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EP0663918A1 - Pure enantiomers of phosphoric-acid esters as phospholipase-a2 inhibitors - Google Patents

Pure enantiomers of phosphoric-acid esters as phospholipase-a2 inhibitors

Info

Publication number
EP0663918A1
EP0663918A1 EP93922534A EP93922534A EP0663918A1 EP 0663918 A1 EP0663918 A1 EP 0663918A1 EP 93922534 A EP93922534 A EP 93922534A EP 93922534 A EP93922534 A EP 93922534A EP 0663918 A1 EP0663918 A1 EP 0663918A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
mol
compounds according
compound
radical
configuration
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP93922534A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Hansjörg EIBL
Ulrich Massing
Clemens Unger
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Original Assignee
Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV filed Critical Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Publication of EP0663918A1 publication Critical patent/EP0663918A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/117—Esters of phosphoric acids with cycloaliphatic alcohols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/091—Esters of phosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl

Definitions

  • the invention relates to new enantiomerically pure phosphocompounds which have an inhibitory effect on the enzymatic activity of phospholipase A 2 and a process for their preparation, and also pharmaceutical preparations which contain such inhibitors.
  • Phospholipase A 2 is an enzyme that cleaves the sn-2 acyl bond of phospholipids. This enzyme is therefore involved in the formation of a large number of substances which trigger biological reactions, in particular in the formation of arachidonic acid and lysophospholipids.
  • a large number of biochemically active compounds are formed from arachidonic acid by enzymatic oxidation, which are summarized under the term eicosanoids, including prostagladins, tromboxanes, prostacyclins and leukotrienes. These different classes of compounds cause a large number of biochemically important reactions. For this reason, inhibitors of PLA 2 are of great interest for the development of new anti-inflammatory drugs or drugs which influence blood clotting. The aim of the invention is therefore to provide inhibitors for PLA 2 .
  • R 1 is a C. * •• - to C 22 - and in particular a C ** 6 - to C * 8 -alkyl radical, with a hexadecyl radical being particularly preferred.
  • R 4 is a C * -C ** 7 alkyl radical.
  • the compounds according to the invention are phosphocholines, phosphoethanolamines, phospho- (methyl) ethanolamines, phospho- (N, N-dimethyl) ethanolamines, phosphoinositols (D or L), Phosphoglycerols (D or L), phosphoserines (D or L), phospho- (N-methyl) -serines (D or L), phospho- (N, N-dimethyl) -serines (D or L), phospho- (N, N, N-trimethyl) -serines (D or L), phosphoglycols, phosphatidic acids, methyl phosphates, ethyl phosphates, 1,3-propanediol phosphates and 1,2-propanediol phosphates.
  • the new compounds are also drugs for combating tumors and protozoan and fungal diseases. They are also suitable for the therapy of autoimmune diseases and bone marrow damage. s
  • the invention also relates to a process for the preparation of such phosphatidyl compounds by reacting
  • phosphocholine-amino or phosphocholine-hydroxy product is used with an aceticating agent containing the radical R 4 to give the corresponding O-phospho-N-acyl or O-phospho-O-acyl Product implemented.
  • the compounds of the invention are pure in terms of their enantiomers. Since the PLA 2 works enantioselectively, the desired enantiomer or a mixture of the enantiomers can be used for PLA 2 modulation by means of the method according to the invention. It has been shown that the substances according to the invention which have a long aliphatic chain (for example the octadecane derivatives) can penetrate very well into cells in order to develop their effect there. Compounds which have a short acyl chain are particularly suitable. Surprisingly, those substances according to the invention which have an unnatural configuration and / or which contain the free amino or hydroxyl function in the molecule have a particularly pronounced inhibitory effect.
  • the substances according to the invention which have a long aliphatic chain for example the octadecane derivatives
  • Compounds which have a short acyl chain are particularly suitable.
  • the reaction scheme illustrates the representation of the 1-phospho-2-ester compounds. Since the introduction of the acyl group takes place in the last step of the synthesis - Ag - the polar phosphoric acid ester groups must not contain any free hydroxyl or amino groups.
  • the target compounds are substances with a free 2-hydroxyl group caused by the reaction sequence Aa - Af can be obtained, then the above restriction does not apply.
  • y means a number from 7 to 19
  • x means a number from 0 to 19.
  • the reaction scheme describes the preparation of 1 phospho-2-amide compounds. Since the introduction of the acyl group takes place in the last step of the synthesis - Bg -, the polar phosphoric acid ester groups must not contain any free hydroxyl or amino groups.
  • the target compounds are substances with a free 2-amino group that can be obtained by the reaction sequence Ba - Bf, then the above restriction does not apply.
  • the synthesis steps Ba) - Bc) correspond to the synthesis steps Aa) to Ac)
  • the synthetic route is modified in the following way: Instead of the reaction Ae, the free hydroxyl group in the 1-position of the corresponding intermediate is replaced by the reaction sequence mesylation and substitution by ammonia in the 1- Amino compound converted, which is then acylated. By debenzylation in the 2-position and exposure of the hydroxyl group, the phosphorylation can now take place in the 2-position.
  • the diagram describes the representation of the l-phospho-2-ester compounds.
  • the fatty acid - Cg - is introduced before the phosphorylation - Ci.
  • target compounds can be produced which have free hydroxyl or amino groups in the polar region, for example phosphoethanolamine, phosphoglycerol etc.
  • the synthesis steps Ca - Cc correspond to the reactions Aa - Ac. Tr-0 OH) I
  • the above synthesis route is modified in the following manner: a) instead of reaction step Cg, phosphorylation is carried out in the 2-position and the end product with free 1- Hydroyl group debenzylated; b) Instead of the reaction step Ce, the 1-hydroxyl group according to Mitsunobu (Mitsunobu 0., M. Wada and T. Sano, Stereospecific and stereoseletive reactions. I. Preparation of amines from alcohols. J. Am. Chem. Soc.
  • This reaction scheme is suitable for the preparation of l-phospho-2-amide compounds.
  • the amide formation - Dg - occurs before the phosphorylation -Di. It can also be used to prepare compounds which carry hydroxyl or amino groups in the polar region, for example phosphoethanolamine, phosphoglycerol etc.
  • the synthesis steps Da - Dd correspond to the reactions Ba - Bd. HO NPhth
  • the invention also relates to pharmaceutical preparations which contain the substances according to the invention.
  • triphenylphosphine pentadecane bromide 0.1 mol triphenylphosphine pentadecane bromide are dissolved in 400 ml THF.
  • the mixture is cooled to 0 ° C. and 0.12 mol of n-butyllithium (2.5 M in hexane) is slowly injected into the reaction solution. After stirring for 10 minutes at 0 ° C., the mixture is cooled to -78 ° C. 0.12 mol of isopropylidene glyceraldehyde (Lit: Hubhelen and Fi ⁇ scher) in 50 ml of THF are added dropwise within 30 minutes. After the dropwise addition, the mixture is stirred for a further 20 minutes at -78 ° C. and then the cooling is removed. One leaves over Stir night.
  • Tritylierun ⁇ A or B. c Tritylierun ⁇ A or B.
  • Phase in vacuo the residue in 1.6 1 dioxane / methanol (1: 1) and carefully mixed with 15 ml of conc. Sulfuric acid. The mixture is stirred for 1.5 hours at 50 ° C., then 1.2 1 potassium carbonate solution (40 g / 1) and 150 ml of conc. NaCl solution. It is extracted with 1.5 l of diisopropyl ether. The aqueous phase is extracted again with 450 ml of diisopropyl ether, the combined org. Phases evaporated in vacuo and the residue taken up in 70 ml of hexane.
  • the crude product of the phosphorylation (A, e) (0.1 mol), which is still contaminated with inorganic salts, is taken up in 450 ml of methanol / THF (1: 1). 10 g Pd / C (5%) in 40 ml water are added with stirring. After adding 40 ml of IN HC1, a nitrogen stream is passed through the reaction solution for 20 minutes. The reaction vessel is connected to a hydrogenation apparatus, the hydrogenolysis is carried out with vigorous stirring. After the hydrogen absorption has ended (about 4 hours), the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the filtrate is neutralized with ammonia solution.
  • the product 10-phosphocholine-2-O-acetyl-octadecane is eluted with chloroform-methanol-ammonia (55: 45: 9).
  • the products are dried azeotropically by adding toluene and then freed from water and solvent residues in vacuo.
  • the yield is X 3 (mmol,%).
  • the residue is dissolved in 50 ml of diisopropyl ether and placed on a column (650 g of silica gel, hexane / diisopropyl ether 2: 1 + 1% triethylamine).
  • a column 650 g of silica gel, hexane / diisopropyl ether 2: 1 + 1% triethylamine.
  • the non-polar impurities are eluted with hexane / diisopropyl ether (2: 1), then the intermediate product with diisopropyl ether.
  • the product-containing phases are evaporated in vacuo, the residue is taken up in 600 ml of methanol and 600 ml of dioxane and carefully with 12 ml of conc. Sulfuric acid added. The mixture is stirred at 60 ° C. for 1.5 hours. After cooling, 1.2 1 potassium carbonate solution.
  • 0.1 mol of l-hydroxy-2-N-phthalimido-octadecane is added dropwise to 0.115 mol of phosphorus oxychloride, together with 0.175 mol of triethylamine in 140 ml of THF, while cooling to ⁇ 10 ° C. The cooling is removed and the mixture is stirred for 10 minutes (KPG stirrer). 0.133 mol of N-methylethanolamine together with 0.175 mol of triethylamine in 75 ml of THF are added dropwise in such a way that the reaction temperature does not exceed 40 ° C. After 15 minutes, the hydrochloride is filtered off with suction and the filtrate is poured into 23 ml of 6N HCl while stirring.
  • the suspension is stirred for 10 hours at 80 ° C. (internal temperature). After cooling, the pH is adjusted to 9.0 first with solid NaOH and then with 6 N NaOH. It is extracted with 2.4 l of methanol / chloroform (1: 1). The upper phase is extracted three times with 550 ml of chloroform. In the lower phase there are solid components that do not interfere with further processing. The lower phases are combined and evaporated in vacuo. The backlog is under Heating in 125 ml conc. HCl finely suspended, then mixed with 550 ml of acetone and cooled to 0 ° C for one hour.
  • the filtrate is mixed with a further 5 liters of acetone and left at -20 ° C. for 24 hours. It is suctioned off, the residue is extracted into 370 ml of 12% ammonia solution. The upper phase is extracted twice with 250 ml of chloroform / methanol (8: 1). The product is obtained by evaporating the combined lower phases and drying in vacuo.
  • Phase in vacuo the residue in 1.3 1 dioxane / methanol (1: 1) and carefully mixed with 15 ml of conc. Sulfuric acid. The mixture is stirred for 1.5 hours at 50 ° C. and then 1 1 of potassium carbonate solution and 100 ml of conc. Cooking salt solution too. It is extracted with 1 1 diisopropyl ether. The aqueous phase is extracted again with 300 ml of diisopropyl ether, the combined org. Phases evaporated in vacuo and the residue taken up in 70 ml of hexane.
  • 0.1 mol of l-hydroxy-2-O-allyl octadecane and 0.15 mol of potassium tert-butoxide are dissolved in 160 ml of THF and warmed to 30 ° C.
  • a solution of 0.15 mol of benzyl chloride in 50 ml of THF is added dropwise and the mixture is stirred at 50 ° C. for 5 hours. It is extracted once with 100 ml of water, then twice with 50 ml of saline (150 g / 1) and then with 30 ml of 1N HCl. It is taken up in 100 ml of hexane and filtered through 50 g of silica gel. The solvents are distilled off in vacuo. The product is dried in vacuo.
  • 0.1 mol of 1-O-benzyl-2-O-allyl-octadecane is taken up in 150 ml of 2-propanol and the solution is mixed with 30 g of activated carbon. The mixture is stirred for 20 minutes, the activated carbon is separated off, 3 g of Pd / C (5%) and 10 ml of 5N HCl are added and the mixture is boiled under reflux for 48 hours.
  • the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the solvent is distilled off in vacuo. The residue is crystallized from 150 ml of hexane at -20 ° C., the fine crystalline product is dried in vacuo.
  • 0.1 mol l-O-benzyl-2-O-lauroyl-octadecane are dissolved in 600 ml THF. 10 g Pd / C (5%) in 20 ml water are added. By adding conc. Formic acid is adjusted to a pH of 5.5. The mixture is hydrogenated for about 2 hours with vigorous stirring. After the hydrogen uptake has ended, the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the amounts of solvent are reduced by about half by evaporation in vacuo at room temperature. 1.2 l of ethyl acetate are added and the mixture is left to crystallize at -20 ° C. for 24 hours. It is suctioned off and the product is dried in a high vacuum. The product is immediately used in the subsequent reactions.
  • the product is purified by chromatography on 800 g of silica gel.
  • the apolar impurities are first eluted with chloroform / methanol (20: 1).
  • the product is then eluted with chloroform / methanol (1: 1).
  • 0.1 mol l-O-benzyl-2-N-lauroyl-octadecane are dissolved in 600 ml THF. 10 g Pd / C (5%) in 20 ml water are added. The mixture is hydrogenated for about 2 hours with vigorous stirring. After the hydrogen uptake has ended, the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the solvents are distilled off in vacuo. The residue, the product, is dried under high vacuum.
  • the phosphorylation was carried out according to the above procedure starting from 2- (R) -hydroxy-2-0-lauroyl-eicosan.
  • the phosphorylation was carried out according to Filthuth and Eibl (Filthuth, E. and Eibl, H.: Synthesis of enantiomerically pure lysophosphatidylinositols and alkylphosphoinositols. Chem. Phys. Lipids 60 (1991/1992) 253-261).
  • Phosphorylation was carried out according to Eibl and Blume (Eibl, H. and Blume, A.: The influence of Charge on phosphatidic acid bilayer membranes. Biochim. Biophys. Acta 553 (1979) 476-488).
  • the phosphoric acid glycol esters, phosphoric acid propanediol (1,2) * esters and the phosphoric acid propanediol (1,3) ester of the above compounds were obtained according to Woolley and Eibl (supra) using the corresponding benzyl ethers.
  • the "Mosher” esters esters of (R) - (+) - ⁇ -methoxy- ⁇ -trifluoromethylphenylacetic acid) from A or B, c and from A, d and from B, d were synthesized.
  • the esters were checked by 19F-NMR spectroscopy to determine whether only a diastereomeric ester had formed by esterification with the chiral alcohol, as is expected from an enantiomerically pure alcohol.
  • the 19F-NMR spectra of the "Mosher” esters of racemic alcohols were used.
  • the comparative "Mosher” esters corresponding racemic alcohols were produced by mixing the “Mosher” esters of the chiral alcohols.
  • the compounds according to the invention are enantiomerically pure.
  • the signal intensities of the respective undesirable distereomer are below 1%.
  • the undesired diastereomer signal can also result from the incomplete enantiomeric purity of the commercially available R “Mosher” acid. (ee> 99%)
  • the enantiomeric excess the chiral substances according to the invention are consequently more than 99%.
  • the volume of a test batch was 2 ml.
  • 2 ⁇ mol substrate substrate in solution / suspension; 20 ⁇ mol / ml water
  • buffer Tris / HCl 100 mM + 10 mM CaCl 2 ; pH: 8.9
  • the samples were preincubated in a water bath at 25 ° C., then the reaction was started by adding the PLA 2 solution. Depending on the substrate properties, 0.01-1 U enzyme was added. The incubation times varied from 10-60 minutes. Control batches without enzyme were carried out in parallel for each substrate. The amount of enzyme and the incubation times were chosen so that a maximum of 10% of the substrate used was converted. At least three determinations were made for each substrate.
  • the reactions were stopped by extraction with 2 ml of chloroform / methanol (3: 1). The mixture was centrifuged for 5 minutes (500 g), the lower phase separated. The upper phase was then extracted once more with 2 ml of chloroform / methanol (3: 1), then with 2 ml of chloroform and centrifuged. The combined lower phases were freed from the solvent in a stream of nitrogen.
  • the residue was taken up in 200-2000 ⁇ l chloroform / methanol / water 30: 60: 8. Aliquots of 2-20 ⁇ l were taken from these solutions and used for the quantitative determination of the amount of product by the HPTLC technique.
  • the specific activities of the PLA2 against the corresponding substrates in ⁇ mol / min / mg U / mg were calculated from the amounts of the product formed, the amounts of enzyme used and the incubation times. With the pure products, the yield of extracted product was determined in an analogous approach and the experimental result was thus corrected.
  • the calibration solutions were prepared by weighing the products and taking them up in chloroform / methanol / water 30: 60: 8. The concentration of the calibration solutions was 100 pmol / ⁇ l.
  • the corresponding amount of "inhibitor” was sonicated together with DPPC or PAF and the sample was then subjected to the PLA 2 hydrolysis.
  • the amount of lysolipid formed is determined as described and the inhibitory effect is calculated in comparison with a DPPC or PAF sample which has not been treated with "inhibitor".
  • the inhibition of the DPPC / PLA 2 or PAF / PLA 2 system is determined by comparing the ratios of the conversion rates measured independently of one another with the ratios the jointly measured sales rates are compared.
  • the plate was run in chloroform / methanol / ammonia (25%) 50: 50: 4 in order to remove contaminants.
  • the plate was dried at 180 ° C for 10 minutes.
  • 2-10 ⁇ l of the calibration solutions and 2-20 ⁇ l of the product solutions to be measured were applied to the thin-layer plate using an HPTLC applicator.
  • the plate was developed in the most suitable solvent for the substrate / product separation (Tab. Xl).
  • the developed plates dried at 180 ° C for 10 minutes.
  • To the The cooled plate was dipped in a solution of 100 g of copper sulfate in 906 ml of water and 94 ml of phosphoric acid (85%) for 15 seconds.
  • the plate was allowed to dry at 110 ° C for one minute.
  • the staining was finally done by heating the plate to 180 ° C. Depending on the product, this process took 1-4 minutes.
  • the plate thus stained was measured in a densitometer.
  • the product quantities were determined via the calibration substances also applied and the resulting calibration curve. These could then be used to calculate the enzymatic conversions.
  • Solvent A chloroform / methanol / triethylamine / water 60: 70: 68: 16 solvent B: chloroform / methanol / ammonia (25%)

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Abstract

The invention concerns compounds of the general formula (I), in which R1 is a C¿10?-C22 alkyl group, R?2¿ is an O-CO-R4, NH-CO-R4, -OH, -OCH¿3?, -OC2H5, -OC3H7, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2 or -N?+(CH¿3)3Cl- group, R4 is a C¿1?-C20 alkyl group and R?3¿ is one of the following groups: -C¿2?H4-N?+(CH¿3)3, -C2H4-N+H(CH3)2, -C2H4-N+H2CH3, -C2H4-N+H3, pentahydroxycyclohexanyl derivatives, in particular myo-inositol derivatives, 1,2- or 2,3-(R or S)-dihydroxypropanyl, seryl (D or L), N-methylseryl (D or L), N,N-dimethylseryl, (D or L), N,N,N-trimethylseryl (D or L), H, methyl, ethyl, hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 2-hydroxypropyl, R2 and (II) being interchangeable with each other, plus enantiomers thereof.

Description

ENANTIOMERENREINE PHOSPHORSAUREESTERN ALS PHOSPHOLIPASE A2- INHIBITOREN. ENANTIOMER-PURE PHOSPHORUS REESTERS AS PHOSPHOLIPASE A2 INHIBITORS.
Beschreibungdescription
Die Erfindung betrifft neue enantiomerenreine Phosphoverbin- dungen, die eine inhibitorische Wirkung auf die enzymatische Aktivität der Phospholipase A2 aufweisen und ein Verfahren zu ihrer Herstellung, sowie pharmazeutische Zubereitungen, die solche Inhibitoren enthalten.The invention relates to new enantiomerically pure phosphocompounds which have an inhibitory effect on the enzymatic activity of phospholipase A 2 and a process for their preparation, and also pharmaceutical preparations which contain such inhibitors.
Die Phospholipase A2 (PLA2 ) ist ein Enzym, welches die sn-2- Acylbindung von Phospholipiden spaltet. Dieses Enzym ist daher an der Bildung einer großen Anzahl von biologische Reaktionen auslösenden Stoffen beteiligt, und zwar insbeson¬ dere bei der Bildung von Arachidonsäure und von Lysophospho- lipiden. Aus der Arachidonsäure werden durch enzymatische Oxidation eine Vielzahl biochemisch wirksamer Verbindungen gebildet, die unter dem Begriff Eicosanoide zusammengefaßt werden, wozu auch die Prostagladine, Tromboxane, Prostazykli- ne und Leukotriene gehören. Diese verschiedenen Verbindungs¬ klassen rufen eine Vielzahl von biochemisch wichtigen Reaktionen hervor. Aus diesem Grund sind Inhibitoren von PLA2 für die Entwicklung neuer entzündungshemmender oder auch die Blutgerinnung beeinflussender Arzneimittel von großem Inte¬ resse. Die Erfindung hat daher zum Ziel, Inhibitoren für PLA2 bereitzustellen.Phospholipase A 2 (PLA 2 ) is an enzyme that cleaves the sn-2 acyl bond of phospholipids. This enzyme is therefore involved in the formation of a large number of substances which trigger biological reactions, in particular in the formation of arachidonic acid and lysophospholipids. A large number of biochemically active compounds are formed from arachidonic acid by enzymatic oxidation, which are summarized under the term eicosanoids, including prostagladins, tromboxanes, prostacyclins and leukotrienes. These different classes of compounds cause a large number of biochemically important reactions. For this reason, inhibitors of PLA 2 are of great interest for the development of new anti-inflammatory drugs or drugs which influence blood clotting. The aim of the invention is therefore to provide inhibitors for PLA 2 .
