ES2533826T3

ES2533826T3 - Inhibidores de beta-lactamasa

Info

Publication number: ES2533826T3
Application number: ES13180969.1T
Authority: ES
Inventors: Timothy A. Blizzard; Helen Chen; Candido Gude; Jeffrey D. Hermes; Jason E. Imbriglio; Seongkon Kim; Jane Y. Wu; Sookhee Ha; Christopher J. Mortko; Ian Mangion; Nelo Rivera; Rebecca T. Ruck; Michael Shevlin
Original assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2008-01-18
Filing date: 2009-01-15
Publication date: 2015-04-15
Anticipated expiration: 2029-01-15
Also published as: MA32025B1; ECSP10010568A; CN101918407B; HK1143809A1; LTPA2020517I1; RU2445314C1; PT2231667E; CA2712783C; HN2010001395A; RS53862B1; NO2020022I1; AU2009206119B2; JP5597164B2; JP2011510012A; NO2020024I1; CN102827067A; KR20160099117A; PT2666774E; LTC2231667I2; HUS000513I2

Abstract

Una combinación de un compuesto de fórmula I:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que X es: (1) CH2, (2) CH2CH2, o (3) CH2CH2CH2; R1 es C(O)N(R3)R4, R2 es SO3 M, OSO3 M, SO2 NH2, PO3 M, OPO3 M, CH2CO2 M, CF2CO2 M o CF3; M es H o un catión farmacéuticamente aceptable; R3 es HetA; R4 es H o alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con N(RA)RB; o, como alternativa, R3 y R4 junto con el átomo de N al que están unidos ambos forman un anillo monocíclico saturado de 4 a 9 miembros que opcionalmente contiene 1 heteroátomo además del nitrógeno unido a R3 y R4 seleccionado de N, O y S, en donde el S está opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2; estando el anillo monocíclico opcionalmente condensado con, tiene un puente de, o está unido en forma espiro con un anillo heterocíclico saturado de 4 a 7 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, de los que S está oxidado opcionalmente a S(O) o S(O)2, formando un sistema anular bicíclico, estando el sistema anular monocíclico o bicíclico formado de este modo sustituido opcionalmente con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente: (1) alquilo C1-6, (2) fluoroalquilo C1-6, (3) (CH2)1-2G, en donde G es OH, O-alquilo C1-6, O-fluoroalquilo C1-6, N(RA)RB, C(O)N(RA)RB, C(O)RA, CO2RA o SO2RA, (4) O-alquilo C1-6, (5) O-fluoroalquilo C1-6, (6) OH, (7) oxo, (8) halógeno, (9) N(RA)RB, (10) C(O)N(RA)RB, (11) C(O)RA, (12) C(O)-fluoroalquilo C1-6, (13) C(O)ORA, o (14) S(O)2RA; HetA es un anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado de 4 a 9 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, estando cualquier anillo con S opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2 y estando 1 o 2 carbonos en el anillo opcionalmente oxidados a C(O); estando el anillo opcionalmente condensado con un cicloalquilo C3-7; y estando el anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado opcionalmente condensado opcionalmente sustituido con un total de 1 a 4 sustituyentes seleccionados de cero a 2 (CH2)nN(RA)RB y de cero a 2 (CH2)nRC; cada n es, de forma independiente, un número entero que es 0, 1, 2 o 3; cada RA es, de forma independiente, H o alquilo C1-8; cada RB es, de forma independiente, H o alquilo C1-8; cada RC es, de forma independiente alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, OC(O)-alquilo C1-8, C(>=NH)NH2, NHC(>= NH)NH2, halógeno, CN, C(O)RA, C(O)ORA, C(O)N(RA)RB, SO2RA, SO2 N(RA)RB, piridilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo; y un antibiótico carbapenem.

Description

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DESCRIPCIÓN

Inhibidores de beta-lactamasa

5 Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos inhibidores de beta-lactamasas y a su uso contra la resistencia bacteriana a los antibióticos. Más particularmente, la invención se refiere a composiciones y a procedimientos para superar la resistencia bacteriana a los antibióticos.

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Antecedentes de la invención

La resistencia bacteriana a los antibióticos se ha convertido en una de las amenazas más importantes para los modernos cuidados sanitarios. Cohen, Science 1992, 257: 1051-1055 divulga que las infecciones causadas por 15 bacterias resistentes tienen como resultado frecuentemente estancias hospitalarias más prolongadas, una mayor mortalidad y un aumento del coste del tratamiento. Neu, Science 1992, 257: 1064-1073 divulga que la necesidad de nuevos antibióticos continuará aumentando debido a que las bacterias tienen una capacidad notable para desarrollar resistencia a nuevos agentes y los convierten rápidamente en ineficaces. Anderson, Nature America 1999, 5: 147149 se refiere a la extensión de la resistencia a antibióticos como pandemia y afirma que una solución a la creciente

20 amenaza para la salud pública requerirá un abordaje interdisciplinat.

La presente crisis ha impulsado diversos esfuerzos para descubrir los mecanismos responsables de la resistencia bacteriana. Coulton et al. Progress in Medicinal Chemistry 31: 297-349 (1994) enseña que el uso extendido de penicilinas y cefalosporinas ha dado como resultado la aparición de las β-lactamasas, una familia de enzimas 25 bacterianas que catalizan la hidrólisis del anillo de β-lactama común a los numerosos antibióticos usados en la actualidad. Más recientemente, Dudley, Pharmacotherapy 15: 9S-14S ha divulgado que la resistencia mediada por β-lactamasas es un aspecto crucial en la parte central del desarrollo de la resistencia bacteriana a los antibióticos En la actualidad, el ácido clavulánico, que es un metabolito de Streptomyces clavultigerus, y dos inhibidores semisintéticos, sulbactam y tazobactam, son inhibidores semisintéticos o naturales de β-lactamasa. Los documentos

30 US5698577, US5510343, US6472406 y Hubschwerlen et al., J. Med. Chem. 1998, 41: 3961 y Livermore et al., J. Med. Chem. 1997, 40: 335-343, divulgan ciertos inhibidores sintéticos de β-lactamasa.

Otras referencias de interés son:

35 El documento US 2003/0199541 A1 divulga determinados compuestos azabicíclicos, incluyendo ciertas 7oxo-6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamidas y su uso como agentes antibacterianos. El documento US 2004/0157826 A1 divulga determinados compuestos heterobicíclicos, incluyendo ciertos derivados de diazepincarboxamida y diazepincarboxilato, y su uso como antibacterianos e inhibidores de βlactamasa.

40 El documento WO2008/039420 A2 divulga ciertas 7-oxo-2,6-diazabiciclo[3.2.0]heptano-6-sulfooxi-2-carboxamidas y su uso como inhibidores de beta-lactamasa.

Poole, Cell. Mol. Life Sci. 2004, 61: 2200-2223, proporciona una recapitulación de la resistencia de patógenos 45 bacterianos a antibióticos β-lactámicos y abordajes para superar la resistencia.

Los inhibidores de β-lactamasa disponibles actualmente son insuficientes para contrarrestar la diversidad de βlactamasas en constante crecimiento. Por tanto, existe la necesidad de nuevos inhibidores de β-lactamasas.

50 Sumario de la invención

La presente invención está dirigida a ciertos compuestos dé carboxamida y carboxilato diazabicíclicos que son inhibidores de beta-lactamasas. Los compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables son útiles en combinación con antibióticos beta-lactámicos para el tratamiento de infecciones bacterias, en particular infecciones

55 bacterianas resistentes a antibióticos. Más particularmente, la presente invención incluye compuestos de Fórmula I:

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y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la que

5 X es:

(1): CH2,

(2): CH2CH2,

(3): CH2CH2CH2;

10 R1 es C(O)N(R3)R4;

R2 es SO3 M, OSO3 M, SO2 NH2, PO3 M, OPO3 M, CH2CO2 M, CF2CO2 M, o CF3;

15 M es H o un catión farmacéuticamente aceptable;

R3 es HetA;

R4 es H o alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con N(RA)RB;

20 o, como alternativa, cuando R1 es C(O)N(R3)R4, R3 y R4 junto con el átomo de N al que están unidos ambos forman un anillo monocíclico saturado de 4 a 9 miembros que opcionalmente contiene 1 heteroátomo además del nitrógeno unido a R3 y R4 seleccionado de N, O y S, en el que el S está opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2; estando el anillo monocíclico opcionalmente condensado con, tiene un puente de, o está unido en forma espiro

25 con un anillo heterocíclico saturado de 4 a 7 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, de los que S está oxidado opcionalmente a S(O) o S(O)2, formando un sistema anular bicíclico, estando el sistema anular monocíclico o bicíclico formado de este modo sustituido opcionalmente con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente: (1) alquilo C1-6, (2) fluoroalquilo C1-6,

(3) (CH2)1-2G en el que G es OH, alquilo OC1-6, O-C1-6, fluoroalquilo, N (RA)RB, C(O)N(RA)RB, C(O)RA, CO2RA, o 30 SO2RA, (4) alquilo O-C1-6, (5) fluoroalquilo O-C1-6 (6) OH, (7) oxo, (8) halógeno, (9) N(RA)RB, (10) C(O)N(RA)RB,

(11) C(O)RA, (12) C(O)-C1-6 fluoroalquilo (13)C(O)ORA, o (14) S(O)2RA;

R5 es alquilo C1-8 sustituido por 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es independientemente N(RA)C(O)-AryA;

35 HetA es un anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado de 4 a 9 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, estando cualquier anillo con S opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2 y estando 1 o 2 carbonos en el anillo opcionalmente oxidados a C(O); estando el anillo opcionalmente condensado con un cicloalquilo C3-7; y estando el anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado

40 opcionalmente condensado opcionalmente sustituido con un total de 1 a 4 sustituyentes seleccionados de cero a 2 (CH2)nRC;

cada n es, de forma independiente, un número entero que es 0, 1, 2 o 3;

45 cada RA es, de forma independiente, H o alquilo C1-8;

cada RB es, de forma independiente, H o alquilo C1-8;

cada RC es, de forma independiente alquilo C1-6, OH, alquilo O-C1-8, OC(O)-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH50 C(=NH)NH2, halógeno, CN, C (O)RA, C(O)ORA, C(O)N(RA)RB, SO2RA, SO2 N(RA)RB, piridilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo; y un antibiótico carbopemem.

Los compuestos de fórmula I inhiben las β-lactamasas y son sinérgicos con los efectos antibacterianos de los antibóticos β-lactámicos (por ejemplo, imipenem, ceftazidima y piperacilina) contra microorganismos que 55 normalmente son resistentes a los antibióticos β-lactámicos como resultado de la presencia de β-lactamasas. Los

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compuestos de la presente invención son eficaces contra las β-lactamasas de clase A y de clase C, y su combinación con un antibiótico β-lactámico, tal como imipenem, ceftazidima o piperacilina, pueden proporcionar un tratamiento eficaz de las infecciones bacterianas causadas por microorganismos productores de β-lactamasa de clase A y de clase C. De acuerdo con lo anterior, la presente invención incluye combinaciones de un compuesto de fórmula I con un antibiótico β-lactámico adecuado para usar contra bacterias productoras de β-lactamasa de clase C, tales como Pseudomonas spp. y contra bacterias productoras de β-lactamasa de clase A tales como Klebsiella spp.

Realizaciones, subrealizaciones, aspectos y características de la presente invención se describen adicionalmente o serán evidentes a partir de la siguiente descripción, ejemplos y reivindicaciones adjuntas.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 es el patrón de difracción de rayos C del monohidrato cristalino descrito en el Ejemplo 1D.

La Figura 2 es la curva DSC para el monohidrato cristalino descrito en el Ejemplo 1D.

Descripción detallada de la invención

Como se ha indicado en lo que antecede, la presente invención incluye compuestos de fórmula I, siendo los compuestos inhibidores de beta-lactamasas adecuados para usar en combinación con antibióticos beta-lactámicos para el tratamiento de infecciones bacterianas.

La expresión "inhibidor de β-lactamasas" se refiere a un compuesto que es capaz de inhibir la actividad βlactamasa. Inhibir la actividad β-lactamasa significa inhibir la actividad de una β-lactamasa de clase A, C o D. Para aplicaciones antimicrobianas, la inhibición a una concentración inhibidora del 50 % se consigue, preferentemente, a

o por debajo de 100 microgramos/ml o a o por debajo de 50 microgramos/ml o a o por debajo de 25 microgramos/ml. Los expertos en la técnica entienden las expresiones β-lactamasas de "clase A", "clase C" y "clase D" y se describen en Waley, The Chemistry of β-lactamase, Page Ed., Chapman & Hall, London, (1992) 198-228.

La expresión "β-lactamasa" indica una proteína capaz de inactivar un antibiótico β-lactámico. La β-lactamasa puede ser una enzima que cataliza la hidrólisis del anillo antibiótico β-lactámico de un antibiótico β-lactámico. De particular interés en el presente documento son las β-lactamasas microbianas. La β-lactamasa puede ser, por ejemplo, una serina β-lactamasa. Las β-lactamasas de interés incluyen las divulgadas en, por ejemplo, Waley, The Chemistry of β-lactamase, Page Ed., Chapman & Hall, London, (1992) 198-228. β-lactamasas de particular interés en el presente documento incluyen una β-lactamasa de clase C de Pseudomonas aeruginosa o de Enterobacter cloacae P99 (en lo sucesivo en el presente documento P99 β-lactamasa) y una β-lactamasa de clase A de Klebsiella spp.

El término "antibiótico" hace referencia a un compuesto o composición que disminuye la viabilidad de un microorganismo o que inhibe el crecimiento o proliferación de un microorganismo. La frase "inhibe el crecimiento o proliferación" significa multiplicar el tiempo de generación (es decir, el tiempo requerido para que la célula bacteriana se divida o para que la población se duplique) por al menos aproximadamente 2. Antibióticos preferidos son aquéllos que pueden multiplicar el tiempo de generación por al menos aproximadamente 10 o más (por ejemplo, por al menos aproximadamente 100 o incluso indefinidamente, como en la muerte celular total). Como se usa en la presente divulgación, se pretende que un antibiótico incluya un agente antimicrobiano, bacteriostático o bactericida. Ejemplos de antibióticos adecuados para usar con respecto a la presente invención incluyen penicilinas, cefalosporinas y carbapenems.

La expresión "antibiótico β-lactámico" se refiere a un compuesto, que es un carbapenem, con propiedades antibióticas que contiene una funcionalidad β-lactámica.

Una primera realización de la presente invención (Realización R1) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que

HetA es un anillo heterocíclico saturado de 4 a 9 miembros que contienen de 1 a 3 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S, en el que el anillo heterocíclic saturado está sustituido opcionalmente con un total de 1 a 4 sustituyentes seleccionados de cero a 2 (CH2)nN(RA)RB y de cero a 2 (CH2)nRC; cada RC es independientemente alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo.

Una segunda realización de la presente invención (Realización R2) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que X es -CH2-o -CH2CH2-; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una tercera realización de la presente invención (Realización R3) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que X es -CH2CH2-; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

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Una cuarta realización de la presente invención (Realización R4) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que X es C(O)NHR4;-CH2CH2-; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

5 Una quinta realización de la presente invención (Realización R5) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R2 es OSO3 M; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una sexta realización de la presente invención (Realización R6) es un compuesto de fórmula I, o una sal

10 farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R2 es OSO3H; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una séptima realización de la presente invención (Realización R7) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un heterocíclico saturado seleccionado del grupo

15 constituido por pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo y azocanilo; estando el heterocíclico saturado opcionalmente sustituido con N(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC; cada RC es de forma independiente alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrodinilo, pirrolidinilo o piperidinilo; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

20 Una octava realización de la presente invención (Realización R8) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es:

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en el que el asterisco indica el punto de unión de HetA al resto del compuesto; T es H o RC; RC es alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo y todas las demás 30 variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una novena realización de la presente invención (Realización R9) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es:

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en la que el asterisco indica el punto de unión de HetA al resto del compuesto; T es H o RC; RC es alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

40 En un aspecto de la presente realización, T es H.

Una décima realización de la presente invención (Realización R10) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico saturado opcionalmente condensado seleccionado del grupo constituido por azetidinilo, pirrolidinilo, oxopirrolidinilo (por ejemplo, 245 oxopirrolidinilo), piperidinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, morfolinilo, 1,1dioxidotetrahidrotiopiranilo, azepanilo, oxazepanilo, azocanilo y azabiciclo[3.1.0]ciclohexilo, estando el heterocíclico opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nN(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC; y todas las demás

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variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de la presente realización y sus subrealizaciones, HetA está opcionalmente monosustituido con (CH2)nN(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC.

Una undécima realización de la presente invención (Realización R11) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico saturado seleccionado del grupo constituido por pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo y azocanilo; estando el heterocíclico opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nN (RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de la presente realización y sus subrealizaciones, HetA está opcionalmente monosustituido con (CH2)nN(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC.

Una duodécima realización de la presente invención (Realización R12) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es como se ha definido en la realización R10 o R11, cada RC es, de forma independiente, OH, O-alquilo C1-4, C(=NH)NH2, Cl, Br, F, o CN; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En una primera subrealización, HetA es como se ha definido anteriormente en la Realización R10. En una segunda subrealización, HetA es como se ha definido anteriormente en la Realización R11. En un aspecto de la presente realización y sus subrealizaciones, HetA está opcionalmente monosustituido con (CH2)nN(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC.

Una decimotercera realización de la presente invención (Realización R13) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico como se ha definido en la realización R10 o R11, estando el anillo heterocíclico en HetA opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo C1-3, O-alquilo C1-3, NH2, N(H)-alquilo C1-3, N(-alquilo C1-3)2, CH2 NH2, CH-2 N(H)-alquilo C1-3, CH2 N(-alquilo C1-3)2 o piperidinilo; y todas los demás variables son como se han definido inicialmente o como se han definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una decimocuarta realización de la presente invención (Realización R14) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico como se ha definido en la realización R10 o R11, estando el anillo heterocíclico en HetA opcionalmente sustituido con F, CH3, OCH3, NH2, N(H)CH3, N(CH3)2, CH2 NH2, CH2 N(H) CH3, CH2 N(CH3)2 o piperidinilo; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una decimoquinta realización de la presente invención (Realización R15) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico seleccionado del grupo constituido por azetidinilo, pirrolidinio, pirazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, azepanilo, oxazepanilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, y tetrahidropiranilo, estando el anillo heterocíclico opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, alquilo C1-3, CH2 NH2, CH2 N(H)-alquilo C1-3, CH2 N(alquilo C1-3)2, O-alquilo C1-3, Cl, Br, F, NH2, N(H)-alquilo C1-3, N(-alquilo C1-3)2, C(O)NH2, C(O)N(H)-alquilo C1-3, C(O)N(-alquilo C1-3)2, C(O)-alquilo C1-3, C(O)O-alquilo C1-3, OC(O)-alquilo C1-3, S (O)2-alquilo C1-3, S(O)2 NH2, S(O)2 N(H)-alquilo C1-3, o S(O)2 N(-alquilo C1-3)2; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta realización, R2 es OSO3H.

Una decimosexta realización de la presente invención (Realización R16) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que HetA es un anillo heterocíclico seleccionado del grupo constituido por azetidinilo, pirazolinilo, piperidinilo, piperazinilo, azepanilo, oxazepanilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo y tetrahidropiranilo, estando el anillo heterocíclico opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, CH3, CH2 NH2, CH2 N(H)CH3, CH2 N(CH3)2, OCH3, Cl, Br, F, NH2, N(H)CH3, N(CH3)2, C(O)NH2, C(O)N(H) CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)CH3, C(O)OCH3, OC(O)CH3, S(O)2CH3, S(O)2 NH2, S(O)2 N(H)CH3, o S(O)2 N(CH3)2; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta realización, R2 es OSO3H.

Una decimoséptima realización de la presente invención (Realización R17) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R3 y R4 junto con el átomo N al que están ambos unidos forman un heterociclilo seleccionado del grupo constituido por:

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y

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estando el anillo opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, alquilo C1-3, CF3, CH2OH, CH2O-alquilo C1-3, CH2OCF3, CH2 NH2, CH2 N(H)-alquilo C1-3, CH2 N(-alquilo

5 C1-3)2, O-alquilo C1-3, OCF3, oxo, Cl, Br, F, NH2, N(H)-alquilo C1-3, N(-alquilo C1-3)2, C(O)NH2, C(O)N(H)-alquilo C1-3, C(O)N(-alquilo C1-3)2, C(O)-alquilo C1-3, C(O)O-alquilo C1-3 o S(O)2-alquilo C1-3; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta realización, R2 es OSO3H.

10 Una decimooctava realización de la presente invención (Realización R18) es un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R1 es C(O)N(R3)R4; R3 y R4 junto con el átomo N al que están ambos unidos forman un heterociclilo seleccionado del grupo constituido por:

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estando el anillo opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma

20 independiente, CH3, CF3, CH2OH, CH2OCH3, CH2OCF3, CH2 NH2, CH2 N(H)CH3, CH2 N(CH3)2, OCH3, OCF3, oxo, Cl, Br, F, NH2, N(H)CH3, N(CH3)2, C(O)NH2, C(O)N(H)CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)CH3, C(O)OCH3, o S(O)2CH3; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de la presente realización, R2 es OSO3H.

25 Una decimonovena realización de la presente invención (Realización R19) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R4 es H o alquilo C1-4 opcionalmente sustituido con N(RA)RB; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta realización, R4 es H o alquilo C1-4.

30 Una vigésima realización de la presente invención (Realización R20) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R4 es H, alquilo C 1-3 o (CH2)2-3 N(RA)RB; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta realización, R4 es H o alquilo C1-3.

