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CN112279376A - 一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法 - Google Patents

一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法 Download PDF

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CN112279376A
CN112279376A CN202011012344.6A CN202011012344A CN112279376A CN 112279376 A CN112279376 A CN 112279376A CN 202011012344 A CN202011012344 A CN 202011012344A CN 112279376 A CN112279376 A CN 112279376A
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China
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water
culture
aquaculture
culture medium
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CN202011012344.6A
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王蒙蒙
王宏信
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Yiqi Weiye Beijing Technology Co ltd
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Yiqi Weiye Beijing Technology Co ltd
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Abstract

本发明提供一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,具体步骤如下:步骤一,厌氧硝化;步骤二,好氧硝化;步骤三,光合细菌净化;步骤四,微藻培养净化;步骤五,微生物水质改良剂调节。本发明依次通过厌氧硝化、好氧硝化、光合细菌净化、微藻培养净化和微生物水质改良剂调节五个阶段,能够彻底分解养殖用水有害物质,且能为水产动物提供微量元素,提升水产动物自身免疫力,微生物水质改良剂中既包含有快速提供溶氧的微生物,又含有能分解水体中大分子有机质、残饵粪便等有害物质的微生物,同时还含有能为水产动物提供生产发育所需营养物质的菌株,能够长期保持养殖水处于适宜水产动物生长的水质条件。

Description

一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法
技术领域
本发明涉及水产养殖水净化技术领域,尤其涉及一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法。
背景技术
水是水生生物的生存条件,水质的好坏直接影响水产产量。如何调节好水质,促进水产快速健康生长,是一直困扰着养殖户的问题。目前,大多养殖户通过通过水质改良剂对养殖用水的水质进行调节。
水质改良剂包括物理型水质改良剂、化学型水质改良剂和生物型水质改良剂。物理型水质改良剂主要是通过吸附作用快速将有害物质进行吸附,作用效果缓慢不明显且不易降解。化学型水质改良剂可以与有害物质发生反应从而使其降解,但易形成二次污染。生物型水质改良剂能够抑制致病菌的生长繁殖,修复水体的生态环境。现有微生物制剂中的微生物菌株在大量生长繁殖时耗氧,会导致水体中溶解氧的下降,生长过程中的代谢产物会改变水体环境,对水产动物造成一定程度的影响。
发明内容
本发明旨在解决现有技术的不足,而提供一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法。
本发明为实现上述目的,采用以下技术方案:
一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,具体步骤如下:
步骤一,厌氧硝化,
利用抽水机将水产养殖水抽至化粪池,水中所含的有机物在化粪池中沉淀,形成自然活性污泥,进行厌氧硝化;化粪池首次使用时,向化粪池中按照2.5-3.5kg/m3的剂量添加初始活性污泥,初始活性污泥按重量计包括以下组分:池塘湿底泥2000-2400份、对虾饲料600-800份、蔗糖40-60份、淀粉40-60份、牛肉膏15-25份和乳酸杆菌180-220份、硝化细菌150-200份;
步骤二,好氧硝化,
厌氧硝化2-3周后,利用抽水机将化粪池内的水产养殖水抽至曝气池进行曝气处理,每星期向曝气池中添加1次芽孢杆菌,剂量为10g/m3
步骤三,光合细菌净化,
好氧硝化2-3周后,利用抽水机将曝气池内的水产养殖水抽至光合细菌反应器进行光合菌净化,每星期向光合细菌反应器中添加1次光合细菌,剂量为10g/m3
步骤四,微藻培养净化,
光合细菌净化2-3周后,利用抽水机将光合细菌反应器内的水产养殖水抽至微藻培养池进行微藻培养净化,微藻培养池中投放有微藻,微藻选自小环藻、中肋骨条藻、小球藻和栅藻中的一种或其中多种的组合;
步骤五,微生物水质改良剂调节,
微藻培养净化2-3周后,利用抽水机将微藻培养池内的水产养殖水抽回至养殖池进行正常的水产养殖,养殖期间按75-100mg/m3的剂量施加复合微生物水质改良剂,施加间隔为15-20天。
进一步的,步骤五中的复合微生物水质改良剂为含有枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、环状芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化细菌和反硝化细菌的混合菌株的发酵产物。
进一步的,混合菌株按重量份数计包括:枯草芽孢杆菌8-12份、沼泽红假单胞菌10-13份、巨大芽孢杆菌8-12份、嗜酸乳杆菌4-7份、粪链球菌5-8份、环状芽孢杆菌8-11份、产朊假丝酵母7-10份、硝化细菌4-9份和反硝化细菌5-8份。
进一步的,硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤A,液体培养基的制备,硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:亚硝酸钾1.3份、氯化钠2.0份、硫酸镁晶体0.5份、磷酸氢二钾1.0份、硫酸亚铁晶体0.4份、碳酸钙5.0份、水1000份;pH值为7.0-7.4;
步骤B,富集培养液的制备,取上述硝化细菌的液体培养基200ml,装入内壁具有褶皱的500ml培养瓶中,再加入污染的养殖水20ml,进行通气摇瓶培养,培养时间约为2-3周,制得硝化细菌的富集培养液;
步骤C,分离培养,取上述硝化细菌富集培养液2ml,在无菌操作条件下,加入到硅胶平板培养基内,涂平板,通入无菌空气培养,培养时间约为2-3周;挑取经富集培养的硝化细菌单菌落,接入相应的内壁具有褶皱的500ml培养瓶中并进行通气摇瓶培养,培养瓶内相应培养基的量分别为150-200ml,培养时间为2-3周。
进一步的,反硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤a,液体培养基的制备,反硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:硝酸钾0.4份、硫代硫酸钠晶体1.0份、磷酸氢二钾0.4份、氯化铵0.1份、硫酸镁晶体0.12份、碳酸氢钠0.2份、硫酸亚铁晶体0.002份、水200份;pH值为7.0-7.4;
步骤b,富集培养液的制备,在无菌操作条件下,在100ml无菌大试管中接入上述液体培养基70-80ml,再接入污染养殖水20ml,放入厌氧工作站中培养,温度为30℃,培养时间为8-10天,制得反硝化细菌的富集培养液;
步骤c,分离培养,取上述反硝化细菌富集培养液2ml,放入厌氧工作站,在30℃下培养8-10天,培养基上长出半透明的圆形菌落后,挑取单菌落接入100ml深层液体培养基中,液体培养基中倒立一个杜氏小管,再次放入厌氧工作站,在30℃下培养8-10天。
