CN112225724B

CN112225724B - 苯并咪唑类化合物激酶抑制剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112225724B
Application number: CN202011082470.9A
Authority: CN
Inventors: 刘世强; 周远峰; 吴雪松; 包如迪
Original assignee: Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd; Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd; Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd
Priority date: 2016-09-07
Filing date: 2017-09-06
Publication date: 2022-04-29
Anticipated expiration: 2037-09-06
Also published as: WO2018045956A1; CN112225724A; CN109952295A; CN109952295B; WO2018045957A1; CN109963842A; CN112250669A; TW201811771A; CN112250669B; CN109963842B; TWI765908B

Abstract

本申请提供一种苯并咪唑类化合物激酶抑制剂及其制备方法和应用。具体地，提供一种通式(I)所示的化合物、其制备方法及含有该化合物的药物组合物，及其作为苯并咪唑类化合物激酶抑制剂在制备预防和/或治疗癌症或肿瘤相关疾病特别是膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌、胃肠道间质瘤或前列腺肿瘤等疾病的药物中的用途。

Description

苯并咪唑类化合物激酶抑制剂及其制备方法和应用

本申请是申请号为201780050147.3，申请日为2017年9月6日，发明名称为“苯并咪唑类化合物激酶抑制剂及其制备方法和应用”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于药物开发领域，具体涉及一种苯并咪唑类化合物激酶抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)是一类丝氨酸(Ser)/苏氨酸(Thr)激酶，该家族包含13个成员，分别为cyclin分为A-L。不同的CDK和细胞周期素(cyclin)形成CDK-cyclin复合物，通过CDK激酶活性，催化不同底物磷酸化，启动DNA合成，实现对细胞周期不同时相的推进和转化；调控基因转录，参与细胞的生长、增殖、休眠或者进入凋亡。因此，CDKs在所有细胞，包括肿瘤细胞和正常细胞的增殖和死亡调控中具有重要功能。其中，CDK4/6-Cyclin D复合物在细胞从G1期到S期的转化中具有重要作用。在G1期，CDK4/6与cyclin D结合后，使包括视网膜母细胞瘤蛋白(Retinoblastoma protein,Rb)在内的一系列底物磷酸化。Rb磷酸化后释放与其结合并被其抑制的蛋白，主要是转录因子E2F等，E2F激活并转录进入S期所必须的一些基因，促进细胞G1/S的转化。研究发现，CDK4/6特异性的激活与一些肿瘤的增殖密切相关，cyclinD–CDK4/6–INK4–Rb通路的异常普遍存在。表现为：(1)p16INK4a基因缺失，点突变，或者DNA甲基化导致p16INK4a失活；(2)CDK4基因扩增或者点突变(R24C)，失去和p16INK4a结合能力；(3)cyclinD1因为基因重排或者基因扩增而过度表达。这条通路的改变，加速了G1期进程，使得肿瘤细胞增殖加快而获得生存优势。因此，对其的干预成为一种治疗策略，CDK4/6因此成为抗肿瘤的靶点之一。

辉瑞的Palbociclib(PD0332991)是第一个FDA批准上市治疗乳腺癌的CDK4/6小分子抑制剂。接着，诺华ribociclib(LEE011)于2017年3月获批与芳香化酶抑制剂联合治疗。礼来Abemaciclib(LY2835219)等在内的一些化合物处于临床研究，而且均表现不错的治疗效果。除了乳腺癌外，研究表明,选择性CDK4/6抑制剂在卵巢癌、非小细胞肺癌、B细胞淋巴瘤、肝癌、神经胶质瘤、结肠癌、多发性骨髓瘤等多种肿瘤中均具有很好的抗肿瘤活性。因此，开发新的CDK4/6的小分子抑制剂，成为治疗这些肿瘤的新的有效方法，激励着一代代科学家们为此不断的做出努力。

公开的选择性抑制CDK4/6的抑制剂专利申请包括WO2004065378、WO2012101013、WO2016192630、WO2016015604和WO2016015604等。

CDK4/6抑制剂作为药物在癌症或肿瘤治疗中具有良好的应用前景，本发明将提供一种新型结构的高选择性的CDK4/6抑制剂，并发现具有此类结构的化合物表现出优异的效果和作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其中通式(I)所示的化合物结构如下：

其中：

L为键、-C(O)-或-C(O)NH-；

环A为杂环基，其中所述的杂环基选自单环杂环基、螺环杂环基、稠环杂环基和桥环杂环基；

R选自氢原子、氘原子或卤素；

R₁选自氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₃、-(CH₂)_nSR₃、-(CH₂)_nC(O)R₃、-(CH₂)_nC(O)OR₃、-(CH₂)_nS(O)_mR₃、-(CH₂)_nNR₄R₅、-(CH₂)_nC(O)NR₄R₅、-(CH₂)_nC(O)NHR₄、-(CH₂)_nNR₄C(O)R₅和-(CH₂)_nNR₄S(O)_mR₅，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤代烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₆、-SR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆、-(CH₂)_nC(O)OR₆、-(CH₂)_nS(O)_mR₆、-(CH₂)_nNR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NHR₇、-(CH₂)_nNR₇C(O)R₈和-(CH₂)_nNR₇S(O)_mR₈中的一个或多个取代基所取代；

R₂相同或不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、氨基烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氨基、氧代基、硝基、羟基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₃、-(CH₂)_nSR₃、-(CH₂)_nC(O)R₃、-(CH₂)_nC(O)OR₃、-(CH₂)_nS(O)_mR₃、-(CH₂)_nNR₄R₅、-(CH₂)_nC(O)NR₄R₅、-(CH₂)_nC(O)NHR₄、-(CH₂)_nNR₄C(O)R₅和-(CH₂)_nNR₄S(O)_mR₅，其中所述的烷基、氘代烷基、卤代烷基、氨基烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤代烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₆、-(CH₂)_nSR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆、-(CH₂)_nC(O)OR₆、-(CH₂)_nS(O)_mR₆、-(CH₂)_nNR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NHR₇、-(CH₂)_nNR₇C(O)R₈和-(CH₂)_nNR₇S(O)_mR₈中的一个或多个取代基所取代；

R₃选自氢原子、氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、羟基、氨基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₆、-(CH₂)_nSR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆、-(CH₂)_nC(O)OR₆、-(CH₂)_nS(O)_mR₆、-(CH₂)_nNR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NHR₇、-(CH₂)_nNR₇C(O)R₈和-(CH₂)_nNR₇S(O)_mR₈中的一个或多个取代基所取代；

R₄和R₅相同或不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)_nOR₆、-(CH₂)_nSR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆、-(CH₂)_nC(O)OR₆、-(CH₂)_nS(O)_mR₆、-(CH₂)_nNR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NHR₇、-(CH₂)_nNR₇C(O)R₈和-(CH₂)_nNR₇S(O)_mR₈，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基、-(CH₂)_nOR₆、-(CH₂)_nSR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆、-(CH₂)_nC(O)OR₆、-(CH₂)_nS(O)_mR₆、-(CH₂)_nNR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NR₇R₈、-(CH₂)_nC(O)NHR₇、-(CH₂)_nNR₇C(O)R₈和-(CH₂)_nNR₇S(O)_mR₈中的一个或多个取代基所取代；