Diese Ziele werden erfindungsgemäß durch die Bereitstellung einer Gruppe von Phosphorsäureestern mit der allgemeinen FormelThese goals are achieved according to the invention by providing a group of phosphoric acid esters with the general formula
0 II0 II
R1 -C(R2 )H-CH2 -0-P-OR3 o- erreicht, worin R1 einen Alkylrest mit 10 bis 22 C-Atomen bedeutet, R2 gleich -OH, -OCH3 , -OC2H5 , -OC3 H7 , -NH2 , -NHCH3 , -N(CH3 )2, -N+ (CH3 )3C1" , -0-C(0)R4 oder -NH-C(0)R4 bedeutet, wobei R4 für einen Alkylrest mit 1 - 20 C-Atomen steht und R3 eine der folgenden Gruppen darstellt:R 1 -C (R 2 ) H-CH 2 -0-P-OR 3 o- achieved, wherein R 1 is an alkyl radical having 10 to 22 carbon atoms, R 2 is -OH, -OCH 3 , -OC 2 H 5 , -OC 3 H 7 , -NH 2 , -NHCH 3 , -N (CH 3 ) 2 , -N + (CH 3 ) 3 C1 ", -0-C (0) R 4 or -NH-C (0) R 4 , where R 4 represents an alkyl radical having 1 to 20 C atoms and R 3 represents one of the following groups:
-C2 HA -N+ (CH3 )3 , -C2H4 -N+ H(CH3 )2 , -C2H4 -N+ H2CH3 , -C2 H4 -N+H3 , Pentahydroxycyclohexanyl-, insbesondere myo-Inositolderivate, 1,2- oder 2,3-(R oder S)-Dihydroxypropanyl-, Seryl (D oder L)-, (N-Methyl)-Seryl (D oder L)-, (N,N-Dimethyl)-Seryl (D oder L)-, (N,N,N-Trimethyl)-Seryl (D oder L)-, H-, Me¬ thyl-, Ethyl-, Hydroxyethyl-, 3-Hydroxypropyl-, 2-Hydroxypro- pyl. Bei den erfindungsgemäßen Verbindungen sind-C 2 H A -N + (CH 3 ) 3 , -C 2 H 4 -N + H (CH 3 ) 2 , -C 2 H 4 -N + H 2 CH 3 , -C 2 H 4 -N + H 3 , pentahydroxycyclohexanyl, especially myo-inositol derivatives, 1,2- or 2,3- (R or S) -dihydroxypropanyl-, seryl (D or L) -, (N-methyl) -seryl (D or L) - , (N, N-Dimethyl) -seryl (D or L) -, (N, N, N-trimethyl) -seryl (D or L) -, H-, methyl, ethyl, hydroxyethyl, 3rd -Hydroxypropyl-, 2-hydroxypropyl. In the compounds of the invention
0 R2 und O-P-OR3 gegeneinander vertauschbar. Bei den erfin- o- dungsgemäßen Substanzen kann das den Rest R2 tragende C-Atom sowohl in der R- als auch in der S-Konfiguration vorliegen. Der Alkylrest R1 kann sowohl gesättigte als auch ungesättigte Kohlenstoffbindungen aufweisen. In einer bevorzugten Ausfüh¬ rungsform ist R1 ein C.* •• - bis C22 - und insbesondere ein C** 6 - bis C* 8 -Alkylrest, wobei ein Hexadecylrest besonders bevor¬ zugt ist. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist R4 ein C* -C** 7-Alkylrest.0 R 2 and OP-OR 3 interchangeable. In the case of the substances according to the invention, the C atom carrying the radical R 2 can be present both in the R and in the S configuration. The alkyl radical R 1 can have both saturated and unsaturated carbon bonds. In a preferred embodiment, R 1 is a C. * •• - to C 22 - and in particular a C ** 6 - to C * 8 -alkyl radical, with a hexadecyl radical being particularly preferred. In a further preferred embodiment, R 4 is a C * -C ** 7 alkyl radical.
Je nach der Bedeutung von R3 handelt es sich also bei den erfindungsgemäßen Verbindungen um Phosphocholine, Phospho- ethanolamine, Phospho-( -methyl)-ethanolamine, Phospho-(N,N- dimethyl)-ethanolamine, Phosphoinositole (D oder L), Phospho- glycerine (D oder L) , Phosphoserine (D oder L) , Phospho-(N- Methyl)-serine (D oder L) , Phospho-(N,N-Dimethyl)-serine (D oder L), Phospho-(N,N,N-Trimethyl)-serine (D oder L), Phos- phoglykole, Phosphatidsäuren, Methylphosphate, Ethylphospha- te, 1,3-Propandiolphosphate und 1,2-Propandiolphosphate. Die neuen Verbindungen sind weiterhin auch Arzneimittel zur Bekämpfung von Tumoren sowie von Protozoen- und Pilz¬ erkrankungen. Sie sind ebenfalls geeignet zur Therapie von Autoimmunerkrankungen und von KnochenmarksSchädigungen. sDepending on the meaning of R 3 , the compounds according to the invention are phosphocholines, phosphoethanolamines, phospho- (methyl) ethanolamines, phospho- (N, N-dimethyl) ethanolamines, phosphoinositols (D or L), Phosphoglycerols (D or L), phosphoserines (D or L), phospho- (N-methyl) -serines (D or L), phospho- (N, N-dimethyl) -serines (D or L), phospho- (N, N, N-trimethyl) -serines (D or L), phosphoglycols, phosphatidic acids, methyl phosphates, ethyl phosphates, 1,3-propanediol phosphates and 1,2-propanediol phosphates. The new compounds are also drugs for combating tumors and protozoan and fungal diseases. They are also suitable for the therapy of autoimmune diseases and bone marrow damage. s
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung solcher Phosphatidylverbindungen durch Umsetzen vonThe invention also relates to a process for the preparation of such phosphatidyl compounds by reacting
Isopropyliden-Glycerinaldehyd mit einer Triphenylphos- phinalkylbromid-Verbindung mittels einer Wittigreak- tion, einer Hydrierung und Deacetonierung des so erhaltenen Produktes auf an sich bekannte Weise, anschließender Tritylierung des hydrierten und deacetonierten Produktes zur entsprechenden O-Tritylhydroxy-Verbindung, - Benzylierung der O-Tritylhydroxy-Verbindung und Detrity- lierung zum entsprechenden Hydroxy-O-Benzylzwischenpro- dukt und Weiterverarbeitung des Zwischenproduktes entweder dadurch, daß man es durch Phosphorylierung zur entsprechenden Phospho-0- Benzylverbindung mit anschließender Debenzylierung zum entsprechenden O-Phospho-Hydroxy-Produkt, insbesondere einem O-Phosphorsäureester oder O-Phosphorsäurediester mit freier 2-Hydroxylgruppe umsetzt, oder daß man das Zwischenprodukt durch eineIsopropylidene-glyceraldehyde with a triphenylphosphine alkyl bromide compound by means of a Wittig reaction, hydrogenation and deacetonation of the product obtained in a manner known per se, subsequent tritylation of the hydrogenated and deacetonated product to the corresponding O-tritylhydroxy compound, - benzylation of the O- Tritylhydroxy compound and detritylation to the corresponding hydroxy-O-benzyl intermediate and further processing of the intermediate either by phosphorylation to the corresponding phospho-0-benzyl compound with subsequent debenzylation to the corresponding O-phospho-hydroxy product, in particular one Reacts O-phosphoric acid ester or O-phosphoric acid diester with free 2-hydroxyl group, or that the intermediate by a
Phthalimideinführung unter Konfigurationsumkehr und an¬ schließender Detritylierung zur entsprechenden Hydroxy- N-Phthalimido-Verbindung umsetzt, die dann mittels einer Phosphorylierung auf an sich bekannte Weise in die ent¬ sprechende Phospho-N-Phthalimido-Verbindung umgesetzt wird, welche dann durch Phthalsäureabspaltung in das gewünschte O-Phospho-Amino-Produkt , insbesondere ein 0- Phosphorsäureester- oder O-Phosphorsäurediester-Amino- Produkt überführt wird. In einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens wird z.B. das Phosphocholin-A ino-oder Phos- phocholin-Hydroxy-Produkt mit einem den Rest R4 enthaltenden Acelierungsmittel zum entsprechenden O-Phospho-N-Acyl- oder O-Phospho-O-Acyl-Produkt umgesetzt.Introducing phthalimide with reversal of configuration and subsequent detritylation to the corresponding hydroxy-N-phthalimido compound, which is then converted by means of phosphorylation in a manner known per se into the corresponding phospho-N-phthalimido compound, which is then split off into the by phthalic acid desired O-phospho-amino product, in particular a 0-phosphoric ester or O-phosphoric diester amino product is transferred. In a preferred embodiment of the process according to the invention, for example the phosphocholine-amino or phosphocholine-hydroxy product is used with an aceticating agent containing the radical R 4 to give the corresponding O-phospho-N-acyl or O-phospho-O-acyl Product implemented.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind bezüglich ihrer Enan- tiomeren rein. Da die PLA2 enantioselektiv arbeitet, kann mittels dem erfindungsgemäßen Verfahren gezielt das gewünsch¬ te Enantiomer oder auch eine Mischung der Enantiomere zur PLA2 -Modulation eingesetzt werden. Es hat sich gezeigt, daß die erfindungsgemäßen Substanzen, die eine lange aliphatische Kette aufweisen (z.B. die Octadecanderivate) , sehr gut in Zellen eindringen können, um dort ihre Wirkung zu entfalten. Besonders geeignet sind dabei Verbindungen, die eine kurze Acylkette aufweisen. Überraschenderweise zeigen diejenigen erfindungsgemäßen Substanzen, die eine unnatürliche Konfigu¬ ration aufweisen und/oder die die freie Amino- bzw. Hydroxyl- funktion im Molekül enthalten, besonders ausgeprägte inhibi¬ torische Wirkung.The compounds of the invention are pure in terms of their enantiomers. Since the PLA 2 works enantioselectively, the desired enantiomer or a mixture of the enantiomers can be used for PLA 2 modulation by means of the method according to the invention. It has been shown that the substances according to the invention which have a long aliphatic chain (for example the octadecane derivatives) can penetrate very well into cells in order to develop their effect there. Compounds which have a short acyl chain are particularly suitable. Surprisingly, those substances according to the invention which have an unnatural configuration and / or which contain the free amino or hydroxyl function in the molecule have a particularly pronounced inhibitory effect.
In den im folgenden angeführten ReaktionsSchemata A bis D sind die Verfahren zur Synthese der erfindungsgemäßen Verbin¬ dungen zusammengefaßt.The processes for the synthesis of the compounds according to the invention are summarized in the reaction schemes A to D given below.
Syntheseweσ ASynthesis method A
Das Reaktionsschema veranschaulicht die Darstellung der 1- Phospho-2-Esterverbindungen. Da die Einführung der Acylgruppe im letzten Schritt der Synthese - Ag - erfolgt, dürfen die polaren Phosphorsäureester-Gruppen keine freien Hydroxyl- oder Aminogruppen beinhalten.The reaction scheme illustrates the representation of the 1-phospho-2-ester compounds. Since the introduction of the acyl group takes place in the last step of the synthesis - Ag - the polar phosphoric acid ester groups must not contain any free hydroxyl or amino groups.
Ausnahme; Sind die Zielverbindungen jedoch Substanzen mit einer freien 2-Hydroxylgruppe, die durch die Reaktionsfolge Aa - Af erhalten werden können, dann gilt obige Einschränkung nicht.Exception; However, the target compounds are substances with a free 2-hydroxyl group caused by the reaction sequence Aa - Af can be obtained, then the above restriction does not apply.
*H-CH=0 Ph3P-CH2-(CH2 )y-CH3 * H-CH = 0 Ph 3 P-CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
I a) Wittigreaktion / KettenaufbauI a) Wittig reaction / chain structure
I b) Hydrierung / DeacetonierungI b) hydrogenation / deacetonation
OH OHOH OH
CH2-C*H-CH2 -CH2-(CH2 )y-CH3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| c) Tritylierung| c) Tritylation
TrO OH 1 i CH2 -C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 TrO OH 1 i CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| d) Benzylierung / Detritylierung| d) benzylation / detritylation
HO OBz i CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 HO OBz i CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| e) Phosphorylierung O ι\| e) phosphorylation O ι \
R3 -O-P 0 OBz i IR 3 -OP 0 OBz i I
0" CH2-C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 0 "CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
f ) Debenzylierungf) Debenzylation
0 M R3_O-P - o OH i I I 0" CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 0 M R3_O-P - o OH i II 0 "CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| g) Acylierung| g) acylation
0 w R3_O-P - O 0-C(0)-(CH2 )X-CH3 0 w R3_O-P - O 0-C (0) - (CH 2 ) X -CH 3
0" CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 0 " CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
Hierbei bedeutet *, daß das C-Atom in der R- oder S-Konfigu- ration vorliegt, aber auch racemisch sein kann. Dies kann durch die entsprechende Auswahl der Edukte erreicht werden.Here * means that the C atom is in the R or S configuration, but can also be racemic. This can be achieved by the appropriate selection of the starting materials.
y bedeutet eine Zahl von 7 bis 19, x bedeutet eine Zahl von 0 bis 19.y means a number from 7 to 19, x means a number from 0 to 19.
Zur Synthese der 2-Phospho-l-Esterverbindungen wird der Syn¬ theseweg auf folgende Weise modifiziert: Anstelle der Phos¬ phorylierung Ae wird das entsprechende Zwischenprodukt in 1- Position acyliert, die Hydroxylgruppen in 2-Position durch katalytische Hydrogenolyse freigesetzt und dann in 2-Position phosphoryliert. Syntheseweσ BTo synthesize the 2-phospho-l-ester compounds, the synthetic route is modified in the following way: Instead of the phosphorylation Ae, the corresponding intermediate is acylated in the 1-position, the hydroxyl groups in the 2-position are released by catalytic hydrogenolysis and then in 2 -Position phosphorylated. Synthesis method B
Das Reaktionsschema beschreibt die Darstellung von 1 Phospho- 2-Amidverbindungen. Da die Einführung der Acylgruppe im letz¬ ten Schritt der Synthese - Bg - erfolgt, dürfen die polaren Phosphorsäureester-Gruppen keine freien Hydroxyl- oder A ino- gruppen enthalten.The reaction scheme describes the preparation of 1 phospho-2-amide compounds. Since the introduction of the acyl group takes place in the last step of the synthesis - Bg -, the polar phosphoric acid ester groups must not contain any free hydroxyl or amino groups.
Ausnahme: Sind die Zielverbindungen Substanzen mit einer freien 2-Aminogruppe, die durch die Reaktionsfolge Ba - Bf erhalten werden können, dann entfällt obige Einschränkung.Exception: If the target compounds are substances with a free 2-amino group that can be obtained by the reaction sequence Ba - Bf, then the above restriction does not apply.
Die Syntheseschritte Ba) - Bc) entsprechen den Synthese¬ schritten Aa) bis Ac)The synthesis steps Ba) - Bc) correspond to the synthesis steps Aa) to Ac)
TrO OH l i CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 TrO OH li CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
, d) Phthalimideinführung / Detritylierung, d) phthalimide introduction / detritylation
HO NPht » i CH2 -C*H-CH2 -CH2-(CH2 )y-CH3 HO NPht »i CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
e) Phosphorylierunge) phosphorylation
0 w R3_O-P - 0 NPht ι I l 0- CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 0 w R3_O-P - 0 NPht ι I l 0- CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
f) Phthalsäureabspaltung 0 II R3 _0-P - 0 NH, o- CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 f) Elimination of phthalic acid 0 II R3 _ 0 -P - 0 NH, o- CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| g ) Acylierung| g) acylation
O IIO II
R3 -O-P 0 NH-C ( 0 ) -CH2 )X -CH3 I I / 0" CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) -CH3 R 3 -OP 0 NH-C (0) -CH 2 ) X -CH 3 II / 0 " CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) -CH 3
*, x und y haben die bei Syntheseweg A angegebene Bedeutung.*, x and y have the meaning given for synthesis route A.
Zur Synthese der 2-Phospho-1-Esterverbindungen wird der Syn¬ theseweg auf folgende Weise modifiziert: Anstelle der Reak¬ tion Ae wird die freie Hydroxylgruppe in der 1-Position des entsprechenden Zwischenprodukts durch die Reaktionsfolge Mesylierung und Substitution durch Ammoniak in die 1-Amino- verbindung umgewandelt, die dann acyliert wird. Durch Deben- zylierung in der 2-Position und Freilegung der Hydroxylgruppe kann jetzt die Phosphorylierung in 2-Position erfolgen.To synthesize the 2-phospho-1-ester compounds, the synthetic route is modified in the following way: Instead of the reaction Ae, the free hydroxyl group in the 1-position of the corresponding intermediate is replaced by the reaction sequence mesylation and substitution by ammonia in the 1- Amino compound converted, which is then acylated. By debenzylation in the 2-position and exposure of the hydroxyl group, the phosphorylation can now take place in the 2-position.
Syntheseweσ CSynthesis method C
Das Schema beschreibt die Darstellung der l-Phospho-2-Ester- Verbindungen. Im Unterschied zu A erfolgt die Einführung der Fettsäure - Cg - vor der Phosphorylierung - Ci. Damit können Zielverbindungen hergestellt werden, die im polaren Bereich freie Hydroxyl- oder Aminogruppen tragen, z.B. Phosphoetha- nolamin, Phosphoglycerin usw. Die Syntheseschritte Ca - Cc entsprechen den Reaktionen Aa - Ac. Tr-0 OH ) IThe diagram describes the representation of the l-phospho-2-ester compounds. In contrast to A, the fatty acid - Cg - is introduced before the phosphorylation - Ci. In this way, target compounds can be produced which have free hydroxyl or amino groups in the polar region, for example phosphoethanolamine, phosphoglycerol etc. The synthesis steps Ca - Cc correspond to the reactions Aa - Ac. Tr-0 OH) I
CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
L d) Allylierung / DetritylierungL d) allylation / detritylation
OH OA11 \ i CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 OH OA11 \ i CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
e) Benzylierunge) Benzylation
..
BzO OA11 i l CH2 -C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 BzO OA11 il CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| f) Allyletherspaltung| f) allyl ether cleavage
BzO OH ι iBzO OH ι i
CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y •CH,CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y • CH,
g) Acylierungg) acylation
BzO OCO-(CH2 )x-CH3 BzO OCO- (CH 2 ) x -CH 3
I i CH2-C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 I i CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
,| h) Debenzylierung, | h) Debenzylation
HO 0-CO-(CH2 )X-CH3 CH2 -C*H-CH2-CH2 -(CH2 )y-CH3 HO 0-CO- (CH 2 ) X -CH 3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| i) Phosphorylierung 0 R3O-'P-O 0-CO-(CH2 )X-CH3 | i) Phosphorylation 0 R 3O-'PO 0-CO- (CH 2 ) X -CH 3
I II I
0" - CH2-C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 s0 "- CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3 s
*, x und y haben die bei Syntheseweg A angegebene Bedeutung.*, x and y have the meaning given for synthesis route A.
Zur Synthese a) der 2-Phospho-1-Hydroxyverbindungen und b) der 2-Phospho-1-Aminoverbindungen wird obiger Syntheseweg auf folgende Weise modifiziert: a) Anstelle der Reaktionsschritts Cg wird in 2-Position phosphoryliert und zum Endprodukt mit freier 1-Hydroylgruppe debenzyliert; b) anstelle des Reaktionsschritts Ce wird die 1-Hydroxyl- gruppe nach Mitsunobu (Mitsunobu 0., M. Wada und T. Sano, Stereospecific and stereoseletive reactions. I. Preparation of amines from alcohols. J. Am. Chem. Soc. £4, 679-680 (1972); Mitsunobu 0., The use of diethyl azodicarboxylate and triphenylphosphine in synthesis and transformation of natural products. Synthesis 1981. 1-28) in eine N-Phthalimidgruppe überführt. Nach Abspaltung der Allylschutzgruppe in 2-Posi- tion wird phosphoryliert. Die Aminogruppe in der 1-Position wird durch reduktive Abspaltung des Phthalsäurerests freige¬ setzt.To synthesize a) the 2-phospho-1-hydroxy compounds and b) the 2-phospho-1-amino compounds, the above synthesis route is modified in the following manner: a) instead of reaction step Cg, phosphorylation is carried out in the 2-position and the end product with free 1- Hydroyl group debenzylated; b) Instead of the reaction step Ce, the 1-hydroxyl group according to Mitsunobu (Mitsunobu 0., M. Wada and T. Sano, Stereospecific and stereoseletive reactions. I. Preparation of amines from alcohols. J. Am. Chem. Soc. £ 4, 679-680 (1972); Mitsunobu 0., The use of diethyl azodicarboxylate and triphenylphosphine in synthesis and transformation of natural products. Synthesis 1981. 1-28) converted into an N-phthalimide group. After splitting off the allyl protecting group in the 2-position, phosphorylation is carried out. The amino group in the 1 position is released by reductive cleavage of the phthalic acid residue.
