CN1701808A - 丹参注射用乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种丹参注射用乳剂，该注射用乳剂是指纳米微乳剂型或亚纳米乳剂。与传统的丹参注射剂相比，具有功效成分明确、用量小、疗效高以及副作用小等特点。

Description

丹参注射用乳剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种丹参注射剂，它含有丹参提取物、表面活性剂和含水介质，更具体地说涉及这些制剂的纳米微乳剂型和亚纳米乳剂型。

与市售的丹参注射剂相比，这两种新剂型都具有功效成分明确、用量小、药效显著以及副作用小等特点。

背景技术

一味丹参散，功同四物汤。丹参作为口服制剂其治疗心血管疾病的疗效已经得到了肯定。是活血化淤药物研究中成绩之佼佼者。研究发现，丹参具有良好的抗冠心病作用。其有效成分主要是丹参素(p-3，4二羟基苯基乳酸)及丹参酮。

其水溶性提取物丹参注射液已广泛应用于临床治疗心脑血管疾病达20余年。

从丹参水溶性部位分离到的有效成分——丹参素(danshensu)，即D(+)β-(3，4-二羟基苯基)乳酸，我国学者已进行了许多药理研究，证明其有多种药理活性。比如：具有缩小心肌梗塞范围和减轻病程的作用，具有对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用，具有改善微循环障碍及降低血浆乳酸含量的作用，具有改善微循环障碍作用，从而改善细胞缺血缺氧所致的代谢障碍。临床应用发现丹参素会增加微血管脆性，长期输液会造成内皮细胞脱落。

从丹参中提取总丹参酮，具有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量；减慢心率，增加心肌收缩力，改善缺氧后引起的心肌代谢紊乱及心功能；抑制凝血；促进组织修复以及抗菌、抑菌等作用。可用作冠心病心绞痛和心肌梗塞、脑动脉和视网膜动脉及外周静脉血栓形成、白塞氏综合征、结节性红斑的治疗。

为充分发挥丹参这味药材的功效，真正使其达到增效减毒的效果，特发明了丹参有效部位丹参酮和丹参素制成纳米微乳剂型和亚纳米乳新剂型，具有用量小，疗效高，副作用少等特点。

发明内容

随着中药有效成分研究的深入，发现丹参注射液采用的工艺只提取了一种有效部位丹参素，本发明经过工艺优选，选用了最佳的提取方法，将有效成分尽可能提取完全。本发明还采用了纳米微乳剂型或亚纳米乳新剂型，与传统的丹参注射液相比，具有功效成分明确、用量小、疗效高以及副作用小等特点。

本发明的丹参注射剂新剂型，它含有丹参提取物、表面活性剂和含水介质。该注射剂是一种水性分散体，分散相的平均粒径≤0.5微米，注射剂中提取物的浓度为0.01％～5％。其中丹参提取物中含有丹参酮酮类物质和丹参酚酸类物质。丹参酮类物质的含量在脂溶性提取物中的含量为50-99.99％，丹酚酸类物质在水溶性提取物中含量为50-99.99％。

丹参的脂溶性成分大多为共轭醌、酮类化合物，具有特征的橙黄色和橙红色。主要有：丹参酮I、丹参酮IIA、丹参酮、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参酸甲酯、次甲基丹参醌、紫丹参甲素、紫丹参乙素、戊素、丹参新酮、二氢丹参醌、丹参醇、羟基丹参酮、降丹参酮、四氢丹参醌、异丹参酮、异隐丹参酮、丹参醌、二氢次丹参醌、二萜萘嵌苯酮、丹参螺旋缩酮内酯、丹参酚、丹参醛等。

丹参的水溶性成分主要为丹参酚酸类物质，主要有丹参酸甲也称丹参素：二羟基苯乳酸、丹参酸乙、丹参酸丙、琥泊酸、丹参酚酸、丹酚酸B、丹酚酸F、谷甾醇、熊果酸原儿茶醛、叻啡酸、异阿魏酸、迷迭香酸、迷迭香酸甲酯、铁锈醇、替告吉宁、鼠尾草酚等。

表面活性剂选自磷脂(植物磷脂、动物磷脂、合成磷脂)、丙二醇、脂肪酸甘油酯、solutolHS15、labrosol、吐温类、泊洛沙姆系列、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚乙二醇及其衍生物系列、羟丙基β-环糊精、羟丙基T-环糊精中的一种或几种；

表面活性剂中还可以添加甘油三酯或作为等渗剂的甘油，其中甘油三酯包括植物油或中链甘油三酯，还可以添加作为助乳化剂的脂肪酸或脂肪醇或其钠盐，胆酸或脱氧胆酸及其钠盐，其中脂肪酸或脂肪醇包含的碳原子数可以从6-24，还可以添加抗氧化剂如生育酚(维生素E)或L-抗坏血酸棕榈酸酯，还可以添加助溶剂乙醇。