R₆选自氢原子、氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、羟基、氨基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的一个或多个取代基所取代；

R₇和R₈相同或不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、羟基、氨基、酯基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自氘原子、烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、酯基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

x为0、1、2、3、4或5的整数；

m为0、1或2的整数；且

n为0、1、2、3、4或5的整数。

在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(II)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：

B选自3-8元单环杂环基、6-12元螺环杂环基、6-12元稠环杂环基或6-12元桥环杂环基；优选3-8元单环杂环基；

L为键或-C(O)-；

R、R₁、R₂和x如权利要求(II)所述。

在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(II)所示的化合物，其为通式(III)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：环B、R、R₁、R₂和x如通式(II)所述。

在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(II)所示的化合物，其为通式(IV)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：环B、R、R₁、R₂和x如通式(II)所述。

在本发明的一个优选实施例方案中，其为通式(V)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：

M为CR₂R₂、NR₂或O；

R为氢原子或卤素，其中所述的卤素优选氟原子；

R₁为烷基或卤素，其中所述的烷基为C_1-6烷基，优选C_1-3烷基；

R₂相同或不同，且各自独立地选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6氨基烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、卤素、氨基、氧代基、硝基、羟基、氰基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、-(CH₂)_nOR₃和-(CH₂)_nNR₄R₅，其中所述的C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6氨基烷氧基、C_3-8环烷基和3-8元杂环基任选进一步被选自C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、卤素、氨基、氰基、羟基、烯基、炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、C_1-6羟烷基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、-(CH₂)_n-、-(CH₂)_nOR₆和-(CH₂)_nNR₇R₈中的一个或多个取代基所取代；

或者两个R₂相互连接，形成一个3-10元的环烷基或者杂环基，其中所述的3-8元的环烷基或者杂环基任选进一步被一个或者多个C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6氨基烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、卤素、氨基、氧代基、羟基、氰基和C_3-8环烷基的取代基取代；优选形成5-8元环烷基或者杂环基；且

y为0、1、2或3的整数；

R₃～R₈、n和x如通式(I)所述。

其中：

M选自CHR₂或NR₂；

R₂选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6氨基烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、卤素、氨基、氧代基、羟基、氰基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、-(CH₂)_nOR₃和-(CH₂)_nNR₄R₅，其中所述的C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_1-6氨基烷氧基、C_3-8环烷基和3-8元杂环基任选进一步被选自C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、卤素、氨基、氰基、羟基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、C_1-6羟烷基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、-(CH₂)_n-、-(CH₂)_nOR₆和-(CH₂)_nNR₇R₈中的一个或多个取代基所取代；

R、R₁、R₃～R₈、x、n和y如通式(V)所述。

在本发明的一个优选实施例方案中，其为通式(VI)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：

R₄和R₅各自独立地选自氢原子、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-8环烷基、-(CH₂)_nOR₆、-(CH₂)_nC(O)R₆，其中所述的C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-8环烷基任选进一步被选自C_1-6烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、C_1-6烷氧基、C_1-6羟烷基和C_1-6环烷基中的一个或多个取代基所取代；

或者R₄和R₅形成一个3-8元的杂环基，其中所述的3-8元的杂环基任选进一步被选自C_1-6烷基、-(CH₂)n-、卤素、羟基、氨基、氰基、C_1-6烷氧基、C_1-6羟烷基和C_1-6环烷基中的一个或多个取代基所取代；优选R₄和R₅形成的杂环基是4-6元；

R、R₁和n如通式(V)所述。

在本发明的一个优选实施例方案中，所示各通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R选自氢原子和卤素；卤素优选氟。

在本发明的一个优选实施例方案中，所示各通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₁选自C_1-8烷基和卤素，其中所述的C_1-8烷基，优选C_1-6烷基，更优选C_1-3烷基；最优选甲基，其中所述的卤素优选氟。

在本发明的一个优选实施例方案中，所示各通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₂选自氢原子、C_1-8烷基、C_1-8卤代烷基、C_1-8烷氧基、C_3-8环烷基、C_2-6烯基、卤素、氧代基、-(CH₂)_nNR₄R₅和3-10杂环基，其中所述的C_1-8烷基、C_1-8卤代烷基、C_1-8烷氧基、C_3-8环烷基和3-10元杂环基任选进一步被选自卤素、羟基、氰基、C_1-8烷基、-(CH₂)_nOR₆和C_1-8烷氧基中的一个或多个取代基所取代；优选C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、氧代基、-(CH₂)_nNR₄R₅和3-6杂环基，其中所述的C_1-6烷基任选进一步被选自卤素、羟基和氰基中的一个或多个取代基所取代；所述的C_1-6烷基更优选C_1-3烷基。

在本发明的一个优选实施例方案中，所示各通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₄和R₅相同或不同，且各自独立地选自氢原子、C_1-8烷基、C_1-8卤代烷基、C_3-8环烷基、-(CH₂)_nC(O)R₆和C_1-8烷氧基，其中所述的C_1-8烷基、C_1-8卤代烷基、C_3-8环烷基和C_1-8烷氧基任选进一步被选自卤素、羟基、氰基、C_1-8烷基、C_3-8环烷基、-(CH₂)_nOR₆和C_1-8烷氧基中的一个或多个取代基所取代；优选C_1-6烷基和C_3-6环烷基，其中所述的C_1-6烷基和C_3-6环烷基任选进一步被选自卤素、羟基、氰基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和-(CH₂)_nOR₆中的一个或多个取代基所取代；其中所述的C_1-6烷基更优选C_1-3烷基；R₆选自氢原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；优选C_1-3烷基和C_1-3烷氧基。

在本发明的一个优选实施例方案中，任一所示的通式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：

通式化合物(V-A)和通式化合物(V-B)偶联后得到通式(I)化合物，该通式(I)化合物任选进一步反应，或进一步脱保护基得到不同的通式(I)化合物，其中偶联反应中催化试剂优选Pd₂(dba)₃和Xantphos试剂；

