ES2284940T5

ES2284940T5 - Composición de vacuna que comprende al menos dos valencias, una coadyuvada, y la otra no

Info

Publication number: ES2284940T5
Application number: ES02779603T
Authority: ES
Inventors: Alain Francon
Original assignee: Sanofi Pasteur Inc
Current assignee: Sanofi Pasteur Inc
Priority date: 2001-08-08
Filing date: 2002-07-31
Publication date: 2012-07-02
Anticipated expiration: 2022-07-31
Also published as: EP1416958A1; CA2455406C; MXPA04001125A; ZA200400022B; NZ530727A; CN1541108A; EP1416958B1; HUP0401182A2; PT1416958E; US20040170648A1; HU228216B1; DE60219177D1; HUP0401182A3; FR2828406A1; BRPI0211151B8; FR2828406B1; WO2003013600A1; DK1416958T3; DK1416958T4; PL367904A1

Abstract

Una composición de vacuna que comprende (i) una primera valencia coadyuvada con un compuesto de aluminio que comprende iones hidroxilo (ii) una segunda vacuna que contiene un polisacárido de cápsula bacteriana que comprende uno o más grupos O-acetilo y (iii) iones fosfato, citrato o carbonato.

Description

Composición de vacuna que comprende al menos dos valencias, una coadyuvada, y la otra no

La presente invención tiene particularmente por objeto una composición de vacuna bivalente Hepatitis A / Fiebre tifoidea (HA-Vi) estabilizada en la que la valencia Vi conserva su poder inmunogénico durante al menos 5 aproximadamente 24 meses.

La hepatitis A y la fiebre tifoidea son dos enfermedades para las que se dispone ya de vacuna. Estas dos enfermedades se encuentran en regiones del globo donde las condiciones de higiene están lejos de ser óptimas. En la medida en que los respectivos agentes infecciosos tienen en común la misma vía de transmisión (vía oral-fecal) y en la medida en que las zonas endémicas de estas enfermedades se solapan ampliamente, parece interesante combinar las dos valencias en un mismo producto. En particular, se comprenderá fácilmente que, en la gama de las vacunas del viajero, una combinación HA-Vi sea más atractiva que las dos vacunas monovalentes HA y Vi que deben ser suministradas separadamente.

Ya se han realizado estudios con el fin de verificar que las valencias HA y Vi son compatibles especialmente en términos de inocuidad, poder inmunogénico y de estabilidad. Estos estudios utilizan combinaciones HA-Vi

15 preparadas a partir de las vacunas monovalentes que ya existen en el mercado; son esencialmente dos : por una parte, los estudios realizados combinando las monovalentes Havrix™ (HA) y Typherix™ (Vi) producidas por SmithKline Beecham Biologicals (Rixensart, Bélgica) y por otra parte los estudios realizados combinando las monovalentes Avaxim™ (HA) y Typhim Vi™ (Vi) producidas por Aventis Pasteur (Lyon, Francia).

En las dos series de estudios, la vacuna monovalente HA está constituida por el virus de la hepatitis A inactivado y adsorbido sobre hidróxido de aluminio. De igual forma, la vacuna monovalente de la fiebre tifoidea está constituida por el polisacárido de la cápsula de Salmonella typhi que permanece no coadyuvada. Por último, las combinaciones bivalentes se producen de manera idéntica, mezclando simplemente las vacunas monovalentes correspondientes (estas vacunas monovalentes se comercializan en forma líquida). Así, una dosis de Avaxim™ y una dosis de Typhim Vi™ se mezclan juntas para dar una dosis de la combinación bivalente HA-Vi.

25 Las dos series de estudios se han realizado con combinaciones constituidas menos de veinte meses antes de que sean realizadas las inyecciones en el marco de los ensayos clínicos. Estos estudios han mostrado que las combinaciones bivalentes eran equivalentes a las monovalentes correspondientes, especialmente en términos de poder inmunogénico. Así, la combinación bivalente de SmithKline Beecham Biologicals ha satisfecho las exigencias de las autoridades de Gran Bretaña y ha recibido ya una autorización para la comercialización en ese país. Esta autorización tiene sin embargo por contra una fecha de caducidad establecida de 12 meses después de la fabricación.

En el campo de las vacunas, una fecha e caducidad de 12 meses no puede considerarse suficiente, teniendo en cuenta especialmente el tiempo necesario para los controles de los lotes antes de la distribución. Una fecha de caducidad establecida de 24 o, mejor aún, de 36 meses facilita enormemente la comercialización de los lotes.

