[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

EA019156B1 - Производные оксима в качестве ингибиторов hsp90 - Google Patents

Производные оксима в качестве ингибиторов hsp90 Download PDF

Info

Publication number
EA019156B1
EA019156B1 EA201070912A EA201070912A EA019156B1 EA 019156 B1 EA019156 B1 EA 019156B1 EA 201070912 A EA201070912 A EA 201070912A EA 201070912 A EA201070912 A EA 201070912A EA 019156 B1 EA019156 B1 EA 019156B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
methyl
amino
compound
phenyl
fluoro
Prior art date
Application number
EA201070912A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201070912A1 (ru
Inventor
Юн К. Чэнь
Эрик Ван Ко
Прасуна Гунтупалли
Джон Дэвид Лосон
Вольфганг Райнхард Людвиг Нотц
Джеффри А. Стаффорд
Хуонг-Тху Тон-Ну
Original Assignee
Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед filed Critical Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед
Publication of EA201070912A1 publication Critical patent/EA201070912A1/ru
Publication of EA019156B1 publication Critical patent/EA019156B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/78—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/84—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединениям, ингибирующим HSP90, имеющим формулугде X представляет собой О; Rпредставляет собой -L-R; Rвыбран из группы, включающей водород и метил; Rи Rвыбраны из группы, определенной в п.1 формулы изобретения; Rпредставляет собой водород; Rи R, оба, представляют водород; Rвыбран из группы, включающей водород, амино и гидроксил; L представляет собой (-CRR-); n равно 1, 2, 3, 4 или 5; Rи R, каждый, независимо выбраны из группы, включающей водород, гидроксил, амино, (C)алкил и гидрокси(C)алкил. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям и способам использования таких соединений.

