CN1268633C

CN1268633C - 吲哚并咔唑苷的制备和分离

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Publication number: CN1268633C
Application number: CNB028075455A
Authority: CN
Inventors: S·维斯曼; D·恰恩; T·伊达; M·卡瓦萨基; S·希拉加; A·卡马塔尼
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd; Merck and Co Inc
Current assignee: MSD KK; Merck and Co Inc
Priority date: 2001-03-29
Filing date: 2002-03-25
Publication date: 2006-08-09
Anticipated expiration: 2022-03-25
Also published as: JP2004519518A; US6559299B2; EA200301068A1; MXPA03008805A; IL157823A0; CN1578784A; NZ529168A; PL363865A1; AU2002306863B2; EP1390376A1; HRP20030777A2; HUP0303640A2; YU72603A; EA005126B1; CZ20032638A3; KR20040028732A; UA74249C2; JP3439470B1; TWI245045B; AR035449A1

Abstract

本发明涉及一种制备高纯度的吲哚并咔唑苷的新方法，吲哚并咔唑苷抑制肿瘤细胞的生长，因此被用于治疗哺乳动物的癌症，等等。

Description

吲哚并咔唑苷的制备和分离

发明背景

在癌症化学治疗领域，大量化合物作为抗肿瘤剂已经应用于实际中。然而，仍然需要不断开发更有效的化合物以对抗各种肿瘤(参见日本癌症协会第47届大会会刊，第12-15页(1988))。这种需要导致了吲哚并咔唑衍生物的开发。(参见美国专利号4,487,925；4,552,842；4,785,085；5,591,842和5,922,860；日本专利号20277/91；Journal of Antibiotics，Vol.44，pp.723-728(1991)；WO91/18003；WO98/07433；以及EP0545195A1)。这些化合物已经作为拓扑异构酶抑制剂使用并因此用于治疗癌症(Cancer Chemother.Pharmacol.34(附加)：S41-S45(1994))

这些化合物在治疗许多癌症上的成功使得有必要改进它们的合成方法。(参见Bioorg. & Med.Chem.Letters 2000，10，419；Tetrahedron 1997，53，5937；Tetrahedron 1997，53，585；和Synthesis 1976，414)。然而，以前已知的方法遇到许多的问题，包括使用不希望的溶剂，汞或银盐，低收率以及不需要的副产物的生成，使其不得不进行冗长的提纯步骤。

例如，以前已知的制备高纯度吲哚并咔唑苷III的方法需要提纯步骤，例如活性炭处理、色谱分离法和/或原料的重结晶，由于产物非常高的细胞毒性，特别是当大规模时，该提纯步骤是冗长的、费时的并且危险的。(参见Bioorg & Med Chem Letters 1999，3307；和Tetrahedron 1997，585描述在结构上相似的化合物的合成，需要再溶解粗产品以得到纯的物质))。

因此本发明的目的是提供一种新的合成吲哚并咔唑衍生的抗癌物质的路线，以克服以前已知的合成方法中存在的问题。具体地说，由该路线制得的足够纯的产品在后面的配方中可以按“原状”使用。