Syntheseweg DSynthetic route D
Dieses Reaktionsschema ist zur Darstellung von l-Phospho-2- Amidverbindungen geeignet. Im Unterschied zu - B - erfolgt die Amidbildung - Dg - vor der Phosphorylierung -Di. Damit können auch Verbindungen dargestellt werden, die im polaren Bereich Hydroxyl- oder Aminogruppen tragen, z.B. Phosphoetha- nolamin, Phosphoglycerin usw. Die Syntheseschritte Da - Dd entsprechen den Reaktionen Ba - Bd. HO NPhthThis reaction scheme is suitable for the preparation of l-phospho-2-amide compounds. In contrast to - B - the amide formation - Dg - occurs before the phosphorylation -Di. It can also be used to prepare compounds which carry hydroxyl or amino groups in the polar region, for example phosphoethanolamine, phosphoglycerol etc. The synthesis steps Da - Dd correspond to the reactions Ba - Bd. HO NPhth
. i. i
CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| e) Benzylierung| e) Benzylation
BzO NPhth t tBzO NPhth t t
CH2 -C*H-CH2 -CH2-(CH2 )y-CH3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| f) Phthalsaureabspaltung| f) Elimination of phthalic acid
BzO NH, l t CH2 -C*H-CH2 -CH2 -(CH2 )y-CH3 BzO NH, according to CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| g ) Acylierung| g) acylation
BzO NH-CO-(CH2 )X-CH3 BzO NH-CO- (CH 2 ) X -CH 3
CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
| h) Debenzylierung| h) Debenzylation
HO NH-CO-(CH2 )X-CH3 CH2 -C*H-CH2 -CH2 - ( CH2 ) y -CH3 HO NH-CO- (CH 2 ) X -CH 3 CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3
I i ) PhosphorylierungI i) phosphorylation
0 u0 u
R30-P - 0 NH-CO-(CH2 )X-CH3 R 3 0-P - 0 NH-CO- (CH 2 ) X -CH 3
0" CH2-C*H-CH2-CH2-(CH2 )y-CH3 *, x und y haben die bei Syntheseweg A angegebene Bedeutung.0 "CH 2 -C * H-CH 2 -CH 2 - (CH 2 ) y -CH 3 *, x and y have the meaning given for synthesis route A.
Beispiele für die inhibitorische Wirkung der Substanzen sind in Tabelle 1 und 2 dargestellt.Examples of the inhibitory effect of the substances are shown in Tables 1 and 2.
Tabelle 1:Table 1:
Inhibitorische Wirkung von l-O-Phosphocholin-2-(-Tabelle) octadecanen auf das System DPPC/PLA2Inhibitory effects of 1-O-phosphocholine-2 - (- table) octadecanes on the DPPC / PLA2 system
R-Konfiguration S-KonfigurationR configuration S configuration
Inhibitor Inhibition Inhibitor InhibitionInhibitor inhibition inhibitor inhibition
(10 %) (%) (10 %) (%)(10%) (%) (10%) (%)
Tabelle 2 :Table 2:
Inhibitorische Wirkung von l-O-Phosphocholin-2-(-Tabelle)- octadecanen auf das System PAF/PLA2Inhibitory effects of l-O-phosphocholine-2 - (- table) - octadecanes on the PAF / PLA2 system
R-Konfiguration S-KonfigurationR configuration S configuration
Inhibitor Inhibition Inhibitor InhibitionInhibitor inhibition inhibitor inhibition
(10 %) (%') (10 %) (%)(10%) (% ') (10%) (%)
Die Erfindung betrifft auch pharmazeutische Zubereitungen, die die erfindungsgemäßen Substanzen enthalten.The invention also relates to pharmaceutical preparations which contain the substances according to the invention.
Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung näher erläu¬ tern.The following examples are intended to explain the invention in more detail.
Beispiel 1:Example 1:
Wittigreaktion/Kettenaufbau A oder B. a:Wittig reaction / chain structure A or B. a:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-1.2-Isoproyliden-oσtadec-3-enEx: 2- (R / S / rac) -1.2-isoproylidene-oσtadec-3-ene
0.1 mol Triphenylphosphin-pentadecan-bromid werden in 400 ml THF gelöst. Man kühlt auf 0°C und spritzt 0.12 mol n-Butyl- lithium (2.5 M in Hexan) langsam in die Reaktionslösung. Nach 10 Minuten Rühren bei 0°C kühlt man auf -78°C ab. 0.12 mol Isopropylidenglycerinaldehyd (Lit: Hubschwerlen und Fi¬ scher) in 50 ml THF werden innerhalb von 30 Minuten zuge¬ tropft. Nach dem Zutropfen wird noch 20 Minuten bei -78°C gerührt und anschließend die Kühlung entfernt. Man läßt über Nacht rühren. Es wird gegen 350 ml Wasser extrahiert, die untere Phase wird nochmals gegen 50 ml Diisopropylether ex¬ trahiert. Die org. Phasen werden im Vakuum abgedampft und der Rückstand in 350 ml Pentan aufgenommen. Unter starkem Rühren kühlt man auf 0°C ab. Vom Rückstand wird abgesaugt und mit 150 ml Pentan nachgewaschen. Das Filtrat extrahiert man mit 120 ml konz. NaCl-Lsg. , dampft die Lösungsmittel der org. Phasen im Vakuum ab, nimmt den Rückstand in 20 ml Hexan auf und trennt das apolare Nebenprodukt durch eine Säulenfiltra¬ tion mit Hexan an 160 g Kieselgel ab. Anschließend wird das Produkt mit Hexan/Diisopropylether eluiert. Man gewinnt das Produkt durch sorgfältiges Abdeεtillieren der Lösungsmittel im Vakuum.0.1 mol triphenylphosphine pentadecane bromide are dissolved in 400 ml THF. The mixture is cooled to 0 ° C. and 0.12 mol of n-butyllithium (2.5 M in hexane) is slowly injected into the reaction solution. After stirring for 10 minutes at 0 ° C., the mixture is cooled to -78 ° C. 0.12 mol of isopropylidene glyceraldehyde (Lit: Hubschwerlen and Fi¬ scher) in 50 ml of THF are added dropwise within 30 minutes. After the dropwise addition, the mixture is stirred for a further 20 minutes at -78 ° C. and then the cooling is removed. One leaves over Stir night. It is extracted against 350 ml of water, the lower phase is extracted again against 50 ml of diisopropyl ether. The org. Phases are evaporated in vacuo and the residue is taken up in 350 ml of pentane. The mixture is cooled to 0 ° C. with vigorous stirring. The residue is filtered off and washed with 150 ml of pentane. The filtrate is extracted with 120 ml of conc. NaCl solution. , the solvents of the org. Phases in vacuo, the residue is taken up in 20 ml of hexane and the apolar by-product is separated off by column filtration with hexane on 160 g of silica gel. The product is then eluted with hexane / diisopropyl ether. The product is obtained by carefully distilling off the solvents in vacuo.
Ausbeute: 0.076 mol = 76 % M = 324.549 g/mol (C21H40O2 ) Rf = 0.49 (Hexan/Diisopropylether (4:1)) [α]D(R) = -4.60 (Reine Substanz) [α]D(S) = +4.60 (Reine Substanz) Analyse: ber. : C = 77.71 H = 12.42 gef.: C = 77.98 H - 12.56Yield: 0.076 mol = 76% M = 324,549 g / mol (C 21 H 40 O 2 ) R f = 0.49 (hexane / diisopropyl ether (4: 1)) [α] D (R) = -4.60 (pure substance) [ α] D (S) = +4.60 (pure substance) Analysis: calc.: C = 77.71 H = 12.42 found: C = 77.98 H - 12.56
Beispiel 2:Example 2:
Hydrierunσ/Deacetonierunσ A oder B, b:Hydrogenation / Deacetonation A or B, b:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-1.2-OctadecandiolEx: 2- (R / S / rac) -1,2-octadecanediol
Zu 0.1 mol 1.2-Isopropyliden-octadec-3-en in 800 ml THF wird 18 g Pd/C (10 %ig) in 18 ml Wasser zugegeben. Bevor man das Reaktionsgefäß an eine Hydrierapparatur anschließt, leitet man 20 Minuten einen Stickstoffström durch die Reaktionsmi¬ schung. Nach Beendigung der Wasserstoffaufnähme (12-24 Stun¬ den) wird über einen Membran- oder Glasfaserfilter der Katalysator abgesaugt. Zum Filtrat werden 120 ml 2 N HC1 gegeben und eine Stunde bei 60°C gerührt. Nach dem Abkühlen wird mit 900 ml Kaliumcarbonatlsg. (40 g/1) extrahiert. Die wässrige Phase wird wiederum mit 300 ml THF extrahiert, die org. Phasen vereinigt und die Lösungsmittel im Vakuum abde¬ stilliert. Durch Zugabe von Toluol wird das enthaltene Wasser azeotrop abdestilliert. Lösungsmittel- und Wasserspuren wer¬ den durch Trocknung im Vakuum beseitigt. Ausbeute: 0.097 = 97 % M •= 286.50 g/mol (C18H3B02) Rf = 0.19 (Chloroform/Methanol 20:1)18 g of Pd / C (10%) in 18 ml of water are added to 0.1 mol of 1,2-isopropylidene-octadec-3-ene in 800 ml of THF. Before the reaction vessel is connected to a hydrogenation apparatus, a nitrogen stream is passed through the reaction mixture for 20 minutes. After the hydrogen uptake has ended (12-24 hours), the catalyst is suctioned off through a membrane or glass fiber filter. 120 ml of 2N HCl are added to the filtrate and the mixture is stirred at 60 ° C. for one hour. After cooling, 900 ml of potassium carbonate solution. (40 g / 1) extracted. The aqueous phase is again extracted with 300 ml of THF, the org. Phases are combined and the solvents are distilled off in vacuo. The water contained is distilled off azeotropically by adding toluene. Traces of solvent and water are removed by drying in vacuo. Yield: 0.097 = 97% M • = 286.50 g / mol (C 18 H 3B 0 2 ) R f = 0.19 (chloroform / methanol 20: 1)
Rf (Zwischenprodukt) = 0.50 (Hexan/Diisopropylether 4:1) R (Edukt) = 0.56 (Hexan/Diisopropylether 4:1) Analyse: ber.: C = 73.21 H = 9.98 N = 4.10 gef.: C = 73.10 H = 10.25 N = 4.25R f (intermediate) = 0.50 (hexane / diisopropyl ether 4: 1) R (starting material) = 0.56 (hexane / diisopropyl ether 4: 1) Analysis: calc .: C = 73.21 H = 9.98 N = 4.10 found: C = 73.10 H = 10.25 N = 4.25
Beispiel 3:Example 3:
Tritylierunσ A oder B. c:Tritylierunσ A or B. c:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Trityl-2-hydroxy-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-trityl-2-hydroxy-octadecane
Zu 0.1 mol 1.2-Octadecandiol in 260 ml Toluol wird 0.15 mol Triethylamin gegeben. Es wird auf Siedetemperatur erhitzt und 0.115 mol Tritylchlorid in 125 ml Toluol werden in 10 Minuten eingetropft. Man laßt eine Stunde unter Rückfluß kochen. Vom Lösungsmittel wird im Vakuum abdestilliert. Den Rückstand gibt man in 550 ml konz. NaCl-Lsg./Kaliumcarbonatlsg. (40 g/1) (1:1) und extrahiert mit 550 ml Diisopropylether. Die org. Phase wird gegen 210 ml konz. NaCl-Lsg./Kaliumcarbonat¬ lsg. (40 g/1) (10:1) extrahiert. Über mit Kaliumcarbonat basisch eingestelltes Kieselgel (80 g) wird die org. Phase säulenfiltriert. Man eluiert vollständig mit weiteren 350 ml Diisopropylether (+ 0.5 ml Triethylamin) und dampft die Elua- te im Vakuum ab. Aus 550 ml Pentan wird zwei Tage bei -20°C kristallisiert. Das Produkt kristallisiert in feinen Nadeln. Die Trocknung erfolgt über KOH im Vakuum. Ausbeute: 0.09 mol = 90 %0.15 mol of triethylamine is added to 0.1 mol of 1,2-octadecanediol in 260 ml of toluene. The mixture is heated to boiling temperature and 0.115 mol of trityl chloride in 125 ml of toluene are added dropwise in 10 minutes. Allow to reflux for an hour. The solvent is distilled off in vacuo. The residue is concentrated in 550 ml. NaCl solution / potassium carbonate solution (40 g / 1) (1: 1) and extracted with 550 ml of diisopropyl ether. The org. Phase is concentrated against 210 ml. NaCl solution / potassium carbonate solution (40 g / 1) (10: 1) extracted. The silica gel (80 g) is made basic with potassium carbonate. Column filtered phase. The whole is eluted with a further 350 ml of diisopropyl ether (+ 0.5 ml of triethylamine) and the eluates are evaporated off in vacuo. It is crystallized from 550 ml of pentane at -20 ° C for two days. The product crystallizes in fine needles. Drying takes place over KOH in a vacuum. Yield: 0.09 mol = 90%
M = 528.821 g/mol (C37H52θ2 )M = 528,821 g / mol (C 37 H 52 θ 2 )
Rf = 0.70 (Diethylether/Pentan 1:1)R f = 0.70 (diethyl ether / pentane 1: 1)
Rf (Edukt) - 0.09 (Diethylether/Pentan 1:1)R f (educt) - 0.09 (diethyl ether / pentane 1: 1)
Beispiel 4: Benzylierunσ/Detritylierunσ A, d:Example 4: Benzylierunσ / Detritylierunσ A, d:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-Hydroxy-2-0-benzyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-hydroxy-2-0-benzyl-octadecane
In 450 ml THF werden 0.1 mol l-O-Trityl-2-hydroxy-octadecan und 0.12 mol Kalium-tert-butylat gelöst. Man erwärmt auf 50°C und tropft 0.12 mol Benzylchlorid in 150 ml THF zu. Nach zwei Stunden wird 0.045 mol Kalium-tert.-butylat zugesetzt und 0.045 mol Benzylchlorid in 60 ml zugetropft. Nach weiteren zwei Stunden werden 450 ml NaCl-Lsg. (100 g/1) zugegeben. Nach der Phasentrennung destilliert man das Lösungsmittel der org. Phase im Vakuum ab, nimmt den Rückstand in 1.6 1 Dioxan/Methanol (1:1) auf und versetzt vorsichtig mit 15 ml konz. Schwefelsäure. Man rührt 1.5 Stunden bei 50°C, gibt dann zur Reaktionslösung 1.2 1 Kaliumcarbonatlösung (40 g/1) sowie 150 ml konz. NaCl-Lsg.. Es wird mit 1.5 1 Diisopropyl¬ ether extrahiert. Die wassrige Phase wird nochmals mit 450 ml Diisopropylether extrahiert, die vereinigten org. Phasen im Vakuum abgedampft und der Rückstand in 70 ml Hexan aufgenom¬ men. An 700 g Kieselgel wird erst mit 1.5 1 Hexan, dann mit Hexan/Diisopropylether (20:1) säulenfiltriert, bis der Tri- tylether eluiert ist. Anschließend wird das Produkt mit Di¬ ethylether/Pentan 1:1 eluiert. Ausbeute: 0.083 mol = 83 % M = 376.622 g/mol (C25H A02) R = 0.35 (Diethylether/Pentan (1:))0.1 mol of 10-trityl-2-hydroxy-octadecane and 0.12 mol of potassium tert-butoxide are dissolved in 450 ml of THF. The mixture is heated to 50 ° C. and 0.12 mol of benzyl chloride in 150 ml of THF is added dropwise. After two hours, 0.045 mol of potassium tert-butoxide is added and 0.045 mol of benzyl chloride in 60 ml is added dropwise. After a further two hours, 450 ml of NaCl solution. (100 g / 1) added. After the phase separation, the solvent of the org. Phase in vacuo, the residue in 1.6 1 dioxane / methanol (1: 1) and carefully mixed with 15 ml of conc. Sulfuric acid. The mixture is stirred for 1.5 hours at 50 ° C., then 1.2 1 potassium carbonate solution (40 g / 1) and 150 ml of conc. NaCl solution. It is extracted with 1.5 l of diisopropyl ether. The aqueous phase is extracted again with 450 ml of diisopropyl ether, the combined org. Phases evaporated in vacuo and the residue taken up in 70 ml of hexane. Column filtration on 700 g of silica gel is carried out first with 1.5 l of hexane and then with hexane / diisopropyl ether (20: 1) until the trityl ether is eluted. The product is then eluted with diethyl ether / pentane 1: 1. Yield: 0.083 mol = 83% M = 376.622 g / mol (C 25 H A 0 2 ) R = 0.35 (diethyl ether / pentane (1 :))
Rf (Zwischenprodukt) = 0.80 (Diethylether/Pentan (1:1)) Rf (Edukt) = 0.70 (Diethylether/Pentan (1:1)) Analyse: ber. : C = 79.73 H = 11.78 0 = 8.49 gef.: C = 79.81 H = 11.82 O = 8.27R f (intermediate) = 0.80 (diethyl ether / pentane (1: 1)) R f (starting material) = 0.70 (diethyl ether / pentane (1: 1)) Analysis: calc.: C = 79.73 H = 11.78 0 = 8.49 found: C = 79.81 H = 11.82 O = 8.27
Beispiel 5: sExample 5: s
Phosphorylierung A, e:Phosphorylation A, e:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Phosphocholin-2-0-benzyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-phosphocholine-2-0-benzyl-octadecane
Zu 0.115 mol Phosphoroxychlorid wird unter Kühlung auf <10°C 0.1 mol l-Hydroxy-2-O-benzyl-octadecan (A, d) zusammen mit 0.175 mol Triethylamin in 140 ml THF zugetropft. Man entfernt die Kühlung und läßt 10 Minuten rühren (KPG-Rührer) . 0.133 mol N-Methylethanolamin zusammen mit 0.175 mol Triethylamin in 75 ml THF werden so zugetropft, daß die Reaktionstempera¬ tur 40°C nicht übersteigt. Man saugt nach 15 Minuten vom Hydrochlorid ab und gießt das Filtrat unter Rühren zu 23 ml 6 N HC1. Nach 5 Minuten neutralisiert man mit konz. Ammoniaklö¬ sung. Das Lösungsmittel wird im Vakuum vorsichtig abgedampft, bis nur noch Wasser übergeht. Die Vorlage nimmt man mit 270 ml Chloroform und 340 ml Methanol auf und extrahiert gegen 230 ml Wasser. Das Lösungsmittel der unteren Phase wird, bis auf Reste an Wasser, vorsichtig im Vakuum abgedampft. Der Rückstand der Vorlage wird in 280 ml Dichlormethan/2-Propanol (1:3) aufgenommen und mit 0.24 mol Dimethylsulfat versetzt. Man erwärmt auf 40°C und tropft rasch 0.25 mol Kaliumcarbonat in 100 ml Wasser zu. Nach 30 Minuten intensiven Rührens läßt man abkühlen und trennt die Phasen. Das Lösungsmittel der oberen Phase wird im Vakuum abgedampft, der Rückstand in 500 ml Methanol und 450 ml Chloroform aufgenommen und gegen 450 ml Wasser extrahiert. Das Lösungsmittel der unteren Phase wird unter Zusatz von Toluol im Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wird in 55 ml Dichlormethan gelöst. Durch Zugabe von 600 ml Aceton wird das Rohprodukt über Nacht ausgefällt. Dies, noch mit kleinen Mengen an Salzen, verunreinigte Pro¬ dukt wird in der Folgereaktion eingesetzt. M = 541.750 g/mol (C30H56O5NP) Rf = 0.17 (Chloroform/Methanol/Ammoniaklsg. 6 % (60:40:6))0.1 mol of l-hydroxy-2-O-benzyl-octadecane (A, d) together with 0.175 mol of triethylamine in 140 ml of THF are added dropwise to 0.115 mol of phosphorus oxychloride while cooling to <10 ° C. The cooling is removed and the mixture is stirred for 10 minutes (KPG stirrer). 0.133 mol of N-methylethanolamine together with 0.175 mol of triethylamine in 75 ml of THF are added dropwise in such a way that the reaction temperature does not exceed 40 ° C. After 15 minutes, the hydrochloride is suctioned off and the filtrate is poured into 23 ml of 6N HCl with stirring. After 5 minutes, neutralize with conc. Ammonia solution. The solvent is carefully evaporated in vacuo until only water passes over. The template is taken up in 270 ml of chloroform and 340 ml of methanol and extracted against 230 ml of water. The solvent of the lower phase is carefully evaporated in vacuo except for the remains of water. The residue of the initial charge is taken up in 280 ml dichloromethane / 2-propanol (1: 3) and mixed with 0.24 mol dimethyl sulfate. The mixture is heated to 40 ° C. and 0.25 mol of potassium carbonate in 100 ml of water is quickly added dropwise. After 30 minutes of intensive stirring, the mixture is allowed to cool and the phases are separated. The solvent of the upper phase is evaporated in vacuo, the residue is taken up in 500 ml of methanol and 450 ml of chloroform and extracted against 450 ml of water. The solvent of the lower phase is distilled off in vacuo with the addition of toluene. The residue is dissolved in 55 ml dichloromethane. The crude product is precipitated overnight by adding 600 ml of acetone. This product, which is still contaminated with small amounts of salts, is used in the subsequent reaction. M = 541,750 g / mol (C 30 H 56 O 5 NP) R f = 0.17 (chloroform / methanol / ammonia solution 6% (60: 40: 6))
Beispiel 6: Debenzylierung A. f:Example 6: Debenzylation A. f:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Phosphocholin-2-hydroxy-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-phosphocholine-2-hydroxy-octadecane
Das noch mit anorganischen Salzen verunreinigte Rohprodukt der Phosphorylierung (A, e) (0.1 mol) wird in 450 ml Metha- nol/THF (1:1) aufgenommen. 10 g Pd/C (5 %ig) in 40 ml Wasser werden unter Rühren zugegeben. Nach Zugabe von 40 ml I N HC1 leitet man 20 Minuten einen Stickstoffström durch die Reak¬ tionslösung. Man schließt das Reaktionsgefäß an eine Hydrier¬ apparatur an, die Hydrogenolyse erfolgt unter intensivem Rühren. Nach Beendigung der Wasserstoffaufnähme (ca. 4 Stun¬ den) wird vom Katalysator abgesaugt (Membran- oder Glasfaser¬ filter) und das Filtrat mit Ammoniaklösung neutralisiert. Man dampft die Lösungsmittel im Vakuum ab, nimmt den Rückstand mit 550 ml Methanol und 450 ml Chloroform auf und extrahiert zweimal mit je 450 ml 10 %iger Kochsalzlösung. Die Lösungs¬ mittel der unteren Phase werden unter Zusatz von Toluol im Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wird unter Aufkochen in 160 ml Chloroform fein suspendiert. 1.6 1 Aceton werden zuge¬ geben und über 48 Stunden bei 4°C gefällt. Man erhält das reine Produkt durch Absaugen und Trocknung im Vakuum. Ausbeute: 0.099 mol = 99 % (aus A, d = 90 %) M = 451.626 g/mol (C23H50O5NP)The crude product of the phosphorylation (A, e) (0.1 mol), which is still contaminated with inorganic salts, is taken up in 450 ml of methanol / THF (1: 1). 10 g Pd / C (5%) in 40 ml water are added with stirring. After adding 40 ml of IN HC1, a nitrogen stream is passed through the reaction solution for 20 minutes. The reaction vessel is connected to a hydrogenation apparatus, the hydrogenolysis is carried out with vigorous stirring. After the hydrogen absorption has ended (about 4 hours), the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the filtrate is neutralized with ammonia solution. The solvents are evaporated off in vacuo, the residue is taken up in 550 ml of methanol and 450 ml of chloroform and extracted twice with 450 ml of 10% sodium chloride solution. The solvents of the lower phase are distilled off in vacuo with the addition of toluene. The residue is finely suspended in 160 ml of chloroform while boiling. 1.6 1 acetone are added and precipitated at 4 ° C. over 48 hours. The pure product is obtained by suction and drying in vacuo. Yield: 0.099 mol = 99% (from A, d = 90%) M = 451,626 g / mol (C 23 H 50 O 5 NP)
Rf = 0.12 (Chloroform/Methanol/Ammoniaklsg. 6 % (60:40:6) Analyse: ber. : C = 61.17 H = 11.16 N = 3.10 P = 6.86 gef.: C = 61.15 H = 11.27 N = 3.15 P = 6.82 Beispiel 7 Acylierung A, σ:R f = 0.12 (chloroform / methanol / ammonia solution 6% (60: 40: 6) analysis: calc.: C = 61.17 H = 11.16 N = 3.10 P = 6.86 found: C = 61.15 H = 11.27 N = 3.15 P = 6.82 Example 7 Acylation A, σ:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Phosphocholin-2-0-acyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-phosphocholine-2-0-acyl-octadecane
10 mmol des entsprechend konfigurierten l-O-Phosphocholin-2- hydroxy-octadecan (A, f) und 21 mmol DMAP sowie 20 mmol des entsprechenden Säurechlorids bzw. des Acetanhydrids werden in 90 ml alkoholfreiem Chloroform im geschlossenen Kolben bei 30°C 16 Stunden im Ultraschallbad beschallt. 1 ml Methanol wird zugegeben, nach 10 Minuten wird das Lösungsmittel im Vakuum abdestilliert. In X-* ml Chloroform wird aufgenommen und mit 560 ml bei X2 °C gefällt. Das Rohprodukt wird abge¬ saugt und mit 160 ml Chloroform und 180 ml Methanol aufgenom¬ men. Man extrahiert gegen 135 ml Wasser, die obere Phase wird anschließend mit 200 ml Chloroform/Methanol (2:1) extrahiert. Beim Produkt l-O-Phosphocholin-2-O-acetyl-octadecan wird anstelle von 135 ml Wasser 10 %ige Kochsalzlösung verwendet. Die Lösungsmittel der vereinigten unteren Phasen werden nach Zusatz von Toluol unter Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wird chromatographisch an 450 g Kieselgel gereinigt. Dabei eluiert man zuerst die rel. apolaren Verunreinigungen mit Chloroform/Methanol/Ammoniak (60:40:2) um anschließend das Produkt mit Chloroform/Methanol/Ammoniak (60:40:7) aus der Säule zu eluieren. Das Produkt l-O-Phosphocholin-2-O-acetyl- octadecan wird mit Chloroform-Methanol-Ammoniak (55:45:9) eluiert. Die Produkte werden durch Zusatz von Toluol azeotrop getrocknet und im Vakuum anschließend von Wasser und Lösungs- mittelresten befreit. Die Ausbeute beträgt X3 (mmol, %). X2 [°C] -25 (12h) -20 (48h)10 mmol of the appropriately configured 10-phosphocholine-2-hydroxy-octadecane (A, f) and 21 mmol of DMAP and 20 mmol of the corresponding acid chloride or acetic anhydride are in 90 ml of alcohol-free chloroform in a closed flask at 30 ° C for 16 hours in an ultrasonic bath sonicated. 1 ml of methanol is added, after 10 minutes the solvent is distilled off in vacuo. It is taken up in X- * ml chloroform and precipitated with 560 ml at X 2 ° C. The crude product is suctioned off and taken up in 160 ml of chloroform and 180 ml of methanol. It is extracted against 135 ml of water, the upper phase is then extracted with 200 ml of chloroform / methanol (2: 1). The product 10-phosphocholine-2-O-acetyl-octadecane uses 10% saline instead of 135 ml of water. The solvents of the combined lower phases are distilled off under vacuum after the addition of toluene. The residue is purified by chromatography on 450 g of silica gel. First you elute the rel. apolar impurities with chloroform / methanol / ammonia (60: 40: 2) in order to subsequently elute the product from the column with chloroform / methanol / ammonia (60: 40: 7). The product 10-phosphocholine-2-O-acetyl-octadecane is eluted with chloroform-methanol-ammonia (55: 45: 9). The products are dried azeotropically by adding toluene and then freed from water and solvent residues in vacuo. The yield is X 3 (mmol,%). X 2 [° C] -25 (12h) -20 (48h)
4 (24h) -20 (12h) RT (24h)4 (24h) -20 (12h) RT (24h)
Nr. X5 [mmol, %] Prod. RF* Schmelzpunkt [°C]No. X 5 [mmol,%] Prod. RF * melting point [° C]
8.4, 84 (C-2-Ester) 0.93 130-150 (zers. )8.4, 84 (C-2 ester) 0.93 130-150 (decomp.)
