CS223897B2

CS223897B2 - Method of making the derivative of 16-amino-18,19,20-trinor-prostaglandine with ev.substituted phenyl group on the atom c 17

Info

Publication number: CS223897B2
Application number: CS819142A
Authority: CS
Inventors: Sarudy E Toth; Gabor Ambrus; Gyoergy Cseh; Janos Borvendeg; Imre Moravcsik; Gabrielle Mezey
Original assignee: Gyogyszerkutato Intezet
Priority date: 1980-12-09
Filing date: 1981-12-09
Publication date: 1983-11-25
Also published as: SE8107347L; US4418205A; ATA524181A; FR2495611B1; FI70885C; IT8125485A0; IT1211144B; CH648298A5; FI70885B; FR2495611A1; GB2090829A; DE3148752A1; GB2090829B; SE441674B; DD208149A5; AU7836381A; FI813938L; GR76966B; AT377976B; HU184356B

Description

(54) Způsob výroby derivátů 16-amino-18,19,22-trmor-prostaglandinu s popřípadě substituovanou fenylovou skupinou na atomu C17

Vynález se týká nových derivátů 1-amino-18,19,20-trrnor-prostaglandiinu se substituovanou nebo nesubstituovanou fenylovou skupinou na atomu C17 otecného vzorce I

na atomech Cis a Cie může být buď S nebo R konfigurace,

Y znamená voskový atom nebo C1.3 alkylovou skupinu,

W značí vodíkový atom^, atom halogenu, hydroxyskupinu, a jejich adičních solí s kyselinami. Kromě toho se vynález týká způso^bu výroby uvedených sloučenrn.

Cílem výzkumu léčiv je využití fyziologické aktivity prosta^glandin^ů v rozhčných terapeutických oborech. Přírodní prostaglandin^y ma^jí ne^příznivou vtastnost projevujíc^íse v tom, že vykazují současně široký roz sah účinku a kromě toho jsou organismem rychle rozkládány. Tyto nevýhody je možno odstranit přípravou analogů prostaglandinu, které jsou metabohzov^ niž^ší r^ychlostí a které mají selektivnější účinek (P. Ramwell a I. Saw: Ann. N. Y. Acad. Sci. 180, 10 (1971)].

Vynález se týká nových derivátů prostaglandinu, které mají l-amino-Z-fenylethylovou skupinu, popřípadě substituovanou halogenem, hydroxyskupinou, místo n-amylové skupiny tvořící fragment Ci6 až C20 přírodních prostaglandinů. Kromě toho je předmětem vynálezu způsob výroby uvedených derivátů.

Pro organismus mají fyziologický význam ně^kter^é fen^yleth^ylderiváty (napMklad feny lalanin, tyrosin, L-dopa] a dále některá léčiva (například různá sympatomimetická činidla] patřící k tomuto druhu sloučenin. Proto se předpokládalo, že fyziologické vlastnosti přírodních prostaglandinů je možno modifikovat zavedením fenylethylaminové skupiny do postranního řetězce prostaglandinů.

Nové deriváty 16-ammo-18,19,20-trinor-prostaglandinu se substituovanou nebo nesubstituovanou fenylovou skupinou na atomu C17 výše uvedeného obecného vzorce I, v němž na atomech C'15 a Ci6 může být buď

9a„iaa_l,15-trihydroxy-16-p-nitrobenzyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,

20-trinoT-prastadienové kyseliny obecného vzorce XII

S nebo R konfigurace, Y znamená atom vodíku nebo C1.3 . alkylovou skupinu, W atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, a jejich adiční soli s kyselinami, je možno podle vynálezu připravit tak, že se z derivátu

OH

NO_Z

OH

NH-COOCH (XlH v němž na atomech Cj.5 a Ci6 může být S nebo R konfigurace,

W má výše uvedený význam a

Y značí C1.3 alkylovou skupinu, odstraní v libovolném pořadí esterová skupina a chránící p-nitrobenzylo^j^y^k^^rbonylová skupina, s tím omezením, že v těch sloučeninách obecného vzorce I, kde W má výše definovaný význam a Y značí C1.3 alkylovou skupinu, se odstraní pouze p-nitrobenzyloxykarbonylová skupina, a vzniklý produkt obecného vzorce · I se popřípadě převede organickou nebo anorganickou kyselinou na svou sůl.

V souladu s výhodným způsobem podle vynálezu se p-nitrobenzyloxykarbonylová skupina .z derivátu 9a,lla,15-trlhydroxy-16-p-nitrobenzyloxykárbonylamido -17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,i20-trinor-prostadi'enové kyseliny výše uvedeného obecného vzorce XII, v němž na atomech C15 a Cis může být buď S nebo R konfigurace a Y . a W mají výše uvedený význam, odstraňuje v prostředí kyseliny .octové zinkovým prachem a esterová skupina vzniklého esteru 9α,11α,15-trihydroxy-16-amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,:^(^-^-^i^i^i^(^r^^-^I^(Oí^tild^enO'vé kyseliny . se popřípadě hydrolyzuje ve směsi vody a nižšího alkanolu, s výhodou methanolu, hydroxidem alkalického kovu, . s výhodou hydroxidem lithným, a potom se zpracovává kyselinou až do dosažení isoelektlického bodu produktu. Izolovaný produkt je možno přeměnit na adiční sůl s kyselinou o sobě známými způsoby. Redukce zinkovým prachem v kyselině octové se provádí v rozmezí tep

lot —5 až +10 °C, s výhodou při 0 °C, hydrolýza esteru v rozmezí teplot 0 až +10 °C, s výhodou při +5 °C.

Podle jiného výhodného postupu vynálezu je/ možno .p-nitrobenzyloxykarbonylovou chránící skupinu ve sloučenině obecného vzorce XII .odstranit katalytickou hydrogenací s přenosem vodíku v přítomnosti katalyzátoru typu paládia na uhlí a cyklohexadienu.

Hydrolýzu esteru je možno s výhodou provádět .pomocí . enzymů typu esterázy, například lipázy Rhizopus orizae (maďarský patent č. 160 109 j. Sled odstraňování chránící p-nitrobenzyloxykarbonylové skupiny · a esterové skupiny lze při provádění postupu podle vynálezu vzájemně měnit.

Pro přípravu adičních solí s kyselinami sloučenin obecného vzorce I a sloučenin obecného vzorce I s volnou aminoskupinou, získaných odstraněním chránící p-nitrobenzyloxykarbonylové skupiny a popřípadě štěpením 'esterové skupiny, se uvedené sloučeniny s výhodou nechají reagovat v roztoku s anorganickou nebo organickou kyselinou, popřípadě sx jejich . roztokem ve vhodném rozpouštědle, a vzniklá adiční sůl s kyselinou se odděluje způsoby o sobě známými.

Sloučeniny obecného vzorce XII, používané jako výchozí látky při postupu podle vynálezu, jsou také nové. Mohou být syntetizovány dále uvedeným výhodným způsobem: derivát 1-karb<^^;^-^:l-p-nitrobenzyloxykarbonylamido^-fenylethanu obecného vzorce II «I *

i v němž se nechá reagovat s alkylesterem kyseliny

W znamená atom vodíku, atom halogenu, chlormnvenčí, vzniklý derivát smíšeného hydroxyskupinu, anhydridu obecného vzorce III ^cH-CH--^cooH & I

NH-COOCH.

