DE3210730C2

DE3210730C2 -

Info

Publication number: DE3210730C2
Application number: DE3210730A
Authority: DE
Inventors: Ernst 3400 Goettingen De Schuett Jun
Original assignee: FA ERNST SCHUETT JUN 3400 GOETTINGEN DE; GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE
Current assignee: FA ERNST SCHUETT JUN 3400 GOETTINGEN DE; GESELLSCHAFT fur STRAHLEN- und UMWELTFORSCHUNG MBH 8000 MUENCHEN DE
Priority date: 1982-03-24
Filing date: 1982-03-24
Publication date: 1990-06-13
Also published as: DE3210730A1

Description

Die Erfindung betrifft einen Aufsatz für einen Schüttelkolben, der als Spritzfänger und zur Auf nahme eines luft- und/oder gasdurchlässigen Verschlusses ausgebildet ist.The invention relates to an attachment for a Shake flask that acts as a splash catcher and on an air and / or gas permeable closure is trained.

Wenn aerobe Mikroorganismen in Flüssigkultur in Ge fäßen ohne Belüftungsvorrichtung - z. B. Erlenmeyerkolben mit Wattestopfen - angezogen werden, dann muß die im Kolben befindliche Flüssigkeit zum Zwecke der Belüftung in stetiger Bewegung gehalten werden. Dies wird durch eine Schüttelmaschine bewirkt. Eine für die Mikro organismen ausreichende Belüftung ergibt sich bei Schüttelfrequenzen bis zu 100 Anschlägen pro Minute (bei Linearschüttlern), wenn das Flüssigkeitsvolumen nur ¹/₁₀ vom Gesamtvolumen des Gefäßes einnimmt. Bei einem größeren Füllvolumen muß das Kulturgefäß zur ausreichenden Sauerstoffversorgung der Mikroorganis men mit einer höheren Schüttelfrequenz geschüttelt werden. Die höhere Schüttelfrequenz hat zur Folge, daß Spritzer entstehen, welche den als Sterilverschluß dienenden Wattestopfen des Kulturgefäßes befeuchten. Dadurch wird dieser als sterile Barriere unbrauchbar und zudem luftundurchlässig.If aerobic microorganisms in liquid culture in Ge vessels without a ventilation device - e.g. B. Erlenmeyer flasks with cotton plugs - are tightened, then the liquid in the flask must be kept in constant motion for the purpose of ventilation. This is done by a shaker. A micro-organisms for proper ventilation results with shaking frequencies up to 100 strokes per minute (for linear shakers) when the liquid volume is only ^_1/10 takes the total volume of the vessel. With a larger filling volume, the culture vessel must be shaken with a higher shaking frequency in order to supply the microorganisms with sufficient oxygen. The higher shaking frequency results in splashes which moisten the cotton stopper of the culture vessel, which serves as a sterile seal. This makes it unusable as a sterile barrier and also impermeable to air.

Eine Verringerung des Füllvolumens des Gefäßes führt dazu, daß die Anzahl der notwendigen Gefäße zur Anzucht einer bestimmten Menge von Mikroorganismen erhöht wer den muß und der Nutzungsgrad von Kulturgefäßen und Schüttelmaschinen verringert wird. Eine erhöhte Schüt telfrequenz, die nur bei Verwendung des Verschlusses möglich ist, bewirkt eine bessere Belüftung der Kultur, wodurch das vielfach beobachtete semi-aerobe Wachs tum der Mikroorganismen bei erhöhter Dichte vermieden wird und durch stärkeres Wachstum der Kultur erst eine vollständige Nutzung des Nährsubstrates möglich wird.A reduction in the filling volume of the vessel leads the number of vessels required for cultivation a certain amount of microorganisms increased the must and the degree of use of cultural vessels and Shaker is reduced. An increased bulk frequency only when using the shutter is possible results in better ventilation of the culture, whereby the often observed semi-aerobic wax tum of the microorganisms avoided at increased density becomes and through stronger growth of culture only one full use of the nutrient substrate becomes possible.