7.0, 70 (C-12-Ester) 0.32 130-150 (zers. )7.0, 70 (C-12 ester) 0.32 130-150 (decomp.)
6.4, 64 (C-16-Ester) 0.24 135-150 (zers. )6.4, 64 (C-16 ester) 0.24 135-150 (decomp.)
6.9, 69 (C-18/l-Ester) 0.28 120-135 (zers. )6.9, 69 (C-18 / l ester) 0.28 120-135 (dec.)
10 5.2, 52 (C-18-Ester) 0.30 130-150 (zers. )10 5.2, 52 (C-18 ester) 0.30 130-150 (decomp.)
+ - Laufmittel: Chloroform/Methanol/Ammoniak (6 %ig) 60:40:6+ - mobile phase: chloroform / methanol / ammonia (6%) 60: 40: 6
Molgewicht/ Nr. Summenformel Analyse 6 493.663 Ber. C=60.82 H=10.61 N=2.83Molecular Weight / No. Molecular Formula Analysis 6 493.663 Ber. C = 60.82 H = 10.61 N = 2.83
C25 H5206NP Gef. C=59.86 H=10.06 N=2.71C 25 H 52 0 6 NP Found C = 59.86 H = 10.06 N = 2.71
633.936 Ber.: C=66.31 H=11.44 N=2.20 C35H7206NP Gef.: C=65.32 H=11.58 N=2.16633.936 Calc .: C = 66.31 H = 11.44 N = 2.20 C 35 H 72 0 6 NP Found: C = 65.32 H = 11.58 N = 2.16
690.044 Ber.: C=67.88 H=11.68 N=2.02 C39H80O6NP Gef.: C=67.56 H=11.78 N=2.02 716 . 082 Ber . : C=68 . 77 H=11 .54 N=1 . 95690.044 Calc .: C = 67.88 H = 11.68 N = 2.02 C 39 H 80 O 6 NP Found: C = 67.56 H = 11.78 N = 2.02 716. 082 calc. : C = 68. 77 H = 11 .54 N = 1. 95
C4 -1 H8 2 06 NP Gef . : C=68 . 74 H=12 . 00 N=2 . 07C 4 - 1 H 8 2 0 6 NP Gef. : C = 68. 74 H = 12. 00 N = 2. 07
10 718 . 089 Ber.: C=68.57 H=11.79 N=1.9510 718. 089 calc .: C = 68.57 H = 11.79 N = 1.95
C4 1 H8 4 06 NP Gef.: C=67.99 H=11.59 N=2.02C 4 1 H 8 4 0 6 NP Found: C = 67.99 H = 11.59 N = 2.02
Beispiel 8Example 8
Phtalimideinführung mit Konfigurationsumkehr/DetritylierungPhthalimide introduction with configuration reversal / detritylation
B- d:B- d:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-Hydroxy-2-N-Phtalimido-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-hydroxy-2-N-phthalimido-octadecane
Zu 0.1 mol l-O-Trityl-2-hydroxy-octadecan in 600 ml THF wer¬ den 0.12 mol Phthalimid und 0.145 mol Triphenylphosphin gege¬ ben. Unter Rühren und Kühlung auf 0°C wird langsam 0.146 mol Diethylazodicarboxylat in 120 ml THF zugetropft. Nach zwei Stunden wird zur Reaktionsmischung 1.2 1 Kaliumcarbonatlsg. (40 g/1) und 120 ml konz. NaCl.-Lsg. gegeben und mit 1.2 1 Diisopropylether extrahiert. Man extrahiert die obere Phase mit 230 ml konz. NaCl.-Lsg. und destilliert das Lösungsmittel im Vakuum ab. Der Rückstand wird in 50 ml Diisopropylether gelöst und auf eine Säule (650 g Kieεelgel, Hexan/Diisopro¬ pylether 2:1 + 1 % Triethylamin) gegeben. Man eluiert zuerst die apolaren Verunreinigungen mit Hexan/Diisopropylether (2:1), dann das Zwischenprodukt mit Diisopropylether. Die produkthaltigen Phasen werden im Vakuum eingedampft, der Rückstand mit 600 ml Methanol und 600 ml Dioxan aufgenommen und vorsichtig mit 12 ml konz. Schwefelsäure versetzt. Man rührt 1.5 Stunden bei 60°C. Nach Abkühlung wird 1.2 1 Kalium¬ carbonatlsg. (40 g/1) zugegeben und gegen 1.2 1 Diisopropyl¬ ether extrahiert. Man trennt die Phasen, zieht das Lösungs¬ mittel der oberen Phase ab und unterwirft den Rückstand einer Säulenfiltration an 700 g Kieselgel. Zuerst wird der Trityl- ether mit Hexan/Diisopropylether, alsdann das Produkt mit Diethylether eluiert. Das Produkt wird im Vakuum getrocknet,0.12 mol of phthalimide and 0.145 mol of triphenylphosphine are added to 0.1 mol of 10-trityl-2-hydroxy-octadecane in 600 ml of THF. 0.146 mol of diethyl azodicarboxylate in 120 ml of THF is slowly added dropwise with stirring and cooling to 0.degree. After two hours, 1.2 1 of potassium carbonate solution is added to the reaction mixture. (40 g / 1) and 120 ml conc. NaCl. Solution. given and extracted with 1.2 1 diisopropyl ether. The upper phase is extracted with 230 ml of conc. NaCl. Solution. and distilled off the solvent in vacuo. The residue is dissolved in 50 ml of diisopropyl ether and placed on a column (650 g of silica gel, hexane / diisopropyl ether 2: 1 + 1% triethylamine). First the non-polar impurities are eluted with hexane / diisopropyl ether (2: 1), then the intermediate product with diisopropyl ether. The product-containing phases are evaporated in vacuo, the residue is taken up in 600 ml of methanol and 600 ml of dioxane and carefully with 12 ml of conc. Sulfuric acid added. The mixture is stirred at 60 ° C. for 1.5 hours. After cooling, 1.2 1 potassium carbonate solution. (40 g / 1) added and extracted against 1.2 1 diisopropyl ether. The phases are separated, the solvent from the upper phase is removed and the residue is subjected to column filtration on 700 g of silica gel. First the trityl ether with hexane / diisopropyl ether, then the product eluted with diethyl ether. The product is dried in a vacuum,
Ausbeute: 0.077 mol = 77 % M = 415.618 g/mol (C26H4103N) Rf = 0.29 (Essigester/Hexan 1:2)Yield: 0.077 mol = 77% M = 415.618 g / mol (C 26 H 41 0 3 N) R f = 0.29 (ethyl acetate / hexane 1: 2)
Rf (Zwischenprodukt) = 0.67 (Essigester/Hexan 1:2) Rf (Edukt) = 0.69 (Essigester/Hexan 1:2) Analyse: ber.: C = 73.21 H = 9.98 N = 4.10 gef.: C = 73.10 H = 10.25 N - 4.25R f (intermediate) = 0.67 (ethyl acetate / hexane 1: 2) R f (educt) = 0.69 (ethyl acetate / hexane 1: 2) Analysis: calculated: C = 73.21 H = 9.98 N = 4.10 found: C = 73.10 H = 10.25 N - 4.25
Beispiel 9 Phosphorylierung B, e:Example 9 Phosphorylation B, e:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-O-Phoεphocholin-2-N-phthalimido-octade- canExample: 2- (R / S / rac) -I-O-Phoεphocholin-2-N-phthalimido-octadecan
Zu 0.115 mol Phosphoroxychlorid wird unter Kühlung auf <10°C 0.1 mol l-Hydroxy-2-N-Phthalimido-octadecan zusammen mit 0.175 mol Triethylamin in 140 ml THF zugetropft. Man entfernt die Kühlung und läßt 10 Minuten rühren (KPG-Rührer) . 0.133 mol N-Methylethanolamin zusammen mit 0.175 mol Triethylamin in 75 ml THF werden so zugetropft, daß die Reaktionstempera¬ tur 40°C nicht übersteigt. Man saugt nach 15 Minuten vom Hydrochlorid ab und gießt das Filtrat unter Rühren zu 23 ml 6 N HCl. Nach 5 Minuten neutralisiert man mit konz. Ammoniaklö¬ sung. Das Lösungsmittel wird im Vakuum vorsichtig abgedampft, bis nur noch Wasser übergeht. Die Vorlage nimmt man mit 380 ml Chloroform und 460 ml Methanol auf und extrahiert gegen 310 ml Wasser. Das Lösungsmittel der unteren Phase wird, bis auf Reste an Wasser, vorsichtig im Vakuum abgedampft. Der Rückstand der Vorlage wird in 280 ml Dichlormethan/2- Propanol (1:3) aufgenommen und mit 0.24 mol Dimethylsulfat versetzt. Man erwärmt auf 40°C und tropft rasch 0.25 mol Kaliumcarbonat in 100 ml Wasser zu. Nach 30 Minuten intensi¬ ven Rührens läßt man abkühlen und trennt die Phasen. Das Lösungsmittel der oberen Phase wird im Vakuum abgedampft, der Rückstand in 450 ml Methanol und 380 ml Chloroform aufgenom¬ men und gegen 380 ml Wasser extrahiert. Das Lösungsmittel der unteren Phase wird unter Zusatz von Toluol im Vakuum abde¬ stilliert, das resultierende Rohprodukt in der nächsten Reak¬ tion eingesetzt. M = 580.714 g/mol (C3 , H5306N2P) Rf = 0.17 (Chloroform/Methanol/Ammoniaklsg. 6 %ig (60:40:6))0.1 mol of l-hydroxy-2-N-phthalimido-octadecane is added dropwise to 0.115 mol of phosphorus oxychloride, together with 0.175 mol of triethylamine in 140 ml of THF, while cooling to <10 ° C. The cooling is removed and the mixture is stirred for 10 minutes (KPG stirrer). 0.133 mol of N-methylethanolamine together with 0.175 mol of triethylamine in 75 ml of THF are added dropwise in such a way that the reaction temperature does not exceed 40 ° C. After 15 minutes, the hydrochloride is filtered off with suction and the filtrate is poured into 23 ml of 6N HCl while stirring. After 5 minutes, neutralize with conc. Ammonia solution. The solvent is carefully evaporated in vacuo until only water passes over. The template is taken up with 380 ml of chloroform and 460 ml of methanol and extracted against 310 ml of water. The solvent of the lower phase is carefully evaporated in vacuo except for the remains of water. The residue of the initial charge is taken up in 280 ml of dichloromethane / 2-propanol (1: 3) and mixed with 0.24 mol of dimethyl sulfate. The mixture is heated to 40 ° C. and 0.25 mol is rapidly added dropwise Potassium carbonate in 100 ml of water. After 30 minutes of intensive stirring, the mixture is allowed to cool and the phases are separated. The solvent of the upper phase is evaporated in vacuo, the residue is taken up in 450 ml of methanol and 380 ml of chloroform and extracted against 380 ml of water. The solvent of the lower phase is distilled off in vacuo with the addition of toluene, and the resulting crude product is used in the next reaction. M = 580,714 g / mol (C 3 , H 53 0 6 N 2 P) R f = 0.17 (chloroform / methanol / ammonia solution 6% (60: 40: 6))
Beispiel 10 Phthalsaureabspaltung B, f:Example 10 Phthalic acid cleavage B, f:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Phosphocholin-2-amino-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-phosphocholine-2-amino-octadecane
Das noch mit Salzen verunreinigte Rohprodukt der Phosphory¬ lierung, (B, e), (0.1 mol) wird in 310 ml 2-Propanol/Wasser/ Toluol (6:1:1:5) gelöst. Nach Zugabe von 0.2 mol Natriumbor¬ hydrid bei 0°C läßt man über Nacht bei RT rühren. 0.05 mol Natriumborhydrid wird zugegeben, eine weitere Stunde intensiv gerührt. Durch vorsichtige Destillation im Vakuum wird das Lösungsmittel entfernt. Nach Umfüllen des Rückstandes mit insges. 380 ml Wasser in ein 4 1 Becherglas wird unter stän¬ digem Rühren und unter Eiskühlung insges. 380 ml konz. HCl sehr langsam und vorsichtig (schäumt1 ) zugegeben. Man rührt die Suspension 10 Stunden bei 80°C (Innentemperatur). Nach Abkühlung wird erst mit fester NaOH, anschließend mit 6 N NaOH auf pH 9.0 eingestellt. Es wird mit 2.4 1 Metha¬ nol/Chloroform (1:1) extrahiert. Die obere Phase wird noch dreimal mit je 550 ml Chloroform extrahiert. Dabei befinden sich in der unteren Phase feste Bestandteile, die bei der weiteren Bearbeitung nicht stören. Die unteren Phasen werden vereinigt und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird unter Erwärmung in 125 ml konz. HCl fein suspendiert, dann mit 550 ml Aceton versetzt und eine Stunde auf 0°C gekühlt. Nach Absaugen des feinen Niederschlags versetzt man das Filtrat mit weiteren 5 1 Aceton und beläßt 24 Stunden bei -20°C. Es wird abgesaugt, der Rückstand in 370 ml 12 %ige Ammoniaklö- sung extrahiert. Mit je 250 ml Chloroform/Methanol (8:1) wird die obere Phase zweimal extrahiert. Das Produkt erhält man durch das Eindampfen der vereinigten unteren Phasen und Trocknung im Vakuum.The crude product of the phosphorylation, (B, e), (0.1 mol), which is still contaminated with salts, is dissolved in 310 ml of 2-propanol / water / toluene (6: 1: 1: 5). After adding 0.2 mol of sodium borohydride at 0 ° C., the mixture is stirred at RT overnight. 0.05 mol sodium borohydride is added and the mixture is stirred intensively for a further hour. The solvent is removed by careful distillation in vacuo. After decanting the residue with a total of 380 ml of water in a 4 1 beaker, a total of 380 ml of conc. HCl added very slowly and carefully (foams1). The suspension is stirred for 10 hours at 80 ° C. (internal temperature). After cooling, the pH is adjusted to 9.0 first with solid NaOH and then with 6 N NaOH. It is extracted with 2.4 l of methanol / chloroform (1: 1). The upper phase is extracted three times with 550 ml of chloroform. In the lower phase there are solid components that do not interfere with further processing. The lower phases are combined and evaporated in vacuo. The backlog is under Heating in 125 ml conc. HCl finely suspended, then mixed with 550 ml of acetone and cooled to 0 ° C for one hour. After the fine precipitate has been suctioned off, the filtrate is mixed with a further 5 liters of acetone and left at -20 ° C. for 24 hours. It is suctioned off, the residue is extracted into 370 ml of 12% ammonia solution. The upper phase is extracted twice with 250 ml of chloroform / methanol (8: 1). The product is obtained by evaporating the combined lower phases and drying in vacuo.