Description

Настоящее изобретение относится к соединениям, пригодным для ингибирования белка теплового шока 90 (Н8Р90), а также к композициям, наборам и изделиям, включающим такие соединения. Настоящее изобретение также относится к способам ингибирования Н8Р90 и способам лечения с использованием соединений согласно настоящему изобретению. Дополнительно, настоящее изобретение относится к способам получения соединений согласно настоящему изобретению, а также к промежуточным соединениям, которые можно применять в таких способах. В частности, настоящее изобретение относится к ингибиторам Н8Р90, композициям, наборам и изделиям, включающим такие соединения, способам ингибирования Н8Р90, а также способам и промежуточным соединениям для получения таких ингибиторов.
Уровень техники
Молекулярные шапероны поддерживают надлежащее свертывание и конформацию образующихся полипептидов. Данная активность критична для регуляции баланса между синтезом и разрушением белка. В случае повреждения белка молекулярные шапероны могут также способствовать повторному сворачиванию или, в случае необратимого повреждения белка, уничтожению такого белка клеточным механизмом разрушения белка1.
Белки теплового шока (Н8Р) первоначально определяли по повышенной экспрессии в ответ на воздействие различных повреждающих клетку факторов, таких как повышенная температура, а также воздействие тяжелых металлов и окислительный стресс1. Большинство, но не все Н8Р представляют собой молекулярные шапероны, которые делят на семейства в соответствии с размером молекул и функцией, включая Н8Р100, Н8Р90, Н8Р70, Н8Р60, Н8Р40 и малые Н8Р. Быструю индукцию экспрессии гена Н8Р называют реакцией теплового шока (Н8К.), которая обеспечивает цитопротекцию при повторном воздействии повреждающего фактора, которое в противном случае вызвало бы летальное повреждение молекул. Цитопротекция является примером повышенной экспрессии молекулярного шаперона, связанной с функционированием нормальных клеток в организме. Однако абберантная экспрессия белков данного семейства может также быть связана с некоторыми болезненными состояниями.
Существуют многочисленные свидетельства в пользу того, что молекулярные шапероны имеют значение для поддержания ракового фенотипа. Дополнительно, накапливающиеся свидетельства связи экспрессии молекулярных шаперонов с другими заболеваниями, включая, без ограничения, нейродегенеративные заболевания, включая болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона и прионные заболевания, воспаление и заболевания, связанные с воспалением, такие как боль, головные боли, лихорадка, артрит, астма, бронхит, тендинит, экзема, воспалительное заболевание кишечника и т.д., заболевания, зависящие от ангиогенеза, такие как рак, артрит, диабетическая ретинопатия, старческая дегенерация желтого пятна (ΑΜΌ) и инфекционные заболевания, в частности грибковые инфекции, вирусные заболевания, включая, но не ограничиваясь перечисленными, заболевания, вызываемые вирусом гепатита В (НВУ), вирусом гепатита С (НСУ) и простым вирусом герпеса типа 1 (Н8У-1), заболевания сердечно-сосудистой и центральной нервной системы3, 4 5 6 7.
Н8Р90 представляет собой распространенный молекулярный шаперон, который составляет 1-2% общего белка клетки. Он осуществляет свою функцию шаперона, обеспечивая правильную конформацию, активность, локализацию внутри клетки и протеолитический оборот ряда белков, которые участвуют в росте, дифференцировке и выживании клеток3, 5 8. Поскольку было показано, что Н8Р90 ассоциирует с большим количеством важных сигнальных белков и способствует их стабилизации (такие белки обычно называют клиентами Н8Р90), существует логическое обоснование терапевтического применения ингибиторов Н8Р90 для лечения разнообразных заболеваний человека (как описано выше)9. Активность Н8Р90 необходима для стабилизации и функционирования многих онкогенных белков-клиентов, которые вносят свой вклад во все основные характеристики злокачественных процессов и соответственно Н8Р90 является широко признанной мишенью терапии при лечении рака3, 4 5 8. Такие белки-клиенты включают, среди прочих, ВСК.-АВЦ АКТ/РКВ, С-ΡΑΡ. СЭК4. рецепторы стероидных гормонов (эстрогена и андрогена), белки выживания, е-Мск НЕК.-2 и теломеразы. Ингибирование функции Н8Р90 приводит к дестабилизации и разрушению белков-клиентов по убиквитин-протеасомному пути, что приводит к ослаблению сигналов, которые распространяются по онкогенным сигнальным путям и модулирования всех аспектов злокачественного фенотипа3, 5 8. Соответственно ингибиторы Н8Р90 обладают потенциалом для лечения рака, зависимого от разнообразных молекулярных аномалий и их совместное действие может также снижать способность к развитию устойчивости.
Считают, что Н8Р90 осуществляет функцию шаперона в цикле, включающем координированные взаимодействия ряда белков, действующих совместно с шаперонами, которые вместе вовлечены в хорошо контролируемое, взаимно регулируемое взаимодействие с обменом АТФ/АДФ и гидролизом АТФ характерным и необходимым Ν-концевым АРФ-азным доменом. Кристаллографические исследования выявили, что некоторые ингибиторы Н8Р90 занимают Ν-концевой сайт связывания АТФ10, что приводит к ингибированию АТФазной активности и функции Н8Р90.
Вначале для 14-членного макроциклического антибиотика радицикола была продемонстрирована противоопухолевая активность ίη νίίτο, а также было показано, что он обращает злокачественный фенотип клеток, трансформированных ν-8ΒΟη. Впоследствии было с использованием рентгеновской кри
- 1 019156 сталлографии было показано, что радицикол связывается с Ν-концевым АТФ-связывающим карманом Н8Р90 с высокой аффинностью10 и ингибирует АТФазную активность Н8Р90, что приводит к разрушению ряда сигнальных белков12. Хотя радицикол подавляет рост опухолей ίη νίίτο, он не обладает активностью ίη νίνο, наиболее вероятно, из-за наличия реактивной эпоксидной группы и других нежелательных химических особенностей, которые обуславливают нестабильность и возможную токсичность8, 13.
Бензохинон ансамицины являются вторым классом природных антибиотиков, для которых было продемонстрировано ингибирование активности Н8Р90. Первым примером является гелданамицин, который также конкурирует с АТФ за связывание с Ν-концевым сайтом связывания нуклеотидов Н8Р9014. Также как в случае с радициколом, несмотря на многообещающую противоопухолевую активность ίη νίίτο (и ίη νίνο), разработка средства для лечения людей на основе гелданамицина была прекращена из-за нестабильности и неприемлемой гепатотоксичности данного соединения в терапевтических дозах15.
С целью обнаружения средств с расширенными пределами безопасности для клинического применения, исследовали аналоги гелданамицина, включая производное 17-аллиламино-17деметоксигелданамицин (17-ААС или танеспимицин)16. 17-ААС оказывает воздействием на клетки, подобное действию гелданамицина, включая разрушение белков-клиентов и блокирование клеточного цикла, но обладает повышенной метаболической стабильностью и более низкой токсичностью5, 8. Доклинические исследования с использованием 17-ААС продемонстрировали высокую эффективность этого производного ίη νίίτο, а также его противоопухолевую активность в нетоксичных дозах в различных моделях с ксенографтами опухолей человека17, 18. На основании биологической активности 17-ААС недавно прошел фазу I клинических испытаний с некоторыми обнадеживающими результатами9, 19 В результате, к настоящему времени 17-ААС вступил во II фазу клинических испытаний в виде монотерапии для различных типов опухолей, включая меланому и рак груди.
Существует несколько возможных факторов, которые могут снижать клиническую эффективность 17-ААС. Доклинические испытания показали, что метаболизм 17-ААС в печени под действием цитохрома Р450 приводит к образованию 17-амино-17-деметоксигелданамицина (17-АС)17. Хотя 17-АС сохраняет ингибирующую активность, метаболизм под действием СУР3А4, вероятно, вызывает изменения в фармакокинетике. Кроме того, активность 17-ААС повышается в результате его перехода в форму гидрохинона, 17-ААСН2, под действием фермента-редуктазы ΝΟΘ1 или ΌΤ-диафоразы17, 20 Полиморфная экспрессия обоих указанных метаболических ферментов, возможно, накладывает ограничения на клиническое применение 17-ААС в популяции5, 8 17. Эффективность 17-ААС, возможно, также снижается его ассоциацией с белком множественной устойчивости к лекарствам ΜΌΚ1 или Р-гликопротеином. Наконец, ограничения 17-ААС связаны с его низкой растворимостью, громоздкой и сложной конформацией и отсутствием биодоступности при пероральном введении. Попытки получить другую форму 17-ААС привели к началу клинических испытаний с ί.'ΝΕ1010 и составом на основе кремафора (ΚΘ8-953), причем последний показал многообещающие результаты у пациентов с рецидивирующей рефрактерной миеломой. Национальный институт рака США и Κοκαη Вюксюпсск также разработали более водорастворимый аналог 17-ААС, 17-диметиламиноэтиламино-17-деметоксигелданамицин (17-ЭМАС) или алвеспимицин (аКекршуст), который оценивали в доклинических и клинических испытаниях9. 17-ААСН2, также известный как 1Р1-504, также вступил в клинические испытания в виде растворимого производного 17-ААС21.
Недавно были описаны неприродные продукты, являющиеся ингибиторами Н8Р90. Один из таких продуктов содержит каркас 3,4-диарилпиразол резорцинола. Примерами таких молекул являются соединение ССТ018159 и аналоги ССТ0129397/УЕВ-49009 и УЕВ-50589. Обработка раковых клеток такими инги22, 23, 24, 25 биторами Н8Р90 вызвала индукцию Н8Р70, снижение количества белков-клиентов и апоптоз , , , .
Οιίοκίκ еί а1.26 с использованием метода рациональной разработки лекарственных средств разработали новый класс ингибиторов Н8Р90 с пуриновым каркасом. Первое идентифицированное соединение из этого ряда, РИ3, связывало Н8Р90 с умеренной аффинностью, вызывая клеточные эффекты, характерные для ингибиторов Н8Р90. Важным свойством РИ3 является то, что он более растворим, чем 17-ААС; однако его эффективность в отношении клеток значительно ниже, чем у ансамицина26. Дальнейшие усилия, направленные на повышение эффективности РИ3, привели к идентификации РИ24РС127. Это соединение оказывало биологическое воздействие на клетку в диапазоне концентраций 2-6 мкМ27 и также продемонстрировало в 10-50 раз более высокую аффинность к Н8Р90 из трансформированных клеток, чем к Н8Р90 из нормальных тканей27. Применение РИ24РС1 в моделях с ксенографтами опухоли молочной железы человека обеспечило противоопухолевую активность без значительной токсичности27. В более поздних исследованиях были идентифицированы производные РИ 8-арилсульфанил, 8арилсульфоксил и 8-арилсульфонил аденин, которые проявляли повышенную растворимость в воду и эффективность примерно 50 нМ в клеточных моделях, а также терапевтическую активность в моделях с ксенографтами опухолей человека28.
Также идентифицированы другие неприродные низкомолекулярные ингибиторы Н8Р90, включая соединения 2-амино-хиназолин-5-она (\УО 2006113498 А2), 2-амино-7,8-дигидро-6Н-пиридо[4,36]пиримидин-5-она (\УО 2007041362 А1) и производные хиназолин-оксима (\УО 2008142720 А2), которые воздействуют на Н8Р90, обеспечивая профилактику или лечение заболеваний, связанных с пролифе
- 2 019156 рацией клеток. Эти молекулы обладают приемлемой эффективностью и лекарственными свойствами.
Итоговые доклинические испытания обеспечили небольшие молекулы с приемлемыми лекарственными свойствами и в сочетании с итоговыми доклиническим исследованиями в рамках подхода ингибирования активности Н8Р90, достигаемого при использовании 17-ЛЛС. вызвали значительный интерес в данной области к разработке дополнительных ингибиторов Н8Р90 с улучшенными лекарственными свойствами, которые обеспечили бы полезный терапевтический эффект для пациентов, страдающих от заболеваний. связанных с аномальной укладкой белка.
В описании уровня техники содержатся ссылки на следующие публикации.
1. РС. Уоипд, У.К. Адакйе, К. 81едегк апб Р.и. НатИ, РаЛтаук οί сйарегопе-теб1а1еб ргсйеш Го1бшд ίη Ле су!око1, №-й. Кем. Мо1. Се11 ΒίοΙ. 5 (2004), р. 781-791.
2. 8.Ό. ХУек!еЛе1бе апб Κ.Ι. МоптоЮ, Неа! Лоск гекропке тоби1а!огк ак Легареийс !оо1к Гог бгсеакек оГ ргсйеш сопГогтабоп, 1. Βίο1. Сйет. 280 (2005), р. 33097-33100.
3. Ь. ХУН^кеИ апб 8.Ь. Ьшбс.|шк1 Н8Р90 апб !йе сйарегопшд оГ сапсег, №11. Кем. Сапсег 5 (2005), р. 761-772.
4. 8.К. Са1бегоооб, М.А. Кйа1едие, Ό.Β. Задует апб Ό.Κ. Сюсса, Неа! кйоск ргсйешк ш сапсег: сйарегопек оГ Лтопдепеык, Тгепбк Вюсйет. 8ск 31 (2006), р. 164-172.
5. М.У. Ро\\егк апб Р. Уогктап, Татдейпд оГ пшЫр1е ыдпайпд раЛгаук Ьу йеа! кйоск ргсйеш 90 то1еси1аг сйарегопе 1пй1Ьйотк, Епбосг. Ке1а!. Сапсег 13 (8ирр1. 1) (2006), р. 8125-8135.
6. АЭ. Масапо апб Соптау бе Масапо, 8юк сйарегопек, се11и1аг к1гекк, апб б1кеаке, N. Епд1. 1. Меб. 353 (2005), р. 1489-1501.
7. 1.М. Вагга1, 8.А. Вгоаб1еу, 6. 8сйаГГаг апб Ρ.ϋ. НатИ, Ко1ек оГ то1еси1аг сйарегопек ш ртоШп т1кГо1бшд б1кеакек, 8етт. Се11 Иеу. Βίο1. 15 (2004), р. 17-29.
8. 8. 8йагр апб Р. Уогктап, БтЫЬИогк оГ !йе Н8Р90 то1еси1аг сйарегопе: сиггеп! к!а1ик, Абу. Сапсег Кек. 95 (2006), р. 323-348.
9. 8. Расеу, и. ΒηιΚΓίκ I. 1ибкоп апб Р. Уогктап, Нкр90 шЫЬйотк ш !йе сйшс, НапбЬоок Ехр. Рйагтасо1. 172 (2006), р. 331-358.
10. 8.М. Кое, С. Ртобтотои, К. ОБпегс РЕ. ЬабЬиту, Р.У. Р1рег апб Ь.Н. Реаг1, 8!гис!ига1 Ьак1к Гог шН1Ь111оп оГ !йе Нкр90 то1еси1аг сйарегопе Ьу !йе апЛшпог апйЬюйск габююо1 апб де1бапатусш, 1. Меб. Сйет. 42 (1999), р. 260-266.
11. Н.Ь К^оп, М. УокЫба, К. АЬе, 8. Ноппоис1п апб Т. Βерри, Каб1асо1, ап адеп! тбистд 1Не теуегка1 оГ !гапкГогтеб рйепо!урек оГ кгс-!гапкГогтеб ПЬгоЫакК Βίο^ί. Βίο^Πιποί Βίο6^ιη. 56 (1992), р. 538-539.
12. Т.У. 8сйиЙе, 8. АИпада, Т. Митака1а, Т. Адамита, 8. 8ид1то1о, Н. Nакаηο, Υ.8. Ьее, Β.Β. 81теп, Υ. Агдоп, 8. РеЙк, Ό.Ο. Той, Ь.М. №скегк апб 8.У. 8йагта, Л!егас!юп оГ габююо1 гс1!й тетЬегк оГ Ле йеа! кйоск ргсйеш 90 Гатйу оГ то1еси1аг сйарегопек, Мо1. ЕпбосгшоЙ 13 (1999), р. 1435-1448.
13. С1агке, Р.А., Ротегк, М., апб Уогктап, Р. (2006), ЛЫЬйюп оГ Ле то1еси1аг сйарегопе йеа! кйоск ргсйеш 90 ш сапсег: сопкециепсек Гог Ле теди1айоп оГ киту1уа1 ыдпайпд апб шбисйоп оГ се11 беаЛ 1п: Арор!окгс апб Сапсег Тйегару (ОеЬайп, К.-М. апб Ри1ба, 8., Ебк), р. 933-959. У11еу-УСН, ХУепЛетт 6егтапу.
14. С. Ртобтотои, 8.М. Кое, К. ОБпеп, РЕ. ЬабЬиту, Р.У. Р1рег апб Ь.Н. Реаг1, Иепййсайоп апб к!гисЛта1 с11агас1епха1юп оГ Ле АТР/АБР-Ьтбтд к11е Л !Не Нкр90 то1еси1аг сйарегопе, Се11 90 (1997), р. 65-75.
15. 1.6. 8ирко, К.Ь. Нкктап, М.К. бгеуег апб Ь. Ма1кре1к, Ртесйшса1 рйатшасо1одю еуа1иа1юп оГ де1бапатусш ак ап апЛитог адепр Сапсег СйетоЛет. Рйагтасо1. 36 (1995), р. 305-315.
16. К.С. 8сйпиг, М.Ь. Согтап, К.1. 6а11аксйип, Β.Λ. Соорег, М.Р. Бее, 1.Ь. Бо!у, М.Ь. Миххк Ι.Ό. Моуег, С.1. ΌίΟτίο апб Гог ехатр1е ΒιΛη^ε ЛЫЬЛоп оГ Ле опсодепе ргобис! р185е^ЬΒ-2 т νίίτο апб т νίνο Ьу де1бапатуст апб бЛубгоде1бапатусш бегта1Лек, 1. Меб. Сйет. 38 (1995), р. 3806-3812.
17. Ь.К. Ке11апб, 8.Υ. 8йагр, Р.М. Кодегк, Т.6. Муегк апб Р. Уогктап, БТ-беарйогаке ехргеккюп апб (итог се11 кепкИ1У11у ίο 17-а11у1атшо, 17-бетеЛохуде1бапатус1п, ап шЫЬйог оГ йеа! кйоск ргсйеш 90, 1. №Л Сапсег 1пкк 91 (1999), р. 1940-1949.
18. и. Βι^τρ, М. ХУаЙогс Р. Каупаиб, К. 6пткйате, Ь. Ке11апб, М. Уа1епй, I. 1ибкоп апб Р. Уогктап, Рйаттасоктейс-рйаттасобупатк ге1а11опкН1рк Гог Ле Неа! кйоск ргсйеш 90 то1еси1аг сйарегопе 1пН1Ь11ог 17-а11у1атшо, 17-бетеЛохуде1бапатусш т йитап омапап сапсег хеподгай тобе1к, Сйп. Сапсег Кек. 11 (2005), р. 7023-7032.
19. и. Βι^τρ, А. О'Боппей, М. 8сигг, 8. Расеу, 8. 8!ар1е!оп, Υ. Акаб, Ь. 81ттопк, А. Ма1опеу, Р. Каупаиб, М. СатрЬе11, М. ХУаЙогс 8. Ьакйаш, 8. Кауе, Р. ХУогктап апб I. 1ибкоп, Рйаке I рйагтасоктейс апб рйаттасобупатк к!ибу оГ 17-а11у1атшо, 17-бетеЛохуде1бапатуст т ра11еп1к гс1!й абмапсеб тайдпапаек, 1. Сйп. Опсо1. 23 (2005), р. 4152-4161.
20. У. 6ио, Р. Ке1дап, Б. 81еде1, 1. ΖίττοΛ, Ό. 6ик!аГкоп апб Ό. Кокк, Рогтайоп оГ 17-а11у1атшобетеЛохуде1бапатуст (17-АА6) йубгодшпопе Ьу NΛ^(Р)Н:^и^ηοηе ох1богебис!аке 1: го1е оГ 17-АА6 йубтодшпопе ш йеа! кйоск ргсйеш 90 шЫЬйюп, Сапсег Кек. 65 (2005), р. 10006-10015.
21. 1.К. 8убог, Е. №гтапк С.8. Р1еп, 1.К. Ройет, 1. 6е, Ь. 6тешег, К.Н. Рак, кА. А11, М.8. БетЬккк 1.
Нибак, 1. Райеткоп, С. Репбегк, М. Р1пк, М.А. Кеаб, 1. 8апд, С. Уообгсагб, Υ. Ζ^^, Ό.8. 6гау/е1, 1. ХУндИ, 1.А. Βηπό!1 У.1. Ра1отЬе11а, 1. Абатк апб 1.К. Топд, Беуе1ортеп! оГ 17-а11у1атшо-17бетеЛохуде1бапатуст йубгодшпопе йубтосЫопбе (№^504), ап апй-сапсет адеп! бйес!еб адашк! Нкр90,
- 3 019156
Ргос. Ыа11. Асаб. 8οΐ. И8А 103 (2006), р. 17408-17413.
22. К.М. СНеипд, Т.Р. МаккНетак, К. кашек, М.6. КоМапбк, К.1. Вокса11, 8.Υ. 8Нагр, А. Ма1опеу, 8.М. Кое, С. Ргобготои, Ь.Н. Реаг1, 6.№. АНегпе, Е. МсЬопа1б апб Р. №огктап, ТНе 1бепййсайоп, купкНекщ, рго1е1п сгукка1 к1гис1иге апб ш уйго ЬюсНетка1 еуа1иайоп о! а пе\у 3,4-б1агу1руга7о1е с1акк о! Нкр90 тЫЬНогк, Вюогд. Меб. СНет. Ьекк. 15 (2005), р. 3338-3343.
23. 8.Υ. 8Нагр, К. Вокса11, М. Кота1апбк, С. Ргобготои, 8.М. Кое, А. Ма1опеу, М. Ротаегк, Р.А. С1агке, 6. Вох, 8. 8апбегкоп, Ь. Раккегкоп, Т.Р. МаккНетак, К.М. СНеипд, К. Ва11, А. Науек, Е. Каупаиб, К. Магащ, Ь. Реаг1, 8. Есс1ек, №. АНегпе, Е. МсЬопа1б апб Р. №огктап, 1п уйго Ью1одка1 скагаскеп/айоп о! а посек купкНейс б1агу1ругахо1е гекогсшо1 с1акк о! Неак кНоск Ргокеш 90 1пй1Ьйогк, Сапсег Кек. 67 (2007), р. 2206-2216.
24. В.№. Эутоск, X. Ват1, Р.А. ВгоидН, ТЕ. Сап8Йе1б, А. Маккеу, Е. МсЭопа1б, К.Е. НиЬЬагб, А. 8игдепог, 8.Ό. КоидЫеу, Р. №еЬЬ, Р. №огктап, Ь. №йдНк апб М.1. Огукба1е, №сек рокепк кта11-то1еси1е 1пй1Ьйогк о! кНе то1еси1аг сйарегопе Нкр90 бксоуегеб кЬгоидН ккгискиге-Ьакеб беадп, 1. Меб. Сйет. 48 (2005), р. 4212-4215.
25. 8.Υ. 8йагр, С. Ргобготои, К. Вокса11, М.У. Ротаегк, 1.Ь. Но1тек, 6. Вох, Т.Р. МаккНетак, К.М. СНеипд, А. Ка1ика, К. 1атек, А. Науек, А. НагбсакЙе, В. Эутоск, Р.А. ВгоидН, X. Ват1, 1.Е. Сап8Йе1б, Ь. №пдНк, А. 8игдепог, N. Ео1орре, К.Е. НиЬЬагб, №. АНете, Ь. Реаг1, К. 1опек, Е. МсЭопа1б, Е. Каупаиб, 8. Есс1ек, М. Эгукба1е апб Р. №огктап, 1пН1Ь1йоп о! кНе Неак кНоск ргокеш 90 то1еси1аг сНарегопе ш уйго апб ш у|уо Ьу посек купкНейс, рокепк гекогсшуйс ругахо1е/|коксахо1е апибе апа1одиек, Мо1. Сапсег ТНег. 6 (2007), р. 1198-1211.
26. 6. СН1ок1к, М.К Т1таи1, В. Ьисак, ₽.Ν. Мипккег, Е.Е. 2Непд, Ь. 8ерр-Ьогеп/шо апб N. Кокеп, А кта11 то1еси1е беыдпеб ко Ьшб ко кНе абешпе пис1еойбе роскек о! Нкр90 саикек Нег2 бедгабайоп апб кНе дгоМН аггекк апб бкйегепйайоп о! Ьгеакк сапсег се11к, СНет. Вю1. 8 (2001), р. 289-299.
27. М. УйепсЫк, Ό. 8о11к, А. Вакко, Н. Ние/о, В. Ьисак, Н. Не, Ν. Кокеп, С. 8ратршако, Р. МобпсН и 6. СЬ1ок1к, Тагдейпд \у|бе-гапде опсодетс 1гапкГогтайоп У1а РИ24ЕС1, а кресШс 1пН1Ьйог о! китог Нкр90, СНет. Вю1. 11 (2004), р. 787-797.
28. Н. Не, Ό. 2акогкка, к. К1т, к. Адшгге, Ь. Ь1аидег, Υ. 8Не, Ν. №и, К.М. Гтшогтшо, Ь.Т. 6еМгкН апб 6. СЫок1к, Гбепййсайоп о! рокепк таакег ко1иЬ1е риппе-кса!!о1б 1пН1Ьйогк о! кНе Неак кНоск ргокеш 90, к. Меб. СНет. 49 (2006), р. 381-390.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям, обладающим активностью в отношении ингибирования Н8Р90. Согласно настоящему изобретению также предложены композиции и наборы, включающие такие соединения. Дополнительно, настоящее изобретение относится к способам изготовления соединений согласно настоящему изобретению, а также промежуточным соединениям, которые можно использовать в указанных способах.
Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложено соединение формулы
К,
I
или его таутомер, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой О;
К1 представляет собой -Ь-К45;
К2 выбран из группы, включающей водород и метил;
К3 выбран из группы, включающей
К12 выбран из группы, включающей
К4 представляет собой водород;
Кб и К63 оба, представляют водород;
К45 выбран из группы, включающей водород, амино и гидроксил;
Ь представляет собой (-СК46К47-)п;
п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
К46 и К47, каждый, независимо выбраны из группы, включающей водород, гидроксил, амино,
- 4 019156 (С1_б)алкил и гидрокси(С1_б)алкил.
Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтическим композициям, которые включают ингибитор Н8Р90 согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут необязательно содержать 0.001100% одного или более ингибиторов согласно настоящему изобретению. Такие фармацевтические композиции можно вводить или вводить совместно различными путями, включая, например, пероральное, парентеральное, интраперитонеальное, внутривенное, внутриартериальное, чрескожное, сублингвальное, внутримышечное, ректальное, трансбуккальное, интраназальное введения, введение при помощи липосом, введение путем ингаляции, вагинальное введение, введение в глаз и местную доставку (например, при помощи катетера или стента), подкожное введение, введение в жировую ткань, введение в сустав или через трахею. Композиции также можно вводить или вводить совместно в формах с замедленным высвобождением.
Один аспект настоящего изобретения относится к способам приготовления соединений, наборов и изделий согласно настоящему изобретению. Например, в настоящем описании приведено несколько схем синтеза для синтеза соединений согласно настоящему изобретению.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к способам применения соединений и композиций согласно настоящему изобретению.
В одном варианте осуществления соединения и композиции применяют для ингибирования Н8Р90.
В другом варианте осуществления соединения и композиции применяют для лечения болезненных состояний, в отношении которых Н8Р90 обладает активностью или участвует в патогенезе и/или развитии симптомов данного болезненного состояния.
В другом варианте осуществления соединение вводят субъекту в случае, когда активность Н8Р90 в организме субъекта изменена, предпочтительно снижена.
Относительно всех описанных выше вариантов реализации необходимо иметь в виду, что настоящее изобретение охватывает все фармацевтически приемлемые ионизированные формы (например, соли) и сольваты (например, гидраты) соединений, вне зависимости от того, указаны ли такая ионизированная форма или сольват, поскольку они хорошо известны в соответствующей области. Также следует отметить, что, если не указана конкретная стереохимическая структура, предполагается, что указание на соединение охватывает все возможные стереоизомеры (например, энантиомеры или диастереомеры, в зависимости от числа хиральных центров) вне зависимости от того, представлено ли данное соединение в виде отдельного изомера или смеси изомеров. Далее, если не указано другое, подразумевается, что указание на соединение охватывает все возможные резонансные формы и таутомеры. В формуле изобретения выражения соединение, содержащее формулу, соединение, соответствующее формуле и соединение формулы охватывает данное соединение и все фармацевтически приемлемые ионизованные формы и сольваты, все возможные стереоизомеры и все возможные резонансные формы и таутомеры, если в конкретном пункте формулы явно не указано другое.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 показаны 8ЕО ΙΌ N0: 1 и 8ЕО ΙΌ N0: 2, упоминаемые в настоящем описании.
На фиг. 2 показана порошковая рентгеновская дифрактограмма (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-он 0-(8)-3,4дигидроксибутил оксим бензоата, форма А.
На фиг. 3 показаны результаты дифференциальной сканирующей колориметрии и термогравиметрии (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3й]пиримидин-5(6Н)-он 0-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим бензоата, формы А.
Определения
Если не указано другое, приведенные ниже термины используются в данном описании в определенном ниже значении.
Следует отметить, что в настоящем описании и формуле изобретения форма единственного числа включает и множество объектов, если из контекста явно не следует обратное. Кроме того, определения стандартных химических терминов можно найти в справочных изданиях, включая Сагеу апй 8ипйЬегд Айуапсей Отдашс СйетЫгу 5(Н Ей., УоЕ. А (2007) аий В (2007), 8рттдет 8с1епсе+Ви51пе88 Мей1а, Νον Уотк. Также, если не указано другое, используются стандартные методы масс-спектроскопии, ЯМР, ВЭЖХ, химии белка, биохимии, технологии рекомбинантных ДНК и фармакологии, находящиеся в пределах компетенции специалиста в данной области.
* в химической структуре, в частности в радикале, обозначает точку присоединения радикала.
Алкил, представленный отдельно, представляет собой линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, алифатический радикал, цепь которого состоит из атомов углерода. В обычно используемых обозначениях (Сх)алкил и (Сх-у)алкил X и Υ указывают число атомов углерода в цепи. Например, (С1-6)алкил включает алкилы, имеющие цепь, состоящую из 1-6 атомов углерода (например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, сек-бутил, изобутил, трет-бутил, винил, аллил, 1-пропенил, изопротенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метилаллил, этинил, 1-припинил, 2-пропинил и т.п.). Алкил совместно с другим радикалом (например, как в арилалкиле, гетероарилалкиле и т.п.) обозначает линей
- 5 019156 ный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный алифатический двухвалентный радикал, содержащий указанное число атомов, или, если число атомов не указано, обозначает связь (например, (С6 -ю)арил(С1-з)алкил включает бензил, фенэтил, 1-фенилэтил, 3-фенилпропил, 2-тиенилметил, 2пиридинилметил и т.п.). В конкретных вариантах осуществления алкил, отдельно или совместно с другим радикалом, может представлять собой (С1-20)алкил, (С1-15)алкил, (С1-10)алкил, (С1-5)алкил или (С1-3)алкил. В альтернативном варианте алкил, отдельно или совместно с другим радикалом, может представлять собой (С1)алкил, или (С2)алкил, или (С3)алкил.
Амино обозначает азотсодержащую группу, содержащую два дополнительных заместителя, где, например, к азоту присоединен атом водорода или углерода. Например, типичные аминогруппы включают -ΝΗ2, -ННСН3, -Ы(СН3)2, -НН((С1-10)алкил), -Ы((С1-10)алкил)2, -НН(арил), -НН(гетероарил), -Ы(арил)2, -Мгетероарил)2 и т.п. Необязательно, указанные два заместителя вместе с атомом азота образуют цикл. Если не указано другое, соединения согласно настоящему изобретению, содержащие аминогруппы, могут включать их замещенные производные. Подходящие защитные группы для аминогрупп включают ацетил, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил и т.п.
Животное включает людей и млекопитающих, не являющихся людьми (например, собаки, кошки, кролики, крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы, свиньи, олени и т.д.), а также не млекопитающих (например, птица и т.п.).
Заболевание включает, в частности, нездоровое состояние животного или его части и включает нездоровые состояния, которые могут быть вызваны или присущи медицинским или ветеринарным средствам лечения, применяемым к животному, т.е. побочные эффекты такого лечения.
ЕС50 обозначает молярную концентрацию агониста, которая обеспечивает 50% максимального возможного эффекта такого агониста. Действие агониста может быть стимулирующим или ингибирующим.
Гидрокси обозначает радикал -ОН.
1С50 обозначает молярную концентрацию, которая обеспечивает 50% ингибирование целевого фермента.
Изомеры обозначают соединения, имеющие идентичные молекулярные формулы, но различающиеся по природе последовательности соединения атомов или по расположению атомов в пространстве. Изомеры, которые различаются расположением атомов в пространстве, называются стереоизомерами. Стереоизомеры, которые являются зеркальным отражением друг друга, называются диастереомерами, а стереомеры, которые на являются накладывающимися зеркальными отражениями, называются энантиомерами или иногда оптическими изомерами, атом углерода, связанный с четырьмя неидентичными заместителями, называется хиральным центром, соединение с одним хиральным центром имеет две энантиомерные формы противоположной хиральности. Смесь двух энантиомерных форм называется рацемической смесью. Соединение с одним или более хиральными центрами имеет 2П-1 энантиомерных пар, где η - это число хиральных центров. Соединения с одним или более хиральными центрами могут существовать либо в форме отдельного диастереомера, либо в форме смеси диастереомеров, называемой диастереомерной смесью. В случае присутствия одного хирального центра стереоизомер может характеризоваться абсолютной конфигурацией этого хирального центра. Абсолютная конфигурация относится к пространственному расположению заместителей, присоединенных к хиральному центру. Энантиомеры характеризуются абсолютной конфигурацией хиральных центров и описываются в соответствии с правилами последовательностей К.- и 8-, предложенными Сайп, 1пдо1к и Рге1од. Правила стереохимической номенклатуры, методы определения стереохимической структуры и разделения стереоизомеров хорошо известны в соответствующей литературе (например, см. Лйтапеей Огдаше Сйешщйу, 5(Н екйюп, Магсй, 1еггу, 1ойп \УПеу & 8оп§, №\ν Уогк, 2001).
Уходящая группа обозначает группу в смысле, принятом в синтетической органической химии, т.е. атом или группу, которая может быть удалены в условиях реакции (например, алкилирования). Примеры уходящих групп включают, но не ограничиваются перечисленными, галоген (например, Г, С1, Вг и I), алкил (например, метил и этил) и сульфонилокси (например, мезилокси, этансульфонилокси, бензолсульфонилокси и тозилокси), тиометил, тиенилокси, дигалофосфиноилокси, тетрагалофосфокси, бензилокси, изопропилокси, ацилокси и т.п.
Фармацевтически приемлемый обозначает пригодный для приготовления фармацевтической композиции, которая в общем безопасна, не токсична и не обладает нежелательными с биологической или другой точки зрения свойствами, и включает объекты, приемлемые для использования в ветеринарии, а также для фармацевтического применения для людей.
Фармацевтически приемлемые соли обозначают соли соединений согласно настоящему изобретению, которые являются фармацевтически приемлемыми в определенном выше смысле и которые обладают желаемой фармакологической активностью. Такие соли включают соли присоединения, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексаноевая кислота, гептаноевая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота,
- 6 019156 янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винно-каменная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, о-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, р-хлоробензолсульфоновая кислота, 2нафталинсульфоновая кислота, р-толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4метилбицикло[2.2.2]окс-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 4,4'-метилен-бис-(3гидрокси-2-ен-1-карбоновая кислота), 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, третбутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глютаминовая кислота, гидроксинафтоевая кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п.
Фармацевтически приемлемые соли также включают соли присоединения основания, которые могут быть образованы, если присутствующие протоны кислоты способны взаимодействовать с неорганическими и органическими основаниями. Подходящие неорганические основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид алюминия и гидроксид кальция. Приемлемые органические основания включают этаноламин, биэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, Νметилглюкамин и т.п.
Защищенные производные обозначает производные, в которых реактивный сайт или сайты блокированы защитными группами. Защищенные производные пригодны для изготовления ингибиторов или могут сами обладать ингибирующей активностью. Подробный перечень защитных групп можно найти в Р.С.М. Аий апб Т.А. Сгееие, Сгееие'к Рго1ес1шд Сгоирк ίη Огдашс 8уШ11С515. 41П ебйюи, 1о1т Абеу & 8ои5, 1ис. 2007.
Субъект и пациент включают людей и млекопитающих, не являющихся людьми (например, собаки, кошки, кролики, крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы, свиньи, олени и т.д.), а также не млекопитающих (например, птица и т.п.).
Терапевтически эффективное количество обозначает количество, которое при введении животному для лечения заболевания является достаточным для того, чтобы обеспечить такое лечение заболевания.
Терапия или лечение обозначает любое введение (применение) соединения согласно настоящему изобретению и включает:
(1) предотвращение возникновения заболевания у животного, которое может быть предрасположено к такому заболеванию, но у которого оно еще не проявилось, или которое не демонстрирует патологической картины или симптомов такого заболевания, (2) подавление заболевания у животного, испытывающего или демонстрирующего патологическую картину или симптомы, характерные для больного (т.е. блокирование дальнейшего развития патологической картины или симптомов), или (3) снижение выраженности заболевания у животного, испытывающего или демонстрирующего патологическую картину или симптомы, характерные для больного (т.е. обращение патологической картины или симптомов).
Относительно всех приведенных в настоящем описании определений следует отметить, что они являются открытыми в том смысле, что могут быть включены другие заместители, помимо указанных. Таким образом (С1)алкил указывает на то, что присутствует один атом углерода, но не указывает на то, какие существуют заместители при данном атоме углерода. Соответственно, (С1)алкил включает метил (т.е. -СН3), а также -СЯЯ'Я, где Я, Я' и Я, каждый, независимо и необязательно могут представлять собой водород или дополнительный заместитель, в котором атом, связанный с данным атомом углерода, представляет собой гетероатом или циано. Следовательно, СР3, СН2ОН и ΟΗ2ΟΝ, примерами являются все (С|)алкилы. Аналогично, такие термины, как алкиламино и т.п., включают диалкиламино и т.п.
Кроме того, предполагается, что атомы, образующие настоящее соединение, включают все изотопы таких атомов. В настоящем описании изотопы включают все атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. В качестве неограничивающего примера, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают 13С и 14С.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые можно применять для ингибирования Н8Р90. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим такие соединения. Дополнительно, настоящее изобретение относится к способам и промежуточным соединениям, которые можно использовать для изготовления указанных соединений. Кроме того, настоящее изобретение относится к способам применения таких соединений. Следует отметить, что соединения согласно настоящему изобретению могут также обладать активностью в отношении других членов того же семейства белков и, таким образом, их можно применять в отношении болезненных состояний, связанных с указанными другими членами данного семейства.
Следует отметить, что соединения согласно настоящему изобретению могут также обладать ингибирующей активностью в отношении других членов семейства Н8Р, и таким образом, их можно использовать при заболеваниях, связанных с этими другими членами данного семейства.
- 7 019156
Соединения согласно настоящему изобретению.
Согласно одному из аспектов настоящего изобретения предложены соединения, которые можно применять в качестве ингибиторов Н8Р90. В одном варианте осуществления ингибитор Н8Р90 согласно настоящему изобретению имеет формулу
или его таутомер, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой О;
Я! представляет собой -Ь-Я45;
Я2 выбран из группы, включающей водород и метил;
Я3 выбран из группы, включающей
Я12 выбран из группы, включающей
Я4 представляет собой водород;
Я6 и Я63 оба, представляют водород;
Я45 выбран из группы, включающей водород, амино и гидроксил;
Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)П;
η равно 1, 2, 3, 4 или 5;
Я46 и Я47, каждый, независимо выбраны из группы, включающей водород, гидроксил, амино, (С1-6)алкил и гидрокси(С1-6)алкил.
X.
В одном варианте описанных выше примеров осуществления соединений согласно настоящему изобретению X представляет собой О.
Я1.
В одном конкретном варианте указанных выше примеров осуществления соединений согласно настоящему изобретению Я1 представляет собой -Ь-Я45, где Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)П; η равно 1, 2, 3, 4 или 5; Я45 независимо выбран из группы, включающей водород, гидроксил, амино.
В других вариантах Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)5. В других вариантах Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)4. В других вариантах Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)3. В других вариантах Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)2. В других вариантах Ь представляет собой -(СЯ46Я47)-. Ь представляет собой (-СЯ46Я47-)П, Я46 и Я47, каждый, независимо выбраны из группы, включающей водород, гидрокси, амино, (С1-6)алкил и гидрокси(С1-6)алкил.
В других вариантах Я46 и Я47, оба, представляют собой водород.
Я2.
В другом варианте осуществления и вариантов соединений согласно настоящему изобретению Я2 выбран из группы, включающей водород, метил.
Я4.
В одном варианте Я4 представляет собой водород.
Я6.
В одном варианте Я6 представляет собой водород.
Я3.
В одном варианте указанных выше примеров осуществления соединений согласно настоящему изобретению Я3 выбран из группы, включающей
- 8 019156
Κ12·
В описанных выше примерах и вариантах осуществления настоящего изобретения, в некоторых вариантах, К12 выбран из группы, включающей
Конкретные примеры соединений согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее:
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-3,4-дигидроксибутил оксим;
(7К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-3,4-дигидрокси-4-метилпентил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(3'-(циклопропилсульфонил)-5-фторбифенил-2-ил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2-амино-3-гидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(2-(5-амино-6-метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиразин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-метокситиазол-4-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-4,5-дигидроксипентил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3-амино-2-гидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидроксипропил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-4-гидроксибутил оксим;
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-4,5-дигидроксипентил оксим;
(8,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3П]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-3,4-дигидроксибутил оксим.
В других аспектах настоящее изобретение относится к способам получения соединений, пригодных в качестве ингибиторов Н8Р90.
В одном варианте осуществления предложен способ, включающий осуществление реакции соединения формулы
с соединением формулы Η2Ν-Ο-Κ1 в условиях, в которых образуется промежуточное соединение, имеющее формулу
осуществление реакции указанного промежуточного соединения с соединением формулы
- 9 019156
в условиях, в которых образуется продукт, имеющий формулу
I
где Я! и Я2 имеют значения, указанные выше.
В другом варианте осуществления способ получения соединения согласно настоящему изобретению включает осуществление реакции соединения формулы с соединением формулы
в условиях, в которых образуется промежуточное соединение, имеющее формулу
и осуществление реакции указанного промежуточного соединения с соединением формулы Η2Ν-ΟΒι в условиях, в которых образуется продукт, имеющий формулу
/О где Κι и Я2 имеют значения, указанные выше.
В еще одном варианте осуществления способ получения соединения согласно настоящему изобретению включает осуществление реакции соединения формулы
- 10 019156 с исходным материалом I, имеющим формулу
в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Е, имеющее формулу
группу, выбранную из группы, включающей где РС представляет собой защитную ((С1-6)3алкил)силил, (((С1-6)алкил)3-к)(фенил)к)силил, причем к равен 0-3, бензил и тетрагидропиранил; К2 имеет значения, указанные выше.
В описанных выше вариантах осуществления соединение может быть получено способом А, включающим осуществление сочетания исходного материала II, имеющего формулу
с указанным промежуточным соединением Е, что обеспечивает образование промежуточного соединения С, имеющего формулу
осуществление сочетания исходного материала III, имеющего формулу
с указанным промежуточным соединением С в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Н, имеющего формулу
снятие защиты с промежуточного соединения Н в условиях, в которых образуется продукт, имеющий формулу
где Κ1 ρ представляет собой защищенную форму Κβ
К! имеет значения, указанные выше;
К12 имеет значения, указанные выше.
В описанных выше вариантах осуществления соединение может быть получено способом В, включающим
- 11 019156 снятие защиты с промежуточного соединения Р в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Р', имеющее формулу
осуществление сочетания исходного материала II, имеющего формулу
с указанным промежуточным соединением Р', что обеспечивает образование промежуточного соединения С, имеющего формулу
осуществление сочетания исходного материала III, имеющего формулу
с указанным промежуточным соединением С в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Н, имеющее формулу кг
снятие защиты с промежуточного соединения Н в условиях, в которых образуется продукт, имеющий формулу
I
где Я1 р представляет собой защищенную форму Κ1;
Я1 имеет значение, указанное выше;
Я12 имеет значение, указанное выше.
Другой способ, пригодный для получения соединений согласно настоящему изобретению, включает осуществление реакции соединения формулы
с исходным материалом I, имеющим формулу
в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Р, имеющее формулу
- 12 019156
снятие защиты с промежуточного соединения Р в условиях, в которых образуется промежуточное соединение Р', имеющее формулу
осуществление сочетания исходного материала III, имеющего формулу
с промежуточным соединением Р' в условиях, в которых образуется промежуточное соединение I, имеющее формулу
снятие защиты, а затем осуществление сочетания исходного материала II, имеющего формулу
с промежуточным соединением I в условиях, в которых образуется продукт, имеющий формулу
где Κ1 ρ представляет собой защищенную форму Κι;
Κι имеет значение, указанное выше;
К2 имеет значение, указанное выше;
Κ12 имеет значение, указанное выше.
Во всех описанных выше вариантах осуществления способов в некоторых вариантах Κ1 представляет собой -Ь-К45, где Ь представляет собой (-СК46К47-)П, где η равно 1, 2, 3, 4 или 5; Κ46 и Κ47, каждый, независимо выбраны из группы, включающей водород, гидроксил, гидрокси(С1-6)алкил, амино, (С1-6)алкил;
Κ45 независимо выбран из группы, включающей водород, гидроксил, амино.
В некоторых вариантах способа согласно настоящему изобретению Κ2 выбран из группы, включающей водород, метил.
В описанных выше вариантах осуществления способов согласно настоящему изобретению Κ12 выбран из группы, включающей
Следует отметить, что соединения согласно настоящему изобретению могут иметь форму фармацевтически приемлемой соли, биоразлагаемого эфира, биогидролизуемого амида, биогидролизуемого карбамата, сольвата, гидрата или пролекарства. Например, соединение необязательно содержит заместитель, который ίη νίνο может превратиться в другой заместитель, например водород.
- 13 019156
Далее следует отметить, что соединение может быть представлено в виде смеси стереоизомеров, либо соединение может быть представлено в виде единственного стереоизомера.
Согласно другому аспекту предложена композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение согласно любому из описанных выше вариантов воплощения или вариантов. В одном конкретном варианте композиция представляет собой твердую форму, пригодную для перорального введения. В другом конкретном варианте композиция представляет собой жидкую форму, пригодную для перорального введения. В еще одном конкретном варианте композиция представляет собой таблетку. В еще одном конкретном варианте композиция представляет собой жидкую лекарственную форму, пригодную для парентерального введения.
Согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно любому из описанных выше вариантов и примеров осуществления, причем указанная композиция пригодна для введения путем, выбранным из группы, включающей пероральное, парентеральное, интраперитонеальное, внутривенное, внутриартериальное, чрескожное, сублингвальное, внутримышечное, ректальное, трансбуккальное, интраназальное введения, введение при помощи липосом, введение путем ингаляции, вагинальное введение, введение в глаз и местную доставку (например, при помощи катетера или стента), подкожное введение, введение в жировую ткань, введение в сустав или через трахею.
Согласно еще одному аспекту предложен способ лечения болезненного состояния, в отношении которого Н8Р90 обладает активностью, которая вносит вклад в патогенез и/или симптоматику данного болезненного состояния, причем указанный способ включает обеспечение присутствия соединения согласно любому из описанных выше вариантов и примеров осуществления в количестве, терапевтически эффективном для данного болезненного состояния.
В каждом из указанных выше вариантов болезненное состояние выбрано из группы, включающей рак, воспаление, воспалительное заболевание кишечника, псориаз, артрит и отторжение трансплантата.
В одном из вариантов каждого из описанных выше способов болезненное состояние представляет собой рак. Рак выбран из группы, включающей плоскоклеточную карциному, астроцитому, саркому Капоши, глиобластому, немелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, меланому, рак яичника, рак предстательной железы, рак груди, мелкоклеточный рак легкого, глиому, рак прямой и ободочной кишки, рак мочеполовой системы, рак желудочно-кишечного тракта, рак почки, раковые заболевания крови, неходжкинскую лимфому, лимфому, множественную миелому, лейкемию (включая острую миелогенную лейкемию, хроническую миелогенную лейкемию, хроническую лимфоцитарную лейкемию), миелодиспластический синдром и мезотелиому.
В одном из вариантов каждого из описанных выше способов Н8Р90 предоставляет Н8Р90а. В другом варианте Н8Р90 представляет собой Η8Ρ90β.
Соли, гидраты и пролекарства ингибиторов Н8Р90.
Следует понимать, что соединения согласно настоящему изобретению могут быть представлены и их можно необязательно вводить в форме солей, гидратов и пролекарств, которые ίη νίνο превращаются в соединения согласно настоящему изобретению. Например, в объем настоящего изобретения входят превращение соединений согласно настоящему изобретению в и использование их в форме фармацевтически приемлемых солей, полученных из различных органических и неорганических кислот и оснований в соответствии с известными процедурами.
В случае, когда у соединения согласно настоящему изобретению есть форма свободного основания, такие соединения можно приготовить в форме фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой, например гидрогалидом, таким как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид; другие минеральные кислоты и соответствующие соли, такие как сульфат, нитрат, фосфат и т.д.; а также алкил- и моноарил и моноарилсульфонаты, такие как этансульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат; а также другие органические кислоты и соответствующие соли, такие как ацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитра, бензоат, салицилат и аскорбат. Другие соли присоединения кислот согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются перечисленными, адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камформат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, циклопентанпропионат, диглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, фумарат, галактерат (из муциновой кислоты), галактуронат, глюкогептонат, глюконат, глютамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, иодид, изотионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малонат, мандалат, метафосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, олеат, памоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат и фталат. Следует понимать, что формы свободных оснований обычно несколько отличаются от соответствующих солей по физическим свойствам, таким как растворимость в полярных растворителях, но в остальном соли эквивалентны соответствующим формам свободных оснований для целей настоящего изобретения.
В случае, когда у соединений согласно настоящему изобретению есть форма свободной кислоты,
- 14 019156 могут быть получены фармацевтически приемлемые соли присоединения основания путем осуществления реакции соединения в форме свободного основания с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Примерами таких оснований являются гидроксиды щелочных металлов, включая гидроксиды калия, натрия и лития; гидроксиды щелочно-земельных металлов, такие как гидроксиды бария и кальция; алкоксиды щелочных металлов, например этанолат калия и пропанолат натрия; и различные органические основания, такие как гидроксид аммония, пиперидин, диэтаноламин и Ν-метилглютамин. Также предусмотрены аммонийные соли соединений согласно настоящему изобретению. Другие соли оснований согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются перечисленными, соли меди, соли двухвалентного и трехвалентного железа, соли лития, магния, соли двухвалентного и трехвалентного марганца, калия, натрия и цинка. Соли органических оснований включают, но не ограничиваются перечисленными, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, например аргинин, бетаин, кафеин, хлорпрокаин, холин, Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин (бензатин), дициклогексиламин, диэтаноламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-этилморфолин, Ν-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабрамин, изопропиламин, лидокаин, лизин, меглумин, Ν-метил-Э-глютамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминовые смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтаноламин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трис-(гидроксиметил)метиламин (трометанамин). Следует понимать, что формы свободных кислот обычно несколько отличаются от соответствующих солей по физическим свойствам, таким как растворимость в полярных растворителях, но в остальном соли эквивалентны соответствующим формам свободных оснований для целей настоящего изобретения.
Соединения согласно настоящему изобретению, которые включают основные группы, содержащие азот, могут быть кватернизированы такими агентами, как (С1-4)алкилгалиды, например метил, этил, изопропил и трет-бутил хлориды, бромиды и иодиды; ди(С1-4)алкилсульфаты, например диметил, диэтил и диамил сульфаты; (С10-18)алкилгалиды, например децил-, додецил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, бромиды и иодиды; а также арил(С1-4)алкилгалиды, например бензилхлорид и фенэтилбромид. Такие соли обеспечивают получение как водорастворимых, так и жирорастворимых соединений согласно настоящему изобретению.
Также могут быть получены защищенные производные соединений согласно настоящему изобретению. Примеры методик, которые можно применять для получения защитных групп и их удаления, можно найти в Р.С.М. \Уи1к апб Т.^. Сгсспс ίη Сгсспс'к Рго1сс11ус Сгоирк ίη Огдашс 8упШек1к 41П сббюп. ίοΐιη \УПеу αη6 δοηκ, 2007.
Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть легко получены или сформированы в процессе осуществления способов согласно настоящему изобретению в форме сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений согласно настоящему изобретению могут быть легко получены путем рекристаллизации из смеси водного/органического растворителей, таких как диоксин, тетрагидрофуран или метанол.
В настоящем описании фармацевтически приемлемая соль включает любое соединение согласно настоящему изобретению, которое применяют в форме соли, в частности, если соль обеспечивает улучшенную фармакокинетику соединения по сравнению со свободной формой соединения или другой солевой формой соединения. Форма фармацевтически приемлемой соли может также, в первую очередь, обеспечивать желаемые фармакокинетические свойства соединения, которыми оно ранее не обладало, и может даже положительно влиять на соединение в отношении его терапевтической активности в организме. Примером фармакокинетического свойства, на которое может быть оказано положительное влияние, является путь, которым данное соединение транспортируется через мембрану клетки, что, в свою очередь, может оказать прямое и положительное влияние на всасывание, распределение, биотрансформацию и выведение соединения. Хотя путь введения фармацевтической композиции имеет важное значение, и различные анатомические, физиологические и патологические факторы могут значительно снизить биодоступность, растворимость соединения обычно зависит от природы конкретной соли, которая используется. Для специалиста очевидно, что водный раствор соединения обеспечивает наиболее быстрое всасывание соединения в организме субъекта, которого лечат, а жировые растворы и суспензии, а также твердые лекарственные формы замедляют всасывание соединения.
Применение соединений согласно настоящему изобретению.
Одна группа симптомов, для лечения которых можно использовать ингибиторы Н8Р90 согласно настоящему изобретению, представляет собой симптомы, включающие нежелательную или неконтролируемую пролиферацию клеток. Такие симптомы включают доброкачественные опухоли, различные типа раковых заболеваний, такие как первичные опухоли и метастазы опухолей, рестеноз (например, поражение сердечных, сонных и церебральных сосудов), анормальная стимуляция клеток эндотелия (атеросклероз), повреждения тканей организма в результате хирургического вмешательства, анормального заживления ран, заболеваний, которые приводят к фиброзу тканей, травмы от повторяющихся движений, нарушения тканей, которые на являются высоковаскуляризированными, пролиферативные реакции, связанные с трансплантацией органов, нейродегенеративные заболевания, включая болезнь Паркинсона,
- 15 019156 болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона и прионные заболевания, воспаление и заболевания, связанные с воспалением, такие как боль, головные боли, лихорадка, артрит, астма, бронхит, тендоинит, экзема, воспалительное заболевание кишечника и заболевания, зависимые от ангиогенеза, такие как рак, артрит, диабетическая ретинопатия, возрастная дегенерация желтого пятна (ΑΜΌ) и инфекционные заболевания, в частности грибковые инфекции, вирусные заболевания, включая, но не ограничиваясь перечисленными, заболевания, вызванные вирусом гепатита В (ИВУ), вирусом гепатита С (НСУ) и вирусом простого герпеса типа 1 (Н8У-1), заболевания сердечно-сосудистой и центральной нервной систем3, 4 5 6 7.
В целом, клетки в доброкачественных опухолях сохраняют свои дифференцированные признаки и не делятся полностью неконтролируемым образом. Доброкачественная опухоль обычно локализована и не образует метастазы. Конкретные типа доброкачественных опухолей, которые можно лечить ингибиторами Н8Р90 согласно настоящему изобретению, включают следующее: гемангиомы, гепатоцеллюлярные аденомы, кавернозные гемангиомы, фокальная нодулярная гиперплазия, нейромы слухового нерва, нейрофиброма, цистанома желчных протоков, фиброма, липомы, лейомиомы, мезотелиомы, тератомы, миксомы, нодулярная регенеративная гиперплазия, трахома и пирогенные гранулемы.
В случае злокачественных опухолей клетки становятся недифференцированными, не отвечают на сигналы контроля роста со стороны организма и размножаются неконтролируемым образом. Злокачественные опухоли инвазивны и способны к распространению в отдаленные участки (метастазированию). Злокачественные опухоли обычно делят на две категории: первичные и вторичные. Первичные опухоли возникают непосредственно в ткани, где их обнаруживают. Вторичные опухоли или метастазы образуются в другом участке организма, но распространяются в отдаленные органы. Обычные пути метастазирования представляют собой прямое прорастание в прилежащие структуры, распространение по кровеносной или лимфатической системам и распространение вдоль пластов тканей и пустот организма (перетонеальная жидкость, цереброспинальная жидкость и т.д.).
Конкретные типы раковых заболеваний или злокачественных опухолей, первичных или вторичных, которые можно лечить с использованием ингибиторов Н8Р90 согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются следующими, лейкемию, рак молочной железы, рак мочеполовой системы, рак кожи, рак кости, рак предстательной железы, рак печени, рак легкого, рак мозга, рак гортани, рак желчного пузыря, рак поджелудочной железы, рак прямой кишки, рак паращитовидной железы, рак щитовидной железы, надпочечников, нервной ткани, мочевого пузыря, головы и шеи, толстой кишки, желудка, рак прямой и толстой кишки, бронхов, почки, базальноклеточная карцинома, плоскоклеточная карцинома язвенного и папилларного типов, метастазирующая карцинома кожи, остеосаркома, саркома Эвинга, ретикулосаркома, миелома, гигантскоклеточная саркома, мелкоклеточная опухоль легкого, немелкоклеточная опухоль легкого, опухоль островковых клеток, первичная опухоль мозга, острые и хронические лимфоцитарные и гранулоцитарные опухоли, волосковоклеточные опухоли, аденома, гиперплазия, карцинома спинного мозга, феохромоцитома, тисока1 псигоптк. интестинальные ганглионейромы, гиперпластическая опухоль роговичного нерва, опухоль тагГапоН ЬаЬйик (марфаноидный внешний вид), опухоль Вильма, семинома, опухоль яичника, лейомиома, дисплазия и ίη κίΐιι карцинома шейки матки, нейробластома, ретинобластома, карцинома мягких тканей, злокачественный карциноид, местные поражения кожи, рак желудочно-кишечного тракта, злокачественные опухоли крови, миелодиспластический синдром, грибковые микозы, рабдомиосаркома, астроцитома, неходжкинская лимфома, саркома Капоши, остеогенная и другие саркомы, злокачественная гиперкальцемия, гипернефрома, истинная полицитемия, аденокарцинома, мультиформная глиобластома, глиома, лейкемия (включая острую миелогенную лейкемию, хроническую миелогенную лейкемию, хроническую лимфоцитарную лейкемию), лимфомы, злокачественные меланомы, плоскоклеточные карциномы и другие саркомы.
Ингибиторы Н8Р90 согласно настоящему изобретению можно также использовать для лечения абнормальной пролиферации клеток вследствие повреждения тканей в ходе хирургического вмешательства. Такие повреждения могут возникать в результате разнообразных хирургических процедур, таких как операции на суставах, операции на кишечнике и образование келоидных рубцов. Заболевания, которые вызывают образование фиброзной ткани, включают эмфизему. Нарушения в результате повторяющихся движений, которые можно лечить согласно настоящему изобретению, включают синдром запястного туннеля. Пример нарушения, связанного с пролиферацией клеток, которое можно лечить согласно настоящему изобретению, включает рак кости.
Пролиферативные реакции, связанные трансплантацией органов, которые можно лечить с использованием ингибиторов Н8Р90 согласно настоящему изобретению, включают пролиферативные ответы, которые вносят вклад в возможное отторжение органа или связанные с ним осложнения. В частности, такие пролиферативные реакции могут возникать в ходе трансплантации сердца, легкого, печени, почки и других органов или систем тела.
Анормальный ангиогенез, который можно лечить с использованием настоящего изобретения, включает анормальный ангиогенез, сопровождающий ревматоидный артрит, ишемическиреперфузионный отек и повреждение мозга, ишемию коры, гиперплазию и гиперваскуляризацию яичников (синдром поликистозных яичников), эндометриоз, псориаз, диабетическую ретинопатию и другие ангиогенные заболевания глаз, такие как ретинопатия недоношенных (ретролентальная фиброплазия)
- 16 019156 дегенерация желтого пятна, отторжение трансплантата роговицы, неоваскулярная глаукома и синдром Остера-Вебера.
Примеры связанных с неконтролируемым ангиогенезом заболеваний, которые можно лечить согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленными, неоваскуляризацию сетчатки/сосудистой оболочки и неоваскуляризацию роговицы. Примеры неоваскуляризации сетчатки/сосудистой оболочки включают, но не ограничиваются перечисленными, заболевания Бетца (Вс5(5) миому, ямки диска зрительного нерва, болезнь Старгарта, Болезнь Педжета, окклюзию вен, окклюзию артерий, серповидно-клеточную анемию, саркоид, сифилис, эластическую псевдоксантому, каротидную обструкцию, хронический увеит, витрит, микобактериальные инфекции, болезнь Лайма, системную красную волчанку, ретинопатию недоношенных, болезнь Илза, диабетическую ретинопатию, дегенерацию желтого пятна, болезнь Бекета, инфекции, вызывающие ретинит или воспаление сосудистой оболочки глаза, возможно гистоплазмоз, промежуточный увеит (рагк ρΐαηίΐίδ). хроническое отслоение сетчатки, синдромы гипервязкости, травмы и осложнения после вмешательства с использованием лазера, заболевания, связанные с неоваскуляризацией угла глаза, и заболевания, вызванные анормальной пролиферацией сосудисто-волокнистой или фиброзной ткани, включая все формы витреоретинопатии. Примеры неоваскуляризации роговицы включают, но не ограничиваются перечисленными, эпидемический кератоконъюнктивит, дефицит витамина А, переутомление от контактных линз, аропический кератит, верхний лимбальный кератоконъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит, синдром Сьергена, красные угри, фликтенулез, диабетическая ретинопатия, ретинопатия недоношенных, отторжение трансплантата роговицы, язва Мурена, краевая дегенерация Террьена, краевой кератолиз, полиартерит, саркоидоз Вегенара, воспаление склеры, пемфигоид, радиальная кератотомия, неоваскулярная глаукома и ректрорентальная фиброплазия, сифилис, инфекция микобактериями, жировое перерождение, химические ожоги, грибковые изъязвления, инфекция простым вирусом Герпеса, инфекция вирусом опоясывающего герпеса, инфекция, вызванная простейшими и саркома Капоши.
Хронические воспалительные заболевания, связанные с неконтролируемым ангиогенезом, также можно лечить ингибиторами Η8Ρ90 согласно настоящему изобретению. Хроническое воспаление зависит от непрерывного прорастания капилляров, которое обеспечивает приток клеток воспаления. Приток и присутствие клеток воспаления обеспечивает образование гранулем и таким образом поддерживает состояние хронического воспаления. Подавление ангиогенеза при помощи ингибитора Η8Ρ90 или в комбинации с другими противовоспалительными агентами могут предотвратить образование гранулем и таким образом облегчат заболевание. Примеры хронических воспалительных заболеваний включают, но не ограничиваются перечисленными, воспалительные заболевания кишечники, такие как болезнь Крона и язвенный колит, псориаз, саркоидит и ревматоидный артрит.
Воспалительные заболевания кишечника, такие как болезнь Крона и язвенный колит, характеризуются хроническим воспалением и ангиогенезом в различных отделах желудочно-кишечного тракта. Например, болезнь Крона возникает в форме трансмурального воспалительного заболевания, которое наиболее часто поражает дистальную подвздошную кишку и прямую кишку, но может возникать в любой части желудочно-кишечного тракта, от рта до ануса и прианальной области. Пациенты с болезнью Крона обычно страдают хронической диареей, ассоциированной с абдоминальной болью, лихорадкой, анорексией, потерей веса, а также вздутием живота. Язвенный колит также представляет собой хроническое, неспецифическое воспалительное и язвенное заболевание, возникающее в слизистой оболочки толстой кишки, и характеризуется кровавой диареей. Воспалительные заболевания кишечника обычно вызываются хроническим гранулематозным воспалением в желудочно-кишечном тракте, включающим образование новых сосудов, окруженных оболочкой из воспалительных клеток. Подавление ангиогенеза ингибиторами согласно настоящему изобретению, вероятно, обеспечит подавление образования новых капилляров и предотвращение образования гранулем. Воспалительные заболевания кишечника также имеют дополнительные кишечные проявления, такие как поражения кожи. Такие поражения характеризуются воспалением и ангиогенезом и могут возникать во многих участках вне желудочно-кишечного тракта. Ингибирование ангиогенеза ингибиторами Η8Ρ90 согласно настоящему изобретению может снизить приток клеток воспаления и предотвратить образование повреждений.
Саркоидит, другое воспалительное заболевание, характеризуется как мультисистемное грануломатозное нарушение. Гранулемы при этом заболевании могут образовываться в любом участке тела. Соответственно, симптомы зависят от участка с гранулемами, от активности заболевания. Гранулемы образованы разрастаниями капилляров, которые обеспечивают постоянную доставку питания клеткам воспаления. Применение ингибиторов Η8Ρ90 согласно настоящему изобретению для подавления ангиогенеза может привести к подавлению образования таких гранулем. Псориаз, который также является хроническим воспалительным рецидивирующим заболеванием, характеризуются папулами и бляшками различного размера. Лечение с использованием таких ингибиторов отдельно или в комбинации с противовоспалительными агентами, вероятно, обеспечит предотвращение образование новых кровеносных сосудов, необходимых для поддержания характерных поражений и облегчение симптомов у пациента.
Ревматоидный артрит (РА) также представляет собой хроническое воспалительное заболевание, характеризующееся неспецифическим воспалением периферических суставов, считают, что кровеносные
- 17 019156 сосуды в синовиальной выстилке также претерпевают ангиогенез. В дополнение к образованию новых сосудистых сетей, клетки эндотелия высвобождают факторы и активные молекулы кислорода, что приводит к росту паннуса и разрушению хряща. Факторы, вовлеченные в ангиогенез, могут активно участвовать и способствовать поддержанию состояния хронического воспаления при ревматоидном артрите. Лечение с использованием ингибиторов Н8Р90 согласно настоящему изобретению отдельно или в комбинации с антиревматоидными агентами, возможно, обеспечит предотвращение образования новых кровеносных сосудов, необходимых для поддержания хронического воспаления и обеспечат облегчение симптомов у пациента, страдающего РА.
Комбинированная терапия.
Разнообразные терапевтические агенты могут оказывать действие, аддитивное или синергетическое действию ингибиторов Н8Р90 согласно настоящему изобретению. Комбинированные средства терапии, которые включают один или более соединений согласно настоящему изобретению с одним или более другими терапевтическими агентами, можно использовать, например, для: 1) усиления терапевтического эффекта (эффектов) одного или более соединений согласно настоящему изобретению и/или указанных одного или более терапевтических агентов; 2) снижения побочных эффектов одного или более соединений согласно настоящему изобретению и/или указанных одного или более терапевтических агентов; и/или 3) снижения эффективной дозы одного или более соединений согласно настоящему изобретению и/или указанных одного или более терапевтических агентов. Следует отметить, что комбинированная терапия включает случай, когда агенты вводят до или после друг друга (последовательное введение), а также случай, когда агенты вводят одновременно.
Примеры таких терапевтических агентов, которые можно использовать в комбинации с ингибиторами Н8Р90, включают, но не ограничиваются перечисленными, средства против пролиферации клеток, противораковые агенты, алкилирующие агенты, антибиотические агенты, гормональные агенты, агенты растительного происхождения и биологические агенты.
Средства против пролиферации клеток (антипролиферативные агенты) - это агенты, которые подавляют нежелательную и неконтролируемую пролиферацию клеток. Примеры антипролиферативных агентов, которые можно использовать в комбинации с ингибиторами Н8Р90 согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленными, ретиноидную кислоту и ее производные, 2-метоксиэстрадиол, белок АНСЮЗТАТШ™. белок ЕЯООЗТАТШ™, сурамин, скваламин, тканевый ингибитор металлопротеиназы-1, тканевый ингибитор металлопротеиназы-2, ингибитор активатора плазминогена-1, ингибитор активатора плазминогена-2, хрящевой ингибитор, паклитаксел, тромбоцитарный фактор 4, протамин сульфат (клупеин), сульфатированные производные хитина (полученные из панциря краба-стригуна), сульфатированный комплекс полисахарид-пептидогликан (§р-рд), стауроспорин, модуляторы метаболизма матрикса, включая, например, аналоги пролина (Б-азетедин-2-карбоновая кислота (БАСА)), цисгидроксипролин, б,1-3,4-дегидропролин, тиапролин, бета-аминопропионитрил фумарат, 4пропил-5-(4-пиридинил)-2(3Н)-оксазолон, метотрексат, митоксантрон, гепарин, интерфероны, 2макроглобулин-сыворотка, сЫтр-3, химостатин, бета-циклодекстрин тетрадекасульфат, эпонемицин; фумагиллин, золота натрий-тиомалат б-пеницилламин (СОРТ), бета-1-антиколлагеназа-сыворотка альфа2-антиплазмин, бисантрен, лобензарит динатрий, п-2-карбоксифенил-4-хлорантрониловой кислоты динатрий или ССА, талидомид, ангостатический стероид, карбоксиаминоимидазол, ингибиторы металлопротеиназ, такие как ВВ94. Другие антиангиогенные агенты, которые можно применять, включают антитела, предпочтительно моноклональные антитела к следующим ангиогенным факторам роста: ЬЕСЕ, аЕСЕ, ЕСЕ-5, изоформы УЕСЕ, УЕСЕ-С, НСЕ/8Е и Апд-1/Анд-2. Ееггага Ν. апб А1Да1о, К. С11шса1 арр11сайоп оГ апдюдешс дго\\111 ГасЮге апб 1Ьеи шЫЬйогк (1999), №11иге Мебюше, 5:1359-1364.
Алкилирующие агенты представляют собой многофункциональные соединения, которые обладают способностью замещать ионы водорода алкильными группами. Примеры алкилирующих агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, бисхлорэтиламины (азотсодержащие иприты, например хлорамбуцил, циклофосфамид, изосфамид, мехлорэтамин, мелфалан, уроиприт), азиридины (например, тиотепа), алкил алкон сульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, крамустин, ломустин, стрептозоцин), неклассические алкилирующие агенты (алтретамин, декарбазин и прокарбазин), соединения платины (карбопластин и циспластин). Указанные соединения реагируют с фосфат-, амино-, гидроксил-, сульфгидрильной, карбоксильной и имидазольной группами. В физиологических условиях указанные лекарственные средства ионизируются и образуют положительно заряженный ион, который присоединяется к чувствительным нуклеиновым кислотам и белкам, что приводит к блокированию клеточного цикла и/или гибели клеток. Комбинированные терапевтические средства, включающие ингибитор Н8Р90 и ингибирующий агент, возможно будут оказывать синергетическое действие на раковую опухоль и обеспечивать побочные эффекты, связанные с этими химиотерапевтическими агентами.
Антибиотические агенты представляют собой группу лекарственных средств, получаемых аналогично антибиотикам путем модификации природных продуктов. Примеры антибиотических агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, антрациклины (например, доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, идарубицин и антрацендион), митомицин С, блеомицин, дактиномицин, пликатомицин. Такие антибиотические агенты нарушают рост клеток путем направленного воздействия на различ
