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CN113336837B - 多肽及其在制备抗神经退行性疾病药物方面的应用 - Google Patents

多肽及其在制备抗神经退行性疾病药物方面的应用 Download PDF

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CN113336837B
CN113336837B CN202110827432.XA CN202110827432A CN113336837B CN 113336837 B CN113336837 B CN 113336837B CN 202110827432 A CN202110827432 A CN 202110827432A CN 113336837 B CN113336837 B CN 113336837B
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Abstract

本发明涉及多肽及其应用。该多肽为系列多肽，序列为SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:14之一。该多肽用于制备治疗或预防神经退行性疾病的药物。本发明的系列多肽能治疗或预防神经退行性疾病，具有良好的应用前景。

Description

多肽及其在制备抗神经退行性疾病药物方面的应用
技术领域
本发明涉及多肽及其在制备抗神经退行性疾病药物方面的应用，该系列多肽为DVL-2的特定多肽片段，属于生物医药技术领域。
背景技术
神经退行性疾病(如阿尔茨海默病，帕金森病等)以特异性神经元丢失为主要特征，是一类进行性发展的疾病。包括阿尔茨海默症、帕金森病等在内的神经退行性疾病大多发生机理复杂，具体病因尚无定论，缺乏有效治愈手段。亟需研究和开发能有效防治神经退行性疾病的方法及药物。
帕金森病是最常见的神经退行性疾病之一，多发于老年人群体。帕金森病最主要的病理改变包括中脑黑质多巴胺能神经元异常退化，及其导致的纹状体多巴胺显著减少和路易小体的形成，临床表现为静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态异常等运动障碍，甚至出现认知障碍等非运动症状。中国帕金森病患者在全球帕金森病高发国家中约占一半，且随着人口老龄化不断加速，帕金森病导致的社会负担也日益加剧。
阿尔茨海默病是最常见的神经退行性疾病，主要临床表现为认知功能和学习障碍、记忆力衰退等。随着人口老龄化不断加速，近年阿尔茨海默病患病人数正在急剧增加，其导致的社会负担也日益加剧，尤其在中国，阿尔茨海默病患者人数已居世界第一，防治阿尔茨海默病药物市场需求巨大。
Dishevelled(DVL)是经典Wnt信号通路中的重要调控因子。哺乳动物体内DVL主要包括DVL-1、DVL-2和DVL-3，它们均包含高度保守的DIX、PDZ和DEP三个基本结构域。本发明的发明人经过大量探索、实验及研究工作，目前已取得与DVL-2有关的研究成果。
发明内容
本发明的主要目的是：根据发明人新近研究成果，针对现有技术存在的问题，提出一种多肽，能应用于制备抗神经退行性疾病药物。同时，还提供该多肽的用途。
本发明解决其技术问题的技术方案如下：
一种多肽，其特征是，所述多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:14之一。
优选地，所述多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQID NO:8之一。
该系列多肽是DVL-2蛋白的特定多肽片段，能应用于制备抗神经退行性疾病药物。
一种多肽，其特征是，由前文所述多肽与细胞穿透肽连接而成，所述细胞穿透肽位于多肽的N端；所述细胞穿透肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:15至SEQ ID NO:47之一。
一种多肽，其特征是，由前文所述多肽经连接肽与细胞穿透肽连接而成，所述连接肽、细胞穿透肽均位于多肽的N端；所述细胞穿透肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:15至SEQ IDNO:47之一，所述连接肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:48至SEQ ID NO:72之一。
前文所述多肽用于制备治疗或预防神经退行性疾病的药物的用途。
其中，所述神经退行性疾病包括阿尔茨海默病或帕金森病。
本发明还提出：
编码前文所述多肽的核酸。
含有前文所述多肽或前文所述核酸的药物组合物。
前文所述药物组合物用于制备治疗或预防神经退行性疾病的药物制剂的用途。