(II) v němž

W má výše uvedený význam, se nechá reagovat s trisubstituovaným fosfinem - obecného vzorce VI

P(Z)s (VI),

W —\ \ОУ- CH£ C C--C-0 -C O-Cl bw-mcHcW^-NOg (III) v němž

W má výše uvedený význam, se podrobí reakci s diazomethanem za vzniku derivátu l-dlazo--2-o'xo-3-p-nitrobénzylOxykarbonylamid.o-4-fenylbutanu obecného vzorce iV

v němž

W má výše uvedený význam.

Na tuto sloučeninu se působí kyselinou chlorovodíkovou, získaný derivát 1-chlor-2-oxo-3-p-inítrobenzyloxykarbonylamido-4-fenylbutanu obecného vzorce V v němž

Z znamená alkylovou nebo arylovou skupinu, a na vzniklý derivát fosfoniumchloridu obecného vzorce VII

(VI) v němž

W a Z mají výše uvedený význam, se působí hydroxidem -alkalického- kovu.

Získaný derivát fosforanu obecného vzorce VIII

N0_z (V)

CH^CH-CO-C^P (2)1

NH-C—CH^O

(Vlil) v -němž

W a Z mají výše uvedený význam, se - nechá reagovat s la-íe-ka.rbalkoxy^-hexenyl j-2^-íormylyyklOipentan-3a-,5a-diold.iacylátem obecného vzorce IX

v němž

X znamená nižší alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu a

Y značí Cm alkylovou skupinu.

Získaný derivát -alkylesteru 9a,lla-diacyloxy-15-o.xo-16-p-nltrohenzyloxykarbonylamido-17-fenyh5-ci'3,13-tr3ns-1^;8,19,2Ó-trinor-prostadienové kyseliny obecného' vzorce X

ocox

v němž na atomu Сю může být buď S nebo R konfigurace a dále kde

W, X -a Y mají výše uvedený význam, se redukuje -borohydridem alkalického kovu. Produkty z redukce, tj. deriváty alkylesteru 9a,lla-diacyloxy-15 (S) -hydroxy-16(X)

-P'-nitro'benzyloxyka.rbonylam.ido-17-fenyl-5-cis,13-tnans-18,.19,20-trinor-prastad.ienové kyseliny a alkylesteru 9a,lla-15(R)-hydro · xy-16-p-nitl’ιoίbenzylχyykarbonyiaιπddo-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny, charakterizované obec· ným vzorcem XI ocox

(XI) v němž

W, X a- Y mají výše -uvedený význam, se oddělí a potom podrobí hydrolýze kyselinou p-toluensulfonovou v methanolickém roztoku.

Pro syntézu sloučenin uvedeného obecného vzorce XII, používaných jako výchozí látky při postupu podle vynálezu, je výhodné použít jako základní sloučeniny opticky aktivní deriváty la-(6-karbaÍkoxy-2-hexenyl) -2/3-f ormylcyklopentan-3a,5a-dioldia-cylátu.

Tyto sloučeniny mohou být výhodně .připraveny -dále uvedeným způsobem, použijeli se jako výchozí látky známého χ-laktonu ( — ) 3a,5«-dihiy d г оху-2·^- (trityloxymethyl) cyklopentan-la-octové kyseliny [Tetrahedron Letters, 4639 (1976)]: y-lakton 3a,5a-dihydroxy-2;/?- (trityloxymi^1^l^;^l) cyklopentan-la-octové kyseliny se podrobí redukci diisóbutylaluminiumhydridem, vzniklý χ-laktol 3a,5 «-dihydroxy-aj- (trityloxyinethyl) cyklopentan ία-acetaldehydu se nechá reagovat s 4-ka.l’boxybutylidentгifenylfósfóranem, získaný la-(6-kiarbiO'xx---hexenyl)-2/3- (trityloeymxteyl Icyklopentan^a^a-diol se esterifikuje a vytvořený lα-(6-karbal·kóey-2-hexenyl) -20- (trityloιχymethyl) cyklopentan-Sa^a-díol se acyluje chloridem kyseliny nebo anhydridem kyseliny, připraveným z alifatické nebo aromatické karboxylové kyseliny, přičemž vzniká la-(6-karbalkoxy-2-hexenyl) -2·β- (trltyloxymethyl) cyklopentan-3a*5a-dioldiacylát.

Na tento diacylát se působí organickou nebo anorganickou kyselinou a vytvořený lo- (6-karbalkoxy-2-hexenyl) --/^--^^ydroxymethylcyklopentan^a^a-dioldiacylát se nakonec podrobí oxidaci (Maďarský patent -č.

177 834).

Uvedené la- ( 6-karba ak oxy-2 -liexeuy i) -20-formylcyklopentan^a^a-dioldiacyláty jsou výhodné výchozí látky pro přípravu derivátů prostaglandinů modifikovaných v jejich 3-eyd.roxy-l-trans-óktxnyióvém postranním řetězci, protože -tyto meziprodukty figurující v konečném stupni prostaglandinové syntézy mohou být snadno přeměněny na různé analogy prostaglandinů -vhodně obměněnými - Wlítigovými činidly, používanými pro výstavbu postranního řetězce.

Wittigova činidla nutná pro přípravu derivátů prostaglandinů podle vynálezu mohou být získána -buď z S- nebo R-fenylalaninu nebo z derivátů fenylalaninu, substituovaných atomem halogenu, -hydгoeyskupinóu, alkylovou skupinou nebo alkóeyskupinóu na benzenovém jádru, podle tohoto -reakčního schématu:

při syntéze 9a,11(al5(f)itr.ihydnoxy-16(S)-ami^,nól171fxnyl-5-cis,13-tranLS-18,19,20-trinór-próstadixnóvýce kyselin (sloučeniny obecného vzorce I, kde Y = W = H] se nejprve S-fenylalanin přeměňuje na svůj - p-nitróbxιnzy-oxykarbonylóvý derivát známým způsobem [D. T. Gish a F. H. Carpenter: J. Am. Chem. Soc. 75, 950 (1953) ]; p-nltrobenzyloeykarbonylóvá skupina je výhodnou chránicí skupinou aminoskupiny, protože může být snadno odstraněna redukcí zinkem v prostředí kyseliny octové při 0 °C. Za těchto podmínek jsou -deriváty 16iamino-17-fxnyl-18,19,20-trinor-prostaglandinu PGF typu -skoro stálé a nerozkládají se.

Uvedený p-nitróbenzylóeykarbonyl S-fenylalanin se převádí v prostředí txtraeydró223897 furanu v přítomnosti N-methyLm-orfolinu adicí mělárního množství inobutylesteru kyseliny chlormravenm při —15 °C ina -derivát smíšeného anhydridu. Při reakci -se vysráží hydrochlorid N-methylmorfiolinu. K této směsi se sraženinou se po- kapkách přidává přebytek roztoku -diazomethanu v - etheru a míc^há se ^po ^dobu 3 hodin ^př.i te^plotě —¹⁵stupňů Celsia. Potom se -do -směsi, -obsahující derivát diazoketoinu vytvořený při reakci s -diazomethanem, uvádí při —15 °C bezvodý chlorovodík a získá se l-chlor-2-oxo-3(S)-p-nitrobenzyloxykarňonylamido-4-fenylbutan.