35 Ahora bien, en el caso de las combinaciones HA-Vi, la solicitante se ha dado cuenta de que, más allá de 16-18 meses después de la fecha de fabricación, la valencia Vi perdía progresivamente su poder inmunogénico y ha emitido una hipótesis sobre el origen de esta inestabilidad. En efecto, los grupos O-acetilo del polisacárido Vi que son característicos de la inmunogenicidad de Vi, se hidrolizan en el tiempo, sobre todo en condiciones alcalinas. Esta hidrólisis se considera responsable de la disminución del poder inmunogénico del polisacárido Vi y sería debido a la adsorción del componente Vi sobre el hidróxido de aluminio que está presente en la combinación bivalente como coadyuvante de la valencia HA. La valencia Vi se adsorbe inmediatamente sobre le gel de aluminio una vez que las valencias monovalentes se mezcla una con otra. Esta adsorción entraña mantener el polisacárido Vi en un ambiente alcalino. En efecto, estando cargado positivamente el hidróxido de aluminio, atrae los iones OH- del medio, lo que ocasiona un aumento del pH en el microentorno del gel de aluminio donde se encuentra el Vi tras su

45 adsorción. La hidrólisis de los O-acetilo en lo que a ella se refiere es un fenómeno muy lento cuyos efectos son realmente perceptibles al cabo de 16 - 18 meses aproximadamente.

No sólo la solicitante ha puesto en evidencia el problema de la inestabilidad de la valencia Vi a lo largo del tiempo, sino que propone una solución que consiste en añadir a la combinación bivalente un anión tal como un ion fosfato o citrato que impida la adsorción de la valencia Vi sobre el aluminio mientras se mantiene la valencia HA en forma coadyuvada.

Por lo tanto, en su enseñanza más general, la invención se refiere a una composición de vacuna que comprende al menos dos valencias; (i) una primera valencia que es la valencia hepatitis A y que está coadyuvada con hidróxido de aluminio y (ii) una segunda valencia que es la valencia fiebre tifoidea constituida por el polisacárido Vi de la cápsula de Salmonella typhi, que contiene un polisacárido de cápsula bacteriana que comprende uno o dos grupos O-acetilo

55 y que no está adsorbida sobre hidróxido de aluminio gracias a lo cual la primera valencia está coadyuvada, debido a la presencia de un compuesto adicional que sirve para impedir la adsorción de la segunda valencia sobre el hidróxido de aluminio, sin perturbar la adsorción de la primera valencia.

Según un modo de realización ventajoso, la adsorción de la segunda valencia está impedida por la presencia de un compuesto aniónico protector siempre que presente todas las garantías de seguridad necesarias para una utilización con fines de vacunación. Este compuesto protector es un fosfato, un citrato o también un carbonato. También es posible utilizar una combinación de diferentes aniones, por ejemplo, una combinación de iones fosfato y citrato. A título indicativo, es preciso que los iones fosfato puedan ser especialmente aportados por una solución que contiene fosfato monopotásico, fosfato disódico y cloruro de sodio.

El uso de un compuesto protector permite especialmente estabilizar la actividad antigénica de la segunda valencia durante un tiempo prolongado (24 meses o más), con preferencia durante la conservación a temperatura normal de almacenamiento o más elevada (v.g. 37°C). La estabilidad de la actividad inmunogénica se puede estimar por técnicas diversas midiendo esta actividad en el momento en que la composición se fabrica y después efectuando medidas idénticas a lo largo del tiempo, o al menos 24 meses después de la fecha de fabricación, y comparando los resultados obtenidos. Cuando los datos numéricos no han demostrado ser estadísticamente diferentes entre sí, se debe considerar que la actividad inmunogénica es estable. El título de la actividad inmunogénica de un antígeno se puede determinar por la técnica ELISA, en uso corriente en el campo de las vacunas.

La valencia hepatitis A puede estar constituida por el virus HA inactivado.

La segunda valencia, por definición, está constituida por el polisacárido Vi de la cápsula de Salmonella typhi, conjugado o no, que contiene dentro de su unidad repretida uno o dos grupos O-acetilos.

Por «polisacárido de cápsula bacteriana» se entiende un polisacárido constituido por encadenamiento de la unidad que se repite característica de un polisacárido de cápsula, cualquiera que sea su tamaño e independientemente de la modificación anexa. La unidad que se repite de un polisacárido que entra en la composición según la invención, comprende necesariamente al menos un grupo O-acetilo.