Aus dem DE-GM 75 34 387 ist ein Aufsatz der o. g. Art bekannt. Dieser kugelförmige Belüftungsaufsatz be sitzt jedoch einen Stutzen, mit dem er auf den Schüt telkolben aufgesetzt wird. Im Innenraum des Belüftungs aufsatzes ist der Spritzfänger untergebracht. Diese Konstruktion bewirkt eine Kopflastigkeit des Schüt telkolbens, weil einerseits die vertikale Ausdehnung der Schüttelkolben-Belüftungsaufsatz-Anordnung durch den Aufsatz erheblich erhöht wird und andererseits der Belüftungsaufsatz sätmliche benetzungsverhindern den Konstruktionsteile aufweist und somit schwerge wichtig wird. Zumindest bei hohen Schüttelfrequenzen besteht somit die Gefahr des Abscherens des Belüftungs aufsatzes.From DE-GM 75 34 387 is an article of the above. Art known. This spherical ventilation attachment be however sits a nozzle with which he is on the dump telkolben is placed. Inside the ventilation the splash guard is housed. These Construction causes the bulk to be heavy telkolbens, because on the one hand the vertical expansion the shake flask ventilation arrangement the essay is increased significantly and on the other hand the ventilation attachment prevents all wetting has the construction parts and thus heavily becomes important. At least at high shaking frequencies there is therefore a risk of the ventilation being sheared off essay.

Die der Erfindung gestellte Aufgabe besteht darin, einen Aufsatz für Mikroorganismen-Kulturgefäße zu finden, der verhindert, daß Flüssigkeitsspritzer aus der Nährlösung beim Schütteln den sterilen Verschluß des Gefäßes erreichen, aber gleichzeitig der Zustrom von Luft nicht behindert wird und zusätzlich den Ein satz anderer gasdurchlässiger Sterilabschlüsse (als Wattestopfen) ermöglicht. The object of the invention is an essay for microorganism culture vessels find that prevents liquid splashes from the sterile closure of the nutrient solution when shaken of the vessel, but at the same time the inflow is not hindered by air and additionally the one set of other gas permeable sterile seals (as Cotton plug).

Die Lösung dieser Aufgabe ist in den kennzeichnenden Merkmalen des Anspruches 1 beschrieben.The solution to this problem is in the characteristic Features of claim 1 described.

Die übrigen Ansprüche geben vorteilhafte Weiterbil dungen der Erfindung wieder.The other claims give advantageous further education end of the invention again.

Ein Vorteil der Erfindung besteht darin, daß der Schwerpunkt der Anordnung nach unten verlagert wurde und ein Abscheren des Spritzfängers bei hohen Schüt telfrequenzen nicht möglich ist. Weiterhin wurde da durch die Gesamthöhe des mit dem Spritzfänger verse henen Gefäßes wesentlich reduziert, so daß jetzt eine Sterilisierung in laborüblichen Tischautoklaven möglich ist und das Kulturgefäß in Schüttelmaschinen mit Kastenaufsätzen verwendet werden kann.An advantage of the invention is that the The focus of the arrangement was shifted down and shear off the splash guard at high bulk telfrequencies is not possible. Furthermore there was by the total height of the verse with the splash guard hens vessel significantly reduced, so that now sterilization in standard laboratory autoclaves is possible and the culture vessel in shaking machines can be used with box attachments.

Die Erfindung wird im folgenden anhand eines Aus führungsbeispiels mittels der Figur näher erläutert.The invention is based on an off management example explained in more detail by means of the figure.

