17 G.D. Searle And Company Intermediates and processes for the preparation of benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
US5994391A (en) 1994-09-13 1999-11-30 G.D. Searle And Company Benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
US6642268B2 (en) 1994-09-13 2003-11-04 G.D. Searle & Co. Combination therapy employing ileal bile acid transport inhibiting benzothipines and HMG Co-A reductase inhibitors
GB9423172D0 (en) 1994-11-17 1995-01-04 Wellcom Foundation The Limited Hypolipidemic benzothiazepines
US5811388A (en) 1995-06-07 1998-09-22 Cibus Pharmaceutical, Inc. Delivery of drugs to the lower GI tract
EP0893949B1 (en) 1996-01-16 2005-04-27 Ronald J. Sokol Use of antioxidant agents to treat cholestatic liver disease
DE19608592A1 (de) 1996-03-06 1997-09-11 Hoechst Ag Antikörper zur selektiven immunologischen Bestimmung von Gallensäuren in biologischen Matrices
CA2248586A1 (en) 1996-03-11 1997-09-18 G.D. Searle & Co. Novel benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
JP2000510858A (ja) 1996-05-23 2000-08-22 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ６―フルオロウルソデオキシコール酸（６―ｆｕｄｃａ）による結腸直腸癌の予防および治療
AU3940897A (en) 1996-07-24 1998-02-10 Zumtobel Staff Gmbh Adapter for a retaining means used to secure a built-in lamp in a mounting hole,or retaining means or built-in lamp provided with such an adapter
DE19633268A1 (de) 1996-08-19 1998-02-26 Hoechst Ag Polymere Gallensäure-Resorptionsinhibitoren mit gleichzeitiger Gallensäure-Adsorberwirkung
GB9704208D0 (en) 1997-02-28 1997-04-16 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
EP0971744A2 (en) 1997-03-11 2000-01-19 G.D. SEARLE & CO. COMBINATION THERAPY EMPLOYING ILEAL BILE ACID TRANSPORT INHIBITING BENZOTHIEPINES AND HMG Co-A REDUCTASE INHIBITORS
EP0864582B1 (en) 1997-03-14 2003-06-04 Aventis Pharma Deutschland GmbH Hypolipidemic 1,4-benzothiazepine-1,-dioxides
US6635280B2 (en) 1997-06-06 2003-10-21 Depomed, Inc. Extending the duration of drug release within the stomach during the fed mode
AU729529B2 (en) 1997-06-06 2001-02-01 Depomed, Inc. Gastric-retentive oral drug dosage forms for controlled release of highly soluble drugs
AU7552198A (en) 1997-06-11 1998-12-30 Sankyo Company Limited Benzylamine derivatives
AUPO763197A0 (en) 1997-06-30 1997-07-24 Sigma Pharmaceuticals Pty Ltd Health supplement
US5900233A (en) 1997-10-16 1999-05-04 Day; Charles E. Epichlorohydrin and 1-(3-aminopropyl) imidazole copolymer and its use in treating irritable bowel syndrome
US20030153541A1 (en) 1997-10-31 2003-08-14 Robert Dudley Novel anticholesterol compositions and method for using same
DE69812419T2 (de) 1997-12-19 2003-08-14 G.D. Searle & Co., Chicago Verfahren zu herstellung von enantiomerisch-anreicherte tetrahydrobenzothiepin oxyden
GB9800428D0 (en) 1998-01-10 1998-03-04 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
KR20010042618A (ko) 1998-04-24 2001-05-25 후지야마 아키라 구아니딘 유도체
DE19825804C2 (de) 1998-06-10 2000-08-24 Aventis Pharma Gmbh 1,4-Benzothiepin-1,1-dioxidderivate, Verfahren zu deren Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US6221897B1 (en) 1998-06-10 2001-04-24 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Benzothiepine 1,1-dioxide derivatives, a process for their preparation, pharmaceuticals comprising these compounds, and their use
AU5194999A (en) 1998-08-07 2000-02-28 Takeda Chemical Industries Ltd. Benzothiepin derivatives, process for the preparation of the same and uses thereof
PL348508A1 (en) 1998-12-23 2002-05-20 Searle Llc Combinations of ileal bile acid transport inhibitors and cholesteryl ester transfer protein inhibitors for cardiovascular indications
CA2356515A1 (en) 1998-12-23 2000-07-06 G.D. Searle Llc Combinations for cardiovascular indications
PL348609A1 (en) 1998-12-23 2002-06-03 Searle Llc Combinations of ileal bile acid transport inhibitors and bile acid sequestring agents for cardiovascular indications
