DE2234797A1 - 1-alkylcycloalkyloxycarbonylderivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als aminogruppenschutzreagens bei der peptidsynthese - Google Patents

Description

Juli

■ u.Z.: K 012 (Vo/MU/kä)
F_1973 YKI

SHIONOGI & CO,. LTD.,
Osaka, Japan

" I-Alkylcycloalkyloxycarbonylderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Aminogruppenschutzreagens bei der Peptidsynthese "

Priorität: 15- Juli 1971, Japan, Nr. 52 7.07/1971 15. Juli 1971, Japan, Nr. 52"708/1971 19. August 1971, Japan, Mr. 63 182/1971

Die Erfindung betrifft neue I-Alkylcycloalkyloxycarbonylderivate der allgemeinen Formel I ■ -

in der R, einen niederen Alkylrest, z.B, die Methyl-, Äthyi- oder Propylgruppe, bedeutet, η eine ganze Zahl mit dem Uert k, oder 6 ist und R^ eine Azidogixippe oder oinori subs tituj ertön oder nicht .substituierten Rhenoxyi-est der allgemeinen Formel II bedeutet; .

=■-/ (ic)

0βββ4/1ΑΠ eADORpo^

wobei m eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 5 und Y ein V/a s s erst off- oder Halogenatom, wie Fluor, Brom oder Chlor, die Nitro-, Hydroxyl- oder Cyanogruppe oder ein niederer Alkylrest, wie die Methyl-, Äthyl- oder Propylgruppe oder ein niederer Alkoxyrest, wie die Methoxy-, Äthoxy- öder Propoxygruppe, ist.

Der Ausdruck "niederer Alkylrest" bedeutet unverzweigte oder verzweigte Alkylreste mit 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 4 und insbesondere 1 bis j5 Kohlenstoffatomen. Der Ausdruck "niederer Alkoxyrest" bedeutet unverzweigte oder verzweigte Alkcxyreste mit 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 4 und insbesondere 1. bis j5 Kohlenstoffatomen.

Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man
(a) ein 1-Alkylcycloalkanol der allgemeinen Formel III

(CH₂)η

(IH)

in der R. und η die vorstehende Bedeutung haben, mit einem Halogenameisensäureester der allgemeinen Formel IV.

X-C-O-R, . (IV)

Il ^H

in der X ein Halogenatom, wie Fluor, Brom oder Chlor, und Rr einen substituierten oder nicht substituierten Phenylrent der allgemeinen Formel V bedeutet

2 0 9864V1411

in der Ύ und m die vorstehend angegebene .Bedeutung haben, zu. einem Kohlensäureester der allgemeinen Formel VI umsetzt

in der R^, R^ und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben, und gegebenenfalls

(b) den Kohlensäureester der allgemeinen Formel VI mit Hydrazin 'zu einem Kolilensäureesterhydrazid der allgemeinen Formel VII . -

(Φο)ν. ρ;

^0-C-NHNH₂ (VII)

.0

umsetzt, in der R^ und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben, und dieses in einem sauren Medium mit einem. Nitrit' der allgemeinen Formel VIII

■ χ . R₅ONO . (VIII)

in der R₅ ein V/asserstoffatom, einen niederen Alkylrest, wie die Isoamyl- oder tert.-Butylgruppe, oder ein Alkälimetallkation, wie das Natrium- oder Kaliumion, bedeutet^ zu einem Kohlensäureesteräzid der allgemeinen Formel IX umsetzt

(IX)

in dor U^ und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben.

20988A/H11

Die Umsetzung der 1-Alkylcycloalkanole der allgemeinen Formel III mit Halogenameisensäur.eestern der allgemeinen Formel IV zu ι Kohlensäureestern der allgemeinen Formel VI wird 1 bis 24 Stunden bei Temperaturen von -10 bis +5O⁰C in Gegenwart einer Base ; in einem organischen Lösungsmittel, vorzugsweise in Dichlor- j methan oder Chloroform,durchgeführt. Beispiele für Basen sind ! organische Basen, wie Pyridin, Chinolin, Dimethylanilin oder » Triäthylamin. . i

Die Umsetzung der Kohlensäureester der allgemeinen Formel VI ■ mit Hydrazin zu den entsprechenden Kohlensäureesterhydraziden wird 1/2 bis 24 Stunden bei Temperaturen von 0 bis 100⁰C in einem Lösungsmittel oder ohne Lösungsmittel durchgeführt. Vorzugsweise beträgt das Molverhältnis von Hydrazin zum Kohlensäureester der allgemeinen Formel VI 1:1 bis 2:1.Bei der Durchführung dieser Reaktion in Gegenwart eines Lösungsmittels wird vorzugsweise ein polares Lösungsmittel, wie ein Alkohol, z.B. Methanol,

Äthanol, Propanol oder Butanol, Dimethylformamid oder Dimethyl- >

sulfoxid, verwendet. j

Die Umsetzung der Kohlensaureesterhydrazide der allgemeinen ) Formel VII mit Nitriten der allgemeinen Formel VIII zu J Kohlensäureesteraziden der allgemeinen Formel IX wird einige > Minuten (3 bis 5) bis einige Stunden (3 bis 5) bei Temperaturen " von -40⁰C bis Raumtemperatur (10 bis 30⁰C) in einem sauren Reaktionsmedium durchgeführt. Bevorzugte Lösungsmittel sind bei- · spielsweise Essigsäure, Acetonitril, Dimethylformamid oder wäßrige Lösungen dieser Lösungsmittel. Vorzugsweise werden an- ι organische Säuren, z.B. Salzsäure, oder organische Säuren, z.B. ,

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ORlQiNALlNSPSCTED

Essigsäure, zugesetzt. Zur Vereinfachung wird das Kohlensäureesterazid der allgemeinen Formel IX im allgemeinen ohne Isolierung in den nächsten Reaktionsschritt eingesetzt. Es kann aber auch durch Destillation, unter vermindertem Druck gereinigt werden.

Das als Ausgangsverbindung verwendete 4-Alkylcycloalkanol der allgemeinen Formel III kann beispielsweise hergestellt werden,-indem man ein entsprechendes 1-Alkylcyclo.alkanon der allgemeinen Formel X

C=O ■ ·

in der η eine ganze Zahl mit dem Wert 4, 5 oder 6 ist, mit einem Grignard-Reagens der allgemeinen Formel XI

R₁MgX (XI)

in der L und X die vorstehend angegebene Bedeutung haben, umsetzt und das erhaltene Produkt auf übliche Weise hydrolysiert, · . r

Der als Ausgangsverbindung verwendete Chlorameisensäureester der allgemeinen Formel IV kann beispielsweise durch Behandlung des entsprechenden Phenols mit Phosgen oder, einem Chlorameisensäurehalogenid auf übliche-Weise erhalten v/erden.

Die so erhaltenen Verbindungen der allgemeinen Formel VI und IX ( = I) eignen sich als N-Acylierungsmittel und sind deshalb wertvolle Aminoschutzgruppenreagentien für Aminosäuren oder Peptide. Außer zum Schutz von Aminogruppen können diese ί Verbindungen auch 'zum Schutz von anderen funktionellen Gruppen, beispielsweise zum Schutz der Hydroxylgruppe im Tyrosin oder

/ eric ,^, 209884/1411

der Mercaptogruppe im Cystein, verwendet werden.

Der charakteristische Vorgang bei dar Peptidsynthese ist die Ausbildung einer Amidbindung zwischen der Carboxylgruppe einer Aminosäure oder eines Peptids und der Aminogruppe einer zweiten Aminosäure oder eines Peptids. Dabei müssen funktionelle Gruppen, die nicht an der.Bildung der Amidbindung beteiligt sein sollen, geschützt werden, um die Bildung von unerwünschten Nebenprodukten zu verhindern. Aus diesem Grund muß eine Schutzgruppe den folgenden Anforderungen genügen:

(1) Sie muß sich leicht und möglichst in quantitativer Ausbeute in die Aminosäure oder das Peptid einführen lassen.

(2) Sie muß ihre Schutzfunktion behalten und zwar vorzugsweise

•β

unter allen Kupplungsbedingungen. ' '

(3) Bei ihrer Einführung darf sich keine Racemisierung der zu schützenden Aminosäure ergeben.

(4) Sie darf nicht das Auftreten von Nebenreaktionen veranlassen.

(5) Sie muß sich leicht und selektiv auf solche Meise entfernen lassen, daß andere Schutzgruppen für die gleichen oder andere funktioneile Gruppen nicht in unerwünschter Vieise beeinträchtigt werden.

Es wurde nun erfindungsgemäß festgestellt, daß sich 1-Alkylcycloalkyloxycarbonylreste zum Schutz von Aminogruppen während der Peptidsynthese eignen, da sie die vorgenannten Bedingungen in ausreichendem Maße erfüllen. Diese Schutzgruppen lassen sich leicht in Aminogruppen von Aminosäuren oder Peptiden einführen und können leicht durch Behandlung mil: einer Säure in jeden

209884/1411

beliebigen Stadium der Peptidsynthese entfernt werden.

Die Erfindung betrifft deshalb auch die Verwendung der 1-Alkyl~ cycloalkyloxycarbonylderivate der allgemeinen Formel I als Aminoschutzgruppenreagentien bei der Peptidsynthese.