其中：

X为卤素；优选氯；

环A、L、R、R₁、R₂和x如通式(I)所述。。

本发明还涉及一种治疗预防和/或治疗预防CDK4/6介导的病理学特征的疾病的方法，其包括向患者施用治疗有效剂量的通式(I)所示的化合物其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在制备用于治疗和/或预防由CDK激酶4和/或6介导的癌症或肿瘤相关疾病的药物中的应用。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在制备治疗癌症或肿瘤相关药物中的应用，其中所述癌症或肿瘤相关疾病选自脑瘤、肺癌、肝癌、胃癌、口腔癌、头颈癌、肠癌或直肠癌、结肠癌、肾癌、食管腺癌、食管鳞状细胞癌、鳞状上皮细胞癌、甲状腺癌、骨癌、皮肤癌、非小细胞肺癌、原位癌、淋巴瘤、神经纤维瘤、成神经细胞瘤、肥大细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、胶质瘤、肉瘤或脂肪肉瘤、胶质母细胞瘤、膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌、胃肠道间质瘤或前列腺肿瘤；优选自膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌、胃肠道间质瘤或前列腺肿瘤。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在制备治疗癌症或肿瘤相关疾病的方法，其包括向患者施用治疗有效剂量的通式(I)所示的化合物其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物，其中所述癌症或肿瘤相关疾病选自脑瘤、肺癌、肝癌、胃癌、口腔癌、头颈癌、肠癌或直肠癌、结肠癌、肾癌、食管腺癌、食管鳞状细胞癌、鳞状上皮细胞癌、甲状腺癌、骨癌、皮肤癌、非小细胞肺癌、原位癌、淋巴瘤、神经纤维瘤、成神经细胞瘤、肥大细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、胶质瘤、肉瘤或脂肪肉瘤、胶质母细胞瘤、膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌、胃肠道间质瘤或前列腺肿瘤；优选自膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌、胃肠道间质瘤或前列腺肿瘤。

作为更进一步优选的制备治疗乳腺癌相关疾病的方法，所述乳腺癌包括：在绝经后女性雌激素受体阳性和/或人表皮生长因子受体2阴性的局部晚期或转移性乳腺癌。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，一种药用组合物，其包括治疗有效剂量的任一所示的通式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

发明的详细说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的烷基，更优选1至6个碳原子的烷基，最更优选1至3个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基，本发明优选甲基、乙基、异丙基、叔丁基、卤代烷基、氘代烷基、烷氧基取代的烷基和羟基取代的烷基。

术语“亚烷基”是指烷基的一个氢原子进一步被取代，例如：“亚甲基”指-CH₂-、“亚乙基”指-(CH₂)₂-、“亚丙基”指-(CH₂)₃-、“亚丁基”指-(CH₂)₄-等。术语“烯基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上定义的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至8个碳原子，最优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基，优选环丙基、环丁基、环己基、环戊基和环庚基。

术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：

也包含单螺环烷基与杂环烷基共用螺原子的螺环烷基，非限制性实例包括：

术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：

术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：

所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；进一步优选包含3至10个环原子；更优选包含3至8个环原子；最优选包含6至10个环原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选哌啶基和

多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为6至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：

术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为6至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：

术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为6至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：

所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：

等。

杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，更优选为5元或6元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为三唑基、噻吩基、咪唑基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有选三唑基、吡咯基、噻吩基、噻唑基和嘧啶基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：

杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。

“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。

“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。

“羟基”指-OH基团。

“卤素”指氟、氯、溴或碘。

“氨基”指-NH₂。

“氰基”指-CN。

“硝基”指-NO₂。

“羧基”指-C(O)OH。

“氧代基”指

例如氧代哌啶基，

“THF”指四氢呋喃。

“EtOAc”指乙酸乙酯。

“MeOH”指甲醇。

“DMF”指N、N-二甲基甲酰胺。

“DIPEA”指二异丙基乙胺。

“TFA”指三氟乙酸。

“MeCN”指乙晴。

“DMA”指N,N-二甲基乙酰胺。

“Et₂O”指乙醚。

“DCE”指1,2二氯乙烷。

“DIPEA”指N，N-二异丙基乙胺。

“NBS”指N-溴代琥珀酰亚胺。

“NIS”指N-碘代丁二酰亚胺。

“Cbz-Cl”指氯甲酸苄酯。

“Pd₂(dba)₃”指三(二亚苄基丙酮)二钯。

“Dppf”指1,1’-双二苯基膦二茂铁。

“HATU”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯。

“KHMDS”指六甲基二硅基胺基钾。

“LiHMDS”指双三甲基硅基胺基锂。

“MeLi”指甲基锂。

“n-BuLi”指正丁基锂。

“NaBH(OAc)₃”指三乙酰氧基硼氢化钠。

“X选自A、B、或C”、“X选自A、B和C”、“X为A、B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A、B、C中的任意一种或几种。

“立体异构”包含几何异构(顺反异构)、旋光异构、构象异构三类。

本发明所述的氢原子均可被其同位素氘所取代，本发明涉及的实施例化合物中的任一氢原子也均可被氘原子取代。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

具体实施方式

以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例

本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，氘代甲醇(CD₃OD)和氘代氯仿(CDCl₃)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

液质联用色谱LC-MS的测定用Agilent 1200Infinity Series质谱仪。HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，TLC采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。

本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。

在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。

实施例1

1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

第一步：叔-丁基4-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯的制备

将6-氯-2-甲基尼古丁酸(0.7g,4.1mmol)，叔-丁基1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯(1.0g,4.9mmol)，TEA(1.2g,12.2mmol)溶于CH₂Cl₂(15mL)中，加入HATU(1.87g,4.9mmol)，室温搅拌反应两小时。反应液用CH₂Cl₂(30mL)稀释后用NaHCO₃溶液(30mL),饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析[洗脱剂:CH₂Cl₂～CH₂Cl₂/MeOH(10:1)]得产品叔-丁基4-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯(1.4g,产率96％)。

MS m/z(ESI):354.1[M+H]⁺。

第二步：5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺的制备

4-氟-1-异丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(2.0g,6.3mmol)、4-氯-5-氟嘧啶-2-胺(0.93g,6.3mmol)、Pd(dppf)Cl₂(0.4g,0.6mmol)、碳酸钾(2.61g,18.9mmol)于二氧六环/H₂O(4/1，50mL)的混合溶液中氮气保护下回流5h，冷却至室温浓缩除去有机溶剂，加水稀释，CH₂Cl₂(30mL*3)萃取，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得到产物5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(1.8g,产率94.4％)。

MS m/z(ESI):304.1[M+H]⁺。

第三步：叔-丁基4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯的制备

化合物5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(1.2g，4.0mmol)和化合物叔-丁基4-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯(1.7g,4.8mmol)溶于二氧六环(40mL)，然后依次加入碳酸铯(3.9g,11.9mmol)，Pd₂(dba)₃(0.2g，0.22mmol)，Xantphos(0.24g,0.44mmol)，置换氮气三次，搅拌回流过夜。冷却过滤，浓缩，柱层析分离[DCM～DCM/MeOH(10:1)]得到化合物叔-丁基4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯(2g,产率81％)。

MS m/z(ESI):621.3[M+H]⁺。

第四步：1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

叔-丁基-4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-羧酸酯(2g,3.2mmol)溶于CH₂Cl₂(30mL)，冷却至0℃，滴加三氟乙酸(10mL)，滴加完毕后室温搅拌2h，浓缩后的粗产物(1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的三氟乙酸盐(4g,产率99％)，粗产物无需进一步纯化可直接用于下一步反应。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.98(d,J＝3.2Hz,1H),8.61(s,1H),8.36(d,J＝9.0Hz,1H),8.24(d,J＝11.1Hz,1H),7.61(d,J＝8.8Hz,1H),5.18(dt,J＝13.8,7.1Hz,1H),4.07-3.84(m,2H),3.62-3.52(m,3H),3.43(m,3H),3.00(s,3H),2.78(s,3H),2.21(d,J＝43.5Hz,2H),1.84(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.2,-143.0.