Ausbeute: 0.08 mol = 80 % (aus B, d = 70 %) M = 450.641 g/mol (C23H5 n 04N2P)Yield: 0.08 mol = 80% (from B, d = 70%) M = 450,641 g / mol (C 23 H 5 n 0 4 N 2 P)
Rf = 0.05 (Chloroform/Methanol/Ammoniaklsg. 6 % (60:40:6)) Analyse: ber.: C = 61.30 H = 11.55 N = 6.21 gef.: C = 60.55 H = 11.17 N = 5.76R f = 0.05 (chloroform / methanol / ammonia solution 6% (60: 40: 6)) Analysis: calculated: C = 61.30 H = 11.55 N = 6.21 found: C = 60.55 H = 11.17 N = 5.76
Beispiel 11 Acylierung B. g:Example 11 Acylation B. g:
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-O-Phosphocholin-2-N-acyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -I-O-phosphocholine-2-N-acyl-octadecane
10 mmol des entsprechend konfigurierten Eduktes (B. f) und 21 mmol DMAP sowie 20 mmol des entsprechenden Säurechlorids bzw. des Acetanhydrids werden in 90 ml alkoholfreiem Chloroform im geschlossenen Kolben bei 30°C 10 Stunden im Ultraschallbad beschallt. 1 ml Methanol wird zugegeben, nach 10 Minuten wird das Lösungsmittel im Vakuum abdestilliert. In X^ ml Chloro¬ form wird aufgenommen und mit 560 ml bei X2 °C gefällt. Das Rohprodukt wird abgesaugt und mit 160 ml Chloroform und 180 ml Methanol aufgenommen. Man extrahiert gegen 135 ml Wasser, die obere Phase wird anschließend mit 200 ml Chloroform/Me¬ thanol (2:1) extrahiert. Beim Produkt l-O-Phosphocholin-2-N- acetyl-octadecan wird die obere Phase zusätzlich dreimal gegen je 110 ml Chloroform/Methanol (8:1) extrahiert. Die Lösungsmittel der vereinigten unteren Phasen werden unter Zusatz von Toluol in Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wird chromatographisch an 450 g Kieselgel gereinigt. Dabei eluiert man zuerst die rel. apolaren Verunreinigungen mit Chloro¬ form/Methanol/Ammoniak (60:40:2), um anschließend das Produkt mit Chloroform/Methanol/ Ammoniak (60:40:7) aus der Säule zu eluieren. Das Produkt l-O-Phosphocholin-2-N-acetyl-octadecan wird mit Chloroform/ Methanol/Ammoniak (50:50:9) eluiert. Die Produkte werden durch Zusatz von Toluol azeotrop getrocknet, im Hochvakuum werden sie anschließend von Wasser und Lösungs¬ mittelresten befreit. Die Ausbeute beträgt X3 (mmol, %).10 mmol of the appropriately configured educt (B. f) and 21 mmol of DMAP and 20 mmol of the corresponding acid chloride or acetic anhydride are sonicated in 90 ml of alcohol-free chloroform in a closed flask at 30 ° C for 10 hours in an ultrasonic bath. 1 ml of methanol is added, after 10 minutes the solvent is distilled off in vacuo. It is taken up in X ^ ml chloroform and precipitated with 560 ml at X 2 ° C. The crude product is filtered off and taken up with 160 ml of chloroform and 180 ml of methanol. It is extracted against 135 ml of water, the upper phase is then extracted with 200 ml of chloroform / methanol (2: 1). For the product lO-phosphocholine-2-N-acetyl-octadecane, the upper phase is extracted three times against 110 ml of chloroform / methanol (8: 1). The solvents of the combined lower phases are below Addition of toluene distilled off in vacuo. The residue is purified by chromatography on 450 g of silica gel. First you elute the rel. apolar impurities with chloroform / methanol / ammonia (60: 40: 2) in order to subsequently elute the product from the column with chloroform / methanol / ammonia (60: 40: 7). The product 10-phosphocholine-2-N-acetyl-octadecane is eluted with chloroform / methanol / ammonia (50: 50: 9). The products are dried azeotropically by adding toluene, and then they are freed of water and solvent residues in a high vacuum. The yield is X 3 (mmol,%).
Nr. X3 [mmol, %] Prod. RF* SchmelzpunktX 3 [mmol,%] Prod. RF * Melting point
[°C][° C]
7.2, 72 (C-2-Amid) 0.12 200-2107.2, 72 (C-2 amide) 0.12 200-210
(zers. ) 6.7, 67 (C-12-Amid) 0.31 183-199(dec.) 6.7, 67 (C-12 amide) 0.31 183-199
(zers. )(dec.)
3 7.6, 76 (C-16-Amid) 0.25 201 (zers.) 4 7.6, 76 (C-18/l-Amid) 0.26 168 (zers.) 5 7.7, 77 (C-18-Amid) 0.19 193-2023 7.6, 76 (C-16-amide) 0.25 201 (decomp.) 4 7.6, 76 (C-18 / l-amide) 0.26 168 (decomp.) 5 7.7, 77 (C-18-amide) 0.19 193- 202
(zers. )(dec.)
+ = Laufmittel: Chloroform/Methanol/Ammoniak (6 %ig) 60:40:6 Molgewicht/+ = Eluent: chloroform / methanol / ammonia (6%) 60: 40: 6 Molar weight /
Nr. Summenformel AnalyseNo molecular formula analysis
1 492.678 Ber.: C=60.95 H=10.84 N=5.69 C26H5305N2P Gef.: C=60.08 H=11.07 N=5.651 492.678 Calc .: C = 60.95 H = 10.84 N = 5.69 C 26 H5 3 0 5 N 2 P Found: C = 60.08 H = 11.07 N = 5.65
2 632.952 Ber.: C=66.41 H=11.62 N=4.42 C35H7305N2P Gef.: C=65.23 H=11.70 N=4.362 632.952 Calc .: C = 66.41 H = 11.62 N = 4.42 C 35 H 73 0 5 N 2 P Found: C = 65.23 H = 11.70 N = 4.36
3 689.060 Ber.: C=67.98 H=11.84 N=4.06 C39H8105N2P Gef.: C=67.69 H=11.78 N=4.033 689.060 Calc .: C = 67.98 H = 11.84 N = 4.06 C 39 H 81 0 5 N 2 P Found: C = 67.69 H = 11.78 N = 4.03
4 715.098 Ber.: C=68.86 H=11.69 N=3.91 C41H8305N2P Gef.: C=68.32 H=11.90 N=3.724 715.098 Calc .: C = 68.86 H = 11.69 N = 3.91 C 41 H 83 0 5 N 2 P Found: C = 68.32 H = 11.90 N = 3.72
5 717.114 Ber.: C=68.67 H=11.94 N=3.90 C41H8505N2P Gef.: C=67.92 H=11.97 N=4.065 717.114 Calc .: C = 68.67 H = 11.94 N = 3.90 C 41 H 85 0 5 N 2 P Found: C = 67.92 H = 11.97 N = 4.06
Beispiel 12: Allylierung/Detritylierung (Stufe C, d)Example 12: Allylation / Detritylation (Step C, d)
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-Hydroxy-2-0-Allyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -l-hydroxy-2-0-allyl-octadecane
In 400 ml THF werden 0,1 mol l-O-Trityl-2-hydroxy-octadecan und 0,12 mol Kalium-tert.-butylat gelöst. Man erwärmt auf 40°C und tropft 0,12 mol Allylchlorid in 140 ml THF zu. Nach 1,5 Stunden werden 0,02 mol Kalium-tert-butylat zugesetzt und weitere 0,02 mol Allylchlorid in 30 ml THF zugetropft. Nach weiteren 2 Stunden wird 400 ml Kochsalzlösung (100 g/1) zuge¬ geben. Nach der Phasentrennung destilliert man das Lösungs¬ mittel der org. Phase im Vakuum ab, nimmt den Rückstand in 1,3 1 Dioxan/Methanol (1:1) auf und versetzt vorsichtig mit 15 ml konz. Schwefelsäure. Man rührt 1,5 Stunden bei 50°C und gibt dann 1 1 Kaliumcarbonatlösung sowie 100 ml konz. Koch¬ salzlösung zu. Es wird mit 1 1 Diisopropylether extrahiert. Die wäßrige Phase wird nochmals mit 300 ml Diisopropylether extrahiert, die vereinigten org. Phasen im Vakuum abgedampft und der Rückstand in 70 ml Hexan aufgenommen. An 600 g Kie¬ selgel wird erst mit 1 1 Hexan, dann mit Hexan/Diisopropyl¬ ether (20:1) säulenfiltriert, bis der Tritylether eluiert ist. Anschließend wird das Produkt mit Diethylether/Pentan eluiert.0.1 mol of 10-trityl-2-hydroxy-octadecane and 0.12 mol of potassium tert-butoxide are dissolved in 400 ml of THF. The mixture is warmed to 40 ° C. and 0.12 mol of allyl chloride in 140 ml of THF is added dropwise. After 1.5 hours, 0.02 mol of potassium tert-butoxide are added and a further 0.02 mol of allyl chloride in 30 ml of THF is added dropwise. After a further 2 hours, 400 ml of saline (100 g / 1) are added. After phase separation, the solvent of the org. Phase in vacuo, the residue in 1.3 1 dioxane / methanol (1: 1) and carefully mixed with 15 ml of conc. Sulfuric acid. The mixture is stirred for 1.5 hours at 50 ° C. and then 1 1 of potassium carbonate solution and 100 ml of conc. Cooking salt solution too. It is extracted with 1 1 diisopropyl ether. The aqueous phase is extracted again with 300 ml of diisopropyl ether, the combined org. Phases evaporated in vacuo and the residue taken up in 70 ml of hexane. On 600 g of silica gel, column filtration is carried out first with 1 l of hexane, then with hexane / diisopropyl ether (20: 1) until the trityl ether is eluted. The product is then eluted with diethyl ether / pentane.
Ausbeute: 0,081 mol = 81 % M = 326,565 g/mol (C21H4202) Rf = 0,30 (Diethylether/Pentan (1:1))Yield: 0.081 mol = 81% M = 326.565 g / mol (C 21 H 42 0 2 ) R f = 0.30 (diethyl ether / pentane (1: 1))
Rf (Zwischenprodukt) = 0,74 (Diethylether/Pentan (1:1)) Rf (Edukt) = 0,70 (Diethylether/Pentan (1:1)) Analyse: ber.: C = 77,23 H = 12,96 gef.: C = 77,26 H = 13,00R f (intermediate) = 0.74 (diethyl ether / pentane (1: 1)) Rf (educt) = 0.70 (diethyl ether / pentane (1: 1)) Analysis: calculated: C = 77.23 H = 12 , 96 found: C = 77.26 H = 13.00
Beispiel 13Example 13
Benzylierung (Stufe C. e.Benzylation (stage C. e.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-0-allyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-benzyl-2-0-allyl-octadecane
0,1 mol l-Hydroxy-2-O-allyl-octadecan und 0,15 mol Kalium- tert.-butylat werden in 160 ml THF gelöst und auf 30°C er¬ wärmt. Man tropft eine Lösung von 0,15 mol Benzylchlorid in 50 ml THF zu und läßt 5 Stunden bei 50°C rühren. Man extra¬ hiert einmal mit 100 ml Wasser, dann zweimal mit je 50 ml Kochsalzlösung (150 g/1) und anschließend mit 30 ml 1 N HCl. Man nimmt in 100 ml Hexan auf und filtriert über 50 g Kiesel¬ gel. Die Lösungsmittel werden im Vakuum abdestilliert. Das Produkt wird im Vakuum getrocknet.0.1 mol of l-hydroxy-2-O-allyl octadecane and 0.15 mol of potassium tert-butoxide are dissolved in 160 ml of THF and warmed to 30 ° C. A solution of 0.15 mol of benzyl chloride in 50 ml of THF is added dropwise and the mixture is stirred at 50 ° C. for 5 hours. It is extracted once with 100 ml of water, then twice with 50 ml of saline (150 g / 1) and then with 30 ml of 1N HCl. It is taken up in 100 ml of hexane and filtered through 50 g of silica gel. The solvents are distilled off in vacuo. The product is dried in vacuo.
Ausbeute: 0,089 mol = 89 % M = 466,75 g/mol (C32H50O2 ) Rf = 0,77 (Hexan/Diisopropylether (2:1)) Analyse: ber.: C = 82,34 H = 10,79 gef.: C = 82,09 H = 10,67 Beispiel 14Yield: 0.089 mol = 89% M = 466.75 g / mol (C 32 H 50 O 2 ) R f = 0.77 (hexane / diisopropyl ether (2: 1)) Analysis: calculated: C = 82.34 H = 10.79 Found: C = 82.09 H = 10.67 Example 14
Allyletherspaltung (Stufe C, f.Allyl ether cleavage (stage C, f.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-hydroxy-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-benzyl-2-hydroxy-octadecane
0,1 mol l-O-Benzyl-2-O-allyl-octadecan werden in 150 ml 2- Propanol aufgenommen und die Lösung mit 30 g Aktivkohle ver¬ setzt. Man rührt 20 Minuten, trennt die Aktivkohle ab und gibt 3 g Pd/C (5 %ig) sowie 10 ml 5 N HCl zu und läßt 48 Stunden unter Rückfluß kochen. Der Katalysator wird abgesaugt (Membran- oder Glasfaserfilter) und das Lösungsmittel wird im Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wird aus 150 ml Hexan bei -20°C kristallisiert,, das feinkristalline Produkt im Vakuum getrocknet.0.1 mol of 1-O-benzyl-2-O-allyl-octadecane is taken up in 150 ml of 2-propanol and the solution is mixed with 30 g of activated carbon. The mixture is stirred for 20 minutes, the activated carbon is separated off, 3 g of Pd / C (5%) and 10 ml of 5N HCl are added and the mixture is boiled under reflux for 48 hours. The catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the solvent is distilled off in vacuo. The residue is crystallized from 150 ml of hexane at -20 ° C., the fine crystalline product is dried in vacuo.
Ausbeute: 0,094 mol = 94 % M = 376,622 g/mol (C25H4402 ) Rf = 0,50 (Diisopropylether)Yield: 0.094 mol = 94% M = 376.622 g / mol (C 25 H 44 0 2 ) R f = 0.50 (diisopropyl ether)
Analyse: ber.: C = 79,73 H = 11,78 0 = 7,49 gef.: C = 79,69 H = 11,74 0 = 8,70Analysis: calculated: C = 79.73 H = 11.78 0 = 7.49 found: C = 79.69 H = 11.74 0 = 8.70
Beispiel 15Example 15
Acylierung (Stufe C g)Acylation (stage C g)
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-0-lauroyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -I-0-benzyl-2-0-lauroyl-octadecane
0,1 mol l-O-Benzyl-2-O-hydroxy-octadecan, 1 g DMAP und 0,11 mol Laurinsäure werden in 200 ml Dichlormethan gelöst und auf 0°C gekühlt. 0,12 mol DCC in 40 ml Dichlormethan werden zuge¬ tropft. Man läßt 4 Stunden bei Raumtemperatur rühren und dann über Nacht bei 0°C stehen. Der Rückstand wird über einen Glasfaserfilter abgesaugt. Das Filtrat wird dann zweimal mit je 70 ml 1 N HCl und zweimal mit je 70 ml gesättigter Na- triumhydrogencarbonatlösung extrahiert. Man trocknet über Natriumsulfat und destilliert das Lösungsmittel im Vakuum ab. Zur Reinigung wird in 30 ml Hexan/Diisopropylether aufge¬ schlämmt und über 150 g Kieselgel filtriert.0.1 mol lO-benzyl-2-O-hydroxy-octadecane, 1 g DMAP and 0.11 mol lauric acid are dissolved in 200 ml dichloromethane and cooled to 0 ° C. 0.12 mol DCC in 40 ml dichloromethane are added dropwise. The mixture is stirred for 4 hours at room temperature and then left to stand at 0 ° C. overnight. The residue is suctioned off through a glass fiber filter. The filtrate is then extracted twice with 70 ml of 1N HCl and twice with 70 ml of saturated sodium bicarbonate solution. You dry over Sodium sulfate and distilled off the solvent in vacuo. For cleaning, it is slurried in 30 ml of hexane / diisopropyl ether and filtered through 150 g of silica gel.
Ausbeute: 0,080 mol = 80 % M = 558,932 g/mol (C37H6603 ) Rf = 0,48 (Hexan/Diisopropylether (1:5)) Analyse: ber.: C = 79,51 H = 11,90 0 = 8,58 gef.: C = 79,69 H = 11,75 0 = 8,32Yield: 0.080 mol = 80% M = 558.932 g / mol (C 37 H 66 0 3 ) R f = 0.48 (hexane / diisopropyl ether (1: 5)) Analysis: calculated: C = 79.51 H = 11 , 90 0 = 8.58 found: C = 79.69 H = 11.75 0 = 8.32
Beispiel 16Example 16
Debenzylierung (Stufe C. h)Debenzylation (level C. h)
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-Hydroxy-2-0-lauroyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-hydroxy-2-0-lauroyl-octadecane
0,1 mol l-O-Benzyl-2-O-lauroyl-octadecan werden in 600 ml THF gelöst. 10 g Pd/C (5 %ig) in 20 ml Wasser werden zugegeben. Durch Zugabe von konz. Ameisensäure wird auf einen pH-Wert von 5,5 eingestellt. Man hydriert etwa 2 Stunden unter star¬ kem Rühren. Nach Beendigung der Wasserstoffaufnähme wird von Katalysator abgesaugt (Membran- oder Glasfaserfilter) und die Lösungsmittelmengen durch Abdampfen im Vakuum bei Raumtempe¬ ratur etwa um die Hälfte verringert. Man versetzt mit 1,2 1 Essigester und läßt 24 Stunden bei -20°C kristallisieren. Es wird abgesaugt und das Produkt im Hochvakuum getrocknet. Das Produkt wird sofort in die Folgereaktionen eingesetzt.0.1 mol l-O-benzyl-2-O-lauroyl-octadecane are dissolved in 600 ml THF. 10 g Pd / C (5%) in 20 ml water are added. By adding conc. Formic acid is adjusted to a pH of 5.5. The mixture is hydrogenated for about 2 hours with vigorous stirring. After the hydrogen uptake has ended, the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the amounts of solvent are reduced by about half by evaporation in vacuo at room temperature. 1.2 l of ethyl acetate are added and the mixture is left to crystallize at -20 ° C. for 24 hours. It is suctioned off and the product is dried in a high vacuum. The product is immediately used in the subsequent reactions.
Ausbeute: 0,087 mol = 87 %Yield: 0.087 mol = 87%
M = 468 , 807 g/mol (C3 0 H6 0 θ3 )M = 468.807 g / mol (C 3 0 H 6 0 θ 3 )
Rf = 0 , 46 ( Diethylether /Pentan ( 1 : 1 ) ) Beispiel 17R f = 0.46 (diethyl ether / pentane (1: 1)) Example 17
Benzylierung (Stufe D, e.Benzylation (stage D, e.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-N-phthalimido-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-benzyl-2-N-phthalimido-octadecane
0,1 mol l-Hydroxy-2-N-phthalimido-octadecan und 0,15 mol Kalium-tert.-butylat werden in 200 ml THF gelöst und auf 50°C erwärmt. 0,15 mol Benzylchlorid in 80 ml THF werden innerhalb von 10 Minuten zugetropft, anschließend läßt man noch 3 Stun¬ den bei 50°C rühren. Man extrahiert einmal gegen 100 ml Was¬ ser und zweimal gegen je 50 ml Kochsalzlöung (150 g/1). Man destilliert das org. Lösungsmittel im Vakuum ab und reinigt das Rohprodukt durch Umkristallisation aus 150 ml Methanol und anschließend aus 150 ml 2-Propanol.0.1 mol of l-hydroxy-2-N-phthalimido-octadecane and 0.15 mol of potassium tert-butoxide are dissolved in 200 ml of THF and heated to 50.degree. 0.15 mol of benzyl chloride in 80 ml of THF are added dropwise in the course of 10 minutes, after which the mixture is stirred for a further 3 hours at 50.degree. The mixture is extracted once against 100 ml of water and twice against 50 ml of sodium chloride solution (150 g / l). The org is distilled. Solvent in a vacuum and cleans the crude product by recrystallization from 150 ml of methanol and then from 150 ml of 2-propanol.
Ausbeute: 0,090 mol = 90 % M = 505,743 g/mol (C33H4703N) Rf = 0,70 (Essigester/Hexan (1:2)) Analyse: ber.: C = 78,37 H = 9,36 0 = 9,49 gef.: C = 78,34 H = 9,47 0 = 9,39Yield: 0.090 mol = 90% M = 505.743 g / mol (C 33 H 47 0 3 N) R f = 0.70 (ethyl acetate / hexane (1: 2)) Analysis: calculated: C = 78.37 H = 9.36 0 = 9.49 found: C = 78.34 H = 9.47 0 = 9.39
Beispiel 18Example 18
Phthalsaureabspaltung (Stufe D. f.Phthalic acid cleavage (stage D. f.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-amino-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-benzyl-2-amino-octadecane
0,1 mol l-Benzyl-2-N-phthalimido-octadecan werden in 1,1 1 2- Propanol/Wasser (6:1) gelöst. 0,5 mol Natriumborhydrid werden unter Kühlung vorsichtig zugesetzt. Man entfernt die Kühlung und läßt 24 Stunden bei Raumtemperatur rühren. Von etwa der Hälfte des Lösungsmittels wird im Vakuum vorsichtig abdestil¬ liert. 500 ml Essigsäure werden sehr langsam und vorsichtig (Schaumbildung) zugegeben, anschließend erhitzt man 4 Stunden auf 80°C. Von der Essigsäure wird im Vakuum abgedampft und der Rückstand mit 1 N NaOH-Lösung auf einen pH von 8,5 einge¬ stellt. Man extrahiert die wäßerige Phase zweimal mit je 1 1 Diethylether. Nach dem Abdestillieren der organischen Phase reinigt man das Produkt chromatographisch an 800 g Kieselgel. Dabei werden zuerst die apolaren Verunreinigungen mit Chloro- form/Methanol (20:1) eluiert. Anschließend wird das Produkt mit Chloroform/Methanol (1:1) eluiert.0.1 mol l-benzyl-2-N-phthalimido-octadecane are dissolved in 1.1 1 2-propanol / water (6: 1). 0.5 mol sodium borohydride are carefully added with cooling. The cooling is removed and the mixture is stirred at room temperature for 24 hours. About half of the solvent is carefully distilled off in vacuo. 500 ml of acetic acid are added very slowly and carefully (foaming), then the mixture is heated at 80 ° C. for 4 hours. The acetic acid is evaporated off in vacuo and the residue was adjusted to a pH of 8.5 with 1 N NaOH solution. The aqueous phase is extracted twice with 1 1 of diethyl ether each. After the organic phase has been distilled off, the product is purified by chromatography on 800 g of silica gel. The apolar impurities are first eluted with chloroform / methanol (20: 1). The product is then eluted with chloroform / methanol (1: 1).