Dabei wird eine Aminogruppe einer Aminosäure oder eines Peptids durch ein I-Alkylcycloalkyloxycarbonylderivat der allgemeinen Formel I acyliert, die erhaltene 35-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-verbindung nach bekannten Verfahren mit einer anderen Amino säure oder einem Peptid umgesetzt und das erhaltene N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-peptid zur Entfernung des 1-Alkylcyclöalkyloxycarbonylrestes und Bildung des entsprechenden Peptids mit einer Säure behandelt. ' ·

Die erste Stufe der Peptidsynthese besteht in der Acylierung der Aminogruppe einer Aminosäure oder^ines Peptids mit einer Verbindung der allgemeinen Formel I. Das erhaltene geschützte Produkt weist die allgemeine Formel XII auf,

)-C-A.

in der R., und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben und A ein Aminosäure- oder Peptidrest ist.'

Diese Acylierungsreaktion durch Verbindungen der allgemeinen Formel I ist vollkommen analog der Einführung der H-(Benzyl- . oxycarbonyl)- oder M-(tert.-Butyloxycarbonyl)-gruppen in Arainoisäuren oder Peptide /vgl.Ber. dtsch. chem.Ges.*Bd. 65 (!932^₈,1192

209884/-U11

.HeIv. J

/Chim. Acta, Bd. 42 (1959) S. 2622;AnruN.Y.Acad.Sci., Bd. 08 ,

in der R^ den um die Aminogruppe verminderten Rest eines Aminosäureesters bedeutet, zu einem N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-derivat der allgemeinen Formel XIV

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(I960), S. 676/. Die Acylierung wird im allgemeinen 1 bis \

ο '

72 Stunden bei Temperaturen von 0 bis 50 C, vorzugsweise in Ge- , genwart eines Lösungsmittels und einer Base durchgeführt. Als Lösungsmittel können anorganische Lösungsmittel, wie Wasser, , und organische Lösungsmittel, wie Methanol, Äthanol, Dioxan, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Acetonitril oder Essigsäure- , äthylester, verwendet v/erden. Beispiele für Basen, die die Reaktion beschleunigen, sind Alkalimetallhydroxide, wie Natriumoder Kaliumhydroxid., Alkalimetallcarbonate, wie Natrium- oder · Kaliumcarbonat, Alkalimetallhydrogencarbonate, wie Natriumoder Kaliumhydrogencarbonat,.Erdalkalimetalloxide, wie Magnesiumoxid, organische tertiäre Amine, wie Pyridin, Chinolin, Trimethylamin oder Triäthylamin, und Trimethylbenzylammoniumhydroxid. Vorzugsweise beträgt das Molverhältnis des Acylierungsmittels zu der zu schützenden Aminogruppe etwa 1,0:1 bis

Eine andere Ausfülirungsform der Einführung der erfindungsgeiaäs- * sen Schutzgruppen besteht in der Behandlung des 1-Alkyl-

cycloalkanols der allgemeinen Formel III mit einem Isocyanat ..

der allgemeinen Formel XIII '

O=C=N-R₃ ' (XIII)

(XIV)

. in der R^, η und FU die vorstehend angegebene Bedeutung haben.

Auch diese Isocyanatreaktion ist ein Analogverfahren" /vgl. Z. Naturforsch., Bd. 5b (1950), S. 170; Liebigs Ann. Chem., Bd. 575 (1952), S. 217)? Die Umsetzung wird im allgemeinen 1/2 bis 6 Stunden bei Temperaturen von 50 bis 130⁰C in einem Lösungs-

mittel und gegebenenfalls in Abwesenheit einer organischen Base durchgeführt. Beispiele für Lösungsmittel sind Benzol, Toluol, ι Xylol, Anisol und Diisopropyläther. Als organische Basen werden ] vorzugsweise Pyridin, Triäthylamin, Collidin oder Chinolin ver-■ v/endet, die auch zugleich als Lösungsmittel dienen können.

A Die als Ausgangsverbindungen verwendeten Isocyanate der allgemeinen Formel XIII können auf übliche Weise durch Behandeln eines Aminosäureesters mit Phosgen erhalten werden /vgl. Liebigs Ann. Chem., Bd. 575 (1952), S. 2177. Bevorzugte Amino- · säureester sind dabei niedere Alkylester, z.B. Methyl-, Äthyloder Propylester, und niedere Arylalkylester, z.B. Benzyl- oder p-Nitrobenzylester.

Beispiele für Aminosäuren, in die sich die erfindungsgemäi3en Schutzgruppen einführen lassen, sind: Glycin, Alanin, Valin, Norvalin, Leucin, Norteucin, Isoleucin,. Serin, Threonin, Cystein, Cystin, Methionin, Asparaginsäure, Asparagin, Gluta» ( rninsüure, Glutamin, Lysin, Ornithin, Citrullin, Arginin, * Phenylalanin, Tyrosin, Histidin, Tryptophan, Prolin, Hydroxy- \ prolin, ß-Alanin, y-Aminobuttersäure, a-Aminoisobuttersäure,

209884/1411 _ .

OflWHNAL !NSPEGTED

Sarcosin, α,β-Diaminopropionsäure, ajy-Diaminobuttersäure und "^: andere natürlich vorkommende oder synthetische Aminosäuren. Diese Aminosäuren können in der L- _t D- oder DL-Konfiguration vorliegen. Enthalten die mit den Schutzgruppen der Erfindung zu versehenden Aminosäuren oder Peptide weitere, funktionelle Gruppen, wie Amino-, Carboxyl-, Hydroxyl-, Mercapto-, Guanidino- oder Iminogruppen, so können diese gegebenenfalls mit in der Peptidchemie Üblichen Schutzgruppen versehen v/erden. Die Carboxylgruppe wird vorzugsweise verestert, z.B. mit Methanol, Äthanol, tert.-Butanol, Benzylalkohol, p-Nitrobenzylalkohol oder Phenole,oder sie wird durch Amidbildung geschützt. Aminogruppen v/erden beispielsweise durch Einführung einer Benzyloxycarbonyl-, p-Nitrobenzyloxycarbonyl-, p-Brombenzyloxycarbonyl-, tert.-Butyloxycarbonyl-, teut.-Amyloxycarbonyl-, p-Methoxybenzyloxycarbonyl-, 2-(p-Diphenyl)-isopropyloxycarbonyl-,· Trityl-, Tosyl- oder Formylgruppe geschützt. Die Hydroxylgruppe von Tyrosin oder Serin kann 'durch die Acetyl-, Benzyl- oder tert.-Butylgruppe maskiert werden. Zum Schutz der Mercaptogruppe von Cystein kann die Benzyl-,. p-Methoxybenzyl- oder Sulfenylgruppe verwendet werden. Die Guanidinogruppe von Arginin läßt sich durch Einführung der Nitro- oder Tasylgruppe schützen. Zum Schutz der Iminogruppe von Histidin kann die Benzyl-, Benzyloxycarbonyl-, Tosyl- oder tert.-Butyloxycarbonylgruppe verwendet v/erden. Diese bekannten Schutzgruppen lassen sich durch Hydrolyse, Reduktion oder Abspaltung durch Säure auf übliche Weise entfernen.

Die zv.^reite Stufe der Pcptidsynthese besteht in einer Kupp lung r»- reaktion zwischen einem N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-derivat

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- Ii - 223479?

der..allgemeinen Formel XIT oder- XIV mit einer anderen Aminosäure oder einem Peptid. Ein neues Peptid, 'das die 1-Alkylcyclo 'alkyloxycarbonylgruppe als Aminoschutzgruppe enthält, kann durcli Kondensation einer Verbindung der allgemeinen Formel XII oder XIV mit einer anderen Aminosäure oder einem Peptid nach bekannten Verfahren hergestellt, werden. Zu dieser Kondensation wird vorzugsweise das Carbodiimldverfahren /vgl.. J.Am.Chem. Soc, Bd. 77 (1955), S. 1067; ibid., Bd. 78 (1956), S. 13677, da Carbonyldiimidazolverfahren/vgl. .LieMgs Ann.Chem. ,Bd.6O9( 1957) ,S. das Verfahren mit. aktivierten Estern, wie p-Nitrophenylester.

N-Hydr oxy sue cinimide "s ter, Penta chlorphenyles.ter_:, Cyanine thylester oder p-Nitropheiiylthlolester, /vgl. Nature ,Bd.. 175 (1955),. S.' 685; HeIv. Chim.Acta,'Bd. 40 (1957), S, .373; J. Am. ehem. Soc-, Bd. 86 (1966), S. 1839;-Chero.Abstr., Bd. "57 (1962),

S. 7373; HeIv.Chim,Acta, Bd. 38 (1955), S. 80;Liebigs Ann.Chem., Bd₄ 573· ^:
K1951L S. 99; HeIv.CMm.Acta, Bd. 39, (1956), -S. 872/, das Azidverfahren'/vgl. J.Prakt.Chera., Bd. 70 (1904),S. 73, 89; Collection Czechoslov.Chem.Commuiis., Bd. 26 (I96I), S. 2333/ oder das Verfahren mit gemischten Anhydriden /vgl. . J.Am. Chem.Soc, Bd. 7k (1952), S. 676/ verwendet. Peptide mit einer durch die genannten Schutzgruppen geschützten Aminogruppe kön-· nen auch in fester Phase hergestellt werden /vgl* J. Am.Chem. Soc. ,Bd. 85 (1964), S. 214^;9_/. Gegebenenfalls können funlctionel-Ie Gruppen von Aminosäuren oder Peptiden, die an der Umsetzung · mit den ]i-(1-Alkyl'cycloalkyloxycarbonyl)-verMnduiigen nicht teilnehmen, mit den vorgenannten'Schutzgruppen versehen werden. Es.ist festzuhalten, daß bei dieser Kupplungsreaktion die" durch die vorbr!se]iriebene Acylierung als Ester erhaltenen N-(1 -Alkylcycloalkylojtycarbonyl-) -verbindungen zuerst nach üblichen Veri'alir'en. mit Bason hydro] yniort Und anschließend die erhaltenen

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N-acylierien, freien Säuren als Carbo^ylkomponente nach be-> kannten Verfahren mit. einer anderen Aminosäure- oder einem Pep·? tid als Aiflinokoraponente kondensiert werden. Liegen aber die N- (1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-verbindungen als N-acylierte, freie Säuren vor,, so können sie ohne weitere .Ilydrolyseffiaßnahmen zur anschließenden Peptidsynthcse verwendet werden, Viird die 0 -Arainogruppe von basischen Aminosäuren, wie Lysin oder Ornithin, mit einem Aminoschutzgruppenreagens der Erfindung acyliert, so kann das erhaltene N -acylierte Produkt als Arain-r komponente bei der Kupplungsreaktion ungeachtet seiner Estern· form verwendet werden. Auf diese Weise erhält man durch wieder^· holte Kupplungsreaktionen längerkettige Peptide.

