DE2752029A1 - ELECTROPHORESIS DEVICE - Google Patents
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Description
«45 HANAU · RnMERSTR. 1» · POSTFACH 7W · TEL tOMM» Μ·Μ/1β?«0· TEUXj 41M7U|»t · TELEGRAMME: HANAUPATENT«45 HANAU · RnMERSTR. 1 »· POST BOX 7W · TEL tOMM» Μ · Μ / 1β? «0 · TEUXj 41M7U |» t · TELEGRAMS: HANAUPATENT
NATIONAL AERONAUTICS ANDNATIONAL AERONAUTICS AND
SPACE ADMINISTRATIONSPACE ADMINISTRATION
NASA Headquarters 21. November 1977NASA Headquarters November 21, 1977
Washington, D.C, U.S.A. Bm/Ml - 11 603Washington, D.C, U.S.A. Bm / Ml - 11 603
(6043146 US)(6043146 US)
E lektrophorese-Ei nrichtungElectrophoresis device
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine Elektrophorese-Einrichtung mit einem Behälter für Elektrolytlösung und einer Einrichtung zum Halten eines Probenträgers. Dabei soll insbesondere Antiserum einer Membran oder einem Gel zugeführt werden.The present invention relates to an electrophoresis device with a container for electrolyte solution and one Device for holding a sample carrier. In particular Antiserum can be applied to a membrane or a gel.
Frühere Elektrophorese-Einrichtungen verwenden Zelluloseazetat als Träger für die Proben, die voneinander getrennt und analysiert werden sollen. Dabei wird eine gesteuerte Dehnvorrichtung verwendet, um die Membran gespannt und parallel zur Basis der Einheit zu halten, ohne daß die Mitte der Membran unterstützt würde. Diese Anordnung verhindert ein Flüssigkeitsbecken und sorgt für ein gleichförmiges Mischungsverhältnis auf der Membran. Die bekannten Einrichtungen sehen weiterhin eine Anzeigeeinrichtung vor, die halbautomatisch arbeitet, um individuell acht Proben in einer Reihe in einer von drei verschiedenen Lagen relativ zur Kathode und Anode auf die Membran aufzubringen, und sie gleichzeitig der Elektrophorese ζ u unte rz i ehen .Previous electrophoresis equipment used cellulose acetate as a carrier for the samples that are to be separated from one another and analyzed. A controlled stretching device is used, to keep the diaphragm taut and parallel to the base of the unit without supporting the center of the diaphragm. This arrangement prevents a liquid pool and ensures a uniform Mixing ratio on the membrane. The well-known facilities continue to provide a display device that is semi-automatic works to individually eight samples in a row in one of three different positions relative to the cathode and anode apply the membrane, and electrophoresis at the same time ζ u unte rz i ehen.
Ein Nachteil dieser Anordnung ist es, daß die Vorrichtung zum Halten der Proben in einem Zeitpunkt lediglich die Proben "eins" liefert, was zeitraubend ist und die ersten zugeführten Proben einer örtlichen Diffusion und Beweglichkeit infolge von ιonvektionsströmen während der Zeit aussetzt, in der nachfolgende Proben zugeführt werden. Dieser Nachteil wird problematisch, wenn bei der vergleichenden Elektrophorese von unbekannten Substanzen eine hohe Auflösung notwendig ist. 809823/0631 A disadvantage of this arrangement is that the device for holding the samples at a time only supplies the samples "one", which is time-consuming and exposes the first samples to local diffusion and mobility due to convection currents during the time in which subsequent samples are fed. This disadvantage becomes problematic when a high resolution is necessary in the comparative electrophoresis of unknown substances. 809823/0631
'■3O0O/5W - 6 -'■ 3O0O / 5W - 6 -
NASA . . . (11 603)NASA. . . (11 603)
Ein Beispiel einer derartigen EIektrophorese-Eiηrichtung ist im US-Patent 3 317 418 beschrieben, das am 2. Mai 1967 herausgegeben wurde.An example of such an electrophoresis device is in U.S. Patent 3,317,418, issued May 2, 1967 became.
Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, die Nachteile der obengenannten, bekannten Elektrophorese-Einrichtungen zu vermeiden, und eine rasche, einfache und zuverlässige Elektrophorese mit hoher Auflösung zu erzielen.The present invention is based on the object Disadvantages of the above-mentioned, known electrophoresis devices and achieve fast, simple, and reliable high-resolution electrophoresis.