Ausbeute: 0,088 mol = 88 % M = 375,641 g/mol (C25H45ON) Rf = 0,21 (Chloroform/Methanol (9:1)) Analyse: ber.: C = 79,93 H = 12,07 gef.: C = 79,90 H = 11,89Yield: 0.088 mol = 88% M = 375.641 g / mol (C 25 H 45 ON) R f = 0.21 (chloroform / methanol (9: 1)) Analysis: calculated: C = 79.93 H = 12, 07 found: C = 79.90 H = 11.89
Beispiel 19Example 19
Acylierung (Stufe D. g.Acylation (stage D. g.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-0-Benzyl-2-N-lauroyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-0-benzyl-2-N-lauroyl-octadecane
0,1 mol l-O-Benzyl-2-amino-octadecan, 1 g DMAP und 0,11 mol Laurinsäure werden in 200 ml Dichlormethan gelöst und auf 0°C gekühlt. 0,12 mol DCC in 40 ml Dichlormethan werden zuge¬ tropft. Man läßt 4 Stunden bei Raumtemperatur rühren und dann über Nacht bei 0°C stehen. Der Rückstand wird über einen Glasfaserfilter abgesaugt. Das Filtrat wird dann zweimal mit je 70 ml 1 N HCl und zweimal mit je 70 ml gesättigter Na- triumhydrogencarbonatlösung extrahiert. Man trocknet über Natriumsulfat und destilliert das Lösungsmittel im Vakuum ab. Zur Reinigung wird in 30 ml Hexan/Diisopropylether auf- geschlämmt und über 150 g Kieselgel filitriert. Ausbeute: 0,096 mol = 96 % M = 557,948 g/mol (C37H6702N) Rf = 0,35 (Hexan/Diisopropylether (1:5)) Rf (Edukt) = 0,04 (Hexan/Diisopropylether (1:5)) Analyse: ber.: C = 79,65 H = 12,10 gef. : C = 79,30 H = 11,930.1 mol lO-benzyl-2-amino-octadecane, 1 g DMAP and 0.11 mol lauric acid are dissolved in 200 ml dichloromethane and cooled to 0 ° C. 0.12 mol DCC in 40 ml dichloromethane are added dropwise. The mixture is stirred for 4 hours at room temperature and then left to stand at 0 ° C. overnight. The residue is suctioned off through a glass fiber filter. The filtrate is then extracted twice with 70 ml of 1N HCl and twice with 70 ml of saturated sodium bicarbonate solution. It is dried over sodium sulfate and the solvent is distilled off in vacuo. For cleaning, it is slurried in 30 ml of hexane / diisopropyl ether and filtered through 150 g of silica gel. Yield: 0.096 mol = 96% M = 557.948 g / mol (C 37 H 67 0 2 N) R f = 0.35 (hexane / diisopropyl ether (1: 5)) R f (starting material) = 0.04 (hexane / Diisopropyl ether (1: 5)) Analysis: calc .: C = 79.65 H = 12.10 found. : C = 79.30 H = 11.93
Beispiel 20Example 20
Debenzylierung fStufe D, h.Debenzylation for level D, h.
Bsp. : 2-(R/S/rac)-l-Hydroxy-2-N-lauroyl-octadecanEx: 2- (R / S / rac) -1-hydroxy-2-N-lauroyl-octadecane
0,1 mol l-O-Benzyl-2-N-lauroyl-octadecan werden in 600 ml THF gelöst. 10 g Pd/C (5 %ig) in 20 ml Wasser werden zugegeben. Man hydriert etwa 2 Stunden unter starkem Rühren. Nach Been¬ digung der Wasserstoffaufnahme wird von Katalysator abgesaugt (Membran- oder Glasfaserfilter) und die Lösungsmittel im Vakuum abdestilliert. Der Rückstand, das Produkt, wird im Hochvakuum getrocknet.0.1 mol l-O-benzyl-2-N-lauroyl-octadecane are dissolved in 600 ml THF. 10 g Pd / C (5%) in 20 ml water are added. The mixture is hydrogenated for about 2 hours with vigorous stirring. After the hydrogen uptake has ended, the catalyst is suctioned off (membrane or glass fiber filter) and the solvents are distilled off in vacuo. The residue, the product, is dried under high vacuum.
Ausbeute: 0,098 mol = 98 % M = 467,823 g/mol (C30H61O2N) Rf = 0,28 (Diethylether/Pentan (1:1)) Analyse: ber.: C = 77,02 H = 13,14 gef.: C = 76,88 H = 13,06 Yield: 0.098 mol = 98% M = 467.823 g / mol (C 30 H 61 O 2 N) R f = 0.28 (diethyl ether / pentane (1: 1)) Analysis: calculated: C = 77.02 H = 13.14 Found: C = 76.88 H = 13.06
Phosphorylierungsreaktionen nach Schema C, iPhosphorylation reactions according to scheme C, i
Beispiel 21Example 21
Phosphorylierungen (Stufe C, i)Phosphorylation (stage C, i)
PE** - Bsp.: 2-(R)-l-0-Phosphoethanolamin-2-0-lauroyl-eicosanPE ** - Ex .: 2- (R) -l-0-phosphoethanolamine-2-0-lauroyl-eicosan
Ausbeute: 0,090 mol = 90 % M = 619,90 g/mol (C34H70O6NP)Yield: 0.090 mol = 90% M = 619.90 g / mol (C 34 H 70 O 6 NP)
Rf = 0,5 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 65,88 H = 11,38 N = 2,26 gef.: C = 65,61 H = 11,37 N = 2,34R f = 0.5 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 65.88 H = 11.38 N = 2.26 found: C = 65, 61 H = 11.37 N = 2.34
Eibl, H. und Engel, J. : Synthesis of hexadecylphosphocholine (Miltefosine). In: Alkylphosphocholines: New Drugs in Cancer Therapy. Eds. H. Eibl, P. Hilgard und C. Unger, Karger, Basel (1992), 1-5Eibl, H. and Engel, J.: Synthesis of hexadecylphosphocholine (Miltefosine). In: Alkylphosphocholines: New Drugs in Cancer Therapy. Eds. H. Eibl, P. Hilgard and C. Unger, Karger, Basel (1992), 1-5
Die Phosphorylierung wurde nach obiger Vorschrift ausgehend von 2-(R)-Hydroxy-2-0-lauroyl-eicosan durchgeführt.The phosphorylation was carried out according to the above procedure starting from 2- (R) -hydroxy-2-0-lauroyl-eicosan.
Beispiel 22Example 22
PE2 - Bsp.: 2-(S)-l-0-(N-Methyl)-phosphoethanolamin-2-0-lau- royl-eicosanPE 2 - Example: 2- (S) -l-0- (N-methyl) -phosphoethanolamine-2-0-lauroyl-eicosane
Ausbeute: 0,087 mol = 87 % M = 633,93 g/mol (C35H7206NP)Yield: 0.087 mol = 87% M = 633.93 g / mol (C 35 H 72 0 6 NP)
Rf = 0,45 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 66,31 H = 11,45 N = 2,21 gef.: C = 56,89 H = 11,43 N = 2,28R f = 0.45 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 66.31 H = 11.45 N = 2.21 found: C = 56, 89 H = 11.43 N = 2.28
Die Phosphorylierung wurde nach Eibl und Engel, siehe oben, ausgehend von 2-(S)-Hydroxy-2-0-lauroyl-eicosan durchge¬ führt. Beispiel 23The phosphorylation was carried out according to Eibl and Engel, see above, starting from 2- (S) -hydroxy-2-0-lauroyl-eicosan. Example 23
PI - Bsp.: 2-(S)-l-0-Phospho-(L-myo-inositol)-2-0-lauroyl- eicosan, NatriumsalzPI - Ex .: 2- (S) -l-0-phospho- (L-myo-inositol) -2-0-lauroyl- eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,002 mol = 40 % M = 760,96 g/mol (C38H740, PNa)Yield: 0.002 mol = 40% M = 760.96 g / mol (C 38 H 74 0, PNa)
Rf = 0,26 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 59,98 H = 9,80 P = 4,07 gef.: C = 59,71 H = 9,80 P = 4,05R f = 0.26 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 59.98 H = 9.80 P = 4.07 found: C = 59, 71 H = 9.80 P = 4.05
Die Phosphorylierung wurde nach Filthuth und Eibl (Filthuth, E. und Eibl, H. : Synthesis of enantiomerically pure lysophosphatidylinositols and alkylphosphoinositols. Chem. Phys. Lipids 60 (1991/1992) 253-261) durchgeführt.The phosphorylation was carried out according to Filthuth and Eibl (Filthuth, E. and Eibl, H.: Synthesis of enantiomerically pure lysophosphatidylinositols and alkylphosphoinositols. Chem. Phys. Lipids 60 (1991/1992) 253-261).
Beispiel 24Example 24
PG - Bsp.: 2-(R)-l-0-Phosphoglycerin-2-0-lauroyl-eicosan, NatriumsalzPG - Ex .: 2- (R) -l-0-phosphoglycerin-2-0-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,080 mol = 80 % M = 672,90 g/mol (C35 H7008PNa)Yield: 0.080 mol = 80% M = 672.90 g / mol (C 35 H 70 0 8 PNa)
Rf = 0,65 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 62,47 H = 10,48 P = 4,60 gef.: C = 62,19 H = 10,48 P = 4,58R f = 0.65 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 62.47 H = 10.48 P = 4.60 found: C = 62, 19 H = 10.48 P = 4.58
Die Synthese wurde nach Woolley und Eibl (Woolley, P. und Eibl, H. : Synthesis of enantiomerically pure phospholipids including phosphatidylserine and phosphatidylglycerol. Chem. Phys. Lipids 47 (1988) 52-62) durchgeführt. Beispiel 25The synthesis was carried out according to Woolley and Eibl (Woolley, P. and Eibl, H.: Synthesis of enantiomerically pure phospholipids including phosphatidylserine and phosphatidylglycerol. Chem. Phys. Lipids 47 (1988) 52-62). Example 25
P - Bsp.: 2-(S)-l-0-Phospho-2-0-lauroyl-eicosan, NatriumsalzP - Ex: 2- (S) -l-0-phospho-2-0-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,081 mol = 81 % M = 598,82 g/mol (C32H6406PNa)Yield: 0.081 mol = 81% M = 598.82 g / mol (C 32 H 64 0 6 PNa)
Rf = 0,01 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,19 H = 10,77 P = 5,17 gef.: C = 63,78 H = 10,76 P = 5,14R f = 0.01 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.19 H = 10.77 P = 5.17 found: C = 63, 78 H = 10.76 P = 5.14
Die Phosphorylierung wurde nach Eibl und Blume (Eibl, H. und Blume, A. : The influence of Charge on phosphatidic acid bilayer membranes. Biochim. Biophys. Acta 553 (1979) 476-488) durchgeführt.Phosphorylation was carried out according to Eibl and Blume (Eibl, H. and Blume, A.: The influence of Charge on phosphatidic acid bilayer membranes. Biochim. Biophys. Acta 553 (1979) 476-488).
Beispiel 26 a) POCH3 Example 26 a) POCH 3
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phosphomethyl-2-0-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (R) -l-0-phosphomethyl-2-0-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,084 mol = 84 % M = 612,84 g/mol (C33H6606 Na)Yield: 0.084 mol = 84% M = 612.84 g / mol (C 33 H 66 0 6 Na)
Rf = 0,95 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,68 H = 10,85 P = 5,05 gef.: C = 64,36 H - 10,84 P = 5,03R f = 0.95 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.68 H = 10.85 P = 5.05 found: C = 64, 36 H - 10.84 P = 5.03
b) POCH2CH3 b) POCH 2 CH 3
Bsp.: 2-(S)-l-0-Phosphoethyl-2-0-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (S) -l-0-phosphoethyl-2-0-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,075 mol = 75 % M = 626,87 g/mol (C34H6806PNa)Yield: 0.075 mol = 75% M = 626.87 g / mol (C 34 H 68 0 6 PNa)
Rf = 0,90 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 65,14 H = 10,93 P = 4,94 gef.: C = 64,89 H = 10,92 P = 4,92 Die Methyl- und Ethylphosphorsäureester der obigen Verbindun¬ gen wurden nach Träuble et al. (Träuble H. et al.: Electrostatic interactions at charged lipid membranes. I. Effects of pH and univalent cations on membrane structure. Biophys. Chem. 4 (1976) 319-342) erhalten.R f = 0.90 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 65.14 H = 10.93 P = 4.94 found: C = 64, 89 H = 10.92 P = 4.92 The methyl and ethyl phosphoric acid esters of the above compounds were according to Träuble et al. (Träuble H. et al .: Electrostatic interactions at charged lipid membranes. I. Effects of pH and univalent cations on membrane structure. Biophys. Chem. 4 (1976) 319-342).
Beispiel 27 a ) P0CH2 -CH2 -0HExample 27 a) P0CH 2 -CH 2 -0H
Bsp.: 2-(S)-l-0-Phosphoglycol-2-0-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (S) -l-0-phosphoglycol-2-0-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,090 mol = 90 % M = 642,87 g/mol (C34H6807PNa)Yield: 0.090 mol = 90% M = 642.87 g / mol (C 34 H 68 0 7 PNa)
Rf = 0,55 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 63,52 H = 10,66 P = 4,82 gef.: C = 63,24 H = 10,65 P = 4,80R f = 0.55 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calc .: C = 63.52 H = 10.66 P = 4.82 found: C = 63, 24 H = 10.65 P = 4.80
OH b ) POCH2 -CH-CH3 OH b) POCH 2 -CH-CH 3
Bsp. : 2-(S)-1-O-Phosphopropandiol-(1,2)-2-O-lauroyl-eicosa , NatriumsalzEx: 2- (S) -1-O-phosphopropanediol- (1,2) -2-O-lauroyl-eicosa, sodium salt
Ausbeute: 0,065 mol = 65 % M = 656,90 g/mol (C35 H7007PNa)Yield: 0.065 mol = 65% M = 656.90 g / mol (C 35 H 70 0 7 PNa)
Rf = 0,60 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,00 H = 10,74 P = 4,72 gef.: C = 63,44 H = 10,73 P = 4,67R f = 0.60 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.00 H = 10.74 P = 4.72 found: C = 63, 44 H = 10.73 P = 4.67
c) POCH2 -CH2 -CH2 -OHc) POCH 2 -CH 2 -CH 2 -OH
Bsp. : 2-(R)-l-0-Phosphopropandiol-(l,3)-2-0-lauroyl-eicosanEx: 2- (R) -l-0-phosphopropanediol- (1,3) -2-0-lauroyl-eicosane
Ausbeute: 0,060 mol = 60 %Yield: 0.060 mol = 60%
M = 656,90 g/mol (C35 H7007PNa)M = 656.90 g / mol (C 35 H 70 0 7 PNa)
Rf = 0,55 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,00 H = 10,74 P « 4,72 gef.: C ■ 63,82 H - 10,61 P = 4,65R f = 0.55 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) Analysis: calculated: C = 64.00 H = 10.74 P «4.72 found: C ■ 63.82 H - 10.61 P = 4.65
Die Phosphorsäureglykolester, Phosphorsaurepropandiol-(1,2)* ester und die Phosphorsaurepropandiol-(1,3)-ester obiger Verbindungen wurden nach Woolley und Eibl (supra) erhalten unter Verwendung der entsprechenden Benzylether.The phosphoric acid glycol esters, phosphoric acid propanediol (1,2) * esters and the phosphoric acid propanediol (1,3) ester of the above compounds were obtained according to Woolley and Eibl (supra) using the corresponding benzyl ethers.