Eine der stufen der Peptidsynthesen, meist die letzte, besteht in der Abspaltung der I-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe von der geschützten Aminosäure oder dem Peptid durch Behandlung mit einer Säure. Die Entfernung der 1-Alkyleycloalkyloxycarbonylgruppe wird durch Behandlung einer Lösung oder Suspension einer geschützten Aminosäure bzw. eines Peptids mit einer organischen oder anorganischen Säure durchgeführt. Die dazu verwendeten Säuren können gegebenenfalls in einem organischen Lösungsmittel oder V.'asser gelöst -werden. Beispiele für Säuren sind Halogenwasserstoffsäuren, wie Fluorwasserstoffsäure, Bromwasserstoff säure oder Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure,¹ Trifluoressigsäure, Essigsäure, Ameisensäure, Monochloressigsäure, Methansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure oder Gemische dieser SMuren. Bei der Verwendung dieser Säuren läuft die Reaktion glatl·. bei Raumtemperatur unter Entwicklung von Kohlendioxid ab. Im allgemeinen ist die Entfernung, der I-Alkylcyclo-

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ankyloxycarboiiy!gruppenbei 0 bis 60°C innerhalb von 30 bis 120 Minuten beendet. Im allgemeinen wird die Schutzgruppe vorzugsweise bei niedrigen oder mäßigen Temperaturen entfernt, da Peptide bekanntlich bei erhöhten Temperaturen beeinträchtigt .v/erden können. Man nimmt deshalb die Entfernung der Schutzgruppen vorteilhafterweise bei Temperaturen von 0 bis 30°C, insbesondere bei Raumtemperatur vor. Die Säure kann in Lösungsmitteln, die die Reaktion nicht beeinflussen, wie Wasser, Methanol, Dichlormethan, Essigsäure, Essigsäureät]rylester oder Acetonitril, gelöst werden. Im allgemeinen setzt man die zum Entfernen der Schutzgruppe verwendete Säure in einem beispielsweise 2- bis 10-fachen molaren Überschuß ein, bezogen auf die geschützte Aminosäure bzw. das Peptid.

Die I-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe ist gegen katalytische ' Hydrierung beständig. Andererseits kann die Benzyloxycarbonyl- ', gruppe, eine typische Aminoschutzgruppe, leicht durch Hydrierung entfernt werden. Deshalb erhält man bei Verwendung der Verbindungen der Erfindung die Möglichkeit, bestimmte Amino-■ Schutzgruppen selektiv zu entfernen. Sollen beispielsweise in ι einer Aminosäure oder einem Peptid mit 2 Aminogruppen beide ί Aminogruppen blockiert werden, so kann eine mit der 1-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe und die andere mit der Benzyloxy- ^! carbonylgruppe geschützt v/erden. Die letztere Schutzgruppe

kann durch Hydrogenolyse entfernt werden, während dabei die er-[ findungsg.em-i.ii3e Schutzgruppe nicht angegriffen wird. Anschlic- \ ßc-nd I.rißt fiich die Schutzgruppe der Erfindung durch Behandlung mi L Saure cn Women. Da die Amirioschutzgruppen der Erfindung unter alkalischen Bedingungen f.;Labil sind, werden sie bei der

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Verseifimg von Aminosäureester!! oder -peptiden nicht beoin- trächtigt. Dies stellt einen besonderen Vorteil der &chutzgrup pen der Erfindung dar. Außerdem können die Arainoscliutzgruppen der Erfindung leicht in eine Aminogruppe von Aminosäuren oder Peptiden in zufriedenstellender Ausbeute eingeführt werden, ohne daß Nebenreaktionen und Racemisierungserscheinungen auftreten. Ihre Schutzeigenschaften behalten sie auch während der Kupplungsreaktionen.

Die durch Verwendung der Verbindungen der Erfindung erhaltenen geschützten Aminosäuren und Peptide sind wertvolle Zwischenpro dukte zur Herstellung von biologisch aktiven Polypeptiden, z.B. ACTil-Peptiden.

Die Erfindung betrifft deshalb auch N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-aminosäuren oder -peptide.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

I. Reagentien zur Einführung der I-Alkylcycloalkvlpxycarbonylgruppe

Beispiel 1 Kohlensäure-1-methylcyclohexyl--phenylester

22,8 g 1-Hethylcyclohexanol werden in 100 ml Di chlorine than gelöst, und die Lösung wird zu 32,4 ml Pyridin gegeben. Die erhaltene Lösung wird in einem Eisbad gekühlt und tropfenweise mit einer Lösung von 31,3 g Chlorameisensäurephenylestcr in 100 ml Dichlormcthan versetzt. Das Gemisch wird 2 1/? .Stunden bei 0⁰C gerührt und anschließend 16 bis IS stunden bei I;auml.o>,i peratur ;:> hehongelassen. Die erhaltene Lösung; wird dreinal mit. Je 20 ml '„'asscr gov/anchcn, über Iki/^ner. iumsu l.fal. <\o IjocIiuc; L timl

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_ 15 . 2214191

unter vermindertem Druck eingedampf t. !lan erholt 43 G Kohlen-* simre-i-mothjrlcyclolicxylr'phenylester als Öl, i)er R^-Wert bei der DlüinGohichtchi'oin.atographie an Kieselgel mit einem Gemisch aus Benzol und Essigsüureäthyles.ter (1^: ι Λ V-olumenteile)'als Laufmittel beträgt 0,77ν '

Beispiel 2

22,8 g 1-Methylcyclohexanol werden in 100 ml Dichlorniethan. gelöst, und die Lösung wird, mit 32,4 ml Pyridin versetzt, Anschließend v/ird die Lösung in einem Eisbad gekühlt und tropfenweise mit einer Lösung von 40,3 g Chlorameisensäure^p-nitrophenylester in 100 ml Dichlormethan versetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden bei 0°C gerührt und anschließe'nd 16 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Die erhaltene Lösung wird dreliiial mit je 30 ml -,fässer .gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Han. erhält 66 g Kohlensäure-1-methylcyclohej^l-p-nitrophenylester als Öl, Dieses Produkt hai. bei der Dünnschichtehroniatographie an Kieselgel mit einem Gemisch aus Berzol und Bssigsäureäthylester (8:3 Volumenteile) einen R_f-Viert von 0,73,

Beispiel 3

Kohlensäiire-i-mechylcyclohoxyl-pentachlorphenylester Gemäß dem vorstehend beschriebenen Verfahren erhält man.aus 2,86 g 1-Hcthylcyclohexanol und 8,23 g Chlorameisensäurepentachlorphenylester 7,70 g ^:Produkt, das.bei der Dünnschicht- · cliroinaLcjg.i-arjhie an Kieselgel mit einern Gemisch aus Benzol und ]jSöigoiiiia"eäthy!l ester (8 : 3 Volumenteile) einen R^-Wert 0,80 aüiVoic-t.

2 0 9 8 8 4 / 1 A 1 T

BAD

2234*11?

Beispiel 4 ^ohlensäiiro-i-.iaethylcyclohoxyl-hydrazid und iC

(a) 19»4 ml lOOprozentiges Hydrazinhydrat werden zu 43 g gemäß Beispiel 1 erhaltenem Kohlensäure-1-metliylcyclohexyl^phenyl-* ester gegeben. Das Gemisch wird 16 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen_k Nach der Zugabe einer Lösung von 11,2g Natriumhydroxid in Wasser extrahiert man das Gemisch fünfmal mit je 75 ml Diäthyläther. Die Ätherphasen werden vereinigt, dreimal mit je 50 ml 2n Natriumhydroxidlösung gewaschen, über' Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Durch Destillation des erhaltenen Öls unter-vermindertem Druck .erhält man 25,2 g Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-hydrazid vom Kp. 112 bis 1i4°C/5 Torr.

C8H16N2O2 :	C	79·	9	H	16	N
ber. :	55,	82	9	,36	16	.27
gef.:	55,		,39	,12

(b) 19,4 ml lOOprozentiges Hydrazinhydrat v,^rerden zu 66 g gemäß Beispiel 2 erhaltenem Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-p-nitrophenylester gegeben. Dieses Gemisch wird 2i/2Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Dabei wird p-Nitrophenol freigesetzt·, und die Masse erstarrt. Man erhält das gewünschte Kohlensäuremonohydrazid durch wiederholte Extraktion mit Diäthyläther. Die Ätherphasen werden vereinigt, dreimal mit je 40 ml 2n Natriurahydroxidlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Das erhaltene Öl wird unter" vermindertem Druck destilliert. Man erhält 26,6 g Kolilensäure-1-methylcyclohexyl-hydrazid vom Kp. 115 bis 117°C/5 Torr.

