DE69102707T2

DE69102707T2 - In einem DNA - Gel stabilisierte Heilwasserliposomen.

Info

Publication number: DE69102707T2
Application number: DE69102707T
Authority: DE
Inventors: Henri Cousse; Pierre Fabre; Gilbert Mouzin; Marie-Therese Trebosc
Original assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Current assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Priority date: 1990-10-17
Filing date: 1991-10-16
Publication date: 1995-03-02
Anticipated expiration: 2011-10-17
Also published as: ATE107850T1; ES2059161T3; FR2668063B1; US5376379A; JPH06502158A; JP3230239B2; WO1992006666A1; EP0554343A1; FR2668063A1; EP0554343B1; DE69102707D1; DK0554343T3

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Zusammensetzungen auf der Grundlage von Thermalwasser, die in einem DNA-Gel stabilisierte Thermalwasser-Liposome umfassen und insbesondere in der Dermatologie und Kosmetik nützlich sind.
Die Liposome sind mikro-blasenförmig und bestehen aus einer oder mehreren lipidischen Doppelschichten, die einen zentralen wäßrigen Raum begrenzen und im Falle von multilamellaren Liposomen ein wäßriges Verhalten zwischen zwei Doppelschichten zeigen.
Diese Strukturen sind aus Phospholipiden zusammengesetzt, zu denen man häufig Sterole wie Cholesterol gibt, um die Stabilität zu erhöhen.
Die Liposome können nach ihrer Größe und ihrem uni- oder multilamellaren Charakter eingeordnet werden:
MLV (Multi-Lamellar Vesicles; multilamellare Bläschen)
: Durchmesser 100 bis 5.000 nm (mehrere Doppelschichten)
LUV (Large Unilamellar Vesicles; umfangreiche unilamellare Bläschen) : Durchmesser 200 bis 2.000 nm (eine Doppelschicht)
SUV (Small Unilamellar Vesicles; kleine unilamellare Bläschen : Durchmesser 20 bis 80 nm (eine Doppelschicht)
Es wurden in der Industrie Techniken entwickelt, die es ermöglichen, große Mengen von Liposomen zu erhalten (ultra-dispersion, sonication, lipopred.) Ref. PUISIEUX F., DELATTRE J. - Les liposomes. Application thérapeutiques. Technique et Documentation, Lavoisier Paris, 1983.
Diese Mikro-Bläschen sind fähig mit den Zellen zusammenzuwirken, deren Membranen eine mit den Membranen der Liposome identische Beschaffenheit aufweisen.
Dermatologie und Kosmetik bilden einen vielversprechenden Bereich für die Erschließung der Liposome.
Die hauptsächlichen, die Haut betreffenden Untersuchungen beziehen sich auf Liposome von Corticoiden. Es scheint, daß die Mikro-Verkapselung der Corticoide das perkutane Eindringen des Produktes verringert und seine Konzentration im Bereich der lokalen Zentren erhöht: épiderme et derme. Réf. WOHLRAB W., LASCH J. - Penetration Kinetics of liposomal hydrocortisone in human skin. Dermatologica, 174, 18-22, 1987.
Es wurden auch andere Substanzen eingebracht, aber die Untersuchungen sind für eine allgemeine Aussage zu eng umrissen: EGF (Epidermal Growth Factor) könnte bei der Heilung von Wunden hilfreich sein: die superoxidierten Disproportionierungs-Produkte könnten eine lokale anti-Inflammatorische Wirkung besitzen. Unglücklicherweise sind die Bläschen der Liposome in den verwendeten Formulierungen sehr zerbrechlich und werden oft zerstört, bevor sie ihr Ziel erreichen.
Zahlreiche Autoren haben die Verwendung von gelbildenden Mitteln erwähnt, um die liposomalen Bläschen in Form von wäßrigem Gel zu stabilisieren.
Die hauptsächlich verwendeten gelbildenden Mittel sind Gelatine, Carboxyvinyl-Polymere, Methacryl-Polymere, die Copolymere von Polydimethylsiloxan und seit kurzem Collagen.
Die gegenwärtig angewendete Stabilisierung der Liposome in einem wäßrigen Gel mit gelbildenden Mitteln ermöglicht jedoch nicht, eine Stabilität der Formulierung von höher als dreimal bei einer Temperatur von 40 ºC zu erhalten.
Die vorliegende Erfindung ermöglicht es, diesen beträchtlichen Nachteil zu verringern, indem sie die Liposome in einem Gel von Desoxyribonucleinsäure stabilisiert.
Gemäß der Erfindung wird die DNA eine hochpolymerisierte DNA sein, die nach dem Fachmann bekannten Verfahren erhalten wird und kommerziell verfügbar ist (nachstehend "DNA HP").
Man kann insbesondere die DNA nennen, die eine Molmasse zwischen 500.000 und 1.500.000 und vorzugsweise zwischen 800.000 und 1.200.000 besitzt.
Die Zusammensetzung gemäß der Erfindung enthält vorteilhafterweise 0,1 bis 10 Gew.-% DNA und insbesondere 0,5 bis 5 Gew.-%.
Gemäß der Erfindung bringt man in die Liposome Thermalwässer und ganz besonders Wasser aus Avène oder Wasser aus Cauterets ein. Das Wasser aus Avène besitzt eine nützliche therapeutische Wirksamkeit bei der Behandlung von Ekzemen, Pruritis, Psoriasis, Verzögerungen bei der Vernarbung und Verbrennungen. Grundlegende Untersuchungen haben die Wirksamkeit des Wassers aus Avène bestätigt. So ermöglichten mehrere Reihen von Untersuchungen zu demonstrieren, daß das Wasser aus Avène einen Inhibitor-Effekt auf die Degranulation der humanen Basophilen ausübt. Es inhibiert ebenfalls die Migration von Polykernen, denen eine bedeutende Rolle bei der kutanen Entzündung zukommt.
Das sulfurierte Wasser aus Cauterets weist in Form von Liposomen eine Bedeutung in der Dermatologie auf, und ganz besonders bei folgenden Behandlungen: Psoriasis, Ekzeme, Acne, Pruritus, Seborrhoe und Alopezie.
Das Wasser aus Avène hat die folgende Zusammensetzung:

ANIONEN mg/l

HCO&sub3;&supmin; (Bicarbonate) 218,4
Cl&supmin; (Chloride) 5,8
SO&sub4;&supmin;&supmin; (Sulfate) 12,4
NO&sub3;&supmin; (Nitrate) 1,1
NO&sub2;&supmin; (Nitrite) < 0,02
F&supmin; (Fluoride) 0,12
PO4&supmin;&supmin;&supmin; (Phosphate) < 0,1
Br&supmin; (Bromide) < 0,1

KATIONEN mg/l

Ca&spplus;&spplus; (Calcium) 40,8
Mg&spplus;&spplus; (Magnesium) 22,7
K&spplus; (Kalium) 1,0
Na&spplus; (Natrium) 4,8
Li&spplus; (Lithium) < 0,1
Fe&spplus;&spplus; (Eisen) < 0,01
Mn&spplus;&spplus; (Mangan) < 0,005
Sr&spplus;&spplus; (Strontium) 0,13
Das Wasser aus Cauterets hat die folgende Zusammensetzung:

ANIONEN mg/l

HCO&sub3;&supmin; (Bicarbonate) 25
CO&sub3;&supmin;&supmin; (Carbonate) 23,4
H&sub3;SiO&sub4;&supmin; (Silikate) 32,8
Cl&supmin; (Chloride) 45
SO&sub4;&supmin;&supmin; (Sulfate) 31,5
NO&sub2;&supmin; (Nitrite) -
NO&sub3;&supmin; (Nitrate) -
PO&sub4;&supmin;&supmin;&supmin; (Phosphate) -
F&supmin; (Fluoride) 2,2
HS&supmin; (Sulfide) Spuren
SO&sub3;&supmin;&supmin; (Sulfite) Spuren
S&sub2;O&sub3;&supmin;&supmin; (Thiosulfate) 5,6