Para los fines de la presente invención, el polisacárido puede obtenerse en forma purificada a partir de la bacteria de origen según técnicas completamente convencionales. Según las necesidades, el polisacárido puede estar (i) fragmentado o no fragmentado y (ii) conjugado o no conjugado con un polipéptido portador tal como la anatoxina diftérica o tetánica.

En un contexto más específico, la invención tiene por objeto una composición de vacuna que comprende

(i) la valencia de HA coadyuvada con hidróxido de aluminio, (ii) la valencia de fiebre tifoidea constituida por polisacárido de Vi, composición en la que la valencia de Vi no está adsorbida sobre hidróxido de aluminio, y

(iii) iones fosfato, citrato o carbonato; en cantidad suficiente para impedir la adsorción de la valencia fiebre tifoidea, manteniendo la primera valencia en forma de coadyuvante.

Para los fines de la presente invención, la primera valencia puede ser coadyuvada bien por precipitación con hidróxido de aluminio, o bien por adsorción sobre hidróxido de aluminio.

El hidróxido de aluminio que sirve para coadyuvar la primera valencia puede ser hidróxido de aluminio puro (es decir un compuesto de aluminio que comprende iones Al3+ y iones hidroxilo) o cualquier hidróxido de aluminio conocido por el mismo nombre aunque desde el punto de vista químico no esté constituido exclusivamente por hidróxido de aluminio. Así, puede tratarse de compuestos mixtos de aluminio tales como los designados por el nombre de hidroxifosfato de aluminio o hidroxisulfato de aluminio. De manera general, se puede tratar de cualquier compuesto de aluminio que comprenda especialmente iones hidroxilo. A modo de ilustración, se cita el hidróxido de aluminio Alhydrogel™ comercializado por la firma Superfos Biosector.

Los iones fosfato, citrato o carbonato (compuesto protector) deben añadirse en cantidad suficiente para impedir la adsorción de la segunda valencia mientras se mantiene la primera valencia en forma coadyuvada. Esta cantidad depende de diversos factores, entre ellos la cantidad y la naturaleza de la primera valencia, su modo de coadyuvación, la cantidad y la naturaleza del hidróxido de aluminio y la cantidad de la segunda valencia. El experto en la técnica familiarizado con el campo de las vacunas está perfectamente capacitado para tener en cuenta estos requisitos a fin de determinar la cantidad apropiada de compuesto que impide la adsorción de la segunda valencia una vez que los demás factores han sido establecidos, de tal suerte que el hidróxido de aluminio sea saturado por los iones fosfato mientras se mantiene la primera valencia en forma coadyuvada.

Sin embargo, es preciso que las vacunas comerciales contengan de manera habitual de 0,6 a 1,5 mg de aluminio / ml. En las vacunas comercializadas de HepA, el gel de aluminio, presente a dosis convencionales (expresado en cantidad de aluminio), se encuentra ampliamente en exceso respecto del antígeno de la HepA en la medida en que los sitios de adsorción del gel de aluminio están lejos de estar saturados. Así, en la práctica, sólo la cantidad de aluminio parece ser determinante para establecer la cantidad de compuesto protector que debe estar presente.

Para una composición según la invención que contiene 0,3 mg de aluminio en forma de hidróxido de aluminio y en un volumen de 0,5 ml, conviene añadir iones fosfato en concentración aproximadamente 20 mM. Si la dosis de aluminio es el doble para ese mismo volumen, conviene añadir el doble de concentración de iones fosfato, es decir 40 mM. Pero para una composición según la invención que contiene 0,6 mg de aluminio en un volumen de 1 ml, es

suficiente una concentración 20 mM de iones fosfato.

A modo de ilustración, se indica que una vacuna bivalente según la invención puede contener en un volumen de 0,5 ml, (i) 160 unidades antigénicas o 1440 unidades ELISA de virus de la hepatitis A inactivados adsorbidos sobre (ii) hidróxido de aluminio que contiene 0,3 mg de aluminio ; (iii) 0,025 mg de polisacárido Vi ; y (iv) una concentración 20 mM de iones fosfato.

Las unidades antigénicas y las unidades ELISA citadas más arriba son, respectivamente, unidades establecidas con ayuda de ensayos ELISA de referencia apropiados para las firmas Aventis Pasteur y SmithKline Beecham Biologicals (van Hoecke et al, J. Travel. Med. (1998) 5 : 116 y André et al, en Prog. Med. Virol., Melnick JL Ed, Basel, Karger (1990) 37 : 72). No puede hacerse de otra manera puesto que no existe ninguna referencia normalizada internacional para la vacuna de HepA.

