[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

EA047073B1 - Соединения пиразола и имидазола для ингибирования il-17 и ror-гамма - Google Patents

Соединения пиразола и имидазола для ингибирования il-17 и ror-гамма Download PDF

Info

Publication number
EA047073B1
EA047073B1 EA202190033 EA047073B1 EA 047073 B1 EA047073 B1 EA 047073B1 EA 202190033 EA202190033 EA 202190033 EA 047073 B1 EA047073 B1 EA 047073B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
cycloalkyl
heteroaryl
heterocycloalkyl
aryl
Prior art date
Application number
EA202190033
Other languages
English (en)
Inventor
Синь Цзян
Мелеэн Висник
Кристофер Ф. Бендер
Гари Болтон
Брэдли Капрат
Читасэ Ли
Брайан Корнберг
Патрик О'Брайан
Марта Р. Хотема
Original Assignee
Рита Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Рита Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Рита Фармасьютикалз, Инк.
Publication of EA047073B1 publication Critical patent/EA047073B1/ru

Links

Description

Настоящее изобретение относится в целом к областям биологии и медицины. Более конкретно, оно относится к соединениям, композициям и способам лечения и предотвращения заболеваний, таких как заболевания, связанные с RAR-ассоциированным орфанным рецептором γ (RORy) и избыточной выработкой IL-17.
Описание известного уровня техники
Воспалительные заболевания, в частности, аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, остеоартрит, псориаз и рассеянный склероз, часто имеют тяжелые и долгосрочные нежелательные эффекты на физическое самочувствие и качество жизни. У многих пациентов эти заболевания обуславливают существенную недееспособность, а в некоторых случаях (например, волчанка и рассеянный склероз) они могут представлять угрозу для жизни. Последние достижения в разработке вариантов терапии, такие как разработка терапевтических антител к фактору некроза опухоли (TNF), улучшили результаты и качество жизни для многих пациентов. Однако у существенного количества пациентов не наблюдается достаточное облегчение симптомов при применении таких вариантов терапии или они не могут их переносить. Даже у пациентов, восприимчивых к терапии, могут наблюдаться существенные побочные эффекты, которые могут представлять угрозу для жизни вследствие подавления иммунитета или других осложнений.
Недавние исследования хронического воспаления и аутоиммунности выявили важную роль субпопуляции Т-лимфоцитов, известных как ТМ7-клетки. Эти клетки вырабатывают воспалительный цитокин интерлейкин 17 (IL-17). Сообщалось о повышении уровней IL-17 при различных аутоиммунных заболеваниях, включая рассеянный склероз, ревматоидный артрит, псориаз, воспалительное заболевание кишечника, витилиго, синдром Шегрена и анкилозирующий спондилит (Miossec and Kolls, 2012; Yang et al., 2014; Gaffen et al., 2014). Имеющиеся данные позволяют предположить, что IL-17 также играет существенную роль в патологии васкулита, атеросклероза и воспалительных заболеваний легких, таких как муковисцидоз и хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). IL-17 также участвует в патофизиологии эпилепсии и нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и БАС. Повышенные уровни IL-17 или ТМ7-клеток были зарегистрированы у пациентов с психиатрическими и психоневрологическими состояниями, включая шизофрению, обсессивно-компульсивное расстройство, биполярное расстройство, посттравматическое стрессовое расстройство, глубокую депрессию и аутизм. Повышение уровней IL-17 было связано с другими патологическим состояниями, связанными с нарушением регуляции воспалительной сигнализации, включая ожирение, резистентность к инсулину и жировую болезнь печени.
Хотя ТЫ7-клетки не являются единственным источником IL-17, сообщалось, что эти клетки являются основным источником этого цитокина в тканях, поврежденных вследствие аутоиммунного заболевания, таких как артритические суставы. Сообщалось, что повышенные уровни IL-17 обуславливают деградацию тканей, например, за счет стимуляции выработки матриксных металлопротеиназ, что является источником повреждения соединительной ткани и хрящей, и повышения экспрессии лиганда рецепторного активатора NF-кВ (RANKL), который стимулирует активность остеокластов и обуславливает повреждение костей.
Нарушение активности ТЫ7-клеток, включая повышение выработки IL-17, также вовлечено в патологии, связанные с некоторыми вирусными и паразитарными инфекциями. Например, IL-17 участвует в развитии тяжелого нейровоспаления, связанного с инфекцией Toxoplasma gondii, и повышенной тяжестью поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В этих и других случаях IL-17, по-видимому, играет роль в сохранении инфекции, стимуляции чрезмерного воспалительного ответа и ингибировании выведения инфекционного агента (Waite and Skokos, 2011). Соответственно, способы лечения, которые предотвращают или ингибируют избыточную выработку IL-17 или иным образом снижают циркулирующие уровни IL-17, имели бы существенный потенциал при широком спектре заболеваний или расстройств, в том числе включающих воспалительные и аутоиммунные компоненты.
Дифференцировка ТЫ7-клеток и выработка ими IL-17 в значительной степени регулируются ретиноидным орфанным рецептором ROR/t, членом семейства ядерных гормональных рецепторов. Экспрессия RORYt типична для всех типов ТЫ7-клеток и играет существенную роль в их дифференцировке, а также их активности. ROR/ также регулирует выработку IL-17 в клетках других типов, включая гаммадельта Т-клетки, врожденные лимфоидные клетки и клетки-индукторы лимфоидной ткани (Bronner et al., 2017). Было показано, что ингибирование активности ROR/t приводит к снижению экспрессии IL-17. Таким образом, идентификация низкомолекулярных ингибиторов ROR/t представляет значительный интерес.
- 1 047073
Сущность изобретения
В настоящем изобретении предложены новые соединения, включая производные пиразола и имидазола, с противовоспалительными и/или антиоксидантными свойствами, их фармацевтические композиции, способы их производства и способы их применения. В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
где n равен 1;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra, где
Ra представляет собой амино;
R2 представляет собой водород или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-2), алкенил(С2-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
R3 представляет собой алкил(С1-12), арил(С6-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил^-и), гетероарил(О-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(Сб-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-2)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равны 1 или 2; R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(о-2), дициклоалкиламино(С6-12), ал кил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1_12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-8), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), диариламино(С12);
где пунктирная линия означает наличие или отсутствие двойной связи;
где признак арил не исключает наличия одной или более необязательно диалкиламинО(С2-12), ариламинО(С6-12) или замещенных алкильныХ(С1-12) групп, присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу;
где признак гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с атомом ароматического углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и при этом гетероарильная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы, где признак гетероарил не исключает наличия одной или более необязательно замещенных алкильныХ(С1-12) или арильныХ(С6-12) групп, присоединенных к одному или более кольцевым атомам;
где признак гетероаралкил относится к одовалентной группе -алкандиилгетероарил, в которой термин гетероарил используется в соответствии с приведенным определением;
где признак гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или азота образуют часть одной или более неароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех
- 2 047073 до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом гетероциклоалкильная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы, где признак гетероциклоалкил не исключает наличия одной или более необязательно замещенных алкильных(С1-12) групп, присоединенных к одному или более кольцевым атомам;
где признак гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода, двумя атомами ароматического азота или одним атомом ароматического углерода и одним атомом ароматического азота в качестве двух точек присоединения, указанные атомы образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых содержит от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
где признак гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или более кольцевых структур, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы;
где признак замещенный относится к группе, в которой один или более атомов водорода были независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -OCH3, -OCH2CH3, -NHCH3, NHCH2CH3, -N(CH3>2, -C(O)NH2, -ОС(О)СНз или -NHC(O)CH3;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
R2 R2' где n равен 1;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra, где Ra представляет собой амино;
R2 представляет собой водород или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), алкенил(С2-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
R3 представляет собой алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(с1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-12), гетероарил(О-12), гетероаралкил^-^), -арендиил(сб-12)алкил(сы2), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равен 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-2), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоал кил(с1-12), арил(сб-18), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18), -арендиил(сб-18)гетероциклоалкил(сы2), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)-алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-8), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
- 3 047073
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
где
R1 представляет собой циано;
R2 представляет собой водород версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), алкенил(С2-12) или замещенную
R3 представляет собой алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арило-12), аралкил^-^), гетероарил(О-12), гетероаралкил^-п), -арендиил^б-^алкил^п), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m равен 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоал кил(с1-12), арил(сб-18), -арендиил(сб-12)алкил(с1-12), аралкил^-^, -арендиил^-^гетероциклоалкил^-п), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, R6 не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12); или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
где
R1 представляет собой циано;
R2 представляет собой водород, алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(с1-12), арил(сб-12), аралкил^-^), гетероарил(О-12), гетероаралкил(С7-12), -арендиил(сб-12)алкил(О-2), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равны 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), ди- 4 047073 циклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С2), алкил(С1-12), циклоалкил(С3- 1 2), -алкандииЛ(С 1 - 1 2)циклоалкил(С3-12), -алкандииЛ(С 1 - 1 8)аралкоксИ(С6- 1 8), гетероциклоалкиЛ(С 1-12), ариЛ(С6-18), -арендииЛ(С6-12)алкиЛ(С1-12), аралкиЛ(С7-18), -арендииЛ(С6-18)ГетероциклоалкиЛ(С1-12), гетероиЛ(С1-18), -гетероарендииЛ(С1-12)алкиЛ(С1-12), гетероаралкиЛ(С2-18), ациЛ(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламин(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламинО(СЗ-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12); или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как R4 /Rs
R2 R2' ζνχ где
R2 представляет собой водород, алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-2), гетероарил(С1-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил^-^циклоалкил^-п), -гетероарендиил(С1-2)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил^-п), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
О. Р
V где каждый l и m независимо равны 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-2), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино^-п), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(о -12), -алкандиил^ 1 - 1 2)циклоалкил(С3 -12), -алкандиил^ 1 - 1 8)аралкокси(С7- 1 8), гетероциклоалкил(О-12), арил^6-18), -арендиил(C6-12)алкил(c1-12), аралкил^.^),
-арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-2) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда Кб не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-2), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
R2 R2 (VI), где
R2 представляет собой водород, алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-12), гетероарил(С1-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С<12)гетероарил(С<12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
- 5 047073
О /° V где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкиламинО(С1-12), диалкиламинО(С2-12), циклоалкиламинО(С3-12), дициклоалкиламино^б.^), алкил(циклоалкил)аминО(С4-12), ариламино(С6-12), диариламинО(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(сб-18), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18),
-арендиил(С6-18)Гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-2), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как щ\ /*5
R2 R2' (VII), где
R2 представляет собой водород, алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(сб-12), аралкил(С7-12), гетероарил^-^), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы ¥
,(γ).
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкил(С1-12), циклоалкил(С1-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп;
или ее фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
R4 /Rs Ν=·=χι = 11 2R6 1 (VIII), где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(сб-12), аралкил(С7-12), гетероарилсь^), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), -арендиил(сб-12)арил(сб-12), -арендиил(сб-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(сб-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(сб-12)циклоалкил(сз-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(сб-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
- 6 047073 ¥
,(γ4 где каждый l и m равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламинО(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)аминО(С4-12), ариламино(С6-12), диариламинО(С12), алкил^.^), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)Циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(0-12), арил(сб-18), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18),
-арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
или ее фармацевтически приемлемая соль.
В других вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
R4 /Rs
Ξ // 1 (IX), где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(сб-12), аралкил(С7-12), гетероарил^-^), гетероаралкил(С7-12), -арендиил^б-^алкилсыз), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)Циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)Циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
О /°
V ,(О)т где каждый l и m независимо равен 1 или 2; и
R6 представляет собой алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп;
или ее фармацевтически приемлемая соль.
В других вариантах осуществления соединения дополнительно определены как R4 Л5 1 (X), где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-12), гетероарил(С1-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
- 7 047073
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил^ы^циклоалкил^з-^), -алкандиил^.^аралкокси^лз), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), —арендиил(С6-12)алкил(С1—12), аралкил(С7-18), -арендиил(С6-18)-гетероциклоалкил(С1 -12), гетероарил(С1 -18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1 -12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или ее фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкил(С<12) или замещенный алкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкил(С<12), такой как метил.
В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой циано. В других вариантах осуществления R1 представляет собой -C(O)Ra. В некоторых вариантах осуществления Ra представляет собой алкокси(С<6), такой как метокси. В других вариантах осуществления Ra представляет собой амино.
В некоторых вариантах осуществления R2' представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой водород. В других вариантах осуществления R2' и R2, оба, представляют собой водород. В других вариантах осуществления R2 представляет собой алкил(С<12) или замещенный алкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой алкил(С<12), такой как метил.
В некоторых вариантах осуществления R4 отсутствует. В других вариантах осуществления R4 представляет собой циклоалкил(С<12) или замещенный циклоалкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой циклоалкил(С<12), такой как циклогексил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой гетероциклоалкил(С<12) или замещенный гетероциклоалкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероциклоалкил(С<12), такой как тетрагидро-2Н-пиран-4ил или 1,1-диоксидотетрагидротиофен-3-ил.
В других вариантах осуществления R4 представляет собой где l и m, каждый, представляют собой 1 или 2.
В других вариантах осуществления R4 представляет собой арил(С<18) или замещенный арил(С<18). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой арил(С<18), такой как фенил, о-толил, п-толил, [1,1'-бифенил]-4-ил, 4-изопропилфенил, нафтален-1-ил, 4'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил или 2'-метил-[1,1'бифенил]-4-ил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой замещенный арил(С<18), такой как 4-(трифторметил)фенил, 4-цианофенил, 2-фторфенил, 4-фторфенил, 4-хлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 4-метоксифенил, 4-(трифторметокси)фенил, 4-карбоксифенил, 4'-метокси-[1,1'-бифенил]-4-ил, 4'(диметиламино)-[1,1 '-бифенил] -4-ил, 2'-фтор-[1,1 '-бифенил] -4-ил, 3'-фтор-[1,1'-бифенил] -4-ил, 2'(гидроксиметил)-[1,1 '-бифенил] -4-ил, 3'-(гидроксиметил)-[1,1 '-бифенил] -4-ил, 4'-(гидроксиметил)-[1,1'бифенил]-4-ил или 5-(3-(гидроксиметил)фенил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой аралкил(С<18) или замещенный аралкил(С<18). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой аралкил(С<18), такой как бензил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой -арендиил(С<12)гетероциклоалкил(С<12) или замещенный -арендиил(С<12)гетероциклоалкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой -арендиил(С<12)гетероциклоалкил(С<12), такой как 4морфолинофенил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой гетероарил(С<18) или замещенный гетероарил(С<18). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероарил(С<18), такой как пиридин-4-ил, хинолин-4-ил, 5-метилпиридин-2-ил, 6-метилпиридин-3-ил, (пиридин-3ил)фенил, (пиридин-4-ил)фенил, 4-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)фенил, 4-(пиримидин-4-ил)фенил, 4(пиримидин-5-ил)фенил, 4-(пиридин-3-ил)фенил, 4-(пиридин-4-ил)фенил, 5-фенилпиридин-2-ил, [3,3'бипиридин]-6-ил, 5-циклопропилпиридин-2-ил, 6-фенилпиридин-3-ил, 4-(6-метилпиридазин-4-ил)фенил, 5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил, 3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил, 4-метил-5-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил, 1фенилпиперидин-4-ил, 4-фенилоксазол-2-ил, 4-(6-метилпиридазин-4-ил)фенил, 4-(5-метил-1,2,4оксадиазол-3-ил)фенил, 4-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)фенил, 4-(1,2,4-оксадиазол-3-ил)фенил, 4(пиридазин-3-ил)фенил, 4-(5-метилпиридазин-3-ил)фенил, 1-метил-1Н-бензоЩимидазол-2-ил или бензоЩтиазол-2-ил. В других вариантах осуществления R4 представляет собой замещенный гетероарил(С<18), такой как 2-фтор-4-(пиридин-3-ил)фенил, 5-(трифторметил)пиридин-2-ил, 5-(3фторфенил)пиридин-2-ил, 5-(4-фторфенил)пиридин-2-ил, 4-(2-(гидроксиметил)пиридин-4-ил)фенил, 4(2-(фторметил)пиридин-4-ил)фенил, 5-(трифторметил)бензоЩоксазол-2-ил, 6-хлорбензоЩтиазол-2-ил
- 8 047073 или 4-(5-фторпиридин-3-ил)фенил.
В некоторых вариантах осуществления R5 отсутствует. В других вариантах осуществления R5 представляет собой циклоалкил,·,: |2, или замещенный циклоалкил,: |2,. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой циклоалкил: 12.,· такой как циклогексил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой гетероциклоалкилC 12, или замещенный гетероциклоалкил(С<12). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой гетероциклоалкилC 12,. такой как тетрагидро-2Н-пиран-4ил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой арилс 18, или замещенный арил(С<18). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой арилс· 18,. такой как фенил, о-толил, п-толил, [1,1'-бифенил]-4-ил, 4-изопропилфенил, нафтален-1-ил, [1,1'-бифенил]-3-ил или 3-изопропилфенил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой замещенный арил^^, такой как 4-хлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 4-метоксифенил, 4-(трифторметокси)фенил, 3-бромфенил, 3-хлорфенил, 4(диметиламино,фенил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой аралкил^^ или замещенный аралкилов}. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой аралкил^^, такой как бензил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой -арендиилс 12,гетероциклоалкилс 12, или замещенный -арендиил-C 12,гетероциклоалкил(: 12,. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой -арендиил,: 12,-гетероциклоалкил·,: 12,, такой как 3морфолинофенил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой гетероарилс^ или замещенный гетероарил^щ. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой гетероарил^х^,, такой как пиридин-4-ил, хинолин-4-ил, хинолин-3-ил, хинолин-5-ил, 3-(пиридин-4-ил)фенил, 3(пиримидин-5-ил,фенил, 2-изопропилпиримидин-5-ил, 6-циклопропилпиридин-3-ил, 3-(1-метил-1НпиразолЧ-и.рфенил, 1-метил-1Н-пиразол-4-ил, 3-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)фенил, 3-(1-метил-1Нпиразол^-и.рфенил или 2-циклопропилпиридин-4-ил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой замещенный гетероарилс^, такой как 2-(трифторметил)пиридин-4-ил или 3-(5фторпиридин-3-ил,фенил. В других вариантах осуществления R5 представляет собой -гетероарендиил:: 12,гетероциклоалкил·:: 12, или замещенный -гетероарендиил:: 12,гетероциклоалкил:: 12,. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой -гетероарендиилс^гетероциклоалкил^^,, такой как 2-морфолинопиридин-4-ил.
В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой амино. В других вариантах осуществления R6 представляет собой алкиламинO(C<!2) или замещенный алкиламино^^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой алкиламинO(C<!2), такой как метиламино. В других вариантах осуществления R6 представляет собой циклоалкиламинO(C<!2) или замещенный циклоалкиламино,: 12,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой циклоалкиламинO(C<!2), такой как циклобутиламино. В других вариантах осуществления R6 представляет собой алкил(циклоалкил)аминO(C<!2) или замещенный алкил(циклоалкил)аминO(C<!2). В других вариантах осуществления R6 представляет собой алкил(циклоалкил)аминO(C<!2), такой как метил(циклобутил)амино. В других вариантах осуществления R6 представляет собой ариламинO(C<!2) или замещенный ариламинO(C<!2). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой ариламинO(C<!2), такой как фениламино. В других вариантах осуществления R6 представляет собой алкил^^ или замещенный алкил^^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой алкил^с^,, такой как метил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный алкиле^,, такой как 2-гидроксиэтил или 2-метоксиэтил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой ацил^С^, или замещенный ацил^С^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой ацил^С^,, такой как -С(О,СН3. В других вариантах осуществления R6 представляет собой циклоалкилс^, или замещенный циклоалкилс^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой циклоалкилс^,, такой как циклопропил или циклогексил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой -алкандиилс^циклоалкилс^, или замещенный -алкандиилс^циклоалкил^^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой -алкандиил(C<!8,-циклоалкил(C<!8,, такой как циклобутилметил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой арилов, или замещенный арилов,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой арилов,, такой как фенил, о-толил, п-толил или 3-изопропилфенил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный арил^с^, такой как 2-фторфенил, 4-фторфенил, 4(гидроксиметил,фенил, 3-фторфенил или 4-(фторметил,фенил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой аралкил^^, или замещенный аралкил: 1в,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой аралкил: 1в.,· такой как бензил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный аралкил^^,, такой как 2-фторбензил, 4-фторбензил или 4-хлорбензил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой -арендиил,: lв.,гетероциклоалкилC 12, или замещенный -арендиилс^гетероциклоалкилс^,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой -арендиилс^гетероциклоалкилс^,, такой как 4-морфолинофенил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой гетероарил: 1в, или замещенный гетероарил,: 1в,. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой гетероарилс^,, такой как пиридин-2-ил, пиридин-3-ил, пиридин-4-ил, 2- 9 047073 метил-2Н-тетразол-5-ил, 1-метил-1Н-пиразол-4-ил, пиримидин-4-ил, пиримидин-5-ил, 3-метил-1,2,4оксадиазол-5-ил)фенил, пиридин-2-илметил, 3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил или 5-метил-1,2,4оксадиазол-3-ил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой гетероаралкил(С<18) или замещенный гетероаралкил(С<18). В других вариантах осуществления R6 представляет собой гетероаралкил^^), такой как 2-пиридинилметил или 4-пиридинилметил. В других вариантах осуществления R6 представляет собой -алкандиил^^аралкокси^^) или замещенный
-алкандиил^^аралкокси^^). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой -алкандиил(С<18)аралкокси(С<18), такой как 2-(бензилокси)этил.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определены как
- 10 047073
- 11 047073
- 12 047073
- 13 047073
- 14 047073
- 15 047073
- 16 047073
- 17 047073
- 18 047073
или фармацевтически приемлемая соль любой из вышеприведенных формул. В другом аспекте в настоящем изобретении предложены фармацевтические композиции, содержащие:
(A) соединение, описанное в данном документе или приведенное выше; и (B) вспомогательное вещество.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для введения пе
- 19 047073 рорально, интраадипозально, внутриартериально, внутрисуставно, внутричерепно, внутрикожно, внутриочагово, внутримышечно, интраназально, внутриглазно, внутриперикардиально, внутрибрюшинно, внутриплеврально, внутрипростатно, интраректально, интратекально, интратрахеально, интратуморально, внутрипуповинно, интравагинально, внутривенно, интравезикулярно, интравитреально, липосомально, локально, мукозально, парентерально, ректально, субконъюнктивально, подкожно, сублингвально, местно, трансбуккально, трансдермально, вагинально, в кремах, в липидных композициях, посредством катетера, посредством лаважа, посредством непрерывной инфузии, посредством инфузии, посредством ингаляции, посредством инъекции, посредством местной доставки или посредством локализованной перфузии. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для перорального введения. В других вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для введения посредством инъекции. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для внутриартериального введения, внутримышечного введения, внутрибрюшинного введения или внутривенного введения. В других вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для местного введения. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для местного введения в кожу или в глаз. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена в виде единичной дозы.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложены способы лечения или предотвращения аутоиммунного или воспалительного заболевания или расстройства, связанного с повышенной выработкой цитокина IL-17 у нуждающегося в этом пациента, включающие введение пациенту фармацевтически эффективного количества соединения или композиции, описанных в данном документе. В некоторых вариантах осуществления пациент представляет собой млекопитающее, например человека. В некоторых вариантах осуществления заболевание или расстройство связано с нарушением регуляции ангиогенеза.
В некоторых вариантах осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз, рассеянный склероз, склеродермию, ревматоидный артрит, волчанку, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, синдром Шегрена, витилиго, увеит, синдром сухого глаза, системный склероз, сахарный диабет 1 типа, миастению гравис и воспалительное заболевание кишечника.
В некоторых вариантах осуществления способ включает введение соединения один раз. В других вариантах осуществления способ включает введение соединения два или более раз.
Другие цели, признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидны из нижеприведенного подробного описания. Однако следует понимать, что подробное описание и конкретные примеры, хотя и указывают конкретные варианты осуществления изобретения, приведены только в качестве иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации в пределах сущности и объема изобретения станут очевидными для специалистов в данной области техники из этого подробного описания. Следует отметить, что даже если конкретное соединение приписано одной конкретной универсальной формуле, это не означает, что оно не может также принадлежать другой универсальной формуле.
Описание иллюстративных вариантов осуществления
В данном документе описаны новые соединения и композиции, которые можно применять для ингибирования активности ядерного рецептора RORy и/или IL-17 и, таким образом, они применимы при лечении широкого спектра различных заболеваний, таких как аутоиммунное заболевание, метаболические заболевания, онкологические заболевания и инфекции. В некоторых вариантах осуществления эти соединения применяют для модуляции экспрессии одного или более последующих соединений, таких как интерлейкин-17 (IL-17).
Соединения и способы синтеза
Соединения по настоящему изобретению (также называемые соединениями по настоящему изобретению) приведены, например, выше, в разделе Сущность изобретения и в формуле изобретения ниже. Их можно получить, используя способы синтеза, описанные в разделе Примеры. Эти способы можно дополнительно модифицировать и оптимизировать, используя принципы и методики органической химии, применяемые специалистами в данной области техники. Такие принципы и методики изложены, например, в Smith, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, (2013), которая включена в данный документ посредством ссылки. Кроме того, способы синтеза можно дополнительно модифицировать и оптимизировать для препаративного, пилотного или крупномасштабного получения, в виде партий или непрерывного, используя принципы и методики химии технологических процессов, применяемые специалистами в данной области техники. Такие принципы и методики изложены, например, в Anderson, Practical Process Research & Development - A Guide for Organic Chemists (2012), которая включена в данный документ посредством ссылки.
Все соединения по настоящему изобретению можно, в некоторых вариантах осуществления, применять для предотвращения и лечения одного или более заболеваний или расстройств, обсуждаемых в данном документе или другом месте. В некоторых вариантах осуществления одно или более соединений, охарактеризованных или приведенных в качестве примеров в данном документе в виде промежуточного соединения, метаболита и/или пролекарственного препарата, можно, в то же время, применять для предотвращения и лечения одного или более заболеваний или нарушений. Следовательно, если явно не указано иное, все соединения по настоящему изобретению считаются активными соединениями и тера
- 20 047073 певтическими соединениями, предусмотренными для применения в качестве активных фармацевтических ингредиентов (АФИ). Фактическую пригодность для применения человеком или в ветеринарной сфере, как правило, определяют, используя комбинацию протоколов клинических испытаний и регуляторных процедур, например, регламентированных Управлением по контролю за продуктами питания и лекарствами (FDA). В Соединенных Штатах FDA отвечает за защиту общественного здоровья, обеспечивая безопасность, эффективность, качество и безопасность лекарств, вакцин и других биологических продуктов, используемых в медицине или ветеринарии, а также медицинских устройств.
В некоторых вариантах осуществления преимуществом соединений по настоящему изобретению является то, что они могут быть более эффективными, менее токсичными, более долгодействующими, более сильнодействующими, вызывающими меньше побочных эффектов, могут легче всасываться, быть более метаболически стабильными, более липофильными, более гидрофильными и/или иметь лучший фармакокинетический профиль (например, более высокую пероральную биодоступность и/или более низкий клиренс), и/или иметь другие полезные фармакологические, физические или химические свойства по сравнению с соединениями, известными на данном уровне техники, при применении в связи с приведенными в данном документе показаниями или иным образом.
Соединения по настоящему изобретению могут содержать один или более асимметрично замещенных атомов углерода или азота и могут быть выделены в оптически активной или рацемической форме. Таким образом, подразумеваются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы, эпимерные формы и все геометрические изомерные формы химической формулы, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения могут находиться в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, диастереомерных смесей и отдельных диастереомеров. В некоторых вариантах осуществления получают один диастереомер. Хиральные центры соединений по настоящему изобретению могут иметь S- или R-конфигурацию. В некоторых вариантах осуществления представленные соединения могут содержать два или более атомов, которые имеют определенную стереохимическую ориентацию.
Химические формулы, используемые для представления соединений по настоящему изобретению, обычно показывают только один из возможных нескольких разных таутомеров. Например, известно, что многие типы кетоновых групп существуют в равновесии с соответствующими енольными группами. Аналогично, многие типы иминных групп существуют в равновесии с енаминовыми группами. Независимо от того, какой таутомер приведен для заданного соединения, и независимо от того, какой из них является наиболее распространенным, подразумеваются все таутомеры заданной химической формулы.
Кроме того, предполагается, что атомы, входящие в состав соединений по настоящему изобретению, включают все изотопные формы таких атомов. В контексте данного документа изотопы включают те атомы, которые имеют одинаковое атомное число, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают 13С и 14С.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению действуют как пролекарственные препараты или могут быть дериватизированы, чтобы действовать как пролекарственные препараты. Поскольку известно, что пролекарственные препараты усиливают многочисленные необходимые качества фармацевтических препаратов (например, растворимость, биодоступность, производство и т.д.), соединения, применяемые в некоторых способах по изобретению, при необходимости можно доставлять в форме пролекарственных препаратов. Таким образом, изобретение предусматривает пролекарственные препараты соединений по настоящему изобретению, а также способы доставки пролекарственных препаратов. Пролекарственные препараты соединений, применяемых в изобретении, можно получать путем модификации функциональных групп, присутствующих в соединении, таким образом, чтобы модификации расщеплялись, либо при рутинной обработке, либо in vivo, до исходного соединения. Соответственно, пролекарственные препараты включают, например, соединения, описанные в данном документе, в которых гидрокси-, амино- или карбоксигруппа связаны с любой группой, которая при введении пролекарственного препарата пациенту расщепляется с образованием гидрокси-, амино- или карбоновой кислоты соответственно.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению существуют в солевой или несолевой форме. В случае солевой(ых) формы(форм), в некоторых вариантах осуществления конкретный анион или катион, образующий часть любой солевой формы соединения, предложенного в данном документе, не является критическим при условии, что соль в целом является фармакологически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способы их получения и применения представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002), которая включена в данный документ посредством ссылки.
Следует понимать, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они вступают в реакцию или из которых они осаждаются или кристаллизуются. Такие комплексы известны как сольваты. Когда растворителем является вода, комплекс известен как гидрат. Также следует понимать, что многие органические соединения могут существовать в более чем одной твердой форме, включая кристаллические и аморфные формы. Все твердые формы соединений,
- 21 047073 предложенных в данном документе, включая любые их сольваты, входят в объем настоящего изобретения.
Заболевания, связанные с воспалительным цитокином IL-17
Различные данные указывают на то, что воспалительный цитокин IL-17 участвует в патогенезе многих аутоиммунных заболеваний, включая ревматоидный артрит, псориаз и псориатический артрит, воспалительное заболевание кишечника (включая, помимо прочего, болезнь Крона), рассеянный склероз, аутоиммунный нефрит, аутоиммунный увеит, диабет 1 типа и анкилозирующий спондилит. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения одного или более из этих заболеваний или расстройств. Тип Т-лимфоцитов, известный как ^П-клетки, является основным источником IL-17. Семейство IL-17 состоит из нескольких членов. Первый идентифицированный член, IL-17A, обычно называют IL-17. IL-17 состоит из двух мономеров, связанных дисульфидными связями с образованием гомодимера (Miossec and Kolls, 2012). Помимо IL-17A, другим основным членом семейства является IL-17F. Некоторые данные свидетельствуют о том, что IL-17F и IL-17A, хотя они имеют много общих эффектов, могут иметь разные эффекты при определенных состояниях, таких как воспаление легких. Цитокины IL-17 связываются с рецепторами IL-17 (IL-17R), расположенными в мембране клеток определенных типов. Хотя существует несколько подтипов рецептора IL-17, комплекс IL-17RA/IL-17RC необходим для активности IL-17A и IL-17F. IL17RA обладает необычным свойством передачи сигналов через путь, который включает адаптерный белок (АСТ1), а не путь Janus-киназы/сигнального трансдуктора и активатора транскрипции (JAK/STAT), используемый большинством рецепторов интерлейкина. Связывание IL-17A с IL-17RA активирует путь провоспалительного ядерного фактора-каппа В (NF-кВ) и провоспалительные элементы пути митогенактивируемой протеинкиназы (MAPK), такие как N-концевая киназа JUN (JNK), р38 и внеклеточная сигнальная киназа (ERK). Активность IL-17 стимулирует секрецию IL-6 и IL-8 из мезенхимальных клеток и приводит к лихорадке наряду с накоплением нейтрофилов в крови и тканях. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно использовать для ингибирования секреции IL-6 и IL-8 из мезенхимальных клеток. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения или ингибирования лихорадки у пациента. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения накопления нейтрофилов в крови или ткани пациента.
Помимо своего вклада в острое воспаление IL-17 также способствует хроническому воспалению (Miossec and Kolls, 2012). В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения или лечения хронического воспаления. IL-17 стимулирует выработку матриксных металлопротеиназ (ММР), которые, помимо прочего, могут разрушать хрящи в суставах. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения или лечения деградации хрящей пациента. IL-17 также увеличивает экспрессию активатора рецептора лиганда NF-кВ (RANKL) В остеобластах, что приводит к дифференцировке и активации остеокластов и деградации костей. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения или лечения деградации костей пациента. В зависимости от целевой клетки, которая подвергается воздействию, IL-17 может стимулировать выработку IL-6, IL-8, IL-1, фактора некроза опухоли (TNF), ММР, оксида азота или нескольких других белков, вовлеченных в воспалительные состояния (например, тканевого фактора, CCL20, G-CSF и GM-CSF). В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для ингибирования выработки IL-6, IL-8, IL-1, фактора некроза опухоли (TNF), ММР, оксида азота или нескольких других белков, которые вовлечены в воспалительные состояния (например, тканевого фактора, CCL20, G-CSF и GM-CSF).
Хотя IL-17 играет роль в иммунном ответе на инвазивные патогены, чрезмерная активность IL-17 обуславливает патологии, связанные с чрезмерным иммунным ответом на инфекцию. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения или лечения чрезмерного иммунного ответа на инфекцию. Например, IL-17 имеет отношение к тяжелому нейровоспалению, связанному с инфекцией Toxoplasma gondii, и повышенной тяжести поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения нейровоспаления, например нейровоспаления, связанного с инфекцией Toxoplasma gondii. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или профилактики поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В этих и других случаях IL-17, по-видимому, играет роль в сохранении инфекции, стимуляции чрезмерного воспалительного ответа и ингибировании клиренса инфекционного агента (Waite and Skokos, 2012). В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для предотвращения чрезмерного воспалительного ответа и/или стимуляции клиренса инфекционного агента.
Препараты, нацеленные на IL-17, прошли клинические испытания в отношении широкого спектра
- 22 047073 воспалительных состояний, включая псориаз, ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, увеит, болезнь Бехчета, псориатический артрит, болезнь Крона, ревматическую полимиалгию, синдром сухого глаза, рассеянный склероз, реакцию трансплантат против хозяина и бронхиальную астму. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения одного или более из этих заболеваний или расстройств. Доклинические данные также указывают на то, что IL-17 вовлечен в патологию диабета 1 типа, а у пациентов с расстройством Стилла с началом во взрослом возрасте, другим аутоиммунным заболеванием, повышено количество ^П-клеток. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения сахарного диабета 1 типа. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения болезни Стилла с началом во взрослом возрасте. Активность ^П-клеток была связана с развитием болезни трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток (например, костного мозга) (Fujiwara, et al., 2014). В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения болезни трансплантат против хозяина, например, после трансплантации аллогенных стволовых клеток (например, костного мозга). Учитывая большое количество фактических данных на сегодняшний день, вполне вероятно, что методы лечения, снижающие экспрессию IL-17 или иным образом снижающие его уровни в циркуляции или целевых тканях (например, моноклональные антитела к IL17), могут найти широкое применение при лечении аутоиммунных заболеваний и других воспалительных процессов. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для снижения экспрессии IL-17 или его уровней в циркуляции или целевых тканях (например, моноклональные антитела к IL-17). В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения аутоиммунных заболеваний или других воспалительных процессов.
Об избыточной выработке IL-17 или повышенном количестве ^П-клеток сообщалось в исследованиях на пациентах или на животных моделях ряда состояний, включая аутоиммунные заболевания, неврологические расстройства, сердечно-сосудистые заболевания, онкологические заболевания, психические и психоневрологические расстройства, острые и хронические воспалительные процессы, хронические болевые синдромы, отторжение органа или болезнь трансплантат против хозяина, или бронхиальную астму и другие аллергические состояния. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для лечения или предотвращения одного или более из этих заболеваний или расстройств.
Дифференцировка ^П-клеток и выработка ими IL-17 в значительной степени регулируются ретиноидным орфанным рецептором RORYt, членом семейства ядерных гормональных рецепторов. Экспрессия RORYt является общей для всех типов ^П-клеток. RORy также регулирует выработку IL-17 в клетках других типов, включая γδ Т -клетки, врожденные лимфоидные клетки и клетки-индукторы лимфоидной ткани (Bronner et al., 2017). Ингибирование активности RORYt приводит к снижению экспрессии IL17. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для ингибирования активности RORYt.
Предложенные в данном документе соединения и композиции можно применять для подавления выработки IL-17 в культурах человеческих Т-клеток, подверженных воздействию смеси цитокинов, которые, как известно, вызывают дифференцировку в ^П-клетки. В некоторых вариантах осуществления также продемонстрирована возможность действия в качестве обратных агонистов RORYt. He ограничиваясь какой-либо теорией, считается, что, например, RORYt-независимые механизмы, по-видимому, способствуют подавлению выработки IL-17. Таким образом, предложенные в данном документе соединения и композиции можно применять для ингибирования дифференцировки Т-клеток в ^П-клетки, а также для ингибирования выработки IL-17 зрелыми ^П-клетками. В некоторых из этих вариантов осуществления конечным результатом является снижение уровней IL-17. В некоторых вариантах осуществления соединения, предложенные в данном документе, можно вводить пациенту для подавления выработки IL17 в одной или более тканях или одном или более органах пациента.
Фармацевтические составы и пути введения
В другом аспекте для введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтические составы (также называемые фармацевтическими препаратам, фармацевтическими композициями, фармацевтическими продуктами, лекарственными продуктами, лекарствами, лекарственными средствами или лекарственными препаратами) содержат терапевтически эффективное количество соединения, описанного в данном документе, в составе с одним или более вспомогательными веществами и/или носителями лекарственных препаратов, подходящими для указанного пути введения. В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, составлены способом, подходящим для лечения людей и/или ветеринарных пациентов. В некоторых вариантах осуществления изготовление включает смешивание или объединение одного или более соединений, описанных в данном документе, с одним или более из следующих вспомогательных веществ: лактозы, сахарозы, порошка крахмала, сложных
- 23 047073 эфиров целлюлозы алкановых кислот, сложных алкиловых эфиров целлюлозы, талька, стеариновой кислоты, стеарата магния, оксида магния, диоксида кремния, натриевых и кальциевых солей фосфорной и серной кислот, лаурилсульфата натрия, желатина, гуммиарабика, альгината натрия, поливинилпирролидона и/или поливинилового спирта. В некоторых вариантах осуществления, например для перорального введения, фармацевтическая композиция может быть таблетирована или инкапсулирована. В некоторых вариантах осуществления соединения могут быть растворены или суспендированы в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия и/или различных буферах. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические составы можно подвергать обычной фармацевтической обработке, такой как стерилизация, и/или они могут содержать носители лекарственных препаратов и/или вспомогательные вещества, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, инкапсулирующие агенты, такие как липиды, дендримеры, полимеры, белки, такие как альбумин, нуклеиновые кислоты и буферы.
Фармацевтические препараты можно вводить рядом способов, например, перорально или путем инъекции (например, подкожно, внутривенно и внутрибрюшинно). В зависимости от пути введения соединения, описанные в данном документе, могут быть покрыты материалом для защиты соединения от воздействия кислот и других естественных условий, которые могут инактивировать соединение. Для введения активного соединения способами, отличными от парентерального введения, может быть необходимо покрытие соединения или совместное введение соединения с материалом, предотвращающим его инактивацию. В некоторых вариантах осуществления активное соединение можно вводить пациенту в подходящем носителе, например липосомах, или разбавителе. Фармацевтически приемлемые разбавители включают солевой раствор и водные буферные растворы. Липосомы включают эмульсии CGF вода-вмасле-в-воде, а также традиционные липосомы.
Соединения, описанные в данном документе, также можно вводить парентерально, внутрибрюшинно, внутриспинально или интрацеребрально. Дисперсии могут быть приготовлены в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях, и в маслах. В обычных условиях хранения и использования эти препараты могут содержать консервант для предотвращения роста микроорганизмов.
Фармацевтические композиции, подходящие для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы (в случае водорастворимости) или дисперсии и стерильные порошки для приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий для немедленного приема. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (такой как глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.п.), их подходящие смеси и растительные масла. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем применения материалов для покрытия, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и путем применения поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов можно обеспечить посредством различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимеросала и т.п. Во многих случаях в композицию предпочтительно включать изотонические вещества, например, сахара, хлорид натрия или полиспирты, такие как маннит и сорбит. Пролонгированное всасывание инъекционных композиций можно обеспечить путем включения в композицию вещества, которое замедляет всасывание, например, моностеарата алюминия или желатина.
Соединения, описанные в данном документе, можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или усваиваемым пищевым носителем. Соединения и другие ингредиенты также могут быть заключены в желатиновую капсулу с твердой или мягкой оболочкой, инкапсулированы в ГМПЦкапсулах, спрессованы в таблетки или включены непосредственно в рацион пациента. Для перорального терапевтического введения соединения, описанные в данном документе, можно соединять с одним или более вспомогательными веществами и использовать в форме проглатываемых таблеток, буккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, облаток и т.п. Процент терапевтического соединения в композициях и препаратах, конечно, может варьироваться. Количество терапевтического соединения в таких фармацевтических составах подобрано так, чтобы получить подходящую дозировку.
Терапевтическое соединение также можно применять местно на кожу, глаз, ухо или слизистые оболочки. Местное введение терапевтического соединения может включать составы соединений в виде раствора для местного применения, лосьона, крема, мази, геля, пены, трансдермального пластыря или настойки. В случае составления терапевтического соединения для местного применения соединение можно объединять с одним или более агентами, которые увеличивают проницаемость соединения для ткани, на которую оно наносится. В других вариантах осуществления предполагается, что местное введение включает введение в глаз. Такое введение можно применять к поверхности роговицы, конъюнктивы или склеры. Не ограничиваясь какой-либо теорией, считается, что нанесение на поверхность глаза позволяет терапевтическому соединению достигать задней части глаза. Местный офтальмологический состав для введения может быть приготовлен в виде раствора, суспензии, мази, геля или эмульсии. Наконец, местное введение также может включать нанесение на слизистые оболочки, такие как внутренняя часть рта. Такое введение можно осуществлять непосредственно в конкретном месте слизистой оболочки, таком
- 24 047073 как зуб, рана или язва. В альтернативном варианте, если необходима местная доставка в легкие, терапевтическое соединение можно вводить путем ингаляции в виде сухого порошка или аэрозольного состава.
В некоторых вариантах осуществления может быть преимущественно составлять парентеральные композиции в единичной дозированной форме для удобства введения и равномерности дозировки. В контексте данного документа единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных дозировок для подлежащих лечению субъектов; каждая единица содержит предопределенное количество терапевтического соединения, рассчитанное так, чтобы оказывать необходимое терапевтическое действие, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. В некоторых вариантах осуществления спецификации для единичных дозированных форм по изобретению обусловлены и напрямую зависят от (а) уникальных характеристик терапевтического соединения и конкретного предусмотренного терапевтического эффекта, и (b) ограничений, свойственных области техники составления соединений, таких как терапевтическое соединение для лечения выбранного патологического состояния у пациента. В некоторых вариантах осуществления активные соединения вводят в терапевтически эффективной дозе, достаточной для лечения патологического состояния, связанного с состоянием у пациента. Например, эффективность соединения можно оценить в животной модельной системе, которая может быть предиктивной в отношении эффективности при лечении заболевания у человека или другого животного.
В некоторых вариантах осуществления диапазон эффективных доз для терапевтического соединения может быть экстраполирован на основе эффективных доз, определенных в исследованиях на животных для ряда различных животных. В некоторых вариантах осуществления эквивалентную дозу для человека (ЭДЧ) в мг/кг можно рассчитать в соответствии со следующей формулой (смотрите, например, Reagan-Shaw et al., FASEB J., 22(3):659-661, 2008, которая включена в данный документ посредством ссылки):
ЭДЧ (мг/кг) = доза для животного (мг/кг) х (Km животного/Km человека)
Использование коэффициентов Km при преобразовании приводит к более точным значениям ЭДЧ, которые основаны на площади поверхности тела (ПИТ), а не только на массе тела. Значения Km для людей и различных животных хорошо известны. Например, Km для человека массой в среднем 60 кг (с ПИТ 1,6 м2) составляет 37, тогда как у ребенка с массой тела 20 кг (ПИТ 0,8 м2) Km будет составлять 25. Km для некоторых релевантных животных моделей также хорошо известны, включая: Km для мышей 3 (с учетом массы 0,02 кг и ППТ 0,007); Km для хомяка 5 (с учетом массы 0,08 кг и ППТ 0,02); Km для крыса 6 (с учетом массы 0,15 кг и ПИТ 0,025) и Km для обезьяны 12 (с учетом массы 3 кг и ПИТ 0,24).
Точные количества терапевтической композиции зависят от решения практикующего специалиста и специфичны для каждого индивида. При этом рассчитанная доза ЭДЧ обеспечивает общее руководство. Другие факторы, влияющие на дозу, включают физическое и клиническое состояние пациента, путь введения, предполагаемую цель лечения и эффективность, стабильность и токсичность конкретного терапевтического состава.
Фактическую количественную дозировку соединения по настоящему изобретению или композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению, вводимую субъекту, можно определить по физическим и физиологическим факторам, таким как тип подлежащего лечению животного, возраст, пол, масса тела, тяжесть патологического состояния, тип заболевания, подлежащего лечению, предыдущее или одновременное терапевтическое вмешательство, идиопатия пациента и путь введения. Эти факторы могут быть определены квалифицированным специалистом. Практикующий специалист, ответственный за введение, обычно определяет концентрацию активного(ых) ингредиента(ов) в композиции и соответствующую(ие) дозу(ы) для каждого отдельного пациента. Лечащий врач может корректировать дозировку в случае каких-либо осложнений.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество, как правило, варьируется от около 0,001 до около 1000 мг/кг, от около 0,01 до около 750 мг/кг, от около 100 до около 500 мг/кг, от около 1 до около 250 мг/кг, от около 10 до около 150 мг/кг в одной или более дозах, вводимых ежесуточно в течение одних или боле суток (в зависимости от курса режима введения и факторов, которые обсуждались выше). Другие подходящие диапазоны доз включают от 1 до 10000 мг в сутки, от 100 до 10000 мг в сутки, от 500 до 10000 мг в сутки и от 500 до 1000 мг в сутки. В некоторых вариантах осуществления количество составляет менее 10000 мг в сутки с диапазоном от 750 до 9000 мг в сутки.
В некоторых вариантах осуществления количество активного соединения в фармацевтической композиции составляет от около 1 до около 100 мас.%. В некоторых вариантах осуществления количество активного соединения в фармацевтическом составе составляет от около 10 до около 90, от около 25 до около 75 или около 50 мас.%.
Предусмотрены однократные или многократные дозы агентов. Специалист в данной области техники может определить необходимые интервалы времени для доставки нескольких доз, используя рутинные эксперименты. Например, пациентам можно вводить по две дозы ежесуточно с интервалом приблизительно 12 ч. В некоторых вариантах осуществления агент вводят один раз в сутки.
Агент(ы) можно вводить по стандартной схеме. В контексте данного документа термин стандартная схема относится к заранее определенному назначенному периоду времени. Стандартная схема мо
- 25 047073 жет охватывать периоды времени, которые идентичны или различаются по длине, при условии, что схема определена заранее. Например, стандартная схема может включать введение дважды в сутки, раз в сутки, раз в двое суток, раз в трое суток, раз в четверо суток, раз в пять суток, раз в шесть суток, раз в неделю, раз в месяц или в любое установленное количество суток или недель между ними. В альтерна тивном варианте заранее определенная стандартная схема может включать введение два раза в сутки в течение первой недели, после этого - один раз в сутки в течение нескольких месяцев и т.д. В других вариантах осуществления изобретения предусмотрено, что агент(ы) можно принимать перорально и что время приема может зависеть или не зависеть от приема пищи. Так, например, агент можно принимать каждое утро и/или каждый вечер, независимо от того, когда субъект ел или будет есть.
Комбинированная терапия
Помимо использования в качестве монотерапии, соединения по настоящему изобретению могут также найти применение в комбинированной терапии. Эффективную комбинированную терапию можно обеспечить посредством одной композиции или одного фармакологического состава, которые содержат оба агента, или двух разных композиций или составов, вводимых одновременно, при этом одна композиция содержит соединение по данному изобретению, а другая содержит второй(ые) агент(ы). В альтернативном варианте терапия может проводиться до или после лечения другим агентом с интервалами, варь ирующимися от минут до месяцев.
Неограничивающие примеры такой комбинированной терапии включают комбинацию одного или более соединений по изобретению с другим противовоспалительным агентом, химиотерапевтическим агентом, лучевой терапией, антидепрессантом, антипсихотическим агентом, противосудорожным средством, стабилизатором настроения, антиинфекционным агентом, антигипертензивным агентом, агентом для снижения уровня холестерина или другим модулятором липидов в крови, агентом, способствующим снижению массы, антитромботическим агентом, агентом для лечения или предотвращения сердечнососудистых событий, таких как инфаркт миокарда или инсульт, противодиабетическим агентом, агентом для уменьшения отторжения трансплантата или болезни трансплантат против хозяина, агентом против артрита, обезболивающим агентом, агентом против бронхиальной астмы или другим агентом для лечения респираторных заболеваний или агентом для лечения или предотвращения кожных заболеваний. Соединения по изобретению можно комбинировать с агентами, предназначенными для улучшения иммунного ответа пациента на онкологическое заболевание, включая (но не ограничиваясь этим) противораковые вакцины. См. Lu et al. (2011), которая включена в данный документ посредством ссылки.
Определения
В контексте химической группы водород означает -Н; гидрокси означает -ОН; оксо означает =O; карбонил означает -С(=О)-; карбокси означает -С(=О)ОН (также пишется как -СООН или СО2Н); галоген означает независимо -F, -Cl, -Br или -I; амино означает -NH2; гидроксиамино означает -NHOH; нитро означает -NO2; имино означает =NH; циано означает -CN; изоцианат означает N=C=O; азидо означает -N3; в одновалентном контексте фосфат означает -ОР(О)(ОН)2 или его депротонированную форму; в двухвалентном контексте фосфат означает -ОР(О)(ОН)О- или его депротонированную форму; меркапто означает -SH; и тио означает =S; сульфонил означает -S(O)2- и сульфинил означает -S(O)-.
В контексте химических формул символ - означает одинарную связь, = означает двойную связь, а =' означает тройную связь. Символ — представляет необязательную связь, которая, если присутствует, является одинарной или двойной.
Символ ---- представляет одинарную связь или двойную связь. Таким образом, формула
ох-
ватывает, например,
И понятно, что ни один такой кольцевой атом не образует часть более чем одной двойной связи. Кроме того, следует отметить, что символ ковалентной связи - при соединении одного или двух сте реогенных атомов не указывает на какой-либо предпочтительный вариант стереохимии.
Напротив, он охватывает все стереоизомеры, а также их смеси. Символ uwv в случае, когда он нарисован перпендикулярно поперек связи (например ЬСНз в случае метила), указывает точку присоединения группы. Следует отметить, что точка присоединения обычно идентифицирована таким образом только для больших групп, чтобы помочь читателю однозначно идентифицировать точку присоединения. Символ -^ означает одинарную связь, в которой группа, присоединенная к толстому концу клина, направлена из страницы. Символ И означает одинарную связь, в которой группа, присоединенная к толстому концу клина, направлена в страницу. Символ Wv\ означает одинарную связь, в которой геометрия вокруг двойной связи (например, Е или Z) не определена. Таким образом подразумеваются оба варианта, а также их комбинации. Любая неопределенная валентность на атоме структуры, приведенной в данной заявке, неявно представляет атом водорода, связанный с этим атомом. Жирная точка на атоме углерода указывает на то, что водород, присоединенный к этому углероду, ориентирован в направлении из плоскости бумаги.
- 26 047073
В случаях, когда переменная изображена в виде плавающей группы в кольцевой системе, например, группы R в формуле
эта переменная может замещать любой атом водорода, присоединенный к любому из кольцевых атомов, включая изображенный, подразумеваемый или явно определенный атом водорода, при условии, что образуется стабильная структура. В случаях, когда переменная изображена в виде плавающей группы в конденсированной кольцевой системе, например, группы R в формуле
эта переменная может замещать любой атом водорода, присоединенный к любому из кольцевых атомов любого из конденсированных колец, если не указано иное. Замещаемые атомы водорода включают изображенные атомы водорода (например, атом водорода, присоединенный к атому азота в вышеприведенной формуле), подразумеваемые атомы водорода (например, атом водорода вышеприведенной формулы, который не показан, но подразумевается, что он присутствует), явно определенные атомы водорода и необязательные атомы водорода, чье присутствие зависит от идентичности кольцевого атома (например, атом водорода, присоединенный к группе X, когда X является -СН-), при условии образования стабильной структуры. В проиллюстрированном примере R может находиться в 5-членном или в 6-членном кольце конденсированной кольцевой системы. В вышеприведенной формуле подстрочная буква у, следующая сразу за буквой R, заключенная в скобки, представляет числовую переменную. Если не указано иное, эта переменная может быть равной 0, 1, 2 или любому целому числу больше 2, ограниченному только максимальным числом замещаемых атомов водорода в кольце или кольцевой системе.
