CZ200219A3 - Derivát diacylhydrazinu, způsob jeho přípravy, jeho pouľití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents

Description

01-3731-01-Ma

Derivát diacylhydrazinu, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů diacylhydrazinu jakožto integrinového inhibitoru, způsobu jeho přípravy, jeho použití a farmaceutických prostředků, které ho obsahují.

Vynález se týká derivátů diacylhydrazinu obecného vzorce I

kde znamená

X skupinu H2N-C(=NH)-NH, H₃C-C(=NH)-NH-, Het¹-NH-,

Y skupinu -(CH2>n^- nebo

Z	skupinu N-R2	nebo CH-R2,
R1,	R2 vždy na sobě	nezávisle atom vodíku nebo skupinu fl.
R3	atom vodíku	, skupinu Ar nebo Het,
R^	atom vodíku.	skupinu fl, Ar, OH, Ofl, Oflr. arylalkylovou,

4« 4*44 44··

A

Ar

Hal

Het

Het.¹ n

m , o,

Hal, CN, NO?, CF3 nebo OCF3, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou A, OH, OA, CF3 , OCF3, CN, NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je monosubstituována, disubstituována nebo trisubstituována skupinou A, OH, OA, CF3 , OCF3 , CN, NO2 nebo Hal za vytvoření nesubstit.uované nebo substituované bifenylové skupiny, nebo znamená naftylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou A, OH, OA, CF3 , OCF3, CN, N02 nebo Hal, atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, nasycenou, částečně nebo plně nenasycenou monocyk1ickou nebo bicykl ickou lieterocykl 1 ckou skupinu se 5 až 6 členy v kruhu s 1 nebo 2 atomy dusíku a/nebo s 1 nebo 2 atomy síry nebo kyslíku, přičemž je heterocyklický podíl popřípadě monosubstituován nebo disubstituován skupinou CN, Hal, OH, OA, CF3, A, NO2 nebo OCF3, pětičlennou nebo šestičlennou heterocyklickou aromatickou skupinu s 1 až 4 atomy dusíku nesubstituovanou nebo monosubstituovanoun nebo disubstituovanou skupinou Hal, A, Ar, OA, OAr, ary1 a 1kylovou, CN, NO2, CF3 nebo OCF3,

2, 3, 4, 5 nebo 6,

0, 1 nebo 2 a jejich fyziologicky přijatelných solí a solvátťi.

Dosavadní stav techniky

Podobné sloučeniny jsou známy z patentových spisu číslo EP Cl 632016, WO 97/26250, WO 97/24124 nebo DE 198 31 710Úkolem vynálezu je vyvinout nové sloučeniny s hodnotnými vlastnostmi, které by se zvláště hodily pro výrobu léčiv.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je shora charakterizovaný derivát di-aeylhydrazinu jakožto integrinový inhibitor.

S překvapením se zjistilo, že sloučeniny obecného vzorce 1 a jejich soli mají při dobré snášenlivosti velmi hodnotné farmakologické vlastnosti- Především působí jako inhibitory integrinu, přičemž především inhibují vzájemné působení ct v~, 33 - nebo β5- nebo 36 - i ntegri nových receptorů s ligandy, například vazbu fibrinogenu na integrinový receptor.

Integriny patří do rodiny heterodimerni třídy I - transmembránových receptorů, které mají významnou úlohu v četných adhezních procesech bunka-matrice popřípadě buňka-buňka (Tuckwell a kol., 1996, Symp. Soc. Ex. Biol. 47). Zhruba se mohou dělit do tří tříd: βι-integriny, které představují receptory pro extracelulární matrici, 32 - integriny, které jsou aktivovatelné na leukocyty, a jsou spouštěny při zánět-livých procesech, jakož také e_v-integriny, které ovlivňují buněčnou odezvu při hojeni ran a při jiných patologických procesech (Marshall a Hart, Semin. Cancer Biol. 7, str. 191, 1996). Relativní afinita a specificita pro ligandovou vazbu se stanovuje kombinací různých ct-sub jednotek a β-sub jednotek.

Obzvláštní účinnost vykazují sloučeniny obecného vzorce I v případě integrlnů ctv3l , <rv33 . «νβ5 «Tib33 jakož také «v3s

ΦΦ «φ ·Φ ··· ·« φφ·« a civfis , s výhodou <χν&3 , <τνβ5 , <ζνβ6 a také αιιρβ3 .

Integrin avPe ie poměrně vzácný (Busk a kol- J- Biol. Chem. 267(9), str. 5790. 1992) a ve zvětšené míře se tvoří během opravných procesů v epitelové tkáni a přednostně váže přírodní matricové molekuly fibronektinu a tenascinu (Vang a kol., flm. J. Resplr. Cell Mol. Biol- 15(5), str. 664, 1996). Fyziologické a pathologické funkce <ζ_νβ6 nejsou dosud podrobně známy: avšak má se zato, že tento integrin má významnou úlohu ve fyziologických procesech a poruchách (například záněty, hojení ran, nádory), na nichž se účastní epitelové buňky. Integrin ανββ je tedy expresován na kerat-inocyty v ranách (Haapasalni a kol., J. Invest, Dermatol. 106(1), st-r. 42, 1996), což znamená, že kromě procesů hojení ran a zánětů v kůži mohou být i jiné pathologické procesy, jako například lupenka, puchýřnaté onemocnění, zánět kůže a zarudnutí kůže a také cyst-ický zánět kůže, endometrióza, cirrhosa jater nebo periodontitida ovlivněny agonisty nebo antagonisty tohoto integrinu. Kromě toho má «vřte význam v epitelu dýchacího traktu (Weinacker a kol., Rm. J. Respir. Cell Mol- Biol. 12(5), str. 547, 1995), takže je možné použít vhodných agonistů/antagonistů tohoto integrinu s úspěchem pro poruchy dýchacího traktu, jako je bronchitida, astma, plicní fibróza a nádory v dýchacím traktu. Je také konečně známo, že <ζνβ6 má význam v zažívacím epitelu, takže by mohlo být použito vhodných agonistů/antagonistů tohoto integrinu k léčení zánětů, nádorů a ran gastrointestinálního traktu

Zjistilo se, že sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu a jejích soli, jako rozpustné molekuly, působí na buňky nesoucí zmíněný receptor, nebo jsou-li připojeny k povrchům, jsou umělými ligandy pro adhesi na buňkách zprostředkovanou «νβ6 - Obzvláště působí jako inhibitory integrinu , tím, že inhibují obzvláště interakce receptorů s ostatními ligandy, jako je například vázání fibronektinu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou mocnými inhibitory vitronekt.inouého receptorů avíb a/nebo mocnými inhibitory receptorů av(Í6 Integrin avP3 je expresován na mnoho buněk, jako jsou například endothelové buňky, buňky hladkého svalstva cév, například aorty, buňky, které znehodnocují kostní matrici (osteoklasty) nebo nádorové buňky.

Působení sloučenin podle vynáleu lze doložit například způsobem, který popsal J. W. Smith a kol. (J. Biol. Chem. 265, str. 12267 až 12271, 1990).

B. Felding-Habermann a D.A. Cheresh popisují CCurr. Opin. Cell. Biol. 5, str. 864, 1993) význam integrinů jakožto receptorů adheze pro různé jevy a symptomy, zvláště se zřetelem na v i tronekt. i nový receptor <rví)3 Závislost vývoje angiogeneze na vzájemném působení vaskulárních integrinů a extracelulárních matricových proteinů popisují P-C. Brooks, R.A. Clark a D.A. Cheresh (Science 264, str. 569 až 571, 1994).

P-C. Brooks, A-M. Montgomery, M. Rosenfeld, R.A. Reisfeld, T.-Hu, G. Klier a D.A- Cheresh (Cell 79, str. 1157 až 1164, 1994) popsali možnost použití inhibice tohoto vzájemného působení a tím navození apoptosy (programované umírání buněk) angiogenních vaskulárních buněk působením cyklického peptidu. Popisují například ocvfi3 antagonisty nebo protilátky proti ocvf)3 , které způsobují zmenšování nádorů iniciací apoptosy.

Experimentální důkaz, že sloučeniny podle vynálezu také zabraňují adhesi živých buňkách na odpovídajících matričních proteinech a podle toho také adhesi nádorových buněk na matričních proteinech, může být získán testem adhese na buňkách

podle způsobu, který popsal Mitjans F- a kol, J. Cell Science 108. str.2825 až 2838, 1995).

P.C.Brooks a kol- popisuje v časopise J.C1in.Invest- 96, str. 1815 až 1822, 1995 antagonisty <ΐνβ3 k ovládání rakoviny a k léčení nádorem vyvolaných angiogenních poruch. Sloučeniny jsou schopné inhibovat vazbu meta 1 opratěináz na integriny a tím zabraňují buňkám využívat enzymatickou aktivitu proteinázy - Je uveden příklad inhibice vazby MMP-2 Cmatriční metaloproteínázy-2) na vitronektinový receptor ανβ3 cyklo-RGD peptidem, jak popsal P.C.Brooks a kol-, Cell 85, str.683 až 693, 1996.

Je tedy možno používat sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu jako léčebně účinných sloučenin obzvláště k léčení nádorových onemocnění, osteoporózy, osteolytických poruch a k potlačování angiogenese.

Sloučeniny obecného vzorce I, které blokují interakci receptorů integrinu a ligandů, jako například fibrinogenu na fibrinogenový receptor (glykoprotein IlblIIa), inhibují jako GPIIb/IIIa antagonisty rozptyl nádorových buněk metastázováním. Je to dokládáno následujícími poznatky:

nádorové buňky se rozšiřují z lokalizovaného nádoru do cévního systému vytvářením mikroagregátů Cmikrotrombů) interakcí nádorových buněk s destičkami. Chráněny v mikroagregátech jsou nádorové buňky zaštítěny a nejsou poznány buňkami imunitního systému. Tyto mikroagregáty se mohou usadit na stěnách krevních cév, čímž usnadní další pronikání nádorových buněk do tkáně. Jelikož je vytváření mikrotrorabfl zprostředkováváno fibrinogenovou vazbou k receptorům fibrinogenu na aktivované destičky, je možno považovat antagonisty GPIIb/IIIa za účinné inhibitory metastáz.

Vedle vázání fibrinogenů, fibronektinu a von-Vi1lebrandova • » ·* · · * » • · · • · * · a· a aaa aa aa aa aaa aa aa«a faktoru na destičkový receptor fibrinogenu inhibují sloučeniny obecného vzorce I také vázání dalších adhezivních proteinů, jako je vitronektin, kolagen a laminin, na odpovídající recept.f.ny na povrchu různých buněčných typů. Inhibují zejména tvoření destičkových trombů a může jich být proto používáno k léčení trombóz, apoplexie, infarktu myokardu, zánětů a arteriosk1erózyInhibiční účinek agregace trombocytů lze předvést in vitro způsobem, který popsal Born (Nátuře 4832, str. 927 až 929, 1962).

Mírou absorpce léčebně účinné sloučeniny organizmem je její biologická dostupnost.

Je-li léčebně účinná látka podávána do organismu intravenozne ve formě roztoku k injektování, je její biologická dostupnost, tedy procento léčiva, které vstoupí nezměněno do oběhového systému, tedy větší cirkulace, 100¾.

Je-li léčebně účinná látka podávána orálně, je účinná látka obvykle obsažena ve formulaci jako pevná látka a podle toho se musí napřed rozpustit, aby byla schopna překonat vstupní bariéry, například zažívacího traktu, ústní sliznice, nosních přepážek nebo kůže, obzvláště stratům corneum. nebo být resorbována tělem. Farmakokinetické údaje, tedy data biologické dostupnosti lze získat analogicky způsobem, který popsal J.Shaffer a kol. (J. Pharm. Sciences 88, str- 313 až 318, 1999.

Vynález se týká sloučenin obecného vzorce I a jejich fyziologicky přijatelné soli a/nebo solvátu k použití jako terapeuticky účinných látek.

Vynález se tedy týká sloučenin obecného vzorce I a jejich

fyziologicky přijatelných solí a/nebo solvátů k použití jako integrinových inhibitorů.

Vynález se týká sloučenin obecného vzorce I a jejich fyziologicky přijatelných solí a/nebo solvát.ň k léčení nemocíSloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto účinná léčiva v humánní a veterinární medicíně zvláště k profylaxi a/nebo k ošetřování kardiovaskulárních poruch, thrombózy, infarktu myokardu, arteriosklerózy. zánětů, apoplexie, angíny pektoris, nádorových onemocnění, jako je růst nádoru a vytvářeníní metastáz, ost-eolytických nemocí, jako je zvláště osteoporóza, patologicky angiogenních nemocí, jako jsou například záněty, of ta 1 Biologických onemocnění, diabetické retinopathie, rohovkové degenerace, krátkozrakosti, oční histoplasmózy, reumatické arthrit.idy, osteoarthritidy, rhubeotického glaukomu, vředovité kolitidy, Crohnovy nemoci, atherosklerózy, lupénky, velkého puchýřnatého onemocnění, dermatitidy, erythema, pulmonární fibrózy, cystické fibrózy, endomet-riozy. cirliózy jater, periodontitidy, restenózy po angioplastice, rozptýlené sklerózy virových infekcí, bakteriálních infekcí, plísříových infekcí, akutního selhání ledvin a při podpoře procesů hojení ran a při podpoře léčivých procesů.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto ant.imikrobiálně působící látky při operacích, při kterých se používá biologického materiálu, implantátů, katheteru nebo srdečních stimulátorů.

Přitom tyto sloučeniny působí antiseptický. Účinnost, antimikrobiální aktivity se může doložit způsobem, který popsal P. Valentin-Veigund a kol- (Infection and Immunity, str. 2851 až 2855, 1988).