KATIONEN mg/l

Ca&spplus;&spplus; (Calcium) 5
Mg&spplus;&spplus; (Magnesium) 0,12
Na&spplus; (Natrium) 63,6
K&spplus; (Kalium) 1,8
NH&sub4;&spplus; (Ammonium)
Mn&spplus;&spplus; (Mangan)
Al&spplus;&spplus;&spplus; (Aluminium)
Zn&spplus;&spplus; (Zink)
Cu&spplus;&spplus; (Kupfer)
Li&spplus; (Lithium) 0,18
Selbstverständlich können gemäß der vorliegenden Erfindung auch alle anderen Thermalwässer, die eine therapeutische und/ oder kosmetische Bedeutung aufweisen, mikro-verkapselt werden, um ein gezieltes Eindringen dieser Wässer im Bereich der Epidermis und der Dermis zu ermöglichen.
Gemäß einem zusätzlichen Merkmal der vorliegenden Erfindung enthält die Zusammensetzung gegebenenfalls außerdem einen assoziierten Wirkstoff, wie
ein antibakterielles Mittel und ganz besonders Phenonip, EDTA, Benzoesäure, Butyl-para-hydroxybenzoat, Sorbinsäure;
einen assoziierten Vitaminstoff wie Vitamin E, Vitamin C;
oder ein Öl wie Gurkenkrautöl (Borretschöl) oder Arganöl.
Selbstverständlich ist die obengenannte Aufstellung nicht einschränkend.
Der assoziierte Wirkstoff wird insbesondere in einer Menge von 0 bis 5 Gew.-% und meistens von 0,1 bis 3 Gew.-% der Zusammensetzung vorliegen.
Die Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung enthält in vorteilhafter Weise 0,1 bis 10 Gew.-% Lipide, die zur Bildung der Liposome herangezogen werden, und ganz besonders 0,5 bis 5 %, wobei das Gewichts-Verhältnis (Lipide)/(Thermalwasser, verkapselt in den Liposomen) etwa 1/3 beträgt.
In einer Ausführungsform gehören die in der vorliegenden Erfindung verwendeten Liposome zum multilamellaren Typ, hergestellt nach dem französischen Patent 2 634 375.
In dieser besonderen Ausführungsform werden die Gele der Liposome auf die folgende Art und Weise hergestellt:

a) Liposome

Man stellt eine flüssige Phase her, die im wesentlichen aus einer Lösung von amphiphilen Lipiden und gegebenenfalls einem der genannten assoziierten Wirkstoffe lipophiler Beschaffenheit in einem organischen Lösungsmittel und insbesondere Ethanol besteht.
Diese Phase wird dann unter mäßigem Rühren in eine Lösung von Thermalwasser gegeben, die gegebenenfalls einen der assoziierten Wirkstoffe hydrophiler Beschaffenheit enthält.
Nach dem Abdampfen unter reduziertem Druck erhält man eine Suspension mit gewünschter Konzentration an Liposomen.
Die amphiphilen Lipide können Glycolipide, Phospho-Amino- Lipide und insbesondere Phospholipide sein, beispielsweise die Lecithine (aus Eiern, Soja usw.)
Das Lösungsmittel ist vorzugsweise ein mit Wasser in allen Verhältnissen mischbarer Alkohol, insbesondere Ethanol.
Die Lösung der amphiphilen Lipide kann außerdem eine Substanz lipophiler Beschaffenheit enthalten, die dazu vorgesehen ist, die physikalischen (elektrische Ladung, Steifheit) und chemischen Charakteristiken der Wandungen, wie von Cholesterol, Stearylamin, Phosphatidinsäure usw. zu modifizieren.
Die Konzentration der Lipide in dem Lösungsmittel kann 0,1 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise 1 bis 5 Gew.-%, betragen.
Es ist vorteilhaft, daß das Volumen des für die Phase (1) verwendeten Lösungsmittels zwischen 30 und 100 %, beispielsweise etwa 50 %, des Wasser-Volumens der Phase (2) beträgt, um Liposomen von geringer Größe (insbesondere 100 bis 300 nm) zu erhalten.
Auf diese Weise ermöglicht die Erfindung Medikamente, insbesondere in injizierbarer Form, und kosmetische Produkte zu erhalten, die sehr stabil sind.

