DE2910509A1

DE2910509A1 - Teilchenfoermiges material fuer medizinische zwecke, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung als arzneimittel

Info

Publication number: DE2910509A1
Application number: DE19792910509
Authority: DE
Inventors: Marie-Claude Mynard; Jean-Louis Tayot
Original assignee: Institut Merieux SA
Current assignee: Institut Merieux SA
Priority date: 1979-03-16
Filing date: 1979-03-16
Publication date: 1980-09-25

Description

Teilchenförmiges Material für medizinische Zwecke
Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung als Arzneimittel Beschreibung Die Erfindung betrifft ein teilchenförmiges Material für medizinische Zwecke, ein Verfahren zu dessen Herstellung und dessen Anwendung als Arzneimittel, insbesondere für die orale Verabrechung.
Gegenstand der älteren Patentanmeldung P 28 40 506.3 ist ein teilchenförmiges Material aus Trägermaterialteilchen, die mit einer Schicht aus einem Gangliosid oder einem Gangliosidderivat mit einer Affinität gegenüber Choleratoxin ausgerüstet ist, sowie eine zweite Schicht aufweist, die aus dem Choleratoxin besteht. Diese Kombination wurde als wirksam zur Hervorrufung einer Immunität, insbesondere wegen der Bildung von Cholera-Antitoxin-Antikörpern, gegen Cholera gefunden.
Es wurde nun gefunden, daß bereits die mit einer Schicht aus einem Gangliosid oder Gangliosidderivat umhüllten Trägermaterialteilchen ein sehr wirksames Arzneimittel gegen Diarrhö und diese erzeugenden Bakterien sind, wenn die Kombination aus Trägermaterialteilchen und Gangliosid bzw. Gangliosidderivat gegenüber den Toxinen von Diarrhö erzeugenden Bakterien, insbesondere Choleratoxin, eine Affinität aufweist.
Besonders geeignet ist das Gangliosid GM1, das durch Absorption auf geeigneten Trägermaterialteilchen, vorzugsweise Aktivkohle, soweit unlöslich gemacht ist, daß es im Magen-Darmtrakt nicht adsorbiert oder absorbiert wird, wohl aber in der Lage ist, die genannten Toxine an sich zu binden.
Diese Bedingung wird nicht von allen Trägermaterialteilchen bzw. Kombinationen von diesen mit dem Gangliosid oder dem Gangliosidderivat erfüllt.
Es müssen vielmehr noch aktive Stellen vorhanden sein, die zur Neutralisation des Toxins erforderlich sind.
Insbesondere geeignete Trägermaterialteilchen sind solche von Aktivkohle entsprechend der Normen, die für die therapeutische Anwendung gelten. Brauchbar sind daneben auch andere unlösliche Teilchen, insbesondere von saugfähigen bzw. absorptionsfähigen Mineralien, beispielsweise Siiiciumdioxid, Aluminiumoxid, Magnesiumoxid, Titandioxid sowia synthetisch erzeugte oder natürlich vorkommende, diese enthaltende Mineralien, Gläser, Tone, wie Kaolin, auch Latex, gegebenenfalls modifizierte Cellulose.
Wie sich gezeigt hat, sind diese Kombinationen gemäß der Erfindung bei oraler Verabreichung absolut verträglich und zeigen eine große irreversible Affinität gegenüber dem Gangliosid, welches in erster Linie zur Bindung der Toxine dient.
Von den verschiedenen Gangliosiden hat insbesondere das Gangliosid 91 sowie bestimmte Derivate davon eine Affinität gegenüber bakteriellen Toxinen, die Diarrhö und insbesondere Cholera erzeugen. Hierzu gehören außer dem Gangliosid GMq auch das Lysogangliosid GM1 r das durch alkalische Hydrolyse des erstgenannten Gangliosids erhalten wird, sowie auch Produkte einer partiellen oder vollständigen Hydrolyse der N-Acylgruppen oder N-Acetylgruppen zu Aminogruppen, oder auch mit Säuren behandelte Ganglioside. Die Herstellung und Reinigung solcher Ganglioside ist in der DE-OS 26 33 246 beschrieben wie wie vor vornehmlich durch EsetlerichiaFoli hervorgerufen wird Das erfindungsgemäße teilchenförmige Material ist ungewöhnlich stabil, selbst bei erhöhter Temperatur und kann beispielsweise 2 Monate bei 500C aufbewahrt werden. Es widersteht einer Behandlung mit Säuren und kann sogar in einem wässrigen sauren Milieu gekocht werden, ohne zu zersetzen. Auch gegenüber Salzen der Gallensäure ist das Material stabil. Die Bindung wird erst durch mindestens 1-stündiges Kochen in einem Gemisch aus Chloroform, Methanol und Wasser gelöst. Die mit dem Gangliosid oder Gangliosidderivat umhüllten Teilchen des erfindungsgemäßen Materials können als Arzneimittel, insbesondere auch im Gemisch mit Antiseptica für den Verdauungstrakt (Benzonaphtnl, Hexamin, Chinolin), Antibiotica, Antispasmolytica und obeflächenaktiven physiologischen Substanzen einzeln oder in beliebigen Kombinationen vermischt werden, damit gegebenenfalls zusätzliche Wirkungen, insbesondere eine bessere Verteilung im Verdauungstrakt erzielt wird. Das teilchenförmige Material wird in der Regel zusammen mit üblichen Exzipienten, die das Gangliosid bzw. Gangliosidderivat nicht beeinträchtigen, verwendet, sofern dies für nötig gehalten wird. Insbesondere wird das teilchenförmige Material als solches oder mit einem weiteren Zusatz von Aktivkohle oder ähnlichen neutralen Exzipienten zu Tabletten oder anderen Preßkörpern für die therapeutische orale Verabreichung gepreßt. Das teilchenförmige Material kann jedoch auch in Form von Granulat, in Form trinkbarer Suspensionen oder in Form weicher Kapseln verarbeitet und als Arzneimittel angewendet werden.