Jelikož sloučeniny obecného vzorce I představují inhibi9 • · 9 99· t 9

49 4 4 tory vazby fibrinogenu a tím ligandy receptorů fibrinogenu na krevní destičky, jsou použitelné jako diagnostika k detekci a k lokalizaci thrombů ve vaskulárním systému in vivo, pokud jsou například substituovány radioaktivním nebo UV detektovatelným zbytkem.

Sloučeniny obecného vzorce I jakožto inhibitory vazby fibrinogenu se mohou také používat jako účinné pomocné prostředky ke studiu metabolismu krevních destiček při různých aktivačních stadiích nebo v intracelulárních signálních mechanismech receptorů fibrinogenu. Zjistitelná jednotka zabudovatelného značení například isotopového značení ³H dovoluje po vázání na receptor zkoumat uvedené mechanismy.

Používané zkratky mají následující význam:

Ac	acety1
Aza-Gly	H2N-NH-C00H
BC1C	terč.-butoxykarbony1
CBz nebo	Z benzyloxykarbony1
DCCI	dicyklohexylkarbod i imid
DCM	dichlormethan
DIPEA	d i isopropy1ethy1am1n
DMF	d imethy1f ormani d
EDCI	N-et.hy 1 -Ν, N - Cd imethy lam inopropy 1 jkarbod i imid
Et	ethyl
Fmoc	9-f1 nořenylmethoxykarbony1
Gly	glycin
HATU	0-(7-azabenzotriazol-l-y1)-N,Ν,Ν',N'-tetramethy1- uroniumhexafluorfosfát
HGBt	1-hydroxybenzotri azo1
HOMSu	N-hydroxysukc i n im id
Me	methyl
MBHA	4-methy1benzhydrylami n
Mtr	4-met-hoxy-2,3,6 - tr imethy 1 feny 1 sul f ony 1
NMP	N-methy1pyrrolidon

— · * *fcfc· • fc « • · fcfc • fcfc « f · fcfc

•fc ·♦ * fcfc fc fcfcfc fcfcfc

1· ·<··

NMR

OBzl

CtBu

Clct.

OEt

OMe

Pbf β-Phe

POA

Rf

RP

RT

Sal

TBT1I

TEA

Trt nukleární magnetická rezonance benzy1es ter terč-but.y 1 es ter oktanoy1 ethyl ester methylester

2,2,4,6,7-pentamethyldihydrobenzofuran-5-sulfonyl β-fenylalanin fenoxyacetyl retenční faktor reverzní fáze retenční doba salicyloy1

O-(ΙΗ-benzotriazol-l-yl)-N,N,N' ,N^J-tetrámethyl-uroní umt.et.raf 1 uorborát. trifluoroctová kyselina trityl (trifenylmethyl)

Sloučeniny obecného vzorce I mají alespoň jedno chirální centrum a mohou být proto v několika stereoizomerních formách. Vynález zahrnuje všechny tyto formy (například D- a L-formy) a jejich směsi (například DL-formy).

Sloučeniny podle vynálezu zahrnují také tak zvané prodrogové deriváty, to znamená například alkylovými nebo acylovými skupinami, cukry nebo oligopeptidy obměněné sloučeniny obecného vzorce I, které se v organismu rychle štěpí na účinné sloučeniny podle vynálezu- Do této skupiny pat.ří také biologicky odbouratelné polymerní deriváty sloučenin podle vynálezu popsané v literatuře (například Int. J. Pharm- 115, str. 61 až 67, 1995).

Sloučeniny podle vynálezu zahrnují také deriváty obecného vzorce I, jejichž karboxylová skupina je převedena na farmaceuticky přijatelnou, metabolicky labilní skupinu esteru ne-

bo amidu.

Volné aminoskupiny nebo volné hydroxylové skupiny jakožto substituenty sloučenin obecného vzorce I mohou být chráněny vhodnými chránícími skupinami.

Solváty sloučenin obecného vzorce I se míní adiční sloučeniny sloučenin obecného vzorce I s inertními rozpouštědly, které se vytvářejí vzájemnou přitažlivostí. Solváty se míní například monohydráty a di hydraty nebo adiční sloučeniny s alkoholy, například s methanolem nebo s ethanolemZpůsob přípravy sloučenin obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, nebo jejich soli spočívá podle vynálezu v tom, že

a) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená Z skupinu N-R², se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II

kde X, V, R¹ a R² mají shora uvedený význam a ve které jsou volné aminoskupiny chráněny vhodnou skupinou chránící aminoskupinu , se sloučeninou obecného vzorce III

R2

OH kde R² a R³ má shora uvedený význam a ve které jsou volné hydroxylové skupiny chráněny vhodnou skupinou chránící hydroxylovou skupinu, nebo vázány na pevnou fázi, a následně se chránící skupiny a/nebo pevná fáze odštěpí, nebo

b) se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce IV

O kde X a Y mají shora uvedený význam a ve které jsou volné aminoskupiny chráněny vhodnou skupinou chránící aminoskuplnu, se sloučeninou obecného vzorce V

R³ kde R¹, R², R³ a Z má shora uvedený význam a ve které jsou volné hydroxylové skupiny chráněny vhodnou skupinou chránící hydroxylovou skupinu, nebo vázány na pevnou fázi, a následně se chránící skupiny a/nebo pevná fáze odštěpí, nebo

c) se uvolňuje sloučenina obecného vzorce I ze svého funkčního derivátu zpracováním solvolyzačním nebo hydrogenolyzačním činidlem a/nebo, se zásaditá sloučenina nebo kyselá sloučenina obecného vzorce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sůl.

Všechny skupiny, které jsou obsaženy ve sloučenině více než jednou, například R² . mohou být na sobě nezávisle stejné nebo odlišné.

« *

• « · ·

• · ·*«·

Ve shora uvedených vzorcích znamená A alkylovou skupinu lineární nebo rozvětvenou s 1 až 6 , s výhodou s 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6 atomy uhlíku. S výhodou je A skupina methylová, ethylová, isopropylová, n-propylová, n-butylová, isobutylová, sek-butylová nebo terc-butylová, dále také n-pentylová, 1-, 2nebo 3-methyl butylová, 1,1-, 1,2- nebo 2,2-dimet.hy lpropy lová , 1-ethy1propylová, hexylová, 1-, 2-, 3- nebo 4-methy1pentylová, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- nebo 3,3-dimethy1butylová, 1nebo 2-ethylbutylová, 1-ethyl-1-methylpropylová, l-ethyl-2methylpropylová a 1,1,2- nebo 1,2,2-trimethylpropylová skupina, především skupina methylová.

Skupinou chránící aminoskupinu je s výhodou skupina acetylová, propionylová, butyrylová, feny1acetylová, benzoylová, toluylová, PDA, methoxykarbonylová, ethoxykarbony1ová, 2,2,2-trichlorethoxykarhonylová, BOC, 2-jodethoxykarbony1ová, CBZ (karbobenzoxy), 4-methoxybenzyloxykarbony1ová, FMOC, MTr nebo benzylová skupina. Zvláště výhodnou je skupina Fmoc.

Symbol Ar znamená s výhodou fenylovou skupinu, dále s výhodou fenylovou skupinu monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubst. i tuovanou skupinou A, OH, OA, CF3 , OCF3 , CN, NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je monosubstituovaná, disubstituovaná nebo trisubstituována skupinou A, OH, OA, CF3, OCF3, CN, NO2 nebo Hal za vytvoření nesubstituované nebo substituované bifenylové skupiny, přičemž A a Hal mají shora uvedený výhodný nebo obzvláště výhodný význam.

Symbol Ar znamená dále naftylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosiibstltuovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou A, OH, OA, CF3, OCF3, CN, NO2 nebo Hal, přičemž A a Hal mají některý ze shora a níže uvedených výhodných nebo obzvláště výhodných významů.

Proto znamená Ar s výhodou skupinu fenylovou, o-, m- nebo p-methylfenylovou, o-, m- nebo p-ethylfenylouou, o-, m- nebo p-propy1feny1ovou, o-, m- nebo p-isopropy1feny1ovou, o-, mnebo p-terc-butylfenylávou, o-, m- nebo p-hydroxyfeny1ovou, o-, m- nebo p-methoxyfeny1ovou, o-, m- nebo p-ethoxy-fenylevou, o-, m — nebo p-trifluormethylfenylovou, o-, m- nebo p-trif1uormethoxyfeny1ovou, o-, m- nebo p-f1uorfeny1ovou, o-, πιnebo p-bromfenylovou, o-, m- nebo p-chlorfenylovou, o-, m- nebo p-nitrofenylovou, dále s výhodou skupinu 2,3-, 2,4-, 2,5-,

2,6-, 3,4- nebo 3,5-dimethylfenylovou, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-,

3.4- nebo 3,5-d imet.hoxyf eny lovou , 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4nebo 3,5-dihydroxyfenylovou, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- nebo

3.5- ditrifluormethylfenylovou, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4nebo 3,5-d i t-r i f 1 uormethoxyf eny 1 ovou , 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-,

3.4- nebo 3,5-d i n i t.rof eny 1 ovou , 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4nebo 3,5-difluorfenylovou, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- nebo

3.5- dichlorfenylovou, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- nebo 3,5-dibromfenylovou- Avšak s výhodou dále také nesubstituovanou skupinu bifenylovou nebo substituovanou skupinu bifenylovou, zvláště s výhodou skupinu 4-bifenylovou nebo 3-bifeny1ovou, 4' -(2-methylbif eny lovou) , 4' -(3-met.hy lbif eny lovou) , 4' -(4-met.hylbi feny lovou) , 3’ -( 2-methylbif eny lovou) , 3' -(3-met.hyl bifenylovou), 3’-(4-met.hy 1 bifenyl ovou ) , 4-(2-met.hy 1 bi f eny lovou ) , 4- (3 -methy 1 b ifeny 1 ovou) , 3 - ( 2-met.hy 1 bifenylovou) , 3- (4-met.hy 1 bi fenylovou), 4'-(2-fIuorbi fenylovou), 4’ -(3-f 1uorhifenylovou), 4'-(4-fluorbifenylovou), 3'-(2-f1uorbifenylovou), 3'-(3-f1uorbi f eny1ovou), 3‘-(4-fluorb i feny1ovou), 4-(2-fluorb i fenylovou), 4-(3-f1uorbifeny1ovou), 3-(2-f1uorbifenylovou), 3-(4-fIuorbifeny1ovou). S výhodou však také znamená nesubstituovanou skupinu naftalen-l-ylovou nebo naftalen-2-y1ovou skupinu.

Obzvláště s výhodou znamená Ar fenylovou, p-chlorfenylovou, ρ-bromfenylovou, p-f1uorfeny1ovou, 3,5-di-chlorfeny1ovou, o- nebo m-nitrofeny1ovou, p-trifluormethoxyfenylovou, p-methoxyf enylovou, 3,5-d i chlor-2-hydroxyfenylovou, naf talen-1-y1ovou

bifeny1-4-y1 dvou nebo 4’-(4-fluorbifenyl)ovou skupinu.

flralkylovou skupinou ie s výhodou skupina benzylová, fenyl ethy lová, feny 1 propy lová nebo naf t.y 1 methy 1 ová , zvláště však skupina benzylová.

Hal znamená s výhodou atom fluoru, chloru nebo bromu.

Symbol Het znamená nasycenou, částečně nebo plně nenasycenou monocyk1ickou nebo bicyklickou heterocyklickou skupinu se 5 až 6 členy v kruhu s 1 nebo 2 atomy dusíku a/nebo s 1 nebo 2 atomy síry nebo kyslíku, přičemž je heterocyklický podíl popřípadě monosubst i t.uován nebo disubstituován skupinou CN, Hal, OH, OA, CF3, A, N0₂ nebo OCFa.