35 Una vigésimoprimera realización de la presente invención (Realización R21) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R4 is H o metilo; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimosegunda realización de la presente invención (Realización R22) es un compuesto de fórmula I, o una

40 sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que R4 es H; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimotercera realización de la presente invención (Realización R23) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que RA es de forma independiente H o alquilo C1-4; cada RB es de

45 forma independiente H o alquilo C1-4; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimocuarta realización de la presente invención (Realización R24) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que RA es de forma independiente H o alquilo C1-3; cada RB es de

50 forma independiente H o alquilo C1-3; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimoquinta realización de la presente invención (Realización R25) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que RA es de forma independiente H o CH3; cada RB es de forma

55 independiente H o CH3; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en una cualquiera de las realizaciones anteriores.

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Una vigésimosexta realización de la presente invención (Realización R26) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que RC de forma independiente alquilo C1-4, OH, O-alquilo C1-4, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimoséptima realización de la presente invención (Realización R27) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que RC es de forma independiente OH, alquilo C1-4, C(=NH)NH2, NH-C(=NH) NH2, Cl, Br, F, o CN; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimooctava realización de la presente invención (Realización R28) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que cada RC es de forma independiente alquilo C1-3, O-alquilo C1-3, Cl, Br, F, C(O)NH2, C(O)N(H)-alquilo C1-3, C(O)N(-alquilo C1-3)2, C(O)-alquilo C1-3, C(O)O-alquilo C1-3, OC(O)-alquilo C1-3, S(O)2-alquilo C1-3, S(O)2 NH2, S(O)2 N(H)-alquilo C1-3, S(O)2 N(alquilo C1-3)2, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, CH2-pirrolidinilo, CH2-piperidinilo o CH2-morfolinilo; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente

o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una vigésimonovena realización de la presente invención (Realización R29) es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que cada RC es de forma independiente alquilo CH3, OCH3, Cl, Br, F, C(O)NH2, C(O)N(H) CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)CH3, C(O)OCH3, OC(O)CH3, S(O)2CH3, S(O)2 NH2, S(O)2 N(H)CH3, o S(O)2 N(CH3)2, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, CH2-pirrolidinilo, CH2-piperidinilo, o CH2-morfolinilo; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Una primera clase (denominada de forma alternativa en el presente documento "subclase C1-S1") incluye los compuestos de fórmula I, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la que HetA es un anillo heterocíclico saturado seleccionado del grupo constituido por pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo y azocanilo, estando el heterocíclico saturado opcionalmente monosustituido con N(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente. En un aspecto de esta subclase, R4 es H.

Una segunda clase (subclase C1-S2) incluye los compuestos de fórmula I, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la todas las variables son exactamente como se define en la subclase C1-S1 a excepción de que cada RC es de forma independiente OH, O-alquilo C1-4, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, Cl, Br, F, o CN. En un aspecto de esta subclase, R4 es H.

Una tercera clase (subclase C1-S3) incluye los compuestos de fórmula I seleccionados del grupo constituido por:

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y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; en los que T es H o (CH2)2-3RC; y RC y R2 son cada uno independientemente como se ha definido inicialmente o como se ha definido en cualquiera de las realizaciones anteriores. En un aspecto de esta subclase, T es H. En otro aspecto de esta subclase R2 es OSO3H o SO3H. En otro aspecto más de esta subclase, T es H y R2 es OSO3H o SO3H. En otro aspecto más de esta subclase, T es H y R2

5 es OSO3H. En otro aspecto más de esta subclase, cada RC es de forma independiente alquilo C1-6, OH, O-alquilo C18, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo. En una característica de este aspecto, R2 es OSO3H.

Una segunda clase de compuestos de la presente invención (clase C2) incluye los compuestos de fórmula I 10 seleccionados del grupo constituido por:

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y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos;

15 en los que T es H, alquilo C1-3, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, (CH2)2-3-O-alquilo C1-3, (CH2)2-3OH, (CH2)2-3F, (CH2)2-3piperidinilo, (CH2)2-3-pirrolidinilo; y T' es H, Cl, Br, F, alquilo C1-3, O-alquilo C1-3, OH, NH2, N(H)-alquilo C1-3 o N(alquilo C1-3)2; y R2 es como se ha definido inicialmente.

Una primera subclase de la segunda clase (subclase C2-S1) incluye los compuestos de fórmula (A1) a (A10) y

20 (A20), y sus sales farmacéuticamente aceptables; en la que R2 es OSO3H; y todas las demás variables son como se ha definido inicialmente en la Clase C1.

Una segunda subclase de la segunda clase (subclase C2-S2) incluye los compuestos de fórmula (A1) a (A10) y (A20), y sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que T es H, CH3, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, (CH2)225 3OCH3, (CH2)2-3OH, (CH2)2-3F, (CH2)2-3-piperidinilo, (CH2)2-3-pirrolidinilo; T' es H, F, O-alquilo C1-3, OH, NH2, N(H)CH3,

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N(CH3)2; y R2 es como se ha definido inicialmente. En un aspecto de esta subclase, R2 es OSO3H.

Una tercera subclase de la segunda clase (subclase C2-S3) incluye los compuestos de fórmula (A1) a (A10) y (A20), y sus sales farmacéuticamente aceptables; en la que T es H; T' es H, F, OCH3, u OH; y R2 es OSO3H.

Otra realización de la presente invención es una combinación que comprende el compuesto seleccionado del grupo constituido por los compuestos del título de los Ejemplos 1 a 40 (o, como alternativa, los Compuestos 1 a 40) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Otra realización de la presente invención es una composición que comprende el compuesto seleccionado del grupo constituido por los compuestos del título de los Ejemplos 1 a 8 (es decir, los Compuestos 1 a 8) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Otra realización de la presente invención es un compuesto seleccionado del grupo de los compuestos 1, 2 y 4, y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

Otra realización de la presente invención es un compuesto seleccionado del grupo constituido por:

(2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo [3.2.1]octano-2-carboxamida; y

(2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirrolidin-3-il]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo [3.2.1]octano-2-carboxamida;

y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Otra realización más de la presente invención es (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (es decir, el compuesto del Ejemplo 1 o, como alternativa, el Compuesto 1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otra realización más de la presente invención es (2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirolidin-3-i]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo [3.2.1]octano-2-carboxamida (es decir, el compuesto del Ejemplo 14, o Compuesto 14) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otra realización de la presente invención es el compuesto 1 en forma de un monohidrato cristalino. El monohidrato cristalino tiene un patrón de XRPD mostrado en la Figura 1 y la curva DSC mostrada en la Figura 2. El monohidrato cristalino se puede preparar como se ha descrito en la parte A del Ejemplo 1D. En una realización, el monohidrato cristalino se caracteriza por un patrón de difracción en polvo de rayos X obtenido usando radiación de cobre Kα (es decir, la fuente de radiación es una combinación de radiación Cu Kα1yKα2) que comprende valores 2Θ (es decir, reflexiones en los valores 2Θ) en grados de aproximadamente 15,6, 17,4 y 20,4. En esta realización y en cualquier realización análoga siguiente, se entiende que el término "aproximadamente" modifica cada uno de los valores 2Θ. En otra realización, el monohidrato cristalino se caracteriza por un patrón de difracción en polvo de rayos X obtenido usando radiación de cobre Kα que comprende valores 2Θ en grados de aproximadamente 15,6, 17,4, 20,4, 24,0, 26,3 y 29,3. En otra realización más, el monohidrato cristalino se caracteriza por un patrón de difracción en polvo de rayos X obtenido usando radiación de cobre Kα que comprende valores 2Θ en grados de aproximadamente 1513,5, 15,5, 15,6, 17,4, 18,7, 19,7, 20,4, 21,7, 22,6, 24,0, 24,3, 25,9, 26,3, 26,6, 27,0, 27,5, 29,3, 30,0, 31,3, 32,4, 32,9, 33,1, 34,0, 34,7, 35,5 y 38,9.

En otra realización más, el monohidrato cristalino del compuesto 1 se caracteriza por una traza de PDF derivada de su patrón de difracción en polvo de rayos X mostrado en la Figura 1. La traza de PDF proporciona una huella de las distancias entre átomos que definen al monohidrato cristalino. Se puede obtener una traza de PDF del modo descrito en el documento WO 2005/082050. En un aspecto de la presente realización, el monohidrato cristalino se caracteriza por las partes de la traza de PDF correspondientes a los valores 2Θ en grados de aproximadamente 15,6, 17,4 y 20,4 en el XRPD. En otro aspecto de la presente realización, el monohidrato cristalino se caracteriza por las partes de la traza de PDF correspondientes a los valores 2Θ en grados de aproximadamente 15,6, 17,4, 20,4, 24,0, 26,3 y 29,3 en el XRPD. En otra realización más de la presente realización, el monohidrato cristalino se caracteriza por las partes de la traza de PDF correspondientes a los valores 2Θ en grados de aproximadamente 1513,5, 15,5, 15,6, 17,4, 18,7, 19,7, 20,4, 21,7, 22,6, 24,0, 24,3, 25,9, 26,3, 26,6, 27,0, 27,5, 29,3, 30,0, 31,3, 32,4, 32,9, 33,1, 34,0, 34,7, 35,5 y 38,9 en el XRPD.

La expresión "aproximadamente", cuando modifica a la cantidad (por ejemplo, kg, l o equivalentes) de una sustancia

o composición o el valor de una propiedad física o el valor de un parámetro que caracteriza a una etapa de un procedimiento (por ejemplo, la temperatura a la cual se realiza dicha etapa de un procedimiento) o similares hace referencia a la variación en la cantidad numérica que se puede producir con, por ejemplo, los procedimientos típicos de medición, manipulación o muestreo implicados en la preparación, caracterización y/o uso de la sustancia o composición, en el error inadvertido en estos procedimientos, en las diferencias en la fabricación, la fuente o la pureza de los ingredientes empleados para fabricar o usar las composiciones o llevar a cabo los procedimientos, y similares. En un caso concreto de los valores 2Θ en grados en un XRPD descrito en el presente documento, el término "aproximadamente" normalmente significa e valor ±0,1.

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Otra realización de la presente invención es un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se ha definido inicialmente o como se define en cualquiera de las realizaciones, subrealizaciones, aspectos, clases o subclases anteriores, en las que el compuesto o su sal es una sal sustancialmente pura. Como se usa en el presente documento, "sustancialmente puro/a" significa idóneamente al menos aproximadamente 60 % en peso, normalmente al menos aproximadamente 70 % en peso, preferentemente al menos aproximadamente 80 % en peso, más preferentemente al menos aproximadamente 90 % en peso (por ejemplo, de aproximadamente 90 % en peso a aproximadamente 99 % en peso), incluso más preferentemente al menos aproximadamente 95 % en peso (por ejemplo, de aproximadamente 95 % en peso a aproximadamente 99 % en peso, o de aproximadamente 98 % en peso a 100 % en peso), y lo más preferentemente al menos aproximadamente 99 % en peso (por ejemplo, 100 % en peso) de un producto que contiene un compuesto de fórmula I o su sal (por ejemplo, el producto aislado de una mezcla de reacción que da el compuesto o la sal) consiste en el compuesto o la sal. El nivel de pureza de los compuestos y sales se puede determinar usando un procedimiento de análisis estándar, tal como cromatografía en capa fina, electroforesis en gel, cromatografía de líquidos de alto rendimiento y/o espectrometría de masas. Si se usa más de un procedimiento de análisis y los procedimientos proporcionan diferencias experimentalmente significativas en el nivel de pureza determinado, el procedimiento que proporcione el mayor nivel de pureza tiene prioridad. Un compuesto o sal con una pureza del 100 % es uno que carece de impurezas detectables como se determina mediante un procedimiento de análisis estándar. Con respecto al compuesto de la invención que tiene uno

o más centros asimétricos y se puede producir como mezclas de estereoisómeros, un compuesto sustancialmente puro puede ser una mezcla sustancialmente pura de estereoisómeros o un diastereoisómero o enantiómero sustancialmente puro.

Otras realizaciones de la presente invención incluyen las siguientes:

(a): Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I como se ha definido en lo que antecede, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable, que además comprende una cantidad eficaz de un antibiótico β-lactámico que es impipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem o panipenem.

(b): La composición farmacéutica de (a) en la que el beta-lactámico es imipenem. (c)La composición farmacéutica de (a), que además comprende una cantidad eficaz de un inhibidor de DHP.

(d): La composición farmacéutica de (c) en la que el antibiótico beta-lactámico es imipenem y el inhibidor de DHP es cilastatina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

(e): Una combinación de cantidades eficaces de un compuesto de fórmula I como se ha definido en la que antecede, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un antibiótico beta-lactámico que se selecciona de imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem y panipenem.

(f): La combinación de (e), en la que el antibiótico beta-lactámico es imipenem.

(g): Una combinación de (e), que además comprende una cantidad de un inhibidor de DHP.

(h): La combinación de (g), en la que el antibiótico beta-lactámico es imipenem y el inhibidor de DHP es cilastatina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

(i): También se divulga un método para tratar una infección bacteriana que puede deberse a Pseudomonas spp.

: o Klebsiella spp., que comprende administrar a un sujeto que necesite dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición de la combinación de (a) a (h).

La presente invención también incluye un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

(i) para uso en, o (ii) para uso como medicamento para, o (iii) para uso en la preparación (o fabricación) de un medicamento para tratar una infección bacteriana. En estos usos, los compuestos de la presente invención se pueden usar opcionalmente en combinación con uno o más carbapenems y opcionalmente uno o más inhibidores de DHP.

Realizaciones adicionales de la invención incluyen las composiciones farmacéuticas y combinaciones indicadas en (a)-(h) anteriores y los usos indicados en el párrafo anterior, en los que el compuesto de la presente invención empleado en los mismos es un compuesto de una de las realizaciones, subrealizaciones, clases o subclases descritas anteriormente. El compuesto puede usarse, opcionalmente, en forma de una sal farmacéuticamente aceptable en estas realizaciones.

Realizaciones adicionales de la presente invención incluyen cada una de las composiciones farmacéuticas, combinaciones y usos indicados en los párrafos anteriores, en los que el compuesto de la presente invención o su sal empleada en los mismos es sustancialmente puro. Con respecto a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I o su sal y un vehículo farmacéuticamente aceptable y opcionalmente uno o más excipientes, se entiende que la expresión "sustancialmente puro/a" hace referencia a un compuesto de fórmula I

o su sal per se; es decir, la pureza del ingrediente activo en la composición.

Como se usa en el presente documento, el término "alquilo" se refiere a un hidrocarburo monovalente saturado de cadena lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. Por tanto, por ejemplo "alquilo C1-8 (o "alquilo C1-C8) hace referencia a cualquiera de los isómeros de alquilo de octilo, heptilo, hexilo y pentilo, así como n-, iso-, sec-y t-butilo, n-e isopropilo, etilo y metilo. Como otro ejemplo "alquilo C1-6 (o "alquilo C1-C6) hace referencia a cualquiera de los isómeros de alquilo de hexilo y pentilo, así como n-, iso-, sec-y t

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butilo, n-e isopropilo, etilo y metilo. Como otro ejemplo, "alquilo C1-4" hace referencia a n-, iso-, sec-y t-butilo, n-e isopropilo, etilo y metilo.

El término "fluoroalquilo" se refiere a un grupo alquilo como se ha definido anteriormente en el que uno o más átomos de hidrógeno se han sustituido por un flúor. Por tanto, por ejemplo, "fluoroalquilo C1-6" (o "fluoroalquilo C1-C6") hace referencia a un grupo alquilo de C1 a C6 lineal o ramificado como se ha definido anteriormente con uno o más sustituyentes flúor. Fluoroalquilos adecuados tienen un significado análogo a excepción de que los sustituyentes halógenos están restringidos a flúor. Fluoroalquilos adecuados incluyen la serie (CH2)0-4CF3 (es decir, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 3,3,3-trifluoro-n-propilo, etc.).

El término "halógeno" (o "halo") se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

El término "cicloalquilo" hace referencia a cualquier anillo monocíclico monovalente de un alcano que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. Por tanto, por ejemplo, "cicloalquilo C4-7" hace referencia a ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.

El término "C(O)" se refiere a carbonilo. Los términos "S(O)2" y "SO2" hacen referencia cada uno a sulfonilo. El término ""S(O)" hace referencia a sulfinilo.

El símbolo "*" al final de un enlace hace referencia al punto de unión de un grupo funcional u otro resto químico al resto de la molécula de la que forma parte.

A menos que se limite expresamente, el término "sustituido" hace referencia a una y varias sustituciones con un sustituyente citado en la medida en que dicha una y más sustituciones (incluida una sustitución múltiple en el mismo sitio) esté químicamente permitida. A menos que se indique expresamente otra cosa, está permitida la sustitución con un sustituyente citado en cualquier átomo en un anillo (por ejemplo, cicloalquilo, un anillo heteroaromático o un anillo heterocíclico saturado) siempre que dicha sustitución en el anillo esté permitida químicamente y tenga como resultado un compuesto estable. No obstante, se entiende que el grado de sustitución puede estar cualificado. Por ejemplo, la expresión "opcionalmente sustituido con un total de 1 a 4 sustituyentes seleccionados de cero a 2 N(RA) RB y de cero a 2 RC" significa qe puede haber opcionalmente 4 sustituyentes en total con un máximo de 2 N(RA)RB sustituyentes y un máximo de 2 grupos RC.

HetA se define en el presente documento como un anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado de 4 a 9 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, estando el anillo opcionalmente condensado con un cicloalquilo C3-7. Los anillos heterocíclicos saturados adecuados para usar como HetA incluyen, por ejemplo, azetidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, pirazolidinilo, hexahidropirimidinilo, tiazinanilo, tiazepanilo, azepanilo, diazepanilo, azocanilo (= octahidroazocinilo), azonanilo (= octahidro-1H-azoninilo), tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo y dioxanilo. Anillos heterocíclicos monoinsaturados adecuados incluyen, por ejemplo, anillos correspondientes a los anillos saturados indicados en la frase anterior a excepción de que contengan un doble enlace (por ejemplo, un doble enlace carbono-carbono). Anillos heterocíclicos saturados condensados con un cicloalquilo adecuado para usar como HetA incluyen, por ejemplo:

A menos que se indique expresamente otra cosa en un contexto concreto, cualquiera de los diversos anillos cíclicos y sistemas anulares descritos en el presente documento puede estar unido al resto del compuesto en cualquier átomo del anillo (es decir, cualquier átomo de carbono o cualquier heteroátomo) siempre que tenga como resultado un compuesto estable.

A menos que se indique expresamente otra cosa, todos los intervalos citados están incluidos. Por ejemplo, un anillo heteroaromático descrito como que contiene de "1 a 4 heteroátomos" significa que el anillo puede contener 1, 2, 3 o 4 heteroátomos. También debe entenderse que cualquier intervalo citado en el presente documento incluye dentro de su alcance todos los subintervalos dentro de dicho intervalo. Por tanto, por ejemplo, con un anillo heterocíclico descrito como que contiene de "1 a 4 heteroátomos" se pretende incluir como aspectos del mismo los anillos heteroclínicos que contienen de 2 a 4 heteroátomos, 3 o 4 heteroátomos, de 1 a 3 heteroátomos, 2 o 3 heteroátomos, 1 o 2 heteroátomos, 1 heteroátomo, 2 heteroátomos, 3 heteroátomos y 4 heteroátomos.

Cuando una variable (por ejemplo, RA o RB) se presenta más de una vez en cualquier constituyente o en la Fórmula I o en cualquier otra fórmula que represente y describa compuestos de la presente invención, su definición cada vez es independiente de su definición en cualquier otra aparición. También se permiten combinaciones de sustituyentes y/o variables sólo si dichas combinaciones tienen como resultado compuestos estables.

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Un compuesto "estable" es un compuesto que se puede preparar y aislar y cuya estructura y propiedades permanecen o puede hacerse que permanezcan esencialmente sin cambiar durante un periodo de tiempo suficiente para permitir el uso del compuesto para los fines descritos en el presente documento (por ejemplo, administración terapéutica a un sujeto). Los compuestos de la presente invención están limitados a compuestos estables abarcados por la fórmula I.

Los compuestos de la presente invención tienen al menos dos centros asimétricos y pueden tener uno o más centros adicionales como resultado de la presencia de determinados sustituyentes y/o patrones sustituyentes. De acuerdo con esto, los compuestos de la invención pueden encontrarse como mezclas de estereoisómeros, o como diaestereómeros o enantiómeros individuales. Todas las formas isoméricas de estos compuestos, individualmente o en mezclas, están incluidos dentro del alcance de la presente invención.

El término "compuesto" hace referencia al compuesto libre y, en la medida en que son estables, a cualquier hidrato o solvato del mismo. Un hidrato es el compuesto en complejo con agua y un solvato es el compuesto en complejo con un disolvente orgánico.

Como se ha indicado anteriormente, los compuestos de la presente invención se pueden emplear en forma de sales farmacéuticamente aceptables. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que posee la eficacia de compuesto parental y que no es indeseable biológicamente ni de otro modo (por ejemplo, no es tóxica o de otro modo perjudicial para el receptor de la misma). Una sal farmacéuticamente aceptable es una sal formada tratando el compuesto de la invención (por ejemplo, un compuesto de fórmula I) con un equivalente molar de una base suave (por ejemplo, carbonato sódico, bicarbonato sódico, bicarbonato potásico o acetato sódico). En este caso, M es un catión, tal como Na+ en caso de tratamiento con una base de sodio.