EP1140189B1 (en) 1998-12-23 2003-05-14 G.D. Searle LLC. Combinations of ileal bile acid transport inhibitors and fibric acid derivatives for cardiovascular indications
PL348581A1 (en) 1998-12-23 2002-06-03 Searle Llc Combinations of ileal bile acid transport inhibitors and nicotinic acid derivatives for cardiovascular indications
WO2000047568A2 (en) 1999-02-12 2000-08-17 G.D. Searle Llc 1,2-benzothiazepines for the treatment of hyperlipidemic diseases
DE19916108C1 (de) 1999-04-09 2001-01-11 Aventis Pharma Gmbh Mit Zuckerresten substituierte 1,4-Benzothiazepin-1,1-dioxidderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
SE9901387D0 (sv) 1999-04-19 1999-04-19 Astra Ab New pharmaceutical foromaulations
US6287609B1 (en) 1999-06-09 2001-09-11 Wisconsin Alumni Research Foundation Unfermented gel fraction from psyllium seed husks
WO2001034570A1 (fr) 1999-11-08 2001-05-17 Sankyo Company, Limited Derives heterocycliques azotes
GB9927088D0 (en) 1999-11-17 2000-01-12 Secr Defence Use of poly(diallylamine) polymers
CA2400021A1 (en) 2000-02-18 2001-08-23 Merck & Co., Inc. Aryloxyacetic acids for diabetes and lipid disorders
SE0000772D0 (sv) 2000-03-08 2000-03-08 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US20020061888A1 (en) 2000-03-10 2002-05-23 Keller Bradley T. Combination therapy for the prophylaxis and treatment of hyperlipidemic conditions and disorders
EP1286984A2 (en) 2000-03-10 2003-03-05 Pharmacia Corporation Method for the preparation of tetrahydrobenzothiepines
US6638498B2 (en) 2000-06-30 2003-10-28 Semorex Inc. Molecularly imprinted polymers for the treatment and diagnosis of medical conditions
US20020183307A1 (en) * 2000-07-26 2002-12-05 Tremont Samuel J. Novel 1,4-benzothiazephine and 1,5-benzothiazepine compounds as inhibitors of apical sodium co-dependent bile acid transport and taurocholate uptake
FR2812886B1 (fr) 2000-08-08 2002-11-08 Assist Publ Hopitaux De Paris Depistage d'un nouveau syndrome hepatique et ses applications
SE0003766D0 (sv) 2000-10-18 2000-10-18 Astrazeneca Ab Novel formulation
EG26979A (en) 2000-12-21 2015-03-01 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2002053548A1 (en) 2000-12-27 2002-07-11 Banyu Pharmaceutical Co.,Ltd. Benzothiazepine derivatives
US6506921B1 (en) 2001-06-29 2003-01-14 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Amine compounds and curable compositions derived therefrom
US20040077625A1 (en) 2001-07-25 2004-04-22 Tremont Samuel J. Novel 1,4-benzothiazepine and 1,5-benzothiazepine compounds as inhibitors of apical sodium codependent bile acid transport abd taurocholate uptake
US20040038862A1 (en) 2001-07-30 2004-02-26 Goodwin Bryan James Identification of new therapeutic targets for modulating bile acid synthesis
GB0121337D0 (en) 2001-09-04 2001-10-24 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0121622D0 (en) 2001-09-07 2001-10-31 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0121621D0 (en) 2001-09-07 2001-10-31 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2003022286A1 (en) 2001-09-08 2003-03-20 Astrazeneca Ab Benzothiazepine and benzothiadiazepine derivatives with ileal bile acid transport (ibat) inhibitory activity for the treatment hyperlipidaemia
EP1425279A4 (en) 2001-09-12 2005-10-26 Searle Llc PROCESS FOR THE PREPARATION OF CRYSTALLINE TETRAHYDROBENZOTHIEPINES
CA2464685A1 (en) 2001-11-02 2003-05-15 G.D. Searle Llc Novel mono- and di-fluorinated benzothiepine compounds as inhibitors of apical sodium co-dependent bile acid transport (asbt) and taurocholate uptake
TW200300349A (en) 2001-11-19 2003-06-01 Sankyo Co A 4-oxoqinoline derivative
GB0314079D0 (en) 2003-06-18 2003-07-23 Astrazeneca Ab Therapeutic agents
GB0229931D0 (en) 2002-12-21 2003-01-29 Astrazeneca Ab Therapeutic agents