Die Menge an den Träger fixiertes Gangliosid bzw. dessen Derivat beträgt vorzugsweise 3 - 10 Mikromol je Gramm Träger. Im Arzneimittel beträgt diese Menge 0,1 bis 2G, vorzugsweise 0,1 bis 10 Mikromol jo Gramm Zubereitung.
Für die Prophylaxe werden 2 bis 50 Mikromol, für die Therapie 10 bis 200 Mikromol Gangliosid oder dessen Derivat täglich verabreicht.
Die herstellung des erfindungsgemäßen teilchenförmigen Materials erfolgt durch Fixierung des Gangliosids bzw.
dessen Derivats an die Trägerteilchen, was durch chemische Methoden (Kupplung) oder physikalische Methoden (Adsorption) erfolgen kann.
Im bevorzugten Fall der Bindung an Aktivkohle genügt das Kontaktieren einer Gangliosidlösung mit dem Träger.
Beispiel 1 Es wird aus Kalbshirn bzw. Rinderhirn ein wässriger Gangliosidextrakt hergestellt (vgl. L. Svennerholm Gangliosides, Isolation" in Methode in Carbohydrate Chemistry" Band 6, Herausgeber R.L. Whister und J.N.
Bemiller, Academic Press, New York, 1972).
Der Extrakt wird chromatographisch von den Gangliosiden getrennt unter gleichzeitiger Reinigung der Ganglioside.
Hierzu wird ca. 7 1 des Extrakts auf eine Säule aufgegeben, die 50g eines Trägermaterials enthält, das aus Siliciumdioxidpulver mit einer spezifischen Oberfläche von 50m2/g besteht, welches mit einer aminierten Polysacderidpolymeren-Lösung vom pH 8 - 13 imprägniert und anschließend getrocknet wurde. Das getrocknete Pulver war anschließend mit einer 0,158-igen Lösung von 1,4-Butandioldiglycidyläther in Äthyläther bei 400C imprägniert worden.
Die mit diesem Präparat gefüllte Säule wurde mit einer Pufferlösung in Form einer 0,05-molaren Lösung von TRIS-(hydroxymethyl)--aminomethan und Salzsäure vom pH-Wert 6,8 äquilibriert. Die Durchlaufgeschwindigkeit betrug 200 cm3/cm2/h. Das Auswaschen des auf der Säule fixierten Gangliosids wurde mit einer Pufferlösung aus 0,5-molarer Kaliumacetatlösung in Methanol durchgeführt.
Das Eluat wurde mit Aktivkohle (CECA, Qualität WL3S) in einer Menge von 1 g Kohle auf 10 Mikromol Gangliosid vermischt. Nach dem Zentrifugieren und Waschen wurde das erfindungsgemäße Trägermaterial einer sauren Hydrolyse bei 800C unterworfen. Hierdurch wurde der größte Teil der auf der Kohle fixierten Polysialoganglioside in Monosialoganglioside (GM1) überführt. Das Pulver wurde gewaschen und getrocknet und danach gegebenenfalls in eine pharmakologische Anwendungsform gebracht.
Beispiel 2 Es wurde ein Arzneimittel folgender Zusammensetzung hergestellt: Gangliosid GMI auf Aktivkohlepulver gemäß Beispiel 1 100 g Puderzucker 740 g Zuckersirup 250 g Der Puderzucker wurde mit dem Kohlepulver in einem Mörser verrieben. Der Sirup wurde allmählich zugegeben, bis eine Paste erhalten wurde, welche beim Durchgehen durch ein entsprechendes Sieb ein Granulat ergab. Dieses Granulat war als Mittel gegen Cholera gut brauchbar.
Be.ispiel 3 Es wurde ein Arzneimittel wie folgt hergestellt: Pulver aus Gangliosid GMl und Aktivkohle 50 g Saccharose 44 g Gummi arabikum 6g Das Kohlepulver wurde unter Rühren mit einem Sirup vermahlen, der aus 70 g destilliertem Wasser, 44 g Saccharose und 6 g Gummiarabikum bestand. Die erhaltene Paste wurde granuliert und bei 50°C getrocknet. Anstelle von Gummiarabikum als Gleitmittel können auch andere gelatinierte Stärkepräparate des Handels verwendet werden.
Beispiel 4 Es wurde ein Arzneimittel wie folgt hergestellt: Gangliosid GMl auf Holzkohle gemäß Beispiel 1 40 g Saccharose 54 g vorgelatinierte Maisstärke 6g Das auf die Aktivkohle aufgebrachte Gangliosid wurde in einem Mörser mit einem Sirup vermischt, der aus 60 cm3 destilliertem Wasser, 54 g Saccharose und 6 g gelatinierter Maisstärke bestand. Die Paste wurde granuliert und das Granulat bei 500C etwa 1 Stunde unter Belüftung getrocknet. Das Granulat wurde in noch feuchtem Zustand zu Tabletten verpreßt und bei 500C 18 Stunden getrocknet. Es wurden sehr harte und zerbrechliche Körner erhalten, deren Spaltbarkeit den Vorschriften der Französischen Pharmacopee, 9. Auflage entsprach.