Cuando M es H (por ejemplo, R2 es OSO3H) y el compuesto de la invención contiene una base interna que es capaz de protonarse (por ejemplo, R1 contiene un nitrógeno básico), se entiende que el compuesto podría existir en una forma en la cual la base interna está completamente protonada por M = H de forma tal que R2 posee una carga negativa (por ejemplo, R2 = OSO3-) y la base interna tiene una carga positiva, o está parcialmente protonada de un modo tal que R2 posee una carga negativa parcial, o no está protonada. De un modo similar, cuando M es H y el compuesto de la invención contiene dos o más bases internas que pueden protonarse (por ejemplo, R1 contiene dos

o más nitrógenos básicos), se entiende que el compuesto podría existir en una forma en la cual una u otra bases internas están completamente protonada por M = H o que dos o más de las bases internas están cada una suficientemente protonadas de forma tal que R2 posee una carga negativa o que una o más de las bases están parcialmente protonadas de un modo tal que R2 posee una carga negativa parcial, o que ninguna de las bases está protonada. La presente invención incluye todas estas formas del compuesto. Aunque estos compuestos pueden estar en forma de una sal interna (es decir, un zwiterión), en el presente documento se consideran compuestos de la invención, no sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Por otro lado, para un compuesto de la invención que contenga una base interna (por ejemplo, R1 contiene un nitrógeno básico), una sal farmacéuticamente aceptable es una sal formada por el tratamiento del compuesto con una cantidad adecuada de un ácido (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido trifluoroacético, ácido metanosulfónico o similares) de un modo tal que la base interna esté protonada o el ácido con la carga positiva de la base protonada equilibrado con un contraión negativo (por ejemplo, cloruro, trifluoruro, metanosulfonato o similares). Para los compuestos de la invención que contengan dos bases internas (por ejemplo, R1 contiene dos nitrógenos básicos), otra sal farmacéuticamente aceptable es una sal formada por el tratamiento del compuesto con una cantidad adecuada de ácido de un modo tal que una de las bases internas esté protonada por el ácido sulfónico presente en la molécula (es decir, R2 tiene una carga negativa) y la otra esté protonada por el ácido con la carga positiva de la base protonada equilibrada con un contraión negativo adecuado. Otra sal farmacéuticamente aceptable más para compuestos de la invención que contienen dos bases internas puede obtenerse tratando el compuesto con suficiente ácido (por ejemplo, ácido sulfúrico, HCl, ácido metanosulfónico o TFA) de un modo tal que el grupo ácido sulfónico presente en la molécula permanezca protonado (es decir, M = H) y las bases internas estén protonadas y tengan asociadas un contraion negativo adecuado (por ejemplo, sulfonato). Como queda claro a partir de lo anterior, la naturaleza y tipo precisos de la sal farmacéuticamente aceptable que se puede obtener dependerá de la naturaleza del compuesto específico a tratar (por ejemplo, la presencia o ausencia de nitrógenos básicos en R1) y las condiciones de tratamiento usadas; por ejemplo dependerá de la elección y la cantidad del ácido o la base con la cual se trate al compuesto, el pH del medio de tratamiento, la cantidad y elección del tampón (en su caso) y similares. Se entiende que la presente invención abarca todos los tipos y formas de sales farmacéuticamente aceptable de los compuestos de la presente invención.

Como se ha indicado anteriormente, la presente invención incluye composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula I de la presente invención y uno o más de otros componentes activos (un carbapenem) y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las características del vehículo dependerán de la vía de administración. Por "farmacéuticamente aceptable" se quiere decir que los ingredientes de la composición farmacéutica deben ser compatibles entre sí, no interferir con la eficacia del o los ingredientes activos y no ser perjudiciales (por ejemplo, tóxicos) para el receptor de la misma. Por tanto, las composiciones de acuerdo con la invención pueden contener, además del inhibidor, diluyentes, cargas, sales, tampones, estabilizantes, solubilizantes y otros materiales bien

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conocidos en la técnica.

También se divulga un procedimiento para tratar una infección bacteriana que comprende administrar a un sujeto que necesite tal tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y en combinación con un carbapenem y opcionalmente un inhibidor de DHP. El término "sujeto" (o, como alternativa, "paciente"), como se usa en el presente documento, se refiere a un animal, preferentemente un mamífero, más preferentemente un ser humano, que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimentación. El término "administración" y sus variantes (por ejemplo, "administrar" un compuesto) en referencia a un compuesto de fórmula I significa proporcionar el compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo al individuo que necesita el tratamiento. Cuando un compuesto o una sal del mismo se proporciona en combinación con uno o más agentes activos distintos,, se entiende que "administración" y sus variantes incluye cada uno la introducción del compuesto o su sal y los otros agentes al mismo tiempo o a tiempos diferentes. Cuando os agentes de una combinación se administran al mismo tiempo, se pueden administrar juntos en una única composición o se pueden administrar por separado. Se entiende que una "combinación" de agentes activos puede ser una única composición que contiene todos los agentes activos o múltiples composiciones, cada una de las cuales contiene uno o más de los agentes activos. En el caso de dos agentes activos, una combinación puede ser una única composición que comprende ambos agentes o dos composiciones distintas, en las que cada una comprende uno de los agentes; en el caso de tres agentes activos, una combinación puede ser una única composición que comprende los tres agentes, tres composiciones distintas cada una de las cuales comprende uno de los agentes, o dos composiciones una de las cuales comprende dos de los agentes y la otra comprende uno tercer agente; y así sucesivamente.

Las composiciones y combinaciones de la presente invención se administran adecuadamente en cantidades eficaces. La expresión "cantidad eficaz", como se usa en el presente memoria, significa la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o médica en un tejido, sistema, animal o ser humano buscada por el investigador, veterinario, médico u otro clínico. En una realización, la cantidad eficaz es una "cantidad terapéuticamente eficaz" para el alivio de los síntomas de la enfermedad o afección que se esté tratando (por ejemplo, la curación de las afecciones asociadas con infección bacteriana y/o resistencia bacteriana a fármacos). En otra realización, la cantidad eficaz es una "cantidad profilácticamente eficaz" para la profilaxis de los síntomas de la enfermedad o afección que se está previniendo. El término también incluye en el presente documento la cantidad de compuesto activo suficiente para inhibir la β-lactamasa y, de este modo, provocar la respuesta que se busca (es decir, una "cantidad eficaz en la inhibición"). Cuando el compuesto activo (es decir, el ingrediente activo) se administra como la sal, las referencias a la cantidad del ingrediente activo deben estar en forma del ácido libre o de la base libre del compuesto.

La administración de una composición de la presente invención es, adecuadamente, parenteral, oral, sublingual, transdérmica, tópica, intranasal, intratraqueal o intrarectal, estando la composición formulada adecuadamente para administrar por la vía seleccionada usando procedimientos de formulación bien conocidos en la técnica, incluidos, por ejemplo, los procedimientos para preparar y administrar formulaciones descritas en los capítulos 39, 41, 42, 44 y 45 en Remington -The Science and Practice of Pharmacy, 21ª edición, 2006. En una realización, los compuestos de la invención se administran por vía intravenosa en un contexto hospitalario. En otra realización, la administración es oral en forma de un comprimido o cápsula o similares. Cuando se administra sistémicamente, una composición terapéutica se administra adecuadamente a una dosis suficiente para conseguir un nivel en sangre del inhibidor de al menos aproximadamente 1 microgramo/ml, preferentemente aproximadamente 10 microgramos/ml y, más preferentemente, aproximadamente 25 microgramos/ml. Para la administración localizada, concentraciones mucho menores que esta pueden ser eficaces y concentraciones mucho mayores se pueden tolerar.

La administración intravenosa de un compuesto de la invención se puede realizar reconstituyendo una forma en polvo del compuesto con un disolvente aceptable. Los disolventes adecuados incluyen, por ejemplo, soluciones salinas (por ejemplo, inyección de cloruro sódico al 0,9 %) y agua estéril (por ejemplo, agua estéril para inyectables, agua bacteriostática para inyectables con metilparaben y propilparaben, o agua bacteriostática para inyectables con alcohol bencílico al 0,9 %). La forma en polvo del compuesto se puede obtener mediante irradiación gamma del compuesto o mediante liofilización de una solución de compuesto, tras lo cual se puede almacenar el polvo (por ejemplo, en un vial sellado) a o por debajo de la temperatura ambiente hasta que se reconstituya. La concentración del compuesto en la solución i.v. reconstituida puede estar, por ejemplo, en un intervalo de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 20 mg/ml.

Los compuestos de la invención se pueden usar para el tratamiento, profilaxis o inhibición del crecimiento bacteriano

o infecciones producidas por bacterias que son resistentes a antibióticos β-lactámicos. Más particularmente, las bacterias pueden ser cepas positivas a β-lactamasa que son altamente resistentes a antibióticos β-lactámicos. Los expertos en la técnica conocen bien las expresiones "ligeramente resistente" y "altamente resistente" (véase, por ejemplo, Payne et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38: 767-772 (1994); Hanaki et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 30:11.20-11.26 (1995)). Para los objetivos de la presente invención, las cepas bacterianas que son altamente resistentes a imipenem son aquéllas contra las cuales la CMI de imipenem es >16 mg/ml, y las cepas bacterianas que son ligeramente resistentes a imipenem son aquéllas contra las cuales la CMI de imipenem es >4 mg/ml.

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Los compuestos de la invención se pueden usar en combinación con antibióticos carbapenem para el tratamiento de infecciones causadas por cepas productoras de β-lactamasa de clase C, además de las infecciones que se incluyen dentro del espectro antibacteriano del agente antibiótico. Ejemplos de bacterias productoras de β-lactamasa de clase C son Pseudomonas aeruginosa, Enterobarcter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli y Acinetobacter baumannii.

Los carbapenem adecuados para usar en la presente invención incluyen los que se sabe que muestran inestabilidad a, o de otro modo son sensibles a las β-lactamasas de clase C, y que también se sabe que tienen un grado de resistencia a las β-lactamasas de clase C.

Cuando los compuestos de fórmula I se combinan con un antibiótico carbapenem, también se puede combinar un inhibidor de la deshidropeptidasa (DHP). Muchos carbapenems son vulnerables al ataque por una enzima renal conocida como DHP. Este ataque o degradación puede reducir la eficacia del agente antibacteriano carbapenem. Los inhibidores de la DHP y su uso con carbapenems se divulgan en, por ejemplo, los documentos US4539208, US4616038, US4880793 y US5071843. Un inhibidor preferido de DHP es el ácido 7-(l-2-amino-2-carboxietiltio)-2(2,2-dimetilciclopropanoecarboxamida)-2-heptenoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los carbapenems adecuados para la coadministración con compuestos de la presente invención incluyen imipenem, meropenem, biapenem, ácido (4R, 5S, 6S)-3-[3S, 5S)-5-(3-carboxifenil-carbamoil)pirrolidin-3-iltio]-6-(1R)-1hidroxietil]-4-metil-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxílico, cloruro de (1S, 5R, 6S)-2-(4-(2-(((carbamoilmetil)1,4-diazoniabiciclo[2.2.2]oct-1-il)-etil(1,8-naftosultam)metil)-6-[1(R)-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato, BMS181139 (ácido [4R-[4-alfa,5 beta,6 beta(R*)]]-4-[2-[(aminoiminometil)amino]etil]-3-[(2-cianoetil)tio]-6-(1hidroxietil)-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxílico), BO2727 (ácido [4R-3[3S*,SS*(R*)], 4alfa,5beta, 6beta(R*)]]-6-(1-hidroxietil)-3-[[5-[1-hidroxi-3-(metilmino)propil]-3-pirrolidinil]tio]-4-metil-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept2-en-2-carboxílico monoclorhidrato), E1010 (ácido (1R,5S,6S)-6-[1(R)-hidroximetil]-2-[2(S)-[1(R)-hidroxi-1-[pirrolidin3(R)-il]metil]pirrolidin-4(S)-ilsulfanil]-1-metil-1-carba-2-penem-3-carboxílico diclorhidrato) y S4661 (ácido (1R,5S,6S)2-[(3S,5S)-5-(sulfamoilaminometil)pirrolidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico), cloruro de (1S,5R,6S)-1-metil-2-{7-[4-(aminocarbonilmetil)-1,4-diazoniabiciclo(2.2.2)octan-1-il]-metil-fluoren-9-on-3-il}-6-(1Rhidroxietil)-carbapen-2-em-3 carboxilato.

En una realización, el antibiótico coadministrado con un compuesto de la presente invención se selecciona del grupo constituido por imipenem, meropenem y ácido (4R, 5S, 6S)-3-[(3S,5S)-5-(3-carboxifenilcarbamoil)pirrolidin-3-iltio]-6(1R)-1-hidroxietil]4-metil-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxílico.

Cuando se coadministra con un antibiótico carbapenem, la combinación del compuesto de la invención y el antibiótico pueden proporcionar un efecto sinérgico Las expresiones "efecto sinérgico" y "sinergia" indican que el efecto producido cuando dos o más fármacos se coadministran es mayor que lo que se podría predecir basándose en el efecto producido cuando los compuestos se administran de forma individual. Sin desear quedar ligado a teoría alguna, se cree que los compuestos de la presente invención son inhibidores de carbapenem que actúan para prevenir la degradación de los antibióticos carbapenem, de modo que se potencia su eficacia y se produce un efecto sinérgico.

Las abreviaturas usadas en el presente documento incluyen las siguientes: acac = acetilacetonato; AIBN = 2,2azobisisobutironitrilo; BLI = inhibidor de beta-lactamasa; Bn = bencilo; BOC (o Boc) = t-butiloxicarbonilo; BOC-ON = 2-(terc-butoxicarboniloxiamino)-2-fenilacetonitrilo; BOC-OSN = N-terc-butoxicarboniloxi)succinimida; BOP = hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio; BSA = seroalbúmina bovina; CBZ (o Cbz) = carbobenzoxi (como alternativa, benciloxicarbonilo); COD = ciclooctadienilo; DBU = 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7eno; DCC = diciclohexilcarbodiimida; DCE = 1,2-dicloroetano; DCM = diclorometano; DIPEA = diisopropiletilamina (o base de Hunig); DMAC = N,N-dimetilacetamida; DMAP = 4-dimetilaminopiridina N,N-dimetilaminopiridina; DME = 1,2-dimetoxietano; DMF = N,N-dimetilformamida; DMSO = dimetilsulfóxido; EDC = 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida; DSC = calorimetría diferencial de barrido; Et = etilo; EtOAc = acetato de etilo; HMDS = hexametildisilazida; HOBT = 1-hidroxibenzotriazol; HOPO = 2-hidroxipiridin-N-óxido; HPLC = cromatografía de líquidos de alto rendimiento; IPA = alcohol isopropílico; IPAc = acetato de isopropilo; i-Pr = isopropilo; CL/EM = cromatografía de líquidos/espectrometría de masas; Me = metilo; MHBII = caldo de Mueller Hinton de tipo II; CMI = concentración mínima inhibidora; MSA = ácido metanosulfónico; NMP = N-metilpirrolidinona; PG = grupo protector; F = fenil; TEA = trietilamina; TFA = ácido trifluoroacético; TFE =2,2,2-trifluoroetanol; TF = tetrahidrofurano; TLC = cromatografía en capa fina; TSB = caldo de tripticasa soja; TsOH = ácido p-toluenosulfónico; XRPD = difracción en polvo de rayos X.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar fácilmente de acuerdo con los siguientes esquemas de reacción y ejemplos, o modificaciones de los mismos, usando materiales de partida, reactivos fácilmente disponibles y procedimientos de síntesis convencionales, incluidos, por ejemplo, los procedimientos descritos en el documento US7112592. En estas reacciones también es posible usar variantes que sean conocidas por los expertos en la técnica, pero no se mencionan con mayor detalle. Además, otros procedimientos para preparar compuestos de la presente invención pueden ser fácilmente evidentes para el experto en la técnica a la luz de los siguientes esquemas de reacción y ejemplos. A menos que se indique lo contrario, todas las variables son como se ha definido

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en lo que antecede.

Los compuestos de carboxamida de la presente invención en los que a es un enlace sencillo y X es (CH2)1-3 se pueden preparar como se representa en el esquema 1.

El intermedio bicíclico A se puede obtener como se describe en el documento US 7112592 o mediante modificaciones de rutina del mismo. La cadena lateral se puede unir mediante la reacción del ácido A con la amina B (en caso necesario la amina incorpora un grupo protector) en condiciones de formación de amida estándar conocidas en la técnica. por ejemplo, una solución del ácido A y la amina B (1-2 equivalentes molares) en disolvente (por ejemplo, un haloalcano tal como diclorometano seco o cloroformo) se pueden agitar a temperatura ambiente mientras que secuencialmente se añade trietilamina (1-2 equivalentes), HOBT (1-2 equivalentes) y EDC (1-2 equivalentes) a temperatura ambiente en nitrógeno. La mezcla de reacción resultante se puede agitar a temperatura ambiente hasta que la reacción se completa (por ejemplo, en aproximadamente 8 a 24 horas) y después la mezcla de reacción se puede concentrar al vacío y purificar el residuo usando cromatografía en columna en gel de sílice o HPLC, dando la amida C. La desprotección del grupo protector éter bencílico para dar el intermedio hidroxilactama D se puede conseguir mediante hidrogenación o, en algunos casos, mediante hidrólisis catalizada con ácido. Por ejemplo, se puede añadir paladio sobre carbón (0,05-0,5 eq.) a una solución del éter bencílico en un disolvente adecuado (por ejemplo, un alcohol tal como metanol o etanol, un acetato de alquilo tal como EtOAc, un éter tal como THF) y la mezcla resultante se agitó en hidrógeno (1-3 atmósferas) hasta que la reacción se completa (por ejemplo, de aproximadamente 1 a 24 horas) determinado mediante una técnica de seguimiento adecuada tal como TLC o HPLC. Una vez finalizado, se puede aislar hidroxilactama D usando técnicas convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción se puede filtrar y el filtrado se puede concentrar para proporcionar una hidroxilactama D bruta que en muchos casos se puede usar directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. Si se requiere o desea purificación adicional, la hidroxilactama D bruta se puede purificar mediante cromatografía en columna en gel de sílice o mediante HPLC para dar la hidroxilactama D pura. La sulfatación del intermedio D para dar el sulfato E se puede conseguir usando un reactivo de sulfatación en un disolvente adecuado. Por tanto, a una solución de hidroxilactama D en un disolvente aprótico (por ejemplo, una amida terciaria tal como piridina, DMF o DMAC) a temperatura ambiente se puede añadir complejo de trióxido de azufre piridina (2-10 equivalentes). La mezcla resultante se puede agitar a temperatura amiente hasta completar la reacción (por ejemplo, de aproximadamente 4 a 24 horas) seguida mediante HPLC o CL/EM. Según sea necesario se puede añadir complejo de trióxido de azufre piridina adicional para dirigir la reacción hasta su finalización. Se puede obtener un producto de reacción purificado usando técnicas convencionales, tales como filtración de la mezcla de reacción, concentración del filtrado al vacío, suspensión del concentrado en una solución de dihidrogenofosfato potásico acuosa saturada, lavado de la solución acuosa con un disolvente orgánico adecuado (por ejemplo, EtOAc), adición de hidrogenosulfato de tetrabutilamonio en exceso a la capa acuosa, extracción de la mezcla con disolvente orgánico (por ejemplo, EtOAc 4X), combinación de las capas orgánicas, secado de las fases orgánicas combinadas sobre sulfato sódico y concentración al vacío, para dar la sal de tetrabutilamonio del intermedio E. En los casos en los que no hay grupo protector en la cadena lateral, el producto de la reacción de sulfatación es un compuesto de fórmula I de la presente invención. Cuando un grupo protector se incorpora en la cadena lateral de la amida (por ejemplo, amina o éter bencílico, BOC amina o un CBZ amina), el grupo se puede retirar usando una técnica conocida en la materia para dar el compuesto de fórmula

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I. Más particularmente, en compuestos de fórmula I que contienen un grupo amino en la cadena lateral (por ejemplo, R3

es aminoalquilo), el grupo amino normalmente está protegido para evitar reacciones secundarias indeseadas

durante la síntesis. La protección se puede conseguir adecuadamente mediante el uso de BOC, CBZ, o un grupo

protector similar.

Los compuestos de carboxilato de la presente invención en los que X es (CH2)1-3 se pueden preparar como se representa en el esquema 2:

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10 En el esquema 2, el éster G se obtiene haciendo reaccionar el intermedio urea bicíclica A con el alcohol de cadena lateral F (en el que si es necesario el alcohol incorpora un grupo protector) en presencia de un reactivo de esterificación (por ejemplo, 1-2 equivalentes de DMAP) en un disolvente aprótico (por ejemplo, un éter tal como éter dietílico o THF o un haloalcano tal como diclorometano) a una temperatura que varía de aproximadamente 0 ºC a

15 35 ºC hasta que la reacción ha finalizado (por ejemplo, de aproximadamente 1 a 24 horas) seguida mediante TLC o HPLC. Después, el intermedio G se puede convertir en un compuesto de la presente invención mediante una secuencia sintética (desbencilación, sulfatación y desprotección de la cadena lateral (en caso necesario)) análoga a la indicada en el Esquema 1 para la síntesis de análogos de amida.

20 En términos generales, cuando un grupo químico en un compuesto se denomina en el presente documento "protegido" o se dice que incorpora un "grupo protector", esto significa que el grupo químico se usa de una forma modificada para impedir reacciones secundarias indeseadas en el sitio protegido. Los grupos protectores adecuados para usar en la preparación de compuestos de la presente invención y técnicas para añadir y retirar dichos grupos protectores son bien conocidos en la técnica e incluyen los que se describen en Protective Groups in Organic

25 Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973 y en T.W. Greene & P.G.M Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 3ª edición, 1999, y 2ª edición 1991.