Die Figur zeigt im Schnitt einen Aufsatz, der aus einem Rohrstutzen 11 besteht, der in den Schüttel kolben 4 bzw. das Kulturgefäß hineinragt. Auf einem Teil seiner Mantelfläche sind drei parallel zueinan der liegende O-Ringdichtungen 1 in Nuten 12 gehaltert. Diese dichten den Rohrstutzen 11 im aufgesetzten Zustand gegenüber dem Hals 13 des Schüttelkolbens 4 ab. Im Innern des Rohrstutzens 11 befinden sich z. B. zwei Prallflächen 2, die schräg zu jeweils einer Querschnittsebene durch den Rohrstutzen 11 nach unten weisend in unterschiedlichen Höhen zueinander angeordnet sind. Sie beanspruchen jeweils zumindest den halben Rohrdurchmesser und sitzen jeweils um ca. 180° zueinander versetzt auf dem Innenmantel.The figure shows in section an essay, which consists of a pipe socket 11 , the piston 4 projects into the shaker or the culture vessel. On part of its outer surface, three O-ring seals 1 lying parallel to each other are held in grooves 12 . These seal the pipe socket 11 in the mounted state against the neck 13 of the shaking piston 4 . Inside the pipe socket 11 are z. B. two baffles 2 , which are arranged obliquely to each cross-sectional plane through the pipe socket 11 facing downward at different heights to each other. They each occupy at least half the pipe diameter and are each offset on the inner jacket by approximately 180 ° to one another.

Der Aufsatz wird in den Hals 13 des Mikroorganis men-Kulturgefäßes - hier ein Erlenmeyerkolben - einge schoben und dort durch vier O-Ringe 1 festgehalten. Diese O-Ringe 1 sind so dimensioniert, daß sie die fertigungsbedingten Abweichungen in der Kolbenhals weite überbrücken. Der Rohrstutzen 11 ist unten ab geschrägt 5, um das Abtropfen der aus dem Rohr kommenden Flüssigkeiten zu erleichtern.The attachment is inserted into the neck 13 of the microorganism culture vessel - here an Erlenmeyer flask - and held there by four O-rings 1 . These O-rings 1 are dimensioned such that they bridge the manufacturing-related deviations in the piston neck. The pipe socket 11 is chamfered from 5 below to facilitate the draining of the liquids coming from the pipe.

Der Rohrstutzen 11 ragt am unteren Ende 5 etwa in den Kolbenraum 8 hinein, um bereits hier einen Teil der Spritzer aus der Kulturflüssigkeit 6 abzufangen. Der Weg vom Innenraum 8 des Kulturgefäßes 4 zum sterilen Verschluß 3 im Oberteil 14 des Rohrstutzens 11 ver läuft innerhalb des Rohres, vorbei an den zwei Prall flächen 2. Hier werden die restlichen Spritzer ab gefangen. Die Prallflächen 2 besitzen Einkerbungen oder Löcher 15 entlang einer Rohrachse, welche die Durchführung und das Festhalten einer Kanüle 16 er möglichen, die durch den Wattestopfen 3 in die Kul turflüssigkeit 6 eingeführt werden kann. Dadurch ist eine Probenentnahme aus der Mikroorganismenkul tur 6 ohne Entfernung des Verschlusses 3 möglich. Der Aufsatz besitzt außen an der Oberseite einen um laufenden Rand 7, der zusammen mit einem weiteren O-Ring 10 den Hals 13 des Kulturgefäßes 4 vor Kontamination schützt, so daß dieser Teil der Ge fäßöffnung nach Abnahme des Aufsatzes keine Konta mination der auszugießenden Kulturflüssigkeit 6 verursachen kann. Weiterhin dient der Rand 7 der Handhabbarkeit des Rohrstutzens 11 beim Auf- und Absetzen. Im Bereich des Randes 7 befindet sich im Inneren des Rohres eine Kerbe 9 oder ein Vorsprung zur Aufnahme einer Fritte oder ähnlichem sterilen Verschluß, welcher einen Wattestopfen 3 überflüssig macht.The pipe socket 11 protrudes at the lower end 5 approximately into the piston chamber 8 in order to catch some of the splashes from the culture liquid 6 here . The path from the interior 8 of the culture vessel 4 to the sterile closure 3 in the upper part 14 of the pipe socket 11 runs within the pipe, past the two baffles 2 . The remaining splashes are caught here. The baffles 2 have notches or holes 15 along a tube axis, which allow the implementation and holding of a cannula 16 , which can be introduced into the liquid 6 through the cotton plug 3 . This makes it possible to take samples from the microorganism culture 6 without removing the closure 3 . The cap has outside on top of one to running edge 7, further together with an O-ring 10 to the neck 13 of the culture vessel 4 from contamination, so that this part of Ge fäßöffnung after acceptance of the article not conta mination of Allowance must be culture liquid 6 can cause. Furthermore, the edge 7 is used to handle the pipe socket 11 when putting it on and taking it off. In the area of the edge 7 there is a notch 9 or a projection for receiving a frit or similar sterile closure in the interior of the tube, which makes a cotton plug 3 unnecessary.