SE0104334D0 (sv) 2001-12-19 2001-12-19 Astrazeneca Ab Therapeutic agents
AU2002351752A1 (en) 2001-12-29 2003-07-30 Novo Nordisk A/S Combined use of a glp-1 compound and another drug for treating dyslipidemia
GB0201850D0 (en) 2002-01-26 2002-03-13 Astrazeneca Ab Therapeutic treatment
US20040014806A1 (en) 2002-03-08 2004-01-22 Pharmacia Corporation Methods and compositions for lowering levels of blood lipids
GB0209467D0 (en) 2002-04-25 2002-06-05 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0213669D0 (en) 2002-06-14 2002-07-24 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0216321D0 (en) 2002-07-13 2002-08-21 Astrazeneca Ab Therapeutic treatment
US7312208B2 (en) 2002-08-28 2007-12-25 Asahi Kasei Pharma Corporation Quaternary ammonium compounds
AU2003257578B2 (en) 2002-08-28 2009-01-22 Asahi Kasei Pharma Corporation Novel quaternary ammonium compounds
GB0304194D0 (en) 2003-02-25 2003-03-26 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7939061B2 (en) 2003-02-28 2011-05-10 Micropharma Limited Cell and enzyme compositions for modulating bile acids, cholesterol and triglycerides
GB0307918D0 (en) 2003-04-05 2003-05-14 Astrazeneca Ab Therapeutic use
AU2004281184C1 (en) 2003-10-16 2012-01-12 Techcom Group, Llc Reduced digestible carbohydrate food having reduced blood glucose response
EP1719768B1 (en) 2004-02-27 2012-04-25 Asahi Kasei Pharma Corporation Novel benzothiazepine and benzothiepine compounds
TW200533336A (en) 2004-03-02 2005-10-16 Fujisawa Pharmaceutical Co Concomitant drugs
EP1593671A1 (en) 2004-03-05 2005-11-09 Graffinity Pharmaceuticals AG DPP-IV inhibitors
US20050215882A1 (en) 2004-03-23 2005-09-29 The Regents Of The University Of Michigan Noninvasive method to determine fat content of tissues using MRI
TWI354569B (en) 2004-05-28 2011-12-21 Bristol Myers Squibb Co Coated tablet formulation and method
WO2006121861A2 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Microbia, Inc. Biphenylazetidinone cholesterol absorption inhibitors
DE102005033099A1 (de) 2005-07-15 2007-01-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neues 1,4-Benzothiazepin-1,1-Dioxidderivat mit verbesserten Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindung enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung
DE102005033100B3 (de) 2005-07-15 2007-01-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neues 1,4-Benzothiazepin-1,1-Dioxidderivat mit verbesserten Eigenschaften, diese Verbindung enthaltene Arzneimittel und Verfahren zu deren Herstellung
WO2007035665A1 (en) 2005-09-20 2007-03-29 Novartis Ag Use of a dpp-iv inhibitor to reduce hypoglycemic events
US8048413B2 (en) 2006-05-17 2011-11-01 Helene Huguet Site-specific intestinal delivery of adsorbents, alone or in combination with degrading molecules
DE502007006208D1 (de) 2006-11-14 2011-02-17 Sanofi Aventis Deutschland Neue 1,4-benzothiepin-1,1-dioxidderivate mit verbesserten eigenschaften, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102006053635B4 (de) 2006-11-14 2011-06-30 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, 65929 Neue mit Benzylresten substituierte 1,4-Benzothiepin-1,1-Dioxidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
DE102006053636B4 (de) 2006-11-14 2008-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue mit Cyclohexylresten substituierte 1,4-Benzothiepin-1,1-Dioxidderivate und deren Verwendung
DE102006053637B4 (de) 2006-11-14 2011-06-30 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, 65929 Neue mit Fluor substituierte 1,4-Benzothiepin-1,1-Dioxidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
US8410083B2 (en) 2007-01-19 2013-04-02 Intercept Pharmaceuticals, Inc. 23-substituted bile acids as TGR5 modulators and methods of use thereof
US10888521B2 (en) 2007-03-02 2021-01-12 Farnam Companies, Inc. Sustained release compositions using wax-like materials