V prostředí etheru při teplotě varu se 1rchlor-2-oxo (S) -p-nitrobenzyloxykarbonylamido-4-fenylbutan nechá reagovat s tri-n-butylfosfinem nebo popřípadě s trifenylfosfinem. Ze -vzniklých fosfoniových solí se uvolní fosforanové deriváty, používané jako Wittigova činidla, přídavkem roztoku -hydroxidu alkalického kovu.

V prostředí etheru se la-[G-karbalkoxy-2-hexenyl) -2/3-f ormyl'cyklopentan-3a,5a-dioldiac^áty ^podiroⁱb^{í p}o ^dobu 8 a-ž W hodin reakci se 2 moly tri-n-butyl-²-oxo-³(^S)-^p-'mtrobenzyloxykarbonylami^do-4-fenyibutylidenfosforanu. Při reakci vzniklý derivát -alkylesteru 9α,llα-diacyloxy-15-oxo-16 (S j-pmitrobenzylox^ykarbonylami^do-17-^fenyl-5-ci'S,l³-trans-18,19,²2--rinor-prostadienové kyseliny se oddělí -od tri-n-butylfosfinoxidu, rovněž vytvořeného při reakci, a -od zbylého -přebytku tri-n-buty--2-oxo-3 ( S) -p-nitrobenzyloxykarbonylamido-4-fenyl^but^y^rlí<^í^nh^s^ifoi^anu, s -výhodou chromatografií -prováděnou na sloupci -silikagelu.

Redukcí derivátu alkylesteru 9a,lla^:-diacylox^-15-oxo-11 (S j -p-nitiObenzyloxykarbon^ylami^do-r7-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny borohydridem alkalického kovu, tj. borohydridem sodným, se tvoří směs derivátů alkylesteru 9a,11a-^diac^yloxy-15 (^S j -^hy dr oxy-to (^S) -^plni^rI^o^benzylooykarbonylamido-17-fenyl-5-cisД3-rrans-18,19,22-trinor-prosraУienové kyseliny a alkylesteru 9^a,-^«dh^c^^yk^^^^y^-15 (R)-hydroxy-16 (S ] -p-pnitrobenzyloxykarbony lamido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,22---rmor-prosrcl·dienové kyseliny. Tyto sloučeniny se od sebe liší konfigurací na atomu Cis. Oba diastereomery je možno výhodně oddělit preparativní chromatografií na tenké vrstvě nebo sloupcovou chromatografií.

Při separaci prováděné na tenkých vrstvách silikagelu s vyvíjecím -systémem tvořeným -směsí n-heptanu a ethylacetátu -v poměru 1 : 1, byl označen -polární -produkt jako isomer A a nepolární produkt jako isomer B, protože u -obou diastereomerů není ješte objasněna ^kon^figurace na atomu Gis.

Hydrolýzou derivátů alkylesteru 9a, 11a-diacyloxy-15 (ξ) -hydroxy-16 (S ] -psnitrobenzyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cis,13-tra-ns-18,19,²2-trinor-prostadienové kyseliny (isomeru A) a ^9alla-^diacyloxy-¹5(£j-^hydrox^y-16 (S) -p-nirrobenzyloxykarbonylamido·-17-fenyl-5-cisД3-trans-13,19,20-rrinor-prostadienové kyseliny (isomeru B) v methanolickém -roztoku kyselinou p-toluensulíonovou při -teplotě -místnosti se získají deriváty alkylesteru (ξ -trrihyrroyy-16 (S j-p-nitrobeIlzyloxykarbonylamΊd□-17lfenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinO;r-í3ro'sta^dienové ^kyselin^y (isomer A] a ⁹a,lla'^,15(£]-tri^,h^ydroxy-11 (S ] -p-initrobenzy loxykarbonylamido-17-fen^yl-5élis,13rtrйnss-l 8,19,20-trinor-prostadionové kyseliny (isomer B).

^podle výše uv-ederáho reakčního schématu -byly postupem podle -vynálezu připraveny tyto sloučeniny:

9a,11a, 15 (ξ) -trihydroxy-11 (R ] -amino-17lfenyl-5lCis,13-trans-18)19,22-rrl·nor-prΌStadienová kyselina (isomer A) z výchozího R-fenylaminu,

9α,11α,15 (ζ )-trih^ydroxy-11 (S j-amino-17-p-chlorfeny--5-cis,13-trans-18Д9.2Π--гmor-prostadienová kyselina (isomer A) z . (Sj-p-chlorf enylalaninu,

9^1^,15 (ξ) -ГгИ^Ь-юу-И (S j -amino-17-p-hydroxyfeinyl-5-cis,13-trans-18,19,22--rinor-prostadienová kyselina (isomer A] z- (Sj-tyr osinu,

9^,11^,15 (ξ) -trihydrox^y-11 (S) -amino-17-p-methylfeny--5-cis,13-trans-18,19,20-triínor-prostadienová kyselina (isomer A) -z (Sj-p-methylfenylalaniniu.,

9a, 11a, 15 (ξ j -ГгШу^У^г^с^^у^-^И (S) -amino-17-p-methooyfeny^--5-cis^,1З’trans-¹⁸,19,20-rrinO'r-prostadienová - kyselina (isomer A] z (SJ-p-meťhoxyfenylalaininu a rovněž odpovídající nižší alkylestery výše uvedených kyselin.

Deriváty 9 o, 11a, 15 (ξ) -triιhydroyy-16-am-ιno-17-fe.nyl-5-cisД3-trans-18,19,2ΰ-rrmoг-prostadienové kyseliny byly podrobeny tes^tům určeným ^pro charakterizaci biolo^gických účinků prostaglandinů typu PGF2a a byte objeveιno^, že jejich tera^peutický účrnek je vyšší než účinek sloučenin -typu PGF2_a.

Prostaglandiny typu PGF·.^ a jejich někter^é (teriváty b^yly zaveden^y do tera^pie a ^porodnické -praxe asi před 10 lety. V novější době jsou používány ve veterinární praxi pro s^ynchmmzaci říje. Účinek těchto sloučenin projevující se vyvoláním -potratu byl zkoumán zia -r^ůznýc^h experimentálních ^podmínek na několika druzích -zvířat.

Podle jedné ze -zkušebních -metod [M. J.

K. Harper a R. C. Skarnes: Advances in Biosciences 9, 789 (1973)] se testovaná látka podávala subkutánně myším v 16. až 17.

dnu jejich gravidity (třetí trimestr] a po223897 mino-17-fenyl-5-cis, 13-trans-18,19,i2J-t rinor-prostadienové kyseliny [isomer A):

tom se registroval počet potratů vzniklých během 48 hodin a -po odstranění dělohy rovněž počet živých mrtvých embryí a jizev na placentě.

Při jiné studii osvětlující účinek na rannou fázi gravidity byly ošetřovány samice křečků ve 4., 5. a 6. dnu gravidity při subkutánní aplikaci zkoušených látek a 8. dne při pitvě byl zjišťován počet nitroděložních zachycení embryí a. rovněž .stav vaječníků [N. S. Grossley: Prostaglandis 10, 5 (1975)].

Podobně byly ošetřovány krysy ve 4., 5.,

6. a 7. dnu gravidity a po usmrcení 9. dne bylo při pitvě registrováno přerušení graviiidy [W. Skuballa et al.: J. Med. Chem. 21, 443 (1978)].

Podle výše uvedených metod byl stanoven vztah mezi dávkováním příslušných látek a reakcí organismu na ně při použití prostaglandinu PGF_2(Z, jeho methylesteru a také sloučenin obecného. vzorce I podle vynálezu. Každá -dávka byla zkoušena na pěti zvířatech.

