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DE323081T1 - Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase. - Google Patents

Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase.

Info

Publication number
DE323081T1
DE323081T1 DE88311916T DE88311916T DE323081T1 DE 323081 T1 DE323081 T1 DE 323081T1 DE 88311916 T DE88311916 T DE 88311916T DE 88311916 T DE88311916 T DE 88311916T DE 323081 T1 DE323081 T1 DE 323081T1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
xba
dna
restriction endonuclease
cloning vector
vector
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
DE88311916T
Other languages
English (en)
Inventor
Cott Elizabeth Van
Geoffrey Wilson
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
New England Biolabs Inc
Original Assignee
New England Biolabs Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by New England Biolabs Inc filed Critical New England Biolabs Inc
Publication of DE323081T1 publication Critical patent/DE323081T1/de
Pending legal-status Critical Current

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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
    • C12N9/1007—Methyltransferases (general) (2.1.1.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
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  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
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Claims (9)

88311916.6 M:NE27O4A1 New England Biolabs Inc. ä ■ I Patentansprüche
1. Isoliertes DNA-Segment, welches für die Xba I Restriktionsendonuklease codiert, wobei das isolierte DNA-Segment erhältlich ist aus Xanthamonas badrii ATCC Nr. 11672.
2. Ein rekombinanter DNA-Vektor, welcher einen Vektor umfaßt, in den ein DNA-Segment eingeführt wurde, welches für die Xba I Endonuklease, hergestellt durch Xanthamonas badrii ATCC Nr. 11672.
3. Isoliertes DNA-Segment, welches für die Xba I Restriktionsendonuklease und Methylase codiert, wobei das isolierte DNA-Segment erhältlich ist aus Xanthamonas badrii ATCC Nr. 11672.
4. Ein Klonierungsvektor, welcher das isolierte DNA-Segment gemäß Anspruch 1 umfaßt.
5. Ein Klonierungsvektor, welcher das isolierte DNA-Segment gemäß Anspruch 3 umfaßt.
6. Eine Wirtszelle, welche durch den Vektor gemäß Anspruch 4 oder 5 transformiert wurde.
7. Ein Verfahren zum Klonieren von DNA, welche für eine ^
■/ ■ Xba I Restriktionsendonuklease codiert, welches umfaßt:
a) Reinigen von DNA aus Xanthamonas badrii ATCC Nr. 11672;
b) teilweise Verdauen der gereinigten DNA mit Hind III, um DNA-Fragmente zu bilden;
c) Ligieren der DNA-Fragmente in einen Klonierungsvektor;
d) Transformieren einer Wirtszelle mit dem Klonierungsvektor aus Schritt (c), um eine Zellbibliothek zu bilden;
e) Reinigen der rekombinanten Vektoren aus der Zellbibliothek, um eine Plasmidbibliothek zu bilden;
f) In-Kontakt-Bringen der Plasmidbibliothek aus Schritt (e) mit Xba I, um einen Verdauungspool zu bilden,
Übertragen des Verdauungspools in eine Wirtszelle und auf das Vorliegen eines oder mehrerer Klonierungsvektoren zu testen, welche DNA enthalten, die für eine Xba I Methylase codiert;
20
g) Testen des Klonierungsvektors aus Schritt (f), welcher DNA enthält, welche für Xba I Methylase codiert, auf das Vorliegen von DNA, welche für eine Xba I Restriktionsendonuklease codiert; und
h) Isolieren des Klonierungsvektors aus Schritt (g), welcher DNA enthält, die für Xba I Restriktionsendonuklease codiert.
8. Ein Verfahren zum Herstellen von Xba I Restriktionsendonuklease, welches das Kulivieren einer Wirtszelle umfaßt, welche mit dem Vektor gemäß den Ansprüchen 4, 5 oder 6 transformiert wurde unter den Expressionsbedingungen für die Endonuklease.
9. Ein Verfahren zum Herstellen von Xba I Restriktionsendonuklease, welches umfaßt:
a) Reinigen von DNA aus Xanthamonas badrii ATCC Nr. j 11672;
b) teilweises Verdauen der gereinigten DNA mit Hind III, um DNA-Fragmente zu bilden;
c) Ligieren der DNA-Fragmente in einen Klonierungsvektor;
d) Transformieren einer Wirtszelle mit dem Klonierungsvektor aus Schritt (c), um eine Zellbibliothek zu bilden;
e) Reinigen rekombinanter Vektoren aus der Zellbibliothek, um eine Plasmidbibliothek zu bilden;
f) In-Kontakt-Bringen der Plasmidbibliothek aus Schritt (e) mit Xba I, um einen Verdauungspool zu bilden, Übertragen des Verdauungspools in eine Wirtszelle und Testen auf das Vorliegen von einem oder mehreren Klonierungsvektoren, welche DNA enthalten, die für eine Xba I Methylase codiert;
g) Testen des Klonierungsvektors aus Schritt (f), welcher DNA enthält, die für Xba I Methylase codiert, auf das Vorliegen von DNA, welche für eine Xba I Restrxktionsendonuklease codiert.
h) Isolieren des Klonierungsvektors aus Schritt (g),
welcher DNA enthält, die für Xba I Restriktionsendo- ^. nuklease codiert; und
35
i) Kultivieren einer Wirtszelle, welche mit dem Klonierungsvektor aus Schritt (h) transformiert wurde unter Expressionsbedingungen für die Xba I Restriktionsendonuklease.
DE88311916T 1987-12-21 1988-12-16 Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase. Pending DE323081T1 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/136,093 US4983542A (en) 1987-12-21 1987-12-21 Method for producing the XbaI restriction endonuclease and methylase

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE323081T1 true DE323081T1 (de) 1994-02-24

Family

ID=22471256

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE3853145T Expired - Lifetime DE3853145T2 (de) 1987-12-21 1988-12-16 Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase.
DE88311916T Pending DE323081T1 (de) 1987-12-21 1988-12-16 Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase.

Family Applications Before (1)

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DE3853145T Expired - Lifetime DE3853145T2 (de) 1987-12-21 1988-12-16 Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase.

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4983542A (de)
EP (1) EP0323081B1 (de)
JP (1) JP2746964B2 (de)
AT (1) ATE118817T1 (de)
DE (2) DE3853145T2 (de)

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Also Published As

Publication number Publication date
JP2746964B2 (ja) 1998-05-06
EP0323081B1 (de) 1995-02-22
JPH0216979A (ja) 1990-01-19
DE3853145D1 (de) 1995-03-30
EP0323081A2 (de) 1989-07-05
US4983542A (en) 1991-01-08
ATE118817T1 (de) 1995-03-15
EP0323081A3 (en) 1990-03-07
DE3853145T2 (de) 1995-08-31

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