В случае химических групп и классов соединений число атомов углерода в группе или классе указано следующим образом: Cn определяет точное число (n) атомов углерода в группе/классе. C<n определяет максимальное число (n) атомов углерода, которое может быть в группе/классе, при этом минимальное число является наименьшим возможным для рассматриваемых группы/класса. Например, подразумевается, что минимальное число атомов углерода в группах алкиЛ(С<8), циклоалкандииЛ(С<8), гетероарил(С<8) и ацил(С<8) - один, минимальное число атомов углерода в группах алкенил(С<8), алкинил(С<8) и гетероциклоалкил(С<8) - два, минимальное число атомов углерода в группах циклоалкиЛ(С<8) - три, а минимальное количество атомов углерода в группахариЛ(С<8) и аренедииЛ(С<8) - шесть. Cn-n' определяет как минимальное (n), так и максимальное число (n') атомов углерода в группе. Таким образом, злкиЛ(С2-ю) обозначает те алкильные группы, которые содержат от 2 до 10 атомов углерода. Данные указатели числа атомов углерода могут находиться перед химическими группами или классами, которые они модифицируют, или могут находиться за ними, или могут находиться или не находиться в скобках, что не означает какое-либо изменение в значении. Таким образом, термины С5 олефин, С5-олефин, олефин(С5) и олефинС5 являются синонимами. Когда любые из химических групп или классов соединений, определенных в данном документе, модифицированы термином замещенный, любой атом углерода во фрагменте, замещающем атом водорода, не учитывается при подсчете. Таким образом, метоксигексил, который имеет в общей сложности семь атомов углерода, является примером замещенного алкила(С1-6). Если не указано иное, любые химическая группа или класс соединений, перечисленные в формуле изобретения без ограничения числа атомов углерода, имеют предельное число атомов углерода, меньшее или равное двенадцати.
Термин насыщенный, используемый для модификации соединения или химической группы, означает, что соединение или химическая группа не имеют двойных углерод-углеродных и тройных углеродуглеродных связей, за исключением случаев, указанных ниже. Когда этот термин используется для модификации атома, это означает, что атом не является частью какой-либо двойной или тройной связи. В случае замещенных версий насыщенных групп могут присутствовать одна или более двойных связей углерод-кислород или двойных связей углерод-азот. Когда такая связь присутствует, то не исключаются углерод-углеродные двойные связи, которые могут возникать как часть кето-енольной таутомерии или имин/енаминной таутомери. Когда термин насыщенный используется для модификации раствора вещества, это означает, что в растворе не может раствориться больше этого вещества.
Термин алифатический означает, что соединение или химическая группа, модифицированные таким образом, представляют собой ациклические или циклические, но неароматические соединение или группу. В алифатических соединениях/группах атомы углерода могут быть объединены в прямые цепи, разветвленные цепи или неароматические кольца (алициклические). Алифатические соединения/группы могут быть насыщенными, то есть, соединенными одинарными углерод-углеродными связями (алканы/алкил), или ненасыщенными, с одной или более углерод-углеродными двойными связями (алкены/алкенил) или с одной или более углерод-углеродными тройными связями (алкины/алкинил).
- 27 047073
Термин ароматический означает, что соединение или химическая группа, модифицированные таким образом, имеют планарное ненасыщенное кольцо атомов с 4n+2 электронами в полностью сопряженной циклической π-системе.
Термин алкил относится к одновалентной насыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Группы -СН3 (Me), -CH2CH3 (Et), -СН2СН2СН3 (n-Pr или пропил), -СН(СН3)2 (i-Pr, iPr или изопропил), -СН2СН2СН2СН3 (n-Bu), -СН(СН3)СН2СН3 (втор-бутил), -СН2СН(СН3)2 (изобутил), -С(СН3)3 (трет-бутил, t-бутил, t-Bu или tBu) и -СН2С(СН3)3 (нео-пентил) являются неограничивающими примерами алкильных групп. Термин алкандиил относится к двухвалентной насыщенной алифатической группе, с одним или двумя насыщенными атомами углерода в качестве точки(ек) присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, не содержащей двойных или тройных углерод-углеродных связей и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Группы -СН2- (метилен), -СН2СН2- -СН2С(СН3)2СН2- и -СН2СН2СН2- являются неограничивающими примерами алкандиильных групп. Термин алкилиден относится к двухвалентной группе =CRR', в которой R и R' независимо представляют собой водород, алкил, арил или гетероарил. Неограничивающие примеры алкилиденовых групп включают: =СН2, =СН(СН2СН3) и =С(СН3)2. Алкан относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше.
Термин циклоалкил относится к одновалентной насыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или более неароматических кольцевых структур, не содержащей углерод-углеродных двойных или тройных связи, и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Неограничивающие примеры включают: -СН(СН2)2 (циклопропил), циклобутил, циклопентил или циклогексил (Су). В контексте данного документа этот термин не исключает наличия одной или более алкильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к атому углерода неароматической кольцевой структуры. Термин циклоалкандиил относится к двухвалентной насыщенной алифатической группе с двумя атомами углерода в качестве точек присоединения, не содержащей углерод-углеродных двойных или тройных связей и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Группа 'V—/ является неограничивающим примером циклоалкандиильной группы. Циклоалкан относится к классу соединений, имеющих формулу Н-R, где R представляет собой циклоалкил в соответствии с определением данного термина выше.
Термин алкенил относится к одновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, по меньшей мере одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, не содержащей углеродуглеродных тройных связей и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Неограничивающие примеры включают: -СН=СН2 (винил), -СН=СНСН3, -СН=СНСН2СН3, -СН2СН=СН2 (аллил), -СН2СН=СНСН3 и -СН=СНСН=СН2. Термин алкендиил относится к двухвалентной ненасыщенной алифатической группе с двумя атомами углерода в качестве точек присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, по меньшей мере одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, не содержащей углерод-углеродных тройных связей и не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. Группы -СН=СН-, -СН=С(СН3)СН2-, -СН=СНСН2- и -СН2СН=СНСН2- являются неограничивающими примерами алкендиильных групп. Следует отметить, что, хотя алкендиильная группа является алифатической, при соединении в обоих концах эта группа не исключается из образующей части ароматической структуры. Термины алкен и олефин являются синонимами и относятся к классу соединений, имеющих формулу Н-R, где R представляет собой алкенил в соответствии с определением данного термина выше. Аналогично, термины концевой алкен и α-олефин являются синонимами и относятся к алкену, имеющему только одну углерод-углеродную двойную связь, причем эта связь является частью винильной группы на конце молекулы.
Термин алкинил относится к одновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, по меньшей мере одной углерод-углеродной тройной связью, не содержащей других атомов, кроме углерода и водорода. В контексте данного документа термин алкинил не исключает наличия одной или более неароматических углерод-углеродных двойных связей. Группы -С^СН, -С^ССН3 и -СН2С^ССН3 являются неограничивающими примерами алкинильных групп. Алкин относится к классу соединений, имеющих формулу Н-R, где R представляет собой алкинил. Когда любой из этих терминов используется с модификатором замещенный, это означает, что один или более атомов водорода были независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -СО2Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СН3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -OC(O)CH3, -NHC(O)CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2.
Термин арил относится к одновалентной ненасыщенной ароматической группе с атомом ароматического углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть
- 28 047073 одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, которые все являются углеродом, и при этом группа не содержит других атомов, кроме углерода и водорода. При наличии более одного кольца, кольца могут быть конденсированы или не конденсированы. Неконденсированые кольца связаны ковалентной связью. В контексте данного документа термин арил не исключает наличия одной или более алкильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу. Неограничивающие примеры арильных групп включают фенил (Ph), метилфенил, (диметил)фенил, -С6Н4СН2СН3(этилфенил), нафтил и одновалентную группу, являющуюся производным бифенила (например, 4-фенилфенил). Термин арендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода в качестве точек присоединения, причем указанные атомы углерода образуют часть одной или более шестичленных ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, которые все являются углеродом, и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода и водорода. В контексте данного документа термин арендиил не исключает наличия одной или более алкильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу. При наличии более одного кольца, кольца могут быть конденсированы или не конденсированы. Неконденсированые кольца связаны ковалентной связью.
Неограничивающие примеры арендиильных групп включают:
Арен относится к классу соединений, имеющих формулу Н-R, где R представляет собой арил в соответствии с определением данного термина выше. Бензол и толуол являются неограничивающими примерами аренов.
Термин аралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-арил, в которой каждый из терминов алкандиил и арил используется в соответствии с определениями, приведенными выше. Неограничивающими примерами являются: фенилметил (бензил, Bn) и 2-фенилэтил.
Термин гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с атомом ароматического углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и при этом гетероарильная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. При наличии более одного кольца, кольца являются конденсированными. Термин гетероарил не исключает наличия одной или более алкильных или арильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к одному или более кольцевым атомам. Неограничивающие примеры гетероарильных групп включают бензоксазолил, бензимидазолил, фуранил, имидазолил (Im), индолил, индазолил (Im), изоксазолил, метилпиридинил, оксазолил, фенилпиридинил, пиридинил (пиридил), пирролил, пиримидинил, пиразинил, хинолил, хиназолил, хиноксалинил, триазинил, тетразолил, тиазолил, тиенил и триазолил.
Термин гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода, двумя атомами ароматического азота или одним атомом ароматического углерода и одним атомом ароматического азота в качестве двух точек присоединения, указанные атомы образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых содержит от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. В случае наличия более одного кольца, кольца являются конденсированными; однако термин гетероарендиил не исключает наличия одной или более алкильных или арильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к одному или более кольцевым атомам. Неограничивающие примеры гетероарендиильных групп включают
Термин N-гетероарил относится к гетероарильной группе с атомом азота в качестве точки присоединения. Гетероарен относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой гетероарил. Пиридин и хинолин являются неограничивающими примерами гетероаренов.
Термин гетероаралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-гетероарил, в которой каждый из терминов алкандиил и гетероарил используется в соответствии с определениями, приведенными выше. Неограничивающими примерами являются пиридинилметил и 2-хинолинилэтил.
Термин гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода
- 29 047073 или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или азота образуют часть одной или более неароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом гетероциклоалкильная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы. При наличии более одного кольца, кольца являются конденсированными. В контексте данного документа этот термин не исключает наличия одной или более алкильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к одному или более кольцевым атомам. Также этот термин не исключает наличия одной или более двойных связей в кольце или кольцевой системе при условии, что полученная группа остается неароматической. Неограничивающие примеры гетероциклоалкильных групп включают азиридинил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофуранил, тетрагидропиранил, пиранил, оксиранил и оксетанил.
Термин гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или более кольцевых структур, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы. При наличии более одного кольца, кольца являются конденсированными. В контексте данного документа термин гетероциклоалкандиил не исключает наличия одной или более алкильных групп (насколько допускает ограничение по числу атомов углерода), присоединенных к одному или более кольцевым атомам. Также этот термин не исключает наличия одной или более двойных связей в кольце или кольцевой системе при условии, что полученная группа остается неароматической. Неограничивающие примеры гетероциклоалкандиильных групп включают
Термин N-гетероциклоалкил относится к гетероциклоалкильной группе с атомом азота в качестве точки присоединения. N-пирролидинил является примером такой группы.
Термин ацил относится к группе -C(O)R, в которой R представляет собой водород, алкил, циклоалкил или арил в соответствии с определениями данных терминов выше. Группы -СНО, -С(О)СН3 (ацетил, Ас), -С(О)СН2СН3, -С(О)СН(СН3)2, -С(О)СН(СН2)2, -С(О)С6Н5 и -C(O)C6H4CH3 являются неограничивающими примерами ацильных групп. Тиоацил определяется аналогичным образом за исключением того, что атом кислорода группы -C(O)R замещен атомом серы, -C(S)R. Термин альдегид соответствует алкильной группе в соответствии с определением выше, присоединенной к группе -СНО.
Термин алкокси относится к группе -OR, в которой R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше. Неограничивающие примеры включают: -ОСН3 (метокси), -ОСН2СН3 (этокси), -ОСН2СН2СН3, -ОСН(СН3)2 (изопропокси) или -ОС(СН3)3 (трет-бутокси). Термины циклоалкокси, алкенилокси, алкинилокси, арилокси, аралкокси, гетероарилокси, гетероциклоалкокси и ацилокси при использовании без модификатора замещенный относятся к группам, определяемым как -OR, где R представляет собой циклоалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил, гетероциклоалкил и ацил, соответственно. Термины алкилтио и ацилтио относятся к группе -SR, в которой R представляет собой алкил и ацил соответственно. Термин спирт соответствует алкану в соответствии с определением выше, где по меньшей мере один из атомов водорода замещен гидроксигруппой. Термин эфир соответствует алкану в соответствии с определением выше, где по меньшей мере один из атомов водорода замещен алкоксигруппой.
Термин алкиламино относится к группе -NHR, в которой R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше. Неограничивающие примеры включают: -NHCH3 и -NHCH2CH3. Термин диалкиламино относится к группе -NRR', в которой R и R' могут представлять собой одинаковые или разные алкильные группы. Неограничивающие примеры диалкиламинных групп включают: -N(CH3)2 и -N(CH3)(CH2CH3). Термины циклоалкиламино, алкениламино, алкиниламино, ариламино, аралкиламино, гетероариламино, гетероциклоалкиламино и алкоксиамино, используемые без модификатора замещенный, относятся к группам, определенным как -NHR, в которых R представляет собой циклоалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил, гетероциклоалкил и алкокси, соответственно. Неограничивающим примером ариламиногруппы является -NHC6H5. Термины дициклоалкиламино, диалкениламино, диалкиниламино, диариламино, диаралкиламино, дигетероариламино, дигетероциклоалкиламино и диалкоксиамино относятся к группам, определенным как -NRR', в которых R и R', оба, представляют собой циклоалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил, гетероциклоалкил и алкокси соответственно. Аналогично, термин алкил(циклоалкил)амино относится к группе, определенной как -NRR', в которой R представляет собой алкил, a R' представляет собой циклоалкил. Термин амидо (ациламино), используемый без модификатора замещенный, относится к группе -NHR, в которой R представляет собой ацил в соответствии с определением данного термина выше.
- 30 047073
Неограничивающим примером амидогруппы является -NHC(O)CH3.
Когда химическая группа используется с модификатором замещенный, это означает, что один или более атомов водорода были независимо в каждом случае замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СН3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -OC(O)CH3, -NHC(O)CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2. Например, следующие примеры являются неограничивающими примерами замещенных алкильных групп: -СН2ОН, -CH2Cl, -CF3, -CH2CN, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)CH3, -СН2ОСН3, -СН2ОС(О)СН3, -CH2NH2, -CH2N(CH3)2 и -CH2CH2Cl. Термин галогеналкил представляет собой подгруппу замещенного алкила, в которой замещение атома водорода ограничено галогеном (т.е. -F, -Cl, -Br или -I), так, чтобы она не содержала любые другие атомы, кроме углерода, водорода и галогена. Группа -CH2Cl является неограничивающим примером галогеналкила. Термин фторалкил представляет собой подгруппу замещенного алкила, в которой замещение атома водорода ограничено фтором, так, чтобы она не содержала любые другие атомы, кроме углерода, водорода и фтора. Группы -CH2F, -CF3 и -CH2CF3 являются неограничивающими примерами фторалкильных групп. Неограничивающими примерами замещенных аралкилов являются (3-хлорфенил)метил и 2-хлор-2-фенил-ет-1-ил. Группы, -C(O)CH2CF3, -СО2Н(карбоксил), -СО2СН3 (метилкарбоксил), -СО2СН2СН3, -C(O)NH2 (карбамоил) и -CON(CH3)2 являются неограничивающими примерами замещенных ацильных групп. Группы -NHC(O)OCH3 и -NHC(O)NHCH3 являются неограничивающими примерами замещенных амидогрупп.
Использование слова в единственном числе при применении в сочетании с термином содержащий в формуле изобретения и/или в тексте описания может означать один, но также соответствует значению один или более, по меньшей мере один и один или более одного.
В тексте данной заявки термин около используется для указания того, что значение включает собственную вариацию погрешности для устройства, способа, используемого для определения значения, или вариацию между субъектами или пациентами исследования.
Активный ингредиент (АИ) или активный фармацевтический ингредиент (АФИ) (также называемый активным соединением, активным веществом, активным агентом, фармацевтическим агентом, веществом, агентом, биологически активной молекулой или терапевтическим соединением) представляет собой ингредиент в фармацевтическом препарате, который является биологически активным.
Термины содержать, иметь и включать являются неограничивающими глаголами-связками. Любые формы или времена одного или более этих глаголов, такие как содержит, содержащий, имеет, имеющий, включает и включающий, также являются неограничивающими. Например, любой способ, который содержит, имеет или включает один или более этапов, не ограничивается наличием только этих одного или более этапов и также охватывает другие не включенные в список этапы.
Термин эффективный, при использовании данного термина в описании и/или формуле изобретения, означает приемлемый для достижения необходимого, ожидаемого или предполагаемого результата. Эффективное количество, терапевтически эффективное количество или фармацевтически эффективное количество, при использовании в контексте лечения пациента или субъекта соединением, означает такое количество соединения, которое при введении субъекту или пациенту для лечения или предотвращения заболевания представляет собой количество, достаточное для осуществления такого лечения или предотвращения заболевания.
Вспомогательное вещество представляет собой фармацевтически приемлемое вещество, смешанное вместе с активными ингредиентами лекарственного средства, фармацевтической композиции, состава или системы доставки лекарственного средства. Вспомогательные вещества можно использовать, например, для стабилизации композиции, для увеличения объема композиции (такие вещества часто называют объемообразующими агентами, наполнителями или разбавителями при использовании в данных целях) или для терапевтического усиления активного ингредиента в конечной дозированной форме, например, облегчения всасывания лекарственного препарата, снижения вязкости или повышения растворимости. Вспомогательные вещества включают фармацевтически приемлемые версии антиадгезивов, связующих веществ, покрытий, красителей, разрыхлителей, ароматизаторов, глидантов, лубрикантов, консервантов, сорбентов, подсластителей и носителей. Основное вспомогательное вещество, которое служит средой для доставки активного ингредиента, обычно называют носителем. Вспомогательные вещества можно также использовать в процессе производства, например, для облегчения обработки активного вещества, например, путем улучшения сыпучести порошка или предотвращения прилипания, в дополнение к способствованию стабильности in vitro, такой как предотвращение денатурации или агрегации в течение ожидаемого срока годности. Пригодность вспомогательного вещества обычно варьируется в зависимости от пути введения, дозированной формы, активного ингредиента, а также других факторов.
Термин гидрат при использовании в качестве модификатора соединения означает, что соединение имеет менее одной (например, полугидрат), одну (например, моногидрат) или более одной (например, дигидрат) молекул воды, связанных с каждой молекулой соединения, например, в твердых формах соединения.
В контексте данного документа термин IC50 относится к ингибирующей дозе, которая составляет 50% от максимального полученного ответа. Данная количественная мера показывает, сколько конкрет
- 31 047073 ного лекарственного препарата или другого вещества (ингибитора) необходимо для ингибирования заданного биологического, биохимического или химического процесса (или компонент процесса, т.е. фермента, клетки, клеточного рецептора или микроорганизма) наполовину.
Изомер первого соединения представляет собой отдельное соединение, в котором каждая молекула содержит те же составляющие атомы, что и первое соединение, но при этом конфигурация таких атомов в трех измерениях отличается.
В контексте данного документа термин пациент или субъект относится к живому организму класса млекопитающих, такому как человек, обезьяна, корова, овца, коза, собака, кошка, мышь, крыса, морская свинка или их трансгенные виды. В определенных вариантах осуществления пациентом или субъектом является примат. Неограничивающими примерами пациентов-людей являются взрослые, подростки, младенцы и плоды.
В целом, в контексте данного документа фармацевтически приемлемый относится к таким соединениям, материалам, композициям и/или дозированным формам, которые с медицинской точки зрения являются подходящими для применения в контакте с тканями, органами и/или жидкостями организма людей и животных, не вызывая чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений в соответствии с разумным соотношением польза/риск. Один из примеров соединений, которые являются фармацевтически приемлемыми, включает те соединения, материалы, композиции и/или дозированные формы, которые были определены Управлением по контролю за продуктами питания и лекарствами США (US FDA) как имеющие статус считающихся в целом безопасными (GRAS).
Фармацевтически приемлемые соли означают соли соединений, описанных в данном документе, которые являются фармацевтически приемлемыми в соответствии с определением выше, и которые обладают необходимой фармакологической активностью. Такие соли включают соли присоединения кислот, образуемые с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или с органическими кислотами, такими как 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, 2нафталинсульфоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, 4,4'-метиленбис(3-гидрокси-2-ен-1карбоновая кислота), 4-метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, уксусная кислота, алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, алифатические серные кислоты, ароматические серные кислоты, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, камфорсульфоновая кислота, угольная кислота, коричная кислота, лимонная кислота, циклопентанепропионовая кислота, этансульфоновая кислота, фумаровая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, гептановая кислота, гексановая кислота, гидроксинафтойная кислота, молочная кислота, лаурилсульфурная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, о-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, щавелевая кислота, пхлорбензолсульфоновая кислота, фенил-замещенные алкановые кислоты, пропионовая кислота, птолуолсульфоновая кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, винная кислота, трет-бутилуксусная кислота, триметилуксусная кислота и т.п. Фармацевтически приемлемые соли также включают соли присоединения оснований, которые могут образовываться, когда присутствующие кислотные протоны способны вступать в реакцию с неорганическими или органическими основаниями.
Приемлемые неорганические основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид алюминия и гидроксид кальция. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и т.п. Следует понимать, что конкретный анион или катион, образующий часть любой соли по данному изобретению, не является критичным, если соль в целом является фармакологически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способов их получения и применения представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (P. H. Stahl & C. G. Wermuth eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002).
Фармацевтически приемлемый носитель, лекарственный носитель или просто носитель представляет собой фармацевтически приемлемое вещество, смешанное с лекарственным средством на основе активного ингредиента, которое участвует в переносе, доставке и/или транспорте химического агента. Лекарственный носитель можно использовать для улучшения доставки и эффективности лекарств, включая, например, технологию контролируемого высвобождения для модуляции биодоступности лекарственного препарата, снижения метаболизма лекарственного препарата и/или снижения токсичности лекарственного препарата. Некоторые лекарственные носители могут повышать эффективность доставки лекарственного препарата к конкретным целевым участкам. Примеры носителей включают: липосомы, микросферы (например, сделанные из сополимера молочной и гликолевой кислот), альбуминовые микросферы, синтетические полимеры, нановолокна, комплексы белок-ДНК, белковые конъюгаты, эритроциты, виросомы и дендримеры.
Фармацевтический лекарственный препарат (также называемый фармацевтическим средством, фармацевтическим препаратом, фармацевтической композицией, фармацевтическим составом, фарма
- 32 047073 цевтическим продуктом, лекарственным продуктом, лекарственным веществом, лекарственным препаратом, лекарственным средством или просто лекарством, агентом или препаратом) представляет собой композицию, используемую для диагностирования, излечения, лечения или предотвращения заболевания, которая содержит активный фармацевтический ингредиент (АФИ) (в соответствии с определением выше) и необязательно содержит один или более неактивных ингредиентов, которые также называются вспомогательными веществами (в соответствии с определением выше).
Предотвращение или профилактика включает (1) ингибирование появления заболевания у субъекта или пациента, который может быть подвержен риску заболевания и/или предрасположен к нему, но еще не испытывает или не демонстрирует какую-либо или всю патологию или симптоматику заболевания, и/или (2) замедление появления патологии или симптоматики заболевания у субъекта или пациента, который может быть подвержен риску заболевания и/или предрасположен к нему, но еще не испытывает или не демонстрирует какую-либо или всю патологию или симптоматику заболевания.
Пролекарственный препарат означает соединение, которое может в условиях in vivo метаболически преобразовываться в ингибитор по настоящему изобретению. Сам пролекарственный препарат может также обладать или не обладать активностью в отношении заданного целевого белка. Например, соединение, содержащее гидрокси-группу, можно вводить в виде сложного эфира, который посредством гидролиза преобразуется in vivo в гидроксисоединение. Неограничивающие примеры подходящих сложных эфиров, которые могут преобразовываться in vivo в гидрокси-соединения, включают ацетаты, цитраты, лактаты, фосфаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис-в-гидроксинафтоат, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуоилтартраты, метансульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, п-толуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы, хинаты и сложные эфиры аминокислот. Аналогично, соединение, содержащее аминогруппу, можно вводить в виде амида, который посредством гидролиза преобразуется in vivo в соединение амина.
Стереоизомер или оптический изомер представляет собой изомер заданного соединения, в котором аналогичные атомы связаны с другими аналогичными атомами, но при этом конфигурация этих атомов в трех измерениях отличается. Энантиомеры представляют собой стереоизомеры заданного соединения, которые являются зеркальным отображением друг друга, как левая и правая руки. Диастереомеры представляют собой стереоизомеры заданного соединения, которые не являются энантиомерами. Хиральные молекулы содержат хиральный центр, также называемый стереоцентром или стереогенным центром, который представляет собой любую точку, хотя и не обязательно атом, в несущей группы молекуле, расположенную таким образом, что взаимная замена любых двух групп приводит к получению стереоизомера. В органических соединениях хиральный центр обычно представляет собой атом углерода, фосфора или серы, хотя другие органические и неорганические соединения также могут быть стереоцентрами. Молекула может иметь несколько стереоцентров и, соответственно, много стереоизомеров. В соединениях, стереоизомерия которых обусловлена тетраэдрическими стереогенными центрами (например, тетраэдрическим углеродом), общее количество гипотетически возможных стереоизомеров не превышает 2n, где n - число тетраэдрических стереоцентров. Молекулы с симметрией часто имеют меньше максимально возможного количества стереоизомеров. Смесь энантиомеров в соотношении 50:50 называется рацемической смесью. В альтернативном варианте смесь энантиомеров может быть энантиомерно обогащена так, что один энантиомер присутствует в количестве, превышающем 50%. Как правило, энантиомеры и/или диастереомеры можно разрешать или разделять, используя известные в данной области техники методики. Предполагается, что в случае любых стереоцентра или оси хиральности, стереохимия которых не была определена, такие стереоцентр или ось хиральности могут присутствовать в R-форме, S-форме или в виде смеси R- и S-форм, включая рацемические и нерацемические смеси. В контексте данного документа выражение по существу не содержит других стереоизомеров означает, что композиция содержит < 15%, более предпочтительно < 10%, еще более предпочтительно < 5% или наиболее предпочтительно < 1% других стереоизомеров.
Лечение или процесс лечения включает: (1) ингибирование заболевания у субъекта или пациента, который испытывает или демонстрирует патологию или симптоматику заболевания (например, прекращение дальнейшего развития патологии и/или симптоматики), (2) облегчение заболевания у субъекта или пациента, который испытывает или демонстрирует патологию или симптоматику заболевания (например, обращение патологии и/или симптоматики) и/или (3) осуществление любого измеримого снижения интенсивности заболевания или его симптома у субъекта или пациента, который испытывает или демонстрирует патологию или симптоматику заболевания.
Термин единичная доза относится к таким составу соединения или композиции, которые получены в количестве, достаточном для обеспечения одной терапевтически эффективной дозы активного ингредиента для пациента за одно введение. Такие однодозовые составы, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются этим, одну таблетку, капсулу или другие пероральные составы, или один флакон с жидкостью для набора в шприц или другие инъекционные составы.
Вышеприведенные определения заменяют любое противоречащее определение в любой ссылке, которая включена в настоящее описание посредством ссылки. Однако тот факт, что некоторые термины
- 33 047073 определены, не следует рассматривать как свидетельство того, что любой неопределенный термин является неопределенным. Скорее считается, что все используемые термины описывают изобретение в терминах, позволяющих специалисту в данной области техники понять объем настоящего изобретения и реализовать его на практике.
Примеры
Следующие примеры включены для демонстрации предпочтительных вариантов осуществления изобретения. Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что методики, описанные в следующих примерах, представляют собой методики, которые, как обнаружил автор изобретения, хорошо работают при практической реализации данного изобретения, и, таким образом, могут рассматриваться как составляющие предпочтительные способы для его практической реализации. Однако специалистам в данной области техники в свете настоящего описания должно быть понятно, что в конкретных описанных вариантах осуществления можно сделать множество изменений и при этом получить такой же или схожий результат без отклонения от сущности и объема изобретения.
Пример 1. Синтез и характеристики
Способы синтеза соединений
Схема 1
Реагенты и условия: a) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, от 0°C до кт; ii) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 55°C; b) реагент Джонса, ацетон, 0°C; с) MgBr2-Et2O, ДИПЭА, PhCOCl, CH2Cl2, кт; d) циклогексилгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 110°C; е) NaOMe, МеОН, 55°C; f) ДДХ, толуол, 85°C (для Т1); или ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C (для Т2).
Схема 2
Реагенты и условия: а) (2,2,2-трифторэтил)гидразин, 12Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) NaOMe, MeOH, 55°C; с) ДДХ, толуол, 85°C.
Схема 3
Реагенты и условия: а) бензилгидразина дигидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 110°C; b) NaOMe, MeOH, 55°C; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
- 34 047073
Схема 4
Реагенты и условия: a) ArNHNH2 и водн. HCl (для 15а и 15 с) или ArNHNH2-HCl (для 15В), EtOH, микроволновое облучение; b) NaOMe, MeOH, 55°C; с) условие А (для Т6 и Т7): ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C; или условие В (для Т8): ДДХ, бензол, рефлюкс.
Схема 5
Реагенты и условия: a) ArNHNH2-HCl, EtOH, микроволновое облучение; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 6
Реагенты и условия: a) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, от 0°C до кт; ii) NH2OH-HCl, EtOH, Н2О, 55°C; b) MgBr2-Et2O, ДИПЭА, PhCOCl, CH2Cl2, кт; с) ArNHNH2 HCl, 12Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение; d) NaOMe, МеОН, 55°C; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
- 35 047073
Схема 7
Реагенты и условия: a) ArNHNH2-xHCl, EtOH, микроволновое облучение; b) условие А: K2CO3, МеОН, кт; или условие В: NaOMe, МеОН, 55°C; с) условие А: ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C или условие В: ДДХ, толуол, 85 °C.
Схема 8
Реагенты и условия: а) 3-гидразинилтетрагидротиофен 1,1-диоксид дигидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) K2CO3, МеОН, ТГФ, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 9
Реагенты и условия: a) ArNHNH2-HCl, EtOH, микроволновое облучение; b) условие А (для 32а): NaOMe, МеОН, 55°C или условие В (для 32b): K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
- 36 047073
Схема 10
ГЗЗ Т34
Реагенты и условия: a) 3-BrPhNHNH2-HCl, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) NaOMe, МеОН, 55°C; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C; d) 3-пиридинилбороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C.
Схема 11
35 Т35
Реагенты и условия: a) PhB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 12
Реагенты и условия: a) 4-BrPhNHNH2-HCl, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) NaOMe, МеОН, 55°C; с) ArB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 13
Реагенты и условия: а) ДЦК, 1,4-диоксан, кт.
- 37 047073
Схема 14
Реагенты и условия: а) 39, MgBr2-OEt2, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) бифенил-4-ил гидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 15
(4-бромфенил)гидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение,
Реагенты и условия: а)
100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ArB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 16
Реагенты и условия: а) 4-гидразинилбензойная кислота гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) NaOMe, MeOH, 55°C; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 17
Реагенты и условия: a) 4-Br-2-F-PhNHNH2-HCl, EtOH,
100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) пиридин-3 бороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, микроволновое облучение, 90°C; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
- 38 047073
Схема 18
Реагенты и условия: а) бис(пинаколато)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, 100°C; b) ArBr, K3PO4, Pd(PPhs)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 19
Реагенты и условия: a) i) 5-бром-2-гидразинилпиридин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) арилбороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; d) Br2 в CH2Cl2 (для Т56-Т59) или ДБДМГ (для Т60), ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 20
Реагенты и условия: а) ДАСТ, CH2Cl2, -78°C.
Схема 21
Реагенты и условия: а) циклопропилтрифторборат калия, K3PO4, RuPhos, толуол, вода, Pd(OAc)2, 95°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 22
Реагенты и условия: а) 2-гидразинил-5-(трифторметил)пиридин, 4Н HCl в 1,4-диоксане, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 39 047073
Схема 23
Реагенты и условия: а) 5-гидразино-2-фенилпиридина гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 24
R
Реагенты и условия: a) HCO2Et, NaOMe, МеОН, бензол, кт; b) бифенил-4-илгидразин, АсОН, EtOH, кт; с) Br2, Na2CO3, CH2Cl2, -10°C; d) арилбороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ; е) 3Н водн. HCl, МеОН, кт; f) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; g) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C; h) K2CO3, MeOH, кт; i) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 25
Реагенты и условия: а) ДАСТ, C^Ch, 0°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 26
Реагенты и условия: а) циклопропилтрифторборат калия, K3PO4, RuPhos, толуол, вода, Pd(OAc)2,
- 40 047073
125°C; b) 3Н водн. HCl, МеОН, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; d) NH2OH-HCl, АсОН, EtOH, 60°C; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 27
Реагенты и условия: а) 1-циклогексен-1-ил-бороновой кислоты сложный пинаколовый эфир, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 100°C; b) 3Н водн. HCl, МеОН, кт; с) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, кт; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; е) NH2OH-HCl, АсОН, EtOH, 60°C; f) K2CO3, МеОН, кт; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C. Схема 28
Реагенты и условия: а) морфолин, t-BuXPhosPd-G3, XPhos, NaOBut, 1,4-диоксан, 120°C; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, от кт до 50°C; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; 6Н водн. HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 29
Реагенты и условия: а) циклобутиламин (для 90а) или MeNH2-HCl (для 90b), t-BuXPhosPd-G3, XPhos, NaOBut, 1,4-диоксан, 120°C; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; d) NH2OH-HCl, 6Н водн. HCl, EtOH, 55°C; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 41 047073
Схема 30
водн. НСНО, 1,4-диоксан, 85°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с)
Реагенты и условия: а) НСО2Н, 37% ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 31
Реагенты и условия: а) 2-три-н-бутилстаннилпиридин, t-BuXPhosPd-G3,
XPhos, NaOBu’, 1,4диоксан, 150°C; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; 6Н водн. HCl, NH2OH-HC1, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 32
Реагенты и условия: а) 2-фторбензоила хлорид, MgBr2-Et2O, ДИПЭА, CH2C12, кт; b) 4-бромфенилгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) арилбороновая кислота (или арилбороновой кислоты сложный пинаколовый эфир), K3PO4 (или K2CO3), палладиевый катализатор, 1,4-диоксан/ДМФ, 90°C; е) Br2, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 33
Реагенты и условия: а) морфолин, t-BuXPhosPd-G3, XPhos, NaOBu’, 1,4-диоксан, 120°C; b) ДДХ, то луол, кт.
- 42 047073
Схема 34
Реагенты и условия: а) 12Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Реагенты и
Схема 35
бис(пинаколато)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, условия: а)
1,4-диоксан, 100°C; b) 4хлорпиримидин, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 36
Реагенты и условия: а) 4-цинофенилгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение,
120°C; b) водн. NH2OH, EtOH, 50°C; с) диметилацетамида диметилацеталь, 1,4-диоксан, 60°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) Br2, CH2Cl2, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 37
b) i) (COCl)2,
а) 50%
H2SO4,
130°C;
водн.
Реагенты и условия:
CH2Cl2, 0°С до кт; ii) N гидроксиацетамидин, Et3N, CH2Cl2, от 0°С до кт; с) Т3Р, 1,4-диоксан, 90°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) Br2, CH2Cl2, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 43 047073
Схема 38
Реагенты и условия: а) диэтилоксалат, NaH, ТГФ, 80°C; b) i) бифенил-4-илгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; ii) 3Н водн. HCl, ТГФ; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; ii) NH2OH-HCl, EtOH, 12Н водн. HCl, 55°C; d) 50% водн. H2SO4, 130°C; е) i) (COCl)2, CH2Cl2, 0°С до кт; ii) N-гидроксиацетамидин, Et3N, CH2Cl2, от 0°С до кт; f) Т3Р, 1,4-диоксан, 90°C; g) K2CO3, МеОН, кт; h) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 39
Реагенты и условия: а) 5-бром-2-гидразинилпиридин, 6Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; b) NaOMe, MeOH, 5°C; с) PhB(OH)2, K3PO4, Р6(РРЬз)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 40
Реагенты и условия: а) 12Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 41
Реагенты и условия: a) MgBr2-OEt2, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) 129, 12Н водн. HCl, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
- 44 047073
Схема 42
Реагенты и условия: а) 6Н водн. HCl, ТГФ, кт; b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°С до кт; с) HNOH-HCl, 6Н водн. HCl, EtOH, 60°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C; f) анилин, tBuXPhosPd-G3, XPhos, NaOBut, 1,4-диоксан, 120°C.
Схема 43
Реагенты и условия: а) изоникотиноилхлорида гидрохлорид, MgBr2 OEt2, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) (4бромфенил)гидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) 5фторпиридин-3-бороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 44
Реагенты и условия: а) (4-бромфенил)гидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; b) K2CO3, МеОН, кт; с) 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, Н2О, 120°C (для 147а); 5-фторпиридин-3-бороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C (для 147b); d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 45 047073
Схема 45
Реагенты и условия: a) 3-F-PhCOCl, MgBr2-OEt2, ДИПЭА, CH2Cl2 кт; b) 4-гидразинохинолина гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 100°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 46
Реагенты и условия: a) MgBr2-Et2O, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) 4-бром-фенилгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) 5-фторпиридин-3-бороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан/ДМФ, 90°C; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 47
Реагенты и условия: а) 4-цианофенилгидразин гидрохлорид, EtOH, микроволновое облучение,
120°C; b) 50% водн. H2SO4, 130°C; с) i) (COCl)2, C^Cb, от 0°С до кт; ii) N-гидроксиацетамидин, Et3N, CH2Cl2, от 0°С до кт; d) T3P, 1,4-диоксан, 90°C; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ (для Т106) или Br2 в CH2Cl2 (для Т107), ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 46 047073
Схема 48
Реагенты и условия: а) этил 2-хлор-2-оксоацетат, MgBr2 OEt2, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) 4-BrPhNHNH2-HCl, EtOH, микроволновое облучение, 120°C; с) 50% водн. H2SO4, 130°C; d) i) (COCl)2, CH2Cl2, от 0°С до кт; ii) N-гидроксиацетамидин, Et3N, CH2Cl2, от 0°С до кт; е) Т3Р, 1,4-диоксан, 90°C; f) K2CO3, МеОН, кт; g) 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин (для 167а) или пиридин-3-илбороновая кислота (для 167b), K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан/ДМФ, 90°C; h) Br2 в CH2Cl2, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 49
Реагенты и условия: a) i) (COCl)2, CH2Cl2, от 0°С до кт; ii) водн. аммиак, ТГФ, от 0°С до кт; b) ТФУА, Et3N, CH2Cl2, кт; с) i) водн. NH2OH, EtOH, 50°C; ii) диметилацетамид диметилацеталь, 1,4диоксан, 60°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)пиридазин, K3PO4, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; f) Br2 в CH2Cl2, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 50
Реагенты и условия: а) озон, CH2Cl2, -78°C; Me2S, кт; b) 2-метил-2Н-тетразол-5-амин, TsOH-H2O, бензол, рефлюкс; с) бензальдегид, NH4OAc, EtOH, 80°C; d) водн. HCl, МеОН, кт; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, бензол, кт; f) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; g) NaOMe, МеОН, кт; h) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 47 047073
Схема 51
Реагенты и условия: а) анилин, TsOH-H2O, бензол, рефлюкс; b) формальдегид, NH4OAc, EtOH, Н2О, кт; с) NBS, MeCN, от 0°C до кт; d) пиридин-4-илбороновая кислота, K2CO3, Pd(dppf))Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; е) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; f) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; g) N^OH-HCl, EtOH, 50°C; h) NaOMe, MeOH, ТГФ, кт; i) Br2 в CH2Cl2, ДМФ, 0°C; пиридин, 50°C.
Схема 52
Реагенты и условия: а) 1-циклогексен-1-ил-бороновая кислота сложный пинаколовый эфир, K2CO3, Pd(dppf))Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; с) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, кт; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; е) N^OH-HCl, EtOH, 50°C; f) NaOMe, MeOH, ТГФ, кт; g) Br2 в C^Ch, ДМФ, 0°C; пиридин, 50°C.
Схема 53
R R
hT115R = H
Реагенты и условия: a) i) арилгидразин, EtOH, НОАс, 80°C (для 195а) или микроволновое облучение 150°C (для 195b); ii) MnO2, CH2Cl2; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, от кт до 50°C; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, от 0°С до кт; 6Н водн. HCl, HNOH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, кт; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 48 047073
Схема 54
Реагенты и условия: а) гидразин, EtOH, 60°C; b) арилбороновая кислота, 3 А молекулярные сита, ацетат меди (II), пиридин, CH2Cl2, кт; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 55
Реагенты и условия: а) ДЦК, 1,4-диоксан, кт.
Схема 56
Реагенты и условия: а) 202, MgBr2-Et2O, ДИПЭА, CH2Cl2, кт; b) гидразина моногидрат, EtOH, 60°C; с) 4-бифенилбороновая кислота, 3 А молекулярные сита, ацетат меди (II), пиридин, CH2Cl2, кт; d) K2CO3, МеОН, от кт до 50°C; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 57
Реагенты и условия: а) гидразина моногидрат, EtOH, 60°C; b) арилбороновая кислота, 3 А молекулярные сита, ацетат меди (II), пиридин, CH2Cl2, кт; с) K2CO3, МеОН; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 58
Реагенты и условия: а) гидразина моногидрат, EtOH, 60°C; b) пиридин-4-бороновая кислота, 3 А молекулярные сита, ацетат меди (II), пиридин, ДМФ, 85°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 49 047073
Схема 59
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Реагенты и условия: a) Br2, Na2CO3, CH2C12, -10°C; b) арилбороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4диоксан, ДМФ, 90°C; с) 3Н водн. HC1, МеОН, кт; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; е) NH2OH-HC1, АсОН, EtOH, от 60°С до кт; f) K2CO3, МеОН, кт; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 60
Реагенты и условия: а) гидразина моногидрат, EtOH, 60°C; b) 3-бифенилбороновая кислота, 4 А молекулярные сита, ацетат меди (II), пиридин, CH2C12, кт; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 61
Реагенты и условия: а) 3-фторанилин, TsOH-H2O, бензол, рефлюкс; b) RCHO, NH4OAc, EtOH; с) водн. HC1, ТГФ, кт; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; е) NH2OH-HC1, EtOH, 50°C; f) K2CO3, МеОН, кт; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, от 50°C до кт.
- 50 047073
Схема 62
222 223g-223h 224g-224h 225g-225h
Реагенты и условия: a) RCHO, NH4OAc, EtOH, 60°C; b) водн. HCl, МеОН, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; d) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 63
Реагенты и условия: а) 37% водн. формальдегид, NH4OAc, EtOH, 60°C; b) NBS, CH3CN, от 0°С до кт; с) арилбороновая кислота, K2CO3, Pd(PPh3)4, ДМЭ, Н2О, 90°C; d) водн. HCl, ТГФ, кт; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; g) K2CO3, МеОН, кт; h) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, от 50°C до кт.
Схема 64
Реагенты и условия: а) бензилтрифторборат калия, Cs2CO3, Pd(dppf)Cl2, ТГФ, Н2О, 80°C; b) водн. HCl, МеОН, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; d) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 65
Реагенты и условия: а) арилбороновой кислоты сложный пинаколовый эфир (для 240а) или арилбо- 51 047073 роновая кислота (для 240b-240d), K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, вода, 110°C; b) водн. HCl, ТГФ, кт; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; ii) NHOH-HCl, 6 Н водн. HCl, EtOH; d) K2CO3, МеОН; е) метод А (для Т141, Т142 и Т144): ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C; или метод В (для Т143): ДДХ, толуол, кт.
Схема 66
Реагенты и условия: a) 3-Br-PhCHO, NH4OAc, EtOH, от кт до рефлюкса; b) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; с) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; 6Н водн. HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, MeOH, 55°C; e) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 67
Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 90°C; b)
Реагенты и условия: а) арилбороновая кислота, K3PO4, ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 55°C.
Схема 68
Реагенты и условия: а) 3-аминопиридин, TsOH-H2O, бензол, рефлюкс; b) водн. формальдегид, NH4OAC, EtOH, 60°C; с) NBS, MeCN, от 0°C до кт; d) арилбороновая кислота, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4диоксан, Н2О; е) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; f) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; ii) N^OH-HCl, EtOH, 60 °C; g) K2CO3, MeOH, от кт до 55°C; h) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 52 047073
Схема 69
Реагенты и условия: а) 1-метил-1Н-пиразол-4-амин, TsOH-H2O, бензол, рефлюкс; b) RCHO,
NH4OAC, EtOH, 60°C; с) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; е) NHOH-HCl, EtOH, 50°C; f) K2CO3, МеОН, кт; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, от 50°C до кт.
Схема 70
Реагенты и условия: а) водн. формальдегид, NH4OAc, EtOH, 60°C; b) NBS, MeCN, от 0°C до кт; с) (2-морфолинопиридин-4-ил)бороновая кислота, K2CO3, Pd(PPh3)4, ДМЭ, Н2О, 90°C; d) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; f) NHOH-HCl, EtOH, 50°C; g) K2CO3, МеОН, кт; h) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, от 50°C до кт.
Схема 71
Реагенты и условия: а) циклопропиламин, толуол, 45°C (для 269а); изопропиламин, толуол, 100°C (для 269b); b) 4-изопропилбензальдегид, NH4OAc, EtOH; с) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; d) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; ii) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C; e) K2CO3, MeOH, от кт до 50°C; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 53 047073
Схема 72
Реагенты и условия: a) RNH2, бензол, 80°C; b) 4-изопропилбензальдегид, NH4OAc, EtOH; с) 3Н водн. HCl, МеОН, кт; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; е) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; f) K2CO3, МеОН, кт; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 73
толуол, микроволновое облучение, 150°C; b) 4Реагенты и условия: a)
RNH2, p-TsOH-H2O, изопропилбензальдегид, NH4OAc, EtOH; с) 3Н водн. HCl, ТГФ, кт; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; е) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; f) K2CO3, МеОН, от кт до 50°C; g) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 74
Реагенты и условия: а) Н2, 10% Pd/C, EtOH, кт; b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, кт; с) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; d) K2CO3, МеОН, кт; е) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 54 047073
Схема 75
Реагенты и условия: а) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, кт; b) 3Н водн. HCl, МеОН, кт; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, кт; d) NHOH-HCl, AcOH, EtOH, от 60°C до кт; е) K2CO3, МеОН, кт; f) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 76
Реагенты и условия: a) NaOAc, Ac2O, 100°C.
Схема 77
Реагенты и условия: а) Вос-гидразид, НОАс, МеОН, кт; NaBH3CN, кт; b) HCl, i-PrOH, 45°C. Схема 78
Реагенты и условия: а) 286, n-BuOH, 110°C; b) K2CO3, МеОН, от кт до 50°C; с) ДДХ, толуол, кт. Схема 79
Реагенты и условия: а) 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин, K2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 55 047073
Схема 80
Реагенты и условия: а) 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин, K2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 81
293Ь R = Me Т179 R = Me
Реагенты и условия: а) бис(пинаколато)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, 100°C; b) арилгалид, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ; с) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 82
Реагенты и условия: a) DIBAL-H, толуол, CH2Cl2, -10°C; b) NaBH4, МеОН, от 0°С до кт; с) MsCl, Et3N, CH2Cl2, 0°C; d) BU4NF, ТГФ, CH3CN, от кт до 60°C.
Схема 83
Реагенты и условия: а) 298, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 120°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 84
Реагенты и условия: а) 298, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 120°C; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Схема 85
Реагенты и условия: а) водн. NH2OH, EtOH, 80°C; b) диметилацетамид диметилацеталь, 1,4диоксан, 60°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
- 56 047073
Схема 86
Реагенты и условия: а) K2CO3, МеОН, кт; b) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C; с) триметил ортоформиат, 60°C.
Схема 87
Реагенты и условия: а) водн. NH2OH, EtOH, 50°C;
диоксан, 60°C; с) K2CO3, МеОН, кт; d) ДБДМГ, ДМФ, 0°C; пиридин, 60°C.
Возможная схема 1
b) диметилацетамид диметилацеталь, 1,4-
- 57 047073
Реагенты и условия: а) гидридо(диметилфосфинистая кислота-kP) бис(диметилфосфинито-кР)]платина (II), Н2О.
Возможная схема 2
[водород
Реагенты и условия: a) i) HCO2Et, NaOMe; ii) NH2OH-HCl; iii) водн. HCl; b) перфторфенил пиримидин-4-карбоксилат, MgBr2-OEt2, ДИПЭА; с) (4-бромфенил)гидразин гидрохлорид; d) K2CO3; е) (5фторпиридин-3-ил)бороновая кислота, реакция сочетания Сузуки; f) ДБДМГ; Ру.
Возможная схема 3
Реагенты и условия: а) перфторфенил 4-фторбензоат, MgBr2-OEt2, ДИПЭА; b) (4бромфенил)гидразин гидрохлорид; с) K2CO3; d) 6-метилпиридазин-4-илбороновой кислоты сложный пинаколовый эфир, реакция сочетания Сузуки; е) ДБДМГ; Ру.
Возможная схема 4
Реагенты и условия: а) MOMCl, ДИПЭА; b) HCO2Et, NaOMe; с) озон; Me2S; d) 3-фторанилин; е) 3пиридин-4-ил-бензальдегид, NH4OAc; f) i) водн. HCl; ii) окисление; g) i) HCO2Et, NaOMe; ii) NH2OH-HCl; h) K2CO3; i) ДБДМГ; Py.
- 58 047073
Процедуры синтеза и характеристики Общая информация
Если не указано иное, коммерческие реагенты использовали в том виде, в котором они были получены, а все реакции проводили в атмосфере азота. Все растворители имели степень чистоты по стандарту ВЭЖХ или ACS. Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали на спектрометре Varian Inova- 400 при рабочих частотах 400 МГц (1H ЯМР) или 100 МГц (13С ЯМР). Химические сдвиги (δ) приведены в м.д. относительно остаточного растворителя (обычно хлороформа δ 7,26 м.д. для 1Н ЯМР) и констант связи (J) в Гц. Мультиплетность обозначена следующим образом: с для синглета, д для дублета, т для триплета, к для квадруплета и м для мультиплета. Масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре Waters Micromass ZQ или Agilent 6120.
Соединение 2: В перемешиваемый раствор соединения 1 (5,0 г, 25,47 ммоль) в этилформиате (62 мл, 0,76 моль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 43,7 мл, 190,97 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. HCl (6Н, 31,84 мл, 191,04 ммоль) для доведения рН < 7. Смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин, а затем экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOH (250 мл) и воде (25 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (2,6 г, 37,42 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. После концентрации остаток экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 2 (4,0 мг, выход 71%) в виде белого твердого вещества. m/z=222 (M+1).
Соединение 3: Раствор соединения 2 (4,0 г, 18,08 ммоль) в ацетоне (90 мл) охлаждали до 0°С и по каплям обрабатывали реагентом Джонса до сохранения оранжевого цвета. Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли i-PrOH, пока реакционная смесь не становилась зеленой. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали смесь водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 3 (3,78 г, выход 95%) в виде белого твердого вещества. m/z=220 (M+1).
Соединение 4: Соединение 3 (246 мг, 1,12 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (12 мл). Последовательно добавляли этилэфират бромида магния (738 мг, 2,86 ммоль) и N.N-диизопропилэтиламин (0,597 мл, 3,42 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и добавляли бензоилхлорид (0,173 мл, 1,49 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и добавляли насыщ. водн. NaH2PO4 (5 мл). Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения 4 (400 мг, количественный выход) в виде твердого вещества, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=324 (М+1).
Соединение 5 и соединение 6:
Реакция А: Соединение 4 (100 мг, 0,31 ммоль) и циклогексилгидразина гидрохлорид (100 мг, 0,66 ммоль) в EtOH (1 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 5 ч. Реакция В: Соединение 4 (16 мг, 0,049 ммоль) и циклогексилгидразина гидрохлорид (15 мг, 0,10 ммоль) в EtOH (0,5 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 5 ч. Реакционную смесь из реакций А и В объединяли и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% EtOAc в гексанах) с получением соединения 5 (50 мг, выход 35%) и соединения 6 (15 мг, выход 10%) в виде белого твердого вещества. Соединение 5: m/z=402 (M+1); соединение 6: m/z=402 (M+1).
Соединение 7: Соединение 5 (48 мг, 0,12 ммоль) растворяли в МеОН (1,2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 42 мкл, 0,18 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc, после этого - 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% ацетоном в гексанах) с получением соединения 7 (38 мг, выход 79%) в виде белого твердого вещества. m/z=402 (М+1).
Т1: Соединение 7 (38 мг, 0,095 ммоль) растворяли в толуоле (1 мл). Добавляли ДДХ (24 мг, 0,11 ммоль). Смесь нагревали при 85°С в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили CH2Cl2 и насыщ. водн. NaHCO3 и перемешивали в течение 5 мин. Органическую фазу отделяли, а водную фазу три раза экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т1 (15 мг, выход 31%) в виде желтого твердого вещества. m/z=400 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 8,57 (с, 1H), 7,45 (м, 3H), 7,27 (м, 2Н), 3,98 (тт, J=3,9, 11,5 Гц, 1H), 2,55 (м, 3H), 2,13 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 1,84 (м, 9Н), 1,46 (с, 3H), 1,29 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,26 (м, 3H).
- 59 047073
Соединение 8: Соединение 8 (белое твердое вещество, 10 мг, выход 67%) синтезировали из соединения 6 (15 мг, 0,037 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 7. m/z=402 (M+1).
Т2: Соединение 8 (10 мг, 0,025 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,25 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (3,6 мг, 0,013 ммоль) в ДМФ (0,1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (10 мкл, 0,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 020% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т2 (5 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества. m/z=400 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,13 (с, 1H), 7,67 (м, 2Н), 7,39 (м, 2Н), 7,30 (м, 1H), 4,00 (тт, J=3,8, 11,4 Гц, 1H), 2,81 (ддд, J=2,0, 6,0, 16,0 Гц, 1H), 2,74 (м, 1H), 2,65 (кд, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 2,24 (м, 3H), 2,00 (м, 5Н), 1,79 (м, 1H), 1,62 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,45 (м, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 9: Смесь соединения 4 (100 мг, 0,25 ммоль), (2,2,2-трифторэтил)гидразина (70 мас.% в Н2О, 62 мкл, 0,49 ммоль) и 12Н водн. HCl (40 мкл, 0,048 ммоль) в EtOH (2,5 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-20% ацетоном в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-10% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 9 (48 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества. m/z=402 (М+1).
Соединение 10: Соединение 10 (белое твердое вещество) синтезировали из соединения 9 (45 мг, 0,11 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 7; m/z=402 (M+1).