Phosphorylierungsreaktionen nach Schema D, iPhosphorylation reactions according to scheme D, i
Beispiel 28Example 28
D, i - PhosphorylierungenD, i - phosphorylation
PE*, (analog C, i) -PE *, (analog C, i) -
Bsp. : 2-(S)-l-O-Phosphoethanolamin-2-N-lauroyl-eicosanEx: 2- (S) -I-O-phosphoethanolamine-2-N-lauroyl-eicosan
Ausbeute: 0,085 mol «= 85 % M = 618,92 g/mol (C34H7, OsN2P)Yield: 0.085 mol «= 85% M = 618.92 g / mol (C 34 H 7 , O s N 2 P)
Rf = 0,5 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 65,98 H = 11,56 N = 4,53 gef.: C = 65,60 H = 11,55 N •= 4,59R f = 0.5 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 65.98 H = 11.56 N = 4.53 found: C = 65, 60 H = 11.55 N • = 4.59
Beispiel 29Example 29
PE2 (analog C, i) -PE 2 (analog C, i) -
Bsp. : 2-(S)-l-0-(N-Methyl)-phosphoethanolamin-2-N-lauroyl- eicosanEx: 2- (S) -l-0- (N-methyl) -phosphoethanolamine-2-N-lauroyl-eicosan
Ausbeute: 0,082 mol = 82 % M = 632,95 g/mol (C35 H7305N2P)Yield: 0.082 mol = 82% M = 632.95 g / mol (C 35 H 73 0 5 N 2 P)
Rf = 0,45 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 66,42 H = 11,62 N = 4,43 gef.: C = 65,80 H = 11,60 N = 4,54 Beispiel 30R f = 0.45 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 66.42 H = 11.62 N = 4.43 found: C = 65, 80 H = 11.60 N = 4.54 Example 30
PI (analog C, i) -PI (analog C, i) -
Bsp. : 2-(R)-l-0-Phospho-(L-myo-inositol)-2-N-lauroyl-eicosan, NatriumsalzEx: 2- (R) -l-0-phospho- (L-myo-inositol) -2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,02 mol = 30 % M = 760,96 g/mol (C38H750, 0NPNa)Yield: 0.02 mol = 30% M = 760.96 g / mol (C 38 H 75 0, 0 NPNA)
Rf = 0,25 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 60,06 H = 9,95 P = 4,08 gef.: C = 59,69 H = 9,93 P = 4,05R f = 0.25 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 60.06 H = 9.95 P = 4.08 found: C = 59, 69 H = 9.93 P = 4.05
Beispiel 31 PG (analog C, i) -Example 31 PG (analog C, i) -
Bsp.: 2-(S)-l-0-Phophoglycerin-2-N-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (S) -l-0-phophoglycerin-2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,075 mol = 75 % M = 671,91 g/mol (C35H7, 07NPNa)Yield: 0.075 mol = 75% M = 671.91 g / mol (C 35 H 7, 0 7 NPNA)
R = 0,65 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 62,57 H - 10,65 P = 4,61 gef.: C = 62,00 H = 10,63 P = 4,57R = 0.65 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) Analysis: calc .: C = 62.57 H - 10.65 P = 4.61 found: C = 62.00 H = 10.63 P = 4.57
Beispiel 32Example 32
P (analog C, i) -P (analog C, i) -
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phospho-2-N-lauroyl-eicosan, NatriumsalzEx: 2- (R) -l-0-phospho-2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,076 mol = 76 % M = 597,83 g/mol (C32H6505NPNa)Yield: 0.076 mol = 76% M = 597.83 g / mol (C 32 H 65 0 5 NPNa)
Rf = 0,01 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,29 H = 10,96 P = 5,18 gef.: C = 63,97 H = 10,95 P = 5,15 Beispiel 33 POCH3 (analog C, i) -R f = 0.01 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.29 H = 10.96 P = 5.18 found: C = 63, 97 H = 10.95 P = 5.15 Example 33 POCH 3 (analog C, i) -
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phosphomethyl-2-N-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (R) -l-0-phosphomethyl-2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,080 mol = 80 % M = 611,86 g/mol (C33 H6705NPNa)Yield: 0.080 mol = 80% M = 611.86 g / mol (C 33 H 67 0 5 NPNa)
Rf = 0,85 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,78 H = 11,04 P = 5,06 gef.: C = 64,50 H = 11,03 P = 5,04R f = 0.85 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.78 H = 11.04 P = 5.06 found: C = 64, 50 H = 11.03 P = 5.04
Beispiel 34Example 34
P0CH2CH3 (analog C, i) -P0CH 2 CH 3 (analog C, i) -
Bsp.: 2-(S)-l-0-Phosphoethyl-2-N-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (S) -l-0-phosphoethyl-2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,069 mol = 69 % M - 625,89 g/mol (C34 H6905 PNa)Yield: 0.069 mol = 69% M - 625.89 g / mol (C 34 H 69 0 5 PNa)
Rf = 0,90 (Chloroform/Methanol /Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 65,25 H = 11,11 P = 4,95 gef.: C = 64,88 H = 11,09 P = 4,92R f = 0.90 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 65.25 H = 11.11 P = 4.95 found: C = 64, 88 H = 11.09 P = 4.92
Beispiel 35Example 35
POCH2-CH2-OH (analog C, i) -POCH 2 -CH 2 -OH (analog C, i) -
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phosphoglycol-2-N-lauroyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (R) -l-0-phosphoglycol-2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,078 mol = 78 %Yield: 0.078 mol = 78%
M = 641,89 g/mol (C34 H6906NPNa)M = 641.89 g / mol (C 34 H 69 0 6 NPNa)
Rf = 0,55 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6)R f = 0.55 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6)
Analyse: Beispiel 36Analysis: Example 36
POCH2 -CH-CH3 ( analog C , i )POCH 2 -CH-CH 3 (analog C, i)
OH Bsp. : 2-(R)-l-0-Phosphopropandiol-(1,2)-2-N-lauroyl-eicosan, NatriumsalzOH Example: 2- (R) -l-0-phosphopropanediol- (1,2) -2-N-lauroyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,058 mol = 58 % M = 655,91 g/mol (C35 H7, 06NPNa)Yield: 0.058 mol = 58% M = 655.91 g / mol (C 35 H 7 , 0 6 NPNa)
Rf = 0,60 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,09 H = 10,91 P = 4,72 gef.: C = 63,76 H = 10,90 P = 4,70R f = 0.60 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.09 H = 10.91 P = 4.72 found: C = 63, 76 H = 10.90 P = 4.70
Beispiel 37Example 37
OH iOH i
POCH2 -CH2 -CH2 (analog C, i) -POCH 2 -CH 2 -CH 2 (analog C, i) -
Bsp. : 2-(S)-l-0-Phosphopropandiol-(l,3)-2-N-lauroyl-eicosanEx: 2- (S) -I-0-phosphopropanediol- (1,3) -2-N-lauroyl-eicosane
Ausbeute: 0,065 mol = 65 % M = 655,91 g/mol (C35 H7007PNa)Yield: 0.065 mol = 65% M = 655.91 g / mol (C 35 H 70 0 7 PNa)
Rf = 0,55 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 64,09 H = 10,91 P = 4,72 gef.: C = 63,81 H = 10,84 P = 4,68 R f = 0.55 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 64.09 H = 10.91 P = 4.72 found: C = 63, 81 H = 10.84 P = 4.68
Beispiele 38 PS (analog Beispiel 24)Examples 38 HP (analogous to example 24)
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phospho-L-serin-2-N-acetyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (R) -l-0-phospho-L-serine-2-N-acetyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,061 mol = 61 % M = 516,59 g/mol (C23 H46NaN 7P)Yield: 0.061 mol = 61% M = 516.59 g / mol (C 23 H 46 NaN 7 P)
Rf = 0,20 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 53,48 H = 8,98 P = 6,00 gef.: C = 53,21 H ■ 8,83 P = 5,89R f = 0.20 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 53.48 H = 8.98 P = 6.00 found: C = 53, 21 H ■ 8.83 P = 5.89
Beispiel 39Example 39
PS (analog Beispiel 24)PS (analogous to example 24)
Bsp.: 2-(S)-l-0-Phospho-L-serin-2-N-acetyl-eicosan, Natrium¬ salzExample: 2- (S) -I-0-phospho-L-serine-2-N-acetyl-eicosan, sodium salt
Ausbeute: 0,053 mol = 53 %Yield: 0.053 mol = 53%
M = 516,59 g/mol (C23H46NaN207 )M = 516.59 g / mol (C 23 H 46 NaN 2 0 7 )
Rf = 0,20 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6)R f = 0.20 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6)
Analyse: ber.: wie R-Form gef.: C = 53,14 H = 8,91 P = 5,89Analysis: Calculated from R-form: C = 53.14 H = 8.91 P = 5.89
Beispiel 40Example 40
P-(N,N,N-trimethyl)-S- (analog Beispiel 21)P- (N, N, N-trimethyl) -S- (as in Example 21)
Bsp. : 2-(R)-l-0-Phospho-(N,N,N-trimethyl)-L-serin-2-N-acetyl- eicosan, NatriumsalzEx: 2- (R) -l-0-phospho- (N, N, N-trimethyl) -L-serine-2-N-acetyl-eicosane, sodium salt
Ausbeute: 0,041 mol = 41 % M = 558,67 g/mol (C26H52NaN207P)Yield: 0.041 mol = 41% M = 558.67 g / mol (C 26 H 52 NaN 2 0 7 P)
Rf = 0,10 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 55,63 H = 9,38 N = 5,01 P = 5,54 gef.: C = 55,63 H = 9,22 N = 4,89 P = 5,44 Beispiel 41R f = 0.10 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 55.63 H = 9.38 N = 5.01 P = 5.54 found : C = 55.63 H = 9.22 N = 4.89 P = 5.44 Example 41
PS - (analog Beispiel 24)PS - (analogous to example 24)
Bsp.: 2-(R)-l-0-Phospho-L-serin-2-0-ethyl-nonadecan, Natrium¬ salzExample: 2- (R) -l-0-phospho-L-serine-2-0-ethyl-nonadecane, sodium salt
Ausbeute: 0,055 mol = 55 % M = 517,62 g/mol (C24 H49NaN07P)Yield: 0.055 mol = 55% M = 517.62 g / mol (C 24 H 49 NaN0 7 P)
Rf = 0,20 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 55,69 H = 9,54 N = 2,70 P = 5,98 gef.: C - 55,45 H = 9,47 N = 2,63 P = 5,87R f = 0.20 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 55.69 H = 9.54 N = 2.70 P = 5.98 found. : C - 55.45 H = 9.47 N = 2.63 P = 5.87
Beispiel 42Example 42
P-(N,N-dimethyl)-S- (analog Beispiel 24)P- (N, N-dimethyl) -S- (analogous to example 24)
Bsp. : 2-(S)-1-O-Phospho-(N,N-dimethyl)-D-serin-2-O-ethyl- heptadecan, NatriumsalzEx: 2- (S) -1-O-phospho- (N, N-dimethyl) -D-serine-2-O-ethyl-heptadecane, sodium salt
Ausbeute: 0,047 mol = 47 % M = 517,62 g/mol (C24H49NaN07P)Yield: 0.047 mol = 47% M = 517.62 g / mol (C 24 H 49 NaN0 7 P)
Rf = 0,15 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 55,69 H = 9,54 N = 2,70 P = 5,98 gef.: C = 55,51 H = 9,43 N = 2,59 P = 5,83R f = 0.15 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 55.69 H = 9.54 N = 2.70 P = 5.98 found. : C = 55.51 H = 9.43 N = 2.59 P = 5.83
Beispiel 43Example 43
PN - (analog Beispiel 24)PN - (analogous to example 24)
Bsp. : 2-(R)-l-0-Phospho-sn-l'-glycerin-2-amino-octadecan,Ex: 2- (R) -I-0-phospho-sn-l'-glycerol-2-amino-octadecane,
NatriumsalzSodium salt
Ausbeute: 0,061 mol = 61 % M = 461,56 g/mol (C2 , H45NaN06P)Yield: 0.061 mol = 61% M = 461.56 g / mol (C 2 , H 45 NaN0 6 P)
Rf = 0,20 (Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 54,64 H = 9,82 N = 3,03 P = 6,71 gef.: C = 54,43 H = 9,67 N = 2,78 P = 6,50 Beispiel 44R f = 0.20 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 54.64 H = 9.82 N = 3.03 P = 6.71 found : C = 54.43 H = 9.67 N = 2.78 P = 6.50 Example 44
PN - (analog Beispiel 24)PN - (analogous to example 24)
Bsp. : 2-(R)-l-0-Phospho-sn-l'-glycerin-2-(N,N,N-trimethyl)* ammonium-eicosanEx: 2- (R) -l-0-phospho-sn-l'-glycerol-2- (N, N, N-trimethyl) * ammonium eicosane
Ausbeute: 0,045 mol = 45 % M = 509,70 g/mol (C26H56N06P)Yield: 0.045 mol = 45% M = 509.70 g / mol (C 26 H 56 N0 6 P)
Rf = 0,15 (Chloroform/Methanol /Ammoniak (25 %) (60:40:6) Analyse: ber.: C = 61,27 H = 11,07 N = 2,75 P = 6,08 gef.: C = 61,05 H = 11,00 N = 2,73 P = 6,07R f = 0.15 (chloroform / methanol / ammonia (25%) (60: 40: 6) analysis: calculated: C = 61.27 H = 11.07 N = 2.75 P = 6.08 found. : C = 61.05 H = 11.00 N = 2.73 P = 6.07
Beispiel 45Example 45
Bestimmung der Enantiomerenreinheit der erfindungsgemäßenDetermination of the enantiomeric purity of the invention
SubstanzenSubstances
Hierzu wurden die "Mosher"-ester (Ester der (R)-(+)-α-Me- thoxy-α-trifluormethylphenylessigsäure) von A oder B, c sowie von A, d und von B, d synthetisiert. Die Ester wurden 19F-NMR-spektroskopisch daraufhin überprüft, ob sich durch Veresterung mit dem chiralen Alkohol nur ein diastereomerer Ester gebildet hat, wie es von einem enantiomeren reinen Alkohol erwartet wird. Zum Vergleich wurden die 19F-NMR-Spek- tren der "Mosher"-ester der racemischen Alkohole herangezo¬ gen. Die hier überprüften Alkohole werden im Verlauf der Synthese in die erfindungsgemäßen Substanzen überführt, ohne daß die O-C oder N-C-Bindung im chiralen Zentrum in einer Folgereaktion beeinflußt wird. Die optische Reinheit der hier untersuchten Alkohole ist also voll auf die erfindungsgemäßen Substanzen zu übertragen. Beispiel 46For this purpose, the "Mosher" esters (esters of (R) - (+) - α-methoxy-α-trifluoromethylphenylacetic acid) from A or B, c and from A, d and from B, d were synthesized. The esters were checked by 19F-NMR spectroscopy to determine whether only a diastereomeric ester had formed by esterification with the chiral alcohol, as is expected from an enantiomerically pure alcohol. For comparison, the 19F-NMR spectra of the "Mosher" esters of racemic alcohols were used. The alcohols checked here are converted into the substances according to the invention in the course of the synthesis without the OC or NC bond in the chiral center is influenced in a subsequent reaction. The optical purity of the alcohols examined here can therefore be fully transferred to the substances according to the invention. Example 46
Synthese der "Mosher"-ester:Synthesis of the "Mosher" esters:
XI mg (0.250 mmol) des zu veresternden Alkohols wird zusammen mit 79.6 mg (0.386 mmol) Dicyclohexylcarbadiimid (DCC) und 82.0 mg (0.350 mmol) (R)-(+)-α-Methoxy-α-trifluormethyl-phe- nylessigsäure (R-Moshersäure) sowie einem Kristall DMAP in 1.5 ml alkoholfreiem Chloroform gelöst und drei Stunden bei RT gerührt. (Prüfung des vollständigen Umsatzes durch DC- Kontrolle) Vom Lösungsmittel wird vorsichtig im Vakuum abde¬ stilliert. Man reinigt das Produkt säulenchromatographisch an 25 g Kieselgel. Die "Mosher"-ester der Alkohole l-Hydroxy-2- O-benzyl-octadecan und l-Hydroxy-2-N-phthal-imido-octadecan werden mit Essigester/Hexan (1:4) eluiert, die "Mosher"-ester der Alkohole l-O-Trityl-2-hydroxy-octadecan werden mit Diiso- propylether/Hexan (1:7) eluiert. Ausbeute: X2 mg (X3 mmol) = X4 %XI mg (0.250 mmol) of the alcohol to be esterified together with 79.6 mg (0.386 mmol) dicyclohexylcarbadiimide (DCC) and 82.0 mg (0.350 mmol) (R) - (+) - α-methoxy-α-trifluoromethyl-phenylacetic acid ( R-Mosheric acid) and a crystal of DMAP dissolved in 1.5 ml of alcohol-free chloroform and stirred for three hours at RT. (Check the complete conversion by TLC control) The solvent is carefully distilled off in vacuo. The product is purified by column chromatography on 25 g of silica gel. The "Mosher" esters of the alcohols l-hydroxy-2-O-benzyl-octadecane and l-hydroxy-2-N-phthalimido-octadecane are eluted with ethyl acetate / hexane (1: 4), the "Mosher" esters of the alcohols lO-trityl-2-hydroxy-octadecane are eluted with diisopropyl ether / hexane (1: 7). Yield: X2 mg (X3 mmol) = X 4 %
Nr. Alkohol X, [mg] X2 [mg]X3 [mmol] X4[%]No. Alcohol X, [mg] X 2 [mg] X 3 [mmol] X 4 [%]
1 l-Hydroxy-2-O- 94 147 0.247 99 benzyl-octadecan1 l-Hydroxy-2-O- 94 147 0.247 99 benzyl octadecane
(A, d)(A, d)
2 l-Hydroxy-2-N- 105 117 0.185 74 phtalimido- octadecan (B, d)2 l-Hydroxy-2-N- 105 117 0.185 74 phthalimido octadecane (B, d)
3 l-O-Trityl-2- 132 134 0.195 78 hydroxy-octadecan3 l-O-Trityl-2- 132 134 0.195 78 hydroxy-octadecane
(A oder B, d) "Mosher"-ester Nr. RF (Laufmittel) Molgewicht/Summenformel(A or B, d) "Mosher" ester No. R F (eluent) molecular weight / formula
1 0.62 (Essigester/ 592.783 (C35H5104F3 )1 0.62 (ethyl acetate / 592.783 (C 35 H 51 0 4 F 3 )
Hexan 1:4)Hexane 1: 4)
2 0.41 (Essigester/ 631.776 (C36 H4805 NF3 )2 0.41 (ethyl acetate / 631.776 (C 36 H 48 0 5 NF 3 )
Hexan 1:4)Hexane 1: 4)
3 0.43 (Diisopropyl- 687.985 (C47H5904F3 ) ether/ Hexan 1:7)3 0.43 (diisopropyl 687.985 (C 47 H 59 0 4 F 3 ) ether / hexane 1: 7)
Die zu Vergleichszwecken dienenden "Mosher"-ester entspre¬ chenden racemischen Alkohole wurden durch Mischung der "Mosher"-ester der chiralen Alkohole erzeugt.The comparative "Mosher" esters corresponding racemic alcohols were produced by mixing the "Mosher" esters of the chiral alcohols.
1 F-NMR (CDC13 ) : 1 F-NMR (CDC1 3 ):
"Mosher"-ester von Chemische Verschiebung rac-(A oder B, c) ό=-71.83 δ=-72.26"Mosher" ester of chemical shift rac- (A or B, c) ό = -71.83 δ = -72.26
R-(A oder B, c) δ=-71.82R- (A or B, c) δ = -71.82
S-(A oder B, c) δ=-72.26S- (A or B, c) δ = -72.26
rac-(B, d) δ=-72.11 δ=-72.58rac- (B, d) δ = -72.11 δ = -72.58
R-(B, d) δ=-72.11R- (B, d) δ = -72.11
S-(B, d) δ=-72.58S- (B, d) δ = -72.58
rac-(A, d) δ=-72.06 δ=-72.12rac- (A, d) δ = -72.06 δ = -72.12
R-(A, d) δ=-72.06R- (A, d) δ = -72.06
S-(A, d) δ=-72.12S- (A, d) δ = -72.12
Aus den Spektren ist ersichtlich, das die erfindungsgemäßen Verbindungen enantiomerenrein sind. Die Signalintensitäten des jeweilig unerwünschten Distereomers liegen unter 1 %. Das unerwünschte Diastereomerensignal kann auch von der nicht vollständigen Enantiomerenreinheit der handelsüblichen R- "Mosher"-säure herrühren. (ee>99%) Der Enantiomerenuberschuß der chiralen erfindungsgemäßen Substanzen beträgt folglich mehr als 99 %.It can be seen from the spectra that the compounds according to the invention are enantiomerically pure. The signal intensities of the respective undesirable distereomer are below 1%. The undesired diastereomer signal can also result from the incomplete enantiomeric purity of the commercially available R “Mosher” acid. (ee> 99%) The enantiomeric excess the chiral substances according to the invention are consequently more than 99%.
Beispiel 47Example 47
Bestimmung der Substrateigenschaften gegenüber PhospholipaseDetermination of substrate properties against phospholipase
A2 (PLA2.A2 (PLA2.
Das Volumen eines Testansatzes betrug 2 ml. Pro Testansatz wurden in einem Reagenzglas 2 μmol Substrat (Substrat in Lösung/Suspension; 20 μmol/ml Wasser) in der entsprechenden Menge Puffer (Tris/HCl 100 mM + 10 mM CaCl2 ; pH: 8.9) aufge¬ nommen und im Ultraschallbad bei 45°C 30 Minuten suspendiert.The volume of a test batch was 2 ml. For each test batch, 2 μmol substrate (substrate in solution / suspension; 20 μmol / ml water) in the appropriate amount of buffer (Tris / HCl 100 mM + 10 mM CaCl 2 ; pH: 8.9 ) recorded and suspended in an ultrasonic bath at 45 ° C for 30 minutes.
Die Proben wurden im Wasserbad bei 25°C vorinkubiert, dann die Reaktion durch Zugabe der PLA2-Lösung gestartet. Dabei wurde je nach Substrateigenschaften 0.01-1 U Enzym zugege¬ ben. Die Inkubationszeiten variierten von 10-60 Minuten. Für jedes Substrat wurden Kontrollansätze ohne Enzym parallel durchgeführt. Die Enzymmenge und die Inkubationszeiten wurden so gewählt, daß maximal 10 % des eingesetzten Substrates umgesetzt wurden. Mindestens drei Bestimmungen wurden für jedes Substrat durchgeführt. Die Reaktionen wurden durch Extraktion mit je 2 ml Chloroform/Methanol (3:1) gestoppt. Es wurde 5 Minuten zentrifugiert (500 g), die untere Phase sepa¬ riert. Die obere Phase wurde daraufhin noch einmal mit 2 ml Chloroform/Methanol (3:1), dann mit 2 ml Chloroform extra¬ hiert und zentrifugiert. Die vereinigten unteren Phasen wur¬ den im Stickstoffström vom Lösungsmittel befreit.The samples were preincubated in a water bath at 25 ° C., then the reaction was started by adding the PLA 2 solution. Depending on the substrate properties, 0.01-1 U enzyme was added. The incubation times varied from 10-60 minutes. Control batches without enzyme were carried out in parallel for each substrate. The amount of enzyme and the incubation times were chosen so that a maximum of 10% of the substrate used was converted. At least three determinations were made for each substrate. The reactions were stopped by extraction with 2 ml of chloroform / methanol (3: 1). The mixture was centrifuged for 5 minutes (500 g), the lower phase separated. The upper phase was then extracted once more with 2 ml of chloroform / methanol (3: 1), then with 2 ml of chloroform and centrifuged. The combined lower phases were freed from the solvent in a stream of nitrogen.
Der Rückstand wurde in 200-2000 μl Chloroform/Methanol/Wasser 30:60:8 aufgenommen. Aus diesen Lösungen wurden Aliquots von 2-20 μl entnommen und zur quantitativen Bestimmung der Pro¬ duktmenge durch die HPTLC-Technik eingesetzt. Aus den Mengen des gebildeten Produktes, den eingesetzten Enzymmengen und den Inkubationszeiten wurden die spezifischen Aktivitäten der PLA2 gegen die entsprechenden Substrate in μmol/min/mg = U/mg berechnet. Mit den reinen Produkten wurde in einem analogen Ansatz die Ausbeute an extrahiertem Produkt bestimmt und damit das experimentelle Ergebnis korrigiert. Die Eichlösungen wurden durch Einwage der Produkte und Auf¬ nahme in Chloroform/Methanol/Wasser 30:60:8 hergestellt. Die Konzentration der Eichlösungen betrug 100 pmol/μl.The residue was taken up in 200-2000 μl chloroform / methanol / water 30: 60: 8. Aliquots of 2-20 μl were taken from these solutions and used for the quantitative determination of the amount of product by the HPTLC technique. The specific activities of the PLA2 against the corresponding substrates in μmol / min / mg = U / mg were calculated from the amounts of the product formed, the amounts of enzyme used and the incubation times. With the pure products, the yield of extracted product was determined in an analogous approach and the experimental result was thus corrected. The calibration solutions were prepared by weighing the products and taking them up in chloroform / methanol / water 30: 60: 8. The concentration of the calibration solutions was 100 pmol / μl.
Zur Durchführung der Messung der Inhibitorwirkung auf die PLA2 -Hydrolyse von DPPC bzw. PAF wurde die entsprechende Menge "Inhibitor" mit DPPC bzw. PAF gemeinsam beschallt und die Probe dann der PLA2-Hydrolyse unterworfen. Man bestimmt wie beschrieben die entstandene Menge Lysolipid und berechnet im Vergleich mit einer, nicht mit "Inhibitor" behandelten, DPPC- bzw. PAF-Probe die Inhibitionswirkung. Bei "Inhibito¬ ren", die auch der PLA2 -Hydrolyse unterliegen, wird die Hem¬ mung auf das DPPC/PLA2 bzw. PAF/PLA2 -System bestimmt, indem die Verhältnisse der unabhängig voneinander gemessenen Um¬ satzraten mit den Verhältnissen der gemeinsam gemessenen Umsatzraten verglichen werden.To carry out the measurement of the inhibitory effect on the PLA 2 hydrolysis of DPPC or PAF, the corresponding amount of "inhibitor" was sonicated together with DPPC or PAF and the sample was then subjected to the PLA 2 hydrolysis. The amount of lysolipid formed is determined as described and the inhibitory effect is calculated in comparison with a DPPC or PAF sample which has not been treated with "inhibitor". In the case of "inhibitors", which are also subject to PLA 2 hydrolysis, the inhibition of the DPPC / PLA 2 or PAF / PLA 2 system is determined by comparing the ratios of the conversion rates measured independently of one another with the ratios the jointly measured sales rates are compared.
