CN1297261C - 脂肪酰乙醛输液剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种脂肪酰乙醛输液，包括具有生物活性的脂肪酰乙醛和针用药用辅料，其特征在于每瓶输液含有脂肪酰乙醛8～100mg，其中脂肪酰乙醛R-COCH₂CHO中的R为C8～14的烃类化合物或者直链烃类化合物。该产品具有清热解毒，消痈排脓，利尿通淋的作用，且稳定可靠，无刺激性，无毒副作用，疗效好，具有一定缓释作用，保持较好的血药浓度，能满足大剂量冲击疗法的要求，同时又能最大限度地消灭细菌，方便医护人员操作，尤其对泌尿系统的趋向性更好，准确性更高，疗效更加显著。

Description

脂肪酰乙醛输液剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种既能抗菌消炎、提高免疫功能又能提供能量的生物活性脂肪酰乙醛输液剂及其制备方法。

背景技术

中国传统医药中，有一种药食两用并被称为神奇的植物抗生素的植物——鱼腥草。它为三白科植物蕺菜[Houttuynia cordata Thunb.]的干燥地上部分。具有清热解毒，消痈排脓，利尿通淋的作用。现代药理研究证实鱼腥草具有抗病原微生物、抗炎、抗过敏平喘等作用，能提高免疫功能、利尿等等。临床常用于治疗呼吸系统、消化系统、泌尿系统以及耳鼻喉科、眼科、外科感染等疾病。经研究发现其中的主要活性成份为鱼腥草素(Decanoylacetaldehyde或Houttuynin)，化学名称为癸酰乙醛(dodecanecarboaldehyde，3-oxo)。鱼腥草素为黄色油状液体，6～8℃可固化，其亚硫酸加成物熔点164～167℃(分解)。溶于氢氧化钠水溶液，易聚合生成不溶性的无定型固体。具有抗病原微生物、抗炎、提高免疫功能等药理作用。药代动力学结果提示合成鱼腥草素自肠胃道吸收比较慢，静注后药物大多分布于肺部，有利于呼吸系统疾病的治疗。临床常用于治疗呼吸道感染、慢性宫颈炎等症。合成鱼腥草素现有片剂和水针剂两种，属于清热解毒药。目前片剂的规格为30mg，口服用量：一次120mg～150mg，一日360～450mg。而注射剂为2ml∶4mg，肌内注射，一次8mg(2支)，一日16～24mg(4～6支)。在构效关系研究及归经理论(或称靶向性)研究的指导下，国内科研工作者又研究出新鱼腥草素，新鱼腥草素(C₁₄)是在鱼腥草素(C₁₂)的烷基(碳链)上再增加2个碳，该品对泌尿系统的趋向性更好些。鱼腥草素和新鱼腥草素已被国家或地方相关部门批准为药品上市。但是，现有的鱼腥草注射液(有效成份亦为鱼腥草素)、鱼腥草素钠(1995年版中国药典)注射液、新鱼腥草素注射液尚存在许多问题，如不能很好地解决活性成分脂肪酰乙醛的溶解性问题、稳定性问题、注射时的疼痛性问题、大剂量问题等，致使本系列产品的生产、销售和使用都不能满足市场需要。加之目前的患者普遍存在耐药性的问题，使用时不得不提高一次用药量，即增加小剂量注射液的支数，以达到大剂量冲击治疗的作用，这无疑将加大医护人员的工作量，给抢救危急重症病人带来诸多不利。

发明内容

本发明的任务在于提供一种质量稳定、安全性高、疗效好、剂量大、便于操作的脂肪酰乙醛输液剂及其制备方法。

本发明通过运用能增加长链烷基化合物水溶性的药用辅料，以及发明者研究出的高鱼腥草素(C₁₆)，即在新鱼腥草素的基础上在烷基(碳链)上再增加2个碳等一系列创造性的工作，解决脂肪酰乙醛所存在的生物药剂学缺陷，制备出准确性更高，疗效更加显著，毒副作用更低的现有技术所不及的脂肪酰乙醛输液剂。