Dále v tabulce jsou obsaženy výsledky získané u gravídních myší při použití methylesteru 9«,11a,15 (ξ ) -trihydroxy-16 (S ) -aSloučenina

PGF_2a

Methylester 9a,11a,15 (ξ)-trlhydroxy-16 (S) -amíno-17-^^nyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny (isomer A)

Padesátinásobné zvýšení účinku ve srovnání s PGF2o. je zvláště významné u křečků, protože tento- test je vhodný pro citlivou detekci abortivního účinku dané sloučeniny s luteolytickou aktivitou.

Podle výzkumů autorů vynálezu nemají deriváty 9a,Ila,15 (ξ )-trihydroxy-16-amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-pi'Ostadienové kyseliny nepříznivý účinek .na funkci .intestinálního traktu testovaných zvířat, jako je tomu u přírodních prostaglandinů. Při dávce 10 mg PGF_2e/kg a 3 mg methylesteru PGF₂a/k.g se vyskytl průjem u gravídních myší v rozsahu přes 50 °/o, -zatímco methylester 9a,ll«,15(f--riihyciroKy-16 (S) -amino'-17-fenyi-5-cis,13-trans-18,19₁20-trinor-prostadienové kyseliny (isomer A) nevyvolal průjem v dávce 3 m.g/kg. Tato dávka je 2,5násbbná -vzhledem k té, která způsobuje potrat, u -50 % gravídních zvířat.

Výzkumy prováděné na izolovaných orgánech prokázaly podobné účinky těm, kterých bylo dosaženo in vivo. Při zjišťování účinných koncentracích -sloučenin podle vynálezu na hladké svalstvo, byly jednotlivé orgány suspendovány v isotonickém solném roztoku - v konstantním proudu kyslíku. Bylo nalezeno, že ileum- myši, krysy, morčete a kromě toho bronchiáiní a děložní svaly morčete jsou relativně necitlivé k novým derivátům podle vynálezu. V souladu s tím

Sloučenina

EDso {přibližně) mg/kg tělesné hmotnosti

PGF_2a	16
PGF2_a-methylester	10
9a, 11a, 15 [ ξ) -trihydroxy- -16 (S) -amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20--rinor-prostandlenové kyseliny methylester (isomer A]	1,2

Z hodnot EDso (dávka vyvolávající potrat u 50 % -zvířat] získaných interpolací je zřejmé, že nová sloučenina podle vynálezu vykazuje Xí^ní^^^iobný účinek ve srovnání s PGF2_a a 8násobný účinek ve srovnání s -methylestrem PGF2«.

Podobné zvýšení účinku bylo možno -pozorovat při ošetřování zvířat, která byda v prvním trimestru jejich gravidity.

EDso (přibližně) mg/kg tělesné hmotnosti křeček krysa

1000

0,5 100 je -minimální dávka vyvolávající -kontrakci dělohy u myši, křečka a krysy co do velikosti o 1 až 2 řády vyšší než je tomu u pros-agia.ndinů typu PGF_2q·.

V protikladu k prostaglandinům typu PGF_2a abortivní účinek nových derivátů podle vynálezu nesouvisí s jejich účinkem projevujícím se v přímém působení na hladké svalstvo.

Také metabollcká stabilita nových derivátů hraje významnou roli -u výborného biologického účinku -uvedených sloučenin: prostaglandm--1-hydroxydehydrogenáza izolovaná z plícního. laloku, která je nejúčinnější inaktivační enzym přírodních prostaglandinů, nezpůsobuje oxidaci -derivátů 16-amino-17-fenyl-18,19,20-trinor-p:rostagiandinu. Mimoto nové -deriváty neinhibují enzymatickou oxidaci prostaglandinů typu PGF_2a[zkušební systém: P. Tolnay -et al.: Acta Biochim. Biophys. Acad. Sci. Hung. 14, 67 (19719)].

Deriváty 9α, 11a,15( ξ )-trihydroxy-16-amino-n-fenyl-S-cis, 13-tran:s-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny podle vynálezu - je možno převést na farmaceutické přípravky obvýklými způsoby používanými při výrobě léčiv (to je -zvláště výhodné pro přípravu injekcí). Tyto -lékové formy je možno aplikovat -primárně u hovězího dobytka pro zlepšení synchronizace říje a porodu, kromě toho ce veterinární praxi k léčení sterility, chronické endomeíritidy a apyometrie.

Jednotlivé dávky sloučenin podle vynálezu, vypočtené pro různé druhy zvířat, činí •při intramuskuláriní .aplikaci:

2,0 mg pro krávu,

1,0 mg pro koně a 2,0 mg pro prase.

Vynález ilustruje dále uvedené příklady provedení, jimiž se však jeho rozsah neomezuje.

Příklad 1

Methylester 9«, 11a, 15 (ξ J-trihydroxy-16{ S j -amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny (sloučenina obecného vzorce 1, k-de ^γ = СНз, W = Ц isomer A j

V 18 ml kyseliny octové se rozpustí 1,2 g (^0,00² 'mol] methytesteru ^9alla^,15(^£]-trlhydroxy-16 (S) -p^niitrobenzyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,2G--rmor-prostadienové kyseliny (isomer A) a potom se do roztoku ochlazeného na 0 °C za stálého míchání přidá 6 ml vody a 650 mg zinkového prachu. Reakční směs se míchá 1 hodinu při -0 °C v atmosféře dusíku, potom, se za chlazení upraví pH 2N roztokem hydroxidu sodného na -hodnotu 6 a směs se podrobí lyo-fylizaci. Pevný zbytek se potom chromatografuje na sloupci připraveném z 30 g . silikagelu ve směsích chloroform — — methanol, obsahujících postupně se zvyšujících množství methanolu. Samotný produkt se eluuje ze sloupce směsí -obsahující ¹⁴ % .methanolu.

Výtěžek: ⁶⁵0 mg (⁷⁷ % ) methylesteru 9a< 11α,15( -ξ j 4rihydroxy-16 (S j-amino-17-fe.ay.l^cisJ^traus^BJ^SO-trinor-prosteclienové kyseliny -(isomer A] chromatograficky čistého (chromatografie na tenké vrstvě, vyvíjení systém rozpouštědel: -methanol — chloroform 30 : 70, R_f = 0,6).

IC spektrum (film):

vOH 3 700 — 3 200, vC — O 1 720, ^yCH = CH{trans) ⁹⁷⁰ cm“¹.

NMR spektrum (DMSO -ds) :

2,8 (H-16. m, 1H), 3,6 (OCH3, s, .3H),

3,8 — 4,3 - (H-9,11,15, m, 3H], 5,4 (H-5,6, m, 2H), 5,6 — 5,8 (H-13,14, m 2H), 7,35 (Η-Ar, s, 5H) ppm.

Hmotové spektrum:

mol. hmotnost (m/z): 417

Hmotové číslo charakteristických iontu (m/z): 417, 386, 326, 120, 91.

Hydrochlorid konečného produktu:

olej^, zjištěný o^bsah chloru = ^7,69 °/o.