MS m/z(ESI):521.2[M+H]⁺.

实施例2

1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-4-(甲基氨基)哌啶-2-酮的制备

第一步：(1-(6-氯-2-甲基吡啶-3-基)-2-氧代哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备

3-溴-6-氯-2-甲基吡啶(200mg,0.969mmol)、(2-氧代哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(249mg,1.162mmol)、Pd₂(dba)₃(89mg,0.0972mmol)、Xantphos(112mg,0.194mmol)、碳酸铯(947mg,2.907mmol)于二氧六环(10mL)中100℃氮气保护下搅拌过夜，冷却，浓缩后柱层析得到产物(31mg,收率9.4％)。

MS m/z(ESI):340.1,342.1[M+H]⁺。

第二步：(1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-2-羰基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备

5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(28mg,0.0923mmol)、(1-(6-氯-2-甲基吡啶-3-基)-2-氧代哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(31mg,0.0912mmol)、Pd₂(dba)₃(8.4mg,0.00917mmol)、Xantphos(10.6mg,0.0183mmol)、碳酸铯(89mg,0.273mmol)于二氧六环(10mL)中100℃氮气保护下搅拌5h，冷却，浓缩后柱层析得到产物(19.6mg,收率35.0％)。

MS m/z(ESI):607.2[M+H]⁺。

第三步：(1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-2-羰基哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备

(1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-2-羰基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(19.6mg,0.0323mmol)、60％NaH(1.6mg,0.0400mmol)于THF(2mL)中搅拌，加入碘甲烷(9mg,0.0634mmol)，室温搅拌过夜，浓缩后柱层析得到产物(12mg,产率59.8％)。

MS m/z(ESI):621.3[M+H]⁺。

第四步：1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-4-(甲基氨基)哌啶-2-酮的制备

上一步产物(12mg,0.0193mmol)溶于二氯甲烷(2mL)，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌3h，浓缩至干，柱层析分离得到产物(9.1mg,产率90.4％)。

¹H NMR(400MHz,CD3OD)δ:8.93(s,1H),8.53(d,J＝33.8Hz,2H),8.21(s,1H),7.91(s,1H),5.19(s,1H),4.01(s,4H),3.73(s,2H),3.02(s,3H),2.77(s,1H),2.68(s,3H),2.38(d,J＝87.2Hz,3H),1.84(s,6H).

MS m/z(ESI):521.2[M+H]⁺。

实施例3

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

第一步：1-(6-氯-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮的制备

将6-氯-2-甲基烟酸(1.0g,5.8mmol)，哌啶-4-酮(866mg,8.7mmol),HATU(2.2g,17.5mmol),DIEA(2mL)依次加入二氯甲烷(50mL)中。反应在室温下搅拌4小时，LCMS显示反应结束，反应液加入二氯甲烷(50mL)和水(50mL)分液，有机相用饱和碳酸氢钠(3x20 mL)洗涤，有机相分液,用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。剩余粗产品通过快速硅胶柱纯化(CH₂Cl₂:MeOH＝20:1)得到产品1-(6-氯-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮(1.2g,81％)。

将4-氯-5-氟嘧啶-2-胺(4.5g,31.3mmol),4-氟-1-异丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(10.0g,31.3mmol),Pd(dppf)Cl₂(200mg),碳酸钾(8.6g,62.6mmol)依次加入二氧六环(50mL)和水(5mL)中。反应在氮气保护100℃下搅拌3小时，反应结束后，反应液浓缩，剩余物加入二氯甲烷(50mL)和水(50mL)。分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。剩余粗产品通过快速硅胶柱纯化得到产品5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(5.0g,52％)。

MS m/z(ESI):304.1[M+H]⁺

第三步：1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮的制备

将5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(200mg,0.66mmol)，1-(6-氯-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮(167mg,0.66mmol),Pd₂(dba)₃(50mg),Xan-phos(70mg),碳酸铯(430mg,1.32mmol)依次加入无水二氧六环(5mL)中。反应在氮气保护110℃下搅拌4小时，反应结束后，反应液浓缩，剩余物加入二氯甲烷(10mL)和水(10mL)。分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。剩余粗产品通过快速硅胶柱纯化得到产品1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮(100mg,30％).

MS m/z(ESI):520.2[M+H]⁺

第四步：(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

将1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮(100mg,0.19mmol)，环丙胺(0.3mL)溶于二氯甲烷(5mL)中，反应搅拌在室温下20分钟后，醋酸硼氢化钠(200mg,0.95mmol)加入反应液中，反应在室温下搅拌1小时，LCMS显示反应完全，将反应液直接旋干，剩余物用快速硅胶柱纯化，再经制备HPLC纯化得到产品(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮(24.0mg,22％)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.95(d,J＝3.1Hz,1H),8.58(s,1H),8.20(d,J＝10.7Hz,2H),7.65(d,J＝8.8Hz,1H),5.24–5.09(m,2H),3.77(s,1H),3.63(s,1H),3.02(d,J＝13.7Hz,1H),2.97(s,3H),2.84(d,J＝4.2Hz,1H),2.73(s,3H),2.35(s,1H),2.31–2.13(m,2H),2.06(s,1H),1.83(d,J＝6.9Hz,6H),1.73(s,2H),1.33(d,J＝18.5Hz,2H),1.04–0.89(m,2H).

MS m/z(ESI):561.2[M+H]⁺

实施例4

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(9-甲基-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-基)甲酮的制备

第一步：9-苯甲基3-(叔-丁基)3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3,9-二羧酸酯的制备

叔-丁基3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-羧酸酯(130mg,0.57mmol)与三乙胺(0.3mL)溶于二氯甲烷(10mL)，冰浴下滴加氯甲酸苄酯(0.16mL,1.14mmol)。室温搅拌过夜。然后用二氯甲烷(30mL)稀释，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，并用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析[洗脱剂:PE～PE/EtOAc(1:1)]得到化合物9-苯甲基3-(叔-丁基)3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3,9-二羧酸酯(170mg,产率82％)。

MS m/z(ESI):305.0[M-55]⁺。

第二步：苯甲基-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯的制备

化合物9-苯甲基3-(叔-丁基)3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3,9-二羧酸酯(170mg，0.47mmol)溶于二氯甲烷(3mL),滴加三氟乙酸(2mL)，室温搅拌2h。浓缩待用。

MS m/z(ESI):261.1[M+H]⁺。

第三步：苯甲基3-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯的制备

化合物6-氯-2-甲基尼古丁酸(85mg，0.5mmol)和化合物苯甲基3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯溶于DMF(5mL),加DIEA(0.3mL)和HATU(380mg，1mmol)，室温搅拌2h。浓缩后柱层析纯化[洗脱剂:DCM～DCM/MeOH(10:1)]得化合物苯甲基3-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯(180m g,产率94％)。