为解决上述任务，本发明的技术方案是：一种脂肪酰乙醛输液剂，包括具有生物活性的脂肪酰乙醛和针用药用辅料，其特征在于每瓶输液含有脂肪酰乙醛8～100mg，其中脂肪酰乙醛R-COCH₂CHO中的R为C8～14的烃类化合物或者直链烃类化合物。

所述脂肪酰乙醛R-COCH₂CHO中的醛基为与亚硫酸氢钠形成的加成物R-COCH₂CHOHSO₃Na，以便改善脂肪酰乙醛的水溶性和稳定性。

所述针用药用辅料为制备成氨基酸输液的必需氨基酸L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸醋酸盐、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸中的一种或几种，或者为半必需氨基酸L-精氨酸、L-酪氨酸、L-组氨酸中的一种或几种，或者为非必需氨基酸L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酸、L-天门冬氨酸中的一种或几种，或者为其他氨基酸如牛磺酸中的一种或几种。

所述针用药用辅料为制备成氨基酸输液所需的山梨醇、L-苹果酸、丁二酸、马来酸、延胡素酸、葡萄糖、卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂等中的一种或几种能量供应物质，用于提供部分热量，防止氨基酸作为能源消耗，同时有利于提高氨基酸的利用率。

所述针用药用辅料为制备成脂肪乳输液剂所使用的脂肪酸或其衍生物为饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和必需脂肪酸，即大豆油、花生油、精炼米糠油、小麦胚芽油、芝麻油、棉籽油、月见草油、紫苏油、沙棘油、红花油、亚麻籽油、玉米油、葡萄籽油、沙蒿籽油、青刺果油、深海鱼油、油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、多不饱和脂肪酸、二十碳五烯酸及其酯、二十二碳六烯酸、酯或甘油中的一种或几种。

所述针用药用辅料为制备成脂肪乳输液剂所使用的卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂中的一种或几种表面活性剂。

所述脂肪酰乙醛氨基酸输液通过下列工艺制得。注意事项：

1、先将微量的氨基酸溶于注射用水，并注意使其完全溶解；

2、在整个过程中注意通氮或在氮气保护下操作，以防氨基酸氧化；

3、抗氧剂尽量在后期加入；

4、灭菌时温度要保持均匀。

具体操作是：在1万级和氮气保护的条件下，先将微量的氨基酸溶于注射用水(60～80℃)，并注意使其完全溶解，将脂肪酰乙醛加入适量注射用水，加入注射用水稀释至所需体积，再加入注射用氨基酸及其他辅料，并注意使其完全溶解，加入抗氧剂，调节等渗，补加注射用水至最终所需体积。过滤，滤液经过滤纸及0.4μm的滤膜粗滤等处理后，在100级的条件下，用0.2μm以下的滤膜过滤。精滤液送入分装机，按每瓶所需ml分装，盖上丁基橡胶盖子，制剂预热，在于121℃灭菌(15分钟)。或用旋转灭菌器灭菌，冲热水逐渐冷却。阴凉处保存。

所述脂肪酰乙醛脂肪乳输液通过下列方法制得。操作要点为：

1、将药物先溶于制备所用的的油脂中，并注意使其完全溶解；

2、乳化剂溶于水相或油相；

3、将油相及水相于50～80℃用组织打碎机制得粗乳；

4、将粗乳迅速冷却至20℃以下，再用两步高压乳匀机乳化，即得细分散的亚微乳；

5、调节pH，过滤除粗乳滴与碎片，滤液分装，扎盖。

以上所有操作均在氮气保护下进行，配液过程在100级的条件下。先将制剂预热，在于121℃灭菌(15分钟)。或用旋转灭菌器灭菌，冲热水逐渐冷却。阴凉处保存。

所述脂肪酰乙醛输液剂中的关键中间体——脂肪烃甲酮的制备工艺为：使用乙酰丙酸和相应的脂肪酸用库泊(Kob.R)电解反应制备，控制工艺条件参数为：电流3～30A、电压60～90V、时间56～126小时。