P říklad 2

Methytester 9^,11^155()-trihydroxy-16(S ]-amlno-1⁷ --enyl-5 -cis Д 3 -ttans-16,19,2 2-1гшог

-prostadienové -kyseliny (sloučenina obecného vzorce I, kde Y = CH3, W = H, isomer

B)

Ve 12 ml kyseliny octové se - rozpustí 750 mUigramA (0,0^3 mol] methytesteru 9^11a„.15 (ξ j-trihydroxy-^S j-p-niirobenzyloxykarbonylamido-17-fe.nyl-5-cis,13-trans-78,19,20-tгinor-pro'stadieyové kyseliny (isomer B) a potom se do roztoku ochlazeného na 0 °C za stálého míchání -přidají 4 ml vody a ⁴¹⁰ mg zinkového prachu. ^Reakcn^í směs se míchá při -0 °C -v atmosféře dusíku ' -po dobu 1 -hodiny a -potom -se izoluje produkt postupem popsaným v příkladu 1.

^Výtěže^k: 380 mg (72 %) methylesteru 9^71ι-,75( ξ )-trihydroxy-16 (S )-amino-17-fenyl-⁵-cisДЗ-trans-⁷8Д9,2²-tr^tnDr-prostadieyové kyseliny (isomer B).

^IC spektrum (film):

v OH 3 700 — -3 200, v C = O 1 720, yCH — OH (trans) 970 cm4

NMR spektrum· (DMSO -de]:

δ 3,0 XH-16, m, 1H), 3,6 (OCH3, s, 3HJ,

3,7 -— 4,3 (H-9, 11,15 m, 3H), 5,4 (H-5,6, m, -2H), 5,6 -— 5,8 (H-13,14, m, 2H),

7,3 (Η-Ar, s, -5H) ppm.

Hmotové spektrum:

mol. hmotnost (m/z): 417.

Hmotové číslo charakteristických iontů (m/z): 417, -386, 326, 120, 91.

Výchozí látky použité v postupech příkía^{dů 1} a 2 mohou být ^jpraveny ^podte ^dále uvedeného postupu:

a) Methylester 9α,l.h-dj^aacιrO^J^^y7^'^^c^-^76{S)-p-Уitгobeyzylo.xykaгbonylamido-17-fenyl-5-cis,73-trays-78,19,20-triУor-p·rostadienové kyseliny (sloučenina obecného vzorce X, kde X — Y = CHs, W — H)

Ve 130 ml tetrahydrofuranu -se rozpustí 8,6 g (0,025 molj p-mtrobe.nzyloxykarbony.l-S-fenylalan.inu a k roztoku se při —15 °C přidá ^2,7 ml ^-(0^,0°⁵ mol) ^N-methylmorfolinu a 3,2 ml -(0,025 mol] isobutylesteru -kyseliny chlormravenčí. -Směs se míchá při —¹⁵ °^{C p}o -dobu ³⁰ manut a ^potom ^-se ke vzniklému anhydridu přidá po - kapkách ^{130 -} ml (^0,06° mol] 2% - eťherického ^-roztoku diazomethanu. Reakční směs se míchá po dobu dalších 2 hodin při —15 °C a -potom se do roztoku vytvořeného -derivátu diazoketonu -zavádí po dobu 20 minut bezvo-dý chlorovodfc. ^potom se směs vlije do 150 -ml ledové vody, organická vrstva se promývá ^{3χ 50} m¹ vody až do yepř^ítomyosti chlorovodíku, vysuší se bezvodým síranem sodným ia zahustí za sníženého tlaku. Na olejovitý zbytek se nalije 30 ml n-pentanu, vzniklé krystaly se odfiltrují a vysuší za sníženého tlaku. Získaný produkt je homogenní podle chromatografie ina tenké vrstvě (vyvíjecí systém rozpouštědel: ethylacetát + in-heptan 1 : 1, R_F = 0,71).

Výtěžék: 8,,4 g (90 °/o) l-chlor-2-oxo-3(S)-p-nitrdbenzyloxykarbionylamido-4-fenylbutanu, teplota tání = 106 až 110 °C, (a)_D = = +35,0¹° (c = 1, chloroform).

IČ spektrum (KBr):

>NH 3 300, v C = O (keton) 1 745, <_v c = O (amid) 1700 cm^-1.

NMR spektrum (CDCb):

δ 3,1 (СНг-Аг, m, 2H), 4,0 (CH2CI, q, 2H), 4,7 (CH-NH, m, 1H), 5,15 (CHž-Ar-NOž, s, 2H), 5,4 (NH, m, 1H), 7,3 (Η-Ar, m, 5H),

7,4 — 8,3 (Ή-ΑΓ-ΝΟ2, 2xd, 4H) ppm.

Do roztoku 7,5 g (0,02 mol) l-chlor-2-юхо-3 (S) -p-nitrobenzyloxykar bonylamido-4-feinylbutanu ve 100 ml dichlormethanu se za míchání přidá 5,4 ml (0,022 mol) tri-n-butylfosfiinu. Reakční směs se zahřívá na 60 °C po dobu 2 hodin a potom se odpaří za sníženého tlaku do sucha. Na zbytek se nalije 50 ml vody a nezreagovaný tri-n-butylfosfin se extrahuje 3 X 20 ml n-heptanu. Do vodné vrstvy, obsahující tri-n-butyl-2-охо-З(S) -p-nitr obenzyloxykarbonylamido-4-fenyl-butylfosfioniumchlorld, se přidá 20 ml diethyletheru, 'za chlazení ina 5 °C se po kapkách přidá 10 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného a potom se reakční směs míchá 6 minut. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje se 20 ml etheru. Spojené etherové extrakty se vysuší za použití adsorbentu typu molekulárního síta, připraveného z přírodního hlinoptilolitu s otvory 4,1O^-10 m.

Tento roztok tri-m-butyl-2-охо-З (S) -p-nltrobenzyloxykarbonylamido-4-fenyl-butylidenfiosforanu v etheru se za míchání při 5 stupních Celsia a v atmosféře dusíku přidá do roztoku 3,5 g (0,01 mol) la-(6-karbomethoxy-2-hexenyl)-2/3-formylcykIopeintan^3ai,5a-dioldiacetátu v 5 ml etheru. Reakční směs se míchá po dobu 7 .hodin při 5 °C a potom se rozpouštědlo za sníženého tlaku odpaří. Zbytek se chromatografuje na sloupci 150 g kyseliny křemičité a rozpouštědlovým systémem, tvořeným n-hexanem a ethylacetátem obsahujícím postupně se zvyšující množství ethylacetátu. Produkt se eluuje ze sloupce směsí obsahující 14 % ethylacetátu.

Výtěžek: 5 g (75 %) methylesteru 9α,11α-diacetoxy-15-oxo-16 (S) -p-nitr obenzyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trínor-prostadienové kyseliny (olej).

IČ spektrum (film):

v NH 3 300, v C=O 1 730 cm“¹.

NMR spektrum (CDCI3):

δ2,0 (СНзСО, s, 2x3H), 3,60 (ОСНз, s, 3H), 4,8 — 5,2 (H-9,11,16, CH2-Ar-NO_z, m, 5H — překrývající se signály), 5,2 — 5,5 (H-5,6,m, 2H), 6,1 (H-14, d, 1H), 6,7 (H-13, 2xd), 7,1 (Η-Ar, m, 5H, 1H), 7,3 — 8,0 (H-Ar-NOa, 2xd, 4H) ippm.