MS m/z(ESI):414.1[M+H]⁺。

第四步：苯甲基3-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯的制备

化合物苯甲基3-(6-氯-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯(100mg，0.24mmol)和化合物5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺(75mg，0.25mmol)溶于二氧六环(15mL)，然后依次加入碳酸铯(324mg,1mmol)，Pd₂(dba)₃(23mg，0.025mmol)与Xant-phos(30mg,0.05mmol)，置换氮气三次，回流过夜。冷却过滤,浓缩后柱层析纯化[DCM～DCM/MeOH(10:1)]得到化合物苯甲基3-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯(120mg,产率73％)。

MS m/z(ESI):681.2[M+H]⁺。

第五步：(3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

化合物苯甲基3-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-9-羧酸酯(120mg,0.17mmol)溶于甲醇(10mL)，氮气保护下加入氢氧化钯(30mg)，然后置换氢气三次，室温搅拌过夜。过滤，浓缩得粗产品(90mg,产率93％)

MS m/z(ESI):547.2[M+H]⁺。

第六步：(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(9-甲基-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-基)甲酮的制备

化合物(3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮(90mg,0.16mmol)和甲醛溶液(0.1mL)溶于二氯甲烷(5mL)，室温搅拌30min，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(100mg)，继续搅拌3h。反应液浓缩后经反相柱层析纯化得到化合物(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(9-甲基-3,9-二氮杂二环[4.2.1]壬烷-3-基)甲酮(56mg,产率50％)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：9.00(s,1H),8.64(s,1H),8.50(s,1H),8.26(d,J＝10.6Hz,1H),7.63(s,1H),5.21(m,1H),4.20(m,4H),3.76(m,2H),3.02(m,6H),2.80(d,J＝12.8Hz,3H),2.65(m,2H),2.43–2.20(m,2H),2.19–1.95(m,2H),1.85(d,J＝6.0Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ-128.9,-142.6

MS m/z(ESI):561.2[M+H]⁺。

实施例5

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)):δ:9.00(s,1H),8.63(s,1H),8.38-8.22(m,2H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),5.25-5.15(m,1H),4.30-4.10(m,1H),4.05-3.90(m,1H),3.75-3.35(m,5H),3.02(s,3H),2.78(s,3H),2.75-2.55(m,1H),2.35-1.90(m,4H),1.85(d,J＝6.7Hz,6H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-129.16(s),-142.76(d,J＝12.8Hz).

MS m/z(ESI):547.2[M+H]⁺。

实施例6

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氟吡啶-3-基)(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氟吡啶-3-基)(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)):δ:8.72(d,J＝3.4Hz,1H),8.60(s,1H),8.37(d,J＝8.1Hz,1H),8.00-7.90(s,1H),5.20-5.10(m,1H),4.30-4.17(m,1H),4.02-3.93(m,1H),3.79-3.38(m,5H),2.99(s,3H),2.75-2.45(m,1H),2.35-1.87(m,4H),1.82(d,J＝8Hz,6H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-129.68(d,J＝4.4Hz),-148.65(s).

MS m/z(ESI):551.2[M+H]⁺。

实施例7

(1,4-重氮基庚环-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备

(1,4-重氮基庚环-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.59(dd,J＝9.5,3.3Hz,1H),8.49(s,1H),8.25(d,J＝8.2Hz,1H),8.07(d,J＝11.3Hz,1H),7.92(t,J＝8.9Hz,1H),5.04(dd,J＝13.7,6.9Hz,1H),3.91(s,1H),3.77(d,J＝19.3Hz,1H),3.58–3.45(m,2H),3.42–3.24(m,4H),2.89(s,3H),2.10(d,J＝24.5Hz,2H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-70.3,-129.5,-148.5.

MS m/z(ESI):525.2[M+H]⁺.

实施例8

(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.72(d,J＝3.3Hz,1H),8.61(s,1H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),8.20(d,J＝11.3Hz,1H),8.04(t,J＝8.9Hz,1H),5.17(dt,J＝14.0,6.9Hz,1H),4.40–4.31(m,1H),4.01–3.55(m,5H),3.46–3.36(m,2H),2.99(d,J＝10.6Hz,6H),2.29(m,2H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H).

MS m/z(ESI):539.2[M+H]⁺.

实施例9

(S)-(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备

(S)-(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.62(d,J＝3.4Hz,1H),8.50(d,J＝0.9Hz,1H),8.26(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),8.09(d,J＝11.3Hz,1H),7.92(t,J＝8.8Hz,1H),5.13–4.97(m,1H),4.07(d,J＝15.5Hz,1H),3.82(d,J＝17.3Hz,5H),2.93(s,2H),2.89(s,3H),2.79(d,J＝18.3Hz,1H),2.14(d,J＝31.4Hz,2H),1.74(d,J＝6.9Hz,6H),1.39(dd,J＝47.3,6.8Hz,3H).

MS m/z(ESI):472.2[M+H]⁺.

实施例10

(4,5-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4,5-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

MS m/z(ESI):472.2[M+H]⁺.

实施例11

(4-乙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-乙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.87(s,1H),8.50(s,1H),8.30(m,1H),8.13(d,J＝10.9Hz,1H),7.49(d,J＝8.2Hz,1H),5.13–5.01(m,1H),4.23(d,J＝11.8Hz,1H),3.85–3.40(m,5H),3.235-3.25(m,4H),2.89(s,3H),2.70(m,3H),2.25-2.10(m,2H),1.73(d,J＝6.7Hz,6H),1.32(m,3H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.1,-142.8.

MS m/z(ESI):549.2[M+H]⁺.

实施例12

(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)(6-甲基-3,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮的制备

(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)(6-甲基-3,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD):δ:8.62–8.54(m,1H),8.46(s,1H),8.22(d,J＝8.2Hz,1H),8.05(d,J＝11.2Hz,1H),7.94-7.78(m,1H),5.05(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),4.68-4.39(m,1H),4.05-3.90(m,1H),3.91-3.40(m,2H),3.35-3.05(m,2H),2.95-2.80(m,6H),2.75-2.57(m,1H),2.45-2.30(m,1H),2.23-1.98(m,2H),1.73(d,J＝6.8Hz,6H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-69.67(d,J＝282.4Hz),-129.43(d,J＝8.9Hz),-148.33(s).

MS m/z(ESI):551.2[M+H]⁺。

实施例13

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(1-甲基八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(1-甲基八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD):δ:8.88(s,1H),8.51(s,1H),8.25-8.10(m,2H),7.52-7.44(m,1H),5.20-4.96(m,1H),4.70-4.50(m,1H),4.04-3.46(m,5H),3.40-3.30(m,1H),3.20-3.01(m,1H),2.96-2.80(m,5H),2.78-2.48(m,4H),2.35-1.9(dd,m,3H),1.92-1.51(m,7H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-129.11(s),-142.77(d,J＝26.3Hz).

MS m/z(ESI):561.2[M+H]+。

实施例14

(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：9.00(s,1H),8.63(s,1H),8.42(s,1H),8.26(s,1H),7.60(s,1H),5.20(s,1H),4.34–3.77(m,3H),3.63(s,3H),3.02(s,5H),2.92(s,1H),2.82(s,3H),2.32(d,J＝55.7Hz,3H),1.85(s,6H),1.60(s,2H),1.31(s,3H).