209884/Uli *m>

	55	C	. 9	H	N	,27	2234797
C8ni6N2°2 :	55	,79 .	,9	,36	16	,30.
ber.:		,93		,72 .	16
gef.:

Setzt man in der vorgenannten Vorschrift Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-pentachlorphenylester ein, so erhält¹ man Kohlensäure-1-methylcyclohexylester-hydrazid,.

2,58 g Kohlensäure-1-methylcyclohexylester-hydrazid werden mit 1,7 ml Essigsäure und 2,5 ml ¥asser vermischt·. Das Gemisch wird in einem Eisbad gekühlt. Anschließend wird das Gemisch sehr langsam mit einer Lösung von 1,14 g Natriumnitrit in 2 ml Wasser "versetzt und sodann 30 Minuten "bei 0⁰C gerührt. Das sich bei der Zugabe von 5 ml !/asser abscheidende ölige Azid wird dreimal mit Diäthyläther extrahiert. Die Ätherlösungen v/erden vereinigt, mit 1 m Natriumhydrogencarbonatlösüng gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck bei einer Badtemperatur von 18°C eingedampft. Man erhält 2,82 g Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-azid als farbloses Öl-mit einem charakteristischen Geruch. Dieses Kohlensäuremonoazid wird ohne A'/eitere Reinigung zur Acylierung von Aminosäuren oder Peptiden verwendet.

Beispiel 5

Kohlensäure-i-methylcyclopentyl-p-nitrophenylester Gemäß Beispiele v/erden 10,0 g I-Methylcyclopcntanol mit 20,2 g Chlorameisensäure-p-nitropheriylester umgesetzt. Man erhält 30,0 g KOhlensäure-i-rnethylcyclopentyl-p-nitrophenylester als Ul, dan bei der Diinnachichtchroraatographie an ,Kleselgcl mit einem Gemisch aus Benzol und Ecsigsäureäthylester (8 : 3 VoIuinenteile) einen R^-Uerk von 0,73 aufv;eist.

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Beispiel 6 Kohlensäure-1-methylcyclopentyl-azid

30 g des gemäß Beispiel 5 erhaltenen Kohlensäureesters werden'" gemäß Beispiel 4 mit Hydrazinhydrat umgesetzt. Man erhält 12,8 g Kohlensäure-1-methylcyclopentyl-hydrazid- als Öl vom ■■ Kp. 110 bis 111°C/7 Torr.
Cr₇IL-N₀Oo : - C- H N

ber.:	.53	,14	8,	92	17	,71
gef.:	53	,34	8,	67	17	,49

Durch Behandlung dieses Kohlensäuremonoazids mit Natriumnitrat, gemäß Beispiel 4 erhält man 12,5 g Kohlensäure-1-methylcyclo-. pentylester-azid, das ohne v/eitere Reinigung verwendet wird.

II. N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-aminosäuren und -peptide

Beispiel 7

Dicyclohexylaminsalz von N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanin

(a) Acylierung mit Kohlensäureestermonbazid:

2,82 g Kohlensäure-i-methylcyclohexylester-azid werden in 10 ml Dioxan gelöst, und die Lösung wird bei 45°C mit einem Gemisch aus 1,6.5 g L-i?heny!alanin, 20 ml N-Natriumhydroxid, 1,70 g Natriumhydrogencarbonat und 10 ml Dioxan versetzt. Anschließend v/ird das Gemisch 41 Stunden bei 45⁰C gerührt. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wird"der Hackstand' gekühlt und in Gegenwart von 10 ml Essigsäureäthylester mit /ι η Salzsäure angesäuert. Die wäßrige Phase wird mit kaltem Essigsäureäthylester extrahiert. Die organischen Extrakte worden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter

209884/1411

BAD ORIGINAL

vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand von 2$ 45 g" wird in Diäthyläther gelörjt/Und die Lösung mit 1,6 ml ©ieyelohexylamin versetzt. Das beim Abkühlen sich abscheidende -kristalline Aminsälz wird abfiltriert-, mit kaltem Diäthyläther .gewaschen:-, . und im Vakuuaiexsikkator getrocknet. Nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung von Äthanol und Essigsäureäthylester erhält man 3,47 g der in der Überschrift genanntön Verbindung vom F. 184 bis 185°C (Zersetzung)/q/^² "+ 26*5 £ 0,7° (c = IfO^ Methanol),

C₁₇H₂^NO₇₄ .C₁₂II₂₃N: C H N

"ber.: , 71,57 9,53 5,76 .gef»: 71,56 9*45 5,80

(b) Acylierung mit KohlensäUrepentachlorphenylester';

2,16 g L-Phenylalanin-methjrlester-liydrochlorid vrerden in 10 ml Dimethylformamid gelöst., und die Lösung wird mit 2,80 al Triäthylämin \rersetzt. Das ausgefalleile Triäthylämin-hydrochiörid wii'd abfiltriert Und das Filtrat mit einer Lösung voll 4y0 g gemäß BeispieD- 3 erhaltenem Kohlensäure-1-methylcyclohexylpentachlorphenylester in Dimethylformamid versetzt. Das Geniifech wird 4 1/2 Tage bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Lösungsmittel wird bei einer Badtemperatur von 45°C "unter verriiinderteffl Druck abgedampft und der Rückstand in Essigsäüreäthyrester gelöst. Die Lösung v/ird in einem Eisbad gekühlt, mit eiskalter 1n Salzsäure, "asser und anschließend zur Entfernung des gebildeten Phenols mehrmals mit 2m Nätritimcarbonatlösxmg gewaschen.. Die erhaltene Lösung wird übeD" Magnesiumsulfat getrocknet und unter verminderten Druck eingedampft. Man erhält 2*76 g M-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylaianin-methylester

2Ö988A/H11

als Öl. Der so erhaltene Methylester wird, in 25 BiI Methanol
gelöst und die Lösung mit 5 ml 2n Natriumhydroxidlösung ver« ^f setzt. Das Gemisch wird 60.Minuten bei Raumtemperatur geschüttelt und anschließend bei O⁰C mit 10 ml. 1n Salzsäure neutralisiert.. Nach dem Abdampfen des Methanols unter vermindertem
Druck wird der Rückstand in einem Eisbad gekühlt und in Gegen- _s wart von Essigsäureäthylester mit eiskalter kn Salzsäure angesäuert. Die wäßrige Phase wird mit Essigsäureäthylester extra- >' hiert, Die organischen Phasen v/erden vereinigt, über Magnesium- . * sulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, f Der erhaltene Rückstand, wird, in Diäthyläther gelöst und die f Lösung mit 1,7 ml Dieyclohexylamln versetzt. Das erhaltene Pro«- j dukt wird aus einer Mischung von Äthanol und-Essigsäureäthyl«·
ester umkristallisiert, Man erhält 2,90 g Dleyclohexylarnin« « salz von N-(i-MethylcyclO/hexylo2iyc£irbonyl)-'L«-phenylalanin yqb j F, 1dh biß'· 185°C (Zersetzung). /ojV'^ + 26,6·+ 0,7^Q {© » 1,0; f Methanol), / j

C₁₇Ii₂₅IJO₄^C₁₂II₂₅N: C H-I ' ' ' j. t)ea%i 71,57 9,55 5,76
gef, j 71,56 9,4-9 _ 6,OJ, ·

Verwendet man gemäO dem vorstehenden Verfahren Kohlensäure-1- > rflethylcyclohexyl-p-nitrophenylester, so erhält man die gleiche ^ Verbindung. . :

(c) Iß-ocyanat-yerfahren: j

1,08 g L-Phenylalanin-methylester-hydrochlox^id werden in 15 ml | wasserfrei-öm Toluol suspendiert. In die Suspension v.ird 90 Ilinu·
ten bei einer Bod temperatür von 120 bis 130⁰C wasserfreies
Phosgen eingeleitet. Die erhaltene ;klare Lösung wird unter- vor-

2O908A/U11

raindertera Druck eingedampft. Man erhält das entsprechende ■ Isocyariat als 01. Dieses wird mit 0,52 g 1-Methylcyclohexanol ,- und 2 ml Pyridin versetzt. Anschließend v/ird das Gemisch 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Das Lösungsmittel v/ird unter verraindertem Druck abgedampft und der dunkel gefärbte' Rückstand in Chloroform gelöst. Die Lösung v/ird auf eine mit 20 g Kieselgel (0,05 bis 0,2 mm, E-. Merck) beschickte Säule aufgesetzt, die mit Chloroform äquilibriert ist. Die Säule v/ird mit Chloroform' eluiert, das 1 Prozent Methanol enthält. Dünnschichtchromatographisch läßt sich feststellen, daß die erste 100 ml-Fraktion das gewünschte Produkt enthält. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man 1,15 g N-(1-Methyl-

; cyclohexyloxyoarbonylO-L-phenylalaninmethylester.

/ ■ ■ ■

< ■ ■ ■

Der so erhaltene Methylester v/ird in 10 ml Methanol gelöst und die Lösung mit 3 rnl 2n Natriumhydroxidlösung versetzt. Das Ge-I misch wird'60 Minuten bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach \ dem Abdampfen des Methanols unter vermindertem Druck wird der

Rückstand in einem Eisbad gekühlt und bei O⁰C in Gegenwart von

^: Essigsäureäthylester mit kalter 1n Salzsäure angesäuert. Die

i - ■ · - ■

\ wäßrige Phase wird mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die * organischen Phasen werden, vereinigt, über Magnesiumsulfat ge- ? trocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Der-erhalte-

i ■ .