b) Herstellung des Liposomen-Gels

In die vorstehende Suspension trägt man unter mäßigem Rühren die DNA (insbesondere DNA HP) sowie gegebenenfalls die Konservierungsstoffe und Parfume ein.
Die Erfindung ermöglicht es, Liposomen von Thermalwässern zu erhalten, die in einem Gel einwandfrei stabilisiert sind.
Diese gemäß der vorliegenden Erfindung erhaltenen Formulierungen können in der Dermokosmetik verwendet werden, insbesondere durch topische Applikation, wenn die Zusammensetzung einen Trägerstoff für die topische Anwendung umfaßt. Es kann sich hierbei um ein in einem Rohr oder mechanischen System mit Pumpe untergebrachtes Gel handeln oder um eine Aerosol-Zusammensetzung, die in Form von Gel freigesetzt wird.
Die folgenden Beispiele sind dazu vorgesehen die Erfindung zu veranschaulichen, ohne jedoch einen beschränkenden Charakter aufzuweisen.

BEISPIEL 1 : Herstellung eines Ansatzes von 5 kg Liposomen von Wasser aus Avène mit 2 % Lipiden

Ausgangsstoff:

1 - Organische Phase

- Phospholipid (Lipoid 80)o SEPPIC 100 g
- Cholesterol BP 15 g
- Ethanol 95º 2,5 Liter

2 - Wäßrige Phase

- Wasser aus Avène 5 Liter
- Dinatrium-EDTA 10 g

Verfahrensweise

1 - Herstellung der organischen Phase I

In 2,5 Liter Ethanol trägt man unter kräftigem Rühren bei Umgebungstemperatur 100 g Phospholipid, 10 g Cholesterol und 10 g Phenonim ein. Dann setzt man das Rühren 1/2 Stunde lang bis zur Auflösung und zum Vorliegen einer homogenen, blaßgelben Phase fort.

2 - Herstellung der wäßrigen Phase II

In 5 Liter Wasser aus Avène trägt man unter Rühren 10 g Dinatrium-EDTA ein.

3 - Herstellung der Liposome

Man trägt die organische Phase I mit Hilfe eines Kremlin und einer peristaltischen Pumpe in einem dünnen Strahl in die wäßrige Phase II ein.
Die Zugabe unter kräftigem Rühren mit Hilfe eines Rayneri dauert 15 Minuten lang. Die organische Phase soll außerhalb von dem beim Rühren entstehenden Konus eingetragen werden. Es bildet sich eine milchige Phase.
Dann dampft man unter reduziertem Druck 2,7 Liter (Ethanol + Wasser) ab. Die Temperatur des Wasserbades beträgt 50 ºC. Man erhält eine milchige Lösung von 4,8 Litern mit 2 % Lipiden, die man auf 5 Liter mit Wasser aus Avène komplettiert.

BEISPIEL 2 : Herstellung der Liposomen-Zusammensetzung von Thermalwasser, stabilisiert durch ein Gel von DNA HP

Zu der vorstehenden Lösung, die 2 % Lipide enthält, gibt man unter mäßigem Rühren und in kleinen Portionen 100 g DNA HP (gehandelt von der Firma JAVERNECH). Die Auflösung erfolgt bei Umgebungstemperatur langsam. Nach 1 Stunde Rühren erhält man eine stabilisierte Formulierung, die 2 % Gel von DNA HP und 2 % Liposome enthält.

BEISPIEL : 3 Formulierungen

In den nachstehenden Formulierungen liegt die Menge (in Gewicht) von in den Liposomen verkapseltem Thermalwasser in der Größenordnung des Dreifachen von den Lipiden, aus denen die Liposome bestehen.