Una composición según la invención está ventajosamente en forma líquida y una dosis de vacuna se formula ventajosamente en un volumen comprendido entre 0,5 y 1 ml, ambos incluidos.

Una composición según la invención se puede realizar:

(i): añadiendo iones fosfato, citrato o carbonato a una preparación que contiene una valencia distinta de la valencia de fiebre tifoidea, coadyuvada por hidróxido de aluminio; y

(ii): mezclando la preparación obtenida en el punto (i) con una preparación que contiene la valencia de fiebre tifoidea; procedimiento en el que la primera valencia es la hepatitis A, la valencia de fiebre tifoidea está constituida por el polisacárido Vi de Salmonella typhi, y los iones fosfato, citrato o carbonato se añaden en cantidad suficiente para impedir la adsorción de la segunda valencia, manteniendo la primera valencia en forma de coadyuvante.

Ejemplo : Preparación de una composición HA Vi según la invención

A - Preparación del componente HA adsorbido

99 ml de un lote de virus HA inactivado cuyo título antigénico es de 885 U ELISA/ml se mezclan con 5,94 ml de 2fenoxi-etanol al 25 %. La homogeneización se lleva a cabo durante 15 min y después la preparación se filtra sobre Millipak 40 MPGL 04SH2. Después de la filtración se obtienen 95 ml de una preparación con un título de 835 U ELISA/ml.

A esta preparación, se añaden 47,5 ml de un gel de alúmina que contiene 3,14 mg de aluminio / ml. Se completa con 48 ml de PBS (tampón fosfato) 40 mM. Se agita durante una noche a 5°C (18 h) para que el componente HA se adsorba sobre el gel de alúmina. El pH es de 7,28.

B - Preparación de una solución de polisacárido Vi concentrado 10 veces

Se prepara un polvo de polisacárido Vi según el método de Gotschlich et al, Prog. Immunobiol. Standard (1972) 5 :

485. En un matraz de 30 ml que contiene 16,64 mg de Vi (9,5 g% de humedad residual, es decir 15,06 mg de peso seco), se vierten poco a poco 25,1 ml de agua destilada preparada para inyección (ppi), con agitación continua. Se deja proseguir la agitación durante 24 h a 5°C con el fin de obtener la disolución completa del polisacárido. Esta preparación se filtra sobre un filtro Millex 0,22 µm GV SLGV 025. El filtro se lava con 5 ml de agua destilada ppi. El volumen final es, por tanto, de 30,1 ml.

C - Preparación de vacuna bivalente de HAVi

A 62 ml de la preparación obtenida en el punto A (HA), se añaden 10,6 ml de una solución de fosfato 94 mM, y después 8,1 ml de la preparación obtenida en el punto B (Vi). Las características de la vacuna así obtenida son las siguientes:

Concentración final en fosfato: 20 mM

pH : 7,3

Osmolaridad: 578 mosm / kg

Esta preparación, llamada preparación P2, se reparte a continuación en dosis de 0,5 ml.

En paralelo se han preparado también otras dos composiciones bivalentes P2' y P2" que no contienen 20 mM de fosfato, sino, respectivamente, 10 y 40 mM de fosfato. Para hacer esto, se añaden 10,6 ml de una solución de fosfato 17,6 mM o 246 mM según la especie.

El comportamiento de los componentes HA y Vi en las composiciones P2, P2' y P2" se ha estudiado inmediatamente dosificando estos componentes por ELISA en las composiciones tal cuales o después de centrifugarlas. Se ha constatado que a 10 mM de fosfato, el HA permanecía adsorbido pero Vi se adsorbía sobre el gel de alúmina

mientras que a 40 mM de fosfato el Vi no se adsorbía más pero el HA se desorbía parcialmente. A 20 mM de fosfato, se cumplen las condiciones buscadas: el HA permanece adsorbido mientras que el Vi no se adsorbe.

A continuación, se ha estudiado la estabilidad de las dosis a 5°C ± 3°C durante 30 meses. Se ha evaluado especialmente por ELISA la capacidad antigénica del polisacárido Vi en las dosis de vacunas tomadas en su integridad y en el sobrenadante después de la centrifugación (el componente adsorbido sobre el gen de alúmina sedimenta con el gel) ; ello permite además establecer el porcentaje de Vi no adsorbido.