MS m/z(ESI):472.2[M+H]⁺.

实施例15

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(1-甲基哌啶-4-基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(1-甲基哌啶-4-基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.99(s,1H),8.63(s,1H),8.60–8.46(m,1H),8.25(d,J＝10.8Hz,1H),7.60(d,J＝7.9Hz,1H),5.20(m,1H),4.31–3.93(m,2H),3.84(m,2H),3.74(m,4H),3.57(m,3H),3.23(m,2H),3.01(s,3H),2.93(s,3H),2.80(s,3H),2.57(m,3H),2.28(m,3H),1.85(d,J＝6.4Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.0,-142.7.

MS m/z(ESI):518.3[M+H]⁺.

实施例16

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(5-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(5-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.87(d,J＝3.0Hz,1H),8.51(s,1H),8.29(d,J＝8.9Hz,1H),8.13(d,J＝11.1Hz,1H),7.50(dd,J＝8.6,4.8Hz,1H),5.07(dt,J＝13.7,6.8Hz,1H),4.05(m,1H),3.85(m,1H),3.65–3.39(m,4H),3.32(m,1H),2.90(s,3H),2.67(s,3H),2.11–1.89(m,2H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H),1.35(dd,J＝13.7,6.5Hz,3H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.1,-142.8.

MS m/z(ESI):535.2[M+H]⁺.

实施例17

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(d,J＝3.1Hz,1H),8.63(s,1H),8.42(dd,J＝15.8,8.9Hz,1H),8.26(d,J＝11.0Hz,1H),7.59(d,J＝8.9Hz,1H),5.20(dt,J＝13.8,6.7Hz,1H),4.36(d,J＝11.3Hz,1H),3.94–3.54(m,5H),3.50–3.40(m,2H),3.01(t,J＝7.9Hz,6H),2.80(d,J＝9.7Hz,3H),2.29(m,2H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.3,-142.9.

MS m/z(ESI):535.2[M+H]⁺.

实施例18

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-甲氧基乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-甲氧基乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法如下。

(1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮(200mg,0.38mmol)溶于DMF(6mL),依次加入碳酸钾(150mg)和1-溴-2-甲氧基乙烷(0.5mL)，并于60℃下搅拌3h。冷却，过滤，浓缩柱层析纯化[洗脱剂:CH₂Cl₂～CH₂Cl₂/MeOH(10:1)]得白色固体产物(150mg，产率68％)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(d,J＝3.2Hz,1H),8.68–8.60(m,1H),8.40(dd,J＝13.2,8.9Hz,1H),8.26(d,J＝11.1Hz,1H),7.59(d,J＝8.9Hz,1H),5.20(m,1H),4.37(m,1H),3.95–3.66(m,6H),3.59–3.39(m,8H),3.01(s,3H),2.79(s,3H),2.41–2.16(m,2H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.3,-142.9.

MS m/z(ESI):579.3[M+H]⁺.

实施例19

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

MS m/z(ESI):603.2[M+H]⁺.

实施例20

3-(4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-基)丙腈的制备

3-(4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)-1,4-重氮基庚环-1-基)丙腈的制备方法参照实施例18。

¹H NMR(400MHz,MeOD):δ:8.99(d,J＝3.3Hz,1H),8.63(s,1H),8.49(d,J＝9.0Hz,1H),8.25(d,J＝11.1Hz,1H),7.60(d,J＝8.9Hz,1H),5.18(dq,J＝14.1,7.0Hz,1H),4.10-3.85(m,1H),3.80-3.45(m,8H),3.26-3.18(m,2H),3.02(s,3H),2.80(s,3H),2.43-2.18(m,2H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-129.12(s),-142.84(d,J＝10.2Hz).

MS m/z(ESI):574.2[M+H]⁺。

实施例21

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-羟基丙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-羟基丙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.56(d,J＝3.3Hz,1H),8.31(m,2H),7.77(d,J＝11.8Hz,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),4.93(m,1H),4.03–3.72(m,3H),3.57–3.41(m,2H),3.04(s,1H),2.84(d,J＝27.2Hz,3H),2.73–2.57(m,4H),2.49(m,4H),2.01(s,1H),1.87(s,1H),1.73(d,J＝6.7Hz,6H),1.17(m,3H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-130.5,-149.5.

MS m/z(ESI):579.3[M+H]⁺.

实施例22

(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.97(d,J＝3.3Hz,1H),8.79(s,1H),8.42(dd,J＝15.2,8.9Hz,2H),8.04(d,J＝8.7Hz,1H),7.59(d,J＝8.9Hz,1H),5.19(dt,J＝13.8,6.9Hz,1H),4.45–4.29(m,1H),3.98–3.52(m,5H),3.49–3.38(m,2H),3.01(t,J＝7.9Hz,6H),2.81(t,J＝15.9Hz,3H),2.40–2.14(m,2H),1.84(t,J＝10.5Hz,6H).

MS m/z(ESI):517.3[M+H]⁺.

实施例23

6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基-N-(8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)烟酰胺的制备

6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基-N-(8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)烟酰胺的制备方法参照实施例1。

MS m/z(ESI):561.3[M+H]⁺.

实施例24

(4-环丙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-环丙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.47(d,J＝3.8Hz,1H),8.22(d,J＝8.7Hz,2H),7.71(d,J＝12.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.5Hz,1H),5.04(m,1H),3.63(s,2H),3.50–3.29(m,2H),2.93(m,1H),2.83(s,1H),2.63(m,8H),2.35(s,3H),1.90(s,1H),1.76(s,1H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.19(s,2H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-130.7,-149.8.

MS m/z(ESI):561.2[M+H]⁺.

实施例25

(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

MS m/z(ESI):585.3[M+H]⁺.

实施例26

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-羟基乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(2-羟基乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

MS m/z(ESI):565.3[M+H]⁺.

实施例27

4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,7-二甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备

4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,7-二甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备方法参照实施例2。

MS m/z(ESI):535.3[M+H]⁺.

实施例28

3-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,3-噁吖己环-2-酮的制备

3-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,3-噁吖己环-2-酮的制备方法参照实施例2。

MS m/z(ESI):494.2[M+H]⁺.

实施例29

4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1-甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备

4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1-甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备方法参照实施例2。

MS m/z(ESI):521.2[M+H]⁺.

实施例30

1-乙基-4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备

1-乙基-4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备方法参照实施例2。

MS m/z(ESI):535.3[M+H]⁺.

实施例31

1-乙基-4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备

1-乙基-4-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-1,4-重氮基庚环-5-酮的制备方法参照实施例2。

MS m/z(ESI):549.3[M+H]⁺.

实施例32

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):623.3[M+H]⁺.

实施例33

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(己基氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(己基氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.97(s,1H),8.64(d,J＝7.4Hz,2H),8.44(d,J＝8.0Hz,1H),8.24(d,J＝11.0Hz,1H),7.73(d,J＝8.3Hz,1H),5.19(s,1H),3.51(s,1H),3.09(d,J＝6.8Hz,3H),3.03(s,3H),2.25(s,2H),1.86(d,J＝6.4Hz,6H),1.76(s,4H),1.46(s,2H),1.43–1.30(m,5H),0.96(t,J＝6.5Hz,3H).