US9295677B2 (en) 2008-02-26 2016-03-29 Qing Bile Therapeutics Inc. Polyhydroxylated bile acids for treatment of biliary disorders
KR20110059750A (ko) 2008-09-02 2011-06-03 유에스브이 리미티드 가교 폴리머
CA2744817C (en) 2008-11-26 2020-07-07 Satiogen Pharmaceuticals, Inc. Bile acid recycling inhibitors for treatment of obesity and diabetes
US20110152204A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Satiogen Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Obesity or Diabetes with Bile Acid Sequestrants
JO3131B1 (ar) 2010-04-27 2017-09-20 Glaxosmithkline Llc مركبات كيميائية
EP3593802A3 (en) 2010-05-26 2020-03-25 Satiogen Pharmaceuticals, Inc. Bile acid recycling inhibitors and satiogens for treatment of diabetes, obesity, and inflammatory gastrointestinal conditions
CN103221051A (zh) 2010-11-08 2013-07-24 阿尔比里奥公司 用于治疗代谢障碍和相关病症的ibat抑制剂
PT2637646T (pt) 2010-11-08 2016-08-17 Albireo Ab Uma combinação farmacêutica que compreende um inibidor do ibat e um sequestrador de ácido biliar
US20120114588A1 (en) 2010-11-08 2012-05-10 Albireo Ab Ibat inhibitors for treatment of metabolic disorders and related conditions
DK3400944T3 (da) 2010-11-08 2020-10-12 Albireo Ab Ibat-inhibitorer til behandling af leversygdomme
CN104023727B (zh) 2011-10-28 2017-04-05 鲁美纳医药公司 用于治疗小儿胆汁淤积性肝病的胆汁酸再循环抑制剂
SG11201401816SA (en) * 2011-10-28 2014-05-29 Lumena Pharmaceuticals Inc Bile acid recycling inhibitors for treatment of hypercholemia and cholestatic liver disease
US9273085B2 (en) 2012-05-07 2016-03-01 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrazole derivative and use thereof for medical purposes
WO2014144485A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Lumena Pharmaceuticals, Inc. Bile acid recycling inhibitors for treatment of barrett's esophagus and gastroesophageal reflux disease
WO2014144650A2 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Lumena Pharmaceuticals, Inc. Bile acid recycling inhibitors for treatment of primary sclerosing cholangitis and inflammatory bowel disease
JO3301B1 (ar) 2013-04-26 2018-09-16 Albireo Ab تعديلات بلورية على إيلوبيكسيبات
WO2015131152A1 (en) 2014-02-27 2015-09-03 Nusirt Sciences Inc. Compositions and methods for the reduction or prevention of hepatic steatosis
KR102560954B1 (ko) 2014-06-25 2023-07-31 이에이 파마 가부시키가이샤 고형 제제 및 그의 착색 방지 또는 착색 감소 방법
CA2952405A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Ea Pharma Co., Ltd. Solid formulation and method for stabilizing the same
KR101674806B1 (ko) 2014-10-20 2016-11-10 씨제이헬스케어 주식회사 신규한 아미노알킬벤조티아제핀 유도체 및 이의 용도
EP3012252A1 (en) 2014-10-24 2016-04-27 Ferring BV Crystal modifications of elobixibat
US9684018B2 (en) 2014-11-19 2017-06-20 Texas Instruments Incorporated Current sense circuit that operates over a wide range of currents
KR20160061492A (ko) 2014-11-21 2016-06-01 삼성디스플레이 주식회사 휴대용 먼지 센서 및 이를 이용한 휴대전화
CA3011595C (en) 2016-02-09 2024-01-02 Albireo Ab Cholestyramine pellets and methods for preparation thereof
EP3413877B1 (en) 2016-02-09 2021-04-07 Albireo AB Oral cholestyramine formulation and use thereof
RU2750937C2 (ru) 2016-02-09 2021-07-06 Альбирео Аб Пероральный состав холестирамина и его применение
US11350844B2 (en) 2016-11-23 2022-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research System and method for generating nonalcoholic fatty liver disease activity score (NAS) using magnetic resonance elastography
EP3664781A1 (en) 2017-08-09 2020-06-17 Albireo AB Cholestyramine granules, oral cholestyramine formulations and use thereof
WO2019032027A1 (en) 2017-08-09 2019-02-14 Albireo Ab CHOLESTYRAMINE TABLETS, ORAL FORMULATIONS OF CHOLESTYRAMINE AND THEIR USE
CN111836804A (zh) 2018-03-09 2020-10-27 埃洛比克斯股份公司 用于制备依洛昔巴特的方法
US10428109B1 (en) 2018-03-09 2019-10-01 Elobix Ab Process for the preparation of 1,5-benzothiazepine compounds
US10793534B2 (en) 2018-06-05 2020-10-06 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