FORMULIERUNG 1 :

Lipide 2 %
DNA HP 2 %
Phenonip 0,5 %
EDTA 0,2 %
Wasser aus Avène zu 100

FORMULIERUNG 2 :

Lipide 2 %
DNA HP 0,5 %
Phenonip 0,5 %
EDTA 0,2 %
Wasser aus Avène zu 100

FORMULIERUNG 3 :

Lipide 2 %
DNA HP 0,1 %
Phenonip 0,5 %
EDTA 0,2 %
Wasser aus Avène zu 100

FORMULIERUNG 4 :

Lipide 0,5 %
DNA HP 0,2 %
Butyl-para-hydroxybenzoat 0,2 %
Blütenwasser 1 %
Wasser aus Avène zu 100

FORMULIERUNG 5 :

Lipide 2 %
DNA HP 0,5 %
Sorbinsäure 0,3 %
Wasser aus Cauterets zu 100

FORMULIERUNG 6 :

Lipide 1 %
DNA HP 0,5 %
Vitamin C 1 %
Phenonip 0,5 %
Blütenwasser 1 %
Wasser aus Cauterets zu 100

FORMULIERUNG 7 :

Lipide 2 %
DNA HP 0,5 %
Ginkgo-Extrakt 1 %
Phenonip 0,5 %
Blütenwasser 1 %
Thermalwasser zu 100

FORMULIERUNG 8 :

Lipide 0,1 %
DNA HP 0,5 %
Gurkenkrautöl 1 %
Phenonip 1 %
Thermalwasser zu 100

FORMULIERUNG 9 :

Lipide 10 %
DNA HP 5 %
Vitamin E 0,5 %
Phenonip 1 %
Thermalwasser zu 100

BEISPIEL 4 : Untersuchung der Stabilität

Die Untersuchung der Stabilität wurde bei 40 ºC an Formulierungen durchgeführt, die 2 % Liposome von Thermalwasser aus Avène enthalten.
Die Sichtdarstellung wurde mit einem Elektronenmikroskop realisiert und erfolgte jedesmal, nachdem die Negativ-Färbung der Liposome mit Hilfe einer 2 %igen Lösung von Natrium-Phosphotungstat vorgenommen wurde.
Die Resultate dieser Untersuchung sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt. Zeit/Monate Gelbildner Gelatine (5%) Carbopol 941 (0,5%) Carbopol 910 (0,5%) Eudispert HV (0,5%) Eudispert NV (0,5%) Dimethycon-copolyol (2%) Collagen (5%) DNA HP (0,1%) DNA HP (0,5%) DNA HP (2%)
+ = gute Stabilität (Liposome 300 + 30 nm)
± = Steigerung der Größe der Liposome (durch membranäre Fusion)
- = Trennung der Phasen (Instabilität der Formulierung)
Die photographischen Beobachtungen zeigen, daß die Liposome gut in einem Netz von DNA HP dispergiert sind, ohne daß ihre Form und ihre Größe beeinträchtigt sind, und bestätigen die überraschende Stabilität der Liposome in dieser Formulierung.
Andere durchgeführte Untersuchungen haben als Resultat ergeben, daß die Anwesenheit von DNA gemäß der Erfindung ermöglicht, eine bemerkenswerte Stabilisierung der Liposome von Mineralwasser gemäß der Erfindung bei ihrer Herstellung sowie in den galenischen Formulierungen zu erhalten.
Ein Gehalt von 0,5 bis 2 % DNA HP ermöglicht es, die Liposome 24 Monate lang zu stabilisieren, während mit den klassischen gelbildenden Mitteln vom Typ Carbopol und/oder Collagen die Stabilität der liposomalen Membranen maximal 6 Monate aufrechterhalten bleibt.
Diese Stabilität kann durch die Vernetzung der Fasern von DNA HP im wäßrigen Medium erklärt werden, die eine Dispersion der Liposome ermöglicht und die Fusion der lipidischen Bläschen verhindert.

BEISPIEL 5 : Pharmazeutische und chemische Aktivität

Die Vektorisierung des Mineralwassers in liposomaler Form gemäß der Erfindung ermöglicht in überraschender Weise eine Verstärkung der pharmakologischen und klinischen Aktivität dieses Wassers.
Die erhaltenen Resultate sind weiter unten zusammengefaßt.