Hmotové spektrum:

mol. hmotnost (m/z): 678

Hmotové číslo charakteristických iontů (m/z): 678, 587, 422, 405, 379, 337, 319, 299, 259.

b) Methylester 9a,lla-diacetoxy-15(£)-hydroxy-16 (S) -p-nitr obenzy loxy kar hony 1amido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadlenové kyseliny (isomer A) a methylester 9a,lla-diacetoxy-15(f )-hydr oxy-16 (S) -p-nitriobenzyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cís,13-trans-18,19,20-trlnor-prostadien.ové kyseliny (isomer B) sloučeniny obecného vzorce XI, kde X = CH3, Y = СНз a W = H)

Do roztoku 4,8 g (0,007 mol) methylesteru 9a,ll«-diacetoxy-15-oxo-16(S)-p-nitrobenzylkarbonylamido-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-prostadienové kyseliny v 80 milimetrech bezvodého methanolu se při 5 °C a za míchání přidá 265 mg (0,007 mol) borohydridu sodného. Reakční směs se míchá v atmosféře dusíku při 5 °C po dobu 1 hodiny, potom se vlije do 300 ml 0,2 M roztoku dihydrogenřosfátu sodného ochlazeného na 5 °C a extrahuje se 2 X 100 ml ethylacetátu. Spojené ethyacetátové extrakty se vysuší bezvodým síranem sodným a odpaří se za sníženého tlaku. Získaný surový produkt se čistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě s použitím silikagelu jako adsorbentu a vyvíjejícího rozpouštědlového systému tvořeného směsí ethylacetátu a n-heptanu 1: 1.

Výtěžek: 2,4 g methylesteru 9a,lla-diacetoxy-16 (S) -p-nitrobenzyloxykarbony lamido-17-1епу1-5-с18,13Чгап,8-18,19,20-1г1пог-ргоstadienové kyseliny (polární produkt, isomer A, R_f = 0,25) a 1,5 g methylesteru 9a,lla-diacetoxy-15 (ξ) -hydroxy-16 (S) -p-initrobenzyloxykarbonylamido-17-fienyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinor-priostadienové kyseliny (niepoláriní produkt, isomer B, R_P = 0,36). Mehylester 9a,lla-diacetoxy-15 (ξ) -.hydroxy-16 (S) -p-.nitrobenzylkarbonylamido-17-fenyl-5-cis,₁13-trans-li8,19,20-trinor-pnostadienové kyseliny (isomer A):

Teplota tání: 71 až 73 °C.

IČ spektrum (film):

v OH 3 600 — 3 300, v C = O 1 730' (široký), C=C 1 615, yč=C (trans) 970 cm¹.

NMR spektrum (CDCI3):

δ 2,0 — 2,1 (СНзСО, s, 2x3H), 3,6 ОСНз, s, 3H), 3,8 — 4,3 (H-15,16, m, 2H), 4,8 — —·5,2 (H-9,11, CHzAr-NOž, m, 4H), 5,3 (H

-5,6, m, 2H), 5,6 (H-13,14, m, 2H), 7,2 (H-Ar, .m, 5H), 7,3 — 8,1 (H-Ar-NOh, 2xd, 4H) ppm.

Hmotové spektrum:

Hmotové číslo c2ai'a]^iteristickýc2 iontů (m/z): 589, 452, 436, 392, 381, 299, 272, 255, 136.

Methylester 9a,lla-diacetoxy-15 (ξ) -hydroxy-15 (S ) -p-!mtrobenzyloxyka.rbonylam'ido-17-fenyl-5-cis,134ra!is-18,19,20-tnnor-prostadienové kyseliny (isomer B):

Teplota tání: 81 až 83 °O.

IC spektrum (^film):

v OH 3 600 — 3 300, yO = O 1 730 (široký), vC = C 1615, /OH = OH (trans) 970 cm-1.

NMR spektrum (ODOI3):

δ 2,0, 2,1 (OH3OO, s, 2x3H), 3,6 (OOH3, s, 3H), 3,8 — 4,3 (H-15,16, m, 2H), 4,8 — 5,2 (H-9,11, 0^^1--.^02, m, 4H), 5,3 (H-5,6, m, 2H), 5,6 (H-13,14, -m, 2H), 7,2 (Η-Ar, m, 5H), 7,3 — 8,1 (H-Ar-NOž, 2xd, 4H) ppm.

Hmotové spektrum:

Hmotov^é čísto charakteristicích -iontů (m/z): 589, 452, 436, 392, 381, 299, 255, 136.

ci) Methylester 9α,11α,15(£ )-trihydrox^y-16(S) -p-nitrobenizyloxykarbonylamido-17-fenyl-5-cίi,13-t.ra·ns-18,19,20--rinor-p1ostadienové kyseliny (sloučenina obecného vzorce XII, kde Y = OH3, W = H, isomer A)

Ve 150 ml bezvodého methanolu se rozpustí 2 g (0,003 mol) .methylesteru 9a,11a-diacetoxy-15 (ξ) -hydrioxy-16 (S) -p-nitrobenzyloxykarbonyaшl-cO)-17-feny^5-c'is13-t1'ans-18,19,20-ttinor-proitadienové kyseliny (isomer A) a do roztoku se přidá 4,6 g (0,024 mol) p-toluensulfonové kyseliny. Reakční směs se mícM v atmosféře dusféu pn teplotě místnosti po· dobu 36 hodin, potom se vlije do 210 ml 1 M roztoku hydrogenfosfátu sodného (pH 6) a extrahuje se 3X 100 ml ethylacetátu. Spojené ethylacetátové -extrakty se odpaří za sníženého tlaku .a zbytek se chromatografuje s použitím 100 g -silikagelu jako adsorbentu a vyvíjecího rozpouštědlového systému, tvořeného .směsí n-hexanu a ethylacetátu obsahující postupně se zvyšující množství ethylacetátu. Samotný -produkt se eluujie ze sloupce směsí rozpouštědel, obsahu^jící ¹⁰ % n-^hexanu v et^hylacet^átu.

Výtěžek: ¹,3 ^g (75 %) homogenního methylesteru 9^1¼¹⁵ (f )-trihydroxy-16 (^S )-p-niti^c^t)en^z^yl^^k^a^j^^t^(^i^^ylU^mid^o-¹^7-^:^ť^i^^yl-5j-^ch>1.318

-trans-18,19,20-tιrinor-prostadienové kyseliny (isomer A).

Teplota tání: 76 až 78 °O.

^IC spektrum (Hlín):

v OH+NH 3 600 — 3 100, v 0 = O 1 710, v 0 = O 1 610 ^cm“¹

NMR spektrum (ODOls):

y3,6 (OOH3, -s, 3H), 3,9 (H-15,16 m, 2H),

4,1 (H-9,11, m, 2H), 5,2 (OH₂-Ar-NO₂, překrývající se signály), 5,3 (H-5,6, m, 2H), 5,5 (H-13,14, m, 2H), 7,3 (Η-Ar, H-Ar-NCb, překrývající se signály), 8,1 [H-Ar-(o-nitro), d, 2H] ppm.

Hmotové spektrum:

Hmotové číslo charakteristických -iontů (m/z): 399, 368, 352, 308, 299, 290, 236, 91.

J Methylester Bajll-a^d^-mydíirox^y-16(S) -p-nitrobenzyloxykarbonylam-do-17-fényl-5-cis,-3-trans-18,19,20-trinor-pnostadienové kyseliny (sloučenina obecného vzorce XII, kde Y = OH3, W = H, isomer B).