CA3100113A1 (en) 2018-06-05 2019-12-12 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
US11801226B2 (en) 2018-06-20 2023-10-31 Albireo Ab Pharmaceutical formulation of odevixibat
EP3810581A1 (en) 2018-06-20 2021-04-28 Albireo AB Crystal modifications of odevixibat
US10941127B2 (en) 2019-02-06 2021-03-09 Albireo Ab Benzothiadiazepine compounds and their use as bile acid modulators
DK3921028T3 (da) 2019-02-06 2023-01-23 Albireo Ab Benzothiadiazepinforbindelser og anvendelse deraf som galdesyremodulatorer
JP7504110B2 (ja) 2019-02-06 2024-06-21 アルビレオ・アクチボラグ ベンゾチアゼピン化合物及び胆汁酸モジュレータとしてのそれらの使用
US10975045B2 (en) 2019-02-06 2021-04-13 Aibireo AB Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
WO2021110886A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Albireo Ab Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
ES2973549T3 (es) 2019-12-04 2024-06-20 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como moduladores de los ácidos biliares
JP2023504643A (ja) 2019-12-04 2023-02-06 アルビレオ・アクチボラグ ベンゾチア（ジ）アゼピン化合物及び胆汁酸モジュレータとしてのそれらの使用
CN114761018A (zh) 2019-12-04 2022-07-15 阿尔比里奥公司 苯并硫杂二氮杂环庚三烯化合物及其作为胆汁酸调节剂的用途
AR120682A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzotiadiazepina y su uso como moduladores del ácido biliar
WO2021110887A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Albireo Ab Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
ES2972045T3 (es) 2019-12-04 2024-06-10 Albireo Ab Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores del ácido biliar
AR120683A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como ácido biliar
US11014898B1 (en) 2020-12-04 2021-05-25 Albireo Ab Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
AR120679A1 (es) 2019-12-04 2022-03-09 Albireo Ab Compuestos de benzoti(di)azepina y su uso como moduladores ácido biliar

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019234077A1 (en) 2019-12-12
EP3802504A1 (en) 2021-04-14
CN112449637B (zh) 2024-03-19
US20210017141A1 (en) 2021-01-21
CA3100113A1 (en) 2019-12-12
TW202015699A (zh) 2020-05-01
US11306064B2 (en) 2022-04-19
JP2021525780A (ja) 2021-09-27
CN112449637A (zh) 2021-03-05
EP3802504B1 (en) 2023-01-18
JP7391048B2 (ja) 2023-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2942443T3 (es) Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores de ácidos biliares
ES2937153T3 (es) Compuestos de benzotiadiazepinas y su uso como moduladores de ácidos biliares
US10793534B2 (en) Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
ES2973355T3 (es) Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores del ácido biliar
US11603359B2 (en) Benzothiadiazepine compounds and their use as bile acid modulators
US11773071B2 (en) Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
ES2955799T3 (es) Compuestos de benzotiazepina y su uso como moduladores de los ácidos biliares
ES2972045T3 (es) Compuestos de benzotia(di)azepina y su uso como moduladores del ácido biliar
WO2021110886A1 (en) Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
WO2021110884A1 (en) Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
WO2021110887A1 (en) Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators
JP2024500309A (ja) ベンゾチア（ジ）アゼピン化合物および胆汁酸モジュレータとしてのその使用
WO2024008766A1 (en) Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
RU2785867C9 (ru) Бензотиа(ди)азепины и их применение в качестве модуляторов желчных кислот
RU2785867C2 (ru) Бензотиа(ди)азепины и их применение в качестве модуляторов желчных кислот
RU2814570C2 (ru) Соединения бензотиадиазепина и их применение в качестве модуляторов желчных кислот
RU2817535C2 (ru) Соединения бензотиазепина и их применение в качестве модуляторов желчных кислот
AU2023304672A1 (en) Benzothia(di)azepine compounds and their use as bile acid modulators
EP4069362A1 (en) Benzothiazepine compounds and their use as bile acid modulators