Symbol Het znamená s výhodou substituovanou nebo nesubstituovanou skupinu 2- nebo 3-fůrylovou, 2- nebo 3-thienylovou, 1-, 2- nebo 3-pyrrolylovou, 1-, 2-, 4- nebo 5-imidazolylovou,

3- , 4- nebo 5-pyrazolylovou, 2-, 4- nebo 5-oxazolylovou, 3-,

4- nebo 5-isoxazolylovou, 2-, 4- nebo 5-thiazolylovou, 3-, 4nebo 5-isothiazolylovou, 2-, 3- nebo 4-pyridy1ovou, 2-, 4-, 5nebo 6-pyrimidinylovou, dále s výhodou skupinu 1,2,3-triazol-1-, -4- nebo -5-ylovou, 1,2,4-triazol-1-, -4- nebo -5-ylovou,

1- nebo 5-tetrazoly1ovou, 1,2,3-oxadiazo1-4- nebo -5-ylovou, 1,2,4-oxadiazol-3- nebo -5-ylovou, 1,3,4-thiadiazo1-2- nebo -5-ylovou, 1,2,4-thiadiazol-3- nebo -5-ylovou, 1,2,3-t-hiadia-5-ylovou, 2-, 3-, 4-, 5- nebo 6-2H-thiopyranylonebo 4-4H-t.hiopyrany lovou , 3- nebo 4-pyr idaziny lovou , pyrazinylovou, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzofurylovou,

2- , 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzothienylovou, 1-, 2-, 3-, 4-,

5- , 6- nebo 7-1H-indolylovou, 1-, 2-, 4- nebo 5-benzimidazolylovou, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzopyrazolylovou, 2-, 4-,

5-, 6- nebo 7-benzoxazolylovou, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzisoxazolylovou, 2-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzthiazolylovou, 2-, 4-,

5-, 6- nebo 7-benzisot.hiazolylovou, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzzol-4- nebo vou, 2-, 316 « ·

-2,1,3-oxadiazo1y1ovou, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-chinolynylovou, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-isochinolynylovou,

1- , 2-, 3-, 4- nebo 9-karbazolylovou, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-,

7-, 8- nebo 9-akridlnylovou, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-cinnolinylovou nebo 2-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-chinazolinylovou skupinu. Heterocyklické skupiny nohou být také částečně nebo plně hydrogenované. Het proto také může znamenat skupinu 2,3-dihydro-2-, -3-, -4- nebo 5-furylovou, 2,5-dihydro-2-, -3-,

-4- nebo -5-furylovou, tetrahydro-2- nebo -3-furylovou, 1,3dioxolan-4-ylovou, tet.rahydro-2- nebo -3-t.h i eny 1 ovou , 2,3-dihydro-1-, -2-, -3-, -4- nebo -5-pyrrolylovou, 2,5-dihydro-1-,

-2-, -3-, -4- nebo -5-pyrrolylovou, 1-, 2- nebo 3-pyrrolidinylovou, tet.rahydro-1-, -2- nebo -3-pyroly lovou , tetrahydro-1 - ,

2- nebo 4-inidazolylovou, 2,3-dihydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-,

-6-, -7-lH-indolylovou, 2,3-dihydro-1-, -2-, -3-, 4- nebo -5pyrazolylovou, tetrahydro-1-, -3- nebo -4-pyrazolylovou, 1,4-dihydro-1-, -2-, -3-, nebo -4-pyridylovou, 1,2,3,4-tetrahydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5- nebo -6-pyridylovou, 1,2,3,6-tetrahydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5- nebo -6-pyridylovou, 1-, 2-, 3nebo 4-piperidinylovou, 1,2,3 nebo 4-azepanylovou, 2-, 3- nebo 4-morfol inyl ovou, tet.rahydro-2-, -3- nebo 4-pyrany1ovou, 1,4-dioxany1ovou, 1,3-dioxan-2-, -4- nebo -5-ylovou, hexahydro-1-3- nebo -4-pyridazinylovou, hexahydro-1-, -2-, -4- nebo -5-pyrinidinylovou, 1-, 2- nebo 3-piperazinylovou, 1,2,3,4-t-eti'ahydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- nebo 8-chinolynylovou , 1,2,3,4-tetrahydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- nebo

-8-isoch inolynylovou skupinu.

Obzvláště s výhodou znamená Het skupinu 2-, 3- nebo 4-pyridylovou nebo 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-1H-indolylovou skupinu.

Symbol Het¹· znamená pětičlennou nebo šestičlennou heterocyklickou aromatickou skupinu s 1 až 4 atomy dusíku popřípadě nonosubstítuovánou nebo disubst-i tuovánou skupinou Hal, A,

OA, Ar, OAr, aryla1ky1ovou, CN, NO2, CF3 nebo OCF3 , přičemž Hal, A, arylalkyl a Ar mají některý ze shora uvedených výhodných nebo obzvláště výhodných významů.

S výhodou znamená Het¹ nesubstituovanou nebo substituovanou skupinu 2- nebo 3-pyrrolylovou, 2-, 4- nebo 5-imidazolylovou, 3-, 4- nebo 5-pyrazoly)ovou, 2-, 3- nebo 4-pyridylovou, 2-, 4-, 5- nebo 6-pyrimidinylovou, 3- nebo 4-pyridazinylovou a 2- nebo 3-pyrazinylovou skupinu. Obzvláště s výhodou znamená Het.¹ skupinu pyrid i n-2-y lovou , im i dazo ly 1 -2-y 1 ovou nebo 4-raet-hylpyridin-2-ylovou.

Symbol HetJ-NH znamená s výhodou pyrrol-2- nebo pyrrol-3-y1aminoskupinu, imidazol-2-, imidazol-4- nebo imidazol-5-ylaminoskupinu, pyrazol-3-, pyrazol-4- nebo pyrazol-5-ylaminoskupinu. pyrid-2-, pyrid-3- nebo pyrid-4-ylaminoskupi nu, pyrimidin-2-, pyrimidin-4-, pyrimidin-5- nebo pyrimidin-6-ylam inoskupinu, pyridazin-3-, pyridazin-4-ylaminoskupi nu, pyrazin-2-, pyrazin-3-ylaminoskupinu, přičemž heterocyklické kruhy jsou popřípadě substituovány s výhodou alkylovou skupinou.

Obzvláště s výhodou znamená Het.¹-NH pyr i d-2-y 1 an i noskup inu, imidazol-2-ylam inoskupinu, nebo 4-methylpyridin-2-ylaminoskup i nu.

Symbol OA znamená s výhodou methoxyskupinu, ethoxyskupinu, propoxyskupinu, nebo butoxyskuplnu, dále také penty1oxyskupi nu nebo hexyloxyskupinu.

.Symbol R¹ znamená s výhodou atom vodíku nebo skupinu A, kde A má shora uvedený význam a zvláště atom vodíku.

Symbol R² znamená s výhodou atom vodíku nebo skupinu A, kde A má shora uvedený význam a zvláště atom vodíku.

Symbol R³ znamená s výhodou atom vodíku, skupinu ftr nebo

Het., kde Ar a Het. mají shora uvedený význam a zvláště atom vodíku, skupinu fenylovou, p-chlorfenylovou, p-bromfenylovou. p-fluorfeny1ovou, 3,5-dich1orfenylovou, o- nebo m-nitrofenylovou, p-trif luormet.hoxyf eny lovou, p-methoxyfeny1ovou, 3,5-dich1or-2-hydroxyfenylovou, naftalen-1-ylovou, bifeny1-4-ylovou nebo 4'-C4-fluorbifenyllovou skupinu.

Symbol R⁴ znamená s výhodou atom vodíku, skupinu A, Ar, OH, OA, OAr, aryla1kylovou, Hal, CN, N0₂, CF3 nebo OCF3 , přičemž A, arylalkyl, Ar a Hal mají shora uvedený význam a zvláště znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu.

Symbol X znamená skupinu H2N-CC=NH)-NH, H3C-C<=NH)-NH- nebo , Het¹-NH-, přičemž Het¹-NH- má některý ze shora uvedených významů a zvláště znamená X skupinu H₂N-CC=NH1-NH, H3C-CC=NH1-NH-, pyridin-2-ylaminoskupinu, imidazoly1-2-ylamínoskupinu nebo 4-methy1pyridin-2-ylam inoskupi nu.

Symbol Y znamená skupinu CCH₂l_n nebo skupinu obecného vzorce

kde znamená n 2, 3, 4, 5 nebo 6, zvláště 3 nebo 4 a m O, 1 nebo 2, zvláště 0 a o 0, 1 nebo 2. zvláště 0 nebo 1 a R⁴ má shora uvedený význam.

Symbol Z znamená skupinu N-R² nebo CH-R², kde R² má shora uvedený význam a zvláště skupinu NH nebo CH₂ Vynález se tedy týká zvláště sloučenin obecného vzorce I, ve kterých alespoň jeden ze symbolů má shora uvedený výhodný význam. Některými výhodnými skupinami sloučenin obecného vzorce I jsou následující sloučeniny dílcích vzorců Ia až Ir, kde zvlášt neuvedené symboly mají význam uvedený u obecného vzorce I, přičemž znamená v obecném vzorci

Ia)	X	skupinu	H2N-CC=NH)-NH- .
Ib)	Y	skupinu
			R4
Ic)	Z	skupinu	N-R2 ,
Id)	Z	skupinu	CH-R2,
Ie)	X	skupinu	H2N-C<=NH)-NH- , H3C-C<=NH)-

HetJ-NH- a

Y	skupinu	<CH2)n.
lf) X	skupinu	H2N-C(=NH)-NH-
Y	skupinu	•(CH2)X^-<ch2)»- R4

ig)	X Y R3 z	skupinu skupinu skupinu skupinu	H2N-C(=NH)-NH- nebo HetT-NH- (CH2)n. Ar, NH,
Ih)	X	skupinu	H2N-C(=NH)-NH-
	R3	skupinu	Ar,

Z skupinu NH,

Y skupinu

-{CH₂)Jj^U(CH₂)₀R* li) X R³

Y

Z

Ik) X R³ Z

Y skupinu H2N“C(=NH)-NH- nebo Het,¹-NHskupinu Ar, skupinu (CH₃)n a skupinu CH2, skupinu skupinu skupinu skupinu

H2N-C<=NH)-NH-,

Ar,

CH₂ .

.(CH₂)_oR⁴

Im) X skupinu H2N-C<=NH)-NH- , H3C-CX=NH)-NH- nebo

Het¹-NH- a

Y skupinu (CH2 >n nebo

Z	skupinu NH nebo CH2,
R1 , R2	atom vodíku.
R3	skupinu Ar
R4	atom vodíku.
Het1	skupinu 4-methylpyridin-2-ylovou, pyridin-2-ylovou nebo imidazol-2-ylovou,
n	3 nebo 4

In)

m O a o O nebo 1,

X skupinu H2N-Cť=NH)-NH- nebo HetJ-NH-,

Y skupinu CCH2)n nebo

R*

Z skupinu NH,

R¹ , R² atom vodíku,

R³ fenylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou OH. OA, OCF3 . NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je nesubstituována nebo je monosubstituována, disubstituována nebo trisubstituována atomem halogenu za vytvoření nesubstituované nebo substituované bifenylové skupiny, nebo znamená nesubstituovanou naftylovou skupinu,

R⁴ atom vodíku,

Het¹ skupinu 4-methy1pyridin-2-ylovou, pyridin-2-ylovou nebo imidazol-2-ylovou,

Ιο)

n m	3 0	nebo 4 a
0	0	nebo 1,

X

Y skupinu H2N-CC=NH)-NH- nebo Het¹-NH-, skupinu CCH2)n nebo

Z skupinu CH2,

Ip)

R¹ , R² atom vodíku,

R³ fenylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou OH, OA, OCF3 , NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je nesubstituována nebo je monosubstituována, disubstituována nebo trisubstituována atomem halogenu za vytvoření nesubstituované nebo substituované bifenylové skupiny, nebo znamená nesubstituovanou naftylovou skupinu,

R⁴ atom vodíku,

Het.¹ skupinu 4-methylpyridin-2-ylovou, pyridin-2-ylovou nebo imidazo1-2-y1ovou, n 4 m 0 a o O,

X skupinu H₂N-C(=NH)-NH- nebo HetA-NH- a

V skupinu CCH2)n nebo

Z skupinu NH nebo CH2.

R¹ , R² atom vodíku,

R³ fenylovou skupinu nesubst1tuovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubstituovanou skupinou OH, OA, OCF3 , NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je nesubstituována nebo je monosubstituována, disubstituována nebo trisubstituována atomem halogenu za vytvoření nesubstituované nebo substituované bifenylové skupiny, nebo znamená nesubstituovanou naftylovou skupinu.

R⁴ atom vodíku,

Het¹ skupinu 4-methy1pyridin-2-y1ovou, pyridin-2-ylovou nebo imidazol-2-ylovou,

n	3	nebo 4,
m	O	a
o	0	nebo 1,
R3	skupinu r

Ir) X y nylovou skupinu, která je monosubstituována, disubstituována nebo trisubstituována skupinou atomem halogenu skupinu H₂N-C(=NH)-NH- nebo Het¹-NH- a skupinu (CH₂)n nebo (CH₂),

<CH₂)_oZ skupinu NH nebo CH₂,

R¹ , R² atom vodíku,

R³ skupinu bifeny1-4-ylovou, 4-chlorfenylovou nebo

3,5-d1-chlorfenylovou,

R⁴ atom vodíku,

Het¹ skupinu 4-methylpyridin-2-ylovou, pyridin-2-ylovou nebo imidazol-2-ylovou,

n	3	nebo 4,
m	0	a
o	0	nebo 1,

Sloučeniny obecného vzorce I a výchozí látky pro jejich přípravu se připravují o sobě známými způsoby, které jsou popsány v literatuře (například ve standardních publikacích jako Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme Verlag, Stuttgart), a to za reakčních podmínek, které jsou pro jmenované reakce známy a vhodné- Přitom se může také používat

o sobě známých, zde blíže nepopisovaných variant Výchozí látky se mohou popřípadě vytvářet in sítu, to znamená že se z reakční směsi neizolují, nýbrž se reakční směsi ihned používá pro přípravu sloučenin obecného vzorce ΙΟ loučen i ny obecného vzorce I se mohou získat za podmínek peptidové syntézy. Přitom se účelně pracuje o sobě známými obvyklými způsoby peptidové syntézy popsanými v literatuře (například Houben-Veyl, l.c., svazek 15/11, str. 1 až 806, 1974).

Přímé prekursory sloučenin obecného vzorce I se také mohou připravovat. na pevné fázi , například na bobt-natelné polystyrénové pryskyřici, například způsobem, který popsal Merrifield (fingew. Chem. 97, str. 801 až 812, 1985).

Vhodně se jako pevné fáze může používat v podstatě všech známých nosičů například z chemie peptidů na pevné fázi nebo z přípravy nukleových kyselin.

Vhodnými polymerními nosičovými materiály jsou polymerní pevné fáze s výhodou mající hydrofilní vlastnosti například zesít.ěné polycukry, jako jsou celulóza, sepharóza nebo Sephadex^R, akrylamidy, polymery na bázi polyet-hy lenglykol ů nebo Tent.akelpolymer^R. Používanou pevnou fází je s výhodou tritylchlori dpo 1 y styrenová prysky ř ice, 4-methoxy tr i ty 1 chlor i. dová pryskyřice, Merrífieldoua pryskyřice a Vangova pryskyřice.