La presente invención también incluye un procedimiento (denominado alternativamente Procedimiento P) para preparar un compuesto de fórmula P-II:

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que comprende

(A) poner en contacto el iluro de cetosulfoxonio de Fórmula P-I:

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con un catalizador de iridio, rodio o rutenio para obtener el compuesto P-II, en el que:

5 PG es un grupo protector de amina seleccionado del grupo constituido por carbamatos y bencilaminas; RU es CH3 o fenilo; RV es CH3 o fenilo; R4 es H o alquilo C1-4;

10 T' es H, Cl, Br, F, alquilo C1-3, O-alquilo C1-3, OH, NH2, N(H)-alquilo C1-3 o N(-alquilo C1-3)2; p es cero, 1o 2;q es cero, 1o2; y p +q =cero,1, 2o 3.

El compuesto P-II es un intermedio útil en la síntesis de determinados compuestos de la presente invención. El grupo protector de amina PG puede ser un carbamato (es decir, un grupo protector de fórmula 15

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en la que R es alquilo opcionalmente sustituido, alilo, bencilo opcionalmente sustituido o similares) o una bencilamina (es decir, un grupo protector de fórmula

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en la que A es fenilo opcionalmente sustituido). Grupos protectores de carbamato y bencilamina adecuados y procedimientos para su formación y escisión se describen en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. 25 McOmie, Plenum Press, 1973 y en T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 3ª edición, 1999, y 2ª edición, 1991. En una realización, PG es (1) C(-O)-O-(CH2)0-1-CH=CH2, (2) C(=O)-OCH2-fenilo en el que el fenilo está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, halo, -NO2, -alquilo C1-4 o -O-alquilo C1-4, (3) C(=O)-O-alquilo C1-4 o (4) CH2-fenilo en el que el fenilo está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, halo,

30 -NO2, -alquilo C1-4 u -O-alquilo C1-4. En otra realización, PG es t-butiloxi-carbonilo (Boc), aliloxicarbonilo (Alloc), benciloxicarbonilo (Cbz), p-metoxibenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxi-carbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, pclorobenciloxicarbonilo, 2,4-diclorobenciloxicarbonilo o bencilo. En otra realización más, PG es Cbz.

Otras realizaciones del compuesto P-II incluyen las siguientes: (1) RU y RV son ambos CH3 o ambos fenilo; (2a) T' es

35 H o F; (2b) T' es H; (3a) R4 es H o CH3; (3b) R4 es H. Una o más de estas realizaciones (1) a (3) se pueden combinar entre sí y/o con las realizaciones descritas en lo que antecede para PG, en la que cada una de estas combinaciones es una realización aparte del compuesto P-II.

La etapa A implica la inserción intramolecular de NH usando un iluto de cetosulfoxonio para formar un producto

40 cíclico. La química del iluro empleada en la etapa A proporciona un beneficio de seguridad con respecto a procedimientos alternativos que usan diazometano (un riesgo de explosión) para generar una diazocetona que después se puede usar en una ciclación. La etapa A también puede proporcionar un rendimiento alto. Por ejemplo, el rendimiento de la etapa A usando una cantidad catalítica de [Ir(COD)Cl]2 puede ser del 85 % o mayor.

45 La etapa A se realiza en un disolvente orgánico. Los disolventes adecuados incluyen tolueno, diclorometano, DCE, DMF, THF, clorobenceno, 1,2-diclorobenceno, ciclopentilmetil éter, acetonitrilo, IPAc, nitrometano, trifluorometilbenceno, metiletilcetona, DME y 2-MeTHF. Un disolvente preferido es tolueno.

La ciclación en la etapa A se realiza en presencia de un catalizador de Ir, Rh o Ru. Catalizadores adecuados

50 incluyen [Ir(COD)C l]2, RuCl2(PPh3)3, Ru(DMSO)4Cl2, [RuCl2(cimeno)]2, [RuI2(cimeno)]2, (ciclopentadienil)Ru(PPh3)2, (indeno)RuCl(PPh3)2, Rh2(OAc)4, Rh2(TFA)4, (COD)2IrBF4, IrCl(CO)(PPh3)2, IrCl(CO)3, Ir(COD)(acac), Ir(CO)2(acac), metilciclopentadienilo)(COD)Ir, o ((ciclohexil)3P)3(COD)Ir(piridina). Una clase de catalizadores adecuados está constituida por [Ir(COD)Cl]2, RuCl2(PPh3)3, Ru(DMSO)4Cl2, [RuCl2(cimeno)]2, [Rul2(cimeno)]2,

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(ciclopentadienil)Ru(PPh3)2, (indeno)RuCl(PPh3)2, Rh2(OAc)4, Rh2(TFA)4. Un catalizador preferido es [Ir(COD)Cl]2. El catalizador normalmente se emplea en un intervalo de aproximadamente 0,25 a 5 moles por ciento basado en la cantidad del compuesto P-I, y normalmente se emplea más en una cantidad en el intervalo de aproximadamente 0,5 a 2 % molar.

5 La reacción en la etapa A se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 50 ºC a aproximadamente 130 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 70 ºC a aproximadamente 110 ºC.

10 Una realización del procedimiento P comprende la etapa A como se ha descrito anteriormente en la que PG es Cbz, para obtener el Compuesto P-IIa (= Compuesto P-II en el que PG está sustituido con Cbz), y además comprende:

(B) tratar el compuesto P-IIa con un agente reductor para obtener un compuesto de fórmula P-III:

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y

(C) poner en contacto el compuesto P-III con un haluro de sulfonilo de fórmula R^-SO2W en presencia de una base de amina terciaria para obtener un compuesto de fórmula P-IV:

en la que W es halógeno y R^ es (1) fenilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, alquilo C1-4, haloalquilo C1-4, alquilo O-C1-4, O-haloalquilo C1-4, Cl, Br, F, o 25 NO2, (2) alquilo C1-4 o (3) haloalquilo C1-4.

La etapa B se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen tolueno, diclorometano, THF, alcohol isopropílico y acetonitrilo. Disolventes preferidos son tolueno y THF.

30 Agentes reductores adecuados en la etapa B incluyen LiBH4, NaBH4, KBH4, (Me4 N)BH4, LiAlH(O-t-Bu)3, LiBH(OEt)3, y Al(O-i-Pr)3/IPA. Una clase de agentes reductores adecuados está constituida por LiBH4, NaBH4, y KBH4. Agentes reductores preferidos incluyen LiBH4 y NaBH4. Normalmente, el agente reductor se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 2 equivalentes por equivalente del compuesto P-IIa, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,3 equivalentes.

35 La reacción en la etapa B se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 20 ºC a aproximadamente 40 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 15 ºC a aproximadamente 0 ºC.

40 La etapa C se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen diclorometano, THF, acetato de etilo y MTBE. Un disolvente preferido es diclorometano.

Ejemplos de haluros de sulfonilo adecuados para usar en la etapa C incluyen cloruro de metanosulfonilo, cloruro de clorometanosulfonilo, cloruro de diclorometanosulfonilo, cloruro de bencenosulfonilo, cloruro de p45 trifluorometilbencenosulfonilo, cloruro de p-toluenosulfonilo, cloruro de p-bromobecenosulfonilo, cloruro de pfluorobencenosulfonilo y cloruro de p-metoxibencenosulfonilo. Una clase de haluros de sulfonilo adecuados está constituida por cloruro de clorometanosulfonilo, cloruro de p-trifluorometilbencenosulfonilo y cloruro de pbromobecenosulfonilo. Un haluro de sulfonilo preferido es cloruro de p-trifluorometilbencenosulfonilo. El haluro de sulfonilo normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 2

50 equivalentes por equivalente del compuesto P-III, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,5 equivalentes (por ejemplo, aproximadamente 1,3 equivalentes).

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La amina terciaria de la etapa C es, adecuadamente, un atrialquilamina C1-4. Una clase de aminas adecuadas consiste en TEA, DIPEA y dietilisopropilamina. DIPEA es una base preferida. La base normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 equivalentes por equivalente del compuesto P-III, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1,1 a aproximadamente 2

5 equivalentes (por ejemplo, aproximadamente 1,8 equivalentes).

La reacción en la etapa C se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 0 ºC a aproximadamente 40 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 10 ºC a aproximadamente 25 ºC.

10 Otra realización del procedimiento P comprende las etapas A, B y C como se ha descrito anteriormente, en la que PG es Cbz, para obtener el Compuesto P-IV y además comprende:

(D) poner en contacto el compuesto P-IV con N-Boc-O-bencilhidroxilamina en presencia de una base para 15 obtener un compuesto de fórmula P-V:

imagen15

y

(E) tratar el compuesto P-V con un ácido para obtener un compuesto de la Fórmula P-VI:

imagen16

25 La etapa D se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen DMAC, DMF, NMP, THF y DME. Un disolvente preferido es NMP.

Bases adecuadas en la etapa D incluyen t-butóxido de Li, t-butóxido de Na, t-butóxido de K, carbonato de cesio, KHMDS y NaHMDS Una clase de bases adecuadas está constituida por t-butóxido de Li, t-butóxido de Na y t

30 butóxido de K. Una base preferida es t-butóxido de K. La base normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 2 equivalentes por equivalente del compuesto P-IV, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,5 equivalentes (por ejemplo, aproximadamente 1,3 equivalentes).

35 La N-Boc-O-bencilhidroxilamina normalmente se usa en la etapa D en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 2 equivalentes por equivalente del compuesto P-IV, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,5 equivalentes (por ejemplo, aproximadamente 1,3 equivalentes).

40 La reacción en la etapa D se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 30 ºC a aproximadamente 60 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 35 ºC a aproximadamente 45 ºC.

La etapa E se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen DCM y acetonitrilo. 45

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Ácidos adecuados en la etapa E incluyen ácidos sulfónicos. Ácidos adecuados en la etapa E incluyen ácido metanosulfónico, ácido trifluorometanosulfónico, ácido clorometanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido ptoluenosulfónico, ácido p-bromobecenosulfónico, ácido p-metoxibecenosulfónico y ácido ptrifluorometilbencenosulfónico. La clase A de ácidos adecuados está constituida por ácido p-toluenosulfónico y ácido

5 metanosulfónico. Un ácido preferido es el ácido metanosulfónico. Normalmente, el ácido se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 equivalentes por equivalente del compuesto P-V, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 equivalentes.

La reacción en la etapa E se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente

10 25 ºC a aproximadamente 60 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 30 ºC a aproximadamente 40 ºC.

Otra realización del procedimiento P comprende las etapas A, B, C, D y E como se ha descrito anteriormente, en la que PG es Cbz, para obtener el Compuesto P-VI y además comprende:

15

(F) poner en contacto el compuesto P-VI con fosgeno, difosgeno o trifosgeno en presencia de una base amina terciaria y después añadir una solución acuosa de ácido para obtener un compuesto de fórmula P-VII:

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y

25: (G) poner en contacto el compuesto P-VII con una fuente de hidrógeno en presencia de un catalizador de hidrogenolisis y en presencia de un protector productor de Boc para obtener un compuesto de fórmula P-VIII:

imagen18

La etapa F se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen DCM y acetonitrilo. Un disolvente preferido es DCM.

30 Ácidos adecuados incluidos en la etapa F incluyen ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético y ácido fosfórico. Un ácido preferido es el ácido fosfórico. El ácido normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 equivalentes por equivalente del compuesto P-VI, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 3 a aproximadamente 5 equivalentes (por

35 ejemplo, aproximadamente 3,2 equivalentes).

La amina terciaria de la etapa F es, adecuadamente, una trialquilamina C1-4. Una clase de aminas adecuadas consiste en TEA, DIPEA y dietilisopropilamina. DIPEA es una base preferida. La base normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 equivalentes por equivalente del compuesto

40 P-VI, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 3 a aproximadamente 5 equivalentes (por ejemplo, aproximadamente 3,2 equivalentes).

El trifosgeno, el difosgeno o el fosgeno normalmente se usa en la etapa F en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 0,5 a 1 equivalentes por equivalente del compuesto P-VI, y se usa más normalmente en una 45 cantidad en un intervalo de aproximadamente 0,7 a aproximadamente 1 equivalentes (por ejemplo,

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aproximadamente 0,8 equivalentes). El trifosgeno es el preferido sobre difosgeno y fosgeno.

El contacto del compuesto P-VI con trifosgeno, difosgeno o fosgeno en la etapa F puede realizarse adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente -15 ºC a aproximadamente 0 ºC y normalmente se realiza a

5 una temperatura en el intervalo de aproximadamente 35 ºC a aproximadamente 45 ºC. La posterior adición y reacción con el ácido se pueden realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 0 ºC a aproximadamente 25 ºC.

La etapa G se realiza en un disolvente orgánico. Disolventes adecuados incluyen acetato de etilo, DMAC, t-butanol y 10 THF. Un disolvente preferido es THF.

Agentes productores de Boc adecuados en la etapa G incluyen carbonato de di-t-butilo, cloroformiato de t-butilo, BOC-ON y BOC-OSN. Un agente preferido es carbonato de di-t-butilo. El agente normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 0,9 a aproximadamente 3 equivalentes por equivalente del compuesto

15 P-VII, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 0,9 a aproximadamente 1,5 equivalentes (por ejemplo, de aproximadamente 0,95 a aproximadamente 1,1 equivalentes).

La fuente de hidrógeno en la etapa G normalmente es gas hidrógeno, opcionalmente mezclado con un gas vehículo que es químicamente inerte en las condiciones de reacción usadas en la etapa G (por ejemplo, nitrógeno o un gas

20 noble tal como helio o argón). La presión no es un aspecto crucial en la etapa G, aunque las presiones atmosférica y superpatmosférica tienden a ser convenientes. Normalmente, la presión es de al menos aproximadamente 2 psig (aproximadamente 115 kPa). La fuente de hidrógeno puede ser, alternativamente, una molécula de transferencia de hidrógeno tal como formiato amónico, ciclohexeno o ciclohexadieno.

25 La captación de hidrógeno no es un parámetro crítico del procedimiento, aunque normalmente se usa al menos una cantidad estequiométrica del gas hidrógeno u otra fuente de hidrógeno.

El catalizador de hidrogenolisis comprende un metal del grupo 8 soportado o no o un compuesto soportado o no soportado, sal o complejo de un metal del grupo 8. El catalizador normalmente usado en la etapa G es metal Pd 30 soportado o no soportado o un compuesto de Pd soportado o no soportado, o una sal o complejo del mismo. Los soportes de catalizadores adecuados incluyen carbón, sílice, alúmina, carburo de silicio, fluoruro de aluminio y fluoruro cálcico. Una clase de catalizadores adecuados está constituida por negro de Pd (es decir, partículas de paladio metálico), Pd(OH)2, y Pd/C (es decir, paladio sobre un soporte de carbón). El Pd/C es un catalizador de hidrogenolisis preferido. El catalizador normalmente se usa en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 5 a

35 aproximadamente 20 % en peso respecto a la cantidad de compuesto VI, y se usa más normalmente en una cantidad en un intervalo de aproximadamente 5 a aproximadamente 15 % en peso (por ejemplo, aproximadamente 10 % en peso).

La reacción en la etapa G se puede realizar adecuadamente a una temperatura en el intervalo de aproximadamente

40 10 ºC a aproximadamente 50 ºC y normalmente se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 15 ºC a aproximadamente 30 ºC.

Una subrealización del procedimiento P comprende la etapa A como se ha descrito en la que el compuesto de fórmula P-II es el compuesto p-2:

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en el que la etapa A comprende:

(A) poner en contacto el iluro de cetosulfoxonio p-1

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con un catalizador seleccionado del grupo constituido por el dímero de cloruro de ciclooctadieno-iridio, Ru(DMSO)4Cl2, y Rh2(TFA)4, para obtener el compuesto P-2

5 Otra subrealización del procedimiento P comprende la etapa A como se ha descrito en las subrealizaciones anteriores para obtener el compuesto p-2, y que además comprende

(B) tratar el compuesto p-2 con un agente reductor seleccionado del grupo constituido por borohidruro de Li, 10 borohidruro de Na y borohidruro de K para obtener el compuesto p-3.

imagen21

y

(C) poner en contacto el compuesto p-3 con un haluro de sulfonilo de fórmula R^-SO2W en presencia de una trialquilamina C1-4 par a obtener un compuesto de fórmula p-4:

imagen22

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en la que W es cloro; y

R^ is metilo, clorometilo, fenilo, 4-bromofenilo, 4-trifluorometilfenilo o 4-metilfenilo.

Otra subrealización del procedimiento P comprende las etapas A, B y C como se ha descrito en las subrealizaciones 25 anteriores para obtener el compuesto p-4, y que además comprende

(D) poner en contacto el compuesto p-4 con N-Boc-O-bencilhidroxilamina en presencia de una base seleccionada del grupo constituido por t-butóxido de Li, t-butóxido de Na, t-butóxido de K y amilóxido de K para obtener el compuesto p-5:

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y

(E) tratar el compuesto p-5 con un ácido seleccionado del grupo constituido por ácido metanosufónico, ácido clorometanosulfónico, ácido p-toluenosulfónico para obtener un compuesto de fórmula p-6:

imagen24

Otra subrealización del procedimiento P comprende las etapas A, B, C, D y E como se descrito en las subrealizaciones anteriores con el fin de obtener el compuesto p-6, y que además comprende

(F) poner en contacto el compuesto P-6 con fosgeno en presencia de una base trialquilamina C1-4 y después añadir una solución acuosa de ácido para obtener un compuesto de fórmula p-7:

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15 y

(G) poner en contacto el compuesto p-7 con hidrógeno en presencia de un catalizador de Pd y un agente

productor de Boc seleccionado del grupo constituido por carbonato de di-t-butilo y BOC-ON para obtener el 20 compuesto p-8:

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Los disolventes, agentes, catalizadores, cantidades de reacción, temperaturas de reacción etc. descritos

25 anteriormente para las etapas A a F en el procedimiento P que conducen al compuesto P-VIII y sus realizaciones aplicables a las etapas A a F indicas en las subrealizaciones anteriores que conducen al compuesto p-8, a excepción de cuando se planteen limitaciones expresas sobre una o más de estas variables en las subrealizaciones. Por ejemplo, la subrealización del procedimiento P que describe la preparación del compuesto p-2 a partir del compuesto p-1 restringe el catalizador usado en la etapa A a un grupo específico de catalizadores de Ir, Ru y Rh, De acuerdo

30 con esto, la divulgación más amplia de catalizadores adecuados proporcionados en el procedimiento P como se ha indicado inicialmente en lo que antecede no se aplica a esta subrealización.

Debe entenderse que los disolventes, agentes, catalizadores, cantidades de reacción, temperaturas de reacción etc. descritos anteriormente con respecto al procedimiento P y a sus realizaciones y subrealizaciones son solo para 35 ilustrar, no limitar, el alcance del procedimiento. Por ejemplo, el disolvente orgánico usado en cualquiera de las etapas A a G puede ser cualquier sustancia orgánica que en las condiciones de reacción usadas en la etapa de interés en la fase líquida es químicamente inerte y se divulgarán, suspender y/l dispersar los reactantes y cualquier reactivo para poner los reactantes y los reactivos en contacto y permitir que proceda la reacción. Consideraciones similares se aplican a la elección de las bases, catalizadores y otros reactivos usados en las etapas del

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procedimiento. Además, cada una de las etapas se puede realizar a cualquier temperatura a la cual la reacción que forma el producto deseado puede proceder de un modo detectable. Los reactantes, catalizadores y reactivos en una etapa dada se pueden usar en cualquier cantidad que tenga como resultado la formación de al menos algo del producto deseado. Por supuesto, una elevada conversión (por ejemplo, al menos aproximadamente el 60 % y 5 preferentemente mayor) de los materiales de partida en combinación con un rendimiento elevado (por ejemplo, al menos aproximadamente el 5 % y preferentemente mayor) de los productos deseados normalmente es el objetivo de cada etapa y se prefiere la elección de disolventes, agentes, catalizadores, cantidades de reacción, temperaturas etc. que pueden proporcionar conversiones y rendimientos del producto relativamente buenos, y son más preferidas las elecciones que pueden proporcionar conversiones y rendimientos óptimos. Los disolventes, agentes,

10 catalizadores, cantidades de reacción, temperaturas de reacción etc. descritos anteriormente con respecto al procedimiento P y a sus realizaciones y subrealizaciones pueden proporcionar conversiones y rendimientos de buenos a óptimos.

Los siguientes ejemplos se proporcionan únicamente para ilustrar la invención y su práctica. 15 EJEMPLO PREPARATIVO 1

Ácido (4R,6S)-3-(Benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxílico

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Etapa 1: (2S,4S)-4-hidroxipirrolidin-1,2-dicarboxilato de 2-alil-1-terc-butilo

25 A una solución de cis-4-hidroxi-l-prolina (265 mg, 2,02 mmol) en DMF (5 ml) e hidróxido sódico acuoso (2 ml, 2 mmol) se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (0,532 ml, 2,291 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió bromuro de alilo (0,18 ml, 2,08 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con HCl acuoso

30 diluido, agua, bicarbonato sódico saturado y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío, dando el compuesto del título en forma de un aceite transparente.

Etapa 2: Sal clorhidrato de (4S)-4-hidroxi-l-prolinato de alilo

35 A una solución de (2S,4S)-4-hidroxipirrolidina-1,2-dicarboxilato de 2-alil-1-terc-butilo (1,05 g, 4,87 mmol) en diclorometano (20 ml) se añadió ácido clorhídrico (solución 4,2 M en dioxano, 5 ml, 21 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas, después se concentró al vacío, dando el compuesto del título.