MS m/z(ESI):605.3[M+H]⁺.

实施例34

(4-((2,2-二氟乙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((2,2-二氟乙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)):δ:8.97(d,J＝3.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.35-8.15(m,2H),7.80–7.54(m,1H),6.39(t,J＝53.7Hz,2H),5.30-5.05(m,1H),3.90-3.55(m,4H),3.15-3.05(m,1H),2.99(s,3H),2.77(s,3H),3.40-2.10(m,2H),1.90-1.65(m,8H).

¹⁹F NMR(400MHz,MeOD):δ:-124.27(s),-129.21(s),-143.14(s).

MS m/z(ESI):585.2[M+H]⁺。

实施例35

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2,2,2-三氟乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2,2,2-三氟乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.95(d,J＝2.8Hz,1H),8.63(m,2H),8.42(d,J＝8.7Hz,1H),8.23(d,J＝11.1Hz,1H),7.73(d,J＝8.9Hz,1H),5.25–5.10(m,1H),4.17(q,J＝9.0Hz,2H),3.67(s,1H),3.37(m,4H),3.00(s,3H),2.39–2.19(m,2H),1.83(m,J＝11.6Hz,8H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-69.8,-129.2,-142.6.

MS m/z(ESI):603.2[M+H]⁺.

实施例36

(4-((环丙基甲基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((环丙基甲基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.99(d,J＝3.1Hz,1H),8.63(s,1H),8.27(t,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝8.9Hz,1H),5.19(dt,J＝13.8,6.8Hz,1H),3.79(d,J＝13.6Hz,1H),3.52(s,1H),3.01(d,J＝7.0Hz,6H),2.78(s,3H),2.30(d,J＝11.0Hz,1H),2.17(d,J＝10.2Hz,1H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H),1.74(s,2H),1.15(td,J＝7.8,3.9Hz,1H),0.76(q,J＝5.8Hz,2H),0.47(q,J＝4.8Hz,2H).

MS m/z(ESI):573.5[M+H]⁺.

实施例37

(4-(环丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.88(s,1H),8.57–8.45(m,1H),8.14(d,J＝11.0Hz,2H),7.49(d,J＝7.9Hz,1H),5.20–5.04(m,1H),4.66(d,J＝11.9Hz,1H),3.86(d,J＝7.1Hz,1H),3.65(s,1H),3.35(s,1H),2.90(d,J＝7.7Hz,4H),2.66(s,3H),2.31–2.18(m,3H),2.17–1.97(m,2H),1.88(d,J＝16.2Hz,2H),1.72(t,J＝8.8Hz,6H),1.61(s,2H).

MS m/z(ESI):573.3[M+H]⁺.

实施例38

(4-((2,2-二氟环丙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((2,2-二氟环丙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):597.3[M+H]⁺.

实施例39

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-氟环丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-氟环丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):579.3[M+H]⁺.

实施例40

(4-(环戊基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环戊基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):589.3[M+H]⁺.

实施例41

(4-((4,4-二氟环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((4,4-二氟环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.56(d,J＝3.8Hz,1H),8.32(d,J＝10.1Hz,2H),7.79(d,J＝11.9Hz,1H),7.61(s,1H),7.31(s,1H),4.69(d,J＝12.7Hz,1H),3.60(s,1H),3.19(t,J＝12.7Hz,1H),2.97(s,2H),2.86(s,1H),2.70(s,3H),2.46(s,3H),1.93(ddd,J＝30.6,29.7,16.7Hz,7H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H),1.49(d,J＝9.9Hz,2H),1.30(s,3H).

MS m/z(ESI):639.2[M+H]⁺.

实施例42

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-羟基乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-羟基乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):565.3[M+H]⁺.

实施例43

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-甲氧基乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((2-甲氧基乙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):579.3[M+H]⁺.

实施例44

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-吗啉代哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-吗啉代哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.56(d,J＝3.8Hz,1H),8.31(m,2H),7.77(d,J＝11.9Hz,1H),7.61(s,1H),4.91(m,1H),4.73(d,J＝12.1Hz,1H),3.82–3.69(m,4H),3.65(d,J＝13.0Hz,1H),3.17(t,J＝12.3Hz,1H),2.92(dd,J＝27.2,15.4Hz,1H),2.78–2.53(m,8H),2.45(s,3H),2.10(d,J＝10.2Hz,1H),1.94(d,J＝12.0Hz,1H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H),1.49(m,2H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-130.5,-149.5.

MS m/z(ESI):591.3[M+H]⁺.

实施例45

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):632.4[M+H]⁺.

实施例46

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(4-甲基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-7-基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(4-甲基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-7-基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):630.3[M+H]⁺.

实施例47

(4-((3,3-二氟环丁基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((3,3-二氟环丁基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):611.3[M+H]⁺.

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(d,J＝3.1Hz,1H),8.63(s,1H),8.28(t,J＝11.1Hz,2H),7.59(d,J＝8.9Hz,1H),5.29–5.11(m,1H),4.80(d,J＝13.5Hz,1H),3.97(dd,J＝12.9,7.2Hz,1H),3.79(d,J＝12.4Hz,1H),3.56(s,1H),3.22–2.91(m,8H),2.78(s,3H),2.21(dd,J＝54.2,9.7Hz,2H),1.85(d,J＝6.9Hz,6H),1.78(d,J＝12.2Hz,2H).

实施例48

(S)-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(吗啉-2-基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(S)-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(吗啉-2-基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

MS m/z(ESI):620.3[M+H]⁺.

实施例49

(R)-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(吗啉-2-基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(R)-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(吗啉-2-基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

MS m/z(ESI):620.3[M+H]⁺.

实施例50

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(6-甲基-3,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(6-甲基-3,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.58(d,J＝3.8Hz,1H),8.39–8.31(m,2H),7.82(d,J＝11.9Hz,1H),7.68–7.59(m,1H),4.98–4.92(m,1H),3.65–3.50(m,1H),3.48–3.40(m,2H),3.27–2.96(m,2H),2.84–2.68(m,4H),2.65(s,3H),2.57–2.36(m,5H),2.22–2.00(m,1H),2.00–1.80(m,1H),1.74(d,J＝6.9Hz,6H).

MS m/z(ESI):5847.2[M+H]⁺.

实施例51

(4-(环丙基(甲基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮(200mg，0.357mmol)、30％甲醛水溶液(2ml)于甲醇(10ml)中搅拌，加入三乙酰氧基硼氢化钠(227mg)，室温搅拌3h。加水，二氯甲烷提取，干燥，纯化得到类白色固体(201.7mg,产率98.4％)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(s,1H),8.63(s,1H),8.44–8.18(m,2H),7.60(d,J＝7.9Hz,1H),5.26–5.14(m,1H),4.87–4.82(m,1H),3.80(d,J＝9.4Hz,2H),3.35(s,1H),3.02(d,J＝9.3Hz,8H),2.78(s,3H),2.36(t,J＝48.6Hz,2H),1.94(s,2H),1.85(d,J＝6.5Hz,6H),1.29(d,J＝8.6Hz,2H),1.05(d,J＝29.8Hz,3H).