El ELISA se lleva a cabo por el método indirecto. El antígeno Vi que se ha de dosificar se pone intercalado entre anticuerpos anti-Vi que tapizan el fondo de una placa y anticuerpos anti-Vi de ratón. Se añade un anticuerpo anti IgG de ratón biotinilado, y después el complejo de estreptavidina biotinilado se acopla a peroxidasa de rábano. La reacción se revela por adición de sustrato dihidrocloruro de orto-fenilendiamina (OPD). La degradación de OPD se traduce por una coloración naranja oscura proporcional a la cantidad de antígeno Vi. Su intensidad se mide espectrofotométricamente.

En placas de 96 pocillos, se reparten 100 µl de suero anti Salmonella typhi. Se deja incubar 5 h a 37°C y después se vacía la placa y se efectúan 3 lavados en PBS (tampón fosfato) Tween al 0,05 %. Los sitios libres se saturan añadiendo 200 µl de una solución de leche en polvo diluida en PBS. Se incuba durante 1 h 30 min a 37°C y después se vacía la placa y se efectúan 3 lavados. Se preparan diluciones en serie al doble de una vacuna patrón para obtener una gama patrón. Las dosis de vacuna que se van a valorar así como una dosis de referencia (que permite verificar la gama de patronaje) se diluyen de manera apropiada; se reparten 100 µl de cada dilución en las cúpulas y se deja incubar durante una noche a 37°C. Se vacía la placa y se procede con los lavados. A continuación, se añaden 100 µl por cúpula de un suero de ratón anti-Vi diluido de manera apropiada. Se deja incubar durante 1 h a 37°C y seguidamente se vacía la placa y se procede con los lavados. Luego se fijan las anti-immunoglobinas de ratón biotiniladas (100 µl por cúpula de una dilución apropiada). Se deja incubar durante 1 h a 37°C y seguidamente se vacía la placa y se procede con los lavados. Entonces se fija la estreptavidina biotinilada acoplada a la peroxidasa (100 µl por cúpula de una dilución apropiada). Se deja incubar durante 1 h a 37°C y seguidamente se vacía la placa y se procede con los lavados. Se revela la placa añadiendo 100 µl por cúpula de una solución de OPD a 1 mg/ml en tampón citrato fosfato pH 5. Se deja incubar 30 min a temperatura ambiente en la oscuridad antes de añadir 100 µl de ácido sulfúrico 2 N en las cúpulas. La lectura de la placa se efectúa espectrofotométricamente a 492 nm. Se establece la curva patrón de la adsorbancia en función de la concentración. El título de cada una de las diluciones ensayadas se calcula en relación con la curva patrón y se expresa en ng/ml. Para obtener el título medio de cada dosis de vacuna ensayada se hace la media de títulos obtenidos con el conjunto de diluciones. El título se da en µg/dosis.

Se mide también la cantidad de O-acetilos del polisacárido Vi presente en el sobrenadante, después de la centrifugación.Los O-acetilos se titulan por un método colorimétrico utilizando hidroxilamina (Hestrin S. J. Biol. Chim. (1949) 180 : 249). La hidroxilamina en medio alcalino forma con los ésteres un ácido hidroxámico que, en presencia de sal férrica da una coloración marrón cuya intensidad se mide espectrofotométricamente a 540 nm.

Se realiza en paralelo un estudio idéntico con una preparación llamada preparación P1, preparada de la misma manera que P2, con la única diferencia de que no se añade fosfato en el momento de la constitución de la vacuna bivalente. En este caso, el componente Vi se adsorbe inmediatamente sobre el gel de alúmina y para realizar su dosificación después de la centrifugación, como para P2, conviene desorberlo previamente. Esta desorción se obtiene por modificación del pH y de la fuerza iónica del medio. Después de la centrifugación, el gel de alúmina se pone en contacto con una solución de citrato trisódico 150 mM durante 6 h a 37ºC. Después se centrifuga para recuperar el sobrenadante, donde se encuentra el componente Vi.

Los resultados se presentan en la tabla I siguiente.