本发明的丹参注射用乳剂，可以将丹参酮类物质单独制成纳米乳制剂或亚纳米乳制剂，丹参酚酸类物质制成水针，给药时将丹参酮乳剂用丹参素水针稀释后静脉点滴或推注；也可以将丹参酮类物质制成乳剂的分散相，丹参酚酸类物质溶于水相中，给药时用适量0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖稀释后静脉点滴或推注。其制备方法如下：

a)丹参酮类物质溶于甘油三酯或油酸乙酯中，于50-90℃高速搅拌制成油相，其余组分溶于适量水中，于50-90℃高速搅拌制成水相，油水两相混合于50-90℃高速搅拌制成初乳剂，调节PH值5.0-7.0。

b)取上述(a)中初乳剂，注射用水添至处方量，转移至高压乳匀机中，反复乳化。至乳滴平均粒径≤0.5微米。

C)取上述(b)的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

丹参的提取工艺步骤：

取丹参1500g，加8倍量50-80％乙醇回流提取三次，第一次1.5h，第二、三次1.0h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，冷藏24-48h，上清液上改性聚酰胺树脂柱或聚酰胺树脂柱，先用水洗，再用20-70％乙醇洗脱，乙醇洗脱液收干即得总丹参酚酸类物质。沉淀用95％乙醇充分溶解，冷藏过滤，滤液回收至乙醇含量5％-20％左右，通过聚酰胺树脂柱净化，回收乙醇至小体积，静置析晶，80℃以下干燥即得总丹参酮粉末。

具体实施例

实施例1(亚纳米乳剂型)

处方一：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入精制大豆油或中链油10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂2.0g、甘油3g、生育酚50mg，于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃-80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

处方二：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、聚乙二醇400/6000.5％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入精制大豆油或中链油10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂2.0g、甘油3g、育酚50mg、乙二醇400/600 1.0g于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方三：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.5％-4.0％、solutolHS15 0.5％-3.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入精制大豆油或中链油10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂1.5g、solutolHS15 1.0g、甘油3g、生育酚50mg于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方四：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.5％-4.0％、solutolHS15 0.5％-3.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入精制大豆油或中链油10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂1.3g、solutolHS15 1.0g、甘油3g、生育酚50mg、聚乙二醇400 0.5g于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方五：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.5％-4.0％、solutolHS15 0.5％-3.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入精制大豆油或中链油10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂1.3g、solutolHS15 1.0g、甘油3g、生育酚50mg、聚乙二醇400/600 0.4g于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方六：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、含磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、油酸乙酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入油酸乙酯10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相：称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂2.0g、甘油3g、生育酚50mg于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方七：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、含磷脂0.5％-4.0％、solutolHS15 0.5％-3.0％、甘油1.0％-6.0％、油酸乙酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％、生育酚0.01％-1.0％、聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于适量有机溶剂中，加入油酸乙酯10g、油酸3g，高速搅拌使混合均匀，于60℃减压蒸馏除去有机溶剂，制成油相；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、大豆磷脂1.3g、solutolHS15 1.0g、甘油3g、生育酚50mg、聚乙二醇400/600 500mg于60℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于60℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水添至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

实施例2(纳米微乳剂型)

处方一：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、solutolHS15 0.2％-10.0％、无水乙醇0.01％-8％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于1g乙醇中，加入solutolHS15 1.5g及适量水于40℃搅拌使混合均匀；称取丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg溶于适量水中，两者混合定容至100ml，于40℃高速搅拌制成微乳。调节PH值为5.0～7.0，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方二：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、solutolHS15 0.2％-10.0％、无水乙醇0.01％-8％、油酸乙酯0.01％-8％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于1g乙醇中，加入油酸乙酯0.5mg、solutolHS15 1.5g及适量水中，于40℃搅拌使混合均匀；丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg溶于适量水中，两者混合定容至100ml，调节PH值为5.0～7.0，于40℃高速搅拌制成微乳。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方三：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、solutolHS15 0.2％-10.0％、中链甘油三酯0.01％-5％、无水乙醇0.01％-8％、聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于1g乙醇中，加入solutolHS15 1.0g、中链甘油三酯0.3g及适量水中，于40℃搅拌使混合均匀；丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、聚乙二醇400/600 300mg溶于适量水中，两者混合定容至100ml，调节PH值为5.0～7.0，于40℃高速搅拌制成微乳。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方四：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、磷脂0.2％-10.0％、无水乙醇0.01％-10％，羟丙基β-环糊精0.1％-5.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于1g乙醇中，加入磷脂1.2g及适量水中，于40℃搅拌使混合均匀；丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg、羟丙基β-环糊精300mg溶于适量水中，两者混合定容至100ml，调节PH值为5.0～7.0，于40℃高速搅拌制成微乳。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

处方五：丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、吐温-80 0.01％-2.0％、无水乙醇0.01％-8％、甘油0.01％-3.0％、注射用水添至100％。