^ ne Rückstand v/ird in Diäthyläther. gelöst und die Lösung mit « 10 ml Dicyclohexylamin versetzt. Das erhaltene Salz v/ird ausf einer Mischung von Methanol und Diäthyläther umkristallisiert.

¹ . Ilach den Abi'iltr.icren erhält man 1,08 g Dicyclohexylarainsalz ?· von i^::~(1*-IIßthylcyclohexyloxycai"bonyl)-L-phenylalanin voiq

ί F. 104 bis 1OC⁰U (Zersetzung). A/2⁵ + 26,1 + 0,7°·(c = 1,0; I - D ■■ -■

209884/U11

ommmt

Methanol).

C₁₇H₂₃NO₄. C₁₂H₂₃H: C H N . ;

ber.: 71,57 9,53 5,76

gef.: 71,80 9,48 5,66.

Beispiel -8

N- (1 -Methylcyclohexyloxycarbonyl)-glycin

1,13 g Glycin v/erden mit Kohlensäure-i-methylcyclohexyl-azid (aus 15 mITol des gemäß Beispiel 4 erhaltenen Kohlensäuremonohydrazids) gemäß Beispiel 7 acyliert. Nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung'von Essigsäureätlrylester und Petroläther erhält man 2,27 g N-(1-Methylcyclohexy] oxycarbonyi)-glycin vom F. 70 bis 72⁰C.

C10H17NO4:	C	80	H	96	6,	N
ber.:	55,	66	7,	88	6,	51
gef.:	55,	7,		74.

Beispiels

Dicyclohexylaminsalz von N- (1-Methylcyclohexyloxvcarbonyl)-L-serin -

1,58 g L-Serin v;erden mit Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-azid (aus 15 mMol des entsprechenden Kohlensäuremonohydrazids hergestellt) gemäß Beispiel 7 acyliert. Das erhaltene acylierte L-Serin (2,10 g Öl) wird auf übliche Weise mit Dicycrohexylamin behandelt. Man erhält 2,52 g der in der Überschrift; genannten Verbindung vom F. 128 bis 129°C. /aj^ + 12,3 + .0,6° (c =1,0; Methanol). . . -

ber.:

C	76	9	H	N
64,	46	9	,92	6,57
64,		,48	6,53

209884Π4ΊΪ

■Beispiel 10 ■

Ν^α- (1 -Metlwlcyclohexyloxycarbonyl) -Yl -ni tro-Ii-arprinin ■

3,29 g N -Nitro-L-arginin v/erden nach dem vorstehend 'beschriebenen Verfahren mit Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-azid (herge-

acylier'c, stellt aus 15 mMol des entsprechenden KohlensäureesterhydrazidF)T Das erhaltene Produkt wird aus einer Mischung von Essigsäureäthyiester und Petroläther umkristallisiert. Man erhält 2,0 g der in der Überschrift genannten Verbindung vom F,'91⁰C (Zersetzung). /α7β⁴ - 1,5 + 0,5° (c =. 1,0; Methanol), C₁₄H₂₅N₅O₆.1/4CH-₃CO₂C₂H₅: C H N*

ber.: 47,24 7,14 18,36

gef-.: 47,28 7,35 18,54. '

Beispiel Λ"\ -

N ' -{1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-Iysin 5,5 g L-Lysin-monohydrochlorid werden in 40 ml Wasser gelöst und die Lösung mit 5,5 g basischem Kupfercarbonat versetzt. Das Gemisch wird 30 Minuten auf dem siedenden itasserbad erwärmt und anschließend durch Diatomeenerde filtrierte -Das Filtrat v/ird mit 1,6 g Magnes±niBO3cid versetzt und das Gemisch bei 4^⁰C gerührt. Anschließend wird tropfenweise eine. Lösung vo» liohlen*- säure-i-methylcyclohexyl-azid (hergestellt aus 45 nMol des .nach der vorstehenden Vorschrift hergestellten ICohlensSurieesterhydrazids.) -· In SQ ml Ifethanol zugegeben. Das Eeaktionsgeaisch wird- #5 Stunden laei 45°C geriliirt und aaischließeiid in eitlem Bis~ bad gekühlt. Bach der Zugabe von 27 ml 2 η Essigsäure wird der ausgefallene niederschlag' abfiltriert, mit 'Jässör gewaschen u im Vakuumoxsllckator ,getrocknet, Han erhält 6,9 g 'Ku von Έ' - (1 -J-Iethylcyclohexyloxycarbonyl) -IL-lysin,

Eine Suspension von 6,9 g des Kupferkomplexes in 100 ml Wasser wird in einem Eisbad gekühlt und mit 25 ml 2n wäßriger Ammoniaklösung versetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden bei 0 C unter Einleiten eines mäßig starken Schwefelwasserstoffstroms gerührt und anschließend sehr vorsichtig mit' 35 ml 2n Essigsäure versetzt. Der Kupfersulfidniederschlag wird durch Diatomeenerde abfiltriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält Ν^έ -(I-Methylcyclohexyloxycarbonylj-L-Iysin als farblosen Feststoff, der bei der Dünnschichtchromatographie mit n-Butanol, Essigsäure und Wasser (18 : 2 : 5 Volumenteile) als Laufmittel einen einzigen durch Ninhydrin anfärbbaren Flecken ergibt. Das Produkt wird aus Wasser umgefällt. Man erhält 5,45 g Produkt vom F. 184 bis 188⁰C (Zersetzung) /«7J5² + 3,0 + 0,5° (c = 1,0; Wasser)»

Beispiel 12

Dicyclohexylaminsalz von N- (1 -Methylcyclo'nentyloxycarbonyl)-L-phenylalanin

1,65 g L-Phenylalanin v/erden in 10 ml 1n Natriumhydroxidlösung gelöst, und die Lösung wird mit 1,7 g Natriumhydrogencarbonat und 5 ml Dioxan versetzt. Anschließend wird bei einer Badtemperatur von 45⁰C eine Lösung von Kohlensäure-1-methylcyclopentylazid (hergestellt gemäß Beispiel 6 aus 2,38 g des entsprechenden Kohlonsäureesterhydrazids) in 5 ml Dioxan'zugegeben. Das Gemisch wird 24 Stunden bei 45 C gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgedampft. Der erhaltene Rückstand wird gekühlt und in Gegenwart von 20 ml Essigsäureäthylester mit einer eiskalten 4n Salzsäure angesäuert. Die wäßrige Phase wird dreimal mit eiskaltem Essigsäureuthylester

209834/U11

extrahiert. Die organischen Extrakte werden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand von 1,28 g wird in Diäthyläther gelöst und die Lösung mit 0,87 ml.Dicyclohexylamin versetzt. Das ausgefallene kristalline Aminsalz. .wird abfiltriert, mit Diäthyläther gewaschen und im Vakuumexsikkator getrocknet. Nach dem Umkristallisieren aus Äthanol erhält man 1,52 g Dicyclöhexylaminsalz von N-(1-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-pheny!alanin vorn F. 203 bis 205⁰C (Zersetzung), /ö/^¹ + 26,9 + 0,7° (c = 1,0; Methanol). . .

H2^N:	C	15	9	H	5	N ..
ber.:	71,	09	9	,38	5	,93
gef.:	71,		,45	,96.-

Beispiel 13

DicyclohexylaminesIz von H- (1 -Methylcyclopentyloxycarbonyl) -L-phenylalanin

Aus 1,08 g L-Phenylalanin-methylester-hydrochlorid wird das entsprechende Isocyanat hergestellt. Dieses wird in Pyridin mit 0,45 g 1-Methyl.cyclopentanol zu N-O-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalaninmethylest.er umgesetzt. Nach dem Verseifen des Methylesters und anschließende Behandlung mit Dicyclohexylamin erhält man 1,16 g des gewünschten Produktes vom F. 203 bis 205⁰C (Zersetzung), foj^ + 27,0 + 0,7°.(c = 1,0; Methanol).
C₁₆H₂₁NO₄. C₁₂H₂ H:

C	15	9	H	N	93
71,	30 .	9	,38	5,	66
71,		,48	VJl

■ßol.:
Auf die vorstehende ^TJeir>e erhalt man unter Verwendung von

209884/ U 1Ϊ

1-Metliy.1cyclohexanol folgende Verbindungen: N-(I-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-glycin vom F. 70 - 71°C; Dicyclohexylaminsalz von N- (1 -rietliylcyclohexyloxycarbonyl) -L-serin vom F. 128 bis 129°C, [aj²^ + 12,4 + 0,5° (c = 1,0;' Methanol) und ^-(i-MethylcyclohexyloxycarbonylO-N -nitro-L-arginin vom F. 90⁰C (Zersetzung), /Ö/q - 1,7 + 0,4° (c = 1,0; Methanol). · '

Beispiel 14

Dicyclohexylaminsalz von N^a-BenzylQ'xycarbonyl-N - (1 -methy1-cyclobexyloxycarbonyl)-L-lysin

Eine Lösung von 1,43 g N -(i-MethylcyclohexyloxycarbonylKL-lysin in 10 ml 1n Natriumhydroxidlösung v.^rird in einem Eisbad gekühlt und mit 0,85 g IJatriumhydrogencarbonat versetzt. Anschließend v/erden tropfenweise 0,94 g Chlorarneisensäurebenzylester zugegeben, und das Gemisch wird 3 Stunden bei 0⁰C gerührt. Sodann wird das überschüssige Reagens durch Extraktion mit Diäthyllither entfernt. Das erhaltene Gemisch wird in Gegenwart von Diäthyläther mit eiskalter 4ri Salzsäure angesäuert. Die wäi3rige Phase v/ird zweimal mit Diäthyläther extrahiert. Die Ätherphasen werden vereinigt, mit eiskalter In Salzsäure und anschließend mit ¥asser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in Diäthyläther gelöst und die Lösung mit 1 ml Dicyclohexylamin versetzt. Die nach 16- bis 18-stündigem Kühlstellen ausgefallenen Kristalle werden abfiltriert, mit kaltem-Diäthyläther gewaschen und getrocknet. Uan erhält 2,6?. g des gewünschten Produktes vom F. 94 bis 96⁰C. /σ/p ' -ι- 4,9 +_ 0,5° (c = 1,0; Methanol).