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Etapa 3: (4S)-4-hidroxi-1-(trifluoroacetil)-l-prolinato de alilo

A la sal clorhidrato de (4S)-4-hidroxi-l-prolinato de alilo (1,011 g, 4,87 mmol) se añadió THF (18 ml). La suspensión resultante se enfrió hasta 0 ºC y se añadió trietilamina (3,0 ml, 21,5 mmol) seguida de anhídrido trifluoroacético (2 ml, 14,2 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0 ºC durante 30 minutos, después se añadió agua. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, después se diluyó con acetato de etilo y se lavó con una solución de HCl 1 N, solución de bicarbonato sódico diluido, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. Con el fin de hidrolizar todo éter de triofluoroacetato que se pueda haber formado como subproducto, el residuo se suspendió en tetrahidrofurano (11,5 ml) y agua (11,5 ml). La solución turbia resultante se agitó a temperatura ambiente durante 7 horas. La solución transparente resultante se diluyó con acetato de etilo y se lavó con una solución de bicarbonato sódico al 5 % y salmuera, después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, se concentró al vacío, dando el producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice, dando el compuesto del título como un aceite marrón claro.

Etapa 4: (4R)-4-[(benciloxi)amino]-1-(trifluoroacetil)-l-prolinato de alilo

Una solución de (4S)-4-hidroxi-1-(trifluoroacetil)-l-prolinato de alilo (844 mg, 3,16 mmol) en acetonitrilo (16 ml) se enfrió hasta -10 ºC y se añadió 2,6-lutidina (0,62 ml, 5,32 mmol), seguido de anhídrido trifluorometanosulfónico (0,85 ml, 5,15 mmol). Tras la adición se dejó calentar la temperatura hasta 0 ºC. La mezcla de reacción se agitó a 0 ºC durante 1 hora, después se añadió O-bencilhidroxilamina (1 ml, 8,667 mmol) seguido de 2,6-lutidina (0,62 ml, 5,32 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó después con acetato de etilo y se lavó con una solución de bicarbonato sódico al 5 % y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo oleoso marrón (2,57 g) se sometió a cromatografía en gel de sílice que eluyó inicialmente con una proporción de diclorometano:acetato de etilo de 95:5 y, por último, con diclorometano:acetato de etilo 80:20, dando el compuesto del título como un sólido amarillo claro.

Etapa 5: (4R)-4-[(benciloxi)amino]-l-prolinato de alilo

Una solución de (4R)-4-[(benciloxi)amino]-1-(trifluoroacetil)-l-prolinato de alilo (1,19 g, 3,20 mmol) en metanol (9,5 ml) se añadió lentamente a una solución de borohidruro sódico (312 mg, 8,25 mmol) en metanol (9,5 ml) a -10 ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta 0 ºC lentamente y después se agitó a 0 ºC durante 3 horas. Se añadió borohidruro sódico adicional (0,29 g, 7,67 mmol) a 0 ºC y la mezcla de reacción se agitó a 0 ºC durante tres horas, después se añadió gel de sílice (para preabsorber el producto bruto para cromatografía) y el disolvente se eliminó al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con diclorometano:acetato de etilo:metanol 15:9:1, dando el compuesto del título como un aceite incoloro.

Etapa 6 (2S,4R)-4-[(benciloxi)amino]pirrolidina-1,2-dicarboxilato de 2-alil-1-terc-butilo

Una solución de (4R)-4-[(benciloxi)amino]-l-prolinato de alilo (1,2 g, 4,34 mmol) en diclorometano (29 ml) se añadió a dicarbonato de di-terc-butilo (1,1 ml, 4,34 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con hexano, después con hexano:acetato de etilo a 4:1, dando el compuesto del título como una goma transparente.

Etapa 7: (2S,4R)-4-[(benciloxi)[(triclorometoxi)carbonil]amino}-pirrolidina-1,2-dicarboxilato de 2-alil-1-terc-butilo

A una solución de (2S,4R)-4-[(benciloxi)amino]pirrolidina-1,2-dicarboxilato de alil-1-terc-butilo (261 mg, 0,745 mmol) y trietilamina (0,13 ml, 0,933 mmol) en diclorometano (4 ml) a 0 ºC se añadió difosgeno (0,1 ml, 0,804 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 ºC durante 4 horas y después se dejó reposar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo primero con hexano, después con hexano:acetato de etilo a 4:1, dando el compuesto del título como una goma transparente.

Etapa 8: (4R,6S)-3-(benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxilato de alilo

A una solución de (2S,4R)-4-{(benciloxi)[(triclorometoxi)carbonil]amino}-pirrolidina-1,2-dicarboxilato de 2-alil-1-tercbutilo (80 mg, 1,49 mmol) se añadió ácido clorhídrico (solución 4,2 M en dioxano, 16 ml, 70,4 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche y el disolvente se eliminó al vacío. Al residuo se añadió diclorometano (82 ml), seguido de trietilamina (0,62 ml, 4,45 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche y el disolvente se eliminó al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice (sistema de cromatografía ISCO) usando un gradiente de hexano durante 2 minutos a una proporción de 7:3· de hexano:acetato de etilo durante 6 minutos, se mantuvo durante 3 minutos y se dejó ir hasta 100 % de EtOAc durante 8 minutos, dando el compuesto del título como un aceite transparente.

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Etapa 9: Ácido (4R,6S)-3-(benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxílico

A una solución de (4R,6S)-3-(benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxilato de alilo (459 mg, 1,52 mmol), complejo de 1,1'-bis(difenil-fosfino)ferroceno-dicloruro de paladio(II) diclorometano (116 mg, 0,14 mmol) en

5 tetrahidrofurano (7,6 ml) se añadió 2-etilhexanoato sódico (0.5 M en acetato de etilo, 2,5 ml, 1,25 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas (se formó un precipitado). Se añadió acetona (37 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y después se centrifugó la muestra. El sólido se recogió y se lavó con acetona y éter y se secó al vacío, dando el compuesto del título en forma de un sólido marrón. CL/EM (ionización positiva) m/e (M+H).

10 EJEMPLO 1

(2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

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Etapa 1: 4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo

20 A una solución de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (0,141 g, 0,509 mmol) (nota: este intermedio se divulga en el documento US 7,112,592 Ejemplo 32b) en diclorometano seco (3 ml) se añadió 4-amino-1-BOC-piperidina (0,1532 g, 0,765 mmol), trietilamina (0,16 ml, 1,148 mmol), HOBT (0,1145 g, 0,748 mmol) y EDC (0,1455 g, 0,759 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente en nitrógeno. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó

25 mediante HPLC (columna 30X100 mm Waters Sunfire; 5 micrómetros; 35 ml/minuto; 210 nM; 15 % a 100 % CH3CN

+ 0.05 % de TFA/agua + 0,05 % de TFA durante 15 minutos; el producto deseado eluye a 50 % de CH3CN + 0,05 % de TFA/agua + 0,05 % de TFA), dando el compuesto del título.

Etapa 2: 4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de terc30 butilo

A una solución de 4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1carboxilato de terc-butilo (151 mg, 0,33 mmol) en metanol (3 ml) se añadió paladio sobre carbón (30,5 mg; 10 % Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 3 horas. El análisis por TLC mostró que la

35 reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró a través de un microfiltro y el filtrado se concentró al vacío, dando el compuesto del título en forma de un aceite amarillo.

Etapa 3: N,N,N-ributilbutan-1-aminio [({(2S,5R)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-6il}oxi)sulfonil]oxidamida

40 A una solución de 4-({[(2S,5R)6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (36 mg, 0,098 mmol) en piridina (0,5 ml) se añadió complejo de trióxido de azufre-piridina (70 mg; 0,440 mmol). La mezcla se agitó en nitrógeno a temperatura ambiente durante la noche. El análisis CL/EM mostró una reacción incompleta. La reacción se filtró y los sólidos se lavaron con piridina seca y diclorometano. El filtrado se

45 recogió y se concentró al vacío. El residuo se volvió a disolver en piridina seca (0,75 ml) y se añadió complejo

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trióxido de azufre-piridina (31 mg) seguido de tamices moleculares activados de 4A. La reacción se agitó durante 4 horas pero en la CL/EM se vieron pocos cambios. La reacción se filtró y los tamices se lavaron con diclorometano. El filtrado se concentró al vacío y se suspendió en una solución de dihidrógenofosfato potásico acuoso saturado La mezcla resultante se lavó con acetato de etilo. La capa acuosa se recogió y se añadió hidrógenosulfato de tetrabutilamonio (0,034 mg, 0,098 mmol). La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se extrajo con EtOAc (4X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron al vacío, dando el compuesto del título como un aceite amarillo.

Etapa 4: (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida:

A una solución de N,N,N-tributilbutan-1-aminio [({(2S,5R)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,6diazabiciclo[3.2.1]oct-6-il}oxi)sulfonil]oxidamida (22,4 mg, 0,050 mmol) en diclorometano anhidro (2 ml) a 0 ºC en nitrógeno se añadió ácido trifluoroacético (0,1 ml, 1,298 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora, después se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter y el precipitado blanco resultante se recogió mediante centrifugación. El sólido se lavó con éter (2 veces para dar el compuesto del título contaminado con hidrogenosulfato de tetrabutilamonio y piridina). El sólido se trituró con acetonitrilo (2X) y el sólido blanco se recogió mediante centrifugación, dando el compuesto del título como un sólido blanco. CL-EM (ionización negativa) m/e 347 (M-H); CL-EM (ionización positiva) m/e 349 (M+H), 381 (M+Na); RMN de 1H (600 MHz, D2O; sin referencia) (8, ppm) 4,19 (1H, d a, J = 2,5 Hz), 3,98-4,06 (2H, m), 3,47 (2H, d a, J =13 Hz), 3,31 (1H, d a, J = 12 Hz), 3,12 (2H, dd a, J =13, 3 Hz), 3,06 (1H, d, J =12 Hz), 2,04-2,21 (m, 4H), 1,87-1,95 (1H, m), 1,72-1,83 (m, 3H).

EJEMPLO 1A

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Etapa 1: 4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo:

A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (1,484 g, 5,37 mmol) en diclorometano seco (60 ml) se añadió trietilamina (1,88 ml, 13,49 mmol), yoduro de 2-cloro-1metilpiridinio (1,60 g, 6,26 mmol) y 4-amino-1-BOC-piperidina (1,30 g, 6,49 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente en nitrógeno. Después, la reacción se calentó a 50 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice en una columna Isco Combiflash (40 g de gel de sílice, 40 ml/min, 254 nM, 15 % a 100 % de EtOAc/ hexano con 14 volúmenes de la columna, después 100 % de EtOAc con 4 volúmenes de la columna; el compuesto del título eluyó a 65 % de acetato de etilo/hexano), dando el compuesto del título como un sólido naranja claro.

Etapa 2: 4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo:

A una solución del producto de la etapa 1 (1,81 g, 3,95 mmol) en metanol (50,6 ml) se añadió paladio sobre carbón (394 mg, 10 de Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo un globo de hidrógeno durante la noche. El análisis CL/EM indicó que la reacción no se había completado. A la reacción se añadió ácido acético (6 gotas) y catalizador adicional (159 mg de 10 % Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 90 minutos adicionales. A la reacción se añadió catalizador adicional (0,2085 g de 10 % de Pd/C) y se continuó agitando en hidrógeno durante 2,5 horas adicionales, momento en el cual se consideró completa la reacción por análisis por CL/EM se. La reacción se filtró a través de una lecho corto de celite y el sólido recogido se lavó bien con MeOH. El filtrado se concentró al vacío, dando el compuesto del título en forma de un aceite incoloro, que se usó en la

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siguiente etapa sin purificar.

Etapa 3: 4-({[(2S,5R)-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo:

A una solución del producto de la etapa 2 (1,455 g, 3,95; rendimiento teórico de la etapa 2) en piridina seca (30 ml) se añadió complejo de trióxido de azufre-piridina (3, g, 20,11 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla espesa resultante se agitó durante el fin de semana. La reacción se filtró y los sólidos insolubles blancos se lavaron bien con diclorometano. El filtrado se concentró al vacío. Además el residuo se sometió a destilación azeotrópica con tolueno para eliminar el exceso de piridina, dando el compuesto del título, que se usó en la siguiente etapa sin purificar.

Etapa 4: (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

A una mezcla del producto de la etapa 3 (1,772 g, 3,95 mmol; rendimiento teórico de la etapa 3) en diclorometano seco (30 ml) a 0 ºC en nitrógeno se añadió lentamente ácido trifluoroacético (6,1 ml, 79 mmol). Inmediatamente, la reacción se convirtió en una solución. Después de 1 hora, a la reacción se añadió ácido trifluoroacético adicional (8 ml). La reacción se agitó a 0 ºC hasta que se consideró completa por análisis por CL/EM, después se concentró al vacío. El residuo se trituró con éter (3x) para eliminar el exceso de TFA y las impurezas orgánicas. El sólido insoluble blanco resultante se recogió mediante centrifugación, se secó al vacío, después se purificó mediante HPLC preparativa (columna 250X21,2 mm Phenomenex Synergi Polar-RP 80A; 10 micrómetros; 35 ml/min.; 210 nM; 0 % a 30 % de metanol/agua durante 15 minutos; el compuesto del título eluyó a 10 % de metanol/agua). Las fracciones que contenían el compuesto del título se combinaron y liofilizaron durante la noche, dando el compuesto del título como un sólido blanco. CL/EM (ionización negativa) m/e 347 (M-H).

EJEMPLO 1C

Etapa 1: 4-[(terc-butoxicarbonil)amino]piperidin-1-carboxilato de bencilo

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4-(N-BOC amino) piperidina (17 kg, 84,88 mol) de disolvió en DCM (90 kg), se añadió trietilamina (10,14 kg, 100,16 mol) y la solución resultante se enfrió hasta 0-5 ºC. Se añadió cloroformiato de bencilo (16,51 kg, 96,76 mol) durante 45 minutos manteniendo la temperatura a < 25 ºC, tras lo cual la solución se envejeció durante 30 minutos a 20 ºC. Después se añadió HCl 2 M (61 kg, 118,13 mol) durante 10 minutos manteniendo la temperatura a <25 ºC. La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se dejó de agitar y se dejó que se separaran las fases. Después, las fases se separaron entre sí y la fase orgánica se destiló al vacío hasta un volumen de 35 l. Se añadió acetato de isopropilo (89 kg) y el lote se concentró mediante destilación al vacío a menos de 35 ºC hasta un volumen de ~ 50 l para cristalizar el producto del título. Después se añadió heptano (47 kg) durante 10 minutos y la suspensión resultante se enfrió y envejeció a 20 ºC durante 20 minutos, tras lo cual la suspensión envejecida se filtró, se lavó con heptano (17 kg), y se secó con barrido de N2 en el filtro, dando el producto de título como un sólido blanco (24,7 kg, 87 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,33 (5H, m), 5,13 (2H, s), 4,47 (1H, m), 4,11 (2H, m), 3,61 (1 H, m), 2,93 (2H, m), 1,94 (2H, m), 1,45 (9H, s) y 1,30 (2H, m).

Etapa 2: 4-aminopiperidina-1-carboxilato de bencilo

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4-(N-BOC amino)-CBz piperidina (24,4 kg 73,42 mol), THF (65 kg) y HCl 5 M (23,0 kg, 110,13 mol) se combinaron y calentaron a 30-35 ºC durante ~2 horas y después a 55 ºC durante la noche. Después de enfriar la mezcla de reacción hasta 10 ºC, se añadió diclorometano (97 kg) y NaOH 10 M (7,97 kg, 145,12 mol) manteniendo la temperatura a < 25 ºC. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con 25 % en peso de la solución de NaCl (27,5 kg). La fase orgánica lavada se destiló a presión atmosférica hasta un volumen de 70 l. Después se añadió diclorometano (162 kg) y la mezcla se concentró mediante destilación hasta un volumen de 120 l, dando el producto del título como una solución en DCM (17,2 kg, 100 %.). RMN de 1H (CDCl3) 7,33 (5H, m), 5,14 (2H, s), 4,14 (2 H, s a), 2,87 (3H, m), 1,83 (2H, m), 1,66 (3H, m) y 1,28 (2H, m).

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Etapa 3: 4-{[1-(terc-butoxicarbonil)-5-oxo-l-prolil]amino}piperidin-1-carboxilato de bencilo

1-carboxilato de bencilo (17,1 kg en diclorometano, volumen 120 l, 73 mol) y diclorometano (80 kg) y se envejecieron a 20 ºC durante 10 minutos para formar una suspensión espesa. Se añadió clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3etilcarbodiimida (16,8 kg, 87.6 mol) en porciones a la suspensión manteniendo la temperatura a <30 ºC. Después, la suspensión se envejeció a 25 ºC durante 30 minutos, tras los cuales se añadió ácido clorhídrico 1 M (94 kg, 85,5 mol) Las fases se dejaron reposar durante la noche y después se separaron, y la fase orgánica se lavó después con carbonato sódico 2 M (109 kg) y se cambió el disolvente a acetonitrilo, volumen final 50 ml. Se añadió tolueno (88,2 kg) y el lote se enfrió hasta 0 ºC. Se añadió al lote dicarbonato de di-terc-butilo (18,32 kg, 83,95 mol) y 4dimetilaminopiridina (223 g, 1,83 mol) y la solución se calentó hasta 25 ºC y se envejeció durante la noche. Después, el lote se concentró mediante destilación hasta un volumen de 80 ml. Se añadió tolueno adicional (88,2 kg) y el lote se concentró adicionalmente hasta 50 ml. Se añadió acetato de isopropilo (30 kg) y la suspensión resultante se envejeció durante 10 minutos. Después, gota a gota, se añadió a la suspensión heptano (70 kg) durante 30 minutos y la suspensión se envejeció durante 30 minutos, después se filtró, se lavó con acetato de isopropilo / heptano (22,5 kg/17,4 kg) y después y se secó al vacío, dando el producto de título como un sólido blanco (27,5 kg, 95,5 % en peso, 82 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,33 (5H, m), 6,19 (1H, m), 5,13 (2H, s), 4,48 (1H, dd), 4,15 (2H, m), 3,97 (1H, m), 2,95 (2H, m), 2,73 (1H, d tr), 4,65 (1H, m), 2,61 (1H, m), 2,18 (2H, m), 1,45 (9H, s) y 1,30 (2H, m).

Etapa 4: 4-({N-(terc-butoxicarbonil)-6-[dimetil(óxido)-λ4-sulfaniliden]-5-oxo-l-norleucil}amino)piperidin-1-carboxilato de bencilo

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A una solución de yoduro de trimetilsulfoxonio (18,79 kg, 85,38 mol) en DMF (115 kg) a 15-25 ºC se añadió tercbutóxido de potasio (9,58 kg, 85,38 mol) en tres porciones. La suspensión se envejeció a 20-25 ºC durante una hora, seguido de la adición del material de partida 4-{[1-(terc-butoxicarbonil)-5-oxo-l-prolil]amino}piperidin-1-carboxilato de bencilo (27,17 kg, 60,99 mol) en cuatro porciones durante 30 minutos, después se envejeció durante 30 minutos a 20 ºC. Se añadieron agua (54 kg) y material de siembra (10 g) (nota: la cristalización se producirá sin el uso de siembra, pero es preferible el uso de siembra ya que normalmente proporciona un producto más consistente y mejor rendimiento) y la suspensión se envejeció a 20 ºC durante 30 minutos. Se añadió solución de NaCl al 10 % (543 kg) durante 1 hora manteniendo la temperatura a o por debajo de 25 ºC. La suspensión se enfrió después hasta 3 ºC durante 1 hora y se envejeció durante la noche a 3 ºC, tras lo cual la suspensión se filtró. Se lavó tres veces con agua (136 l, 82 l, 82 l) y se secó al vacío a 55 ºC, dando el producto del título como un sólido amarillo (32,8 kg, 83 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,49 (1H, s a), 7,33 (5H, m), 5,83 (1H, s a), 5,13 (2H, s), 4,48 (1H, s), 4,08 (3H, m), 3,96 (1H, m), 3,45 (3H, s), 3,41 (3H, s), 3,03 (2H, m), 2,41 (1H, m), 2,24 (1H, m), 1,94 (4H, m), 1,68 (5H, s) y 1,44 (12H, s),).