脂肪酰乙醛的化学结构通式为：R-COCH₂CHO；脂肪酰乙醛亚硫酸氢钠加成物的化学结构通式为：R-COCH₂CHOHSO₃Na；鱼腥草素(在上述结构通式中R为C9)，《中国药典》1995版称为鱼腥草素钠；新鱼腥草素(在上述结构通式中R为C11)(广东省粤Q/WS-1125-82；高鱼腥草素(在上述结构通式中R为C13)是发明者发明的化合物。

所述高鱼腥草素的合成工艺为，工艺原理：

原料：乙酰丙酸                Xmol

月桂酸(十二碳酸)              Xmol

氢氧化钾                      1-2Xmol

甲醇                          乙酰丙酸与月桂酸重量之和的2-5倍

工艺过程：

a、先将氢氧化钾溶于甲醇中，溶解后，加入乙酰丙酸和月桂酸，溶解；

b、将所得的溶液加入电解槽内，通电进行电解，控制条件参数为：电流3～30A、电压60～90V、时间56～126小时；

c、反应完后，取出反应液，浓缩，回收甲醇，出现黄色油状物时，倒出，酸化，水洗、分离油物、减压蒸馏一次、精馏一次，收集十五酮-2；

d、将十五酮-2、甲酸乙酯、无水苯装入回流反应器中，再将金属钠分次加入反应器中，控制反应温度21～35℃，反应时间20-200小时，得反应液；

e、将上述反应液用水提取2-4次，合并提取液；

f、将NaHSO₃、水及冰醋酸配成混合溶液，搅拌下分次加入到5过程的水提合并液中，有大量的白色沉淀，搅拌过夜，过滤，用乙醇洗涤，抽干、干燥，得高鱼腥草素；

g、十四酰乙醛：将e中合并提取液，用醋酸酸化，减压浓缩收水分等低沸物质，真空蒸馏，得十四酰乙醛。

该工艺可用于鱼腥草素、新鱼腥草素等的合成。鱼腥草素用辛酸(C8)、新鱼腥草素用癸酸(C10)替代上述工艺中的月桂酸(C12)，并将投料量按摩尔比调整即可。

本发明提供的脂肪酰乙醛输液经实验表明：

一、稳定性：在常温下脂肪酰乙醛输液放置1年，产品稳定可靠，各项指标均合格，完全符合注射用的要求；

二、刺激性：用大白兔做刺激性实验，脂肪酰乙醛输液的刺激性为0级，即无明显变化或轻度充血；

三、抗菌消炎：脂肪酰乙醛输液剂和鱼腥草素等注射液在抗菌消炎方面的作用基本一致。

实施例1

高鱼腥草素的合成工艺为，工艺原理：

原料：乙酰丙酸        366g

月桂酸(十二碳酸)      631g

甲醇                  2500ml

氢氧化钾              27g

工艺过程：

1、先将氢氧化钾溶于甲醇中，溶解后，加入乙酰丙酸和月桂酸，溶解；

2、将所得的溶液加入电解槽内，通电进行电解，控制条件参数为：电流3～30A、电压60～90V、时间56～126小时；

3、反应完后，取出反应液，浓缩，回收甲醇，出现黄色油状物时，倒出，酸化，水洗、分离油物、减压蒸馏一次、精馏一次，收集十五酮-2；

4、取100g十五酮-2、55g甲酸乙酯、无水苯600ml，装入回流反应器中，将15g金属钠分次加入反应瓶中，控制反应温度21～35℃，时间25小时，得反应液；

5、将上述反应液用水210ml提取2次，80ml提取2次，合并提取液；

6、将132g NaHSO₃、260ml水及36ml冰醋酸配成混合溶液，搅拌下分次加入到5过程的水提合并液中，有大量的白色沉淀，搅拌过夜，过滤，用乙醇洗涤，抽干、干燥，得高鱼腥草素；