Ve 100 ml bezvodého methanolu se rozpustí 1,4 g (0,002 mol) methylesteru 9a, 11a-diacetoxy-15 (ξ) -hydnooyt16 (S)-p-nitrobenzylooykarbonyla'md0O'-17-feny--5-cis,13-traιni-18,19,20,trmor-proitadienové kyse^!iny (isomer B) a. do .roztoku se přidají 3 g (0,016 mol) p-toluensulionové kyseliny. Reakční směs se míchá v atmosféře dusíku po dobu 36 hodin při teplotě místnosti a vzniklý produkt se izoluje postupem popsaným v odstavci O).

^Výtěže^k: ⁸50 m^g (70 °/o] čistého me^^lesteru 9a, 11a,15 (ξ) -t-rihydroxy-fé (S) -p-nitrobenzyloxykarboinylamiido-17-fenyl-5-cis,13-tIians--1,l1,2.0--.rl·nor1prostadienové kyseliny (isomer B):

Teplota tání: 69 až 71 °O.

^IČ . s^pe^ktrum (Mm):

v NH + OH 3 600 — 3 100, v O = O 1 730, v O = O 1615 cm-1.

NMR spektrum (ODOI3):

γ 3,6 (OCHó, s, 3H), 3,8 (H-15,16, m, 2H), 4,1 (H-9,11, m, 2H), 5,0 (CH₂-Ar-NO₂, překrývající -se signály), 5,3 (H-5,6, m, 2H), 5,5 (H-13,14, -m, 2H), - 7,3, 7,4 (H-Ar-NO02 překrývající se signály], 8,1 [H-Ar-(o-nitro], d, 2H] ppm.

Hmotové spektrum:

Hmotové číslo -charakteristických -iontů (m/z): 399, 368, 352, 308, 299, 290, 255,

236.

P ř íklad 3 .........

9α,11α,15 (ξ) -trihydroxy-16 (S) -amino-17 -fenyl-5-ci'S,13-tTans-1849,20-trinor-pr'Ostadienová kyselina (sloučenina -obecného vzorce

I, kde Y = W = H, isomer A)

GP**

500 img (0,021 mol] hydroxidu llthného rozpuštěného v 8 ml vody se přidá při 0 °C do methanolického -roztoku 600 mg (0,0014 mol) methylesteru 9<a,lla,15(f )-trihydroxy-16(S)-amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,0O-trinor-prosradienové kyseliny (isomer A, příklad 1). Reakční -směs se -míchá v atmosféře -dusíku při 0 °C po dobu 16 hodin -a potom se pH roztoku -upraví přídavkem 8% vodného roztoku kyseliny šťavelové na hodnotu 5,5. Methanol se odpaří za sníženého tlaku při 5 °C a zbylý vodný roztok se podrobí lyofylizaci. Suchý zbytek se chromatografuje na -sloupci 10 g silikagelu s rozpouštědlovým systémem tvořeným chloroformem a methanolem s obsahem postupně se zvyšujícího množství methanolu. Produkt se eluuje ze -sloupce chloroformem obsahujícím 00 % methanolu.

Výtěžek: 500 mg (86 %] 9a,11a,15(f)-trihydroxy-16 (S) -amino-17-f enyl-5-cis,13*trans-18,19,20--rinor-pгo6tadienové kyseliny (isomer A) homogenní podle chromatografie -na tenké -vrstvě (vyvíjející rozpouštědlový systém: methanol a chloroform 30 : 70, R_P = = 0,05).

IC spektrum (film):

v OH 3 700 — 2 500, v COOH 700 (horní část), v COO- 1 560, χ CH = CH (trans) 970 cm*¹.

NMR -spektrum (DMSO -dis):

/2,8 (H-16, m, 1H), 3,8, 4,0, 4,25 (H-9,11,15, -m, - 3H), 5,35 (H-5,6, m, 2H), 5,5 — 5,6 (H-13,14, -m, 0H), 7,35 (Η-Ar, s, 5H) ppm.

Příklad 4

9a,11a,15 (ξ) -trihydroxy-16 (S) -amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-tri-nor-prostadienová kyselina (sloučenina obecného vzorce I, kde Y — W = H, isomer B)

070 mg (0,0110 mol) hydroxidu lithného rozpuštěného ve 4 ml vody se přidá při 0 °C do roztoku 315 mg (0,00075 -mol) methylesteru 9a,lla,15 (ξ) -trih.ydroxy-16 (S) -amlno-17-fenyll5-cii,13-traIns-18,19,20-tгinor-prostadienové kyseliny (isomer B, příklad 0) ve 10 ml methanolu. Reakční směs se míchá v atmosféře dusíku při 0 °C po dobu 16 hodin a potom se izoluje produkt postupem popsaným -v příkladu 3.

Výtěžek: 080 mg (90 %) chromatograficky čisté 9a,11(a,15(£)-trihydroxy-16(S)-amino-17-fenyl-5-cis,13-trans-18,19,20-trinorprostadienové kyseliny (isomer B).

IC spektrum (film):

v OH 3 700 — 0 500, v COOH 1 700, v COO

1570, y CH = CH (trans) 970 cm1.

NMR spektrum (DMSO -d6):

y 0,9 (H-16, m, 1H), 3,5 — 4,0 (H-9,11,15, m, 3H), 5,4 (H-5,6, m, 0H), 5,5 — 5,6 (H-13,14, m, 0H), 7,3 (Η-Ar, -s, 5H) ppm.

Příklad 5

Methylester 9a, 11a, 15 (£) -trihydroxy-16 (S) -amino-17-p-hydroxyfeiiyl-5-cis,13-trans-18,19,00-trinor-prιostadle.nové- kyseliny (sloučenina obecného vzorce I, kde Y = CH3, W = = OH, isomer A)

V 9 -ml kyseliny -octové se rozpustí 610 mg (0,001 mol) -methylesteru 9a,lla,15(£)-trihydroxy-16 (S) -p-nitrobenzyloxykarbonylamido-17-p-hyidroxyfenyl-5-cis,13-trains-18,19.00-rri:nor-prosrad'lenové kyseliny (Isomer A) a do roztoku se za míchání a při 0 °C přidají 3 ml vody a 305 -mg -zinkového -prachu. Reakční směs se míchá v atmosféře dusíku -při 0 °C po dobu 1 hodiny, pH roztoku -se za chlazení upraví pomocí 0 N roztoku hydroxidu sodného na hodnotu 6 a potom se roztok podrobí lyofylizaci. Pevný zbytek se -chromatografuje na sloupci 10 g -sillkagelu -s použitím směsi chloroformu - a methanolu, -obsahující postupně se zvyšující množství methanolu. Produkt se eluuje ze sloupce chloroformem obsahujícím 10 % methanolu.

Výtěžek: 340 mg (78 °/o) methylesteru 9a,ll,ai,15 (ξ) -trihydrox y-16 (S )-amlno-17-pthydroxyfenyl-5-ciS,13-rran'S-18,19,00-trinorprostadienové kyseliny (isomer A), homogenní -podle chromatografie na tenké vrstvě.

IČ spektrum (film):

vOH 3 600 — 3 100, vC == O 1 705 ст!

NMR spektrum (CD3OD):

ó 0,7 (H-16, m, 1H), 3,6 (OCHl, s, 3H), 3,9 — - 4,3 (H-9,11,15, m, 3H), 5,4 (H-5,6 m, 0H), 5,6 (H-13,14, m, 0H), 6,7 (Η-Ar, d, 0H) 7,1 (Η-Ar, d, 0H) ppm.