- 18 019156 ные компоненты клетки. Например, считается, что антрациклины воздействуют на активность ДКН топоизомеразы II в областях транскрипционно активной ДНК, что приводит к появлению разрывов в нитях ДНК. Считается, что блеомицин хелатирует железо и образует активированный комплекс, который затем связывается с основаниями ДНК, что приводит к разрывам нитей и гибели клеток. Комбинированная терапия, включающая ингибитор Н8Р90 и антибиотический агент, возможно будет оказывать синергетическое действие на раковую опухоль и снижать побочные эффекты, связанные с указанными химиотерапевтическими агентами.
Антиметаболические агенты представляют собой группу лекарственных средств, которые воздействуют на метаболические процессы, жизненно важные для физиологии и пролиферации раковых клеток. Активно пролиферирующим клеткам необходим непрерывный синтез больших количеств нуклеиновых кислот, белков, жиров и других жизненно важных компонентов клетки. Многие антиметаболиты ингибируют синтез пуриновых или пиримидиновых нуклеозидов или ингибируют ферменты репликации ДНК. Некоторые антиметаболиты воздействуют на синтез нуклеозидов и РНК ΚΝΑ и/или метаболизм аминокислот, а также синтез белков. Нарушая синтез жизненно необходимых компонентов клетки, антиметаболиты могут замедлить или блокировать рост раковых клеток. Примеры антиметаболических агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, фторурацил (5-РИ), флоксуридин (5-РИбК), метотрексат, лейковорин, гидроксимочевину, тиогуанин (6-ТС). меркаптопурин (6-МР), цитрабин, пентостатин, флударабин фосфат, кладрибин (2-СЭА), аспарагиназу и гемцитабин. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и антиметаболический агент, может оказывать синергетическое воздействие на раковые опухоли и снижать побочные эффекты, связанные с указанными химиотерапевтическими агентами.
Гормональные агенты представляют собой группу лекарственных средств, которые регулируют рост и развитие соответствующих органов-мишеней. Большинство гормональных агентов составляет группа из половых стероидов и их аналогов и производных, таких как эстрогены, андрогены и прогестины. Эти гормональные агенты могут служить антагонистами рецепторов половых гормонов и снижать экспрессию рецепторов и транскрипцию жизненно важных генов. Примерами таких гормональных агентов являются синтетические эстрогены (например, диэтилстибестрол), антиэстрогены (например, тамоксивен, торемифен, флуоксиместерол и ралоксифен), антиандрогены (бикалютамид, нилютамид и длютамид), ингибиторы ароматазы (например, аминоглютетимид, анастрозол и тетразол), каетоконазол, гозерелин ацетат, лейпролин, манэстрол ацетат и мифепрестон. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и гормональный агент, может оказывать синергетическое воздействие на раковое заболевание и снижать побочные эффекты, связанные с указанными химиотерапевтическими агентами.
Агенты растительного происхождения представляют собой группу лекарственных средств, которые получены из растений или модифицированы на основании молекулярной структуры таких агентов. Примеры агентов растительного происхождения включают, но не ограничиваются перечисленными, алкалоиды барвинка (например, винкристин, винбластин, виндезин, винзолидин и винорелбин), подофиллотоксины (например, этопозид (УР-16) и тенипозид (УМ-26)) и таксаны (например, паклитаксел и доцетаксел). Эти агенты растительного происхождения обычно действуют как антимитотические агенты, которые связывают тубулин и подавляют митоз. Считается, что подофиллотоксины, такие как этопозид, нарушают синтез ДНК путем взаимодействия с топоизомеразой II, что приводит к разрывам нити ДНК. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и агент растительного происхождения, может оказывать синергетическое воздействие на рак и снижать побочные эффекты, связанные с указанными химиотерапевтическими агентами.
Биологические агенты представляют собой группу агентов, которые вызывают обратное развитие ракового заболевания/опухоли при использовании отдельно или в комбинации с химиотерапией и/или радиотерапией. Примеры биологических агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, иммуномодулирующие белки, такие как цитокины, моноклональные антитела к антигеном опухолей, гены-супрессоры опухолей и противораковые вакцины. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и биологический агент, может оказывать синергетическое воздействие на рак, усиливать иммунные реакции пациента на туморогенные сигналы и снижать побочные эффекты, связанные с указанными химиотерапевтическими агентами.
Цитокины обладают мощной иммуномодулирующей активностью. Некоторые цитокины, такие как интерлейкин-2 (ЧБ-2, альдеслейкин) и интерферон, продемонстрировали противоопухолевую активность и были одобрены для лечения пациентов с метастазирующей карциномой почки и метастазирующей злокачественной меланомой. ГБ-2 представляет собой фактор роста Т-лимфоцитов, который играет центральную роль в опосредуемых Т-лимфоцитами иммунных ответах. Считается, что селективное действие Ш-2 на некоторых пациентов является результатом клеточного иммунного ответа, который отличает свое от чужого. Примеры интерлейкинов, которые можно использовать в комбинации с ингибиторами Н8Р90, включают, но не ограничиваются перечисленными, интерлейкин-2 (Ш-2), а также интерлейкин-4 (Ш-4), интерлейкин-12 (Ш-12).
Интерферон включает более 23 родственных подтипов с перекрывающимися активностями, причем
- 19 019156 каждый из подтипов ИФН включен в объем настоящего изобретения. ИФН продемонстрировал активность в отношении солидных опухолей и злокачественных заболеваний крови, причем последние оказались особенно чувствительными.
Другие цитокины, которые можно использовать в комбинации с ингибитором Н8Р90, включают цитокины, которые демонстрируют глубокое воздействие на гематопоэз и иммунные функции. Примеры таких цитокинов включают, но не ограничиваются перечисленными, эритропоэтин, гранулоцит-С8Р (филграстин), колониестимулирующий фактор гранулоцитов и макрофагов (саргамостим). Эти цитокины можно использовать в комбинации с ингибитором Н8Р90 для снижения индуцированной химиотерапией миелопоэтической токсичности.
Также в комбинации с ингибитором Н8Р90 можно использовать другие иммуномодулирующие агенты, не относящиеся к цитокинам. Примеры таких иммуномодулирующих агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, бациллу Кльметта-Герена, левамизол и октреодит, октапептид продолжительного действия, который имитирует эффекты природного гормона соматостатина.
Моноклональные антитела к антигенам опухолей - это антитела, вырабатывающиеся в ответ на антигены, экспрессируемые опухолями, предпочтительно опухоль-специфичные антигены. Например, моноклональное антитело НЕВСЕРТРЫ® (Траструцумаб, ТгаЦги/итаЬ) вырабатывается к рецептору 2 эпидермального фактора роста человека 2 (НЕВ2), экспрессия которого повышены в некоторых опухолях молочной железы, включая метастазирующий рак молочной железы. Повышенная экспрессия белка НЕВ2 ассоциирована с более агрессивным заболеванием и более неблагоприятным клиническим прогнозом. НЕВСЕРТГЫ® используется в качестве агента монотерапии для лечения пациентов с метастазирующим раком молочной железы, при котором экспрессия белка НЕВ2 опухолью повышена. Комбинированная терапия, включающая ингибитор Н8Р90 и НЕВСЕРТРЫ®, может оказывать синергетическое воздействие на опухоли, в частности на метастатические раковые опухоли.
Другим примером моноклональных антител к антигенам опухоли является ΚΙΕυΧΑΝ® (ритуксимаб), которые вырабатывается в ответ на СЭ20 на клетках лимфомы и селективно снижает количество нормальных и злокачественных СЭ20' пре-В и зрелых В-лимфоцитов. В1ТиХАЫ® используют отдельно для лечения пациентов с рецидивирующей или рефрактерной низкодифференцированной или фолликулярной СЭ20'. В-клеточной неходжкинской лимфомой. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и В1ТиХАЫ® возможно будет оказывать синергетическое воздействие не только на лимфому, но также на другие виды и типы злокачественных опухолей.
Гены-супрессоры опухолей представляют собой гены, которые подавляют рост клеток и циклы деления, предотвращая, таким образом, развитие новообразования. Мутации в генах-супрессорах опухолей приводят к тому, что клетки не реагируют на один или более компонентов сети ингибирующих сигналов, преодолевают контрольные точки клеточного цикла, что приводит к более интенсивному контролируемому росту клеток - раку. Примеры генов-супрессоров опухолей включают, но не ограничиваются перечисленными, ЭРС-4, ΝΡ-1, ΝΡ-2, ВВ, р53, ^Т1, ВВСА1 и ВВСА2. ЭРС-4 участвует в развитии рака поджелудочной железы и участвует в цитоплазматических механизмах подавления деления клеток. ΝΡ-1 кодирует булок, который подавляет Вак, ингибиторный белок цитоплазмы. ΝΡ-1 участвует в развитии нейрофибром и феохромацитом нервной системы, а также миелоидной лейкемии. ΝΕ-2 кодирует ядерный фактор, который участвует в развитии менингиомы, шванномы и эпендиомы нервной системы. ВВ кодирует белок рВВ, ядерный фактор, который является основным ингибитором клеточного цикла. ВВ участвует в развитии ретинобластомы, а также рака кости, мочевого пузыря, мелкоклеточного рака легкого, а также рака молочной железы. р53 кодирует белок р53, который регулирует деление клеток и может вызвать апоптоз. Мутации и/или инактивация р53 обнаруживаются в разнообразных раковых опухолях. \УТ1 участвует в развитии опухоли Вильмса (рак почки). ВВСА1 участвует в развитии рака молочной железы и яичников, а ВВСА2 участвует в развитии рака молочной железы. Гены-супрессоры опухолей могут быть перенесены в клетки опухолей, где они осуществляют свою функцию по подавлению опухоли. Комбинированное терапевтическое средство, включающее ингибитор Н8Р90 и супрессор опухоли, возможно, будет оказывать синергетические эффекты на пациентов с различными раковыми опухолями.
Противораковые вакцины представляют собой группу агентов, которые вызывают специфический иммунный ответ организма на опухоли. Большинство исследуемых, разрабатываемых и проходящих клинические испытания противораковых вакцин представляют собой опухоль-ассоциированные антигены (ТАА). ТАА - это структуры (т.е. белки, ферменты или углеводы), которые присутствуют на опухолевых клетках или отсутствуют или присутствуют в меньших количествах на нормальных клетках. Благодаря тому что эти структуры являются достаточно уникальными для клеток опухоли, ТАА обеспечивают мишени, которые иммунная система может распознавать и разрушать. Примеры ТАА включают, но не ограничиваются перечисленными, ганглиозиды (СМ2), простата-специфичный антиген (Р8А), αфетопротеин (АРР), онкофетальный антиген (СЕА) (продуцируемый опухолями толстой кишки и другими, например опухолями молочной железы, легкого, желудка и поджелудочной железы), антигены, ассоциированные с меланомой (МАВТ-1, др100, МАСЕ 1,3 тирозиназа), фрагменты Е6 и Е7 папилломавиру
- 20 019156 са, целые клетки или части/лизаты антологичных клеток опухоли и аллогенных клеток опухоли.
Для усиления иммунного ответа на ТАА можно использовать адъювант. Примеры адъювантов включают, но не ограничиваются перечисленными, бациллу Кальметта-Герена (ВСС). эндотоксинылипополисахариды, гемоцианин улитки (СКЬН), интерлейкин-2 (1Ь-2), колониестимулирующий фактор гранулоцитов-макрофагов (6М-С8Г) и цитоксан, химиотерапевтический агент, который в низких дозах, как считают, снижает индуцируемую опухолью иммуносупрессию.
Композиции, включающие ингибиторы Н8Р90.
В сочетании с соединениями согласно настоящему изобретению можно использовать разнообразные композиции и пути введения. Такие композиции могут включать в дополнение к соединению согласно настоящему изобретению обычные фармацевтические наполнители и другие фармацевтически неактивные агенты. Дополнительно, композиции могут включать активные агенты в дополнение к соединениям согласно настоящему изобретению. Такие дополнительные агенты могут включать дополнительные соединения согласно настоящему изобретению и/или один или более других фармацевтических агентов.
Композиции могут иметь газообразную, жидкую, полужидкую или твердую форму и изготовлены таким образом, чтобы быть пригодными для выбранного пути введения. Для перорального введения обычно используют капсулы и таблетки. Для парентерального введения обычно используют восстановленные лиофилизированные порошки, приготовленные, как описано в настоящем патенте.
Композиции, включающие соединения согласно настоящему изобретению, можно вводить или вводить совместно перорально, парентерально, интраперитонеально, внутривенно, внутриартериально, трансдермально, сублингвально, через слизистые, ректально, трансбуккально, интраназально, с использованием липосом, путем ингаляции, вагинально, в глаз, путем местной доставки (например, при помощи катетера или стента), подкожно, в жировую ткань, в сустав или в трахею. Соединения и/или композиции согласно настоящему изобретению можно также вводить или вводить совместно в лекарственных формах с замедленным высвобождением.
Ингибиторы Н8Р90 и включающие их композиции можно вводить или вводить совместно в любой стандартной лекарственной форме. Совместное введение в контексте настоящего изобретения обозначает введение более одного терапевтических агентов, один из которых включает ингибитор Н8Р90, в ходе согласованного лечения для достижения улучшенного клинического результата. Такое совместное введение может быть одновременным, т.е. происходить в перекрывающиеся периоды времени.
Растворы или суспензии, используемые для парентерального, внутрикожного, подкожного или топического введения, могут необязательно включать один или более из следующих компонентов: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, солевой раствор, нелетучее масло, полиэтиленгликоль, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; антимикробные агенты, такие как бензиловый спирт и метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота и бисульфит натрия; хелатирующие агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА); буферы, такие как ацетаты, цитраты и фосфаты; средства для регулирования тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза, и средства для регулирования кислотности и щелочности композиции, такие как щелочные или кислые агенты, например карбоната, бикарбоната, фосфаты, соляная кислота и органические кислоты, такие как уксусная кислота и лимонная кислота. Препараты для парентерального введения могут быть дополнительно заключены в ампулы, одноразовые шприцы или сосуды, содержащие одну или множество доз, выполненные из стекла, пластика или другого подходящего материала.
В случае, когда соединения согласно настоящему изобретению недостаточно растворимы, можно использовать методы солюбилизации соединений. Такие методы известны специалистам и включают, но не ограничиваются перечисленными, использование сорастворителей, таких как диметилсульфоксид (ДМСО), использование поверхностно-активных веществ, таких как ΤνΕΕΝ, или растворение в водном бикарбонате натрия. Производные соединений, такие как пролекарства соединений, также можно использовать для изготовления эффективных фармацевтических композиций.
После смешивания или добавления соединений согласно настоящему изобретению в композицию возможно образуется раствор, суспензия, эмульсия или нечто подобное. Форма полученной композиции будет зависеть от ряда факторов, включая предполагаемый путь введения и растворимость соединения в выбранном носителе или среде. Эффективная концентрация, необходимая для снижения выраженности заболевания, которое лечат, может быть определена эмпирическим путем.
Композиции согласно настоящему изобретению могут быть необязательно представлены в виде лекарственных форм для введения человеку и животным, таких как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, сухие порошки для ингаляторов, гранулы, стерильные растворы или суспензии для парентерального введения, растворы и суспензии для перорального введения, эмульсии вода-масло, содержащие подходящее количество соединений, в частности фармацевтически приемлемых солей соединений. Фармацевтически терапевтически активные соединения обычно изготавливают и вводят в виде лекарственных форм, содержащих одну дозу или множество доз. Лекарственные формы, содержащие одну дозу, в настоящем описании включают физически раздельные объекты, пригодные для введения животным и человеку и упакованные, как принято в данной области. Каждая единичная доза содержит заранее определенное
- 21 019156 количество терапевтически активного соединения, достаточное для того, чтобы обеспечить желаемый терапевтический эффект, в комбинации с необходимым фармацевтическим носителем, средой или разбавителем. Примеры лекарственных форм, содержащих одну дозу, включают ампулы и шприцы, отдельно упакованные таблетки и капсулы. Лекарственные формы, содержащие одну дозу, можно вводить частями или по несколько. Лекарственные формы, содержащие множество форм, представляют собой множество идентичных форм, содержащих одну дозу, упакованных в один контейнер для введения отдельных форм с одной дозой. Примеры лекарственных форм, содержащих множество доз, включают сосуды и бутылки таблеток или капсул или бутылок объемом пинта или галлон. Таким образом, лекарственная форма, содержащая множество доз, представляет собой множество лекарственных форм, содержащих одну дозу, которые не разделены в упаковке.
В дополнение к одному или более соединениям согласно настоящему изобретению композиция может включать разбавитель, такой как лактоза, сахароза, дикальция фосфат или карбоксиметилцеллюлоза; смазывающее вещество, такое как стеарат магния, стеарат кальция и тальк; и связующее вещество, такое как крахмал, натуральные смолы, гуммиарабик, желатин, глюкоза, молассы, поливинилпирролидон, целлюлозы и их производные, повидон, кросповидоны и другие подобные связующие вещества, известные специалистам. Жидкие композиции для фармацевтического применения могут, например, быть приготовлены путем растворения, диспергирования или другого вида смешивания определенного выше активного соединения и необязательных фармацевтических вспомогательных веществ, таких как носители, например вода, физ. раствор, водный раствор декстрозы, гликоли, этанол и т.п., с образованием растворов или суспензий. При желании, фармацевтическая композиция для введения может содержать незначительные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие агенты или солюбилизирующие агенты, эмульгирующие агенты, рН-буферные агенты, такие как, например, ацетат, цитрат натрия, производные циклодекстрина, сорбитан монолаурат, триэтаноламин натрия ацетат, триэтаноламин олеат и другие подобные агенты. Актуальные способы получения таких лекарственных форм известны или будут очевидны для специалиста в соответствующей области; например, см. Кетшд!оп: Тйе 8с1епсе апк Ргасйсек о£ Рйагтасу, ЫрртсоИ ^1Шат8, апк ХУПкнъ РиЫщйег, 2Г’1 екШоп, 2005. Композиции и составы для введения будут в любом случае содержать количество ингибитора по настоящему изобретению, достаточное для снижения активности Н8Р90 ш у1уо, и, таким образом, обеспечения лечения болезненного состояния субъекта.
Лекарственные формы или композиции могут необязательно включать одно или более соединений согласно настоящему изобретению в диапазоне от 0.005 до 100% (мас./мас.), а также дополнительные вещества, такие как вещества, указанные в настоящем описании. Для перорального применения фармацевтически приемлемая композиция может необязательно включать любой один или более используемых обычно наполнителей, таких как, например, маннитол, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, производные целлюлозы, натрий-кроскармеллозу, глюкозу, сахарозу, карбонат магния, стеарин натрия, тальк фармацевтического качества. Такие композиции включают растворы, суспензии, таблетки, порошки, сухие порошки для ингаляторов и составы с замедленным высвобождением, такие как, но не ограничиваясь перечисленными, импланты и микроинкапсулированные системы доставки, биоразрушаемые и биосовместимые полимеры, такие как коллаген, этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, полиортоэфиры, полимолочная кислота и др. Способы приготовления таких составов известны специалистам в соответствующей области. Композиции могут необязательно включать 0.01-100% (мас./мас.) одного или более ингибиторов Н8Р90, возможно 0.1-95%, и возможно 1-95%.
Соли, предпочтительно натриевые соли, могут быть приготовлены с носителями, носителей, которые защищают соединение от быстрого выведения из организма, например составы или оболочки с контролируемым высвобождением. Составы могут дополнительно включать другие активные соединения, что обеспечит желаемые комбинации свойств.
А. Составы для перорального введения.
Лекарственные формы для перорального введения могут быть твердыми, гелеобразными или жидкими. Примеры твердых лекарственных форм включают, но не ограничиваются перечисленными, таблетки, капсулы, гранулы и нерасфасованные порошки. Более конкретные примеры таблеток для перорального применения включают прессованные жевательные пастилки и таблетки, которые могут быть покрыты оболочкой, растворяющейся в кишечнике, сахаром или пленкой. Гранулы и порошки могут быть представлены в нешипучей и шипучей формах. Каждый из вышеперечисленных ингредиентов можно комбинировать с ингредиентами, известными в соответствующей области.
В некоторых вариантах осуществления соединения согласно настоящему изобретению производятся в твердой лекарственной форме, предпочтительно в форме капсул или таблеток. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и т.п. могут необязательно содержать один или более из следующих ингредиентов или соединений сходной природы: связующий компонент; разбавитель; дезинтегратор; лубрикант; вещество, улучшающее скольжение; подсластитель и вкусовую добавку.
Примеры связующих компонентов, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь, раствор глюкозы, растительная слизь акации, раствор желатина, сахарозы и крахмальный клейстер.
- 22 019156
Примеры лубрикантов, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: тальк, крахмал, магния или кальция стеарат, ликоподиевая кислота и стеариновая кислота.
Примеры разбавителей, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: лактоза, сахароза, крахмал, каолин, соль, маннитол и дикальций фосфат.
Примеры глидантов, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: коллоидный диоксид кремния.
Примеры улучшителей распадаемости, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: кроскамеллоза натрия, карбоксиметилкрахмал натрия, альгиновая кислота, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, бентонит, метилцеллюлоза, агар и карбоксиметилцеллюлоза.
Примеры красящих добавок, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, любые из красителей для пищевых и косметических продуктов, их смесей; и суспензия водорастворимых красителей классов ΡΌ и С в гидратированном оксиде алюминия.
Примеры подсластителей, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, следующее: сахароза, лактоза, маннитол и искусственные подсластители, такие как цикламат натрия и сахарин, и любое количество высушенных распылением вкусовых добавок.
Примеры вкусовых добавок, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, натуральные вкусовые добавки, экстрагированные из растений, таких как фрукты, и синтетические смеси, обладающие приятным вкусом, такие как, но не ограничивающиеся ими, перечная мята и метилсатицилат.
Примеры смачивающих агентов, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, пропиленгликоль моностеарат, сорбитан моноолеат, диэтиленгликоль монолаурат, полиоксиэтилен лаурил эфир.
Примеры противорвотных покрытий, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, жирные кислоты, жиры, мази, шеллак, насыщенный аммиаком шеллак и ацетатфталат целлюлозы.
Примеры пленочных покрытий, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, гидроксиэтилцеллюлозу, натрия карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль 4000 и ацетатфталат целлюлозы.
Если желательно пероральное введение, соль данного соединения может быть необязательно получена в композиции, защищающей ее от воздействия кислой среды желудка. Например, композиция может быть произведена в кишечнорастворимой оболочке, которая поддерживает ее целостность в желудке и высвобождает активное соединение в кишечнике. Композиция также может быть получена в комбинации с антацидным или другим подобным ингредиентом.
В случае если единицей лекарственной формы является капсула, она может необязательно дополнительно включать жидкий носитель, такой как жирное масло. В дополнение, единицы лекарственной формы могут необязательно дополнительно содержать различные другие материалы, которые изменяют физическую форму единицы лекарственной формы, например, покрытия из сахара или других энтеральных агентов.
Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить в качестве компонента эликсира, суспензии, сиропа, облатки, разбрызгиваемой жидкости, жевательной резинки или других. Сироп может необязательно содержать, в дополнение к активным соединениям, сахарозу в качестве подсластителя и определенные консерванты, красители, красящие добавки и вкусовые добавки.
Соединения согласно настоящему изобретению могут также быть перемешаны с другими активными материалами, которые не обладают нужным действием, или с материалами, которые дополняют нужное действие, такие как антациды, Н2 блокаторы и диуретики. Например, если соединение используют для лечения астмы или гипертензии, оно может быть использовано с другими бронхорасширяющими и противогипертензивными средствами соответственно.
Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые могут входить в состав таблеток, содержащих соединения согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленными, связующие компоненты, лубриканты, разбавители, дезинтеграторы, красящие добавки, вкусовые добавки и увлажнители. Таблетки, покрытые кишечнорастворимым покрытием, из-за кишечнорастворимого покрытия не подвержены воздействию кислот желудка и растворяются или распадаются в нейтральной или щелочной среде кишечника. Таблетки с сахарным покрытием могут быть прессованными таблетками, к которым присоединяют различные слои фармацевтически приемлемых веществ. Таблетки, покрытые пленкой, могут быть прессованными таблетками, покрытыми полимером или другим подходящим покрытием. Различные прессованные таблетки могут быть прессованными таблетками, полученными с помощью одного или более циклов компрессии, использующих фармацевтически приемлемые вещества, упомянутые ранее. Красящие вещества могут также применяться при производстве таблеток. Вкусовые добавки и подсластители могут применяться при производстве таблеток, и особенно полезны при производстве жевательных таблеток и пастилок.
- 23 019156
Примеры жидких пероральных лекарственных форм, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, водные растворы, эмульсии, суспензии, растворы и/или суспензии, восстановленные из нешипучих гранул, и шипучие препараты, восстановленные из шипучих гранул.
Примеры водных растворов, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются перечисленными, эликсиры и сиропы. Здесь термин эликсиры относится к прозрачным, подслащенным, водно-спиртовым препаратам. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые можно использовать в эликсирах, включают, но не ограничиваются перечисленными, сольвенты. Частные примеры сольвентов, которые можно использовать, включают глицерин, сорбитол, этиловый спирт и сироп. Здесь термин сиропы относится к концентрированным водным растворам сахара, например сахарозе. Сиропы могут необязательно также содержать консерванты.
Термин эмульсии относится к двухфазным системам, в которых одна жидкость распределена в форме маленьких шариков в другой жидкости. Эмульсии могут необязательно быть эмульсиями типа масло в воде и типа вода в масле. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые можно использовать в эмульсиях, включают, но не ограничиваются перечисленными, не водные жидкости, эмульгирующие агенты и консерванты.
Примеры фармацевтически приемлемых веществ, которые можно использовать в нешипучих гранулах, из которых восстанавливают жидкую оральную лекарственную форму, включают разбавители, подсластители и увлажнители.
Примеры фармацевтически приемлемых веществ, которые можно использовать в шипучих гранулах, из которых восстанавливают жидкую оральную лекарственную форму, включают органические кислоты и источник двуокиси углерода.
Подкрашивающие и вкусовые добавки могут необязательно использоваться во всех указанных выше лекарственных формах.
Частные примеры консервантов, которые можно использовать, включают глицерин, метил и пропилпарабен, бензойную кислоту, бензоат натрия и спирт.
Частные примеры не водных жидкостей, которые можно использовать в эмульсиях, включают минеральное масло и хлопковое масло.
Частные примеры эмульгирующих агентов, которые можно использовать, включают желатин, акацию, трагакант, бентонит и поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтилен сорбитан моноолеат.
Частные примеры суспендирующих агентов, которые можно использовать, включают натрия карбоксиметилцеллюлозу, пектин, трагакант, вигум и акацию. Разбавители включают лактозу и сахарозу. Подсластители включают сахарозу, сиропы, глицерин и искусственные подсластители, такие как натрия цикламат и сахарин.
Частные примеры увлажнителей, которые можно использовать, включают пропиленгликоль моностеарат, сорбитан моноолеат, диэтилен гликоль монолаурат и полиоксиэтилен лаурил эфир.
Частные примеры органических кислот, которые можно использовать, включают лимонную кислоту и винную кислоту.
Источники двуокиси углерода, которые можно использовать, в шипучих композициях включают натрия бикарбонат и натрия карбонат. Красящие агенты включают любые из красителей для пищевых и косметических продуктов и их смесей.
Частные примеры вкусовых добавок, которые можно использовать, включают экстрагированные из растений, таких как фрукты, и синтетические смеси, обладающие приятным вкусом.
Для твердой лекарственной формы, раствора или суспензии, например в пропиленкарбонате, растительном масле или триглицеридах, такую форму предпочтительно заключают в твердую или мягкую желатиновую капсулу. Такие растворы, препараты и их формы в капсулах раскрыты в патентах США № 4328245; 4409239 и 4410545. Для жидкой лекарственной формы, раствора, например в полиэтиленгликоле, соединение может быть разбавлено достаточным количеством фармацевтически приемлемого жидкого носителя, например воды, чтобы обеспечить легкость дозирования для введения.
В альтернативном варианте жидкие или полутвердые составы для перорального введения могут быть приготовлены путем растворения или диспергирования активного соединения в растительных маслах, гликолях, триглицеридах, эфирах пропиленгликоля (например, пропиленкарбонате) и других подобных носителях, а также путем заключения таких растворов или суспензий в твердые или мягкие желатиновые оболочки капсул. Другие подходящие формы включают формы, раскрытые в патентах США № 28819 и 4358603.
В. Инъецируемые составы, растворы и эмульсии.
Настоящее изобретение также относится к композициям, предназначенным для введения соединения согласно настоящему изобретению парентеральным путем, обычно характеризующимся подкожными, внутримышечными или внутривенными инъекциями. Композиции для введения путем инъекций могут быть получены в любой обычной форме, например в форме жидкого раствора или суспензии, твердых форм, пригодных для растворения или суспендирования в жидкости перед введением путем инъекции, или в форме эмульсий.
- 24 019156
Примеры наполнителей, которые можно использовать в сочетании с композициями для введения путем инъекции согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленными, воду, физиологический раствор, декстрозу, глицерин и этанол. Композиции для введения путем инъекции могут необязательно включать небольшие количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие агенты, рН-буферные вещества, солюбилизаторы, стабилизаторы, вещества, улучшающие растворимость и другие подобные агенты, такие как, например, ацетат натрия, сорбитан монолаурат, триэтаноламин олеат и циклодекстрины. Также в настоящем изобретении предусмотрена имплантация систем с медленным высвобождением или продолжительным высвобождением, которые обеспечивают поддержание постоянного уровня дозировки (см., например, патент США 3710795). Процентная доля активного соединения, содержащегося в таких композициях для парентерального введения, в большой степени зависит от природы композиции, а также от активности соединения и потребностей субъекта.
Парентеральное введение составов включает внутривенное, подкожной и внутримышечное введение. Препараты для парентерального введения включают стерильные растворы, готовые для введения путем инъекции, стерильные сухие растворимые продукты, такие как описанные в настоящем патенте лиофилизированные порошки, готовые для смешивания с растворителем перед введением, включая подкожные таблетки, стерильные суспензии, готовые для введения путем инъекции, стерильные сухие нерастворимые продукты, готовые для смешивания со средой непосредственно перед введением, и стерильные эмульсии. Растворы могут быть либо водными, либо неводными.
В случае внутривенного введения, примеры подходящих носителей включают, но не ограничиваются перечисленными, физиологический раствор или фосфатный буферной раствор (ФБР) и растворы, содержащие загустители и солюбилизирующие агенты, такие как глюкоза, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль, а также их смеси.
Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые можно использовать в препаратах для парентерального введения, включают, но не ограничиваются перечисленными, водные среды, неводные среды, антимикробные агенты, изотонические агенты, буферы, антиоксиданты, местные анастетики, суспендирующие и диспергирующие агенты, эмульгирующие агенты, секвестрирующие или хелатирующие агенты, а также другие фармацевтически приемлемые вещества.
Примеры водных сред, которые можно использовать, включают раствор хлорид натрия для инъекций, раствор Рингера для инъекций, изотонический раствор декстрозы для инъекций, стерильную воду для инъекций, раствор Рингера для инъекций с лактатом и декстрозой.
Примеры неводных сред для парентерального введения, которые можно использовать, включают нелетучие масла растительного происхождения, хлопковое масло, кукурузное масло, кунжутное масло и кокосовое масло.
В парентеральные препараты можно добавлять антимикробные агенты в бактериостатических или фунгистатических концентрациях, в частности, в случаях, когда такие препараты упакованы в контейнеры, содержащие множество доз, и таким образом предназначены для хранения и извлечения множества аликвот. Примеры антимикробных агентов, которые можно использовать, включают фенолы или крезолы, ртутные препараты, хлорбутанол, метиловый и пропиловый эфиры р-гидроксибензойной кислоты, тимеросал, бензалкония хлорид и бензэтония хлорид.
Примеры изотонических агентов, которые можно использовать, включают хлорид натрия и декстрозу. Примеры буферов, которые можно использовать, включают фосфат и цитрат. Примеры антиоксидантов, которые можно использовать, включают бисульфат натрия. Примеры местных анастетиков, которые можно использовать, включают прокаин гидрохлорид. Примеры суспендирующих и диспергирующих агентов, которые можно использовать, включают натрий-карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропил метилцеллюлозу и поливинилпирролидон. Примеры эмульгирующих агентов, которые можно использовать, включают Полисорбат 80 (ΤΑΕΕΝ 80). Агенты, секвестрирующие или хелатирующие ионы металлов, включают ЭДТА.
Фармацевтические носители могут также необязательно включать этиловый спирт, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль для смешивающихся с водой сред и гидроксид натрия, серную кислоту, лимонную кислоту или молочную кислоту для контроля рН.
Концентрацию ингибитора в составе для парентерального введения можно регулировать таким образом, чтобы инъекция обеспечивала введение фармацевтически эффективного количества, обеспечивающего желаемый фармакологический эффект. Точная концентрация ингибитора и/или доза в конечном счете зависеть от возраста, массы и состояния пациента или животного, как известно в соответствующей области.
Препараты для парентерального введения, содержащие одну дозу, могут быть упакованы в ампулу, склянку или шприц с иглой. Все препараты для парентерального введения должны быть стерильными, как известно в данной области.
Инъецируемые формы могут быть предназначены для местного или системного введения. Обычно терапевтически эффективная доза содержит концентрацию от по меньшей мере около 0.1 до около 90% мас./мас. или более предпочтительно более 1% мас./мас. ингибитора Н8Р90 в ткани (тканях), кото
- 25 019156 рые лечат. Ингибиторы можно вводить за один прием или разделить на несколько более мелких доз и вводить через некоторые промежутки времени. Очевидно, что точная доза и продолжительность лечения будут зависеть от участка, в которые композицию вводят парентерально, носителя и других факторов, которые могут быть определены экспериментально с использованием известных протоколов тестирования или путем экстраполяции экспериментальных данных ίη νίνο или ίη νίίτο. Следует отметить, что значения дозировок и концентраций также могут варьировать в зависимости от возраста субъекта, которого лечат. Дополнительно следует понимать, что конкретные режимы дозирования со временем может быть необходимо скорректировать, чтобы он соответствовал индивидуальным потребностям конкретного субъекта и профессиональному мнению лица, которое вводит или руководит введением составов. Соответственно, следует понимать, что указанные в настоящем описании диапазоны концентраций приведены исключительно в качестве примера и не предполагают ограничения объема или осуществления заявленных составов.
Ингибитор Н8Р90 может необязательно быть суспендирован в микронизированной или другой подходящей форме или может быть дериватизирован с получением более растворимого активного продукта или пролекарства. Форма полученной смеси зависит от ряда факторов, включая предполагаемые путь введения и растворимость соединения в выбранном носителе или среде. Эффективная концентрация является достаточной для облегчения симптомов болезненного состояния и может быть определена эмпирически.
С. Лиофилизированные порошки.
Соединения согласно настоящему изобретению могут также быть приготовлены в форме лиофилизированных порошков, которые могут быть восстановлены для введения в форме растворов, эмульсий и других смесей. Лиофилизированные порошки также могут быть изготовлены в твердой форме или в форме гелей.
Стерильные лиофилизированные порошки могут быть приготовлены путем растворения соединения в натрий-фосфатном буферном растворе, содержащем декстрозу или другой подходящий наполнитель. Последующая стерильная фильтрация раствора, за которой следует лиофилизация в обычных условиях, известных специалистам в соответствующей области, обеспечивает получение желаемых растворов. Вкратце, лиофилизированный порошок может, но не обязательно, быть приготовлен путем растворения декстрозы, сорбита, фруктозы, кукурузной патоки, ксилитола, глицерина, глюкозы, сахарозы или других подходящих агентов в количестве примерно 1-20%, предпочтительно примерно от 5 до 15%, в подходящем буфере, таком как цитратный, натрий- или калий-фосфатный буфер или другие известные буферы, обычно приблизительно при примерно нейтральном рН. Затем к полученной смеси добавляют ингибитор Н8Р90, предпочтительно при температуре выше комнатной, предпочтительно приблизительно при 30-35°С, и перемешивают до растворения. Полученную смесь разбавляют путем добавления дополнительного количества буфера до желаемой концентрации, полученную смесь подвергают стерильной фильтрации или обрабатывают для удаления твердых частиц, чтобы обеспечить стерильность, и распределяют в сосуды для лиофилизации. Каждый сосуд может содержать одну дозу или множество доз ингибитора.
Ό. Составы для местного введения.
Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить в форме смесей для топического применения. Смеси для местного применения могут включать смеси для местного и системного введения. Конечные смеси могут представлять собой раствор, суспензию, эмульсию и т.д. и могут иметь форму кремов, гелей, мазей, эмульсий, эликсиров, лосьонов, суспензий, настоев, паст, пен, аэрозолей, жидкостей для спринцевания, спреев, суппозиториев, бандажей, кожных пластырей или могут представлять собой другую форму для топического введения.
Ингибиторы Н8Р90 могут быть изготовлены в форме аэрозолей для топического введения, например, путем ингаляции (см. патенты США № 4044126, 4414209 и 4364923, в которых описаны аэрозоли для доставки стероидов, которые можно применять для лечения воспалительных заболеваний, в частности астмы). Такие состав для введения в дыхательные пути могут иметь форму аэрозоля или раствора для небулайзера, или представлять собой ультратонкий порошок для вдыхания, отдельно или в комбинации с инертным носителем, таким как лактоза. В таких случаях частицы лекарственной формы будут обычно иметь диаметр менее 50 мкм, предпочтительно менее 10 мкм.
Ингибиторы также могут быть изготовлены в форме для местного или топического применения, например, для топического нанесения на кожу и слизистые оболочки, например, в глазу, в форме гелей, кремов и лосьонов для нанесения на глаз или для интрацестернального или интраспинального введения. Топическое введение предполагается для чрескожной доставки в глаза или слизистую оболочку, для ингаляционных средств терапии. Также можно использовать растворы ингибитора Н8Р90 отдельно или в комбинации с другими фармацевтическими наполнителями для назального введения.
Е. Составы для других путей введения.
В зависимости от болезненного состояния, которое лечат, можно использовать другие пути введения, такие как местное нанесение трансдермальные пластыри и ректальное введение. Например, лекарственные формы для ректального введения представляют собой ректальные суппозитории, капсулы и таб
- 26 019156 летки для системного действия. Ректальные суппозитории в настоящем описании обозначают твердые тела для введения в прямую кишку, которые плавятся или размягчаются при температуре тела с высвобождением одного или более фармацевтически или терапевтически активных ингредиентов. Фармацевтически приемлемые вещества, которые можно применять в ректальных суппозиториях, представляют собой основы или носители, или вещества, повышающие точку плавления. Примеры оснований включают какао-масло, глицерин-желатин, карбовакс (полиоксиэтиленгликоль) и подходящие смеси моно- и диглицеридожирных кислот. Можно использовать комбинации различных оснований. Средства, повышающие точку плавления, включают спермацет и воск. Ректальные суппозитории могут быть получены либо путем прессования, либо формованием. Обычно масса ректального суппозитория составляет примерно от 2 до 3 г. Таблетки и капсулы для ректального введения могут быть изготовлены с использованием тех же фармацевтически приемлемых веществ и теми же методами, что и в случаях составов для перорального введения.
Т. Примеры составов.
Ниже приведены конкретные примеры составов для перорального, внутривенного введения и таблеток, которые необязательно можно использовать для соединений согласно настоящему изобретению. Следует отметить, что эти составы могут варьировать в зависимости от конкретного используемого соединения и показаний, при которых это соединение предполагают применять. Состав для перорального введения
Соедининие согласно настоящему изобретению
Моногидрат лимонной кислоты
Гидроксид натрия Ароматизатор Вода
10-100 мг
105 мг мг в достаточном количестве до 100 мл
Составы для внутривенного введения
Соедининие согласно настоящему изобретению Декстроза моногидрат
0.1-10 мг в достаточном количестве до получения изотонического раствора
Моногидрат лимонной кислоты 1.05 мг
Гидроксид натрия 0.18 мг
Вода для инъекций в достаточном количестве до 1,0 мл
Составы в форме таблеток
Соединение согласно настоящему изобретению 1%
Микрокристаллическая целлюлоза 73%
Стеариновая кислота 25%
Коллоидный оксид кремния 1%.
Дозировка, хозяин и безопасность.
Соединения согласно настоящему изобретению стабильны и их применение безопасно. В частности, соединения согласно настоящему изобретению можно применять в качестве ингибиторов Н8Р90 у разнообразных субъектов (например, людей, млекопитающих, не являющихся людьми и не являющихся млекопитающими).
Оптимальная доза может варьировать в зависимости от таких событий, как, например, тип субъекта, масса тела субъекта, тяжесть состояния, путь введения и специфические свойства конкретного соединения, которое используют. Обычно, приемлемые и эффективные дозы представляют собой количество, достаточное для того, чтобы эффективно замедлять или устранять состояние, которое лечат. Обычно, ежедневная доза для перорального введения взрослому (масса тела около 60 кг) составляет приблизительно от 1 до 1000 мг, приблизительно от 3 от 300 мг или приблизительно от 10 до 200 мг. Очевидно, что ежедневную дозу можно вводить одной или несколькими (например, 2 или 3) порциями в день.
Получение ингибиторов Н8Р90.
Могут быть разработаны различные способы получения соединений согласно настоящему изобретению. Типичные способы синтеза таких соединений приведены в разделе Примеры. Однако необходимо отметить, что соединения согласно настоящему изобретению могут также быть получены с использованием других способов синтеза, разработанными другими специалистами.
Схемы синтеза соединений согласно настоящему изобретению.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены с использованием приведенных ниже схем реакций. Специалист в соответствующе области сможет легко разработать другие схемы реакции. Также очевидно, что для оптимизации выходов данных реакций могут быть использованы различные растворители, температуры и другие условия реакций.
В описанных ниже реакциях может быть необходимой защита реакционных функциональных групп, например, гидрокси, амино, имино, тио или карбоксигрупп, в случае, когда желательно их присутствие в конечном продукте, чтобы избежать их нежелательного участия в реакциях. Можно использо вать стандартные защитные группы в соответствии со стандартными процедурами, которые описаны, например, в Р.О.М. А'Мз апб Т.^. Огеепе т Огеепе'з РгокесДуе Огоирз т Огдатс 8уп1Гез1з, 4ΐΓ есШюп,
- 27 019156
ΙοΙιη ШИсу апб δοηδ, 2007.
Схема 1
Приготовление дигидрохиназолинон оксим эфира
ία
«г в, 1 „X &
Реакция альдегида 1А с ацетон-производным 1В дает енон 1С (этап 1). Обработка енона 1С малонат-производным 1Ό с последующей сапонификацией и декарбоксилированием дает винилоговую кислоту 1Е (этап 2). С-ацилирование хлорангидридом 1Р дает трион 1С (этап 3). Обработка 1С гуанидином в присутствии пирролидина дает дигидрохиназолинон 1Н (этап 4). Реакция сочетания Сузуки с бороновым эфиром П (этап 5) дает соединение 11. Реакция с алкоксиамином 1К в рефлюксируемом пиридине (этап 6) и, в случае необходимости, снятие защиты (этап 7) дает оксим эфир 1Ь. Хиральное разделение путем сверхкритической жидкостной хроматографии дает оба энантиомера, 1М и 1Ν.
Схема 2
Получение дигидропиридопиримидинон оксим эфира
2М КгСОэ мсарр^сь ОМА. гмикроколн. 120°С, Н мин.
снятие : зациты > текст*
Реакция альдегида 2А с хиральным сульфинамидом 2В пирролидин ац/нилгуанидин
МИКОЗ ΙΟΛΗ.
Реагент Деи «и или ЛоуФФона в присутствии тетраэтоксида титана дает имин 2С (этап 1). Обработка сульфинамида только реагентом Реформатского 2Ό дает хиральный сульфинамид 2Е (этап 2), после чего проводят катализируемое кислотой снятие с получением хиральной бета-аминокислоты 2Е (этап 3). Реакция амина с функционализированным дикитеном 2С дает амид 2Н (этап 4), после чего осуществляют обработку метоксидом с образованием продукта конденсации Дикма
- 28 019156 на 21 (этап 5). Реакция винилоговой кислоты 21 с ацетилгуанидином дает продукт конденсации 21 (этап 6). Превращение лактама 21 в тиолактам 2К осуществляют с использованием реагента Леви или Лоуссона (этап 7). Превращение тиолактама 2К в амидин 2М осуществляют путем обработки замещенным алкоксиамином 2Ь (этап 8). Наконец, реакция сочетания Сузуки с бороновым эфиром 2Ν (этап 9) и, в случае необходимости, удаление защиты (этап 10) дает конечный продукт 2О.
Схема 3
Получение дигидроизохинолинон оксим эфира
где Υ = водород и К1-К2 определены в тексте
пирролидин ΝΟ,ΤΝ
Реакция альдегида ЗА с ацетон-производным 3В дает енон 3С (этап 1). Обработка енона 3С малонат-производным 3Э с последующей сапонификацией и декарбоксилированием дает винилоговую кислоту 3Е (этап 2). С-ацилирование хлорангидридом 3Р дает трион 30 (этап 3). Ацетилирование винилоговой кислоты дает 3Н (этап 4), которое, в свою очередь, обрабатывают малононитрилом в основной среде с получением 31 (этап 5). Обработка биснитрила 31 аммиаком дает аминопиридин 31 (этап 6). Реакция сочетания Сузуки с бороновым эфиром 3К (этап 7) дает соединение 3Ь. Реакция с алкоксиамином 3М в дефлегмируемом пиридине (этап 8) и, в случае необходимости, снятие защиты (этап 9) дает оксим эфир 3Ν. Хиральное разделение путем сверхкритической жидкостной хроматографии дает оба энантиомера, 3О и 3Р.
Далее, 3Ь можно подвергнуть описанной ниже серии трансформаций с получением различных групп Я7. Аминопиридин 3Ь защищают в форме ацетил-производного 30 (этап 10). Обработка нитрила 30 НС1 дает кислоту 3Я (этап 11). Перегруппировка Куртиса, стимулируемая дифенилфосфорилазидом (этап 12), дает анилин 38. Наконец, анилин 38 может быть превращен в фенол 3Т с использованием реагентов Зандмейера. Любое из промежуточных соединений 30, 3Я, 38 и 3Т может быть функционализировано, как показано в этапах 8 и 9 с получением соответствующих оксимэфиров, с последующим хиральным разделением путем сверхкритической жидкостной хроматографии.
- 29 019156
Схема 4
Получение дигидронафтиридинон оксим эфира
Реакция альдегида 4А с хиральным сульфонамидом 4В в присутствии тетраэтоксида титана дает имин 4С (этап 1). Обработка сульфанимида только реагентом Реформатского 4Ό дает энантиомерно чистый сульфонамид 4Е (этап 2), после чего проводят катализируемое кислотой снятие защиты с получением бета-аминокислоты 4Е (этап 3). Реакция амина с функционализированным дикетеном 4С дает амид 4Н (этап 4), после чего осуществляют обработку метоксидом с получением продукта конденсации Дикмана 41 (этап 5). После окисления реакция бензонитрила 41 с аммиаком дает продукт конденсации 41 (этап 6). Превращение лактама 41 в тиолактам 4К осуществляют с использованием тиолирующего реагента, такого как реагенты Дэви и Лоуссона (этап 7). Превращение тиолактама 4К в амидин 4М осуществляют путем обработки замещенным алкоксиамином 4Ь (этап 8). Наконец, реакция сочетания Сузуки с бороновым эфиром 4Ν (этап 9) и, в случае необходимости, снятие защиты (этап 10) дает конечный продукт 4О.
Схема 5
Получение дигидропиридопиримидинона оксим эфира
Реакция тиолактама 2К с защищенным гидроксиламином 5А (например, защищенным ТВ8) в при- 30 019156 сутствии ацетата ртути дает амидин 5В, после чего проводят катализируемое кислотой снятие защиты с получением гидроксил-производного 5С. Алкилирование подходящим галоалкилом 5Ό в основании, например С§2СО3, дает оксим эфир 5Е, после чего осуществляют реакцию сочетания, такую как реакция сочетания Сузуки с бороновой кислотой 5С, и, если необходимо, снятие защиты с получением продукта 5Е.
Схема 6
Получение дигидронафтиридинон оксим эфира
5 η
'ЩН
л Λ
η2ν ν Π
Кб'
2Κ Υ 4Ηιι
Нй(ОАс)г юлуол 100 ’С; 2 ч. 80%
ρ^ρρΟΛ
2Ν МагСОз, ЦМГщмф ’С. 30%
,Н1
6С
Κι
(¾ Ν ι II „ОН «2 Ν Α
ΝΗ г* 6Ε . 4ΝΗ
Эх <^χ η2ν ν >< Ββ 4ϊ' ,Ηι-’ СагСОз, ОМРдмф κ.τ.,63% Ν „Λ ПЙ ЧД .Βίο
6Ω Н12 'Ви βΡ Κ-π
га· Υ · гоаороа (С1,Вг.1) и Р1-Ю определены в тексте
Реакция тиолактама 2К с защищенным гидроксиламином 6А (например, защищенным ТВ8) в присутствии сильного тиофила (например, ацетата ртути) дает амидин 6В. Реакция арилирования (например, реакция сочетания Сузуки) с бороновым эфиром 6С и снятие защиты дают гидроксил-производное 6Ό. Алкилирование соответствующим галоалкилом 6Е в основании, например С§2СО3, дает продукт 6Е.
В каждой из описанных выше процедур или схем реакций различные заместители, отличные от указанных в описании, могут быть выбраны из различных заместителей.
Общие процедуры.
Очевидно, что некоторые соединения согласно настоящему изобретению содержат атомы, связанные с другими атомами, которые придают соединению конкретную стереохимическую структуру (например, хиральные центры). Очевидно, что синтез соединений согласно настоящему изобретению может привести к получению смесей различных стереоизомеров (т.е. энантиомеров и диастереомеров). Если не указана конкретная стереохимическая структура, предполагается, что упоминание соединения включает все возможные различные стереоизомеры.
Соединения согласно настоящему изобретению могут также быть получены в форме отдельных стереоизомеров путем осуществления реакции рацемической смеси соединения согласно настоящему изобретению с оптически активным разделяющим агентом с образованием пары диастереоизомерных соединений, разделения диастереоизомеров и выделения оптически чистого энантиомера. Хотя разделение энантиомеров можно осуществить с использованием ковалентных диастереомерных производных соединений, предпочтительно использовать диссоциируемые комплексы (например, кристаллические диастереоизомерные соли).
Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть изготовлены в виде фармацевтически приемлемых солей путем осуществления реакции формы свободного основания с фармацевтически приемлемыми неорганическими или органическими кислотами. В альтернативном варианте соли присоединения с фармацевтически приемлемыми кислотами могут быть приготовлены путем осуществления реакции формы свободной кислоты с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Неорганические и органические кислоты и основания, пригодные для получения фармацевтически приемлемых солей соединений, описаны в разделе Определения данного патента. В альтернативном варианте формы свободных оснований соединений могут быть приготовлены с использованием солей исходных материалов и промежуточных соединений.
Формы свободных кислот или свободных оснований соединений могут быть получены из соответствующих солей присоединения оснований и солей присоединения кислот. Например, соединение из формы соли присоединения кислоты может быть переведено в форму соответствующего свободного основания путем обработки подходящим основанием (например, раствором гидроксида аммония, гидроксидом натрия и т.п.). Соединение в форме присоединения основания может быть превращено в соответствующую свободную кислоту путем обработки подходящей кислотой (например, соляной и т.п.).
Производные соединений, представляющие собой пролекарства, могут быть получены способами, известными среднему специалисту в соответствующей области (например, дальнейшие подробности
- 31 019156 можно найти в 8аи1шег еί а1. (1994), Богдаше апб Мебюта1 СйешШгу Ьейегк. νοί. 4, р. 1985). Например, соответствующие пролекарства могут быть приготовлены путем осуществления реакции недериватизированного соединения с подходящим карбамалирующим агентом (например, 1,1ацилоксиалкилкарбонохлоридат, перенитрофенил карбонат и т.п.).
Защищенные соединения согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены способами, известными среднему специалисту в соответствующей области. Подробное описание методик, которые можно применять для получения защитных групп и их удаления, приведено в Р.С.М. ХУий апб Т.^. Стене, Сгеепе'8 Рго1ес1тд Сгоирк ίη Огдашс δνηΐΐκκίκ, 4‘ь ебйющ ίοΐιη \Убеу & δοηκ, 1пс. 2007.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть легко приготовлены или образованы в ходе осуществления способов согласно настоящему изобретению в форме сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений согласно настоящему изобретению могут быть легко приготовлены путем рекристаллизации из смеси водного/органического растворителя с использованием органического растворителя, такого как диоксин, тетрагидрофуран или метанол.
Настоящее изобретение также предусматривает (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим бензоат - форму. Образование (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим бензоата (формы А) обычно осуществляют путем кристаллизации из растворителя. На практике, удобные растворители включают хлороформ, толуол, ацетонитрил и ацетон. Также можно использовать антирастворители, т.е. растворители или растворы, в которых соединения растворяются хуже, чем в выбранном растворителе. Объем растворителя не критичен, однако для удобства его следует поддерживать минимальным. Необязательно, кристаллизацию можно инициировать при помощи формы А. Такие процессы обычно требуют от 2 ч до 7 дней. Очевидно, что термины кристаллизовать, кристаллизирование и кристаллизация обозначают полное растворение с последующим осаждением, а также процесс образования суспензии без полного растворения.
(К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим бензоат (форма А) может быть исследован методом рентгеновской дифрактографии. Порошковая рентгеновская дифрактограмма формы А, полученная по стандартной методике рентгеновской кристаллографии, приведена на фиг. 2. Стандартные порошковые дифрактометры обычно оборудованы медным источником, монохроматором первичного пучка и детектором положения. Падающий луч обычно коллимируется с использованием дивергентной щели около 1°. Источник обычно работает при 40 кВ и 30 мА. Порошковая рентгеновская дифракция может регистрироваться при угле два тета от 3 до 120° с шагом от 0.02 до 0.04. Дифрактометр может быть откалиброван по кремниевому стандарту или другим подходящим стандартным материалам. Многие современные дифрактометры могут быть автоматизированы, что обеспечивает вращение образцов в ходе сбора данных. Очевидно, что относительная интенсивность пиков рентгеновской дифракции может зависеть от предпочтительной ориентации и других факторов. Соответственно, может потребоваться обработка формы А для подавления таких факторов, например, измельчение образца в агатовой ступке с пестиком или другие меры. Очевидно, что различия в относительной интенсивности дифракционных пиков не мешает получению дифракционной картины, соответствующей (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4дигидроксибутил бензоата (форма А). Также очевидно, что для идентификации (К,2)-2-амино-7-(4-фтор2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4дигидроксибутил бензоата (формы А) требуется только набор пиков, показанных на фиг. 2, а в некоторых примерах достаточно одного пика.
Форма А также может быть исследована путем температурного анализа, обычно дифференциальной сканирующей колориметрии (Б8С) и термогравиметрии. На фиг. 3 показаны термограммы, полученные методом Б8С и термогравиметрии формы А. Термограмма Б8С показывает единственное эндотермическое событие при 128°С, которое соответствует плавлению.
В настоящем описании символы и обозначения, используемые в способах, схемах и примерах согласуются с используемыми в современной научной литературе, например в журнале Американского химического общества (Ιοι.ιη'ΐηΐ ο£ 111е Атенсам Сйеш1са1 8οс^еίу) или журнале биологической химии (6οιΐΓη;·ι1 ο£ Вю^дюб Сйетщйу). Для обозначения остатков аминокислот используются стандартные однобуквенные и трехбуквенные обозначения, которые предполагают Ь-конфигурацию, если не указано иное. Кроме тех случаев, когда указано другое, все исходные материалы были приобретены у коммерческих поставщиков и использовались без дополнительной очистки. В частности, в примерах и описании могут встретиться следующие сокращения:
- 32 019156
мкл (микролитр) Ас (ацетил)
атм (атмосфера) АТФ (аденозин трифосфат)
ВОС (трет-бутилоксикарбонил) ВОР (бис(2-оксо-3- оксазолидинил)фосфиновый хлорид )
БСА (бычий сывороточный альбумин) ΟΒΖ (бензилоксикарбонил)
СШ (1,1-карбонилдиимидазол) ОСС (дициклогексилкарбодиимид)
ОСЕ (дихлорэтан) ДХМ (дихлорметан)
ΏΜΑΡ (4-диметиламинопиридин) ΏΜΕ (1,2-диметоксиэтан)
ДМФ (Ν,Ν-диметилформамид) ЭМРи (Ν,Ν’-диметилпропилмочевина)
ДМСО (диметилсульфоксид) ЕОС1 (этилкарбодиимид гидрохлорид)
ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) Εΐ (этил)
ЕьО (диэтилэфир) ЕЮАс (этил ацетат)
РМОС (9-флуоренилметоксикарбонил) г (грамм)
ч (час) НОАс или АсОН (уксусная кислота)
НОВТ (1-гидроксибензотриазол) НО8и (Ν-гидроксисукцинимид)
ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) Гц (Герц)
ί.ν. (внутривенно) 1ВСР (изобутил хлорформат)
ί-РгОН (изопропанол) л (литр)
М (моль) тСРВА (мета-хлорпербензойная кислота)
Ме (метил) МеОН (метанол)
мг (миллиграмм) МГц (мегагерц)
мин (минута) мл (миллилитр)
мМ (миллимоль) ммоль (миллимоль)
моль (моль) МОР8 (морфолинпропансульфоновая кислота)
т.п. (точка плавления) ИаОАс (ацетат натрия)
ОМе (метокси) Ρ5Ϊ (фунт на квадратный дюйм)
ОФ (ЕР. обращенная фаза) к.т. (температура окружающей среды)
8РА (анализ сцинцилляции близости) ТВАР (тетра-п-бутиламмония фторид)
ТВ8 (1-бутилдиметилсилил) 1Вц (трет-бутил)
ТЭА (триэтиламин) ТФА (трифторуксусная кислота)
ТФАА (трифторуксусный альдегид) ТГФ (тетрагидрофуран)
Т1Р8 (триизопропилсилил) ТБС (тонкослойная хроматография)
ТМС (триметилсилил) ТМСЕ (2-(триметилсилил)этил)
Тг (время удерживания) Вгц35 (полиоксиэтиленгликоля додециловый эфир)
Все упоминания эфира или Εί2Ο относятся к диэтиловому эфиру, упоминания солевого раствора относятся к насыщенному водному раствору №С1. Если не указано другое, все значения температуры выражены в °С (градусы Цельсия). Все реакции проводят в инертной атмосфере при комнатной температуре, если не указано другое.
1Н-ЯМР спектры регистрировали на аппарате Вгикег Ауапсе 400. Химические сдвиги выражены в частях на миллион (ррт). Константа связи выражена в Герцах (Гц). Расщепление описывает видимую множественность и обозначается как 8 (синглет), б (дублет), ί (триплет), с.| (квартет), т (мультиплет), Ьг (широкий).
Масс-спектры низкого разрешения (МС) и данные о чистоте соединения получали на устройстве ^а!ег8 ΖΡ ЬС/МС с одной квадрупольной системой, оборудованной источником ионизации электроспреем (Е81), УФ-детектором (220 и 254 нм) и испарительным детектором рассеяния света (ЕБ8Э). Тонкослойную хроматографию проводили на силикагелевых пластинках 0.25 мм Е. Мегск (60Г-254), визуализировали УФ-светом, 5% с использованием фосфомолибденовой кислоты, раствора Нингидрина или ранизальдегида. Колоночную флэш-хроматографию проводили на силикагеле (меш 230-400, Мегск).
Исходные материалы и реагенты, используемые для получения этих соединений, либо доступны у коммерческих поставщиков, таких как А1бпс11 С’11е1шса1 Сотрапу (Мб^аикее, XVI), Васкет (Тоггапсе, СА), 8|дта (8ΐ. Ьош8, МО), или могут быть получены способами, хорошо известными средним специалистам в соответствующей области. Процедуры ниже описаны в таких стандартных источниках, как Пе8ег апб Г1е8ет'8 К.еадеп18 Гог Огдашс 8уп1ке818, νο18. 1-23, Ιοίιη \νίΒ\· апб δοη8, №\ν Уотк, ΝΥ, 2006; К.обб'8 Скеш181гу οί СагЬоп Сотроипб8, νο18. 1-5 апб 8ирр8., Е18еу1ег 8с1епсе РиЬ118кег8, 1998; Огдашс Веасбоп8, νο18. 1-68, 1окп \νίΒ\· апб 8оп8, №\ν ΥογΚ, ΝΥ, 2007; Магск 1.: Αбνаηсеб Огдашс Скет181гу, 5(Н еб., 2001, 1о1т \νίΒ\· апб 8оп8, №\ν ΥογΚ, ΝΥ; Ьагоск: СотргеНеп81уе Огдашс Тгап8Гогта11оп8, 2пб ебШоп, 1окп \νίΓ\· апб 8оп8, №\ν Уогк, 1999. Полное раскрытие всех документов, цитируемых в данном патенте, включены в настоящее описание посредством ссылки.
Известны различные методы разделения рацемических смесей различных стереоизомеров. Например, рацемическую смесь соединения можно подвергнуть реакции с оптически активным разделяющим
- 33 019156 агентом с образованием пары диастереоизомерных соединений. Диастереоизомеры можно затем разделить, чтобы выделить оптически чистые энантиомеры. Диссоциируемые комплексы также можно использовать для разделения энантиомеров (например, кристаллические диастереоизомерные соли). Диастереомеры обычно обладают достаточно различающимися физическими свойствами (например, точками плавления, точками кипения, растворимостью, реактивностью и т.д.) и легко могут быть разделены благодаря этим различиям. Например, диастереомеры обычно можно разделить методом хроматографии или с использованием методик разделения/разрешения, использующим различия в растворимости. Более подробное описание матодик, которые можно использовать для разделения стереоизомеров соединений, можно найти в 1еап 1асцнек, Апбге Со11ек, 8атие1 Н. №11еп, Епапйотегк, Касетакек апб Кеко1икюпк, 1оНп №11еу & 8ои5, 1пс. (1981).
Диастереомеры обладают различными физическими свойствами (например, точками плавления, точками кипения, растворимостью, реактивностью и т.д.) и легко могут быть разделены благодаря этим различиям. Диастереомеры можно разделять путем хроматографии или предпочтительно при помощи методик разделения/разрешения, основанных на различиях в растворимости. Затем выделяют оптически чистый энантиомер с использованием разделяющего агента любыми практическими средствами, которые не приведут к рацемизации. Более подробное описание методик, которые можно применять для выделения стереоизомеров соединений из рацемических смесей, можно найти в 1еап 1асцнек, Апбге Со11ек, 8атие1 Н. №|1еп, ЕпапЦотегк, Касетакек апб Кеко1ийопк, 1оНп №11еу & 8опк, 1пс. (1981).
Хиральные компоненты могут быть разделены при помощи любой из разнообразных методик, известных специалистам. Например, хиральные компоненты могут быть очищены путем сверхкритической жидкостной хроматографии (8ЕС). В одном варианте анализ методом хиральной аналитической 8ЕС/МС осуществляют с использованием аналитической системы Вегдег (АикоСНет, №\\агк, ЭЕ), которая состоит из модуля контроля жидкости с двойным насосом Вегдег ЕСМ 1100/1200 и модифицирующим жидкостным насосом ЕСМ 1200, печи Вегдег ТСМ 2000 и автосэмплером А1сокк 718. Интегральной системой может управлять программное обеспечение В1-8ЕС СНетккайоп, версии 3.4. Детектирование можно осуществлять на детекторе №акегк ΖΡ 2000, управляемом в положительном режиме с интерфейсом Е81, в диапазоне измерений от 200-800 Да с 0.5 с на изображение. Хроматографическое разделение можно осуществлять на колонках СЫта1Рак АЭ-Н, СЫта1Рак А8-Н, СЫта1Се1 ΘΌ-Н или СЫта1Се1 О1-Н (5 мк 4.6x250 мм; СЫта1 Тесйио1од^ек, 1пс. №екк СНеккег, РА) с 10 до 40% в качестве модификатора, с ацетатом аммония или без (10 мМ). Можно использовать любую из различных скоростей потока, включая например, 1.5 или 3.5 мл/мин при давлении на входе, установленном на 100 бар. Дополнительно, можно использовать разнообразные параметры впрыскивания образца, включая, например, объем образца 5 или 10 мкл в метаноле при концентрации 0.1 мг/мл.
В другом варианте препаративную хиральную хроматографию можно осуществлять с использованием системы очистки Вегдег МиШ6тат II 8ЕС. Например, образцы можно загружать на колонки СЫта1Рак АО со1итп (21x250 мм, 10 мкм). В конкретных вариантах скорость потока для разделения может быть 70 мл/мин, объем образца может составлять до 2 мл, а давление на входе может быть установлено на 130 бар. Для повешения эффективности можно применять множество впрыскиваний.
Описание синтеза конкретных соединений согласно настоящему изобретению на основании описанных выше схем реакции и их варианты приведены ниже в разделе Примеры.
Исследование биологической активности соединений согласно настоящему изобретению.
Ингибирующее действие соединения согласно настоящему изобретению на Н8Р90 может быть оценено с использованием разнообразных видов анализа связывания и функционального анализа. Хорошо известно, что связывание Ν-концевого АТФ-связывающего домена Н8Р90 ингибирует связывание АТФ и АТФ-зависимую активность шаперонов, Кое ек а1. I. Меб. СНет. 1999 42, 260-266. В литературе описаны разнообразные тесты связывания ш νίΙΐΌ и ш у1уо для оценки аффинности соединений согласно настоящему изобретению к Н8Р90; например, СЫоык ек а1. СНетккту & Вю1оду, 2001, 8: 289-299, Саггегак ек а1. Апа1 ВюсНет, 2003, 317(1): 40-6; К1т ек а1. I. Вюто1 8сгееп, 2004, 9(5): 375-81; и Ζ^ι.! ек а1. Апа1 ВюсНет, 2004, 331(2): 349-57.
Пример А-1 ниже описывает конкурентный флюоресцентный поляризационный анализ ш уйто, в котором тестируемое соединение конкурирует с флуоресцентным зондом за связывание со связывающим доменом рекомбинантного Н8Р90 человека. За кинетикой реакции можно следить по флюоресценции (возбуждение при λ=485 нм; испускание при λ=538 нм). Аффинность связывания тестрируемого соединения с Н8Р90 определяют по поляризованной флюоресценции; интенсивность поляризованной флюоресценции пропорциональна доли связанного зонда, новый низкомолекулярный зонд, (8,Е)-5-(2-(2амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)илиденаминоокси)этилкарбамоил)-2-(6-гидрокси-3-оксо-3Н-ксантен-9-ил)бензойная кислота (зонд Т8ЭЕР) был разработан специально для этого анализа. Константны ингибирования можно рассчитать (1С50) при помощи нелинейной аппроксимации кривой концентраций соединения и интенсивностей флюоресценции стандартным уравнением 1С50. Для справки, измеренные в этом тесте значения 1С50 для двух известных ингибиторов Н8Р90: гелданамицина (6М) и 17-аллиламино,17-деметоксигелданамицина (17
- 34 019156
ААС) после 1 ч инкубации с ферментом и зондом Т8Э-РР, составили 90 и 400 нм соответственно. С использованием процедуры, описанной в примере А-1, было показано, что приведенные в качестве примеров соединения обладают аффинностью связывания Н8Р90, соответствующей 1С50 менее 10 мкМ, а некоторые - менее 1 мкМ, а большинство других соединений обладают значением 1С50 менее 0.1 мкМ. Значения 1С50 приведенных в качетстве примеров соединений согласно настоящему изобретению приведены в табл. 1.
Ингибирующее действие соединений согласно настоящему изобретению в отношении Н8Р90 в живых клетках может быть оценено путем измерения жизнеспособности клеток. В примере А-2 описан тест на жизнеспособность клеток, в котором клетки опухоли в фазе экспоненциального роста обрабатывают лекарственным средством в диапазоне концентраций. После обработки лекарственным средством измеряли жизнеспособность клеток по превращению солей тетразолия ΜΤ8 (3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-5-[3карбоксиметоксифенил]-2-[4-сульфофенил]-2Н-тетразолий, внутренняя соль), (Рготеда, Май18оп, ^1) метаболически активными клетками. Далее, панель выбранных раковых клеток включает клетки ВТ-474, НТ-29, К-562 и ΜΚΝ-45, каждая из которых отражает различные типы раковых опухолей, а также понимаемые пути злокачественной трансформации.