T3: Соединение T3 (светло-желтое твердое вещество, 6 мг, выход 13% из соединения 9) синтезировали из соединения 10 (все с последнего этапа, < 0,11 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения T1. m/z=400 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,17 (с, 1H), 7,67 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 4,84 (дк, J=2,2, 7,7 Гц, 2Н), 2,84 (ддд, J=1,9, 6,0, 16,0 Гц, 1H), 2,77 (м, 1H), 2,64 (тд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,10 (м, 1H), 1,67 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 11 и соединение 12:
Реакция А: Соединение 4 (108 мг, 0,33 ммоль) и бензилгидразина дигидрохлорид (130 мг, 0,67 ммоль) в EtOH (2,7 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 4 ч. Реакция В: Соединение 4 (80 мг, 0,25 ммоль) и бензилгидразина дигидрохлорид (97 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 4 ч. Реакционную смесь из реакций А и В объединяли и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 11 (68 мг, выход 29%) и соединения 12 (65 мг, выход 27%) в виде белого твердого вещества. Соединение 11: m/z=410 (M+1); соединение 12: m/z=410 (M+1).
Соединение 13: Соединение 11 (68 мг, 0,17 ммоль) растворяли в МеОН (2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 57 мкл, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и 10% водн. NaH2PO4. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 13 (65 мг, выход 96%) в виде желтого твердого вещества. m/z=410 (М+1).
Т4: Соединение 13 (68 мг, 0,17 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (2 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (24 мг, 0,084 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (60 мкл, 0,74 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 2 ч и при 40°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т4 (35 мг, выход 52%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=408 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,54 (с, 1H), 7,40 (м, 3H), 7,27 (м, 3H), 7,21 (м, 2Н), 7,00 (м, 2Н), 5,27 (д, J=15,6 Гц, 1H), 5,22 (д, J=16,0 Гц, 1H), 2,60 (м, 3H), 2,17 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,01 (м, 1H), 1,74 (м, 1H), 1,50 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 14: Соединение 14 (65 мг, количественный выход) синтезировали из соединения 12 (65 мг, 0,16 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 13. m/z=410 (M+1).
Т5: Соединение Т5 (31 мг, выход 48%) синтезировали из соединения 14 (65 мг, 0,16 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т4. m/z=408 (M+1); 8,05 (с, 1H), 7,72 (м, 2Н), 7,43 (м, 2Н), 7,35 (м, 4Н), 7,09 (м, 2Н), 5,73 (д, J=16,8 Гц, 1H), 5,44 (д, J=16,8 Гц, 1H), 2,85 (м, 2Н), 2,57 (кд, J=6,8,
- 60 047073
13,5 Гц, 1H), 2,25 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,09 (м, 1H), 1,67 (м, 1H), 1,46 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 15а: Смесь соединения 4 (43 мг, 0,13 ммоль), (4-(трифторметил)фенил)гидразина (47 мг, 0,27 ммоль) и 12Н водн. HCl (22 мкл, 0,26 ммоль) в EtOH (1,2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 15а (37 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества. m/z=464 (M+1).
Соединение 16а: Соединение 15а (35 мг, 0,076 ммоль) растворяли в МеОН (1,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 26 мкл, 0,11 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc, после этого - 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 16а (26 мг, выход 74%) в виде белого твердого вещества. m/z=464 (М+1).
Т6: Соединение 16а (26 мг, 0,056 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,36 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (8 мг, 0,028 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (14 мкл, 0,17 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 030% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т6 (12 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества. m/z=462 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,88 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 7,70 (м, 4Н), 7,50 (с, 1H), 7,42 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,88 (ддд, J=6,5, 11,4, 16,3 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,5, 13,8 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15b: Соединение 4 (82 мг, 0,25 ммоль) и 4-гидразинилпиридина гидрохлорид (74 мг, 0,51 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 1 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% ацетоном в гексанах) с получением соединения 15b (51 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества. m/z=397 (M+1).
Соединение 16b: Соединение 15b (48 мг, 0,12 ммоль) растворяли в МеОН (1,2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 42 мкл, 0,18 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc, после этого - 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения 16b в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали на следующем этапе без очистки. m/z=397 (M+1).
Т7: Соединение Т7 синтезировали из соединения 16b (56 мг, 0,14 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза Т6. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (С18, элюирование 10-80% ацетонитрилом в воде) с получением соединения Т7 (10 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества. m/z=395 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,89 (м, 2Н), 7,71 (м, 2Н), 7,56 (с, 1H), 7,51 (м, 2Н), 7,43 (м, 2Н), 7,37 (м, 1H), 2,98 (ддд, J=1,5, 6,4, 16,4 Гц, 1H), 2,88 (ддд, J=6,7, 11,5, 16,3 Гц, 1H), 2,58 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,22 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,68 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,6 Гц, 3H).
Соединение 15с: Реакция А: Смесь соединения 4 (230 мг, 0,71 ммоль), 4-гидразинилхинолина (191 мг, 1,20 ммоль) и 12Н водн. HCl (0,12 мкл, 0,26 ммоль) в EtOH (7 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакция В: Смесь соединения 4 (53 мг, 0,16 ммоль), 4-гидразинилхинолина (52 мг, 0,33 ммоль) и 12Н водн. HCl (27 мкл, 0,32 ммоль) в EtOH (1,6 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 110°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Две реакционные смеси объединяли и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3 и водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 15с (38 мг, выход 10%) в виде белого твердого вещества. m/z=464 (M+1).
Соединение 16с: Соединение 16с синтезировали из соединения 15с (65 мг, 0,16 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 16b; m/z=447 (M+1).
Т8: Соединение 16с (35 мг, 0.078 ммоль) растворяли в бензоле (0,8 мл). Добавляли ДДХ (21 мг, 0,093 ммоль). Смесь нагревали при рефлюксе в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили CH2Cl2 и насыщ. водн. NaHCO3 и перемешивали в течение 5 мин. Органическую фазу отделяли, а водную фазу три раза экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии
- 61 047073 (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т8 (30 мг, выход 86%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=445 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,17 (шир. с, 1H), 8,29 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,85 (м, 1H), 7,74 (м, 2Н), 7,61 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 7,43 (м, 2Н), 7,37 (м, 1H), 7,30 (м, 1H), 6,94 (м, 1H), 3,02 (м, 2Н), 2,53 (тд, J=6,8, 13,1 Гц, 1H), 2,35 (дд, J=11,7, 13,7 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=6,1, 13,7 Гц, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15d: Соединение 4 (129 мг, 0,40 ммоль) и (2-фторфенил)гидразина гидрохлорид (130 мг, 0,80 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали, а остаток разводили CH2Cl2. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органическую фазу отделяли. Водную фазу дважды экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 15d (155 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества. m/z=414 (M+1).
Соединение 16d: Смесь соединения 15d (153 мг, 0,37 ммоль) и K2CO3 (153 мг, 0,37 ммоль) в МеОН (3,6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растирали с МТБЭ при рефлюксе и охлаждали до комнатной температуры. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали МТБЭ и сушили на воздухе с получением соединения 16d (87 мг, выход 57%) в виде белого твердого вещества. m/z=414 (M+1).
Т9: Соединение 16d (85 мг, 0,21 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1,42 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (29 мг, 0,10 ммоль) в ДМФ (0,58 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (50 мкл, 0,62 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 5,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т9 (59 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества. m/z=412 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,71 (м, 2Н), 7,60 (м, 3H), 7,38 (м, 5Н), 2,96 (ддд, J=1,7, 6,3, 16,1 Гц, 1H), 2,88 (м, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,32 (шир. т, J=12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,1, 13,8 Гц, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,6 Гц, 3H).
Соединение 16е: Смесь соединения 4 (100 мг, 0,309 ммоль), фенилгидразина (61 мкл, 0,618 ммоль) и 10,1Н водн. HCl (61 мкл, 0,618 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения 15е (130 мг, количественный выход) в виде стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=396 (M+1).
Соединение 15е: Смесь соединения 15е (125 мг, 0,316 ммоль) и карбоната калия (87 мг, 0,632 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 16е (69 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества. m/z=396 (М+1);
T11: Раствор соединения 16е (63 мг, 0,159 ммоль) в безводном ДМФ (3,0 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (25 мг, 0,087 ммоль) в безводном ДМФ (1,0 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли безводный пиридин (0,128 мл, 1,59 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т11 (33 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества. m/z=394 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,73 (м, 2Н), 7,59 (м, 3H), 7,51 (м, 3H), 7,41 (м, 2Н), 7,34 (м, 1H), 2,98 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,2 Гц, 1H), 2,88 (ддд, J=6,5, 11,4, 16,1 Гц, 1H), 2,54 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,14 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,57 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15f: Соединение 15f (оранжевое стекло, 133 мг, количественный выход) синтезировали из соединения 4 (100 мг, 0,309 ммоль) и 4-хлорфенилгидразина гидрохлорида (111 мг, 0,618 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 15d. Реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 3 ч. Соединение 15f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах). m/z=430 и 432 (М+1).
Соединение 16f: Соединение 16f (оранжевое стекло, 67 мг, выход 52%) синтезировали из соединения 15f (130 мг, 0,302 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 16е. Реакцион
- 62 047073 ную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 27 ч. Соединение 16f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=430 и 432 (М+1).
Т13: Соединение Т13 (желтое твердое вещество, 44 мг, выход 68%) синтезировали из соединения 16f (65 мг, 0,151 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения T11. T13 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах). m/z=428 & 430 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,70 (м, 2Н), 7,57 (м, 3H), 7,44 (м, 4Н), 7,35 (м, 1H), 2,96 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,2 Гц, 1H), 2,87 (ддд, J=6,4, 11,4, 16,2 Гц, 1H), 2,55 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H),2,14 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15g: Соединение 15g (стекло, 139 мг, выход 80%) синтезировали из соединения 4 (121 мг, 0,374 ммоль) и 3,4-дихлорфенилгидразина гидрохлорида (159 мг, 0,748 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 15d. Реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 3 ч. Соединение 15g очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах). m/z=464 и 466 (М+1).
Соединение 16g: Соединение 16g (стекло, 105 мг, выход 76%) синтезировали из соединения 15g (138 мг, 0,297 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 16е. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Соединение 16g очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=464 и 466 (М+1).
Т10: Соединение Т10 синтезировали из соединения 16g (104 мг, 0,223 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т11. Неочищенный продукт очищали путем растирания с МеОН. Полученное твердое вещество растирали при рефлюксе с 50% водн. МеОН. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения Т10 (37 мг, выход 36%) в виде белого твердого вещества. m/z=462 и 464 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,69 (м, 3H), 7,66 (м, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,40 (м, 4Н), 2,96 (ддд, J=1,5, 6,3, 16,1 Гц, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,26 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15h: Соединение 15h (стекло, 120 мг, выход 95%) синтезировали из соединения 4 (100 мг, 0,309 ммоль) и 4-метилфенилгидразина гидрохлорида (98 мг, 0,618 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 15d. Реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 3 ч. Соединение 15h очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах). m/z=410 (М+1).
Соединение 16h: Соединение 16h (стекло, 94 мг, выход 79%) синтезировали из соединения 15h (119 мг, 0,290 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 16е. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Соединение 16h очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах). m/z=410 (М+1).
Т12: Соединение Т12 (желтое твердое вещество, 24 мг, выход 26%) синтезировали из соединения 16h (94 мг, 0,229 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения T11. T12 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах). m/z=40% (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (м, 2Н), 7,60 (с, 1H), 7,39 (м, 7Н), 2,96 (м, 1H), 2,88 (м, 1H), 2,54 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,27 (тд, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,14 (дд, J=6,3, 13,8 Гц, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 15i: Смесь соединения 4 (100 мг, 0,309 ммоль) м 4-метоксифенилгидразина гидрохлорида (108 мг, 0,618 ммоль) в EtOH (2,0 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 3 ч, а после этого - при 130°C в течение дополнительного 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры остаток разделяли между EtOAc и 1,0Н водн. HCl. Органическую фазу сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 15i (40 мг, 30%) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=426 (M+1).
Соединение 16i: Соединение 16i (желтое стекло, 60 мг, выход 61%) синтезировали из соединения 15i (98 мг, 0,230 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 16е. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч. Соединение 16i очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=426 (M+1).
Т14: Соединение Т14 синтезировали из соединения 16i (59 мг, 0,138 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т11. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), с последующим растиранием с МеОН с получением соединения Т14 (14 мг, выход 24%) в виде желтого твердого вещества. m/z=424 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (м, 2Н), 7,63 (с, 1H), 7,41 (м, 4Н), 7,33 (м, 1H), 7,06 (м, 2Н), 3,91 (с, 3H), 2,96 (м, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,54 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,26 (м, 1H), 2,14 (дд, J=6,4, 13,9 Гц, 1H), 1,78 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 19: В перемешиваемый раствор соединения 17 (Coltart and Danishefsky, 2003, 2,19 г, 9,77 ммоль) в этилформиате (23 мл, 285,95 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 35 мл, 152,95 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в те
- 63 047073 чение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. HCl (6 Н, 20 мл, 120 ммоль) для доведения рН < 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток смешивали с гидроксиламина гидрохлоридом (910 мг, 13,10 ммоль), EtOH (80 мл) и водой (8 мл). Смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. После концентрации остаток экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в гексанах) с получением соединения 18 (453 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества. m/z=250 (M+1). Из колонки соединение 19 (736 мг, выход 37%) получали в виде бесцветного масла. m/z=206 (M+1).
Соединение 20: Соединение 19 (520 мг, 2,53 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (25 мл). Последовательно добавляли этилэфират бромида магния (1,60 г, 6,20 ммоль) и N.N-диизопропилэтиламин (1,32 мл, 7,56 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и добавляли бензоилхлорид (0,382 мл, 3,29 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, дефлегмировали в течение ночи и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли насыщ. водн. NaHCO3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 20 (560 мг, выход 71%) в виде оранжевого масла. m/z=310 (M+1).
Соединение 21а: Смесь соединения 20 (200 мг, 0,65 ммоль), (4-цианофенил)гидразина гидрохлорида (219 мг, 1,29 ммоль) и 12Н HCl (60 мкл, 0,72 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали, а остаток разводили EtOAc и промывали смесь водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток дважды очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 21а (110 мг, выход 42%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=407 (M+1).
Соединение 22а: Соединение 21а (110 мг, 0,27 ммоль) растворяли в МеОН (4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 93 мкл, 0,41 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 65% EtOAc в гексанах) с получением соединения 22а (55 мг, выход 50%) в виде желтого твердого вещества. m/z=407 (M+1).
Т15: Раствор соединения 22а (55 мг, 0,14 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (19,3 мг, 0,067 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли безводный пиридин (60 мкл, 0,74 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток дважды очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т15 (21 мг, выход 38%) в виде желтого твердого вещества. m/z=405 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,92 (м, 2Н), 7,69 (м, 4Н), 7,47 (с, 1H), 7,41 (м, 3H), 2,92 (м, 2Н), 2,65 (м, 3H), 1,89 (м, 2Н), 1,59 (с, 3H).
Соединение 21b: Смесь соединения 20 (117 мг, 0,38 ммоль), (4-фторфенил)гидразина гидрохлорида (123 мг, 0,76 ммоль) и 12Н HCl (40 мкл, 0,48 ммоль) в EtOH (2,5 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 3 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали, а остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 21b (35 мг, выход 23%) в виде белого твердого вещества. m/z=400 (M+1).
Соединение 22b: Соединение 21b (35 мг, 0,088 ммоль) растворяли в МеОН (2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 30 мкл, 0,13 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc, после этого - 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток дважды очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 22b (12 мг, выход 34%). m/z=400 (M+1).
Т16: Раствор соединения 22b (12 мг, 0,030 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (4,4 мг, 0,015 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли безводный пиридин (10 мкл, 0,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты суши
- 64 047073 ли Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т16 (содержит 11% 1,2эпоксида, 4,9 мг, выход 41%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=398 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,71 (м, 2Н), 7,55 (с, 1H), 7,52 (м, 2Н), 7,36 (м, 5Н), 2,91 (м, 2Н), 2,64 (м, 3H), 1,82 (м, 2Н), 1,53 (с, 3H).
Соединения 23а и 24а: Соединение 4 (180 мг, 0,56 ммоль) и о-толилгидразина гидрохлорид (180 мг, 1,13 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 1 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили МТБЭ. Смесь промывали 1Н водн. HCl, 1Н водн. NaOH и водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 23а (199 мг, выход 87%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=410 (M+1). Из колонки также получают соединение 24а (13 мг, выход 6%). m/z=410 (M+1).
Соединение 25а: Смесь соединения 23а (111 мг, 0,27 ммоль) и K2CO3 (112 мг, 0,81 ммоль) в МеОН (2,8 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растирали с МТБЭ при рефлюксе, охлаждали до комнатной температуры и держали при комнатной температуре в течение 2 ч. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили на воздухе с получением соединения 25а (80 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. m/z=410 (M+1).
Т17: Соединение 25а (77 мг, 0,19 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (27 мг, 0,094 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч.
Добавляли пиридин (45 мкл, 0,56 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 5,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1 Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т17 (48 мг, выход 63%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=408 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ~3/1 смесь атропизомеров. Основной изомер: 7,73 (м, 2Н), 7,31-7,51 (м, 7Н), 7,22 (с, 1H), 2,863,01 (м, 2Н), 2,51 (кд, 1H, J=6,4, 13,2 Гц), 2,30 (дт, 1H, J=1,6, 12,8 Гц), 2,15 (дд, 1H, J=6,4, 14,0 Гц), 2,03 (с, 3H), 1,80 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,32 (д, 3H, J=6,8 Гц).
Соединение 26а: Соединение 24а (28 мг, 0,068 ммоль) растворяли в МеОН (0,7 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 31 мкл, 0,14 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (10 мл) для доведения рН < 7. Смесь экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в гексанах) с получением соединения 26а (24 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества. m/z=410 (M+1).
Т18: Соединение 26а (24 мг, 0,059 ммоль) растворяли в толуоле (0,6 мл). Добавляли ДДХ (15 мг, 0,066 ммоль). Смесь нагревали при 85°С в течение 2,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили CH2Cl2 (10 мл) и насыщ. водн. NaHCO3 (10 мл) и перемешивали в течение 5 мин. Органическую фазу отделяли, а водную фазу три раза экстрагировали CH2Cl2 (3x10 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т18 (10,8 мг, выход 45%) в виде желтого твердого вещества. m/z=408 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,56 (с, 1H), 7,23 (м, 7Н), 7,08 (м, 2Н), 2,78 (м, 2Н), 2,60 (м, 1H), 2,25 (м, 1H), 2,10 (дд, J=6,3, 13,2 Гц, 1H), 1,99 (с, 3H), 1,81 (кд, J=6,6, 12,6 Гц, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,34 (дд, J=1,2, 6,8 Гц, 3H).
Соединения 23b и 24b: Соединения 23b и 24b (131 мг, выход 67%) синтезировали из соединения 4 (129 мг, 0,40 ммоль) и 4-(трифторметокси)фенилгидразина гидрохлорида (100 мг, 0,44 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединений 23а и 24а. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением смеси соединений 23b и 24b. m/z=480 (М+1).
Соединения 25b и 26b: Смесь соединений 23b и 24b (129 мг, 0,27 ммоль) и K2CO3 (111 мг, 0,80 ммоль) в МеОН (2,8 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 030% ацетоном в гексанах) с получением соединений 25b (100 мг, выход 78%) и 26b (14 мг, выход 11%).
Соединение 25b: белое твердое вещество; m/z=480 (М+1); Соединение 26b: белое твердое вещество; m/z=480 (M+1).
Т19: Соединение Т19 синтезировали из соединения 25b (98 мг, 0,20 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т17. Неочищенный продукт дважды очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т19 (78
- 65 047073 мг, выход 80%) в виде белого твердого вещества. m/z=478 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 7,70 (м, 2Н), 7,57 (м, 2Н), 7,51 (с, 1H), 7,43 (м, 4Н), 7,36 (м, 1H), 2,97 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,1 Гц, 1H), 2,88 (ддд, J=6,4, 11,4, 16,2 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (м, 1H), 1,80 (тдд, J=6,3, 12,1, 18,9 Гц, 1H), 1,58 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Т20: Соединение 26b (14 мг, 0,029 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (4,2 мг, 0,015 ммоль) в ДМФ (0,21 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (10 мкл, 0,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl (10 мл) и водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т20 (10,1 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. m/z=478 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,55 (с, 1H), 7,36 (м, 3H), 7,28 (м, 2Н), 7,16 (м, 4Н), 2,77 (м, 1H), 2,63 (м, 2Н), 2,18 (дт, J=2,3, 12,7 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединения 23с и 24с: Соединения 23с и 24с синтезировали из соединения 4 (129 мг, 0,40 ммоль) и бифенил-4-ил-гидразина гидрохлорида (176 мг, 0,80 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединений 23а и 24а. Реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 2 ч, а после этого - при 120°С в течение 3 ч. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением ~9/1 смеси соединений 23с и 24с (97 мг, выход 52%) в виде желтого твердого вещества. Соединение 23с: m/z=472 (М+1); Соединение 24с: m/z=472 (М+1).
Соединения 25с и 26с: Смесь соединений 23с и 24с (95 мг, 0,20 ммоль) и K2CO3 (84 мг, 0,61 ммоль) в МеОН (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 030% ацетоном в гексанах) с получением соединения 25с (56 мг, выход 59%) и соединения 26с (10 мг, выход 11%). Соединение 25с: белое твердое вещество; m/z=472 (М+1);
Соединение 26с: белое твердое вещество; m/z=472 (М+1).
Т21: Соединение 25с (54 мг, 0,11 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,57 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (16 мг, 0,056 ммоль) в ДМФ (0,57 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч.
Добавляли пиридин (28 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 5,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1 Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах). Полученный продукт перекристаллизовывали из EtOAc и гексанов с получением соединения Т21 (34 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества. m/z=470 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,67 (м, 3H), 7,58 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,42 (м, 3H), 7,35 (м, 1H), 2,99 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,4 Гц, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,9 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Т22: Соединение 26с (10 мг, 0,021 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (3,0 мг, 0,010 ммоль) в ДМФ (0,1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (10 мкл, 0,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1 Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 018% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т22 (8,4 мг, выход 84%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=470 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (с, 1H), 7,56 (м, 4Н), 7,43 (м, 2Н), 7,34 (м, 6Н), 7,21 (м, 2Н), 2,80 (м, 1H), 2,65 (м, 2Н), 2,20 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,09 (дд, J=7,1, 13,7 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединения 23d и 24d: Соединение 4 (200 мг, 0,62 ммоль) и 1-нафтилгидразина гидрохлорид (240 мг, 1,23 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl (10 мл) и водой (2x10 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением смеси соединений 23d и 24d (270 мг, выход 98%) в виде розового твердого вещества. Соединения 23d и 24d: m/z=446 (М+1).
Соединения 25d и 26d: Смесь соединений 23d и 24d (270 мг, 0,61 ммоль) и K2CO3 (418 мг, 3,02 ммоль) в МеОН (6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (15 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин и экстрагировали EtOAc (20 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоноч
- 66 047073 ной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах) с получением соединения 25d (110 мг, выход 41%) в виде розового твердого вещества. Смешанные фракции объединяли и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах) с получением соединения 26d (15 мг, выход 6%) в виде белого твердого вещества. Соединение 25d: m/z=446 (М+1); соединение 26d: m/z=446 (М+1).
Т23: Т23 (белое твердое вещество, 80 мг, выход 73%) синтезировали из соединения 25d (109 мг, 0,25 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т21. Соединение Т23 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах). m/z=444 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЛ, 2:1 смесь атропизомеров) δ [8,28 (д, J=8,4 Гц), 8,27 (д, J=8,4 Гц); 2:1; 1H], [8,17 (д, J=8,4 Гц), 8,14 (д, J=8,4 Гц); 2:1; 1H], [8,02 (д, J=7,2 Гц), 7,92 (д, J=7,3 Гц); 1:2; 1H], 5,70 (м, 5Н), 7,44 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), [7,02 (д, J=8,5 Гц), 6,99 (д, J=8,4 Гц); 1:2; 1H], 6,66 (с, 1H), 2,94 (м, 2Н), 2,67 (тт, J=6,8, 13,9 Гц, 1H), 2,39 (м, 1H), 2,06 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), [1,56 (с), 1,10 (с); 2:1; 3H], [1,18 (д, J=7,2 Гц), 1,16 (д, J=6,8 Гц); 1:2; 3H].
Т24: Т24 (белое твердое вещество, 9 мг, выход 65%) синтезировали из соединения 26d (14 мг, 0,31 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т21. Соединение Т24 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах). m/z=444 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,58 (с, 1H), 7,89 (м, 2Н), 7,62 (м, 1H), 7,52 (м, 2Н), 7,38 (м, 1H), 7,24 (м, 1H), 7,15 (м, 3H), 7,04 (м, 2Н), 2,84 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,2, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,0, 13,7 Гц, 1H), 1,87 (дк, J=6,9, 12,6 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединения 23е и 24е: Соединения 23е и 24е (~6/1 смесь, коричневое твердое вещество, 256 мг, выход 95%) синтезировали из соединения 4 (200 мг, 0,62 ммоль) и 4-изопропилфенилгидразина гидрохлорида (230 мг, 1,18 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединений 23d и 24d. Соединения 23е и 24е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах). Соединение 23е m/z=438 (M+1); соединение 24е: m/z=438 (M+1).
Соединения 25е и 26е: Соединения 23е и 24е (256 мг, 0,59 ммоль) растворяли в МеОН (2,9 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 267 мкл, 1,17 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 для доведения рН < 7. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% ацетоном в гексанах) с получением соединения 25е (176 мг, выход 69%) в виде белого твердого вещества. Смешанные фракции объединяли и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% ацетоном в гексанах) с получением соединения 26е (31 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества. Соединение 25е: m/z=43% (M+1); соединение 26е: m/z=43% (M+1).
Т25: Соединение 25е (176 мг, 0,40 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (57 мг, 0,20 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (162 мкл, 2,01 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (1 мл). Добавляли EtOAc (3 мл). Смесь нагревали до рефлюкса, чтобы дать растворителю испариться. Когда объем уменьшался до ~ 1 мл, смесь охлаждали до комнатной температуры и держали в течение 2 ч. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали EtOAc и сушили в вакууме с получением соединения Т25 (110 мг, выход 63%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=436 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,73 (м, 2Н), 7,55 (с, 1H), 7,41 (м, 6Н), 7,34 (м, 1H), 3,05 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,97 (ддд, J=1,6, 6,4, 16,1 Гц, 1H), 2,88 (ддд, J=6,4, 11,4, 16,1 Гц, 1H), 2,53 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,13 (ддд, J=3,3, 5,3, 10,3 Гц, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,57 (м, 3H), 1,32 (д, J=7,1 Гц, 6Н), 1,31 (д, J=7,1 Гц, 3H).
Т26: Соединение 26е (31 мг, 0,071 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (10 мг, 0,035 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (29 мкл, 0,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1 Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т26 (25 мг, выход 81%) в виде желтого твердого вещества. m/z=436 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,32 (м, 3H), 7,17 (м, 6Н), 2,89 (гепт, J=6,9, 1H), 2,78 (ддд, J=1,4, 6,6, 16,4 Гц, 1H), 2,64 (м, 2Н), 2,19 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,22 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединения 23f и 24f: Реакция А: Соединение 4 (100 мг, 0,31 ммоль) и оксан-4-илгидразина дигидрохлорид (117 мг, 0,63 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 2,5 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакция В: Соединение 4 (100 мг, 0,31 ммоль) и оксан-4-илгидразина дигидрохлорид (117 мг, 1,13 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микровол
- 67 047073 новом устройстве Biotage при 120°С в течение 5 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Две реакционные смеси объединяли и разделяли между CH2Cl2 (20 мл) и водой (20 мл). Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали CH2Cl2 (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 23f (78 мг, выход 31%) и соединения 24f (81 мг, выход 32%). Соединение 23f: белое твердое вещество; m/z=404 (М+1); Соединение 24f: белое твердое вещество; m/z=404 (М+1).
Соединение 25f: Соединение 23f (76 мг, 0,19 ммоль) и K2CO3 (78 мг, 0,56 ммоль) в МеОН (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (1 мл) при рефлюксе, после чего охлаждали до комнатной температуры. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали EtOAc и сушили в вакууме с получением соединения 25f (52 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества. m/z=404 (М+1).
Т27: Соединение 25f (51 мг, 0,13 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (18 мг, 0,063 ммоль) в ДМФ (0,6 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (51 мкл, 0,62 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1 Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т27 (46 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества. m/z=402 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,10 (с, 1H), 7,68 (м, 2Н), 7,40 (м, 2Н), 7,32 (м, 1H), 4,23 (м, 3H), 3,63 (дт, J=2,2, 12,2 Гц, 1H), 3,56 (дт, J=2,2, 12,2 Гц, 1H), 2,73 (м, 5Н), 2,26 (дт, J=1,9, 12,6 Гц, 1H), 2,03 (м, 2Н), 1,83 (ддд, J=2,2, 4,3, 13,3 Гц, 1H), 1,63 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 26f: Соединение 26f (белое твердое вещество, 72 мг, выход 91%) синтезировали из соединения 24f (79 мг, 0,20 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 25f. Соединение 26f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах). m/z=404 (M+1).
Т28: Соединение Т28 (белое твердое вещество, 42 мг, выход 53%) синтезировали из соединения 26f (79 мг, 0,20 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т27. Соединение Т28 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах). m/z=402 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,55 (с, 1H), 7,46 (м, 3H), 7,27 (м, 2Н), 4,21 (тт, J=4,2, 11,4 Гц, 1H), 4,05 (м, 2Н), 3,37 (дтд, J=2,2, 12,0, 14,1 Гц, 2Н), 2,53 (м, 3H), 2,36 (пд, J=4,7, 12,0 Гц, 2Н), 2,12 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 1,99 (дд, J=6,5, 13,6 Гц, 1H), 1,75 (м, 3H), 1,46 (с, 3H), 1,29 (д, J=6,6 Гц, 3H).
Соединения 27 и 28: Реакция А: Соединение 4 (100 мг, 0,31 ммоль) и 3гидразинилтетрагидротиофен 1,1-диоксид дигидрохлорид (115 мг, 1,62 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 3 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакция В: Соединение 4 (100 мг, 0,31 ммоль) и 3-гидразинилтетрагидротиофен 1,1-диоксид дигидрохлорид (115 мг, 1,62 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 5 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Две реакционные смеси объединяли и разделяли между CH2Cl2 (20 мл) и водой (20 мл). Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали CH2Cl2 (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 27 (94 мг, выход 35%) и соединения 28 (89 мг, выход 33%). Соединение 27: белое твердое вещество; m/z=43% (М+1); Соединение 28: белое твердое вещество; m/z=438 (М+1).
Соединение 29: Смесь соединения 27 (92 мг, 0,21 ммоль) и K2CO3 (78 мг, 0,63 ммоль) в МеОН (2 мл) и ТГФ (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (15 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл).
Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 29 (69 мг, выход 75%) в виде белого твердого вещества. m/z=438 (М+1).
Т29: Соединение 29 (69 мг, 0,16 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,4 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (23 мг, 0,080 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (64 мкл, 0,79 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 060% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т29 (34 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества. m/z=436 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCN) δ 8,33 (с, 1H), 7,72 (м, 2Н), 7,44 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 5,38 (кд, J=6,6, 8,9 Гц, 1H), 3,82 (м, 1H), 3,62 (м, 2Н), 3,19 (дддд, J=0,9, 7,0, 7,9, 13,0 Гц, 1H), 2,75 (м, 3H), 2,60
- 68 047073 (м, 2Н), 2,28 (дт, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,04 (м, 1H), 1,65 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,29 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 30: Смесь соединения 28 (80 мг, 0,18 ммоль) и K2CO3 (80 мг, 0,58 ммоль) в МеОН (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 30 (65 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества. m/z=438 (М+1).
T30: Соединение 30 (65 мг, 0,15 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,75 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (22 мг, 0,077 ммоль) в ДМФ (0,75 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (60 мкл, 0,74 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 060% EtOAc в гексанах) с получением соединения T30 (31 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества. m/z=436 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,05 (с, 1H), 7,67 (м, 2Н), 7,43 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 5,15 (пент, J=7,3 Гц, 1H), 3,79 (дт, J=7,8, 14,0 Гц, 2Н), 3,50 (дд, J=7,7, 13,5 Гц, 1H), 3,34 (м, 1H), 2,83 (м, 5Н), 2,27 (дт, J=1,9, 12,6 Гц, 1H), 2,09 (м, 1H), 1,64 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 31а: Соединение 4 (200 мг, 0,62 ммоль) и 2-гидразино-5-метилпиридина гидрохлорид (198 мг, 1,24 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 31а (215 мг, выход 85%) в виде белого твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Соединение 32а: Соединение 31а (215 мг, 0,52 ммоль) растворяли в МеОН (2,6 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 239 мкл, 1,04 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между 10% водн. NaH2PO4 (10 мл) и EtOAc (20 мл). Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 32а (187 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Т31: Соединение 32а (187 мг, 0,46 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (65 мг, 0,23 ммоль) в ДМФ (1,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (183 мкл, 2,27 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (3x15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток разводили толуолом и концентрировали для удаления остаточного пиридина. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т31 (145 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. m/z=409 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,53 (с, 1H), 8,27 (тд, J=0,8, 2,5, 1H), 7,94 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,76 (м, 2Н), 7,70 (ддд, J=0,7, 2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,45 (м, 2Н), 7,38 (м, 1H), 2,93 (ддд, J=1,7, 6,0, 16,1 Гц, 1H), 2,83 (ддд, J=6,2, 11,5, 16,2, 1H), 2,65 (тд, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 2,42 (с, 3H), 2,21 (дт, J=2,1, 12,6 Гц, 1H), 2,10 (м, 1H), 1,94 (с, 3H), 1,80 (м, 1H), 1,35 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 31b: Соединение 4 (200 мг, 0,62 ммоль) и 5-гидразинил-2-метилпиридина гидрохлорид (198 мг, 1,24 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (20 мл) и промывали водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 035% ацетоном в гексанах) с получением соединения 31b (205 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Соединение 32b: Смесь соединения 31b (205 мг, 0,50 ммоль) и K2CO3 (345 мг, 2,50 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (15 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин и экстрагировали EtOAc (20 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах) с получением соединения 32b (185 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Т32: Соединение Т32 (грязно-белое твердое вещество, 150 мг, выход 82%) синтезировали из соединения 32b (184 мг, 0,45 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т31. Соединение Т32 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах). m/z=409 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3, 1:1 смесь атропизомеров) δ [8,69 (с), 8,69 (с); 1:1; 1H], 7,74 (дд, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 7,70 (м, 2Н), 7,52 (с, 1H), 7,42 (м, 3H), 7,36 (м, 1H), 2,96 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,2 Гц, 1H), 2,87 (ддд, J=6,4, 11,4, 16,1 Гц, 1H), 2,72 (с, 3H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,1,
- 69 047073
12,7 Гц, 1H), 2,15 (да, J=6,0, 14,4 Гц, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 33: Соединение 4 (200 мг, 0,62 ммоль) и (З-бромфенил)гидразина гидрохлорид (276 мг, 1,23 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 33 (250 мг, выход 85%) в виде белого твердого вещества. m/z=474 и 476 (М+1).
Соединение 34: Соединение 33 (247 мг, 0,52 ммоль) растворяли в МеОН (2,6 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 240 мкл, 1,05 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь обрабатывали 10% водн. NaH2PO4 (10 мл) для доведения рН < 7 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 34 (257 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=474 и 476 (М+1).
T33: Соединение 34 (157 мг, 0,33 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,8 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (47 мг, 0,16 ммоль) в ДМФ (0,8 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (134 мкл, 1,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl (10 мл) и водой (3x15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения T33 (123 мг, выход 78%) в виде желтого твердого вещества. m/z=412 & 474 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (м, 4Н), 7,53 (с, 1H), 7,48 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 2,96 (ддд, J=1,5, 6,3, 16,2 Гц, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,26 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,5, 13,8 Гц, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Т34: Смесь соединения T33 (73 мг, 0,15 ммоль), 3-пиридинилбороновой кислоты (29 мг, 0,24 ммоль) и K3PO4 (99 мг, 0,47 ммоль) в 1,4-диоксане (0,72 мл) и ДМФ (0,36 мл) в колбе продували N2 в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (9 мг, 0,008 ммоль). Колбу герметично закрывали и нагревали при 90°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разводили EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (4x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т34 (22 мг, выход 30%) в виде белого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,90 (дд, J=0,8, 2,5 Гц, 1H), 8,66 (дд, J=1,6, 4,8 Гц, 1H), 7,93 (ддд, J=1,6, 2,4, 7,9 Гц, 1H), 7,81 (ддд, J=1,1, 1,8, 7,8 Гц, 1H), 7,73 (м, 4Н), 7,62 (с, 1H), 7,57 (ддд, J=1,1, 2,1, 7,8 Гц, 1H), 7,42 (м, 3H), 7,36 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (ддд, J=6,5, 11,4, 16,2 Гц, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (м, 1H), 1,82 (тдд, J=6,2, 12,2, 18,6 Гц, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 35: Смесь соединения 34 (50 мг, 0,11 ммоль), фенилбороновой кислоты (19 мг, 0,16 ммоль) и K3PO4 (67 мг, 0,32 ммоль) в 1,4-диоксане (0,5 мл) и ДМФ (0,25 мл) в колбе продували N2 в течение 3 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (6 мг, 0,005 ммоль). Колбу герметично закрывали и нагревали при 90°С в течение 4,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между EtOAc (20 мл) и 10% водн. NaH2PO4 (15 мл). Органический экстракт отделяли и промывали водой (3x15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 35 (39 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. m/z=472 (М+1);
Т35: Соединение 35 (39 мг, 0,083 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,4 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (12 мг, 0,041 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (34 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl (10 мл) и водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т35 (28 мг, выход 72%) в виде желтого твердого вещества. m/z=470 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 1H), 7,73 (м, 3H), 7,64 (м, 4Н), 7,45 (м, 7Н), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,4, 13,7 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 36: Соединение 4 (1,00 г, 3,09 ммоль) и (4-бромфенил)гидразина гидрохлорид (1,38 г, 6,17 ммоль) в EtOH (17 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (80 мл) и промывали 1Н водн. HCl (2x30 мл) и водой (30 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель,
- 70 047073 элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 36 (1,367 г, выход 93%) в виде желтого твердого вещества. Соединение 36 содержит 11% региоизомера пиразола по данным ВЭЖХ. m/z=474/476 (M+1).
Соединение 37: Соединение 36 (1,365 г, 2,88 ммоль) растворяли в МеОН (14 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,32 мл, 5,77 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь обрабатывали 10% водн. NaH2PO4 (50 мл) для доведения рН < 7 и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах) с получением соединения 37 (1,120 г, выход 82%) в виде белого твердого вещества. m/z=474/476 (М+1).
Соединение 38а: Смесь соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль), 2-фторфенилбороновой кислоты (40 мг, 0,29 ммоль), K3PO4 (121 мг, 0,57 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (11 мг, 0,010 ммоль) в колбе продували N2. 1,4-диоксан (1 мл) и ДМФ (0,5 мл) дегазировали N2 и добавляли в колбу. Колбу наполняли N2 и герметично закрывали. Смесь нагревали при 90°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (10 мл) и 10% водн. NaH2PO4 (6 мл). Смесь фильтровали через подушку из целита® и элюировали EtOAc (15 мл). Фильтрат промывали водой (3x15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 38а (78 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т36: Соединение 38а (78 мг, 0,16 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (23 мг, 0,080 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (64 мкл, 0,79 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl (10 мл) и водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т36 (57 мг, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,68 (дд, J=1,6, 4,8 Гц, 1H), 7,97 (тд, J=2,1, 8,0 Гц, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,65 (м, 3H), 7,43 (м, 3H), 7,36 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,0, 12,8 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,2, 14,0 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38b: Соединение 38b (белое твердое вещество, 66 мг, выход 74%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 3-пиридинилбороновой кислоты (35 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Соединение 38b очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% ацетоном в гексанах). m/z=473 (M+1).
Т37: Соединение 38b (66 мг, 0,14 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,070 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (56 мкл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (4x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 020% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т37 (52 мг, выход 79%) в виде желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8,93 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,68 (дд, J=1,6, 4,8 Гц, 1H), 7,97 (тд, J=2,1, 8,0 Гц, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,65 (м, 3H), 7,43 (м, 3H), 7,36 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,0, 12,8 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,2, 14,0 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38с: Соединение 38с (белое твердое вещество, 58 мг, выход 62%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 3,5-диметилизоксазол-4-бороновой кислоты (40 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Соединение 38с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-25% EtOAc в CH2Cl2). m/z=491 (M+1).
Т38: Соединение Т38 (белое твердое вещество, 49 мг, выход 85%) синтезировали из соединения 38с (58 мг, 0,12 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т38 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах). m/z=489 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,73 (м, 2Н), 7,60 (м, 2Н), 7,54 (с, 1H), 7,49 (м, 2Н), 7,43 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 2,99 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,34 (с, 3H), 2,29 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,7, 13,7 Гц, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,61 s, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38d: Соединение 38d (светло-желтое твердое вещество, 65 мг, выход 72%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 4-пиридинилбороновой кислоты (35 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 5 ч. Соединение 38d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 030% ацетоном в гексанах). m/z=473 (M+1).
Т39: Соединение 38d (65 мг, 0,14 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и охлаждали рас
- 71 047073 твор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,070 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (55 мкл, 0,68 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (4x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 055% ацетоном в гексанах) с получением частично очищенного продукта.
Продукт растворяли в CH2Cl2 (1 мл) и EtOAc (2 мл). Смесь нагревали до рефлюкса, чтобы дать растворителю испариться. Когда объем уменьшался до ~ 0,5 мл, смесь охлаждали до комнатной температуры. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали EtOAc, и сушили в вакууме с получением соединения Т39 (40 мг, выход 62%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=471 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (м, 2Н), 7,86 (м, 2Н), 7,73 (м, 2Н), 7,65 (м, 3H), 7,58 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 2,99 (ддд, J=1,6, 6,3, 16,2 Гц, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,8, 13,3 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38е: Соединение 38е (белое твердое вещество, 73 мг, выход 79%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и (3-фторфенил)бороновой кислоты (40 мг, 0,29 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 3,5 ч. Соединение 38е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах). m/z=490 (M+1).
Соединение Т40: Соединение Т40 (белое твердое вещество, 57 мг, выход 79%) синтезировали из соединения 38е (72 мг, 0,15 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т40 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах). m/z=488 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,78 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,66 (с, 1H), 7,60 (м, 2Н), 7,41 (м, 6Н), 7,12 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (м, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38f: Соединение 38f (белое твердое вещество, 79 мг, выход 86%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и п-толилбороновой кислоты (39 мг, 0,29 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Реакционную смесь нагревали при 90°C в течение 3,5 ч. Соединение 38f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах). m/z=486 (М+1).
Соединение Т41: Соединение Т41 (белое твердое вещество, 59 мг, выход 76%) синтезировали из соединения 38f (78 мг, 0,16 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т41 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), m/z=484 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,76 (м, 4Н), 7,70 (с, 1H), 7,56 (м, 4Н), 7,42 (м, 2Н), 7,33 (м, 3H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38g: Соединение 38g (белое твердое вещество, 78 мг, выход 82%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 4-гидроксиметилфенилбороновой кислоты (43 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 3,5 ч. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 38g. Продукт растворяли в CH2Cl2 (1 мл) и EtOAc (2 мл). Смесь нагревали до рефлюкса, чтобы дать растворителю испариться. Когда объем уменьшался до ~ 0,5 мл, смесь охлаждали до комнатной температуры и держали в течение 2 ч. Осажденное вещество собирали путем фильтрации, промывали EtOAc и сушили в вакууме с получением соединения 38g. m/z=502 (M+1).
Соединение Т42: Соединение Т42 (белое твердое вещество, 24 мг, выход 31%) синтезировали из соединения 38g (78 мг, 0,16 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т42 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в CH2Cl2). m/z=500 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,69 (с, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,58 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,35 (м, 1H), 4,79 (д, J=5,9 Гц, 2Н), 2,99 (ддд, J=1,6, 6,5, 16,6 Гц, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,15 (м, 1H), 1,82 (тт, J=6,3, 12,6 Гц, 1H), 1,74 (т, J=6,0 Гц, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38h: Соединение 38h (белое твердое вещество, 67 мг, выход 70%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 2-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (43 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Соединение 38h очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-90% EtOAc в гексанах). m/z=502 (M+1).
Соединение Т43: Соединение Т43 (грязно-белое твердое вещество, 56 мг, выход 84%) синтезировали из соединения 38h (67 мг, 0,13 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т43 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах). m/z=500 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,76 (м, 2Н), 7,62 (м, 3H), 7,57 (м, 2Н), 7,50 (с, 1H), 7,43 (м, 4Н), 7,36 (м, 2Н), 4,65 (д, J=4,6 Гц, 2Н), 3,01 (ддд, J=1,5, 6,7, 16,5 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,7, 13,8 Гц, 1H), 1,91 (т, J=4,9
- 72 047073
Гц, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38i: Соединение 38i (белое твердое вещество, 82 мг, выход 89%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и о-толилбороновой кислоты (39 мг, 0,29 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Соединение 38i очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-25% ацетоном в гексанах). m/z=486 (M+1).
Соединение Т44: Соединение Т44 (грязно-белое твердое вещество, 48 мг, выход 59%) синтезировали из соединения 38i (82 мг, 0,17 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т36. Соединение Т44 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах). m/z=484 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,75 (м, 2Н), 7,59 (с, 1H), 7,55 (м, 4Н), 7,43 (м, 2Н), 7,32 (м, 5Н), 3,00 (ддд, J=1,3, 6,2, 16,1 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,33 (с, 3H), 2,30 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,5, 13,9 Гц, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38j: Соединение 38j (белое твердое вещество, 62 мг, выход 65%) синтезировали из соединения 37 (90 мг, 0,19 ммоль) и 3-гидроксиметилфенилбороновой кислоты (43 мг, 0,28 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а.
Соединение 38j очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах). m/z=502 (M+1).
Т45: Соединение 38j (62 мг, 0,12 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (18 мг, 0,063 ммоль) в ДМФ (0,6 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (50 мкл, 0,62 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. HCl и водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т45 (52 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества. m/z=500 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,81 (м, 2Н), 7,74 (м, 2Н), 7,68 (м, 2Н), 7,58 (м, 3H), 7,50 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,42 (м, 3H), 7,35 (м, 1H), 4,81 (д, J=5,9 Гц, 2Н), 2,99 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (м, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,79 (т, J=6,0 Гц, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 38k: Соединение 38k (белое полутвердое вещество, 51 мг, выход 75%) синтезировали из соединения 37 (64 мг, 0,13 ммоль) и (4-метоксифенил)бороновой кислоты (31 мг, 0,20 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 3 ч. Соединение 38k очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 030% EtOAc в гексанах). m/z=502 (M+1).
Т46: Соединение Т46 (грязно-белое твердое вещество, 39 мг, выход 76%) синтезировали из соединения 38k (51 мг, 0,10 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т45. Соединение Т46 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах). m/z=500 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,74 (м, 4Н), 7,70 (с, 1H), 7,60 (м, 2Н), 7,55 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,35 (м, 1H), 7,03 (м, 2Н), 3,88 (с, 3H), 2,98 (м, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,5, 13,9 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 381: Соединение 381 (белое твердое вещество, 27 мг, выход 78%) синтезировали из соединения 37 (32 мг, 0,067 ммоль) и (4-(диметиламино)фенил)бороновой кислоты (17 мг, 0,10 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 38а. Соединение 381 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% ацетоном в гексанах). m/z=515 (M+1).
Т47: Соединение 381 (26 мг, 0,051 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,25 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (7,2 мг, 0,025 ммоль) в ДМФ (0,25 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (20 мкл, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали 1Н водн. NaOH (10 мл), водой (3x10 мл) и солевым раствором (10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т47 (6 мг, выход 23%) в виде желтого твердого вещества. m/z=513 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,74 (м, 5Н), 7,57 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 7,41 (м, 2Н), 7,34 (м, 1H), 6,83 (м, 2Н), 3,03 (с, 6Н), 2,98 (дд, J=5,6, 16,0 Гц, 1H), 2,89 (м, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 39: Перемешиваемый раствор пиримидин-4-карбоновой кислоты (500 мг, 4,02 ммоль) и пентафторфенола (815 мг, 4,43 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) в атмосфере N2 обрабатывали N,N'дициклогексилкарбодиимидом (914 мг, 4,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч. Осажденную мочевину удаляли путем фильтрации. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 39 (880 мг, выход 69%) в виде желтого масла, которое кристаллизо
- 73 047073 валось после отстаивания. m/z=291 (M+1).
Соединение 40: В перемешиваемую суспензию соединения 3 (200 мг, 0,912 ммоль) и эфирата бромида магния (588 мг, 2,28 ммоль) в CH2Cl2 (12 мл) по каплям добавляли N.N-диизопропилэтиламин (0,45 мл, 2,58 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 мин и по каплям добавляли раствор 39 (396 мг, 1,36 ммоль) в CH2Cl2 (6 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре. Добавляли насыщ. водн. KH2PO4 (30 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 40 (145 мг, выход 49%) в виде желтого вязкого масла. m/z=326 (М+1).
Соединение 41: Смесь соединения 40 (145 мг, 0,445 ммоль), бифенил-4-ил гидразина гидрохлорида (196 мг, 0,897 ммоль) и EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток растворяли в EtOAc. Смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 41 (142 мг, выход 67%) в виде оранжевого стекла. m/z=474 (M+1).
Соединение 42: Раствор 41 (138 мг, 0,291 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (80 мг, 0,582 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 42 (113 мг, выход 82%) в виде желтого стекла. m/z=474 (M+1).
Т48: Раствор 42 (112 мг, 0,236 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (37 мг, 0,129 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,19 мл, 2,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 3% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в CH2Cl2), и после этого снова очищали, используя третий этап колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), с получением соединения Т48 (74 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества. m/z=472 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,71 (д, J=5,4 Гц, 1H), 7,95 (дд, J=1,4, 5,4 Гц, 1H), 7,83 (м, 2Н), 7,67 (м, 2Н), 7,62 (с, 1H), 7,58 (м, 2Н), 7,52 (м, 2Н), 7,45 (м, 1H), 3,42 (дд, J=5,3, 18,0 Гц, 1H), 2,99 (ддд, J=6,9, 11,8, 17,3 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,8, 14,0 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 43: Смесь 40 (200 мг, 0,614 ммоль), (4-бромфенил)гидразина гидрохлорида (274 мг, 1,23 ммоль) и EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°C в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток растворяли в EtOAc. Смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 43 (261 мг, выход 89%) в виде желтого стекла. m/z=476 и 478 (М+1).
Соединение 44: Раствор 43 (257 мг, 0,539 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали карбонатом калия (149 мг, 1,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 44 (205 мг, выход 80%) в виде белого стекла. m/z=476 и 478 (М+1).
Соединение 45а (Т185): Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли 44 (204 мг, 0,428 ммоль), трехосновным фосфатом калия (272 мг, 1,28 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием (25 мг, 0,021 ммоль), 5-фторпиридин-3-бороновой кислотой (91 мг, 0,642 ммоль), безводным 1,4-диоксаном (2 мл) и безводным ДМФ (1 мл). Смесь продували N2. Сосуд герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 21 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 45а (149 мг, выход 71%). К соединению 45а примешивали трифенилфосфиноксид и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=493 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,22 (м, 1H), 8,75 (шир.
- 74 047073 с, 1H), 8,69 (м, 1H), 8,54 (м, 1H), 7,92 (да J=1,4, 5,4 Гц, 1H), 7,76 (м, 2Н), 7,68 (м, 1H), 7,57 (м, 2Н), 3,54 (дд, J=5,7, 13,5 Гц, 1H), 3,37 (м, 1H), 2,93 (ддд, J=6,7, 12,0, 17,7 Гц, 1H), 2,53 (кд, J=6,4, 12,8 Гц, 1H), 1,98 (м, 5Н), 1,59 (с, 3H), 1,26 (м, 3H).
Т49: Раствор 45а (148 мг, 0,300 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (47 мг, 0,165 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 60 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,24 мл, 2,97 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который растворяли в минимальном количестве 1,4-диоксана и держали при 5°С в течение 1 ч. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения Т49 (38 мг, выход 26%) в виде желтого твердого вещества. m/z=491 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,77 (т, J=1,7 Гц, 1H), 8,71 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,56 (д, J=2,7 Гц, 1H), 7,93 (дд, J=1,5, 5,4 Гц, 1H), 7,84 (м, 2Н), 7,67 (м, 3H), 7,57 (с, 1H), 3,42 (м, 1H), 2,99 (ддд, J=6,9, 11,8, 18,1 Гц, 1H), 2,57 (м, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,18 (м, 1H), 1,83 (тдд, J=6,2, 12,6, 18,7 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 45b: Соединение 44 (200 мг, 0,42 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (270 мг, 1,27 ммоль), Pd(PPh3)4 (25 мг, 0,021 ммоль) и пиримидин-5-илбороновую кислоту (80 мг, 0,65 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 45b (150 мг, выход 75%) в виде твердого вещества. m/z=476 (М+1).
Т50: Раствор соединения 45b (150 мг, 0,32 ммоль) в сухом ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (47 мг, 0,16 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водой и солевым раствором.
Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением Т50 (90 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=474 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,31 (д, J=0,7 Гц, 1H), 9,23 (д, J=1,2 Гц, 1H), 9,07 (м, 2Н), 8,71 (дд, J=0,7, 5,3 Гц, 1H), 7,93 (тд, J=1,1, 5,4 Гц, 1H), 7,86 (м, 2Н), 7,69 (м, 2Н), 7,57 (с, 1H), 3,42 (м, 1H), 2,99 (ддд, J=6,9, 11,8, 18,0 Гц, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,9, 13,9 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 45с: Соединение 45с (твердое вещество, 110 мг, выход 55%) синтезировали из соединения 44 (200 мг, 0,42 ммоль) и пиридин-3-илбороновой кислоты (80 мг, 0,65 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 45b. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 5 ч. Соединение 45с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах). m/z=415 (M+1).