Claims

Patentansprüche 1. Teilchenförmiaes Material für medizinische Zwecke aus Trägermaterial, das mit einer Schicht aus einem Gangliosid oder einem Gangliosidderivat mit einer Affinität gegenüber Choleratoxin ausgerüstet ist, sowie eine zweite Schicht aufweist, die aus dem Choleratoxin besteht, nach Patent (Patentanmeldung P 28 40 506.3), dadurch g e k e n n z e i c h n e t daß es nur die erste Schicht auf Trägermaterialteilchen aufweist, wobei die Kombination gegenüber Toxinen von Diarrhö erzeugenden Bakterien, insbesondere Choleratoxin, eine Affinität aufweist.
2. Teilchenförmiges Material nach Anspruch 1, dadurch g e k e n n z e i c h n e t , daß das Gangliosid oder Gangliosidderivat ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Gangliosid GM1, Lysogangliosid GMl, partielle Hydrolyseprodukte des Gangliosids GM1 sowie Mono-oder a-sialo Ganglioside, die Produkte einer Säurebehandlung der Ganglioside oder ihrer Derivate sind.
3. Teilchenförmiges Material nach Anspruch 1 und 2, dadurch g e k e n n z e i c h n e t , daß die Trägermaterialteilchen aus Aktivkohle, Latex, ggf. modifizierter Cellulose, porösen mineralischen Trägern und davon abgeleiteten Stoffen, wie Gläsern, Silicaten, Tonen bestehen.
4. Teilchenförmiges Material nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch g e k e n n z e i c h n e t , daß es je Gramm Trägermaterialteilchen 1 bis 20 Mikromol Ganglioside oder Gangliosidderivat enthält.
5. Teilchenförmiges Material nach Anspruch 4, dadurch g e k e n n z e i c h n e t , daß es je Gramm Trägermaterialteilchen 3 bis 10 Mikromol Gangliosid oder Gangliosidderivat enthält.
6. Verfahren zur Herstellung von teilchenförmigem Material nach den Ansprüchen 1 bis 5, dadurch g e k e n n -z e i c h n e t , daß man das teilchenförmige Trägermaterial an das Gangliosid oder Gangliosidderivat fixiert.
7. Verwendung des teilchenförmigen Materials gegebenenfalls in Verbindung mit üblichen Exzipienten sowie gegebenenfalls mit einem oder mehreren anderen Arzneimitteln, die aus der Gruppe der Antiseptica für innere Anwendung, Antibiotica und Antispasmolytica ausgewählt sind, als Arzneimittel insbesondere für die orale Verabreichung.
8. Verwendung nach Anspruch 7 in einer Form, die 0,1 bis 20 Mikromol Gangliosid oder dessen Derivat je Gramm Zubereitung enthält.