1. Inhibierung der Degranulation der humanen Basophilen

Die Degranulation der humanen Basophilen wurde nach der folgenden Vorschrift beobachtet:
Erhalten von sensibilisierten Basophilen aus einem Antigen von Proben allergisch Kranker oder nach passiver Sensibilisierung von Spender-Basophilen durch ein Serum, das reich an spezifischer IgE ist.
Wenn die sensibilisierten Basophilen von allergisch Kranken stammen, ist es erforderlich, eine Anreicherung auf 1 g durch einfache Sedimentation vorzunehmen und eine Zentrifugierung des an Leukozyten reichen Plasmas. Der Leukozyten-Rückstand enthält 1.500 bis 3.000 Basophilen/mm³.
Die erhaltenen Leukozyten werden dann in einem Mineralpuffer in Suspension gebracht und anschließend zentrifugiert.
Das sensibilisierende Antigen wird dann in RPMI 1640 (flows Labo) verdünnt (7 Verdünnungen von 5 in 5), ausgehend von einer Konzentration von beispielsweise 10&supmin;³, wenn es sich um Glycerin- Extrakte handelt.
Um die Vektorisierung des Wassers aus Avène auf sensibilisierende Basophil-Allergene zu untersuchen, werden reines Wasser und destilliertes Wasser in Kontakt mit einem aliquoten Anteil des Zell-Rückstandes gebracht und 30 Minuten lang bei 25 ºC inkubiert. Nach dieser Inkubationszeit wird die Zellsuspension, Volumen zu Volumen, mit den Verdünnungen des Antigens und zusätzlich mit einer Kontrolle ohne Antigen vermischt.
Die Mischung aus Zellen und Antigen wird 15 Minuten lang bei 37 ºC inkubiert und anschließend mit Toluidinblau angefärbt.
Die nicht degranulierten Basophilen werden dann in Hämocyto- Salpeter von Malassez oder Fuchs-Rosenthal ausgezählt.

Resultate

In der folgenden Tabelle sind die Resultate dargestellt, die im maximalen Prozentsatz der Degranulation von 15 Degranulation- Tests in Anwesenheit von verschiedenen Pneumo-Allergenen ausgedrückt sind. Der mittlere Prozentsatz der Degranulation für 15 Untersuchungen liegt bei 57,1 % für die Kontrollen mit destilliertem Wasser, bei 29,3 % für Wasser aus Avène und bei 14,1 % für die Tests, die mit den stabilisierten Liposomen realisiert wurden (diese Differenz ist hoch signifikant p < 0,01). destilliertes Wasser Wasser aus Avène Wasser aus Avène Liposome DNA HP (5%)

Schlußfolgerung

Die Vektorisierung des Wassers aus Avène durch Liposome gestattet eine Verstärkung des Inhibitor-Effektes der Degranulation von Basophilen von 100 %.

2. Pharmakoklinik

Eine Verstärkung der Anti-Reizwirkung beim Menschen wurde an einem Modell der kutanen Reizung, provoziert durch Natriumlaurylsulfat (LSS) untersucht.
getestete Produkte : (a) destilliertes Wasser
(b) Wasser aus Avène
(c) Wasser aus Avène (Liposome DNA HP (5%)
Die drei zu untersuchenden Produkte werden als Lösungsmittel für LSS verwendet, um Lösungen der gleichen Konzentration zu realisieren wie die Kontroll-Lösung von LSS, die das Modell der Reizung bildet. Sie werden so wie die Kontrolle verabreicht, als verschlossener Patch-Test während 24 Stunden.
Die Ermittlung der kutanen Reiz-Intensität wird durch Messung der Veränderungen des kutanen Blutdurchflusses mit Hilfe der Vélocimétrie Laser Doppler (VLD) durchgeführt.