Влияние ингибирования Н8Р90 ниже по каскаду может быть оценено по индукции Н8Р70 и функции и стабильности различных стероидных рецепторов и сигнальных белков, включая, например, НЕК2/ЕКВВ2. Индукция Н8Р70 является главным признаком ингибирования Н8Р90. Транскрипция самого Н8Р70 как АТФ-зависимого белка теплового шока будет повышаться в ответ на неправильно свернутые, денатурированные или агрегированные белки. Поскольку функция Н8Р90 нарушается, Н8Р70 стимулируется непосредственно в ответ на изменения белков-клиентов Н8Р90 в клетке. Сио е! а1. Сапсег Кез, 2005, 65(22), 10536. В примере А-3 описан способ количественной оценки индукции Н8Р70 путем измерения неинфракрасной люминесценции β-галактозидазы и определение значений ЕС50 тестового соединения в отношении индукции Н8Р70в/в-галактозидазы.
Снижение количества онкопротеина НЕК-2/ЕКВВ2 также указывает на ингибирование Н8Р90. 8ат е! а1. Мо1 Сапсег Тйег, 2006, 5(5), 1197; 8йагр е! а1. Мо1 Сапсег Тйег, 2007, 6(4), 1198. НЕК-2 использует Н8Р90 для созревания; изменения функционирования Н8Р90 приводят к появлению неправильно сложенного белка, который в итоге подвергнется убиквитинилированию и разрушению в протеосомах. Соединения согласно настоящему изобретению вызывают деградацию этих молекул, которые можно измерить с использованием хорошо известных методик с использованием антител, таких как иммуноблоттинг, радиоиммуноанализ, Вестерн-блот, иммунопреципитация, твердофазный иммуноферментный анализ (ЕЫ8А) и производные методики с использованием антител против НЕК2. В примере А-4 описаны процедуры анализа Вестерн-блот для определения значения ЕС50 тестируемого соединения на снижение количества НЕК2/ЕКВВ2.
Для специалистов в данной области будут очевидны различные модификации и изменения, которые можно внести в соединения, композиции, наборы и способы согласно настоящему изобретению, не выходящие за рамки объема изобретения. Таким образом, предполагается, что настоящее изобретение охватывает модификации и варианты настоящего изобретения, при условии, что они попадают в объем, определяемый формулой изобретения и ее эквивалентами.
Примеры
Пример 1. Общая процедура получения эфира оксима и аналогов.
- 35 019156
Α. (Е)-4-(2-Бром-4-фторфенил)бут-3-ен-2-он (1В).
В испарительную колбу на 500 мл добавляли 2-бром-4-фторбензальдегид (1А, 10.0 г, 49.3 ммоль, 1.0 экв.) и ацетон (22.9 г, 394 ммоль, 8.0 экв.). Смесь охлаждали до 0°С в ледяной ванне. Добавляли Н2О (200 мл) и смесь превращалась в густую суспензию. Добавляли твердый №ЮН (2.16 г, 54.2 ммоль, 1.1 экв.), постепенно нагревали реакционную смесь до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли 1 N НС1 и экстрагировали ЕЮАс (3x100 мл). Органические фазы объединяли и промывали насыщенным водным №С1. Органическую фазу сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением темно-желтого масла, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки (11.9 г, 99%).
Е8ЕМС: т/ζ 243.2 (М+Н)+.
B. 5-(2-Бром-4-фторфенил)-3-гидроксициклогекс-2-енон (1Ό).
В испарительную колбу на 500 мл добавляли (Е)-4-(2-бром-4-фторфенил)бут-3-ен-2-он (1В, 11.9 г, 49.0 ммоль, 1.0 экв.) и МеОН (200 мл). Добавляли диметилмалонат (1С, 6.47 г, 49.0 ммоль, 1.0 экв.), а затем №ЮМс (30 мас.%, в МеОН, 9.6 мл, 51.4 ммоль, 1.05 экв.). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, после чего ее конденсировали с получением коричнево-красного твердого вещества. Остаток разбавляли в 1 N №ЮН (150 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч, в течение которого цвет реакционной смеси менялся с мутно-красного до прозрачнокоричневого с коричневым осадком. Осторожно добавляли концентрированную НС1 до достижения кислого рН смеси (согласно бумажке для опредения рН). Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (200 мл) и промывали насыщенным водным №С1. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (1x75 мл). Органическую фазу сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением пенистого оранжевого твердого вещества, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки (14.3 г, 100%).
Е8ЕМС: т/ζ 285.2 (М+Н)+.
C. 5-(2-Бром-4-фторфенил)-2-(1-гидроксиэтилиден)циклогексан-1,3-дион (1Е).
В испарительную колбу на 500 мл добавляли 5-(2-бром-4-фторфенил)-3-гидроксициклогекс-2-енон (1Ό) (14.3 г, 50.1 ммоль, 1.0 экв.), СН2С12 (200 мл), уксусный ангидрид (6.65 г, 65.2 ммоль, 1.3 экв.), ЕΐзN (15.22 г, 150 ммоль, 3.0 экв.) и диметиламинопиридин (ДМАП) (каталитическое количество). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Мониторинг методом ЖХ/МС показал завершение реакции. Реакционную смесь концентрировали и очищали путем колоночной хроматографии (градиент 70% СН2С12/Гексан до 100% СН2С12) с получением продукта в форме светло-желтой пены, которая позже превращалась в масло (3.55 г, 22%). Неочищенный материал использовали на следующем этапе без очистки.
Е8ЕМС: т/ζ 327.2 (М+Н)+.
Ό. 2-Амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он (1Р).
В 150-мл сосуд для работы под давлением добавляли 5-(2-бром-4-фторфенил)-2-(1гидроксиэтилиден)циклогексан-1,3-дион (1Е, 1.12 г, 3.42 ммоль, 1.0 экв.), ЕЮН (30 мл), гуанидин гидрохлорид (818 мг, 8.56 ммоль, 2.5 экв.) и диметиламин (2.0 М в ТГФ, 10 мл, 20.5 ммоль, 6.0 экв.). Сосуд закрывали и нагревали в течение 72 ч при 100°С. Завершение реакции определяли методом ЖХ/МС. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали с получением пастообразного серого твердого вещества. К остатку добавляли ЕЮН (~10 мл) и обрабатывали ультразвуком в суспензии. Твердое вещество собирали путем фильтрации и промывали холодным ЕЮН с получением светло-желтого твердого вещества (288 мг, 24%).
Е8ЕМС: т/ζ 350.2 (М+Н)+.
Е. 2-Амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он (1Н).
В испарительную колбу на 10 мл добавляли 2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он (33 мг, 0.0942 ммоль, 1.0 экв.), 2-фторпиридин-3-бороновую кислоту (27 мг, 0.188 ммоль, 2.0 экв.), ОМЕ (2 мл), карбонат калия (2.0 М вод., 94 мкл, 0.188 ммоль, 2.0 экв.) и палладия тетракис-трифенилфосфин (5 мг, 0.00471 ммоль, 0.05 экв.). Реакционную смесь нагрували с обратным холодильником в течение ночи, после чего ЖХ/МС показала завершение реакции. Реакционную смесь фильтровали через целит и концентрировали с получением остатка. Остаток очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением продукта в форме белого твердого вещества (30 мг, 96%).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.67 (бб, 1=3.54, 1.77 Гц, 1Н), 2.89 (Ьг. 5., 1Н), 3.06 (1, 1=12.51 Гц, 2Н), 3.18 (Ьг. 5., 1Н), 7.18 (бб, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Н), 7.31-7.53 (т, 4Н), 7.72 (бб, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Н), 7.98 (ббб, 1=9.79, 7.52, 1.89 Гц, 1Н), 8.28 (б, 1=4.80 Гц, 1Н).
Е8ЕМС: т/ζ 367.3 (М+Н)+.
Е8ЕМС: т/ζ 367.3 (М+Н)+.
Р. Получение оксим эфиров.
Оксим эфиры могут быть получены либо способом А, либо способом В, которые описаны ниже.
Способ А, основные условия. Раствор 2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (1Н, 0.27 ммоль, 1.0 экв.) и соответствующего гидроксиламина П (0.54
- 36 019156 ммоль, 2.0 экв.) в сухом пиридине (2 мл) перемешивали в течение ночи при 75°С. Смесь вливали в ледяную воду, полученный осадок собирали путем фильтрации. Неочищенное твердое вещество перекристаллизовывали в горячем этаноле с получением чистого продукта 11 в форме белого твердого вещества с выходом 90%.
Способ В.
Кислые. Раствор 2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-она (1Н, 0.27 ммоль, 1.0 экв.) в Е1ОН (3 мл) перемешивали в атмосфере Ν2. Добавляли соответствующий гидроксиламин 11 (0.35 ммоль, 1.3 экв.) и водную НС1 (5 М, 0.48 ммоль, 1.8 экв.) и нагревали реакционную смесь с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Полученный остаток собирали и перекристаллизовали в горячем этаноле с получением чистого продукта 11 в форме белого или беловатого порошка с выходом около 90%.
Пример 2.
Получение реагентов - гидроксиламинов.
А. Синтез О-(2-метоксиэтил)гидроксиламина (2В).
Этап 1. 2-Метоксиэтанол (2.00 г, 26.3 ммоль), Ν-гидроксифталимид (4.72 г, 28.9 ммоль, 1.1 экв.) и трифенилфосфин (7.58 г, 28.9 ммоль, 1.1 экв.) растворяли в 85 мл сухого ТГФ, а затем смесь охлаждали в ледяной ванне. Диизопропил азодикарбоксилат (6.91 г, 34.2 ммоль, 1.3 экв.) растворяли в 15 мл сухого ТГФ и медленно добавляли к описанной выше смеси. Реакционную смесь перемешивали в ледяной ванне в течение 10 мин, после чего ледяную ванну удаляли. Затем реакционную смесь оставляли при перемешивании при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение ночи. После завершения реакции согласно ЖХ/МС, реакционную смесь концентрировали с получением масла. Затем ее очищали путем флэшхроматографии с использованием смеси гексан/этилацетат 70/30 с получением 2-(2метоксиэтокси)изоиндолин-1,3-диона (2А, 5.19 г, 89.2% выход).
Е81-МС: т/ζ 222.3 (М+Н)+.
Этап 2. 2-(2-Метоксиэтокси)изоиндолин-1,3-дион (5.18 г, 23.4 ммоль) растворяли в 50 мл этанола и гидрате гидразина (22.7 мл, 468 ммоль). Раствор нагревали в течение 2 ч в масляной ванне при температуре 80°С. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, твердые вещества оседали. Это твердое вещество затем фильтровали, фильтрат концентрировали и очищали путем колоночной флэш-хроматографии с использованием смеси хлороформ/метанол 98/2 с получением О-(2метоксиэтил)гидроксиламина (2В, 0.866 г, с выходом 36.2%).
1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 3.36 (8, 3Н), 3.52-3.59 (т, 2Н), 3.73-3.85 (т, 2Н).
В. Синтез О-(3-метоксипропил)гидроксиламина (2Ό).
о
ТГФ
2-(3-Метоксипропокси)изоиндолин-1,3-дион (2С) получали из 3-метоксипропан-1-ола и Νгидроксифталимида, следуя процедуре, аналогичной примеру 2А, этап 1 (3.71 г, с выходом 94.9%).
Е81-МС: т/ζ 236.3 (М+Н)+.
2С освобождали от защиты, как описано в примере 2А, этап 2 с получением О-(3метоксипропил)гидроксиламина (2Ό, 0.633 г, с выходом 38.1%).
1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 1.81 (1, 1=6.32 Гц, 2Н), 3.31 (8, 3Н), 3.45 (1, 1=6.32 Гц, 2Н), 3.70 (1, 1=6.32 Гц, 2Н).
Е81-МС: т/ζ 106.4 (М+Н)+.
- 37 019156
С. Синтез трет-бутил 2-(аминоокси)этилкарбамата (2Е).
трет-Бутил 2-(1,3-диоксоизоиндолин-2-илокси)этилкарбамат 2Е получали из трет-бутил 2гидроксиэтилкарбамата и Ν-гидроксифталимида, следуя процедуре, аналогичной примеру 2А, этап 1.
Е1-МС: т/ζ 329.3 (МАа)'.
2Е освобождали от защиты, как описано ранее в 2А, этап 2 с получением трет-бутил 2(аминоокси)этилкарбамата (2Е, 1.26 г, с выходом 58%).
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.45 (8, 9Н), 3.37 (д, 1=5.31 Гц, 2Н), 3.62-3.85 (т, 2Н), 4.90 (Ьг. 8., 1Н), 5.47 (Ьг. 8., 2Н).
Ό. Синтез О-(пиридин-3-илметил)гидроксиламина (2Н).
Фталимид-защищенное промежуточное соединение 2С получали из пиридин-3-илметанола и Νгидроксифталимид, следуя процедуре, аналогичной примеру 2А, этап 1 (3.22 г, 81.3% выход).
Е1-МС: т/ζ 255.2 (М+Н)+.
2С освобождали от защиты, как описано ранее в примере 2А, этап 2 с получением О-(пиридин-3илметил)гидроксиламина (2Н, 0.734 г, с выходом 69.2%).
’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 4.71 (8, 2Н), 7.44 (бб, 1=7.83, 5.05 Гц, 1Н), 7.85 (б, 1=7.83 Гц, 1Н), 8.47 (бб, 1=5.05, 1.26 Гц, 1Н), 8.53 (б, 1=2.27 Гц, 1Н).
Е1-МС: т/ζ 125.3 (М+Н)+.
2Е. Синтез (К)-О-((1,4-диоксан-2-ил)метил)гидроксиламина (2М).
Этап 1. 2-Хлорэтанол (34.8 г, 43.2 ммоль) бора трифториддиэтил и бора трифлюорид диэтилэфират (0.136 мл, 1.08 ммоль) растворяли в 20 мл ТГФ и охлаждали в ледяной ванне. В 10 мл ТГФ медленно через шприц добавляли (К)-(-)-эпихлорогидрин (10.0 г, 10.8 ммоль). После добавления ледяную ванну удаляли и смесь нагревали на масляной бане при 45°С в течение 90 мин, за это время реакция завершалась. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом с получением маслянистого сырого продукта (К)-1хлор-3-(2-хлорэтокси)пропан-2-ол (2ф 16.2 г, с выходом 86.6%).
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 3.56-3.71 (т, 6Н), 3.85-3.92 (т, 3Н).
Этап 2. 2I (16.2 г, 93.6 ммоль) растворяли в 45 мл ТГФ и охлаждали в ледяной ванне. В 20 мл воды капельно добавляли гидроксид натрия (9.36 г, 234 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в ледяной ванне в течение 15 мин, и при комнатной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия. Продукт экстрагировали в фазу этилацетата три раза. Объединенные органические фазы затем промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили на сульфате натрия и концентрировали в сырой маслянистый продукт, (8)-2-((2хлорэтокси)метил)оксиран (21, 11.1 г, с выходом 86.7%).
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.57-2.72 (т, 2Н), 2.76-2.89 (т, 2Н), 3.08-3.25 (т, 2Н), 3.45
- 38 019156 (бб, 1=12.25, 5.68 Гц, 1Н), 3.51-3.70 (т, 2Н).
Этап 3. 21 (11.1 г, 81.3 ммоль) растворяли в 50 мл ТГФ. В 50 мл воды добавляли гидроксид натрия (16.3 г, 406 ммоль) и нагревали реакционную смесь в масляной бане при 90°С в течение одного дня. Несмотря на то что анализ методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) показал, что реакция завершена только наполовину, продукт экстрагировали из водной фазы с этилацетатом/ТГФ, дихлорметаном, ηбутанолом. Первые две экстракции содержали продукт и исходный материал, который позже очищали методом флэш-колоночной хроматографии (этилацетат/гексан 30/70). Дальнейшие экстракции содержали чистый (8)-(1,4-диоксан-2-ил)метанол (2К, 1.98 г, с выходом 20.8%).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 3.47 (1, 1=9.98 Гц, 1Н), 3.51-3.67 (т, 3Н), 3.67-3.87 (т, 5Н).
Этап 4. 2К (1.33 г, 11.2 ммоль), Ν-гидроксифталимид (2.02 г, 12.4 ммоль), трифенилфосфин (3.25 г, 12.4 ммоль) растворяли в 30 мл сухого ТГФ и смесь охлаждали в ледяной ванне. Диизопропил азодикарбоксилат (2.51 г, 12.4 ммоль) в 5 мл ТГФ добавляли к указанной выше смеси капельно. После добавления ледяную ванну удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На следующий день реакция была завершена. Смесь концентрировали под вакуумом с получением масла, а затем очищали методом колоночной флэш-хроматографии с использованием этилацетат/гексана 20/80 с получением (Я)-2-((1,4-диоксан-2-ил)метокси)изоиндолин-1,3-диона (2Ь).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 3.56 (1, 1=10.74 Гц, 1Н), 3.60-3.85 (т, 4Н), 3.92 (бб, 1=11.75, 2.40 Гц, 1Н), 4.05 (ббб, 1=9.98, 3.03, 2.91 Гц, 1Н), 4.11-4.19 (т, 1Н), 4.20-4.29 (т, 1Н), 7.71-7.80 (т, 2Н), 7.81-7.91 (т, 2Н).
Этап 5. 2Ь (4.30 г, 12.4 ммоль) растворяли в 90 мл метанола/дихлорметана, взятых в соотношении 1/9. Добавляли гидразин гидрат (1.67 мл, 22.4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, одновременно с чем завершалось удаление защиты. Выпавший в осадок побочный продукт фильтровали, а фильтрат концентрировали с получением масла, а затем очищали путем флэш-хроматографии, с использованием смеси хлороформ/метанол, взятой в соотношении 99/1, с получением (Я)-О-((1,4-диоксан-2-ил)метил)гидроксиламина (2М, 0.915 г, 61.4% выход в 2 этапа).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 3.41 (1, 1=10.86 Гц, 1Н), 3.57-3.71 (т, 4Н), 3.71-3.82 (т, 3Н), 3.83-3.92 (т, 1Н), 5.55 (Ьг. к., 2Н).
Р. Синтез (8)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанамина (2О).
(8)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанамин (2О) получали из (8)-2-(2,2-диметил-1,3диоксолан-4-ил)этанол (2Ν), следуя описанной в литературе процедуре (Те1^аЬеб^οη Ье11, 2005, 46, 54755478).
С. Синтез (Я)-О-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламина (2Р)
Указанное в названии соединение получали согласно ВаПеу е1 а1., 1. Меб. СЬет., 1991, 54, 51-65. 2Н. Синтез (8)-О-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламина (20)
Указанное в названии соединение получали согласно ВаПеу е1 а1., 1. Меб. СЬет., 1991, 34, 51-65. 21. Синтез О-((2,2-диметил-1,3-диоксан-5-ил)метил)гидроксиламина (2Я)
Указанное в названии соединение получали согласно Натай^ е1 а1., 1. Меб. СЬет., 1990, 33, 187196.
- 39 019156
1. Синтез трет-бутил 2-(аминооксиметил)морфолин-4-карбоксилата (2Т)
К раствору трет-бутил 2-(гидроксиметил)морфолин-4-карбоксилата (5 г, 23 ммоль) в СН2С12 (250 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (5.6 г, 34.5 ммоль) и трифенилфосфин (15 г, 57.5 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С (11.1 мл, 57.5 ммоль) и медленно по капле добавляли при помощи капельной воронки диизопропил азодикарбоксилат в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли Н2О (300 мл) и экстрагировали СН2С12. Органические фазы промывали солевым раствором. Сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали с получением прозрачного масла, которое затем очищали путем флэшхроматографии (50% ЕЮЛс-гексан). Полученное прозрачное маслянистое вещество 28 растворяли в СНС13:СН3ОН (50 мл). Добавляли гидразин гидрат (25 мл, 0.25 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением прозрачного масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (10% СН3ОН-СН2С12) с получением оксилата (2Т) в виде прозрачного масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.47 (к, 9Н), 3.46-3.62 (т, 2Н), 3.61-3.79 (т, 4Н), 3.79-4.04 (т, 3Н).
[М+Н] расч. для СюН20^О4, 233; эксп., 233.
К. Синтез (8)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламина (2 А)
К раствору (8)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанола (14.2 мл, 0.1 моль) в СН2С12 (250 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (16.3 г, 0.1 моль) и трифенилфосфин (39.3 г, 0.15 моль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и медленно по капле добавляли при помощи капельной воронки диизопропил азодикарбоксилат (29.5 мл, 0.15 моль) в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли Н2О (300 мл) и смесь, экстрагированную СН2С12. Органические фазы промывали солевым раствором. Сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэшхроматографии (50% ЕЮЛс-гексан) с получением 2И в виде светло-желтого масла.
2и растворяли в СН2С12 (250 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли гидразин гидрат (25 мл, 0.25 моль) по капле при помощи капельной воронки. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (70% ЕЮЛс-гексан) с получением 7.2 г (45%, выход в два этапа) (8)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4ил)этил)гидроксиламина (2А) в виде бледно-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.13 (к, 3Н), 1.18 (к, 3Н), 1.53-1.71 (т, 2Н), 3.53 (ц, 1=6.48 Гц, 2Н), 3.79-3.89 (т, 1Н), 3.89-4.01 (т, 1Н), 4.63-4.81 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С7Н16Ю3, 162.11; эксп., 162.0.
2Ь. Синтез (Я)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламина (2Х)
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, описанной в примере 2К, с использованием (Я)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанола (4.28 мл, 30 ммоль), СН2С12 (100 мл), 2гидроксиизоиндолин-1,3-диона (4.9 г, 30 ммоль), трифенилфосфина (11.8 г, 45 ммоль), диизопропил азодикарбоксилата (8.8 мл, 45 ммоль) и гидразин гидрата (6.0 мл, 60 ммоль) с получением 2.1 г (43%, выход
- 40 019156 в два этапа) (К)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламина (2Х) в виде бледно-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.13 (в, 3Н), 1.18 (в, 3Н), 1.53-1.71 (т, 2Н), 3.53 (т, 2Н), 3.79-3.89 (т, 1Н), 3.89-4.01 (т, 1Н), 4.63-4.81 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С7Н16ЫО3, 162.11; эксп., 162.0.
2М. Синтез О-(((3аК,4К,6аК)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил)гидроксиламина (2Υ).
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, описанной в примере 2К, с использованием ((3аК,4К,6аК)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4-ил)метанола (2.04 г, 10 ммоль), СН2С12 (25 мл), 2-гидроксиизоиндолин-1,3-диона (2.0 г, 12 ммоль), трифенилфосфина (4.0 г, 15 ммоль), диизопропил азодикарбоксилата (3.0 мл, 15 ммоль) и гидразин гидрата (2.0 мл, 20 ммоль) с получением 1.12 г О-(((3аК,4К,6аК)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил)гидроксиламина (2Υ) (50%, выход в два этапа) в виде бледно-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.24 (в, 3Н), 1.26 (в, 3Н), 3.31 (в, 3Н), 3.59-3.75 (т, 2Н), 4.44 (ΐ, 1=7.20 Гц, 1Н), 4.56 (б, 6=5.81 Гц, 1Н), 4.67 (б, 1=6.06 Гц, 1Н), 4.92-5.00 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С.1КХО,. 220.11; эксп., 220.10.
Пример 3. Хиральное разделение рацемической смеси 2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (1Еа и 1ЕЬ).
Дигидрохиназолинон 1Е (пример 1) был разделен на его энантиомеры методом сверхкритической жидкостной хроматографии (СЖХ) при следующих условиях:
Колонка С1пга1Рак ΙΑ, 250x10 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: МеОН
Параметры градиента: 20% МеОН
Время прогона: 12 мин
Расход: 20 мл/мин
Объем впрыска: 800 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 82% от исходного количества рацемической смеси. Выход (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (1Еа) составил 45%. Выход (8)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (1ЕЬ) составил 37%.
Пример 4. Хиральное разделение 2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-она (1На и 1НЬ).
Дигидрохиназолинон 1Н (пример 1) был разделен на его энантиомеры, 1На и 1НЬ, методом сверхкритической жидкостной хроматографии (СЖХ) при следующих условиях:
Колонка СЫта1Рак ΑΌ-Н, 250x2 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
- 41 019156
В: МеОН
Параметры градиента: 30% МеОН
Время прогона: 10 мин
Расход: 50 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 68% от исходного количества рацемической смеси.
Выход (В)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)она (1На) составил 36%.
Выход (8)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)она (1НЬ) составил 32%.
Пример 5. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-метил оксима (соединение 1)
Соединение 1 получали в виде белого или беловатого порошка (90%), следуя процедуре, аналогичной примеру 1, с использованием О-метилгидроксиламина.
Ή-ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ ррт 2.58-2.68 (т, 5Н), 2.78-2.88 (т, 3Н), 5.02 (к, 2Н), 6.92 (бб, 1Н), 7.17 (1б, 1Н), 7.29 (т, 1Н), 7.40 (бб, 1Н), 7.67 (ΐ, 1Н), 8.25 (б, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 396.1 (М+Н)+.
Пример 6. Хиральное разделение В и 8 энантиомеров (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-метил оксима (соединение 2 и соединение 3).
Рацемическую смесь соединения 1 разделяли на его В и 8 энантиомеры, соединение 2 и соединение 3, путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка С1пга1Рак 1А, 250x21 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: ЕЮН
Параметры градиента: 40% ЕЮН
Время прогона: 8 мин
Расход: 50 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 45%.
Выход (В,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-он О-метил оксима (1) составил 23%.
Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-она (2) составил 22%.
- 42 019156
Пример 7. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин^бЩ-он Ο-аллил оксима (соединение 4)
Соединение 4 получали в виде белого или беловатого порошка (90%), следуя процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-аллилгидроксиламина. Я и 8 энантиомеры соединения 4 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОСЯ) δ ррт 2.58 (т, 5Η), 2.82 (т, 3Η), 4.60 (к, 2Н), 4.97 (к, 2Н), 5.19-5.23 (т, 2Н), 5.99 (к, 1Η), 6.92 (66, 1Η), 7.17 (16, 1Η), 7.27 (т, 1Η), 7.41 (66, 1Η), 7.69 (т, 1Η), 8.23 (к, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 422.1 (Μ+Η)+.
Пример 8. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Η)-он Ο-трет-бутил оксима (соединение 5)
Соединение 5 получали в виде белого или беловатого порошка (90%) согласно процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-трет-бутилгидроксиламина. Я и 8 энантиомеры соединения 5 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОС1;) δ ррт 1.29 (к, 9Η), 2.61 (т, 4Η), 2.82 (т, 3Η), 4.96 (к, 2Н), 6.94 (66, 1Н), 7.18 (16, 1Η), 7.30 (т, 1Η), 7.43 (66, 1Η), 7.70 (т, 1Η), 8.25 (к, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 438.2 (Μ+Η)+.
Пример 9. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Η)-он О-изобутил оксима (соединение 6)
Соединение 6 получали в виде белого или беловатого порошка (90%) согласно процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-изобутилгидроксиламина. Я и 8 энантиомеры соединения 6 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
Ή-ЯМР (300 МГц, СОСЯ) δ ррт 0.88 (т, 6Η), 1.67 (т, 1Η), 2.29 (т, 5Η), 2.59 (к, 3Η), 3.86 (т, 2Η), 5.03 (т, 2Η), 6.93 (66, 1Η), 7.19 (16, 1Η), 7.27 (т, 1Η), 7.41 (66, 1Η), 7.70 (т, 1Η), 8.24 (к, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 438.2 (Μ+Η)+.
- 43 019156
Пример 10. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-бензил оксима (соединение 7)
Соединение 7 получали в виде белого или беловатого порошка (90%) согласно процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-бензилгидроксиламина. В и 8 энантиомеры соединения 7 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
1Н-ЯМР (300 МГц, С1)С1;) δ ррт 2.51 (з, 3Н), 2.60-2.81 (т, 4Н), 4.97 (т, 2Н), 5.12 (т, 2Н), 6.91 (άά, 1Н), 7.16 (ΐά, 1Н), 7.26-7.39 (т, 7Н), 7.65 (т, 1Н), 8.25 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 472.1 (М+Н)+.
Пример 11. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-фенил оксима (соединение 8)
Соединение 8 получали в виде белого или беловатого порошка (90%) согласно процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-фенилгидроксиламина. В и 8 энантиомеры соединения 8 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОСЪ) δ ррт 2.65-3.07 (т, 7Н), 6.04 (т, 2Н), 6.96 (άά, 1Н), 6.99 (ΐ, 1Н), 7.11-7.25 (т, 3Н), 7.26-7.35 (т, 3Н), 7.44 (άά, 1Н), 7.72 (т, 1Н), 8.25 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 458.1 (М+Н)+.
Пример 12. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-фторпиридин-3-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-4-нитробензил оксима (соединение 9)
Соединение 9 получали в виде белого или беловатого порошка (90%) согласно процедуре, описанной в примере 1, с использованием О-4-нитробензил гидроксиламин. В и 8 энантиомеры соединения 9 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 6.
1Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-ά,·,) δ ррт 2.44 (з, 3Н), 2.64-6.80 (т, 3Н), 3.20 (т, 2Н), 5.28 (з, 2Н), 7.18 (άά, 1Н), 7.38 (ΐά, 1Н), 7.45 (т, 1Н), 7.60 (т, 2Н), 7.72 (άά, 1Н), 7.99 (т, 1Н), 8.25 (т, 3Н).
Е81-МС: т/ζ 517.2 (М+Н)+.
- 44 019156
Пример 13. Получение 2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-она (13А)
Р0(фрГ)С12 ϋΜΑ, >одКгСО:4 микроволн., 150 С
13А
В сосуд для микроволновой обработки на 5 мл добавляли 2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он (1Е (пример 1), 56 мг, 0.163 ммоль, 1.0 экв.), 2-метокси-6-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (77 мг, 0.325 ммоль, 2.0 экв.), Рк(крр£)С12 (11 мг, 0.013 ммоль, 0.08 экв.), 2.0 М водный К2СО3 (162 мкл, 0.325 ммоль, 2.0 экв.) и диметилацетамид (2 мл). Сосуд запечатывали и нагревали в микроволновой печи при температуре 150°С в течение 10 мин. Анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Реакционную смесь фильтровали через целит и очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением продукта 13А в форме белого твердого вещества (33 мг, 55%).
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-к6) δ ррт 2.54 (8, 3Н), 2.62 (ккк, 1=15.73, 3.03, 2.72 Гц, 1Н), 2.84-3.04 (т, 2Н), 3.15-3.31 (т, 1Н), 3.60-3.73 (т, 1Н), 3.78 (8, 3Н), 6.81 (к, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.15 (к, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.22 (кк, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Н), 7.33 (1к, 1=8.59, 2.78 Гц, 1Н), 7.55 (Ьг. 8., 2Н), 7.71 (кк, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Н), 7.81 (кк, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 379.3 (М+Н)+.
Пример 14. Хиральное разделение К и 8 энантиомеров 2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипирвдин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (13Аа и 13АЬ)
13А
13А*
Рацемическую смесь соединения 13А разделяли на его К и 8 энантиомеры, соединение 13Аа и соединение 13АЬ, путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЫга1Рак АЭ-Н, 150x2.1 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: МеОН
Параметры градиента: 30% МеОН
Время прогона: 10 мин
Расход: 50 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 20%. Выход (К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (13Аа) составил 10%. Выход (8)2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-она (13АЬ) составил 10%.
- 45 019156
Пример 15. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он Ο-2-метоксиэтил оксима (соединение 10)
2-Амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он (13А (пример 13), 0.126 г, 0.33 ммоль) и О-(2-метоксиэтил)гидроксиламин (0.121 г, 1.33 ммоль) растворяли в 2.2 мл уксусной кислоты/этилацетата в соотношении 20/80 моль/моль с небольшим количеством р-толуолсульфоновой кислоты моногидрата (0.0127 г, 0.0666 ммоль). Реакционную смесь нагревали в масляной бане при 80-85°С в течение ночи. Продукт был очищен путем препаративной ЖХ/МС (35-50% СНзСN в Н2О с получением (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-метоксиэтил оксим (10) в форме соли ТФА (0.067 г, 45% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ ррт 2.58 (8, 3Н), 2.60-2.69 (т, 1Н), 2.73-2.83 (т, 1Н), 3.17-3.22 (т, 1Н), 3.23 (8, 3Н), 3.36 (άά, 1=13.89, 2.02 Гц, 2Н), 3.55 (!, 1=4.67 Гц, 2Н), 3.74 (з, 3Н), 4.17 (ц, 1=4.29 Гц, 2Н),
6.79 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.15 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.22 (άά, 1=9.73, 2.65 Гц, 1Н), 7.32 (!ά, 1=8.53, 2.65 Гц, 1Н), 7.69 (άά, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н), 7.78 (!, 1=7.83 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 452.2 (М+Н)+.
Пример 16. Хиральное разделение К и 8 энантиомеров (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он Ο-2-метоксиэтил оксима (соединение 11 и соединение 12)
Рацемическая смесь соединения 10 разделяли на его К и 8 энантиомеры, соединение 11 и соединение 12, путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЫга1Рак ΑΩ-Н, 250x21.2 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: Е!ОН
Параметры градиента: 30% В
Время прогона: 15 мин
Расход: 50 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 68.1%. Выход (К,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-метоксиэтил оксима (11) составил 33.6%. Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-метоксиэтил оксима (12) составил 34.5%.
- 46 019156
Пример 17. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (соединения 13)
2-Амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он (13А (пример 13), 0.097 г, 0.256 ммоль) и К-О-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-илметил)гидроксиламин (0.113 г, 0.769 ммоль) растворяли в 2.0 мл сухого пиридина. Реакционную смесь нагревали в масляной бане при 70-80°С в течение ночи. Реакционную смесь сливали в химический стакан с ледяной водой и продукт выпадал в осадок. Затем его фильтровали и промывали Н2О с получением (Е)-2-амино-7-(4фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-((К)-2,2-диметил-1,3диоксолан-4-ил)метил оксима (17А), который использовали на следующем этапе без дополнительной очистки.
Е1-МС: т/ζ 508.4 (М+Н)+.
С 17А удаляли защиту 80% раствором уксусной кислоты в воде в течение 40 мин и затем продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (30-45% Ο4^Ν в Н2О с получением (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (13) в форме соли ТФА (0.108 г, 89.7% выход).
’Н-ЯМР (400 МГц, МеОО) δ ррт 2.69-2.81 (т, 4Н), 3.07 (Ьг. 8., 1Н), 3.15-3.25 (т, 2Н), 3.36-3.63 (т, 3Н), 3.81-3.86 (8, 3Н), 3.87-3.97 (т, 1Н), 4.21 (т, 2Н), 4.38 (т, 1Н), 4.42-4.54 (т, 1Н), 6.75 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.06 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.09-7.17 (т, 1Н), 7.17-7.27 (т, 1Н), 7.57 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 7.73 (1, 1=7.96 Гц, 1Н).
Е1-МС: т/ζ 468.4 (М+Н)+.
Пример 18. Хиральное разделение К и 8 энантиомеров (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил 14 и соединение 15) оксима (соединение
Рацемическую смесь соединения 13 разделяли на его К и 8 энантиомеры, соединение 14 и соединение 15 путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЫга1Рак АЭ-Н, 250x21.2 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: Е1ОН
Параметры градиента: 20% В
Время прогона: 25 мин
Расход: 20 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 16.2%. Выход (К,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (14) составил 9.0%. Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (15) составил 7.2%.
- 47 019156
Пример 19. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Η)-он Ο-2-трет-бутоксиэтил оксима (соединение 16)
Соединение 16 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 15, с использованием Ο-(2-третбутоксиэтил)гидроксиламина. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (45-55% ΟΗ^Ν в Н2О) с получением соединения 16 в форме соли ТФА (0.0417 г, 51% выход). Я и 8 энантиомеры соединения 16 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 16.
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ ррт 1.07 (к, 9Η), 2.58 (к, 3Η), 2.60-2.69 (т, 1Η), 2.73-2.87 (т, 1Η), 3.20 (66, 1=16.04, 12.25 Гц, 1Η), 3.28-3.44 (т, 2Η), 3.52 (1, 1=5.31 Гц, 2Η), 3.75 (к, 3Η), 4.02-4.17 (т, 2Η),
6.79 (6, 1=8.08 Гц, 1Η), 7.14 (6, 1=7.33 Гц, 1Η), 7.22 (66, 1=9.73, 2.91 Гц, 1Η), 7.32 (16, 1=8.53, 2.91 Гц, 1Η), 7.68 (66, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Η), 7.74-7.83 (т, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 494.3 (М +1)'.
Пример 20. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Η)-он Ο-3-метоксипропил оксима (соединение 17)
Соединение 17 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 15, с тем отличием, что использовали Ο-(3-метоксипропил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (50-65% СΗзСN в Η2Ο, с получением соединения 17 в форме соли ТФА (0.0428 г, 55.4% выход). Я и 8 энантиомеры соединения 17 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 16.
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ ррт 1.83 (1, 1=6.57 Гц, 2Η), 2.51 (к, 3Η), 2.55-2.66 (т, 1Η), 2.67-2.79 (т, 1Η), 3.07-3.18 (т, 1Η), 3.20 (к, 3Η), 3.25-3.32 (т, 2Η), 3.35 (1, 1=6.32 Гц, 2Η), 3.74 (к, 3Η), 4.08 (16, 1=6.44, 1.77 Гц, 2Η), 6.79 (6, 1=8.08 Гц, 1Η), 7.14 (6, 1=7.33 Гц, 1Η), 7.21 (66, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Η), 7.31 (16, 1=8.65, 2.91 Гц, 1Η), 7.68 (66, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Η), 7.74-7.84 (т, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 466.4 (М +1)'.
Пример 21. Получение (Е)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Η)-илиденаминоокси)уксусной кислоты (соединение 18) он
Соединение 18 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 15, с тем отличием, что была ис- 48 019156 пользована 2-(аминоокси)уксусная кислота. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (40-60% СНзСN в Н2О) с получением соединения 18 в форме соли ТФА (0.0413 г, 70% выход). Я и 8 энантиомеры соединения 18 могут быть получены путем СЖХ с использованием процедуры, аналогичной примеру 16.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.42 (к, 3Н), 2.66-2.79 (т, 3Н), 3.08-3.12 (т, 2Н), 3.75 (к, 3Н), 4.56 (б, 1=1.77 Гц, 2Н), 6.79 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.14 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.21 (бб, 1=9.73, 2.91 Гц, 1Н), 7.267.36 (т, 1Н), 7.66-7.73 (т, 1Н), 7.74-7.83 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 452.3 (М+Н)+.
Пример 22. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксима (соединение 19)
Соединение 19 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 17, с тем отличием, что использовали 8-О-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-илметил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (30-40% СНзСN в Н2О) с получением соединения 19 в форме соли ТФА (0.0818 г, 70.5% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.52 (к, 3Н), 2.62 (бб, 1=17.94, 14.15 Гц, 1Н), 2.75 (б, 1=1.01 Гц, 1Н), 3.07-3.19 (т, 1Н), 3.27-3.38 (т, 5Н), 3.68-3.73 (т, 2Н), 3.75 (к, 3Н), 3.89-3.99 (т, 1Н), 4.06 (ббб, 1=10.86, 4.67, 3.16 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=7.83 Гц, 1Н), 7.14 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.21 (бб, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Н), 7.32 (1б, 1=8.59, 2.78 Гц, 1Н), 7.69 (бб, 1=8.72, 5.94 Гц, 1Н), 7.75-7.82 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 468.4 (М+Н)+.
Пример 23. Хиральное разделение Я и 8 энантиомеров (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(Я)-2,3-дигидроксипропил оксима (соединение 20 и соединение 21)
Рацемическую смесь соединения 19 разделяли на его Я и 8 энантиомеры, соединение 20 и соединение 21 путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЫга1Рак ΆΌ-Н, 250x10 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: МеОН
Параметры градиента: 25% В
Время прогона: 15 мин
Расход: 20 мл/мин
Объем впрыска: 1000 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 34.7%. Выход (Я,Е)-(Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(Я)-2,3-дигидроксипропил оксима (20) составил 14.1%. Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(Я)-2,3-дигидроксипропил оксима (21) составил 20.6%.
- 49 019156
Пример 24. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-аминоэтил оксима (соединение 22)
...О 22
Соединение 22 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 15, с тем отличием, что использовали трет-бутил-2-(аминоокси)этилкарбамат. Окончательное удаление трет-бутоксикарбониловой защиты проводили путем обработки 24А (0.180 г, 0.019 ммоль) в 20% ТФА/СН2С12 в течение 10 мин. О завершении реакции судили по результатам анализа методом ЖХ/МС. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и остаток очищали методом препаративной ЖХ/МС (25-35% СΗзСN в Н2О) с получением продукта 22 в форме соли ТФА (0.0625 г, 75.3% выход).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОД6) δ ррт 2.52 (з, 3Н), 2.62-2.74 (т, 1Н), 2.76-2.90 (т, 1Н), 2.99-3.18 (т, 3Н), 3.32 (ά, 1=12.38 Гц, 2Н), 3.75 (з, 3Н), 4.20 (ΐ, 1=5.05 Гц, 2Н), 6.80 (ά, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.14 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.23 (άά, 1=9.73, 2.91 Гц, 1Н), 7.33 (ΐά, 1=8.53, 2.91 Гц, 1Н), 7.69 (άά, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Н), 7.74-7.86 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 437.4 (М+Н)+.
Пример 25. Хиральное разделение В и 8 энантиомеров (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-аминоэтил оксима (соединение 23 и соединение 24)
Рацемическую смесь соединения 22 разделяли на его В и 8 энантиомеры, соединение 23 и соединение 24, путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЫга1Рак ΆΌ-Н, 250x10 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: МеОН + 10 мм NΗ4Οас
Параметры градиента: 30% В
Время прогона: 8 мин
Расход: 20 мл/мин
Объем впрыска: 75 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 23%. Выход (В,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-аминоэтил оксима (23) составил 9.2%. Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-аминоэтил оксима (24) составил 13.9%.
- 50 019156
Пример 26. Получение (Е) и (Ζ) Изомеров 2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-пиридин-3-илметил оксима (соединение 25 и соединение 26)
Рацемическую смесь, содержащую соединения 25 и 26, получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 15, с тем отличием, что использовали О-(пиридин-3-илметил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (25-40% ίΉ3ΟΝ в Н2О) с получением продукта в форме соли ТФА. Е и Ζ изомеры разделяли методом препаративной ЖХ/МС (25-40% ίΉ3ΟΝ в Н2О) с общим выходом 71.6%.
Выход (Е) 2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-он О-пиридин-3-илметил оксима (25) составил 0.0398 г, 50.2%.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.37 (к, 3Н), 2.58-2.83 (т, 2Н), 3.12 (бб, 1=16.04, 12.25 Гц, 1Н), 3.32 (бб, 1=13.26, 3.92 Гц, 2Н), 3.67 (к, 3Н), 5.20 (б, 1=3.03 Гц, 2Н), 6.78 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.14 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.21 (бб, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Н), 7.31 (1б, 1=8.53, 2.91 Гц, 1Н), 7.63-7.73 (т, 2Н), 7.78 (1, 1=7.83 Гц, 1Н), 8.11 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 8.68 (Ьг. к., 1Н), 8.74 (к, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 485.4 (М+Н)+.
Выход (Ζ) 2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-он О-пиридин-3-илметил оксима (26) составил 0.017 г, 21.4%.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.12 (к, 3Н), 2.63-2.71 (т, 1Н), 2.72-3.00 (т, 4Н), 3.80 (к, 3Н), 5.11 (к, 2Н), 6.83 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.18 (бб, 1=9.73, 2.91 Гц, 1Н), 7.26 (1б, 1=8.53, 2.91 Гц, 1Н), 7.57 (ббб, 1=13.71, 8.40, 5.43 Гц, 1Н), 7.73-7.88 (т, 1Н), 7.96 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 8.64 (к, 1Н)
8.79 (Ьг. к., 1Н).
Е81-МС: т/ζ 485.4 (М+Н)+.
Пример 27. Получение (Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксима (соединение 27) и хиральное разделение энантиомеров
Соединение 27 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 17, с тем отличием, что использовали О-((2,2-диметил-1,3-диоксан-5-ил)метил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (35-40% СН3С№ в Н2О) с получением соединения 17 в форме соли ТФА (0.109 г, 42.9% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 1.89 (т, 1Н), 2.47 (к, 3Н), 2.54 (т, 1Н), 2.67 (Ьг. к., 2Н), 3.07 (б, 1=15.66 Гц, 1Н), 3.25 (т, 1Н), 3.41 (ф 1=5.31 Гц, 4Н), 3.75 (к, 3Н), 4.03 (б, 1=8.00 Гц, 2Н), 4.39 (ф 1=4.97 Гц, 2Н), 6.79 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.20 (бб, 1=9.60, 2.53 Гц, 1Н), 7.25-7.35 (т, 1Н), 7.68 (бб, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н), 7.74-7.83 (т, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 482.4 (М+Н)+.
Я и 8 энантиомеры соединения 27 разделяли путем СЖХ при следующих условиях:
Колонка СЬ1га1Рак ЛИ, 250x10 мм, 5 мкм
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: 1РОН
Параметры градиента: 40% В
- 51 019156
Время прогона: 12 мин
Расход: 15 мл/мин
Объем впрыска: 500 мкл.
Общий выход для двух энантиомеров составил 50.3%.
Выход (В,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксима (28) составил 27.9%.
Выход (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксима (29) составил 22.4%.
Пример 28. Получение (Е)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-илиден)гидразинкарбоксимидамида (соединение 30)
Кетон 13А ((пример 13) 0.100 г), аминогуанидин гидрохлорид (0.0876 г, 3 экв.) и 5Ν НС1 (5 экв.) растворяли в этаноле и нагревали в масляной бане при температуре 90°С в течение 2 ч. Сырой продукт затем очищали методом препаративной ЖХ/МС (40-45% СНзСN в Н2О) с получением (Е)-2-(2-амино-7(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)илиден)гидразинкарбоксимидамида (30) в форме соли ТФА (0.0617 г, 53.6% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.64 (к, 3Н), 2.70-2.82 (т, 2Н), 3.15-3.33 (т, 2Н), 3.48 (Ьг. к., 1Н), 3.73 (к, 3Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.17 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.25 (бб, 1=9.73, 2.65 Гц, 1Н), 7.33-7.40 (т, 1Н), 7.74-7.86 (т, 2Н), 10.74 (к, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 435.4 (М+Н)+.
Пример 29. Получение (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 31)
Соединение 31 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 17, с тем отличием, что использовали (8)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом препаративной ЖХ/МС (СНзСN в Н2О с получением (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима в форме соли ТФА (31, 4.5 мг, 7.1% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.17-1.37 (т, 1Н), 2.46-2.64 (т, 4Н), 2.81-2.99 (т, 2Н), 3.253.53 (т, 3Н), 3.58-3.66 (т, 1Н), 3.77-3.96 (т, 4Н), 4.16-4.38 (т, 3Н), 5.18 (Ьг. к., 2Н), 6.66-6.78 (т, 1Н), 6.95 (бб, 1=7.33, 4.29 Гц, 1Н), 7.02-7.22 (т, 2Н), 7.31-7.44 (т, 1Н), 7.55-7.68 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н28Р^О4, 482; эксп., 482.
- 52 019156
Пример 30. Получение дигидрохиназолин-5(6Н)-она (30Н)
2-амино-7-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)-4-метил-7,8-
Α. Синтез 3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-карбальдегида (30С).
В сосуд на 500 мл добавляли 2-формилтиофен-3-бороновую кислоту (30А, 5.00 г, 32.1 ммоль, 1.0 экв.), 2-бром-6-метоксипиридин (30В, 6.03 г, 32.1 ммоль, 1.0 экв.), толуол (100 мл), ЕЮН (100 мл), натрия гидрокарбонат (2Ν, 32 мл, 64 ммоль, 2.0 экв.) и Рб(брр£)С12 (1.17 г, 1.6 ммоль, 0.05 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при температуре 90°С. Реакционную смесь охлаждали, добавляли насыщенный водный Ν;·ιΟ1 (100 мл) и смесь перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (2x100 мл) и полученные органические фазы объединяли и пропускали через целитную пластинку, чтобы удалить оставшийся Рб. Органические фазы промывали последовательно Н2О (100 мл) и насыщенным водным Ν;·ιΟ1 (100 мл), а затем сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением пористого коричневого твердого вещества, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки (6.2 г, 88%).
Е81-МС: т/ζ 220.2 (М+Н)+.
B. Синтез (Е)-4-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)бут-3-ен-2-она (30Ό).
В испарительную колбу на 500 мл добавляли 3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-карбальдегид (30С, 6.2 г, 28.3 ммоль, 1.0 экв.), ацетон (16.6 мл, 226 ммоль, 8.0 экв.) и Н2О (130 мл). После охлаждения до 0°С в ледяной ванне добавляли водный №ЮН (5Ν, 6.2 мл, 31.1 ммоль, 1.1 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, разогревая при этом до комнатной температуры. Мониторинг методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена на ~60%, после чего добавляли дополнительный водный №ЮН (5Ν, 1 мл, 5.0 ммоль, 0.18 экв.). После перемешивания в течение дополнительных 6 ч согласно результатам ЖХ/МС реакция была завершена. Реакционную смесь нейтрализовали 3Ν водного НС1 до уровня рН ~8. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (3x100 мл). Органические фазы объединяли и промывали насыщенным водным №101 (100 мл). Объединенные водные фазы экстрагировали ЕЮАс (100 мл). Органические фазы объединяли и сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением черного твердого вещества. Остаток очищали методом флэш-хроматографии (60% СН2С12/гексан до 100% СН2С12) с получением желтого твердого вещества 30Ό (4.8 г, 67%).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.29 (в, 3Н), 3.96 (в, 3Н), 6.59 (б, 1=15.92 Гц, 1Н), 6.84 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.41 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.60 (б, 1=5.31 Гц, 1Н), 7.75-7.88 (т, 2Н), 8.71 (б, 1=15.92 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 260.3 (М+Н)+.
C. Синтез 3-гидрокси-5-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)циклогекс-2-энона (30Е).
В испарительную колбу на 200 мл добавляли (Е)-4-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)бут-3ен-2-он (30Ό, 4.81 г, 18.6 ммоль, 1.0 экв.), МеОН (100 мл) и диметилмалонат (30Е, 2.13 мл, 18.6 ммоль, 1.0 экв.). Добавляли №ЮМс (30 мас.% в МеОН, 3.66 мл, 19.5 ммоль, 1.05 экв.) и перемешивали реакционную смесь в течение ночи при нагревании в колбе с обратным холодильником. Анализ методом ЖХ/МС показывал желаемое промежуточное соединение и смесь концентрировали, а затем разбавляли водным раствором 1 N водный №ЮН (100 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°С в ледяной ванне и подкисляли 1 Ν НС1 с получением кислой среды. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли ЕЮАс (200 мл) и органическую фазу промывали насыщенным водным №С1 (100 мл). Объединенные водные фазы экстрагировали ЕЮАс (100 мл). Объединенные органические фазы сушили над безводным №ь8О4. фильтровали и концентрировали с получением пенистого коричневого твердого вещества 30Е, которое использовали на следующем этапе без дополнительной очистки (4.9 г, 88%).
- 53 019156 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-к6) δ ррт 2.67 (т, 3Н), 3.79 (8, 3Н), 4.54-4.70 (т, 1Н), 5.30 (8, 1Н), 6.73 (к, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.31 (к, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.39-7.54 (т, 2Н), 7.76 (1, 1=7.83 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 302.3 (М+Н)+.
Ό. Синтез 2-ацетил-3-гидрокси-5-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)циклогекс-2-энона (300)
В испарительную колбу на 200 мл добавляли 3-гидрокси-5-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2ил)циклогекс-2-энон (30Е, 4.9 г, 16.3 ммоль, 1.0 экв.), СН2С12 (100 мл), уксусный ангидрид (2.15 г, 21.1 ммоль, 1.3 экв.), Е13Ы (6.8 мл, 48.8 ммоль, 3.0 экв.) и ДМАП (катализатическое количество). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего анализ методом ЖХ/МС показал два сигнала, соответствующих М+Н = 344. Дополнительно добавляли уксусный ангидрид (0.5 мл, 5.3 ммоль, 0.32 экв.) и реакционную смесь нагревали в течение 6 ч при температуре 40°С. Анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена, после чего смесь концентрировали до твердого вещества и очищали методом флэш-хроматографии (70% СН2С12/Гексан до 100% СН2С12) с получением темно-оранжевого твердого вещества 300 (1.72 г, 31%).
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-к6) δ ррт 2.52-2.57 (т, 3Н), 2.83 (т, 2Н), 3.09 (т, 2Н), 3.78 (8, 3Н), 4.68 (т, 1Н), 6.74 (к, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.32 (к, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.41-7.47 (т, 1Н), 7.51 (к, 1=5.31 Гц, 1Н), 7.76 (1, 1=7.96 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 344.3 (М+Н)+.
Е. Синтез 2-амино-7-(3-(6-метоксипиридин-2-ил)тиофен-2-ил)-4-метил-7,8-дигидрохиназолин5(6Н)-она (30Н)
В 150-мл сосуд для работы под давлением добавляли 2-ацетил-3-гидрокси-5-(3-(6-метоксипиридин2-ил)тиофен-2-ил)циклогекс-2-энон (300, 1.72 г, 5.01 ммоль, 1.0 экв.), Е1ОН (50 мл), пирролидин (2.13 г, 30.1 ммоль, 6.0 экв.), гуанидин гидрохлорид (1.44 г, 15 ммоль, 3.0 экв.). Сосуд закрывали и нагревали в течение ночи при 100°С. Анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена, после чего реакционную смесь концентрировали и остаток разбавляли 20% Е1ОАс/СН2С12. Нерастворимое твердое вещество, не являющееся продуктом, отфильтровывали. Оставшийся фильтрат очищали методом колоночной хроматографии (20% Е1ОАс/СН2С12 до 70% Е1ОАс/СН2С12) с получением продукта 30Н в форме светлосерого твердого вещества (270 мг, 15%).
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-к6) δ ррт 2.55 (8, 3Н), 2.76-2.95 (т, 2Н), 3.02-3.22 (т, 2Н), 3.70 (8, 3Н), 4.62-4.77 (т, 1Н), 6.72 (к, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.31 (к, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.41-7.54 (т, 4Н), 7.75 (1, 1=7.83 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 367.3 (М+Н)+.
- 54 019156
Пример 31. Получение (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидро-6Н-пиридо[4,3б]пиримидин-5-тион (3Н) и (К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-она (311)
A. Синтез (8)-2-метилпропан-2-сульфиновая кислота 1-(2-бром-4-фторфенил)метил-(Е)-ил иденамила (31С).
(8)-трет-бутансульфинамид (31А, 9.9 г, 81.6 ммоль), 2-бром-4-фтор-бензальдегид (31В, 15.5 г, 76 ммоль) и титана тетраэтоксид (34 мл) помещали в сосуд с круглым дном на 500 мл, содержащий ТГФ (сухой, 50 мл). Реакционную смесь допускалось перемешивать при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего реакция считается завершенной согласно результатам анализа методом ЖХ/МС. Е1ОАс (200 мл), солевой раствор (150 мл) и целит добавляли и перемешивали в течение 1 ч. Гетерогенную смесь фильтровали через целитную пластину и промывали Е1ОАс. Органическую фазу промывали солевым раствором и сушили (№28О4), затем концентрировали под вакуумом с получением продукта 31С в форме вязкого масла (23.3 г, 99% выход). 31С использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки.
B. Синтез (К)-3-амино-3-(2-бром-4-фторфенил)пропионовой кислоты этилового эфира (31Ό).
В трехгорлый сосуд на 500 мл, сверху оборудованный мешалкой, капельной воронкой на 150 мл и обратным конденсатором, помещали ТГФ (сухой, 150 мл), Ζη (74.5 г, 1.14 моль, размер частиц 10 мкм) и СиС1 (11.3 г, 114 ммоль) в атмосфере Ν2. Гетерогенную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч, одновременно, интенсивно при перемешивании. После охлаждения до комнатной температуры добавляли этил бромацетат (12.61 мл, 114 ммоль) и реакционную смесь держали при температуре 50°С в течение 1 ч, а затем охлаждали до 0°С. 31С (23.3 г, 76 ммоль) добавляли ТГФ (сухой, 80 мл) через капельную воронку в течение 10 мин. Реакционную смесь затем держали при 0°С в течение 4 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Гетерогенную смесь фильтровали через целитную пластину и промывали Е1ОАс. Органическую фазу промывали лимонной кислотой (1М), NаНСОз, солевым раствором, сушили над №ь8О4 и концентрировали под вакуумом с получением 24.3 г светло-желтого твердого вещества. Твердое вещество добавляли в диэтилэфир (200 мл), Е1ОН (5 мл) и НС1 (38 мл, 4М диоксан). Через 30 мин продукт 31Ό выпадал в осадок и его фильтровали, твердое вещество промывали избытком диэтилэфира, сушили под высоким вакуумом с получением β-амино эфир НС1 соли с большим выходом (15.6 г, 47.7 ммоль, 63%). Стоковый раствор содержал дополнительные 1.9 г (6.5 ммоль, 8.5%) свободного основания после нейтрализации и колоночной хроматографии (1-5%, МеОН в ДХМ).
- 55 019156
ΕδΙ-МС: т/ζ 290.01 (МН4).
С. Синтез (К)-3-(2-бром-4-фторфенил)-3-(3-оксо-бутириламино)пропионовой кислоты этил эфира (31Р).
В 500-мл сосуд с круглым дном, содержащий 31Ό (13.3 г, 41 ммоль) в 200 мл ДХМ и ТЭА (22.8 мл, 3 экв.), добавляли дикетен (31Е, 8.81 мл, 50% в ДХМ). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции (2 ч, согласно результатам анализа методом ЖХ/МС). Реакционную смесь промывали 1 N NаНδО4, солевым раствором, сушили над №ь8О4 и концентрировали под вакуумом с получением соединения 31Е в форме желтого твердого вещества (15.3 г, 99%).
ΕδΙ-МС: т/ζ 374.0 (МН4).
Ό. Синтез (К,Е)-6-(2-бром-4-фторфенил)-3-(1-гидроксиэтилиден)пиперидин-2,4-диона (31С).
В сосуд, содержащий 30 мл сухого МеОН, добавляли металлический натрий (1.00 г, 43.5 ммоль, 3.4 экв.). Реакционную смесь интенсивно перемешивали до растворения натрия. В сосуд для работы под давлением, содержащий 31Е (4.81 г, 12.9 ммоль, 1.0 экв.), в МеОН (50 мл) добавляли только что приготовленный раствор №1ОМе. Сосуд для работы под давлением запечатывали и нагревали при 100°С в течение ночи. Анализ методом ЖХ/МС показал сигнал продукта как преобладающий. Реакционную смесь концентрировали и затем разбавляли метиленхлорид (500 мл) и водный 1 Ν ΝΉ4Ο (100 мл). Органическую фазу далее промывали водным 1 Ν ΝΉ4Ο (100 мл) и насыщенным водным №1С1 (100 мл). Объединенные водные фазы экстрагировали метиленхлоридом (2x75 мл). Объединенные органические фазы сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением темно-желтого твердого вещества 31С которое считалось достаточно чистым для использования в следующей реакции без дальнейшей очистки (2.05 г, 49%).
ΕδΙ-МС: т/ζ 328.2 (М+Н)4.
Е. Синтез (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-она (31Н).
В сосуд для микроволновой обработки, содержащий ацетилгуанидин (800 мг, 7.9 ммоль), добавляли пирролидин (3.25 мл, 39 ммоль), 5 мл ЕЮН и 31С (1.3 г, 3.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 160°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (50 мл) и промывали 1 М NаНδО4 (40 млх2), солевым раствором, сушили над №28О4, концентрировали под вакуумом. Полученное твердое вещество очищали методом колоночной хроматографии (в пределах 25% МеОН в ДХМ) с получением продукта 31Н в форме светло-желтого кристаллического твердого вещества (989 мг, 72%).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.61 (к, 3Н), 2.83 (бб, 1=16.29, 5.94 Гц, 1Н), 3.22 (бб, 1=16.42, 6.06 Гц, 1Н), 4.84-5.06 (т, 1Н), 7.11 (Ьг. к., 2Н), 7.19-7.40 (т, 2Н), 7.61 (бб, 1=8.59, 2.53 Гц, 1Н), 7.98 (б, 1=3.28 Гц, 4Н).
ΕδΙ-МС: т/ζ 351.0 (МН4).
Е. Синтез (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидро-6Н-пиридо[4,3-б]пиримидин5-тиона (31Ι).
В сосуд на 4 мл, содержащий 31Н и 2 мл ЭМН, добавляли реагент Деви (250 мг, 0.71 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 20 мин. Сырую смесь непосредственно помещали в кварцевую колонку на 12 г и разбавляли (2-4% МеОН ίη ДХМ) с получением тиолактама 31Ι с умеренным выходом (134 мг, 52%).
ΕδΙ-МС: т/ζ 367.0 (МН4).
С. Синтез (К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-она (311).
В сосуд для микроволновой обработки на 5 мл добавляли 31Н (700 мг, 1.99 ммоль, 1.0 экв.), 2-(6метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокан (1.43 г, 4.78 ммоль, 2.4 экв.), Рб(бррГ)С12 (73 мг, 0.0997 ммоль, 0.05 экв.), К2СО3 (826 мг, 5.98 ммоль, 3.0 экв.) и диметилацетамид (10 мл). Сосуд запечатывали и нагревали в микроволновой печи при температуре 110°С в течение 30 мин. Анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Реакционную смесь разбавляли метанолом, фильтровали и очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением продукта 311 в форме белого твердого вещества (618 мг, 81.7% выход).
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.58 (к, 3Н), 2.80-2.95 (т, 1Н), 3.08-3.22 (т, 1Н), 3.86 (к, 3Н), 5.15 (Ьг. к., 1Н), 6.86 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.18 (б, 1=6.82 Гц, 1Н), 7.23-7.33 (т, 2Н), 7.55 (бб, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н), 7.84 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 2Н).
ΕδΙ-МС: т/ζ 380.2 (М4Н)4.
- 56 019156
Пример 32. Получение (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил оксима (соединение 32) и (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (соединение 33)
Сосуд на 4 мл, содержащий (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидро-6Нпиридо[4,3Ш]пиримидин-5-тион (311) (пример 31, 107 мг, 0.28 ммоль), (К)-О-((2,2-диметил-1,3диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламин (247 мг, 1.68 ммоль) и диоксан (2 мл), нагревали до 100°С в течение 12 ч. Сырую смесь очищали методом препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (10-70% Н2ОАсСН 0.035% ТФА) с получением продукта (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил оксим (32А) с умеренным выходом (40 мг, 30% выход).
Е81-МС: т/ζ 480.1 (М+Н)+.
Сосуд, содержащий 32А (40 мг, 0.083 ммоль), 2-метокси-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан2-ил)пиридин (58 мг, 0.25 ммоль), №ьСО3, (0.5 мл, 1.0 ммоль), Рά(άррГ)2С12 (3.4 мг, 0.004 ммоль) и ΌΜΑ (0.5 мл), нагревали до 130°С в течение 20 мин в микроволновой печи. Получившуюся сырую смесь разбавляли Е!ОАс и промывали Н2О, солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил оксима (32) после препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (16 мг, 39% выход, 10-70% Н3О-АсСН 0.035% ТФА).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт 1.35 (8, 3Н), 1.41 (з, 3Н), 2.85 (з, 3Н), 3.15 (άά, 1=17.05, 10.48 Гц, 1Н), 3.46 (άά, 1=17.18, 3.79 Гц, 1Н), 3.70-3.80 (т, 1Н), 3.88 (з, 3Н), 3.99-4.17 (т, 3Н), 4.36-4.49 (т, 1Н), 4.90 (άά, 1=10.36, 3.54 Гц, 1Н), 4.30-5.10 (Ьг, 2Н), 5.80 (Ьг, 1Н), 6.76 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.02 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.10-7.24 (т, 2Н), 7.60 (άά, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.68 (!, 1=7.83 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 509.4 (М+Н)+.
Соединение 32 смешивали с АсОН-Н2О (1 мл, 5:1) и нагревали до 80°С в течение 30 мин; избыток АсОН удаляли под вакуумом. Сырой продукт затем очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксима (33, 12 мг, 20-75% Н2ОАсСН 10 мм ^4)2СО2).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСОШ6) δ ррт 2.48 (з, 3Н), 2.81 (άά, 1=16.17, 7.83 Гц, 1Н), 3.04 (άά, 1=16.17, 4.80 Гц, 1Н), 3.28-3.41 (т, 2Н), 3.66-3.76 (т, 1Н), 3.78-3.84 (т, 1Н), 3.9 (з, 3Н), 3.89-3.97 (т, 1Н), 4.51 (!, 1=5.68 Гц, 1Н), 4.64 (ά, 1=4.80 Гц, 1Н), 4.94-5.05 (т, 1Н), 6.48 (з, 1Н), 6.79 (з, 2Н), 6.85 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.18 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.23-7.35 (т, 2Н), 7.53 (άά, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н), 7.84 (!, 1=7.83 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 469.2 (М+Н)+.
- 57 019156
Пример 33. Получение (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(8)-2,3-дигидроксипропил оксима (соединение 34)
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, описанной в примере 32, с тем отличием, что использовали (8)-О-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламин.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ ррт 2.63 (к, 3Η), 2.97-3.14 (т, 1Η), 3.16-3.28 (т, 1Η), 3.55-3.68 (т, 1Η), 3.68-3.76 (т, 3Η), 3.90 (к, 3Η), 3.97-4.20 (т, 3Η), 4.90 (66, 1=10.23, 3.92 Гц, 1Η), 5.26 (Ьг. к., 2Η), 5.83 (к, 1Η), 6.74 (6, 1=8.34 Гц, 1Η), 7.00 (6, 1=7.07 Гц, 1Η), 7.07-7.22 (т, 2Η), 7.52-7.76 (т, 2Η).
Е8ЯМС: т/ζ 469.2 (М+Н+).
Пример 34. Синтез (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксима (соединение 35)
Указанное в названии соединение 35 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 32, с тем отличием, что использовали Ο-((2,2-диметил-1,3-диоксан-5-ил)метил)гидроксиламин. Сырой продукт очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (5 мг, 20-75% ^Ο-ΛοίΝ, 10 мм (ΝΗ^^Ο^ с получением (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,36]пиримидин-5(6Η)-он Ο-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксима (33, 5 мг, 2.9% выход).
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ ррт 1.88-2.05 (т, 1Η), 2.53 (к, 3Η), 2.81 (66, 1=16.17, 7.33 Гц, 1Η), 3.03 (66, 1=16.04, 4.93 Гц, 1Η), 3.42-3.50 (т, 4Η), 3.86 (к, 3Η), 3.93 (66, 1=6.32, 2.53 Гц, 2Η), 4.29-4.39 (т, 2Η), 5.00-5.10 (т, 1Η), 6.31 (к, 1Η), 6.76 (к, 2Η), 6.85 (6, 1=8.34 Гц, 1Η), 7.19 (6, 1=7.33 Гц, 1Η), 7.21-7.32 (т, 2Η), 7.49 (66, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Η), 7.84 (1, 1=7.83 Гц, 1Η).
Е8ЯМС: т/ζ 483.3 (М+Н+).
Пример 35. Синтез (Я,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,36]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 36) и (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,36]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 37)
Смесь (Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)тиона (3П, 100 мг, 0.3 ммоль), (8)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламина (194 мг, 1.2 ммоль), Η§(ΟΛο)2 (192 мг, 0.6 ммоль) и безводного толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 1 ч. Анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали
- 58 019156 через целит и промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали и полученный маслянистый осадок очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он О-2-((8)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил оксима (35А, 87 мг, 65%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 1.35 (з, 3Н), 1.40 (з, 3Н), 2.01 (ςά, 1=6.32, 3.03 Гц, 2Н), 2.76 (з, 3Н), 2.95 (άά, 1=16.42, 8.84 Гц, 1Н), 3.18 (άά, 1=17.18, 5.05 Гц, 1Н), 3.56-3.62 (т, 1Н), 4.09 (άά, 1=7.96, 5.94 Гц, 1Н), 4.16-4.28 (т, 2Н), 4.98 (άάά, 1=8.78, 4.61, 1.52 Гц, 1Н), 7.07 (ΐά, 1=8.21, 2.53 Гц, 1Н), 7.34 (άά, 1=8.08, 2.53 Гц, 1Н), 7.68 (άά, 1=12.00, 6.95 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С21Н26ВгР^О3, 494.11; эксп., 494.00.
Смесь указанных выше соединений (83.0 мг, 0.17 ммоль), 2-метокси-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)пиридин (80.0 мг, 0.34 ммоль), Рά(άррί)2С12 (14 мг, 0.017 ммоль), 2 N №-ьС.’О3 (0.42 мл, 0.85 ммоль) в ЭМА (2 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 80°С в течение 2.5 ч. Анализ методом ЖХ/МС показал смесь в пропорции 1:1 исходного материала и продукта. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали через целит и промывали 1: 1 МеОН-СН2С12. Фильтрат концентрировали и остаток растворяли в 4:1 смеси АсОН-Н2О и нагревали при 80°С в течение 30 мин. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ (базовый режим) с получением соединений 36 и 37.
Соединение 36. (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Η)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (36, 8.0 мг).
!Н-ЯМР (400 МГц, метанолД4) δ 1.68-1.80 (άάάά, 1=14.31, 8.75, 5.65, 5.65 Гц, 1Н), 2.02 (άάάά, 1=14.24, 7.74, 6.44, 3.92 Гц, 1Н), 2.85 (з, 3Н), 3.18 (άά, 1=16.93, 6.57 Гц, 1Н), 3.37 (άά, 1=16.80, 5.43 Гц, 1Н), 3.43-3.55 (т, 2Н), 3.72-3.82 (т, 1Н), 4.18-4.31 (т, 2Н), 5.14 (ΐ, 1=5.94 Гц, 1Н), 7.15 (ΐά, 1=8.40, 2.65 Гц, 1Н),
7.39 (άά, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Н), 7.46 (άά, 1=8.34, 2.78 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С-81 Б.-ВгЕЮО;. 454.29; эксп., 454.20.
Соединение 37. (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (37, 8.0 мг).
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 1.53-1.58 (т, 1Н), 1.69-1.73 (т, 1Н), 2.46 (з, 3Н), 2.79-2.87 (т, 1Н), 2.93-2.98 (т, 1Н), 3.22-3.28 (т, 1Н), 3.35-3.38 (т, 1Н), 3.54-3.60 (т, 1Н), 3.70 (з, 3Н), 3.94-4.00 (т, 2Н), 4.69 (άάά, 1=10.23, 3.03, 2.91 Гц, 1Н), 6.55 (άά, 1=8.34, 2.53 Гц, 1Н), 6.84 (άά, 1=7.33, 2.53 Гц, 1Н), 6.94-7.00 (т, 2Н), 7.43-7.52 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С24Н28Р^О4, 483.50; эксп., 483.30.
Пример 36. Синтез (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 37)
Он
Соединение 37 синтезировали, следуя процедуре, аналогичной примеру 39, с тем отличием, что использовали (8)-О-(2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламин.
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 1.43-1.55 (т, 1Н), 1.66 (т, 1Н), 2.55 (з, 3Н), 2.83-2.95 (т, 2Н), 3.11-3.44 (т, 1Н), 3.17-3.24 (т, 1Н), 3.27-3.33 (т, 1Н), 3.48-3.56 (т, 1Н), 3.65 (з, 3Н), 3.89-4.01 (т, 2Н), 4.68 (άάά, 1=10.23, 3.03, 2.91 Гц, 1Н), 6.53 (άά, 1=8.34, 2.53 Гц, 1Н), 6.81 (άά, 1=7.33, 2.53 Гц, 1Н), 6.90 (άΐ, 1=9.28, 2.68 Гц, 1Н), 6.96 (ΐά, 1=8.40, 2.65 Гц, 1Н), 7.38-7.43 (т, 1Н), 7.44-7.51 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н]+ расч. для С24Н28РЩО4, 483.21; эксп., 483.00.
- 59 019156
Пример 37. (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(В)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 38)
Соединение 38 синтезировали, следуя процедуре, аналогичной примеру 39, с тем отличием, что использовали (В)-О-(2-(2,2-диметил- 1,3-диоксолан-4-ил)этил)гидроксиламин.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.74-1.93 (т, 1Н), 2.13-2.16 (т, 1Н), 2.66 (к, 3Н), 3.00-3.11 (т, 1Н), 3.14-3.24 (т, 1Н), 3.32 (б, 1=3.03 Гц, 1Н), 3.50 (ббб, 1=11.18, 7.01, 4.55 Гц, 1Н), 3.65 (ббб, 1=10.74, 6.95, 3.54 Гц, 1Н), 3.90 (к, 3Н), 4.13-4.28 (т, 2Н), 4.88 (бб, 1=10.61, 4.04 Гц, 1Н), 5.11 (к, 2 ч, ОН), 5.72 (к, 1 ч, ΝΉ), 6.74 (б, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.00 (б, 1=7.83 Гц, 1Н), 7.10-7.22 (т, 2Н), 7.61-7.70 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С24Н28Р^О4, 483.21; эксп., 483.30.
Пример 38. (8)-4-((2)-((В)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)амино)бутан-1,2-диол (соединение 39)
Соединение 39 синтезировали, следуя процедуре, аналогичной примеру 39, с тем отличием, что использовали (8)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанамин (2О, пример 2-Р).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.55-1.68 (т, 2Н), 2.57 (к, 3Н), 2.66-2.78 (т, 2Н), 3.16 (бб, 1=16.17, 3.54 Гц, 1Н), 3.25 (ббб, 1=14.08, 4.29, 4.11 Гц, 1Н), 3.41-3.49 (т, 1Н), 3.52-3.59 (т, 1Н), 3.65-3.78 (т, 1Н), 3.88 (к, 3Н), 4.83 (бб, 1=12.63, 3.03 Гц, 1Н), 5.30 (Ьг. к., 2Н, ОН), 6.70 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.01 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.10 (бб, 1=9.47, 2.65 Гц, 1Н), 7.17 (1б, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.62 (ΐ, 1=7.83 Гц, 1Н), 7.80 (бб, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С24Н28Р^О3, 467.21; эксп., 467.30.
Пример 39. Синтез (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((В)-1,4-диоксан-2-ил)метил оксима (соединение 40)
Тиолактам (31Ι (пример 31), 0.087 г, 0.0272 ммоль), (В)-О-((1,4-диоксан-2-ил)метил)гидроксиламин (2М (пример 2-Е), 0.145 г, 1.09 ммоль) и ацетат ртути(11) (0.173 г, 0.045 ммоль) растворяли в 3.5 мл сухого толуола и нагревали в масляной бане при температуре 100°С в течение 1 ч. О завершении реакции судили по результатам анализа методом ЖХ/МС. Сырую смесь фильтровали через целит, промывали метанолом, а затем концентрировали и очищали методом препаративной ЖХ/МС (25-55% СНзСN в Н2О) с получением (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он О-((В)-1,4-диоксан-2-ил)метил оксима (39А, 0.0405 г, 36.7% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформа-б) δ ррт 2.90 (к, 3Н), 3.04 (бб, 1=17.05, 8.97 Гц, 2Н), 3.28 (бб,
- 60 019156
1=17.56, 4.17 Гц, 1Н), 3.43 (бб, 1=11.62, 9.85 Гц, 1Н), 3.58-3.68 (т, 1Н), 3.70-3.76 (т, 2Н), 3.77-3.88 (т, 2Н), 3.93-4.00 (т, 1Н), 4.01-4.08 (т, 1Н), 4.09-4.18 (т, 1Н), 5.01 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 5.78 (к, 1Н), 7.11 (кб, 1=8.21, 2.53 Гц, 1Н), 7.37 (бб, 1=7.96, 2.65 Гц, 1Н), 7.41 (бб, 1=8.84, 5.81 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 468.1 (М+Н)+.
Реакцию 39А с 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазабороканом (39В) проводили, следуя процедуре, аналогичной примеру 31, этапы от 31Н до 311, с получением (К^)-2-амино-7-(4-фтор2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((К)-1,4диоксан-2-ил)метил оксима (40, 37.3% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.55 (к, 3Н), 2.85 (бб, 1=16.17, 7.07 Гц, 1Н), 3.10 (бб, 1=16.29, 5.18 Гц, 1Н), 3.24-3.35 (т, 1Н), 3.45 (бб, 1=10.99, 2.65 Гц, 1Н), 3.50-3.59 (т, 1Н), 3.59-3.74 (т, 2Н), 3.763.84 (т, 3Н), 3.86 (к, 3Н), 3.89-3.96 (т, 1Н), 5.10 (т, 1Н), 6.54 (Ьг. к., 1Н), 6.85 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.19 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.23-7.31 (т, 2Н), 7.45 (бб, 1=8.46, 5.94 Гц, 1Н), 7.78-7.92 (т, 1Н).
Е81-МС:т^ 495.3 (М+Н)+.
Пример 40. Получение (7К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-морфолин-2-илметил оксима и изомеров (соединения 41-
40А получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 39, с тем отличием, что использовали третбутил 2-(аминооксиметил)морфолин-4-карбоксилат. Окончательное удаление трет-бутоксикарбониловой защиты проводили путем обработки 40А (6 мг, 0.01 ммоль) 4Ν НС1 в диоксане (0.7 мл). Реакционную смесь сушили под вакуумом с получением (7К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-морфолин-2-илметил оксима в форме рыжевато-коричневого масла (41, количественный выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 2.84 (к, 3Н), 3.00-3.10 (т, 1Н), 3.11-3.21 (т, 1Н), 3.34-3.50 (т, 2Н), 3.53-3.77 (т, 2Н), 3.81-3.92 (т, 1Н), 4.06 (к, 3Н), 4.09-4.13 (т, 2Н), 4.13-4.21 (т, 2Н), 4.95-4.99 (т, 1Н), 7.11-7.18 (т, 1Н), 7.23-7.29 (т, 1Н), 7.29-7.38 (т, 2Н), 7.67-7.76 (т, 1Н), 8.04-8.12 (т, 1Н).