本发明的发明人经过大量探索、实验及研究工作，基于DVL-2进行构效关系分析，设计若干多肽序列并进行活性检测，最终获得具有防治神经退行性疾病的生物学活性的系列多肽。本发明所涉及的系列多肽能治疗或预防神经退行性疾病，具有良好的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例1的结果示意图，A图和B图的纵坐标均为相对细胞存活率。A图中，Control组为对照组，Rotenone组为模型组，Rotenone+peptide(2，5，7，8)组为待测多肽组(待测多肽分别为多肽SEQ ID NO:2，多肽SEQ ID NO:5，多肽SEQ ID NO:7，多肽SEQ IDNO:8)。B图中，Control组为对照组，Rotenone组为模型组，其余实验组为待测多肽组，Rotenone+Tat组中待测多肽为细胞穿透肽SEQ ID NO:15，Rotenone+Tat-peptide(2，5，7，8)组中待测多肽分别为含有多肽SEQ ID NO:2、多肽SEQ ID NO:5、多肽SEQ ID NO:7或多肽SEQ ID NO:8的第二组多肽。
图2为本发明实施例2的结果示意图，Hoechst标记细胞核，呈现蓝色；PI标记凋亡或坏死细胞，呈现红色。图中，Control组为对照组，Rotenone组为模型组，Rotenone+peptide 2组为待测多肽组(待测多肽为多肽SEQ ID NO:2)。
图3为本发明实施例3的结果示意图。图中，Rotenone(-)Peptide 2(-)组为对照组，Rotenone(+)Peptide 2(-)组为模型组，Rotenone(+)Peptide2(+)组为待测多肽组(待测多肽为多肽SEQ ID NO:2)。
图4为本发明实施例4的结果示意图，纵坐标为相对细胞存活率，Control组为对照组，Aβ25-35组为模型组，Aβ25-35+peptide(2，5，7，8)组为待测多肽组(待测多肽分别为多肽SEQ ID NO:2，多肽SEQ ID NO:5，多肽SEQ ID NO:7，多肽SEQ ID NO:8)。
图5为本发明实施例5的结果示意图，Hoechst标记细胞核，呈现蓝色；PI标记凋亡或坏死细胞，呈现红色。图中，Control组为对照组，Aβ25-35组为模型组，Aβ25-35+peptide 2组为待测多肽组(待测多肽为多肽SEQ ID NO:2)。
图6为本发明实施例6的结果示意图。图中，Control组为对照组，MPTP组为模型组，其余实验组为待测多肽组，MPTP+Tat组中待测多肽为细胞穿透肽SEQ ID NO:15，MPTP+Tat-peptide(2，5，7，8)组中待测多肽分别为含有多肽SEQ ID NO:2、多肽SEQ ID NO:5、多肽SEQID NO:7或多肽SEQ ID NO:8的4条多肽。
图7为本发明实施例7的结果示意图。其中，A图为各组实验小鼠黑质中TH表达量的检测，B图为各组实验小鼠纹状体中TH表达量的检测。图中，Con组为对照组，MPTP-Non组为模型组，其余实验组为待测多肽组，MPTP+Tat组中待测多肽为细胞穿透肽SEQ ID NO:15，MPTP+Tat-peptide(2，5，7，8)组中待测多肽分别为含有多肽SEQ ID NO:2、多肽SEQ ID NO:5、多肽SEQ ID NO:7或多肽SEQ ID NO:8的4条多肽。
具体实施方式
下面参照附图并结合实施例对本发明作进一步详细描述。但是本发明不限于所给出的例子。
实施例1
本实施例为检测各多肽对帕金森病样模型神经细胞死亡的影响。
本实施例的待测多肽如下：
(1)第一组多肽：多肽SEQ ID NO:2，多肽SEQ ID NO:5，多肽SEQ ID NO:7，多肽SEQID NO:8。
(2)第二组多肽：①多肽SEQ ID NO:2+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ IDNO:15；②多肽SEQ ID NO:5+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；③多肽SEQID NO:7+连接肽SEQ ID NO:57+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；④多肽SEQ ID NO:8+连接肽SEQID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15。注：细胞穿透肽SEQ ID NO:15即细胞穿透肽Tat。
本实施例的具体实验过程如下：