本发明的有益效果是:本发明依次通过厌氧硝化、好氧硝化、光合细菌净化、微藻培养净化和微生物水质改良剂调节五个阶段,能够彻底分解养殖用水有害物质,且能为水产动物提供微量元素,提升水产动物自身免疫力,微生物水质改良剂中既包含有快速提供溶氧的微生物,又含有能分解水体中大分子有机质、残饵粪便等有害物质的微生物,同时还含有能为水产动物提供生产发育所需营养物质的菌株,能够长期保持养殖水处于适宜水产动物生长的水质条件。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明:
实施例一
一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,具体步骤如下:
步骤一,厌氧硝化,
利用抽水机将水产养殖水抽至化粪池,水中所含的有机物在化粪池中沉淀,形成自然活性污泥,进行厌氧硝化;化粪池首次使用时,向化粪池中按照2.5kg/m3的剂量添加初始活性污泥,初始活性污泥按重量计包括以下组分:池塘湿底泥2000份、对虾饲料600份、蔗糖40份、淀粉40份、牛肉膏15份和乳酸杆菌180份、硝化细菌150份;
步骤二,好氧硝化,
厌氧硝化2周后,利用抽水机将化粪池内的水产养殖水抽至曝气池进行曝气处理,每星期向曝气池中添加1次芽孢杆菌,剂量为10g/m3
步骤三,光合细菌净化,
好氧硝化2周后,利用抽水机将曝气池内的水产养殖水抽至光合细菌反应器进行光合菌净化,每星期向光合细菌反应器中添加1次光合细菌,剂量为10g/m3
步骤四,微藻培养净化,
光合细菌净化2周后,利用抽水机将光合细菌反应器内的水产养殖水抽至微藻培养池进行微藻培养净化,微藻培养池中投放有微藻,微藻选自小环藻、中肋骨条藻、小球藻和栅藻中的一种或其中多种的组合;
步骤五,微生物水质改良剂调节,
微藻培养净化2周后,利用抽水机将微藻培养池内的水产养殖水抽回至养殖池进行正常的水产养殖,养殖期间按75mg/m3的剂量施加复合微生物水质改良剂,施加间隔为15天。
进一步的,步骤五中的复合微生物水质改良剂为含有枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、环状芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化细菌和反硝化细菌的混合菌株的发酵产物。
进一步的,混合菌株按重量份数计包括:枯草芽孢杆菌8份、沼泽红假单胞菌10份、巨大芽孢杆菌8份、嗜酸乳杆菌4份、粪链球菌5份、环状芽孢杆菌8份、产朊假丝酵母7份、硝化细菌4份和反硝化细菌5份。
进一步的,硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤A,液体培养基的制备,硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:亚硝酸钾1.3份、氯化钠2.0份、硫酸镁晶体0.5份、磷酸氢二钾1.0份、硫酸亚铁晶体0.4份、碳酸钙5.0份、水1000份;pH值为7.0;
步骤B,富集培养液的制备,取上述硝化细菌的液体培养基200ml,装入内壁具有褶皱的500ml培养瓶中,再加入污染的养殖水20ml,进行通气摇瓶培养,培养时间约为2周,制得硝化细菌的富集培养液;
步骤C,分离培养,取上述硝化细菌富集培养液2ml,在无菌操作条件下,加入到硅胶平板培养基内,涂平板,通入无菌空气培养,培养时间约为2周;挑取经富集培养的硝化细菌单菌落,接入相应的内壁具有褶皱的500ml培养瓶中并进行通气摇瓶培养,培养瓶内相应培养基的量分别为150ml,培养时间为2周。
进一步的,反硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤a,液体培养基的制备,反硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:硝酸钾0.4份、硫代硫酸钠晶体1.0份、磷酸氢二钾0.4份、氯化铵0.1份、硫酸镁晶体0.12份、碳酸氢钠0.2份、硫酸亚铁晶体0.002份、水200份;pH值为7.0;
步骤b,富集培养液的制备,在无菌操作条件下,在100ml无菌大试管中接入上述液体培养基70ml,再接入污染养殖水20ml,放入厌氧工作站中培养,温度为30℃,培养时间为8天,制得反硝化细菌的富集培养液;
步骤c,分离培养,取上述反硝化细菌富集培养液2ml,放入厌氧工作站,在30℃下培养8天,培养基上长出半透明的圆形菌落后,挑取单菌落接入100ml深层液体培养基中,液体培养基中倒立一个杜氏小管,再次放入厌氧工作站,在30℃下培养8天。
实施例二
一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,具体步骤如下:
步骤一,厌氧硝化,
利用抽水机将水产养殖水抽至化粪池,水中所含的有机物在化粪池中沉淀,形成自然活性污泥,进行厌氧硝化;化粪池首次使用时,向化粪池中按照3.5kg/m3的剂量添加初始活性污泥,初始活性污泥按重量计包括以下组分:池塘湿底泥2400份、对虾饲料800份、蔗糖60份、淀粉60份、牛肉膏25份和乳酸杆菌220份、硝化细菌200份;
步骤二,好氧硝化,
厌氧硝化3周后,利用抽水机将化粪池内的水产养殖水抽至曝气池进行曝气处理,每星期向曝气池中添加1次芽孢杆菌,剂量为10g/m3
步骤三,光合细菌净化,
好氧硝化3周后,利用抽水机将曝气池内的水产养殖水抽至光合细菌反应器进行光合菌净化,每星期向光合细菌反应器中添加1次光合细菌,剂量为10g/m3
步骤四,微藻培养净化,
光合细菌净化3周后,利用抽水机将光合细菌反应器内的水产养殖水抽至微藻培养池进行微藻培养净化,微藻培养池中投放有微藻,微藻选自小环藻、中肋骨条藻、小球藻和栅藻中的一种或其中多种的组合;
步骤五,微生物水质改良剂调节,
微藻培养净化3周后,利用抽水机将微藻培养池内的水产养殖水抽回至养殖池进行正常的水产养殖,养殖期间按100mg/m3的剂量施加复合微生物水质改良剂,施加间隔为20天。
进一步的,步骤五中的复合微生物水质改良剂为含有枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、环状芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化细菌和反硝化细菌的混合菌株的发酵产物。
进一步的,混合菌株按重量份数计包括:枯草芽孢杆菌12份、沼泽红假单胞菌13份、巨大芽孢杆菌12份、嗜酸乳杆菌7份、粪链球菌8份、环状芽孢杆菌11份、产朊假丝酵母10份、硝化细菌9份和反硝化细菌8份。
进一步的,硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤A,液体培养基的制备,硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:亚硝酸钾1.3份、氯化钠2.0份、硫酸镁晶体0.5份、磷酸氢二钾1.0份、硫酸亚铁晶体0.4份、碳酸钙5.0份、水1000份;pH值为7.4;
步骤B,富集培养液的制备,取上述硝化细菌的液体培养基200ml,装入内壁具有褶皱的500ml培养瓶中,再加入污染的养殖水20ml,进行通气摇瓶培养,培养时间约为3周,制得硝化细菌的富集培养液;
步骤C,分离培养,取上述硝化细菌富集培养液2ml,在无菌操作条件下,加入到硅胶平板培养基内,涂平板,通入无菌空气培养,培养时间约为3周;挑取经富集培养的硝化细菌单菌落,接入相应的内壁具有褶皱的500ml培养瓶中并进行通气摇瓶培养,培养瓶内相应培养基的量分别为200ml,培养时间为3周。
进一步的,反硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤a,液体培养基的制备,反硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:硝酸钾0.4份、硫代硫酸钠晶体1.0份、磷酸氢二钾0.4份、氯化铵0.1份、硫酸镁晶体0.12份、碳酸氢钠0.2份、硫酸亚铁晶体0.002份、水200份;pH值为7.4;
步骤b,富集培养液的制备,在无菌操作条件下,在100ml无菌大试管中接入上述液体培养基80ml,再接入污染养殖水20ml,放入厌氧工作站中培养,温度为30℃,培养时间为10天,制得反硝化细菌的富集培养液;
步骤c,分离培养,取上述反硝化细菌富集培养液2ml,放入厌氧工作站,在30℃下培养10天,培养基上长出半透明的圆形菌落后,挑取单菌落接入100ml深层液体培养基中,液体培养基中倒立一个杜氏小管,再次放入厌氧工作站,在30℃下培养10天。
实施例三
一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,具体步骤如下:
步骤一,厌氧硝化,
利用抽水机将水产养殖水抽至化粪池,水中所含的有机物在化粪池中沉淀,形成自然活性污泥,进行厌氧硝化;化粪池首次使用时,向化粪池中按照3kg/m3的剂量添加初始活性污泥,初始活性污泥按重量计包括以下组分:池塘湿底泥2200份、对虾饲料700份、蔗糖560份、淀粉50份、牛肉膏20份和乳酸杆菌190份、硝化细菌170份;
步骤二,好氧硝化,
厌氧硝化2周后,利用抽水机将化粪池内的水产养殖水抽至曝气池进行曝气处理,每星期向曝气池中添加1次芽孢杆菌,剂量为10g/m3
步骤三,光合细菌净化,
好氧硝化3周后,利用抽水机将曝气池内的水产养殖水抽至光合细菌反应器进行光合菌净化,每星期向光合细菌反应器中添加1次光合细菌,剂量为10g/m3
步骤四,微藻培养净化,
光合细菌净化3周后,利用抽水机将光合细菌反应器内的水产养殖水抽至微藻培养池进行微藻培养净化,微藻培养池中投放有微藻,微藻选自小环藻、中肋骨条藻、小球藻和栅藻中的一种或其中多种的组合;
步骤五,微生物水质改良剂调节,
微藻培养净化3周后,利用抽水机将微藻培养池内的水产养殖水抽回至养殖池进行正常的水产养殖,养殖期间按80mg/m3的剂量施加复合微生物水质改良剂,施加间隔为18天。
进一步的,步骤五中的复合微生物水质改良剂为含有枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、环状芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化细菌和反硝化细菌的混合菌株的发酵产物。
进一步的,混合菌株按重量份数计包括:枯草芽孢杆菌9份、沼泽红假单胞菌12份、巨大芽孢杆菌9份、嗜酸乳杆菌5份、粪链球菌6份、环状芽孢杆菌9份、产朊假丝酵母8份、硝化细菌6份和反硝化细菌6份。
进一步的,硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤A,液体培养基的制备,硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:亚硝酸钾1.3份、氯化钠2.0份、硫酸镁晶体0.5份、磷酸氢二钾1.0份、硫酸亚铁晶体0.4份、碳酸钙5.0份、水1000份;pH值为7.2;
步骤B,富集培养液的制备,取上述硝化细菌的液体培养基200ml,装入内壁具有褶皱的500ml培养瓶中,再加入污染的养殖水20ml,进行通气摇瓶培养,培养时间约为2周,制得硝化细菌的富集培养液;
步骤C,分离培养,取上述硝化细菌富集培养液2ml,在无菌操作条件下,加入到硅胶平板培养基内,涂平板,通入无菌空气培养,培养时间约为2周;挑取经富集培养的硝化细菌单菌落,接入相应的内壁具有褶皱的500ml培养瓶中并进行通气摇瓶培养,培养瓶内相应培养基的量分别为180ml,培养时间为3周。
进一步的,反硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤a,液体培养基的制备,反硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:硝酸钾0.4份、硫代硫酸钠晶体1.0份、磷酸氢二钾0.4份、氯化铵0.1份、硫酸镁晶体0.12份、碳酸氢钠0.2份、硫酸亚铁晶体0.002份、水200份;pH值为7.1;
步骤b,富集培养液的制备,在无菌操作条件下,在100ml无菌大试管中接入上述液体培养基75ml,再接入污染养殖水20ml,放入厌氧工作站中培养,温度为30℃,培养时间为9天,制得反硝化细菌的富集培养液;
步骤c,分离培养,取上述反硝化细菌富集培养液2ml,放入厌氧工作站,在30℃下培养9天,培养基上长出半透明的圆形菌落后,挑取单菌落接入100ml深层液体培养基中,液体培养基中倒立一个杜氏小管,再次放入厌氧工作站,在30℃下培养9天。
本发明依次通过厌氧硝化、好氧硝化、光合细菌净化、微藻培养净化和微生物水质改良剂调节五个阶段,能够彻底分解养殖用水有害物质,且能为水产动物提供微量元素,提升水产动物自身免疫力,微生物水质改良剂中既包含有快速提供溶氧的微生物,又含有能分解水体中大分子有机质、残饵粪便等有害物质的微生物,同时还含有能为水产动物提供生产发育所需营养物质的菌株,能够长期保持养殖水处于适宜水产动物生长的水质条件。
上面结合具体实施例对本发明进行了示例性描述,显然本发明具体实现并不受上述方式的限制,只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进,或未经改进直接应用于其它场合的,均在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,其特征在于,具体步骤如下:
步骤一,厌氧硝化,