Sloučeniny obecného vzorce T se mohou získat tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III a následným odstraněním chránící skupiny nebo pevné fáze.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou rovněž získat reakcí sloučenin obecného vzorce IV se sloučeninami obecného

vzorce V a následným odstraněním chránící skupiny.

Kopulační reakce se daří s výhodou v přítomnosti dehydratačního činidla vybraného ze souboru zahrnujícího například karbodiimid, jako jsou DCC1 nebo EDC1, dále anhydrid propanfosfonové kyseliny (flngev. Chem. 92, str.129, 1980), difeuy 1 f osf ory 1 azi d nebo 2-ethoxy-N-e tlioxykarbony 1-1,2-d i hydrochinolin, v inertním rozpouštědle, jako je například halogenovaný uhlovodík, jako dichlormethan; ether, jako tetrahydrofuran nebo dioxan; amid, jako dimethylformamid nebo dimethylacetamid; nitril, jako acetonitril; dimethylsulfoxid nebo ve směsi těchto rozpouštědel, při teplotě přibližně -10 až +40

C, s výhodou 0 až 30 C. K podpoře intrarao1eku1árni cyklizace před int.ramolekulární peptldovou vazbou je účelné pracovat ve zředěných roztocích- Reakční doba je podle použitích reakčních podmínek několik minut až 14 dní.

Místo sloučenin obecného vzorce II a/nebo IV se mohou pro reakci používat. také vhodné reaktivní deriváty těchto sloučenin obecného vzorce II a/nebo IV, s výhodou předaktivouaná karboxylové kyselina nebo halogenid karboxylové kyseliny, symetrický nebo směsný anhydrid nebo aktivovaný ester. Takové skupiny k aktivaci karboxylové skupiny v typických acylačních reakcích jsou popsány v literatuře (například ve standardních publikacích jako Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme Verlag, Stuttgart.). Aktivované estery se účelně vytvářejí in šitu, například přísadou HOBt nebo N-hydroxysukc i n imiduReakce se zpravidla provádí v inertním rozpouštědle, za použití halogenidu karboxylové kyseliny v přítomnosti činidla vázajícího kyselinu, s výhodou organické zásady, jako je triethylamin, dimethylan i 1in, pyridin nebo chinolin.

Příznivé mflže být. také přidání hydroxidu, uhličitanu nebo ·· ···♦ *· hydrogenuh1 iči tanu alkalického kovu nebo kovu alkalické zeminy nebo Jiné soli slabé kyseliny alkalického kovu nebo kovu alkalické zeminy, s výhodou draslíku, sodíku, vápníku nebo cesia.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou získat, také tak, že se uvolňují ze svých funkčních derivátů solvolýzou zvláště hydrolýzou nebo hydrogeno1ýzou.

Pro solvolýzu nebo pro hydrogenolýzu jsou jako výchozí látky vhodné sloučeniny, které nají místo jedné nebo několika volných aninoskupin a/nebo hydroxylových skupin odpovídající chráněné aminoskupiny a/nebo hydroxylové skupiny, s výhodou sloučeniny, které místo H-N skupiny mají skupinu PG¹N, kde znamená PG¹ skupinu chránící aminoskupinu a/nebo sloučeniny, které místo atomu vodíku hydroxylové skupiny mají skupinu chránící hydroxylovou skupinu, například sloučeniny, které odpovídají obecnému vzorci I, avšak místo skupiny -COOH mají skupinu -C00PG², kde znamená PG² skupinu chránící hydroxylovou skupinu.

Je také možné, že v molekule výchozí látky je několik stejných nebo různých skupin chránících aminoskupinu a/nebo hydroxylovou skupinu. Pokud jsou chránící skupiny navzájem odlišné, mohou se v mnoha případech selektivně odštěpovat <T. V. Greene, P.G-M. Vuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 2- vydání, V i I ey. New York, 1991; nebo P.J. Kocienski, Prcitect.ing Groups, 1. vydání, Georg Thieme Verlag, Stuttgart - New York 1.994; H. Kunz, H. Waldmann, Comprehensive Organ i c Synthe<vyd. B-M. Trošt, I. Fleming, E. Vinterfeldt),

Sv. 6, sis,

Pergamen, Oxford, str. 631 až 701, 19911

Výraz skupina chránící aminoskupinu je obecně znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně Ck blokování! aminoskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly

provedena. Typické pro takové skupiny jsou zvláště nesubstituované nebo substituované skupiny acylové, arylové. aralkoxymethylové nebo aralkylové. Jelikož se skupiny, chránící aminoskupinu, po žádoucí reakcí (nebo po sledu reakcí) odstraňují, nemá jejich druh a velikost rozhodující význam- Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 atomy uhlíku. Výraz acylová skupina je zde vždy míněn v nejširším slova smyslu. Zahrnuje acylové skupiny odvozené od alifatických, aralifatických, aromatických nebo heterocyk1 ických karboxylových nebo sulfonových kyselin, jakož zvláště skupiny alkoxykarbony lově, a 1keny1oxykarbonylově, aryloxykarbony lově a především ara1koxykarbony lově. Jakožto příklady takových acylových skupin se uvádějí skupiny alkanoyl ové jako acetylová, propionylová, but.yrylová skupina; aralkanoylové jako fenylacet.ylová skupina; aroylové jako benzoylová nebo toluylová skupina; ary1oxya1kanoy1ové jako fenoxyacetylová skupina; alkoxykarbonylově, jako skupina methoxykarbonylová, ethoxykarbony lová , 2,2,2-t.r ichlorethoxykarbony lová , terč-but-oxy karbony lová (BOC), 2-jodethoxykarbonylová; alkenyloxykarbony 1ové, jako skupina allyloxykarbonylová (Aloe); aralky1oxykarbony1ové jako skupina benzyloxykarbonylová (karbobenzoxy“-CBZ synonymní se Z), 4-methoxybenzyloxykarbony1ová (MOZ), 4-nitrohenzyloxykarbony1ová nebo 9-f1uorenylmethoxykarbonylová (Fmoc) skupina; 2-(feny1su1fony 1)ethoxykarbony1ová; trimethylsily1ethoxykarbonylová (Teoc) a arylsulfonylové jako skupina 4-methoxy-2,3,6-tr imethylf eny lsulf ony lová (Mt-r) . Výhodnými skupinami, chránícími aminoskupinu, jsou skupiny BOC, Fmoc a Aloe, dále také Z, skupina benzylová a acetylová skupina .

Vý raz skupina chránící hydroxyskupinu je obecně rovněž znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) hydroxyskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena. Typické pro takové skupiny jsou shora uvedené nesubst.ituované nebo substituované skupiny arylové, aral• fc · fcfc fcfc • fc fc fcfc fcfc fcfcfc* • fcfc · · · fcfc · • fc fcfcfc* fc*·· · t ··♦♦»···· •fc fcfc ·· fcfcfc fcfc fcfc·· ·· fcfcfc* kýlové, aroylové, nebo acylové dále také skupiny alkylové, alkylarylove, nebo aralky1si 1y1ové nebo O,O-aceta1ové nebo O,S-acetalové skupiny. Jelikož se skupiny, chránící hydroxyskupinu, po žádoucí reakci (nebo reakčním sledu) odstraňují, nemá jejich druh a velikost, rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 10 atomy uhlíku. Jakožto příklady skupin chránících hydroxylovou skupinu, se uvádějí ara1kýlové skupiny jako skupina benzylová, 4-methoxybenzylová nebo 2,4-dimethoxybenzy1ová; aroylové jako benzoylová nebo p-nitrobenzoylová; acylové skupiny, jako skupina acetylová nebo pivaloylová, p-toluensulfonylová; alkylové skupiny jako skupina methylová nebo terč-butylová; však také skupiny allylové: a 1ky1silylové jako skupina trimethylsilylová (TMS), triisopropylsilylová (TIF‘S) , terc-buty 1 dimethy 1 s i ly 1 ová (TBS) nebo triethyisilylová, trimethylsilylethylová; aralkylsilylové jako skupina terc-butyldifenylsilylová (TBDPS); cyklické acetalové jako skupina isopropylidenacetalová, cyklopenty1idenacetalová, cyklohexylidenacetalová, benzylidenacetalová, p-methoxybenzylidenacetalová nebo o,p-dimethoxybenzy1idenacetalová skupina; acyklické acetalové jako skupina tetrahydropyranylová (Thp), methoxymethylová (MOM), nethoxyethoxymethylová (MEM), benzyloxymethylová (BOM) nebo methylthiomethylová (MTM). Obzvláště výhodnými skupinami, chránícími hydroxylovou skupinu, jsou skupina benzylová, acetylová, terc-butylová a TBS.

Uvolňování sloučenin obecného vzorce I z jejich funkčních derivátů a odstraňování chránících skupin je známo z litet-rratury (například T.V. Greene, P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 2. vydání, Viley, New York, 1991; nebo P.J. Kocienski, Protecting Groups, 1. vydání, Georg Thieme Verlag, Stuttgart - New York 1994). Je také možno používat o sobě známých obměn takových způsobů, které zde nejsou podrobně popisovány .

Zásada obecného vzorce I se může kyselinou převádět na

ΦΦΦ · φ’ φ · *φ φ

φφ φφ příslušnou adiční sůl s kyselinou, například reakcí ekvivalentního množství zásady a kyseliny v inertním rozpouštědle, jako je například ethanol a následným odpařením rozpouštědla. Pro tuto reakci přicházejí v úvahu vzlášt-ě kyseliny, které poskytují fysiologicky přijatelné soli. Může se používat anorganických kyselin, jako jsou kyselina sírová, siřičitá, dithlonová, dusičná, ha1ogenovodíkové kyseliny, jako chlorovodíková nebo bromovodíková, fosforečné kyseliny, jako kyselina ortofosforečná, sulfaminová kyselina a ogranické kyseliny, zvláště alifatické, alicyklické, aral if at.ické, aromatické nebo heterocyklické jednosytné nebo něko1 i kasytné karboxylové, sultánové nebo sírové kyseliny, jako jsou kyselina mravenčí, octová, propionová, hexanová, oktanová, děkanové, hexadekanová, oktadekanová, pivalová, diethyloctová, nalonová, jantarová, pimelová, fumarová, malelnová, mléčná, vinná, jablečná, citrónová, glúkonová, askorbová, nikotinová, isoni kot. i nová, methansulfonová, ethansulfonová. benzensulfonová, t.rimethoxybenzensulfonová, adamantankarboxylová, p-toluensulfonová. glykolová, embonová, ch1orfenoxyoctová, asparagová, glutamová,rolin, glyoxylová, palmit.ová, parachlorfenoxyisomáselná cyk1ohexankarboxylová, gl iikos-l-f osf át, naftalenmonosulfonová a naftalendisulfonová a laurylsírová kyselina. Solí s fysiologicky nevhodnými kyselinami, například pikrátfl, se mříže používat k izolaci a/nebo k čištění sloučenin obecného vzorce I.

Na druhé straně se sloučeniny obecného vzorce I reakcí se zásadou (například s hydroxidem nebo s uhličitanem sodným nebo draselným) mohou převádět na své fysiologicky přijatelné soli kovové, zvláště na soli s alkalickým kovem nebo s kovem alkalické zeminy nebo na amoniové soli. Vhodnými solemi jsou dále substituované amoniové soli, například dimethylamoniové, d i et-hy 1 amon iové , di isopropylamoniové, monoethanolamoniové , dlethanolamoniové, nebo diisopropylamoniové, cyklohexylamoniové, dicyk1ohexy1amoniové, dibenzylethy1endiamoniové, dále například soli s argininem nebo s lysinem.

·· ···· • · · · • · 9 · • · 0 « · ί « 1 « 0

Vynález se také týká použití sloučenin obecného vzorce I a/nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceut.ických prostředků.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich fysiologicky přijatelné soli se mohou používat pro výrobu farmaceutických prostředků, zvláště nechemickou cestou. Za tímto účelem se mohou převádět, na vhodnou dávkovači formu s alespoň jedním pevným nebo kapalným a/nebo polokapalným nosičem nebo pomocnou látkou a popřípadě ve směsi s jednou nebo s několika jinými účinnými látkami.

Těchto prostředků podle vynálezu se může používat jakožto léčiv v humánní a ve veterinární medicíně- Jakožto nosiče přicházejí v úvahu anorganické nebo organické látky, které jsou vhodné pro enterální (například orální) nebo pro parenterální nebo topické podávání nebo ve formě inhalačních sprejů a které nereagují se sloučeninami obecného vzorce I, jako jsou například voda, rostlinné oleje, benzylalkoholy, a 1kyleng1yko1y, polyethy 1 eng lykoly , glycerintriacetát, želatina, uhlohydráty , jako laktóza nebo škroby, stearát horečnatý, mastek a vaselina. Pro orální použiti se hodí zvláště tablety, pilulky, kapsle, prášky, granuláty, sirupy, štávy nebo kapky, pro rektální použití čípky, pro parenterální použití roztoky, zvláště olejové nebo vodné roztoky, dále suspenze, emulze nebo implantáty, pro topické použití masti, krémy nebo pudry. Sloučeniny podle vynálezu se také mohou lyofilizovat a získaných lyofilizátů se může například používat pro přípravu vstřikovatelných prostředků. Prostředky se mohou sterilovat a/ nebo mohou obsahovat pomocné látky, jako jsou kluzná činidla, konzervační, stabilizační činidla a/nebo smáčedla, emulgát-ory, soli k ovlivnění osmotického tlaku, pufry, barviva, chuťové přísady a/ nebo ještě jednu další nebo ještě několik dalších účinných látek, jako jsou například vitaminy.