Die Aufgabe wird erfindungsgemäß durch die Merkmale des kennzeichenden Teiles des Anspruches 1 gelöst. Weitere Ausgestaltungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen dargestellt.The object is achieved according to the invention by the features of characterizing part of claim 1 solved. Further refinements of the invention are set out in the subclaims.
Erfindungsgemäß ist eine integrierte Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben vorgesehen, außerdem ein Elektrolytbehälter und eine Abdeckung, sowie ein Meh r f ach-Probe n-Ha I t· ·. Die Vorrichtung ist so ausgelegt, um mehrere Proben aus entsprechenden Behältern im Probenhalter aufzunehmen, als ob es sich nur um eine einzige Probe handeln würde. Die Vorrichtung zum Aufnehmen mehrerer Proben hat einen zentralen Auslöseknopf, dessen Niederdrücken zur Folge hat, daß die Behältermündungen einer Anzahl von Probenbehältern die Oberfläche der Flüssigkeit im Probenhalter berühren und infolge von Kapillarwirkung anfüllen. Der Probenbehälter wird dann auf die EIektro IytzeI I en-Abdeckung platziert, so daß er in einen vorher bestimmten Schlitz oder Stelle in Bezug zu den Elektroden hineinpaßt. Al Ie Proben werden dann in einer einzigen Bewegungdurch Niederdrücken des zentralen Auslöseknopfes übertragen. Die Behä I te rmü η dunq ■■» η der Probenbehälter fal len frei und unabhängig voneinander auf die Membrane oder das Gel bzw. in den Elektrolytbehälter.According to the invention is an integrated device for holding several Samples provided, also an electrolyte container and a cover, as well as a multiple sample n-Ha I t · ·. The device is designed to collect multiple samples from appropriate containers in the sample holder as if it were just a single one Would act sample. The device for taking multiple samples has a central release button, which is depressed as a result has that the container mouths of a number of sample containers touch the surface of the liquid in the sample holder and fill it up due to capillary action. The sample container will then placed on the electrical IytzeI en cover so that he fits into a predetermined slot or location in relation to the electrodes. Al Ie samples are then in a single movement by depressing the central release button transfer. The containers η dunq ■■ »η of the sample containers fall free and independently of one another on the membrane or the gel or in the electrolyte container.
Jeder der Probenbehälter kann unabhängig vom anderen niedergedrückt werden, so daß steigende Beträge einer gegebenen Probe auf den gleichen Fleck abgelagert werden können, was für den FaI I einer sehr niedrigen Konzentrati π des gelösten Stoffes erforderlich sein könnte. Da rüberhina us kann jede der Behälter-Each of the sample containers can be depressed independently of the other so that increasing amounts of a given sample can be deposited on the same spot, whatever the If a very low concentration of the solute is required could be. Any of the container
809823/0631 - ι -809823/0631 - ι -
NASA . . .NASA. . .
mündungen -urch Behä I termündunger. einer höheren Volumenkapazität ersetzt werden, oder die Behältermündungen können an verschiedenen Lagen eingeführt werden, um längere Zonen der Anwendung der Probe zu e rre i chen·mouths -through container mouths. a higher volume capacity be replaced, or the container mouths can be on different Layers are introduced to cover longer zones of application of the sample to reach·
Durch die Probenbehälter wird die Notwendigkeit der früheren Schlitzausbildung überflüssig; man kann das Gel durchschneiden und alle Proben bei einem einzigen Vorgang übertragen.The sample container eliminates the need for the earlier Slot formation unnecessary; you can cut through the gel and transfer all samples in a single operation.
Die Zellenabdeckung hat derartige Schlitze, daß die Proben in einer Anzahl von festen Lagen angeordnet werden können, die in gleichen Abständen zwischen Kathode und Anode angeordnet sind. So ist es möglich, eine Anzahl von Proben zu gleicher Zeit der Elektrophorese zu unterziehen, indem man die entsprechenden Schlitze längs der Ze I I abdeckung auswählt.The cell cover has slots in such a way that the samples can be inserted into a number of solid layers can be arranged, which are arranged at equal distances between the cathode and anode. It is thus possible to electrophoresis a number of samples at the same time by using the appropriate Selects slots along the Ze I I cover.