209884/141Ί g/φ original

	•67	C	9	H	N	223479?
HOVN: ·	67	,85	9	,21	6,
ber.:		,83		»13	7,	98
gef.:			07.

B e i s ρ ie 1 15

I^'-Benzyloxycarbonyl-N¹-- (1 -methyl cyclohexyloxyearbonyl) -L-lysy.l··» L-Orolyl-L-valyl-g].ycin-methylester ' .

2,41 g des gemäß Beispiel 14 erhaltenen Dicyclohexylaminsalzes v/erden 30 Minuten in öOprozentigem Äthanol mit 4 cm eines Kationenaustauscherharzes (Dowex 50 w χ 8; H⁺-Form) geschüttelt. Nach dem Abfiltrieren des Harzes wird das Filtrat unter vermindertem Druck bei einer Badtemperatur von 45°C eingedampft. Der Rückstand wird in Diäthyläther gelöst, die Lösung über Magnesiumsulfat getrocknet und unter, vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 1,7 g Diacyl-L~lysin (freie Säure) als sirupösen Rückstand. Dieser Rückstand wird zusammen mit 1,14-g L-Prolyl-L-välyl-glycin-rnethylester (hergestellt gemäß der in Bull.Chem. Soc.Japan, Bd. 37 (1964), S. 1471, angegebenen Vorschrift) in Dichlormethan gelöst. Anschließend wird bei O⁰C eine Lösung von 0,83 g NjN'-Dicyclohexylcarbodiimid zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 16 bis 18 Stunden bei 4°C stehengelassen und anschließend nach üblichen Verfahren zunr gewünschten Tetrapeptid aufgearbeitet. Dieses Tetrapeptid wird aus Diäthyläther gefällt und aus einer Mischung von Essigsäureäthylester' und /Petroläther umgefällt. Man erhält ein reines Produkt mit einer .optischen Drehung von /ccJ-q - 73,6 +_ 1,2° (c = 1,0; Methanol). ' -·■'-■■-■

^C3^l3^II53^II5°9^: ' · ^{C H w}

bei-.: . . -61,12 7',77 10,18.

gcf.: 61,40 7,68 10,01.

20 9884/1411

Beispiel 16

r oxy

N -Benzyl oxycarbony^l-N^ (1 -rnethylcycJ-ghexylKTarbonyl·) -L-lysyl-L-J)FOl yl-L-valyl-plycin

1,38 g des gemäß Beispiel 15 erhaltenen Tetrapeptidesters v/erden in 5 ml Methanol gelöst, und die Lösung wird mit 2 ml 2n Natriumhydroxidlösung versetzt. Das Gemisch v/ird' 60 P4inuten bei Raumtemperatur geschüttelt und anschließend in einem Eisbad gekühlt. 10 ml ¥asser und 15 ml Essigsäureäthylester v/erden zugegeben,und das Gemisch wird mit eiskalter 1n Salzsäure angesäuert. Die wäßrige Phase wird mit kaltem Essigsäureäthylesterextrahiert. Die organischen Phasen v/erden vereinigt, mit eiskalter 1n Salzsäure gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet .und unter vermindertem Druck eingedampft. Der erhaltene schaumartige Rückstand wird aus einer Mischung von Essigsäureäthylester und Diäthyläther gefällt. Nach Der Umfällung aus dem gleichen Lösungsmittelgemisch erhält man das gewünschte Produkt in reiner Form. Bei der Dünnschichtchromatographie mit einem Gemisch aus Chloroform, Methanol und Essigsäure (90 : 10 : 3 Volumenteile) als Lauf mittel erhält man eine einzige Komponente. Ausbeute 1,26 g. [qj^ - 71*1 + 1,1° (c = 1,0; Methanol).

1/2H2O:	C	,81	H	N	2.6
ber. :	59	,97	7,68	10,	92.
gef.:	59	7,84	9,

Beispiel 17

N -Benzvloxvcarbonyl-N^-Ci-methylcyclohexyloxvcarbony:! )-L-lysyl L-prclyl-L-val vl -/rlycyl-N*-(1 -methyl cyclohoxyloxycarbonyjl^L-lysin-rnothy], er. tor

N^-Benzyloxycarbonyl-N-'-Ci-me thylcyclohexyloxycai-bony^-L-lysin (hergestellt geii^:iß Beispiel 15 aus 1,5 nuMol des Dicycloi.exyl-

7 η 9 8 8 4 / 1 t 1 1

B ORIGINAL

aminsalzes) wird in 10 ml Diäthyläther gelöst und die Lösung bei 0°C mit einer Ätherlösung von Diazomethan bis zur bleibenden Gelbfärbung versetzt. Anschließend wird die Lösung 30 Minuten bei 0⁰C stehengelassen und sodann mit wenigen Tropfen Essigsäure versetzt, um das überschüssige Diazomethan zu zersetzen. Die Lösung wird mit 1m Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält den Methylester des Diacyl-L-lysins als sirupösen Rückstand, der sich bei der Dünnschichtchromatographie mit einem Gemisch ,aus Methanol und Chloroform (2:8 Voluraenteile) einheitlich verhält.

0,69 g des erhaltenen Diacyl-lysin-methylesters werden 2 Stunden bei Raumtemperatur in einem Gemisch aus 10 ml Methanol und 2,5 ml Essigsäure über Palladium hydriert. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wird der ölige Rückstand in Dichlormethan gelöst und die Lösung bei O⁰C mit einer eiskalten 50prozentigen Kaliuracarbonatlösung geschüttelt. Nach entsprechender Aufarbeitung erhält man 0,53 g N -(1-MethyI-cyclohexyloxycarbonyl)-L-lysin-methylester als sirupösen Rückstand. Dieser wird zusammen mit 0,91 g N^a-Benzyloxycarbonyl-N (i-methylqrclohexyloxycarbonylj-L-lysyl-L-prolyl-L-valyl-glycin in 10 ml Dichlormethan gelöst. Die Lösung wird bei O⁰C mit einer Lösung von 0,31 g Dicyclohexylcarbodiimid in Dichlormethan versetzt. Das Gemisch wird 16 bis 18 Stunden bei 4°C stehengelassen und anschließend auf die übliche Weise zur Is~olierung des gewünschten Pen i:apeptidderivats aufgearbeitet.. Dieses Produkt fäll!; aus einer Ätherlösung als gelatinöser Niederschlag aus. Es verhält sich dünnschichtchromatographisch mit

209884/1411 _{βΑί) oalQINAi}.

einem Geraisch aus Methanol und Chloroform (1:9 Volumenteile) als Laufmittel einheitlich. Nach der Umfällung aus einer Mischung von Essigsäureäthylester und Diäthyläther erhält man 1,08 g Produkt, faj^ - hg,7 +. 1,0° (c = 1,0; Methanol). '

C₄₉H₇₇N₇O₁₂: CH₁N

ber.: 61,55 8,12 10,25

gef.: 61,60 8,26 10,00.

Beispiel 18

N^g-Benzyloxvcarbonyl-N^£-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-lysyl-L-prolyl-L-valyl-glycln-N -(i-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L·- lysin-hydrazid

0,72 g des gemäß Beispiel 17 erhaltenen Pentapeptidderivats werden in 6 ml Hydrazin gelöst und die Lösung mic 0_?4 ml Hydrazinhydrat versetzt. Anschließend wird das Gemisch 16 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur gehalten. Das Hydrazid wird durch Zugabe einer großen Menge Diäthyläther ausgefällt. Der gelatinöse Niederschlag wird abfiltriert, mit Diäthyläther gewaschen und im Vakuumexsikkator über Schwefelsäure getrocknet. Nach der Umfällung aus einer Mischung von Methanol und Diäthyläther erhält man 0,67 g reines Produkt, /o/q - 51,6 £ 0,9° (c = 1,0; Methanol).

C₄₈H₇₇N₉O₁₁: CHN

ber.: ■ 60,29 8,12 13,18 gef.: 60,34 8,25 13,16

Beispiel 19 N^a-Benzyloxycarbonyl-N*-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-lysyl-N -nitro-L-arginyl-N^-nitro-L-argiriinai-nid

C C

Eine Lösung von 0,54 g N -Nitro-L-arginyl-N -nitro-L-argininamid-hydrobromid (hergestellt gemäß der in Bull.Chem.Soc.