Pro podávání ve formě inhalačních sprejů se účinná látka rozpouští nebo suspenduje ve hnacím plynu nebo ve směsi hnacích plynů (jako jsou například oxid uhličitý nebo fluorchlorované uhlovodíky). V takovém případě se přitom používá účinné látky v mikronizované formě, přičemž se může přidávat alespoň jedno fyziologicky přijatelné rozpouštědlo, například et-hanol. Inhalační roztoky se mohou podávat za použití o sobě známých zařízení k tomuto účelu.

Sloučen iny obecného vzorce I a jejich fyziologicky přijatelné soli se mohou používat jakožto inhibitory integrinu k léčení nemocí, jako jsou zvláště thrombosa, infarkt myokardu, koronární onemocnění srdce, arteriosklerosa, nádorová onemocnění, osteoporosa, záněty a infekce.

Sloučeniny obecného vzorce I a/nebo jejich fyziologicky přijatelné soli, jsou také vhodné pro použití při patologických pochodech udržovaných a šířených angiogenezí, zvláště nádorů, nebo rheumatoidní arthritidy.

Sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu se zpravidla používá v dávkách podobných jako obchodně známé peptidy, zvláště obdobně jako sloučeniny podle amerického patentového spisu číslo 4 472305, s výhodou v dávce přibližně 0,05 až 500 mg, zvláště 0,5 až 100 mg na dávkovači jednotku. Denní dávka je s výhodou přibližně 0,01 až 2 mg/kg tělesné hmotnostní- Určitá dávka pro každého jednotlivého jedince závisí na nejrůznějších faktorech, například na účinnosti určité použité sloučeniny, na stáří, tělesné hmotnosti, všeobecném zdravotním stavu, pohlaví, stravě, na okamžiku a cestě podání, na rychlosti vylučování, na kombinaci léčiv a na závažnosti určitého onemocnění. Výhodné je parenterální podáváníKromě toho se sloučeniny obecného vzorce I jakožto integrinové ligandy mohou používat pro výrobu sloupců pro afi 32

ni tni chromatografií k výrobě čistého integrinu. Ligand, to znamená sloučenina obecného vzorce I, se přitom přes například karboxylovon skupinu Asp kovalentně kopuluje na polymerní nos ič.

Výroba materiálů pro afinitní chromatografií integrinu se provádí za podmínek, které jsou pro aminokyselin běžné a o sobě známé.

kv « V ι V S ci sten i kondenzac i

Sloučeniny obecného vzorce I mohou mít jedno nebo několik chirálních center a mohou být proto v racemické nebo v opticky aktivní formě. Popřípadě se získané racemáty mohou o sobě známými způsoby mechanicky nebo chemicky dělit na své enantiomery. S výhodou se vytvářejí diastereomery z racemátu reakcí s opticky aktivním dělicím činidlem. Jakožto příklady takových dělicích činidel se uvádějí opticky aktivní kyseliny, jako jsou 1) a L formy kyseliny vinné, diacety1vínné, dibenzoylvinné, kyseliny mandlové, jablečné nebo mléčné nebo různé opticky aktivní kafrsulfonové kyseliny, jako je kyselina p-kafrsulfonová. Výhodné je také dělení enantiomerů pomocí sloupců plněných opticky aktivními dělicími činidly (například dinitrobenzoylfenylglycinem): vhodnou mobilní fází je například směs hexan/isopropanol/aceton itri 1 například v objemovém poměru 82:15:3.

Je také samozřejmě možné opticky aktivní sloučeniny obecného vzorce I získat některým ze shora uvedených způsobů, přičemž se vychází z opticky aktivních látek.

Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Teploty se uvádějí vždy ve stupních Celsia- Výraz zpracování obvyklým způsobem v následujících příkladech praktického provedení znamená:

Popřípadě se přidává voda, popřípadě podle konstituce konečného produktu se hodnota pH nastavuje na 2 až 10, reakční směs se extrahuje ethylacetátem nebo dich1ormethanem, provádí se oddělení organické fáze a její vysušení síranem sodným, filtrace, odpaření a čištění chromatografií na silikagelu a/ nebo krystalizaci.

RT je retenční doba (v minutách) při HPLC v následujících systémech =

Sloupec z Omnicromu YMC^;

1- 4,6 x 250 mm, 5 pm, Cis (pro analýzu)

2- 30 x 250 mm, 7 um, Cis (pro přípravy)

Jakožto mobilní fáze se používají gradienty acetonitrilu (B) s 0,1 % trifluoroctové kyseliny a voda (A) s 0,1 % trifluoroctové kyseliny (procenta jsou míněna objemově a vztahují se k acetonitrilu). Retenční doba Rt se uvádí při toku 1 ml/min. Detekce při 220 nm.

Dělení diastereomerft se provádí s výhodou za uvedených podmínek .

Hmotová spektrometr i e (MS) ESI (elektronová sprejová ionizace) (M+H)⁺

EAB (bombardování rychlým atomem) (M+H)⁺

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

1. 5-(9H-E1uoren-9-y1methoxy)-3H-[1,3.4]oxad i azo1-2-on

Dva ekvivalenty fosgenu (1,E!9 M v toluenu, 4,2 ml) se přidají do roztoku 3,91 mmol 9H-f1uoren-9-ylmethy1hydrazinkarboxylátu ve 40 ml dichlormethanu a 40 ml nasyceného vadného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Míchá se po dobu patnáct • φ minut a zpracuje se obvyklým způsobem. Získá se 5-(9H-f1uoren -9-y1methoxy)-3H-[1,3,4]oxadi azo1-2-on (AR)

mg: IR (KBr)- 3300s, l780s, 1650s, 1451m, 1426m, 1347m,

1224m, 918m, 758w, 740m cm^-1.

2. Pryskyřicí vázaný Fmoc-p-Phe-OH (BC)

Promyjí se 2,0 g tri tylchloridpolystyrenové pryskyřice (teoretické zatížení 1,8 mmol) ve 20 ml dimethy1 formámidu. Pryskyřice se smísí s roztokem 2,7 mmol Fmoc-í)-Phe-0H a 2,25 mmol DIPEA ve 20 ml d imethy 1 formám idu, směs se protřepává při teplotě místnosti po dobu dvou hodin a přidá se 1 ml methanolu. Směs se promyje DCM (5 x 20 ml) a methanolem (3 x 20 ml) a vysuší se.

3. Pryskyřicí vázaný Fmoc-aza-Gly-p-Phe (CD)

Přomyje se 0,48 mmol/g BC použitím DCM (2 x 7 ml) a NMP (1 x 7 ml) a dvakrát se odstraňují chránící skupiny použitím 20 % piperidinu v 7 ml dimethylformamidu nejdříve po dobu 5 minut a pak po dobu 15 minut. Pryskyřice, zbavená chránících skupin se promyje NMP (5x7 ml) a absolutním DCM (5x7 ml), smísí se s roztokem 0.72 mmol AB v 7 ml DCM a protřepává se při teplotě místnosti po dobu 90 minut. Pryskyřice se promyje

4. 3-[4-(3-Cuan i cl i nobenzoy1 )sera i karazi do] -3-feny 1 propionová kyše1 i na

Promyje se 0,24 mmol CD použitím NMP (7x5 ml) a dvakrát se odstraňují chránící skupiny použitím 20 % piperidinu v 7 ml dimethylformám idu nejdříve po dobu 5 minut a pak po dobu 15 minut. Pryskyřice se promyje NMP (5 x 7 ml) a dimethylformamidem (2 x 7 ml), smísí se s roztokem 0,48 mmol 3-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbonylam ino)benzoové kyseliny, 0,48 mmol HATU a 2,4 mmol kolidinu v 5 ml dimethylformamidu a prot-řepává se při teplotě místnosti po dobu 90 minut. Pryskyřice se promyje a chránící skupiny se odstraní shora popsaným způsobem.

Pryskyřice se následně smísí s roztokem 2,4 mmol Ν, N'-bi s-ElOC-l-guany 1 pyrazol u (DE) ve 4 ml chloroformu a

B udržuje se na teplotě 50 C po dobu 16 hodin. Pryskyřice se promyje DCM, methanolem a diethyletherem. K odstranění skupin BOC se pryskyřice protřepává se směsí 95 % TFA a 5 % triisopropylsilanu (5 ml) při teplotě místnosti, nejdříve 90 minut a pak 30 minut.. Odstraněním rozpouštědla čištěním preparát i vní chromatografií RP-HPLC se získá tri f 1 uoracet.át 3-[4-(3-guan1di nobenzoy1)sem i karazido]-3-f eny1propionové kysel i ny.

RT = 19,1 (0 50¾ B, 30 minut)

MS (ESI): n/e = 385,1 Í[M+H]⁺).

Příklad 2

1. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí CD se 3-C9H-fluoren-9-y1methoxykarbonylanino)fenyloctovou kyselinou s následným odstraněním skupiny Fmoc a reakcí s ”DE s následným odstraněním skupiny BOC a odloučením od pryskyřice získá trif1uoracetát 3-[4-<3-guani d i nořeny 1 ačety1 jsem i karazidol-3-fe nylpropionové kyseliny.

RT = 4,3 (10 50¾ B, 30 minut)

MS CESI>: m/e = 399,1 C[M+H1⁺)

2. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí EF, připraveného reakcí AB s na pryskyřici vázaným, Fmoc chráněným p-(4-chlorfenyllalaninem

ΈΓ se 3-(9H-f luoren-9-y lmethoxykarbonylamino Ibenzocivou kysel lnou s následným odstraněním skupiny Fmoc a reakcí s DE s následným odstraněním skupiny BOC a odloučením od pryskyřice se získá trif1uoracetát 3-[4-(3-guanidinofenylácety1jsemikarazido]-3-(4-chlorfeny1jpropionové kyseliny.

RT = 22,8 (0—> 50¾ B. 30 minutj

MS (ESI): m/e = 419,0 (LM+H1+1.

Příklad 3

Promyje se 0,24 mmol CD NMP (7 x 5 mil a dvakrát se odstraňují chránící skupiny použitím 20 ¾ piperidinu v 7 ml dimethylformamidu nejdříve po dobu 5 minut a pak po dobu 15 mi37

iu.it. Pryskyřice se promyje NMP <5x7 ml) a dimethylformamidem (2 x 7 ml), smísí se s roztokem 0,48 mmol 3-(9H-fluoren-9-ylmet.hoxykarbony 1 am i no) va 1 erové kyseliny, 0,48 mmol HATU a 2,4 mmol kolidi nu v 5 ml dimethylformámidu a protřepává se při teplotě místnosti po dobu 90 minut- Pryskyřice se promyje a chránící skupiny se odstraní shora popsaným způsobem.

Pryskyřice se následně smísí s roztokem 2,4 mmol N,N'-bis-BOC-l-guany1pyrazolu (DE) ve 4 ml chloroformu a udržuje se na teplotě 50 0 po dobu 16 hodin. Pryskyřice se promyje DCM. K odstranění skupin 800 se pryskyřice protřepává se směsí 95 % TFfl a 5 % tri isopropylsi lanu (5 ml) při teplotě místnosti, nejdříve 90 minut, a pak 30 minut. Odstraněním rozpouštědla, čištěním preparativní chromatografii RP-HPLC se získá trif 1 uoracetát 3 -14 - (3-guan i d i nopentanoy 1 )semikaraz i do] -3-feny1propionové kyseliny.

RT = 18,2 (0 50¾ 8, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 365,1 <[M+H1⁺).

Příklad 4

Podobně jako podle příkladu 3 se reakcí EE se 3-C9Hfluoren-9-ylmethoxykarbonylamino)valerovou kyselinou s následným odstraněním Fmoc chránící skupiny, reakcí s DE a odstraněním BOC chránící skupiny a odštěpením od pryskyřice získá trif luoracet.át. 3 - [4 - (3-guan id i nopentanoy 1 )sem i karazidol -3-(4-chlorfenylpropionové kyseliny.

RT = 21,9 <0 50¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e - 399,1 CÍM+H]-·-).

• 9

Příklad 5

Promyje se 0,60 mmol EF” použitím 20 ml NMP a dvakrát se odstraňují chránící skupiny použitím 20 % piperidinu v 20 ml d imethyl formám i du nejdříve po dobu 5 minut- a pak po dobil 15 minut. Pryskyřice se promyje NMP (5 x 20 ml) a dimethylformamidem (2 x 20 ml), smísí se s roztokem 0,90 mmol N-(2-(4-methylpyridyl)-5-ami novalerové [sic] kyseliny, 0,90 mmol HATU a 6,0 mmol kol i dinu v 5 ml d i methyl formám i du a protřepává se při teplotě místnosti přes noc. Pryskyřice se promyje dimethy1formamidem, NMP a DEM. Pro odštěpení promyté pryskyřice od pevné fáze se produkt protřepává se 20 ml směsi DCM/kyselina octová/trif1uorethanol ¢3=1=1) při teplotě místnosti, nejdříve po dobu 90 minut a pak po dobu 30 minut. Odstraněním rozpouštědla se získá acetát 3-(4-[5-(4-methy1pyrid-2-y1amino)pentanoyl1semikarazido)-3-(4-chlorfeny1)propionové kyseliny. Čištěním preparativní chromatografií HPLC se získá trifluoracet-át 3-<4-[5-(4-methy 1pyrid-2-ylam i no)pentanoy 11 semíkarazido)-3-<4-chlorfeny1jpropionové kyseliny.

RT = 19,3 (10 —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI)= m/e = 448.1 ([M-+-H1 + ).