称取丹参酮(总丹参酮含量93％)100mg溶于1g乙醇中，加入吐温-80 1g、甘油0.5g及适量水中，于40℃搅拌使混合均匀；丹参酚酸类物质(总丹参酮含量80％)120mg溶于适量注射用水中，两者混合定容至100ml，调节PH值为5.0～7.0，于40℃高速搅拌制成微乳。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

实施例3(药效学研究资料)

以结扎冠脉造成犬急性实验性心肌缺血模型，采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗塞范围。观察本发明注射剂与市售丹参注射剂对实验性犬心肌缺血及心肌梗塞的影响，结果见附图。结果表明，本发明实施例2：5mg/kg，本发明实施例6：2.5mg/kg和5mg/kg对实验性急性犬心肌缺血有明显的改善作用，可显著减轻心肌缺血范围(N-ST)，其作用优于丹参注射液0.5g/kg。

注：1：生理盐水组

2：丹参注射液0.5g/kg组

3：实施例2(处方一)：2.5mg/kg

4：实施例1(处方一)：5mg/kg

5：实施例1(处方五)：5mg/kg

Claims (10)

1、一种丹参注射用乳剂，它含有丹参提取物、表面活性剂和含水介质，其特征在于：该注射剂是一种水性分散体，分散相的平均粒径≤0.5微米，注射剂中提取物的浓度为0.01％～5.0％，在药剂学上称为微乳制剂或亚纳米乳制剂。

2、根据权利要求1中丹参注射液新剂型：

(1)丹参提取物，其特征在于含有丹参酮类物质和丹参酚酸类物质，其中丹参酮类物质在脂溶性提取物中的含量为50-99.99％，丹参酚酸类物质在水溶性提取物中含量为50-99.99％。

(2)表面活性剂，其特征在于选自：磷脂(植物磷脂、动物磷脂、合成磷脂)、丙二醇、脂肪酸甘油酯、solutolHS15、labrosol、吐温类、泊洛沙姆系列、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚乙二醇及其衍生物系列、羟丙基β-环糊精、羟丙基γ-环糊精中的一种或几种；表面活性剂中还可以添加甘油三酯或作为等渗剂的甘油，其中甘油三酯包括植物油或中链甘油三酯，还可以添加作为助乳化剂的脂肪酸或脂肪醇或其钠盐，胆酸或脱氧胆酸及其钠盐，其中脂肪酸或脂肪醇包含的碳原子数可以从6-24，还可以添加抗氧化剂如生育酚(维生素E)或L-抗坏血酸棕榈酸酯，还可以添加助溶剂乙醇。

3、根据权利要求1-2中丹参注射用乳剂，其特征在于按重量计，含丹参酮类物质0.01％-2.0％、丹参酚酸类物质0.01％-3.0％、表面活性剂1.0％-30.0％、注射用水添至100％。

4、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％；还可以含生育酚0.01％-1.0％；还可以含羟丙基β-环糊精0.5％-5.0％或聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％。

5、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、甘油三酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％；还可以含solutolHS15 0.5％-3.0％，生育酚0.01％-1.0％；还可以含羟丙基β-环糊精0.5％-5.0％或聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％。

6、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含磷脂0.5％-4.0％、甘油1.0％-6.0％、油酸乙酯5％-20％、油酸1.0％-6.0％；还可以含solutolHS15 0.5％-3.0％，生育酚0.01％-1.0％；还可以含聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％。

7、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含solutolHS15 0.2％-10.0％、无水乙醇0.01％-8％，中链甘油三酯0.01％-5％、还可以含聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％或羟丙基β-环糊精0.1％-5.0％。

8、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含磷脂0.2％-10.0％、无水乙醇0.01％-10％，还可以含聚乙二醇400/600 0.1％-5.0％或羟丙基β-环糊精0.1％-5.0％。

9、根据权利要求3中的表面活性剂，其特征在于按重量计，含吐温-80 0.01％-2.0％、无水乙醇0.01％-8％，还可以含甘油或甘油三酯0.01％-3.0％。

10、根据权利要求1中丹参注射用乳剂，其特征在于根据权利要求1中注射剂，可以将丹参酮类物质单独制成纳米乳制剂或亚纳米乳制剂，丹参酚酸类物质制成水针，给药时将丹参酮乳剂用丹参素水针稀释后静脉点滴或推注；也可以将丹参酮类物质制成乳剂的分散相，丹参酚酸类物质溶于水相中，给药时用适量0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖稀释后静脉点滴或推注。其制备方法如下：

a)丹参酮类物质溶于甘油三酯或油酸乙酯中，于50-90℃高速搅拌制成油相，其余组分溶于适量水中，于50-90℃高速搅拌制成水相，油水两相混合于50-90℃高速搅拌制成初乳剂，调节PH值为5.0-7.0。

b)取上述(a)中初乳剂，注射用水添至处方量，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米。

c)取上述(b)的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

其中纳米微乳制剂只需要高速搅拌即可形成，不需要高压乳匀机乳化。

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