[М+Н]+ расч. для С25Н28Е^О3, 494; эксп., 494.
Разделение методом СЖХ двух энантиомеров выхода 41.
(К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-морфолин-2-илметил оксим (42).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 2.82 (к, 3Н), 2.95-3.28 (т, 4Н), 3.33-3.45 (т, 2Н), 3.83 (кб, 1=12.57,
2.40 Гц, 1Н), 3.92 (к, 3Н), 4.02-4.21 (т, 4Н), 5.07 (бб, 1=8.84, 4.29 Гц, 1Н), 6.81 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.17-7.29 (т, 2Н), 7.63 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.78 (к, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н28Е^О3 494; эксп., 494.
(К^)-2-Амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-морфолин-2-илметил оксим (43).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 2.82 (к, 3Н), 2.95-3.28 (т, 4Н), 3.33-3.45 (т, 2Н), 3.83 (кб, 1=12.57,
2.40 Гц, 1Н), 3.92 (к, 3Н), 4.02-4.21 (т, 4Н), 5.07 (бб, 1=8.84, 4.29 Гц, 1Н), 6.81 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.17-7.29 (т, 2Н), 7.63 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.78 (к, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н28Е^О3, 494; эксп., 494.
- 61 019156
Пример 41. Синтез (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((2Я,38,4Я)-3,4,5-тригидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксима (44) и его аналога (соединение 44) и стереоизомеров (соединения 45, 46, 47 и 48)
1.1МФРЧС1, ЛММкСО.
». ροιφοίιο,
НЙОАС^ толуол
Реакцию между 311 и О-(((3аЯ,4Я,6аЯ)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил)гидроксиламином (2Υ) проводили, следуя процедуре, аналогичной примеру 39. В результате получали рацемическую смесь (Я,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((3аЯ,4Я,6аЯ)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил оксима. Разделение методом препаративной ЖХ/МС (40-85% Ν^ΘΆ^^Θ-Λ^Ν) давала диастереомеры 41А и 41В.
Диастереомеры, 41А и 41В, каждый в отдельности приводили в реакцию с 2-метокси-6-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридином также согласно процедуре, описанной в примере 39. Удаление защиты и разделение методом препаративной ЖХ/МС (40-85% NН4ΘΑС-Н2Θ-ΑССN) каждой из реакционной смеси давали гидроксильный аналог и два стереоизомера.
(Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((2Я,38,4Я)-3,4,5-тригидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим (44).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.35 (к, 3Н), 2.67-2.72 (т, 1Н), 2.78-2.90 (т, 1Н), 3.29 (б1, 6=11.94, 2.87 Гц, 1Н), 3.39-3.48 (т, 1Н), 3.59 (к, 3Н), 3.65-3.77 (т, 1Н), 3.82-3.90 (т, 1Н), 3.91-4.01 (т, 1Н), 4.57-4.69 (т, 1Н), 4.83-4.97 (т, 1Н), 6.37-6.50 (т, 1Н), 6.75 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 6.79-6.91 (т, 2Н), 7.327.44 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СйВДТОД, 527.20; эксп., 527.20. (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((2Я,38,4Я,5Я)-3,4-дигидрокси-5-метокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим (45).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.44 (к, 3Н), 2.72-2.84 (т, 1Н), 2.88-2.97 (т, 1Н), 3.05 (к, 3Н), 3.68 (к, 3Н), 3.70 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 3.81-3.94 (т, 2Н), 3.95-4.03 (т, 2Н), 4.56 (к, 1Н), 4.69 (бб, 1=9.98, 3.16 Гц, 1Н), 6.53 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 6.82 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 6.88-7.00 (т, 2Н), 7.39-7.52 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С^оЩА, 541.21; эксп., 541.20. (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((3аЯ,4Я,6Я,6аЯ)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил оксим (46).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.10 (к, 3Н), 1.27 (к, 3Н), 2.46 (к, 3Н), 2.79-2.88 (т, 1Н), 2.923.01 (т, 1Н), 3.08 (к, 3Н), 3.69 (к, 3Н), 3.78-3.91 (т, 2Н), 4.32 (1, 1=6.44 Гц, 1Н), 4.37 (б, 1=5.81 Гц, 1Н),
- 62 019156
4.57 (б, 1=6.06 Гц, 1Н), 4.72 (бб, 1=10.74, 3.66 Гц, 1Н), 4.75 (8, 1Н), 6.56 (б, 1=9.85 Гц, 1Н), 6.84 (б, 1=6.32 Гц, 1Н), 6.90-7.04 (т, 2Н), 7.44-7.54 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С29Н34Е^О6, 581.24; эксп., 581.30. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((2К,38,4К,58)-3,4-дигидрокси-5-метокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим (47).
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.51 (8, 3Н), 2.81-2.91 (т, 1Н), 2.96-3.04 (т, 1Н), 3.12 (8, 3Н), 3.74 (8, 3Н), 3.77 (б, 1=4.80 Гц, 1Н), 3.92-4.00 (т, 2Н), 4.01-4.07 (т, 2Н), 4.63 (8, 1Н), 4.74 (бб, 1=10.36, 4.04 Гц, 1Н), 6.59 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 6.88 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 6.94-7.07 (т, 2Н), 7.52 (1, 1=7.83 Гц, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н3(фНО6, 541.21; эксп., 541.20. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-((3аК,4К,68,6аК)-6-метокси-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-б][1,3]диоксол-4ил)метил оксим (48).
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.04 (8, 3Н), 1.20 (8, 3Н), 2.40 (8, 3Н), 2.72-2.81 (т, 1Н), 2.862.94 (т, 1Н), 3.02 (8, 3Н), 3.63 (8, 3Н), 3.64-3.79 (т, 3Н), 4.26 (1, 1=6.69 Гц, 1Н), 4.51 (б, 1=4.55 Гц, 1Н), 4.62-4.70 (т, 2Н), 6.50 (б, 1=8.59 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 6.85-6.95 (т, 2Н), 7.39-7.47 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С НЛ'Х.О... 581.24; эксп., 581.30.
Пример 42. Общая процедура для реакции сочетания Сузуки
В сосуд на 5 мл для микроволновой обработки помещали (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он (31Н (пример 31), 100 мг, 0.28 ммоль, 1 ед), бороновую кислоту 42А (4 ед) и Рб(бррГ)С12 СН2С12 (93 мг, 0.11 ммоль, 0.4 ед). Соединения растворяли в смеси ОМА (3 мл) и 2 М К2СО3 (1 мл, 8 ед) и сосуд запечатывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин в микроволновый реактор. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали Н2О (х3) и насыщенным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и испаряли при пониженном давлении с получением сырого продукта. Сырой материал очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением чистой соли ТФА продукта 42В в форме беловатого твердого вещества.
Пример 43. Получение (К)-2-амино-7-(5-фтор-3'-((4-(трифторметокси)фенокси)метил)бифенил-2ил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-она (43А)
Е
Соединение 43А получали способом, описанным в примере 42, с использованием 3-((4(трифторметокси)фенокси)метил)фенилбороновой кислоты.
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.79 (8, 3Н), 2.86-2.93 (т, 1Н), 3.08 (бб, 1=16.80, 11.75 Гц, 1Н), 4.83 (бб, 1=11.49, 4.42 Гц, 1Н), 5.07 (8, 2Н), 6.91-6.97 (т, 3Н), 6.98-7.05 (т, 2Н), 7.17-7.24 (т, 2Н), 7.45-7.48 (т, 1Н), 7.51-7.62 (т, 2Н), 7.66-7.75 (т, 1Н).
Е8ЬМС: т/ζ 539 (МН+).
- 63 019156
Пример 44. Получение (К)-2-амино-7-(5-фтор-2'-(3-(1,1-диоксидоизотиазолидин-2ил)метил)бифенил-2-ил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-она (41А)
Указанное в названии соединение 44А получали способом, описанным в примере 42, с использованием 3-(1,1-диоксидоизотиазолидин-2-ил)фенилбороновой кислоты.
1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 2.50 (дшп, 1=6.88 Гц, 2Н), 2.80 (8, 3Н), 3.00 (кк, 1=17.05, 4.17 Гц, 1Н), 3.23-3.29 (т, 1Н), 3.43 (1, 1=7.45 Гц, 2Н), 3.80 (1, 1=6.44 Гц, 2Н), 4.90-4.93 (т, 1Н), 7.06 (кк, 1=9.22,
2.40 Гц, 1Н), 7.12 (к, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.19-7.28 (т, 3Н), 7.45 (1, 1=7.83 Гц, 1Н), 7.69 (кк, 1=8.84, 5.56 Гц, 1Н).
Е81-МС: т/ζ 468 (МН+).
Пример 45. (К,2)-2-амино-7-(3'-(циклопропилсульфонил)-5-фторбифенил-2-ил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксим (соединение 49)
Соединение 45А синтезировали, следуя процедуре из примера 39, с использованием (8)-О-((2,2диметил- 1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламина. 3 -(Циклопропилсульфонил)фенилбороновую кислоту затем приводили в реакцию с 45А согласно реакции сочетания Сузуки, реакции из примера 42 и на выходе получали соединение 49, упомянутое в названии.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-к) δ ррт 0.76-0.88 (т, 1Н), 0.99-1.11 (т, 1Н), 2.29-2.38 (т, 1Н), 2.45 (8, 3Н), 2.60 (кк, 1=16.55, 3.66 Гц, 1Н), 2.81 (кк, 1=16.42, 10.86 Гц, 1Н), 3.28-3.43 (т, 1Н), 3.70-3.76 (т, 1Н), 3.77-3.85 (т, 1Н), 3.85-3.92 (т, 1Н), 4.21 (кк, 1=10.86, 3.28 Гц, 1Н), 6.78 (кк, 1=9.09, 2.53 Гц, 1Н), 6.98 (1к, 1=8.27, 2.40 Гц, 1Н), 7.37-7.48 (т, 3Н), 7.62 (8, 1Н), 7.68 (к1, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С Н;.1;\,О,8. 542.18; эксп., 542.20.
Пример 46. (8)-4-((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-метоксибутановая кислота (соединение 50)
- 64 019156
A. Синтез (8)-метил 4-(аминоокси)-2-метоксибутаноата.
К суспензии NаН (60% в минеральном масле, 552 мг, 12.0 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли раствор (8)-3-гидроксидигидрофуран-2(3Н)-он (46а, 1.02 г, 10.0 ммоль) в ТГФ (5 мл) медленно, по капле при 0°С в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин и добавляли диметилсульфат (1.4 мл, 15.0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и анализ методом ТСХ показал, что реакция завершена. Холодную воду (25 мл) добавляли к реакционной смеси и экстрагировали этилацетат. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над безводным №ь8О.-| и фильтровали. Концентрировали с получением (8)-3-гидроксидигидрофуран-2(3Н)-она (46а) в форме желтого масла, которое растворяли в МеОН. Каталитическое количество К2СО3 (50 мг) добавляли при 0°С и реакционную смесь помешивали в течение 1 ч. Анализ методом ТСХ показал, что реакция завершена. Холодную воду (25 мл) добавляли к реакционной смеси и экстрагировали этилацетат. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над безводным №ь8О4 и фильтровали. Концентрировали с получением (8)-метил 4-гидрокси-2-метоксибутаноата (46Ь, 1.5 г, 99%), в форме желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.07-2.28 (т, 1Н), 2.36-2.58 (т, 1Н), 3.36 (к, 3Н), 3.49 (к, 3Н), 3.85-4.07 (т, 1Н), 4.29-4.42 (т, 2Н).
К раствору (8)-метил 4-гидрокси-2-метоксибутаноата (46Ь, 1.48 г, 10.0 ммоль) в СН2С12 (25.0 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (1.63 г, 10.0 ммоль) и трифенилфосфин (3.93 г, 15.0 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и диизопропил азодикарбоксилат (2.95 мл, 15.0 ммоль) медленно по капле добавляли в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли Н2О (100 мл) и экстрагировали СН2С12. Органические фазы промывали солевым раствором. Сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% Е1ОАс-гексан) с получением (8)-метил 4-(1,3-диоксоизоиндолин-2-илокси)-2-метоксибутаноата (46с, 1.25 г, 42%) в виде светло-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.98-2.10 (т, 1Н), 2.23-2.37 (т, 1Н), 3.51 (к, 3Н), 3.79 (к, 3Н), 4.24 (бб, 1=9.47, 3.66 Гц, 1Н), 4.31-4.40 (т, 2Н), 7.74-7.82 (т, 2Н), 7.81-7.90 (т, 2Н).
К раствору (8)-метил 4-(1,3-диоксоизоиндолин-2-илокси)-2-метоксибутаноата (1.2 г, 4.0 ммоль) в СН2С12 (5.0 мл) добавляли гидразин гидрат (0.98 мл, 10.0 ммоль) капельно при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (70% Е1ОАс-гексан) с получением (8)-метил 4-(аминоокси)2-метоксибутаноата (46с, 0.552 г, 84%) в виде бледно-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.75-2.23 (т, 2Н), 3.40 (к, 3Н), 3.46 (к, 3Н), 3.65-3.86 (т, 2Н), 4.96 (б1, 1=12.57, 6.22 Гц, 1Н).
B. Получение соединения 50.
Смесь (Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)тиона (311, 146 мг, 0.4 ммоль), (8)-метил 4-(аминоокси)-2-метоксибутаноата (46с, 260 мг, 1.6 ммоль), Нд(ОАс)2 (257 мг, 0.8 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (8)-метил 4-(^)-((Я)-2-амино-7-(2бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2метоксибутаноата (23 мг, 12%) в форме беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для СоНлВгР^Од, 496.09; эксп., 496.20.
Смесь полученного вещества (23 мг, 0.05 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2диоксазаборокана (74.5 мг, 0.25 ммоль), Рб(брр£)2С12 (4.0 мг, 0.005 ммоль), 2 Ν водного №ьС’О3 (0.25 мл, 0.5 ммоль) и ЭМА (2 мл), дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Во время реакции метиловый эфир смыливали на месте. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (8)-4-(^)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-метоксибутановой кислоты (4.6 мг, 20%) в форме беловатого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.91-2.03 (т, 1Н), 2.10-2.24 (т, 1Н), 2.74 (к, 3Н), 2.84-2.98 (т, 1Н), 3.00-3.10 (т, 1Н), 3.31 (Ьг. к., 3Н), 3.75-3.79 (т, 1Н), 3.81 (к, 3Н), 4.02-4.16 (т, 2Н), 4.82 (ббб, 1=10.23, 2.91, 2.78 Гц, 1Н), 6.69 (бб, 1=8.34, 2.02 Гц, 1Н), 6.95 (бб, 1=7.20, 1.89 Гц, 1Н), 7.06 (ббб, 1=9.16, 2.46, 2.27 Гц, 1Н), 7.09-7.16 (т, 1Н), 7.60 (бббб, 1=15.73, 8.15, 7.96, 2.27 Гц, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н28р^О3, 511.20; эксп., 511.40.
- 65 019156
Пример 47. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-он О-((2К,38,48)-3,4-дигидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим (соединение 51)
К раствору (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-он О-((2К,38,4К)-3,4-дигидрокси-5-метокситетрагидрофуран-2 ил)метил оксима (10.5 мг, 0.02 ммоль) в СН2С12 (1 мл) добавляли Е1381Н (16 мкл, 0.05 ммоль) и ВЕуЕьО (8.0 мкл, 0.05 ммоль) при 0°С в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и наливали в толченый лед. Получившуюся суспензию экстрагировали СН2С12 и промывали солевым раствором. Полученное в результате реакции вещество после очистки методом препаративной ЖХ/МС позволяет получить указанное в названии соединение (3.0 мг, 30%) в форме светло коричневого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 2.50 (8, 3Н), 2.77 (йй, 1=16.04, 6.95 Гц, 1Н), 3.00 (йй, 1=16.04, 5.18 Гц, 1Н), 3.15-3.26 (т, 2Н), 3.35-3.42 (т, 2Н), 3.83 (8, 3Н), 3.85-3.94 (т, 2Н), 4.38-4.41 (т, 1Н), 4.935.13 (т, 1Н), 6.82 (й, 1=9.09 Гц, 1Н), 7.16 (й, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.21-7.30 (т, 2Н), 7.45 (йй, 1=8.46, 5.94 Гц, 1Н), 7.86 (йй, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н28Е^О3, 511.51; эксп., 511.20.
Пример 48. (28,4К)-трет-бутил 2-(аминооксиметил)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)пирролидин-1карбоксилат
К раствору (28,4К)-трет-бутил 4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-(гидроксиметил)пирролидин-1карбоксилата (2.0 г, 6.0 ммоль) в СН2С12 (15.0 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (978 мг, 6.0 ммоль) и трифенилфосфин (2.36 г, 9.0 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и диизопропил азодикарбоксилат (1.78 мл, 9.0 ммоль) медленно по капле добавляли в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли Н2О (100 мл) и экстрагировали СН2С12. Органические фазы промывали солевым раствором. Сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% ЕЮАс-гексан) с получением (28,4К)-трет-бутил 4-(третбутилдиметилсилилокси)-2-((1,3-диоксоизоиндолин-2-илокси)метил)пирролидин-1-карбоксилата в виде светло-желтого масла.
Получившуюся маслянистое соединение растворяли в СН2С12 (250 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли капельно гидразин гидрат (1.2 мл, 12.0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэшхроматографии (70% ЕЮАс-гексан) с получением 1.2 г (60%, в два этапа) (28,4К)-трет-бутил 2(аминооксиметил)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)пирролидин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 0.24 (8, 3Н), 0.26 (8, 3Н), 0.87 (8, 9Н), 1.26 (8, 9Н), 1.67-1.76 (т, 1Н), 1.81-1.94 (т, 1Н), 3.18 (йй, 1=12.25, 4.93 Гц, 1Н), 3.22-3.31 (т, 1Н), 3.70-3.81 (т, 1Н), 3.88-3.96 (т, 1Н), 3.98-4.09 (т, 1Н), 4.12-4.21 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СнН^ОдЗ!, 347.23; эксп., 347.22.
- 66 019156
Пример 49. (В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((28,4В)-4-гидроксипирролидин-2-ил)метил оксим (соединение 52)
ОН
Смесь (В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)тиона (183 мг, 0.5 ммоль), (28,4В)-трет-бутил 2-(аминооксиметил)-4-(третбутилдиметилсилилокси)пирролидин-1-карбоксилата (692 мг, 2.0 ммоль), Нд(ОАс)2 (320 мг, 1.0 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч.
Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (28,4В)трет-бутил 2-((^)-((В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)пирролидин-1-карбоксилата (200 мг, 50%) в форме беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С30Н45ВгЕ^О481, 679.24; эксп., 679.20.
Смесь полученного вещества (200 мг, 0.3 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2диоксазаборокана (447 мг, 1.5 ммоль), Рб(бррГ)2С12 (25 мг, 0.03 ммоль), 2 Ν №ьСО3 (1.5 мл, 3.0 ммоль) и ОМА (2 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (28,4В)-трет-бутил 2-((^)-((В)-2-амино-7-(4-фтор-2(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)метил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоксилата (94 мг, 53%) в форме вязкого масла.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С30Н37Е^О5, 594.28; эксп., 594.30.
Получившуюся маслянистое соединение растворяли в диоксане (1.0 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли 4Ν НС1 в диоксане (0.1 мл, 0.375 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Получившееся твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением соединения 52 в форме соли НС1 (56 мг, 76%) в виде белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.64 (ббб, 1=13.64, 8.08, 5.56 Гц, 1Н), 1.88 (бб, 1=13.64, 7.07 Гц, 1Н), 2.65 (8, 3Н), 2.90 (б, 1=11.62 Гц, 1Н), 3.00-3.09 (т, 2Н), 3.13-3.27 (т, 1Н), 3.68-3.82 (т, 1Н), 3.843.94 (т, 4Н), 3.95-4.02 (т, 1Н), 4.40 (ί, 1=4.67 Гц, 1Н), 4.87 (бб, 1=10.48, 3.92 Гц, 1Н), 5.18 (8, 2Н), 5.72 (8, 1Н), 6.73 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.00 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.07-7.24 (т, 2Н), 7.57-7.77 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н29Е^О3, 494.22; эксп., 494.20.
Пример 50. (3В,58)-1-ацетил-5-((^)-((В)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)пирролидин-3-ил ацетат (соединение 53)
К раствору (В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((28,4В)-4-гидроксипирролидин-2-ил)метил оксима (20 мг, 0.05 ммоль) в СН2С12 (1 мл) содержащему каталитическое количество ДМАП, добавляли Ξί3Ν (20.86 мкл, 0.15 ммоль) и ацетил хлорид (10.0 мкл, 0.1 ммоль) при 0°С в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Гасили насыщенным раствором №Н4С1 и экстрагировали СН2С12. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над безводным
- 67 019156 №ь8О4. Получившийся остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением соединения, упомянутого в названии (5 мг, 25%) в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.00 (5, 3Н), 2.04 (5, 3Н), 2.09-2.23 (т, 1Н), 2.29-2.41 (т, 1Н), 2.64 (5, 3Н), 2.95-3.11 (т, 1Н), 3.15-3.29 (т, 1Н), 3.66 (бб, 1=11.37, 5.56 Гц, 1Н), 3.90 (5, 3Н), 4.04 (бб, 1=11.87, 5.31 Гц, 1Н), 4.13-4.30 (т, 1Н), 4.32-4.49 (т, 1Н), 4.77-4.95 (т, 1Н), 5.06-5.16 (т, 1Н), 5.20-5.32 (т, 1Н), 6.74 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.01 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.10-7.22 (т, 2Н), 7.57-7.74 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С29Н33Р^О5, 578.60; эксп., 578.30.
Пример 51. (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-(аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилат
К раствору (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-гидроксипирролидин-1,2-дикарбоксилата (4.9 г, 20.0 ммоль) в СН2С12 (50.0 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (3.26 г, 20.0 ммоль) и трифенилфосфин (7.86 г, 30.0 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и диизопропил азодикарбоксилат (5.90 мл, 30.0 ммоль) медленно по капле добавляли в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Выделение продукта реакции и очистка методом, описанным в примере 2А, этап 1 давали (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-(1,3-диоксоизоиндолин-2-илокси)пирролидин1,2-дикарбоксилат в форме вязкого масла.
Полученное маслянистое соединение растворяли в СН2С12 (100 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли гидразин гидрат (4.0 мл, 40.0 ммоль) капельно. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Выделение продукта реакции и очистка методом, описанным в примере 2А, этап 2 давали (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-(аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилата в виде бледножелтого масла (2.8 г, 53%, выход в два этапа).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.42 (5, 9Н), 2.13-2.29 (т, 1Н), 2.34-2.48 (т, 1Н), 3.48-3.68 (т, 2Н), 3.72 (5, 3Н), 4.23-4.30 (т, 1Н), 4.30-4.49 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СпН21^>О5, 261.14; эксп., 261.22.
Пример 52. (28,4К)-метил 4-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)пирролидин-2-карбоксилат (соединение 54) о7 )=0
Смесь (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)тиона (150 мг, 0.4 ммоль), (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-(аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилата (416 мг, 1.6 ммоль), Нд(ОАс)2 (256 мг, 0.8 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (28,4Κ)-1трет-бутил 2-метил 4-(^)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилата (172 мг, 570%) в форме беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С^Н^ВгР^О 593.14; эксп., 593.10.
Смесь (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)тиона (150 мг, 0.4 ммоль), (28,4К)-1-трет-бутил 2-метил 4-(аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилата (416 мг, 1.6 ммоль), Нд(ОАс)2 (256 мг, 0.8 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (28,4Κ)-1трет-бутил 2-метил 4-(^)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)пирролидин-1,2-дикарбоксилата (172 мг, 570%) в форме белова того твердого вещества.
- 68 019156
МС (Е8) [М+Н] расч. для С^Нз^гР^А, 593.14; эксп., 593.10.
Полученное маслянистое соединение растворяли в диоксане (1.0 мл) и охлаждали до 0°С. 4Ν НС1 в диоксане (62.0 мкл, 0.25 ммоль) добавляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Получившееся твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением соединения 54 в форме соли НС1 (45.0 мг, 82%) в виде белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.32-2.46 (т, 2Н), 2.53 (к, 3Н), 2.87 (бб, 1=16.80, 10.74 Гц, 2Н), 3.12 (б, 1=4.04 Гц, 1Н), 3.30 (бб, 1=12.63, 3.54 Гц, 1Н), 3.47 (к, 3Н), 3.71 (к, 3Н), 4.38 (бб, 1=9.98, 2.65 Гц, 1Н), 4.67 (ΐ, 1=3.79 Гц, 1Н), 4.73 (бб, 1=10.23, 3.66 Гц, 1Н), 6.60 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 6.87 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 6.97 (бб, 1=9.22, 2.65 Гц, 1Н), 7.03 (!б, 1=8.46, 2.02 Гц, 1Н), 7.46 (бб, 1=9.09, 4.80 Гц, 1Н), 7.53 (!, 1=7.71 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н29Р^О4, 522.542; эксп., 522.24
Пример 53. (28,4К)-4-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)пирролидин-2-карбоксильная кислота (соединение 55)
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 52.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОБ) δ ррт 2.23-2.36 (т, 1Н), 2.39-2.49 (т, 1Н), 2.69 (к, 3Н), 3.14-3.26 (т, 2Н), 3.43-3.54 (т, 2Н), 3.76 (к, 3Н), 4.14-4.26 (т, 1Н), 4.53 (бб, 1=9.09, 3.79 Гц, 1Н), 4.60 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 6.82-6.91 (т, 1Н), 6.93-7.09 (т, 2Н), 7.20-7.32 (т, 1Н), 7.44 (бб, 1=8.84, 5.31 Гц, 1Н), 7.68-7.90 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н27Р^О4, 507.51; эксп., 508.20.
Пример 54. (КД-2-амино-7 -(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(3К,58)-5-(гидроксиметил)пирролидин-3-ил оксим (соединение 56)
НО \
К раствору (28,4К)-метил 4-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)пирролидин-2-карбоксилата (25.0 мг, 0.04 ммоль) в сухом эфире (1 мл) добавляли Ь1А1Н4 (0.1 мл, 0.01 ммоль, 1 М раствор в эфире) при 0°С в атмосфере Ν2. Перемешивали в течение 1 ч и гасили раствором 1 N №ЮН (0.1 мл). Добавляли безводный Мд8О4 и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением указанного в названии соединения (6.0 мг, 32%) в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.67-1.95 (т, 2Н), 2.47 (к, 3Н), 2.58 (б, 1=3.03 Гц, 1Н), 2.71 (б, 1=3.28 Гц, 1Н), 2.94-3.00 (т, 2Н), 3.13-3.19 (т, 1Н), 3.22-3.39 (т, 2Н), 3.43 (бб, 1=11.12, 6.32 Гц, 1Н), 3.58 (к, 3Н), 4.65-4.73 (т, 1Н), 6.47 (бб, 1=8.46, 2.91 Гц, 1Н), 6.76 (бб, 1=7.20, 2.65 Гц, 1Н), 6.84 (ббб, 1=9.73, 2.78, 2.65 Гц, 1Н), 6.87-6.93 (т, 1Н), 7.29-7.36 (т, 1Н), 7.41 (!, 1=7.83 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н29Р^О3, 494.53; эксп., 494.20.
Пример 55. (3аК,4К,6а8)-трет-бутил 4-(аминооксиметил)-2,2-диметилдигидро-3аН[ 1,3]диоксоло [4,5-с] пиррол-5 (4Н)-карбоксилат
- 69 019156
К раствору (8)-1-трет-бутил 2-метил 1Н-пиррол-1,2-(2Н,5Н)-дикарбоксилата (1.0 г, 4.5 ммоль) в диоксане-Н2О (4:1) добавляли НМО (580 мг, 4.95 ммоль) и ОвО4 (114 мг, 0.45 ммоль, 2.5 вес.% в Н2О) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре, гасили 10% водным раствором №ь82О3 и экстрагировали этилацетат. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором и сушили над безводным №ь8О4. Получившийся остаток растворяли в ацетоне (5 мл), добавляли каталитическое количество ППТС и диметоксипропан (1.5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным NаΗСОз и солевым раствором. Сушили над безводным №ь8О4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в эфире (5.0 мл) и добавляли Ь1А1Н4 (3.0 мл, 3.0 ммоль, 1 М раствор в эфире) при 0°С в атмосфере Ν2. Перемешивали в течение 1 ч и гасили 1 N раствором №ЮН (0.1 мл). Добавляли безводный Мд8О4 и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии (5% МеОН-СН2С12) с получением (3аК,4К,6а8)-трет-бутил 4(гидроксиметил)-2,2-диметилдигидро-3аН-[1,3]диоксоло[4,5-с]пиррол-5(4Н)-карбоксилата (550 мг, 45%, выход в три этапа).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.32 (в, 6Н), 1.47 (в, 9Н), 3.33-3.38 (т, 1Н), 3.50 (бб, 1=13.14, 6.06 Гц, 2Н), 4.54 (б, 1=3.79 Гц, 1Н), 4.59-4.61 (т, 1Н), 4.66-4.73 (т, 2Н).
Полученное маслянистое соединение (550 мг, 2.0 ммоль) подвергали реакции сочетания Мицунобу, после чего удаляли фталимидную защиту, следуя процедуре, аналогичной описанной в примере 2, с получением (3аК,4К,6а8)-трет-бутил 4-(аминооксиметил)-2,2-диметилдигидро-3аН-[1,3]диоксоло[4,5с]пиррол-5(4Н)-карбоксилат (340 мг, 59%) в форме вязкого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.31 (в, 3Н), 1.45 (в, 3Н), 1.47 (в, 9Н), 3.26-3.47 (т, 1Н), 3.593.80 (т, 2Н), 4.07-4.38 (т, 1Н), 4.51-4.67 (т, 1Н), 5.41-5.71 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С 11;,\О,. 289.17; эксп., 289.20.
Пример 56. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((2К,3К,48)-3,4-дигидроксипирролидин-2-ил)метил оксим (соединение 57)
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, аналогичной описанной в примере #, с использованием (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-тиона (150 мг, 0.4 ммоль) и (3аК,4К,6а8)-трет-бутил 4-(аминооксиметил)-2,2-диметилдигидро-3аН[1,3]диоксоло[4,5-с]пиррол-5(4Н)-карбоксилата (340 мг, 1.2 ммоль). Реакция сочетания Сузуки и последующее удаление защиты позволяли получить указанное в названии соединение в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.53 (в, 3Н), 2.85-2.99 (т, 1Н), 3.02-3.15 (т, 1Н), 3.18-3.25 (т, 1Н), 3.26-3.31 (т, 2Н), 3.81 (в, 3Н), 3.83-3.95 (т, 1Н), 3.97-4.04 (т, 1Н), 4.10 (Ьгв, 1Н), 4.20-4.29 (т, 1Н), 4.37 (б, 1=4.80 Гц, 1Н), 4.60 (Ьгв, 1Н), 4.81 (бб, 1=9.47, 3.41 Гц, 1Н), 6.68 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 6.95 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.01-7.14 (т, 1Н), 7.48-7.57 (т, 1Н), 7.61 (ΐ, 1=7.71 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н29Е^О4, 510.53; эксп., 510.40.
Пример 57. (1К,28)-4-(аминоокси)циклопентан-1,2-диол о он
К раствору циклопент-3-энола (840 мг, 10.0 ммоль) в СН2С12 (25.0 мл) добавляли 2гидроксиизоиндолин-1,3-дион (1.96 г, 12.0 ммоль) и трифенилфосфин (3.93 г, 15.0 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и медленно по капле добавляли диизопропил азодикарбоксилат (2.95 мл, 15.0 ммоль) в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. К реакционной смеси добавляли Н2О (100 мл) и экстрагировали СН2С12. Органические фазы промывали солевым раствором. Сушили над безводным №ь8О4. фильтровали и концентрировали с получением жел
- 70 019156 того масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% ЕЮЛс-гексан) с получением 2(циклопент-3-энилокси)изоиндолин-1,3-диона (740 мг, 32%) в виде светло-желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ ррт 2.57-2.87 (т, 4Η), 5.12 (1, 1=6.19 Гц, 1Η), 5.75 (к, 2Η), 7.74 (66, 1=5.68, 3.16 Гц, 2Η), 7.79-7.87 (т, 2Η).
МС (Е8) [М+Н] расч. для €13Η12ΝΟ3, 230.07; эксп., 230.20.
К раствору 2-(циклопент-3-энилокси)изоиндолин-1,3-диона (736 мг, 3.2 ммоль) в дио^нне-ИЮ (5.0 мл, 4:1) добавляли НМО (421 мг, 3.60 ммоль) и Ο^4 (1.0 мл мг, 0.32 ммоль, 2.5 вес.% в Н2О) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Гасили 10% водным раствором Να282Ο3 и экстрагировали этилацетат. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором и сушили над безводным Να28Ο.4. Фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (80% ЕЮЛс-гексан) с получением 2-((3Я,48)-3,4дигидроксициклопентилокси)изоиндолин-1,3-диона (650 мг, 77%) в виде светло-желтого масла.
’Η-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ ррт 1.94-2.12 (т, 2Η), 2.14-2.35 (т, 2Η), 4.22-4.88 (т, 2Η), 4.755.11 (т, 1Η), 7.67-7.78 (т, 2Η), 7.79-7.86 (т, 2Η).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С13Η14NΟ5, 264.08; эксп., 264.20.
Полученное маслянистое соединение (650 мг, 2.47 ммоль) растворяли в СЫ2С12 (5 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли гидразин гидрат (0.3 мл, 6.17 ммоль) капельно. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением (248 мг, 71%) (1Я,28)-4(аминоокси)циклопентан-1,2-диола в виде бледно-желтого масла.
’Η-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ ррт 1.67-1.87 (т, 4Η), 3.86-3.96 (т, 2Η), 4.00-4.21 (т, 1Η).
МС (Е8) [М+Н] расч. для ^Η^ΝΟβ, 134.07; эксп., 134.21.
Пример 58. (7Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(3Я,48)-3,4-дигидроксициклопентил оксим (соединение 58) но он
Смесь (Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)тиона (146 мг, 0.4 ммоль), (1Я,28)-4-(аминоокси)циклопентан-1,2-диола (212 мг, 1.6 ммоль), Η§(ΟΛ^2 (256 мг, 0.8 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (7Я,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он О-(3Я,48)-3,4-дигидроксициклопентил оксима (78 мг, 43%) в виде беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для Ό^ζ-ΒγΡΝ^, 466.08; эксп., 467.30.
Смесь полученного соединения (75 мг, 0.16 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2диоксазаборокана (238 мг, 0.8 ммоль), Ρ6(6ррί)2С12 (13 мг, 0.016 ммоль), 2 Ν водного Ν;·ι2ίΌ3 (0.4 мл, 0.8 ммоль) и ДМА (2 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали с получением (7Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(3Я,48)-3,4дигидроксициклопентил оксима (8.4 мг, 12%) в виде белого твердого вещества.
’Η-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ ррт 1.75-2.03 (т, 4Η), 2.51 (к, 3Η), 2.71-2.89 (т, 1Η), 2.95-3.10 (т, 1Η), 3.86 (к, 3Η), 4.36 (6, 1=3.28 Гц, 2Η), 4.49-4.63 (т, 1Η), 4.94 (т, 1Η), 6.85 (6, 1=7.83 Гц, 1Η), 7.19 (6, 1=7.33 Гц, 1Η), 7.22-7.32 (т, 2Η), 7.42-7.54 (т, 1Η), 7.84 (1, 1=7.58 Гц, 1Η).
МС (Е8) [М+Н] расч. для ВДДОД 495.52; эксп., 495.40.
Пример 59. (1Я,28)-4-(аминооксиметил)циклопентан-1,2-диол
- 71 019156
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, аналогичной описанной в примере 57.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-к) δ ррт 1.21-1.38 (т, 2Н), 1.50-1.64 (т, 2Н), 1.69-1.84 (т, 1Н), 3.863.96 (т, 2Н), 4.11 (кк, 1=7.33, 1.52 Гц, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С..11\О;. 148.09; эксп., 148.07.
Пример 60. (7К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-он О-((3К,48)-3,4-дигидроксициклопентил)метил оксим (соединение 59) /°Н .0
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, аналогичной описанной в примере 58.
1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 1.54-1.69 (т, 2Н), 1.73-1.88 (т, 2Н), 2.61 (8, 3Н), 2.64-2.75 (т, 1Н), 2.903.03 (т, 1Н), 3.11 (кк, 1=16.29, 4.42 Гц, 1Н), 3.80-3.88 (т, 2Н), 3.90 (8, 3Н), 3.94-4.05 (т, 2Н), 5.00 (кк, 1=8.46, 4.42 Гц, 1Н), 6.78 (к, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.11 (к, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.13-7.24 (т, 2Н), 7.59 (кк, 1=8.08, 5.81 Гц, 1Н), 7.76 (1, 1=7.83 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н3(фНО4, 509.22; эксп., 509.20.
Пример 61. 5-(Аминоокси)-2-метилпентан-2,3-диол.
К раствору 5-бром-2-метилпент-2-ена (1.33 мл, 10.0 ммоль) в СΗ3СN (25 мл) добавляли трет-бутил гидроксикарбамат (2.0 г, 15.0 ммоль) и ДБУ (4.5 мл, 30 ммоль) при 0°С и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Г асили насыщенным раствором ИН4С1 и экстрагировали солевой раствор. Объединяли органические фазы, промывали солевым раствором и сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% Е1ОАс-гексан) с получением трет-бутил 4-метилпент-3энилоксикарбамата (750 мг, 70%) в форме вязкого масла.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-к) δ ррт 1.40 (8, 9Н), 1.54 ( 8., 3Н), 1.61 (8., 3Н), 2.21-2.31 (т, 2Н), 3.70-3.78 (т, 2Н), 5.02-5.10 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СПН2^О3, 216.15; эксп., 216.10.
Получившееся маслянистое соединение (750 мг, 3.5 ммоль) растворяли в диоксане - Н2О 4:1, НМО (409 мг, 3.85 ммоль) и добавляли О8О4 (0.2 мл, 0.35 ммоль, 2.5 вес.% в Н2О). Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Выделение продукта реакции совпадающей с процедурой, описанной в примере 58, позволяло получить трет-бутил 3,4-дигидрокси-4метилпентилоксикарбамат (510 мг, 58%) в форме вязкого масла.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-к) δ 1.14 (8, 3Н), 1.20 (8, 3Н), 1.46 (8, 9Н), 1.57-1.70 (т, 1Н), 1.72-1.88 (т, 1Н), 3.62-3.76 (т, 1Н), 3.92-4.15 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СПН2^О5, 250.15; эксп., 250.20.
Получившееся маслянистое соединение (498 мг, 2.0 ммоль) растворяли в диоксане (2.0 мл) и охлаждали до 0°С добавляли 4Ν НС1 в диоксане (1.25 мл, 5.0 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 ч. Получившееся твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением соли НС1 указанного в названии соединения (260 мг, 70%) в форме белого твердого вещества.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформа-к) δ 1.16 (8, 3Н), 1.19 (8, 3Н), 1.63-1.71 (т, 1Н), 1.98-2.06 (т, 1Н), 3.45 (к, 1=12.88 Гц, 1Н), 4.14-4.33 (т, 2Н).
- 72 019156
МС (Е8) [М+Н] расч. для С6Н1(^О3, 150.11; эксп., 150.10. Способ В.
В смесь 5-бром-2-метилпент-2-ена (0.66 мл, 5.0 ммоль) в ίΉ3ΟΝ (15 мл) добавляли 2гидроксиизоиндолин-1,3-диона (3.33 г, 6.0 ммоль) и ДБУ (4.5 мл, 30 ммоль) нагревали при 100°С в течение 4 ч. Выделение продукта реакции, аналогичной описанной в примере 58, давало 2-(4-метилпент-3энилокси)изоиндолин-1,3-дион (1.14 г, 90%) в форме вязкого масла.
Получившееся соединение подвергали дигидроксилированию, после чего удаляли фталимидную защиту аналогично процедуре, описанной ранее (пример 57), в результате получали соединение, указан ное в названии.
Пример 62. (7В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-3,4-дигидрокси-4-метилпентил оксим (соединение 60) он
.0
Указанное в названии соединение получали, следуя процедуре, аналогичной описанной в примере 58.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ ррт 0.99 (б, 1=5.31 Гц, 3Н), 1.04 (б, 1=5.31 Гц, 3Н), 1.34-1.51 (т, 1Н), 1.92-2.07 (т, 1Н), 2.53 (б, 1=1.77 Гц, 3Н), 2.73-2.89 (т, 1Н), 3.03 (бб, 1=16.17, 5.05 Гц, 1Н), 3.16-3.30 (т, 1Н), 3.86 (б, 1=3.03 Гц, 3Н), 3.95-4.06 (т, 2Н), 4.93-5.13 (т, 1Н), 6.86 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.19 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.22-7.34 (т, 2Н), 7.41-7.56 (т, 1Н), 7.78-7.91 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н32Р^О4, 511.56; эксп., 511.40.
Пример 63. (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксим (соединение 61)
ОН
Смесь (В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)тиона (366 мг, 1.0 ммоль), О-(трет-бутилдиметилсилил)гидроксиламина (588 мг, 4.0 ммоль), Нд(ОАс)2 (640 мг, 2.0 ммоль) и толуола (5 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и полученный маслянистый осадок толкли с сухим метанолом с получением бледно-желтого твердого вещества. Фильтровали и сушили с получением (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (384 мг, 80%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 0.22 (к, 3Н), 0.23 (к, 3Н), 0.97 (к, 9Н), 2.70 (к, 3Н), 2.91 (бб, 1=16.42, 8.08 Гц, 1Н), 3.19 (ббб, 1=16.36, 4.86, 1.26 Гц, 1Н), 4.99 (ббб, 1=7.77, 5.12, 2.02 Гц, 1Н), 7.05 (ϊ6, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.33 (бб, 1=8.08, 2.78 Гц, 1Н), 7.39 (бб, 1=8.72, 5.94 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СоНзВР^ОЗх, 480.12.; эксп., 480.30.
Смесь указанного выше соединения (47.9 мг, 0.1 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил1,3,6,2-диоксазаборокана (149 мг, 0.5 ммоль), Рб(брр£)2С12 (8.12 мг, 0.01 ммоль), 2 Ν МьСО3 (0.25 мл, 0.5 ммоль) в ДМА (3 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение ночи. Анализ методом ЖХ/МС показывал (В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксим ([М+Н] расч. для С26Н34ВгРН5О281, 509.24;
- 73 019156 эксп., 509.40). Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (11.8 мг, 30%) в форме белого твердого вещества.
Пример 64. (К)-4-(((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)оксазолидин-2-он (соединение 62)
Раствор (К)-3-трет-бутил 4-метил 2,2-диметилоксазолидин-3,4-дикарбоксилата (5 г, 19.3 ммоль) в безводном диэтилэфире охлаждали в ледяной ванне и добавляли 1 М Ь1Л1Н4 в диэтилэфире (38 мл, 38.6 ммоль) капельно в атмосфере Ν2. Реакционную смесь было допустимо нагревать до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи. Реакционную смесь гасили, медленно добавляя насыщенным водный №^О4 (5 мл). Суспензию фильтровали через целитную пластинку. Целитную пластинку промывали ΕίОАс и раствор сушили под вакуумом с получением (^)-трет-бутил 4-(гидроксиметил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоксилата (2.77 г, 12 ммоль) в виде прозрачного масла.
[М4Н] расч. для СцН2ЩО4, 232; эксп., 232.
Использовали стандартный способ получения алкоксиаминов, состоящий из реакции Мицунобу и снятия гидразиновой защиты, как описано в примере 2.
[М4Н] расч. для СцН22^О4, 247; эксп., 247.
Использовали стандартное присоединение к остову тиалактама через Нд(ОАс)2, как описано в примере 39.
[М4Н] расч. для С25Н32ВгЕ^О4, 580; эксп., 580.
К раствору (В)-трет-бутил 4-(((2)-((В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3карбоксилата в диоксане добавляли 4 Ν НС1 в диоксане. Реакционную смесь было допустимо перемешивать в атмосфере Ν2 при комнатной температуре в течение 90 мин. Реакционную смесь лиофилизировали до сухого состояния с получением (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он-О-(В)-2-амино-3-гидроксипропил оксима (65 мг, 0.13 ммоль).
[М4Н] расч. для С17Н20ВгЕ^О2, 440; эксп., 440.
К раствору (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он О-(В)-2-амино-3-гидроксипропил оксима (65 мг, 0.13 ммоль) в безводном дихлорметане (3 мл) добавляли триэтиламин (400 мкл, 22 ед) и трифосген (94 мг, 0.33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере Ν2 при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь промывали Н2Ох 1 и сушили органическую фазу над безводным №^О4. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О с получением (Β)-4-(((Ζ)-((Β)-2амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)метил)оксазолидин-2-она (12 мг, 0.026 ммоль).
[М4Н] расч. для С18Н18ВгЕ^О3, 466; эксп., 466.
Были использованы стандартные условия Сузуки для присоединения пиридилового цикла, как описано в примере 39.
!Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.76 (к, 3Н), 3.03-3.19 (т, 1Н), 3.33-3.53 (т, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 3.97-4.08 (т, 1Н), 4.07-4.24 (т, 2Н), 4.29 (бб, 1=8.72, 4.67 Гц, 1Н), 4.42-4.55 (т, 1Н), 5.05 (бб, 1=8.97, 4.17 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.14-7.29 (т, 2Н), 7.66 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.77 (ί, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М4Н] расч. для С24Н24ЕУО4, 494; эксп., 494.
- 74 019156
Пример 65. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-2-морфолиноэтил оксим (соединение 63)
К раствору 2-морфолиноэтанола (5 г, 38 ммоль) в СН2С12 (250 мл) добавляли 2гидроксиизоиндолин-1,3-дион (9.3 г, 57 ммоль) и трифенилфосфин (15 г, 57 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и добавляли диизопропил азодикарбоксилат (11 мл, 57 ммоль) медленно по капле при помощи капельной воронки в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением прозрачного масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% Е!ОАс-гексан). Полученное прозрачное маслянистое вещество растворяли в СН2С12 (50 мл). Добавляли гидразин гидрат (5.8 мл, 76 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 ч. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением прозрачного масла О-(2морфолиноэтил)гидроксиламина (3.5 г, 24 ммоль).
[М+Н] расч. для С6Н^2О2, 147; эксп., 147.
К раствору О-(2-морфолиноэтил)гидроксиламина (600 мг, 4.1 ммоль) в безводном толуоле (6 мл) добавляли (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)тион (0.150 г, 0.41 ммоль) и ацетат ртути(11) (262 мг, 0.82 ммоль). Полученную смесь нагревали до 100°С в течение 1 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровать через целитную пластину с промыванием Е!ОАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением желто-зеленого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Фракции концентрировали с получением (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-2-морфолиноэтил оксима (196 мг, 0.41 ммоль).
[М+Н] расч. для С20Н24ВгР^О2, 480; эксп., 480.
К раствору (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин5(6Н)-он О-2-морфолиноэтил оксима (100 мг, 0.21 ммоль) в ДМА добавляли 6-метоксипиридин-2бороновую кислоту Ν-фенилдиэтаноламин эфир (250 мг, 0.84 ммоль), Рά(άррГ)2С12 (17 мг, 0.02 ммоль) и 2 N №ьСО3 (522 мкл, 1.05 ммоль). Полученную смесь дегазировали Ν2 в течение 5 мин, а затем нагревали в запечатанной колбе при 85°С в течение 14 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровать через целитную пластину, покрытую безводным №28О4, промывая Е!ОАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением коричневого остатка, который очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Растворитель удаляли с помощью роторного испарителя и сушили образец под вакуумом с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-он О-2морфолиноэтил оксима (67.4 мг, 0.13 ммоль).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 2.81 (з, 3Н), 2.95 (!ά, 1=11.87, 3.79 Гц, 2Н), 3.12 (άά, 1=17.18, 9.60 Гц, 1Н), 3.34-3.56 (т, 3Н), 3.70 (άά, 1=11.75, 3.41 Гц, 2Н), 3.84-4.06 (т, 7Н), 4.39 (!, 1=4.80 Гц, 2Н), 4.94 (άά, 1=9.60, 4.04 Гц, 1Н), 6.81 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.06 (ά, 1=1.01 Гц, 1Н), 7.08-7.21 (т, 2Н), 7.50 (άά, 1=8.59,
5.31 Гц, 1Н), 7.68-7.81 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н30Р^О3, 508; эксп., 508.
- 75 019156
Пример 66. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил оксим (соединение 64)
Раствор метил тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксилата (5 г, 34.6 ммоль) в безводном диэтилэфире охлаждали в ледяной ванне и добавляли 1 М ЫА1Н4 в диэтилэфире (52 мл, 51.9 ммоль) капельно в атмосфере Ν2. Реакционную смесь было допустимо нагревать до комнатной температуры, при перемешивании в течение ночи. Реакционную смесь гасили, медленно добавляя 1 N водный №1ОН (3 мл). Суспензию фильтровали через целитную пластину. Целитную пластину промывали диэтилэфиром, а затем метанолом и сушили раствор под вакуумом с получением (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанолома (4 г, 34.6 ммоль) в виде прозрачного масла.
[М+Н] расч. для С6Н12О2, 117; эксп., 117.
Использовали стандартный способ получения алкоксиаминов, состоящий из реакции Мицунобу и снятия гидразиновой защиты, как описано в примере 2.
[М+Н] расч. для С6Н^О2, 132; эксп., 132.
Использовали стандартное присоединение к остову тиалактама через Нд(ОАс)2, как описано в примере 39.
[М+Н] расч. для С20Н23ВгЕ^О2, 465; эксп., 465.
Использовали стандартные условия Сузуки для присоединения пиридилового кольца, как описано в примере 39.
’Н-ЯМР (400 МГц, МеОИ) δ 1.19-1.41 (т, 2Н), 1.64 (б, 1=12.88 Гц, 2Н), 1.96-2.13 (т, 1Н), 2.80 (8, 3Н), 3.19 (бб, 1=16.93, 8.59 Гц, 1Н), 3.33-3.47 (т, 3Н), 3.84-4.00 (т, 7Н), 5.03-5.13 (т, 1Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.15-7.27 (т, 2Н), 7.60 (бб, 1=8.34, 5.56 Гц, 1Н), 7.77 (1, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н29Е^О3, 493; эксп., 493.
Пример 67. (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-((18,48)-4-гидроксициклогексил)метил оксим (соединение 65)
К раствору (1г,4г)-4-гидроксициклогексанкарбоксильной кислоты (5 г, 34.7 ммоль) в безводном ДМФ (35 мл) добавляли имидазол (4.72 г, 69.4 ммоль) и ТБДМС хлорид (5.75 г, 38.2 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в атмосфере Ν2 при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли диэтилэфиром и промывали 1 N водным НС1х2, а затем солевым раствором х1. Органическую фазу сушили над безводньм №28О4 и удаляли растворитель под вакуумом с полу- 76 019156 чением (1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексанкарбоксильной кислоты (8.9 г, 34.7 ммоль) в виде прозрачного масла.
Раствор (1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексанкарбоксильной кислоты (8.9 г, 34.7 ммоль) в безводном дихлорметане (80 мл) охлаждали в ванне с сухим льдом/ацетоном и добавляли 20% по весу раствор ДИБАЛ-Г в толуоле (57 мл, 69.4 ммоль) капельно в атмосфере Ν2. Реакционную смесь было допустимо нагревать до -30°С при перемешивании в течение 1 ч. Холодную реакционную смесь медленно наливали в охлажденный 1 N водный НС1 (150 мл). Водную фазу промывали ДХМх2 и объединенные органические фазы промывали солевым раствором х 1 и сушили над безводным №28О4. Растворитель удаляли под вакуумом с получением ((1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)метанола (4.5 г, 18.4 ммоль).
К раствору ((1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)метанолом (4.5 г, 18.4 ммоль) в СН2С12 (150 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (4.5 г, 27.6 ммоль) и трифенилфосфин (7.25 г, 27.6 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и добавляли диизопропил азодикарбоксилат (5.35 мл, 27.6 ммоль) медленно по капле при помощи капельной воронки в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением прозрачного масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (50% ЕЮАс-гексан). Полученное прозрачное маслянистое вещество растворяли в СН2С12 (50 мл). Добавляли гидразин гидрат (1.47 мл, 19.3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 ч. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением прозрачного масла О-(((1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)метил)гидроксиламина (2.5 г, 9.66 ммоль).
[М+Н] расч. для С|3Н29,НО28к 260; эксп., 260.
К раствору О-(((1г,4г)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)метил)гидроксиламина (530 мг, 2.05 ммоль) в безводном толуоле (8 мл) добавляли (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-тион (0.150 г, 0.41 ммоль) и ртути ацетат (262 мг, 0.82 ммоль). Полученную смесь нагревали до 100°С в течение 1 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровать через целитную пластину, промывая ЕЮАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением желто-зеленого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. После высушивания фракций, полученных методом препаративной ВЭЖХ при 50°С в роторном испарителе, получали чистый спирт и (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-он О-((18,48)-4-гидроксициклогексил)метил оксим (63 мг, 0.13 ммоль).
[М+Н] расч. для С21Н25ВгЕ^О2, 479; эксп., 479.
К раствору (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин5(6Н)-он О-((18,48)-4-гидроксициклогексил)метил оксима (63 мг, 0.13 ммоль) в ДМА добавляли 6метоксипиридин-2-бороновую кислоту, Ν-фенилдиэтаноламин эфир (157 мг, 0.52 ммоль), Рй(йрр£)2С12 (10.6 мг, 0.013 ммоль) и 2 Ν №ьСО3 (329 мкл, 0.65 ммоль). Полученную смесь дегазировали Ν2 в течение 5 мин, затем нагревали в запечатанной колбе при 85°С в течение 14 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровали через целитную пластину, покрытую безводным №28О4, промывая ЕЮАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением коричневого остатка, который очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Растворитель удаляли с помощью роторного испарителя, сушили образец под вакуумом с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-он О-((18,48)-4гидроксициклогексил)метил оксима (10 мг, 0.02 ммоль).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 1.40-1.60 (т, 6Н), 1.69 (йй, 1=8.08, 4.55 Гц, 2Н), 1.77-1.92 (т, 1Н), 2.73 (8, 3Н), 3.05-3.18 (т, 1Н), 3.21-3.28 (т, 1Н), 3.83-3.96 (т, 6Н), 5.09 (йй, 1=8.34, 4.55 Гц, 1Н), 6.80 (й, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (й, 1=1.01 Гц, 1Н), 7.15-7.25 (т, 2Н), 7.58 (йй, 1=8.34, 5.81 Гц, 1Н), 7.71-7.82 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для СЕ-НуЕН-Оу 507; эксп., 507.
- 77 019156
Пример 68. (8)-4-((2)-((В)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутанамид (соединение 66)
К раствору 3-гидроксидигидрофуран-2(3Н)-она (5 г, 49 ммоль) в безводном ДМФ (50 мл) добавляли имидазол (6.7 г, 98 ммоль) и ТБДМС хлорид (8.1 г, 54 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в атмосфере Ν2 при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли диэтилэфиром и промывали 1 N водного НС1х2, а затем солевым раствором х1. Органическую фазу сушили над №ь8О.-| и удаляли растворитель под вакуумом с получением 3-(третбутилдиметилсилилокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (11 г, 49 ммоль) в виде прозрачного масла.
[М+Н] расч. для СюН10О381, 217; эксп., 217.
К раствору 3-(трет-бутилдиметилсилилокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (11 г, 49 ммоль) в метаноле добавляли 7 N аммония в метаноле (20 мл, 140 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в запечатанной колбе в течение 2 дней. Растворитель удаляли под вакуумом с получением (8)-2-(третбутилдиметилсилилокси)-4-гидроксибутанамида (4.85 г, 20.8 ммоль) в форме белого твердого вещества.
[М+Н] расч. для С10Н2^О381, 234; эксп., 234.
К раствору (8)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-гидроксибутанамида (4.85 г, 20.8 ммоль) в СН2С12 (150 мл) добавляли 2-гидроксиизоиндолин-1,3-дион (5.1 г, 31.2 ммоль) и трифенилфосфин (8.2 г, 31.2 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°С и добавляли диизопропил азодикарбоксилат (6.0 мл, 31.2 ммоль) медленно по капле при помощи капельной воронки в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением прозрачного масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (60% ЕЮАс-гексан). Полученное бледно-желтое соединение растворяли в СН2С12 (60 мл). Добавляли гидразин гидрат (670 мкл, 8.8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 ч. Полученное твердое вещество затем фильтровали и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением прозрачного желтого масла (8)-4-(аминоокси)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)бутанамида (1.1 г, 4.4 ммоль).
[М+Н] расч. для С10Н24Ы2О381, 249; эксп., 249.
К раствору (8)-4-(аминоокси)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)бутанамида (1 г, 4.1 ммоль) в безводном толуоле (10 мл) добавляли (В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Η)-тион (0.300 г, 0.82 ммоль) и ртути ацетат(11) (523 мг, 1.64 ммоль). Полученную смесь нагревали до 100°С в течение 2 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровали через целитную пластину, промывая ЕЮАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением желто-зеленого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. После высушивания фракций, полученных методом препаративной ВЭЖХ при 50°С на роторном испарителе, получали чистый спирт и получением (8)-4-((2)-((В)-2-амино-7-(2-бром-4фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2гидроксибутанамид (51 мг, 0.11 ммоль).
[М+Н] расч. для С18Н20ВгЕЫ6О3, 477; эксп., 477.
К раствору (8)-4-((2)-((В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Η)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутанамида (51 мг, 0.11 ммоль) в ДМА добавляли 6метоксипиридин-2-бороновую кислоту Ν-фенилдиэтаноламин эфир (130 мг, 0.44 ммоль), Рά(άррί)2С12 (9 мг, 0.011 ммоль) и 2 Ν Nа2СΟ3 (273 мкл, 0.55 ммоль). Полученную смесь дегазировали Ν2 в течение 5 мин, затем нагревали в запечатанной колбе при 85°С в течение 14 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровали через целитную пластину, покрытую безводным №ь8О4. промывая ЕЮАс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением коричневого остатка, ко
- 78 019156 торый очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Растворитель удаляли с помощью роторного испарителя и сушили образец под вакуумом с получением (8)-4-(^)-((К)-2-амино-7(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)-2-гидроксибутанамида (12.6 мг, 0.025 ммоль).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 1.76-1.93 (т, 1Н), 2.16-2.35 (т, 1Н), 2.80 (к, 3Н), 3.18 (бб, 1=16.80, 9.22 Гц, 1Н), 3.32-3.42 (т, 1Н), 3.90 (к, 3Н), 4.10 (бб, 1=8.72, 3.16 Гц, 1Н), 4.13-4.31 (т, 2Н), 5.07 (бб, 1=9.09, 4.04 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.15-7.28 (т, 2Н), 7.66 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.71-7.83 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С24Н26Е^О4, 496; эксп., 496.
Пример 69. (7К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-2-(морфолин-2-ил)этил оксим (соединение 67)
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 1.75-1.92 (т, 1Н), 1.91-2.08 (т, 1Н), 2.78 (к, 3Н), 2.90 (к, 1=11.87 Гц, 1Н), 3.03-3.18 (т, 1Н), 3.18-3.28 (т, 2Н), 3.32-3.42 (т, 2Н), 3.68-3.85 (т, 2Н), 3.91 (к, 3Н), 4.02 (б, 1=12.88 Гц, 1Н), 4.07-4.28 (т, 2Н), 5.01-5.11 (т, 1Н), 6.81 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.16-7.35 (т, 2Н), 7.56-7.69 (т, 1Н), 7.78 (к, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н30Е^О3, 508; эксп., 508.
Пример 70. (8)-4-((^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)-3-бензилоксазолидин-2-он (соединение 68)
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 2.48-2.65 (т, 3Н), 2.97-3.16 (т, 1Н), 3.19-3.35 (т, 1Н), 3.88 (к, 3Н), 3.90-3.99 (т, 1Н), 4.00-4.16 (т, 2Н), 4.15-4.27 (т, 1Н), 4.26-4.39 (т, 1Н), 4.72-4.86 (т, 1Н), 4.90 (бб, 1=10.23, 3.41 Гц, 1Н), 5.47-5.63 (т, 1Н), 6.74 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 6.97-7.06 (т, 1Н), 7.10-7.21 (т, 2Н), 7.207.26 (т, 5Н), 7.57-7.71 (т, 2Н).
[М+Н] расч. для С31Н30Е^О4, 584; эксп., 584.
Пример 71. (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2-амино-3-гидроксипропил оксим (соединение 69)
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.81 (к, 3Н), 2.90-3.00 (т, 1Н), 3.02-3.16 (т, 1Н), 3.69-3.78 (т, 1Н), 3.82 (бб, 1=11.37, 3.54 Гц, 2Н), 3.91 (к, 3Н), 4.13-4.34 (т, 2Н), 5.03-5.10 (т, 1Н), 6.72-6.92 (т, 1Н), 7.13 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.16-7.34 (т, 2Н), 7.63-7.75 (т, 1Н), 7.79 (к, 1=7.71 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С23Н26Е^О3, 468; эксп., 468.
- 79 019156
Пример 72. (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метил оксим (соединение 70)
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.71 (к, 3Н), 3.18 (бб, 1=16.80, 9.22 Гц, 1Н), 3.34-3.43 (т, 1Н), 3.87 (к, 3Н), 3.92 (к, 3Н), 5.06-5.11 (т, 3Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.15-7.29 (т, 2Н), 7.537.67 (т, 2Н), 7.67-7.85 (т, 1Н), 8.85 (Ьг. к., 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н25Е^О2, 489; эксп., 489.
Пример 73. (Я)-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-5-имино-4-метил-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амин (соединение 71)
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.56-2.66 (т, 3Н), 3.28 (б, 1=7.83 Гц, 2Н), 3.88 (к, 3Н), 5.32 (ΐ, 1=7.83 Гц,
1Н), 6.75-6.86 (т, 1Н), 7.11-7.22 (т, 1Н), 7.23-7.36 (т, 2Н), 7.72 (ΐ, 1=6.82 Гц, 1Н), 7.74-7.84 (т, 1Н). [М+Н] расч. для С20Н19Е^О, 379; эксп., 379.
Пример 74. (Я,2)-2-амино-7-(2-(5-амино-6-метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 72) он
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.44-1.61 (т, 1Н), 1.78-1.95 (т, 1Н), 2.53 (к, 3Н), 2.86 (бб, 1=16.04, 7.45 Гц, 1Н), 3.08 (бб, 1=15.92, 4.80 Гц, 1Н), 3.20-3.30 (т, 2Н), 3.47-3.58 (т, 1Н), 3.89 (к, 3Н), 3.96-4.07 (т, 2Н), 4.40-4.51 (т, 2Н), 4.95-5.06 (т, 1Н), 6.22 (б, 1=1.52 Гц, 1Н), 6.54 (к, 2Н), 6.78 (к, 2Н), 7.13-7.29 (т, 2Н), 7.45 (бб, 1=8.46, 5.94 Гц, 1Н), 7.70 (к, 1Н).
[М+Н] расч. для С23Н27Е^О4, 499; эксп., 499.
Пример 75. (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиразин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 73) он
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 1.59-1.74 (т, 1Н), 1.88-2.06 (т, 1Н), 2.62 (к, 3Н), 3.02 (бб, 1=16.29, 9.22
Гц, 1Н), 3.13-3.25 (т, 1Н), 3.39-3.53 (т, 2Н), 3.67-3.78 (т, 1Н), 3.97 (к, 3Н), 4.06-4.24 (т, 2Н), 4.89-4.94 (т, 1Н), 7.20-7.33 (т, 2Н), 7.63-7.74 (т, 1Н), 8.21 (к, 1Н), 8.32 (к, 1Н).
- 80 019156 [М+Н] расч. для С23Н26Р^О4, 484; эксп., 484.
Пример 76. (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-метокситиазол-4-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 74) он
.0
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОБ) δ 1.61-1.75 (т, 1Н), 1.91-2.06 (т, 1Н), 2.63 (к, 3Н), 2.95 (бб, 1=16.17, 8.08 Гц, 1Н), 3.21 (бб, 1=16.17, 4.80 Гц, 1Н), 3.40-3.53 (т, 2Н), 3.69-3.79 (т, 1Н), 4.08 (к, 3Н), 4.11-4.22 (т, 2Н), 5.06 (бб, 1=7.71, 4.93 Гц, 1Н), 7.00 (к, 1Н), 7.10 (!б, 1=8.46, 2.78 Гц, 1Н), 7.22 (бб, 1=9.60, 2.78 Гц, 1Н), 7.48 (бб, 1=8.72, 5.68 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С22Н25Р^О48, 489; эксп., 489.
Пример 77. Синтез (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-4,5-дигидроксипентил оксим (соединение 75)
Соединение А синтезировали, как сообщалось ранее (70.7% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 1.36 (к, 3Н), 1.41 (к, 3Н), 1.71-2.01 (т, 4Н), 3.43-3.67 (т, 1Н), 4.05-4.10 (т, 1Н), 4.16-4.31 (т, 3Н), 7.70-7.79 (т, 2Н), 7.80-7.91 (т, 2Н).
Соединение В ((8)-О-(3-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)пропил)гидроксиламин) синтезировали, как сообщалось ранее, с использованием тех же химических реакций, количественный выход.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 1.36 (к, 3Н), 1.41 (к, 3Н), 1.57-1.76 (т, 4Н), 3.50-3.55 (т, 1Н), 3.69 (!б, 1=6.13, 2.65 Гц, 2Н), 4.02-4.07 (т, 1Н), 4.07-4.16 (т, 1Н), 5.36 (к, 2Н).
Соединение С также получали способом, описанным ранее.
Е8ЬМС: т/ζ 508.2 (М+Н)+.
Очистка методом препаративной ТФА обеспечивала удаление защиты группы ацетонида и давала соединение Ό (55.1% выход).
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.21-1.37 (т, 1Н), 1.47-1.60 (т, 1Н), 1.68 (ббб, 1=13.01, 10.11, 5.94 Гц, 1Н), 1.73-1.91 (т, 1Н), 2.61 (к, 3Н), 2.87 (бб, 1=16.17, 4.29 Гц, 1Н), 3.16-3.33 (т, 3Н), 3.35-3.50 (т, 1Н), 3.87-4.07 (т, 3Н), 4.89-5.00 (т, 2Н), 6.91 (Ьг. к., 1Н), 7.14-7.26 (т, 3Н), 7.58 (бб, 1=8.46, 2.40 Гц, 1Н).
Реакция сочетания Сузуки соединения Ό с обычной процедурой давала соединение 75 (19.3% выход).
- 81 019156
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.16-1.33 (т, 2Н), 1.48 (б, 1=4.55 Гц, 1Н), 1.62 (Ьг. 5., 1Н), 1.76 (б, 1=10.36 Гц, 1Н), 2.52 (5, 3Н), 2.80 (бб, 1=16.04, 6.95 Гц, 1Н), 2.97-3.07 (т, 1Н), 3.18-3.29 (т, 2Н), 3.41 (Ьг. 5., 2Н), 3.86 (5, 3Н), 3.87-3.98 (т, 2Н), 4.40 (Ьг. 5., 2Н), 4.97-5.15 (т, 1Н), 6.19-6.39 (т, 1Н), 6.78 (5, 2Н), 6.85 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.19 (б, 1=6.57 Гц, 1Н), 7.21-7.30 (т, 2Н), 7.47 (бб, 1=8.46, 5.94 Гц, 1Н), 7.84 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
Пример 78. (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3-амино-2-гидроксипропил оксим (соединение 76)
Соединение Р: !Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 1.26 (5, 9Н), 1.28 (5, 6Н), 3.65-3.74 (т, 2Н), 3.89-
3.93 (т, 1Н), 4.12 (т, 1Н), 4.28-4.41 (т, 1Н), 5.58 (Ьг. 5., 2Н).
Соединение С синтезировали, как описано выше.
Е8БМС: т/ζ 579.1 (М+Н)+.
Очищение С методом ЖХ/МС, градиент 35-60% АЦН в Н2О, с системой ТФА, и удаление защиты группы ацетонида с получением соединения Н после этапа испарения.
Е8БМС: т/ζ 539.2 (М+Н)+, 20.8% выход в 2 этапа.
Реакция сочетания Сузуки соединения Н давала соединение I.
Е8БМС: т/ζ 568.3 (М+Н)+, с которого затем удаляли защиту 20% раствором ТФА в дихлорметане в течение 45 мин с получением в качестве продукта соединения 76.
Соединение 76 очищали в базовом режиме, градиент 25-50% АЦН в Н2О, выход 46.1%.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 2.52 (5, 3Н), 2.69-2.86 (т, 2Н), 3.05 (б, 1=4.55 Гц, 2Н), 3.85 (5, 3Н), 3.88 (бб, 1=5.81, 3.79 Гц, 2Н), 3.98 (Ьг. 5., 2Н), 5.02 (Ьг. 5., 1Н), 5.05 (Ьг.5., 2Н), 6.59 (б, 1=1.77 Гц, 1Н), 6.86 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.18 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.28 (ббб, 1=5.68, 2.78, 2.65 Гц, 1Н), 7.52 (бб, 1=8.59, 5.81 Гц, 1Н), 7.75 (Ьг. 5., 2Н), 7.84 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
- 82 019156
Пример 79. (8)-5-(((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)метил)оксазолидин-2-он (соединение 77)
С соединения Н удаляли защиту 20% раствором ТФА в дихлорметане в течение 10 мин с получением соединения К, Е81-МС: т/ζ 439.1 (М+Н)+.
Соединение К приводили в реакцию с трифосгеном, раствором триэтиламина в дихлорметане, как описано ранее, с получением соединения Ь. Его очищали методом препаративной ВЭЖХ, градиент 2550% АЦН в Н2О, выход 10.6%, Е81-МС: т/ζ 439.2 (М+Н)+.
Реакция сочетания Сузуки соединения К с нормальной процедурой давала соединение 77, выход 32.7%.
1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.92 (8, 3Н), 3.35-3.40 (т, 1Н), 3.44-3.52 (т, 1Н), 3.55-3.59 (т, 1Н), 3.633.66 (т, 1Н), 3.91 (8, 3Н), 4.20 (кк, 1=6.44, 4.67 Гц, 2Н), 4.95 (т, 1Н), 5.05 (т, 1Н), 6.79 (к, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.11 (к, 1=6.57 Гц, 1Н), 7.14-7.25 (т, 2Н), 7.59 (т, 1Н), 7.76 (кк, 1=8.46, 7.20 Гц, 1Н).
- 83 019156
Пример 80. (В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидроксипропил оксим (соединение 78)
Соединение 3 получали, следуя процедуре, описанной выше, выход 78.7%.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.08 (8, 6Н), 0.84-0.93 (т, 9Н), 1.99 (8, 2Н), 3.76-3.90 (т, 2Н),
4.27-4.39 (т, 2Н), 7.70-7.78 (т, 2Н), 7.80-7.88 (т, 2Н).
Соединение 4 получали, следуя процедуре, описанной выше, выход 93.2%.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.05-0.09 (т, 6Н), 0.84-0.95 (т, 9Н), 1.73-1.86 (т, 2Н), 3.69 (ί, 1=6.19 Гц, 2Н), 3.75 (ί, 1=6.32 Гц, 2Н), 5.34 (8, 2Н).
Соединение 6: Е81-МС: т/ζ 538.3 (М+Н)+.
Очистку проводили методом препаративной ВЭЖХ, градиент 50-85% АЦН в Н2О с системой ТФА. После испарения получали соединение 7, 42.5% выход в 2 этапа, Е81-МС: т/ζ 424.2 (М+Н)+.
Соединение 78 очищали методом ЖХ/МС в базовом режиме, градиент 40-60% АЦН в Н2О, выход 45.9%.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.77 (дшп, 1=6.44 Гц, 2Н), 2.53 (8, 3Н), 2.82 (бб, 1=16.29, 7.20 Гц, 1Н), 3.04 (бб, 1=16.17, 5.05 Гц, 1Н), 3.42-3.54 (т, 2Н), 3.86 (8, 3Н), 3.91-4.04 (т, 2Н), 4.97-5.13 (т, 1Н), 6.37 (Ьг. 8., 1Н), 6.85 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 6.90 (Ьг. 8., 2Н), 7.19 (б, 1=6.82 Гц, 1Н), 7.21-7.33 (т, 2Н), 7.47 (бб, 1=8.46, 5.94 Гц, 1Н), 7.84 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
- 84 019156
Пример 81. (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-4-гидроксибутил оксим (соединение 79)
Соединение 81с получали, следуя описанной выше процедуре, выход 88.0%.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.03-0.07 (т, 6Н), 0.82-0.96 (т, 9Н), 1.74 (б, 1=8.84 Гц, 2Н), 1.86 (б, 1=8.34 Гц, 2Н), 3.69 (1, 1=6.19 Гц, 2Н), 4.24 (1, 1=6.57 Гц, 2Н), 7.75 (бб, 1=5.56, 3.03 Гц, 2Н), 7.80-7.87 (т, 2Н).
Соединение 81б получали, следуя описанной выше процедуре, выход 94.5%.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.060 (к, 6Н), 0.85-0.94 (т, 9Н), 1.51-1.59 (т, 3Н), 1.59-1.69 (т, 2Н), 3.63 (1, 1=6.32 Гц, 2Н), 3.65-3.72 (т, 2Н), 5.35 (к, 2Н).
Соединение 81Г получали, следуя описанной выше процедуре.
Е81-МС: т/ζ 554.3 (М+Н)+.
Очищали методом ЖХ/МС, используя систему ТФА, градиент 60-90% АЦН/Н2О, удаляли защиту группы ТБДМС и получали соединение 15, 22.2% выход в 2 этапа.
Е81-МС: т/ζ 438.1(М+Н)+.
Соединение 79 получали, следуя описанной выше процедуре. Продукт очищали в базовом режиме, градиент 35-65% АЦН/Н2О, 19.2% выход.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.37-1.56 (т, 2Н), 1.56-1.74 (т, 2Н), 2.53 (к, 3Н), 2.81 (бб, 1=16.04, 7.20 Гц, 1Н), 3.03 (бб, 1=16.17, 5.05 Гц, 1Н), 3.40 (1, 1=6.44 Гц, 2Н), 3.92 (к, 3Н), 3.88-3.98 (т, 2Н), 5.05 (Ьг. к., 1Н), 6.31 (Ьг. к., 1Н), 6.85 (б, 1=8.34 Гц, 3Н), 7.19 (б, 1=6.57 Гц, 1Н), 7.22-7.32 (т, 2Н), 7.47 (бб, 1=8.46,
5.94 Гц, 1Н), 7.84 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
- 85 019156
Пример 82. (7В,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-метоксипропил оксим (соединение 80)
Соединение Ν: Е81-МС: т/ζ 122.0 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 3.33 (к, 3Н), 3.40-3.46 (т, 3Н), 3.67-3.75 (т, 1Н), 3.75-3.83 (т, 1Н), 4.07 (т, 1Н), 5.52 (Ьг. к., 2Н).
Соединение О очищали методом препаративной ВЭЖХ, градиент 25-55% АЦН в Н2О, 4.9% выход, Е81-МС: т/ζ 454.3 (М+Н)+.
Соединение 80 очищали методом препаративной ВЭЖХ, базовый режим, градиент 30-70% АЦН в Н2О, 16.1% выход.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.61 (к, 3Н), 2.89-3.05 (т, 1Н), 3.07-3.21 (т, 1Н), 3.34 (б, 1=2.02 Гц, 3Н), 3.37-3.50 (т, 2Н), 3.61-3.75 (т, 1Н), 3.89 (к, 3Н), 3.92-4.01 (т, 1Н), 4.01-4.09 (т, 2Н), 4.93-5.03 (т, 1Н), 6.78 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.11 (б, 1=1.01 Гц, 1Н), 7.13-7.25 (т, 2Н), 7.64 (бб, 1=8.46, 5.68 Гц, 1Н), 7.75 (ΐ, 1=7.83 Гц, 1Н).
- 86 019156
Пример 83. (Я.2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-5(6Η)-он Ο-(Я)-4,5-дигидроксипентил оксим (соединение 81)
Соединение 83Ь получали, следуя описанной выше процедуре.
’Η-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ 1.36 (к, 3Η), 1.39-1.45 (к, 3Η), 1.73-2.00 (т, 4Η), 2.05 (к, 1Η), 3.543.63 (т, 1Η), 4.04-4.14 (т, 1Η), 4.14-4.21 (т, 1Η), 4.21-4.33 (т, 2Η), 7.72-7.79 (т, 2Η), 7.81-7.87 (т, 2Η).
Соединение 83с получали, следуя описанной выше процедуре, 88.2% выход в 2 этапа.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ 1.36 (к, 3Η), 1.41 (к, 3Η), 1.59-1.78 (т, 4Η), 3.50-3.55 (т, 1Η), 3.69 (16, 1=6.25, 2.40 Гц, 2Η), 4.01-4.07 (т, 1Η), 4.11 (66, 1=7.07, 5.56 Гц, 1Η), 5.36 (к, 2Η).
Соединение 836: Е81-МС: т/ζ 508.3 (М+Ы)+.
Очистка методом ЖХ/МС, градиент 40-60% АЦН в Н2О (метод ТФА) давала соединение 5, Е81-МС: т/ζ 468.1 (М+Ы)+, 24.1% выход в 2 этапа.
Соединение 81, очистку осуществляли как в базовом режиме, так и в режиме кислой среды, выход 21.6%.
’Η-ЯМР (400 МГц, МсС)О) δ 1.35-1.52 (т, 1Η), 1.59 (61, 1=10.04, 4.07 Гц, 1Η), 1.74 (666, 1=13.71, 10.04, 6.06 Гц, 1Η), 1.82-2.08 (т, 1Η), 3.14 (66, 1=16.67, 8.84 Гц, 1Η), 3.28-3.35 (т, 1=4.55 Гц, 1Η), 3.383.49 (т, 2Η), 3.54-3.68 (т, 1Η), 3.84-3.97 (к, 3Η), 4.06 (1, 1=6.44 Гц, 2Η), 5.08 (66, 1=8.84, 4.29 Гц, 1Η), 6.79 (6, 1=7.58 Гц, 1Η), 7.12 (6, 1=6.57 Гц, 1Η), 7.15-7.24 (т, 2Η), 7.62 (66, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Η), 7.76 (66, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Η).
Пример 84. (8)-4-(2-иодоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан
К раствору (8)-2-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанола (1.58 мл, 10.0 ммоль) в СЫ2С12 (25 мл) добавляли ДМАР (120 мг, 1.0 ммоль) и триэтиламин (2.08 мл, 15.0 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0 С и медленно добавляли метансульфонил хлорид (12.0 ммоль, 0.928 мл) капельно в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч (осуществляя мониторинг методом ТСХ, 1:2 ЕЮАсгексаны). Добавляли насыщенный раствор ΝΗ.1Γ1 (20 мл) и экстрагировали смесь СЩСЦ Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над безводным Ν;·ι28Ο.·|. фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое растворяли в сухом ацетоне (25 мл), после чего до- 87 019156 бавляли ΝιΙ (7.5 г, 50 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч (осуществляя мониторинг методом ТСХ, 1:4 ЕЮАс-гексан), охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (50 мл). Экстрагировали этилацетатом, смывали объединенные органические фазы солевым раствором, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением желтого масла, которое затем очищали путем флэш-хроматографии (25% ЕЮАС-гексан) с получением указанного в названии соединения, (8)-4-(2-иодоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (0.82 г, 32% в два этапа) в виде прозрачного масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.36 (в, 3Н), 1.41 (в, 3Н), 1.99-1.16 (т, 2Н), 3.25 (бб, 1=18.19, 8.84 Гц, 1Н), 3.58 (ΐ, 1=7.20 Гц, 1Н), 4.03-4.13 (т, 1Н), 4.13-4.24 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С7Н141О2, 257.00; эксп., 257.08.
Пример 85. Альтернативный синтез (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 37)
Соединение 2К получали, как описано ранее. Смесь (К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-тиона (2К, 366 мг, 1.0 ммоль), О-(трет- бутилдиметилсилил)гидроксиламина (85а, 588 мг, 4.0 ммоль), Нд(ОАс)2 (640 мг, 2.0 ммоль) и толуола (5 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и полученный маслянистый осадок толкли с сухим метанолом с получением, после фильтрации и высушивания, (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (384 мг, 80%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 0.22 (в, 3Н), 0.23 (в, 3Н), 0.97 (в, 9Н), 2.70 (в, 3Н), 2.91 (бб, 1=16.42, 8.08 Гц, 1Н), 3.19 (ббб, 1=16.36, 4.86, 1.26 Гц, 1Н), 4.99 (ббб, 1=7.77, 5.12, 2.02 Гц, 1Н), 7.05 (16, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.33 (бб, 1=8.08, 2.78 Гц, 1Н), 7.39 (бб, 1=8.72, 5.94 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С20Н28ВгЕ^О81, 480.12.; эксп., 480.30.
К раствору (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилилоксима (85Ь, 384 мг, 0.8 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли 1:9 ТФА-Н2О и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали диоксаном, затем сушили с получением (К,2)-2-амино-7-(2бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (85с, 206 мг, 70%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ ррт 2.56 (в, 3Н), 2.83 (бб, 1=15.92, 4.55 Гц, 1Н), 3.17 (бб, 1=16.04,