OH

Cl

Příklad 6

1, Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí FG” , připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc-chráněným íÍ-(3,5-dich1orf eny1)a 1aninem

Cl'

Cl s N-(2-(4-met.hy lpyridy 1 )-5-ami nova 1erovou [sic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-(4-t5-(4-methylpyrid-2-y lam i noípentanoy1]semi karazido)-3-(3,5-d i chlorfeny1Ipropionové kyseliny. Čištěním preparativní chromatografii HPLC se získá trif 1uoracetát 3-<4-f 5-<4-methy1pyrid-2-y1ami no)pentanoy 13 sem ikarazido)-3-(3,5-dich1orfeny1)propionové kysel lny.

RT = 19,3 CO ~ 6CK B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 483,4 ([M+HJO

Pokud se reakční roztok po odštěpení od pryskyřice a po odstranění pevné fáze odfiltrováním okyselí na hodnotu pH 4,0 kyselinou chlorovodíkovou, vytvoří se vnitřní sůl 3-I4-E5-C4-met-hy lpyr id-2-y 1 am i no)pentanoy 11 sem i karazi do) - 3-(3,5-dichlorfeny1)propionové kyseliny.

RT = 19,2 (O —3-60¾ B, 30 minut.)

2. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí GH , připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc-chránaným p-O-nitrof eny1)a1an i nem

s N-(2-(4-methylpyridy1)-5-aminovalerovou tsic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-(4-[5-(4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoy11 sem ikarazido)-3-(3-nitrofeny1)propionové kyseliny. Čištěním preparativní chromatografií HPLC se získá trifluoracetát 3-í4-[5-(4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoyl]semikarazido)-3-(3-nitrofeny1)propionové kyselinyRT = 14,9 (O 60% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 459,5 C[M+H]⁺)

3. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí HK, připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc-chránaným p-(4-fluorf enyl)fenylalaninem

s N-(2-(4-met.hy lpyridy 1 )-5-ami novalerovou [sic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-(4-[5-(4-methy1pyrid-2-y1am1no)pentanoy1]sem i karaz i do)-3-(4'-(4-fluor)b if enyl)propionové kyseliny.

Čištěním preparativní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-<4-[5-(4-methy1pyrid-2-y1am i noJpentanoy1]semi karazido)-3-(4'-(4-fluoríbifenyl)propionové kyseliny.

4. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí ’*KL , připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc-chránaným 0-(2-nitro-

s N-(2-(4-methylpyridy1)-5-ami novalerovou [sic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-(4-E5-(4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoy1]sem ikarazido)-3-(2-nitrofeny1ípropionové kyseliny.

• «

Čištěním preparátivní chromatografií HPLC se získá trif 1 uoracetát 3-<4- [ 5-(4-methy1pyri d-2-y1am i nolpentanoy 1 ] sem i karazi do)-3-(2-n i trofeny1Jpropionové kysel 1ny.

RT = 14,7 (0 602 B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 459,5 (CM+H]⁺)

5. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí LM, připraveného reakcí AEt se s pryskyřicí vázaným Fmoc-chránaným <3-(4-trifluormethoxyfenyl)alani nem vzorce

s N-(2-(4-met.hy 1 pyridy 1 )-5“aminovalerovon [sic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-Í4-[5-(4-methy1pyr i d-2-y 1 ami no) pentanoy 1 ] sem i karazido) - 3- (4-t.r i f 1 uormethoxyf eny 1 ) prop i onové kyše1 i ny.

Čištěním preparativní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-(4-[5-(4-methy1pyrld-2-ylamí no)pentanoy1]semi karazido)-3-(4-tr i f1uormethoxyfeny1)propionové kysel i ny.

RT = 19,8 (O 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): „,/e = 498.5 ( 1 M+Hl ^ )Příklad 7

Podobně jako podle příkladu 1-2 se reakcí trity lehlořidpolystyrenové pryskyřice se skupinou Fmoc-chráněnou 3-aminopropionovou kyselinou vzorce

—( Polymer 1

L0 získá pryskyřice LO . ze které se chránící skupina odstraní podobně jako podle příkladu 1.3 a reakcí s AB se získá sloučenina MN .

Polymer

MN

Podobně jako podle příkladu 5 se MN“ nechává reagovat s N-C2-(4-methylpyridy1)-5-aminovalerovou [sici kyselinou. Po odštěpení od pryskyřice se získá acetát. 3-<4-15-(4-methylpyrid-2-ylamí no)pentanoy1]senikarazido)-3-propionové kysel iny.

Čištěním preparativní chromatografií HPLC se získá trifluoracetát 3-(4-15-(4-methylpyrid-2-ylaminoípentanoy13 sem i karazido!-3-propionové kysel iny.

RT = 7,3 (□ 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 338,4 (1M+H1⁺).

Příklad 8

1. Anhydrid 3-fenyIglutarové kyseliny

Pod zpětným chladičem se zahřívá 10 mmol 3-fenylglutarové kyseliny a 30 mmol acetanhydridu až do dokonalého rozpuštění.

Po ochlazení se přidají 3 ml diethyletheru. sraženina se odfiltruje a promyje se diethyletherem. Tak se získá anhydrid 3-fenylglutarové kyseliny.

^-NMR (250 MHz, CDC1₃): δ = 2,85 {dd, 2H,

3,1 (dd, 2H, CH (CHiY) 2) , 3,4 (m, 1H, CH(CH₂)₂) (m, 5H, arom. H).

CH(HCH)₂) , 7,15-7,45

2. 5-1N'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazlno]-5-oxo-3-feny1pentanová kyselina

Rozpustí se 2,0 mmol anhydridu 3-fenylglutarové kyseliny a 2,0 mmol Fmoc-hydrazinu ve 30 ml tetrahydrofuranu a zahřívá se pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Produkt se extrahuje roztokem 50 ml DCM a 50 ml IN kyseliny chlorovodíkově, organická fáze se vysuší síranem hořečnat.ým a odfiltruje se. Odstraněním rozpouštědla se získá 5-1N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonylJhydrazino]-5-oxo-3-feny1pentanová kysel i na.

RT = 10,4 (30 80% B, 30 minut)

3. 5-1N'-(3-guan id i nobenzoy1jhydrazino]-5-oxo-3-feny1pentanová kysel i na

5-1 N' -(9H-F1uoren-9-ylmethoxykarbony1Jhydrazino]-5-ΟΧΟ-3-feny1pentanová kyselina se zbaví chránících skupin podobně, jako je popsáno v příkladu 1. Chráních skupin zbavená sloučenina se smísí s roztokem 2,0 mmol N,N'-bis-BOC-l-guanylpyrazolu (DE) ve 4 ml chloroformu a udržuje se na teplotě 50 C po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku.

4 ·	*·♦·	•« *	99 9 9
•	•	•	• * · ·	9 9 9
♦	•	«	« · ·	9 9
•	•
• ·		··	99 999	9 9 99 9

K odstranění skupin BOC se zbytek míchá se směsí 95 % TFA a 5 % triisopropylsi lanu <5 ml) při teplotě místnosti, nejprve 90 minut a pak 30 minut. Odstraněním rozpouštědla a čištěním preparativní chromatografií RP-HPLC se získá t.r if 1 uoracetát 5-[ N' -C3-guani dinobenzoyl Ihydrazino] -5-oxo-3-f eny 1 pent.anové kysel i ny.

RT = 17,0 CIO -^50¾ B, 30 minuti

MS CESII: m/e = 384,1 C[M*llj + ).

1. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí 5-[N*-C9H-fluoren-9-y1methoxykarbany1Ihydrazino]-5-oxo-3-fenylpentanové kyseliny s N-C 2-C4-met.hy 1 pyri dy 1 1-5-am i nova 1 erovou [sic] kyselinou získá acetát 4-CN'-[5-C4-methylpyrid-2-ylaminolpentanoy11 hydrazi nokarbony1>-3-f eny1másel né kyše1 i ny.

RT = 22,1 CIO —r 60¾ B, 30 minuti

MS CESII: m/e = 413.1 < [ M-t-H] + 1 .

2. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí 5-[N’-C9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1Ihydrazino]-5-oxo-3-C4-chlorfeny1 lpěn tanové kyseliny s N-C2-C4-met.hyl pyridy 11 -5-am i nova lerovou kyselinou získá acetát C3R1-4-CN'-[5-C4-methylpyrid-2-ylaminalpentanoyl]hydrazinokarbony11-3-C4-chlorfenylImáselné kyseliny, MS CFAB1: m/e = 447,9 CEM+HJ+l.

Pokud se reakční roztok po odštěpení od pryskyřice a po odstranění pevné fáze odfiltrováním okyselí na hodnotu pH 4,0 ky selinou chlorovodíkovou, vytvoří se vnitřní sfll C3R1-4-CN'-[5-C4-methylpyri d-2-ylam inolpentanoy1]hydraz inokarbony11-345

-(4-cli lorf eny 1 íraáselné kysel i ny .

Příklad 10

Podobně jako podle příkladu 3 se reakcí 5-[N'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony 1 )hydrazi no] -5-oxo-3- (4-ch lorf eny 1 )pentanové kyseliny se 3-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbonylaminojvalerovou kyselinou s následným odstraněním Fmoc skupiny, reakcí s “DE a odstraněním BOC skupiny získá trif luoracetát. 4-[N'- (5-giianidinopentanoy 1 jhydrazi nokarbony 11 -3-f eny 1 másel né kyselí nyRT = 19,41 (0 —^50% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 364,2 ( [M+H]*>Příklad 11

Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony 1 )hydrazino] -5-oxopent.anové kysel lny, připravené podobně jako podle příkladu 8.2 reakcí se g 1 ut.aranhydridem s Fmoc hydrazinem, s N-(2-<4-methylpyridy1)-5-aminovalerovou [sic] kyselinou získá acetát 4-(N'-[5-(4-methylpyrld-2-ylami nojpentanoy11 hydrazi nokarbony 1 >másel né kysel i ny.

MS (ESI): m/e = 337,4 ([M+H]⁺)Příklad 12

1. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí NO, připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc chráněným p-(4-bromfeny1Jalaninem vzorce

se N-(2-(4-met.hy Ipyridy 1 )-5-ami novalerovou [sic] kyselinou a odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-(4-[5-(4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoyl]semikarbazido)-3-(4-bromfeny1jpropionové kysel 1ny.

Preparátivní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-(4-[5-(4-methylpyrid-2-ylam i nolpentanoy1]sem i karbazidol-3(4-bromfenylIpropionové kyselinyRT « 17,0 <0 -5» 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 493,4 (£M+H]⁺).

2. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí OP, připraveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc chráněným íJ-(naftalen-l-y1íalaninem vzorce

se N-(2-(4-methylpyridyl)-5-ami novalerovou [sic] kyselinou a od- 47

• 9	4 ·	9444 4 4	4« 4 4	9 9	4 4 9	• 4	44 4 4 4
9 4	4 V
•	•	4 4	4	9	•	a	4	4
	99	• 4	4«		• 99	4 4		4 « 4 4

štěpením od pryskyřice získá acet.át 3-Í4-E5-(4-methy 1 pyrid-2-y 1 am i no) pentanoy 1 1 sem i karbazidol -3 - ( naf ta 1 en-1 -y 1 )propionové kyseliny.

Preparatlvni chromatografii HPLC se získá trif1uoracetát 3- <4-[ 5- (4-methy 1 pyr i d-2-y lam i no) pentanoy 1J sem i karbaz i do) - 3-(naftalen-1-y1)prnpionové kysel i nyRT = 17,6 (0 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 464,5 ([M+H]-).

Příklad 13

1- Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí LM , připraveveného reakcí AB se s pryskyřicí vázaným Fmoc chráněným p-(4-trifluormethoxyfenyl)alaninem vzorce

ocf₃ se 3- (9H-f luoren-9-y lmethoxy karbony lam i no) benzoovou kysel i nou , následným odštěpením Fmoc skupiny a reakcí s DE a odstraněním BOC skupiny a odštěpením od pryskyřice získá trifluoracetát 3-[4-(3-guanidinobenzoy1 )semikarbazido] -3-(4-trif luormet hoxyfeny1)propionové kyseliny.

RT = 17,6 (O 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 468,5 ([M+H]-).

»· ···· a aa a* · a a a • aaa a a a a a a aaa • •a aa aaaa .t

Příklad 14

1. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí FG se 3-(9Hf1uoren-9-ylmethoxykarbonylam ino)benzoovou kysel i nou, následným odštěpením Fmoc skupiny a reakcí s DE a odstraněním E!QC skupiny a odštěpením od pryskyřice získá trifluoracetát 3-E4-(3-guanidi nobenzoy1)semi karbazi do]-3-(3,5-d i chlorfenyl)propionové kyseliny.

RT = 17,0 (0 60% B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 454,3 (ΕM+Hl⁺>.

2. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí OP se 3-(9Hf 1 uoren-9-ylmethoxykarbonylam i no)benzoovou kyše1 i nou, nás 1edným odštěpením Fmoc skupiny a reakcí s DE a odstraněním BOC skupiny a odštěpením od pryskyřice získá trifluoracetát 3-E4-(3-guani di nobenzoy1)semikarbazi do]-3-naf ty 1propi onové kysel i ny.

RT = 15,9 (0 60% B, 30 minut)

MS (ESI): _n/e = 435,5 (EM+H]⁺).

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí NO se 3-(9Hf1uoren-9-ylmethoxykarbony1am i no)benzoovou kysel i nou, následným odštěpením Fmoc skupiny a reakcí s DE a odstraněním BOC skupiny a odštěpením od pryskyřice získá trifluoracetát 3-E4- (3-guanidinobenzoy1)sem ikarbazido]-3-(4-bromfeny1)propionové kysel i ny.

RT = 14,9 (0 —z 60% B, 30 minut)

MS (ESI): _m/_e = 464,3 (EM+H]⁺).