ORIGINAL

Japan, Bd, 39 (1966), S. 882, angegebenen Vorschrift) und 0,28 ml Triethylamin in 5 ml Dimethylformamid wird mit einer Lösung von 0,52 g N^l0C-Benzyloxycart>onyl-N^£-(1-methylcyclohexyloxycarbonylJ-L-lysin-N-hydroxysuccinimidester (hergestellt aus dem entsprechenden Diacyl-lysin und N-Hydroxysuccinimid durch Kondensation in Gegenwart von Dicyclohexylcarbodiimid) in 2 ml Dimethylformamid versetzt. Das Gemisch wird 1.6 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach dem Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wird der Rückstand in einer Mischung von n-Butanol und Essigsäureäthylester (1:3 Voluraenteile) gelöst. Die Lösung wird mit eiskalter 1n Salzsäure, V/asser und anschließend 1m Natriumhydrogencarbönatlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet; und unter vermindertem Druck eingedampft. Das aus n-Butanol ausgefällte Produkt wird aus einer Mischung von Methanol und n-Butanol umgefällt. Man erhält 0,70 g des gewünschten Tripeptids. /α/β⁵ - 15,3 + 0,6° (c = 1,0; Methanol).

C₃Z₊H₅₅N₁₃O₁₁: C : . H N . '

ber.: 49,69 .6,75 22,16 gef.: 49,28 6,91 21,59.

Beispiel 20

N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanvl-L-phenylalanin'-methylester .

0,97 g des gemäß Beispiel 7 erhaltenen Dicyclohexyläminsalzes von N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanir.· werden 30 Minuten bei Raumtemperatur in 60prozentigem Äthanol mit 5 ml eines Kationenaustauscherharzcs (Dowex 5O*.7 ; H -Forr.·) geschüttelt. Dicj erhaltene freie Säure wird anschließend mit L-Phenyl-

ORIGINAL

alaninmethylester (hergestellt aus O,A3 g (2 mMol) des entsprechenden Hydrochlorids durch Neutralisation mit einer 50prozentigen Kaliumcarbonatlösung in Gegenwart von Dichlormethan) unter Verwendung von Dicyclohexylcarbodiiraid als Kondensationsmittel Γη Dichlormethan gekuppelt..Das Reaktionsgemisch wird nach den üblichen Verfahren aufgearbeitet und dabei mit 1n Salzsäure und Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung von Essigsäureäthylester und Petroläther erhält man 0,88 g des gewünschten Dipeptids vom F. 119 bis 12O°C./ä/5⁵ - 13,9 + 0,4° (c = 1,0; Methanol).

C27H34N2O5:	C	50	H	35	N	00
ber.:	69,	60	7,	45	6,	92.
gef.:	69,	7,	5,

Beispiel 21

N-(1-Methylcyclopentyloxycarbonvl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester

Eine Suspension von 0,95 g des Dicyclohexylaminsalzes von N-(1-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalanin (erhalten gemäß Beispiel 12 oder 13) in 10 ml Diäthyläther wird bis zum Verschwinden des Feststoffes mit 7 ml eiskalter 1m Citronensäure geschüttelt. Die Ätherlösung wird mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält die freie Säure als sirupösen Rückstand. Diese v/ird anschließend mit L-Pheriylalaninmethylester (hergestellt nach üblichen Verfahren aus 2 raMol des entsprechenden Hydrochlorids) in Gegenwart von Dicyclohexylcarbodiimid als Kondensationsmittel in Dichloräthan gekuppelt. Der ausgefal] on.? Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert und das Filtrat unter

209984/1411

vermindertem Druck- eingedampft. Der erhaltenen feste Rückstand wird in Essigsäureäthylester gelöst und die Lösung mit eiskalter 1m Citronensäure, Wasser und anschließend Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Der kristalline Rückstand v/ird zweimal aus einer Mischung von Sssigsäureäthylester und Petroläther umkristallisiert. Man erhält 0,78 g des gewünschten Produktes in Form von Nadeln vom P. 116 bis 11"⁰C. fqj^⁶ - 14,3 + 0,6°.(c = 1,0; Methanol). C₂₆H₃₂N₂O₅: C H N

ber.:	69,	OO	7,	13	6,	19
gef.:	69,	24	7,	17	5,	98.

III. Vorzugsweises Verfahren zur Entfernung der Schutzgruppen

Beispiel 22

L-Phenylalanvl-L-phenylalanin-methylester-hydrochlorid 0,20 g des gemäß Beispiel 20 erhaltenen N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylestere werdenin 2 ml einer 1n Lösung von Chlorwasserstoff in Essigsäure gelöst, und die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach dem.Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wird der erhaltene Rückstand mit Diäthyläther behandelt. Man erhält das gewünschte Dipeptid-hydrochlorid als Nadeln. Die Kristalle werden aus einer Mischung von Methanol und Diäthyläther umkristallieiert,. Man erhält 0,152 g Produkt vom F. 201 bis 202⁰C (Zersetzung), /ö/jp + 6,5 + 0,5° (c --■- 1,0; Methanol). ■

2098 84/UTT BAP

Beispiel 23

L-Phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester-formiat 0,20 g des gemäß Beispiel 21 erhaltenen H-(1~Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylesters werden in 2 ml Ameisensäure gelost,, und die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck bei einer Badtemperatur von 40 C wird der Rückstand mit Diäthyläther behandelt. Man erhält das gewünschte Dipeptid-formiat als gelatinösen niederschlag, der beim Kühlen in einem Eisbad auskri.stallisiert. Nach dem Umkristallisieren aus Äthanol erhält man 0,165 g Produkt vom F. 112 bis 115⁰C. /ö/jp + 3,8 +_ 0,5° (c = 1,0; Methanol).

IV. Kinetik der Abspaltung der Aminoschutzgruppen durch Säuren

Beispiel 24

Die Kinetik der Abspaltung der Aminoschutzgruppen durch Säuren

der wird im Vergleich zur bekannten AminoschutzgruppeT^^ert.-Butyl-

oxycarbonylgruppe, die durch Behandlung mit Säure unter milden ■ Bedingungen entfernbar ist, untersucht,

Untersuchte Verbindungen:

Dicyclohexylaminsalz von N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl) -L-phenylalanin (Mhoc-Phe-OH.DCHA),

N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-rnethylester (Mhoc-Phe.Phe~OMe),

Dicyclohexylaminsalz von N-(I-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L--phenylalanin (Mpoc-Pho-OII.DCHA),

2093 84/141

N-O-MethylcyclopentyloxycarbonylJ-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester (Mpoc-Phe.Phe-OIle), N-(tert.-Butyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalaninme'thy-lester (Boc-Phe.Phe-OMe).

Verfahren zur Bestimmung der Kinetik: [kj Verfolgung der optischen Drehung:

20 mg der zu untersuchenden Verbindung werden bis zu einem Gesamtvolumen von 1 ml mit Ameisensäure versetzt. Die Lösung wird sofort in eine Meßzelle gebracht und die optische Drehung bei 25 C in gleichbleibenden Zeitabständen gemessen,'um die Konzentration der im sauren· Medium verbleibenden Testverbindung festzustellen. Die Geschwindigkeitskonstante der sauren Hydrolyse wird nach folgender Gleichung berechnet: .

_ln _&._ ₌_a_i^01 _lGg ^ax

₍₎
dt t ^a~^x ■ t

in der k^ die Geschwindigkeitskonstante erster Ordnung, a die Anfangskonzentration der Testverbindung und χ die in der Zei.t t umgesetzte Menge der Verbindung ist. Aus obiger Gleichung läßt sich die Halbwertszeit X der Schutzgruppe bei saurer Hydrolyse bestimmen, wenn für χ a/2 eingesetzt wird. Man erhält folgende Gleichung:

In 2 (2,303 log 2)

Potentiometrische Titration:
0,2 rnMol der zu untersuchenden Verbindung werden mit SOprozentiger Ameiεcnsäure auf ein Volumen von 2 m3 gebracht, und das Gorni sch v/ird auf einer Temperatur von 25°C gehalten. In-bestimmten Zeii.abotMnden v/erden jeweils. 0,1! ml Lösung aus dem Gemisch

2098.84/U1.1

entnommen und mit 1,5 ml Eisessig verdünnt.. Die verdünnte Lösung wird sofort mit einer 0,02: η Perchlorsäurelösung in Eisessig titriert, um die Konzentration der -freigesetzten-Aminogruppe zu bestimmten» Die daraus erhaltenen Werte werden zur Bestimmung der Qeschwindigjceitskonstante und der Halbwertszeit in die vorstehende Gleichung eingesetzt.

Ergebnisse:

Untersuchte ^""-\^^^ Verbindung -^.	HCOOH	80 % HCOOH
	j Verfahren A	Verfahren B
Mhoc-Phe-OH.DCHA	Ic1=I1ISxIO"1 r=6,O3	--
Mhoc-Phe.Phe-OMe	k1=1l24x10~1'
Mpoc-Phe-OH.DCHA	k1=2,53x1O""1 r=2,74
Mpoc-Fhe. Phe-OMe	^=6,16x10"1 r«ifi3	Ic1 =2,40x10"1 T=2,89
Boc-Phe.Phe-OMe	r=6,36	k1=2,48x10"2

Maßeinheiten: k₁ /min~_/» ^τ /min/.

Aus diesen Werten läßt sich folgende Reihenfolge für die Säurelabilität der Aminoschutzgruppen angeben: Mpoc >Mhoc=Boc.

2 ο 9 P P L ! 1 ' 1 Ί

Claims (1)

1. Patentansprüche

   1. Verbindungen der allgemeinen Formel I

   ^(CV^H2>n A . (1)

   -C-

   '0-C-R₂

   in der R>i einen niederen Alkylrest bedeutet, η eine ganze Zahl mit dem "v/ert 4, 5 oder 6 ist und R₀ eine Azidogruppe oder einen substituierten oder nicht substituierten Phenoxyrest der allgemeinen Formel II bedeutet,

   ; wobei m eine ganze Zahl mit einem ΐ/ert von 1 bis 5 und Y ein

   \ l/asser stoff- oder Halogenatom, die Nitro-, Hydroxyl- od,er Cyano-

   ί gruppe oder ein niederer Alkyl- oder Alkoxyrest ist.