5.94 Гц, 1Н), 4.90 (д, 1=4.97 Гц, 1Н), 7.20 (б, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.21-7.23 (т, 1Н), 7.57 (ббб, 1=8.34, 1.64, 1.39 Гц, 1Н), 9.82 (в, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С14Н14ВгЕ^О, 366.03; эксп., 366.20.
К раствору (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он оксима (85с, 9.2 мг, 0.025 ммоль) в сухом ДМФ (1 мл) добавляли Св2СО3 (12.2 мг, 0.0375 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли (8)4-(2-иодоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (85б, 7.68 мг, 0.03 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение ночи. Анализ методом ЖХ/МС показал полное поглощение исходного материала. Реакционную смесь наливали в колотый лед и полученное твердое вещество фильтровали и промывали холодной водой. После высушивания получали (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-2-((8)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил оксим (7.8 мг, 63%) в форме светло-коричневого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.35 (в, 3Н), 1.41 (в, 3Н), 2.02 (дб, 1=6.32, 3.03 Гц, 2Н), 2.75
- 88 019156 (8, 3Н), 2.94 (кк, 1=16.42, 8.84 Гц, 1Н), 3.17 (кк, 1=16.42, 4.55 Гц, 1Н), 3.59 (кк, 1=8.08, 7.07 Гц, 1Н), 4.09 (кк, 1=8.08, 6.06 Гц, 1Н), 4.17-4.28 (т, 3Н), 4.98 (ккк, 1=8.72, 4.55, 1.64 Гц, 1Н), 7.07 (1к, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.34 (кк, 1=8.08, 2.78 Гц, 1Н), 7.43 (кк, 1=8.72, 5.94 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С1В Вг1;\,О;. 495.11; эксп., 495.30.
К раствору (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-к]пиримидин5(6Н)-он О-2-((8)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил оксима (85е, 1 г, 2 ммоль) в 3Ν водной НС1 (10 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Анализ методом ЖХ/МС показал полное поглощение исходного материала. Получение твердое вещество фильтровали, промывали холодным 1 Ν НС1 и сушили с получением (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (удаляли защиту 85е, 603 мг, 65%) в форме беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С18Н22ВгГ^О3, 454.08; эксп., 454.02.
Смесь (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (удаляли защиту 85е, 480 мг, 1.05 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокан (1.57 г, 5.25 ммоль), Рк(крр£)2С12 (0.086 г, 0.1 ммоль) и 2 Ν №12СО3 (2.64 мл, 5.25 ммоль) в ДМАс (5 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетат и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ (ИН4НСО3/ЛЦН/Н2О) с получением (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3-к]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима (соединение 37, 375 мг, 73%) в форме светло-коричневого твердого вещества.
1Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-к) δ ррт 1.43-1.55 (т, 1Н), 1.66 (т, 1Н), 2.55 (8, 3Н), 2.83-2.95 (т, 2Н), 3.11-3.44 (т, 1Н), 3.17-3.24 (т, 1Н), 3.27-3.33 (т, 1Н), 3.48-3.56 (т, 1Н), 3.65 (8, 3Н), 3.89-4.01 (т, 2Н), 4.68 (ккк, 1=10.23, 3.03, 2.91 Гц, 1Н), 6.53 (кк, 1=8.34, 2.53 Гц, 1Н), 6.81 (кк, 1=7.33, 2.53 Гц, 1Н), 6.90 (к1, 1=9.28, 2.68 Гц, 1Н), 6.96 (1к, 1=8.40, 2.65 Гц, 1Н), 7.38-7.43 (т, 1Н), 7.44-7.51 (т, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С24Н28ГЩЭ4, 483.21; эксп., 483.00.
- 89 019156
Пример 86. Второй альтернативный способ синтеза (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 37)
3Ν НСРНзО
он •О
Соединение 86Ь получали, как описано в примере 85 выше. Реакцией сочетания 86Г с 86Ь получали и методом А, и методом В.
Метод А. Смесь (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (86Ь, 47.9 мг, 0.1 ммоль), 2-(6метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокана (86Г, 149 мг, 0.5 ммоль), Рб(бррГ)С12 (8.12 мг, 0.01 ммоль) и 2 N №ьСО3 (0.25 мл, 0.5 ммоль) в ДМА (3 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение ночи. Анализ методом ЖХ/МС показал полное поглощение исходного материала и образование (К,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (86и или 61).
[М+Н] расч. для С26Н34ВгЕ^О281, 509.24; эксп., 509.40.
Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали с получением коричневого масла, которое затем очищали методом препаративной ВЭЖХ. Во время очистки трет-бутилдиметилсилил защитную группу также удаляли и получали (К,2)-2-амино-7-(4-фтор2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксим (37, 11.8 мг, 30%) в форме белого твердого вещества.
’Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.78 (8, 3Н), 3.14-3.31 (т, 1Н), 3.43-3.46 (т, 1Н), 3.89 (8, 3Н), 5.08 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 6.78 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.05 (б, 1=7.07 Гц, 2Н), 7.18 (б, 1=8.84, 2Н), 7.70 (1, 1=7.71, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для 395.16; эксп., 395.20.
Метод В. (К,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он оксим (соединение 86с) получали, как описано в примере 85 ранее. Смесь 86с (36.5 мг, 0.1 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокана (86Г, 149 мг, 0.5 ммоль),
Рб(бррГ)2С12 (8.12 мг, 0.01 ммоль) и 2 N №ьСО3 (0.25 мл, 0.5 ммоль) в ДМА (3 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли
- 90 019156 этилацетатом и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением (ВД-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (86д или 61, 13.2 мг, 33%) в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2.78 (8, 3Н), 3.14-3.31 (т, 1Н), 3.43-3.46 (т, 1Н), 3.89 (8, 3Н), 5.08 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 6.78 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.05 (б, 1=7.07 Гц, 2Н), 7.18 (б, 1=8.84, 2Н), 7.70 (ί, 1=7.71, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С20Н20Р^О2, 395.16; эксп., 395.20.
К раствору (В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (86д или соединения 61, 10.0 мг, 0.025 ммоль) в сухом ДМФ (1 мл) добавляли С82СО3 (12.2 мг, 0.0375 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли (8)-4-(2-иодоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (86б, 7.68 мг, 0.03 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение ночи. Анализ методом ЖХ/МС показывал полное поглощение исходного материала. Реакционную смесь наливали в толченый лед и полученное твердое вещество фильтровали, промывали холодной водой и сушили с получением (В^)-2амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)он О-2-((8)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этил оксима (861, 8.2 мг, 63%) в форме светло-коричневого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 1.33 (8, 3Н), 1.39 (8, 3Н), 1.91-2.01 (т, 4Н), 2.72 (8, 3Н), 3.07 (бб, 1=16.55, 10.48 Гц, 1Н), 3.26 (бб, 1=17.05, 4.93 Гц, 1Н), 3.55 (бб, 1=7.96, 7.20 Гц, 1Н), 3.90 (8, 3Н), 4.05 (бб, 1=7.96, 5.94 Гц, 1Н), 4.10-4.21 (т, 3Н), 4.89 (бб, 1=10.61, 3.79 Гц, 1Н), 6.74 (б, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.01 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.11-7.22 (т, 2Н), 7.61-7.69 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С27Н32Р^О4, 523.24; эксп., 523.50.
Удаление защиты с 861 осуществляли путем обработки разбавленным НС1, как описано в примере 85, с получением соединения 37.
Пример 87. (В^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-№метилацетамид (соединение 82)
A. Синтез 2-(аминоокси)^-метилацетамида (87с)
1)1ВСР ΝΜΜ о без юд, ТГФ Л о
Μ» В-<А Н 2)ΝΗΟΗ3
87а 87Ь 87с
Раствор 2-(трет-бутоксикарбониламиноокси)уксусной кислоты (87а, 1 г, 5.23 ммоль) в безводном ТГФ охлаждали в ледяной ванне и последовательно добавляли Ν-метилморфолин (863 мкл, 7.85 ммоль) и изобутил хлорформат (746 мкл, 5.75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере Ν2 в течение 20 мин. Добавляли 33% по весу раствор метанамина в этаноле (1.3 мл, 10.46 ммоль) к реакционной смеси, которую допускалось последовательно нагревать до комнатной температуры при перемешивании в течение ночи. ТГФ удаляли под вакуумом и остаток разделяли на этилацетат и воду. Органическую фазу промывали Н2Ох2 и сушили над безводным №28О4. Этилацетат удаляли под вакуумом с получением трет-бутил 2-(метиламино)-2-оксоэтоксикарбамат (87Ь, 775 мг, 3.80 ммоль).
К суспензии трет-бутил 2-(метиламино)-2-оксоэтоксикарбамата (87с, 775 мг, 3.80 ммоль) в безводном диоксане добавляли 4Ν НС1 в диоксане (3 мл, 12 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение 5 ч. Реакционную смесь сушили сублимацией и остаток разбавляли 20% триэтиламином в этилацетате, нейтрализуя соли НС1. Суспензию перемешивали в течение 1 ч и удаляли растворители под вакуумом с получением смеси 2-(аминоокси)^метилацетамида (87с) и соли триэтиламмония хлорида.
B. Получение соединения 82.
Обозначенное в заголовке соединение 82 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 68, реакцию сочетания 2-(аминоокси)^-метилацетамида (87с) проводили через Нд(ОАс)2.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОН) δ 2.75 (8, 3Н), 2.76 (8, 3Н), 3.19 (бб, 1=16.67, 9.35 Гц, 1Н), 3.41 (бб, 1=16.80, 4.17 Гц, 1Н), 3.91 (8, 3Н), 4.47 (8, 2Н), 5.06 (бб, 1=9.35, 4.04 Гц, 1Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13
1)4Ы НС1 в диоксане
2)ЫНС1-Ь
2) нейтрализация ТФА
- 91 019156 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.16-7.29 (т, 2Н), 7.71 (бб, 1=8.84, 5.56 Гц, 1Н), 7.73-7.82 (т, 1Н). [М+Н] расч. для С23Н24Р^О3, 466; эксп., 466.
Пример 88. (В,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-Ы,№диметилацетамид (соединение 83)
А .0
1 II
νΑ- Αίμη
А ] ΗΖΝ N
Ή-,. κνΑ 83
Соединение 83, указанное в названии, получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 87, с тем отличием, что использовали диметиламин.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 2.74 (к, 3Н), 2.93 (к, 3Н), 3.04 (к, 3Н), 3.10-3.24 (т, 1Н), 3.35-3.45 (т, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 4.69-4.81 (т, 2Н), 5.06 (бб, 1=9.35, 4.04 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.16-7.29 (т, 2Н), 7.70 (бб, 1=8.72, 5.68 Гц, 1Н), 7.73-7.82 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С24Н26Р^О3, 480; эксп., 480.
Пример 89. (В,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)ацетамид (соединение 84)
ΝΗ, А
Соединение 84, указанное в названии, получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 87, с тем отличием, что использовали диметиламин.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ 2.73 (к, 3Н), 3.09-3.23 (т, 1Н), 3.34-3.43 (т, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 4.46 (к, 2Н), 5.01-5.12 (т, 1Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.16-7.28 (т, 2Н), 7.64-7.73 (т, 1Н),
7.73-7.82 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С22Н22Р^О3, 452; эксп., 452.
Пример 90. 2-((2)-((В)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-1-((В)-3-фторпирролидин-1-ил)этанон (соединение 85)
К раствору (В,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)уксусной кислоты (0.05 ммоль, 22.6 мг) в ДМФ (0.5 мл) добавляли ГБТУ (0.075 ммоль, 28 мг), ЕЦЫ (0.125 ммоль, 17 мкл) и (В)-3-фторпирролидин (0.06 ммоль, 7.5 мг). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения (соединение 85, 13.0 мг, 50%) в форме коричневого твер дого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ ррт 2.05-2.40 (т, 2Н), 2.72 (к, 3Н), 3.06 (бб, 1=16.93, 10.36 Гц, 1Н),
- 92 019156
3.27-3.38 (т, 1Н), 3.39-3.62 (т, 4Н), 3.63-3.78 (т, 2Н), 3.82 (5, 3Н), 4.47-4.67 (т, 2Н), 4.87 (бб, 1=10.36, 3.03 Гц, 1Н), 5.11-5.36 (т, 1Н), 6.69 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 6.97 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.06 (бб, 1=9.35, 2.53 Гц, 1Н), 7.13 (1, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.50-7.70 (т, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н28Р2^О3, 524.53; эксп., 524.50.
Пример 91. (8)-4-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутановая кислота (соединение 86)
Этап А.
К раствору (8)-3-гидроксидигидрофуран-2(3Н)-она (91а, 5 г, 49 ммоль) в безводном ДМФ (40 мл) добавляли имидазол (6.7 г, 98 ммоль) и ТБДМС-хлорид (8.1 г, 54 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтилэфиром и промывали 1 N НС1х3. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и удаляли растворитель под вакуумом с получением (8)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (91Ь) в виде прозрачного масла (10.6 г, 49 ммоль).
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.15 (5, 3Н), 0.18 (5, 3Н), 0.86-0.99 (т, 9Н), 2.23 (бц, 1=12.63, 8.67 Гц, 1Н), 2.46 (бббб, 1=12.63, 7.58, 6.57, 3.28 Гц, 1Н), 2.84-3.01 (т, 1Н), 4.20 (1б, 1=9.16, 6.44 Гц, 1Н), 4.334.47 (т, 2Н).
Этап В.
К раствору (8)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (91Ь, 6 г, 27.8 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляли карбонат калия (500 мг, 3.6 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Метанол удаляли под вакуумом и остаток разделяли между этилацетатом и водой. Органическую фазу промывали Н2Ох2 и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли под вакуумом и получали (8)-метил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4гидроксибутонат (91с, 3.9 г, 15.7 ммоль) в виде прозрачного масла.
[М+Н] расч. для СцН24О481, 249; эксп., 249.
Этап С.
К раствору (8)-метил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-гидроксибутаноата (91с, 3.9 г, 15.7 ммоль) в безводном дихлорметане добавляли триэтиламин, ДМАП, и метилсульфонил хлорид. Реакционную смесь было допустимо перемешивать в течение 1.5 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным ΝΉ4α. Водную фазу экстрагировали дихлорметаном и объединенные органические фазы промывали солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и удаляли растворитель под вакуумом с получением (8)-метил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4метилсульфонилбутаноата (91б, 4.9 г, 15 ммоль) в форме желтого масла.
[М+Н] расч. для С12Н26О6881, 327; эксп., 327.
Этап Ό.
К раствору (8)-метил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилсульфонилбутаноата (91б, 4.9 г, 15 ммоль) в безводном ацетоне добавляли натрия иодид (11.5 г, 75 ммоль). Реакционную смесь нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 1.5 ч. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали в Е1ОАсх3. Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли под вакуумом с получением (8)-метил 2-(третбутилдиметилсилилокси)-4-иодобутаноата (91е, 4.33 г, 12 ммоль) в форме желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 0.07-0.13 (т, 6Н), 0.82-0.99 (т, 9Н), 2.09-2.32 (т, 2Н), 3.17-3.36 (т, 2Н), 3.74 (5, 3Н), 4.29 (бб, 1=8.08, 4.04 Гц, 1Н).
Этап Е.
К раствору (К^)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин
- 93 019156
5(6Н)-он оксима (91е, 150 мг, 0.41 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) добавляли цезия карбонат (200 мг, 0.62 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в течение 1 ч, в то же время добавляя (8)-метил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилсульфонилбутаноат (91£, 220 мг, 0.62 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь наливали в толченый лед с высвобождением (8)-метил 4-((2)-((Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-(третбутилдиметилсилилокси)бутаноата (91 г, 244 мг, 0.41 ммоль) в форме темно-желтого осадка.
[М+Н] расч. для С;5Н3,5ВгЖ5О.-|8|. 596; эксп., 596.
Этап Р.
К раствору (8)-метил 4-((2)-((Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)бутаноата (91 г, 244 мг, 0.41 ммоль) в ДМА добавляли 6-метоксипиридин-2-бороновую кислоту Ν-фенилдиэтаноламин эфир (488 мг, 1.64 ммоль), Рб(брр£)2С12 (66 мг, 0.08 ммоль) и 2 Ν №ьСО3 (2 мл, 4.1 ммоль). Полученную смесь дегазировали Ν2 в течение 5 мин, затем нагревали в запечатанной колбе при 85°С в течение 14 ч. Реакционную смесь было допустимо охлаждать до комнатной температуры и фильтровали через целитную пластину, покрытую безводным №ь8О4. промывая ЕЮЛс и СН3ОН. Фильтрат концентрировали с получением черного остатка, который очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Фракции сушили под вакуумом с получением (8)-метил 4-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-(третбутилдиметилсилилокси)бутаноата. Полученный материал непосредственно добавляли в диоксан (700 мкл) и обрабатывали 1:9 ТФА:Н2О (1 мл) в течение 3 ч. Растворители удаляли под вакуумом с получением (8)-метил 4-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутаноата (911, 15 мг, 0.03 ммоль).
[М+Н] расч. для С25Н27РШЭ5, 511; эксп., 511.
Этап С.
К раствору (8)-метил 4-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутаноата (911, 15 мг, 0.03 ммоль) в диоксане (500 мкл) добавляли 1 Ν ЫОН (74 мкл, 0.08 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в течение 3 ч, одновременно с этим разбавляя 1:1 ДМСО:МеОН, затем очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ТФА/АЦН/Н2О. Фракции сушили под вакуумом с получением (8)-4-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-2-гидроксибутановой кислоты (соединение 86, 7.1 мг, 0.014 ммоль) в форме желтого масла.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 1.86-2.08 (т, 1Н), 2.18-2.35 (т, 1Н), 2.70-2.87 (т, 3Н), 3.18 (бб, 1=16.80, 9.22 Гц, 1Н), 3.31-3.44 (т, 1Н), 3.84-3.97 (т, 3Н), 4.10-4.32 (т, 3Н), 5.08 (бб, 1=9.09, 4.04 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.14-7.31 (т, 2Н), 7.66 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.76 (ΐ, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С24Н25Р^О5, 497; эксп., 497.
Пример 92. 3-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)дигидрофуран-2(3Н)-он (соединение 87)
Ν'° 87
Α'ΝΗ
Л 2
Η2Ν N ιί
Ίτ
Μ
К раствору (Я,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин5(6Н)-он оксима (0.3 ммоль, 109 мг) в ДМФ (2.0 мл) добавляли Ск2СО3 (0.45 ммоль, 146 мг) и 3бромодигидрофуран-2(3Н)-он (0.36 ммоль, 33.6 мкл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Реакционную смесь наливали в толченый лед, фильтровали полученное твердое вещество и сушили с получением 3((2)-((Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (105 мг, 78%) в виде беловатого твердого вещества.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С18Н18ВгР^О3, 450.05; эксп., 450.30.
Смесь полученного соединения (0.2 ммоль, 92 мг), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2диоксазаборокана (0.5 ммоль, 150 мг), Рб(бррГ)2С12 (0.02 ммоль, 16 мг), 2 Ν №ьСО3 (1.0 ммоль, 0.5 мл) и ДМА (2.0 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температу
- 94 019156 ры, фильтровали через целит и очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением 2-((Ζ)-((Κ)-2амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)-4-гидроксибутановой кислоты (29 мг, 29%) в форме коричневого твердого вещества.
МС (Εδ) [М4Н] расч. для С24Н2&ЕНО5, 497.19; эксп., 497.00.
Полученное соединение растворяли в ТГФ (1.0 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли Ν-метил морфолин (0.15 ммоль, 16.5 мкл) и изобутил хлорформат (0.1 ммоль, 15.5 мкл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 ч. Очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения 3-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)дигидрофуран2(3Н)она (5 мг, 21%) в форме белого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 2.52 (б, 1=3.54 Гц, 1Н) 2.66 (Ьг. к., 3Н) 2.95-3.11 (т, 1Н) 3.27 (Ьг. к., 2Н) 3.79 (к, 3Н) 4.19-4.29 (т, 1Н) 4.34-4.45 (т, 1Н) 4.73-4.91 (т, 2Н) 6.67 (б, 1=8.34 Гц, 1Н) 6.94 (б, 1=6.57 Гц, 1Н) 7.00-7.15 (т, 2Н) 7.49-7.66 (т, 2Н).
МС (Εδ) [М4Н] расч. для С24Н24Е^О4, 479.47; эксп., 479.40.
Пример 93. 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидроксибутанамид (соединение 88)
3-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)дигидрофуран-2(3Н)он (14.3 мг, 0.03 ммоль) растворяли в растворе 7Ν NНз-ΜеОН и перемешивали в течение ночи в запечатанной колбе. Растворитель удаляли и остаток сушили с получением указанного в названии соединения 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4гидроксибутанамида (13.2 мг, 89%) в форме белого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 1.83-2.16 (т, 2Н), 2.58 (б, 1=6.06 Гц, 3Н), 2.85-3.03 (т, 1Н), 3.073.25 (т, 1Н), 3.70 (д, 1=7.24 Гц, 2Н), 3.90 (б, 1=11.37 Гц, 3Н), 4.54 ((б, 1=7.83, 5.05 Гц, 1Н), 4.97-5.17 (т, 1Н), 6.69-6.85 (т, 1Н), 7.11 (бб, 1=7.71, 2.40 Гц, 1Н), 7.14-7.26 (т, 2Н), 7.57-7.72 (т, 1Н), 7.76 (бб, 1=15.03, 6.69 Гц, 1Н).
МС (Εδ) [М4Н] расч. для С24Н27?УО4, 496.50; эксп., 496.40.
Пример 94. 2-(^)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-У№диметилбутанамид (соединение 89) и хиральное разделение
К раствору 3-(^)-(К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)дигидрофуран-2(3Н)-она (310 мг, 0.668 мг) в ТГФ (2 мл) добавляли Ν,Ν-диметиламин (2.0М раствор в МеОН, 0.86 мл, 1.72 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель удаляли и очищали смесь методом ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения 2-(^)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-У№диметилбутанамида (89, 80 мг, 24%) в форме белого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 2.63 (б, 1=2.78 Гц, 3Н), 2.84-2.99 (т, 1Н), 3.01 (б, 1=3.28 Гц, 3Н), 3.08-3.25 (т, 4Н), 3.61-3.93 (т, 2Н), 4.99 (бббб, 1=15.03, 4.86, 2.59, 2.27 Гц, 1Н), 5.09-5.23 (т, 3Н), 5.91 (б, 1=9.09 Гц, 1Н), 6.98-7.14 (т, 1Н), 7.33 (ббб, 1=7.89, 4.99, 2.53 Гц, 1Н), 7.38-7.48 (т, 1Н).
МС (Εδ) [М4Н] расч. для С20Н25ВгЕШЭ3, 495.34; эксп., 495.30.
2-(^)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)
- 95 019156 илиден)аминоокси)-4-гидрокси-Ы,№диметилбутанамид (89) был разделен на его энантиомеры методом сверхкритической жидкостной хроматографии (8РС) при следующих условиях.
Колонка СЫга1Рак А8-Н (250x21 мм, 5 мкм)
Подвижная фаза:
А: СО2 (1)
В: ί-РгОН
Параметры градиента: 25% ί-РгОН
Время прогона: 8 мин
Расход: 50 мл/мин
Объем впрыска: 2000 мкл.
Пример 95. Синтез (К)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-Ы,№диметилбутанамида (соединение 92)
Смесь (К)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-N,N-диметилбутанамида (31 мг, 0.063 ммоль), 2-(6метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокана (93 мг, 0.313 ммоль), Рά(άррГ)2С12 (9.16 мг, 0.013 ммоль), 2 N №ьСО3 (0.156 мл, 0.313 ммоль) и ДМА (2.0 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением (К)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-Ы,№ диметилбутанамида (92, 14.4 мг, 43.9%) в форме беловатого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 2.08-2.16 (т, 2Н), 2.60 (з, 3Н), 2.98 (з, 3Н), 3.02 (ά, 1=9.85 Гц, 1Н), 3.10 (з, 3Н), 3.16-3.33 (т, 1Н), 3.62-3.81 (т, 2Н), 3.89 (з, 3Н), 4.94 (άάά, 1=10.04, 3.98, 0.88 Гц, 1Н), 5.03 (!, 1=6.19 Гц, 1Н), 5.27 (Ьг. з., 2Н), 5.79 (з, 1Н), 6.74 (άά, 1=8.34, 0.76 Гц, 1Н), 7.01 (άά, 1=7.33, 0.76 Гц, 1Н), 7.07-7.23 (т, 2Н), 7.65 (άά, 1=8.34, 7.33 Гц, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н31Р^О4, 524.56; эксп., 524.40.
Пример 96. (8)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-Ы,№диметилбутанамид (соединение 93)
Смесь (8)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-N,N-диметилбутанамида (26 мг, 0.052 ммоль), 2-(6метоксипиридин-2-ил)-6-фенил-1,3,6,2-диоксазаборокана (78 мг, 0.262 ммоль), Рά(άррГ)2С12 (7.68 мг, 0.01 ммоль), 2 Ν №13СО3 (0.131 мл, 0.262 ммоль) и ДМА (2.0 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением (8)-2-((2)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3Ш]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-Ы,№ диметилбутанамида (93, 10.3 мг, 37%) в форме беловатого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ 2.04-2.15 (т, 2Н), 2.60 (з, 3Н), 2.97 (з, 3Н), 3.01-3.07 (т,1Н), 3.13 (з, 3Н), 3.30 (άάά, 1=16.42, 3.79, 1.52 Гц, 1Н), 3.70-3.84 (т, 2Н), 3.89 (з, 3Н), 4.90 (άά, 1=10.74, 3.66 Гц, 1Н),
5.12 (!, 1=6.32 Гц, 1Н), 5.26 (Ьг. з., 1Н), 5.78 (з, 1Н), 6.74 (άά, 1=8.34, 0.76 Гц, 1Н), 7.02 (άά, 1=7.20, 0.88 Гц, 1Н), 7.11-7.21 (т, 2Н), 7.65 (άά, 1=8.34, 7.07 Гц, 2Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н31Р^О4, 524.56; эксп., 524.40.
- 96 019156
Пример 97. 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо [4,3 -б] пиримидин-5 (6Н)-илиден)аминоокси)-4 -гидрокси-1 -морфолинобутан- 1-он (соединение 94)
К раствору 3-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)дигидрофуран-2(3Н) она (12.0 мг, 0.025 ммоль) в ТГФ (1.0 мл) добавляли морфолин (5.52 мкл, 0.063 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли и очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-1-морфолинобутан-1-она (94, 5.7 мг, 40%) в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 1.79-2.03 (т, 2Н), 2.57 (б, 1=7.07 Гц, 3Н), 2.99 (ббб, 1=16.86, 8.72, 8.53 Гц, 1Н), 3.10-3.18 (т, 1Н), 3.22-3.29 (т, 4Н), 3.46-3.55 (т, 4Н), 3.57-3.62 (т, 2Н), 3.81 (б, 1=5.81 Гц, 3Н), 4.95 (ббб, 1=19.45, 8.84, 4.80 Гц, 1Н), 5.00-5.06 (т, 1Н), 6.70 (бб, 1=7.58, 6.06 Гц, 1Н), 7.03 (б, 1=6.57 Гц, 1Н), 7.06-7.16 (т, 2Н), 7.54 (ббб, 1=19.20, 8.34, 5.81 Гц, 1Н), 7.67 (кб, 1=7.83, 4.80 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С28Н33Е^О5, 566.59; эксп., 566.50.
Пример 98. 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-метокси-^№диметилбутанамид (соединение 95)
К раствору 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-4-гидрокси-^№диметилбутанамида (0.03 ммоль, 16 мг) в ТГФ (2 мл) добавляли 50% NаН (0.034 ммоль, 1.65 мг) при 0°С в атмосфере Ν2. Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин и добавляли диметилсульфат (4.08 мкл, 0.043 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Гасили МеОН (1 мл) и очищали методом ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)4-метокси-^№диметилбутанамида (95, 3.6 мг, 25%) в форме беловатого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1.81-2.06 (т, 2Н), 2.47 (к, 3Н), 2.70-2.80 (т, 1Н), 2.83 (б, 1=10.61 Гц, 3Н), 3.05 (б, 1=7.58 Гц, 3Н), 3.07-3.17 (т, 1Н), 3.20 (б, 1=4.80 Гц, 3Н), 3.31-3.39 (т, 2Н), 3.40-3.49 (т, 2Н), 3.87 (б, 1=3.79 Гц, 3Н), 4.80-4.93 (т, 1Н), 5.06-5.22 (т, 1Н), 6.83-6.90 (т, 1Н), 7.20 (б, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.23-
7.32 (т, 2Н), 7.44 (ббб, 1=14.34, 8.91, 5.81 Гц, 1Н), 7.85 (кб, 1=7.83, 3.28 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С27Н33Е^О4, 538.58; эксп., 538.40.
- 97 019156
Пример 99. Синтез 2-(^)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-Ы-((8)-2,3-дигидроксипропил)-Нметилацетамида (соединение 96)
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 2.57 (б, 1=5.31 Гц, 3Н), 2.89-3.21 (т, 5Н), 3.34-3.65 (т, 4Н), 3.753.88 (т, 1Н), 3.89 (к, 3Н), 4.55-4.77 (т, 4Н), 5.01 (б1, 1=9.16, 4.64 Гц, 1Н), 6.77 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.13-7.25 (т, 2Н), 7.67 (бб, 1=8.21, 5.68 Гц, 1Н), 7.75 (1, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н30Р^О5, 540; эксп., 540.
Пример 100. Синтез (Я^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)илиденаминоокси)-Ы-циклопропилацетамида (соединение 97)
Указанное в названии соединение 97 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 87, с тем отличием, что использовали циклопропанамин.
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОИ) δ 0.43-0.53 (т, 2Н), 0.68-0.79 (т, 2Н), 2.67 (б1, 1=7.33, 3.41 Гц, 1Н), 2.71 (к, 3Н), 3.09-3.21 (т, 1Н), 3.37-3.52 (т, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 4.43 (к, 2Н), 5.06 (бб, 1=9.35, 4.29 Гц, 1Н), 6.80 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.15-7.29 (т, 2Н), 7.69 (бб, 1=8.84, 5.56 Гц, 1Н), 7.72-7.83 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н26Р^О3, 492; эксп., 492.
Пример 101. Синтез (Я^)-4-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-Ы,№диметилбутанамида (соединение 98)
дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)бутановой кислоты (101а, 26 мг, 0.054 ммоль) в безводном ТГФ охлаждали в ледяной ванне и последовательно добавляли Ν-метилморфолин (90 мкл, 0.081 ммоль) и изобутил хлорформат (7.7 мкл, 0.060 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере Ν2 в течение 20 мин. 33% по весу раствор диметиламина в метаноле (54 мкл, 0.11 ммоль) добавляли в реакционную смесь, которую затем допускалось нагревать до комнатной температуры при перемешивании в течение ночи. ТГФ удаляли под вакуумом и остаток разделяли между этилацетатом и водой. Органическую фазу промывали Н2Ох2 и сушили над безводным №28О4. Этилацетат удаляли под вакуумом и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением (Я^)-4-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)Ν,Ν-диметилбутанамида (98, 6.4 мг, 0.0126 ммоль).
Ή-ЯМР (400 МГц, МеОИ) δ 1.91-2.05 (т, 2Н), 2.46 (1, 1=7.33 Гц, 1Н), 2.70 (к, 3Н), 2.87 (к, 3Н), 3.00 (к, 3Н), 3.02-3.16 (т, 1Н), 3.25 (бб, 1=16.55, 4.67 Гц, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 4.00-4.12 (т, 2Н), 5.05 (бб, 1=8.59,
- 98 019156
4.55 Гц, 1Н), 6.79 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.15-7.25 (т, 2Н), 7.59 (бб, 1=8.46, 5.68 Гц,
1Н), 7.71-7.82 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н30Р^О3, 508; эксп., 508.
Пример 102. Синтез (К^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-№(2-гидроксиэтил)-№метилацетамид (соединение 99)
К раствору (К^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)уксусной кислоты (102а, 43 мг, 0.095 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл) добавляли 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний гексафлюорофосфат (72 мг, 0.19 ммоль), триэтиламин (53 мкл, 0.39 ммоль) и в конце 2-(метиламино)этанол (102Ь, 16 мкл, 0.19 ммоль). Реакционную смесь было допустимо перемешивать в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли в пропорции 1:1 ДМСО:МеОН и очищали методом препаративной ВЭЖХ, разбавляя ΝΕ^^^ΑΗ^/Ε^. Указанное в названии соединение (соединение 99, 11 мг, 0.022 ммоль) высвобождали из фракций, полученных методом ВЭЖХ в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 2.57 (б, 1=4.04 Гц, 3Н), 2.86-3.21 (т, 5Н), 3.44-3.55 (т, 2Н), 3.663.73 (т, 2Н), 3.89 (к, 3Н), 4.69-4.82 (т, 2Н), 5.01 (б!, 1=9.09, 4.29 Гц, 1Н), 6.77 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.14-7.24 (т, 2Н), 7.60-7.70 (т, 1Н), 7.70-7.80 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С25Н28Р^О4, 510; эксп., 510.
Пример 103. Синтез 2-(^)-((К)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиден)аминоокси)-1-((8)-3-гидроксипирролидин-1-ил)этанона (соединение 100)
Указанное в названии соединение 100 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 102, с тем отличием, что использовали (8)-пирролидин-3-ол.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 1.82-2.13 (т, 2Н), 2.57 (б, 1=3.03 Гц, 3Н), 2.95 (ббб, 1=16.23, 8.91, 3.92 Гц, 1Н), 3.09-3.22 (т, 2Н), 3.38-3.54 (т, 2Н), 3.54-3.74 (т, 2Н), 3.90 (к, 3Н), 4.41 (б, 1=9.35 Гц, 1Н), 4.55-4.73 (т, 2Н), 4.96-5.08 (т, 1Н), 6.78 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.12 (б, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.13-7.24 (т, 2Н), 7.64 (б!, 1=8.53, 5.84 Гц, 1Н), 7.75 (!, 1=7.83 Гц, 1Н).
[М+Н] расч. для С26Н28Р^О4, 522; эксп., 522.
Пример 104. Синтез (К^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-^№диэтилацетамида (соединение 101)
Указанное в названии соединение 101 получали, следуя процедуре, аналогичной примеру 102.
- 99 019156 !Н-ЯМР (400 МГц, метанолД4) δ 1.12 (ΐ, 1=1.01 Гц, 3Н), 1.15-1.26 (т, 3Н), 2.71 (з, 3Н), 3.17 (άά, 1=16.80, 9.47 Гц, 1Н), 3.32-3.46 (т, 5Н), 3.89 (з, 3Н), 4.65-4.81 (т, 2Н), 5.05 (άά, 1=9.47, 4.17 Гц, 1Н), 6.79 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.13 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.15-7.29 (т, 2Н), 7.70 (άά, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.72-7.83 (т, 1Н).
[М+Н] расч. для С.\Н.31Е№О3. 508; эксп., 508.
Пример 105. Синтез (В,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо [4,3 -ά] пиримидин-5 (6Н)-илиденаминоокси)-1 -морфолиноэтанона (соединение 102)
A. (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилилоксим (105а).
Смесь (В)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)тиона (311, 366 мг, 1.0 ммоль), О-(трет-бутилдиметилсилил)гидроксиламина (588 мг, 4.0 ммоль), Нд(ОАС)2 (640 мг, 2.0 ммоль) и толуола (5 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и полученный маслянистый осадок толкли с сухим метанолом с получением бледно-желтого твердого вещества. Фильтровали и сушили с получением ((В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Η)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (105а, 384 мг, 80%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт 0.22 (з, 3Н), 0.23 (з, 3Н), 0.97 (з, 9Н), 2.70 (з, 3Н), 2.91 (άά, 1=16.42, 8.08 Гц, 1Н), 3.19 (άάά, 1=16.36, 4.86, 1.26 Гц, 1Н), 4.99 (άάά, 1=7.77, 5.12, 2.02 Гц, 1Н), 7.05 (ΐά, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.33 (άά, 1=8.08, 2.78 Гц, 1Н), 7.39 (άά, 1=8.72, 5.94 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С20Н28В1ЕД5О81, 480.12.; эксп., 480.30.
B. (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он оксим (105Ь).
К раствору (В,2)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин5(6Н)-он О-трет-бутилдиметилсилил оксима (105а, 384 мг, 0.8 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли 1:9 ТФА-Н2О и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную соль фильтровали и промывали диоксаном. Полученное твердое вещество сушили с получением (ΚΖ)-2амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он оксима (105Ь, 206 мг, 70%) в форме бледно-желтого твердого вещества.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ά,·,) δ ррт 2.56 (з, 3Н), 2.83 (άά, 1=15.92, 4.55 Гц, 1Н), 3.17 (άά, 1=16.04, 5.94 Гц, 1Н), 4.90 (ц, 1=4.97 Гц, 1Н), 7.20 (ά, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.21-7.23 (т, 1Н), 7.57 (άάά, 1=8.34, 1.64, 1.39 Гц, 1Н), 9.82 (з, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СпН^ВгЕ^О, 366.03; эксп., 366.20.
C. (ВД-метил 2-(2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин5(6Н)-илиденаминоокси)ацетат (105с).
К раствору (В^)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3Д]пиримидин5(6Н)-он оксима (105с, 150 мг, 0.4 ммоль) в сухом ДМФ (1 мл) добавляли СзСО3 (195 мг, 0.6 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли метил 2-бромацетат (45 мкл, 0.48 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение ночи. ЖХ/МС показывал готовность исходного материала. Реакционную смесь наливали в толченый лед, фильтровали полу
- 100 019156 чившуюся соль и промывали холодной водой. Полученное твердое вещество сушили с получением (К,2)-метил 2-(2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)илиденаминоокси)ацетата (105с, 172 мг, 99%) в форме светло-коричневого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 2.66 (8, 3Н), 3.12-3.18 (т, 1Н), 3.24-3.32 (т, 1Н), 3.71 (8, 3Н), 4.57 (8, 2Н), 4.96 (ййй, 1=8.40, 4.48, 1.77 Гц, 1Н), 7.01 (1й, 1=8.27, 2.65 Гц, 1Н), 7.23-7.29 (т, 1Н), 7.39 (йй, 1=8.84, 5.81 Гц, 0Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для СиН^ВгЕ^О,, 438.05; эксп., 438.00.
Ό. (К,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)уксусная кислота (105й).
Смесь (К,2)-метил 2-(2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)ацетата (105с, 175 мг, 0.4 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6фенил-1,3,6,2-диоксазаборокана (298 мг, 1,0 ммоль), Рй(йррЦ2С12 (32.5 мг, 0.04 ммоль), 2 Ν №ьС.’О3 (1.0 мл, 2.0 ммоль) в ДМА (3 мл) дегазировали Ν2 и нагревали при 85°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали методом препаративной ВЭЖХ с получением (К,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)уксусной кислоты (105й, 56 мг, 31%) в форме белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 2.79 (8, 3Н), 3.16 (йй, 1=17.05, 10.48 Гц, 1Н), 3.45 (йй, 1=17.05, 3.92 Гц, 1Н), 3.88 (8, 3Н), 4.59 (й, 1=3.03 Гц, 2Н), 4.96 (йй, 1=10.36, 3.79 Гц, 1Н), 5.90 (Ьг8, 1Н), 6.76 (й, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.02 (й, 1=6.82 Гц, 1Н), 7.14 (йй, 1=9.09, 2.78 Гц, 1Н), 7.19 (1й, 1=8.34, 2.78 Гц, 1Н), 7.62 (йй, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.68 (йй, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С22Н22Е^О4, 453.16; эксп., 453.30.
Е. (К,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-1-морфолиноэтанон (соединение 102).
К раствору (К,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)уксусной кислоты (105й, 0.05 ммоль, 22.6 мг) в ДМФ (0.5 мл) добавляли ГБТУ (0.075 ммоль, 28 мг), ЕЦЫ (0.125 ммоль, 17 мкл) и морфолин (0.1 ммоль, 8.3 мкл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, анализ методом ЖХ/МС показал, что реакция завершена. Очищали методом препаративной ЖХ/МС с получением указанного в названии соединения (К,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-
7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-1-морфолиноэтанона (102, 5.7 мг, 22%) в виде беловатого твердого вещества.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 2.83 (8, 3Н), 3.15 (йй, 1=17.31, 10.23 Гц, 2Н), 3.43-3.51 (т, 2Н), 3.63 (й, 1=5.31 Гц, 2Н), 3.65-3.71 (т, 4Н), 3.89 (8, 3Н), 4.71 (8, 2Н), 4.97 (йй, 1=10.36, 3.79 Гц, 1Н), 5.96 (Ьг. 8., 1Н), 6.77 (й, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.03 (й, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.14 (йй, 1=9.35, 2.78 Гц, 1Н), 7.19 (1й, 1=8.40, 2.65 Гц, 1Н), 7.63 (йй, 1=8.84, 5.56 Гц, 1Н), 7.68 (йй, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С26Н28Е^О4, 522.22; эксп., 522.00.
Схемы реакций, раскрытые в примерах выше, использовали для получения соединений, перечисленных в нижеследующей таблице.
- 101 019156
№ соединения Структура и название Молекулярная Масса М+Н (эксп.)
103 А 1 Ν'° II 539.6 540
г<'4 А -0 Η2Ν Ν ΆΐΗ ιΑ
(й,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин- 2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3т7]пиримидин-5(6/7)-илиденаминоокси)-МУбис(2-гидроксиэтил)ацетамид
104 ΗΟ'γ^Ν^γ°Η А 1 ”'° II 539.6567.6 568
νΑ А 2 η2ν ν А
2-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-<7]пиримидин-5(6Я)и лиден)аминоокси )-Х Λ-бис(2гидроксипропил)ацетамид
105 <? А Ν'° II 491.5 492
νΑήη Η2Ν .0 Ν (Й, /)-2-(2-амино -7 -(4 -фтор-2-( 6-метоксип иридин2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3гЛпиримидин-5(6/7)-илиденаминоокси)-1-
- 102 019156
(азетедин-1 -ил)этанон
106 9 А 1 ч'° Ν'^γ^'ΝΗ Η2Ν .О Ν (Я,.г)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин2-ил)фепил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3</]пиримидип-5(6Н)-илиденаминоокси)-1 (пирролидин-1 -ил)этанон 505.5 506
107 О-он А , Н'° νΆ/Άιη Α Λ ϊ Λ η2ν ν х/Υ η 2-((2)-((Л)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4.3- 4] пиримидин-5(6Д)-илиден)аминоокси)-1 -((5)-2(гидроксиметил)пирролидин-1 -ил (этанон 535.6 536
108 ОН ό А 1 Ч'° А А А η2ν (Я,7)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3</]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-1-(4гидроксипиперидин-1-нл)этанон 535.6 536
- 103 019156
109 Υ'Ο' А 1 Ν'° II 570.6 571
ΐΑ-γ л Д Η2Ν Ν Τ ^'ΝΗ
XX (Я,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил (фенил )-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3(/]πиρимидин-5(6^Ζ)-илиденаминοοκси)-^-меτил-^((6-метилпиридин-2-ил)метил)ацетамид
ПО 1 N А Ν'° || 567.6 568
Αχ А Д Η2Ν N Τ 'Άη
χχ (Й,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3</]пиримидин-5(6//)-илнденаминоокси)-Л'.Лг-бие(2метоксиэтил (ацетамид
111 Η2Ν γγ ° а Ν'° || 522.5 523
Αχ А Д Η2Ν N т Άη аДА
XX (К, 2)-Лг-(2-амино-2 -оксоэтил )-2-(2-амино-7-(4-фтор-2(6-метоксипиридин-2-ил)фенил(-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-</]пиримидин-5(6//)илиденаминоокси)-Л-метилацетамид
- 104 019156
112 Ω-0Η А 1 Ч'° νΆΑ^νη н Λ ι Λ η2ν ν Υη 2-((^)-((А)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б/]пиримидин-5(6/7)-илиден)аминоокси)-1-((Я)-2- (гилроксиметил)п иррол ид ин-1 -ил)этанон 535.6 536
113 А 1 ч'° ν'ΑΑ'νη Λ ζΐ I Λ η2ν ν ζθ Ν (А,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропир идо[4,3<7]пиримидин-5(6/¥)-илиденаминоокси)-Лг-(2метоксизтил)-У-метил ацетамид 523.6 524
114 ___.ОН А 1 ч'° А А X Η2Ν 2-((7)-((/?)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7>8-дигидропиридо[4,3</)пиримидин-5(6//)-илиден)аминоокси)-1-((/?)-3гидроксипирролвдин-1 -ил)этанон 521.5 522
- 105 019156
115 СТ 535.6 536
А 1 Ч'° νΑΑΝΗ ζογΑλΡ 2-((г(-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3<7]пиримидин-5(6Н)-илиден)амнноокси)-1 -((77(-3гидроксипиперидин-1-ил (этанон
116 ,-он А 1 1° νΑΑη А 1. λ Λ Η2Ν Ν '''ΑιΑ 2-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-мегил-7,8-дигидропиридо[4,3^7]пиримидин-5(677)-илиден)аминоокси)-1-((5)-3гидроксипирролидин-1 -ил (этанон 521.5 522
117 он А 1 Ч'° Ы'Цг ΝΗ А 1 А Λ Η2Ν N АА 2-((7)-((7?(-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил(фенил)-4-метил-7,8-дигидропирвдо[4,3</]пиримидин-5(6Н(-илиден(аминоокси)-1-((5)-3гидроксипиперидин-1 -ил(этанон 535.6 536
- 106 019156
118 ОН А 1 Ч'° Αυ'νη АД! л η2ν ν η (Я,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- 4] пиримидин-5(6//)-илиденаминоокси)-1 -(3гидроксиазетедин-1 -ил)этанон 507.5 508
119 А 1 ч'° АуАн А Α ϊ Λ η2ν ν τίη А КкАХр (Я.2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3</]пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-1-(3,3дифторпирролидин-1 -ил)этанон 541.5 542
120 ό N А , Ν-0 νΑΑνη А Λ А Λ η2ν ν А η ΖΟ νΑΑρ 2-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3<71пиримидин-5(6/7)-илиден)аминоокси)-1 -((Я)-3- 523.5 524
- 107 019156
фторпирролидин-1 -ил (этанон
121 ΰ А , Ν-° Ν^Α^ΝΗ ιι 1 ι Λ Η2Ν Ν ζο «АД 2-((2)-((Л)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3г/]пиримидин-5(6Я)-илиден)аминоокси)-1 -((8)-3фторпирролидин-1 -ил (этанон 523.5 524
122 О' ύ А 1 < Η2Ν^'''Ν^'''’-'^χΑΉ (А,Х)-2-(2-амипо-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил (фенил )-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ΰ(]πиρимидин-5(67ϊ)-илиденаминοοκси)“1-(4метоксипиперидин-1 -ил (этанон 549.6 550
123 <$ N А 1 Ν-0 ΑγΎ ιι Α ι Λ ηζν /О ν 1Др (/?,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил (фенил (~4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- 527.5 528
- 108 019156
<7]пиримидин-5(6Я)-плиденаминоокси)-1-(3,3дифторазетедин-1 -ил)этанон
124 СГ°' До | Ν'° νΑΑνΗ а Л а Λ η2ν ν '·“^γη -° Ν 2-((2)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3<Дпиримидин-5(6Я)-илиден)ами1юокси)-1-(3(метоксиметил)пиперидии-1 -ил)этанон 563.6 564
125 ° д , Ν'° νΑ^'νη А Л А Λ η2ν ν ζ 'Ά) .ОуМуАДр (А.^)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропир идо[4,3йГ]пиримидин-5(6Я)-илиденаминоокси)-.У-метил-Л7-(2(метиламино)-2-оксоэтил)ацетамид 536.6 537
126 Ο'Ν Д 1 νΑΑνη А Л А Λ η2ν ν ν ]ίη /0 Ν 1Ар (Л,7)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3<7]пиримидин-5(6Я)-илиденаминоокси)-У-(изоксазол- 3-илметил)-Л-метил ацетамид 546.6 547
- 109 019156
127 <'ΝΧΎ 8 До 1 < 562.6 563
Ν^'γ 'ΝΗ η2ν^'' .0 Ν ΐχρ (й,7)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3г/]пиримидин-5(6/7)-илиденаминоокси)-У-метил-У(тиазол -4 -илметил )ацетамид
128 1 Ν'° ν^υ νη ίί Λ ΐ Λ η2ν ν Υ η .0 Ν (Л,г)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3с/]пиримидин-5(6//)-ил11денаминоокси)-1 -(пиразин-2ил)этанон 557.6 558
129 N Д° 1 ч'° Ν^Ε'ΝΗ ίί 1 ΐ Λ η2ν ν '^ )| · ι 2-((2)-((Л)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б/]пиримидин-5(6//)-илиден)аминоокси)-1-(3- (диметил амино)пиперцдин-1 -ил)этанон 562.6 563
- 110 019156
130 ά До 1 Ч'° Ν^Ύ''ΝΗ 1 1 1 η2ν νη Ί ζο ν )ир 2-((Х}-((7?)-2-ами11о-7-(4-фтор-2-(6-метоксипириди1|-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3</]пиримидин-5(6Я)-илиден)аминоокси)-1-(2метилтетрагидро-11/-пирроло[3,4-с] пиридин5(6Я,7Я,7аН)-ил)этанон 574.6 575
131 ΗΝ-Ν ['''^О 1 Ч'0 Ν'Υγ'ΝΗ 1 ζΐ 1 η2ν ν φη (Л,Х)-2-(2’амино-7-(4-фг<)р-2-(6-метокси11иридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигид ропирндо[4,3<7]пиримидин-5(6//)-илиденаминоокси)-Лг-метил-.У((5-метил-177-пиразол-3-ил)метил)ацетамид 559.6 560
132 \·-Ν ΗΝ''Α-| ''1+ До 1 Ч'° N^'<'N4 1 1 1 Λ Η2Ν N Д а ^у%АР (К,2)-2-(2-амино-7Ц4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2- ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- 571.6 572
- 111 019156
ι.ί] г1иримидин-5(677)-ил иденам иноокси)-1 -(2-метил- 6,7-дигидро-ЗЯ-имидазо[4,5-с]пиридин-5(4/7)ил)этанон
133 у—ОН 9 А 1 < 535.6 536
''ΝΗ А Э 1 Λ Η2Ν Ν ^' ]| Ί /ΟγΝ ^АДр
2-((г)-((Я)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3<7]пиримидин-5(6Л)-илиден)аминоокси)-1 -(3(гидроксиметил)пирролидин-1 -ил)этанон
134 .0 а 574.6 575
о 4—
'ΝΗ 111^ η2ν ν ]| ·ι -о γΝγΛ^Ρ
2-(2-((Ζ)-((Λ)-2-3ΜΗΗο-7-(4-φτορ-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-(/]пиримидин-5(6Н)илиден)аминоокси)ацетип)гексагидропирроло[ 1,2а! пиразин-6(7Я)-он
- 112 019156
135 << ύ А 1 Ч'0 1 Д ι Л Η2Ν N | / /<Х)-2-(2-аки1НО-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-21л)фенил)-4-мегил-7,8-дигидрсч1иридо[4,3/)пиримидин-5(6Я)-илиденаминоокси)-1 -(3иетоксиазетедин-1 -ил)этанон 521.5 522
136 δ До 1 ч' ° 11 ι Λ Η2Ν Ν Χχ]| δ /О Ν 1Ι^Λρ (Я,2)-2-(2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2ил)фенил)-4-метил-7>8“ДИГИДропиридо[4,3- <ί] пиримидин-5(6Н)-илиденаминоокси)-1 -(4,4дифторпиперидин-1 -ил)этанон 555.6 556
Пример 106. Альтернативный синтез (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (соединение 61)
- 113 019156
Этап А. Синтез (Я)-5-(1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амина (соединение 106с).
В двугорлую круглодонную колбу под слоем азота добавили (Я)-2-амино-7-(2-бром-4-фторфенил)4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он (106а, 1.00 г, 2.85 ммоль), 1Нбензо[б][1,2,3]триазол (106Ь, 0.678 г, 5.70 ммоль) и безводный ацетонитрил (14 мл). Фосфорил трихлорид (0.796 мл, 8.54 ммоль) медленно добавили к смеси и нагревали реакционную смесь в масляной ванне при 75°С в течение 18 ч. Анализ ЖХ/МС показал, что около 7-10% сединения 1 не прореагировало. Реакционную смесь концентрировали, затем разбавляли 80 мл этилацетата и полученную смесь медленно добавили к 40 мл насыщенного бикарбоната натрия. Разделяли фазы. Водную фазу отмывали один или более раз 40 мл этилацетата. Органические фазы смешивали, промывали солевым раствором, сушили на сульфате натрия и концентрировали с получением желтоватого светло-корчневого твердого вещества, 1.72 г, содержащего около 0.37 г избытка бензотриазола. Сырой материал использовали на следующем этапе без очистки.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С20Н15ВгР^, 452; эксп., 452.3-454.3.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 1.96 (к, 3Н), 2.74 (бб, 1=16.42, 14.91 Гц, 1Н), 3.13 (бб, 1=16.55, 4.17 Гц, 1Н), 5.20 (бб, 1=14.91, 4.04 Гц, 1Н), 5.69 (к, 2Н), 7.03-7.12 (т, 1Н), 7.38 (бб, 1=8.21, 2.65 Гц, 1Н), 7.47-7.52 (т, 1Н), 7.56-7.63 (т, 1Н), 7.74 (бб, 1=8.84, 6.06 Гц, 1Н), 8.16 (б, 1=9.35 Гц, 2Н).
Этап В. Синтез (7Я)-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-5-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илоксиамино)-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амина (соединение 106е).
(Я)-5-(1Н-бензом[1,2,3]триазол-1-ил)-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-2-амин (1.13 г, 2.50 ммоль) и О-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)гидроксиламин (0.322 г, 2.75 ммоль) смешивали в 15 мл ацетонитрила. Затем добавляли укасусную кислоту (0.858 мл, 15.0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. На следующий день реакция завершалась, реакционную смесь концентрировали под вакуумом, а затем очищали путем флэшхроматографии, 81О2, градиент 30-100% этилацетат/гексан. Получили 0.838 г соединения 5, 74.5% выход.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С19Н21ВтР^О2, 450; эксп., 450.3-452.3.
Ή-ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ 1.45-1.97 (т, 6Н), 2.72 (к, 3Н), 2.91 (ббб, 1=16.17, 10.86, 7.83 Гц, 1Н), 3.05-3.26 (т, 1Н), 3.58-3.71 (т, 1Н), 3.86-4.08 (т, 1Н), 4.92-5.06 (т, 1Н), 5.25 (бб, 1=5.81, 2.27 Гц, 1Н), 5.63 (б, 1=4.04 Гц, 2Н), 5.79-5.88 (б, 1=36 Гц, 1Н), 6.93-7.11 (т, 1=16.07, 8.19, 8.19, 2.65 Гц, 1Н), 7.287.34 (т, 1Н), 7.35-7.44 (ббб, 1=36 Гц, 1Н).
Этап С. Синтез (7Я)-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-5-(тетрагидро-2Н-пиран2-илоксиамино)-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амина (соединение 106д).
(7Я)-7-(2-бром-4-фторфенил)-4-метил-5-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илоксиамино)-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амин (0.838 г, 1.86 ммоль), 2-(6-метоксипиридин-2-ил)-6-фенил1,3,6,2-диоксаборокан (1.33 г, 4.47 ммоль), 2М раствор карбоната натрия (3.72 мл, 7.44 ммоль) смешивали в Ν,Ν-диметилацетамиде (12 мл), а затем через реакционную смесь пропыскали азот в течение 5 мин. Затем добавляли комплекс 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроценеденхлор-палладий(11)-дихлорметан (0.136 г, 0.186 ммоль) и нагревали реакционную смесь в масляной бане при 85°С в течение ночи. На следующий день реакционную смесь разбавляли этилацетатом (80 мл), промывали солевым раствором (80 мл), сушили на сульфате натрия и концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем очищали путем флэш-хроматографии, 81О2, градиент 20-100% этилацетат/гексан, с получением белого твердого вещества, содержащего 1.11 г продукта, загрязненного примесью с массой 182 (побочный продукт боронового эфира, соединение 6).
МС (Е8) [М+Н] расч. для С25Н27Р^О3, 479; эксп., 479.4.
Этап Ό. Синтез (Я,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он оксима (соединение 61).
(7Я)-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-5-(тетрагидро-2Н-пиран-2илоксиамино)-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-2-амин (0.891 г, 1.86 ммоль) растворяли в 10 мл диоксана. Затем к указанному перемешиваемому раствору медленно добавляли 4М НС1 в диоксане (1.86 мл, 7.45 ммоль). После окончания добавления НС1 на дне реакционной колбы образовалось желтое твердое вещество. Снятие защиты осуществляли в течение 30 мин, после чего надосадочную жидкость декантрировали. Дихлорметан добавили для промывки твердого вещества, а зетем декантировали. Этот процесс повторяли несколько раз. В смывах диоксаном и дихлорметаном продукта обнаружено не было. Твердый продукт затем очищали на колонке для флэш-хроматографии, 81О2, градиент 2-15% метанол/хлороформ с получением 0.404 г продукта, 63.5% выход в 2 этапа.
МС (Е8) [М+Н] расч. для С20Н19Р^О2, 395; эксп., 395.3.
Ή-ЯМР (400 МГц, метанол-б4) δ 2.60 (к, 3Н), 3.09-3.19 (т, 1Н),3.29-3.34 (т, 1Н), 3.91 (к, 3Н), 5.45 (Ьг. к., 1Н), 6.82 (б, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.16 (б, 1=6.57 Гц, 1Н), 7.19-7.30 (т, 2Н), 7.55 (бб, 1=8.59, 5.56 Гц, 1Н), 7.79 (бб, 1=8.34, 7.33 Гц, 1Н).
- 114 019156
Пример 107. Получение (В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3Д]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксима бензоата, форма А.
(В^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3ά]пиримидин-5(6Η)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим (соединение 37, 20 мг, белый порошок) взвешивали в реакционном сосуде, оборудованном магнитной мешалкой. Добавляли хлороформ и (5 мл) бензойную кислоту в 1,4-диоксане (340 мкл, 0.124 моль/л) и реакционную смесь охлаждали при 5°С. Растворитель выпаривали при мягкой продувке азотом с получением суспензии.
К остатку добавляли ацетон (2.5 мл). Смесь обрабатывали ультразвуком при комнатной температуре с получением раствора. Добавляли гептан (1 мл) и реакционную смесь охлаждали при 5°С. Растворитель выпаривали при мягкой продувке азотом с получением твердого вещества.
Твердый остаток исследовали методом рентгеновской дифрактометрии, дифференциальной сканирующей калориметрии (Ό8Ο) и термогравиметрии. На фиг. 2 показана порошковая дифрактограмма, которая содержит отчетливые линии, характеризующие кристаллический продукт. На фиг. 3 показана термограмма, полученная методом Э8С. на которой видна эндотерма, начинающаяся при 128°С. Данной твердое вещество имеет точку плавления 128°С.
Кроме того, описанные выше схемы реакций и их варианты можно использовать для получения следующих соединений. Очевидно, что при упоминании какого-либо соединения подразумевают все различные стереоизомеры.
- 115 019156
метокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим 0-(3,4-дигидрокси-5-метокситетрагидрофуран- 2-ил)метил оксим
М мн
/=0
г 0 г 0
^0 '0
1 14
ν,ΉΑ'νη ι аза
η2ν ν ]| 1 η2ν ν ДГ А
,0 χ'ΑΑ
'Ν Ι-^Ν Ν
5-(((2}-((Я)-2-ами1ю-7-(4-фтор-2-(6- 5-(((2)-((Я)-2-амино-7-(2-(5-амино-б-
метоксипиразин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8- метоксипиразин-2-ил )-4-фторфенил)-4-мегил-
дигидропиридо[4,3-с/]пиримидин-5(б/7)- 7,8-дигидропиридо[4,3-</]пиримидин-5(677)-
илиден)аминоокси)метил)-3,4- илиден)аминоокси)метил)-3,4-
дигидроксидигидрофуран-2(ЗН)-он дигидроксидигидрофуран-2(ЗН)-он
мн НЯ
.0
1 ΐ
ХХХА ХаДА
N Η2Ν N
(7Л,/)-2-амино-7-(4-ф'гор-2-(6-метоксипиразии- (7к,2)-2-ами11о-7-(2-(5-амшю-6-
2-ил (фенил )-4-мет ил-7,8-дигидропиридо[4,3- метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-4-метил-
^пиримидин-5(6Н)-он 0-(3,4- 7,8-дигидропиридо[4,3-</]пиримидин-5(6Н)-он
дигидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим О-(3,4-дигидрокситетрагид рофуран-2-ил)метил
ОКСИМ
О?Н мн
л?
„.-о '0
1 Ν 1 4
АЙА аОа
η2ν ν ]| 4
-γΑΛ
N η2ν ν
(7й,2)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиразин- (7Л2)-2-амино-7-(2-{5-амино-6-
2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- метоксипиразин-2-ил )-4-фторфенил)-4-метил-
б)пиримидин-5(6Я)-он 0-(3,4- 7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он
- 116 019156 дигидроксипирролидин-2-ил)метил оксим <Э-(3,4-дигидроксипирролидин-2-ил)метил оксим
ОН
(75,Ζ)-2-амино-8,8-дифтор-7-(4-фтор-2-( 6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-</)пиримидин-5(67/)-он 3,4-дигидроксибутил оксим
О(75,2)-2-амино-7-(2-(5-ам ино-6метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил )-8,8дифтор-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б/]пиримидин-5(6Я)-он О-3,4-дигидроксибутил оксим
(7Л’2)-2-амино-Х,8-дифтор-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3ч/]пиримидин-5(677)-он О(3,4-дигидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим (75,7)-2-амино-7-(2-(5-аминС1-6метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-8,8дифтор-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3 <7]пиримидип-5(677)-он 0-(3,4 дигидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил оксим
- 117 019156
(75,7)-2-амино-8,8-дифтор-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8диги дроп иридо [4,3ч/] η ири миди 11-5 (6й)-он О- (3,4-дигидроксилирролидин-2-ил)метил оксим (76',2)-2-амино-7-(2-(5-амино-6метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-8,8дифтор-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(67/)-он 0-(3,4дигидроксипирролидин-2-ил)метил оксим
(7/>,2)-2-амино-8-фтор-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8ди ги дроп иридо [4,3 ч/] пиримиди и- 5 (6//)-он О3,4-дигидроксибутил оксим
(75,г)-2-амино-8-фтор-7-(4-фтор-2-(6метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,Зч/]пиримидин-5(бЛ)-он О(3,4-дигидроксятетрагидрофуран-2-ил)метил (75,7)-2-амино-7-(2-(5-амино-6метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-8-фтор-4метил-7,8-дип1дропнридо[4,Зч/]пиримидин5(б//)-он <?-3,4-дигидроксибутил оксим
метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-8-фтор-4метип-7,8-дигид ропиридо[4,3ч/]пиримидин5(6//)-он О-(3,4-дигидрокситетрагидрофуран-2·
- 118 019156
оксим ил)метил оксим
„о 9Н Н0И
Г
1 н 1 н
„ЛЭ
1 Ν 1 Ϋ
ίχ г η2ν ''ν Η 2Ν 'ή
,Ν—/ Г Ά?
η2ν
(78,7)-2-амино-8-фтор-7-(4-фтор-2-(6- (75,2)-2-амино-7-(2-(5-амино-6-
метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8- метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-8-фтор-4-
дигидропиридо[4,3-<У]пиримиди11-5(6/7)-он О метил-7,8-дигидропиридо[4,3-с/]пиримидин-
(3,4-дигидроксипирролидин-2-ил)метил оксим 5(6Я)-он 0-(3,4-ДИгидроксипирролндин-2- ил)метил оксим
ОН КН2
η2ν. X
Г ..-о г
I 5
ххх^
Η2Ν N || 1 η2ν ν у η
(77?, Ζ/2-ам ино-7 -(4 -фтор-2-(6-метоксип иридии- (7Я,7)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-
2-1ш)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- 2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-
</]пиримидин-5(6//)-он О-З-амино-4- <7]пиримидин-5(6/7)-он 0-4-амино-3-
гидроксибутил оксим гидроксибутил оксим
ДЭН ΝΗ;
<ЖН2 Аон
.0
1 ' 1 N
ХХСч.
η2ν ν у η η2ν ν ]| η
(7 Λ, Ζ)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипириди н- (7Я Ζ)-2 -ам ино-7-(4-фтор-2-( 6-метоксипиридин-
2-ил)фенш1)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3- 2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-
</]пиримидин-5(б/7)-он Ο-2-амино-З- г/]ииримидин-5(6//)-он О-З-амино-2-
гидроксипропил оксим гидроксипропил оксим
Пример А. Биологические тесты.
1. Тест на ферментативное связывания (поляризация флюоресценции) для ингибиторов Н8Р90.
а. Получение белка Н8Р90а.
В данном примере описано клонирование, экспрессия и очистка белка, содержащего Ν-концевой домен Н8Р90а. Следует отметить, что, как очевидно для специалиста, многие другие системы экспрессии и организмы-хозяева также подходят для экспрессии такого белка.
Последовательность человеческого Н8Р90а дикого типа хорошо известна в соответствующей области; см., СНеп В. е1 а1. Сепоткк, 2005, 86:627-637. Ген, кодирующий Н8Р90а, может быть выделен из библиотек РНК, кДНК или кДНК. В данном случае, изолировали ген, кодирующий остатки 9-236 точного клона 5270926 Н8Р90а (АТСС). Эту часть гена, кодирующую участок Н8Р90а человека, который включает Ν-концевой нуклеотид-связывающий домен Н8Р90а человека, клонировали в вектор рЕТ28а (№уадеп). Последовательности ДНК вектор представлена в списке последовательностей: 8ЕО Ш ΝΘ: 1. Экспрессия этого вектора обеспечивала белок, состоящий из рекомбинантного Ν-концевого нуклеотидсвязывающего домена Н8Р90а с отщепляемой меткой из 6 остатков гистидина и сайтом расщепления на
- 119 019156
Ν-конце. Последовательность аминокислот рекомбинантного белка представлена как 8ЕО ΙΌ NО: 2.
Рекомбинантный Ν-концевой фрагмент Н186-Н8Р90а экспрессировали в Е.со11 (ВЬ21) с индукцией 1РТ0. Суспензию клеток из 24x60 мл пробирок (выращенных в многопробирочном аэрируемом ферментере) лизировали с использованием автоматического устройства для лизирования образцов. Вкратце, остаток в каждой пробирке суспендировали в 21 мл лизирующего буфера, состоящего из 50 мМ Тп8 с рН 7.9, 50 мМ №С1, 1 мМ МдСЬ, 0.6 г/л лизоцима (81дта) и 100 мкл/л бензоназы (Иоуадеи). После добавления лизирующего буфера; пробирки обрабатывали ультразвуком в течение 75 с, а затем инкубировали в течение 20 мин. После инкубации, добавили 5 М №С1, в результате чего получали конечную концентрацию соли, равную 400 мМ. Пробирки обрабатывали ультразвуком в течение 50 с и центрифугировали при 3400 об/мин в течение 50 мин. Собирали надосадочную жидкость и добавляли 4 мл РгоВопк Νί ге81и (1иу11годеи). Через по меньшей мере 30 мин, смолу отделяли центрифугированием, промывали 25 мМ Тп8 с рН 7.6, содержащем 400 мМ №С1, 20 мМ имидазола, вливали в колонку и промывали 10 объемами колонки того же буфера. Белок элюировали из колонки с использованием 3 объемов колонки 25 мМ Тп8 рН 7.6, содержащего 400 мМ ИаС1, 400 мМ имидазола. Элюат загружали на колонку 8ирекех 200 (0Е Неа11ксаге), уравновешивали 25 мМ Тп8 рН 7.6, содержащем 250 мМ ИаС1, 0.25 мМ ТСЕР, 1 мМ ЭДТА, собирали пиковые фракции и концентрировали до ~6 мг/мл с использованием центрифужного концентратора с молекулярным ситом на 10 кДа (М1Шроге). Аликвоты подвергали быстрой заморозке в жидком азоте и хранили при -80°С. Все процедуры очистки выполняли при 4°С.
Ь. Получение зонда поляризации флюоресценции.
Разрабатывали и синтезировали небольшие молекулы с флюоресцентной меткой в качестве зонда (Т8Э-ЕР зонда) для определения аффинности связывания тестируемого соединения с белками Н8Р90. Синтез небольшой молекулы, (8,Е)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8дигидрохиназолин-5(6Н)-он О-2-аминоэтил оксима (соединение 24) описан выше в примерах 24 и 25. Зонд Т8Э-ЕР готовили, следуя следующей процедуре:
В сосуд на 4 мл, содержащий раствор соединения 24 (5 мг, 0.00908 ммоль, 1.0 экв.), в дихлорметане (0.6 мл) и триэтиламине (6.3 мкл, 0.0454 ммоль) добавили раствор (5-(2,5-диоксопирролидин-1илокси)карбонил)-2-(6-гидрокси-3-оксо-3Н-ксантен-9-ил)бензойной кислоты (5-РАМ, 4.7 мг, 0.01 ммоль, 1.1 экв.) в дихлорметане (0.4 мл); смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции, которое определяли путем ЖХ/МС, реакционную смесь разбавляли МеОН и очищали непосредственно путем препаративной ВЭЖХ с получением зонда Т8И-ЕР в форме белого твердого вещества (6.8 мг, 75%).
Е81-МС: т/ζ 795.4 (М+Н)+.
с. 1и νίΙΐΌ тестирование ферментативной активности ингибиторов Н8Р90.
Ингибирующее действие соединений согласно настоящему изобретению в отношении Н8Р90а определяли в тесте на поляризацию флюоресценции. Тесты проводили в черном 384-луночном планшете в буфере, содержащем 25 мМ Нере8 с рН 7.3, 150 мМ ИаС1, 0.1 мМ ЭДТА, 0.01% Вгу35, 1 мМ ЭТТ.
В каждую лунку для тестирования добавляли аликвоту буфера, 2 мкл тестируемого соединения 10% ДМСО, 4 мкл 6.25 нм зонда Т8Э РР, 4 мкл 12.5 нм очищенного белка Н8Р90а. В качестве положительного контроля использовали 1 мкМ гелданамицина (0М) вместо тестируемого соединения (0М в природным бензохиноном-ансамицином, о котором известно, что он связывается с Ν-концевым АТФсвязывающим карманом Н8Р90 и ингибирует связывание АТФ в АТФ-зависимые виды активности шаперонов). В качестве отрицательного контроля не добавляли ингибитора. Смеси для анализа инкубировали в течение 60 мин в течение ночи (960 мин). Интенсивность флюоресценции в смесях для анализа
- 120 019156 (после 60 мин и инкубации в течение ночи) регистрировали на приборе Апа1ук1 ΗΤ (Мо1еси1аг Оеуюек) при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны испускания 535 нм.
6. Расчет значений 1С50.
Значение 1С50 может быть рассчитано путем нелинейной аппроксимации кривой концентраций соединения и сигналов ЕР стандартным уравнением 1С50, см., 1. К1т е1 а1. Оеуе1ортеп1 о£ а Ииогексепсе Ро1апха0оп Аккау £ог (Не Мо1еси1аг СНарегопе Ηкр90 1. Вюто1еси1аг 8сгеешпд, 2004, 9(5).
Процентное ингибирование Η8Ρ90 при данной концентрации соединения определяется как
100%х [1 -(ЕР соединения/ЕР холостой)], где ЕР соединения - это наблюдаемая поляризованная флюоресценция при данной концентрации тестируемого соединения;
ЕРхол. - это наблюдаемая поляризованная флюоресценция в присутствии только среды.
Значение р1С50 (отрицательный логарифм молярной концентрации соединения, которая обеспечивает 50% ингибирование) тестируемого соединения рассчитывают путем аппроксимации кривой нелинейным методом наименьших квадратов в соответствии с уравнением:
Процентное ингибирование = 100%/(1+(10-р1С50/10 1од[1])) кривой процентного ингибирования в зависимости от концентрации соединения. Концентрацию тестируемого соединения, обеспечивающую 50% ингибирование (1С50), вычисляют путем возведения 10 в минус р1С50 степень (10-р1С50).
В качестве эталонных соединений тестировали известные ингибиторы №Р90, гелданамицин (СМ) и 17 аллиламино,17-деметоксигелданамицин 17-ААС). Результаты представлены в табл. 1. Следует отметить, что эти два ингибитора продемонстрировали зависимость связывания №Р90 от времени, которая необычна для низкомолекулярных ингибиторов согласно настоящему изобретению.
Таблица 1
Значения 1С50 известных ингибиторов №Р90
Стандартные соединения 1С5о (нм) поеле инкубации в течение 1 часа 1Ся) (нм) после инкубации в течение ночи
Гелданамицин 90 10
17-ААС 400 110
2. Анализ жизнеспособности клеток.
Опухолевые клетки линий ВТ-474, НТ-29, К-562 и МКЯ-45 подготавливали в соответствии с инструкциями поставщиков (Атепсап Туре Си11иге Сойесйоп, ЯоскуШе, МО или Ηιιιηηη 8с1епсе Яекеагсй Яекоигсек Вапк, Οкака, Япония). Клетки высевали в 96-луночные микропланшеты для культивирования тканей в концентрации 5,000-25,000 клеток на лунку и культивировали в течение 24 ч, после чего добавляли соединения или среду - ДМСО (диметилсульфоксид). Образец, в котором летки обрабатывали только ДМСО, использовали в качестве отрицательного контроля, а образец, в котором клетки обрабатывали 17-ААС, использовали в качестве положительного контроля. После 72 ч обработки тестируемым соединением определяли превращение соли тетразолия МТ8 (Рготеда, Ма61коп, ^1, США) метаболически активными клетками путем измерения ΟΌ490 нм на считывающем устройстве для микропланшетов 8рес1гатах (Мо1еси1аг Ое\тсек, 8ап П1едо, СА, США). Для получения кривых концентрация - ответ клетки обрабатывали в дупликатах рядом серийных разбавлений (конечная концентрация ДМСО составляла 0.5%). Процент жизнеспособных клеток определяли путем коррекции на фон и нормировки на лунки, обработанные ДМСО. Значения ЕС50 для ингибирования жизнеспособности клеток рассчитывали при помощи программного модуля ХЬй14 Мюгокой Ехсе1.
3. Анализ индукции №Р703.
Репортерный вектор Н8Р70в/в-галактозидаза был приобретен в 81геккдеп Вюгеадеп1к Согрогайоп (Ую1опа, ВС, Канада). Этот вектор временно трансфецировали в 2 млн клеток Мейа в чашках площадью 10 см2 3 в соответствии с протоколом 81геккдеп с использованием реагента для трансфекции на основе липидов Ηе^аΜΟN8ΤЕЯ (М1глк Вю Согрогайоп, Ма61коп, ^1, США). Затем клетки последовательно высевали в 960-луночные планшеты в концентрации 20,000 клеток/лунку и после 24-часового восстановления вносили тестируемое соединение на 10 ч. Для получения кривых концентрация - ответ клетки обрабатывали в дупликатах рядом серийных разбавлений (конечная концентрация ДМСО составляла 0.5%). Для измерения активности Р-галактозидазы готовили лизаты с использованием системы Са1ас1о-81аг (Арр11е6 Вюкук1етк, Ве6£ог6, МА, США). Регистрировали общую неинфракрасную люминесценцию на считывающем устройстве для планшетов ЕпУ1кюп (Регкт Е1тег, Тигки, Финляндия). Значения ЕС50 для индукции Η8Ρ70β/β-галактозидазы рассчитывали с использованием программного модуля для аппроксимации кривых ХЬй14 Мюгокой Ехсе1. Образец, в котором клетки обрабатывали только ДМСО, использовали в качестве отрицательного контроля, а образец с 17-ААС использовали в качестве положительного контроля.
- 121 019156
4. Анализ белка-клиента Н8Р90 НЕК-2 методом.
млн клеток 8КОУ3 (Американская коллекция типовых культур, КоскуШе, МО) высевали в лунки площадью 35 мм2 в среде МсСоу'8 5А, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки. Через 24 ч после высевания клетки обрабатывали соединениями в 2,5-кратных серийных разбавлениях в ДМСО (конечная ДМСО составляла 0.5%). После 16 ч инкубации с тестируемым соединением готовили лизаты цельных клеток путем лизирования в 62.5 мМ ТП8-НС1 с рН 7, 1% додецилсульфата натрия, 10% глицерина. Белки разделяли путем электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и переносили на мембраны из ПВДФ. Мембраны зондировали подходящими первичными антителами с последующей инкубацией со вторичными антителами, конъюгированными с красителем ГКЭуе 680 или 800С\У (Ы-Сог, Ыпсо1п, ИЕ). НЕК-2/ЕКВВ2 анализировали с использованием моноклональных антител (Се11 81дпа1тд Тес11по1още8. Эапуег8, МА). Уровни общего Н8Р70 анализировали с использованием моноклонального антитела мыши (81ге88деп, Апп АгЬог, М1). В качестве контроля нагрузки белков использовали РСNΑ (ядерный антиген пролиферирующих клеток), детектирование осуществляли с использованием моноклонального антитела (Са1Ь1осЬет, 8ап О1едо, СА). Блоты сканировали на приборе Обу88еу (Ы-Сог, Ыпсо1п, ИЕ), сигналы, соответствующие РСNΑ и НЕК-2/ЕКВВ2 измеряли с использованием программного обеспечения Ы-Сог. Значения для ЕС50 снижение количества общего белка НЕК-2/ЕКВВ2 получали путем аппроксимации кривой отношений общего сигнала НЕК-2/ЕКВВ2 к сигналу РСNΑ в программе ХЫИ4 М1сго8ой Ехсе1.
Пример В. Аффинность связывания соединений согласно настоящему изобретению с Н8Р90 ш У11го Н8Р90.
Значения ферментативной активности соединений согласно настоящему изобретению в отношении Н8Р90 определяли с использованием метода, раскрытого в примере А-1. Соединения согласно настоящему изобретению являются ингибиторами Н8Р90; при этом значения 1С50 примеров соединений обычно составляют менее 1 мкМ и более типично менее 100 нм. Значения 1С50 выбранных соединений приведены в табл. 2.
Таблица 2
1С50 примеров соединений в отношении Н8Р90
№ соединения
33
35
37
40
45
58
59
61
65
75
78
79
83
85
93
96
99
Аффинность связывания
1С51|(нм)
4
13
6
10
10
5
8
3
10
10
4
6
8
4
8
13
8
- 122 019156
Список последовательностей <110> ТАКЕДА ФАРМАСЬЮТИКАЛ КОМПАНИ ЛИМИТЕД <120> ПРОИЗВОДНЫЕ ОКСИМА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Н5Р90 <130> НБР9О-5ООЗ-11Б <140> 12/363,640 <141> 2009-01-30 <150> 61/025,725 <151> 2008-02-01 <160> 2 <170> РаЕепЕГп νβΓίίοη 3.5 <210> 1 <211> 690 <212> Она <213> АгЕ(1пста1 Бедиепсе <22О>
<223> последовательность человеческой кднк, кодированной остатками 9-236 человеческого Н5Р90 (включим стартовый и терминирующий кодон) <400> 1
агддассаас сдаЕддадда ддаддаддЕЕ дадасдгЕсд ссЕЕЕсаддс адаааЕЕдсс 60
садЕЕдаЕдЕ саЕЕдаЕсаЕ сааЕасЕЕЕс ЕасЕсдааса аададаЕсЕЕ ЕсЕдададад 120
стсагЕЕсаа аЕЕсаЕсада ЕдсагЕддас ааааЕссддЕ аЕдааадсЕЕ дасадагссс 180
адЕаааЕЕад асЕсЕдддаа ададсЕдсаЕ аЕЕаассЕЕа Еассдаасаа асаадаЕсда 240
асЕсЕсасЕа ЕЕдгддаЕас ЕддааЕЕдда аЕдассаадд сЕдасЕЕддЕ сааЕаассЕЕ 300
ддЕасЕаЕсд ссаадЕСЕдд дассааадсд ЕЕсаЕддаад сЕЕЕдсаддс ЕддЕдсадаЕ 360
аЕсЕсЕаЕда ЕЕддссадЕЕ сддгдЕЕддЕ ЕЕЕЕЭЕЕСЕд сЕЕаЕЕЕддЕ ЕдсЕдадааа 420
дЕаасЕдЕда Есассаааса ЕаасдагдаЕ дадсадЕасд СЕЕдддадЕС СЕсадсаддд 480
ддаЕсагЕса садЕдаддас адасасаддЕ даассЕаЕдд дЕсдЕддаас аааадЕЕаЕС 540
сгасассЕда аадаадасса аасЕдадгас ЕЕддаддаас даадааЕааа ддадаЕЕдЕд 600
аадааасаЕЕ сгсадЕЕЕаЕ ЕддаЕаЕссс аЕЕасЕсЕЕЕ ЕЕдЕддадаа ддаасдЕдаЕ 660
ааадаадЕаа дсдаЕдасда ддсЕдааЕаа 690
<210> 2 <211> 249 <212> Белок <213> синтетическая последовательность <22О>
<223> 1- 21 = бх-гистидиновая метка сайт-расщепления и метионин
22-249 = Аминокислотная последовательноть для остатков 9-236 человеческого Н5Р90а
- 123 019156 <400> 2
Мес <31 у 1 Зег Бег Н1 $ НТ 5 5 ΗΪ 5 Н1 5 Нт 3 НТ 5 10 Зег Зег <51 у ьеи Уа1 15 Рго
Агд 61 у Зег нтз мес Азр 61 п РГО мес 61 и 61 и 61 и 61 и Уа1 61 и тЬг
20 25 30
РЬе А1а РЬе 61л А1а С1и 11 е А1а 61 п сеи мес Зег Сеи 11 е Не А5П
35 40 45
тЬг РИе Туг 5ег АЗП ьуз С1и Не РЬе Сеи Агд 61 и ьеи 11е Зег А5П
50 55 60
5ег 5ег Азр А1а ьеи Азр Ьуз Не Агд туг б1и Зег ьеи тЬг Азр Рго
65 70 75 80
Зег Суз сеи Азр 5ег 61 у 1_уз 61 и Ьеи НТ 3 11е АЗП Сеи Не Рго АЗП
85 90 95
ьуз 61 η Азр Агд тпг Ьеи ТЬг 11е Уа1 Азр тЬг б1у 11е 61у мес ТЬг
100 105 110
ЬуЗ А1а Азр ьеи Уа! Азп Азп ьеи 61 у ТЬг Не А1а ЬУ5 Зег 61 у тЬг
115 120 125
ьуз А1а РЬе мес 61 и А1а ьеи 61 п А1а 61у А1а Азр Не Зег мес 11е
130 13 5 140
61 у 61 η РЬе 61 у Уа1 61 у РЬе Туг 5ег А1а туг ьеи Уа1 А1а 61 и 1-У5
145 150 155 160
Уа1 ТЬг Уа1 11е ТЬг ьуз Нт 5 АЗП Азр Аэр б!и 61 п туг А1а тгр 61 и
165 170 175
Зег Зег Д1а б1у С1у Зег РЬе ТЬг Уа1 Агд ТЬг АЗр ТЬг 61 у б1и Рго
180 185 190
мес 61 у Агд б1у ТЬг Суз уа! 11 е Сеи Нт 5 ьеи 1У5 61 и Азр 61 п ТЬг
195 200 205
б1и Туг Ьеи 61 и 61 и Агд Агд Не Ьуз 61 и Не Уа1 Суз ьуз НТ 5 Зег
210 215 220
61п РЬе 11 е 61 у Туг Рго 11 е тЬг сеи РЬе уа! 61 и ьуз С1и Агд АЗР
225 230 235 240
ьуз 61 и уа! Зег Азр Азр 61 и А1а б1и
245