Т51: Раствор соединения 45с (110 мг, 0,23 ммоль) в сухом ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (35 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водой и солевым раствором. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением Т51 (75 мг, выход 68%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=473 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,94 (дд, J=0,8, 2,5 Гц, 1H), 8,71 (д, J=5,5 Гц, 1H), 8,69 (м, 1H), 7,98 (ддд, J=1,7, 2,4, 7,9 Гц, 1H), 7,94 (дд, J=1,5, 5,4 Гц, 1H), 7,84 (м, 2Н), 7,63 (м, 2Н), 7,59 (с, 1H), 7,45 (ддд, J=0,8, 4,8, 7,9 Гц, 1H), 3,42 (дд, J=5,9, 17,6 Гц, 1H), 2,99 (ддд, J=6,9, 11,8, 18,0 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,9, 14,0 Гц, 1H), 1,83 (тт, J=6,4, 12,7 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 46: Соединение 4 (82 мг, 0,62 ммоль) и 4-гидразинилбензойной кислоты гидрохлорид (232 мг, 1,23 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (20 мл) и промывали водой (2x15 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 0-100% ацетона в гексанах) с получением соединения 46 (82 мг, выход 30%) и соединения 47 (192 мг, выход 66%). Соединение 46: светло-желтое твердое вещество; m/z=440 (М+1); Соединение 47: светло-желтое твердое веще
- 75 047073 ство; m/z=468 (М+1).
Соединение 48: Соединение 47 (80 мг, 0,18 ммоль) растворяли в МеОН (1,8 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 104 мкл, 0,45 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (15 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 0-100% ацетона в гексанах) с получением соединения 48 (49 мг, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=440 (M+1).
Т52: Соединение Т52 (коричневое твердое вещество, 41 мг, выход 85%) синтезировали из соединения 48 (48 мг, 0,11 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т45. Соединение Т52 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах). m/z=438 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,34 (м, 2Н), 7,72 (м, 2Н), 7,66 (м, 2Н), 7,52 (с, 1H), 7,43 (м, 2Н), 7,36 (м, 1H), 2,99 (дд, J=5,6, 16,6 Гц, 1H), 2,89 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,6, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (м, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 49: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 40 (100 мг, 0,307 ммоль), 4-бром-2-фторфенилгидразина гидрохлоридом (148 мг, 0,614 ммоль) и EtOH (3 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 21 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 49 (161 мг, количественный выход) в виде желтого стекла. m/z=494/496 (М+1).
Соединение 50: Смесь 49 (155 мг, 0,313 ммоль) и карбоната калия (87 мг, 0,626 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 50 (103 мг, выход 66%) в виде белого стекла. m/z=494/496 (М+1).
Соединение 51: Смесь соединения 50 (102 мг, 0,206 ммоль), трехосновного фосфата калия (131 мг, 0,618 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (12 мг, 0,0103 ммоль) и пиридин-3-бороновой кислоты (38 мг, 0,309 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (2 мл) и безводном ДМФ (1 мл) продували N2. Реакционный сосуд герметично закрывали и облучали смесь в микроволновом устройстве Biotage при 90°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 60-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 51 (69,5 мг, выход 68%) в виде белого стекла. m/z=493 (М+1).
Т53: Раствор 51 (69 мг, 0,140 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (22 мг, 0,077 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,11 мл, 1,36 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т53 (52 мг, выход 76%) в виде желтого твердого вещества. m/z=491 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,94 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,72 (м, 2Н), 7,97 (тд, J=2,0, 8,0 Гц, 1H), 7,92 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 7,63 (м, 4Н), 7,47 (дд, J=4,8, 7,9 Гц, 1H), 3,43 (дд, J=5,8, 17,5 Гц, 1H), 2,98 (ддд, J=6,8, 11,8, 18,0 Гц, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,32 (т, J=12,7 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,8, 13,8 Гц, 1H), 1,81 (кд, J=6,0, 12,5 Гц, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 52: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 44 (0,51 г, 1,07 ммоль), бис(пинаколато)дибора (0,41 г, 1,61 ммоль) и ацетата калия (0,32 г, 3,26 ммоль) в 1,4-диоксане (11 мл) дегазировали и обрабатывали [1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладием(П) (78 мг, 0,11 ммоль). Смесь дегазировали, герметично закрывали и нагревали при 100°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 52 (0,41 г, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=524 (M+1).
Соединение 53а: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 52 (0,30 г, 0,57 ммоль), 4-бром-2-(фторметил)пиридина (0,11 г, 0,58 ммоль) и K3PO4 (0,36 г, 1,70 ммоль) в 1,4-диоксане (4,8 мл) и ДМФ (1,2 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (66 мг, 0,057 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентриро
- 76 047073 вали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHC13) с получением соединения 53а (0,17 г, выход 59%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=507 (M+1).
Т54: В перемешиваемый раствор соединения 53а (0,17 г, 0,34 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (47 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,27 мл, 3,34 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т54 (90 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=505 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,71 (м, 2Н), 7,93 (м, 3H), 7,77 (м, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,57 (с, 1H), 7,55 (дд, J=1,8, 5,1 Гц, 1H), 5,60 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 3,42 (дд, J=5,9, 17,6 Гц, 1H), 3,00 (ддд, J=6,9, 11,8, 18,1 Гц, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=7,2, 14,2 Гц, 1H), 1,83 (тдд, J=6,4, 13,2, 19,3 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 53b: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 52 (0,22 г, 0,42 ммоль), (4-бромпиридин-2-ил)метанола (59 мг, 0,31 ммоль) и K3PO4 (0,20 г, 0,94 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (36 мг, 0,031 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили 10% МеОН в CHCl3 (25 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 53b (0,10 г, выход 63%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Т55: В перемешиваемый раствор соединения 53b (0,10 г, 0,20 ммоль) в дегазированном ДМФ (3 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (31 мг, 0,11 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,16 мл, 1,98 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и 10% МеОН в CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т55 (26 мг, выход 26%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=503 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,71 (м, 2Н), 7,93 (дд, J=1,5, 5,3 Гц, 1H), 7,89 (м, 2Н), 7,65 (м, 2Н), 7,56 (м, 2Н), 7,51 (дд, J=1,7, 5,2 Гц, 1H), 4,89 (шир. с, 2Н), 3,64 (шир. с, 1H), 3,42 (дд, J=5,7, 17,7 Гц, 1H), 2,99 (ддд, J=6,9, 11,8, 18,1 Гц, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,9, 13,8 Гц, 1H), 1,84 (ддд, J=6,4, 12,6, 19,8 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 54: Соединение 40 (1,31 г, 4,05 ммоль) и 5-бром-2-гидразинилпиридина гидрохлорид (1,52 г, 6,77 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали при 100°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 54 (1,4 г, выход 73%) в виде твердого вещества. m/z=477/479 (М+1).
Соединение 55: Соединение 54 (1,4 г, 2,93 ммоль) растворяли в МеОН (30 мл) и добавляли K2CO3 (2,05 г, 14,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 55 (1,29 г, выход 92%) в виде твердого вещества. m/z=477/479 (M+1).
Соединение 56а: Соединение 55 (260 мг, 0,55 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и 4-фторфенилбороновую кислоту (115 мг, 0,82 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 56а (265 мг, выход 98%) в виде твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Т56: Соединение 56а (265 мг, 0,54 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (95 мг, 0,59 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали соле
- 77 047073 вым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т56 (30 мг, выход 11%) в виде светло-оранжевого твердого вещества. m/z=491 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,77 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,67 (дд, J=0,8, 2,4 Гц, 1H), 8,49 (с, 1H), 8,15 (дд, J=0,8, 8,6 Гц, 1H), 8,10 (дд, J=2,4, 8,6 Гц, 1H), 8,06 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 7,63 (м, 2Н), 7,23 (м, 2Н), 3,41 (дд, J=5,6, 17,6 Гц, 1H), 2,96 (ддд, J=6,6, 11,9, 17,9 Гц, 1H), 2,68 (тд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,20 (м, 2Н), 2,00 (с, 3H), 1,84 (м, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 56b: Соединение 55 (250 мг, 0,52 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и пиридин-3-илбороновую кислоту (115 мг, 0,94 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин и перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 56b (170 мг, выход 68%) в виде твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Т57: Соединение 56b (170 мг, 0,36 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (60 мг, 0,38 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т57 (60 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества. m/z=474 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,94 (дд, J=0,8, 2,5 Гц, 1H), 8,78 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,72 (м, 2Н), 8,51 (с, 1H), 8,23 (дд, J=0,8, 8,5 Гц, 1H), 8,16 (дд, J=2,4, 8,6 Гц, 1H), 8,07 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 7,99 (ддд, J=1,6, 2,4, 7,9 Гц, 1H), 7,48 (ддд, J=0,9, 4,8, 7,8 Гц, 1H), 3,42 (м, 1H), 2,97 (ддд, J=6,6, 11,9, 17,3 Гц, 1H), 2,70 (кд, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 2,22 (дт, J=2,1, 12,6 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,6, 13,7 Гц, 1H), 2,01 (с, 3H), 1,85 (кт, J=5,8, 12,7 Гц, 1H), 1,38 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 56с: Соединение 55 (250 мг, 0,52 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и 3-фторфенилбороновую кислоту (115 мг, 0,82 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 56с (126 мг, выход 49%) в виде твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Т58: Соединение 56с (125 мг, 0,25 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (41 мг, 0,26 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т58 (80 мг, выход 64%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=491 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,78 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,71 (дд, J=0,8, 2,4 Гц, 1H), 8,51 (с, 1H), 8,18 (дд, J=0,8, 8,6 Гц, 1H), 8,12 (дд, J=2,4, 8,6 Гц, 1H), 8,06 (дд, J=1,5, 5,3 Гц, 1H), 7,48 (м, 2Н), 7,37 (тд, J=2,1, 9,6 Гц, 1H), 7,16 (ддт, J=1,1, 2,6, 8,2 Гц, 1H), 3,42 (дд, J=5,5, 17,6 Гц, 1H), 2,96 (ддд, J=6,6, 11,9, 17,9 Гц, 1H), 2,68 (тд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,22 (тд, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,14 (м, 1H), 2,00 (с, 3H), 1,84 (кд, J=5,9, 13,0 Гц, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 56d: Соединение 55 (260 мг, 0,55 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и фенилбороновую кислоту (100 мг, 0,82 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 56d (250 мг, выход 97%) в виде твердого вещества. m/z=475 (M+1).
Т59: Соединение 56d (250 мг, 0,53 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (90 мг, 0,56 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т59 (27 мг, выход 11%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=473 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,77 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,72 (т, J=1,6 Гц, 1H), 8,51 (с, 1H), 8,15 (д, J=1,6 Гц, 2Н), 8,07 (дд, J=1,5, 5,3 Гц, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,53 (м, 2Н), 7,47 (м, 1H), 3,42 (дд, J=5,5, 17,5 Гц,
- 78 047073
1H), 2,96 (ддд, J=6,6, 12,0, 18,0 Гц, 1H), 2,69 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,22 (м, 1H), 2,14 (м, 1H), 2,01 (с, 3H), 1,85 (м, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 56е: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 55 (0,20 г, 0,42 ммоль), 3-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (0,13 г, 0,86 ммоль) и K3PO4 (0,27 г, 1,27 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (48 мг, 0,042 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали до 90°C в течение 6 ч, после чего при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 56е (0,14 г, выход 66%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Т60: В перемешиваемый раствор соединения 56е (0,14 г, 0,28 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,23 мл, 2,84 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и 5% МеОН в CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3). Полученный продукт растирали с Et2O. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения Т60 (34 мг, выход 24%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=503 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,26 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,93 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,87 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,45 (дд, J=2,5, 8,6 Гц, 1H), 8,37 (с, 1H), 8,11 (м, 2Н), 7,80 (с, 1H), 7,74 (тд, J=1,5, 7,9 Гц, 1H), 7,51 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (д, J=7,6 Гц, 1H), 5,31 (т, J=5,7 Гц, 1H), 4,62 (т, J=5,7 Гц, 2Н), 3,28 (м, 1H), 2,85 (м, 2Н), 2,29 (м, 1H), 2,04 (дд, J=6,5, 13,3 Гц, 1H), 1,96 (с, 3H), 1,80 (дк, J=5,7, 12,7 Гц, 1H), 1,23 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Т61: В перемешиваемый раствор соединения Т60 (30 мг, 0,059 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл) при -78°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор диэтиламиносеры трифторида (14 мг, 0,087 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). После перемешивания в течение 2 ч холодный раствор вливали в холодный насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и экстрагировали CH2Cl2 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т61 (12 мг, выход 40%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=505 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,78 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,73 (дд, J=1,3, 2,0 Гц, 1H), 8,52 (с, 1H), 8,16 (м, 2Н), 8,07 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 7,67 (м, 2Н), 7,57 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,47 (дд, J=1,6, 7,7 Гц, 1H), 5,50 (д, J=47,6 Гц, 2Н), 3,42 (дд, J=5,5, 17,5 Гц, 1H), 2,96 (ддд, J=6,6, 11,9, 18,0 Гц, 1H), 2,68 (м, 1H), 2,22 (дт, J=2,1, 12,6 Гц, 1H), 2,14 (дд, J=6,5, 13,6 Гц, 1H), 2,01 (с, 3H), 1,84 (м, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 57: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 55 (0,25 г, 0,52 ммоль), циклопропилтрифторбората калия (0,23 г, 1,55 ммоль), K3PO4 (0,33 г, 1,55 ммоль) и RuPhos (24 мг, 0,051 ммоль) в толуоле (3,2 мл) и воде (0,8 мл). Добавляли ацетат палладия(П) (6 мг, 0,027 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 95°C в течение 16 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 5% МеОН в CHCl3 (25 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 57 (82 мг, выход 36%) в виде светло-синего твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Т62: В перемешиваемый раствор соединения 57 (82 мг, 0,19 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (30 мг, 0,10 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,15 мл, 1,85 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т62 (52 мг, выход 63%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=437 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,22 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,74 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,33 (с, 1H), 8,30 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 7,88 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,53 (дд, J=2,5, 8,5 Гц, 1H), 3,39 (дд, J=5,8, 17,6 Гц, 1H), 2,94 (ддд, J=6,6, 12,0, 18,0 Гц, 1H), 2,65 (м, 1H), 2,17 (м, 2Н), 2,00 (м, 1H), 1,95 (с, 3H), 1,84 (м, 1H), 1,35 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,14 (м, 2Н), 0,83 (м, 2Н).
Соединение 58: Соединение 40 (0,25 г, 0,77 ммоль) и 2-гидразинил-5-(трифторметил)пиридин (275 мг, 1,55 ммоль) и 4Н HCl в 1,4-диоксане (0,4 мл) в EtOH (2 мл) нагревали при 100°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток обрабатывали водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентриро
- 79 047073 вали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 58 (350 мг, выход 97%) в виде твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 59: Соединение 58 (0,34 г, 0,73 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (0,5 г, 3,62 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 59 (175 мг, выход 51%) в виде твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т63: Соединение 59 (175 мг, 0,37 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (58 мг, 0,20 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Смесь перемешивали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т63 (150 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества. m/z=465 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,26 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,80 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,77 (м, 1H), 8,50 (с, 1H), 8,33 (д, J=8,7 Гц, 1H), 8,16 (дд, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 8,06 (дд, J=1,5, 5,3 Гц, 1H), 3,41 (м, 1H), 2,95 (ддд, J=6,6, 12,0, 18,1 Гц, 1H), 2,69 (м, 1H), 2,21 (дт, J=2,1, 12,5 Гц, 1H), 2,13 (м, 1H), 1,95 (с, 3H), 1,82 (м, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 61: Смесь соединения 40 (55 мг, 0,169 ммоль) и 5-гидразино-2-фенилпиридина гидрохлорида (75 мг, 0,338 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 100°С в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 61 (64 мг, выход 80%) в виде желтого стекла. m/z=475 (M+1).
Соединение 62: Смесь 61 (63 мг, 0,132 ммоль) и карбоната калия (36 мг, 0,265 ммоль) в МеОН (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток растирали с МеОН с получением соединения 62 (35 мг, выход 56%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=475 (M+1).
Т64: Раствор 62(35 мг, 0,074 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (11,5 мг, 0,040 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли безводный пиридин (0,06 мл, 0,742 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток растирали с МеОН с получением соединения Т64 (21 мг, выход 60%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=473 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,24 (с, 1H), 8,86 (д, J=2,6 Гц, 1H), 8,73 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,11 (д, J=7,2 Гц, 2Н), 8,02 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,92 (м, 2Н), 7,54 (м, 4Н), 3,42 (дд, J=5,9, 17,6 Гц, 1H), 2,99 (ддд, J=6,8, 11,6, 17,9 Гц, 1H), 2,57 (м, 1H), 2,27 (т, J=12,8 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,8, 14,1 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 64: Раствор соединения 63 (4,31 г, 18,08 ммоль) в этилформиате (50 мл, 0,61 моль) и бензоле (50 мл) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% МеОН, 17 мл, 91 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (100 мл) и Et2O (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 64 (4,69 г, выход 97%) в виде светло-розового твердого вещества. m/z=267 (M+1, 100%).
Соединения 65 и 66: Раствор соединения 64 (0,66 г, 2,48 ммоль) и уксусной кислоты (1,4 мл, 24,4 ммоль) в EtOH (25 мл) дегазировали и охлаждали до 0°C. Добавляли бифенил-4-илгидразин (0,55 г, 2,99 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 65 (0,49 г, выход 47%) и соединения 66 (0,46 г, выход 45%). Соединение 65: оранжево-желтое твердое вещество; m/z=415 (M+1). Соединение 66: желтое твердое вещество; m/z=415 (M+1).
Соединение 67: В перемешиваемую суспензию соединения 66 (1,31 г, 3,16 ммоль) и карбоната натрия (1,67g, 15,76 ммоль) в CH2Cl2 (30 мл) по каплям добавляли раствор брома (1,5 г, 9,4 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при -10°C в атмосфере N2. После перемешивания в течение 4 ч холодную реакционную смесь
- 80 047073 гасили, по каплям добавляя насыщ. водн. тиосульфат натрия (50 мл). Ледяную баню убирали. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 67 (1,32 г, выход 85%) в виде светлооранжевого твердого вещества. m/z=493 и 495 (М+1).
Соединение 68а: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 67 (0,25 г, 0,51 ммоль), 4фторфенилбороновой кислоты (0,14 г, 1,00 ммоль) и фосфата калия (0,32 г, 1,51 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл) дегазировали и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (58 мг, 0,050 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали смесь при 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/5/5 ΕΏΑ^ΟΗ^Γ^^ηηβι) с получением соединения 68а (0,22 г, выход 85%) в виде желтого масла. m/z=509 (M+1).
Соединение 69а: Раствор соединения 68а (0,22 г, 0,43 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69а (0,22 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=465 (М+1).
Соединение 70а: Раствор соединения 69а (0,22 г, < 0,43 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,40 мл, 2,13 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70а (0,17 г, выход 80%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=493 (М+1).
Соединение 71а: Раствор соединения 70а (0,17 г, 0,34 ммоль), уксусной кислоты (0,20 мл, 3,50 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (35 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71а (0,17 г, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=490 (М+1).
Соединение 72а: Смесь соединения 71а (0,17 г, < 0,34 ммоль) и карбоната калия (0,24 г, 1,74 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 72а (0,10 г, выход 60%) в виде желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т65: В перемешиваемый раствор соединения 72а (93 мг, 0,19 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (30 мг, 0,10 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,15 мл, 1,86 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т65 (48 мг, выход 52%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 2Н), 7,72 (м, 2Н), 7,66 (м, 3H), 7,57 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,43 (м, 1H), 7,11 (м, 2Н), 2,94 (м, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,3, 13,9 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68b: Соединение 68b (желтое клейкое твердое вещество, 0,20 г, выход 78%) синтезировали из соединения 67 (0,25 г, 0,51 ммоль) и 2-фторфенилбороновой кислоты (0,14 г, 1,00 ммоль), используя ту же процедуру, что и для соединения 68а. Соединение 68b очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах). m/z=509 (M+1).
Соединение 69b: Раствор соединения 69b (0,20 г, 0,39 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69b (0,17 г, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 70b: Раствор соединения 69b (0,17 г, 0,37 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) об
- 81 047073 рабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,34 мл, 1,81 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70b (0,17 г, выход 94%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Соединение 71b: Раствор соединения 70b (0,17 г, 0,34 ммоль), уксусной кислоты (0,20 мл, 3,50 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (35 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHC.'O3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71b (0,16 г, выход 94%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Соединение 72b: Смесь соединения 71b (0,16 г, 0,33 ммоль) и карбоната калия (0,23 г, 1,66 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72b (0,15 г, выход 94%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т66: В перемешиваемый раствор соединения 72b (0,15 г, 0,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,25 мл, 3,10 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т66 (87 мг, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 2Н), 7,70 (с, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,59 (м, 3H), 7,50 (м, 2Н), 7,38 (м, 2Н), 7,18 (м, 2Н), 2,74 (м, 2Н), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,09 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68с: Соединение 68с (желтое твердое вещество, 0,18 г, выход 72%) синтезировали из соединения 67 (0,25 г, 0,51 ммоль) и пиридин-4-бороновой кислоты (0,12 г, 0,98 ммоль), используя ту же процедуру, что и для соединения 68а. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч. Соединение 68с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 100% EtOAc в гексанах). m/z=492 (M+1).
Соединение 69с: Раствор соединения 68с (0,18 г, 0,37 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,3 мл, 3,9 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69с (0,19 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=448 (М+1).
Соединение 70с: Раствор соединения 69с (0,19 г, < 0,37 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,35 мл, 1,86 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70с (0,16 г, выход 91%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=476 (М+1).
Соединение 71с: Раствор соединения 70с (0,16 г, 0,34 ммоль), уксусной кислоты (0,20 мл, 3,50 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (35 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения 71с (90 мг, выход 56%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Соединение 72с: Смесь соединения 71с (90 мг, 0,19 ммоль) и карбоната калия (0,13 г, 0,94 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72с (70 мг, выход 78%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Т67: В перемешиваемый раствор соединения 72с (70 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23 мг, 0,080 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,12 мл, 1,48 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт про
- 82 047073 мывали солевым раствором, сушили MgSO.4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т67 (40 мг, выход 57%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,66 (шир. с, 2Н), 7,83 (м, 2Н), 7,67 (м, 5Н), 7,57 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 7,44 (м, 1H), 3,04 (м, 1H), 2,93 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=6,5, 13,7 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68d: Соединение 68d (светло-желтое твердое вещество, 0,19 г, выход 76%) синтезировали из соединения 67 (0,25 г, 0,51 ммоль) и пиридин-3-бороновой кислоты (0,13 г, 1,06 ммоль), используя ту же процедуру, что и для соединения 68а. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч. Соединение 68d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах). m/z=492 (М+1).
Соединение 69d: Раствор соединения 68d (0,19 г, 0,39 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,3 мл, 3,9 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69d (0,23 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=448 (М+1).
Соединение 70d: Раствор соединения 69d (0,23 г, < 0,39 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,37 мл, 1,97 ммоль).
Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70d (0,17 г, выход 92%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 71d: Раствор соединения 70d (0,17 г, 0,36 ммоль), уксусной кислоты (0,21 мл, 3,67 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (38 мг, 0,55 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71d (0,15 г, выход 88%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Соединение 72d: Смесь соединения 71d (0,15 г, 0,32 ммоль) и карбоната калия (0,22 г, 1,59 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения 72d (99 мг, выход 66%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Т68: В перемешиваемый раствор соединения 72d (99 мг, 0,21 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (33 мг, 0,12 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,17 мл, 2,11 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т68 (57 мг, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=471 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,98 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,59 (д, J=4,0 Гц, 1H), 8,08 (тд, J=1,9, 8,0 Гц, 1H), 7,82 (м, 2Н), 7,67 (м, 3H), 7,58 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 7,44 (м, 1H), 7,35 (дд, J=4,5, 7,8 Гц, 1H), 2,99 (м, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,19 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68е: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 67 (0,21 г, 0,42 ммоль), 4метилфенилбороновой кислоты (0,11 г, 0,81 ммоль) и фосфата калия (0,27 г, 1,27 ммоль) в 1,4-диоксане (2,6 мл) и ДМФ (1,3 мл) дегазировали и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (59 мг, 0,051 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали смесь при 100°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/10/10 EtOAc/CH2Cl2/гексаны) с получением соединения 68е (0,13 г, выход 61%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Соединение 69е: Раствор соединения 68е (0,13 г, 0,26 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,0 мл, 3,0 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали
- 83 047073
CHC13 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69е (0,11 г, выход 93%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=461 (M+1).
Соединение 70е: Раствор соединения 69е (0,11 г, 0,24 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,22 мл, 1,17 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70е (0,15 г, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 71е: Раствор соединения 70е (0,15 г, < 0,24 ммоль), уксусной кислоты (0,14 мл, 2,44 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (25 мг, 0,36 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71е (0,12 г, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Соединение 72е: Смесь соединения 71е (0,12 г, < 0,24 ммоль) и карбоната калия (0,17 г, 1,23 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72е (0,11 г, выход 94%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Т69: В перемешиваемый раствор соединения 72е (0,11 г, 0,23 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (32 мг, 0,11 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,19 мл, 2,35 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т69 (40 мг, выход 37%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=484 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,79 (м, 2Н), 7,69 (с, 1H), 7,65 (м, 4Н), 7,58 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,43 (м, 1H), 7,23 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 2,96 (м, 1H), 2,88 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68f: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 67 (0,30 г, 0,61 ммоль), пиримидин-5-бороновой кислоты (0,15 г, 1,21 ммоль) и фосфата калия (0,39 г, 1,84 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (2 мл) дегазировали и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (70 мг, 0,060 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали смесь при 100°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 68f (0,11 г, выход 37%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Соединение 69f: Раствор соединения 68f (0,11 г, 0,22 ммоль) и 3Н водн. HCl (0,75 мл, 2,25 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69f (94 мг, выход 94%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=449 (М+1).
Соединение 70f: Раствор соединения 69f (94 мг, 0,21 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,20 мл, 1,07 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70f (96 мг, выход 96%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Соединение 71f: Раствор соединения 70f (96 мг, 0,20 ммоль), уксусной кислоты (0,15 мл, 2,62 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (21 мг, 0,30 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71f (86 мг, выход 90%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Соединение 72f: Смесь соединения 71f (86 мг, 0,18 ммоль) и карбоната калия (0,13 г, 0,94 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экс
- 84 047073 тракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72f (77 мг, выход 90%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Т70: В перемешиваемый раствор соединения 72f (77 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23 мг, 0,080 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т70 (35 мг, выход 46%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=472 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,19 (с, 1H), 9,12 (с, 2Н), 7,83 (м, 2Н), 7,67 (м, 2Н), 7,64 (с, 1H), 7,57 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 7,44 (м, 1H), 2,98 (м, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,21 (дд, J=6,3, 14,0 Гц, 1H), 1,86 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68g: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 67 (0,25 г, 0,51 ммоль), 3изопропилфенилбороновой кислоты (0,17 г, 1,04 ммоль) и фосфата калия (0,32 г, 1,51 ммоль) в 1,4диоксане (4 мл) и ДМФ (2 мл) дегазировали и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (59 мг, 0,051 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали смесь при 100°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1 Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/20/20 EtOAc/CH2Cl2/гексаны) с получением соединения 68g (0,10 г, выход 37%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=533 (M+1).
Соединение 69g: Раствор соединения 68g (0,10 г, 0,19 ммоль) и 3Н водн. HCl (0,60 мл, 1,80 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 48 ч. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69g (90 мг, выход 98%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 70g: Раствор соединения 69g (90 мг, 0,18 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,17 мл, 0,91 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70g (90 мг, выход 95%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=517 (M+1).
Соединение 71g: Раствор соединения 70g (90 мг, 0,17 ммоль), уксусной кислоты (0,10 мл, 1,75 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (18 мг, 0,26 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71g (89 мг, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Соединение 72g: Смесь соединения 71g (89 мг, 0,17 ммоль) и карбоната калия (0,12 г, 0,87 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72g (91 мг, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Т71: В перемешиваемый раствор соединения 72g (91 мг, < 0,17 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (24 мг, 0,084 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,14 мл, 1,73 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т71 (54 мг, выход 62%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=512 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (м, 2Н), 7,67 (м, 3H), 7,60 (м, 3H), 7,51 (м, 3H), 7,43 (м, 1H), 7,35 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,23 (м, 1H), 2,95 (м, 3H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,2, 13,8 Гц, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,28 (д, J=6,9 Гц 6Н).
Соединение 68h: Соединение 68h (светло-желтое твердое вещество, 0,15 г, выход 67%) синтезировали из соединения 67 (0,22 г, 0,44 ммоль), 2-метилфенилбороновой кислоты (0,12 г, 0,88 ммоль), ис
- 85 047073 пользуя ту же процедуру, что и для соединения 68g. Соединение 68h очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/20/20 ΕΏΑ^ΟΗ^Ι^^η^ι). m/z=505 (M+1).
Соединение 69h: Раствор соединения 68h (0,15 г, 0,30 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,0 мл, 3,0 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69h (0,15 г, количественный выход) в виде темножелтого масла. m/z=461 (M+1).
Соединение 70h: Раствор соединения 69h (0,15 г, < 0,30 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,28 мл, 1,49 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70h (0,15 г, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 71h: Раствор соединения 70h (0,15 г, < 0,30 ммоль), уксусной кислоты (0,17 мл, 2,97 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (31 мг, 0,45 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71h (0,15 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Соединение 72h: Смесь соединения 11h (0,15 г, < 0,30 ммоль) и карбоната калия (0,21 г, 1,52 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72h (0,14 г, выход 96%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Т72: В перемешиваемый раствор соединения 72h (0,14 г, 0,29 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (43 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т72 (91 мг, выход 65%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=484 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,78 (м, 2Н), 7,73 (с, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,58 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,42 (м, 1H), 7,32 (м, 1H), 7,28 (м, 2Н), 7,22 (м, 1H), 2,59 (м, 3H), 2,36 (с, 3H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1Н), 2,07 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 68i: Соединение 68i (светло-желтое твердое вещество, 0,28 г, выход 78%) синтезировали из соединения 67 (0,34 г, 0,69 ммоль), 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (0,21 г, 1,38 ммоль), используя ту же процедуру, что и для соединения 68g. Соединение 68i очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах). m/z=521 (М+1).
Соединение 69i: Раствор соединения 68i (0,28 г, 0,54 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,8 мл, 5,4 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 69i (0,27 г, количественный выход) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Соединение 70i: Раствор соединения 69i (0,27 г, < 0,54 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,53 мл, 2,82 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 70i (0,28 г, количественный выход) в виде рыже-оранжевого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Соединение 71i: Раствор соединения 70i (0,28 г, < 0,54 ммоль), уксусной кислоты (0,33 мл, 5,76 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (0,10 г, 1,44 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 71i (0,29 г, количественный выход) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=502 (M+1).
Соединение 72i: Смесь соединения 71i (70 мг, 0,14 ммоль) и карбоната калия (0,10 г, 0,72 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экс
- 86 047073 тракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 72i (59 мг, выход 84%) в виде желтого твердого вещества. m/z=502 (M+1).
Т73: В перемешиваемый раствор соединения 72i (59 мг, 0,12 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (21 мг, 0,073 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,10 мл, 1,24 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т73 (25 мг, выход 43%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=500 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,80 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,75 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,67 (м, 3H), 7,58 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,50 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 7,43 (м, 3H), 4,74 (с, 2Н), 2,98 (дд, J=5,9, 16,4 Гц, 1H), 2,90 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (м, 1H), 2,16 (дд, J=6,1, 13,7 Гц, 1H), 1,83 (тт, J=6,2, 12,6 Гц, 1H), 1,69 (шир. с, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 73: В перемешиваемый раствор соединения 71i (0,28 г, 0,56 ммоль) в CH2Cl2 (6 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор диэтиламиносеры трифторида (0,11 г, 0,68 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл). Через 30 мин холодную реакционную смесь вливали в насыщ. води. NaHCO3 (25 мл). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 73 (0,13 г, выход 46%) в виде светлого желто-белого твердого вещества. m/z=504 (M+1, 100%).
Соединение 74: Смесь соединения 73 (0,16 г, 0,32 ммоль) и карбоната калия (0,22 г, 1,59 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 74 (82 мг, выход 51%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=504 (M+1).
Т74: В перемешиваемый раствор соединения 74 (79 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (25 мг, 0,087 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т74 (37 мг, выход 47%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=502 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,79 (м, 4Н), 7,67 (м, 3H), 7,58 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,44 (м, 3H), 5,41 (д, JF-H=47,8 Гц, 2Н), 2,94 (м, 2Н), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,3, 13,8 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 75: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 67 (0,50 г, 1,01 ммоль), циклопропилтрифторбората калия (0,45 г, 3,04 ммоль), фосфата калия (0,64 г, 3,01 ммоль) и RuPhos (47 мг, 0,10 ммоль) в смеси толуол:вода (10:1, 10 мл). Добавляли ацетат палладия(П) (11 мг, 0,049 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 125°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/10/10 EtOAc/CH2Cl2/гексαны) с получением соединения 75 (0,16 г, выход 35%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=455 (M+1).
Соединение 76: Раствор соединения 75 (0,14 г, 0,31 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,0 мл, 3,0 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. раствором NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 76 (0,16 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=411 (М+1).
Соединение 77: Раствор соединения 76 (0,16 г, < 0,31 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,30 мл, 1,60 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 77 (0,14 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Соединение 78: Раствор соединения 78 (0,14 г, < 0,31 ммоль), уксусной кислоты (0,20 мл, 3,50 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (43 мг, 0,62 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в
- 87 047073 течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 78 (0,13 г, выход 96%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=436 (M+1).
Соединение 79: Смесь соединения 78 (0,13 г, 0,30 ммоль) и карбоната калия (0,22 г, 1,59 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 79 (0,13 г, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=436 (M+1).
Т75: В перемешиваемый раствор соединения 79 (0,13 г, 0,30 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т75 (57 мг, выход 44%) в виде желтого твердого вещества. m/z=434 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,74 (м, 2Н), 7,63 (м, 2Н), 7,61 (с, 1H), 7,48 (м, 4Н), 7,41 (м, 1H), 2,80 (ддд, J=1,3, 6,3, 16,1 Гц, 1H), 2,62 (ддд, J=6,7, 11,7, 16,1 Гц, 1H), 2,52 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,18 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,10 (дд, J=6,8, 13,8 Гц, 1H), 1,76 (м, 2Н), 1,55 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,90 (м, 4Н).
Соединение 80: В герметично закрываемой колбе смесь соединения 67 (0,46 г, 0,93 ммоль), 1циклогексен-1-ил-бороновой кислоты сложного пинаколового эфира (0,39 г, 1,87 ммоль) и фосфата калия (0,59 г, 2,78 ммоль) в 1,4-диоксане (9 мл) дегазировали и обрабатывали тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (0,11 г, 0,095 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали смесь при 100°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах) с получением соединения 80 (0,16 г, выход 35%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Соединение 81: Раствор соединения 80 (0,16 г, 0,32 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,1 мл, 3,3 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. раствором NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 81 (0,14 г, выход 96%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=451 (М+1).
Соединение 82: Смесь соединения 81 (0,14 г, 0,31 ммоль) и 10% палладия на углероде (50 мг) в EtOAc (20 мл) гидрогенизировали (баллонное давление) при комнатной температуре в течение ночи. Катализатор удаляли путем фильтрации. Фильтрат концентрировали с получением соединения 82 (0,16 г, количественный выход) в виде светло-желтого масла. m/z=453 (M+1).
Соединение 83: Раствор соединения 82 (0,16 г, < 0,31 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,29 мл, 1,54 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 83 (0,15 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=481 (M+1).
Соединение 84: Раствор соединения 83 (0,15 г, < 0,31 ммоль), уксусной кислоты (0,18 мл, 3,14 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (33 мг, 0,47 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 84 (0,13 г, выход 88%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=478 (М+1).
Соединение 85: Смесь соединения 84 (0,13 г, 0,27 ммоль) и карбоната калия (0,19 г, 1,37 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 85 (0,12 г, выход 92%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=478 (М+1).
Т76: В перемешиваемый раствор соединения 85 (0,12 г, 0,25 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (36 мг, 0,13 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,20 мл, 2,47 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт
- 88 047073 промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т76 (73 мг, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=476 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,75 (м, 2Н), 7,64 (м, 3H), 7,49 (м, 4Н), 7,41 (м, 1H), 2,75 (м, 1H), 2,58 (м, 2Н), 2,19 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,08 (дд, J=6,5, 13,7 Гц, 1H), 1,65 (м, 10H), 1,57 (с, 3H), 1,35 (м, 2Н), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 86: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 67 (130 мг, 0,263 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (20,8 мг, 0,0263 ммоль), XPhos (25 мг, 0,052 ммоль), морфолином (0,034 мл, 0,390 ммоль), трет-бутоксидом натрия (75,8 мг, 0,789 ммоль) и 1,4-диоксаном (3 мл). Сосуд герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 120°С с перемешиванием в течение 22 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали через подушку из целита®, а фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 86 (75 мг, выход 57%) в виде грязно-белого аморфного твердого вещества. m/z=500 (M+1).
Соединение 87: Раствор соединения 86 (147 мг, 0,294 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,98 мл, 2,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч. Добавляли дополнительное количество 3,0 Н водн. HCl (0,49 мл, 1,47 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 1,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 87 (147 мг, количественный выход) в виде стекла. m/z=456 (M+1).
Соединение 88: Смесь соединения 87 (134 мг, 0,294 ммоль) в этилформиате (10 мл, 0,12 моль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,54 мл, 2,92 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего охлаждали до 0°C. Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,55 мл, 3,30 ммоль) для доведения рН до ~ 2. Добавляли EtOH (25 мл) и гидроксиламина гидрохлорид (30,6 мг, 0,441 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 15 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 88 (42 мг, выход 30%) в виде желтого стекла. m/z=481 (М+1).
Соединение 89: Смесь 88 (42 мг, 0,0873 ммоль) и карбоната калия (24 мг, 0,174 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч.
Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 89 (15 мг, выход 36%) в виде белого стекла. m/z=481 (M+1).
Т77: Раствор соединения 89 (14 мг, 0,029 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (4,5 мг, 0,016 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,024 мл, 0,30 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т77 (6 мг, выход 43%) в виде желтого твердого вещества. m/z=479 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,75 (м, 2Н), 7,67 (с, 1H), 7,63 (м, 2Н), 7,48 (м, 4Н), 7,41 (м, 1H), 3,83 (м, 4Н), 3,23 (м, 2Н), 3,16 (м, 2Н), 2,72 (дд, J=4,8, 12,6 Гц, 1H), 2,54 (м, 2Н), 2,20 (т, J=10,1 Гц, 1H), 2,08 (дд, J=5,3, 11,0 Гц, 1H), 1,76 (кд, J=5,0, 10,0 Гц, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,6 Гц, 3H).
Соединение 90а: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 67 (200 мг, 0,405 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (32 мг, 0,040 ммоль), XPhos (38 мг, 0,080 ммоль), циклобутиламином (0,052 мл, 0,609 ммоль), трет-бутоксидом натрия (116 мг, 1,21 ммоль) и 1,4-диоксаном (3 мл). Сосуд герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 120°С с перемешиванием в течение 23 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали через подушку из целита®, а фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 90а (207 мг, количественный выход) в виде оранжевого стекла. m/z=484 (М+1).
Соединение 91а: Раствор 90а (207 мг, < 0,427 ммоль) в ТГФ (30 мл) обрабатывали 3,0 Н водн. HCl (1,43 мл, 4,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и
- 89 047073 концентрировали с получением соединения 91а (151 мг, выход 80%) в виде стекла. m/z=440 (М+1).
Соединение 92а: Смесь соединения 91а (150 мг, 0,341 ммоль) в этилформиате (15 мл, 0,18 моль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,32 мл, 1,73 ммоль). После завершения добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 92а (113 мг, выход 67%) в виде прозрачного стекла. m/z=496 (M+1).
Соединение 93а: Раствор 92а (112 мг, 0,226 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали 6,0Н водн. HCl (0,38 мл, 2,28 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (23 мг, 0,331 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 93а (83 мг, выход 79%) в виде желтого вязкого масла. m/z=465 (М+1).
Соединение 94а: Смесь соединения 93а (82 мг, 0,176 ммоль) и карбоната калия (49 мг, 0,355 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 94а (61 мг, выход 75%) в виде стекла. m/z=465 (M+1).
Т78: Раствор соединения 94а (60 мг, 0,129 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,070 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,104 мл, 1,29 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 80% МТБЭ в гексанах) с получением соединения Т78 (28 мг, выход 47%) в виде желтого стекла. m/z=463 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (м, 2Н), 7,63 (м, 3H), 7,48 (м, 4Н), 7,40 (м, 1H), 4,18 (пент, J=7,8 Гц, 1H), 2,47 (м, 4Н), 2,12 (м, 2Н), 1,69 (м, 6Н), 1,54 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 90b: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 67 (200 мг, 0,405 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (32 мг, 0,040 ммоль), XPhos (38 мг, 0,080 ммоль), метиламина гидрохлоридом (41 мг, 0,608 ммоль), трет-бутоксидом натрия (183 мг, 1,90 ммоль) и 1,4-диоксаном (3 мл). Сосуд герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 120°С с перемешиванием в течение 21 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали через подушку из целита®, а фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 90b (119 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества. m/z=444 (M+1).
Соединение 91b: Раствор соединения 90b (140 мг, 0,315 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,05 мл, 3,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 91b (126 мг, количественный выход) в виде желтого вязкого масла. m/z=400 (M+1).
Соединение 92b: Смесь соединения 91b (125 мг, 0,312 ммоль) в этилформиате (15 мл, 0,18 моль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,29 мл, 1,56 ммоль). После завершения добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 92b (126 мг, выход 86%) в виде желтого стекла. m/z=456 (M+1).
Соединение 93b: Раствор соединения 92b (125 мг, 0,274 ммоль) в EtOH (6 мл) обрабатывали 6,0Н водн. HCl (0,45 мл, 2,70 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (28 мг, 0,403 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 17 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 93b (109 мг, выход 94%) в виде желтого стекла. m/z=425 (M+1).
Соединение 94b: Смесь 93b (108 мг, 0,254 ммоль) и карбоната калия (70 мг, 0,508 ммоль) в метаноле (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали соле
- 90 047073 вым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50-60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 94Ь (74 мг, выход 69%) в виде белого стекла. m/z=425 (M+1).
Т79: Раствор соединения 94b (73 мг, 0,172 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (27 мг, 0,098 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,139 мл, 1,72 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование МТБЭ) с получением соединения Т79 (41 мг, выход 56%) в виде желтого стекла. m/z=423 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,73 (м, 2Н), 7,63 (м, 3H), 7,49 (м, 4Н), 7,40 (м, 1H), 3,33 (шир. с, 1H), 2,94 (с, 3H), 2,47 (м, 3H), 2,16 (дт, J=2,1, 12,6 Гц, 1H), 2,09 (м, 1H), 1,76 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 95: Раствор соединения 93а (77 мг, 0,17 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали 37% водн. Раствором формалина (0,067 мл, 0,90 ммоль) и муравьиной кислоты (88%, 0,021 мл, 0,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 1 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 95 (31 мг, выход 39%) в виде оранжевого стекла. m/z=479 (M+1).
Соединение 96: Смесь 95 (30 мг, 0,063 ммоль) и карбоната калия (17 мг, 0,12 ммоль) в МеОН (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 96 (18 мг, выход 60%) в виде стекла. m/z=479 (M+1).
Т80: Раствор 96 (18 мг, 0,038 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (5,9 мг, 0,021 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,030 мл, 0,37 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование МТБЭ) с получением соединения Т80 (11 мг, выход 61%) в виде желтого стекла. m/z=477 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (м, 3H), 7,63 (м, 2Н), 7,48 (м, 4Н), 7,41 (м, 1H), 3,98 (м, 1H), 2,75 (с, 3H), 2,74 (м, 1H), 2,60 (м, 1H), 2,51 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,13 (м, 5Н), 1,68 (м, 2Н), 1,52 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,28 (м, 2Н).
Соединение 97: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 67 (500 мг, 1,01 ммоль), 2-три-п-бутилстаннилпиридином (559 мг, 1,52 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (80 мг, 0,10 ммоль), XPhos (96 мг, 0,20 ммоль), трет-бутоксидом натрия (291 мг, 3,02 ммоль) и 1,4-диоксаном (10 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 150°С в течение 23 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 97 (184 мг, выход 37%), которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=492 (M+1).
Соединение 98: Раствор соединения 97 (199 мг, 0,41 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (3 мл, 9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток смешивали с небольшим количеством EtOAc. Нерастворимое твердое вещество удаляли путем фильтрации. Фильтрат концентрировали с получением частично очищенного соединения 98 (64 мг, выход 35%) и использовали без дополнительной очистки. m/z=448 (M+1).
Соединение 99: Смесь соединения 98 (63 мг, 0,14 ммоль) в этилформиате (5 мл, 61 ммоль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,26 мл, 1,40 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего охлаждали до 0°C. Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,26 мл, 1,56 ммоль) для доведения рН до ~2. Добавляли EtOH (15 мл) и гидроксиламина гидрохлорид (15 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 2,5 ч и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 99 (67 мг, количественный выход), которое использовали
- 91 047073 без дополнительной очистки. m/z=473 (М+1).
Соединение 100: Смесь 99 (67 мг, < 0,14 ммоль) и карбоната калия (39 мг, 0,28 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 28 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 100 (17 мг, выход 25%) в виде белого стекла. m/z=473 (M+1).
Т81: Раствор соединения 100 (16 мг, 0,034 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (5,3 мг, 0,019 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,027 мл, 0,34 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т81 (11 мг, выход 69%) в виде желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (тд, J=1,4, 4,9 Гц, 1H), 7,96 (тд, J=1,1, 8,0 Гц, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,68 (м, 4Н), 7,59 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,43 (м, 1H), 7,21 (ддд, J=1,2, 4,9, 7,5 Гц 1H), 3,36 (дд, J=5,9, 17,2 Гц, 1H), 2,97 (ддд, J=6,8, 11,8, 17,8 Гц, 1H), 2,55 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,7, 13,8 Гц, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 101: В раствор соединения 3 (1 г, 4,56 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) последовательно добавляли этилэфират бромида магния (2,96 г, 11,46 ммоль) и N.N-диизопропилэтиламин (1,8 г, 13,93 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин и обрабатывали 2-фторбензоилхлоридом (0,9 г, 5,68 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 101 (675 мг, выход 43%) в виде твердого вещества. m/z=342 (М+1).
Соединение 102: Соединение 101 (0,78 г, 2,28 ммоль) и HCl-соли 4-бром-фенилгидразина (1,2 г, 5,37 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали при 120°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 10 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 102 (845 мг, выход 75%) в виде твердого вещества. m/z=492/494 (М+1).
Соединение 103: Соединение 102 (0,25 г, 0,51 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (0,35 г, 2,54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах) с получением соединения 103 (225 мг, выход 90%) в виде твердого вещества. m/z=492/494 (М+1).
Соединение 104а: Соединение 103 (240 мг, 0,49 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (320 мг, 1,51 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и пиридин-5-илбороновую кислоту (95 мг, 0,77 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 104а (110 мг, выход 46%) в виде твердого вещества. m/z=492 (М+1).
Т82: Соединение 104а (110 мг, 0,22 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (37 мг, 0,23 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т82 (30 мг, выход 27%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=490 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,29 (с, 1H), 9,05 (с, 2Н), 7,82 (м, 2Н), 7,71 (м, 2Н), 7,65 (с, 1H), 7,58 (дт, J=1,9, 7,5 Гц, 1H), 7,38 (м, 1H), 7,18 (м, 2Н), 2,74 (м, 2Н), 2,58 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,11 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 104b (T186): Соединение 103 (200 мг, 0,41 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K2CO3 (170 мг, 1,23 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (30 мг, 0,041 ммоль) и 6метилпиридазин-4-илбороновой кислоты сложный пинаколовый эфир (125 мг, 0,57 ммоль). Смесь про
- 92 047073 дували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 104b (150 мг, выход 73%) в виде твердого вещества. m/z=506 (M+1).
Т83: Соединение 104b (150 мг, 0,30 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (47 мг, 0,29 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т83 (68 мг, выход 46%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=504 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,37 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,89 (м, 2Н), 7,72 (м, 2Н), 7,62 (с, 1H), 7,58 (м, 2Н), 7,38 (м, 1H), 7,19 (м, 2Н), 2,84 (с, 3H), 2,74 (м, 2Н), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,12 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 104с: Соединение 103 (250 мг, 0,51 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K2CO3 (205 мг, 1,49 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (50 мг, 0,068 ммоль) и пиридин-4-илбороновую кислоту (95 мг, 0,77 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 070% EtOAc в гексанах) с получением соединения 104с (105 мг, выход 42%) в виде твердого вещества. m/z=491 (М+1).
Т84: Соединение 104с (105 мг, 0,21 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (35 мг, 0,22 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т84 (44 мг, выход 42%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=489 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (м, 2Н), 7,85 (м, 2Н), 7,66 (м, 3H), 7,58 (м, 3H), 7,37 (дддд, J=1,9, 5,2, 7,2, 8,2 Гц, 1H), 7,20 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1H), 7,15 (м, 1H), 2,74 (м, 2Н), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,11 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 105: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 103 (225 мг, 0,456 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (36 мг, 0,045 ммоль), XPhos (43 мг, 0,090 ммоль), морфолином (0,059 мл, 0,67 ммоль), трет-бутоксидом натрия (131 мг, 1,36 ммоль) и 1,4-диоксаном (4 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 120°С с перемешиванием в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 105 (139 мг, выход 61%) в виде белого стекла. m/z=499 (M+1).
Т85: Раствор 105 (138 мг, 0,277 ммоль) в безводном толуоле (15 мл) в атмосфере азота обрабатывали ДДХ (81 мг, 0,358 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т85 (30 мг, выход 22%) в виде коричнево-белого твердого вещества. m/z=497 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,70 (с, 1H), 7,59 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,37 (м, 3H), 7,15 (м, 2Н), 7,00 (м, 2Н), 3,90 (м, 4Н), 3,27 (м, 4Н), 2,70 (м, 2Н), 2,54 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,05 (м, 1H), 1,75 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 107а: Смесь соединения 101 (150 мг, 0,44 ммоль), соединения 106а (166 мг, 0,88 ммоль) и 12Н водн. HCl (73 мкл, 0,88 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 040% EtOAc в гексанах) с получением соединения 107а (64 мг, выход 29%) в виде желтого твердого вещества. m/z=495 (М+1).
Соединение 108а: Смесь соединения 107а (60 мг, 0,12 ммоль) в МеОН (1,2 мл) обрабатывали карбонатом калия (25 мг, 0,18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разводили EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 108а (59 мг, выход 98%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=495 (М+1).
Т86: Раствор соединения 108а (59 мг, 0,12 ммоль) в безводном ДМФ (0,8 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (17 мг, 0,059 ммоль) в безводном ДМФ
- 93 047073 (0,4 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли безводный пиридин (29 мкл, 0,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т86 (40 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества. m/z=493 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,03 (с, 1H), 7,77 (м, 2Н), 7,57 (м, 4Н), 7,44 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,2 Гц, 1H), 7,25 (дт, J=1,2, 7,6 Гц, 1H), 7,20 (ддд, J=1,1, 8,3, 10,5 Гц, 1H), 3,74 (с, 3H), 2,68 (м, 3H), 2,30 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1H), 1,90 (с, 3H), 1,81 (м, 1H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 107b: Соединение 107а (оранжевое твердое вещество, 65 мг, выход 30%) синтезировали из соединения 101 (150 мг, 0,44 ммоль) и соединения 106b (168 мг, 0,88 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 107а. Соединение 107b очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-10% EtOAc в гексанах). m/z=497 (M+1).
Соединение 108b: Соединение 108b (оранжевое твердое вещество, 59 мг, выход 98%) синтезировали из соединения 107b (60 мг, 0,12 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 108а. После обработки неочищенный продукт использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=497 (M+1).
Т87: Соединение Т87 (белое твердое вещество, 25 мг, 42%) синтезировали из соединения 108b (59 мг, 0,12 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (17 мг, 0,059 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т86. Соединение Т87 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах). m/z=495 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,54 (с, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,64 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,37 (м, 6Н), 7,19 (м, 1H), 2,67 (м, 3H), 2,34 (дт, J=2,0, 12,5 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,87 (с, 3H), 1,71 (дк, J=5,4, 12,6 Гц, 1H), 1,39 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 107с: Смесь соединения 101 (150 мг, 0,44 ммоль), соединения 106с (154 мг, 0,66 ммоль) и 12Н водн. HCl (73 мкл, 0,88 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 107с (94 мг, выход 40%) в виде желтого твердого вещества. m/z=539 (М+1).
Соединение 108с: Соединение 108с (бледно-желтое твердое вещество, 85 мг, выход 94%) синтезировали из соединения 107с (90 мг, 0,17 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 108а. После обработки неочищенный продукт использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=539 (М+1).
Т88: Соединение Т88 (бледно-желтое твердое вещество, 60 мг, 71%) синтезировали из соединения 108с (85 мг, 0,16 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23 мг, 0,080 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения Т86. Соединение Т88 очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах). m/z=537 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,29 (с, 1H), 8,16 (м, 1H), 7,94 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,63 (м, 2Н), 7,47 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,3 Гц, 1H), 7,29 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1H), 7,20 (ддд, J=1,1, 8,3, 10,5 Гц, 1H), 2,68 (м, 3H), 2,30 (дт, J=1,9, 12,6 Гц, 1H), 2,09 (м, 1H), 1,88 (с, 3H), 1,72 (дк, J=5,3, 12,2 Гц, 1H), 1,38 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 107d: Смесь соединения 101 (55 мг, 0,16 ммоль), соединения 106d (48 мг, 0,24 ммоль) и 12Н водн. HCl (20 мкл, 0,24 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель) с получением соединения 107d (40 мг, выход 49%) в виде желтого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Соединение 108d: Смесь соединения 107d (40 мг, 0,079 ммоль) в МеОН (1 мл) обрабатывали карбонатом калия (16 мг, 0,12 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разводили EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 108d (31 мг, выход 78%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Т89: Раствор соединения 108d (30 мг, 0,059 ммоль) в безводном ДМФ (0,6 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (8,5 мг, 0,030 ммоль) в безводном ДМФ (0,4 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли безводный пиридин (14 мкл, 0,17 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т89 (17 мг, выход 57%) в виде бледно-желтого твердого вещества. m/z=503 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,35 (с, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,63 (дт, J=1,7, 7,4 Гц, 1H), 7,45 (м, 2Н), 7,29 (м, 1H), 7,19 (м, 1H), 2,67 (м, 3H),
- 94 047073
2,30 (дт, J=1,9, 12,6 Гц, 1H), 2,08 (м, 1H), 1,85 (с, 3H), 1,70 (дк, J=5,5, 12,5 Гц, 1H), 1,38 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 107е: Смесь соединения 101 (100 мг, 0,29 ммоль), соединения 106е (71 мг, 0,44 ммоль) и 12Н водн. HCl (50 мкл, 0,60 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 070% EtOAc в гексанах) с получением соединения 107е (45 мг, выход 33%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=468 (M+1).