   2. Kohlensäure-i-methylcyclohexyl-phenylester, , Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-p-nitrophenylester, Kohlensäure-i-methylcyclohexyl-pentachlorphenylester, Kohlensäure-1-methylcyclohexylester-azid,

   Kohlensäure-i-methylcyclohexylester-hydrazid, Kohlensäure-1-methylcyclopentyl-p-nitrophenylester, Kohlensäure-i-methylcyclopentylester-azid und Kohlensäure-i-methylcyclopentyiester-hydrazid.

   j 3· Verfahren zur Herstellung der Vorbindungen nach Anspruch 1, t dadurch gekennzeichnet, daß man

   988A/UM

   (a) ein 1-Alkylcycloalkanol der allgemeinen Formel III

   (III)

   in der R* und η die gleiche Bedeutung wie in Anspruch 1 haben, mit einem Halogenameisensäureester der allgemeinen Formel IV

   X-C-O-R, (IV)

   in der X ein Halogenatom und R- einen substituierten oder nicht substituierten Phenylrest der allgemeinen Formel V bedeutet

   in der Y und m die gleiche Bedeutung wie in Anspruch 1 haben, zu einem Kehlensäureester der allgemeinen Formel VI umsetzt,

   (VI)

   in der R^, η und R^ die vorstehend angegebene Bedeutung haben, und gegebenenfalls

   (b) den Kohlensäureester der allgemeinen Formel VI mit Hydrazin zu einem Kohlensäureesterhydrazid der allgemeinen Formel VII umsetzt,

   209884/U11

   in der R^ und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben* Und dieses ift einem sauren Medium mit einem Nitrit der allge meinen Formel VIII _ - -

   R₅-ONO (VIII)

   in der R^ ein Wasserstoffatom, einen niederen Älkylrest oder ein Alkalimetallkation bedeutet, zu einem Kohlensäure-• esterazid der allgemeinen Formel IX. umsetzt,

   (IX)

   In der R^ und η die vorstehend angegebene Bedeutung -haben.

   k. Verwendung der Verbindungen nach Anspruch 1 zum Schutz von Arainogruxjpen von Aminosäuren oder Peptlden bei der Peptidsynthese.

   5.] Verfahren zur Herstellung"von Peptiden, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Amlnogruppe einer Aminosäure oder eines Peptids mit einer Verbindung nach Anspruch 1 acyliert, die erhaltene II-(1 -Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-aminosäure oder das entsprechende P'eptidderivat mit einer anderen Aminosäure oder einem Peptid nach bekannten Verfahren kondensiert und vom erhaltenen N-(1 -Alkylcycloalkyloxyca,rbonyl)-peptid durch Säurebehandlung die 1-Alkylcyc]oalkyloxycarbonylgruppe abspaltet.

   209884/U11

   6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man als Aminosäure Glycin, Alanin, Valin, Norvalin, Leucin, Norleucin, Isoleucin Serin, Threonin, Cystein, Cystin,
   Methionin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, Lysin, Ornithin, Citrullin, Arginin, Phenylalanin, Tyrosin, Histidin, Tryptophan, Prolin, Hydroxyprolin, ß-Alanin,
   y~Aminobuttersäure, a-Aminobuttersäure, α,ß-Diaminopropionsäure, α.,y-Diaminobuttersäure oder Sarcosin oder andere natürlich auftretende oder synthetische Aminosäuren verwendet.

   7. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man als I-Alkylcycloalkyloxycarbonyl-derivat
   Kohlensäure-1-raethylcyclohexyl-phenylester,
   Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-p-nitrophenylester,
   Kohlensäure-i-raethylcyclohexyl-pentachlorphenylester,
   Kohlensäure-1-methylcyclohexyl-azid,

   Kohlensäure-i-methylcyclopentyl-p-nitrophenylester oder
   Kohlensäure-1-methylcyclopentyl-azid venvendet.

   8. Verfahren nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet, daß man zur Entfernung der I-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe eine Halogenwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Trifluoressigsäure, Essigsäure, Ameisensäure, Monochloressißsäure,
   Methansulfcnsäure, p-Toluolsulfcnsäure oder ein Gemisch aus rrindestens zv/ei dieser Säuren verwendet.

   S, Verfahren zur Herstellung von Peptiden, dadurch gekennzeichnet, dal3 man ein I-Alkylcycloalkanol der allgeaieiiien Form«.·! III

   206884/U1I

   (in)

   in der R^ und η die gleiche' Bedeutung wie in Anspruch 1 haben, mit einem Isocyanat der allgemeinen Formel XIII

   O=C=N-R₇ ■ (XIII)

   in der R₇. dör um die Aminogruppe verminderte Rest eines Aminosäureesters ist, umsetzt, die erhaltene N-(I-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-aminosäure nach bekannten Verfahren mit einer anderen Aminosäure oder einem Peptid umsetzt und dabei gegebenenfalls den Esterrest vor der Kupplungsreaktion abhydrolysiert und die I-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe durch Hydrolyse mit Säuren zur Herstellung des entsprechenden Peptids abspaltet. .""■■'

   10. Verfahren nach Anspruch 9> dadurch gekennzeichnet, daß man als Aminosäureester einen niederen Alkyl- oder Arylalkylester von Glycin, Alanin, Valin, Norvalin, Leucin, Norleucin, Iso- - leucin, Serin, Threonin,. Cystein, Cystin, Methionin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, Lysin, Ornithin, Citrullin, Arginin, Phenylalanin, Tyrosin, Histidin, Tryptophan, Prolin, Hydroxyprolin, ß-Alanin, y-Aminobuttersäure, a-Aminoisobuttersäure, α,β-Diamiriöpropionsäure, α,y-Diaminobuttersäure oder Sarcosin oder andere natürlich vorkommende oder synthetische Aminosäuren verwendet.

   11. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man als S.'iurß ;:ur Entfernung der I-Alkylcycloalkyloxycarbonylgruppe eine Halogenwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Trifluorencigs/iure, Essigsaure, Ameisensäure, rionochloresoig-

   SAP

   saure, Methansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure oder ein Geraisch aus mindestens zwei dieser. Säuren verwendet.

   12. N- (1 -Alkylcycloalkyloxycarbaxiyl)-amino säure n, N-(1-Alkylcycloalkyloxycarbonyl)-peptide und deren Salze, dadurch gekennzeichnet, daß der 1-Alkylcycloalkyioxycarbonylrest die allgemeine Formel XV aufweist

   in der R^ und η die gleiche Bedeutung wie in Anspruch 1 haben.

   13· Verbindungen nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß sie als Aminosäurerest die Reste von Glycin, Alanin, Valin, Norvalin, Leucin, Norleucin, Isoleucin, Serin, Threonin, Cystein, Cystin, Methionin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, Lysin, Ornithin, Citrullin, Arginin, Phenylalanin, Tyrosin, Histidin, Tryptophan, Prolin, Hydroxyprolin, ß-Alanin, y-Aminobuttersäure, a-Aminoisobuttersäure, α,ß-Diaminopropionsäure, α,y-Diaminobuttersäure oder Sarcosin oder andere natürlich vorkommende oder synthetische Aminosäuren enthalten.

   14. N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanin, N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanin-methylester, Dicyclohexylaminsalz von N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanin;

   N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-glycin, N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-serin,

   209884/U11

   Dicyclohexylaminsalz von N- (I-Hethylcyclohexyloxycarbonyl) -L-serin,

   N- {1 -Methylcyclohexyloxycarbonyl)-N -ηΙΐΐΌ-L-arginin, N^£ - (Λ -Ifethylcyclohexyloxycarbonyl) -L-lysin, N^a-Benzylo:<yGarbonyl-Nⁱ-(1-methyl'cyclohex3^rloxycarbonyl)-L-lysin, Dicyclohexylaminsalz von N^Benzyloxycarbanyl-N^-i1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-lysin,

   N-(1-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalanin, DIcyclohexylaminsalz von N-(1-I-letn3^rlcyclopentyloxycarbonyl)-L- · phenylalanin,

   N- (1 -I4ethylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalanin-inethylesi:er, N^a-Benzyl oxy carbonyl-N - (1 -methylcycloheXylOXycarbonyl)-!.-lysyl-L-prolyl-L-valyl-glycin-methylester, Ν^α-Benzyloxycarboriyl-N - (1 -me'thylcyclohexyloxycarbonyl) -L-lysyl-L-prolyl-L-valyl-glycin, /

   N^a~Benzyloxycarbonyl~N^-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L~ lysyl-L-pro^.yl-L-valyl-glycyl-N^- (1 -meihylcyclohexyloxycarbonyl) L-lysin-methylester,

   N^a~Benzyloxycarbonyl-n^-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-lysyl-L-prolyl-L-valyl-glycyl-l·?⁶-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)- L-lysin,

   N^a-Benzyl oxycarbonyl-N^- (1 -ne'thylcyclohexyloxycarbonyl) -L-lysyl-L-prolyl-L-vaiyl-giycyl-N^-Ci-Tnethylcyclohexyloxycarbonyl)- L-lysin-hydrazid,

   N^-Benzyloxycarbonyl-N*-(1-methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-lysyl« M^-mtrc-L-urginyl-K -nitro-L-argininainid,

   N-(1-Methylcyclohexyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester und N-(1-Methylcyclopentyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester.

   209884/1411