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Etapa 5: (2S)-2-[({1-[(benciloxi)carbonil]piperidin-4-il}amino)carbonil]-5-oxopiperidin-1-carboxilato de terc-butilo

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5 El dímero de cloruro de ciclooctadieno-iridio (336,3 g, 0,502 mol) en tolueno (318 kg) se desoxigenó desgasificando usando 3 ciclos de vacío, seguido de burbujeo en subsuperficie con nitrógeno durante 30 minutos, tras lo cual la solución se enfrió hasta 105 ºC. Una solución del material de partida de iluro (27,0 kg, 50,22 mol) en DMF (128 kg) a 25 ºC se desoxigenó desgasificando con 3 ciclos de vacío seguido por burbujeo en la subsuperficie con nitrógeno durante 30 minutos. La solución desgasificada se añadió después a la solución de catalizador caliente durante 30

10 minutos manteniendo la temperatura de la mezcla de reacción por encima de 102 ºC. La mezcla de reacción se envejeció a 105 ºC durante 40 minutos y después se enfrió hasta 20 ºC. La mezcla de reacción orgánica se lavó dos veces con la solución de cloruro de litio al 5 % en peso (81 l x 2), después con agua (81 l). Las fases orgánicas y acuosas se separaron y después se eliminó el tolueno de la fase orgánica mediante destilación al vacío hasta un volumen de 130 l y la fase destilada se almacenó refrigerada y después se usó directamente en la siguiente etapa,

15 Etapa 6: (2S,5S)-2-[({1-[(benciloxi)carbonil]piperidin-4-il}amino)carbonil]-5-hidroxipiperidin-1-carboxilato de terc-butilo

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20 Una solución de borohidruro de litio (22,.2 kg de solución 4,1 M en THF, 101,9 mol) se diluyó en THF (290 kg), tras lo cual se añadió metanol (3,26 kg) a 20 ºC y la solución envejeció durante 30 minutos antes de enfriar hasta -4 ºC. A la solución de borohidruro envejecida se añadió una solución de la cetona en tolueno (46,8 kg en solución ~ 4 ml/g en tolueno, 101,9 mol) manteniendo la temperatura de la reacción a < 0 ºC. La reacción se inactivó con una solución de ácido acético (30,6 kg, 509,5 mol, se disolvió en 183 kg de metanol), manteniendo la temperatura a < 20 ºC. La

25 mezcla de reacción inactivada se envejeció después a 20 ºC durante 1 hora, tras lo cual se concentró al vacío hasta un volumen de 184 l. Se añadió metanol (203 kg) y el lote se destiló al vacío hasta un volumen de 184 ml, Se añadió isopropanol (294 kg) y el lote se destiló al vacío hasta un volumen de 184 l, manteniendo la temperatura interna a ~30 ºC. Se añadieron cristales de siembra (5 g) (nota la cristalización se producirá sin siembra, pero es preferible el uso de siembra ya que normalmente proporciona un producto más consistente y mejor rendimiento) y el lote se

30 envejeció durante 1 hora para formar un lecho de semillas. Después, se añadió agua (560 kg) durante 60 minutos, seguido de la adición de isopropanol (111 kg). La suspensión se filtró, se lavó tres veces con MTBE (30 kg, 35 kg, 5 kg) y después se secó al vacío a 55 ºC para proporcionar el producto del título (26,74 kg, rendimiento 57 % a partir del iluro). RMN de 1H (CDCl3) 7,33 (5H, m), 6,17 (1H, s a), 5,13 (2H, s), 4,61 (1H, m), 4,11 (3H, m), 3,94 (1H, m), 3,64 (1H, m), 2,98 (2H, m), 2,59 (1H, dd), 2,33 (1H, m), 1,94 (4H, m), 1,71 (1H, m), 1,63 (2H, m), 1,48 (9H, s) y 1,35

35 (2H, m).

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Etapa 7: (2S,5S)-2-[({1-[(benciloxi)carbonil]piperidin-4-il}amino)carbonil]-5--({[4-(trifluorometil)fenil]sulfonil}oxi)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo

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5 El material de partida alcohol (26,6 kg, 57,7 mol) se disolvió en diclorometano (120 kg) y se pasó a través de un cartucho de carbón activado. A la solución de alcohol se añadió N, N-dimetilaminopiridina (1,06 kg, 8,66 mol) y TEA (11,1 kg, 109,63 mol), seguido de la adición de cloruro de 4-trifluorometilbencenesulfonilo (18,0 kg, 73,6 mol) como solución en diclorometano (30 kg) durante 20 minutos a una temperatura < 25 ºC. Después, el lote se envejeció

10 durante 3 horas, tras lo cual se añadió agua (110 kg) manteniendo la temperatura< 25 ºC. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó dos veces con agua (80 kg x 2), después con HCl acuoso (15 l de 37 % en peso de HCl concentrado en agua (80 kg). La capa orgánica se diluyó con diclorometano (75 kg) y se destiló al vacío hasta 72 l. Después se añadió MTBE (157 kg) y el lote se destiló al vacío hasta 170 l para cristalizar el producto. La suspensión se envejeció durante 1 hora y después se añadió heptano (58 kg) durante ~20 minutos, después la suspensión se

15 envejeció a 20 ºC durante 18 horas. La suspensión envejecida se filtró, se lavó con heptano (20 kg) y MTBE (20 kg, 40 kg, 38,3 kg) y se secó sobre el filtro usando una corriente de nitrógeno durante 24 horas, dando el producto del título (26,74 kg, rendimiento 57 % del iluro). RMN de 1H (CDCl3) 8,20 (2H, d), 7,85 (2H, d), 7,33 (5H, m), 6,09 (1H, s a), 5,13 (2H, s), 4,59 (1H, m), 4,46 (1H, m), 4,10 (3H, m), 3,91 (1H, m), 2,96 (2H, m), 2,75 (1H, m), 2,33 (1H, m), 1,58 (1H, m), 1,48 (9H, s) y 1,35 (2H, m).

20 Etapa 8: 4-[({(2S,5R)-5-[(benciloxi)amino]piperidin-2-il}carbonil)amino]piperidin-1-carboxilato de bencilo

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25 A una solución de terc-butóxido de potasio ((4,35 g, 38,7 mmol) en DMAC (80 ml) se añadió N-Boc-Obencilhidroxilamina (8,65 g, 38,7 mmol, como solución en un volumen de DMAC de 38 ml) manteniendo la temperatura entre 18 ºC y 25 ºC. La solución se envejeció durante 30 minutos tras lo cual se convirtió en una suspensión. El material de partida sulfonato (20 g, 29.9 mmol) disuelto en DMAC (40 ml) se añadió a la suspensión

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durante 15 minutos a 20 ºC y la mezcla resultante se calentó hasta 40 ºC durante 3,5 horas y después se dejó a 20 ºC durante la noche (350 ml). Se añadió agua a la mezcla manteniendo la temperatura ma < 30 ºC. DCM (350 ml) y las fases se separaron, La fase orgánica se lavó tres vceces con agua (350 ml x 3). La fase orgánica lavada se destiló después a presión atmosférica hasta un volumen de 90 ml, tras lo cual se añadió ácido metanosulfónico (10 ml) y la solución se calentó hasta 35-40 ºC durante 8 horas. A continuación, la mezcla se enfrió hasta 20 ºC, se añadió una solución de NaOH 2 N (200 ml), seguido de la adición de DCM (90 ml). Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con agua (90 ml)) y entonces el disolvente se sustituyó a la presión atmosférica por acetonitrilo, volumen 50 ml. Se añadió ácido p-toluensulfónico (4 g, 1 equiv. basado en ensayo del producto) como solución en acetonitrilo (40 ml) a 40 ºC para cristalizar el producto. Después se añadió MTBE (45 ml) y después la suspensión se enfrió hasta 20 ºC, se envejeció a 20 ºC durante 1 hora y después se filtró dando el producto del título como sal monotosilato cristalina (9,8 g, 53 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,75 (1H, s a), 7,59 (2H, d), 7,36 (5H, m), 7,20 (3H, m), 7,14 (2H, d), 6,98 (2H, d), 5,30 (1H, m), 5,10 (2H, m), 4,37 (2H, s), 3,88 (3H, m), 3,61 (2H, m), 3,23 (2H, m), 2,22 (3H, s), 1,65 (1H, m), 1,26 (5H, m) y 1,21 (3H, m),

Etapa 9: 4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de bencilo

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Se suspendió en diclorometano (108 kg) 4-({[(2S,5R)-5-[(benciloxi)amino]peridin-2-il}carbonil]amino]piperidin-1carboxilato de bencilo en forma de una sal tosilato (8,1 kg, 12.68 mol) tras lo cual se añadió NaHCO3 al 5 % en peso (42 kg, 25,36 mol) y la mezcla bifásica resultante se agitó enérgicamente durante 30 minutos. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con agua (40,5 kg). Después, la fase orgánica se destiló a presión atmosférica hasta ~ 20 l, seguida de la adición de DCM (108 kg). Después se añadió DIPEA (5,25 kg, 40,58 mol) y el lote se enfrió hasta 0-5 ºC. Se añadió trifosgeno (3,01 kg, 10,14 mol) en cuatro porciones manteniendo la temperatura a <10 ºC. Tras 30 minutos se añadió una solución de ácido fosfórico diluido (4,97 kg 85 % en peso de ácido fosfórico en 32 kg de agua) y el lote se envejeció a 20 ºC durante la noche. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con 5 % en peso de NaHCO3 (26 kg) y agua (25 kg). Después, la fase orgánica se destiló a presión atmosférica hasta 30 l. A continuación se añadió etanol (77 kg), seguido de la adición de cristales de siembra (10 g). (Nota: la cristalización se producirá sin el uso de siembra, pero es preferible el uso de siembra ya que normalmente proporciona un producto más consistente y mejor rendimiento). La suspensión se destiló al vacío hasta un volumen de 33 lm después se añadió heptano (55 kg) gota a gota. Después, la suspensión se enfrió hasta 0 ºC, se filtró, se lavó con 3:1 de heptano:etanol (30 l) y se secó sobre el filtro bajo una corriente de nitrógeno, dando el producto del título (5,90 kg, 94 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,35 (10 H, m), 6,57 (1H, d), 5,14 (2H, s), 5,07 (1H, d), 4,92 (1H, d), 4,13 (2H, m), 3,95 (1H, m), 3,89 (1H, d), 3,31 (1H, s), 2,99 (3H, m), 2,65 (1H, d), 2,38 (1H, m), 1,94 (4H, m), 1,62 (2H, m) y 1,34 (2H, m).

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Etapa 10: 4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo:

El material de partida 4-({{(2R,5S)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1carboxilato de bencilo (1,9 kg @ 97 % en peso) y Boc2O (0,776 kg) se cargaron en un frasco de vidrio y los sólidos se disolvieron en THF (15 l). Después, la solución se cargó en un reactor de hidrogenación junto con Pd(OH)2 (184,3 g) y otra porción de THF (10,8 l). La reacción se llevó a cabo a 45 psig de H2 (310,26 kPa) a 23 ºC durante 5 horas. Una vez completada la reacción determinado mediante análisis HPLC, la solución se filtró a través de copos de Solka para eliminar el catalizador y la torta del filtro se lavó con THF. El filtrado y los lavados se cambiaron de disolvente mediante destilación al vacío a EtOAc hasta un volumen de 10 l. Se usaron aproximadamente 30 l de EtOAc durante el cambio de disolvente y se determinó que los niveles de THF tras una destilación a volumen constante (10 l a una temperatura máxima de 20 ºC) mediante RMN de protones eran ~ 4 mol % de THF. EtOAc. La suspensión resultante en EtOAc se envejeció a temperatura ambiente durante 1 hora, tras lo cual se añadieron hexanos (4 l) durante 1 hora a temperatura ambiente. La suspensión se envejeció durante 1 hora más, tras lo cual se midió la concentración del sobrenadante (objetivo: ~6 mg/g). Después se filtraron los sólidos y se lavaron con una solución de 60 % de EtOAc/hexanos (3 x 3l) y se secaron al vacío y bajo N2 a temperatura ambiente, dando el producto del título (rendimiento aislado del 80 %). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 8,60 (s a, 1H), 6,67 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 4,12-4,00 (m, 2H), 4,00 -3,91 (m, 1H), 3,89 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,81-3,76 (m, 1H), 3,19 (dt, J= 11,2, 2,9 Hz, 1H), 2,90(t, J =11,9 Hz, 2H) 2,82 (d, J=11,3 Hz, 1H), 2,45 (dd, J= 15,0, 6,7 Hz, 1H), 2,21-2,11 (m, 1H), 2,02-1,85 (m, 3H), 1,80-1,69 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,44-1,30(m, 2H)

Etapa 11: Sal sulfato de tetrabutilamonio

4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo(3,0 kg), THF (30 l), 2-picolina (1,61 l) y complejo piridina-SO3 (4,54 kg) se cargaron en un matraz en atmósfera de nitrógeno. No se observó exotermia. La mezcla heterogénea se dejó agitar durante la noche (~15 h). Después se añadió DCM (8 l) y la mezcla se concentró mediante destilación al vacío eliminando ~30 l de THF/DCM. Se añadió DCM adicional (28 l), seguido de la adición de agua (20 l), El matraz se introdujo en un baño de hielo y se añadió K2HPO4 (2,20 kg) durante 4 minutos, seguido de un aclarado con agua (1 l). Después, se añadió Bu4 NHSO4(2,90 kg) durante 10 minutos, seguido agua adicional (4 l). La mezcla bifásica se agitó durante 30 minutos, tras los cuales la capa orgánica del fondo se transfirió a un extractor de 100 l mediante un filtro en línea. La capa acuosa restante en el matraz se aclaró con DCM adicional (2 x 4 l) y después también se transfirió al extractor. Una pequeña cantidad de la capa acuosa (~2 l) también se había transferido y las dos capas se separaron. La capa orgánica se devolvió al extractor y se lavó con agua (1 x 6 l); el pH fue de 4,5. La capa orgánica se separó y se cargó en un matraz nuevo a través de un filtro en línea. Se cambió el disolvente de la mezcla a 2,2,2-triufluoroetanol mediante destilación al vacío (volumen final de 34 l) y se usó como tal en la etapa siguiente. El contenido en agua mediante titulación de Karl Fischer fue de 1.900 ppm.

En un experimento a menor escala usando el mismo procedimiento, la evaporación del disolvente dio un sólido del que se recogieron datos de RMN de 1H. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 6,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,37-4,32 (m, 1H), 4,18-4,00 (m, 2H), 4,00-3,89 (m, 1H), 3,87(d, J= 7,7 Hz, 1H), 3,36-3,27 (m, 9H), 2,95-2,79 (m, 2H), 2,75 (d, J=11,4 Hz, 1H), 2,42 (dd, J= 15,0, 6,9 Hz, 1H) 2,24-2,11 (m, 2H), 1,96-1,81 (m, 3H), 1,74-1,60 (m, 8H), 1,47 (s, 9H), 1,46 (m, 8H), 1,39 (m, 2H), 1,01 (t, J=7,3, 12H)

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Etapa 12: (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

5 La solución de la sal Bu4 N +-OSO3 en TFE (34 l) se usó tal como se recibió de la etapa anterior con un rendimiento supuesto del 100 %. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y se añadió HBF4·Et2O (1,57 l) mediante un embudo de adición durante 11 minutos ente 18 y 22 ºC. La suspensión blanca resultante se dejó agitar durante la noche (12 horas). Se eliminó el TFE (~15 l) mediante destilación al vacío. Después, se añadió DCM (15 l). A un extractor de 100 l se cargó agua apirógena (35 l) y NaHCO3 (274 g) y la solución se enfrió hasta 13 ºC. La mezcla de

10 reacción se transfirió mediante vacío al extractor con una temperatura de 11-13 ºC. El matraz de la reacción se aclaró con DCM adicional (5 l) y la suspensión también se transfirió al extractor, La mezcla de reacción se calentó hasta 18,5 ºC y se añadió agua apirógena (12 l) para solubilizar todos los sólidos. El pH final fue de 4,5. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se lavó con DCM (2 X 16 l). El ensayo de la capa acuosa mostró 2,39 (83,8 %)

15 La capa acuosa se cargó en un matraz limpio. La solución se concentró mediante destilación al vacío, seguida de destilación azeotrópica con IPA. En este momento, el análisis RMN de 1H de la proporción IPA:H2O indicó la presencia de 13,4 l de agua y 24,6 l de IPA. Después, se añadió IPA (22 l). El sólido blanco cristalino se filtró y se lavó con IPA:agua apirógena 7:1 (16 l) y se secó al vacío y bajo N2 a temperatura ambiente, dando el producto del título en forma de un hidrato de canal cristalino, 1,5 % en peso de agua. (Rendimiento = 1,715 kg, 57,4 % a través

20 de las etapas 11 y 12). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): 8,3 (s a, 2H), 8,21 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 4,01 (s, 1H), 3,973,85 (m, 1H), 3,75 (d, J= 6,5 Hz, 1H) 3,28(dd, J= 12,9, 2,5 Hz, 2H) 3,05-2,93(m, 4H), 2,08-1,97(m, 1H), 1,95-1,79(m, 3H), 1,75-1,59(m, 4H)

EJEMPLO 1D:

25 (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida monohidrato cristalina

Parte A: Preparación

30 EJEMPLO 1D

(2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida monohidrato cristalina

Parte A: Preparación

35 A un vial de vidrio se añadieron (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2carboxamida amorfa (1 g) y agua desionizada y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente hasta que el seguimiento por XRPD (véase la parte B) indicó que la conversión en una forma diferente se había completado. El sólido cristalino se recogió después mediante filtración por gravedad y se secó a temperatura ambiente.

40 Como alternativa, la suspensión cristalina se puede aislar mediante eliminación evaporativa que, debido a que el hidrato cristalino es soluble en agua (aproximadamente 55 g/ml a temperatura ambiente), puede dar lugar a un rendimiento más alto.

45 El secado puede deshidratar los cristales y, por tanto, los procedimientos de secado que usan vacíos y/o temperaturas altas generalmente no se deben usar. El control de la humedad relativa del ambiente de secado puede minimizar o evitar la deshidratación. Por ejemplo, los cristales se pueden secar usando un vapor de nitrógeno con un contenido en humedad controlado (por ejemplo, en un intervalo de aproximadamente 40 % a aproximadamente 70 % de humedad relativa) para evitar la deshidratación.

50 El hidrato cristalino también se puede obtener suspendiendo en una mezcla de alcohol isopropílico y agua y usando cualquiera de los procedimientos de aislamiento indicados anteriormente. La proporción entre el alcohol isopropílico y el agua es, adecuadamente, de aproximadamente 7:1 en volumen.

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Parte B: Caracterización

Se generó un patrón de XPRD de un monohidratao cristalino preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en la parte A en un difractómetro de polvo de rayos X Philips Panalytical X'Pert Pro con una consola PW3040/60

5 usando un barrido continuo de 4 a 40 grados 2Θ. Como fuente se usó radiación de cobre K-alfa 1 (Kα1) y K-alfa 2 (Kα2). El experimento se realizó con la muestra a temperatura ambiente y abierta a la atmósfera. El patrón de XRPD se muestra en la Figura 1. Los valores 2Θ y los correspondientes espaciados d en el patrón de XRPD incluyen los siguientes:

10 Tabla 1 -Patrón de XRPD de monohidrato cristalino

Nº de pico: espaciado d-(Å) 2-Teta

1: 6,5 13,5

2: 5,7 15,5

3: 5,6 15,6

4: 5,1 17,4

5: 4,7 18,7

6: 4,5 19,7

7: 4,4 20,4

8: 4,1 21,7

9: 3,8 22,6

10: 3,7 24,0

11: 3,6 24,3

12: 3,4 25,9

13: 3,3 26,3

14: 3,3 26,6

15: 3,2 27,0

16: 3,2 27,5

17: 3,0 29,3

18: 2,9 30,0

19: 2,8 31,3

20: 2,7 32,4

21: 2,7 32,9

22: 2,6 33,1

23: 2,6 34,0

24: 2,5 34,7

25: 2,5 35,5

26: 2,3 38,9

El monohidrato cristalino preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en la parte A se analizó con un instrumento TA Instruments DSC Q 1000 de calorimetría de barrido diferencial (DSC) a una velocidad de calentamiento de 10 ºC/minuto desde 25 ºC a 350 ºC en un recipiente de aluminio abierto en una atmósfera de

15 nitrógeno. La curva de la DSC (véase la figura 2) exhibió una endotermia debido a la pérdida de agua con una temperatura de inicio de 22,5 ºC y un cambio de entalpía de 186 J/g. Se observa descomposición por encima de 270 ºC.

El análisis termogravimétrico (TGA) del monohidrato cristalino preparado de acuerdo con el procedimiento descrito

20 en la parte A se realizó con un instrumento TA Instruments TGA Q 500 en nitrógeno a una velocidad de calentamiento de 10 ºC/minuto desde 25 ºC a 300 ºC. El TGA mostró una pérdida de peso de 4,9 % en peso hasta 100 ºC, seguido de descomposición por encima de 270 ºC. La pérdida de 4,9 % en peso corresponde a la pérdida de 1 mol de agua por mol del compuesto, lo que es consistente con un monohidrato.

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EJEMPLO 2 (2S,5R)-N-[(4S)-azepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

imagen39

Etapa 1: (4S)-4-({4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)azepan-1-carboxilato de terc-butilo

10 A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (51,7 mg, 0,187 mmol) en diclorometano seco (2 ml) se añadió una solución de 4S)-4-aminoazepan-1-carboxilato de terc-butilo (69 mg, 0,275 mmol), trietilamina (0,090 ml, 0,646 mmol), HOBT (42,5 mg, 0,278 mmol), y EDC (54,7 mg, 0,285 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente en nitrógeno. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC en una columna

15 Waters Sunfire de 30X100 mm eluida con 15 % a 100 % de CH3CN + 0.05 % de TFA/agua + 0,05 % de TFA durante 15 minutos, dando el compuesto del título como un sólido blanco tras la liofilización.

Etapa 2: (4S)-4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)azepan-1-carboxilato de tercbutilo

20 A una solución de (4S)-4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)azepan-1carboxilato de terc-butilo (49,7 mg, 0,33 mmol) en metanol (3 ml) se añadió paladio sobre carbón (11,8 mg; 10 % Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 1,5 horas. El análisis por TLC mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró a través de un microfiltro y el filtrado se concentró al

25 vacío, dando el compuesto del título impuro en forma de una espuma blanca (44,8 mg) que se usó son purificación adicional en la etapa siguiente.

Etapa 3: N,N,N-tributilbutan-1-aminio [({(2S,5R)-2-{[(4S)-azepan-4-ilamino]carbonil}-7-oxo-1,6-diaxabiciclo[3.2.1] oct6-il)oxi]sulfonil}oxidamida

30 A una solución de (4S)-4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)azepan-1carboxilato de terc-butilo impuro (40,2 mg, 0,105 mmol) en piridina (0,5 ml) se añadió complejo de trióxido de azufrepiridina (42,1 mg; 0,265 mmol). La mezcla se agitó en nitrógeno a temperatura ambiente durante la noche. El análisis por CL/EM mostró una reacción incompleta). Se añadió piridina adicional, seguida de complejo de trióxido de azufre

35 piridina adicional (40 mg). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante cinco horas. La reacción se filtró y los sólidos se lavaron con diclorometano. El filtrado se concentró al vacío y se suspendió en una solución de dihidrogenofosfato potásico acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa se recogió y se añadió hidrógenosulfato de tetrabutilamonio (0,036 mg, 0,105 mmol). La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se extrajo con EtOAc (4X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico

40 y se concentraron al vacío, dando el compuesto del título como un aceite incoloro.