Соединение 108е: Смесь соединения 107е (40 мг, 0,096 ммоль) в МеОН (1 мл) обрабатывали карбонатом калия (20 мг, 0,14 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разводили EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 108е (42 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=468 (M+1).
Т90: Раствор соединения 108е (42 мг, 0,090 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (12,8 мг, 0,045 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли безводный пиридин (22 мкл, 0,27 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т90 (10 мг, выход 24%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=466 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,27 (с, 1H), 7,81 (м, 1H), 7,57 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,41 (м, 4Н), 7,21 (м, 2Н), 3,86 (с, 3H), 2,72 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,10 (м, 1H), 1,85 (с, 3H), 1,79 (м, 1H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 107f: Соединение 107f (белое твердое вещество, 100 мг, выход 75%) синтезировали из соединения 101 (100 мг, 0,29 ммоль) и соединения 106f (65 мг, 0,44 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 107е. Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 4 ч. Соединение 107f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах). m/z=454 (M+1).
Соединение 108f: Смесь соединения 107f (100 мг, 0,22 ммоль) в МеОН (2,2 мл) обрабатывали карбонатом калия (45 мг, 0,33 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разводили EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 108f (100 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=454 (M+1).
Т91: Раствор соединения 108f (100 мг, 0,22 ммоль) в безводном ДМФ (1,2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (31 мг, 0,11 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли безводный пиридин (54 мкл, 0,67 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 010% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т91 (30 мг, 30%) в виде белого твердого вещества. m/z=452 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,96 (шир. с, 1H), 9,64 (с, 1H), 7,74 (м, 1H), 7,61 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,45 (м, 2Н), 7,29 (м, 3H), 7,21 (ддд, J=1,1, 8,3, 10,5 Гц, 1H), 2,69 (м, 3H), 2,30 (дт, J=1,9, 12,6 Гц, 1H), 2,08 (дд, J=5,6, 13,5 Гц, 1H), 1,93 (с, 3H), 1,73 (дк, J=5,7, 12,4 Гц, 1H), 1,38 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 107g: Соединение 107g (желтое твердое вещество, 93 мг, выход 67%) синтезировали из соединения 101 (100 мг, 0,29 ммоль) и соединения 106g (72 мг, 0,44 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 107е. Соединение 107g очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-15% EtOAc в гексанах). m/z=471 (M+1).
Соединение 108g: Смесь соединения 107g (60 мг, 0,13 ммоль) в МеОН (2 мл) обрабатывали карбонатом калия (35 мг, 0,25 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разводили EtOAc. Смесь промывали 1Н водн. HCl. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 108g (55 мг, выход 92%) в виде белого твердого вещества. m/z=471 (M+1).
Т92: Раствор соединения 108g (55 мг, 0,12 ммоль) в безводном ДМФ (0,6 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (17 мг, 0,059 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 12 ч, после чего добавляли безводный пиридин (28 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органиче
- 95 047073 ские экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-10% EtOAc в CH2Cl2) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т92 (30 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества. m/z=469 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,41 (с, 1H), 7,90 (ддд, J=0,6, 1,2, 8,2 Гц, 1H), 7,84 (ддд, J=0,6, 1,3, 7,9 Гц, 1H), 7,65 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,44 (м, 3H), 7,29 (дд, J=1,2, 7,6 Гц, 1H), 7,19 (ддд, J=1,0, 8,3, 10,5 Гц, 1H), 2,68 (м, 3H), 2,32 (дт, J=1,9, 12,5 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,89 (с, 3H), 1,71 (дк, J=5,5, 12,4 Гц, 1H), 1,38 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 109: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 103 (0,52 г, 1,06 ммоль), бис(пинаколато)дибора (0,40 г, 1,58 ммоль) и ацетата калия (0,32 г, 3,26 ммоль) в 1,4-диоксане (11 мл). Добавляли 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия (II) хлорид (78 мг, 0,11 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и насыщ. водн. NaCl (50 мл).
Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 109 (0,29 г, выход 51%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=540 (M+1).
Соединение 110: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 109 (0,29 г, 0,54 ммоль), 4-хлорпиримидина (77 мг, 0,67 ммоль) и фосфата калия (0,34 г, 1,60 ммоль) в 1,4-диоксане (4,8 мл) и ДМФ (1,2 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (62 мг, 0,054 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 110 (0,16 г, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=492 (М+1).
Т93: В перемешиваемый раствор соединения 110 (0,16 г, 0,33 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (46 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,26 мл, 3,22 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3). Полученный примесный продукт растирали с EtOAc. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением Т93 (29 мг, выход 18%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=490 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,34 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,87 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,35 (м, 2Н), 7,83 (дд, J=1,5, 5,4 Гц, 1H), 7,70 (м, 2Н), 7,59 (м, 2Н), 7,38 (дддд, J=1,9, 5,2, 7,1, 8,3 Гц, 1H), 7,18 (м, 2Н), 2,74 (м, 2Н), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,11 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 111: Соединение 101 (0,18 г, 0,53 ммоль) и 4-цианофенилгидразина гидрохлорид (220 мг, 1,30 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали при 120°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 10 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 111 (180 мг, выход 78%) в виде твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Соединение 112: Соединение 111 (172 мг, 0,39 ммоль) растворяли в EtOH (5 мл). Добавляли гидроксиламин (50% в воде, 85 мг, 1,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи, после чего концентрировали с получением соединения 112 (180 мг, выход 97%) в виде твердого вещества. m/z=472 (M+1).
Соединение 113: Соединение 112 (0,18 г, 0,38 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (10 мл). Добавляли диметилацетамида диметилацеталь (0,2 г, 1,50 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 113 (120 мг, выход 63%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 114: Соединение 113 (0,12 г, 0,24 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл) и добавляли K2CO3 (0,17 г, 1,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 114 (85 мг, выход 71%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
- 96 047073
Т94: Соединение 114 (85 мг, 0,17 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (30 мг, 0,19 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и перемешивали реакционную смесь при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т94 (50 мг, выход 59%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=494 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,31 (м, 2Н), 7,66 (м, 2Н), 7,58 (м, 2Н), 7,37 (м, 1H), 7,18 (м, 2Н), 2,73 (м, 2Н), 2,70 (с, 3H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,10 (м, 1H), 1,78 (м, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 115: Соединение 111 (0,56 г, 1,28 ммоль) смешивали в 50% водн. H2SO4 (10 мл) и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C, разводили водой (20 мл) и нейтрализовали NaHCO3 (твердое вещество) до рН 5. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 115 (0,57 г, выход 98%). m/z=458 (M+1).
Соединение 116: Соединение 115 (0,56 г, 1,22 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (0,8 г, 6,30 ммоль) и 1 каплю ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали с получением кислого хлорида. Кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Этот раствор добавляли в раствор N-гидроксиацетамидина (145 мг, 1,96 ммоль) и Et3N (1 г, 9,90 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 116 (0,4 г, выход 64%) в виде твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Соединение 117: Соединение 116 (0,4 г, 0,78 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) обрабатывали пропилфосфоновым ангидридом (50 мас.% в EtOAc, 1,5 г, 2,36 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 117 (0,26 г, выход 67%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 118: Соединение 117 (0,26 г, 0,53 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (365 мг, 2,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 118 (0,25 г, выход 96%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Т95: Соединение 118 (0,25 г, 0,50 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли бром (81 мг, 0,51 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т95 (0,17 г, выход 68%) в виде белого твердого вещества. m/z=494 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,36 (м, 2Н), 7,72 (м, 2Н), 7,57 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,38 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,3 Гц, 1H), 7,21 (д, J=1,2, 7,6 Гц, 1H), 7,15 (м, 1H), 2,74 (м, 2Н), 2,56 (м, 1H), 2,52 (с, 3H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 119: Смесь соединения 63 (0,8 г, 3,36 ммоль), диэтилоксалата (5 г, 34,21 ммоль) и гидрида натрия (60% в минеральном масле, 0,55 г, 13,75 ммоль) в ТГФ (25 мл) нагревали при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах) с получением соединения 119 (0,78 г, выход 69%) в виде масла. m/z 339 (М+1).
Соединение 120: Соединение 119 (365 мг, 1,08 ммоль) и бифенил-4-илгидразина гидрохлорид (0,3 г, 1,36 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали при 120°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 75 мин. Реакционную смесь концентрировали. Остаток обрабатывали водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт концентрировали. Остаток смешивали с ТГФ (5 мл) и 3Н водн. HCl (3 мл, 9 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 120 (0,32 г, выход 67%) в виде масла. m/z=443 (M+1).
Соединение 121: Соединение 120 (0,31 г, 0,70 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 0,12 моль).
- 97 047073
Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1,27 г, 7,05 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (70 мг, 1,01 ммоль) и 12Н водн. HCl (3 капли). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 121 (125 мг, выход 38%) в виде твердого вещества. m/z=468 (М+1).
Соединение 122: Смесь соединения 121 (125 мг, 0,27 ммоль) и 50% водн. H2SO4 (3 мл) нагревали при 130°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C, разводили водой (10 мл) и нейтрализовали NaHCO3 (твердое вещество) до рН 5. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 122 (0,12 г, количественный выход). m/z=440 (M+1).
Соединение 123: Соединение 122 (0,12 г, 0,27 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (175 мг, 1,38 ммоль) и 1 каплю ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и концентрировали с получением кислого хлорида. Кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Этот раствор добавляли в раствор N-гидроксиацетамидина (30 мг, 0,40 ммоль) и Et3N (250 мг, 2,47 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 123 (75 мг, выход 55%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 124: Соединение 123 (72 мг, 0,15 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали пропилфосфоновым ангидридом (50 мас.% в EtOAc, 0,25 г, 0,39 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 124 (40 мг, выход 56%) в виде твердого вещества. m/z=478 (M+1).
Соединение 125: Соединение 124 (80 мг, 0,17 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (115 мг, 0,83 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 125 (80 мг, количественный выход) в виде твердого вещества. m/z=478 (M+1).
Т96: Раствор соединения 125 (80 мг, 0,17 ммоль) в сухом ДМФ (3 мл) обрабатывали 1,3-дибром-5,5диметилгидантоином (26 мг, 0,091 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением Т96 (45 мг, выход 56%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=476 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,82 (м, 2Н), 7,66 (м, 2Н), 7,60 (с, 1H), 7,56 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 7,44 (м, 1H), 3,24 (дд, J=6,0, 18,0 Гц, 1H), 2,90 (ддд, J=6,9, 11,8, 17,9 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=7,0, 14,1 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 126: Смесь соединения 4 (200 мг, 0,62 ммоль), 5-бром-2-гидразинилпиридина (232 мг, 1,23 ммоль) и 6Н водн. HCl (0,21 мл, 1,26 ммоль) в EtOH (4 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 120°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (20 мл) и промывали водой (2x15 мл). Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 126 (264 мг, выход 90%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=475/477 (М+1).
Соединение 127: Соединение 126 (164 мг, 0,35 ммоль) растворяли в МеОН (3,4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,15 мл, 0,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь обрабатывали 10% водн. NaH2PO4 (15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 040% EtOAc в гексанах) с получением соединения 127 (159 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества. m/z=475/477 (М+1).
Соединение 128: Смесь соединения 127 (47 мг, 0,099 ммоль), фенилбороновой кислоты (18 мг, 0,15 ммоль), K3PO4 (63 мг, 0,30 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (6 мг, 0,0052 ммоль) в колбе
- 98 047073 продували N2. 1,4-диоксан (0,5 мл) и ДМФ (0,25 мл) дегазировали N2 и добавляли в колбу. Колбу наполняли N2 и герметично закрывали. Смесь нагревали при 90°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (3x15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 128 (34 мг, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Т97: Соединение 128 (33 мг, 0,070 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (10 мг, 0,035 ммоль) в ДМФ (0,1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (28 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (3x10 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Добавляли толуол (10 мл) и концентрировали смесь для удаления остаточного пиридина. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т97 (20 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества. m/z=471 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,73 (с, 1H), 8,68 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,19 (м, 1H), 8,10 (дд, J=2,5, 8,6 Гц, 1H), 7,79 (м, 2Н), 7,66 (м, 2Н), 7,47 (м, 6Н), 2,94 (дд, J=5,8, 16,0 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,69 (кд, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 2,25 (дт, J=2,0, 12,5 Гц, 1H), 2,12 (дд, J=6,1, 13,7 Гц, 1H), 1,98 (с, 3H), 1,82 (тдд, J=6,0, 12,6, 18,7 Гц, 1H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 130: Смесь соединения 40 (120 мг, 0,37 ммоль), соединения 129 (91 мг, 0,55 ммоль) и 12Н водн. HCl (0,05 мл, 0,60 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 130 (70 мг, выход 42%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=455 (M+1).
Соединение 131: Соединение 130 (70 мг, 0,15 ммоль) в МеОН (2 мл) обрабатывали K2CO3 (43 мг, 0,31 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 131 (63 мг, выход 90%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=455 (M+1).
Т98: Соединение 131 (63 мг, 0,14 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,069 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (34 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т98 (26 мг, выход 41%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=453 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,30 (с, 1H), 9,27 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,83 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,09 (дд, J=1,5, 5,3 Гц, 1H), 7,93 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,52 (ддд, J=1,3, 7,2, 8,3 Гц, 1H), 7,44 (дт, J=1,2, 7,7 Гц, 1H), 3,42 (дд, J=5,2, 17,6 Гц, 1H), 2,92 (ддд, J=6,3, 12,0, 17,9 Гц, 1H), 2,72 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=1,7, 12,5 Гц, 1H), 2,15 (дд, J=6,1, 13,9 Гц, 1H), 1,91 (с, 3H), 1,77 (дк, J=5,6, 12,8 Гц, 1H), 1,40 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 133: В перемешиваемую суспензию соединения 3 (2,45 г, 11,17 ммоль) в CH2Cl2 (100 мл) добавляли эфират бромида магния (7,21 г, 27,92 ммоль) и ^№диизопропилэтиламин (8,12 мл, 46,42 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин, частями добавляли никотиноилхлорид гидрохлорид 132 (2,58 г, 14,52 ммоль) в течение 30 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 21 ч при комнатной температуре, после чего промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 133 (2,10 г, выход 58%). m/z=325 (M+1).
Соединение 134: Смесь соединения 133 (100 мг, 0,31 ммоль), соединения 129 (76 мг, 0,46 ммоль) и 12Н водн. HCl (0,051 мл, 0,62 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 134 (90 мг, выход 64%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=454 (M+1).
Соединение 135: Соединение 134 (90 мг, 0,20 ммоль) в МеОН (2 мл) обрабатывали K2CO3 (55 мг, 0,40 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 135 (57 мг, выход 63%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=454 (M+1).
- 99 047073
Т99: Соединение 135 (57 мг, 0,13 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (18 мг, 0,063 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (34 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали 1Н водн. HCl и водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т99 (19 мг, выход 33%) в виде бледно-розового твердого вещества. m/z=452 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,37 (с, 1H), 9,02 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,67 (дд, J=1,7, 4,9 Гц, 1H), 8,13 (тд, J=2,0, 8,0 Гц, 1H), 7,91 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,86 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,51 (ддд, J=1,3, 7,3, 8,2 Гц, 1H), 7,43 (м, 2Н), 2,90 (м, 2Н), 2,72 (тд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,31 (дт, J=1,7, 12,4 Гц, 1H), 2,17 (м, 1H), 1,90 (с, 3H), 1,78 (тдд, J=6,4, 13,2, 19,5 Гц, 1H), 1,40 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 136: Раствор соединения 67 (847 мг, 1,72 ммоль) в ТГФ (50 мл) обрабатывали 6,0Н водн. HCl (2,86 мл, 17,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 136 (862 мг, количественный выход) в виде вязкого масла и использовали без дополнительной очистки. m/z=449/451 (М+1).
Соединение 137: Раствор соединения 136 (862 мг, < 1,72 ммоль) в этилформиате (120 мл, 1,49 моль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 3,53 мл, 19,06 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 137 (753 мг, выход 92%) в виде стекла. m/z=477/479 (М+1).
Соединение 138: Раствор соединения 137 (753 мг, 1,58 ммоль) в EtOH (15 мл) обрабатывали 6,0Н водн. HCl (2,61 мл, 15,66 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (164 мг, 2,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в атмосфере азота в течение 22 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 138 (706 мг, выход 94%) в виде светло-коричневого вязкого масла, которое постепенно затвердевало после отстаивания. Соединение 138 использовали без дополнительной очистки. m/z=474/476 (М+1).
Соединение 139: Раствор соединения 138 (706 мг, 1,49 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (411 мг, 2,97 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 6 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 139 (380 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества. m/z=474/476 (М+1).
Соединение 140: Раствор соединения 139 (150 мг, 0,316 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (49,6 мг, 0,173 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,10 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 140 (133 мг, выход 89%) в виде желтого твердого вещества. m/z=472/474 (M+1).
Т100: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 140 (133 мг, 0,281 ммоль), анилином (0,038 мл, 0,421 ммоль), t-BuXPhosPd-G3 (22,3 мг, 0,028 ммоль), XPhos (26,7 мг, 0,056 ммоль), трет-бутоксидом натрия (81 мг, 0,843 ммоль) и 1,4-диоксаном (4 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 120°С с перемешиванием в течение 22 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т100 в виде оранжевого стекла (33 мг, выход 24%). m/z=485 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,77 (м, 2Н), 7,66 (м, 3H), 7,55 (м, 2Н), 7,49 (м, 2Н), 7,42 (м, 1H), 7,25 (д, J=0,7 Гц, 2Н), 7,24 (с, 2Н), 6,87 (м, 1H), 5,66 (шир. с, 1H), 2,54 (м, 3H), 2,22 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,11 (дд, J=6,5, 13,9 Гц, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 141: В раствор соединения 3 (600 мг, 2,74 ммоль) в CH2Cl2 (30 мл) последовательно добавляли эфират бромида магния (1,77 г, 6,85 ммоль) и N.N-диизопропилэт-иламин (1,99 г, 11,42 ммоль)
- 100 047073 при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 5 мин и частями добавляли изоникотиноилхлорид гидрохлорид (633 мг, 3,56 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 22 ч реакционную смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4, водой и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 141 (428 мг, выход 48%). m/z=325 (M+1).
Соединение 142: Смесь соединения 141 (428 мг, 1,32 ммоль), (4-бромфенил)гидразина гидрохлорида (590 мг, 2,64 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 120°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 142 (465 мг, выход 74%) в виде оранжевого стекла. m/z=475/477 (М+1).
Соединение 143: Раствор соединения 142 (459 мг, 0,965 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали карбонатом калия (267 мг, 1,93 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Нерастворимое твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили с получением соединения 143 (290 мг, выход 63%) в виде оранжевого твердого вещества. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в EtOAc) с получением второго сбора соединения 143 (56 мг, выход 12%) в виде оранжевого стекла. m/z=475/477 (М+1).
Соединение 144: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 143 (345 мг, 0,725 ммоль), 5-фторпиридин-3-бороновой кислотой (153 мг, 1,09 ммоль), трехосновным фосфатом калия (462 мг, 2,17 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (42 мг, 0,036 ммоль), 1,4-диоксаном (4 мл) и ДМФ (2 мл). Сосуд продували N2 и герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 22 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 144 (175 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества. m/z=492 (M+1).
Т101: Раствор соединения 144 (137 мг, 0,278 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (44 мг, 0,153 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,22 мл, 2,73 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения Т101 (115 мг, выход 84%) в виде желтого стекла. m/z=490 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,77 (т, J=1,7 Гц, 1H), 8,66 (шир. д, J=5,2 Гц, 2Н), 8,56 (д, J=2,7 Гц, 1H), 7,83 (м, 2Н), 7,70 (ддд, J=1,9, 2,7, 9,2 Гц, 1H), 7,65 (м, 4Н), 7,60 (с, 1H), 3,04 (м, 1H), 2,94 (м, 1H), 2,57 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,29 (дт, J=2,1, 12,8 Гц, 1H), 2,21 (дд, J=6,5, 13,9 Гц, 1H), 1,85 (тдд, J=6,4, 12,8, 19,1 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 145: Смесь соединения 133 (284 мг, 0,875 ммоль), (4-бромфенил)гидразина гидрохлорида (391 мг, 1,75 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 100°С в течение 4 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 145 (349 мг, выход 84%) в виде оранжевого стекла. m/z=475/477 (M+1).
Соединение 146: Раствор 145 (448 мг, 0,942 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали карбонатом калия (260 мг, 1,88 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). Полученный продукт растирали с гексанами. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 146 (350 мг, выход 78%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=475/477 (M+1).
Соединение 147а: Сосуд для микроволновой обработки наполняли соединением 146 (150 мг, 0,315 ммоль), 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазином (104 мг, 0,473 ммоль), трехосновным фосфатом калия (200 мг, 0,945 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (18 мг,
- 101 047073
0,016 ммоль), 1,4-диоксаном (2 мл) и водой (1 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 120°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения 147а (34 мг, выход 22%) в виде белого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Т102: Раствор соединения 147а (34 мг, 0,070 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (10,9 мг, 0,038 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,056 мл, 0,695 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения Т102 (29 мг, выход 85%) в виде желтого твердого вещества. m/z=487 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,38 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,97 (м, 1H), 8,60 (дд, J=1,7, 4,9 Гц, 1H), 8,06 (ддд, J=1,7, 2,3, 8,0 Гц, 1H), 7,91 (м, 2Н), 7,70 (м, 2Н), 7,60 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,36 (ддд, J=0,9, 4,8, 8,0 Гц, 1H), 3,00 (ддд, J=1,3, 6,3, 15,9 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,85 (с, 3H), 2,58 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,85 (тдд, J=6,3, 12,6 Гц, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 147b: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 146 (150 мг, 0,315 ммоль), 5-фторпиридин-3-бороновой кислотой (67 мг, 0,48 ммоль), трехосновным фосфатом калия (200 мг, 0,945 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием (0) (18 мг, 0,0157 ммоль), 1,4-диоксаном (2 мл) и ДМФ (1 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 22 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 3% МеОН в EtOAc) с получением соединения 147b (86 мг, выход 56%) в виде стекла. m/z=492 (M+1).
T103: Раствор соединения 147b (86 мг, 0,174 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (27,3 мг, 0,095 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,14 мл, 1,74 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения T103 (82 мг, выход 96%) в виде желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,97 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,77 (м, 1H), 8,60 (дд, J=1,7, 4,8 Гц, 1H), 8,56 (дд, J=0,4, 2,7 Гц, 1H), 8,07 (ддд, J=1,7, 2,3, 8,0 Гц, 1H), 7,83 (м, 2Н), 7,70 (м, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,62 (с, 1H), 7,36 (ддд, J=0,9, 4,8, 7,9 Гц, 1H), 3,00 (ддд, J=1,3, 6,2, 16,0 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,57 (м, 1H), 2,30 (дт, J=2,1, 12,6 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=6,3, 13,8 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 148: В раствор соединения 3 (1,0 г, 4,56 ммоль) в CH2Cl2 (100 мл) последовательно добавляли эфират бромида магния (2,94 г, 11,39 ммоль) и N.N-диизопропилэтиламин (2,34 г, 13,40 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин, после чего по каплям добавляли 3-фторбензоилхлорид (0,72 мл, 5,93 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 22 ч, после чего промывали насыщ. водн. KH2PO4, водой и солевым раствором. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 148 (1,96 г, количественный выход) в виде темно-красного масла, которое использовали без дополнительной очистки. m/z=342 (M+1).
Соединение 149: Смесь 148 (716 мг, 2,11 ммоль), 4-гидразинохинолина гидрохлорида (871 мг, 4,47 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали в микроволновом устройстве Biotage при 100°С в течение 2 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 149 (540 мг, выход 55%) в виде желтого стекла. m/z=465 (M+1).
Соединение 150: Раствор 145 (534 мг, 1,15 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (318 мг, 2,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соеди
- 102 047073 нения 150 (488 мг, выход 91%) в виде желтого стекла. m/z=465 (M+1).
Т104: Раствор соединения 150 (487 мг, 1,04 ммоль) в безводном ДМФ (6 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (164 мг, 0,572 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,84 мл, 10,39 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4, водой и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т104 (326 мг, выход 68%) в виде желтого твердого вещества. m/z=463 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,17 (шир. с, 1H), 8,30 (тд, J=0,9, 8,4 Гц, 1H), 7,86 (м, 1H), 7,62 (м, 2Н), 7,53 (тд, J=1,3, 7,8 Гц, 1H), 7,46 (ддд, J=1,7, 2,7, 10,2 Гц, 1H), 7,39 (дт, J=5,9, 8,0 Гц, 1H), 7,27 (м, 1H), 7,06 (ддт, J=1,0, 2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (м, 1H), 2,99 (м, 2Н), 2,52 (м, 1H), 2,34 (т, J=12,7 Гц, 1H), 2,21 (дд, J=6,1, 14,1 Гц, 1H), 1,85 (м, 1H), 1,58 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 152: В перемешиваемую смесь соединения 3 (500 мг, 2,28 ммоль) и эфирата бромида магния (1,47 г, 5,70 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) при комнатной температуре по каплям добавляли N,Nдиизопропилэтиламин (1,13 мл, 6,49 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин, после чего по каплям добавляли раствор соединения 151 (1,05 г, 3,42 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 23 ч реакционную смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 18% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 152 (412 мг, выход 53%), которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=342 (M+1). Соединение 153: В герметично закрываемой колбе для микроволновой обработки смесь соединения 152 (1,29 г, 3,78 ммоль) и (4-бромфенил)гидразина гидрохлорида (1,69 г, 7,56 ммоль) в EtOH (15 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 120°C в течение 10 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/20/20 EtOAc/CH2Cl2/гексаны) с получением соединения 153 (0,62 г, выход 33%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=492 и 494 (М+1).
Соединение 154: Смесь соединения 153 (0,62 г, 1,26 ммоль) и K2CO3 (0,87 г, 6,29 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Продукт растирали с Et2O, фильтровали и сушили в вакууме с получением соединения 154 (0,35 г, выход 56%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=492 и 494 (М+1).
Соединение 155: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 154 (200 мг, 0,406 ммоль), трехосновным фосфатом калия (258 мг, 1,21 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (23 мг, 0,020 ммоль), 5-фторпиридин-3-бороновой кислотой (85 мг, 0,60 ммоль), 1,4-диоксаном (2 мл) и ДМФ (1 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 23 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 155 (77 мг, выход 37%) в виде желтого стекла. m/z=509 (М+1).
Т105: Раствор соединения 155 (77 мг, 0,15 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23,7 мг, 0,083 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,12 мл, 1,48 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т105 (39 мг, выход 51%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=507 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,76 (т, J=1,7 Гц, 1H), 8,55 (д, J=2,7 Гц, 1H), 7,81 (м, 2Н), 7,67 (м, 6Н), 7,11 (м, 2Н), 2,96 (м, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,3, 13,9 Гц, 1H), 1,83 (тдд, J=6,3, 12,7, 19,1 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 156а: В герметично закрываемой колбе для микроволновой обработки смесь соедине
- 103 047073 ния 152 (1,32 г, 3,87 ммоль) и (4-цианофенил)гидразина гидрохлорида (1,34 г, 7,90 ммоль) в EtOH (15 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 120°C в течение 10 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 156а (0,98 г, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Соединение 157а: Соединение 156а (0,58 г, 1,32 ммоль) смешивали в 50% водн. H2SO4 (10 мл) и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C, разводили водой (20 мл) и нейтрализовали NaHCO3 (твердое вещество) до рН 5. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 157а (0,59 г, выход 98%). m/z=458 (M+1).
Соединение 158а: Соединение 157а (0,25 г, 0,55 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (0,35 г, 2,76 ммоль) и 1 каплю ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали с получением кислого хлорида. Кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Этот раствор добавляли в раствор N-гидроксиацетамидина (65 мг, 0,88 ммоль) и Et3N (0,7 г, 6,93 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 158а (0,19 г, выход 68%) в виде твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Соединение 159а: Соединение 158а (0,19 г, 0,37 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали пропилфосфоновым ангидридом (50 мас.% в EtOAc, 0,5 г, 0,78 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 159а (0,17 г, выход 92%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 160а: Соединение 159а (0,17 г, 0,34 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (240 мг, 1,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0% -35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 160а (90 мг, выход 53%) в виде твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Т106: Соединение 160а (90 мг, 0,18 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (30 мг, 0,10 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т106 (28 мг, выход 31%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=494 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,36 (м, 2Н), 7,70 (м, 4Н), 7,51 (с, 1H), 7,12 (м, 2Н), 2,95 (дд, J=6,1, 16,3 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,56 (м, 1H), 2,52 (с, 3H), 2,26 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,6, 14,0 Гц, 1H), 1,83 (тдд, J=6,5, 12,8, 19,2 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 156b: В герметично закрываемой колбе для микроволновой обработки смесь соединения 133 (1,17 г, 3,61 ммоль) и (4-цианофенил)гидразина гидрохлорида (1,22 г, 7,19 ммоль) в EtOH (10 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 120°C в течение 10 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением соединения 156b (1,24 г, выход 82%) в виде желтого твердого вещества. m/z=422 (M+1).
Соединение 157b: Соединение 156b (0,56 г, 1,33 ммоль) смешивали в 50% водн. H2SO4 (10 мл) и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C, разводили водой (20 мл) и нейтрализовали NaHCO3 (твердое вещество) до рН 5. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 157b (0,57 г, выход 97%). m/z=441 (M+1).
Соединение 158b: Соединение 157а (0,31 г, 0,70 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (0,45 г, 3,54 ммоль) и 1 каплю ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали с получением кислого хлорида. Кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Этот раствор добавляли в раствор N-гидроксиацетамидина (80 мг, 1,08 ммоль) и Et3N (0,85 г, 8,42 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной
- 104 047073 хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 158b (0,2 г, выход 57%) в виде твердого вещества. m/z=497 (M+1).
Соединение 159b: Соединение 158b (0,2 г, 0,40 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали пропилфосфоновым ангидридом (50 мас.% в EtOAc, 515 мг, 0,81 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 159b (0,1 г, выход 52%) в виде твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Соединение 160b: Соединение 159b (0,1 г, 0,21 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (145 мг, 1,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 160b (95 мг, выход 95%) в виде твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Т107: Соединение 160b (95 мг, 0,20 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (35 мг, 0,22 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т107 (68 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. m/z=477 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 8,96 (м, 1H), 8,60 (дд, J=1,7, 4,9 Гц, 1H), 8,38 (м, 2Н), 8,06 (тд, J=2,0, 7,9 Гц, 1H), 7,70 (м, 2Н), 7,51 (с, 1H), 7,36 (ддд, J=0,9, 4,8, 8,0 Гц, 1H), 3,00 (ддд, J=1,2, 6,2, 16,1 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,57 (м, 1H), 2,53 (с, 3H), 2,28 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,19 (дд, J=6,5, 13,9 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 161: Соединение 3 (1 г, 4,56 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (75 мл). Добавляли эфират бромида магния (3 г, 11,62 ммоль) и N.N-диизопропилэт'иламин (2,5 мл, 14,35 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 5 мин и добавляли этил 2-хлор-2-оксоацетат (0,8 г, 5,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток, после чего гасили насыщ. водн. KH2PO4 (75 мл). Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над Mg2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 161 (1,12 г, выход 77%) в виде масла. m/z=320 (M+1).
Соединение 162: Соединение 161 (1,12 г, 3,53 ммоль) и 4-бромфенилгидразина гидрохлорид (1,1 г, 4,96 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 120°C в микроволновом синтезаторе Biotage в течение 90 мин. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 162 (0,85 г, выход 52%) в виде масла. m/z=470 и 472 (М+1).
Соединение 163: Соединение 162 (1,2 г, 2,55 ммоль) смешивали в 50% водн. H2SO4 (10 мл) и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C, разводили водой (10 мл) и нейтрализовали NaHCO3 (твердое вещество) до рН 5. Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения 163 (0,92 г, выход 82%). m/z=442 и 444 (М+1).
Соединение 164: Соединение 163 (0,92 г, 2,08 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (1,3 г, 10,23 ммоль) и 3 капли ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и концентрировали с получением кислого хлорида. Кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Этот раствор добавляли в раствор N-гидроксиацетамидина (230 мг, 3,1 ммоль) и Et3N (1,5 г, 14,85 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 164 (0,67 г, выход 64%) в виде твердого вещества. m/z=498/500 (M+1).
Соединение 165: Соединение 164 (0,67 г, 1,34 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) обрабатывали пропилфосфоновым ангидридом (50 мас.% в EtOAc, 1,8 г, 2,82 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 165 (0,52 г, выход 80%) в виде твердого вещества. m/z=480/482 (М+1).
Соединение 166: Соединение 165 (0,52 г, 1,08 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали K2CO3 (0,75 г, 5,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc.
- 105 047073
Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 166 (0,5 г, выход 96%) в виде твердого вещества. m/z=480/482 (М+1).
Соединение 167а: Соединение 166 (250 мг, 0,52 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (3 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин (175 мг, 0,79 ммоль). Смесь продували N2b течение 10 мин, после чего нагревали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали и концентрировали фильтрат. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 167а (40 мг, выход 16%) в виде твердого вещества. m/z=494 (М+1).
Т108: Соединение 167а (40 мг, 0,081 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (15 мг, 0,094 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т108 (18 мг, выход 45%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=492 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,38 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,91 (м, 2Н), 7,69 (м, 2Н), 7,60 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,52 (с, 1H), 3,25 (дд, J=5,9, 17,4 Гц, 1H), 2,91 (ддд, J=6,9, 11,8, 17,9 Гц, 1H), 2,85 (с, 3H), 2,58 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,26 (м, 2Н), 1,86 (тдд, J=6,3, 12,9, 18,9 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 167b: Соединение 166 (250 мг, 0,52 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (2,7 мл) и ДМФ (1,3 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (50 мг, 0,043 ммоль) и пиридин-3-илбороновую кислоту (115 мг, 0,93 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего нагревали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали и концентрировали фильтрат. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 167b (105 мг, выход 42%) в виде твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Т109: Соединение 167b (105 мг, 0,22 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (38 мг, 0,24 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т109 (35 мг, выход 33%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=477 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,94 (дд, J=0,9, 2,4 Гц, 1H), 8,69 (дд, J=1,6, 4,8 Гц, 1H), 7,97 (ддд, J=1,6, 2,4, 7,9 Гц, 1H), 7,83 (м, 2Н), 7,62 (м, 2Н), 7,57 (с, 1H), 7,45 (ддд, J=0,9, 4,8, 7,9 Гц, 1H), 3,24 (м, 1H), 2,91 (ддд, J=6,9, 11,8, 17,9 Гц, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,28 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,20 (дд, J=7,2, 13,9 Гц, 1H), 1,85 (тдд, J=6,2, 12,7, 18,8 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 168: Соединение 163 (0,46 г, 1,04 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (15 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли оксалилхлорид (0,66 г, 5,20 ммоль) и 3 капли ДМФ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали с получением неочищенного кислого хлорида. Неочищенный кислый хлорид растворяли в CH2Cl2 (5 мл) и добавляли в раствор аммиака (30% в воде, 625 мг, 11,03 ммоль) в ТГФ (25 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 168 (0,46 г, количественный выход) в виде твердого вещества. m/z=441 и 443 (М+1).
Соединение 169: Соединение 168 (0,21 г, 0,48 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (5 мл). Добавляли Et3N (250 мг, 2,48 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (350 мг, 1,67 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 169 (0,1 г, выход 50%) в виде твердого вещества. m/z=423 и 425 (М+1).
Соединение 170: Соединение 169 (0,82 г, 1,94 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламин (50% в воде, 0,4 г, 6,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи, после чего концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в 1,4-диоксане (25 мл). Добавляли диметилацетамида диметилацеталь (1,2 г, 9,01 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 170 (450 мг, выход 48%) в виде твердого вещества. m/z=480/482 (М+1).
Соединение 171: Соединение 170 (0,45 г, 0,93 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали K2CO3 (0,65 г,
- 106 047073
4,71 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 171 (330 мг, выход 73%) в виде твердого вещества. m/z=480/482 (М+1).
Соединение 172: Соединение 171 (330 мг, 0,68 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (3,3 мл) и ДМФ (1,7 мл). Добавляли K3PO4 (350 мг, 1,65 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (50 мг, 0,068 ммоль) и 3-метил-5-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазин (230 мг, 1,04 ммоль). Смесь продували N2 в течение 10 мин, после чего нагревали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 172 (135 мг, выход 40%) в виде пены. m/z=494 (М+1).
Т110: Соединение 172 (135 мг, 0,27 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (45 мг, 0,28 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили водой и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т110 (45 мг, выход 33%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=492 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,38 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,88 (м, 2Н), 7,69 (м, 2Н), 7,60 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,55 (с, 1H), 3,17 (дд, J=6,0, 17,3 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,85 (с, 3H), 2,66 (с, 3H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,2 Гц, 1H), 2,27 (м, 1H), 2,19 (дд, J=6,9, 13,8 Гц, 1H), 1,86 (тдд, J=6,0, 12,8, 19,6 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 173: Соединение 64 (2,841 г, 10,67 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (140 мл) и охлаждали до -78°C. Озон барботировали через реакционную смесь до полного расхода соединения 64. Кислород барботировали через реакционную смесь в течение 10 мин, после чего добавляли диметилсульфид (3,92 мл, 53,33 ммоль). Холодную баню убирали и перемешивали смесь при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 173 (2,32 г, выход 86%) в виде белого твердого вещества. m/z=253 (M+1).
Соединение 174: Раствор соединения 173 (1,52 г, 6,03 ммоль), 5-амино-2-метил-2Н-тетразола (0,76 г, 7,67 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты моногидрата (0,11 г, 0,58 ммоль) в бензоле (50 мл) дефлегмировали с помощью аппарата Дина - Старка в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3, насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 174 (1,15 г, выход 57%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=334 (M+1).
Соединение 175: Соединение 174 (1,54 г, 4,62 ммоль) растворяли в EtOH (50 мл). Добавляли ацетат аммония (2,7 г, 35,03 ммоль) и бензальдегид (0,70 мл, 6,89 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в атмосфере N2 в течение 24 ч. Добавляли дополнительное количество бензальдегида (0,70 мл, 6,89 ммоль®. Смесь нагревали при 80°С еще в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. раствором NH4OH (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 175 (1,40 г, выход 72%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=421 (M+1).
Соединение 176: Раствор соединения 175 (1,40 г, 3,34 ммоль) и 3Н водн. HCl (12 мл, 36 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 176 (1,38 г, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества и использовали на следующем этапе без очистки. m/z=377 (М+1).
Соединение 177: В перемешиваемый раствор соединения 176 (1,38 г, < 3,34 ммоль) и этилформиата (26 мл, 319 ммоль) в бензоле (25 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 3,1 мл, 16,5 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 177 (1,51 г, количественный выход) в виде желтого масла и использовали в следующей реакции без очистки. m/z=405 (M+1).
Соединение 178: Перемешиваемый раствор соединения 177 (1,51 г, < 3,34 ммоль), уксусной кисло
- 107 047073 ты (1,9 мл, 33,2 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (0,35 г, 5,04 ммоль) в EtOH (50 мл) перемешивали при 60°C в атмосфере N2 в течение 4 ч, а после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали насыщ. водн. NaHCO3 (100 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 178 (1,46 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества и использовали в следующей реакции без очистки. m/z=402 (М+1).
Соединение 179: В перемешиваемый раствор соединения 178 (1,46 г, < 3,34 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 3,1 мл, 16,5 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 179 (1,08 г, выход 81%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=402 (М+1).
T111: В перемешиваемый раствор соединения 179 (1,08 г, 2,69 ммоль) в ДМФ (10 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,38 г, 1,33 ммоль) в ДМФ (5 мл) при 0°C в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (2,2 мл, 27,2 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения T111 (0,45 г, выход 42%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=400 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (с, 1H), 7,40 (м, 2Н), 7,34 (м, 3H), 4,36 (с, 3H), 2,62 (м, 3H), 2,15 (м, 2Н), 1,85 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 180: Смесь соединения 173 (2,4 г, 9,51 ммоль) растворяли в бензоле (125 мл). Добавляли анилин (1,1 г, 11,81 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (300 мг, 1,58 ммоль). Реакционную смесь дефлегмировали в течение 2 суток, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали фильтрат. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах) с получением соединения 180 (2,35 г, выход 75%) в виде масла. m/z=328 (М+1).
Соединение 181: Соединение 180 (2,35 г, 7,18 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли формальдегид (37 мас.% в воде, 3 г, 36,99 ммоль) и ацетат аммония (5,5 г, 71,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 суток при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 010% МеОН в EtOAc) с получением соединения 181 (2,3 г, выход 95%) в виде масла. m/z=339 (M+1).
Соединение 182: Соединение 181 (1,94 г, 5,75 ммоль) растворяли в сухом MeCN (10 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Добавляли N-бромсукцинимид (1,2 г, 6,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексане) с получением соединения 182 (1,7 г, выход 71%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=417/419 (M+1).
Соединение 183: Смесь соединения 182 (730 мг, 1,75 ммоль), пиридин-4-илбороновой кислоты (430 мг, 3,50 ммоль), K2CO3 (730 мг, 5,29 ммоль) и Pd(dppf))Cl2 (130 мг, 0,18 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл) и ДМФ (2 мл) продували N2 в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 16 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали фильтрат. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-10% МеОН в EtOAc) с получением соединения 183 (560 мг, выход 77%) в виде твердого вещества. m/z=416 (M+1).
Соединение 184: Соединение 183 (560 мг, 1,35 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали смесь EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 184 (500 мг, количественный выход) в виде твердого вещества. m/z=372 (M+1).
Соединение 185: Смесь соединения 184 (500 мг, 1,35 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 950 мг, 5,28 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего нейтрализовали водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 185 (525 мг, выход 98%) в виде твердого вещества. m/z=400 (M+1).
Соединение 186: Соединение 185 (525 мг, 1,32 ммоль) растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (190 мг, 2,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали
- 108 047073 водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 186 (485 мг, выход 93%). m/z=397 (M+1).
Соединение 187: Соединение 186 (485 мг, 1,22 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 1 г, 5,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 187 (400 мг, выход 82%) в виде масла. m/z=397 (M+1).
Т112: Соединение 187 (400 мг, 1,01 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (180 мг, 1,13 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в EtOAc) с получением соединения Т112 (95 мг, выход 24%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=395 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (с, 1H), 8,46 (м, 2Н), 7,51 (м, 3H), 7,22 (м, 4Н), 2,59 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,50 (м, 2Н), 2,13 (м, 2Н), 1,82 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 188: Смесь соединения 182 (530 мг, 1,27 ммоль), 1-циклогексен-1-ил-бороновой кислоты (400 мг, 1,92 ммоль), K2CO3 (525 мг, 3,80 ммоль) и Pd(dppf))Cl2 (95 мг, 0,13 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл) и ДМФ (2 мл) продували N2 в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 16 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали фильтрат. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 188 (300 мг, выход 57%) в виде масла. m/z=419 (M+1).
Соединение 189: Соединение 188 (300 мг, 0,72 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 3Н водн. HCl (2 мл, 6 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали смесь EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 189 (260 мг, выход 97%) в виде твердого вещества. m/z=375 (M+1).
Соединение 190: Смесь соединения 189 (260 мг, 0,69 ммоль) и 10% Pd/C (35 мг) в EtOAc (15 мл) гидрогенизировали в условиях баллонного водорода при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали с получением соединения 190 (230 мг, выход 88%). m/z=377 (М+1).
Соединение 191: Смесь соединения 190 (230 мг, 0,61 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 500 мг, 2,78 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего нейтрализовали водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 191 (220 мг, выход 89%) в виде твердого вещества. m/z=405 (M+1).
Соединение 192: Соединение 191 (220 мг, 0,54 ммоль) растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (80 мг, 1,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 192 (200 мг, выход 92%) в виде твердого вещества. m/z=402 (M+1).
Соединение 193: Соединение 192 (200 мг, 0,50 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 360 мг, 2,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 193 (195 мг, выход 97%) в виде твердого вещества. m/z=402 (M+1).
Т113: Соединение 193 (195 мг, 0,48 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор брома (86 мг, 0,54 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (2 мл, 24,7 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т113 (40 мг, выход 21%) в виде твердого вещества. m/z=400 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (с, 1H), 7,49 (м, 3H), 7,20 (м, 2Н), 2,54 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,44 (тт, J=3,6, 11,5 Гц, 1H), 2,36 (дд, J=6,4, 11,0 Гц, 1H), 2,29 (ддд, J=1,5, 6,4, 16,4 Гц, 1H), 2,09 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 1,98 (м, 1H), 1,69 (м, 7Н), 1,45 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,25 (м, 4Н).
Соединение 195а: Раствор соединения 194 (400 мг, 1,23 ммоль), 4-хлорфенилгидразина (347 мг, 2,43 ммоль) и ледяной уксусной кислоты (2 капли) в EtOH (20 мл) нагревали при 80°С в течение 43 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 3% EtOAc в CH2Cl2). Полученный продукт растворяли в CH2Cl2 (10 мл) и обрабатывали оксидом марганца (IV) (88%, 940 мг, 9,52
- 109 047073 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 15 ч и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали с получением соединения 195а (108 мг, выход 20%) в виде коричневого стекла и использовали без дополнительной очистки. m/z=449 (M+1).
Соединение 196а: Раствор соединения 195а (107 мг, 0,238 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,79 мл, 2,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 196а (94 мг, выход 98%) в виде оранжевого стекла и использовали без дополнительной очистки. m/z=405 (M+1).
Соединение 197а: Смесь соединения 196а (93 мг, 0,230 ммоль) в этилформиате (5 мл, 62 ммоль) охлаждали до 0°С и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,42 мл, 2,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего охлаждали до 0°C. Смесь обрабатывали 6,0Н водн. HCl (0,43 мл, 2,58 ммоль) для доведения рН до ~ 2. Добавляли EtOH (15 мл) и гидроксиламина гидрохлорид (24 мг, 0,345 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 5,5 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 197а (129 мг, количественный выход) в виде оранжевого стекла и использовали без дополнительной очистки. m/z=430 (M+1).
Соединение 198а: Смесь соединения 197а (98 мг, 0,228 ммоль) и карбоната калия (83 мг, 0,60 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 198а (29 мг, выход 30%) в виде желтого стекла. m/z=430 (M+1).
Т114: Раствор соединения 198а (29 мг, 0,067 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (10,6 мг, 0,037 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 50 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,054 мл, 0,67 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т114 (25 мг, выход 86%) в виде желтого твердого вещества. m/z=428 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,56 (с, 1H), 7,35 (м, 3H), 7,28 (м, 2Н), 7,17 (м, 4Н), 2,77 (ддд, J=1,3, 6,5, 16,4 Гц, 1H), 2,62 (м, 2Н), 2,18 (м, 1H), 2,07 (дд, J=7,0, 13,9 Гц, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 195b: Раствор соединения 194 (200 мг, 0,612 ммоль), фенилгидразина (0,12 мл, 1,22 ммоль) и ледяной уксусной кислоты (2 капли) в EtOH (3 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 150°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах). Полученный продукт растворяли в CH2Cl2 (10 мл) и обрабатывали оксидом марганца(1У) (88%, 471 мг, 4,77 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 40 ч, после чего фильтровали через подушку из целита®. Реакционную смесь концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 195b (85 мг, выход 34%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=415 (M+1).
Соединение 196b: Раствор соединения 195b (85 мг, 0,205 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,68 мл, 2,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 196b (76 мг, количественный выход) в виде желтого стекла и использовали без дополнительной очистки. m/z=371 (M+1).
Соединение 197b: Смесь соединения 196b (76 мг, 0,205 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) охлаждали до 0°С и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,38 мл, 2,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего охлаждали до 0°C. Смесь обрабатывали 6,0 Н водн. HCl (0,38 мл, 2,28 ммоль) для доведения рН до ~2. Добавляли EtOH (13 мл) и гидроксиламина гидрохлорид (21 мг, 0,302 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 197b (81 мг, количественный
- 110 047073 выход) в виде желтого стекла, которое использовали без дополнительной очистки. m/z=396 (M+1).
Соединение 198b: Смесь соединения 197b (81 мг, 0,205 ммоль) и карбоната калия (57 мг, 0,41 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 40 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 198b (58 мг, выход 72%) в виде желтого стекла. m/z=396 (M+1).
Т115: Раствор соединения 198b (58 мг, 0,146 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23 мг, 0,080 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,12 мл, 1,48 ммоль).
Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т115 (44 мг, выход 76%) в виде желтого твердого вещества. m/z=394 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,29 (м, 8Н), 7,16 (м, 2Н), 2,78 (ддд, J=1,5, 6,6, 16,5 Гц, 1H), 2,64 (м, 2Н), 2,20 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,08 (дд, J=6,3, 13,1 Гц, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 199: Раствор соединения 4 (100 мг, 0,309 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали безводным гидразином (0,065 мл, 2,07 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 35 мин, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 199 в количественном выходе в виде прозрачного стекла. m/z=320 (M+1).
Соединение 200а: В раствор соединения 199 (58 мг, 0,181 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (250 мг), 4-метоксифенилбороновую кислоту (55 мг, 0,362 ммоль), ацетат меди(П) (49 мг, 0,271 ммоль) и безводный пиридин (0,022 мл, 0,271 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 10% водн. раствором гидроксида аммония и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 200а (66 мг, выход 86%) в виде прозрачного стекла. m/z=426 (M+1).
Соединение 201а: Смесь соединения 200а (63 мг, 0,148 ммоль) и карбоната калия (41 мг, 0,296 ммоль) в МеОН (4 мл) и ацетоне (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 201а (49 мг, выход 78%) в виде желтого стекла. m/z=426 (M+1).
Т116: Раствор соединения 201а (48 мг, 0,112 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (17,6 мг, 0,061 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,09 мл, 1,11 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т116 (30 мг, выход 63%) в виде желтого твердого вещества. m/z=424 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,59 (с, 1Н), 7,31 (м, 3H), 7,15 (м, 4Н), 6,83 (м, 2Н), 3,80 (с, 3H), 2,77 (м, 1H), 2,63 (м, 2Н), 2,19 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,06 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 200b: В раствор соединения 199 (100 мг, 0,313 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (500 мг), 3,4-дихлорфенилбороновую кислоту (119 мг, 0,623 ммоль), ацетат меди(П) (85 мг, 0,47 ммоль) и безводный пиридин (0,037 мл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 10% водн. раствором гидроксида аммония и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 200b (116 мг, выход 80%) в виде прозрачного стекла. m/z=464 (M+1).
Соединение 201b: Смесь соединения 200b (110 мг, 0,236 ммоль) и карбоната калия (65 мг, 0,47 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 41 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с
- 111 047073 помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 201b (93 мг, выход 85%) в виде прозрачного стекла. m/z=464 (M+1).
Т117: Раствор соединения 201b (91 мг, 0,195 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (30,6 мг, 0,107 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,16 мл, 1,98 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т117 (71 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. m/z=462 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,54 (с, 1H), 7,49 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,38 (м, 3H), 7,32 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,17 (м, 2Н), 6,97 (дд, J=2,5, 8,7 Гц, 1H), 2,76 (ддд, J=1,4, 6,7, 16,6 Гц, 1H), 2,62 (м, 2Н), 2,17 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 200с: В раствор соединения 199 (117 мг, 0,366 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (500 мг), 4-метилфенилбороновую кислоту (99 мг, 0,732 ммоль), ацетат меди(П) (100 мг, 0,549 ммоль) и безводный пиридин (0,044 мл, 0,544 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали 10% водн. раствором гидроксида аммония и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 200с (112 мг, выход 75%) в виде прозрачного стекла. m/z=410 (M+1).
Соединение 201с: Смесь соединения 200с (108 мг, 0,263 ммоль) и карбоната калия (72 мг, 0,52 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 41 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 201с (87 мг, выход 81%) в виде прозрачного стекла. m/z=410 (M+1).
Т118: Раствор соединения 201с (85 мг, 0,207 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (32,5 мг, 0,113 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,17 мл, 2,10 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т118 (66 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. m/z=408 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,32 (м, 4Н), 7,13 (м, 5Н), 2,77 (ддд, J=1,5, 6,6, 16,5 Гц, 1H), 2,63 (м, 2Н), 2,34 (с, 3H), 2,19 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,79 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 202: 2-циклобутилуксусную кислоту (367 мг, 3,22 ммоль) и пентафторфенол (652 мг, 3,54 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (15 мл) в атмосфере азота. Добавляли N,Nдициклогексилкарбодиимид (730 мг, 3,54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Осажденную мочевину удаляли путем фильтрации. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 202 (948 мг, количественный выход) в виде прозрачного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 2,74-2,87 (м, 3Н), 2,20 (м, 2Н), 1,70-2,00 (м, 4Н).
Соединение 203: В перемешиваемую смесь соединения 3 (226 мг, 1,03 ммоль) и эфирата бромида магния (665 мг, 2,57 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) при комнатной температуре по каплям добавляли N,Nдиизопропилэтиламин (0,51 мл, 2,93 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 мин, после чего по каплям добавляли раствор соединения 202 (433 мг, 1,54 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 26 ч реакционную смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 203 (99 мг, выход 30%) в виде прозрачного стекла. m/z=316 (M+1).
Соединение 204: Раствор соединения 203 (98 мг, 0,31 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали моногидратом гидразина (0,038 мл, 0,78 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 21 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах и после этого - 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 204 (47 мг, выход 49%) в виде прозрачного стекла. m/z=312 (M+1).