Der ProbenhaIter wirkt mit der Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben zusammen und enthält eine Anzahl von Reihen, die Behälter entsprechend der Anzahl der Vorrichtungen zum Halten mehrerer Proben enthalten. Dabei werden zur Verfügung stehende Kapillare verwendet, um die Behälter mit frischen Proben zu beladen. Vor dem Füllen der Behälter werden die Elektrophoresezellen so eingestellt, daß sie die geeigneten, für die Bestimmung der gewünschten BestandteiΊe benötigten Puffer enthalten, und jede Zelle wird entsprechend beschriftet. Der Probenbehälter wird dann dazu verwendet, um die verschiedenen individuellen Proben vom Hai'er aufzunehmen und alle gleichzeitig auf die Trägermembran an die vorbestimmte Stelle zu übertragen, die entweder der negativen oder der positiven Elektrode näher liegt.The sample holder works with the device to hold several Samples together and contains a number of rows holding containers corresponding to the number of devices multiple samples included. Available capillaries are used to load the containers with fresh samples. Before filling the container, the electrophoresis cells adjusted to contain the appropriate buffers needed to determine the desired ingredients, and each Cell is labeled accordingly. The sample container is then used to collect the various individual samples from Hai'er and all at the same time on the support membrane to transfer the predetermined location that is closer to either the negative or the positive electrode.
Die Erfindung wird im folgenden anhand der Zeichnung näher erläutert, Es ze i gen:The invention is explained in more detail below with reference to the drawing, Show it:
Fig. 1 einen Längsschnitt längs einer Linie parallel zur Scheidewand (23) von Fig. 2 E,1 shows a longitudinal section along a line parallel to the partition (23) of FIG. 2 E,
809823/0631 - 8 -809823/0631 - 8 -
( 1 1 603)(1 1 603)
Fig. 2A - 2E vergrößerte Aufrisse der Elektrophorese-Einrichtung von Fig. 1 , wobei die Vorrichtung zum Holten "lehrerer Proben, der PIeχigI as decke I , der Zwischendeckel, der Membranhalter und der Behälter für die Elektrolytlösung dargestellt sind,Figures 2A-2E are enlarged elevational views of the electrophoresis equipment of Fig. 1, wherein the device for collecting "teacher samples, the PIeχigI as ceiling I, the intermediate cover, the membrane holder and the container for the electrolyte solution are shown,
Fig. 3 eine Draufsicht auf die in Fig. 2C gezeigteFigure 3 is a top plan view of that shown in Figure 2C
Abdeckung,Cover,
Fig. 4 A und eine Draufsicht und einen Aufriß einesFig. 4A and a plan view and an elevation of one
BB.
Probenhalters, der bei der Vorrichtung gemäßSample holder, which in the device according to
Fig. 2A verwendet werden kann,Fig. 2A can be used
Fig. 5 A und eine Draufsicht und eine Seitenansicht einerFig. 5A and a plan view and a side view of a
temperaturgesteuerten Platte zur Verwendung bei der Vorrichtung gemäß Fig. 1 und 2,temperature controlled plate for use in the device according to FIGS. 1 and 2,
Fig. 6 A und eine Detai I ansich1 und die Ansicht des EndesFig. 6 A and a Detai I ansich1 and the view of the end
ft R ft R
einer Behältermündung gemäß Fig. 2 A,a container mouth according to FIG. 2A,
Fig. 7 A und eine Vorderansicht, bzw. ein Längsschnitt einerFig. 7A and a front view or a longitudinal section of a
RR.
der in Fig. 2E dargestellten Elektroden,the electrodes shown in Fig. 2E,
Fig. 8 eine Vorderansicht des in Fig. 2E dargestelltenFigure 8 is a front view of that shown in Figure 2E
Behälters mit der temperaturgesteuerten Platte von Fig. 5A an der vorgesehenen Stelle,Container with the temperature-controlled plate of Fig. 5A at the intended location,
Fig. 9 eine Draufsicht auf die in Fig. 1 gezeigteFIG. 9 is a top plan view of that shown in FIG
Einrichtung, wobei die elektrische Verbindung zu den Elektroden dargestellt ist, undDevice showing the electrical connection to the electrodes, and
Fig. 10 eine Darstellung verschiedener Proben auf10 shows a representation of various samples
einer Membran, wobei die erfiηdungsgemäße Einrichtung verwendet wird.a membrane, the according to the invention Facility is used.