Beispiel 48Example 48
Durchführung von HPTLC-AnalysenPerforming HPTLC analysis
Vor dem Auftragen der Eich- und Meßlösungen auf die HPTLC- Platte ließ man die Platte in Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) 50:50:4 vorlaufen, um Verschmutzungen zu entfernen. Die Platte wurde 10 Minuten bei 180°C getrocknet. 2-10 μl der Eichlösungen sowie 2-20 μl der zu messenden Produktlösungen wurden mit einem HPTLC-Auftragegerät auf die Dünnschichtplat¬ te aufgetragen. Man entwickelte die Platte im für die Sub¬ strat/Produkt-Trennung günstigsten Laufmittel (Tab. X.l). Die entwickelten Platten trockneten 10 Minuten bei 180°C. Zum Anfärben wurde die erkaltete Platte 15 Sekunden in eine Lö¬ sung von 100 g Kupfersulfat in 906 ml Wasser und 94 ml Phos¬ phorsäure (85 %) getaucht. Man ließ die Platte ein Minute bei 110°C trocknen. Die Anfärbung erfolgte schließlich durch Erhitzen der Platte auf 180°C. Je nach Produkt dauerte dieser Vorgang 1-4 Minuten. Die so angefärbte Platte wurde in einem Densitometer vermessen. Über die mitaufgetragenen Eichsub¬ stanzen und der daraus resultierenden Eichkurve wurden die Produktmengen bestimmt. Diese konnten dann zur Berechnung der enzymatischen Umsätze herangezogen werden.Before the calibration and measurement solutions were applied to the HPTLC plate, the plate was run in chloroform / methanol / ammonia (25%) 50: 50: 4 in order to remove contaminants. The plate was dried at 180 ° C for 10 minutes. 2-10 μl of the calibration solutions and 2-20 μl of the product solutions to be measured were applied to the thin-layer plate using an HPTLC applicator. The plate was developed in the most suitable solvent for the substrate / product separation (Tab. Xl). The developed plates dried at 180 ° C for 10 minutes. To the The cooled plate was dipped in a solution of 100 g of copper sulfate in 906 ml of water and 94 ml of phosphoric acid (85%) for 15 seconds. The plate was allowed to dry at 110 ° C for one minute. The staining was finally done by heating the plate to 180 ° C. Depending on the product, this process took 1-4 minutes. The plate thus stained was measured in a densitometer. The product quantities were determined via the calibration substances also applied and the resulting calibration curve. These could then be used to calculate the enzymatic conversions.
Substrat Laufmittel (RF-Werte: Substrat/Produkt)Substrate eluent (RF values: substrate / product)
DPPC A (0.44/0.34)DPPC A (0.44 / 0.34)
PAF B (0.18/0.10)PAF B (0.18 / 0.10)
(C-2-Ester) B (0.15/0.09)(C-2 ester) B (0.15 / 0.09)
(C-12-Ester) A (0.39/0.22)(C-12 ester) A (0.39 / 0.22)
(C-16-Ester) A (0.39/0.22)(C-16 ester) A (0.39 / 0.22)
(C-18/l-Ester) A (0.38/0.22)(C-18 / l ester) A (0.38 / 0.22)
(C-18-Ester) A (0.35/0.22)(C-18 ester) A (0.35 / 0.22)
(C-2-Amid) B (0.12/0.07)(C-2 amide) B (0.12 / 0.07)
(C-12-Amid) A (0.33/0.16)(C-12 amide) A (0.33 / 0.16)
(C-16-Amid) A (0.34/0.16)(C-16 amide) A (0.34 / 0.16)
(C-18/l-Amid) A (0.33/0.16)(C-18 / l amide) A (0.33 / 0.16)
(C-18-Amid) A (0.33/0.16)(C-18 amide) A (0.33 / 0.16)
Laufmittel A: Chloroform/Methanol/Triethylamin/Wasser 60:70:68:16 Laufmittel B: Chloroform/Methanol/Ammoniak (25 %) Solvent A: chloroform / methanol / triethylamine / water 60: 70: 68: 16 solvent B: chloroform / methanol / ammonia (25%)

Claims

Patentansprüche Claims
1. Enantiomerenreine Phosphorsäureester und Phosphorsäure¬ diester in beiden möglichen Konfigurationen und auch die Racemate der allgemeinen Formel1. Enantiomerically pure phosphoric acid esters and phosphoric acid diesters in both possible configurations and also the racemates of the general formula
O nO n
R1 -C(R2 )H-CH2 -OPO-R3 R 1 -C (R 2 ) H-CH 2 -OPO-R 3
I 0"I 0 "
wobei R1 ein C* 0-C22-Alkylrest bedeutet,where R 1 is a C * 0 -C 22 alkyl radical,
R2 ein O-CO-R4, NH-CO-R4 , -OH, -0CH3 , -0C2 H5 , -0C3 H7 ,R 2 is an O-CO-R 4 , NH-CO-R 4 , -OH, -0CH 3 , -0C 2 H 5 , -0C 3 H 7 ,
-NH2 , -NHCH3 , -N(CH3)2, -N* (CH3 )3C1- bedeutet,-NH 2 , -NHCH 3 , -N (CH 3 ) 2 , -N * (CH 3 ) 3 C1-,
R4 ein C-* -C20 -Alkylrest ist undR 4 is a C- * -C 20 alkyl radical and
R3 für einen der folgenden Reste steht: -C2H4 -N+ (CH3 )3 ,R 3 represents one of the following radicals: -C 2 H 4 -N + (CH 3 ) 3 ,
-C2H4 -N*H(CH3 )2 , -C2H4 -N*H2CH3 , -C2H4 -N*H3 , Pentahydro- xycyclohexanyl-, insbesondere myo-Inositolderivate, 1,2- oder 2,3- (R oder S)-Dihydroxypropanyl-, Seryl (D oder-C 2 H 4 -N * H (CH 3 ) 2 , -C 2 H 4 -N * H 2 CH 3 , -C 2 H 4 -N * H 3 , pentahydroxycyclohexanyl, especially myo-inositol derivatives, 1 , 2- or 2,3- (R or S) -dihydroxypropanyl-, seryl (D or
L)-, (N-Methyl)-Seryl (D oder L)-, (N,N-Dimethyl)-SerylL) -, (N-methyl) -seryl (D or L) -, (N, N-dimethyl) -seryl
(D oder L)-, (N,N,N-Trimethyl)-Seryl (D oder L)-, H-,(D or L) -, (N, N, N-trimethyl) -seryl (D or L) -, H-,
Methyl-, Ethyl-, Hydroxyethyl-, 3-Hydroxypropyl-, 2-Methyl, ethyl, hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 2-
Hydroxypropyl, wobeiHydroxypropyl, wherein
0 u R2 und O-P-OR3 auch miteinander vertauschbar sind, sowie i o-0 u R 2 and OP-OR 3 are also interchangeable, as well as i o-
deren Enantiomeren.their enantiomers.
2. Verbindungen nach Anspruch 1, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R ein C*, 4 -C-* 8 -Alkylrest ist. 2. Compounds according to claim 1, characterized in that R is a C *, 4 -C- * 8 alkyl radical.
3. Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Palmitoylrest ist.3. Compounds according to any one of the preceding claims, characterized in that R 2 is a palmitoyl radical.
4. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Hydroxylrest ist und das ihn tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist.4. Compounds according to claim 1 or 2, characterized in that R 2 is a hydroxyl radical and the C atom carrying it has the S configuration.
5. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Hydroxylrest ist und das ihn tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.5. Compounds according to claim 1 or 2, characterized in that R 2 is a hydroxyl radical and the C atom carrying it has the R configuration.
6. Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R3 eine Aminogruppe ist und das ihn tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist.6. Compounds according to any one of the preceding claims, characterized in that R 3 is an amino group and the C atom carrying it has the S configuration.
7. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 5, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R3 eine Aminogruppe ist und das ihn tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.7. Compounds according to any one of claims 1 to 5, characterized in that R 3 is an amino group and the C atom carrying it has the R configuration.
8. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein C2-C5 -Carbonsäureamid ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.8. Compounds according to any one of claims 1, 2 6 or 7, characterized in that R 2 is a C 2 -C 5 carboxamide and that the C atom bearing this radical has the R configuration.
9. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein C2-C5 -Carbonsäureamid ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist. 9. Compounds according to one of claims 1, 2, 6 or 7, characterized in that R 2 is a C 2 -C 5 carboxamide and that the C atom bearing this radical has the S configuration.
10. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein C2 -C5 -Carbonsäureester ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.10. Compounds according to any one of claims 1, 2, 6 or 7, characterized in that R 2 is a C 2 -C 5 carboxylic acid ester and that the C atom bearing this radical has the R configuration.
11 Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein C2 -C5 -Carbonsäureester ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist.11 Compounds according to one of claims 1, 2, 6 or 7, characterized in that R 2 is a C 2 -C 5 carboxylic acid ester and that the C atom bearing this radical has the S configuration.
12. Verbindungen nach Anspruch 8, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Essigsäureamid ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.12. Compounds according to claim 8, characterized in that R 2 is an acetic acid amide and that the C atom bearing this radical has the R configuration.
13. Verbindungen nach Anspruch 9, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Essigsäureamid ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist.13. Compounds according to claim 9, characterized in that R 2 is an acetic acid amide and that the C atom bearing this radical has the S configuration.
14. Verbindungen nach Anspruch 10, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Essigsäureester ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die R-Konfiguration aufweist.14. Compounds according to claim 10, characterized in that R 2 is an acetic acid ester and that the C atom bearing this radical has the R configuration.
15. Verbindungen nach Anspruch 11, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Essigsäureester ist und daß das diesen Rest tragende C-Atom die S-Konfiguration aufweist.15. Compounds according to claim 11, characterized in that R 2 is an acetic acid ester and that the C atom bearing this radical has the S configuration.
16. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 oder 1 , d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Fet säureamidrest mit 10 bis 17 C-Atomen ist. 16. Compounds according to any one of claims 1, 2, 6 or 1, characterized in that R 2 is a fatty acid amide residue having 10 to 17 carbon atoms.
17. Verbindungen nach Anspruch 16, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß das den Fettsäureamidrest aufweisende C-Atom die R- Konfiguration aufweist.17. Compounds according to claim 16, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that the C atom having the fatty acid amide residue has the R configuration.
18. Verbindungen nach Anspruch 16, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß das den Fettsäureamidrest tragende C-Atom die S- Konfiguration aufweist.18. Compounds according to claim 16, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that the C atom carrying the fatty acid amide residue has the S configuration.
19. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß R2 ein Fettsäureester mit 10 bis 17 C-Atomen ist.19. Compounds according to any one of claims 1, 2, 6 or 7, characterized in that R 2 is a fatty acid ester having 10 to 17 carbon atoms.
20. Verbindungen nach Anspruch 19, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß das den Fettsäureester aufweisende C-Atom die R- Konfiguration aufweist.20. Compounds according to claim 19, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that the C atom having the fatty acid ester has the R configuration.
21. Verbindungen nach Anspruch 19, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß das den Fettsäureester tragende C-Atom die S-Konfi¬ guration aufweist.21. Compounds according to claim 19, so that the carbon atom carrying the fatty acid ester has the S configuration.
22. Verfahren zur Herstellung von Phosphoverbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 21 durch Umsetzen von22. A process for the preparation of phospho compounds according to any one of claims 1 to 21 by reacting
- Isopropyliden-Glycerinaldehyd mit einer Triphenyl- phosphinalkylbromid-Verbindung mittels einer Wit¬ tigreaktion,Isopropylidene-glyceraldehyde with a triphenylphosphinalkylbromide compound by means of a Witig reaction,
- einer Hydrierung und Deacetonierung des so erhalte¬ nen Produktes auf an sich bekannte Weise, an¬ schließender- Hydrogenation and deacetonation of the product thus obtained in a manner known per se, followed by
- Tritylierung des hydrierten und deacetonierten Produktes zur entsprechenden O-Tritylhydroxy-Ver- bindung. Umsetzen der O-Tritylhydroxy-Verbindung und Detri¬ tylierung zum entsprechenden Hydroxy-O-Benzylzwi- schenprodukt und Weiterverarbeitung des Zwischenproduktes entweder da¬ durch, daß man es- Tritylation of the hydrogenated and deacetonated product to the corresponding O-tritylhydroxy compound. Implementation of the O-tritylhydroxy compound and detritylation to the corresponding Hydroxy-O-Benzyl intermediate and further processing of the intermediate either by it
- durch Phosphorylierung zur entsprechenden Phospho- O-Benzylverbindung mit anschließender Deben¬ zylierung zum entsprechenden O-Phospho-Hydroxy- Produkt umsetzt oder daß man das Zwischenprodukt durch eine- Implemented by phosphorylation to the corresponding phospho-O-benzyl compound with subsequent debenylation to the corresponding O-phospho-hydroxy product or that the intermediate product is reacted with a
Phthalimideinführung mit Konformationsumkehr und anschließender Detritylierung zur entsprechenden Hydroxy-N-Phthalimido-Verbindung umsetzt, die dann mittels einer Phosphorylierung auf an sich bekannte Weise in die entsprechende Phospho-N-Phthalimido- Verbindung umgesetzt wird, und diese dann durch Phthalsaureabspaltung in das gewünschte O-Phospho- Amino-Produkt überführt wird.Introduction of phthalimide with conformational reversal and subsequent detritylation to the corresponding hydroxy-N-phthalimido compound, which is then converted into the corresponding phospho-N-phthalimido compound by phosphorylation in a manner known per se, and this is then converted into the desired O- by phthalic acid cleavage Phospho-amino product is transferred.
23. Verfahren nach Anspruch 22, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man das Phosphocholin- oder das Phospho-(N,N-dime- thyl)-Ethanolamin-Amino bzw. das entsprechende Hydroxy- Produkt mit einem den Rest R4 enthaltenden Acetylie- rungsmittel zum entsprechenden Endprodukt umsetzt.23. The method according to claim 22, characterized in that the phosphocholine or the phospho- (N, N-dimethyl) -ethanolamine amino or the corresponding hydroxy product with an acetylene containing the radical R 4 to the corresponding End product.
24. Verfahren nach Anspruch 22, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß eine 1-O-Trity1-2-hydroxyVerbindung durch Allylie¬ rung und Detritylierung zur l-Hydroxy-2-O-allyl-Verbin- dung umgesetzt wird, nach Benzylierung des Zwischenprodukts in 1-Position und Allyletherspaltung in 2-Position die freie 2-Hydroxylgruppe acyliert wird und die freie 1-Hydroxylgruppe durch Benzyletherspaltung erzeugt wird und durch Phosphorylierung in die gewünsch¬ ten Phosphorsäureester- und Phosphorsäurediester-Verbin¬ dungen überführt wird.24. The method according to claim 22, characterized in that a 1-O-trity1-2-hydroxy compound is converted to the l-hydroxy-2-O-allyl compound by allylization and detritylation, after benzylation of the intermediate in 1- Position and allyl ether cleavage in the 2-position the free 2-hydroxyl group is acylated and the free 1-hydroxyl group by benzyl ether cleavage is generated and converted into the desired phosphoric ester and phosphoric diester compounds by phosphorylation.
25. Verfahren nach Anspruch 22, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß eine l-O-Trityl-2-hydroxy-Verbindung durch Einfüh¬ rung der Phthalimidgruppe unter Konfigurationsumkehr und anschließende Detritylierung zur entsprechenden 1-Hydro- xyverbindung umgesetzt wird, das Zwischenprodukt an¬ schließend durch eine Benzylierung in 1-Position gefolgt von einer Phthalsaureabspaltung in 2-Position zur 1-0- Benzyl-2-Aminoverbindung umgesetzt wird, die mit einem den Rest R4 enthaltenden Acylierungsmittel in die 1-0- Benzyl-2-N-Acyl-Verbindung umgewandelt wird und durch Debenzylierung die 1-Hydroxylgruppe freigelegt wird und durch Phosphorylierung in die gewünschten Phosphorsäure¬ ester- und Phosphorεäurediester-Verbindungen überführt wird.25. The method according to claim 22, characterized in that a 10-trityl-2-hydroxy compound is converted by introduction of the phthalimide group with reversal of configuration and subsequent detritylation to the corresponding 1-hydroxy compound, the intermediate product subsequently by a benzylation in 1-position followed by a phthalic acid cleavage in the 2-position is converted to the 1-0-benzyl-2-amino compound, which is converted into the 1-0-benzyl-2-N-acyl compound using an acylating agent containing the radical R 4 and the 1-hydroxyl group is exposed by debenzylation and converted into the desired phosphoric acid ester and phosphoric acid diester compounds by phosphorylation.
26. Verfahren nach Anspruch 22, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß die l-Hydroxy-2-0-Benzylverbindung in der 1-Position mit einem den Rest R4 enthaltenden Acylierungsmittel umgesetzt wird, durch Benzyletherspaltung die 2-Hydro- xylgruppe freigelegt wird und durch Phosphorylierung in die gewünschten Phosphorsäureester- und Phosphorsäuredi¬ ester-Verbindungen umgewandelt wird.26. The method according to claim 22, characterized in that the l-hydroxy-2-0-benzyl compound is reacted in the 1-position with an acylating agent containing the radical R 4 , the 2-hydroxyl group is exposed by benzyl ether cleavage and by phosphorylation in the desired phosphoric acid ester and phosphoric acid diester compounds are converted.
27. Verfahren nach Anspruch 22, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß die l-Hydroxy-2-O-Benzylverbindung durch Mesylierung und anschließende Reaktion mit Ammoniak in die entspre- chende 1-Aminoverbindung umgewandelt wird, nach Acylie¬ rung mit einem den Rest R4 enthaltenden Acylierungsmit¬ tel die 2-Hydroxylgruppe durch Debenzylierung frei¬ gesetzt wird und die freie 2-Hydroxylgruppe durch Phosphorylierung in die gewünschten Phosphorsäureester¬ und Phosphorsäurediester-Verbindungen überführt wird.27. The method according to claim 22, characterized in that the l-hydroxy-2-O-benzyl compound by mesylation and subsequent reaction with ammonia in the corre- The corresponding 1-amino compound is converted, after acylation with an acylating agent containing the radical R 4 , the 2-hydroxyl group is released by debenzylation and the free 2-hydroxyl group is converted into the desired phosphoric ester and phosphoric diester compounds by phosphorylation .
28. Verfahren nach Anspruch 24, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß die l-Hydroxy-2-O-Allylverbindung in die 1-Phthal- imidverbindung umgewandelt wird, nach Abspaltung der Allylschutzgruppe die freie 2-Hydroxylgruppe durch Phos¬ phorylierung in die gewünschten Phosphorsäureester- und Phosphorsäurediester-Verbindungen umgewandelt wird, wobei durch Abspaltung von Phthalsäure die 1-Aminofunk- tion freigelegt werden kann.28. The method according to claim 24, characterized in that the l-hydroxy-2-O-allyl compound is converted into the 1-phthalimide compound, after splitting off the allyl protective group, the free 2-hydroxyl group by phosphorylation into the desired phosphoric acid ester and phosphoric diester - Connections is converted, whereby the 1-amino function can be exposed by elimination of phthalic acid.
29. Verfahren nach Anspruch 24, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß die l-O-Benzyl-2-Hydroxy-Verbindung durch Phosphory¬ lierung in die gewünschten Phosphorsäureester- und Phos¬ phorsäurediester-Verbindungen umgewandelt wird, wobei durch Debenzylierung die 1-Hydroxy-Funktion freigelegt werden kann.29. The method according to claim 24, characterized in that the 10-benzyl-2-hydroxy compound is converted into the desired phosphoric ester and phosphoric diester compounds by phosphorylation, and the 1-hydroxy function can be exposed by debenzylation .
30. Pharmazeutische Zubereitung, enthaltend mindestens eine Phosphoverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 21 oder hergestellt nach einem Verfahren der Ansprüche 22 bis30. Pharmaceutical preparation containing at least one phospho compound according to one of claims 1 to 21 or produced by a method of claims 22 to
29 als Wirkstoff. 29 as an active ingredient.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2065855B1 (en) * 1993-05-31 1995-09-01 Menarini Lab PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF NEW DEOXIAZAPHOSPHOLIPIDIC DERIVATIVES WITH INHIBITING ACTION OF THE PHOSFOLIPASE A2, NEW DERIVATIVES DEOXIAZAPHOSPHOLIPIDICES OBTAINED AND USE OF THEM.
WO2006024675A1 (en) * 2004-09-03 2006-03-09 Forschungszentrum Karlsruhe Gmbh Use of alkylphospholipids for the treatment of solid tumours
EP1745788A1 (en) 2005-07-22 2007-01-24 KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH Acyglycerophospholipids for treating cancer and cachexia
JP2015120665A (en) * 2013-12-24 2015-07-02 日油株式会社 Alkynyl group-containing phosphorylcholine compound, method of producing the same, and azide group-containing compound modifier
EP3895709A1 (en) 2020-04-17 2021-10-20 Andreas Hettich GmbH & Co. KG Phospholipids and phospholipid metabolites for the treatment of viral and bacterial lung inflammation and sepsis

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4562179A (en) * 1982-04-19 1985-12-31 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Phospholipid derivatives, and pharmaceutical composition of the same
US4585762A (en) * 1982-07-30 1986-04-29 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Phospholipid derivatives, processes for use thereof and pharmaceutical composition of the same
US4640913A (en) * 1983-01-10 1987-02-03 American Cyanamid Company Phosphocholine derivatives having antihypertensive action
DE3304870A1 (en) * 1983-02-12 1984-08-16 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Novel phospholipids, processes for their preparation and medicaments containing these compounds
DE3307925A1 (en) * 1983-03-05 1984-09-06 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln NEW 0-ACYL-ALKANDIOL PHOSPHOLIPIDS, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND PHARMACEUTICAL PREPARATIONS CONTAINING THEM
US4659859A (en) * 1984-07-02 1987-04-21 Eli Lilly And Company 2-alkoxy-1-alkoxy phosphoryl dichlorides
US5144045A (en) * 1990-11-13 1992-09-01 American Cyanamid Company Phosphocholine derivative inhibitors of phospholipase A2

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
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