Соединение 205: В раствор соединения 204 (44 мг, 0,14 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) добавляли 3 А мо
- 112 047073 лекулярные сита (190 мг), 4-бифенилбороновую кислоту (56 мг, 0,28 ммоль), ацетат меди(П) (38 мг, 0,21 ммоль) и безводный пиридин (0,017 мл, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 32 ч. Смесь промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 205 (42 мг, выход 64%) в виде прозрачного стекла. m/z=464 (M+1).
Соединение 206: Смесь соединения 205 (39 мг, 0,084 ммоль) и карбоната калия (23 мг, 0,17 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, нагревали при 50°С в течение 8 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 23 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 206 (35 мг, выход 90%) в виде прозрачного стекла. m/z=464 (M+1).
Т119: Раствор соединения 206 (34 мг, 0,073 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (11,5 мг, 0,0402 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,059 мл, 0,73 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т119 (29 мг, выход 86%) в виде желтого твердого вещества. m/z=462 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,54 (с, 1H), 7,70 (м, 2Н), 7,63 (м, 2Н), 7,47 (м, 4Н), 7,40 (м, 1H), 2,75 (м, 3H), 2,58 (тт, J=6,6, 13,3 Гц, 1H), 2,44 (пент, J=7,9 Гц, 1H), 2,11 (м, 2Н), 1,93 (м, 2Н), 1,75 (м, 3H), 1,55 (м, 3H), 1,48 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 207: Раствор соединения 40 (120 мг, 0,368 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали моногидратом гидразина (0,045 мл, 0,93 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 15 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 207 (127 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=322 (M+1).
Соединение 208а: В раствор соединения 207 (125 мг, 0,388 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (500 мг), 4-бифенилбороновую кислоту (153 мг, 0,773 ммоль), ацетат меди(П) (106 мг, 0,584 ммоль) и пиридин (0,047 мл, 0,58 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и 10% водн. NH4OH. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 208а (88 мг, выход 48%) в виде белого стекла. m/z=474 (M+1).
Соединение 209а: Смесь соединения 208а (85 мг, 0,179 ммоль) и карбоната калия (49 мг, 0,36 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 209а (77 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Т120: Раствор соединения 209а (76 мг, 0,16 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (25 мг, 0,087 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т120 (59 мг, выход 78%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=472 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,24 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,63 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,57 (с, 1H), 7,63 (м, 4Н), 7,47 (м, 2Н), 7,38 (м, 3H), 7,00 (дд, J=1,4, 5,3 Гц, 1H), 3,11 (м, 1H), 2,83 (ддд, J=7,1, 11,6, 17,9 Гц, 1H), 2,61 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,18 (м, 2Н), 1,84 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 208b: В раствор соединения 207 (400 мг, 1,24 ммоль) в CH2Cl2 (40 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (1,72 г), 3-бифенилбороновую кислоту (493 мг, 2,49 ммоль), ацетат меди(П) (338 мг, 1,86 ммоль) и пиридин (0,15 мл, 1,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали на открытом воздухе при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 208b (165 мг, выход 28%) в виде белого стекла. m/z=474
- 113 047073 (M+1).
Соединение 209b: Смесь соединения 208b (162 мг, 0,342 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (95 мг, 0,688 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 1,5 ч. Реакционную смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 209b (119 мг, выход 73%) в виде белого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Т121: Раствор соединения 209b (118 мг, 0,249 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (39 мг, 0,136 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,20 мл, 2,47 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование МТБЭ) с получением соединения Т121 (66 мг, выход 56%) в виде желтого твердого вещества. m/z=472 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,23 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,61 (д, J=5,3 Гц, 1H), 8,58 (с, 1H), 7,63 (ддд, J=1,1, 1,8, 7,8 Гц, 1H), 7,48 (м, 7Н), 7,22 (ддд, J=1,1, 2,2, 7,9 Гц, 1H), 6,97 (дд, J=1,5, 5,4 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=6,3, 17,4 Гц, 1H), 2,83 (ддд, J=7,2, 11,6, 17,9 Гц, 1H), 2,61 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,18 (м, 2Н), 1,85 (м, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 210: Раствор соединения 152 (412 мг, 1,21 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали моногидратом гидразина (0,15 мл, 3,09 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 6 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 210 (211 мг, выход 52%) в виде прозрачного стекла. m/z=338 (М+1).
Соединение 211: В раствор соединения 210 (210 мг, 0,622 ммоль) в ДМФ (7 мл) добавляли 3 А молекулярные сита (1,5 г), пиридин-4-бороновую кислоту (382 мг, 3,11 ммоль), ацетат меди(П) (565 мг, 3,11 ммоль) и пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Реакционную смесь нагревали на открытом воздухе при 85°С в течение 21 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали 10% водн. NH4OH и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 90% EtOAc в гексанах) с получением соединения 211 (49 мг, выход 19%) в виде стекла. m/z=415 (M+1).
Соединение 212: Смесь соединения 211 (48 мг, 0,12 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (32 мг, 0,23 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 80% EtOAc в гексанах) с получением соединения 212 (30 мг, выход 63%) в виде твердого вещества. m/z=415 (M+1).
Т122: Раствор соединения 212 (29 мг, 0,070 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (11 мг, 0,038 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,056 мл, 0,69 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т122 (24 мг, выход 83%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=413 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,53 (м, 3H), 7,16 (м, 6Н), 2,72 (ддд, J=1,4, 6,6, 16,7 Гц, 1H), 2,58 (м, 2Н), 2,16 (дт, J=2,3, 12,7 Гц, 1H), 2,08 (дд, J=7,1, 14,5 Гц, 1H), 1,79 (тдд, J=6,6, 12,6, 19,1 Гц, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 213: В перемешиваемый раствор соединения 65 (0,58 г, 1,40 ммоль) и карбоната натрия (0,74 г, 6,98 ммоль) в CH2Cl2 (14 мл) при -10°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор брома (0,67 г, 4,19 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл). После перемешивания в течение 30 мин холодную реакционную смесь обрабатывали насыщ. водн. тиосульфатом натрия (50 мл). Холодную баню убирали и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали, а остаток экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 213 (0,62 г, выход 90%) в виде желтого твердого вещества. m/z=493/495 (М+1).
Соединение 214а: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 213 (0,29 г, 0,59 ммоль), 2-фторфенилбороновой кислоты (0,16 г, 1,14 ммоль) и фосфата калия (0,38 г, 1,79 ммоль) в 1,4диоксане (4,8 мл) и ДМФ (1,2 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (69 мг, 0,060
- 114 047073 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 90°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 1/10/10 EtOAc/CH2Cl2/гексаны) с получением соединения 214а (92 мг, выход 31%) в виде желтого твердого вещества. m/z=509 (М+1).
Соединение 215а: Раствор соединения 214а (92 мг, 0,18 ммоль) и 3Н водн. HCl (0,6 мл, 1,8 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH (25 мл) до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 215а (83 мг, выход 99%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 216а: Раствор соединения 215а (83 мг, 0,18 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,17 мл, 0,91 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 216а (97 мг, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Соединение 217а: Раствор соединения 216а (97 мг, < 0,18 ммоль), уксусной кислоты (0,10 мл, 1,75 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (19 мг, 0,27 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 217а (84 мг, выход 95%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Соединение 218а: Смесь соединения 217а (84 мг, 0,17 ммоль) и карбоната калия (0,12 г, 0,87 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 218а (82 мг, выход 98%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т123: В перемешиваемый раствор соединения 218а (82 мг, 0,17 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (24 мг, 0,084 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т123 (31 мг, выход 38%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (с, 1H), 7,55 (м, 4Н), 7,37 (м, 6Н), 7,14 (м, 3H), 2,64 (м, 3H), 2,22 (дт, J=2,3, 12,9 Гц, 1H), 2,05 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,57 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 214b: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 213 (0,30 г, 0,61 ммоль), пиридин-4-бороновой кислоты (0,15 г, 1,22 ммоль) и фосфата калия (0,39 г, 1,84 ммоль) в 1,4диоксане (4,8 мл) и ДМФ (1,2 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (70 мг, 0,060 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 90°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 214b (0,19 г, выход 63%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=A92 (M+1).
Соединение 215b: Раствор соединения 214Ь (0,19 г, 0,39 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,3 мл, 3,9 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH (25 мл) до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 215b (0,23 г, количественный выход) в виде светло-желтого масла. m/z=448 (M+1).
Соединение 216b: Раствор соединения 215b (0,23 г, < 0,39 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,40 мл, 2,13 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 216b (0,20 г, количественный выход) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 217b: Раствор соединения 216b (0,20 г, < 0,39 ммоль), уксусной кислоты (0,23 мл, 4,02
- 115 047073 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (41 мг, 0,59 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 217b (0,20 г, количественный выход) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Соединение 218b: Смесь соединения 217b (0,20 г, < 0,39 ммоль) и карбоната калия (0,27 г, 1,95 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением соединения 218b (0,13 г, выход 71%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Т124: В перемешиваемый раствор соединения 218b (0,13 г, 0,28 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (39 мг, 0,14 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,22 мл, 2,72 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали.
Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т124 (90 мг, выход 69%) в виде желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (д, J=6,1 Гц, 2Н), 8,58 (с, 1H), 7,59 (м, 4Н), 7,46 (м, 2Н), 7,38 (м, 1H), 7,32 (м, 2Н), 7,12 (м, 2Н), 2,84 (м, 1H), 2,73 (ддд, J=6,8, 11,3, 16,7 Гц, 1H), 2,62 (кд, J=6,7, 3,4 Гц, 1H), 2,20 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,13 (дд, J=7,0, 14,0 Гц, 1H), 1,83 (тдд, J=6,6, 12,6, 19,3 Гц, 1H), 1,58 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 214с: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 213 (0,32 г, 0,65 ммоль), пиридин-3-бороновой кислоты (0,16 г, 1,30 ммоль) и фосфата калия (0,41 г, 1,93 ммоль) в 1,4диоксане (4,8 мл) и ДМФ (1,2 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (76 мг, 0,066 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 90°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили EtOAc (50 мл) и промывали 1Н водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 214с (0,20 г, выход 62%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=492 (M+1).
Соединение 215с: Раствор соединения 214с (0,20 г, 0,41 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH (25 мл) до рН 9-10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 215с (0,18 г, выход 99%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=448 (M+1).
Соединение 216с: Раствор соединения 215с (0,18 г, 0,40 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,40 мл, 2,13 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 216с (0,19 г, выход 99%) в виде желтого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 217с: Раствор соединения 216с (0,19 г, 0,40 ммоль), уксусной кислоты (0,25 мл, 4,37 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (43 мг, 0,62 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 217с (0,29 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=473 (M+1).
Соединение 218с: Смесь соединения 217с (0,29 г, < 0,40 ммоль) и карбоната калия (0,28 г, 2,03 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 218с (0,14 г, выход 74%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Т125: В перемешиваемый раствор соединения 218с (0,14 г, 0,30 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (42 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добав
- 116 047073 ляли пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т125 (95 мг, выход 68%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,58 (м, 2Н), 8,55 (дд, J=0,8, 2,3 Гц, 1H), 7,57 (м, 4Н), 7,46 (м, 3H), 7,37 (м, 1H), 7,30 (м, 3H), 2,82 (ддд, J=1,4, 6,6, 16,4 Гц, 1Н), 2,71 (м, 1H), 2,62 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,21 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1H), 1,83 (тдд, J=6,6, 12,7, 19,4 Гц, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 219: Раствор соединения 148 (1,95 г, 5,71 ммоль) в EtOH (25 мл) обрабатывали моногидратом гидразина (0,69 мл, 14,22 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 22 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 219 (1,34 г, выход 70%) в виде стекла. m/z=338 (М+1).
Соединение 220: В раствор соединения 219 (500 мг, 1,48 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) добавляли 4 А молекулярные сита (2,15 г), 3-бифенилбороновую кислоту (586 мг, 2,96 ммоль), ацетат меди(П) (403 мг, 2,22 ммоль) и пиридин (0,18 мл, 2,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 13 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 220 (503 мг, выход 69%) в виде белого стекла. m/z=490 (М+1).
Соединение 221: Смесь соединения 220 (500 мг, 1,02 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали карбонатом калия (282 мг, 2,04 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 221 (481 мг, выход 96%) в виде прозрачного стекла. m/z=490 (М+1).
Т126: Раствор соединения 221 (480 мг, 0,980 ммоль) в безводном ДМФ (6 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (154 мг, 0,539 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,79 мл, 9,77 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т126 (420 мг, выход 88%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,42 (м, 9Н), 7,20 (ддд, J=1,1, 2,2, 7,9 Гц, 1H), 7,05 (ддт, J=1,0, 2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,96 (м, 2Н), 2,80 (м, 1H), 2,65 (м, 2Н), 2,20 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1H), 2,10 (дд, J=7,0, 13,9 Гц, 1H), 1,82 (тдд, J=6,6, 12,8, 19,2 Гц, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 222: Соединение 173 (1,73 г, 6,86 ммоль) растворяли в бензоле (50 мл). Добавляли 3фторанилин (0,94 г, 8,46 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (0,13 г, 0,68 ммоль). Смесь дефлегмировали в течение 4 суток с ловушкой Дина-Старка для удаления воды. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах) с получением соединения 222 (1,53 г, выход 65%) в виде коричневого масла. m/z=346 (M+1).
Соединение 223а: Соединение 222 (0,23 г, 0,67 ммоль) растворяли в абсолютном EtOH (4 мл) и последовательно обрабатывали 4-фенилбензальдегидом (0,25 г, 1,37 ммоль) и ацетатом аммония (0,53 г, 6,87 ммоль). Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 223а (205 мг, выход 61%) в виде желтого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Соединение 224а: Соединение 223а (0,205 г, 0,403 ммоль) растворяли в ТГФ (8 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 224а (0,195 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 225а: Соединение 224а (0,195 г, < 0,403 ммоль) смешивали с этилформиатом (12 мл, 149 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,25 г, 1,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4,
- 117 047073 фильтровали и концентрировали с получением соединения 225а (0,14 г, выход 71%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Соединение 226а: Смесь соединения 225а (0,14 г, 0,28 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,038 г, 0,55 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 226а (0,104 г, выход 75%) в виде желтого вязкого масла. m/z=490 (M+l).
Соединение 227а: Смесь соединения 226а (0,104 г, 0,21 ммоль) в МеОН (4 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,117 мг, 0,85 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 227а (0,091 г, выход 88%) в виде желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т127: Раствор соединения 227а (88 мг, 0,18 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (26 мг, 0,091 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,15 мл, 1,86 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т127 (44 мг, выход 50%) в виде желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,69 (с, 1H), 7,56 (м, 2Н), 7,50 (м, 2Н), 7,42 (м, 5Н), 7,35 (м, 1H), 7,17 (ддт, J=0,9, 2,6, 8,4 Гц, 1H), 7,01 (м, 2Н), 2,57 (м, 3H), 2,15 (м, 2Н), 1,83 (тт, J=9,1, 13,1 Гц, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223b: Соединение 222 (0,278 г, 0,80 ммоль) растворяли в абсолютном EtOH (4 мл) и последовательно обрабатывали 3-фенилбензальдегидом (0,29 г, 1,59 ммоль) и ацетатом аммония (0,61 г, 7,91 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 223b (283 мг, выход 69%) в виде желтого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Соединение 224b: Соединение 223b (0,280 г, 0,55 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (6 мл, 18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 224b (0,262 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 225b: Соединение 224b (0,26 г, < 0,55 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,43 г, 2,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 225b (0,27 г, количественный выход) в виде бежевого твердого вещества. m/z=493 (M+1).
Соединение 226b: Смесь соединения 225b (0,27 г, 0,55 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (75 мг, 1,08 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 226b (0,151 г, выход 56%) в виде желтого вязкого масла. m/z=490 (M+1).
Соединение 227b: Смесь соединения 226b (0,15 г, 0,31 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,17 г, 1,23 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 227b (0,130 г, выход 87%) в виде желтого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т128: Раствор соединения 227b (0,13 г, 0,27 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (37 мг, 0,13 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,21 мл, 2,60 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т128 (0,11 г, выход 85%) в виде желтого твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц,
- 118 047073
CDCl3) δ 8,69 (с, 1H), 7,61 (м, 1H), 7,51 (тд, J=1,9, 7,0, 1H), 7,44 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,40 (м, 4Н), 7,32 (м, 3H), 7,19 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,03 (ддд, J=0,9, 2,1, 7,9 Гц, 1H), 6,99 (тд, J=2,2, 9,1 Гц, 1H), 2,57 (м, 3H), 2,15 (м, 2Н), 1,85 (м, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223с: Соединение 223с (белое твердое вещество, 263 мг, выход 69%) синтезировали из соединения 222 (0,278 г, 0,80 ммоль), 4-изопропилбензальдегида (0,24 г, 1,62 ммоль), и ацетата аммония (0,61 г, 7,91 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 223b. Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение ночи. Соединение 223с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=475 (M+1).
Соединение 224с: Соединение 224с (желтое твердое вещество, 0,211 г, выход 89%) синтезировали из соединения 223с (0,262 г, 0,55 ммоль) и 3Н водн. HCl (6 мл, 18 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 224b. m/z=431 (M+1).
Соединение 225с: Соединение 225с (бежевое твердое вещество, 0,21 г, выход 94%) синтезировали из соединения 224с (0,211 г, 0,49 ммоль), этилформиата (14 мл, 174 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,35 г, 1,94 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 225b. m/z=459 (M+1).
Соединение 226с: Соединение 226с (желтое вязкое масло, 0,134 г, выход 64%) синтезировали из соединения 225с (0,21 г, 0,46 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (64 мг, 0,92 ммоль) в EtOH (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 226b. Соединение 226с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=456 (M+1).
Соединение 227с: Соединение 227с (желтое твердое вещество, 0,145 г, количественный выход) синтезировали из соединения 226с (0,134 г, 0,29 ммоль) и карбоната калия (0,162 г, 1,17 ммоль) в МеОН (10 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 227b. m/z=456 (M+1).
Т129: Раствор соединения 227с (0,14 г, 0,31 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т129 (82 мг, выход 59%) в виде белого твердого вещества. m/z=454 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,67 (с, 1H), 7,41 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,25 (м, 2Н), 7,15 (ддд, J=0,9, 2,6, 8,3 Гц, 1H), 7,11 (м, 2Н), 6,99 (ддд, J=1,0, 2,1, 7,9 Гц, 1H), 6,94 (тд, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 2,85 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,59 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,51 (м, 2Н), 2,15 (дт, J=2,3, 12,9 Гц, 1H), 2,08 (м, 1H), 1,82 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,20 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 223d: Соединение 223d (бесцветное масло, 217 мг, выход 55%) синтезировали из соединения 222 (0,31 г, 0,90 ммоль), тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (0,20 г, 1,75 ммоль) и ацетата аммония (0,69 г, 8,95 ммоль) в абсолютном EtOH (6 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 223b. Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение ночи. Соединение 223d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc). m/z=441 (M+1).
Соединение 224d: Соединение 224d (вязкое масло, 0,167 г, выход 86%) синтезировали из соединения 223d (0,215 г, 0,49 ммоль) и 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль) в THF (8 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 224b. m/z=397 (M+1).
Соединение 225d: Соединение 225d (бежевое твердое вещество, 0,156 г, выход 88%) синтезировали из соединения 224d (0,165 г, 0,42 ммоль), этилформиата (12 мл, 149 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,30 г, 1,67 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 225b. m/z=425 (M+1).
Соединение 226d: Соединение 226d (коричневое вязкое масло, 0,168 г, количественный выход) синтезировали из соединения 225d (0,156 г, 0,37 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (51 мг, 0,73 ммоль) в EtOH (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 226b. Соединение 226d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=422 (М+1).
Соединение 227d: Соединение 227d (коричневое твердое вещество, 0,151 г, выход 97%) синтезировали из соединения 226d (0,165 г, < 0,37 ммоль) и карбоната калия (0,20 г, 1,45 ммоль) в МеОН (10 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 227b. m/z=422 (M+1).
Т130: Раствор соединения 227d (0,148 г, 0,35 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (50 мг, 0,17 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением со
- 119 047073 единения Т130 (68 мг, выход 46%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=420 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,59 (с, 1H), 7,50 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,22 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,03 (дд, J=1,5, 7,8 Гц, 1H), 6,97 (тд, J=2,4, 9,3 Гц, 1H), 3,98 (ддт, J=2,2, 4,4, 11,2 Гц, 2Н), 3,32 (м, 2Н), 2,73 (т, J=3,9, 11,5 Гц, 1H), 2,55 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,41 (ддд, J=6,3, 11,0, 17,1 Гц, 1H), 2,33 (ддд, J=1,4, 6,4, 16,3 Гц, 1H), 2,00 (м, 4Н), 1,75 (м, 1H), 1,61 (м, 2Н), 1,44 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223е: Соединение 223е (бесцветное масло, 105 мг, выход 23%) синтезировали из соединения 222 (0,33 г, 0,96 ммоль), 2-изопропилпиримидин-5-карбальдегида (0,25 г, 1,66 ммоль) и ацетата аммония (0,73 г, 9,47 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 223b. Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение ночи. Соединение 223е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). m/z=411 (M+1).
Соединение 224е: Соединение 224е (желтое твердое вещество, 93 мг, выход 98%) синтезировали из соединения 223е (0,105 г, 0,22 ммоль) и 3Н водн. HCl (2,5 мл, 7,5 ммоль) в ТГФ (4 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 224b. m/z=433 (М+1).
Соединение 225е: Соединение 225е (бежевое масло, 0,117 г, количественный выход) синтезировали из соединения 224е (93 мг, 0,22 ммоль), этилформиата (7 мл, 87 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,16 г, 0,89 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 225b. m/z=461 (M+1).
Соединение 226е: Соединение 226е (желтое твердое вещество, 64 мг, выход 64%) синтезировали из соединения 225е (0,117 г, < 0,22 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (35 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 226b. Соединение 226е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). m/z=458 (M+1).
Соединение 227е: Соединение 227е (желтое твердое вещество, 63 мг, количественный выход) синтезировали из соединения 226е (63 мг, 0,14 ммоль) и карбоната калия (76 мг, 0,55 ммоль) в МеОН (4 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 227b. m/z=458 (M+1).
Т131: Раствор соединения 227е (63 мг, 0,14 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (20 мг, 0,070 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т131 (30 мг, выход 48%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=456 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (с, 2Н), 8,60 (с, 1H), 7,49 (дт, J=6,0, 8,2 Гц, 1H), 7,22 (ддт, J=1,0, 2,5, 8,3 Гц, 1H), 7,03 (ддд, J=0,9, 2,1, 7,8 Гц, 1H), 6,98 (тд, J=2,2, 8,7 Гц, 1H), 3,19 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,60 (кд, J=6,7, 13,5 Гц, 1H), 2,52 (м, 2Н), 2,14 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,9 Гц, 6Н), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223f: Соединение 223f (рыжее твердое вещество, 173 мг, выход 43%) синтезировали из соединения 222 (0,289 г, 0,84 ммоль), 4-диметиламинобензальдегида (0,25 г, 1,68 ммоль) и ацетата аммония (0,65 г, 8,43 ммоль) в абсолютном EtOH (8 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 223b. Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение ночи. Соединение 223f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). m/z=476 (M+1).
Соединение 224f: Соединение 224f (рыжее твердое вещество, 0,165 г, количественный выход) синтезировали из соединения 223f (0,173 г, 0,36 ммоль) и 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль) в THF (8мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 224b. m/z=432 (M+1).
Соединение 225f: Соединение 225f (бежевое твердое вещество, 0,177 г, количественный выход) синтезировали из соединения 224f (0,165 г, < 0,36 ммоль), этилформиата (10 мл, 124 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,29 г, 1,61 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 225b. m/z=460 (M+1).
Соединение 226f: Соединение 226f (бежевое твердое вещество, 0,104 г, выход 63%) синтезировали из соединения 225f (0,177 г, < 0,36 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (54 мг, 0,78 ммоль) в EtOH (10 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 226b. Соединение 226f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в CH2Cl2). m/z=457 (M+1).
Соединение 227f: Соединение 227f (бежевое твердое вещество, 96 мг, выход 92%) синтезировали из соединения 226f (0,104 г, 0,23 ммоль) и карбоната калия (0,133 г, 0,96 ммоль) в МеОН (10 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 227b. m/z=457 (M+1).
Т132: Раствор соединения 227f (92 мг, 0,20 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (29 мг, 0,10 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением со
- 120 047073 единения Т132 (16 мг, выход 17%) в виде белого твердого вещества. m/z=455 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ 8,69 (с, 1H), 7,39 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,20 (м, 2Н), 7,12 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 6,98 (ддд, J=0,9, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,94 (тд, J=2,3, 9,1 Гц, 1H), 6,56 (м, 2Н), 2,94 (с, 6Н), 2,57 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,49 (м, 2Н), 2,14 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223g: Герметично закрываемую колбу наполняли соединением 222 (0,40 г, 1,16 ммоль), ацетальдегидом (0,52 г, 11,80 ммоль) и EtOH (5 мл). Добавляли ацетат аммония (1,79 г, 23,22 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 60°C в течение 4 суток, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целила®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения 223g (0,15 г, выход 35%) в виде рыжего пенистого твердого вещества. m/z=371 (M+1).
Соединение 224g: Раствор соединения 223g (0,15 г, 0,40 ммоль) и 3Н водн. HCl (1,35 мл, 4,05 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 224g (0,12 г, выход 91%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=327 (M+1).
Соединение 225g: Раствор соединения 224g (0,12 г, 0,37 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,35 мл, 1,86 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл).
Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 225g (0,12 г, выход 92%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=355 (M+1).
Соединение 226g: Раствор соединения 225g (0,12 г, 0,34 ммоль) и уксусной кислоты (0,20 мл, 3,49 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (35 мг, 0,50 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, после этого при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 226g (0,10 г, выход 84%) в виде светло-оранжевого твердого вещества. m/z=352 (М+1).
Соединение 227g: Смесь соединения 226g (0,10 г, 0,28 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,20 г, 1,45 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 227g (51 мг, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=352 (M+1).
Т133: Соединение 227g (51 мг, 0,15 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (20 мг, 0,070 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,12 мл, 1,48 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т133 (14 мг, выход 28%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=350 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,53 (с, 1H), 7,49 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,19 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,02 (ддд, J=0,9, 2,1, 7,9 Гц, 1H), 6,96 (тд, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 2,46 (м, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,07 (м, 2Н), 1,76 (м, 1H), 1,44 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 223h: Герметично закрываемую колбу наполняли соединением 222 (0,44 г, 1,27 ммоль), бензальдегидом (0,27 г, 2,54 ммоль) и EtOH (5 мл). Добавляли ацетат аммония (1,0 г, 13,0 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 60°C в течение 48 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 223h (0,44 г, выход 80%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=433 (M+1).
Соединение 224h: Раствор соединения 223h (0,44 г, 1,02 ммоль) и 3Н водн. HCl (3,4 мл, 10,2 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 224h (0,46 г, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества.
- 121 047073 m/z=389 (M+1).
Соединение 225h: Раствор соединения 224h (0,46 г, < 1,02 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 1,0 мл, 5,3 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 225h (0,42 г, выход 99%) в виде желто-оранжевого твердого вещества. m/z=417 (M+1).
Соединение 226h: Раствор соединения 225h (0,41 г, 0,98 ммоль) и уксусной кислоты (0,60 мл, 10,48 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,10 г, 1,44 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 226h (0,42 г, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=414 (М+1).
Соединение 227h: Раствор соединения 226h (0,42 г, < 0,98 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,68 г, 4,93 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 227h (0,26 г, выход 64%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=414 (M+1).
Т134: Соединение 227h (0,26 г, 0,63 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (90 мг, 0,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,51 мл, 6,31 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т134 (0,19 г, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=412 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,67 (с, 1H), 7,40 (дт, J=6,1, 8,1 Гц, 1H), 7,34 (м, 2Н), 7,27 (м, 3H), 7,14 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 6,97 (ддд, J=0,9, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,93 (тд, J=2,3, 9,0 Гц, 1H), 2,55 (м, 3H), 2,13 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 228: Смесь соединения 222 (0,66 г, 1,91 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали формальдегидом (37 мас.% в воде, 0,32 г, 3,94 ммоль) и ацетатом аммония (1,47 г, 19,07 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 228 (546 мг, выход 80%) в виде вязкого масла. m/z=357 (M+1).
Соединение 229: Соединение 228 (545 мг, 1,53 ммоль) растворяли в ацетонитриле (20 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор N-бромсукцинимида (0,38 г, 2,14 ммоль) в ацетонитриле (5 мл). Реакционную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 229 (0,45 г, выход 68%) в виде белого твердого вещества. m/z=435/437 (М+1).
Соединение 230а: Реакционный сосуд наполняли соединением 229 (0,31 г, 0,71 ммоль), 4-хинолин бороновой кислотой (0,23 г, 1,33 ммоль), карбонатом калия (0,29 г, 2,10 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (0,17 г, 0,15 ммоль), диметоксиэтаном (20 мл) и водой (5 мл). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 90°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и солевым раствором. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOH в CH2Cl2) с получением соединения 230а (0,32 г, выход 93%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=484 (M+1).
Соединение 231а: Соединение 230а (0,325 г, 0,67 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (9 мл, 27 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 231а (0,283 г, выход 96%) в виде желтого твердого вещества. m/z=440 (M+1).
Соединение 232а: Соединение 231а (0,28 г, 0,64 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186
- 122 047073 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,46 г, 2,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 232а (0,277 г, выход 93%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=468 (M+1).
Соединение 233а: Смесь соединения 232а (0,277 г, 0,59 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (82 мг, 1,18 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 233а (0,17 г, выход 62%) в виде желтого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 234а: Смесь соединения 233а (0,168 г, 0,36 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,20 мг, 1,45 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 234а (0,173 г, количественный выход) в виде коричневого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Т135: Раствор соединения 234а (0,17 г, < 0,36 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (52 мг, 0,18 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т135 (84 мг, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=463 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (д, J=4,5 Гц, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,31 (м, 1H), 8,13 (м, 1H), 7,77 (ддд, J=1,5, 6,9, 8,5 Гц, 1H), 7,63 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,3 Гц, 1H), 7,28 (дт, J=5,9, 8,1 Гц, 1H), 7,06 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,3 Гц, 1H), 7,00 (д, J=4,5 Гц, 1H), 6,85 (м, 2Н), 2,65 (м, 3H), 2,25 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (дтд, J=2,4, 5,1, 9,7 Гц, 1H), 1,89 (м, 1H), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 230b: Соединение 230b (грязно-белое твердое вещество, 0,217 г, выход 63%) синтезировали из соединения 229 (0,31 г, 0,71 ммоль), 5-хинолинбороновой кислоты (0,23 г, 1,33 ммоль), карбоната калия (0,29 г, 2,10 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,17 г, 0,15 ммоль) в диметоксиэтане (20 мл) и воде (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 230а. Соединение 230b очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2). m/z=484 (M+1).
Соединение 231b: Соединение 231b (белое твердое вещество, 0,177 г, выход 91%) синтезировали из соединения 230b (0,215 г, 0,44 ммоль) и 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль) в ТГФ (8 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 231а. m/z=440 (M+1).
Соединение 232b: Соединение 232b (бежевое твердое вещество, 0,186 г, количественный выход) синтезировали из соединения 231b (0,175 г, 0,40 ммоль), этилформиата (12 мл, 149 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,29 г, 1,61 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 232а. m/z=468 (M+1).
Соединение 233b: Соединение 233b (желтое твердое вещество, 0,17 г, выход 92%) синтезировали из соединения 232b (0,186 г, 0,40 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (55 мг, 0,79 ммоль) в EtOH (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 233а. m/z=465 (M+1).
Соединение 234b: Соединение 234b (коричневое твердое вещество, 0,120 г, выход 69%) синтезировали из соединения 233b (0,173 г, 0,37 ммоль) и карбоната калия (0,20 г, 1,45 ммоль) в МеОН (12 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 234а. m/z=465 (M+1).
Т136: Раствор соединения 234b (0,12 г, 0,26 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (37 мг, 0,13 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т136 (65 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества. m/z=463 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,95 (дд, J=1,7, 4,2 Гц, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,58 (ддд, J=0,9, 1,8, 8,6 Гц, 1H), 8,09 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,53 (дд, J=7,2, 8,5 Гц, 1H), 7,48 (дд, J=4,2, 8,6 Гц, 1H), 7,24 (м, 2Н), 7,02 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,3 Гц, 1H), 6,81 (м, 2Н), 2,64 (м, 3H), 2,25 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (м, 1H), 1,89 (ддт, J=7,1, 10,3, 13,2 Гц, 1H), 1,58 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 230с: Соединение 230с (белое твердое вещество, 0,32 г, выход 93%) синтезировали из соединения 229 (0,31 г, 0,71 ммоль), 3-хинолинбороновой кислоты (0,23 г, 1,33 ммоль), карбоната калия (0,29 г, 2,10 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,17 г, 0,15 ммоль) в диметоксиэтане (20
- 123 047073 мл) и воде (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 230а. Соединение 230с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2). m/z=484 (M+1).
Соединение 231с: Соединение 231с (белое твердое вещество, 0,278 г, выход 97%) синтезировали из соединения 230с (0,316 г, 0,65 ммоль) и 3Н водн. HCl (9 мл, 27 ммоль) в ТГФ (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 231а. m/z=440 (М+1).
Соединение 232с: Соединение 232с (бежевое твердое вещество, 0,219 г, количественный выход) синтезировали из соединения 231с (0,19 г, 0,44 ммоль), этилформиата (13 мл, 161 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,32 г, 1,78 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 232а. m/z=468 (M+1).
Соединение 233с: Соединение 233с (белое твердое вещество, 0,14 г, выход 69%) синтезировали из соединения 232с (0,219 г, < 0,44 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (64 мг, 0,92 ммоль) в EtOH (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 233а. Соединение 233с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50-100% EtOAc в гексанах). m/z=465 (M+1).
Соединение 234с: Соединение 234с (желтое твердое вещество, 0,15 г, количественный выход) синтезировали из соединения 233с (0,14 г, 0,30 ммоль) и карбоната калия (0,17 г, 1,23 ммоль) в МеОН (12 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 234а. m/z=465 (M+1).
Т137: Раствор соединения 234с (0,15 г, < 0,30 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (46 мг, 0,16 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т137 (84 мг, выход 60%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=463 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,80 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,68 (с, 1H), 8,23 (дд, J=0,8, 2,3 Гц, 1H), 8,04 (дд, J=1,0, 8,3 Гц, 1H), 7,72 (м, 2Н), 7,55 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,2 Гц, 1H), 7,44 (дт, J=6,2, 8,3 Гц, 1H), 7,20 (ддт, J=1,0, 2,5, 8,3 Гц, 1H), 7,03 (м, 2Н), 2,60 (м, 3H), 2,18 (м, 2Н), 1,86 (тт, J=8,9, 13,3 Гц, 1H), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 230d: Соединение 230d (грязно-белое твердое вещество, 0,14 г, выход 64%) синтезировали из соединения 229 (0,20 г, 0,46 ммоль), 3-изопропилфенилбороновой кислоты (98 мг, 0,60 ммоль), карбоната калия (0,20 г, 1,45 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,12 г, 0,10 ммоль) в диметоксиэтане (20 мл) и воде (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 230а. Соединение 230d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах). m/z=475 (M+1).
Соединение 231d: Соединение 231d (белое твердое вещество, 0,126 г, количественный выход) синтезировали из соединения 230d (0,132 г, 0,28 ммоль) и 3 Н водн. HCl (3 мл, 9 ммоль) в ТГФ (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 231а. m/z=431 (M+1).
Соединение 232d: Соединение 232d (желтое твердое вещество, 0,135 г, количественный выход) синтезировали из соединения 231d (0,126 г, < 0,28 ммоль), этилформиата (8 мл, 99 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,21 г, 1,17 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 232а. m/z=459 (M+1).
Соединение 233d: Соединение 233d (белое твердое вещество, 86 мг, выход 68%) синтезировали из соединения 232d (0,135 г, < 0,28 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (41 мг, 0,59 ммоль) в EtOH (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 233а. Соединение 233d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2). m/z=456 (M+1).
Соединение 234d: Соединение 234d (белое твердое вещество, 90 мг, количественный выход) синтезировали из соединения 233d (85 мг, 0,19 ммоль) и карбоната калия (0,103 г, 0,75 ммоль) в МеОН (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 234а. m/z=456 (M+1).
Т138: Раствор соединения 234d (89 мг, 0,20 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (28 мг, 0,098 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т138 (48 мг, выход 54%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=454 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,69 (с, 1H), 7,40 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,16 (м, 5Н), 6,98 (ддд, J=1,0, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,93 (тд, J=2,3, 9,0 Гц, 1H), 2,78 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,56 (м, 3H), 2,13 (м, 2Н), 1,82 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,08 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 230е: Соединение 230е (белое твердое вещество, 0,25 г, выход 68%) синтезировали из соединения 229 (0,31 г, 0,71 ммоль), 2-морфолинопиридин 4-бороновой кислоты (0,19 г, 0,91 ммоль),
- 124 047073 карбоната калия (0,29 г, 2,10 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,17 г, 0,15 ммоль) в диметоксиэтане (20 мл) и воде (5 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 230а. Соединение 230е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOH в CH2Cl2). m/z=519 (M+1).
Соединение 231е: Соединение 231е (желтое твердое вещество, 0,245 г, количественный выход) синтезировали из соединения 230е (0,25 г, 0,48 ммоль) и 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль) в ТГФ (8 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 231а. m/z=475 (M+1).
Соединение 232е: Соединение 232е (желтое твердое вещество, 0,25 г, количественный выход) синтезировали из соединения 231е (0,242 г, < 0,48 ммоль), этилформиата (15 мл, 186 ммоль) и метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 0,40 г, 2,22 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 232а. m/z=503 (M+1).
Соединение 233е: Соединение 233е (белое твердое вещество, 0,167 г, выход 69%) синтезировали из соединения 232е (0,25 г, < 0,48 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (69 мг, 0,99 ммоль) в EtOH (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 233а. Соединение 233е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). m/z=500 (M+1).
Соединение 234е: Соединение 234е (белое твердое вещество, 0,164 г, выход 98%) синтезировали из соединения 233е (0,167 г, 0,33 ммоль) и карбоната калия (0,184 г, 1,33 ммоль) в МеОН (15 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 234а. m/z=500 (M+1).
Т139: Раствор соединения 234е (0,162 г, 0,32 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (46 мг, 0,16 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т139 (80 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества. m/z=49% (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,65 (с, 1H), 8,01 (дд, J=0,6, 5,2 Гц, 1H), 7,46 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,20 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,01 (м, 1H), 6,97 (тд, J=2,2, 8,8 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,36 (дд, J=1,3, 5,3 Гц, 1H), 3,79 (м, 4Н), 3,45 (м, 4Н), 2,54 (м, 3H), 2,12 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 235: Герметично закрываемую колбу наполняли соединением 229 (0,41 г, 0,94 ммоль), бензилтрифторборатом калия (0,28 г, 1,41 ммоль), карбонатом цезия (0,92 г, 2,83 ммоль), ТГФ (9 мл) и водой (1 мл). Смесь дегазировали. Добавляли [1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (69 мг, 0,094 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения 235 (83 мг, выход 20%) в виде желтого твердого вещества. m/z=447 (M+1).
Соединение 236: Раствор соединения 235 (83 мг, 0,19 ммоль) и 3Н водн. HCl (0,62 мл, 1,86 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 236 (94 мг, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=403 (M+1).
Соединение 237: Раствор соединения 236 (94 мг, < 0,19 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,17 мл, 0,91 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 237 (95 мг, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=431 (M+1).
Соединение 238: Раствор соединения 237 (95 мг, < 0,19 ммоль) и уксусной кислоты (0,11 мл, 1,92 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (19 мг, 0,27 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, после этого - при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 238 (85 мг, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=428 (М+1).
Соединение 239: Раствор соединения 238 (85 мг, < 0,19 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,14 г, 1,01 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтро
- 125 047073 вали и концентрировали с получением соединения 239 (70 мг, выход 88%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=428 (М+1).
Т140: Соединение 239 (70 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (23 мг, 0,080 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т140 (21 мг, выход 30%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=426 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,36 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,16 (м, 4Н), 6,94 (м, 2Н), 6,81 (м, 1H), 6,72 (тд, J=2,3, 9,0 Гц, 1H), 3,96 (с, 2Н), 2,56 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,41 (ддд, J=6,4, 11,0, 17,2 Гц, 1H), 2,34 (м, 1H), 2,12 (дт, J=2,2, 12,8 Гц, 1H), 2,02 (м, 1H), 1,74 (тдд, J=6,5, 13,0, 19,1 Гц, 1H), 1,48 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 240а: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 229 (200 мг, 0,459 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиридином (188 мг, 0,688 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (53 мг, 0,046 ммоль), трехосновным фосфатом калия (292 мг, 1,38 ммоль), 1,4-диоксаном (6 мл) и водой (2 мл). Смесь продували N2. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 110°С в течение 22 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 240а (211 мг, выход 92%) в виде белого стекла. m/z=502 (М+1).
Соединение 241а: Раствор соединения 240а (210 мг, 0,418 ммоль) в ТГФ (25 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,39 мл, 4,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 241а (187 мг, выход 98%) в виде белого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=458 (M+1).
Соединение 242а: Соединение 241а (185 мг, 0,404 ммоль) в этилформиате (25 мл, 311 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,75 мл, 4,05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (16 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,67 мл, 4,02 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (42 мг, 0,604 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 19 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 242а (184 мг, выход 94%) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=483 (M+1).
Соединение 243а: Раствор соединения 242а (183 мг, 0,379 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (105 мг, 0,758 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, после чего нагревали при 55°С в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 243а (136 мг, выход 74%) в виде желтого стекла. m/z=483 (M+1).
Т141: Соединение 243а (135 мг, 0,279 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли пиридин (0,23 мл, 2,84 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т141 (94 мг, выход 70%) в виде желтого твердого вещества. m/z=481 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 8,57 (д, J=5,1 Гц, 1H), 7,74 (м, 1H), 7,53 (дт, J=6,0, 8,2 Гц, 1H), 7,30 (м, 2Н), 7,02 (м, 2Н), 2,60 (кд, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 2,53 (дд, J=3,9, 8,7 Гц, 2Н), 2,14 (м, 2Н), 1,83 (тт, J=9,1, 13,5 Гц, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 240b: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 229 (200 мг, 0,459 ммоль), (6-циклопропилпиридин-3-ил)бороновой кислотой (112 мг, 0,687 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (53 мг, 0,046 ммоль), трехосновным фосфатом калия (292 мг, 1,38 ммоль), 1,4-диоксаном (6 мл) и водой (2 мл). Смесь продували N2. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 110°С в течение 23 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь раз
- 126 047073 водили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 240b (93 мг, выход 43%) в виде желтого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Соединение 241b: Раствор соединения 240b (93 мг, 0,196 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,65 мл, 1,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 241b (88 мг, количественный выход) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=430 (M+1).
Соединение 242b: Соединение 241b (88 мг, < 0,196 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,38 мл, 2,05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,34 мл, 2,04 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (21 мг, 0,302 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 21 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 242b (90 мг, количественный выход) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=455 (M+1).
Соединение 243b: Раствор соединения 242b (90 мг, < 0,196 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (55 мг, 0,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 4,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 243b (58 мг, выход 65%) в виде желтого стекла. m/z=455 (M+1).
Т142: Соединение 243b (57 мг, 0,125 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (19,6 мг, 0,069 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли пиридин (0,10 мл, 1,24 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т142 (45 мг, выход 79%) в виде желтого твердого вещества. m/z=453 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,62 (с, 1H), 8,27 (дд, J=0,8, 2,3 Гц, 1H), 7,64 (ддд, J=0,7, 2,3, 8,2 Гц, 1H), 7,43 (дт, J=6,0, 8,1 Гц, 1H), 7,17 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,07 (тд, J=0,7, 8,1 Гц, 1H), 6,98 (ддд, J=0,9, 2,1, 7,9 Гц, 1H), 6,94 (тд, J=2,2, 8,9 Гц, 1H), 2,59 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,51 (м, 2Н), 2,13 (м, 2Н), 1,99 (м, 1H), 1,81 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,99 (м, 4Н).
Соединение 240с: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 229 (183 мг, 0,420 ммоль), (3-морфолинофенил)бороновой кислотой (131 мг, 0,633 ммоль), трехосновным фосфатом калия (268 мг, 1,26 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (48,5 мг, 0,042 ммоль), 1,4диоксаном (3 мл) и ДМФ (1 мл). Смесь продували N2. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 110°С в течение 17 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и осаждали продукт. Смесь фильтровали через подушку из целита® и промывали EtOAc. Фильтрат и промывочный материал EtOAc сливали. Фильтрационный осадок тщательно промывали CH2Cl2. Фильтрат CH2Cl2 сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 240с (151 мг, выход 69%) в виде белого твердого вещества и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=518 (М+1).
Соединение 241с: Раствор соединения 240с (151 мг, 0,292 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,97 мл, 2,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между CH2Cl2 и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 241с (121 мг, выход 87%) в виде грязно-белого твердого вещества и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=474 (М+1).
Соединение 242с: Соединение 241с (120 мг, 0,253 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,47 мл, 2,54 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,42 мл, 2,52 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (26 мг, 0,37 ммоль). Реакционную смесь нагревали
- 127 047073 при 60°С в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 242с (126 мг, количественный выход) в виде стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=499 (М+1).
Соединение 243с: Раствор соединения 242с (125 мг, 0,251 ммоль) в МеОН (15 мл) обрабатывали карбонатом калия (69 мг, 0,50 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°C в течение 5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 243с (84 мг, выход 67%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=499 (M+1).
Т143: Раствор соединения 243с (83 мг, 0,17 ммоль) в безводном толуоле (15 мл) в атмосфере азота обрабатывали ДДХ (49 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc). Полученный продукт растворяли в EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения Т143 (30 мг, выход 36%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=497 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,68 (с, 1H), 7,40 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,13 (м, 2Н), 6,98 (м, 2Н), 6,94 (тд, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 6,82 (дд, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,73 (тд, J=1,2, 7,7 Гц, 1H), 3,82 (м, 4Н), 3,05 (м, 4Н), 2,55 (м, 3H), 2,14 (м, 2Н), 1,82 (тт, J=8,3, 13,2 Гц, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 240d: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 229 (170 мг, 0,390 ммоль), 2-(циклопропилпиридин-4-ил)бороновой кислотой (95 мг, 0,58 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (45 мг, 0,039 ммоль), трехосновным фосфатом калия (248 мг, 1,17 ммоль), 1,4-диоксаном (3 мл) и водой (1 мл). Смесь продували N2. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 110°С в течение 19 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и промывали солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 240d (79 мг, выход 43%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Соединение 241d: Раствор соединения 240d (114 мг, 0,241 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (0,80 мл, 2,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 241d (121 мг, количественный выход) в виде желтого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=430 (M+1).
Соединение 242d: Соединение 241d (120 мг, < 0,241 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,52 мл, 2,81 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 26 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,47 мл, 2,82 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (29 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 242d (152 мг, количественный выход) в виде коричневого вязкого масла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=455 (M+1).
Соединение 243d: Раствор соединения 242d (150 мг, < 0,241 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (91 мг, 0,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 5,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 243d (50 мг, выход 46%) в виде желтого стекла. m/z=455 (M+1).
Т144: Соединение 243d (50 мг, 0,11 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере N2. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (17 мг, 0,059 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли пиридин (0,09 мл, 1,11 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т144 (34 мг, выход 68%) в виде желтого твердого вещества. m/z=453 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (с, 1H), 8,27 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,47 (дт, J=6,0, 8,1 Гц, 1H), 7,24 (м, 1H), 7,20 (м, 1H), 6,98 (м, 2Н), 6,81 (дд, J=1,7, 5,2 Гц, 1H), 2,59 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,52
- 128 047073 (м, 2Н), 2,13 (м, 2Н), 1,96 (м, 1H), 1,82 (тт, J=8,8, 13,3 Гц, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,93 (м, 4Н).
Соединение 244: В смесь соединения 222 (1,665 г, 4,82 ммоль) в EtOH (33 мл) добавляли ацетат аммония (3,716 г, 48,20 ммоль) и 3-бромбензальдегид (1,784 г, 9,64 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в атмосфере N2 при комнатной температуре в течение 60 ч, после чего дефлегмировали в течение 24 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (60 мл) и промывали насыщ. водн. NaHCO3 (2 х 30 мл) и водой (30 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 244 (1,815 г, выход 74%) в виде желтого твердого вещества. m/z=511/513 (М+1).
Соединение 245: Раствор соединения 244 (1,815 г, 3,55 ммоль) в ТГФ (90 мл) обрабатывали 3Н водн. HCl (11,5 мл, 34,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 20 ч, после чего концентрировали. Остаток охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли 1Н водн. NaOH (35 мл, 35 ммоль) и насыщ. водн. NaHCO3 (30 мл). Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали CH2Cl2 (2х30 мл).Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 245 (1,538 г, выход 93%) в виде красного твердого вещества. m/z=467/469 (М+1).
Соединение 246: Раствор соединения 245 (300 мг, 0,64 ммоль) в этилформиате (1,6 мл, 19,89 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (25 мас.% в МеОН, 1,47 мл, 6,42 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли 6Н водн. HCl (1,07 мл, 6,42 ммоль), EtOH (6,5 мл) и гидроксиламина гидрохлорид (67 мг, 0,96 ммоль).Смесь перемешивали при 55°С в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и промывали водой (2х20 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах) с получением соединения 246 (170 мг, выход 54%) в виде светло-коричневого твердого вещества. m/z=492/494 (М+1).
Соединение 247: В раствор соединения 246 (170 мг, 0,35 ммоль) в МеОН (3,5 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,158 мл, 0,69 ммоль). Смесь нагревали в атмосфере N2 при 55°С в течение 3 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 10% водн. NaH2PO4 (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2х20 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах) с получением соединения 247 (158 мг, выход 93%) в виде белого твердого вещества. m/z=492/494 (М+1).
Т145: Соединение 247 (80 мг, 0,16 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (23 мг, 0,081 ммоль) взвешивали в пробирке и охлаждали до 0°С в атмосфере N2. Добавляли ДМФ (1,6 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (39 мкл, 0,49 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc (20 мл) и промывали водой (3х15 мл). Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т145 (19 мг, выход 24%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=490/492 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (с, 1H), 7,63 (т, J=1,8 Гц, 1H), 7,42 (м, 2Н), 7,18 (ддт, J=0,9, 2,6, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (тд, J=1,4, 7,8 Гц, 1H), 7,08 (т, J=7,8 Гц, 1H), 6,97 (ддд, J=0,9, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,94 (тд, J=2,2, 8,8 Гц, 1H), 2,55 (м, 3H), 2,13 (м, 2Н), 1,82 (тт, J=9,2, 13,1 Гц, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 248а: Соединение 247 (74,6 мг, 0,152 ммоль), пиридин-4-илбороновую кислоту (27,9 мг, 0,227 ммоль), K3PO4 (96,5 мг, 0,455 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (8,8 мг, 0,0076 ммоль) взвешивали в колбе для микроволновой обработки. Смесь 1,4-диоксана (1 мл) и ДМФ (0,5 мл) продували N2 в течение 5 мин и добавляли. Смесь продували N2 еще в течение 5 мин, после чего нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 90°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разделяли между EtOAc (20 мл) и 10% NaH2PO4 (10 мл). Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2х 10 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали.Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% ацетоном в гексанах) с получением соединения 248а (59 мг, выход 79%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Т146: Соединение 248а (56 мг, 0,11 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (16 мг, 0,056 ммоль) взвешивали в пробирке и охлаждали до 0°С в атмосфере N2. Добавляли ДМФ (1,1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли пиридин (28 мкл, 0,35 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc (20 мл) и промывали водой (3х 15 мл). Органический экстракт сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-80% ацетоном в гексанах)
- 129 047073 с получением соединения Т146 (43 мг, выход 77%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=489 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,67 (с, 1H), 8,64 (м, 2Н), 7,69 (м, 1H), 7,55 (м, 1H), 7,47 (дт, J=6,1, 8,2 Гц, 1H), 7,37 (м, 2Н), 7,34 (м, 2Н), 7,21 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,3 Гц, 1H), 7,04 (м, 1H), 6,99 (тд, J=2,2, 8,9 Гц, 1H), 2,58 (м, 3H), 2,16 (м, 2Н), 1,84 (тт, J=9,0, 13,2 Гц, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 248b: Соединение 247 (85 мг, 0,17 ммоль), пиримидин-5-илбороновую кислоту (32 мг, 0,26 ммоль), K3PO4 (110 мг, 0,52 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (10 мг, 0,0086 ммоль) взвешивали в колбе для микроволновой обработки. Смесь 1,4-диоксана (1 мл) и ДМФ (0,5 мл) продували N2 в течение 5 мин и добавляли. Смесь продували N2 еще в течение 5 мин, после чего нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 90°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разделяли между EtOAc (20 мл) и 10% NaH2PO4 (10 мл). Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% ацетоном в гексанах) с получением соединения 248b (73 мг, выход 86%) в виде грязнобелого твердого вещества. m/z=492 (M+1).
Т147: Раствор соединения 248b (70 мг, 0,14 ммоль) в сухом ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (20 мг, 0,071 ммоль) в ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (34 мкл, 0,43 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта и снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т147 (25 мг, выход 36%) в виде бледнорозового твердого вещества. m/z=490 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,20 (с, 1H), 8,76 (с, 2Н), 8,65 (с, 1H), 7,57 (м, 1H), 7,46 (м, 4Н), 7,22 (м, 1H), 7,05 (м, 1H), 6,98 (тд, J=2,3, 9,0 Гц, 1H), 2,57 (м, 3H), 2,15 (м, 2Н), 1,85 (м, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 248с: Соединение 248с (грязно-белое твердое вещество, 75 мг, выход 85%) синтезировали из соединения 247 (85 мг, 0,17 ммоль), (5-фторпиридин-3-ил)бороновой кислоты (36 мг, 0,26 ммоль), K3PO4 (110 мг, 0,52 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (10 мг, 0,0086 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 248b. Соединение 248с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% ацетоном в гексанах). m/z=509 (M+1).