发明概述

本发明涉及一种制备通式I的高纯度吲哚并咔唑苷的新方法，吲哚并咔唑苷抑制肿瘤细胞的生长，因此被用于治疗哺乳动物的癌症，等等。

发明详述

本发明的实施方案由制备高纯度的式I化合物的方法进行说明，

其包含步骤：

(a)用碱调节基本上由醇、酸、水以及化合物I组成的酸性混合物的pH值，以制得pH在约1.5-约6.5范围内的溶液；

(b)保持从步骤(a)得到的溶液的温度在约50℃-约100℃的范围内；以及

(c)分离化合物I的晶体。

在本发明的第二个实施方案中，该方法包括步骤：

(a)用碱调节主要由酸、醇、水以及化合物I组成的酸性混合物的pH值，以制得pH在约1.5-约6.5范围内的溶液；

(b)用醇调节步骤(a)的溶液，以使其为约10％w/v-约30％w/v水的醇溶液，并且化合物I的浓度约为10mL/g-20mL/g；

(c)调节步骤(b)的溶液的温度，使其在约50℃-约100℃的范围内；

(d)将醇加入到步骤(c)的溶液中，以使溶液稀释至约3∶2(溶液∶醇)；

(e)在约50℃-约100℃的温度范围内，陈化(d)的溶液，直至化合物I的晶体生成以制得一种淤浆；以及

(f)分离化合物I的晶体。

在第二个实施方案的另一个的实施方案，该方法还包含脱保护中间体II：

(其中R独立地是氢或取代或未取代的苄基保护基，条件是至少一个R是取代或未取代的苄基保护基)，通过在催化剂存在下的氢化反应以制备反应混合物，接着过滤反应混合物以得到步骤(a)的混合物。

在另一种实施方案中，在上面描述的方法中，R是苄基。

在本发明的第三个实施方案中，制备高纯度的化合物III的方法

包含步骤：

(a)用碱调节主要由酸、醇、水以及化合物III组成的酸性混合物的pH值，以制得pH在约1.5-约6.5范围内的溶液；

(b)用醇调节步骤(a)的溶液，以使其为约10％w/v-约30％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度约为10mL/g-20mL/g；

(d)接着晶种到溶液中；

(e)将醇加入到溶液中，以使溶液稀释至约3∶2(溶液∶醇)；

(f)在约50℃-约100℃的温度范围内，陈化(e)的溶液，直至化合物III的晶体生成以制得一种淤浆；以及

(g)分离化合物III的晶体。

在第三个实施方案的另一个的实施方案中，该方法还包含脱保护中间体II：

在上面刚描述的另一个实施方案中，在步骤(a)中，将pH值调节到约1.5-约3.5的范围内；在步骤(b)中，调节溶液，以使其为约15％w/v-约25％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度约为12mL/g-18mL/g；在步骤(c)中，将溶液的温度调节到约70℃。

在上面描述的方法的另一个实施方案中，在步骤(a)中，将pH值调节到约2.5；在步骤(b)中，调节溶液，以使其为约20％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度约为15mL/g；在步骤(c)中，将溶液的温度调节到约70℃。

在步骤(f)后，本发明的上述方法还包括调节淤浆的步骤，以使含水量在分离化合物III的结晶的步骤(g)之前降低至约1％w/v-约10％w/v。

制备高纯度化合物III的方法的一个优选实施方案是

其包含步骤：

(a)用低级烷基胺调节基本上由酸、醇、水以及化合物III组成的酸性混合物的pH值，以制得pH约为2.5的溶液；

(b)用异丙醇调节步骤(a)的溶液，以使其为约20％w/v水的异丙醇溶液，并且化合物I的浓度约为15mL/g；

(c)调节步骤(b)的溶液的温度，使其约为70℃；

(d)接着晶种到溶液中；

(e)将异丙醇加入到溶液中，以使溶液稀释至约3∶2(溶液∶异丙醇)；

(f)在约70℃陈化(e)的溶液，直至化合物I的晶体生成以制得一种淤浆；

(g)调节淤浆，以使其含水量约为3％w/v；

(h)在约70℃陈化淤浆，然后将其冷却至约22℃；以及

(i)分离化合物III的晶体。

在优选实施方案的另一个实施方案中，该方法还包含脱保护中间体II：

同样，在本发明的范围内，在上面刚描述的方法中，其中步骤(c)中的低级烷基胺是三乙胺。

本发明可以直接从反应介质中结晶生成产品，不需要另外的提纯步骤。另外，本发明要求的方法提供一种比以前已知方法的二维针形更稳定的晶体几何学，即三维梯形，用溶度动力学表示。

化合物I和化合物III可以按照美国专利号5,591,842(1997年1月7日公开)中所述的步骤合成，在此引入作为参考。化合物III的粉末，其由WO95/30682和美国专利号5,591,842中所述的方法得到，用本发明的方法进行结晶。

本申请中使用的″高纯度″是指由HPLC测得的总杂质含量为1％或更少的产品。

″酸性混合物″是指pH小于7.0的混合物。最优选地，酸性混合物的pH值小于约2.5。

对于本发明，可以使用的酸的类型包括，但不限于，无水或含水的HF、HCl、HBr、HI、HNO₃、HClO₄、硫酸、磷酸、丙酸、间甲苯磺酸(MsOH)、对甲苯磺酸(TsOH)、单磷酸盐、二磷酸盐、混合磷酸盐盐、羧酸或卤化铵。混合磷酸盐可以M₁M₂HPO₄表示，其中M₁和M₂独立地选自H、Na、K、NH₄OH、钠钾等等。酸更优选为HCl。

这里描述的氢解反应中催化剂的选择对本领域熟练技术人员来说是很容易的。合适的催化剂包括钯/碳、Pd(OH)₂、阮内镍、钨催化剂、铑/Al₂O₃等等。钯催化剂是优选的，例如钯/碳。

″接种晶种″是指将溶液暴露在晶体(晶种)中以促进晶体从溶液中析出。可以加入干固体形式的晶种或淤浆形式的晶种以接种晶体。″晶种″可以是相同化合物的晶体或不同化合物的晶体。在目前的情况下，用相同化合物的淤浆进行接种晶体是优选的。

″陈化″是指在恒定温度和体积下将溶液放置一段时间。在本发明中，陈化时间并不重要，除非特别指明，可以很容易地由本领域熟练技术人员确定。

″过滤″是指将溶液通过某些介质以除去颗粒物质。介质的选择不重要，本领域普通技术人员可以容易地选择。过滤可以通过C盐、solka絮凝物、沙、玻璃料、硅藻土等等进行。

″醇″是指1-5个碳原子的直链或支链有机分子，其至少具有羟基作为主活性基团。醇包括甲醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇等等。异丙醇是优选的。

术语″取代的苄基保护基″包括，但是不局限于，对甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对卤代苄基(其中卤素包括氯、溴和碘)、2，6-二氯苄基、二苯甲基、三苯甲基等等。此外合适的保护基可以在(《有机化学中的保护基》Peter G.Wuts和Theodora W.Greene著，John Wiley & Sons出版社出版，第三版(1999))中找到。

本发明包括将滤液的pH值调到特定范围的步骤。pH值可以用任何合适的碱进行调节，例如三乙胺、二异丙基乙胺、三丁胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶、2，4，6-三甲基吡啶、DBU、DBN、二异丙胺、N，N-二甲基苯胺、DABCO、N-烷基吗啉等等。碱优选为低级烷基胺。三乙胺是最优选的。

″淤浆″是指在液体的固体或晶体悬浮液。固体可部分、不完全地或完全地不溶于液体。

方案概要

方案A说明制备生物活性吲哚并咔唑苷的通用方法，通过脱保护/结晶的方法得到高收率和高纯度的产品，避免了在配方前进一步提纯的步骤。

方案A

实施例

实施例是用来帮助进一步理解发明。特定的材料、物质和条件是用来进一步说明本发明，而不是限制本发明的合理的范围。

实施例1

化合物1-1的制备方法描述在WO95/30682(同族专利：US5,804,564)中，在此引入作为参考。

在50升玻璃容器中，在室温下，于0.5小时内，将乙醇(14.0升)滴加到化合物1-1(1.55公斤，1.44摩尔)、甲苯(5.6升)和48％KOH水溶液(4.15公斤)的两相混合物中，并保持内部温度低于30℃。所得暗红色混合物在20-30℃搅拌12小时，在此期间，混合物变成均匀的红色溶液。然后混合物在-5℃进一步陈化1小时，在此期间，10％的柠檬酸水溶液(23.5公斤)慢慢地加入以生成pH为7.7-8.0的混合物，并保持内部温度低于5℃。将所得混合物温热并在25-30℃搅拌7小时，在此期间，定期加入10％柠檬酸水溶液(1.77公斤)以维持pH在7.5-8.0之间。然后，混合物用MTBE(15.5升)进行萃取，分离后的有机层用3％NaCl水溶液(2×3.1升)和25％NaCl水溶液(3.1升)洗涤，随后用Na₂SO₄干燥，并用碳(Darco G-60，155克，室温，1小时)处理。过滤后的溶液在真空中浓缩至6升，并用乙腈进行冲洗(2×15升)，每次在真空中浓缩至6升的分批体积(残余甲苯：9％)。然后，混合物用乙腈稀释成23.3升的溶液，在22-25℃，在0.5小时内将甲醇(3.0升)慢慢地加入其中，然后加入产品(1-2)的晶种，以析出晶体。将所得混合物在该温度范围进一步陈化1小时，接着在1小时内慢慢加入甲醇(17.6升)。将所得黄色悬浮液在22-25℃陈化1小时，接着在0-5℃进一步陈化3小时。过滤晶体，用9∶1(v/v)的乙腈/甲醇混合物(15.5升)对该晶体进行洗涤，在真空中干燥晶体，得到1-2。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃，ppm)：10.79(1H，br.s)，9.04(1H，d，J＝9.2Hz)，8.95(1H，d，J＝9.6Hz)，7.26(32H，m)，6.17(2H，d，J＝7.3Hz)，5.85(1H，d，J＝8.2Hz)，4.89(10H，m)，4.32(1H，t，J＝8.9Hz)，3.96(6H，m)，3.13(1H，d，J＝10.2Hz)

实施例2

在1.5小时内于0℃，在50升玻璃容器中，将12.1％NaClO水溶液(使用前用Na₂S₂O₃水溶液进行滴定；4.06公斤，6.61摩尔)滴加到搅拌下的1，3-二苄氧基-2-丙醇(化合物2-1，1.50公斤，5.51摩尔)、2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧自由基(TEMPO，86.0克，0.55摩尔)乙腈(20.6升)和3％NaHCO₃水溶液(15.5公斤，5.51摩尔)的混合物中，并保持内部温度在0-5℃之间。所得混合物在0-5℃再搅拌1小时，并用MTBE(甲基叔丁基醚)(41升)在10℃以下进行萃取。分离后的有机层在10℃以下用10％Na₂SO₃水溶液(5.0公斤)进行洗涤，接着在室温下用5％NaCl水溶液(3.0公斤)和1％NaCl水溶液(3.0公斤)进行洗涤。然后，浅红色有机层用HPLC进行分析，计算得到1.48公斤(5.49摩尔)的所需的酮(化合物2-2)。然后，将溶液放入50L容器中并在真空中浓缩(40℃浴)至约8L，用正庚烷(2×7.5L)冲洗，得到庚烷混合物(剩余的MTBE和乙腈分别是0.005％和0.90％)，接着用正庚烷稀释至37.5升的分批体积。然后，将混合物温热至70℃，接着加入Boc-NHNH₂(801克，6.06摩尔)和甲苯(1.5升)的溶液。所得混合物在70℃以上搅拌3小时，接着将其冷却至60℃。加入产品(化合物2-3)的晶种，然后将所得混合物在59-61℃陈化1小时以析出晶体。然后，将混合物冷却至室温并陈化过夜。在20℃过滤晶体，用正庚烷(7.5升)对晶体进行洗涤，接着用7∶3v/v的正庚烷/异丙醇(4.5升)的混合物对晶体进行洗涤，然后在真空中干燥晶体得到无色针状的化合物2-3。

然后，在50升玻璃容器中，在0℃下，将化合物2-3(1.64公斤，4.27摩尔)和THF(5.9升)的溶液滴加到搅拌下的NaBH₄(364克，9.62摩尔)和THF(7.2升)的悬浮液中，并保持内部温度低于5℃。然后，将BF₃·OEt₂(920克，6.48摩尔)滴加至所得混合物中，并保持内部温度低于10℃。所得无色悬浮液在0-5℃搅拌1小时，在此期间，在1小时内向其中滴加6N HCl水溶液(4.29公斤，23.5摩尔)，并保持内部温度低于20℃(注意：强烈气体放出)。将所得无色悬浮液温热并在60-65℃搅拌2小时，直到没有气体放出为止。然后，在3℃下将已脱气的2N NaOH水溶液(12.9升，25.8摩尔)慢慢地加入至混合物中，并保持内部温度低于20℃，接着将所得混合物温热至室温，并用已脱气的MTBE(40升)进行萃取。分离后的有机层用已脱气的水(6.6升)进行洗涤，接着用已脱气的盐水(6.5升)和已脱气的水(3.3升)进行洗涤。然后，有机层用已脱气的MTBE稀释，形成57升溶液，然后加入产品(化合物2-4)的晶种，接着在15分钟内滴加草酸(177克，1.97摩尔)和已脱气的MTBE(1.97升)的溶液，析出产品晶体。所得无色淤浆在室温下陈化过夜，过滤晶体，用MTBE(12.3升)洗涤晶体，并将晶体在真空中干燥，得到无色片状的化合物2-4(1.25公斤，88％，99.9面积％，由HPLC测得)。

¹H-NMR(270MHz，DMSO-d₆，ppm)：7.41-7.26(m，10H)，5.91-5.62(br.m，4H)，4.50(s，4H)，3.56(br.d，J＝4.9Hz，4H)，3.34(m，1H).¹³C-NMR(68MHz，DMSO-d₆，ppm)：

164.7，138.2，128.2，127.5，127.4，72.3，68.3，59.8

实施例3

在22℃，将DMA(8.3升)、化合物1-2(1.00公斤；0.94摩尔)以及化合物2-4(350克；1.06摩尔)加入到用氮气净化过的22升容器中。对容器施加真空(40-80托)5分钟/周期，然后用氮气充满(三个周期)，对所得淤浆搅拌下进行脱气。在30分钟内将物料加热至65℃，在此期间，溶液变成均匀。迅速加入三乙胺(146毫升；1.05摩尔)，将溶液在65℃陈化3小时。将物料冷却至45℃，然后将其转入50升圆筒形容器，该容器中装有氮气冲洗过的10℃的MTBE(17.0升)。将容器中的物料再次冷却至10℃，在10分钟内加入氮气冲洗过的水(4.7升)以保持内部温度低于30℃。在22℃，将2M盐酸(440毫升)加入到两相混合物中。在22℃搅拌10分钟后，溶液分层，有机层用水(3×3.8升)洗涤。将有机层在真空中浓缩至5升(20-25℃)，然后用几倍的THF进行冲洗以除去MTBE。在真空中除去溶剂，制得所要的化合物，3-1。¹H-NMR(270MHz，CDCl₃，ppm)：10.63(1H，br.s.)，9.24(1H，br.d，J＝9.6Hz)，9.16(1H，br.d，J＝9.6Hz)，7.50-6.84(42H，m)，6.20(2H，br.d，J＝7.6Hz)，5.84(1H，d，J＝8.6Hz)，5.33(1H，br.d，J＝3.0Hz)，5.21(1H，d，J＝12.2Hz)，5.19(1H，d，J＝11.9Hz)，5.16(1H，d，J＝12.2Hz)，5.08(1H，d，J＝11.9Hz)，5.08(1H，d，J＝10.9Hz)，4.96(1H，d，J＝10.9Hz)，4.89(1H，d，J＝10.9Hz)，4.85(1H，d，J＝10.9Hz)，4.72(1H，d，J＝12.9Hz)，4.68(1H，d，J＝12.9Hz)，4.62-4.48(4H，m)，

4.33(1H，dd，J＝9.6，9.6Hz)，4.06-3.77(7H，m)，3.72(4H，d，J＝5.6Hz)，3.04(1H，d，J＝9.9Hz).

¹³C NMR(68MHz，CDCl₃，ppm)：168.8，168.7，159.4，159.3，143.2，142.9，138.0，137.9，137.6，136.9，136.8，136.6，136.0，130.2，128.7，128.6，128.5，128.4，128.3，128.2，128.2，128.1，128.0，127.9，127.8，127.7，127.6，127.5，127.4，127.3，126.9，126.6，119.4，119.1，118.0，116.9，116.7，116.1，110.4，96.7，96.3，85.8，84.7，80.9，77.4，77.2，76.0，75.9，75.4，74.9，73.9，73.3，73.2，70.7，70.4，69.9，69.8，66.7，58.7，49，4，30.9，27.0

实施例4

注意：该反应的产品，化合物4-1，是细胞毒性化合物

将10％钯/碳(50％湿的；112克)加入5加仑高压釜中，接着加入12-β-D-(2，3，4，6-四-邻苄基吡喃葡萄糖基)-12，13-二氢-2，10-二苄氧基-6-[[-(2-苄氧基-1-(苄氧基甲基)乙基]氨基]-5H-吲哚[2，3-a]吡咯[3，4-c]咔唑-5，7(6H)-二酮(3-1)(175克/升溶液；6.4升；1.12公斤)的THF(四氢呋喃)溶液、异丙醇(IPA)(7.9升)和3NHCl(224毫升)。将物料在40℃/40psi以及快速搅拌下氢化反应4-14小时，在此期间，理论值的110％的氢被吸收。将物料冷却至25℃，用solka絮凝物床过滤反应混合物，并用3/2的IPA/THF(1×3升)冲洗滤渣。用在IPA(约600毫升)中的1M的三乙胺调节滤液的pH至2.5(范围：1.5-6.5)，接着加入水(4.0升)。在大气压下将该批物料浓缩至7.5升。在恒定分批体积下进行蒸馏，同时加入4/1的IPA/水(6.5升)。在保持分批体积为7.5升的同时，通过加入IPA(约9升)，将含水量降至20％(w/v)(范围10-30％的水)。然后将物料冷却至70℃，并且将晶种以IPA淤浆(50毫升)的形式加入。分批在70℃保温1小时，接着在90分钟内加入IPA(5.0升)。该批物料在70℃陈化9-24小时，在此期间，大块的产品晶体析出。进行恒容蒸馏，蒸馏期间加入IPA(17升)以保持体积恒定，得到含水量低至3％(w/v)(范围1-10％的水)的淤浆。将淤浆在70℃陈化3-6小时，接着冷却至22℃并陈化1小时。过滤淤浆，滤饼用IPA(2.5升)，然后用甲醇(1.5升)进行洗涤，接着在真空中于38℃进行干燥6小时，得到纯度大于99A％、收率大于80％的橙色固体产品4-1。

NMR数据(偶合常数(J)的单位是赫兹)：

¹H NMR(400.13MHz，DMSO-d₆)-主要旋转异构体δ的数据11.23(s，1H)，9.80(s，1H)，9.77(s，1H)，8.90(d，J＝8.4，1H)，8.82(d，J＝8.4，1H)，7.21(br s，1H)，7.01(br s，1H)，6.84(重叠m，2H)，6.00(d，J＝8.0，1H)，5.88(t，J＝3.6，1H)，5.57(d，J＝2.4，1H)，5.34(d，J＝4.4，1H)，5.13(d，J＝4.4，1H)，4.94(d，J＝4.4，1H)，4.56(t，J＝5.6，2H)，4.04(dd，J＝11.2，3.2，1H)，3.95(重叠m，2H)，3.81(dd，J＝10.4，4.0，1H)，3.53(重叠m，6H)；¹³C NMR(100.64MHz，DMSO-d₆)-主要旋转异构体δ的数据169.03，168.94，157.79，157.63，144.38，143.12，129.46，127.92，125.19(2C)，118.91，117.57，115.94，114.32，114.23，113.92，110.30，110.24，97.54，97.49，84.49，78.39，76.77，72.88，67.53，62.59，60.47(2C)，58.33.21

HPLC分析

HPLC参数：

柱：YMC ODS-AQ(250×4.6mm)

流速：1.5mL/min.

检测波长：228nm

流动相：A＝0.1％H₃PO₄水溶液

B＝乙腈

梯度：Min A(％) B(％)

0 85 15

40 74 26

60 30 70

61 85 15

65 85 15

注射体积：10μL

温度：25℃

Claims

1.制备高纯度的式I化合物的方法：

其包含步骤：

(a)用碱调节基本上由酸、醇、水以及化合物I组成的酸性混合物的pH值，以制得pH在1.5-6.5范围内的溶液；

(b)用醇调节步骤(a)的溶液，以使其为10％w/v-30％w/v水的醇溶液，并且化合物I的浓度为10mL/g-20mL/g；

(c)调节步骤(b)的溶液的温度，使其在50℃-100℃的范围内；

(d)将醇加入到步骤(c)的溶液中，以使溶液稀释至溶液∶醇为3∶2；

(e)在50℃-100℃的温度范围内，陈化(d)的溶液，直至化合物I的晶体生成以制得一种淤浆；以及

(f)分离化合物I的晶体。

2.权利要求1的方法，其中还包含脱保护中间体II：

其中R独立地是氢或取代或未取代的苄基保护基，条件是至少一个R是取代或未取代的苄基保护基，

通过在催化剂存在下的氢化反应以制备反应混合物，接着过滤反应混合物以得到步骤(a)的混合物。

3.权利要求2的方法，其中R是苄基。

4.制备高纯度的化合物III的方法

包含步骤：

(a)用碱调节基本上由酸、醇、水以及化合物III组成的酸性混合物的pH值，以制得pH在1.5-6.5范围内的溶液；

(b)用醇调节步骤(a)的溶液，以使其为10％w/v-30％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度为10mL/g-20mL/g；

(c)调节步骤(b)的溶液的温度，使其在50℃-100℃的范围内；

(d)接种晶种到溶液中；

(e)将醇加入到溶液中，以使溶液稀释至溶液∶醇为3∶2；

(f)在50℃-100℃的温度范围内，陈化(e)的溶液，直至化合物III的晶体生成以制得一种淤浆；以及

(g)分离化合物III的晶体。

5.权利要求4的方法，还包含脱保护中间体II：

6.权利要求4或5的方法，其中在步骤(a)中，将pH值调节到1.5-3.5的范围内；在步骤(b)中，调节溶液，以使其为15％w/v-25％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度为12mL/g-18mL/g；在步骤(c)中，将溶液的温度调节到70℃。

7.权利要求6的方法，其中在步骤(a)中，将pH值调节到2.5；在步骤(b)中，调节溶液，以使其为20％w/v水的醇溶液，并且化合物III的浓度为15mL/g；在步骤(c)中，将溶液的温度调节到70℃。

8.权利要求7的方法，在步骤(f)后，还包含调节淤浆的步骤，以使含水量在步骤(g)分离化合物III的晶体之前降低至1％w/v-10％w/v。

9.权利要求4的方法，其中包含步骤：

(a)用低级烷基胺碱调节基本上由酸、醇、水以及化合物III组成的酸性混合物的pH值，以制得pH为2.5的溶液；

(b)用异丙醇调节步骤(a)的溶液，以使其为20％w/v水的异丙醇溶液，并且化合物III的浓度为15mL/g；

(c)调节步骤(b)的溶液的温度至70℃；

(d)接种晶种到溶液中；

(e)将异丙醇加入到溶液中，以使溶液稀释至溶液∶异丙醇为3∶2；

(f)在70℃陈化(e)的溶液，直至化合物III的晶体生成以制得一种淤浆；

(g)调节淤浆，以使其含水量为3％w/v；

(h)在70℃陈化淤浆，然后将其冷却至22℃；以及

(i)分离化合物III的晶体。

10.权利要求9的方法，其中还包含脱保护中间体II：

11.权利要求10的方法，其中步骤(a)中的低级烷基胺是三乙胺。