Claims (18)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы или его таутомер, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой О;
    В1 представляет собой -Ь-В45;
    В2 выбран из группы, включающей водород и метил;
    В3 выбран из группы, включающей
    В12 выбран из группы, включающей
    - 124 019156
    К4 представляет собой водород;
    Кб и К6', оба, представляют собой водород;
    К45 выбран из группы, включающей водород, амино и гидроксил;
    Ь представляет собой (-СК^К^-Ц;
    п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
    К46 и К47, каждый независимо, выбраны из группы, включающей водород, гидроксил, амино, (С1-6)алкил и гидрокси(С1-6)алкил.
  2. 2. Соединение по п.1, имеющее формулу
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, в котором Ь представляет собой (-СК^К^-Ц
  4. 4. Соединение по п.1 или 2, в котором Ь представляет собой (-СК46К47-)4.
  5. 5. Соединение по п.1 или 2, в котором Ь представляет собой (-СК46К47-)3.
  6. 6. Соединение по п.1 или 2, в котором Ь представляет собой (-СК46К47-)2.
  7. 7. Соединение по п.1 или 2, в котором Ь представляет собой -СК46К47-.
  8. 8. Соединение по п.1 или 2, в котором К2 представляет собой водород.
  9. 9. Соединение по п.1 или 2, в котором К2 представляет собой метил.
  10. 10. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-
    б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2,3-дигидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)пропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-3,4-дигидроксибутил оксим;
    (7К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-3,4-дигидрокси-4-метилпентил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(3'-(циклопропилсульфонил)-5-фторбифенил-2-ил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-2,3-дигидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2-амино-3-гидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(2-(5-амино-6-метоксипиразин-2-ил)-4-фторфенил)-4-метил-7,8дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиразин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(2-метокситиазол-4-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4-дигидроксибутил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-4,5-дигидроксипентил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3-амино-2-гидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-3-гидроксипропил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-4-гидроксибутил оксим;
    (К^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-4,5-дигидроксипентил оксим;
    (8^)-2-амино-7-(4-фтор-2-(6-метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-3,4-дигидроксибутил оксим.
  11. 11. Соединение по п.1, где соединение представляет собой (КД-2-амино-7-(4-фтор-2-(6- метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(8)-3,4
    - 125 019156 дигидроксибутил оксим.
  12. 12. Соединение по п.1, где соединение представляет собой (КД-2-амино-7-(4-фтор-2-(6- метоксипиридин-2-ил)фенил)-4-метил-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-5(6Н)-он О-(К)-2,3дигидроксипропил оксим.
  13. 13. Соединение по любому из пп.1-12, где соединение имеет форму фармацевтически приемлемой соли.
  14. 14. Соединение по любому из пп.1-13, где соединение присутствует в виде смеси стереоизомеров.
  15. 15. Соединение по любому из пп.1-13, где соединение представляет собой единственный стереоизомер.
  16. 16. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение по любому из пп.1-15 и фармацевтический наполнитель.
  17. 17. Применение соединения по любому из пп.1-15 в качестве лекарственного средства для ингибирования Н8Р90.
  18. 18. Применение соединения по любому из пп.1-15 для лечения рака, воспаления, воспалительного заболевания кишечника, псориаза, артрита и отторжения трансплантата.
EA201070912A 2008-02-01 2009-01-30 Производные оксима в качестве ингибиторов hsp90 EA019156B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2572508P 2008-02-01 2008-02-01
US10159508P 2008-09-30 2008-09-30
PCT/US2009/032728 WO2009097578A1 (en) 2008-02-01 2009-01-30 Oxim derivatives as hsp90 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201070912A1 EA201070912A1 (ru) 2011-08-30
EA019156B1 true EA019156B1 (ru) 2014-01-30