Т148: Раствор соединения 248с (75 мг, 0,15 ммоль) в ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (21 мг, 0,074 ммоль) в ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (35 мкл, 0,44 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т148 (30 мг, выход 40%) в виде бледно-розового твердого вещества. m/z=507 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,66 (с, 1H), 8,44 (м, 2Н), 7,57 (м, 1H), 7,44 (м, 5Н), 7,22 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,05 (ддд, J=0,9, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,98 (тд, J=2,3, 8,8 Гц, 1H), 2,58 (м, 3H), 2,15 (м, 2Н), 1,84 (м, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 248d: Соединение 248d (грязно-белое твердое вещество, 46 мг, выход 54%) синтезировали из соединения 247 (85 мг, 0,17 ммоль), (1-метил-Ш-пиразол-4-ил)бороновой кислоты (33 мг, 0,26 ммоль), K3PO4 (110 мг, 0,52 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (10 мг, 0,0086 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 248b. Соединение 248d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2). m/z=494 (M+1).
Т149: Раствор соединения 248d (46 мг, 0,093 ммоль) в ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (13 мг, 0,047 ммоль) в ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (22 мг, 0,28 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т149 (18 мг, выход 39%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=492 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,70 (с, 1H), 7,54 (м, 3H), 7,40 (м, 2Н), 7,22 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,17 (ддт, J=0,9, 2,6, 8,3 Гц, 1H), 7,11 (м, 1H), 7,01 (ддд, J=1,0, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,97 (тд, J=2,3, 8,9 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 2,56 (м, 3H), 2,14 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 248е: Соединение 248е (грязно-белое твердое вещество, 60 мг, выход 77%) синтезировали из соединения 247 (75 мг, 0,15 ммоль), (3,5-диметилизоксазол-4-ил)бороновой кислоты (32 мг, 0,23 ммоль), K3PO4 (97 мг, 0,46 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (8,8 мг, 0,0076 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 248а. Реакционную смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 90°С в течение 3 ч. Соединение 248е очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0%-50% ацетоном в CH2Cl2). m/z=509 (M+1).
- 130 047073
Т150: Раствор соединения 248е (60 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (17 мг, 0,059 ммоль) в ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (28 мг, 0,35 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т150 (27 мг, выход 45%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=507 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (с, 1H), 7,53 (ддд, J=1,2, 1,8, 7,9 Гц, 1H), 7,42 (м, 2Н), 7,17 (м, 2Н), 7,10 (т, J=0,6, 1,8 Гц, 1H), 7,04 (ддд, J=0,9, 2,0, 7,9 Гц, 1H), 6,96 (тд, J=2,3, 8,9 Гц, 1H), 2,55 (м, 3H), 2,20 (с, 3H), 2,12 (м, 2Н), 2,04 (с, 3H), 1,83 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 248f: Соединение 248f (грязно-белое твердое вещество, 51 мг, выход 60%) синтезировали из соединения 247 (85 мг, 0,17 ммоль), (1-метил-Ш-пиразол-5-ил)бороновой кислоты (33 мг, 0,26 ммоль), K3PO4 (110 мг, 0,52 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (10 мг, 0,0086 ммоль), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 248b. Соединение 248f очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2). m/z=494 (M+1).
Т151: Раствор соединения 248f (51 мг, 0,10 ммоль) в ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (15 мг, 0,052 ммоль) в ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (25 мг, 0,31 ммоль). Смесь нагревали при 55°С в течение ночи, после чего охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc и промывали водой. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в CH2Cl2) с получением соединения Т151 (34 мг, выход 67%d) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=492 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (с, 1H), 7,47 (м, 3H), 7,39 (дд, J=7,7, 8,2 Гц, 1H), 7,33 (м, 2Н), 7,18 (ддт, J=0,9, 2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,03 (ддд, J=0,9, 2,1, 7,9 Гц, 1H), 6,97 (тд, J=2,3, 8,8 Гц, 1H), 6,14 (д, J=1,9 Гц, 1H), 3,68 (с, 3H), 2,56 (м, 3H), 2,11 (м, 2Н), 1,84 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 249: Смесь соединения 173 (0,33 г, 1,31 ммоль), 3-аминопиридина (0,18 г, 1,91 ммоль) и каталитического количества п-толуолсульфоновой кислоты моногидрата в бензоле дефлегмировали в течение ночи с ловушкой Дина - Старка для удаления воды. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. води. NaHCO3 (50 мл) и насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 249 (0,14 г, выход 33%) в виде желтого твердого вещества. m/z=329 (M+1).
Соединение 250: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 249 (600 мг, 1,82 ммоль) и EtOH (22 мл). Добавляли ацетат аммония (1,44 г, 18,68 ммоль) и 37% водн. Раствор формалина (0,74 мл, 9,10 ммоль). Сосуд герметично закрывали, а реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 17 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 8% МеОН в EtOAc) с получением соединения 250 (529 мг, выход 86%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=340 (М+1).
Соединение 251: В раствор соединения 250 (528 мг, 1,56 ммоль) в безводном ацетонитриле (25 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли N-бромсукцинимид (333 мг, 1,87 ммоль). Реакционную смесь держали при 0°С в течение 1 ч, после чего оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 2,5 ч реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 251 (669 мг, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=418/420 (М+1).
Соединение 252а: Стеклянный сосуд с толстыми стенками наполняли соединением 251 (250 мг, 0,597 ммоль), 4-бифенилбороновой кислотой (177 мг, 0,894 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (69 мг, 0,060 ммоль), трехосновным фосфатом калия (380 мг, 1,79 ммоль), 1,4-диоксаном (6 мл) и водой (2 мл). Сосуд продували N2, после чего герметично закрывали. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 21 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и фильтровали через подушку из целила®. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах) с получением соединения 252а (208 мг, выход 71%) в виде белого твердого вещества. m/z=492 (М+1).
Соединение 253а: Раствор соединения 252а (205 мг, 0,416 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,38 мл, 4,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 26 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с
- 131 047073 получением соединения 253а (178 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=448 (М+1).
Соединение 254а: Соединение 253а (178 мг, 0,398 ммоль) в этилформиате (24 мл, 298 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,74 мл, 4,00 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,66 мл, 3,96 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (41 мг, 0,59 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 20 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 254а (191 мг, количественный выход) в виде стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=473 (M+1).
Соединение 255а: Раствор соединения 254а (190 мг, < 0,398 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (111 мг, 0,804 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего нагревали при 55°С в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 255а (157 мг, выход 83%) в виде стекла. m/z=473 (M+1).
Т152: Раствор соединения 255а (155 мг, 0,328 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (52 мг, 0,182 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,27 мл, 3,34 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т152 (117 мг, выход 76%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=471 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,70 (дд, J=1,6, 4,8 Гц, 1H), 8,68 (с, 1H), 8,57 (дд, J=0,8, 2,5 Гц, 1H), 7,54 (м, 3H), 7,50 (м, 2Н), 7,40 (м, 6Н), 2,57 (м, 3H), 2,17 (м, 2Н), 1,86 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 252b: Соединение 252b (белое твердое вещество, 187 мг, выход 68%) синтезировали из соединения 251 (250 мг, 0,597 ммоль), 4-изопропилфенилбороновой кислоты (147 мг, 0,896 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (69 мг, 0,060 ммоль), трехосновного фосфата калия (380 мг, 1,79 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) и воде (2 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 252а. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 23 ч. Соединение 252b очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах). m/z=458 (M+1).
Соединение 253b: Раствор соединения 252b (184 мг, 0,402 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,34 мл, 4,02 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 27 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 253b (160 мг, выход 96%) в виде прозрачного стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=414 (M+1).
Соединение 254b: Соединение 253b (160 мг, 0,386 ммоль) в этилформиате (22 мл, 273 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,71 мл, 3,83 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,64 мл, 3,84 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (40 мг, 0,58 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 18 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 254b (175 мг, количественный выход) в виде стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=439 (M+1).
Соединение 255b: Раствор соединения 254b (174 мг, < 0,386 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (109 мг, 0,790 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего нагревали при 55°С в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 255b (147 мг, выход 87%) в виде стекла. m/z=439 (M+1).
Т153: Раствор соединения 255b (145 мг, 0,331 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (52 мг, 0,182 ммоль) в безвод- 132 047073 ном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,27 мл, 3,34 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т153 (110 мг, выход 76%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=437 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,67 (м, 2Н), 8,51 (дд, J=0,7, 2,6 Гц, 1H), 7,51 (ддд, J=1,6, 2,5, 8,1 Гц, 1H), 7,40 (ддд, J=0,8, 4,8, 8,1 Гц, 1H), 7,21 (м, 2Н), 7,11 (м, 2Н), 2,85 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,56 (м, 3H), 2,14 (м, 2Н), 1,84 (м, 1H), 1,52 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,20 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 252с: Соединение 252с (белое твердое вещество, 246 мг, выход 74%) синтезировали из соединения 251 (300 мг, 0,717 ммоль), хинолин-4-бороновой кислоты (186 мг, 1,075 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (83 мг, 0,072 ммоль), трехосновного фосфата калия (456 мг, 2,15 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) и воде (2 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 252а. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 14 ч. Соединение 252с очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc). m/z=467 (M+1).
Соединение 253с: Раствор соединения 252с (245 мг, 0,525 ммоль) в ТГФ (25 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,75 мл, 5,25 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 253с (210 мг, выход 95%) в виде стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=423 (М+1).
Соединение 254с: Соединение 253с (210 мг, 0,497 ммоль) в этилформиате (28 мл, 348 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,92 мл, 4,97 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (18 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,83 мл, 4,98 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (52 мг, 0,75 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 20 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 254с (213 мг, выход 96%) в виде желтого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=448 (M+1).
Соединение 255с: Раствор соединения 254с (212 мг, 0,474 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (131 мг, 0,949 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего нагревали при 55°С в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 11% МеОН в EtOAc) с получением соединения 255с (182 мг, выход 86%) в виде желтого стекла. m/z=448 (М+1).
Т154: Раствор соединения 255с (180 мг, 0,402 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (63 мг, 0,220 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,33 мл, 4,08 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения Т154 (104 мг, выход 58%) в виде желтого твердого вещества. m/z=446 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,75 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,57 (дд, J=1,5, 4,8 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=0,8, 2,6 Гц, 1H), 8,23 (ддд, J=0,7, 1,5, 8,4 Гц, 1H), 8,13 (ддд, J=0,6, 1,3, 8,4 Гц, 1H), 7,76 (ддд, J=1,5, 6,9, 8,4 Гц, 1H), 7,62 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,3 Гц, 1H), 7,36 (ддд, J=1,6, 2,6, 8,1 Гц, 1H), 7,25 (м, 1H), 7,00 (д, J=4,4 Гц, 1H), 2,65 (м, 3H), 2,27 (дт, J=2,2, 12,9 Гц, 1H), 2,19 (м, 1H), 1,91 (ддт, J=6,8, 10,6, 13,2 Гц, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 252d: Соединение 252d (белое твердое вещество, 253 мг, выход 67%) синтезировали из соединения 251 (320 мг, 0,764 ммоль), 3-бифенилбороновой кислоты (227 мг, 1,14 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (88 мг, 0,076 ммоль), трехосновного фосфата калия (486 мг, 2,29 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) и воде (2 мл), используя процедуру, описанную для синтеза соединения 252а. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч. Соединение 252d очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах). m/z=492 (M+1).
Соединение 253d: Раствор соединения 252d (253 мг, 0,514 ммоль) в ТГФ (25 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,71 мл, 5,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Орга
- 133 047073 нический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 253d (230 мг, количественный выход) в виде стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=448 (М+1).
Соединение 254d: Соединение 253d (230 мг, 0,514 ммоль) в этилформиате (32 мл, 398 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (5,4 М в МеОН, 0,95 мл, 5,13 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный продукт растворяли в EtOH (32 мл). Добавляли 6,0Н водн. HCl (0,86 мл, 5,16 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (54 мг, 0,78 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 17 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 254d (254 мг, количественный выход) в виде желтого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=473 (М+1).
Соединение 255d: Раствор соединения 254d (252 мг, < 0,514 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (147 мг, 1,06 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 255d (185 мг, выход 76%) в виде стекла. m/z=473 (M+1).
Т155: Раствор соединения 255d (147 мг, 0,311 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (49 мг, 0,171 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 80% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т155 (117 мг, выход 80%) в виде желтого твердого вещества. m/z=471 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,70 (дд, J=1,5, 4,8 Гц, 1H), 8,69 (с, 1H), 8,57 (дд, J=0,8, 2,6 Гц, 1H), 7,58 (дт, J=0,5, 1,8 Гц, 1H), 7,53 (м, 2Н), 7,40 (м, 5Н), 7,33 (м, 2Н), 7,23 (ддд, J=1,2, 1,8, 7,8 Гц, 1H), 2,58 (м, 3H), 2,17 (м, 2Н), 1,86 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 256: В раствор соединения 173 (1,5 г, 5,94 ммоль) в бензоле (50 мл) добавляли 1-метилШ-пиразол-4-амин (0,72 г, 7,41 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (0,11 г, 0,59 ммоль). Смесь дефлегмировали в течение 4 суток с ловушкой Дина-Старка для удаления воды, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 256 (1,0 г, выход 51%) в виде коричневого твердого вещества. m/z=332 (M+1).
Соединение 257а: Смесь соединения 256 (0,23 г, 0,69 ммоль) в абсолютном EtOH (5 мл) последовательно обрабатывали 4-изопропилбензальдегидом (0,21 г, 1,42 ммоль) и ацетатом аммония (0,54 г, 7,01 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 257а (283 мг, выход 88%) в виде желтого твердого вещества. m/z=461 (M+1).
Соединение 258а: Соединение 257а (0,278 г, 0,60 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (9 мл, 27 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 258а (0,27 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=417 (M+1).
Соединение 259а: Соединение 258а (0,269 г, < 0,60 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,46 г, 2,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 259а (0,295 г, количественный выход) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=445 (M+1).
Соединение 260а: Смесь соединения 259а (0,295 г, < 0,60 ммоль) в EtOH (15 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (91 мг, 1,31 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 260а (0,223 г, выход 84%) в виде желтого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
- 134 047073
Соединение 261а: Смесь соединения 260а (0,223 г, 0,50 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,279 мг, 2,02 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 261а (0,168 г, выход 75%) в виде желтого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Т156: Раствор соединения 261а (0,166 г, 0,38 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (54 мг, 0,19 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т156 (85 мг, 51%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=440 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,65 (с, 1H), 7,44 (д, J=0,7 Гц, 1H), 7,37 (м, 2Н), 7,31 (м, 1H), 7,15 (м, 2Н), 3,92 (с, 3H), 2,88 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,53 (м, 3H), 2,12 (м, 2Н), 1,80 (ддт, J=7,4, 10,2, 13,3 Гц, 1H), 1,49 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,22 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 257b: Смесь соединения 256 (0,25 г, 0,75 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали 3-хлорбензальдегидом (0,21 г, 1,49 ммоль) и ацетатом аммония (0,58 г, 7,52 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 257b (330 мг, выход 97%) в виде желтого твердого вещества. m/z=453 (M+1).
Соединение 258b: Соединение 257b (0,33 г, 0,73 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (9 мл, 27 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 258b (0,29 г, выход 97%) в виде желтого твердого вещества. m/z=409 (M+1).
Соединение 259b: Соединение 258b (0,291 г, 0,71 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,51 г, 2,83 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 259b (0,291 г, выход 94%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=437 (M+1).
Соединение 260b: Смесь соединения 259b (0,291 г, 0,67 ммоль) в EtOH (15 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,102 г, 1,47 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 260b (0,171 г, выход 59%) в виде белого твердого вещества. m/z=434 (M+1).
Соединение 261b: Смесь соединения 260b (0,171 г, 0,39 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,22 г, 1,59 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 261b (0,183 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=434 (M+1).
Т157: Раствор соединения 261b (0,182 г, 0,42 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (60 мг, 0,21 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,40 мл, 4,95 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т157 (120 мг, выход 66%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=432 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (с, 1H), 7,56 (м, 1H), 7,45 (д, J=0,8 Гц, 1H), 7,31 (с, 1H), 7,28 (м, 2Н), 7,22 (м, 1H), 3,94 (с, 3H), 2,53 (м, 3H), 2,12 (м, 2Н), 1,81 (м, 1H), 1,49 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 257с: Смесь соединения 256 (0,25 г, 0,75 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали 3,4-дихлорбензальдегидом (0,26 г, 1,49 ммоль) и ацетатом аммония (0,58 г, 7,52 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью коло
- 135 047073 ночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 257с (283 мг, выход 77%) в виде белого твердого вещества. m/z=487 (М+1).
Соединение 258с: Соединение 257с (0,282 г, 0,58 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (6 мл, 18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 258с (0,25 г, выход 97%) в виде белого твердого вещества. m/z=443 (M+1).
Соединение 259с: Соединение 258с (0,22 г, 0,50 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,35 г, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 259с (0,229 г, выход 98%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=471 (M+1).
Соединение 260с: Смесь соединения 259с (0,229 г, 0,49 ммоль) в EtOH (15 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (75 мг, 1,08 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 260с (0,192 г, выход 84%) в виде белого твердого вещества. m/z=468 (М+1).
Соединение 261с: Смесь соединения 260с (0,192 г, 0,41 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,23 г, 1,67 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 261с (0,182 г, выход 95%) в виде желтого твердого вещества. m/z=468 (М+1).
Т158: Раствор соединения 261с (0,182 г, 0,39 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (60 мг, 0,21 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,40 мл, 4,95 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т158 (0,118 г, выход 65%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=466 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,59 (с, 1H), 7,67 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,47 (с, 1H), 7,34 (м, 2Н), 7,21 (дд, J=2,0, 8,4 Гц, 1H), 3,95 (с, 3H), 2,53 (м, 3H), 2,10 (м, 2Н), 1,80 (ддт, J=7,3, 10,2, 13,4 Гц, 1H), 1,48 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 257d: Смесь соединения 256 (0,225 г, 0,68 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали 3-(пиридин-4-ил)бензальдегидом (0,25 г, 1,36 ммоль) и ацетатом аммония (0,52 г, 6,75 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 257d (300 мг, выход 89%) в виде белого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 258d: Соединение 257d (0,30 г, 0,61 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл). Добавляли 3Н водн. HCl (9 мл, 27 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 258d (0,30 г, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 259d: Соединение 258d (0,30 г, < 0,61 ммоль) смешивали с этилформиатом (15 мл, 186 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,55 г, 3,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 259d (0,32 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=480 (М+1).
Соединение 260d: Смесь соединения 259d (0,32 г, < 0,61 ммоль) в EtOH (15 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,12 г, 1,72 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 260d (0,148 г, выход 51%) в виде желтого твердого вещества. m/z=477 (М+1).
Соединение 261d: Смесь соединения 260d (0,148 г, 0,31 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали кар
- 136 047073 бонатом калия (0,17 г, 1,23 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO.4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 261d (0,148 г, выход 100%) в виде желтого твердого вещества. m/z=477 (М+1).
Т159: Раствор соединения 261d (0,148 г, 0,31 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (44 мг, 0,15 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,40 мл, 4,95 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения Т159 (48 мг, выход 33%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=475 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,66 (м, 3H), 7,81 (м, 1H), 7,48 (м, 6Н), 7,35 (с, 1H), 3,94 (с, 3H), 2,55 (м, 3H), 2,11 (м, 2Н), 1,84 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 262: Смесь соединения 256 (0,25 г, 0,75 ммоль) в абсолютном EtOH (5 мл) последовательно обрабатывали формальдегидом (37 мас.% в воде, 0,122 г, 1,50 ммоль) и ацетатом аммония (0,58 г, 7,52 ммоль). Раствор перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали EtOAc. Объединенные фильтрат и промытый материал концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения 262 (200 мг, выход 78%) в виде вязкого масла. m/z=343 (M+1).
Соединение 263: Соединение 262 (200 мг, 0,58 ммоль) растворяли в ацетонитриле (18 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли раствор N-бромсукцинимида (0,108 г, 0,61 ммоль) в ацетонитриле (5 мл). Реакционную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения 263 (0,26 г, количественный выход) в виде рыжего твердого вещества. m/z=421/423 (M+1).
Соединение 264: Реакционный сосуд наполняли соединением 263 (0,26 г, < 0,58 ммоль) и диметоксиэтаном (20 мл). Добавляли (2-морфолинопиридин-4-ил)бороновую кислоту (0,16 г, 0,77 ммоль), карбонат калия (0,25 г, 1,81 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,15 г, 0,13 ммоль) и воду (5 мл). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при 90°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и солевым раствором. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в EtOAc) с получением соединения 264 (0,196 г, выход 67%) в виде желтого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Соединение 265: Соединение 264 (0,194 г, 0,38 ммоль) растворяли в ТГФ (8 мл).
Добавляли 3Н водн. HCl (5 мл, 15 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением насыщ. водн. NaHCO3 до рН 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 265 (0,179 г, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=461 (M+1).
Соединение 266: Соединение 265 (0,177 г, 0,38 ммоль) смешивали с этилформиатом (12 мл, 149 ммоль) и обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,28 г, 1,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 для доведения рН до 5. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 266 (0,185 г, выход 99%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 267: Смесь соединения 266 (0,185 г, 0,38 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,12 г, 1,73 ммоль). Смесь нагревали при 50°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 267 (0,140 г, выход 76%) в виде белого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 268: Смесь соединения 267 (0,138 г, 0,28 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,16 г, 1,16 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 268 (0,135 г, выход 98%) в виде желтого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
- 137 047073
Т160: Раствор соединения 268 (0,132 г, 0,27 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (39 мг, 0,14 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли безводный пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения Т160 (58 мг, выход 45%) в виде бежевого твердого вещества. m/z=484 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,62 (с, 1H), 8,06 (дд, J=0,8, 5,3 Гц, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,33 (с, 1H), 6,91 (с, 1H), 6,54 (дд, J=1,3, 5,4 Гц, 1H), 3,94 (с, 3H), 3,82 (м, 4Н), 3,50 (м, 4Н), 2,52 (м, 3H), 2,09 (м, 2Н), 1,82 (м, 1H), 1,48 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 269а: Смесь соединения 173 (100 мг, 0,396 ммоль) в толуоле (5 мл) нагревали до 45°С и добавляли циклопропиламин (45 мг, 0,79 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 45°С в течение 19 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269а (96 мг, выход 83%) в виде вязкого желтого масла. m/z=292 (M+1).
Соединение 270а: Смесь соединения 269а (93 мг, 0,319 ммоль) в EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали 4-изопропилбензальдегидом (95 мг, 0,641 ммоль) и ацетатом аммония (246 мг, 3,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270а (147 мг, количественный выход) в виде белого стекла. m/z=421 (M+1).
Соединение 271а: Раствор соединения 270а (143 мг, < 0,319 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,13 мл, 3,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271а (123 мг, количественный выход) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=377 (M+1).
Соединение 272а: Раствор соединения 271а (122 мг, < 0,319 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186 ммоль) при 0°С обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,60 мл, 3,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в EtOH (15 мл) и последовательно обрабатывали 6,0Н водн. HCl (0,54 мл, 3,24 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (34 мг, 0,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 18 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272а (118 мг, выход 92%) в виде стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=402 (M+1).
Соединение 273а: Раствор соединения 272а (117 мг, 0,291 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (81 мг, 0,59 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 13 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 3 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 273а (78 мг, выход 67%) в виде прозрачного стекла. m/z=402 (M+1).
Т161: Раствор 273а (77 мг, 0,19 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (30 мг, 0,10 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего обрабатывали безводным пиридином (0,15 мл, 1,86 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т161 (60 мг, выход 79%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=400 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,60 (с, 1H), 7,61 (м, 2Н), 7,28 (м, 2Н), 3,21 (тт, J=3,9, 7,0 Гц, 1H), 2,95 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,86 (ддд, J=1,2, 6,2, 16,5 Гц, 1H), 2,70 (м, 1H), 2,56 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,09 (м, 2Н), 1,82 (тдд, J=6,3, 12,8, 19,1 Гц, 1H), 1,43 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,28 (д, J=6,9 Гц, 6Н), 0,96 (м, 2Н), 0,68 (м, 1H), 0,58 (м, 1H).
Соединение 269b: Сосуд высокого давления наполняли соединением 173 (500 мг, 1,98 ммоль), изопропиламином (0,32 мл, 3,72 ммоль) и толуолом (10 мл). Сосуд герметично закрывали, а реакционную
- 138 047073 смесь нагревали при 100°С в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269b (464 мг, выход 80%) в виде желтого вязкого масла, которое затвердевало после отстаивания. m/z=294 (M+1).
Соединение 270b: Смесь соединения 269b (342 мг, 1,16 ммоль) в EtOH (30 мл) последовательно обрабатывали 4-изопропилбензальдегидом (345 мг, 2,33 ммоль) и ацетатом аммония (894 мг, 11,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 ч и нагревали при 60°С в течение 5 ч. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270b (142 мг, выход 29%) в виде светло-желтого стекла. m/z=423 (М+1).
Соединение 271b: Раствор соединения 270b (214 мг, 0,506 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,69 мл, 5,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271b (176 мг, 92%) в виде твердого вещества и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=379 (М+1).
Соединение 272b: Раствор соединения 271b (176 мг, 0,465 ммоль) в этилформиате (20 мл, 249 ммоль) при 0°С обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,86 мл, 4,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4.
Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в EtOH (20 мл) и последовательно обрабатывали 6,0 Н водн. HCl (0,78 мл, 4,68 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (48 мг, 0,69 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272b (192 мг, количественный выход) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=404 (M+1).
Соединение 273b: Раствор соединения 272b (191 мг, 0,473 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (131 мг, 0,946 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 5,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 273b (113 мг, выход 59%) в виде белого стекла. m/z=404 (M+1).
Т162: Раствор соединения 273b (112 мг, 0,277 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (43,6 мг, 0,153 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего обрабатывали безводным пиридином (0,22 мл, 2,72 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т162 (86 мг, выход 77%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=402 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (с, 1H), 7,39 (м, 2Н), 7,31 (м, 2Н), 4,57 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,94 (м, 2Н), 2,82 (ддд, J=6,4, 11,1, 15,9 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,12 (м, 2Н), 1,84 (ддт, J=6,2, 11,1, 13,1 Гц, 1H), 1,49 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,44 (с, 3H), 1,39 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,27 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269с: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 173 (0,36 г, 1,43 ммоль) и метиламина (40 мас.% в воде, 0,23 г, 2,96 ммоль) в бензоле (10 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в течение 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269с (0,29 г, выход 76%) в виде желтого масла. m/z=266 (M+1).
Соединение 270с: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 269с (0,29 г, 1,09 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,33 г, 2,23 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали ацетатом аммония (0,84 г, 10,90 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 60°C в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 270с (0,40 г, выход 93%) в виде светло-желтого воскообразного твердого вещества. m/z=395 (M+1).
- 139 047073
Соединение 271с: Раствор соединения 270с (0,40 г, 1,01 ммоль) и 3Н водн. HCl (3,4 мл, 10,2 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271с (0,33 г, выход 93%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=351 (M+1).
Соединение 272с: Раствор соединения 271с (0,33 г, 0,94 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,90 мл, 4,80 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272с (0,35 г, выход 98%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=379 (M+1).
Соединение 273с: Раствор соединения 272с (0,35 г, 0,92 ммоль) и уксусной кислоты (0,53 мл, 9,26 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (96 мг, 1,38 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273с (0,33 г, выход 95%) в виде желтого твердого вещества. m/z=376 (M+1).
Соединение 274с: Раствор соединения 273с (0,33 г, 0,88 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,61 г, 4,42 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274с (0,23 г, выход 70%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=376 (M+1).
Т163: В перемешиваемый раствор соединения 274с (0,23 г, 0,61 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (96 мг, 0,34 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали безводным пиридином (0,50 мл, 6,18 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали.
Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т163 (130 мг, выход 57%) в виде желто-оранжевого твердого вещества. m/z=374 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,62 (с, 1H), 7,50 (м, 2Н), 7,32 (м, 2Н), 3,55 (с, 3H), 2,96 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,65 (м, 3H), 2,12 (м, 2Н), 1,85 (м, 1H), 1,44 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,27 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269d: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 173 (0,35 г, 1,39 ммоль) и 2-метоксиэтиламина (0,21 г, 2,80 ммоль) в бензоле (10 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269d (0,30 г, выход 70%) в виде светло-желтого масла. m/z=310 (M+1).
Соединение 270d: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 269d (0,30 г, 0,97 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,29 г, 1,96 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали ацетатом аммония (0,75 г, 9,73 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 60°C в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270d (0,32 г, выход 75%) в виде светло-желтого воскообразного твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Соединение 271d: Раствор соединения 270d (0,32 г, 0,73 ммоль) и 3Н водн. HCl (2,4 мл, 7,2 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271d (0,27 г, выход 94%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=395 (M+1).
Соединение 272d: Раствор соединения 271d (0,27 г, 0,68 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,64 мл, 3,41 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272d (0,31 г, количест
- 140 047073 венный выход) в виде темного желто-коричневого масла. m/z=423 (M+1).
Соединение 273d: Раствор соединения 272d (0,31 г, < 0,68 ммоль) и уксусной кислоты (0,40 мл, 6,99 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (71 мг, 1,02 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273d (0,23 г, выход 80%) в виде желто-коричневого твердого вещества. m/z=420 (M+1).
Соединение 274d: Раствор соединения 273d (0,23 г, 0,55 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,38 г, 2,75 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274d (0,13 г, выход 57%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=420 (M+1).
Т164: В перемешиваемый раствор соединения 274d (0,13 г, 0,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (53 мг, 0,18 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,25 мл, 3,09 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т164 (100 мг, выход 77%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=418 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,62 (с, 1H), 7,49 (м, 2Н), 7,31 (м, 2Н), 4,11 (тд, J=5,8, 14,8 Гц, 1H), 3,98 (тд, J=5,8, 14,8 Гц, 1H), 3,53 (дт, J=2,5, 5,7 Гц, 2Н), 3,27 (с, 3H), 2,95 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,74 (м, 2Н), 2,57 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1H), 2,12 (м, 2Н), 1,83 (м, 1H), 1,44 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,27 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269е: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 173 (0,71 г, 2,81 ммоль) и 2-(бензилокси)-1-этанамина (0,85 г, 5,62 ммоль) в бензоле (20 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269е (0,91 г, выход 84%) в виде светло-желтого масла. m/z=386 (М+1).
Соединение 270е: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 269е (0,91 г, 2,36 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,70 г, 4,72 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали ацетатом аммония (1,82 г, 23,61 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 60°C в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 270е (1,10 г, выход 91%) в виде светло-желтого масла. m/z=515 (M+1).
Соединение 271е: Раствор соединения 270е (1,10 г, 2,14 ммоль) и 3Н водн. HCl (7,1 мл, 21,3 ммоль) в МеОН (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271е (0,93 г, выход 92%) в виде желто-коричневого масла. m/z=471 (M+1).
Соединение 272е: Раствор соединения 271е (0,34 г, 0,72 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,68 мл, 3,62 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272е (0,34 г, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=499 (M+1).
Соединение 273е: Раствор соединения 272е (0,34 г, 0,68 ммоль) и уксусной кислоты (0,40 мл, 6,99 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (71 мг, 1,02 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273е (0,32 г, выход 95%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 274е: Раствор соединения 273е (0,32 г, 0,64 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,45 г, 3,26 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и
- 141 047073
CHC13 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274е (0,21 г, выход 65%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Т165: В перемешиваемый раствор соединения 274е (0,21 г, 0,42 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (73 мг, 0,26 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,34 мл, 4,20 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т165 (120 мг, выход 57%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=494 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (с, 1H), 7,45 (м, 2Н), 7,28 (м, 5Н), 7,13 (м, 2Н), 4,41 (с, 2Н), 4,14 (тд, J=5,8, 14,8 Гц, 1H), 4,01 (тд, J=5,6, 14,7 Гц, 1H), 3,59 (м, 2Н), 2,94 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,72 (м, 1H), 2,59 (м, 2Н), 2,05 (м, 2Н), 1,78 (кд, J=6,5, 12,9 Гц, 1H), 1,44 (с, 3H), 1,29 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,26 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269f: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 173 (1,01 г, 4,00 ммоль) и бензиламина (0,86 г, 8,02 ммоль) в бензоле (20 мл) продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269f (1,10 г, выход 80%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=342 (M+1).
Соединение 270f: Раствор соединения 269f (1,10 г, 3,22 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,95 г, 6,41 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали ацетатом аммония (2,48 г, 32,17 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270f (1,54 г, количественный выход) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=471 (М+1).
Соединение 271f: Раствор соединения 270f (1,54 г, < 3,22 ммоль) и 3Н водн. HCl (5,5 мл, 16,5 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271f (1,23 г, выход 90%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=421 (М+1).
Соединение 272f: Раствор соединения 271f (0,50 г, 1,17 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 1,10 мл, 5,86 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272f (0,61 г, количественный выход) в виде желтого масла. m/z=455 (М+1).
Соединение 273f: Раствор соединения 272f (0,61 г, < 1,17 ммоль) и уксусной кислоты (0,70 мл, 12,23 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,13 г, 1,87 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273f (0,51 г, выход 96%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 274f: Раствор соединения 273f (0,51 г, 1,13 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,78 г, 5,64 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 274f (0,53 г, количественный выход) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Т166: В перемешиваемый раствор соединения 274f (0,15 г, 0,33 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (57 мг, 0,20 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,27 мл, 3.33 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с
- 142 047073 получением соединения Т166 (69 мг, выход 46%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=450 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,67 (с, 1H), 7,43 (м, 2Н), 7,34 (м, 3H), 7,24 (м, 2Н), 6,99 (м, 2Н), 5,19 (д, J=16,9 Гц, 1H), 5,07 (д, J=16,8 Гц, 1H), 2,91 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,52 (м, 2Н), 2,38 (ддд, J=6,6, 11,0, 16,2 Гц, 1H), 2,07 (м, 2Н), 1,77 (ддт, J=6,5, 11,0, 12,9 Гц, 1H), 1,47 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269g: Раствор соединения 173 (0,31 г, 1,23 ммоль) и 4-фторбензиламина (0,31 г, 2,48 ммоль) в бензоле (10 мл) дефлегмировали в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269g (0,36 г, выход 82%) в виде вязкого желтого масла. m/z=360 (М+1).
Соединение 270g: Раствор соединения 269g (0,36 г, 1,00 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,30 г, 2,02 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали ацетатом аммония (0,78 г, 10,12 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270g (0,45 г, выход 92%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 271g: Раствор соединения 270g (0,45 г, 0,92 ммоль) и 3Н водн. HCl (3,1 мл, 9,3 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271g (0,37 г, выход 90%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=445 (M+1).
Соединение 272g: Раствор соединения 271g (0,37 г, 0,83 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,80 мл, 4,26 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272g (0,37 г, выход 94%) в виде желтого твердого вещества. m/z=473 (M+1).
Соединение 273g: Раствор соединения 272g (0,37 г, 0,78 ммоль) и уксусной кислоты (0,45 мл, 7,86 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (81 мг, 1,16 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273g (0,35 г, выход 95%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=470 (М+1).
Соединение 274g: Смесь соединения 273g (0,35 г, 0,74 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,52 г, 3,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274g (0,27 г, выход 77%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Т167: В перемешиваемый раствор соединения 274g (0,27 г, 0,57 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (90 мг, 0,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,46 мл, 5,69 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т167 (0,14 г, выход 52%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=468 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,65 (с, 1H), 7,41 (м, 2Н), 7,26 (м, 2Н), 7,04 (м, 2Н), 6,96 (м, 2Н), 5,16 (д, J=16,7 Гц, 1H), 5,04 (д, J=16,6 Гц, 1H), 2,92 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,52 (м, 2Н), 2,38 (ддд, J=6,6, 11,0, 16,2 Гц, 1H), 2,07 (м, 2Н), 1,78 (тдд, 7=6,3, 12,9, 19,2 Гц, 1Н), 1,46 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269h: Раствор соединения 173 (0,3 0 г, 1,19 ммоль) и 2-фторбензиламина (0,30 г, 2,40 ммоль) в бензоле (10 мл) дефлегмировали в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25%
- 143 047073
EtOAc в гексанах) с получением соединения 269h (0,31 г, выход 72%) в виде желтого твердого вещества. m/z=360 (М+1).
Соединение 270h: Раствор соединения 269h (0,31 г, 0,86 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,26 г, 1,75 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали ацетатом аммония (0,67 г, 8,69 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270h (0,42 г, выход 100%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 271h: Раствор соединения 270h (0,42 г, 0,86 ммоль) и 3Н водн. HCl (2,9 мл, 8,7 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271h (0,36 г, выход 94%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=445 (М+1).
Соединение 272h: Раствор соединения 271h (0,36 г, 0,81 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,76 мл, 4,05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272h (0,37 г, выход 97%) в виде желтого твердого вещества. m/z=473 (М+1).
Соединение 273h: Раствор соединения 272h (0,37 г, 0,78 ммоль) и уксусной кислоты (0,45 мл, 7,86 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (81 мг, 1,16 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273h (0,35 г, выход 95%) в виде желтого твердого вещества. m/z=470 (М+1).
Соединение 274h: Раствор соединения 273h (0,35 г, 0,74 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,51 г, 3,69 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274h (0,22 г, выход 63%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Т168: В перемешиваемый раствор соединения 274h (0,22 г, 0,47 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (74 мг, 0,26 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,38 мл, 4,70 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т168 (85 мг, выход 39%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=468 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,66 (с, 1H), 7,41 (м, 2Н), 7,29 (м, 1H), 7,25 (м, 2Н), 7,10 (м, 2Н), 6,71 (дт, J=1,7, 7,8 Гц, 1H), 5,20 (д, J=17,3 Гц, 1H), 5,14 (д, J=17,3 Гц, 1H), 2,92 (гепт, J=6,9 Гц, 1H), 2,54 (м, 2Н), 2,39 (ддд, J=6,7, 11,0, 16,8 Гц, 1H), 2,08 (м, 2Н), 1,79 (м, 1H), 1,47 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269i: Раствор соединения 173 (0,30 г, 1,19 ммоль) и 4-хлорбензиламина (0,34 г, 2,40 ммоль) в бензоле (10 мл) дефлегмировали в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 269i (0,36 г, выход 80%) в виде желтого масла. m/z=376 (M+1).
Соединение 270i: Раствор соединения 269i (0,36 г, 0,96 ммоль) и 4-изопропилбензальдегида (0,28 г, 1,89 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали ацетатом аммония (0,74 г, 9,60 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 270i (0,43 г, выход 89%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=505 (M+1).
Соединение 271i: Раствор соединения 270i (0,43 г, 0,85 ммоль) и 3Н водн. HCl (2,9 мл, 8,7 ммоль) в
- 144 047073
МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271i (0,36 г, выход 92%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=461 (M+1).
Соединение 272i: Раствор соединения 271i (0,36 г, 0,78 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,73 мл, 3,89 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272i (0,37 г, выход 97%) в виде желтого твердого вещества. m/z=489 (M+1).
Соединение 273i: Раствор соединения 272i (0,37 г, 0,76 ммоль) и уксусной кислоты (0,45 мл, 7,86 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (80 мг, 1,16 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273i (0,37 г, количественный выход) в виде желтого твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Соединение 274i: Раствор соединения 273i (0,37 г, 0,76 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,53 г, 3,84 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 274i (0,26 г, выход 70%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=486 (М+1).
Т169: В перемешиваемый раствор соединения 274i (0,26 г, 0,53 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (84 мг, 0,29 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,43 мл, 5.32 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т169 (0,12 г, выход 46%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=484 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,65 (с, 1H), 7,40 (м, 2Н), 7,33 (м, 2Н), 7,25 (м, 2Н), 6,93 (м, 2Н), 5,16 (д, J=16,9 Гц, 1H), 5,03 (д, J=16,9 Гц, 1H), 2,92 (гепт, J=6,7 Гц, 1H), 2,52 (м, 2Н), 2,37 (ддд, J=6,6, 10,9, 16,5 Гц, 1H), 2,07 (м, 2Н), 1,77 (м, 1H), 1,46 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269j: Смесь соединения 173 (225 мг, 0,892 ммоль), 2-(аминометил)пиридина (0,18 мл, 1,75 ммоль) и каталитического количества п-толуолсульфоновой кислоты моногидрата в безводном толуол (3 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 150°C в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 269j (222 мг, выход 73%) в виде желтого вязкого масла. m/z=343 (M+1).
Соединение 270j: Раствор соединения 269j (221 мг, 0,645 ммоль) в EtOH (10 мл) последовательно обрабатывали 4-изопропилбензальдегидом (191 мг, 1,29 ммоль) и ацетатом аммония (497 мг, 6,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 270j (273 мг, выход 90%) в виде желтого стекла. m/z=472 (M+1).
Соединение 271j: Раствор соединения 270j (321 мг, 0,681 ммоль) в ТГФ (30 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (2,27 мл, 6,81 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271j (310 мг, количественный выход) в виде желтого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=428 (M+1).
Соединение 273j: Раствор соединения 271j (309 мг, < 0,681 ммоль) в этилформиате (30 мл, 373 ммоль) при 0°С обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 1,33 мл, 7,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272j. Соединение 272j растворяли в EtOH (30 мл) и обрабатывали 6,0Н водн. HCl (1,20 мл, 7,20 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (75 мг, 1,08 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего концен
- 145 047073 трировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 273j (374 мг, количественный выход) в виде коричневого вязкого масла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=453 (М+1).
Соединение 274j: Раствор соединения 273j (373 мг, 0,824 ммоль) в МеОН (30 мл) обрабатывали карбонатом калия (228 мг, 1,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 274j (200 мг, выход 54%) в виде светло-желтого стекла. m/z=453 (M+1).
Т170: Раствор 274j (200 мг, 0,441 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (65 мг, 0,23 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего обрабатывали безводным пиридином (0,36 мл, 4,45 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с последующим вторым этапом колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-2% МеОН в CH2Cl2) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью препаративной ТСХ (силикагель, элюирование 5% МеОН в CH2Cl2) с получением соединения Т170 (26 мг, выход 13%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=451 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,66 (с, 1H), 8,60 (ддд, J=0,9, 1,8, 4,9 Гц, 1H), 7,68 (дт, J=1,8, 7,7 Гц, 1H), 7,44 (м, 2Н), 7,25 (м, 3H), 6,80 (шир. д, J=7,9 Гц, 1H), 5,29 (д, J=17,3 Гц, 1H), 5,17 (д, J=17,2 Гц, 1H), 2,91 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,55 (м, 2Н), 2,40 (м, 1H), 2,08 (м, 2Н), 1,79 (м, 1H), 1,47 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,23 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 269k: Смесь соединения 173 (225 мг, 0,892 ммоль), 4-(аминометил)пиридина (0,18 мл, 1,75 ммоль) и каталитического количества п-толуолсульфоновой кислоты моногидрата в безводном толуол (3 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage при 150°C в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 269k (311 мг, количественный выход) в виде желтого вязкого масла. m/z=343 (M+1).
Соединение 270k: Раствор соединения 269k (311 мг, < 0,892 ммоль) в EtOH (15 мл) последовательно обрабатывали 4-изопропилбензальдегидом (269 мг, 1,82 ммоль) и ацетатом аммония (700 мг, 9,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 22 ч. Смесь концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в EtOAc) с получением соединения 270k (171 мг, выход 41%) в виде прозрачного стекла. m/z=472 (M+1).
Соединение 271k: Раствор соединения 270k (221 мг, 0,468 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0Н водн. HCl (1,56 мл, 4,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 271k (215 мг, количественный выход) в виде желтого стекла и использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=428 (M+1).
Соединение 273k: Раствор соединения 271k (215 мг, < 0,468 ммоль) в этилформиате (25 мл, 311 ммоль) при 0°С обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М в МеОН, 0,93 мл, 5,02 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 272k. Соединение 272k растворяли в EtOH (20 мл) и последовательно обрабатывали 6,0Н водн. HCl (1,19 мл, 7,14 ммоль) и гидроксиламина гидрохлоридом (52 мг, 0,75 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 22 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 273k (142 мг, выход 67%) в виде желтого стекла. m/z=453 (M+1).
Соединение 274k: Раствор соединения 273k (141 мг, 0,311 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (86 мг, 0,623 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 6 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 274k (102 мг, выход 72%) в виде желто
- 146 047073 го стекла. m/z=453 (M+1).
Т171: Раствор 274k (101 мг, 0,223 ммоль) в безводном ДМФ (3 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (35 мг, 0,122 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, после чего обрабатывали безводным пиридином (0,18 мл, 2,23 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. KH2PO4. Органический слой отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CH2Cl2) с получением соединения Т171 (57 мг, выход 57%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=451 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,65 (с, 1H), 8,61 (м, 2Н), 7,36 (м, 2Н), 7,25 (м, 2Н), 6,93 (м, 2Н), 5,17 (д, 1H, J=17,5 Гц), 5,07 (д, 1H, J=17,5 Гц), 2,91 (м, 1H), 2,57 (дк, J=13,5, 6,8 Гц, 1H), 2,44 (м, 2Н), 2,08 (м, 2Н), 1,81 (м, 1H), 1,48 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,23 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 275: Смесь соединения 271е (0,59 г, 1,25 ммоль) и 10% Pd/C (0,5 г) в EtOH (25 мл) гидрогенизировали (баллонное давление) при комнатной температуре в течение 3 суток. Смесь фильтровали, а фильтрат концентрировали с получением соединения 275 (0,38 г, выход 80%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=381 (М+1).
Соединение 276: Раствор соединения 275 (0,38 г, 1,00 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,94 мл, 5,01 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 276 (0,37 г, выход 90%) в виде темно-желтого твердого вещества. m/z=409 (M+1).
Соединение 277: Раствор соединения 276 (0,37 г, 0,91 ммоль) и уксусной кислоты (0,52 мл, 9,08 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (94 мг, 1,35 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 277 (0,34 г, выход 93%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=406 (M+1).
Соединение 278: Раствор соединения 277 (0,34 г, 0,83 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,54 г, 3,91 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения 278 (0,16 г, выход 47%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=406 (M+1).
Т172: В перемешиваемый раствор соединения 278 (0,16 г, 0,39 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (68 мг, 0,24 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,32 мл, 3,96 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т172 (85 мг, выход 53%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=404 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (с, 1H), 7,49 (м, 2Н), 7,31 (м, 2Н), 4,13 (тд, J=5,9, 14,7 Гц, 1H), 3,99 (тд, J=5,7, 14,6 Гц, 1H), 3,79 (м, 2Н), 2,95 (гепт, J=7,0 Гц, 1H), 2,74 (м, 2Н), 2,57 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1H), 2,12 (м, 2Н), 1,84 (кд, J=6,3, 17,3 Гц, 1H), 1,44 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,27 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 279: Раствор соединения 270f (0,22 г, 0,47 ммоль) в EtOAc (20 мл) обрабатывали 10% Pd/C (0,20 г). Смесь гидрогенизировали (баллонное давление) при комнатной температуре в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением соединения 279 (0,18 г, количественный выход) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=381 (М+1).
Соединение 280: Раствор соединения 279 (0,44 г, 1,16 ммоль) и 3Н водн. HCl (3,9 мл, 11,7 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между 10% водн. NH4OH (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 280 (0,39 г, выход 100%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=337 (M+1).
Соединение 281: Раствор соединения 280 (0,43 г, 1,28 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 моль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 1,20 мл, 6,46 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25
- 147 047073 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 281 (0,36 г, выход 77%) в виде желтого твердого вещества. m/z=365 (M+1).
Соединение 282: Раствор соединения 281 (0,36 г, 0,99 ммоль) и уксусной кислоты (0,57 мл, 9,96 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидроксиламина гидрохлоридом (0,14 г, 2,01 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 282 (0,31 г, выход 86%) в виде желтого твердого вещества. m/z=362 (M+1).
Соединение 283: Раствор соединения 282 (0,31 г, 0,86 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,60 г, 4,34 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 283 (0,19 г, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=362 (M+1).
Т173: В перемешиваемый раствор соединения 283 (0,19 г, 0,52 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (83 мг, 0,29 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,42 мл, 5,19 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2,5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т173 (79 мг, выход 42%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=360 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,92 (шир. с, 1H), 8,63 (с, 1H), 7,68 (м, 2Н), 7,28 (м, 2Н), 2,93 (м, 1H), 2,76 (м, 2Н), 2,57 (дк, J=13,5, 6,8 Гц, 1H), 2,12 (м, 2Н), 1,85 (м, 1H), 1,45 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,26 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Т174: Смесь соединения Т173 (48 мг, 0,13 ммоль) и ацетата натрия (55 мг, 0,67 ммоль) в уксусном ангидриде (2 мл, 21,16 ммоль) перемешивали при 100°C в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т174 (26 мг, выход 48%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=402 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,54 (с, 1H), 7,43 (м, 2Н), 7,34 (м, 2Н), 3,01 (м, 2Н), 2,84 (ддд, J=6,7, 11,1, 17,9 Гц, 1H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,11 (с, 3H), 2,10 (м, 2Н), 1,80 (м, 1H), 1,45 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,28 (д, J=6,9 Гц, 6Н).
Соединение 285: Смесь соединения 284 (3,0 г, 17,12 ммоль), Вос-гидразида (2,26 г, 17,10 ммоль) и ледяной уксусной кислоты (1,95 мл, 34,06 ммоль) в МеОН (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли цианоборогидрид натрия (2,15 г, 34,21 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 21ч реакционную смесь разводили водой (250 мл) и экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 285 (4,94 г, выход 99%) в виде прозрачного вязкого масла, которое затвердевало после отстаивания. m/z=292 (M+1).
Соединение 286: Смесь соединения 285 (4,94 г, 16,95 ммоль) в растворе хлорида водорода (5~6 Н в изопропаноле, 100 мл) перемешивали при 45°С в течение 20 ч. После охлаждения осажденное белое твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали EtOAc, и сушили в вакууме при 40°C с получением соединения 286 (3,58 г, выход 80%). m/z=192 (M+1).
Соединения 287а и 287b: Раствор соединения 101 (114 мг, 0,333 ммоль) и 286 (152 мг, 0,667 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 110°С в течение 43 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединений 287а и 287b (~1/1 смесь, 96 мг, выход 58%). m/z=497 (M+1).
Соединения 288а и 288b: Раствор 287а и 287b (93 мг, 0,187 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали карбонатом калия (52 мг, 0,377 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч, после чего нагревали при 50°С в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме, а остаток разделяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединений 288а и 288b (83 мг, выход 89%) в виде желтого стекла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. m/z=497 (М+1).
Т175 (смесь соединения 289а и 289b): Раствор соединения 288а и 288b (83 мг, 0,167 ммоль) в толуоле (10 мл) в атмосфере азота обрабатывали ДДХ (49 мг, 0,217 ммоль). Реакционную смесь перемешивали
- 148 047073 при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего концентрировали. Остаток разводили EtOAc и промывали насыщ. водн. NaHCO3 и солевым раствором. Органические экстракты сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали.
Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т175 (смесь соединений 289а и 289b, 19 мг, выход 23%) в виде оранжевого твердого вещества. 289a/289b: m/z=495 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) Смесь региоизомеров в соотношении 3/1. Основной изомер: δ 8,15 (с, 1H), 7,57 (дт, J=1,9, 7,6 Гц, 1H), 7,26 (м, 3H), 7,11 (ддд, J=1,2, 8,2, 10,6 Гц, 1H), 6,89 (м, 4Н), 4,19 (тдд, J=4,1, 7,4, 11,4 Гц, 1H), 3,89 (м, 2Н), 3,77 (шир. д, J=12,9 Гц, 1H), 2,94 (м, 2Н), 2,63 (м, 5Н), 2,29 (дт, J=1,9, 12,5 Гц, 1H), 2,16 (м, 1H), 2,00 (м, 1H), 1,60 (м, 1H), 1,56 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 290: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 44 (0,22 г, 0,46 ммоль), 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазина (0,10 г, 0,45 ммоль) и карбоната калия (0,19 г, 1,37 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (34 мг, 0,046 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 290 (0,21 г, выход 93%) в виде светло-коричневого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Т176: В перемешиваемый раствор соединения 290 (0,21 г, 0,43 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (61 мг, 0,21 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,35 мл, 4,33 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т176 (0,12 г, выход 57%) в виде рыжего твердого вещества. m/z=488 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,38 (д, J=2,3 Гц, 1H), 9,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,72 (д, J=5,3 Гц, 1H), 7,92 (м, 3H), 7,70 (м, 2Н), 7,60 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,54 (с, 1H), 3,42 (дд, J=5,6, 17,3 Гц, 1H), 3,00 (ддд, J=6,9, 11,7, 18,1 Гц, 1H), 2,85 (с, 3H), 2,56 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,9, 13,8 Гц, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 291: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 154 (0,21 г, 0,44 ммоль), 3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридазина (0,14 г, 0,64 ммоль) и карбоната калия (0,18 г, 1,30 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (31 мг, 0,042 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в CHCl3) с получением соединения 291 (0,13 г, выход 59%) в виде коричневого твердого вещества. m/z=506 (M+1).
Т177: В перемешиваемый раствор соединения 291 (0,13 г, 0,26 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (37 мг, 0,13 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего обрабатывали пиридином (0,21 мл, 2,60 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т177 (78 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=504 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,38 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,89 (м, 2Н), 7,70 (м, 4Н), 7,59 (м, 2Н), 7,12 (м, 2Н), 2,93 (м, 2Н), 2,85 (с, 3H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,4, 13,9 Гц, 1H), 1,84 (ддд, J=6,1, 12,2, 18,8 Гц, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 292: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 154 (0,85 г, 1,73 ммоль), бис(пинаколато)дибора (0,66 г, 2,60 ммоль) и ацетата калия (0,51 г, 5,20 ммоль) в 1,4-диоксане (17 мл). Добавляли 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(П) хлорид (0,13 г, 0,18 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и фильтровали. Фильтрат промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и насыщ. водн. NaCl (50 мл). Органический экстракт сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного соединения 292 (0,98 г, количественный выход) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=540 (M+1).
- 149 047073
Соединение 293а: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 292 (0,30 г, 0,56 ммоль), 3-бромпиридазина (0,11 г, 0,69 ммоль) и K3PO4 (0,35 г, 1,65 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (65 мг, 0,056 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в CHCl3) с получением соединения 293а (0,13 г, выход 48%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=492 (M+1).
Т178: В перемешиваемый раствор соединения 293а (0,13 г, 0,26 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (38 мг, 0,13 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,21 мл, 2,60 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3). Полученный примесный продукт растирали с Et2O. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением Т178 (41 мг, выход 32%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=490 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,25 (дд, J=1,6, 4,9 Гц, 1H), 8,36 (м, 2Н), 7,99 (дд, J=1,6, 8,6 Гц, 1H), 7,70 (м, 4Н), 7,64 (дд, J=4,9, 8,6 Гц, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,11 (м, 2Н), 2,91 (м, 2Н), 2,56 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,8 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,3, 13,9 Гц, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,63 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 293b: В герметично закрываемой колбе дегазировали смесь соединения 292 (0,28 г, 0,52 ммоль), 3-хлор-5-метилпиридазина (83 мг, 0,64 ммоль) и K3PO4 (0,33 г, 1,55 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДМФ (1 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (60 мг, 0,052 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали. Смесь нагревали при 90°C в течение 2 суток. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 293b (0,12 г, выход 46%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=506 (M+1).