待测多肽组：SH-SY5Y细胞经过10μM维甲酸诱导分化6天后，选择处于对数生长期的分化后SH-SY5Y细胞，以3×104个/mL的密度接种于96孔板(每孔100μL)，在37℃、5％CO2细胞培养箱中培养。培养24h后加入Rotenone(0.1μM)(注：Rotenone即鱼藤酮)，并加入待测多肽(40μM)，设6个复孔。培养24h后，每孔加入10％培养基体积的5mg/mL MTT溶液，于37℃恒温细胞培养箱内孵育4h，弃去上清液，每孔内加入150μL DMSO后在酶标板振荡器上500r/min振荡10min，使蓝紫色结晶甲臜完全溶解。振荡结束后置酶标仪中以570nm为检测波长，630nm为参比波长，测定各孔的OD值，并计算细胞存活情况。
与上述待测多肽组相比，对照组不加Rotenone和待测多肽，模型组不加待测多肽。
结果如图1所示，与模型组相比，第一组多肽以及第二组多肽均能缓解帕金森病样模型神经细胞死亡，而单独细胞穿透肽Tat则未显示出显著细胞保护作用。
实施例2
本实施例为检测多肽对帕金森病样模型神经细胞凋亡的影响。
本实施例的待测多肽为多肽SEQ ID NO:2。
本实施例的具体实验过程如下：
待测多肽组：SH-SY5Y细胞经过10μM维甲酸诱导分化6天后，选择处于对数生长期的分化后SH-SY5Y细胞，以5×104个/mL的密度接种于6孔板(每孔1000μL)，在37℃、5％CO2细胞培养箱中培养。培养24h后加入Rotenone(0.1μM)，并加入待测多肽(40μM)，设3个复孔。培养24h后，弃去6孔板中培养基，使用PBS缓冲液洗涤细胞3次，每次3min；每孔加入1000μL含有Hoechst 33342(7mM)的培养基于37℃培养箱中孵育25min。PBS缓冲液洗涤细胞2次，每孔加入1000μL含有PI(2mM)的培养基，室温下避光孵育15min。染色完成后，使用PBS缓冲液洗涤细胞3次，洗涤完成后在倒置荧光显微镜下进行观察拍照。
与上述待测多肽组相比，对照组不加Rotenone和待测多肽，模型组不加待测多肽。
结果如图2所示，Hoechst标记细胞核，呈现蓝色；PI标记凋亡或坏死细胞，呈现红色。与模型组相比，多肽SEQ ID NO:2可有效减少帕金森病样模型神经细胞凋亡。
实施例3
本实施例为检测多肽对帕金森病样模型神经细胞病理异常的影响。
本实施例的待测多肽为多肽SEQ ID NO:2。
本实施例的具体实验过程如下：
待测多肽组：SH-SY5Y细胞经过10μM维甲酸诱导分化6天后，选择处于对数生长期的分化后SH-SY5Y细胞，以5×104个/mL的密度接种于6孔板(每孔1000μL)，在37℃、5％CO2细胞培养箱中培养。培养24h后加入Rotenone(0.1μM)，并加入待测多肽(40μM)，设3个复孔。培养24h后提取细胞蛋白并制样，具体过程如下：弃去6孔板中培养基，使用PBS缓冲液洗涤细胞3次，收集孔中细胞于EP管内，加入300μL RIPA裂解液(按1:100的比例加入蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂混合液)，冰上裂解30min。4℃12000r/min离心20min，收集上清，使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度并使用PBS缓冲液将蛋白浓度调节至同一水平，向蛋白溶液中加入1/4总体积的5×SDS上样缓冲液，充分混匀后置于沸水中加热10min，于-20℃冰箱中保存。蛋白样品通过蛋白质免疫印迹法进行分析，具体过程如下：配制SDS-PAGE凝胶，置于电泳槽后，加入电泳缓冲液，将蛋白样品加入上样孔，进行恒压电泳。溴酚蓝条带迁移至胶板底部时停止电泳，使用半干转膜仪将目的蛋白条带转移至PVDF膜上，3％脱脂奶粉封闭2h，采用抗TH抗体于4℃孵育过夜，并使用相对应的辣根过氧化物酶偶联的二抗孵育，最后使用化学发光试剂进行条带曝光。
与上述待测多肽组相比，对照组不加Rotenone和待测多肽，模型组不加待测多肽。
结果如图3所示，与模型组相比，多肽SEQ ID NO:2能增加帕金森病样模型神经细胞的TH表达水平，减轻帕金森病样模型神经细胞病理异常。
实施例4
本实施例为检测各多肽对阿尔茨海默病样模型神经细胞死亡的影响。
本实施例的待测多肽为4条多肽：多肽SEQ ID NO:2，多肽SEQ ID NO:5，多肽SEQID NO:7，多肽SEQ ID NO:8。
本实施例的具体实验过程如下：
待测多肽组：选择处于对数生长期SH-SY5Y细胞，以3×104个/mL的密度接种于96孔板(每孔100μL)，在37℃、5％CO2细胞培养箱中培养。培养24h后加入Aβ25-35(0.05μM)(注：Aβ25-35即β-淀粉样蛋白片段)，并加入待测多肽(40μM)，设6个复孔。培养24h后，每孔加入10％培养基体积的5mg/mL MTT溶液，于37℃恒温细胞培养箱内孵育4h，弃去上清液，每孔内加入150μL DMSO后在酶标板振荡器上500r/min振荡10min，使蓝紫色结晶甲臜完全溶解。振荡结束后置酶标仪中以570nm为检测波长，630nm为参比波长，测定各孔的OD值，并计算细胞存活情况。
与上述待测多肽组相比，对照组不加Aβ25-35和待测多肽，模型组不加待测多肽。
结果如图4所示，与模型组相比，4条多肽均能缓解阿尔茨海默病样模型神经细胞死亡。
实施例5
本实施例为检测多肽对阿尔茨海默病样模型神经细胞凋亡的影响。
本实施例的待测多肽为多肽SEQ ID NO:2。
本实施例的具体实验过程如下：
待测多肽组：选择处于对数生长期的SH-SY5Y细胞，以5×104个/mL的密度接种于6孔板(每孔1000μL)，在37℃、5％CO2细胞培养箱中培养。培养24h后加入Aβ25-35(0.05μM)，并加入待测多肽(40μM)，设3个复孔。培养24h后，弃去6孔板中培养基，使用PBS缓冲液洗涤细胞3次，每次3min；每孔加入1000μL含有Hoechst 33342(7mM)的培养基于37℃培养箱中孵育25min。PBS缓冲液洗涤细胞2次，每孔加入1000μL含有PI(2mM)的培养基，室温下避光孵育15min。染色完成后，使用PBS缓冲液洗涤细胞3次，洗涤完成后在倒置荧光显微镜下进行观察拍照。
与上述待测多肽组相比，对照组不加Aβ25-35和待测多肽，模型组不加待测多肽。
结果如图5所示，Hoechst标记细胞核，呈现蓝色；PI标记凋亡或坏死细胞，呈现红色。与模型组相比，多肽SEQ ID NO:2可有效减少阿尔茨海默病样模型神经细胞凋亡。
实施例6
本实施例为检测各多肽对模型小鼠帕金森病样行为异常的影响。
本实施例的待测多肽为4条多肽：①多肽SEQ ID NO:2+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；②多肽SEQ ID NO:5+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；③多肽SEQ ID NO:7+连接肽SEQ ID NO:57+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；④多肽SEQ IDNO:8+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15。
本实施例的具体实验过程如下：
取8周龄雄性C57BL/6小鼠饲养于温度22℃～24℃、湿度50％、每日光照时间12h的饲养室中，小鼠可自由获得食物和水。实验小鼠随机分为7组：Control组，MPTP组，MPTP+Tat组，MPTP+Tat-peptide 2组，MPTP+Tat-peptide5组，MPTP+Tat-peptide 7组，MPTP+Tat-peptide 8组。第1～6天腹腔注射待测多肽溶液(1μg/g，每日1次)，在第2天腹腔注射MPTP(20mg/kg；间隔2h，共4次)，对照组注射等量的生理盐水。第8天进行旷场实验，行为学实验结束后处死小鼠，进行脑组织采集。
旷场实验装置由旷场反应箱和数据自动收集处理系统两部分组成，小鼠旷场反应箱底部边长50cm，反应箱高度为35cm，内壁涂为浅色调，并用隔板分隔为全等的四个小方格，正上方1～2米处架设一摄像头，其视野可覆盖整个旷场内部。实验在安静的环境下进行。首先打开旷场实验配套软件，按实验要求将参数设置完成后，将小鼠轻柔地放于反应箱底面中心，同时进行摄像和数据的收集。小鼠在反应箱中自由探索环境5min，观察并记录5min内小鼠在旷场中的活动情况。
结果如图6所示，与模型组小鼠相比，4条多肽均能提高帕金森病模型小鼠的自主活动能力和空间探索能力，减轻模型小鼠帕金森病样行为异常，而单独细胞穿透肽Tat则未显示出显著改善作用。
实施例7
本实施例为检测各多肽对帕金森病模型小鼠脑黑质、纹状体组织病理异常的影响。
本实施例的待测多肽为4条多肽：①多肽SEQ ID NO:2+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；②多肽SEQ ID NO:5+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；③多肽SEQ ID NO:7+连接肽SEQ ID NO:57+细胞穿透肽SEQ ID NO:15；④多肽SEQ IDNO:8+连接肽SEQ ID NO:48+细胞穿透肽SEQ ID NO:15。
本实施例的具体实验过程如下：
小鼠饲养以及处理方式同实施例6。处死小鼠后，冰上分离小鼠脑黑质和纹状体，并放置于已称重的EP管中，按照10μL/mg加入RIPA组织裂解液(按1:100的比例加入蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂混合液)。使用组织匀浆器于冰上进行匀浆，并置于涡旋仪上充分振荡裂解，每5min一次，共5次，之后采用高速冷冻离心机于4℃，12000r/min离心10min后取上清液。使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度并使用PBS缓冲液将蛋白浓度调节至同一水平，向蛋白溶液中加入1/4总体积的5×SDS上样缓冲液，充分混匀后置于沸水中加热10min，于-20℃冰箱中保存。蛋白样品通过蛋白质免疫印迹法进行分析，方法同实施例3。
结果如图7所示，与模型组小鼠相比，4条多肽均能提高帕金森病模型小鼠黑质和纹状体中TH的表达量，减轻模型小鼠帕金森病样病理异常，而单独细胞穿透肽Tat则未显示出显著改善作用。
在本发明中，多肽还可以是下表中除SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8外的其它序列。
Figure BDA0003174248590000091
Figure BDA0003174248590000101
细胞穿透肽还可以是下表中除SEQ ID NO:15外的其它序列。
SEQ ID NO 序列
15 YGRKKRRQRRR
16 GRKKRRQRRR
17 GRKKRRQRRRPPQ
18 CYGRKKRRQRRR
19 RKKRRQRRR
20 RRRQRRKKRGY
21 RRRR
22 RRRRRR
23 RRRRRRR
24 RRRRRRRR
25 RRRRRRRRR
26 RRRRRRRRRR
27 RRRRRRRRRRRR
28 RRRRRRRRRRRRRRR
29 RQIKIWFQNRRMKWKK
30 YARAAARQARA
31 LSTAADMQGVVTDGMASGLDKDYLKPDD
32 KETWWETWWTEWSQPKKRKV
33 CVKRGLKLRHVRPRVTRMDV
34 DAATATRGRSAASRPTERPRAPARSASRPRRPVD
35 RGGRLSYSRRRFSTSTGR
36 RRIRPRPPRLPRPRPRPLPFPRPG
37 PIEVCMYREP
38 VPTLK
39 CHHHHHRRRRRRRRRHHHHHC
40 MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV
41 Ac-GLWWRLWWRLRSWFRLWFRA-Cya
42 LLIILRRRIRKQAHAHSK
43 CRWRWKCCKK
44 KWRRKLKKLRPKKKRKV
45 MASIWVGHRG
46 RRRKIKR
47 YGRKKRRQRRRLLRAALRKAAL
连接肽还可以是除SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:57外的其它序列。
Figure BDA0003174248590000102
Figure BDA0003174248590000111
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
<110> 中国药科大学
<120> 多肽及其在制备抗神经退行性疾病药物方面的应用
<160> 14
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Ala Ala Pro Glu Ser Gly Leu Glu Val Arg Asp Arg Met Trp Leu Lys
1 5 10 15
Ile Thr Ile Pro
20
<210> 2
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Lys Ile Thr Ile Pro Asn Ala Phe Leu Gly Ser Asp Val Val Asp Trp
1 5 10 15
Leu Tyr His His
20
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
Trp Leu Tyr His His Val Glu Gly Phe Pro Glu Arg Arg Glu Ala Arg
1 5 10 15
Lys Tyr Ala Ser
20
<210> 4
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
Arg Lys Tyr Ala Ser Gly Leu Leu Lys Ala Gly Leu Ile Arg His Thr
1 5 10 15
Val Asn Lys Ile
20
<210> 5
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
Thr Val Asn Lys Ile Thr Phe Ser Glu Gln Cys Tyr Tyr Val Phe Gly
1 5 10 15
Asp Leu Ser Gly
20
<210> 6
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
Gly Asp Leu Ser Gly Gly Cys Glu Ser Tyr Leu Val Asn Leu Ser Leu
1 5 10 15
Asn Asp Asn Asp
20
<210> 7
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
Leu Asn Asp Asn Asp Gly Ser Ser Gly Ala Ser Asp Gln Asp Thr Leu
1 5 10 15
Ala Pro Leu Pro
20
<210> 8
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
Leu Ala Pro Leu Pro Gly Ala Thr Pro Trp Pro Leu Leu Pro Thr Phe
1 5 10 15
Ser Tyr Gln Tyr
20
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
Phe Ser Tyr Gln Tyr Pro Ala Pro His Pro Tyr Ser Pro Gln Pro Pro
1 5 10 15
Pro Tyr His Glu
20
<210> 10
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
Pro Pro Tyr His Glu Leu Ser Ser Tyr Thr Tyr Gly Gly Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ser Ser Gln His
20
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
Ala Ser Ser Gln His Ser Glu Gly Ser Arg Ser Ser Gly Ser Thr Arg
1 5 10 15
Ser Asp Gly Gly
20
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
Arg Ser Asp Gly Gly Ala Gly Arg Thr Gly Arg Pro Glu Glu Arg Ala
1 5 10 15
Pro Glu Ser Lys
20
<210> 13
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
Ala Pro Glu Ser Lys Ser Gly Ser Gly Ser Glu Ser Glu Pro Ser Ser
1 5 10 15
Arg Gly Gly Ser
20
<210> 14
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
Ser Arg Gly Gly Ser Leu Arg Arg Gly Gly Glu Ala Ser Gly Thr Ser
1 5 10 15
Asp Gly Gly Pro
20

Claims (9)

1. 一种多肽，其特征是，所述多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO: 2。
2. 一种多肽，其特征是，由权利要求1所述多肽与细胞穿透肽连接而成，所述细胞穿透肽位于多肽的N端；所述细胞穿透肽的氨基酸序列为SEQ ID NO: 15至SEQ ID NO: 47之一。
3. 一种多肽，其特征是，由权利要求1所述多肽经连接肽与细胞穿透肽连接而成，所述连接肽、细胞穿透肽均位于多肽的N端；所述细胞穿透肽的氨基酸序列为SEQ ID NO: 15至SEQ ID NO: 47之一，所述连接肽的氨基酸序列为SEQ ID NO: 48至SEQ ID NO: 72之一。
4.权利要求1至3任一项所述多肽用于制备治疗或预防神经退行性疾病的药物的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征是，所述神经退行性疾病是阿尔茨海默病。
6.根据权利要求4所述的用途，其特征是，所述神经退行性疾病是帕金森病。
7.编码权利要求1至3任一项所述多肽的核酸。
8.含有权利要求1至3任一项所述多肽或者权利要求7所述核酸的药物组合物。
9.权利要求8所述药物组合物用于制备治疗或预防神经退行性疾病的药物制剂的用途。
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