809823/0631809823/0631
Nasa ... ?7R?n?qNasa ...? 7R? N? Q
(116 03) ά I Dt. OL Ό (116 03) ά I German OL Ό
In dor Zeichnung enthält eine Elektrophorese-Einrichtung einen BehJlter 10 für eine Elektrolytlösung. Innerhalb des Behälters sind feste Umlenkplatten 19, -.ritfernbare Umlenkplatten 24, eine Scheidewand 23 und Rahmenelektroden 26, 2Γ'· angeordnet, die sich von Schlitzen in der Innenwand 3 bis zu Schlitzen in der Innenwand 9 erstrecken. Ein Membranhalter 14 sitzt auf der Scheidewand 23 und auf zwei der ent ι ■> rnbaren Um I fnkp I atten 24 auf. Ein Kanal 20 des Membranhalters 14 spreizt das obere Ende der Scheidewand 23. Der Membranhalter 14 weist Klammern 21, 22 sowie Zähne 18 auf. Die Zähne stehen mit Öffnungen in einer Membran 16 im Eingriff und halten den zentralen Abschnitt der Membrane gespannt. Die Enden der Membran 16 sind In die Elektrolytlösung eingetaucht (nicht gezeigt). Die Membran muß aus einem Material bestehen, das als "Docht" für die Elektrolytlösung zu Her Bereichen der Membran wirkt und die Membran in einem gesättigten Zustand hält. Außerdem muß die Membran genügp'id fost sein, um der Kraft der Zähne Stand zu halten, wenn die Membran benetzt wird. Die Membran kann beispielsweise aus Zelluloseazetat, Papier oder Cellogel hergestellt sein. Eine Membran aus Zelluloseazetat kann aufgehoben und als dauernde Aufzeichnung der Analyse aufbewahrt werden - ein wichtiger Faktor in der Gerichts medizin.In the drawing, an electrophoresis device includes one Container 10 for an electrolyte solution. Inside the container are fixed baffles 19, - removable baffles 24, a partition 23 and frame electrodes 26, 2Γ '· arranged, the extend from slots in the inner wall 3 to slots in the inner wall 9. A membrane holder 14 sits on the Partition 23 and on two of the detachable Um I fnkp I atten 24 on. A channel 20 of the membrane holder 14 spreads the upper end the septum 23. The membrane holder 14 has brackets 21, 22 and teeth 18. The teeth stand with openings in one Diaphragm 16 engages and holds the central portion of the diaphragm taut. The ends of the membrane 16 are in the electrolyte solution immersed (not shown). The membrane must be made of a material that acts as a "wick" for the electrolyte solution acts to her areas of the membrane and keeps the membrane in a saturated state. In addition, the membrane must be sufficient be strong enough to withstand the strength of your teeth when the membrane is wetted. The membrane can for example be made of Cellulose acetate, paper or cellogel. One Cellulose acetate membrane can be lifted and considered permanent Records of analysis are kept - an important factor in forensic medicine.
Eine Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben 30 paßt in die Abdeckung 12 und weist zwei Füße 33, 34 auf. Der Fuß 34 hat einen vorstehenden Zählstift 38 und der Stift 33 einen vorspringenden Laufstift 35. Der Stift 38 und der Laufstift 35 sind so ausgeleqt, daß sie in einen Laufstiftschiit.? bzw. in Zählschlitze an einer der Abdeckplatten von Fig. 3 oder den Probenhalter von Fig. 4 passen.A device for holding multiple samples 30 fits within the cover 12 and has two feet 33, 34. The foot 34 has a protruding counting pin 38 and the pin 33 has a protruding one Barrel pin 35. The pin 38 and barrel pin 35 are so designed that they fit into a barrel pin slot. or in counting slots on one the cover plates from FIG. 3 or the sample holder from FIG. 4 fit.
Die Abdeckung 12 enthält Stecker 11 und Buchsen 13, die mit dom Elektrodendraht 29 über Federverriegelungen 15 bzw. 17 an der RahmoneIektrode 26 einen Kontakt herstellen. Wenn die Abdeckung 12 vom oberen Ende des Behälters 10 entfernt ist, so wird die elektrische Verbindung zum Elektrodendraht 29 infolge der Fede rver r i ege I unge^nigrwtar* raactoke*,·The cover 12 contains plugs 11 and sockets 13, which are connected to domed electrode wire 29 via spring locks 15 and 17, respectively make contact with the frame electrode 26. When the cover 12 is removed from the upper end of the container 10, the electrical connection to the electrode wire 29 as a result der Fede rver r i ege I unge ^ nigrwtar * raactoke *, ·
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IO -IO -
Der E I ektrödendraht 29 ist in den Fig. 7A und 7B detaillierter dargestellt. Ein Platindraht 29 läuft um den aufgeschlitzten Rand der Rahmeneleketrode 26. Der Draht ist ;t Metallkoi'iakten 25 und 27 verbunden, die zu den Federverriege Iungen 15 und 17 gemäß Fig. 1 einen Kreis schließen. Wie in Fin. 2E dargestellt, sind die zwei Rahmenelektroden 26 und 28 im ' ;:hä lter 10 angeordnet, dor an seinen Wänden ',hlitze aufweist, um die Rahmenelektroden aufzunehmen.Electrode wire 29 is shown in greater detail in FIGS. 7A and 7B. A platinum wire 29 runs around the slit edge of the frame electrode 26. The wire is ; t Metallkoi'iakten 25 and 27 connected, which close a circle to the Federverriege Iungen 15 and 17 according to FIG. As shown in Fin. 2E, the two frame electrodes 26 and 28 are arranged in the ';
Gemäß Fig. 2A weist die Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben mehrere Probenbehälter 39 auf, die so ausgelegt sind, daß sie eine im Detail in Fig. 6 gezeigte Probe halten.According to FIG. 2A, the apparatus for holding a plurality of samples has a plurality of sample containers 39 which are designed so that they hold a sample shown in detail in FIG.