Untersuchungs-Vorschrift (Anzahl der Personen: 20)

Es werden drei Lösungen von LSS zu 0,75 % mit Hilfe der zu untersuchenden Produkte (a-b-c) hergestellt. Die Kontroll-Lösung von LSS und die Lösungen a, b und c werden in zufälliger Weise im Verhältnis von 65 ul/cm² auf eine Papierfilter-Scheibe aufgebracht.
Dann wird für die Dauer von 24 Stunden ein verschlossener Verband angelegt. Nach dem Abnehmen des Verbandes wird vor dem Beginn der Messungen die Haut 30 Minuten lang an der freien Luft gelassen, um jede mögliche Wirkung des Einschlusses zu beseitigen.
Die Messung des kutanen Blutdurchflusses wird durch Aufzeichnung mittels VLD innerhalb von 10 Minuten auf jeder Zone realisiert, einerseits vor Anbringen der Patchs, um die physiologische Basis-Linie zu erhalten und andererseits 30 Minuten nach dem Abnehmen der Patchs.
Die Resultate werden im Mittel der Flächen unter der Kurve ausgedrückt.
Die prozentuale Inhibierung der durch LSS hervorgerufenen Entzündung wird mit Hilfe der folgenden Formel berechnet:
% = [ASC LSS - ASC p] / [ASC LSS] 100
ASC LSS = Fläche unter der Kurve für die Lösung von LSS allein, ASC p = Fläche unter der Kurve für die Lösungen der Produkte a, b und c.
Um die Aktivität der untersuchten Produkte in dem Fall zu bestimmen, wo sie signifikant ist, wurde eine statistische Untersuchung mit Hilfe des paarigen Tests t von Student an den erhaltenen Resultaten durchgeführt. Resultate Prozentsatz der Inhibierung der durch LSS induzierten Reizung
Die klinische Untersuchung bestätigt die sehr deutliche Verstärkung (> 100 %) der anti-inflammatorischen Aktivität von durch Liposome vektorisiertem Wasser aus Avène.

Claims

1. Zusammensetzung auf der Grundlage von Heilwasser, dadurch gekennzeichnet, daß es in einem Desoxyribonucleinsäure-Gel stabilisierte Heilwässerliposome umfaßt.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die verwendete Desoxyribonucleinsäure stark polymerisiert (DNA HP) ist.

3. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie 0,1 % bis 10 % Lipide, die in der Liposomzusammensetzung vorliegen, enthält.

4. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß sie 0,1 bis 10 % DNA enthält.

5. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine assoziierte Aktivsubstanz enthält, die ein antibakterielles Mittel ist und insbesondere Phenonip, EDTA, Butyl-para-hydroxybenzoat, Sorbinsäure.

6. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß eine assoziierte Aktivsubstanz, die Vitamin E, Vitamin C, Gurkenkrautöl, Arganöl, ein Extrakt von Ginkgo Biloba ist.

7. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß das verwendete Thermalwasser insbesondere Wasser aus Cauterets oder Wasser aus Avène.

8. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 5 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Zusammensetzung 0,1 bis 3 Gew.-% der assoziierten Aktivsubstanz umfaßt.

9. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß sie einen oder mehrere für eine Verwendung in der Kosmetik, insbesondere in der Dermatologie, geeignete Vehikel umfaßt.

10. Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung, umfassend ein Liposomgel nach einem der vorangegangenen Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß es die folgenden Schritte umfaßt:

1) man stellt eine flüssige Phase, die im wesentlichen aus einer Lösung von amphiphilen Lipiden und gegebenenfalls eines der genannten assoziierten Aktivsubstanzen lipophiler Natur besteht, in einem organischen Lösungsmittel und insbesondere Ethanol, her, 2) diese Phase wird dann unter mäßigem Rühren in eine Lösung von Heilwässern, die gegebenenfalls eines der assoziierten hydrophilen Aktivsubstanzen enthält, hinzugefügt,

3) nach dem Abdampfen unter reduziertem Druck erhält man eine Suspension mit gewünschter Konzentration an Liposomen,

4) zu der voranstehenden Suspension fügt man unter moderatem Rühren die DNA.