Family

ID=40436400

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201070912A EA019156B1 (ru) 2008-02-01 2009-01-30 Производные оксима в качестве ингибиторов hsp90

Country Status (26)

Country Link
US (4) US20110053873A1 (ru)
EP (1) EP2252595B1 (ru)
JP (1) JP5524084B2 (ru)
KR (1) KR20100116206A (ru)
CN (1) CN101983191B (ru)
AR (1) AR071452A1 (ru)
AU (1) AU2009208947B2 (ru)
BR (1) BRPI0906598A2 (ru)
CA (1) CA2713658C (ru)
CL (1) CL2009000228A1 (ru)
CR (1) CR11659A (ru)
DO (1) DOP2010000236A (ru)
EA (1) EA019156B1 (ru)
EC (1) ECSP10010434A (ru)
ES (1) ES2475206T3 (ru)
GE (1) GEP20125718B (ru)
IL (1) IL207227A0 (ru)
MA (1) MA32104B1 (ru)
MX (1) MX2010008269A (ru)
MY (1) MY150596A (ru)
NZ (1) NZ587207A (ru)
PE (1) PE20091371A1 (ru)
SG (1) SG187502A1 (ru)
TW (1) TW200946531A (ru)
WO (1) WO2009097578A1 (ru)
ZA (1) ZA201005435B (ru)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007049532A1 (ja) 2005-10-25 2007-05-03 Shionogi & Co., Ltd. アミノジヒドロチアジン誘導体
AR061185A1 (es) 2006-05-26 2008-08-13 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Compuestos heterociclicos como inhibidores de hsp90. composiciones farmaceuticas.
AU2008220009A1 (en) 2007-03-01 2008-09-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Macrocyclic compound
JP5383483B2 (ja) 2007-04-24 2014-01-08 塩野義製薬株式会社 アルツハイマー症治療用医薬組成物
TW200902526A (en) 2007-04-24 2009-01-16 Shionogi & Amp Co Ltd Aminodihydrothiazin derivative substituted with a cyclic group
GB2449293A (en) * 2007-05-17 2008-11-19 Evotec Compounds having Hsp90 inhibitory activity
MY150596A (en) * 2008-02-01 2014-01-30 Takeda Pharmaceutical Hsp90 inhibitors
CA2727859C (en) 2008-06-13 2016-11-01 Shionogi & Co., Ltd. SULFUR-CONTAINING HETEROCYCLIC DERIVATIVE HAVING ß-SECRETASE-INHIBITING ACTIVITY
WO2010047372A1 (ja) 2008-10-22 2010-04-29 塩野義製薬株式会社 Ｂａｃｅ１阻害活性を有する２－アミノピリミジン－４－オンおよび２－アミノピリジン誘導体
CA2783958A1 (en) 2009-12-11 2011-06-16 Shionogi & Co., Ltd. Oxazine derivative
US9018219B2 (en) 2010-10-29 2015-04-28 Shionogi & Co., Ltd. Fused aminodihydropyrimidine derivative
AU2011321427A1 (en) 2010-10-29 2013-05-02 Shionogi & Co., Ltd. Naphthyridine derivative
CN103608345A (zh) 2011-04-26 2014-02-26 盐野义制药株式会社 噁嗪衍生物和含有该噁嗪衍生物的bace1抑制剂
ITTO20111013A1 (it) 2011-11-03 2013-05-04 Dac Srl Composti farmaceutici
JP2016501827A (ja) 2012-10-24 2016-01-21 塩野義製薬株式会社 Ｂａｃｅ１阻害作用を有するジヒドロオキサジンまたはオキサゼピン誘導体
WO2014107655A1 (en) * 2013-01-07 2014-07-10 St. Jude Children's Research Hospital Use of small molecule unfolder protein response modulators to treat tumors with active sonic hedgehog (ssh) signaling due to smoothened (smo) mutation
WO2014144715A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Hsp90-targeted cardiac imaging and therapy
US9802978B2 (en) 2013-08-12 2017-10-31 Emory University Progesterone phosphate analogs and uses related thereto
CA2961499A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Hsp90-targeted inflammation and infection imaging and therapy
WO2016044120A1 (en) * 2014-09-19 2016-03-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Diazine-fused amidine compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
MX2018012333A (es) 2016-04-07 2019-03-07 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Amidas heterociclicas utiles como moduladores de proteinas.
EP3615008A4 (en) * 2017-04-24 2021-05-05 Samus Therapeutics, Inc. ORAL HSP90 INHIBITOR FORMULATIONS AND RELATED PROCESSES
AU2018274723B2 (en) 2017-05-26 2024-01-18 Cancer Research Technology Limited Benzimidazolone derived inhibitors of BCL6
WO2019055884A2 (en) * 2017-09-15 2019-03-21 Ampersand Biopharmaceuticals, Inc. INHIBITION OF SPONTANEOUS METASTASES BY PROTEIN INHIBITORS OF CYSTEINE PROTEASES
CN112568223B (zh) * 2020-04-13 2023-04-21 辽宁先达农业科学有限公司 除草组合物及其应用和除草剂
CN111671749A (zh) * 2020-06-12 2020-09-18 重庆医科大学 双香豆素在制备HBx蛋白稳定性抑制剂中的用途
CN112661668B (zh) * 2020-12-31 2023-07-28 辽宁先达农业科学有限公司 一种n-取代酰胺类化合物及其制备方法
CN114259564B (zh) * 2021-11-30 2023-03-14 清华大学 Hsp90抑制剂阻碍stat3线粒体转运和治疗哮喘的新应用
CN115073458A (zh) * 2022-07-04 2022-09-20 山东致泰医药技术有限公司 一种阿维巴坦钠的制备方法
CN115381816A (zh) * 2022-08-04 2022-11-25 武汉市金银潭医院(武汉市传染病医院) Ver50589在制备抗肠道病毒71型药物中的应用
WO2024229406A1 (en) 2023-05-04 2024-11-07 Revolution Medicines, Inc. Combination therapy for a ras related disease or disorder
CN117907491B (zh) * 2024-03-12 2024-06-04 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 基于双衍生化技术的脱碱基位点lc-ms/ms分析方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003051844A1 (fr) * 2001-12-14 2003-06-26 Hsp Research Institute, Inc. Derive d'oxime 2,3-dihydro-1h-quinoline-4-one, et inhibiteurs de l'induction de l'expression de la proteine de choc thermique
WO2006113498A2 (en) * 2005-04-14 2006-10-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. 2-amino-quinaz0lin-5-ones as hsp90 inhibitors useful in treating proliferation diseases
WO2007041362A1 (en) * 2005-09-30 2007-04-12 Novartis Ag 2-amino-7,8-dihydro-6h-pyrido[4,3-d] pyrimidin-5-ones
WO2008142720A2 (en) * 2007-05-17 2008-11-27 Dac Srl Quinazolin-oxime derivatives as hsp90 inhibitors

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1197466B (de) 1962-03-22 1965-07-29 Thomae Gmbh Dr K Verfahren zur Herstellung von neuen 5, 6, 7, 8-Tetrahydropyrido-[4, 3-d]pyrimidinen
CA762455A (en) 1962-03-22 1967-07-04 Dr. Karl Thomae Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Pyrido-pyrimidines
GB8912336D0 (en) 1989-05-30 1989-07-12 Smithkline Beckman Intercredit Compounds
US5654307A (en) * 1994-01-25 1997-08-05 Warner-Lambert Company Bicyclic compounds capable of inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family
JP2000038350A (ja) 1998-05-18 2000-02-08 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd 糖尿病治療薬
GEP20033093B (en) 1998-05-26 2003-10-27 Warner Lambert Co Bicyclic Pyrimidines and Bicyclic 3,4-Dihydropyrimidines as Inhibitors of Cellular Proliferation, Compositions Containing Them and Methods for Treating Cell Proliferative Disorders
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
AU2001245856A1 (en) * 2000-03-23 2001-10-03 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
AU2001239549A1 (en) 2000-03-24 2001-10-03 Akzo Nobel N.V. Keratinocyte growth inhibitors and hydroxamic acid derivatives
US6946456B2 (en) 2000-07-28 2005-09-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Methods for treating cell proliferative disorders and viral infections
AU2001280105A1 (en) 2000-08-22 2002-03-04 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Methof of regulating apoptosis and apoptosis-regulatory polypeptide
CA2426952C (en) * 2000-11-02 2012-06-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Small molecule compositions for binding to hsp90
US20060079493A1 (en) * 2001-03-01 2006-04-13 Lawrence Fritz Methods for treating genetically- defined proliferative disorders with hsp90 inhibitors
KR20020089883A (ko) 2001-05-25 2002-11-30 주식회사 지인텍 마사지 장치
WO2003002064A2 (en) * 2001-06-28 2003-01-09 Essential Therapeutics, Inc. Fused pyrimidine dhfr inhibitors as antibacterials
AU2003211993A1 (en) 2002-02-15 2003-09-04 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. (1,2,4)TRIAZOLO(1,5-c)PYRIMIDINE DERIVATIVES
EP1511738A4 (en) 2002-05-17 2007-05-09 Scios Inc TREATMENT OF FIBROPROLIFERATIVE DISEASES USING TGF BETA INHIBITORS
US7323479B2 (en) 2002-05-17 2008-01-29 Celgene Corporation Methods for treatment and management of brain cancer using 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methylisoindoline
AU2003282512A1 (en) 2002-10-22 2004-05-13 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Methods of reducing the activity of and reducing the concentration of a mutant kit protein
EP1457499A1 (en) 2003-03-12 2004-09-15 Tufts University School Of Medicine Inhibitors of extracellular Hsp90
US20050020534A1 (en) * 2003-05-30 2005-01-27 Kosan Biosciences, Inc. Method for treating diseases using HSP90-inhibiting agents in combination with antimetabolites
EP1666064A4 (en) * 2003-08-22 2008-12-17 Kyowa Hakko Kogyo Kk MEANS FOR THE TREATMENT OF DISEASES RELATED TO IMMUNOGLOBULIN GEN TRANSLATION
ATE433974T1 (de) 2003-09-19 2009-07-15 Gilead Sciences Inc Azachinolinolphosphonatverbindungen als integraseinhibitoren
US20050165032A1 (en) 2004-01-23 2005-07-28 Norman Mark H. Vanilloid receptor ligands and their use in treatments
WO2005080377A1 (ja) 2004-02-20 2005-09-01 Kirin Beer Kabushiki Kaisha TGFβ阻害活性を有する化合物およびそれを含んでなる医薬組成物
DE102004041163A1 (de) 2004-08-25 2006-03-02 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen mit antibakterieller Aktivität
WO2006050333A2 (en) 2004-11-02 2006-05-11 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for modulating apoptosis
JP2008519031A (ja) 2004-11-02 2008-06-05 コンフォーマ・セラピューティクス・コーポレイション 慢性リンパ球性白血病を治療する方法および組成物
WO2006052795A2 (en) 2004-11-05 2006-05-18 University Of Rochester Methods of inhibiting the activity of hsp90 and/or aryl hydrocarbon receptor
US20080132510A1 (en) 2005-01-21 2008-06-05 Bingsong Han Imidazolylmethyl and Pyrazolylmethyl Heteroaryl Derivatives
JP5710855B2 (ja) 2005-02-02 2015-04-30 ネクスジェニクス・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 神経線維腫の局所治療
AU2006232109A1 (en) 2005-04-06 2006-10-12 Irm Llc Diarylamine-containing compounds and compositions, and their use as modulators of steroid hormone nuclear receptors
WO2006119504A2 (en) 2005-05-04 2006-11-09 Renovis, Inc. Fused heterocyclic compounds, and compositions and uses thereof
WO2006124904A2 (en) 2005-05-16 2006-11-23 Geron Corporation Cancer treatment by combined inhibition of telomerase and hsp90 activities
JP4896972B2 (ja) 2005-06-14 2012-03-14 シェーリング コーポレイション 複素環式アスパルチルプロテアーゼ阻害剤、その調製及び使用
WO2007035963A2 (en) 2005-09-23 2007-03-29 Conforma Therapeutics Corporation Anti-tumor methods using multi drug resistance independent synthetic hsp90 inhibitors
WO2007082131A1 (en) 2006-01-09 2007-07-19 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of hydroxy substituted heterocycles
US7851468B2 (en) 2006-05-15 2010-12-14 Cephalon, Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines
US7812027B2 (en) 2006-05-16 2010-10-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Substitued [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrazines as dipeptidyl peptidase-IV inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
US8034834B2 (en) 2006-05-25 2011-10-11 Synta Pharmaceuticals Corp. Method for treating proliferative disorders with HSP90 inhibitors
WO2007143629A1 (en) 2006-06-02 2007-12-13 Nexgenix Pharmaceuticals Treatment of neurofibromatosis with inhibitors of a signal transduction pathway
US20080160520A1 (en) * 2006-06-22 2008-07-03 Angelika Amon Methods and Composition for Diagnosing and Treating Cancer
WO2007147217A1 (en) 2006-06-22 2007-12-27 Prana Biotechnology Limited Method of treatment of glioma brain tumour
WO2008021981A2 (en) 2006-08-09 2008-02-21 Nexgenix Pharmaceuticals, Llc. Local treatment of epidermal and dermal hyperproliferative lesions
WO2008045529A1 (en) 2006-10-12 2008-04-17 Serenex, Inc. Purine and pyrimidine derivatives for treatment of cancer and inflammatory diseases
CN101535280B (zh) 2006-11-15 2012-06-27 健泰科生物技术公司 芳基磺酰胺化合物
US20100111943A1 (en) 2007-03-22 2010-05-06 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc Compositions and methods for inhibiting cancer metastasis
US7928111B2 (en) 2007-06-08 2011-04-19 Senomyx, Inc. Compounds including substituted thienopyrimidinone derivatives as ligands for modulating chemosensory receptors
MY150596A (en) * 2008-02-01 2014-01-30 Takeda Pharmaceutical Hsp90 inhibitors

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003051844A1 (fr) * 2001-12-14 2003-06-26 Hsp Research Institute, Inc. Derive d'oxime 2,3-dihydro-1h-quinoline-4-one, et inhibiteurs de l'induction de l'expression de la proteine de choc thermique
WO2006113498A2 (en) * 2005-04-14 2006-10-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. 2-amino-quinaz0lin-5-ones as hsp90 inhibitors useful in treating proliferation diseases
WO2007041362A1 (en) * 2005-09-30 2007-04-12 Novartis Ag 2-amino-7,8-dihydro-6h-pyrido[4,3-d] pyrimidin-5-ones
WO2008142720A2 (en) * 2007-05-17 2008-11-27 Dac Srl Quinazolin-oxime derivatives as hsp90 inhibitors

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
IKUINA Y. ET AL.: "Synthesis and antitumor activity of novel O-carbamoylmethyloxime derivatives of radicicol", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY. WASHINGTON.; US, vol. 46, no. 12, 1 January 2003 (2003-01-01), pages 2534-2541, XP002975841, ISSN: 0022-2623, the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
MY150596A (en) 2014-01-30
NZ587207A (en) 2012-05-25
CA2713658A1 (en) 2009-08-06
CL2009000228A1 (es) 2009-07-24
CN101983191A (zh) 2011-03-02
PE20091371A1 (es) 2009-10-03
AU2009208947B2 (en) 2014-02-06
EP2252595B1 (en) 2014-03-26
CN101983191B (zh) 2013-11-20
EP2252595A1 (en) 2010-11-24
US8071766B2 (en) 2011-12-06
MA32104B1 (fr) 2011-02-01
US20120264770A1 (en) 2012-10-18
DOP2010000236A (es) 2010-09-30
WO2009097578A1 (en) 2009-08-06
EA201070912A1 (ru) 2011-08-30
IL207227A0 (en) 2010-12-30
CR11659A (es) 2010-12-15
SG187502A1 (en) 2013-02-28
JP2011511003A (ja) 2011-04-07
AU2009208947A1 (en) 2009-08-06
ES2475206T3 (es) 2014-07-10
ECSP10010434A (es) 2010-09-30
GEP20125718B (en) 2012-12-25
US20110053873A1 (en) 2011-03-03
US8618290B2 (en) 2013-12-31
US20090305998A1 (en) 2009-12-10
US20120172321A1 (en) 2012-07-05
MX2010008269A (es) 2011-02-21
CA2713658C (en) 2016-07-05
AR071452A1 (es) 2010-06-23
JP5524084B2 (ja) 2014-06-18
KR20100116206A (ko) 2010-10-29
ZA201005435B (en) 2011-11-30
TW200946531A (en) 2009-11-16
BRPI0906598A2 (pt) 2015-07-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019156B1 (ru) Производные оксима в качестве ингибиторов hsp90
EP3700904B1 (en) 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives
RU2743098C2 (ru) Новые производные аммония, способ их получения и фармацевтические композиции, содержащие их
KR102620976B1 (ko) 신규한 하이드록시산 유도체, 이를 제조하는 방법 및 이를 함유하는 약제 조성물
ES2968669T3 (es) Inhibidores selectivos del inflamasoma NLRP3
JP5814467B2 (ja) キナーゼ阻害剤としてのイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン誘導体
ES2910128T3 (es) Compuestos de heteroarilo o arilo fusionados con biciclo y su uso como inhibidores de IRAK4
JP6494624B2 (ja) カゼインキナーゼ１ｄ／ｅ阻害剤としての置換された４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン誘導体
JP6196615B2 (ja) 化合物、その医薬組成物、及び癌治療用の阻害薬としてのその使用
CA2921314A1 (en) Substituted nucleoside derivatives as prmt5 inhibitors
KR20170049604A (ko) Bub1 억제제로서의 벤질 치환된 인다졸
UA114950C2 (uk) ТЕТРАГІДРОІМІДАЗО[1,5-d][1,4]ОКСАЗЕПІНОВА ПОХІДНА
CA3137610A1 (en) 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one compounds
JP6154474B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
CA3137611A1 (en) 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives
AU2023231912A1 (en) Heterocyclic compound for inducing degradation of g12d mutant kras protein
JP2017538697A (ja) 新規なアリール−シアノグアニジン化合物
CA3177214A1 (en) 3-(anilino)-2-[3-(3-alkoxy-pyridin-4-yl]-1,5,6,7-tetrahydro-4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives as egfr inhibitors for the treatment of cancer
WO2019149637A1 (en) Antibody drug conjugates (adcs) with nampt inhibitors
WO2024028316A1 (en) 1h-pyrrolo[3,2-b]pyridine derivatives as irreversible inhibitors of mutant egfr for the treatment of cancer
EP4512811A1 (en) Oxazepine derivative
TW202300146A (zh) 經三唑基-甲基取代的α-D-吡喃半乳糖苷衍生物
EA040675B1 (ru) Ингибиторы активин-подобной рецепторной киназы

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU