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CN113973717A - 一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法 - Google Patents

一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法 Download PDF

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CN113973717A
CN113973717A CN202111434758.2A CN202111434758A CN113973717A CN 113973717 A CN113973717 A CN 113973717A CN 202111434758 A CN202111434758 A CN 202111434758A CN 113973717 A CN113973717 A CN 113973717A
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CN
China
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tissue culture
culture
seedling
bulbil
bud
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Application number
CN202111434758.2A
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李金威
岩香甩
田耀华
魏丽萍
龚燕雄
黄菁
原慧芳
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Yunnan Institute of Tropical Crops
Original Assignee
Yunnan Institute of Tropical Crops
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Abstract

本发明提供了一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，属于植物无性繁殖技术领域。本发明的育苗方法包括组培苗培育、炼苗和组培微球茎催芽育苗过程。珠芽魔芋组培微球茎一年内各时段均可培育，作为来年种植的繁殖材料；其组培微球茎表面具有多个萌芽点，芽上具有生长点和细胞全能性，取下扦插亦可形成一完整植株，正常生长。根据此特性，本发明采取对珠芽魔芋组培微球茎催芽后取芽种植，可有效提高球茎繁殖系数，减少用种量和用种成本，增加产量和经济效益，加快魔芋产业发展。

Description

一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法
技术领域
本发明属于植物无性繁殖技术领域，尤其涉及一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法。
背景技术
珠芽魔芋为天南星科魔芋属多年生草本植物，叶面上长有气生小球茎的一类魔芋的统称，是迄今自然界中唯一含有大量葡甘聚糖的植物，被广泛应用于食品、医疗和工业等领域。因其高产，抗病性强，适宜高温高湿环境种植，深受种植户喜爱；近几年种植面积快速扩大，种质缺乏，成为发展的主要制约因素。目前种植产业中采用的繁殖材料主要是球茎、珠芽与少部分的实生种子，但通常采用常规种植方式，一个球茎(珠芽、实生种子)播种后依然只收获一个球茎，产量虽较白魔芋、花魔芋高，但多苗生长特性未充分得到利用。
中国科学院昆明植物研究所公开了一种珠芽魔芋种苗繁育方法(申请号200410040723.0)，以野外采集珠芽魔芋的珠芽，以及植物的叶片、叶柄、根、块茎芽、鳞叶和块茎切片为外植体，经过芽的诱导与增殖、类似块茎状物的诱导、生根和移植，首次完成了珠芽魔芋的组织培养；吴金平等进行了珠芽魔芋的组培繁殖与快速繁殖，以珠芽魔芋的芽鞘为外植体，经过愈伤组织诱导和不定芽的形成、生根炼苗及移栽，获得了珠芽魔芋生根苗，成活率达到90％；昆明学院(申请号201611000366.4)通过组培技术，改变外植体的诱导发育、生长途径，通过添加相应的生长调节物质，引导生长发育途径由器官发生途径转向胚状体发生途径，直接通过离体培养获得大量成熟的珠芽魔芋种球，用于播种进一步生长膨大，来收获并提高珠芽魔芋产量。显然，现有技术中并未有利用珠芽魔芋组培苗微球茎的无性繁殖特性，进行大规模繁殖育苗的记载。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于针对当前珠芽魔芋发展快速，种质缺乏，自然繁殖周期长、收获率低的问题，提供一种利用珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗的技术，同时对珠芽魔芋的组织培养技术和炼苗机制进行研究，获取大量的珠芽魔芋种苗，加快产业发展和扩大规模化种植面积。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，包括以下步骤：
取珠芽魔芋外植体经过愈伤组织诱导、不定芽诱导、不定芽增殖及生根培养，获得无菌组培苗；无菌组培苗经移栽炼苗，培育收获微球茎；对微球茎进行催芽，待微球茎长出芽头后，取下芽头移栽培养。
优选的是，所述愈伤组织诱导、不定芽诱导培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L。
优选的是，所述不定芽增殖培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+IAA 0.3-0.6mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L。
优选的是，所述生根培养基组成为：1/2MS+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖13-17g/L。
优选的是，所述炼苗基质由体积份数的泥炭土2-4份，红土0-2份，椰糠1-2份组成，基质含水量为65％-82％。
优选的是，所述炼苗过程包括：遮阴度60％-80％，温度25-32℃，空气湿度65％-92％。
优选的是，所述微球茎的重量为1-3g。
优选的是，所述催芽包括：在收获的微球茎上盖一层纸，喷施清水或40-60mg/LGA3或40-60mg/L IAA，至纸面潮湿但无水珠滴下。
优选的是，所述取芽包括：待所述微球茎长出芽头且长度1cm以上，在芽根基与微球茎表面相接处取芽。
优选的是，所述微球茎重复进行催芽、取芽、移栽培养直至球茎皱缩加重，质地松软，移栽播种。
相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：
(1)珠芽魔芋组培微球茎一年内各时段均可培育，作为来年种植的繁殖材料，其表面具有多个萌芽点，芽上具有生长点和细胞全能性，取下扦插亦可形成一完整植株，正常生长。
(2)本发明组培苗培育方法的愈伤组织诱导率、不定芽诱导率、增殖率和生根率都较高，简单易操作。
(3)本发明中珠芽魔芋炼苗方法能有效提高珠芽魔芋组培苗成活率至92％及以上，有助于促进珠芽魔芋产业发展。
(4)本发明中组培微球茎的生长周期短，在组培苗供应充足的情况下，1-2个月便可收获单重1-3g左右的珠芽魔芋微球茎，一年可收获3-4轮，繁育2-3次，体积小，储存、运输方便。
(5)本发明中催芽育苗方法能有效提高组培微球茎出芽率，扩大珠芽魔芋种苗，繁殖系数翻倍，可缩小用种量和用种成本，提高经济效益，方法简单易操作。
具体实施方式
本发明提供了一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，包括以下步骤：取珠芽魔芋外植体经过愈伤组织诱导、不定芽诱导、不定芽增殖及生根培养，获得无菌组培苗；无菌组培苗经移栽炼苗，培育收获微球茎；对微球茎进行催芽，待微球茎长出芽头后，取下芽头移栽培养。
本发明优选珠芽魔芋外植体为地下球茎或叶面珠芽，进一步优选外植体材料健康、饱满，无机械损伤、无病害、霉变。采集外植体后，用清水清洗干净外植体表面杂质，削去表皮，备用。
本发明优选对外植体材料进行消毒处理，进一步优选消毒处理包括：将削皮后的外植体用流水冲洗30min，取出用无菌水冲洗2次后转入无菌操作台上，用75％的酒精浸泡20min，再分别用0.1％的升汞溶液浸泡20min和无菌水冲洗3次。
本发明在外植体消毒后，将其切移至无菌操作台上切成小块。优选小块体积为0.5-1.0cm3；进一步优选小块体积为1cm×1cm×1cm。
将外植体小块接入愈伤组织诱导培养基诱导愈伤组织形成。本发明优选愈伤组织诱导培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L；进一步优选组成为：MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。利用本发明的愈伤组织诱导培养基，1个月后可形成大量愈伤组织。
将形成愈伤组织的外植体转接到不定芽诱导培养基诱导形成不定芽。本发明优选不定芽诱导培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L；进一步优选组成为：MS+6-BA 1mg/L+NAA0.5mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。利用本发明的不定芽诱导培养基，在光照下培养20-25天后外植体上有大量丛生芽形成。
将丛生芽在无菌操作台上取出，分株后接种到不定芽增殖培养基培养。本发明优选不定芽增殖培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+IAA 0.3-0.6mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L；进一步优选组成为：MS+6-BA 2mg/L+IAA 0.4mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。利用本发明的不定芽增殖培养基，在光照下培养25天后可获得5cm左右的珠芽魔芋丛生苗。
将丛生苗分成单株，接种到生根培养基培养生根。本发明优选生根培养基组成为：1/2MS+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖13-17g/L；进一步优选组成为：1/2MS+NAA0.3mg/L+琼脂7g/L+蔗糖15g/L。利用本发明的生根培养基，培养25-30天左右时组培苗高8-12cm、根长2-3cm，便可移栽到大棚进行炼苗。
本发明优选愈伤组织诱导、不定芽诱导、不定芽增殖及生根培养阶段，各培养基pH为5.6-6.2，培养条件为每天光照12h，温度22℃-28℃，光照强度1000-2000lx。
将生根的组培苗移栽入混合基质中，在适宜环境下进行炼苗。本发明优选炼苗环境为遮阴度60％-80％，温度25-32℃，空气湿度65％-92％；进一步优选遮阴度75％，温度28℃，空气湿度80％。本发明优选将生根培养瓶转移至炼苗大棚，第一晚开瓶过夜，第二天将苗取出，用清水清洗干净根部培养基，移栽至填入炼苗基质的育苗盘内。
本发明优选炼苗基质由体积份数的泥炭土2-4份，红土0-2份，椰糠1-2份组成；进一步优选泥炭土:红土:椰糠＝2:1:2。
本发明优选对炼苗基质进行消毒，进一步优选消毒混合液用多菌灵和噻菌酮体积比为1:1混合喷洒基质消毒。
本发明优选炼苗前10天，每隔2-3h施用喷雾设施喷施一次清水，时长控制在1min以内，因组培苗植株质嫩，需时刻保持组培苗叶面潮湿，尤其中午11点-15点时段；保持炼苗基质含水量在65％-82％；进一步优选保持炼苗基质含水量80％。
在炼苗前期，于棚内上方搭建一层遮阳网，保持棚内遮荫度为60％-80％，10天后，组培苗新根系长出，将遮阳网摘除；早晚喷施一次清水，保持基质潮湿。本发明优选炼苗前期每周施用两次氮肥或NPK复合肥，进一步优选氮肥浓度为1‰-5‰，复合肥N:P:K＝15:5:30。
炼苗45-60天后，对组培苗断水断肥，植株倒苗后，便可收集组培微球茎。清洗收集的组培微球茎的表面杂质，进行催芽，获取芽头。
本发明优选挑选1-3g的组培微球茎进行催芽，获取芽头；进一步优选挑选2g的组培微球茎。
本发明优选催芽过程包括：在收获的微球茎上盖一层纸，喷施清水或40-60mg/LGA3或40-60mg/L IAA，至纸面潮湿但无水珠滴下；进一步优选喷施50mg/L的GA3或IAA。
待微球茎长出芽头且长度1cm以上，在芽根基与微球茎表面相接处取芽。作为一种可实施方式，取芽工具需要利用75％-100％酒精消毒。
本发明优选取下的芽头用体积份数的多菌灵1-2份，噻菌酮1-2份的800-1000混合溶液消毒后，在通风干燥处晾干后移栽种植；进一步优选利用体积比多菌灵和噻菌酮＝1:1的1000倍混合溶液消毒。
本发明优选芽头移栽基质由体积份数的泥炭土2-4份，红土0-2份，椰糠1-2份组成；进一步优选泥炭土:红土:椰糠体积比为2:2:1。优选基质含水量保持在20％-45％；进一步优选保持在30％。10天后待芽根部长出新根后，可正常浇水、施肥，基质湿度保持80％及以上。
本发明优选微球茎取芽后，使用体积份数的多菌灵1-2份，噻菌酮1-2份的800-1000混合溶液消毒后，重复进行催芽、取芽、移栽培养直至球茎皱缩加重，质地松软，移栽播种；进一步优选利用体积比多菌灵和噻菌酮＝1:1的1000倍混合溶液消毒。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1、珠芽魔芋组培苗的培育
1.1、挑选健康、饱满，无机械损伤、无病害、霉变的的叶面珠芽为组培外植体。
1.2、用清水清洗干净外植体表面杂质，削去表皮。
1.3、将削皮后的外植体用流水冲洗30min，取出用无菌水冲洗2次后转入无菌操作台上，用75％的酒精浸泡20min，再分别用0.1％的升汞溶液浸泡20min和无菌水冲洗3次，最后移至无菌操作台上切成1cm×1cm×1cm的小块。
1.4、愈伤组织诱导：将小块接入配比为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA0.1mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L的愈伤组织诱导培养基中，每瓶接种5块，1个月后大量愈伤组织形成。
1.5、不定芽诱导：将形成愈伤组织的外植体转接到配比为MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L的不定芽诱导培养基中；在光照下培养20-25天后外植体上有大量丛生芽形成。
1.6、不定芽增殖培养：将丛生芽在无菌操作台上取出，分株后接种到配比为MS+6-BA2mg/L+IAA 0.4mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L的增殖培养基中，每瓶接种20株，同样在光照下培养，25天后可获得5cm左右的珠芽魔芋丛生苗。
1.7、最后将丛生苗分为单株接种到配比为1/2MS+NAA 0.3mg/L+琼脂7g+蔗糖15g/L的生根培养基中，25-30天时苗高8-12cm、根长2-3cm，便可移栽到大棚进行炼苗。
其中，各培养基pH为6.0，培养条件为每天光照12h，温度26℃，光照强度1500lx。
2、炼苗
2.1、将炼苗基质体积比为泥炭土：红土：椰糠＝2:1:2的混合基质，混合均匀后填入育苗盘内，使用多菌灵和噻菌酮体积比为1:1的1000倍混合溶液喷洒消毒；生长前期基质持水量保持80％，组培苗新根萌发后便可正常浇水、施肥。
2.2、将植株、根系健壮的珠芽魔芋组培苗移至四周防雨、遮荫度75％、室温28℃、湿度70％的炼苗大棚内，打开瓶盖过夜；第二天将苗取出，用清水清洗干净根部培养基，移栽至填入基质的育苗盘内。
2.3、前10天，每隔2-3h施用喷雾设施喷施一次清水，时长控制在1min以内，因组培苗植株质嫩，需时刻保持组培苗叶面潮湿，尤其中午11点-15点时段；保持基质含水量在80％；
2.4、前期在棚内上方搭建一层遮阳网，保持棚内遮荫度为75％，10天后，组培苗新根系长出，可将遮阳网摘除；早晚喷施一次清水，保持基质潮湿；每周施用两次1‰的氮肥。
2.5、45-60天后，对组培苗断水断肥，植株倒苗后，便可收集1-3g的组培微球茎。
3、采用组培微球茎扩繁种苗
3.1、挑选2g的珠芽魔芋组培微球茎，清洗表面杂质，依次摆放于干净的长方形育苗盘内，后再微球茎上盖上一层报纸，每日在报纸上喷施少量清水，保持报纸潮湿，但无水珠滴下，盘内无积水，进行催芽。
3.2、待芽长1cm以上时，用75％酒精消毒好的刀片在芽根基与球茎表面相接处取芽。
3.3、取芽后的组培微球茎使用多菌灵和噻菌酮＝1:1的1000倍混合溶液消毒后放回原育苗盘内，再次催芽、取芽。
3.4、取下的芽用多菌灵和噻菌酮＝1:1的1000倍混合溶液消毒，在通风干燥处晾干后移栽至填有泥炭土：红土：椰糠体积比为2:2:1育苗基质的育苗盘内，前期保持基质含水量在20％-45％。
3.5、10天后待芽根部长出新根后，可正常浇水、施肥，基质湿度保持80％及以上；如此重复，至球茎皱缩，质地松软后移栽至大田即可。
采用本发明中组培微球茎扩繁种苗的方法：第一次对珠芽魔芋组培微球茎催芽时，球茎出芽率为100％，取芽后移栽成活率达85％，10天后主芽基部根系逐渐萌发；此时球茎出现轻微皱缩，可进行第二次催芽。20天后逐渐第二次萌芽，第二次球茎出芽率为90％，每个球茎出芽数为1-2颗，30天左右可第二次取芽移栽，移栽成活率81％；取芽后球茎皱缩加重，质地松软，此时停止催芽，将球茎播种至田间，45天后球茎出芽破土，出芽率为78％。
实施例2
1、珠芽魔芋组培苗的培育
1.1、挑选健康、饱满，无机械损伤、无病害、霉变的的地下球茎为组培外植体。
1.2、用清水清洗干净外植体表面杂质，削去表皮。
1.3、将削皮后的外植体用流水冲洗30min，取出用无菌水冲洗2次后转入无菌操作台上，用75％的酒精浸泡20min，再分别用0.1％的升汞溶液浸泡20min和无菌水冲洗3次，最后移至无菌操作台上切成0.8cm×0.8cm×0.8cm的小块。
1.4、愈伤组织诱导：将小块接入配比为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖25g/L的愈伤组织诱导培养基中，1个月后大量愈伤组织形成。
1.5、不定芽诱导：将形成愈伤组织的外植体转接到配比为MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.1mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖25g/L的不定芽诱导培养基中；在光照下培养20-25天后外植体上有大量丛生芽形成。
1.6、不定芽增殖培养：将丛生芽在无菌操作台上取出，分株后接种到配比为MS+6-BA 1mg/L+IAA 0.3mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖25g/L的增殖培养基中，在光照下培养，25天后可获得5cm左右的珠芽魔芋丛生苗。
1.7、最后将丛生苗分为单株接种到配比为1/2MS+NAA 0.1mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖13g/L的生根培养基中，30天后可移栽到大棚进行炼苗。
其中，各培养基pH为5.6，培养条件为每天光照12h，温度22℃，光照强度1000lx。
2、炼苗
2.1、将炼苗基质体积比为泥炭土:椰糠＝2:1的混合基质，混合均匀后填入育苗盘内，使用多菌灵和噻菌酮体积比为2:1的800倍混合溶液喷洒消毒；生长前期基质持水量保持65％，组培苗新根萌发后便可正常浇水、施肥。
2.2、将植株、根系健壮的珠芽魔芋组培苗移至四周防雨、遮荫度60％、室温25℃、湿度92％的炼苗大棚内，打开瓶盖过夜；第二天将苗取出，用清水清洗干净根部培养基，移栽至填入基质的育苗盘内。
2.3、前10天，每隔2-3h施用喷雾设施喷施一次清水，时长控制在1min以内，因组培苗植株质嫩，需时刻保持组培苗叶面潮湿，尤其中午11点-15点时段；保持基质含水量在82％；
2.4、前期在棚内上方搭建一层遮阳网，保持棚内遮荫度为60％，10天后，组培苗新根系长出，可将遮阳网摘除；早晚喷施一次清水，保持基质潮湿；每周施用两次5‰的氮肥。
2.5、45-60天后，对组培苗断水断肥，植株倒苗后，便可收集1-3g的组培微球茎。
3、采用组培微球茎扩繁种苗
3.1、挑选1-2g的珠芽魔芋组培微球茎，清洗表面杂质，依次摆放于干净的长方形育苗盘内，后再微球茎上盖上一层报纸，每日在报纸上喷施50mg/L的GA3，保持报纸潮湿，但无水珠滴下，盘内无积水，进行催芽。
3.2、待芽长1.5以上cm时，用100％酒精消毒好的刀片在芽根基与球茎表面相接处取芽。
3.3、取芽后的组培微球茎使用多菌灵和噻菌酮＝2:1的800倍混合溶液消毒后放回原育苗盘内，再次催芽、取芽。
3.4、取下的芽用多菌灵和噻菌酮＝2:1的800倍混合溶液消毒，在通风干燥处晾干后移栽至填有泥炭土:椰糠体积比为2:1育苗基质的育苗盘内，前期保持基质含水量在20％-45％。
3.5、10天后待芽根部长出新根后，可正常浇水、施肥，基质湿度保持80％及以上；如此重复，至球茎皱缩，质地松软后移栽至大田即可。
实施例3
1、珠芽魔芋组培苗的培育
1.1、挑选健康、饱满，无机械损伤、无病害、霉变的的地下球茎为组培外植体。
1.2、用清水清洗干净外植体表面杂质，削去表皮。
1.3、将削皮后的外植体用流水冲洗30min，取出用无菌水冲洗2次后转入无菌操作台上，用75％的酒精浸泡20min，再分别用0.1％的升汞溶液浸泡20min和无菌水冲洗3次，最后移至无菌操作台上切成0.5cm×0.5cm×1cm的小块。
1.4、愈伤组织诱导：将小块接入配比为MS+6-BA2mg/L+NAA 0.5mg/L+琼脂8g/L+蔗糖32g/L的愈伤组织诱导培养基中，1个月后大量愈伤组织形成。
1.5、不定芽诱导：将形成愈伤组织的外植体转接到配比为MS+6-BA2mg/L+NAA0.4mg/L+琼脂8g/L+蔗糖32g/L的不定芽诱导培养基中；在光照下培养20-25天后外植体上有大量丛生芽形成。
1.6、不定芽增殖培养：将丛生芽在无菌操作台上取出，分株后接种到配比为MS+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.6mg/L+琼脂8g/L+蔗糖32g/L的增殖培养基中，在光照下培养，25天后可获得5cm左右的珠芽魔芋丛生苗。
1.7、最后将丛生苗分为单株接种到配比为1/2MS+NAA 0.5mg/L+琼脂8g/L+蔗糖17g/L的生根培养基中，30天后可移栽到大棚进行炼苗。
其中，各培养基pH为6.2，培养条件为每天光照12h，温度28℃，光照强度2000lx。
2、炼苗
2.1、将炼苗基质体积比为泥炭土:红土:椰糠＝4:1:2的混合基质，混合均匀后填入育苗盘内，使用多菌灵和噻菌酮体积比为1:2的900倍混合溶液喷洒消毒；生长前期基质持水量保持82％，组培苗新根萌发后便可正常浇水、施肥。
2.2、将植株、根系健壮的珠芽魔芋组培苗移至四周防雨、遮荫度80％、室温32℃、湿度65％的炼苗大棚内，打开瓶盖过夜；第二天将苗取出，用清水清洗干净根部培养基，移栽至填入基质的育苗盘内。
2.3、前10天，每隔2-3h施用喷雾设施喷施一次清水，时长控制在1min以内，因组培苗植株质嫩，需时刻保持组培苗叶面潮湿，尤其中午11点-15点时段；保持基质含水量在65％；
2.4、前期在棚内上方搭建一层遮阳网，保持棚内遮荫度为80％，10天后，组培苗新根系长出，可将遮阳网摘除；早晚喷施一次清水，保持基质潮湿；每周施用两次N:P:K＝15:5:30的复合肥。
2.5、45-60天后，对组培苗断水断肥，植株倒苗后，便可收集1-3g的组培微球茎。
3、采用组培微球茎扩繁种苗
3.1、挑选2-3g的珠芽魔芋组培微球茎，清洗表面杂质，依次摆放于干净的长方形育苗盘内，后再微球茎上盖上一层报纸，每日在报纸上喷施50mg/L的IAA，保持报纸潮湿，但无水珠滴下，盘内无积水，进行催芽。
3.2、待芽长2cm时，用85％酒精消毒好的刀片在芽根基与球茎表面相接处取芽。
3.3、取芽后的组培微球茎使用多菌灵和噻菌酮＝1:2的900倍混合溶液消毒后放回原育苗盘内，再次催芽、取芽。
3.4、取下的芽用多菌灵和噻菌酮＝1:2的900倍混合溶液消毒，在通风干燥处晾干后移栽至填有泥炭土:红土:椰糠体积比为4:1:2育苗基质的育苗盘内，前期保持基质含水量在20％-45％。
3.5、10天后待芽根部长出新根后，可正常浇水、施肥，基质湿度保持80％及以上；如此重复，至球茎皱缩，质地松软后移栽至大田即可。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：
取珠芽魔芋外植体经过愈伤组织诱导、不定芽诱导、不定芽增殖及生根培养，获得无菌组培苗；无菌组培苗经移栽炼苗，培育收获微球茎；对微球茎进行催芽，待微球茎长出芽头后，取下芽头移栽培养。
2.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导、不定芽诱导培养基组成为：MS+6-BA1-2mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L。
3.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述不定芽增殖培养基组成为：MS+6-BA 1-2mg/L+IAA 0.3-0.6mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖25-32g/L。
4.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述生根培养基组成为：1/2MS+NAA 0.1-0.5mg/L+琼脂6.5-8g/L+蔗糖13-17g/L。
5.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述炼苗基质由体积份数的泥炭土2-4份，红土0-2份，椰糠1-2份组成，基质含水量为65％-82％。
6.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述炼苗过程包括：遮阴度60％-80％，温度25-32℃，空气湿度65％-92％。
7.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述微球茎的重量为1-3g。
8.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述催芽包括：在收获的微球茎上盖一层纸，喷施清水或40-60mg/LGA3或40-60mg/LIAA，至纸面潮湿但无水珠滴下。
9.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述取芽包括：待所述微球茎长出芽头且长度1cm以上，在芽根基与微球茎表面相接处取芽。
10.根据权利要求1所述的珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法，其特征在于，所述微球茎重复进行催芽、取芽、移栽培养直至球茎皱缩加重，质地松软，移栽播种。
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