4. Podobně jako podle příkladu 5 se reakcí CD se N-(2(4-methylpyridyl)-5-aminovalerovou Esic] kyselinou a následným odštěpením od pryskyřice získá acetát 3-Í4-E5 - (4-methy 1 py r i d-2-y 1 am i no) pen t-anoy 11 semikarbazido)-3-fenylpropionové kyseliny.

··♦· >v • fc fcfc • · · fcfc • · fc · · · • fcfcfc fcfc • fc fcfc fcfc • fcfc •fc fcfc • · · fc • · · • fcfc • · · • · fc·· fc

Preparativní chromatografií HPLC se získá t.rif luoracet.át 3-Í4-Í 5- (4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoyl 1 semikarbazido) -3fenylpropionové kysel inyRT = 13,2 (O 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 414,5 (ÍM+H]-*-).

Příklad 15

1. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[N(9H-f1 nořen -9-ylmethoxykarbony1)hydrazi no]-5-oxo-3-(4-bromfeny1)pentanové kyseliny, připravené reakcí 3-(4-bromfenyl)glutaranhydridu s Fmoc-hydrazinem, se N-(2-(4-met.hy Ipyr Idy 1)-5-am i nova lerovou kyselinou získá acetát 3-(4-bromf enyl )-4-(N* - Í5-(4-met-hyl pyr i d-2-y1am i no)pentanoyl1hydrazi nokarbony1>náselné kysel i nyPreparativní chromatografií HPLC se získá trifluoracetát 3-(4-bromf eny1)-4-(N’-[5-(4-methy1pyrid-2-ylam i no)pentanoy11 hydrazinokarbony1Imáselné kyselinyRT = 17,0 (O 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 492,4 (LM+H1+).

2- Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-iN'-(9H-fluoren-9-y1methoxykarbony1)hydraz1 no]-5-oxo-3-(4-bromf eny1)pen taliové kyseliny s DE získá trifluoracetát 3-(4-bromfeny1)-5-(Ν' -[l-(3-guanidlnofeny1)methanoy11hydrazino)-5-oxopentanové kysel i ny.

RT = 15,0 (0 —->60% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 463,3 (1M+H1⁺).

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-y lmet.hoxykarbony 1 ) hydrazi no] -5-oxo-3- (4-bromf enyl )pentanové kyseliny se 3-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbonylamino)benzoovou kyselinou a s naf t.a l en-2-y lmethy 1 th i oacet. im i dátem získá trif 1 uoracetát 5 - [ N' -<l-(3-acet. im i doy lam i nof eny 1 )met.hanoy 11 hydrazino)-3-(4-bromfeny1)-5-oxopentanové [sic] kyseliny.

RT = 15,4 <0 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 462,3 C[M+H]⁺).

Příklad 16

1- Podobné jako podle přikladu 9 se reakcí 5-[Ν’-(9H-f1 nořen -9-ylmethoxykarbony 1 )hydrazi no] -5-oxo-3-(4-f 1 uorfenyl )pen tanové kyseliny, připravené reakcí 3-(4-f1uorfeny1)g1utaranhydridu s Fmoc-hydrazinem, se N-(2-(4-methylpyridy1)-5-aminovalerovou [sic] kyselinou získá acetát 3-(4-fluorfenyl)-4-<N'-[5-(4-methy1pyrid-2-ylam i no)pentanoy1]hydrazinokarbony11másel né kyseliny.

Preparativní chromatografii HPLC se získá trifluoracetát

3-(4-f1ucrfeny1)-4-<N*-[5-(4-methy1pyrid-2-y1am inolpentanoy1]hydrazinokarbonyl)máselné kyseliny.

RT = 14,1 (0 —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 431,5 ([M+H]*).

2. Podobně jako podle příkladu S se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(4-fluorfeny1)pen tanové kyseliny s DE získá trif1uoracetát 3-(4-f1uorfenyl)-5-(N'-[1-(3-guanidinofeny1)methanoyl]hydrazino)-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 11,2 (0 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 402,4 (1M+H]⁺).

3- Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonyi)hydrazino]-5-oxo-3-(4-fluorfeny1)pen tanové kyseliny se 3-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbonylamino)benzoovou kyselinou a s naftalen-2-y1 methylthioacetimidátem získá trifluoracetát 5 - [ N'-<1-(3-acetim i doylamí nofeny1)methanoy11hydrazino) -3-(4-f luorf enyl )-5-oxopent.anové kysel iny.

RT = 12,0 (0 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): n/e = 401,4 (ΓΜ+Η1Ό.

Příklad 17

1- Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[N'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazinol -5-oxo-3-(4-chlorfenyllpěn tanové kyseliny, připraveně reakcí 3-(4-chlorfeny1Iglutaranhydridu s Fmoc-hydrazinem, se N-(2-(4-methy1pyridyl1-5-aminovalerovou [sic] kyselinou získá acetát 3-(4-ch1orfeny11-4-íN'-[5-(4-methy1pyrid-2-y1amino1pentanoy1]hydrazinokarbony1Imáselné kyseliny.

Preparátivní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-(4-chlorfeny11-4-<N' -[5-(4-methy1pyr i d-2-y1am i no1pentanoy11hydrazinokarbony11máselné kyseliny.

RT = 16,3 (0 —ž 60¾ B, 30 minuti

MS (ESU: m/e = 447,9 ([M+H]+1.

2. Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-[N'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1Ihydrazino]-5-oxo-3-(4-ch1orfeny1 lpěn tanové kyseliny s DE získá trif1uoracetát 3-(4-chlorfeny115-<N'-[1-(3-guan id i nofeny1Imethanoy1]hydraz i no)-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 13,9 (0 60¾ B, 30 minuti

MS (ESU: m/e = 418,9 (EM+H]⁺13. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-EN'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1Ihydrazino]-5-oxo-3-(4-ch1orfeny1 lpěn tanové kyseliny se 3-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1aminolbenzoovou kyselinou a s naftalen-2-ylmethy1thioacetimidátem získá tr i f 1 uoracetát 5- [ N¹ -< 1- (3-acet. im idoy lam i nof eny 1 Imethanoy 11hydraz inol-3-(4-chlorf eny11-5-oxopentanové kysel i ny.

MS (ESIj: m/e = 417,9 (EM+Hl+1.

4. Podobně jako podle příkladu 3 se reakcí 5-[N'-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1Ihydrazino]-5-oxo-3-(4-ch1orfeny1 lpěn tanové kyseliny se 3-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbonyíaminolva··· · lerovou kyselinou a s (DE) získá trifluoracetát 3-(4-chlorf eny 1 -5 -[N'-(5-guani dinopentanoy1)hydrazino]-5-oxopentanové kysel i nyRT = 13,7 (0 —> 60% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 398,5 < [ M+H] * ) .

Příklad 18

1. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-íN’-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(3,5-dichlorfeny1)pentanové kyseliny, připravené reakcí 3-(3,5-dichlorfeny1)glutaranhydridu s Fnoc-hydrazinem, se N-C2-(4-methylpyridyl)-5-am1 novalerovou [sici kyselinou získá acetát 3-(3,5-dichlorfenyl )-4-(N'-[5-(4-methylpyrid-2-ylamino)pentanoyl]hydrazinokarbony1)máselné kyseliny.

Preparativní chromatografií HPLC se získá trifluoracetát 3- (3,5-dichlorfeny1)-4-(Ν' - [ 5-(4-methylpyrid-2-ylami no)penta noy1]hydrazi nokarbony1)másel né kysel i ny.

RT = 18,7 (0 —ž 60% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 482,4 ( ⁺ )2. Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-ΓN'-C9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(3,5-dichlorfenyl)pentanové kyseliny s DE získá trifluoracetát 3-(3,5-dich1orfeny1)-5-(N' -í1-(3-guanidinofeny1)methanoyl]hydrazino)-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 17,7 (0 —> 60% B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 453,3 ([M+H]~*).

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(3,5-dichlorfenyl)pentanové kyseliny se 3-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonylamino)benzoovou kyselinou a s naftalen-2-yImethylthioacetimidátem získá trifluoracetát 5-ÍN' -<1-(3-acetimidoy1aminofeny1)metha53

noy 1 ] hydrazino) -3 - (3,5-d i ch 1 orf enyl ) -5-oxopent.anové kysel i ny. RT = 16,6 (O —ž 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 452,3 C [ M+H] .

4. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[N*-C9H-f1uoren-y-yImethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-C3,5-dichlorf enyl)pentanové kyseliny se 3-(pyrid-2-ylamino)benzonvou kyselinou získá acetát 3-<3,5-dichlorfeny1)-5-oxo-5-íN'-E3-Cpyrid-2-ylamino)benzoyl]hydrazino)pentanové kyseliny.

RT = 33,5 CO —?? 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 498,3 C [ M+Hl .

5. Podobně jako podle příkladu 3 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-yImethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(3,5-dichlorfeny1)pentanové kyseliny se 3-C9H-f1uoren-9-yImethoxykarbony1ami no)valerovou kyselinou a s C“DE) získá trif1uoracetát 3-C3,5-dichlorfenyl-5-[N' -C5-guanidinopent.anoyl Ihydrazinol -5-oxopenta nové kyseliny.

6- Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[N*-C9H-fluoren-9-yImethoxykarbony1)hydrazi no]-5-oxo-3-(3,5-dichlorf enyl)pentanové kyseliny, se 4-(pyrid-2-ylamino)máselnou kyselinou získá acetát 3-C3,5-dich1orfeny1)-5-oxo-5-{N'-[4-(pyrid-2-y1amino)butanoy1]hydrazino)pentanové kyseliny.

Preparativní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-C3,5-dichlorfeny1)-5-oxo-5-(N'-[4-Cpyrid-2-y1amino)butanoyl]hydrazinolpentanové kyseliny.

7- Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-LN'-C9H-f1uoren-9-yImethoxykarbony1)hydrazina]-5-oxo-3-(3,5-dichlorfeny1)pentanové kyseliny, se 4-C1H-imidazo1-2-y1amino)máse1nou kyselinou získá acetát 3-C3,5-dichlorfeny1)-5-oxo-5-íN’-[4-C1H-i midazo1-2-ylamino)butanoy1]hydrazino)pentanové kyseliny.

Preparátivní chromatografií HPLC se získá trifluoracetát. 3-(3,5-di ch1orf eny1)-5-oxo-5-{Ν’-[4-(lH-imi dazo1-2-y1am i no)butanoyl ] hyclrazinoJpentanové kysel iny MS (ESI): m/e = 443,3 (1M+H1+).

Príklad 19

1. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-1N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazina]-5-oxo-3-(bifeny1-4-y1)pen tanové kyseliny, připravené reakcí 3-Cbifeny1-4-y1)glutaranhydridu s Fmoc-hydrazinein, se N-C2-{4-met.hylpyridyl )-5-aminovalerovou [sic] kyselinou získá acetát 3-(bifeny1-4-y1)-4-<N^J-[5-(4-methy1pyr i d-2-y1am i no)pentanoy1]hydraz i nokarbony1)máselné kyseliny.

RT = 20,3 CO —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 489,6 ( LM+H] * ) .

2. Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-1N' -(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbony1)hydrazinol-5-oxo-3-(bifenyl-4-y1)pen tanové kyseliny s DE získá tri f 1 uoracetát. 3-(bifeny1-4-y1)-5-ÍN'-[l-C3-guanidinořeny1)methanoy1]hydrazinol-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 19,3 <0 —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 460,5 ([M+H]⁺).

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N^J-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony1)hydraz ino]-5-oxo-3-(bif eny1-4-y1)pen tanové kyseliny se 3-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonylamino)benzoovou kyselinou a s naftalen-2-ylraethylthioacetimidáhem získá trif luoracetát 5- [ N' -{ 1 -(3-acet iπ idoy1aminofeny1 )methanoy 1 ] hydraz i no)-3-bi f eny1-4-y1-5-oxopentanové kysel i ny.

RT = 19,6 (0 —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 459,5 (ΓΜ+Η1+).

Příklad 20

1. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-ΓN'-(9H-f1uoren-9-y lmethoxykarbony 1 )hydrazino] -5-oxo-3-(3,5-dichlor-2-hydroxyíeny1)pentanové kyseliny, připravené reakcí 3-(3,5-dichlor2-hydroxyfenyl)glutaranhydridu s Fmoc-hydrazinem, se 4(pyridin-2-ylamino)máselnou kyselinou získá acetát 3-(3,5-dich1or-2-hydroxyfeny 1 )-5-oxo-5-íΝ' -Γ4-pyrid-2-ylamino)butanoy11hydrazinolpcntanové kysel inyPreparat.i vn í chromatograf 1 í HPLC se získá tr i f 1 uoracetát. 3-(3,5-dichlor-2-hydroxyfenyl )-5-oxo-5-<N' -[4-pyrid-2-ylamino)butanoyl]hydrazlno)pentanové kyseliny.

MS (ESI): m/e = 470,3 (1M+H]⁺).

2. Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[ N' -(9H-f1uoren-9-y lmethoxykarbony 1 )hydrazi no] -5-oxo-3-(3,5-dich lor-2-hydroxyf eny 1 )pent.anové kyseliny, se 4-(ÍH-imidazol-2-ylamino)máselnou kyselinou získá acetát 3-(3,5-dichlor-2-hydroxyfenyl)-5-oxo-5-(N' - [4-Í1H - imidazol -2-y 1 am i no)butanoy 11 hydrazi no) pentanové kyseliny.

Preparativní chromatografií HPLC se získá trif1uoracetát 3-(3,5-dich lor-2-hydroxyf enyl ) -5 - oxo-5-í N' - [ 4 - ( ÍH- im idazol - 2ylamino)butanoy11hydrazino)pentanové kyselinyMS (ESI): m/e = 459,3 (ΓΜ+ΗΓΌ.