Т179: В перемешиваемый раствор соединения 293b (0,12 г, 0,24 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (34 мг, 0,12 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,19 мл, 2,35 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта. Полученный продукт растирали с Et2O. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением Т179 (51 мг, выход 43%) в виде грязнобелого твердого вещества. m/z=504 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,34 (м, 2Н), 7,79 (м, 1H), 7,69 (м, 4Н), 7,61 (с, 1H), 7,12 (м, 2Н), 2,95 (ддд, J=1,6, 6,4, 16,0 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,27 (дт, J=2,0, 12,8 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,83 (тдд, J=6,3, 12,7, 19,1 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 295: В перемешиваемый раствор соединения 294 (1,00 г, 2,35 ммоль) в CH2Cl2 (25 мл) при -10°C в атмосфере N2 по каплям добавляли диизобутилалюминия гидрид (1,2 М в толуоле, 4,9 мл, 5,9 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч реакционную смесь гасили, по каплям добавляя насыщ. водн. тартрат калия-натрия (25 мл). После перемешивания еще в течение 1 ч холодную смесь обрабатывали насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл). Холодную баню убирали и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Органический слой отделяли, промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 295 (0,99 г, количественный выход) в виде светло-желтой жидкости.
Соединение 296: В перемешиваемый раствор соединения 295 (0,99 г, < 2,35 ммоль) в МеОН (25 мл) при 0°C в атмосфере N2 одной частью добавляли борогидрид натрия (89 мг, 2,35 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 296 (0,99 г, количественный выход) в виде желтой жидкости. m/z=400 (M+1).
Соединение 297: Раствор соединения 296 (0,99 г, < 2,35 ммоль) и триэтиламина (0,41 мл, 2,94 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) при 0°C в атмосфере N2 обрабатывали метансульфонилхлоридом (0,33 г, 2,88 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, а после этого гасили насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл).
- 150 047073
Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Органический слой отделяли, промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 297 (1,03 г, выход 92%) в виде красно-желтой жидкости. m/z=478 (М+1).
Соединение 298: Раствор соединения 297 (1,03 г, 2,16 ммоль) в CH3CN (20 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2 по каплям обрабатывали добавлением тетрабутиламмония фторида (1,0 М раствор в ТГФ, 2,7 мл, 2,7 ммоль). После завершения добавления смесь нагревали при 60°C в течение 16 ч, после чего охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 298 (0,20 г, выход 23%) в виде светло-желтой жидкости. m/z=402 (M+1).
Соединение 299: В герметично закрываемой колбе дегазировали раствор соединения 146 (0,22 г, 0,46 ммоль) и соединения 298 (0,23 г, 0,57 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (53 мг, 0,046 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 120°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc) с получением соединения 299 (55 мг, выход 24%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=506 (M+1).
Т180: В перемешиваемый раствор соединения 299 (55 мг, 0,11 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (16 мг, 0,056 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,10 мл, 1,24 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т180 (22 мг, выход 40%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=504 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,97 (шир. с, 1H), 8,71 (д, J=5,1 Гц, 1H), 8,60 (д, J=4,7 Гц, 1H), 8,07 (тд, J=2,0, 8,0 Гц, 1H), 7,91 (м, 2Н), 7,77 (шир. с, 1H), 7,66 (м, 2Н), 7,61 (с, 1H), 7,54 (м, 1H), 7,36 (дд, J=4,8, 8,0 Гц, 1H), 5,60 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 3,00 (дд, J=5,9, 16,2 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,58 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,30 (м, 1H), 2,20 (дд, J=6,3, 13,9 Гц, 1H), 1,85 (тдд, J=6,3, 12,7, 19,0 Гц, 1H), 1,64 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 300: В герметично закрываемой колбе дегазировали раствор соединения 154 (0,24 г, 0,49 ммоль) и соединения 298 (0,20 г, 0,50 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (56 мг, 0,048 ммоль). Смесь снова дегазировали. Колбу герметично закрывали и нагревали при 120°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 300 (71 мг, выход 28%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=523 (M+1).
Т181: В перемешиваемый раствор соединения 300 (71 мг, 0,14 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (20 мг, 0,070 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,11 мл, 1,36 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3) с получением соединения Т181 (24 мг, выход 34%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=521 (M+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,70 (д, J=5,1 Гц, 1H), 7,89 (м, 2Н), 7,76 (м, 1H), 7,71 (м, 2Н), 7,65 (м, 3H), 7,54 (м, 1H), 7,12 (м, 2Н), 5,60 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 2,95 (дд, J=6,1, 15,9 Гц, 1H), 2,87 (м, 1H), 2,57 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,0, 12,7 Гц, 1Н), 2,17 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,83 (ддд, J=6,4, 12,6, 19,2 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 301: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 156а (0,25 г, 0,57 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали гидроксиламином (50 мас.% водн. раствор, 0,24 г, 3,63 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 80°C в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали и сушили в вакууме с получением соединения 301 (0,24 г, выход 89%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=472 (М+1).
- 151 047073
Соединение 302: Суспензию соединения 301 (0,24 г, 0,51 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали Ν,Ν-диметилацетамида диметилацеталем (90%; 0,23 г, 1,55 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 302 (0,20 г, выход 79%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 303: Смесь соединения 302 (0,20 г, 0,40 ммоль) и K2CO3 (0,28 г, 2,02 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 303 (0,14 г, выход 70%) в виде белого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Т182: В перемешиваемый раствор соединения 303 (0,14 г, 0,28 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (40 мг, 0,14 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,23 мл, 2,84 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения Т182 (96 мг, выход 69%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=494 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,32 (м, 2Н), 7,70 (м, 2Н), 7,64 (м, 2Н), 7,55 (с, 1H), 7,11 (м, 2Н), 2,95 (ддд, J=1,2, 6,0, 15,6 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,71 (с, 3H), 2,56 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,26 (дт, J=2,0, 12,6 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=6,4, 13,8 Гц, 1H), 1,82 (ддд, J=6,4, 12,6, 19,0 Гц, 1H), 1,61 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 304: Смесь соединения 301 (0,14 г, 0,30 ммоль) и K2CO3 (0,21 г, 1,52 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток обрабатывали насыщ. раствором KH2PO4 (25 мл). Осажденное твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой и сушили в вакууме с получением соединения 304 (0,12 г, выход 86%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=472 (М+1).
Соединение 305: В перемешиваемый раствор соединения 304 (0,12 г, 0,25 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (36 мг, 0,13 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,20 мл, 2,47 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах) с получением соединения 305 (64 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Т183: Раствор соединения 305 (64 мг, 0,14 ммоль) в триметилортоформиате (3 мл, 27,42 ммоль) нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали, а остаток разделяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали с получение светло-желтого твердого вещества. Неочищенный продукт растирали с Et2O. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения Т183 (31 мг, выход 46%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=480 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,84 (с, 1H), 8,38 (м, 2Н), 7,68 (м, 4Н), 7,56 (с, 1H), 7,11 (м, 2Н), 2,95 (ддд, J=1,6, 6,4, 16,2 Гц, 1H), 2,86 (м, 1H), 2,56 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,27 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,17 (дд, J=6,5, 13,8 Гц, 1H), 1,82 (тдд, J=6,3, 12,6, 19,0 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 306: В герметично закрываемой колбе раствор соединения 156b (0,25 г, 0,59 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали гидроксиламином (50 мас.% водн. раствор, 0,12 г, 1,82 ммоль). Смесь продували N2. Колбу герметично закрывали и нагревали при 50°C в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали и сушили в вакууме с получением соединения 306 (0,28 г, количественный выход) в виде желтого клейкого твердого вещества. m/z=455 (M+1).
Соединение 307: Суспензию соединения 306 (0,28 г, < 0,59 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали N.N-диметилацетамида диметилацеталем (90%; 0,26 г, 1,76 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 307 (0,28 г, выход 99%) в виде оранжевого твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Соединение 308: Смесь соединения 307 (0,28 г, 0,58 ммоль) и K2CO3 (0,41 г, 2,97 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением соединения 308 (0,18 г, выход 64%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=479 (M+1).
- 152 047073
Т184: В перемешиваемый раствор соединения 308 (0,18 г, 0,37 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) при 0°C в атмосфере N2 по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (54 мг, 0,19 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, после чего добавляли пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток разделяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (25 мл), сушили MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3) с получением частично очищенного продукта. Продукт растирали с Et2O. Твердое вещество собирали путем фильтрации и сушили в вакууме с получением соединения Т184 (77 мг, выход 43%) в виде грязнобелого твердого вещества. m/z=477 (М+1); 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1H), 8,59 (с, 1H), 8,33 (м, 2Н), 8,07 (тд, J=1,8, 7,9 Гц, 1H), 7,64 (м, 2Н), 7,54 (с, 1H), 7,35 (дд, J=4,8, 8,0 Гц, 1H), 2,99 (ддд, J=1,4, 6,3, 15,9 Гц, 1H), 2,91 (м, 1H), 2,71 (с, 3H), 2,56 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 2,28 (дт, J=2,1, 12,7 Гц, 1H), 2,18 (дд, J=6,4, 13,9 Гц, 1H), 1,84 (тдд, J=6,4, 12,7 Гц, 18,9 Гц, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Пример 2. Биологические данные
А. Анализ репортерного гена люциферазы AREc32
Анализ репортерного гена люциферазы AREc32 позволяет количественно оценить эндогенную активность транскрипционного фактора Nrf2 в культивируемых клетках млекопитающих. Клетки AREc32 получены из клеток карциномы молочной железы человека MCF-7, которые были стабильно трансфицированы репортерной конструкцией, содержащей ген люциферазы светляков, расположенный ниже восьми копий последовательности элемента антиоксидантного ответа (ARE) крысиного GSTA2 (Wang et al., 2006; Concept Life Sciences Integrated Discovery and Development Services Ltd (CLSIDDS)). Активный Nrf2 связывается с последовательностями ARE и повышает экспрессию гена люциферазы светляков. Для оценки №12-активирующего потенциала исследуемых соединений клетки AREc32 высевали в черные 96луночные планшеты с плотностью 20000 клеток на лунку в трех повторностях в ДМЭМ+10% ФБС+0,8 мг/мл генетицина и инкубировали при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере. На следующий день клетки обрабатывали ДМСО (носитель) или исследуемым соединением (диапазоны концентраций 0,4200 нМ или 3,9-2000 нМ) в течение 19 ч. Активность люциферазы определяли, используя анализ люциферазы ONE-Glo (Promega). Сигнал люминесценции измеряли на считывающем устройстве для микропланшетов BMG Pherastar. Среднее значение люминесценции в лунках, обработанных исследуемым соединением, нормализовали относительно значений в лунках, обработанных ДМСО, и представляли в виде кратности увеличения индукции. Данные анализировали, используя GraphPad Prism версии 6.00 для Windows, GraphPad Software, La Jolla California USA. Для аппроксимации данных использовали нелинейную регрессионную кривую взаимозависимости log (агониста) и ответа с переменным наклоном. В случаях, когда это было применимо, было установлено максимальное пороговое значение, соответствующее 50-кратному повышению по сравнению с ДМСО. Значения ЕС2х интерполировали по кривой. ЕС2х соответствует концентрации исследуемого соединения, необходимой для 2-кратного повышения активности люциферазного репортера GST ARE.
B. Анализ RORy и жизнеспособность клеток
Аналитическая система RORy была приобретена у Indigo Biosciences. В данном анализе ядерных рецепторов используется линия клеток человека, сконструированная для экспрессии высоких уровней гибридной формы ассоциированного с RAR орфанного рецептора гамма (RORy) человека. N-концевой ДНК-связывающий домен (DBD) нативного рецептора RORy был заменен дрожжевым GAL4-DBD для получения гибридного ядерного рецептора GAL4-RORy. Репортерную клеточную линию трансфицируют плазмидой, которая кодирует ген люциферазы жука, под управлением вышерасположенной активирующей последовательности GAL4 (UAS). GAL4 связывается с UAS и повышает транскрипцию нижерасположенных целевых генов. Гибрид GAL4-RORy является конститутивно активным; следовательно, основное применение этой репортерной аналитической системы заключается в скрининге исследуемых соединений для количественной оценки обратной агонистической активности против RORy человека. Поскольку лиганд-связывающий домен (LBD) RORy идентичен LBD ROR'/L этот анализ является точным заменителем для оценки активности экспериментальных лигандов против RORYt. Для оценки обратной агонистической активности исследуемых соединений в отношении RORy репортерные клетки высевали в белые 96-луночные планшеты в трех повторностях и обрабатывали ДМСО (носитель) или исследуемым соединением (диапазоны концентраций 7,8-2000 нМ) при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере в течение 23 ч. После инкубации в лунки добавляли люциферин и определяли активность люциферазы путем измерения сигнала люминесценции, используя устройство для считывания микропланшетов BMG Pherastar. Жизнеспособность определяли, используя мультиплексный анализ живых клеток (Indigo Biosciences). Значения для образцов исследуемых соединений нормализовали относительно значений образцов, обработанных ДМСО. Данные анализировали, используя GraphPad Prism версии 6.00 для Windows (GraphPad Software, La Jolla California USA). Нелинейный регрессионный анализ с взаимозависимостью log (ингибитор) и нормализованного ответа с переменным наклоном применяли для аппроксимации данных и определения значений IC50 для ингибирования RORy и жизнеспособности клеток. Ингибирование,
- 153 047073 которое сильно коррелирует со снижением жизнеспособности, считается неспецифическим.
C. Высвобождение IL-17 из дифференцированных первичных Т-клеток человека и жизнеспособность клеток
Первичные человеческие криоконсервированные CD4+ Т-клетки (Lonza) размораживали в соответствии с рекомендациями производителя и высевали в срезу для роста лимфоцитов 3 (LGM-3) или среду Х-VIVO 20 (Lonza) в 96-луночные планшеты для тканевого культивирования с плотностью ~2х105 клеток на лунку и оставляли для восстановления в течение приблизительно 4 ч при 37°С с 5% СО2 в увлажненной атмосфере. После этапа восстановления к клеткам добавляли ДМСО (носитель) или исследуемое соединение в дозах в диапазонах 2-500 нМ или 4-1000 нМ в трехкратных серийных разведениях. В случае каждого условия обработки исследовали по три лунки. Конечная концентрация ДМСО в каждой лунке составляла 0,1%. Сразу после обработки CD4+ Т-клетки активировали путем добавления активатора человеческих Т-клеток CD3/CD28 Dynabeads (Life Technologies; соотношение гранул к клеткам 1:2,5) и дифференцировали в ^П-клетки путем добавления смеси следующих цитокинов: трансформирующий фактор роста-β (TGF-β, 5 нг/мл), IL-6 (20 нг/мл), IL-23 (20 нг/мл) и IL-1e (10 нг/мл). В недифференцированные контрольные клетки добавляли только цитокин IL-2 (50 нг/мл). Все человеческие рекомбинантные цитокины были приобретены у R&D Systems. После 45-часовой инкубации при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере планшеты центрифугировали в течение 3 мин при 250 х g, и переносили половину супернатанта в новый планшет для применения в анализе IL-17A (смотрите ниже). Жизнеспособность клеток оценивали в исходном планшете, используя прямой анализ CyQuant (Life Technologies). В лунки добавляли реагент CyQuant (количество, эквивалентное 10% объема оставшейся среды), после чего инкубировали планшеты при 37°C в течение 75 мин. Флуоресценцию считывали на спектрофотометре SpectraMax M2e на длинах волн 480 нм (возбуждение) и 535 нм (испускание). Значения CyQuant для образцов исследуемых соединений нормализовали относительно значений образцов, обработанных ДМСО. Концентрацию IL-17A в супернатанте измеряли, используя анализ гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) (Cisbio Bioassays) в соответствии с протоколом производителя. Анализ проводили при комнатной температуре в 384-луночных твердых планшетах белого цвета малого объема (Greiner Bio-One). Образцы и стандарты (серийно разведенный человеческий рекомбинантный IL-17A (диапазон концентрации 0-5000 пг/мл; Cisbio Bioassays) инкубировали с конъюгатами антитела к IL-17A человека (пара донор - акцептор HTRF) в течение 16 ч и измеряли флуоресценцию, используя устройство для считывания микропланшетов Pherastar FS (BMG Labtech) в режиме HTRF (возбуждение на 337 нм и испускание на 665 и 620 нм). Уровни IL-17A оценивали в двух повторных аликвотах супернатанта из каждой лунки, что дало в общей сложности шесть показаний на исследуемое условие. Рассчитывали отношение сигнала на 665 нм/620 нм, а концентрацию IL-17A в каждом образце определяли путем интерполяции по стандартной кривой. Количество IL-17A из обработанных исследуемыми соединениями образцов нормализовали относительно количества из обработанных носителем образцов, установленного как 100%. Данные анализировали, используя GraphPad Prism (GraphPad Software, La Jolla California USA). Концентрации исследуемого соединения преобразовывали, логарифмируя каждую используемую концентрацию. Значения IC50 для опосредованного соединениями снижения уровней IL-17A и жизнеспособность клеток определяли с помощью нелинейного регрессионного анализа, используя взаимозависимость log (ингибитора) и нормализованного ответа с уравнением переменного наклона. Ингибирование, которое сильно коррелирует со снижением жизнеспособности, считается неспецифическим.
- 154 047073
Таблица. Данные по биологической активности соединений Т1-Т186 в анализах hIL17, RORy и NRF2 GST ARE EC2x
Т№ ΤΙ Τ2 Τ3 Τ4 Структура Ρ Ν-Ν 111 <ΡγΜ °%Ρ Γ Ν-Ν j Υ Ύ V/ я ν-ν °#γΜ hIL17 IC50 (мкМ) 0,065 0,083 0,092 0,223 RORy IC50 (мкМ) 0,174 0,098 0,276 0,140 NRF2 ARE, 2кратный (мкМ) 1,446 0,660 1,461 0,914
Τ5 ρ Ν-Ν _ Ν0·^ρΥΥΐΥ—1\ 111 Ο^Μ 0,119 0,136 0,587
- 155 047073
Т6 рзс. Q N-N °^γΜ 0,035 0,091 0,242
Т7 ζ о о Λ,σ ν·ζ 0 0,170 0,158 0,265
Т8 о Гх> -О Ίί J Уч о о ζ 0,073 0,081 0,426
T9 QF n-n nc,_. ,<^.,l.Xz. z^X \ Г II <4γΜ 0,127 0,063 0,122
Т10 О О О Чс Ωπ Х^2· ύ 0,078 0,088 0,260
Т11 Ζ о о 41 ,о Х^2 о 0,111 0,073 0,107
- 156 047073
T12 z О о 0 0,076 0,055 0,135
T13 А Vn NO. 11] ° ]h 0,096 0,129 0,274
T14 MeO Q ο^γΜ 0,057 0,060 0,147
T15 z о о Η z-1 1—t Ц /-f'* 0 0,141 0,257 0,502
T16 z о о /Ч z^V1 х/—\ и От %z 0 0,248 0,292
T17 Ν-Ν ΝΟοΑ'Α'··'^ίί ) °4γΟ 0,094 0,077 0,105
- 157 047073
T18 N-N ncyAjO 0,182 0,114 0,741
T19 F3CO G M-N °%M 0,032 0,085 0,247
T20 OCF3 0 N-N I ff °^γΐΜ 0,094 0,115 0,927
T21 o о _/A 7\_' Ц/ A^2· 0 0,019 0,080 0,161
T22 .- n^N NC>G'A·'^ °0γΐΜ 0,056 0,175 1,047
- 158 047073
T23 О ,-. z-A ОА \ Ά. о о z 0,089 0,118 0,190
T24 о -Л4 тД--ό ·ι, - . QJ 0,030 0,284 0,827
T25 z Ο Ο , -/4 zA ' —\ 44 V/A Α*ζ 0 0,028 0,092 0,149
T26 ι Γ4 0/ ζ Λ > nA—4-χ Αα Ο ο ζ 0,061 0,104 0,944
T27 ο % А ο Y-f·? 0 0,061 0,132 0,204
T28 0 Ν-Ν νο>·:;?'Α^Α^^ °4γΜ 0,136 0,090 0,719
- 159 047073
T29 0.0 й M-N 0,470 0,837
ТЗО су? Р? Z А ) и.Д—4-х О О 0,143 0,462
Т31 о ?5 -ЛЧ туу.и yj Ά2· О 0,100 0,091 0,298
Т32 о Ъ -М л-/ ^7X2' Ч? У·2 о 0,170 0,124 0,258
ТЗЗ Вг й Ν-Ν _ °ппР 0,089 0,290
Т34 / Vn _ NCpYjO 0,087 0,087 0,245
- 160 047073
T35 n-n i J 'ύ. ύ 0,058 0,129 0,328
T36 Z .Vl о о V \\ _/A —\ a/ V'2· 0 0,022 0,087 0,233
T37 Z /'V о о г _Уч ζύ z —\ ,O Vf^ A z 0 0,024 0,032 0,167
T38 A ,.-o' γ M n^N °Av 0,037 0,046 0,215
T39 NA. VJ M ^n-n NC. j J ] VA °Av 0,031 0,025 0,139
- 161 047073
T40 ο ο v Ч _/Ч, //'/'^ ^7—\ 77 0 0,023 0,080 0,238
T41 ζ /7^ О О \ \ 7^7^ ή/ ‘Ту Ч^2 О 0,025 0,083 0,249
T42 НО^\ . Сд N-N ΥΎΎ 0,035 0,033 0,130
T43 Z 77 00 \ \ Ά сп-а / \ тт7 т Ч^2 О 0,043 0,053 0,174
T44 z 77 СО V Ч Дч /7-7 '\ Чх Ч/ Ч^·2 о 0,041 0,083 0,242
- 162 047073
T45 Αι, о -А .?-/ —у /2 V-A V'Z 0 0,022 0,044 0,147
T46 MeO Q N^N ΥΎ Ύ V/ °TT> 0,020 0,065 0,219
T47 \ z О О \ \\ J4 /W'W —\ Ch 7==-z 0 0,026 0,068 0,253
T48 о o v u -/Λ Ал О Ч^2· t 'z 7 0,030 0,045 0,187
- 163 047073
T49 Z Ζ>-ι ОО г ΐ V / \ Ζ -/Л /> —\ хх 0,052 0,059 0,392
T50 % NCTti^XN ο^γΜ 0,326 0,115 0,977
T51 ζ 'Ζ~~! Ο Ο ® \\ 0,091 0,048 0,501
T52 0 Η0'ν-χ Μ ν-ν I Τ 1 °^γΚ> >2,000 >2,000
T53 Qf - LV/ч Ν0ΤΎιθ °ЛгН 0,088 0,057 0,489
- 164 047073
T54 N=\ гАд F M - rt 0,033 0,052 0,355
T55 N^\ rU но M - Ft -1% Vt]bN °дм 0,149 0,174 0,609
T56 F n NCTnV 0,055 0,099 0,433
T57 ri °дм 0,067 0,096 0,403
T58 N - /Л zN-A NCyTi^M 0,043 0,128 0,355
- 165 047073
T59 Q N Чд - rt NCyTi^N Пн 0,099 0,113 0,449
T60 γΌ ho / N Дд - rt ^ΓΠ^Ν 0,141 0,101 0,440
T61 -π Z λ L о о r ΐ _дл Ауд.. о Дд ‘ yz V 0,115 0,136 0,251
T62 ζ ο ο . -/Л —? Су %Н z <V'Z г' У 0,284 0,691
T63 О Ъ /Д о и гz У 0,151 0,201 0,725
- 166 047073
T64 о о ΫΥ _/4 w Av j/ί vJV Vz 1'z 0,144 0,122 0,636
T65 00 \ \ хД—\' kz vJv vz 0 0,012 0,077 0,201
T66 Z z<'V co v Λ -/Л /W' ' /A /J kh Vz Cj 0,019 0,058 0,128
T67 0 0 AA -/4 Av %Н Az О Z' 0,026 0,049 0,269
T68 Cl M = A V/-n TT 1 AY σ^γΜ 0,027 0,036 0,248
- 167 047073
T69 о о у Л /'А —\ Vr л 0 0,012 0,142 0,380
T70 Q Q - rV/-N мс'Г:;-1-Л::г € ? Ill Πίϊ 0,058 0,075 0,472
71 о о АА _/Л /А ' TL2. Д) А·2 Ό. 0,009 0,294 0,257
T72 С) м ^N-N NCy^jO 0,010 0,138 0,205
T73 Q vl N-N __ °#γΜ 0,030 0,040 0,159
- 168 047073
T74 О о \ \ _/Ч W' —\ ν·ζ 0 т 0,016 0,111 0,182
T75 Q Q N-N оДМ 0,130 0,068 0,248
T76 со ν Т -/Ч —\ ЧЧ Од z 0,030 0,073 0,465
T77 о чч N-N __ °7П> 0,068 0,111 0,908
T78 Чд N-N П NC. ГТ 1 н ο<γτ^ 0,048 0,062 0,534
- 169 047073
T79 G Q n-n NC Г T I H 0 0,178 0,140 1,042
T80 Cl Q N^N П NC... /^n'' г T ϊ οηΤ 0,017 0,071 0,347
T81 CO V 1 -/4 ,74^'' 7\_' n vJt ж z r'z 0,030 0,067 0,243
T82 <0° '7^ Cj 0,063 0,044 0,208
T83 N=\ ν,Α F n-n \ 1 T 1 °^γΜ 0,020 0,033 0,139
- 170 047073
T84 N=\ kJ 0 , - N“N\ A, 0,033 0,023 0,121
T85 о о А /Г АН СГ 0,046 0,050 0,079
T86 9 ΝΛ А nA. f N-N \ NO. .^АА^ААА ΥΎΎ аа ο0γΚ> 0,088 0,351 1,475
T87 ίΛ ζΑ ζ iA\ γυαϊ Άξ. 4α ο ο ζ 0,027 0,685 1,262
T88 ο S „ -Η ΑΑ ιΑ9 л/ Αζ Cj 0,011 0,219 0,743
- 171 047073
T89 Z Г О о / XI \>·ζ СГ 0,013 0,251 0,482
T90 ζ ο ο τ4—( 1 / / V Ζ^ζ V'Z СГ 0,057 0,135 1,313
T91 qn ΗνΑ F ν-ν \ Σ / \\ να \ >0,500 >2,000 >2,000
T92 U.O ύτ t? ο ο ζ 0,028 0,340 0,491
T93 /Ν^Ν Хл Q . Ν-Ν \ NC. Α;../'--<\ γ γ Ύ V/ Ο^γΐΜ 0,037 0,042 0,139
- 172 047073
T94 N о F t Ki N-N L· N<- = / \V/==^ ПГ 0,024 0,065 0,146
T95 IC N \ . о Μ Ν-Ν L· Ν<5:. ν t Α/==\ 0,040 0,062 0,185
T96 Ο Τ Τ J 0-Ν 0,032 0,059 0,258
T97 ° о V \\ 41 ст QC2 Χ^2· 0 0,038 0,107 0,597
T98 - Ο ο 0,078 0,289 0,275
- 173 047073
T99 О о —A ΑΑ ύ 0,087 0,449 0,329
T100 Q Q o n-n V/ T T I H 0 ]h 0,016 0,110 0,319
T101 z /Ai о о г ft 0 / \ Z —\ С/ Ln v·2· О Z' 0,051 0,054 0,353
T102 z Az O p f V 0 / \ z -A ,w'^' A—\ C-A %z M 0,056 0,090 0,918
T103 Ci z A Γ3 CC wLT г \ / V u о LI- 0,031 0,047 0,365
- 174 047073
T104 oa л? i /---X 1 о о z 0,062 0,208 0,638
T105 LL. o zA дрл О /p JJ z \ / a A Q О 0,021 0,067 0,361
T106 J% Ό ν-ν III jj^f °JF 0,027 0,083 0,290
T107 О О Ji vJ¥ У2· G 0,087 0,112 0,505
T108 N=\ M - J A o. J T J N~\ 0,223 0,154 1,245
- 175 047073
T109 о О’ - о. Ν J I 1 Ν \ 0>γΚ> 0,163 0,089 0,543
ТИО Μ - ΓΙ Ν^ Τ Τ Τ Ν'° 0,126 0,193 1,309
Till ζ ο ο ΐΛ--Λι, μρ ЛΌ 11 ,ζ ^ζ \ 0,768 0,590
Т112 Ο _Ο Οζ ιΔ—Ζ, „ όθ 0,264 0,563
Т113 ρ Ν=ρ NCyfYw ο^γΜ 0,181 0,172 >1,000
- 176 047073
T114 о Z A ) и.Д—4·χ Уч О о Ζ 0,507 0,106 0,894
T115 Р Ν-Ν ыс^хУУУч^ч ΥΎ Ύ хУ 0,287 0,077 0,466
T116 8. _ О АО Z А > и.Д--4.χ Уч о о Z 0,191 0,080 0,483
T117 Z о о \ Λ=ζ оЧ 0,107 0,114 0,834
T118 ГУ -'GA ΖΑ ) II. Л—4-х Уч О о Ζ 0,158 0,122 0,635
- 177 047073
T119 .- n-n nc4 °ДГ V 0,043 0,158 1,155
T120 - ϊΛ ΑτΓθ °Av 0,054 0,092 0,908
T121 Q T A z A ) ,,. Λ—Ζ·χ yj^ о о z 0,085 0,242 1,072
T122 0 n^N Г T ] L/F °Av 0,246 0,097 0,441
T123 ZA ZA N-N ncyZaO °лгг F 0,050 0,139 1,181
- 178 047073
T124 .- n-n 0,077 0,123 0,651
T125 О,.,,, О υ< Ζ ;=/ \ !!.Д---4-х Ул Ζ о 0,086 0,137 0,877
T126 о О дд Ло ^Д J I ό 0,021 0,253 1,117
T127 Ζ о о дд> 0,062 0,267 1,119
T128 :фЧ 0,117 0,158 0,818
- 179 047073
T129 N __ ДУЯ 0,073 0,214 1,291
T130 Д ДУЯ 0,273 0,345 1,782
T131 мД ДУЯ 0,138 0,170 0,767
T132 N— 0,114 0,110 1,025
T133 nA ,f ДУ'0 0,247 0,225 0,767
T134 я - A дуу 0,183 0,143 0,832
- 180 047073
T135 .1 ' . 0,160 0,141 0,896
T136 —N N=\ 7ДЯ 0,144 0,189 0,753
T137 гтД N=( __ 0,240 0,093 0,618
T138 ДО Ν-ί __ :ДЯ 0,201 0,284 0,941
T139 С ДN 0 мД ХРЯ 0,128 0,112 0,660
T140 /дд N=\ О 0,288 0,113 1,268
- 181 047073
T141 A (yCF3 nA nc. ..A>.. N A λ Til °7r f 0,194 0,146 0,892
T142 ,ι.Λ—4.1 Уч Ф о 0,156 0,076 0,861
T143 ζ О Ω нХ ζΛ--ό·ι I 0,132 0,095 0,643
T144 ζ Ο Ω ζΛ— Αι Α V -Ά Τ 0,207 0,173 1,122
T145 XX-βγ Ν=( F nc^AAAAx γΤι ТУ °ПГа 0,087 0,092 0,755
T146 ΟΑζ №< / ΝθγΑ\Ν w 0,070 0,106 0,423
- 182 047073
T147 л - /=N >=/ n мД XP'V 0,185 0,108 0,515
T148 p~q> ыД ''F XPV 0,086 0,149 0,566
T149 ДХДД \—/ ;;>Νχ N=< F 0,129 0,159 0,687
T150 о % z-4—4 o-z 0,104 0,135 0,488
T151 ЛдЛ \=/VN N=( 0,154 0,234 0,749
T152 z о о —Лл >‘-n 0,131 0,188 1,164
- 183 047073
T153 λ и.Д—4-χ Ζ о 0,108 0,334 1,247
T154 ф Νφ :ςφ~° 0,415 0,572 1,969
T155 №\ 0,161 0,201 0,738
T156 лф? и. Л—4-х уу Ζ о 0,128 0,117 1,163
T157 Ζ о о -ЛЧ ф? ζζ о \ 0,322 0,103 1,280
- 184 047073
T158 z о о Αχ z Z о \ 0,240 0,124 1,093
T159 —<Α^Ν Ν-ί Д>;' Ν AT Т ° 0,273 0,201 1,082
T160 У X—N 0 nA NC4дДм дУ N т т I °дд 0,468 0,562 >2,000
T161 ΖΛ Ν-ί ыс^-ДЛум^ду °дР 0,113 0,150 1,025
T162 ме^^ДЛД А °дм 0,137 0,141 1,118
- 185 047073
T163 nA °%m 0,255 0,152 1,134
T164 ifz Νϋ^ψΟ·--/~0Μβ °#γΜ 0,158 0,237 >2,000
T165 ZA. °#γΜ 0,211 0,471 >2,000
T166 z О О 0,063 0,228 1,679
T167 /nA—4-x О о ζ 0,053 0,245 1,108
- 186 047073
T168 z О о 0,043 0,296 1,292
T169 ал ci Нп nA Л/ °хтЛ 0,033 0,371 1,009
T170 АЛ nA I I J An '' it- о 0,072 0,103 0,602
T171 АЛ nA NC^yA'A^^' A b 0,157 0,260 1,015
T172 A> NCyAy-^™ °Av >0,500 0,178 >2,000
- 187 047073
T173 I '1 .5 ' ’l · Z-, ; ‘---—T □ о z 0,119 1,975 0,884
T174 N~-> NC 1 Ai 0,368 1,600 0,923
T175 ' J’ _ . . 4 ' Ί' 1 * T- ' 0,036 0,129 0,435
T176 N--G N 'A’n NC ! Ί-' 4 ° ‘ i l· 0,129 0,120 0,979
T177 N---N ' N-N _ NC -- ' 1 ; -j V/-F ° 1H 0,009 0,052 0,271
- 188 047073
T178 LL О A ζ 0,031 0,064 0,342
T179 / Ν Фц Q Νφ _ Γ ΐ ] 0ΑγΜ 0,045 0,037 0,232
T180 О О \\ -/Ч /Ф ' —\ фЧ Az ύ 0,049 0,055 0,308
T181 О О _/Ч /— о Π 0,024 0,060 0,250
T182 °<ф γ° ф ф Αζ 0 -Π 0,032 0,096 0,249
- 189 047073
T183 Ад—Z., Н/ Ch v·2· 0 0,068 0,113 0,526
T184 N '4 .. Q МД 0,076 0,116 0,398
T185 rN Z-4, f~yZ A / /) U О Ll- >0,500 0,625 >2,000
T186 N'N -A / Уд n-n \ ITT AA 0,468 0,297
Все соединения, композиции и способы, описанные и заявленные в данном документе, можно получать и осуществлять без излишних экспериментов в свете настоящего изобретения. Хотя данное изобретение может быть сфокусировано на нескольких вариантах осуществления или может быть описано в терминах предпочтительных вариантов осуществления, для специалистов в данной области техники очевидно, что в отношении соединений, композиций и способов можно применять вариации и модификации без отступления от сущности, объема и концепции изобретения. Предполагается, что все вариации и модификации, очевидные для специалистов в данной области техники, находятся в пределах сущности, объема и концепции изобретения, определяемых прилагаемой формулой изобретения.
Ссылки
Нижеприведенные ссылки в той степени, в которой они описывают типовые процедурные или иные детали, дополняющие изложенные в данном документе, явным образом включены в данный документ посредством ссылки.
Anderson, Practical Process Research & Development - A Guide for Organic Chemists,
2nd ed., Academic Press, New York, 2012.
Bronner, et al., Expert Opin. Ther. Pat., 1:101-112,2017.
Coltart and Danishefsky, Org. Lett., 5:1289, 2003.
Fujiwara, etal., J. Immunol., 193(5):2565-73, 2014.
Gaffen, et al, Nature Reviews Immunology, 14(9):585-600, 2014.
Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use, Stahl and Wermuth Eds., Verlag
Helvetica Chimica Acta, 2002.
Exxetal., J. Clin. Invest., 121(10):4015-29, 2011.
Miosse and Kolls, Nature Reviews, 11(10):763-776, 2012.
Reagan-Shawetal., FASEBJ, 22(3):659-661, 2008.
Smith, March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 7th
Ed, Wiley, 2013.
Waite and Skokos, International Journal of Inflammation, 2012:1-10, 2011.
Yang, etal., Trends in Pharmacological Sciences, 35(10):493-500, 2014.

Claims (30)

1. Соединение формулы
где n равен 1;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra, где
Ra представляет собой амино;
R2 представляет собой водород или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-2), алкенил(С2-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
R3 представляет собой алкил(С1-12), арил(С6-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероцикло алкил(с1-12), арил(Сб-12), аралкил^п), гетероарил(О-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(сб-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-2)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)-арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равны 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-2), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)Циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С112), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-8), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероа рил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
где пунктирная линия означает наличие или отсутствие двойной связи;
где признак арил не исключает наличия одной или более необязательно замещенных алкильных(С1-12) групп, присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу;
где признак гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с атомом ароматического углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом гетероарильная груп па не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы, где признак гетероарил не исключает наличия одной или более необязательно замещенных алкильных(С1-12) или арильных(С6-12) групп, присоединенных к одному или более кольцевым атомам;
где признак гетероаралкил относится к одовалентной группе -алкандиилгетероарил, в которой термин гетероарил используется в соответствии с приведенным определением;
где признак гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или азота образует часть одной или более неароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом гетероциклоалкильная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы, где признак гетеро
- 191 047073 циклоалкил не исключает наличия одной или более необязательно замещенных алкильныХ(С1-12) групп, присоединенных к одному или более кольцевым атомам;
где признак гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода, двумя атомами ароматического азота или одним атомом ароматического углерода и одним атомом ароматического азота в качестве двух точек присоединения, указанные атомы образуют часть одной или более ароматических кольцевых структур, каждая из которых содержит от трех до восьми кольцевых атомов, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
где признак гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или более кольцевых структур, при этом по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и при этом двухвалентная группа не содержит других атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы;
где признак замещенный относится к группе, в которой один или более атомов водорода были независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -OCH3, -OCH2CH3, -NHCH3, NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(О)СНз или -NHC(O)CH3;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, представляющее собой
R2 R2' где n равен 1;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra, где
Ra представляет собой амино;
R2 представляет собой водород; или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), алкенил(С2-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
R3 представляет собой алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арилО-12), аралкил(С7-12), гетероарил(О-12), гетероаралкил(С2-12), -арендии^^-п^лкил^-п), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(c6-12)-гетероциклоαлкил(c1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равен 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламинО(С2-2), циклоалкиламинО(С3-12), дициклоалкиламинО(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламинО(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил^-^), -арендиил(С6-12)алкил(О-12), аралкил(С7-18), -арендиил(c6-18)гетероциклоалкил(c1-12), гетероарил(с1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-8), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламинО(С1-12), диалкиламинО(С2-12), циклоалкиламинО(Сз-12), дициклоалкиламинО(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламинО(С6-12) или диариламино(С12); или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по любому из п.1 или 2, представляющее собой
- 192 047073
где
R1 представляет собой циано;
R2 представляет собой водород или алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), алкенил(С2-12) или замещенную версию любой их этих групп;
R2' представляет собой водород;
R3 представляет собой алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(сб-12), аралкил(С7-12), гетероарил(С1-12|, гетероаралкил(С2-12), -арендиил(сб-12)алкил(С<12), -арендиил(сб-12)арил(сб-12), -арендиил(сб-12)гетероарил(О-12), -арендиил(сб-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m равен 1 или 2;
R6 представляет собой амино; или алкиламино(С 1-12), диалкиламино(С2- 1 2), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, R6 не представляет собой амино, алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по любому из пп.1-3, представляющее собой
где
R1 представляет собой циано;
R2 представляет собой водород, алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(с1-12), арил(сб-12), аралкил(С7-12), гетероарил^-п), гетероаралкил^-^), -арендиил(сб—12)алкил(с1—2), -арендиил(сб12)арил(сб-12), -арендиил(сб-12)Гетероарил(с1-12), -арендиил(сб-18)Гетероциклоалкил(с1-12), -арендиил(сб-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)Гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1<12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равны 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С2), алкил(С1-12), цик
- 193 047073 лоалкиЛ(С3-12), -алкандииЛ(С1-12)ЦиклоалкиЛ(С3-12), -алкандииЛ(С1-18)аралкокси(С6-18), гетероциклоалкиЛ(С1-12), ариЛ(сб—18), -арендииЛ(сб-12)алкиЛ(О-12), аралкиЛ(С7-18), -арендииЛ(сб—18)гетероциклоалкиЛ(с1-12), гетероариЛ(С1-18), -гетероарендииЛ(С1-12)алкиЛ(С1-12), гетероаралкиЛ(С2-18), ациЛ(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламинО(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламинО(С3-12), дициклоалкиламинО(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламинО(С6-12) или диариламино(С12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
5. Соединение по любому из пп.1-4, представляющее собой R4 /Rs
R2 R2' ζνχ где
R2 представляет собой водород, алкиЛ(С1-12) или замещенный алкиЛ(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкиЛ(С3-12), гетероциклоалкиЛ(С1-12), арил^-п), аралкил^-д, гетероариЛ(0-12), гетероаралкиЛ(С2-12), -арендииЛ(С6-12)алкиЛ(C1-12), -арендиил^^арил^-п), -арендииЛ(С6-12)гетероариЛ(с1-12), -арендииЛ(С6-12)гетероциклоалкиЛ(С1-12), -арендииЛ(С6-12)циклоалкиЛ(С3-12), -гетероарендииЛ(С1-2)алкиЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)ариЛ(С6-12), -гетероарендииЛ(С1-12)гетероариЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)гетероциклоалкиЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)циклоалкиЛ(С3-12), -гетероциклоалкандииЛ(С1-12)ариЛ(С6-12), -гетероциклоалкандииЛ(С1-12)гетероариЛ(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
О /° v ,(γ)„ где каждый l и m независимо равны 1 или 2;
R6 представляет собой амино или алкиламинО(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламинО(С3-12), дициклоалкиламинО(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламинО(С6-12), диариламино(С12), алкиЛ(С1-12), циклоалкиЛ(С3-12), -алкандииЛ(С1-12)циклоалкиЛ(С3-12), -алкандииЛ(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкиЛ(О-12), арил^-^), -арендиил^-^алкил^-^), аралкиЛ(С7-18),
-арендииЛ(С6-18)гетероциклоалкиЛ(С1-12), гетероариЛ(С1-18), -гетероарендииЛ(С1-12)алкиЛ(С1-12), гетероаралкиЛ(С2-18), ациЛ(С1-12), алкокси(С1-2) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой амино, алкиламинО(С1-12), диалкиламинО(С2-2), циклоалкиламинО(СЗ-12), дициклоалкиламинО(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламинО(С6-12) или диариламино(С12); или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Соединение по любому из пп.1-3, представляющее собой
где
R2 представляет собой водород, алкиЛ(С1-12) или замещенный алкиЛ(С1-12);
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкиЛ(С3-12), гетероциклоалкиЛ(С1-12), арил^-п), аралкиЛ(С7-12), гетероарил^.п), гетероаралкиЛ(С2-12), -арендииЛ(C6-12)алкиЛ(С1-12), -арендииЛ(С6-12)ариЛ(С6-12), -арендииЛ(С<12)гетероариЛ(С<12), -арендииЛ(С6-12)гетероциклоалкиЛ(С1-12), -арендииЛ(С6-12)циклоалкиЛ(С3-12), -гетероарендииЛ(С1-12)алкиЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)ариЛ(С6-12), -гетероарендииЛ(С1-12)гетероариЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)гетероциклоалкиЛ(С1-12), -гетероарендииЛ(С1-12)циклоалкиЛ(С3-12), -гетероциклоалкандииЛ(С1-12)ариЛ(С6-12), -гетероциклоалкандииЛ(С1-12)гетероариЛ(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
- 194 047073
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкиламино^-п), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино^-п), дициклоалкиламино^-и), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино^-^), диариламино(С12), алкил^-^), циклоалкил(о -12), -алкандиил^-^циклоалкил^-п), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7- 1 8), гетероциклоалкил(О-12), арил^-^), -аренди^^-п^кил^-п), аралкиЛ(С7-18),
-арендиил^-^гетероциклоалкил^-п), гетероарил^-^), -гетероарендиил^-^алкил^-п), гетероаралкиЛ(С2-18), ацил(С1-2), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп;
или его фармацевтически приемлемая соль.
7. Соединение по любому из пп.1-3, представляющее собой
R2 R2' (VII), где
R2 представляет собой водород, алкил^-п) или замещенный алкил^-^;
R2' представляет собой водород;
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил^-п), гетероциклоалкил(С1-12), арил^-п), аралкил(С7-12), гетероарил^-и), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(C6-12)алкил(C1-12), -аренди^^-п^рил^-п), -арендииЛ(С6-12)гетероариЛ(О-12), -арендиил(c6-12)гетероциклоалкил(c1-12), -арендиил^-^циклоалкил^-п), -гетероарендиил^-^алкил^-п), -гетероарендиил^-^арил^-п), -гетероарендиил^-^гетероарил^-п), -гетероарендиил^-^гетероциклоалкил^-п), -гетероарендииЛ(С1-12)циклоалкиЛ(СЗ-12), -гетероциклоалкандиил^-^арил^-п), -гетероциклоалкандиил^-^гетероарил^-п) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкил^-п), циклоалкил^-^), -алкандиил^-^циклоалкил^-п), -алкандиил^-^аралкокси^-^), гетероциклоалкил^-п), арил^-^), -арендиил^-^алкил^-п), аралкиЛ(С7-18), арендиил^-^гетероциклоалкил^-п), гетероарил^-^), -гетероарендиил^-^алкил^-п), гетероаралкиЛ(С2-18), ацил^-п), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп;
или его фармацевтически приемлемая соль.
8. Соединение по любому из пп.1-4, представляющее собой
где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил^-^), гетероциклоалкиЛ(О-12), арил^-п), аралкил^-^), гетероарил^-и), гетероаралкиЛ(С2-12), -арендииЛ(C6-12)алкиЛ(C1-12), -аренди^^-п^рил^-п), -арендииЛ(C6-12)гетероариЛ(C1-12), -арендиил(c6-12)гетероциклоалкил(c1-12), -арендиил^-^циклоалкил^-п), -гетероарендиил^-^алкил^-п), -гетероарендиил^-^арил^-п), -гетероарендиил^-^гетероарил^-п), -гетероарендиил^-^гетероциклоалкил^-п), -гетероарендииЛ(С1-12)циклоалкиЛ(СЗ-12), -гетероциклоалкандиил^-^арил^-п), -гетероциклоалкандиил^-^гетероарил^-п) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкиламино^-п), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино^-п), дициклоал
- 195 047073 киламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(1-12), циклоалкиЛ(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкиЛ(с1-12), ариЛ(Сб-18), -арендииЛ(Сб-12)0лкиЛ(с1-12), аралкил^-щ), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероариЛ(С1-18), гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкоксИ(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп и
X1 и Х2, каждый, независимо представляют собой С или N при условии, что когда Х2 представляет собой N, тогда R6 не представляет собой алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12) или диариламино(С12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Соединение по любому из пп.1-4 и 8, представляющее собой
где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-12), гетероарил(О-12), гетероаралкил(С7-12), -аревдиил(С6-12)алкил<С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)-циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкиламино(С1-12), диалкиламино(С2-12), циклоалкиламино(С3-12), дициклоалкиламино(С6-12), алкил(циклоалкил)амино(С4-12), ариламино(С6-12), диариламино(С12), алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18),
-арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп;
или его фармацевтически приемлемая соль.
10. Соединение по любому из пп.1-4 и 8, представляющее собой
где
R4 и R5, каждый, независимо отсутствуют или представляют собой циклоалкил(С3-12), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-12), аралкил(С7-12), гетероарил(С1-12), гетероаралкил(С2-12), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)циклоалкил(С3-12), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероциклоалкандиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или группа формулы
где каждый l и m независимо равен 1 или 2 и
R6 представляет собой алкил(С1-12), циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-12)циклоалкил(С3-12), -алкандиил(С1-18)аралкокси(С7-18), гетероциклоалкил(С1-12), арил(С6-18), -арендиил(С6-12)алкил(С1-12), аралкил(С7-18), -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12), гетероарил(С1-18), -гетероарендиил(С1-12)алкил(С1-12), гетероаралкил(С2-18), ацил(С1-12), алкокси(С1-12) или замещенную версию любой их этих групп; или
- 196 047073 его фармацевтически приемлемая соль.
11. Соединение по любому из пп.1-3, где R3 представляет собой алкиЛ(С1-12) или замещенный алкил(С1-12).
12. Соединение по любому из пп.1-4 и 11, где R1 представляет собой циано.
13. Соединение по любому из пп.1-7, 11 и 12, где R2 представляет собой водород или метил.
14. Соединение по любому из пп.1-7 и 11-12, где R2 представляют собой алкил(С1-12) или замещенный алкил(С1-12).
15. Соединение по любому из пп.1-14, где R4 отсутствует.
16. Соединение по любому из пп.1-14, где R4 представляет собой гетероциклоалкил(С1-12) или замещенный гетероциклоалкил(С1-12).
17. Соединение по любому из пп.1-14, где R4 представляет собой арил(С6_18) или замещенный арИл(С6-18).
18. Соединение по любому из пп.1-14, где R4 представляет собой -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), замещенный -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12), -арендиил(С6-12)арил(С6-12), замещенный -арендиил(С6-12)арил(С6-12), -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), замещенный -арендиил(С6-12)гетероарил(С1-12), -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), замещенный -гетероарендиил(С1-12)арил(С6-12), -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12) или замещенный -гетероарендиил(С1-12)гетероарил(С1-12).
19. Соединение по любому из пп.1-14, где R4 представляет собой гетероарил(С1-18) или замещенный гетероарил(С1-18).
20. Соединение по любому из пп.1-19, где R5 представляет собой арил(С6-18) или замещенный арил(С6-18).
21. Соединение по любому из пп.1-19, где R5 представляет собой -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12) или замещенный -арендиил(С6-12)гетероциклоалкил(С1-12).
22. Соединение по любому из пп.1-19, где R5 представляет собой гетероарил(С1-12) или замещенный гетероарил(С1-12).
23. Соединение по любому из пп.1-19, где R5 отсутствует или представляет собой -арендиил(С6-12)арил(С6-12), замещенный -арендиил(С6-12)арил(С6-12),
-гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С1-12) или замещенный
-гетероарендиил(С1-12)гетероциклоалкил(С 1-12).
24. Соединение по любому из пп.1-23, где R6 представляет собой циклоалкил(С3-12) или замещенный циклоалкил(С3-12).
25. Соединение по любому из пп.1-23, где R6 представляет собой арил(С6-18) или замещенный арил(С6-18).
26. Соединение по любому из пп.1-23, где R6 представляет собой -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12) или замещенный -арендиил(С6-18)гетероциклоалкил(С1-12).
27. Соединение по любому из пп.1-23, где R6 представляет собой гетероарил(С1-18) или замещенный гетероарил(С1-18).
28. Соединение по любому из пп.1-27, представляющее собой
- 197 047073
- 198 047073
- 199 047073
- 200 047073
- 201 047073
- 202 047073
- 203 047073
или фармацевтически приемлемая соль любой из вышеприведенных формул.
29. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) соединение по любому из пп.1-28 и (b) вспомогательное вещество.
30. Способ лечения или предотвращения аутоиммунного или воспалительного заболевания или расстройства, связанного с повышенной выработкой цитокина IL-17 у нуждающегося в этом пациента,
- 204 047073 включающий введение пациенту фармацевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-28 или композиции по п.29.
EA202190033 2018-06-15 2019-06-17 Соединения пиразола и имидазола для ингибирования il-17 и ror-гамма EA047073B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US62/685,742 2018-06-15
US62/687,602 2018-06-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA047073B1 true EA047073B1 (ru) 2024-05-30

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021225161B2 (en) Compounds useful as kinase inhibitors
JP7010935B2 (ja) Ｕｓｐ３０の阻害剤としての活性を有するシアノ置換ヘテロ環
TWI689502B (zh) 新穎經取代吲唑、其製法、包含其之醫藥製劑及其製備藥劑之用途
JP2022024023A (ja) Ｃｆｔｒ増強物質としてのピロロピリミジン
JP6110859B2 (ja) ヤヌスキナーゼ阻害剤としてのピラゾールカルボキサミド
TWI831738B (zh) 用於抑制ＲＯＲγ及其他用途的嘧啶三環烯酮衍生物
US20240360084A1 (en) Pyrazole and imidazole compounds for inhibition of il-17 and rorgamma
JP2019507168A (ja) 新規な２−置換インダゾール、その製造方法、それを含有する医薬製剤、および薬物を製造するためのその使用
JP2013533868A (ja) タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤としての新規ホモピペラジン誘導体およびそれらの医薬使用
WO2016051193A1 (en) Compounds useful as csf1 modulators
JP6322275B2 (ja) ヤヌスキナーゼ阻害剤としてのｎ−（２−シアノヘテロシクリル）ピラゾロピリドン
JP2021515773A (ja) ＰＩ３Ｋ−γ阻害剤としてのアミノピラジンジオール化合物
TW202124386A (zh) 唑稠合之嗒-3(2h)-酮衍生物
JP2023513373A (ja) Ｐ２ｘ３修飾薬
JP4837701B2 (ja) 医薬組成物
TW201922737A (zh) 作為法尼醇x受體調節劑之螺環化合物
US9150592B2 (en) Heterocyclic nuclear hormone receptor modulators
JP2019537577A (ja) Ｉｒａｋ阻害剤としての使用のためのオキサゾール誘導体およびその調製のための方法
EA047073B1 (ru) Соединения пиразола и имидазола для ингибирования il-17 и ror-гамма
EA043609B1 (ru) ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ - ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ RORγ И ДРУГИХ ПРИМЕНЕНИЙ
TW202100514A (zh) 芳香族衍生物其製備方法和醫學用途
WO2020128036A1 (en) Modulators of the adenosine a2a receptor
CN117677622A (zh) 磺酰亚胺酰胺化合物及其用途