7、十四酰乙醛：将5中合并提取液，用醋酸酸化，减压浓缩收水分等低沸物质，真空蒸馏，得十四酰乙醛。

实施例2

鱼腥草素普通输液剂，配方：

鱼腥草素                      8g

甘露醇                        3000g

氯化钠                        100g

制备工艺：在1万级的条件下，将甘露醇3000g、氯化钠100g溶于～30000ml的注射用水，并注意使其完全溶解。搅拌下加入鱼腥草素，搅拌至鱼腥草素完全溶解，加入注射用水稀释至48000ml，调节酸度、等渗，补加注射用水至50000ml。过滤，滤液经过滤纸及0.4μm的滤膜粗滤等处理后，在100级的条件下，用0.2μm以下的滤膜过滤。精滤液送入分装机，按每瓶50ml分装，盖上盖子，扎盖、送入蒸汽灭菌器灭菌、取出制品、包装、检验、合格、的成品。可制得1000瓶8mg之规格的鱼腥草素普通输液成品。同样可以得到新鱼腥草素、高鱼腥草素普通输液成品。

实施例3

新鱼腥草素八种氨基酸输液，配方(1000ml)：

新鱼腥草素      32mg          L-异亮氨酸        3.82g

L-亮氨酸        5.03g         L-赖氨酸醋酸盐    4.52g

L-甲硫氨酸      2.34g         L-苯丙氨酸        5.65g

L-苏氨酸        2.78g         L-色氨酸          1.0g

L-缬氨酸        3.98g         甘露醇            70g

制备工艺：在1万级和氮气保护的条件下，先将微量的L-色氨酸溶于注射用水～20ml，并注意使其完全溶解，待用；将新鱼腥草素加入～100ml的注射用水，溶解，并注意使其完全溶解，过滤，待用；再将其他氨基酸溶于适量注射用水～500ml，加入上述溶好的色氨酸液和新鱼腥草素液，加入甘露醇并用注射用水稀释至所需体积～800ml，加入抗氧剂，调节等渗，补加注射用水至最终所需体积。过滤，滤液经过滤纸及0.4μm的滤膜粗滤等处理后，在100级的条件下，用0.2μm以下的滤膜过滤。精滤液送入分装机，按每瓶所需250ml分装，盖上丁基橡胶盖子，制剂预热，在于121℃灭菌(15分钟)。或用旋转灭菌器灭菌，冲热水逐渐冷却。阴凉处保存。包装、检验、合格得成品。可制得4瓶250ml∶8mg之规格的新鱼腥草素八种氨基酸输液成品。