Hmotové spektrum:

mol. hmotnost (m/z): 433

Hmotové číslo -charakteristických iontů (m/z): 433, 306, 310, 164, 150, 136.

Příklad 6

Methylester 9a, 11a, 15 (ξ)-trihydroxy-16 (S )-amino-17-p-chlorfenyl-5-cis,13-trans-18,19,0O-tr,inor-prostadienové kyseliny sloučenina obecného -vzorce I, kde Y = C-H3 W = Cl, isomer A)

V 9 ml kyseliny octové se rozpustí 630 mg (Q,0-⁰¹ -mol) methylesteru 9a,ll#,15(f hydroxy-H (S) -p-niti^obenzy^lOxykarbonylamido-17-p-chl^o3fe^ii^l^]^-5c(^.S>,13-t^i^<^T^^--lfi^,19,20-trinor-prostadieinové kyseliny (isomer A) a potom -se do roztoku za stálého míchání a při 0 °C přidají 3 ml vody a 325 mg zinkového prachu. Reakční směs se míchá v atmosféře dusíku při 0 °C po dobu 1 hodiny, pH roztoku se upraví pomocí 2 N roztoku hydroxidu -sodného na hodnotu 6 a potom se provádí lyofylizace. Pevný zbytek se chromatografuje na -sloupci 10 g sdik^agelu v rozpouštědlovém systému, tvořeném chloroformem a methanolem s -obsahem zvyšujících se -množství methanolu. Produkt se eluiuje ze sloupce -chloroformem obsahu jícím ¹⁰ % -methanolu.

Vý^těže^k: ³⁴⁰ mg (⁷² °/o) meth^ylesteru 9a,11a,15 ( ξ ) -trihydrox^y-16 ( S j-amino-17-p-chlorfenyi-5-cis13-trans-18,19,20-triinor-prostadienové kyseliny (isomer - A) homogenní -podle chromatografie na tenké vrstvě.

IC spektrum (film):

v OH 3 600 — 3 100, v C — O 1 730 cm~1

NMR spektrum (CD3OD):

δ 2,8 (H-16, m, 2H), 3,1 (CHž-Ar, m, 2H), 3,6 (OCH3, -s, 3H), 38 — 4,2 (Ή-9,11,15, _m, 3H), 5,4 (H-5,6, m, 2H), 5,6 (H-13,14, m, 2H), 7,2 (Η-Ar, s, 4H) ppm.

Příklad 7 ^ll^^f-ttrihRox^lOf Братто-¹⁷-fen^yl-5-cis,1³-taanSt18,1920-trino!rtp!rostadienová kyselina (sloučenina obecného· -vzorce I, kde Y — H, isomer A)

Do 20 ml 0,1 M fosfátového tlumivého roztoku (^pH ⁸) se ^prid^{á 300} m^g meth^yIesteru 9«, 11a, 15 ( ξ) -^П^гоху-И (S j-p-nitrobenzyl·oxykarboιnylamidO-l⁷-tenyl-5-cis,13-tгanst -18,1922-trinor-prostadienové kyseliny (dsomer A), 60 mg enzymu tvořeného lipázou ^Rhizo^pus o>i’^χzae^{, 350} m^g a=rabsk^{é g}um^y a ¹⁵miligramů taurocholátu sodného. Suspenze se třepe na rotační třepačce -při 28 °C po dobu 4 dnů, potom se zředí 100 ml vody, -okyselí kyselinou citrónovou na pH 3 a extrahuje -se 3 X 20 ml -ethylacetátu.

Spojené ethylacetátové extrakty -se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek obsahující 9a, 11a, 15 (ξ) -^^0^0^-16 (S) z^o^arbonylmtáo-l^fen^-^cisj^trans-18,1922-trinor-prostadienovou kyselinu (isomer A) se rozpusti v ⁵ ml ⁷⁰% vodné ^kyseliiny octové, ochladí -se na 0 °C a míchá se při této teplotě v atmosféře dusíku po dobu 1 hodiny -s 290 mg -zinkového- prachu. Potom se reakční směs zředí 20 ml -άΐοΜΌ^ methanu, zinkový _prach -se -odfiltruje -a filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na sloupci připraveném z 5 -g -silikagelu - v -systému tvořeném chloroformem -a methanolem, obsahujícím -postupně se zvyšující -množství methanolu. Samotný produkt -se -eluuje ze sloupce směsí obsahuprn 20 % methanolu.

^Výt^ěžek: ¹⁰¹ m^g (⁵0 %) θα,ΙΙα,^ΗΗπhydroxy-H (S )tamino-17-fenχ^n-'Cié,13t -trans-WJ^O-trinor-prostadienové ^kyseliin^y(isomer A).

Příklad 8

Příprava farmaceutického přípravku

Pro veterinární účely se připravují 5 ml injekce s obsahem 2 mg aktivní substance takto:

Methylester 9a,11a,15 (ξ )-^^4^07-16 (S) -aminOt17-fenχl-5-cis,13-tranSt t1^,l^^,8^(^-tJiinюii]^]iostadienové kyseliny (isomer A) 2 mg benzylalkohol 40 mg propylenglykol 100 mg destilovaná voda do 5 ml

Claims

PřEDMĚT VYNALEZU

1. Způsob výroby derivátů 16-ami^nc^-18,19,20-trшor-prO'Staglandinu s popřípadě substituovanou fenylovou skupinou na atomu C17 -obecného vzorce I

OH přičemž na atomech C15 až Ci6 může být buď S, nebo R konfigurace,

Y znamená vodíkový atom nebo Ci_.3 alkylovou skupinu,

W znamená vodíkový -atom, atom halogenu nebo J^^^d^oxy^ik-upinu, a jejich adičních solí -s kyselinami, vyznačující -se tím, že se z deriv^u ⁹a,;^ll^б8l^⁵-1^I^,iⁱ^^χ^^d^^^(^^¢^χ^-^^ll-^ptnitio^bennyloxykarbonylamidot17tfenχlt5tcis,13ttranst18,1920-trinor-prostίadienové kyseliny obecného vzorce XII v němž na atomech Cis a Ci6 může být buď S, nebo R konfigurace,

W má výše uvedený význam a Y značí Ci_3 alkylovou skupinu, v libovolném pořadí odstraní esterová skupina a chránící p-nitrobenzyloxykarbonylová skupina, s tím omezením, že v těch sloučeninách obecného vzorce I, kde W má výše uvedený význam a Y značí Ci_3 alkylovou skupinu, se odstraní pouze p-nítrobenzyloxykarbonylová chrániči skupina, a vzniklý produkt obecného vzorce I se popřípadě převede organickou nebo anorganickou kyselinou na svou sůl.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se (xii) tím, že se p-mtrobenzyloxykarbonylová chránící skupina odstraňuje redukcí . zinkovým prachem v prostředí kyseliny octové.
3. Způsob podle .bodu 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se esterová skupina hydrolyzuje v prostředí Ci_4 alkanolu, s výhodou methanolu, ia vody hydroxidem alkalického kovu, s výhodou hydroxidem lithným, načež se na vzniklou sloučeninu působí kyselinou.
4. Způsob podle bodu 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se esterová skupina odstraňuje působením enzymu typu esterázy, s výhodou lipázy Rhizopus oryzae.