利用抽水机将水产养殖水抽至化粪池,水中所含的有机物在化粪池中沉淀,形成自然活性污泥,进行厌氧硝化;化粪池首次使用时,向化粪池中按照2.5-3.5kg/m3的剂量添加初始活性污泥,初始活性污泥按重量计包括以下组分:池塘湿底泥2000-2400份、对虾饲料600-800份、蔗糖40-60份、淀粉40-60份、牛肉膏15-25份和乳酸杆菌180-220份、硝化细菌150-200份;
步骤二,好氧硝化,
厌氧硝化2-3周后,利用抽水机将化粪池内的水产养殖水抽至曝气池进行曝气处理,每星期向曝气池中添加1次芽孢杆菌,剂量为10g/m3
步骤三,光合细菌净化,
好氧硝化2-3周后,利用抽水机将曝气池内的水产养殖水抽至光合细菌反应器进行光合菌净化,每星期向光合细菌反应器中添加1次光合细菌,剂量为10g/m3
步骤四,微藻培养净化,
光合细菌净化2-3周后,利用抽水机将光合细菌反应器内的水产养殖水抽至微藻培养池进行微藻培养净化,微藻培养池中投放有微藻,微藻选自小环藻、中肋骨条藻、小球藻和栅藻中的一种或其中多种的组合;
步骤五,微生物水质改良剂调节,
微藻培养净化2-3周后,利用抽水机将微藻培养池内的水产养殖水抽回至养殖池进行正常的水产养殖,养殖期间按75-100mg/m3的剂量施加复合微生物水质改良剂,施加间隔为15-20天。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,其特征在于,步骤五中的复合微生物水质改良剂为含有枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、环状芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化细菌和反硝化细菌的混合菌株的发酵产物。
3.根据权利要求2所述的复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,其特征在于,混合菌株按重量份数计包括:枯草芽孢杆菌8-12份、沼泽红假单胞菌10-13份、巨大芽孢杆菌8-12份、嗜酸乳杆菌4-7份、粪链球菌5-8份、环状芽孢杆菌8-11份、产朊假丝酵母7-10份、硝化细菌4-9份和反硝化细菌5-8份。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,其特征在于,硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤A,液体培养基的制备,硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:亚硝酸钾1.3份、氯化钠2.0份、硫酸镁晶体0.5份、磷酸氢二钾1.0份、硫酸亚铁晶体0.4份、碳酸钙5.0份、水1000份;pH值为7.0-7.4;
步骤B,富集培养液的制备,取上述硝化细菌的液体培养基200ml,装入内壁具有褶皱的500ml培养瓶中,再加入污染的养殖水20ml,进行通气摇瓶培养,培养时间约为2-3周,制得硝化细菌的富集培养液;
步骤C,分离培养,取上述硝化细菌富集培养液2ml,在无菌操作条件下,加入到硅胶平板培养基内,涂平板,通入无菌空气培养,培养时间约为2-3周;挑取经富集培养的硝化细菌单菌落,接入相应的内壁具有褶皱的500ml培养瓶中并进行通气摇瓶培养,培养瓶内相应培养基的量分别为150-200ml,培养时间为2-3周。
5.根据权利要求1-3中任意一项所述的复合菌剂调节水产养殖水水质的方法,其特征在于,反硝化细菌的培养方法具体如下:
步骤a,液体培养基的制备,反硝化细菌的液体培养基组分按重量份记为:硝酸钾0.4份、硫代硫酸钠晶体1.0份、磷酸氢二钾0.4份、氯化铵0.1份、硫酸镁晶体0.12份、碳酸氢钠0.2份、硫酸亚铁晶体0.002份、水200份;pH值为7.0-7.4;
步骤b,富集培养液的制备,在无菌操作条件下,在100ml无菌大试管中接入上述液体培养基70-80ml,再接入污染养殖水20ml,放入厌氧工作站中培养,温度为30℃,培养时间为8-10天,制得反硝化细菌的富集培养液;
步骤c,分离培养,取上述反硝化细菌富集培养液2ml,放入厌氧工作站,在30℃下培养8-10天,培养基上长出半透明的圆形菌落后,挑取单菌落接入100ml深层液体培养基中,液体培养基中倒立一个杜氏小管,再次放入厌氧工作站,在30℃下培养8-10天。
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