Etapa 4: (2S,5R)-N-[(4S)-azepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

A una solución de N,N,N-Tributilbutan-1-aminio[({(2S,5R)-2-{[(4S)-azepan-4-ilamino]carbonil}-7-oxo-1,645 diazabiciclo[3.2.1]oct-6-il}oxi)sulfonil]oxidamida (30,9 mg, 0,067 mmol) en diclorometano anhidro (7 ml) a 0 ºC bajo

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nitrógeno se añadió ácido trifluoroacético (0,5 ml, 6,5 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante dos horas, después se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter y el precipitado blanco resultante se recogió mediante centrifugación. El precipitado se purificó mediante HPLC en una columna Phenomenex Synergy Polar-RP 80A y se liofilizó dando el compuesto del título en forma de un sólido blanco. CL-EM (ionización negativa) m/e 361

5 (M-H); CL-EM (ionización positiva) m/e 385 (M+Na); RMN de 1H (600 MHz, D2O; sin referencia) (δ, ppm) 4,17 (1H, d a, J = 3 Hz), 3,96-4,03 (2H, m), 3,27-3,38 (3H, m), 3,15-3,22 (2H, m), 3,02 (1H, d, J =12 Hz), 1,62-2,18 (m, 12H).

EJEMPLO 3

10 (2S,5R)-N-[(4R)-azepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

imagen40

Sustituyendo el (4R)-4-aminoazepan-1-carboxilato de terc-butilo por el (4S)-4-aminoazepan-1-carboxilato de terc15 butilo en el procedimiento del ejemplo 2 se puede preparar el compuesto del título.

EJEMPLO 4

(2S,5R)-7-oxo-N--[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.]octano-2-carboxamida; 20

imagen41

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Etapa 1: (3R)-3-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (53 mg, 0,192 mmol) en diclorometano seco (2 ml) se añadió una solución de (3R)-3-aminopirrolidin-1-carboxilato de tercbutilo (55 mg, 0,288 mmol), trietilamina (0,061 ml, 0,441 mmol), HOBT (44,1 mg, 0,288 mmol), y EDC (55,2 mg, 0,288 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante seis horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC en una columna 30X100 mm Waters Sunfire eluida con 15 % a 100 % de CH3CN + 0.05 % de TFA/agua + 0,05 % de TFA durante 15 minutos, dando el compuesto del título.

Etapa 2: (3R)-3-({[(2S,5R)-6-(hidroxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución de (3R)-3-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1carboxilato de terc-butilo (38 mg, 0,085 mmol) en metanol (3 ml) se añadió paladio sobre carbón (9,18 mg; 10 % Pd/C) y la mezcla resultante se agitó en hidrógeno (globo) durante 2 horas. El análisis por TLC mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró a través de un microfiltro y el filtrado se concentró al vacío dando el compuesto del título impuro en forma de un aceite.

Etapa 3: N,N,N-tributilbutan-1-aminio [({(2S,5R)-2-{[(3R)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-3-il]amino}carbonil}-7-oxo1,6-diaxabiciclo[3.2.1] oct-6-il)oxi]sulfonil}oxidamida

A una solución de (3R)-3-({(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1carboxilato de terc-butilo impuro (30 mg, 0,085 mmol) en piridina (0,5 ml) se añadió complejo de trióxido de azufrepiridina (53,9 mg; 0,339 mmol) y tamices moleculares de 4A. La mezcla se agitó en nitrógeno a temperatura ambiente durante la noche. El análisis por CL/EM mostró una reacción incompleta. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en HPLC para recuperar el material de partida sin reaccionar que se volvió a someter a las condiciones de reacción. El producto combinado se suspendió en una solución de dihidrogenofosfato potásico acuoso saturado. La mezcla resultante se lavó con acetato de etilo. La capa acuosa se recogió y se añadió hidrogenosulfato de tetrabutilamonio. La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se extrajo con EtOAc (4X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron al vacío, dando el compuesto del título como un aceite incoloro.

Etapa 4: (2S,5R)-7-oxo-N--[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

A una solución de N,N-dibutilbutan-1-aminio [({(2S,5R)-2-({(3R)-1-(terc-butoxicarbonil)pyrrolidin-3-il]amino} carbonil)7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-6-il}oxi)sulfonil]oxidamida (2 mg, 0,046 mmol) en diclorometano anhidro (0,5 ml) a 0 ºC en nitrógeno se añadió ácido trifluoroacético (0,525 ml, 0,046 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante dos horas, después se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter y el precipitado blanco resultante se recogió mediante centrifugación. El precipitado se purificó mediante HPLC en una columna Phenomenex Synergy Polar-RP 80A y se liofilizó dando el compuesto del título en forma de un sólido blanco. CL-EM (ionización negativa) m/e 333 (M-H); CL-EM (ionización positiva) m/e 336 (M+H), 381 (M+Na); RMN de 1H (600 MHz, D2O; sin referencia) (δ, ppm) 4,50-4,54 (1H, m), 4,20 (1H, dd, J = 3, 6 Hz), 4,03 (1H, br d, H = 7 Hz), 3,54 (1H, dd, J = 7, 13 Hz), 3,403,48 (1H, m), 3,30-3,35 (2H, m), 3,24 (1H, dd, J = 5, 13 Hz), 3,07 (1H, d, J = 12 Hz), 2,31-2,37 (1H, m), 2,15-2,20 (1H, m), 2,00-2,10 (2H, m), 1,88-1,98 (1H, m), 1,76-1,84 (1H, m).

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24-03-2015

EJEMPLO 5 (2S,5R)-N-azocan-5-il-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

imagen42

Sustituyendo la 4-amino-1-BOC-piperidina por el 5-aminoazocan-1-carboxilato de terc-butilo en el procedimiento del ejemplo 1 se puede preparar el compuesto del título.

10 EJEMPLO DE REFERENCIA 1 (2S,5SR)-7-oxo-N-piridin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

imagen43

15 Etapa 1: (2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-N-piridin-4-il-1,6-diazabicyclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (51,5 mg, 0,186 mmol) en diclorometano seco (5 ml) se añadió trietilamina (0,065 ml, 0,466 mmol), yoduro de 2-cloro-1

20 metilpiridinio (63,4 mg, 0,248 mmol) y 4-aminopiridina (19,2 mg, 60,204 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente en nitrógeno. Después, la reacción se calentó hasta 50 ºC durante 1,5 horas. El análisis CL/EM mostró una reacción completa. La mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante HPLC en una columna 30 x 100 mm

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24-03-2015

Waters Sunfire, dando el compuesto del título en forma de un sólido naranja tras la liofilización.

Etapa 2: (2S,5R)-6-hidroxi.7-oxo-N-piridin-4-il-1,6-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

5 A una solución de (2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-N-piridin-4-il-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (52,7 mg, 0,15 mmol, producto combinado de dos ciclos) en metanol (1,5 ml) se añadió paladio sobre carbón (13,2 mg; 10 % Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 5 horas. El análisis por TLC y HPLC mostró una pequeña cantidad de material de partida remanente. Se añadió catalizador adicional (5,6 mg) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 1 hora adicional. La mezcla de reacción se filtró a través de un microfiltro y el

10 filtrado se concentró al vacío, dando el compuesto del título en forma de un aceite incoloro.

Etapa 3: (2S,5R)-7-oxo-N-piridin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

A una solución de (2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-N-piridin-4-il-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (9,2 mg, 0,035

15 mmol) en piridina seca (0,5 ml) se añadieron tamices moleculares secos de 4A y complejo de trióxido de azufrepiridina (22 mg, 0,138 mmol) a temperatura ambiente en nitrógeno. La mezcla se agitó durante cuatro horas. La mezcla de reacción se filtró y los sólidos se lavaron con diclorometano, acetonitrilo y metanol. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se trituró con acetato de etilo. El residuo se secó al vacío, se disolvió en dihidrogenofosfato de sodio saturado y se purificó mediante HPLC en una columna Phenomenex Synergy Polar-RP 80A, dando el

20 compuesto del título en forma de un sólido blanco tras liofilización. CL-EM (ionización negativa) m/e 341 (M-H); CL-EM (ionización positiva) m/e 343 (M+Na); RMN de 1H (600 MHz, D2O; sin referencia) (δ, ppm) 8,57 (2H, s a), 8,15 (2H, s a), 4,27 (1H, br d, J = 7 Hz), 4,20 (1H, s a), 3,33 (1H, d, J = 12 Hz), 3,10 (1H, d, J = 12 Hz), 2,28-2,32 (1H, m), 2,08-2,11 (1H, m), 1,93-1,98 (1H, m), 1,83-1,88 (1H, m).

25 EJEMPLO 6

Ácido (2S,5R)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-6-sulfónico:

imagen44

30 Etapa 1: 4-({[(2S,5R)-7-oxo-6-[(fenoxicarbonotioil)oxi]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)piperidina-1carboxilato de terc-butilo

Una solución de clorotionocarbonato de fenilo (1,25 eq.) en diclorometanpo se añade una solución de piridina (1,2 5

35 eq.), 4-dimetilaminopiridina (0,1 eq.) y 4-({[(2S,5R)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2il]carbonil}amino)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (véase el Ejemplo 1, etapa 2) en diclorometano. La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante la noche, después se enfría en un baño de hielo y se inactiva mediante la adición de agua. Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con diclorometano Las capas orgánicas combinadas se secan sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran al vacío. El residuo se purifica en

40 cromatografía en columna en gel de sílice, dando el compuesto del título.

Etapa 2: 4-[({(2S,5R)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il}carbonil)amino]piperidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución de 4-[({(2S,5R)-7-oxo-6-[(fenoxicarbonotioil)oxi]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-245 il}carbonil)amino]piperidin-1-carboxilato de terc-butilo en benceno seco se añade AIBN (0,1 eq.) y la mezcla

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resultante se calienta hasta reflujo. Se añade una solución de hidruro de tributilestaño (1,25 eq.) durante un periodo de una hora y la mezcla resultante se somete a reflujo durante 3 horas adicionales. La mezcla de reacción se concentra al vacío y el residuo se purifica en cromatografía en columna en gel de sílice, dando el compuesto del título.

5 Etapa 3: Ácido (2S,5R)-2-({[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]amino}carbonil)-7-oxo-2-[(piperidin-4ilamino)carbonil]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-6-sulfónico

El producto de la etapa 2 se sulfata de acuerdo con el procedimiento de la etapa 3 del ejemplo 1, dando el 10 compuesto del título.

Etapa 4: Ácido (2S,5R)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-6-sulfónico:

El ácido (2S,5R)-2-({[1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]amino}carbonil)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,615 diazabiciclo[3.2.1]octano-6-sulfónico se desprotege de acuerdo con el procedimiento de la etapa 4 del ejemplo 1, dando el compuesto del título.

EJEMPLO 7

20 (4R,6S)-2-oxo-N-piperidin-4-il-3-(sulfooxi)-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxamida

imagen45

Sustituyendo el ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico por ácido (4R,6S)-325 (benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxílico en el procedimiento del ejemplo 1 se puede preparar el compuesto del título.

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EJEMPLO 8 (4R,6S)-2-oxo-N-[(4S)-azepan-4-il]-3-(sulfooxi)-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxamida

imagen46

Sustituyendo el ácido (4R,6S)-3-(benciloxi)-2-oxo-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-6-carboxílico por el ácido (2S,SR)-6(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]octano-2-carboxílico en el procedimiento del ejemplo 2 se puede preparar 10 el compuesto del título.

EJEMPLO 9

(2S,5R)-7-oxo-N--[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; 15

imagen47

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Etapa 1: (3S)-3-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (1 g, 3,62

5 mmol) en diclorometano seco (5 ml) se añadió dimetilaminopiridina (884 mg, 7,24 mmol), EDE (1,388 g, 0,248 mmol) y (3S)-3-aminopirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo (742 mg, 3.98 mmol) secuencialmente a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC en una columna 30X100 mm Waters Sunfire eluida con 15 % a 100 % de CH3CN + 0.05 % de TFA/agua + 0,05 % de TFA durante 15 minutos, dando el

10 compuesto del título como un sólido blanco.

Etapa 2: (3S)-3-({[(2S,5R)-6-(hidroxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1-carboxilato de

terc-butilo

15 A una solución del producto de la etapa 1 (1,4 g, 3,15 mmol) en metanol (30 ml) se añadió paladio sobre carbón (335 mg, 10 de Pd/C) y la mezcla resultante se agitó bajo hidrógeno (globo) durante 1 hora. El análisis por CL-EM mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío, dando el compuesto del título en forma de un aceite, que se usó en la siguiente etapa sin purificar.

20 Etapa 3: 3-({[(2S,5R)-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)pirrolidin-1-carboxilato de tercbutilo

A una solución del producto de la etapa 2 (1,11 g, 3,15; rendimiento teórico de la etapa 2) en piridina seca (10 ml) se añadió complejo de trióxido de azufre-piridina (3, g, 15,75 mmol). La mezcla se agitó bajo nitrógeno a temperatura

25 ambiente durante la noche. A la mezcla se añadió diclorometano y se filtró. El sólido recogido se lavó con diclorometano (4X) y los filtrados combinados se concentraron al vacío. El resoduo se usó en la siguiente etapa sin purificación.

Etapa 4: (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

30 A una solución del producto de la etapa 3 (1,37 g, 3,15; rendimiento teórico de la etapa 3) en diclorometano anhidro (5 ml) a 0 ºC en nitrógeno se añadió lentamente ácido trifluoroacético (2 ml, 26 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante dos horas, después se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter y el precipitado blanco resultante se recogió mediante centrifugación (la trituración en éter se repitió dos veces más) El sólido resultante se

35 purificó mediante HPLC en una columna Phenomenex Synergy Polar-RP 80A eluida con metanol/agua y se liofilizó, dando el compuesto del título en forma de un sólido blanco. CL/EM (ionización negativa) m/e 333 (M-H). CL-EM (ionización negativa) m/e 335 (M-H); CL-EM (ionización positiva) m/e 357 (M+H), 381 (M+Na); RMN de 1H (600 MHz, D2O; sin referencia) (δ, ppm) 4,51 (1H, m), 4,16 (1H, br d, J = 2,6 Hz), 3,99 (1H, d, J = 7 Hz), 3,54 (1H, dd, J = 7,13 Hz), 3,40-3,50 (1H, m), 3,30-3,40 (1H, m), 3,20-3,30 (2H, m), 3,02 (1H, d, J = 12 Hz), 2,30-2,40 (1H, m), 2,10-2,20

40 (1H, m), 2,00-2,10 (2H, m), 1,83-1,93 (1H, m), 1,72-1,80 (1H, m).

EJEMPLO 10

(2S,5R)-N-[(3R,4S)-3-fluoropiperidin-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; 45

imagen48

10

15

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25

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50

55

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Etapa 1: (3R,4S)-4-({[(2S,5R)-6-(benciloxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)fluoropiperidin-1carboxilato de terc-butilo

A una solución agitada de ácido (2S,5R)-6-(fenilmetoxi)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (2,108 g, 7,63 mmol) en dimetilformamida anhidra (15 ml) se añadió BOP (4,05 g, 9,15 mmol), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente en nitrógeno durante 5 minutos. Después se añadió diisopropiletilamina (66 ml, 15,26 mmol) seguida por una solución de (3R,4S)-4-amino-3-fluoropiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (1,665 g, 7,63 mmol) en 20 ml de diclorometano. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente en nitrógeno durante 2 horas al vacío y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo dos veces. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (Isco Combiflash apparatus – gel de sílice 120 g, 80 ml/min, 254 nM, 0 % a 100 % de EtOAc/hexano con 6 volúmenes de columna, después 100 % de EtOAc con 9 volúmenes de columna, el compuesto del título eluyó a 100 % de EtOAc). Las fracciones que contienen el producto puro se recogieron y se concentraron al vacío dando un sólido marrón. Las fracciones que contenían el producto impuro se recogieron y se volvieron a purificar mediante HPLC (columna Sunfire de 30X100 mm, 5 micrómetros, 35 ml/min, 10 % a 100 % de CH3CN + 0.1 % de TFA / agua + 0.1 % de TFA durante 15 min.; el compuesto del título eluyó a 70 % de CH3CN + 0.1 % de TFA). Las fracciones que contenían el producto bruto se combinaron y concentraron al vacío. Después, el residuo acuoso resultante se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se recogió y se secó sobre sulfato de magnesio. La concentración al vacío dio un sólido blanco que se combinó con el material aislado de la cromatografía en gel de sílice, dando el compuesto del título.

Etapa 2: 3R,4S)-4-({[(2S,5R)-6-(hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2-il]carbonil}amino)fluoropiperidin-1carboxilato de terc-butilo

A una solución del producto de la etapa 1 (3,0175 g, 6,33 mmol) en metanol (80 ml) y acetato de etilo (20 ml) se añadió paladio sobre carbón al 10 % (0.73 g, 6.86 mmol) y la mezcla de reacción se agitó bajo atmósfera de hidrógeno (globo) durante la noche. El análisis por CL-EM mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró a través de un microfiltro y el sólido recogido se lavó bien con metanol. El filtrado se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente con tolueno, dando el compuesto del título en forma de una espuma amarilla, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificar.

Etapa 3: 3R,4S)-4-({[(2S,5R)-6-(hidroxi-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-2il]carbonil}amino)fluoropiperidin-1-carboxilato de terc-butilo

A una solución del producto de la etapa 2 (2,59 g, 6,7; rendimiento teórico de la etapa 2) en piridina seca (30 ml) se añadió complejo de trióxido de azufre-piridina (5,40 g, 34 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 3 horas, después se añadió complejo de trióxido de azufre-piridina (5,40 g, 3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. A la mezcla se añadió diclorometano y se filtró. El sólido recogido se lavó con abudantemente con diclorometano y los filtrados combinados se concentraron al vacío, dando el compuesto del título bruto. El resoduo se usó en la siguiente etapa sin purificación.

Etapa 4: (2S,5R)-N-[(3R,4S)-3-fluoropiperidin-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

A una solución del producto de la etapa 3 (3,13 g, 6,7; rendimiento teórico de la etapa 3) en diclorometano anhidro (50 ml) a 0 ºC en nitrógeno se añadió lentamente ácido trifluoroacético (10 ml, 130 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y después se agitó durante dos horas Se añadió ácido trifluoroacético adicional (6 ml, 78 mmol) y la mezcla reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas adicionales, después se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter y el precipitado blanco resultante se recogió mediante centrifugación (la trituración en éter se repitió dos veces más) El sólido resultante se purificó mediante HPLC en una columna Phenomenex Synergy Polar-RP 80A eluida con metanol/agua y se liofilizó, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color crema que contenía ~6 % de piridina mediante RMN. Este producto impuro se trituró y sometó a ultrasonidos dos veces con acetonitrilo (sólido aislado mediante centrifugación), dando el compuesto del título como un sólido blanco. CL/EM (ionización negativa) m/e 365 (M-H).

EJEMPLOS 11-39

El procedimiento indicado en el ejemplo 1A se usó para preparar los siguientes compuestos, sustituyéndose en la etapa 1 la 4-4-amino-1-BOC-piperidina por el material de partida amina indicado.

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Ejemplo: Amina Producto

11A y 11B: imagen49 Diastereómeros aislados (diastereómero 1 y diastereómero 2) de: [Los diastereómeros eluidos de una columna de HPLC (Phenomenex Synergi Polar RP80A 250x21,2 mm 10 micrómetros, gradiente eluido a 35 ml/min con de 0 % a 40 % de metanol/agua durante 15 minutos, detección a 210 nM). El primer diastereómero (diastereómero 1) eluyó al 15 % de metanol/agua y el segundo diastereómero (diastereómero 2) eluyó al 18 % de metanol/agua La estereoquímica absoluta de los dos diastereómeros no se ha determinado. Uno de los diastereómeros es (2S,5R)-7-oxo-N[(3R)-azetidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida y el otro es el correspondiente isómero (3S).

12: imagen50 (2S,5R)-7-oxo-N-azetidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2carboxamida

13: imagen51 (2S,5R)-7-oxo-N--[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

14: imagen52 (2S,5R)-7-oxo-N-[(4R)-azetidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

15: imagen53 (2S,5R)-7-oxo-N-[(1-metilpiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

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16: imagen54 Mezcla de (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S,4R)-3-fluoropiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida y su diastereómero 3R,4R.