Die Anordnung dient demnach der Verhinderung der Benetzung von luft- oder gasdurchlässigen sterilen Verschlüssen an Mikroorganismen-Kulturgefäßen mit flüssigen Kulturmedien, die stetig geschüttelt werden, dadurch daß ein außen mit O-Ringen 1, 10 versehener Rohrstutzen 11 in die obere Öffnung des Mikroorganismen-Kulturgefäßes 4 eingeschoben wird. Am oberen Ende 14 des Rohrstutzens 11 befindet sich der vor Benetzung zu schützende Sterilverschluß 3. Die Benetzung des Sterilverschlusses 3 durch Spritzer aus der Kulturflüssigkeit 6 wird durch die zwei im Rohrinneren schräg nach unten weisen den Prallflächen 2 verhindert. Der Gasaustausch zwischen dem Luftraum im Gefäß 4 und dem Luft raum außerhalb des Gefäßes 4 wird dadurch nicht behindert, so daß die Prallflächen 2 nur jeweils die Hälfte des Rohrdurchmessers einzunehmen brau chen. Die Spritzer aus der Kulturflüssigkeit 6 werden vornehmlich von dem in das Gefäß hinein ragende Rohrende 5 abgefangen.The arrangement therefore serves to prevent the wetting of air or gas-permeable sterile closures on microorganism culture vessels with liquid culture media which are continuously shaken, in that a pipe socket 11 provided on the outside with O-rings 1, 10 into the upper opening of the microorganism culture vessel 4 is inserted. The sterile closure 3 to be protected against wetting is located at the upper end 14 of the pipe socket 11 . The wetting of the sterile closure 3 by splashes from the culture liquid 6 is prevented by the two baffles 2 pointing obliquely downward in the tube interior. The gas exchange between the air space in the vessel 4 and the air space outside the vessel 4 is not hindered by this, so that the baffles 2 only take up half of the tube diameter. The splashes from the culture liquid 6 are primarily intercepted by the tube end 5 protruding into the vessel.

Claims

1. Attachment for a shake flask, which is designed as a splash catcher and for receiving an air and / or gas permeable closure, characterized by

a) a cylindrical, in the shaking flask ( 4 ) protruding pipe socket ( 11 ) with an applied on its outer surface, opposite the opening ( 13 ) of the shaking piston ( 4 ) we kenden seal ( 1, 10 ),
b) baffles (2) that are inside of the pipe socket (11) obliquely with respect to cross-sectional planes of the pipe socket (11) and ken the cross-section of the pipe socket (11) at least überdec to half, and
c) an oblique formation in the Schüttelkol ben ( 4 ) protruding pipe socket end ( 5 ).

2. An attachment according to claim 1, characterized in that the baffles ( 2 ) are each offset by approximately 180 ° to one another with respect to the pipe socket axis and are inclined towards the pipe socket end ( 5 ).

3. An attachment according to claim 1 and 2, characterized in that the end ( 14 ) of the pipe socket ( 11 ) protruding from the shaking flask ( 4 ) is provided for receiving the closure ( 3 ).

4. Attachment according to claim 1 or one of the following, characterized in that a circumferential edge ( 7 ) is attached to the pipe socket upper surface, which is designed as a turning aid.

5. An attachment according to claim 1 or one of the following, characterized in that the seal ( 1, 10 ) consists of a plurality of parallel circumferential sealing rings which are held in grooves ( 12 ).

6. An attachment according to claim 1 or one of the following, characterized in that holes ( 15 ) are provided in the baffles ( 2 ), which are aligned lying on a common axis.