Příklad 21

1- Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-y lmethoxykarbony 1 ) hydrazi no 1 -5-oxo-3 - ( 3-n i trof enyl ) pen t-anové kyseliny, připravené reakcí 3-(3-nitrefeny 1 )glutaranhydridu s Emoc-hydrazinem, se N-(2-(4-methy1pyridyl)-5-aminova ler ovou [sic] kyselinou získá acetát 3-(3-nitrofeny1)-4-(N'- [ 5 - (4-methy 1 pyr id in-2-y lam i no) pen tanoy 1 ] hydraz i nokarbony 1 )máselné kyseliny.

MS (ESI): m/e = 458,5 ([M+H1+).

·· at a· «·· *4 ··«»

2. Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-[N'-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonyl )hydrazinol -5-oxo-3- (3-nitrofenyl )pen tanové kyseliny s DE získá trifluoracetát 5-(N*-[1-(3-guani d inof enyl)methanoy11hydrazino)-3-(3-ni trof enyl)-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 11,3 (O —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 429,4 ( [M+H] * ) .

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N'-C9H-fluoren-9-yl met-hoxy kar bony 1 )hydraz i no] -5-oxo-3 - ( 3-n i trof eny 1 ) pen tanové kyseliny se 3-(9H-f1uoren-9-ylmethoxykarbonylamino)benzoovou kyselinou a s naftalen-2-ylmethylthioacetimidátem získá trif1uoracetát 5-[N‘-<1-(3-acetim idoylam i nofeny1)methanoyl1 hydrazino)-3-(3-nitrefeny1)-5-oxopentanové kyseliny.

Příklad 22

1- Podobně jako podle příkladu 9 se reakcí 5-1N'-(9H-f1uoren- 9-ylmethoxykarbony1 )hydrazino] -5-oxo-3-(4-met-hoxyf enyl ) pentanové kyseliny, připravené reakcí 3-(4-methoxyfeny 1 )glutaranhydridu s Fmoc-hydrazinem, se N-(2-(4-methylpyridy1)-5-aminovalerovou [sic] kyselinou získá acetát 3-(4-methoxyfeny1)-4-<N* -[5-(4-methylpyridin-2-ylamino)pentanoyl]hydrazinokarbony 1 >másel né kyseliny.

RT = 13,7 (0 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): _m/e = 443,4 (ΓΜ+ΗΓ)2- Podobně jako podle příkladu 8 se reakcí 5-[N'-(9H-f1nořen- 9-ylmethoxykarbony1)hydrazino]-5-oxo-3-(4-methoxyfeny1) pentanové kyseliny s DE získá trifluoracetát 5-(N‘-[l-(3-guani d i nof eny1)methanoy1]hydrazi no)-3-(4-methoxyf eny1)-5-oxopentanové kyseliny.

RT = 10,6 CO —> 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e - 414,4 C[M+H]⁺).

3. Podobně jako podle příkladu 1 se reakcí 5-[N‘-(9H-fluoren-9-ylmethoxykarbony 1 jhydrazi no] -S-oxo-3 - (4-met.hoxyf eny 1 )pent-anové kyseliny se 3-(9H-f 1 uoren-9-ylmet-hoxykarbony 1 amino)benzoovou kyselinou a s naftalen-2-ylmethylthioacetimidátem získá trif luoracetát. 5-[ N' -11 - (3-acet im 1 doy lam inof eny 1 )methanoyl] hydraz i no)-3-(4-methoxyf eny1)-5-oxopenLanové kyše11ny.

RT = 10,5 (O —z· 60¾ B, 30 minut)

MS (ESI): m/e = 413,4 ([M+Hl⁺>.

Následu jící příklady blíže objasňují, nijak však neomezují farmaceutické prostředky podle vynálezu:

Přiklad A

Injekční ampulky

Roztok 100 g účinné látky obecného vzorce I a 5 g dinat.riumhydrogenfosfátu se ve 3 litrech dvakrát destilované vody upraví 2 n kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 6,5, sterilně se filtruje, plní se do injekčních ampulí, za sterilních podmínek se lyofilizuje a sterilně se uzavře. Každá injekční ampulka obsahuje 5 mg účinné látky.

Příklad B

C í pky	Roztaví	se směs 20	g účinné látky obecného	vzorce I se
100 g	so j ového	lecithinu a	1400 g	kakaového másla,	vlije se do
f ořem	a nechá	se ztuhnout.	Každý	čípek obsahuje	20 mg účinné
látky.

Příklad C

Roztok

Připraví se roztok 1 g účinné látky obecného vzorce I a 9,38 g dihydrátu nat-r iumdihydrogenf osf átu, 28,48 g dinatriumhydrogenfosfátu s 12 molekulami vody a O,1 g benzalkoniumchloridu v 940 ml dvakrát destilované vody. Hodnota pH se upraví na 6,8, doplní se na jeden litr a steriluje se ozářením. Tohoto roztoku se může používat, například jako očních kapek.

Příklad D

Mast

Smísí se 500 mg účinné látky obecného vzorce I a 99,5 g vašelíny za aseptickýeh podmínek.

Příklad E

Tablety

Směs 1 kg účinné látky obecného vzorce I, 4 kg laktosy,

1,2 kg bramborového škrobu, 0,2 kg mastku a 0,1 kg stearátu hořečnatého se lisuje o sobě známým způsobem na tablety, přičemž každá tableta obsahuje 10 mg účinné látky obecného vzorce IPříklad F

Povlečené tablety

Podobně jako podle příkladu E se lisují tablety, které se o sobě známým způsobem povléknou povlakem ze sacharosy, bramborového škrobu, mastku, tragantu a barviva.

«· ·· W« Φ·· Φ· ···«

Příklad Ο

Kaps1e

Plní se 2 kg účinné látky obecného vzorce I do tvrdých želatinových kapslí, přičemž každá kapsle obsahuje 20 mg účinné látky obecného vzorce I.

Příklad H

Ampule

Roztok 1 kg účinné látky obecného vzorce I v 60 litrech dvakrát destilované vody se sterilně zfiltruje, plní se do ampulí, za sterilních podmínek se lyofilizuje a sterilně se uzavře. Každá ampule obsahuje 10 mg účinné látky.

Příklad I. Inhalační sprej

Rozpustí se 14 g účinné látky obecného vzorce I v 10 1 isotonického roztoku chloridu sodného a plní se do běžných obchodních nádob pro stříkání s pumpovým mechanizmem. Roztok se může stříkat do úst nebo do nosu. Každý střik (přibližně 0,1 ml) odpovídá dávce přibližně 0,14 mg.

Průmyslová využitelnost

Derivát diacylhydrazinu jakožto inhibitor integrinu vhodný pro výrobu farmaceutických prostředků zvláště pro profylaxi a ošetřování nemocí jako jsou thrombosa, srdeční infarkt, koronární onemocnění srdce, arteriosklerosa, nádorová onemocnění, osteoporosa, záněty a infekce a patologické procesy probíhající a šířící se angiogenezí.

Claims (10)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I >£/ ZwZ. ~ re * · ♦♦ / (I) kde znamená skupinu H2N-CC=NH)-NH. H₃C-C(=NHj-NH-, Het¹-NH-, skupinu

   -<CH2)n- nebo —j—(CH₂)_oR⁴

   Z skupinu N-R² nebo CH-R²,

   R¹ , R² vždy na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupinu A,

   R³ atom vodíku, skupinu Ar nebo Het,

   R⁴ atom vodíku, skupinu A, Ar, OH, OA, OAr, arylalky1ovou,

   Hal, CN, N02. CF₃ nebo OCF₃,

   A alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,

   Ar fenylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubstituovanou nebo trisubst.ituovanou skupinou A, OH, OA, CF₃, OCF₃, CN, NO2 nebo Hal a která je popřípadě substituovanána fenylovou skupinou, která je monosubstituována, disubst-ituována nebo trisubst-i tuo61 vána skupinou A, OH, OA, CF3, OCF3, CN, NO2 nebo Hal za vytvoření nesubstituované nebo substituované bifenylové skupiny, nebo znamená naftylovou skupinu nesubstituovanou nebo monosubstituovanou, disubst!tuovanou nebo trisubst i tuovanou skupinou A, OH, OA, CF3, OCF3, CN, NO2 nebo Ha 1,

   Hal atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu,

   Het nasycenou, částečně nebo plně nenasycenou monocyk1ickou nebo bicyklickou heterocyklIckou skupinu se 5 až 6 členy v kruhu s 1 nebo 2 atomy dusíku a/nebo s 1 nebo 2 atomy síry nebo kyslíku, přičemž je heteroeyk1ický podíl popřípadě monosubst i tuován nebo disubst. i tuován skupinou CN, Hal, OH, OA, CF3, A, NO2 nebo OCF3 ,

   Het.¹ pětičlennou nebo šestičlennou heterocykl ickou aromatickou skupinu s 1 až 4 atomy dusíku nesubstituovanou nebo monosubstituovanoun nebo disubstituovanou skupinou Hal, A, Ar, OA, OAr, arylalkylovou, CN, NO2 , CF3 nebo OCF3, n 2, 3, 4, 5 nebo 6, m, o, 0, 1 nebo 2 a jeho fyziologicky přijatelné soli a solváty.
2. 2. Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku

   1, kterými jsou

   a) 5-[N' -(3-guanidinobenzoy1)hydrazino]-5-oxo-3-fenylpentanová kysel ina, b j 3-[4-( 3-guanidinofeny1acety1 jsem i karbaz idol-3-f enylprop i onová kyselina,

   c) 3-[4-(3-guanidinobenzoyljsem ikarbazido]-3-fenylpropionová kyselina, ♦ · 99 9 9 · 9 • 9 9 V ·

   d) 4-(N'-[5-(4-methylpyridin-2-y1amino)pentanoy1]hydrazinokarbonyl)-3-fenylmáselná kyselina,

   e) 3-[4-(5-guanidinopentanoy1)semikarbazido]-3-feny1propionová kyselina, f ) 4-[N'-(5-guanid inopentanoy1)hydrazinokarbony11-3-fenylmáselná kyše1 i na,

   g) 3-[4-(3-guan i d inopentanoy1)sem i karbazido]-3-(4-ch1orfeny1)propionová kyselina,

   h) 3-Í4-[5-(4-methy1pyridi π-2-ylam inoípentanoy11sem i karbázi do>-3-(4-chlorfenylmáselná kyselina,

   i) 3-[4-(5-guan idinopentanoy1jsemi karbazido]-3-(4-chlorfeny1)prop i onová kyše1 i na a jejich fyziologicky přijatelné soli a solváty.
3. 3. Způsob přípravy derivátu diacylhydrazinu obecného vzorce

   I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam nebo jeho solí podle nároku 1,vyznačující se tím, že

   a) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená Z skupinu N-R², se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II kde X, Y, R¹ a R² mají v nároku 1 uvedený význam a ve které jsou volné aminoskupiny chráněny vhodnou skupinou chránící am i noskup inu, se sloučeninou obecného vzorce III

   OH

   4 « • 4 4 4 · 4 • 4 ·· ·· 44 « 4 4 4 ·· 4* 4 4 *4 4 4 4 * 4··

   kde R² a R³ mjí v nároku 1 uvedený význam a ve které jsou volné hydroxylové skupiny chráněny vhodnou skupinou chránící hydroxylovou skupinu, nebo vázány na pevnou fázi, a následně se chránící skupiny a/nebo pevná fáze odštěpí, nebo

   b) se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce TV (IV) kde X a Y mají v nároku 1. uvedený význam a ve které jsou volné aminoskuplny chráněny vhodnou skupinou chránící aminoskupinu , se sloučeninou obecného vzorce V

   HN

   R¹ (V)

   R2 kde R¹ , R² , R³ a Z mají v nároku 1 uvedený význam a ve které jsou volné hydroxylové skupiny chráněny vhodnou skupinou chránící hydroxylovou skupinu, nebo vázány na pevnou fázi. a následně se chránící skupiny a/nebo pevná fáze odštěpí, nebo

   c) se uvolňuje sloučenina obecného vzorce I ze svého funkčního derivátu zpracováním solvolyzačním nebo hydrogenolyzačním činidlem a/nebo, se zásaditá sloučenina nebo kyselá sloučenina obecného vzorce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sfll
4. 4- Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku

   1 nebo jeho fyziologicky přijatelné soli nebo solváty pro

   ·· ···· • 4 * ♦ · 44 4 4 4 4 4 ·· • · · 4 • » · · 4 4® ♦ · o ·· ·· • 4 44· •· 4444

   použití jako terapeuticky účinné sloučeniny.
5. 5. Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelné soli nebo solváty pro použití jako integrinové inhibitory.
6. 6. Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku ►

   * 1 nebo jeho fyziologicky přijatelné soli nebo solváty pro použití při léčení nemocí.

   *
7. 7. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t í m , že obsahuje jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo její fysiologicky přijatelnou sfll nebo solvát.
8. 8. Použití derivátu diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelných solí nebo solvátů pro výrobu farmaceutických prostředků.
9. 9. Použití derivátu diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 obecného vzorce I a/nebo jejich fysiologicky přijatelných solí pro výrobu farmaceutických prostředků k ošetřování nemocí jako jsou thrombóza, infarkt myokardu, koronární onemocnění srdce, arterioskleróza, záněty, nádorová onemocnění, osteoporóza, infekce a restenóza po angioplatii.
10. 10. Derivát diacylhydrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelné soli nebo solváty pro použití při patologických procesech, které jsou udržovány nebo šířeny angiogenezí.