Die Probenbehälter 39 werden durch mehrere Blattfedern 45 individuell in ihrer Lage festgehalten. Ein Auslöseknopf 40 weist einen langen Arm 41 auf, der sich quer durch die parallelen Blattfedern 45 hindurch erstreckt. Wenn der Auslöseknopf 40 nach unten gedruckt wird, werden alle Blattfedern derart ausgelöst, daß al Ie Probenbehälter 39 frei werden und zu tropfen beginnen. Der Auslöseknopf 40 weist eine Nut 42 auf, in welche ein Sperriegel 44 einschiebbar ist, um den Aus lös ι ι nopf in der unteren oder niedergedrückten Stell g festzuhalten. Wenn die Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben nichi verwendet wird, kann ein Schutzdeckel 31 aus Plexiglas über den Deckel 12 gestülpt werden, wie in Fig. 2B qe^eiqt ist.The sample containers 39 are supported by a plurality of leaf springs 45 individually held in their position. A release button 40 has a long arm 41, which extends across the parallel Leaf springs 45 extends therethrough. When the release button 40 is pressed down, all leaf springs are released in such a way that that al Ie sample container 39 become free and drip kick off. The release button 40 has a groove 42 into which a locking bolt 44 can be inserted to release the button in the to hold the lower or depressed position g. If the Device for holding multiple samples is not used a protective cover 31 made of plexiglass can be placed over the cover 12 as shown in Fig. 2B qe ^ eiqt.
Gemäß Fig. 6A und 6B enthält die Behältermündung 46 eine Kapillaröffnung 47 zum Halten der Probenflüssigkeit. Die Kapillarmündung 46 wird durch zwei federgespannte,mit einem Spaltkopf versehene Bolzen 49 in ihrer Stellung gehalten, so daß die Behältermündung leicht entfernt werden kann.6A and 6B, the container mouth 46 includes a capillary opening 47 for holding the sample liquid. The capillary mouth 46 is supported by two spring-loaded, split heads Bolt 49 held in place so that the container mouth can be easily removed.
Die Behältermündung 46 kann in ihrer Länge oder Breite modifiziert" werden, um den Betrag der festgehaltenen Probenmenge zu ändern oder mehr als eine Stelle der Vorrichtung auszufüllen.The container mouth 46 can be modified in length or width " to change the amount of sample held or to fill in more than one part of the device.
Gemäß Fig. 2D ist der Membranhalter 14 .ius einem Stück aus geformtem, flexiblem P I as t i kmate rM 9 |9 §<ir!</sQi>l3 H, und mit Zähnen 18 versehen,According to Fig. 2D, the membrane holder 14 .ius is a piece of molded, flexible P I as t i kmate rM 9 | 9 § <ir! </sQi> l3 H, and provided with teeth 18,
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die nach innen gebogen werden kön'^n, um in entsprechende Öffnungen der Membran 16 einzugreifen. Beim Loslösen übt der Halter 14 Dehnungskräfte auf die Membran aus und hält sie dadurch fest gespannt. Um ein Einreißen der Membran zu vermeiden, sind die Zähne 18 vorzugsweise als halbzylindrische oder zylindrische Vorsprünge ausgebildet, und die Öffnungen der Membran 113 gemäß Fig. 10 sind kreisförmig.which can be bent inwards in order to corresponding Openings of the membrane 16 to engage. When detaching, he practices Holder 14 exerts stretching forces on the membrane and thereby holds it tightly stretched. To avoid tearing the membrane, the teeth 18 are preferably semi-cylindrical or cylindrical Projections formed, and the openings of the membrane 113 according to Fig. 10 are circular.