TABLA I

5°C: T 0 3 meses 6 meses 9 meses 12 meses 18 meses 24 meses 30 meses

Vi en la vacuna entera: Vi ELISA (µg/dosis) P2 23,6 25,5 21,7 21,3 18,5 23,7 24,3 26,5

P1: 24,4 23,3 22,2 19,8 17,9 20,5 18,6 19, 3

Vi en el sobrenadante después dela centrifugación: Vi ELISA (µg/dosis) P2 24,3 26 23,1 21,8 17,9 25 21,9 25,8

P1: 21 16,9 16,5 15,4 12 14,7 21,8 15,7

O-acetilos (µmol/dosis): P2 0,127 0,148 0,116 0,117 0,130 0,134 0,095 0,143

P1: 0,081 0,056 0,055 0,055 0,061 0,057 0,090 0,054

polisacáridos (µg/dosis): P2 32,5 30,5 27,6 31 30,4 29,1 31,7 29,3

P1: 20,8 22 15,6 16,2 18,5 16,5 17 18,4

% de desorción de Vi en P1: 86 % 72 % 74 % 78 % 67 % 72 % 63 % 81,6 %

La estabilidad de la formulación P2 ha sido estudiada también a 25°C ± 2°C durante 6 meses y a 37°C ± 3°C durante 3 meses. Los resultados se presentan en las Tablas II y III siguientes.

Tabla II

25°C: T 0 1 mes 3 meses 6 meses

Vi en la vacuna entera: Vi ELISA (µg/dosis) P2 23,6 23,6 21,7 20,6

P1: 24,4 19,6 11,3 7,4

Vi en el sobrenadante después de la centrifugación: Vi ELISA (µg/dosis) P2 24,3 25,5 22,6 20,1

P1: 21 15 10,3 6,3

O-acetilos (µmol/dosis): P2 0,127 0,130 0,103 0,137

P1: 0,081 0,053 0,041 0,029

polisacáridos (µg/dosis): P2 32,5 31,6 25,5 27,2

P1: 20,8 17,3 10,3 6,3

% de desorción de Vi en P1: 86 % 77 % 91 % 85 %

Tabla III

37°C: T 0 1 mes 3 meses

Vi en la vacuna entera: Vi ELISA (µg/dosis) P2 23,6 24,1 21

P1: 24,4 12,7 5,6

Vi en el sobrenadante después de la centrifugación: Vi ELISA (µg/dosis) P2 24,3 25,5 21,1

P1: 21 9,9 4,7

O-acetilos (µmol/dosis): P2 0,127 0,143 0,104

P1: 0,081 0,050 0,026

polisacáridos (µg/dosis): P2 32,5 36 22,5

P1: 20,8 15,4 9,9

% de desorción de Vi en P1: 86 % 78 % 84 %

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición de vacuna que comprende (i) una primera valencia coadyuvada con un compuesto de aluminio que comprende iones hidróxido (ii) una segunda vacuna que contiene un polisacárido de cápsula bacteriana que comprende uno o más grupos O-acetilo y (iii) iones fosfato, citrato o carbonato, en cantidad

5 suficiente para impedir la adsorción de la segunda valencia, manteniendo la primera valencia en forma de coadyuvante; composición en la que la primera valencia es la valencia hepatitis A y la segunda valencia es la valencia fiebre tifoidea, que está constituida por el polisacárido Vi de la cápsula de Salmonella typhi.
2. Una composición de vacuna según la reivindicación 1, en la que la valencia de hepatitis A está constituida por virus de la hepatitis A inactivado.

10 3. Una composición de vacuna según la reivindicación 2, en la que la valencia de fiebre tifoidea posee un título antigénico estable durante al menos 24 meses.
4. Una composición según una de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la primera valencia está coadyuvada por un compuesto de aluminio que es hidróxido de aluminio o hidroxifosfato de aluminio.
5. Una composición según una de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la primera valencia esta coadyuvada 15 por adsorción sobre un compuesto de aluminio.
6. Un procedimiento de fabricación de una composición de vacuna según una de las reivindicaciones 1 a 5, según el que:

(i) se añaden iones fosfato, citrato o carbonato a una preparación que contiene una primera valencia coadyuvada por un compuesto de aluminio que comprende iones hidróxido; y

20 (ii) se mezcla la preparación obtenida en el punto (i) con una preparación que contiene una segunda valencia constituida por un polisacárido de cápsula bacteriana que comprende uno o más grupos O-acetilos; procedimiento en el que la primera valencia es la hepatitis A, la segunda valencia es la valencia fiebre tifoidea, que está constituida por el polisacárido Vi de Salmonella typhi, y los iones fosfato, citrato o carbonato se añaden en cantidad suficiente para impedir la adsorción de la segunda valencia, manteniendo la primera valencia en forma de coadyuvante.