同样可以得到鱼腥草素、高鱼腥草素八种氨基酸输液成品。

实施例4

高鱼腥草素十一种氨基酸输液，配方(1000ml)：

高鱼腥草素    0.2g         L-异亮氨酸    3.72g

L-亮氨酸      5.00g        L-赖氨酸醋酸盐    4.32g

L-甲硫氨酸    2.30g        L-苯丙氨酸        5.60g

L-苏氨酸      2.71g        L-色氨酸          0.90g

L-缬氨酸      3.98g        L-盐酸精氨酸      5.10g

L-酪氨酸      0.27g        L-组氨酸          2.10g

山梨醇        60g

制备工艺：同前(略)。可制得2瓶500ml∶100mg之规格的高鱼腥草素十一种氨基酸输液成品。同样可以得到鱼腥草素、新鱼腥草素十一种氨基酸输液成品。

实施例5

新鱼腥草素十八种氨基酸输液，配方(1000ml)：

新鱼腥草素      0.1g         L-异亮氨酸        3.52g

L-亮氨酸        4.80g        L-赖氨酸醋酸盐    4.12g

L-甲硫氨酸      2.10g        L-苯丙氨酸        5.22g

L-苏氨酸        2.40g        L-色氨酸          0.80g

L-缬氨酸        3.63g        L-盐酸精氨酸      4.90g

L-酪氨酸        0.24g        L-组氨酸          2.00g

L-丙氨酸        1.95g        L-脯氨酸          1.00g

L-丝氨酸        1.00g        甘氨酸            7.56g

L-胱氨酸        0.10g        L-谷氨酸          0.75g

L-天门冬氨酸    2.50g        山梨醇            50.00g

制备工艺：同前(略)。可制得2瓶500ml∶50mg之规格的新鱼腥草素十八种氨基酸输液成品。同样可以得到鱼腥草素、高鱼腥草素十八种氨基酸输液成品。

实施例6

鱼腥草素1种氨基酸维生素输液，配方(1000ml)：

鱼腥草素                        200mg

L-天门冬氨酸                        20g

甘露醇                              70g

制备工艺：同前(略)。可制得10瓶100ml∶20mg之规格的鱼腥草素一种氨基酸输液。同样可以得到新鱼腥草素、高鱼腥草素一种氨基酸输液成品。

实施例7

新鱼腥草素二种氨基酸输液，配方(1000ml)：

新鱼腥草素          0.20g      L-赖氨酸盐酸盐    4.32g

L-半胱氨酸盐酸盐    1.07g      卵磷脂            1.00g

山梨醇              66g

制备工艺：同前(略)。可制得10瓶100ml∶20mg之规格的新鱼腥草素二种氨基酸输液成品。同样可以得到鱼腥草素、高鱼腥草素二种氨基酸输液成品。

实施例8

十二酰乙醛脂肪乳输液，配方：

十二酰乙醛    18g        大豆油        7500g

甘油          1250g      大豆磷脂      750g

制备工艺：在100级的条件下，将十二酰乙醛先溶于适量的大豆油中，并注意使其完全溶解。在氮气保护下，将大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入十二酰乙醛大豆油液、大豆油、甘油，补加注射用水至50000ml。于70～80℃用组织打碎机制得粗乳。将粗乳迅速冷却至20℃以下，再用两步高压乳匀机乳化，即得细分散的亚微乳(脂肪乳)。用4号垂熔漏斗过滤，精滤液送入分装机，按每瓶50ml分装，扎盖、包装、检验、合格、的成品。可制得1000瓶50ml∶18mg之规格的十二酰乙醛脂肪乳输液成品。同样可以得到癸酰乙醛、十四酰乙醛脂肪乳成品。

实施例9

鱼腥草素脂肪乳输液，配方：

鱼腥草素    20g        红花油    6000g

甘油    1000g        大豆磷脂    700g

制备工艺：在100级的条件下，在氮气保护下，将大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入鱼腥草素并注意使其完全溶解，又加入红花油、甘油，补加注射用水至50000ml。于70～80℃用组织打碎机制得粗乳。将粗乳迅速冷却至20℃以下，再用两步高压乳匀机乳化，即得细分散的亚微乳(脂肪乳)。用4号垂熔漏斗过滤，精滤液送入分装机，按每瓶50ml分装，扎盖、包装、检验、合格、的成品。可制得1000瓶50ml∶20mg之规格的鱼腥草素脂肪乳输液成品。同样可以得到新鱼腥草素、高鱼腥草素脂肪乳成品。

本发明经药学研究及部分药理研究，其结果如下：

1、脂肪酰乙醛输液的稳定性

取实施例八个样品在室温下避光保管，放置1、2、3、6、12个月，按时检查，每瓶外观基本不变，有效成分经检验也未发生变化。因此，初步认为各脂肪酰乙醛输液各种处方制得的产品均可达到1年左右的保质期。质量标准中含量测定和鉴别等参照《中国药典1995年版、粤Q/WS-1126-82及相关输液质量要求等。结果如下：

样品	样品含量、鉴别
						1月	2月	3月	6月	12月
	例1例2例3例4例5例6例7例8	合格合格合格合格合格合格合格合格	合格合格合格合格合格合格合格合格	合格合格合格合格合格合格合格合格	合格合格合格合格合格合格合格合格						合格合格合格合格合格合格合格合格

上述结果表明该发明制备的样品，经过初步稳定性考察，产品质量基本稳定，可达一年以上。

2、脂肪酰乙醛输液的刺激性试验

取健康家兔4只，W：2.0～2.2kg，雌雄各半，分为两组，分别在其左右腿股四头肌上注射脂肪酰乙醛输液1ml，药后48h处死兔子，剖检股四头肌，纵向切开观察注射局部肌肉刺激反应，并按下表换算出相应的反应级。

局部肌肉刺激反应级表：

反应级	刺激反应
		012345	无明显变化轻度充血，其范围小于0.51.0cm中度充血，其范围小于0.51.0cm重度充血，伴有肌肉变性出现坏死，有褐色变性出现广泛性坏死