Gemäß Fig. 3 weist die Zwischenabdeckung 12 einen Hebel 50 zur visuellen Nivellierung der gesamten Einrichtung auf. Es sind ein Schlitz 52 und Öffnungen 54 vorgesehen, um den Laufstift 35 und den Zählstift 38 der gesamten Einrichtung 30 aufzunehmen. Die Schlitze 56 ermöglichen einen Durchgang der Behältermündungen 46, wc'in die Probenbehälter 39 niedergedrückt sind, sei es individuell oder gemeinsam infolge des Auslöseknopfes 40.According to FIG. 3, the intermediate cover 12 has a lever 50 visual leveling of the entire facility. A slot 52 and openings 54 are provided around the barrel pin 35 and the counting pin 38 of the entire device 30. The slots 56 allow passage of the container mouths 46, wc'in the sample container 39 are depressed, be it individually or collectively as a result of the release button 40.
Die zehn parallelen Behältermündungen 46 können durch einen der Schlitze 56 hindurchgehen, abhängig da von ,we I eher Schlitz gewählt wird, wobei man den Zählstift 38 an der gesamten Einrichtung 30 in eine der Öffnungen 34 einrastet.The ten parallel container mouths 46 can through one of the Slits 56 pass through depending on which slit I rather choose by engaging the counting pin 38 on the entire device 30 in one of the openings 34.
Gemäß Fig. 4A und 4B weist ein Probenhalter 60 eine Gummiabdichtung 62 auf, um eine Plexiglas-Abdeckplatte 64 abzudecken, die über dem Probenhalter angeordnet werden kann. Der Probenhalter weist einen Schlitz 66 und Öffnungen 68 zur Aufnahme des Laufstiftes 35 und des Zählstiftes 38 der gesamten Einrichtung zum Halten mehrerer Proben auf.According to FIGS. 4A and 4B, a sample holder 60 has a rubber seal 62 to cover a plexiglass cover plate 64 that extends over the sample holder can be arranged. The sample holder has a slot 66 and openings 68 for receiving the barrel pin 35 and the counting pin 38 of the entire device for holding several samples.
Der Probenhalter 60 hat mehrere Vertiefungen 70 für die Proben, die in Reihen angeordnet sind, entsprechend den Öffnungen (AF). Jed< Reihe enthält zehn Stifte derart, daß jede Behältermündung 46 im Stande ist, in eine entsprechende Vertiefung einzutreten.The sample holder 60 has a plurality of wells 70 for the samples, which are arranged in rows corresponding to the openings (AF). Each row contains ten pens so that each container mouth 46 is able to enter a corresponding depression.
Der Probenhalter weist außerdem eine Abflußrinne 72 und eine LöschbI atfrinne 74 auf, um die Proben abzuführen und aufzusaugen.The sample holder also has a gutter 72 and a Erasing channel 74 to discharge and suck up the samples.
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Gemäß Fig. 5A und 5 B wird für den M^mbranhalter 14 eine temperaturgesteuerte Pia'te 80 eingesetzt, wenn ein Gelmedium gewünscht wird. Die Platte weist Halteeinrichtungen 82, 84, 8b, 8 8 .: u r Aufnahme und zum Halten eines Vierecktroges auf, der ein Gelmaterial enthält. Beispielsweise kann beim Nachweis von Fettprotein (Lipoprotein - Lp) ein Agarose-Gel verwendet werden. Durch einen feuchten Docht in Doch ta usnehmungen 90, 92 kann zwischen dem Gel und der Elektrolytlösung ein elektrischer Kontakt hergestellt werden. Eine temperaturgesteuerte Flüssigkeit wird vom Behälter 99 in den Einlaß 100 der Platte gepumpt. Nachdem die Flüssigkeit durch den Plattenkanal 98 hindurch geführt wurde, verläßt sie diese über den Auslaß 102 und kehrt zum Behälter 99 zurück.According to FIGS. 5A and 5B, a temperature-controlled tablet 80 is used for the membrane holder 14 if a gel medium is desired. The plate has holding devices 82, 84, 8b, 8 8.: For receiving and holding a square trough which contains a gel material. For example, an agarose gel can be used for the detection of fat protein (lipoprotein - Lp). Electrical contact can be established between the gel and the electrolyte solution through a moist wick in wick recesses 90, 92. A temperature controlled liquid is pumped from container 99 into inlet 100 of the plate. After the liquid has passed through the plate channel 98, it leaves it via the outlet 102 and returns to the container 99.