17: imagen55 (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S,4R)-3-fluoropiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

18: imagen56 (2S,5R)-7-oxo-N-[(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

19: imagen57 (2S,5R)-N-(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-7-oxo-6-(sulfooxi)--1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

20: imagen58 (2S,SR)-N-[(3R,4R)-4-aminopirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

21: imagen59 (2S,5R)-N-[(3R,4S)-4-hidroxipirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

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22: imagen60 (2S,5R)-N-[(3R,4S)-4-hidroxipirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

23: imagen61 (2S,5R)-N-[(3R,4S)-4-fluoropirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

24: imagen62 (2S,5R)-N-[(3S,4R)-4-fluoropirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

25: imagen63 (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S)-1-piperidin-4-il-2-oxopirrolidin-3-il]6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

26: imagen64 (2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-1-piperidin-4-il-2-oxopirrolidin-3-il]-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

27: imagen65 (2S,5R)-N-[(3S,4R)-3-fluoroazepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

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28: imagen66 (2S,5R)-N-[(3R,4S)-3-fluoroazepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

29: imagen67 (2S,5R)-N-[(3-fluoroazetidin-3-il)metil]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

30: imagen68 (2S,5R)-N-3-azabiciclo[3.1.0.]hex-6-il-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

31: imagen69 (2S,5R)-N-metil-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

32: imagen70 (2S,5R)-2-{[2-(aminometil)piperidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

33: imagen71 (2S,5R)-2-[(4-aminopiperidin-1-il)carbonilo]-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

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34: imagen72 (2S,5R)-2-(piperazin-1-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan7-ona

35: imagen73 (2S,5R)-2-(2,7-diazaespiro[3.5]non-2-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

36: imagen74 (2S,5R)-2-(hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2-(1H)-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

37: imagen75 (2S,5R)-2-{[-(3R)-3-aminopirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

38: imagen76 (2S,5R)-2-{[-(3S)-3-aminopirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

39: imagen77 (2S,5R)-2-{[3-(dimetilamino)pirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona

EJEMPLO 40

El procedimiento indicado en el ejemplo de referencia 1 se usó para preparar el compuesto del ejemplo 40, sustituyéndose en la etapa 1 la 4-aminopiridina se sustituyó por el material de partida amina indicado.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

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Ejemplo: Amina Producto

40: imagen78 (2S,5R)-N-(1-metil-4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il)-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

EJEMPLO 41

Actividad enzimática: Determinación de la CI50

Las actividades de las enzimas de clase C se midieron en presencia del inhibidor de prueba en el ensayo espectrofotométrico contra el sustrato disponible comercialmente, nitrocefina. La enzima AmpC (P. aeruginosa.) y el sustrato se disolvieron en tampón KH2PO4 100 mM (pH 7). El tampón también contenía 0,005 % de BSA. El inhibidor del ensayo se disolvió en DMSO y se diluyó a 1:20 en el ensayo, dando lugar a una concentración final de 50 µMa 0,0002 µM. En una microplaca de 96 pocillos se incubó con enzima beta-lactamasa durante 40 minutos a temperatura ambiente, se añadió la solución sustrato y la incubación continuó durante otros 40 minutos. La reacción espectrofotométrica se detuvo mediante la adición de ácido acético 2,5 N y la absorbancia se midió a 492 nm. El valor de la CI50 se determinó a partir de los gráficos semilogarítmicos de la inhibición enzimática frente a la concentración del inhibidor, con una curva generada usando un ajuste de 4 parámetros.

Las actividades de las enzimas de clase A se midieron usando el mismo protocolo de ensayo indicado anteriormente para las enzimas de clase C a excepción de que la enzima KPC-2 (K. pneumoniae) sustituyó a AmpC.

Los compuestos representativos de la presente invención exhiben inhibición de las β-lactamasas de clase C y de clase A en este ensayo. Por ejemplo, los compuestos de los ejemplos 1, 2 y 4 se analizaron en este ensayo y se encontró que tenían los valores de CI50 mostrados en la tabla 2. La tabla 3 contiene datos de ensayo para otros compuestos ilustrativos.

Protocolo del ensayo de sinergia:

El ensayo determina la concentración de un inhibidor de la β-lactamasa requerido para reducir la CMI de un antibiótico beta-lactámico a la mitad, un cuarto, un octavo, un dieciseisavo y un treintaydosavo frente a cepas de bacterias que normalmente son resistentes al antibiótico en cuestión. Esto se consigue titulando la BLI en una dilución seriada en una placa de microtitulación, mientras al mismo tiempo se titula el antibiótico en una dilución seriada descendente en la placa de microtitulación y después inoculando en la placa la cepa bacteriana en cuestión y dejando crecer a la bacteria durante la noche. Cada pocillo de esta microplaca contiene una combinación diferente de concentraciones del inhibidor y del antibiótico, lo que permite una determinación completa de cualquier sinergia entre los dos.

Combinaciones cepa bacteriana/antibiótico

CL 5701 (Pseudomonas aeruginosa; Pa AmpC)/ Imipenem

MB 2646 (Enterobacter cloacae; P99)/ Ceftazidima

CL 5513 (Klebsiella pneumoniae; SHV-5)/ Ceflazidima

CL 6188 (Acinetobacter baumanii; Oxa40)/ Imipenem

CL 6569 (Klebsiella pneumoniae; KPC-2)/ Imipenem

CL 5761 (Klebsiella pneumoniae; KPC-3)/ Imipenem

CLB 21648 (Acinetobacter baumanii; Ab AmpC)/ lmipenem

Procedimiento general del damero

1.: Todos los pocillos de las filas B-H de placas de microvaloración MIC de 2000 microlitros se llenan con 100 µl de MHBII + 1 % DMSO.

2.: Todos los pocillos de la fila A de placas de microvaloración MIC 2000 se llenan con 100 µl de 2x MMBII + 2 % DMSO.

3.: 100 µl de 4X la concentración final del antibiótico deseada se añaden al pocillo A1 de las placas MIC 2000.

4.: 100 µl de 2X la concentración final del antibiótico deseada se añaden a los pocillos A2-A12 de las placas MIC

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2000.

5.: 100 µl se diluyen en serie desde la fila A a la fila G de cada placa MIC 2000.

6.: 100 µl se extraen de cada pocillo de la fila G de cada placa MIC 2000.

7. 100 µl de 2X la concentración final del inhibidor deseada (en MHBII + 1 % DMSO) se añaden a los pocillos de 5 la columna 1 de las placas de microtitulación.

8.: 100 µl se diluyen en serie desde la columna 1 a la columna 11 de cada placa MIC 2000.

9.: 100 µl se extraen de cada pocillo de la columna 11 de cada placa MIC 2000.

10.Después, se inocula en las placas un crecimiento durante la noche (en TSB) de la cepa que se va a analizar

usando un inoculador MIC 2000. 10 11. Las placas se dejan a 37 ºC durante aproximadamente 20 horas para visualizar el crecimiento.

Medios (todos ellos esterilizados mediante autoclave antes de añadir DMSO):

MHBII + 1 % DMSO MHBII con ajuste catiónico (BBL™) 4,4 g DMSO 2,0 ml Agua destilada 198,0 ml 15 2X MHBII + 2 % DMSO MHBII con ajuste catiónico (BBL™) 8,8 g DMSO 4,0 ml Agua destilada 196,0 ml

1,02X MHBII MHBII con ajuste catiónico (BBL™) 4,4 g Agua destilada 198,0 ml

20 1,1XMHBII+1%DMSO MHBII con ajuste catiónico (BBL™) 4,4 g DMSO 2,0 ml Agua destilada 178,0 ml

TSB

El caldo tripticasa soja (BBL™) se preparó según las instrucciones del frasco.

25 La sinergia se puede expresar como la proporción entre la concentración mínima inhibidora (CMI) de un antibiótico analizado en ausencia de inhibidor de β-lactamasa y la CMI del mismo antibiótico analizado en presencia del inhibidor de β-lactamasa. Una proporción de uno (1) indica que el inhibidor de β-lactamasa no tiene efecto alguno sobre la potencia del antibiótico. Una proporción mayor de uno (1) indica que el inhibidor de β-lactamasa produce un

30 efecto sinérgico cuando se coadministra con el antibiótico. Los inhibidores de β-lactamasa preferidos de la presente invención exhiben una proporción de sinergia de al menos aproximadamente 2, los compuestos más preferidos exhiben una proporción de al menos aproximadamente 4, todavía más preferentemente al menos aproximadamente 8 y lo más preferentemente de al menos aproximadamente 16. Como alternativa, el efecto de sinergia se puede expresar como factor, de nuevo usando una concentración de BL1 inferior a la CMI del antibiótico. Por tanto, si la

35 CMI del antibiótico es 20 µg/ml y una concentración de 1,5 µM de BL1 reduce la CMI a 5 µg/ml, el efecto de sinergia se multiplica por cuatro o "sinergia 4X" a 1,5 µM de BL1.

Compuestos representativos de la presente invención muestran un efecto de sinergia, Por ejemplo, se determinó que los compuestos de los ejemplos 1, 2 y 4 tenían concentraciones 2x de sinergia en un intervalo de 40 aproximadamente 100 2x M o menos. Las concentraciones de sinergia para los ejemplos 1, 2 y 4 frenet a la cepa CL5701 de P. aeruginosa y la cepa CL6569 de Klebsiella pneumoniae se muestran en la tabla 2.

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Tabla 2. Datos biológicos

Ejemplo: R (* indica el punto de unión) P.a. AmpC CI50 (nM) 2X / 4X / 8X Sinergia CL5701 (µM)1 K.p. KPC-2 CI50 (nM) 16X / 32X / 64X Sinergia CL6569 (µM)2

1: imagen79 465 0,2 / 3,12 / 6,25 208 6,25 / 12,5 / 12,5

2: imagen80 69 3,12 / 6,25 / 6,25 245 6,25 / 12,5 / 25

4: imagen81 29,000 100 / 100 / >100 4.400 50 / 100 / 100

sulbactam: ------ 17,000 54 / >150 / >300 33.000 >500/>500/>500

1.: Estas son las concentraciones para 2X, 4X y 8X con imipenem frente a la cepa CL5701 de P. aeruginosa Por ejemplo, una concentración 6,25 µM del compuesto del ejemplo 1 reduce la CMI del imipenem frente a la cepa CL5701 de P. aeruginosa por un factor de 8 (sinergia 8X).

2.: Estas son las concentraciones para 16X, 32X y 64X con imipenem frente a la cepa CL6569.de K. pneumoniae. Por ejemplo, una concentración 12,5 µM del compuesto del ejemplo 1 reduce la CMI del imipenem frente a la cepa CL6569 de K. pneumoniae por un factor de 64 (sinergia 64X).

Tabla 3. Datos biológicos

Ejemplo nº: M-H(m/e)1 K.p. KPC-2 CI50 (nM) P.a. AmpC CI50 (nM)

1A: 347 210 465

2: 361 245 69

9: 333 355 110

10: 365 130 49

11a: 347 480 64

11b: 347 240 480

12: 319 17 1,000

13: 333 4.300 29.100

14: 361 225 520

15: 361 240 500

16: 365 90 110

17: 365 270 20

18: 377 290 120

19: 396 150 9,5

20: 348 660 740

21: 349 250 2.500

22: 349 520 2.250

23: 351 190 150

24: 351 710 19

25: 430 21 620

26: 430 280 45

27: 379 150 13

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28: 379 130 18

29: 351 120 720

30: 345 10.000 720

31: 361 2.500 290

32: 361 780 7.500

33: 347 8 820

34: 333 520 2.200

35: 373 1.000 590

36: 359 33 1.000

37: 333 3.200 840

38: 333 1.500 1.400

39: 361 1.600 270

40: 346 840 200

110: 308 30 610

111: 376 20 1.200

112: 376 13 165

113: 376 8 36

114: 378 11 340

115: 370 2 24

116: 528 70 440

117: 777 12 61

1. Valores obtenidos a través de CL-EM (modo de ion negativo).

Aunque la presente memoria enseña los principios de la presente invención con ejemplos proporcionados con fines ilustrativos, la práctica de la invención abarca todas las variaciones, adaptaciones y/o modificaciones habituales que entren dentro del alcance de las reivindicaciones siguientes. Todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patente citadas en el presente documento se incorporan en la divulgación por referencia en su totalidad, por lo que en el caso de cualquier inconsistencia prevalecerá la presente divulgación.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una combinación de un compuesto de fórmula I:

imagen1

5

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que

X es: 10

(1)

CH2,

(2)

CH2CH2, o

(3)

CH2CH2CH2;

15 R1 es C(O)N(R3)R4, R2 es SO3 M, OSO3 M, SO2 NH2, PO3 M, OPO3 M, CH2CO2 M, CF2CO2 M o CF3; M es H o un catión farmacéuticamente aceptable; R3 es HetA; R4 es H o alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con N(RA)RB;

20 o, como alternativa, R3 y R4 junto con el átomo de N al que están unidos ambos forman un anillo monocíclico saturado de 4 a 9 miembros que opcionalmente contiene 1 heteroátomo además del nitrógeno unido a R3 y R4 seleccionado de N, O y S, en donde el S está opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2; estando el anillo monocíclico opcionalmente condensado con, tiene un puente de, o está unido en forma espiro con un anillo heterocíclico saturado de 4 a 7 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma

25 independiente de N, O y S, de los que S está oxidado opcionalmente a S(O) o S(O)2, formando un sistema anular bicíclico, estando el sistema anular monocíclico o bicíclico formado de este modo sustituido opcionalmente con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente: (1) alquilo C1-6, (2) fluoroalquilo C1-6, (3) (CH2)1-2G, en donde G es OH, O-alquilo C1-6, O-fluoroalquilo C1-6, N(RA)RB, C(O)N(RA)RB, C(O)RA, CO2RA o SO2RA, (4) O-alquilo C1-6, (5) O-fluoroalquilo C1-6, (6) OH, (7) oxo, (8) halógeno, (9) N(RA)RB,

30 (10) C(O)N(RA)RB, (11) C(O)RA, (12) C(O)-fluoroalquilo C1-6, (13) C(O)ORA, o (14) S(O)2RA; HetA es un anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado de 4 a 9 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de forma independiente de N, O y S, estando cualquier anillo con S opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2 y estando 1 o 2 carbonos en el anillo opcionalmente oxidados a C(O); estando el anillo opcionalmente condensado con un cicloalquilo C3-7; y estando el anillo heterocíclico saturado o monoinsaturado

35 opcionalmente condensado opcionalmente sustituido con un total de 1 a 4 sustituyentes seleccionados de cero a 2 (CH2)nN(RA)RB y de cero a 2 (CH2)nRC; cada n es, de forma independiente, un número entero que es 0, 1, 2 o 3; cada RA es, de forma independiente, H o alquilo C1-8; cada RB es, de forma independiente, H o alquilo C1-8;

40 cada RC es, de forma independiente alquilo C1-6, OH, O-alquilo C1-8, OC(O)-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NHC(=NH)NH2, halógeno, CN, C(O)RA, C(O)ORA, C(O)N(RA)RB, SO2RA, SO2 N(RA)RB, piridilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo;

y un antibiótico carbapenem.

45 2. La combinación de la reivindicación 1, en la que el antibiótico carbapenem es imipenem.
3. La combinación de las reivindicaciones 1 o 2, que además comprende un inhibidor de DHP.
4.

La combinación de la reivindicación 3, en la que el inhibidor de DHP es ácido 7-(l-2-amino-2-carboxietiltio)-2-(2,250 dimetilciclopropanocarboxamida)-2-heptenoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
5. La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que X es -CH2-o -CH2CH2-.
6.

La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que R2 es OSO3 M. 55
7.

La combinación de acuerdo con la reivindicación 6, en la que R2 es OSO3H.
8.

La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que HetA es un heterociclo

saturado seleccionado de pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo y azocanilo; opcionalmente sustituido con N(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC; cada Rc es de forma independiente alquilo C1-6, C(=NH)NH2, NHC(=NH2)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
9. La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que HetA es:

imagen2

en las que el asterisco indica el punto de unión de HetA al resto del compuesto; T es H o RC; RC es alquilo C1-6, 10 OH, O-alquilo C1-8, C(=NH)NH2, NH-C(=NH)NH2, halógeno, CN, piridilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
10. La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que HetA es un anillo heterocíclico saturado opcionalmente condensado seleccionado del grupo constituido por azetidinilo, pirrolidinilo, oxopirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo,

15 tetrahidrotiopiranilo, morfolinilo, 1,1-dioxidotetrahidrotiopiranilo, azepanilo, oxazepanilo, azocanilo y azabiciclo[3.1.0]ciclohexilo, en donde el heterocíclico está opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nN(RA)RB y opcionalmente sustituido con 1 o 2 (CH2)nRC.
11. La combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que HetA es un anillo

20 heterocíclico seleccionado del grupo constituido por azetidinilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, azepanilo, oxazepanilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo y tetrahidropiranilo, en donde el anillo heterocíclico está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, CH3, CH2 NH2, CH2 N(H)CH3, CH2 N(CH3)2, OCH3, Cl, Br, F, NH2, N(H)CH3, N(CH3)2, C(O)NH2, C(O)N(H)CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)CH3, C(O)OCH3, OC(O)CH3, S(O)2CH3, S(O)2 NH2, S(O)2 N(H)CH3 o S(O)2 N(CH3)2.

25
12. La combinación de acuerdo con la reivindicación 11, en la que el compuesto de fórmula I es un compuesto seleccionado del grupo constituido por:

imagen3

en las que R2 es como se define en la reivindicación 1, T es H, alquilo C1-3, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, (CH2)2-3-O-alquilo C1-3, (CH2)2-3OH, (CH2)2-3F, (CH2)2-3-piperidinilo, (CH2)2-3-pirrolidinilo; y T' es H, Cl, Br, F, 5 alquilo C1-3, O-alquilo C1-3, OH, NH2, N(H)-alquilo C1-3 o N(-alquilo C1-3)2.
13. La combinación de acuerdo con la reivindicación 12, en la que T es H, CH3, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, (CH2)2-3OCH3, (CH2)2-3OH, (CH2)2-3F, (CH2)2-3-piperidinilo, (CH2)2-3-pirrolidinilo y T' es H, F, O-alquilo C1-3, OH, NH2, N(H)CH3, N(CH3)2.

10
14. La combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que R3 y R4 junto con el átomo N al que están ambos unidos forman un heterociclilo seleccionado del grupo constituido por:

imagen4

y

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

imagen5

en el que el anillo está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes cada uno de los cuales es, de forma independiente, alquilo C1-3, CF3, CH2OH, CH2O-alquilo C1-3, CH2OCF3, CH2 NH2, CH2 N(H)-alquilo C1-3, CH2 N(alquilo C1-3)2, O-alquilo C1-3, OCF3, oxo, Cl, Br, F, NH2, N(H)-alquilo C1-3, N(-alquilo C1-3)2, C(O)NH2, C(O)N(H)alquilo C1-3, C(O)N(-alquilo C1-3)2, C(O)-alquilo C1-3, C(O)O-alquilo C1-3 o S(O)2-alquilo C1-3.
15. La combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el compuesto de fórmula I es un compuesto seleccionado del grupo constituido por:

(2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida

(2S,5R)-N-[(4S)-azepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

(2S,5R)-N-[(4R)-azepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

(2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

(2S,5R)-7-oxo-N-[(3S)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

(2S,5R)-N-azocan-5-il-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

Ácido (2S,5R)-7-oxo-2-[(piperidin-4-ilamino)carbonil]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-6-sulfónico:

(4R,6S)-2-oxo-N-piperidin-4-il-3-(sulfooxi)-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxamida;

(4R,6S)-2-oxo-N-[(4S)-azepan-4-il]-3-(sulfooxi)-1,3-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxamida; y

sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
16. La combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el compuesto de formula I es un compuesto seleccionado del grupo constituido por:

(2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

(2S,5R)-N-[(3R,4S)-3-fluoropiperidin-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida;

Diastereómero

1 de (2S,5R)-7-oxo-N-[(3)-piperidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2

carboxamida;

Diastereómero

2 de (2S,5R)-7-oxo-N-[(3)-piperidin-3-il]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2

carboxamida;

(2S,5R)-7-oxo-N-azetidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(4R)-azepan-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(1-metilpiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S,4S)-3-fluoropiperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida o su diastereómero 3R,4R o una mezcla de los mismos; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S,4R)-3-fluoropiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S,4R)-3-metoxipiperidin-4-il)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2carboxamida; (2S,5R)-N-[(3R,4R)-4-aminopirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-[(3R,4R)-4-hidroxipirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-[(3R,4S)-4-hidroxipirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-[(3R,4S)-4-fluoropirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-[(3S,4R)-4-fluoropirrolidin-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3S)-1-piperidin-4-il-2-oxopirrolidin-3-il]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2carboxamida; (2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-1-piperidin-4-il-2-oxopirrolidin-3-il]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2carboxamida; (2S,5R)-N-[(3S,4R)-3-fluoroazepan-3-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-[(3R,4S)-3-fluoroazepan-4-il]-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-3-azabiciclo[3.1.0.]hex-6-il-7-oxo-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; (2S,5R)-N-metil-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (2S,5R)-2-{[2-(aminometil)piperidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-[(4-aminopiperidin-1-il)carbonil]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-(piperazin-1-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-(2,7-diazaespiro[3.5]non-2-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-(hexahidropirrolo[3.4-c]pirrol-2-(1H)-ilcarbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-{[-(3R)-3-aminopirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-{[-(3S)-3-aminopirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona; (2S,5R)-2-{[3-(dimetilamino)pirrolidin-1-il]carbonil)-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona;

y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
17. La combinación de acuerdo con las reivindicaciones 1, 2, 3 o 4, en la que el compuesto de fórmula I es un compuesto seleccionado del grupo constituido por:

5 (2S,5R)-7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (2S,5R)-7-oxo-N-[(3R)-pirrolidin-3-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida; y

sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. 10
18. La combinación de acuerdo con la reivindicación 17, en la que el compuesto de fórmula I es (2S,5R)-7-oxo-Npiperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

15 19. La combinación de acuerdo con las reivindicaciones 1, 2, 3 o 4, en la que el compuesto de fórmula I es (2S,5R)7-oxo-N-[(3S)-pirolidin-3-i]-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
20. La combinación de acuerdo con las reivindicaciones 1, 2, 3 o 4, en la que el compuesto de fórmula I es (2S,5R)20 7-oxo-N-piperidin-4-il-6-(sulfooxi)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida en forma de un monohidrato cristalino.