结果：脂肪酰乙醛输液的刺激性为0级；

3、脂肪酰乙醛输液的抗炎作用

用Whttle法，小鼠30只，随机分成3组，每组10只，注射给药后20min，小鼠尾静脉注射0.5％伊文思兰0.2ml/只后及时腹腔注射0.7％醋酸0.2ml/10g，15min后处死小鼠，腹腔注射生理盐水5ml轻揉后抽取腹腔液，离心，上清液于620nm处测定光密度值，计算并比较组间差异显著性，结果见下表：

组别	体重	剂量(mg/Kg)	光密度值	抑制率
					空白组阿司匹林输液组	20±1.120±1.120±1.0	等体积2004	0.28±0.050.11±0.020.19±0.04	62.5％47.4％

结果表明脂肪酰乙醛输液剂组在有效剂量为4mg/kg即有较好的抗炎作用。

4、脂肪酰乙醛输液剂的抗菌作用

用试管法测定结果(药物浓度细菌为60mg/ml真菌为3mg/ml)如下表：

样品	流感杆菌	肺炎球菌	金黄色球菌	白念菌	红色癣菌
						鱼腥草素输液新鱼腥草素输液高鱼腥草素输液鱼腥草素注射液	--------	--------	--------	--------	--------

实验结果表明，脂肪酰乙醛输液剂和鱼腥草素注射液一样具有较好的抗菌作用。

为清楚地说明本发明的可能组合，提供以上实施例，但绝不是为了限制本发明，而本发明的范围不受所举实施例的局限。

Claims (3)

1、一种脂肪酰乙醛输液，其特征在于每瓶输液含有具有生物活性的脂肪酰乙醛8～100mg，且脂肪酰乙醛是R-COCH₂CHO中R为C13的高鱼腥草素，和下列针用药用辅料：

制备成氨基酸输液的必需氨基酸L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸醋酸盐、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸中的一种或几种，或者为半必需氨基酸L-精氨酸、L-酪氨酸、L-组氨酸中的一种或几种，或者为非必需氨基酸L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酸、L-天门冬氨酸中的一种或几种，或者为牛磺酸，或者为山梨醇、L-苹果酸、丁二酸、马来酸、延胡素酸、葡萄糖、卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂中的一种或几种能量供应物质；或者

制备成脂肪乳输液剂所使用的大豆油、花生油、精炼米糠油、小麦胚芽油、芝麻油、棉籽油、月见草油、紫苏油、沙棘油、红花油、亚麻籽油、玉米油、葡萄籽油、沙蒿籽油、青刺果油、深海鱼油、油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、多不饱和脂肪酸、二十碳五烯酸及其酯、二十二碳六烯酸、酯或甘油中的一种或几种，或者卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂中的一种或几种表面活性剂。

2、根据权利要求1所述的脂肪酰乙醛输液，其特征在于所述脂肪酰乙醛氨基酸输液通过下列工艺制得：在1万级和氮气保护的条件下，先将微量的氨基酸溶于60～80℃的注射用水中并注意使其完全溶解，将脂肪酰乙醛加入适量注射用水，加入注射用水稀释至所需体积，再加入注射用氨基酸及其他辅料，并注意使其完全溶解，加入抗氧剂，调节等渗，补加注射用水至最终所需体积。过滤，滤液经过滤纸及0.4μm的滤膜粗滤等处理后，在100级的条件下，用0.2μm以下的滤膜过滤。精滤液送入分装机，按每瓶所需ml分装，盖上丁基橡胶盖子，制剂预热，在121℃灭菌15分钟，或用旋转灭菌器灭菌，冲热水逐渐冷却，阴凉处保存。

3、根据权利要求1所述的脂肪酰乙醛输液，其特征在于所述脂肪酰乙醛脂肪乳输液通过下列方法制得：

a、将药物先溶于制备所用的的油脂中，并注意使其完全溶解；

b、乳化剂溶于水相或油相；

c、将油相及水相于50～80℃用组织打碎机制得粗乳；

d、将粗乳迅速冷却至20℃以下，再用两步高压乳匀机乳化，即得细分散的亚微乳；

e、调节pH，过滤除粗乳滴与碎片，滤液分装，扎盖。