Gemäß Fig. 8 ist die temperaturgesteuerte Platte 80 innerhalb des Behälters 10 in ihrer Lage dargestellt. Ein Vierecktrog 103, der ein Gel 104 enthält, ist auf der Platte 80 angeordnet und wird durch Halteeinrichtungen 82, 84 in seiner Stellung festgehalten. Der Viorecktrog wird vorzugsweise aus Material hergestellt, das elektrisch isoliert und ine gute Wärmeleitfähigkeit aufweist. Darüberhina us muß der Vierecktrog gegenüber den Elektrolyten inert sein. Da die Platte so ausgelegt ist, um einen Vierecktrog oder Quadrattrog aufzunehmen, ist eine Drehung des Gelmediums um 90 möglich. Man erhält dadurch eine größere Auflösung, indem man zwei senkrecht zueinander stehende Wanderungen auf dem Gel 104 durchführt, indem man den Rechteckoder Quad ratdruck nach der ersten Wanderung um 90° dreht.8, the temperature controlled plate 80 is within of the container 10 shown in their position. A square trough 103, which contains a gel 104, is arranged on the plate 80 and is held in place by holding devices 82, 84 held. The vioreck trough is preferably made of material manufactured, which is electrically insulated and has good thermal conductivity having. The square trough opposite must go over it the electrolyte be inert. Since the plate is designed to accommodate a square or square trough, it is a The gel medium can be rotated by 90. This gives you a greater resolution by having two mutually perpendicular Walks on the gel 104 by dragging the rectangle or Square pressure rotates 90 ° after the first hike.
über Dochte, 106, 108, die am Rand des Gels aufliegen, und durch Ausnehmungen 90, 92 hindurch zum Elektrolyt führen werden, wird ein Kontakt mit der Elektrolytlösung hergestellt. Der Behälter hat Dochthalter 110 und 111 zum Festhalten des unteren Endes jedes Dochtes innerhalb der Elektrolytlösung. Die Dochthalter verhin'orn ein Herausgleiten der Dochte aus dem Gel und halten sie in einer Lage fest, daß sie mit dem Gel über die Oberfläche hinweg in Berührung stehen. Durch die Ausrichtung des Dochtes wird das Auftrete η eines Kontaktqradienten vermieden. Die Dochte 106, 108 könnenvia wicks, 106, 108 resting on the edge of the gel, and through Recesses 90, 92 will lead through to the electrolyte made contact with the electrolyte solution. The container has wick holders 110 and 111 for holding the lower end of each Wick within the electrolyte solution. The wick-holders forbid sliding the wicks out of the gel and holding them in place Make sure they are in contact with the gel across the surface stand. The alignment of the wick makes the appearance η of a contact gradient avoided. The wicks 106, 108 can
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beispielsweise aus Filterpapier oder Kunstschwamm hergestellt we rde η .for example made of filter paper or synthetic sponge we rde η.
Während des Elektrophorese-Prozesses hat der durch das Gel hiηdurchfIießende elektrische Strom eine Frwärmung zur Folge, die in das Gel ap geleitet w.-rden muß. Die Wä rmekonvekt i on innerhalb des Gels verursacht eine Neigung zur Verbreiterung der einzelnen Bereiche und verursacht Fehler. Diese Erweiterung der Bereiche wird dadurch vermieden, daß man eine Flüssigkeit durch die Platte 80 hindurchschickt, die eine Temperatur unter der Umgebungstemperatur aufweist. Bei einigen Messungen erwies sich z.B. eine Plattentemperatur von 4 C als geeignet. Beim Nachweis des Isoenzyms erhitzt man üblicherweise das Gel auf etwa 37 C, nachdem der Elektrophorese-Strom abgeschaltet ist, und gibt dem Gel Chemikalien zu, die nur mit dem speziellen Enzym eine Reaktion zeigen, das gesucht ist. Nach der vorliegenden Erfindung kann der gesamte Nachweis des Isoenzyms stattfinden, während der Geltrog auf der Platte 80 bleibt. Während der Wanderung innerhalb des EIektrophorese-Vorgangs wird eine Flüssigkeit mit einer Temperatur unter der Umgebungstemperatur durch die Platte 80 hindurchgeschickt, nanac'h wird nach lern Entfernen der Elektrizität eine Flüssigk-it mit einer Temperatur höher der Umgebungstemperatur durch die Platte 80 hindurchgeschickt, um die Anzeige des gewünschten Enzyms zu verbessern.During the electrophoresis process, the electric current flowing through the gel results in warming, which must be conducted into the gel a p. The heat convection within the gel causes a tendency for the individual areas to widen and causes errors. This expansion of the areas is avoided by sending a liquid through the plate 80 which is at a temperature below ambient temperature. For some measurements, for example, a plate temperature of 4 C turned out to be suitable. When the isoenzyme is detected, the gel is usually heated to about 37 C after the electrophoresis current has been switched off, and chemicals are added to the gel that only react with the specific enzyme that is sought. In accordance with the present invention, all of the isoenzyme detection can occur while the gel trough remains on plate 80. During the migration within the electrophoresis process, a liquid with a temperature below the ambient temperature is sent through the plate 80; after the electricity has been removed, a liquid with a temperature higher than the ambient temperature is sent through the plate 80 in order to achieve the Enhance indication of the desired enzyme.
In Fig. 9 ist eine Draufsicht der Abdeckung 12 dargestellt, mit Ausschnitten, welche die Stecker 11 und die Buchsen 13 zeigen. Auf diese Weise können ähnliche Einrichtungen durch Einfügen der Stecker 11 einer Vorrichtung in die Buchsen 13 einer daneben liegenden Einrichtung elektrisch miteinander verbunden werden.In Fig. 9 is a plan view of the cover 12 is shown, with Cutouts showing the plugs 11 and the sockets 13. In this way, similar bodies can be created by inserting the Plug 11 of a device into the sockets 13 of one next to it lying device are electrically connected to each other.
In Fig. 10 .oigt das Muster 109 die Anordnung der Proben auf der Membrane 16, wenn sie gleichzeitig zugeführt werden. Das Muster zeigt, wie die Proben ausgerichtet werden,falls dor Probenbehälter angezeigt wird, nachdem jeder der aufeinanderfolgenden Probenbehälter niedergedrückt wurde. Die Öffnungen 113 in der Membran stehen mit Zähnen 18 innerhalb des M< mb ranha I te rs !4 im Eingriff.In Fig. 10, the pattern 109 shows the arrangement of the samples on the membrane 16 when they are fed simultaneously. The pattern shows how the samples will be aligned if the sample container is displayed after each successive sample container is depressed. The openings 113 in the membrane engage teeth 18 within the M <mb ranha I te rs! 4.
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Zusammenfassend bezieht sich die Erfindung auf eine Elektrophorese-Einrichtung und eine Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben dafür. Die Elektrophorese ist ein physikalischer Vorgang, bei dt elektrisch geladene Moleküle und Kolloid-Teilchen unter Gleichstromfluß längs ο i nes Ge Is oder einer Membran wandern, die mit einem Elektrolyt angefeuchtet sind, Be i Verwendung einer Membran wird ihr Mittelteil horizontal über einem Elektrolytbehälter gespannt gehalten, während die Enden der Membran in den Elektrolyten herabhängen. Bei Verwendung eines Gels wird dieses in einen Rechtecktrog eingebracht, der auf einer Kühlplatte angeordnet ist, wobei Do 'ite den Kontakt mi t" dem Elektrolyten herstel len.In summary, the invention relates to a Electrophoresis equipment and a holding device several samples for it. Electrophoresis is a physical one Process in which electrically charged molecules and colloid particles wander under direct current along ο i nes Ge Is or a membrane moistened with an electrolyte, When a membrane is used, its central part becomes horizontal held taut over an electrolyte container while the The ends of the membrane hang down in the electrolyte. Using of a gel, this is placed in a rectangular trough, which is arranged on a cooling plate, with Do 'ite making contact with the electrolyte.
Die Vorrichtung zum Halten mehrerer Proben wirkt mit dem Behälter zusammen, um dem Benutzer zu ermöglichen, entweder einen einzelnen Knopf zu drücken, um mehrere Proben gleichzeitig auf das Gel oder die Membran abzulegen, oder getrennt einen oder mehrere P robenbe*1 Ί I te r durch Drücken eines seperaten Knopfes für jeden Probenbehälter niederzudrücken.The device for holding a plurality of sample interacts with the container together to allow the user to either press a single button to store several samples at a time to the gel or membrane, or separately one or more P robenbe * 1 Ί I te r by pressing a separate button for each sample container.
Durch Durchführen zweier zueinander senkrechter Wanderungen in einem Rechteck- bzw. Quad rat-Go Itrog, wobei man den Trog nach der ersten Wanderung um 90 dreht, wird eine höhere Auflösung erzielt.By performing two mutually perpendicular hikes in one Rectangular or square Go Itrog, whereby one follows the trough turns 90 on the first hike, a higher resolution is achieved.
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