MS m/z(ESI):575.3[M+H]⁺.

实施例52

(4-(环丙基(异丙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丙基(异丙基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例51。

MS m/z(ESI):603.7[M+H]⁺.

实施例53

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(2-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(2-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)甲酮的制备方法参照实施例1。MS m/z(ESI):561.6[M+H]⁺.

实施例54

(4-(2-(二甲氨基)乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(2-(二甲氨基)乙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

MS m/z(ESI):592.7[M+H]⁺.

实施例55

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):561.6[M+H]⁺.

实施例56

(4-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):618.7[M+H]⁺.

实施例57

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((1-甲基环丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((1-甲基环丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.58(d,J＝3.8Hz,1H),8.35(s,1H),7.82(d,J＝11.9Hz,1H),7.62(d,J＝8.3Hz,1H),7.40–7.34(m,1H),5.00–4.92(m,1H),4.80–4.66(m,1H),3.74–3.58(m,1H),3.54–3.42(m,1H),3.30–3.12(m,1H),3.09–2.91(m,1H),2.71(s,3H),2.60–2.38(m,4H),2.25–2.10(m,1H),2.10–1.89(m,1H),1.74(d,J＝6.9Hz,6H),1.56–1.42(m,1H),1.31(s,3H),0.83–0.67(m,2H),0.66–0.50(m,2H).

MS m/z(ESI):575.7[M+H]⁺.

实施例58

1-((1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)哌啶-4-基)氨基)环丙烷-1-甲腈的制备

1-((1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)哌啶-4-基)氨基)环丙烷-1-甲腈的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.51(d,J＝3.7Hz,1H),8.24(s,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.72(d,J＝11.8Hz,1H),7.58(d,J＝8.5Hz,1H),4.89–4.81(m,1H),4.47–4.27(m,1H),3.53–3.41(m,1H),3.19–3.00(m,3H),2.61(s,3H),2.38(s,3H),2.06–1.92(m,1H),1.92–1.79(m,1H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.45–1.18(m,2H),1.19–0.85(m,4H).

MS m/z(ESI):585.7[M+H]⁺.

实施例59

(1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷-4-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷-4-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.88(d,J＝3.2Hz,1H),8.52(s,1H),8.26(t,J＝9.8Hz,1H),8.15(d,J＝11.1Hz,1H),7.49(d,J＝8.8Hz,1H),5.09(dt,J＝13.7,6.8Hz,1H),4.87(s,1H),4.14(s,1H),3.82(s,1H),3.52(m,6H),2.91(s,3H),2.77–2.63(m,3H),2.33(d,J＝6.3Hz,2H),2.19(d,J＝4.9Hz,2H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-129.1,-142.6.

MS m/z(ESI):546.3[M+H]⁺.

实施例60

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(3,3,3-三氟丙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(3,3,3-三氟丙基)-1,4-重氮基庚环-1-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

MS m/z(ESI):617.6[M+H]⁺.

实施例61

[1,4'-联哌啶]-1'-基(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

[1,4'-联哌啶]-1'-基(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(d,J＝3.1Hz,1H),8.64(s,1H),8.28(t,J＝13.7Hz,2H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),5.27–5.15(m,1H),4.85(s,1H),3.83(d,J＝12.8Hz,1H),3.59(s,3H),3.37(s,1H),3.17–2.93(m,6H),2.78(s,3H),2.34(d,J＝11.6Hz,1H),2.20(d,J＝8.9Hz,1H),2.01(d,J＝14.0Hz,2H),1.97–1.88(m,3H),1.85(d,J＝6.9Hz,8H),1.56(d,J＝12.5Hz,1H).

MS m/z(ESI):589.3[M+H]⁺.

实施例62

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(2-氟-6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.71(d,J＝3.4Hz,1H),8.58(d,J＝1.0Hz,1H),8.38(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),8.16(d,J＝11.4Hz,1H),8.02–7.87(m,1H),5.22–5.05(m,1H),3.83(s,1H),3.62(t,J＝11.6Hz,1H),2.97(s,3H),2.89–2.77(m,1H),2.25(dd,J＝32.2,24.6Hz,2H),1.83(d,J＝6.9Hz,6H),1.68(dd,J＝12.3,4.3Hz,2H),1.33(d,J＝19.0Hz,2H),1.01–0.90(m,4H).

MS m/z(ESI):565.6[M+H]⁺.

实施例63

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丙基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.96(s,1H),8.78(s,1H),8.42(d,J＝8.1Hz,1H),8.29(s,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.61(d,J＝7.9Hz,1H),5.19(s,1H),4.82–4.72(m,2H),3.72(d,J＝57.5Hz,2H),3.04(d,J＝15.4Hz,4H),2.80(d,J＝24.0Hz,4H),2.46–2.16(m,2H),1.85(d,J＝6.4Hz,8H),1.08–0.87(m,4H).

MS m/z(ESI):543.2[M+H]⁺.

实施例64

(S)-(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(S)-(3,4-二甲基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.54(s,1H),8.32–8.04(m,2H),7.72–7.48(m,2H),4.86–4.73(m,1H),3.95(m,1H),3.74–3.48(m,1H),3.40(m,2H),3.05(s,2H),2.93–2.68(m,1H),2.63(s,3H),2.51(s,2H),2.41(m,4H),2.06(s,1H),1.91(s,1H),1.66(s,6H),1.26(d,J＝6.6Hz,2H),0.93(d,J＝6.3Hz,1H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-130.2,-149.0.

MS m/z(ESI):548.3[M+H]⁺.

实施例65

N-(3,3-二氟环丁基)-N-(1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基尼古丁酰)哌啶-4-基)乙酰胺的制备

(4-((3,3-二氟环丁基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮(200mg，0.328mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入三乙胺(1ml)，滴加醋酸酐(1ml)，室温搅拌3h。加水，二氯甲烷提取，干燥，纯化得到180.3mg目标产物，收率84.3％。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:9.00(d,J＝3.2Hz,1H),8.63(s,1H),8.26(d,J＝11.1Hz,1H),7.58(d,J＝8.9Hz,1H),5.27–5.12(m,1H),4.79(s,1H),4.12–3.46(m,2H),3.35(s,1H),3.33(dt,J＝3.3,1.6Hz,8H),3.02(s,4H),2.78(s,3H),2.65(s,1H),2.22(s,3H),1.82(t,J＝18.9Hz,9H).

MS m/z(ESI):653.2[M+H]⁺.

实施例66

(4-烯丙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-烯丙基-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.53(s,1H),8.12(d,J＝17.1Hz,2H),7.53(d,J＝7.9Hz,2H),6.07–5.78(m,1H),5.27(dt,J＝48.5,14.5Hz,2H),4.82(d,J＝6.7Hz,1H),3.84(d,J＝16.7Hz,2H),3.47(d,J＝15.2Hz,2H),3.20(d,J＝5.7Hz,1H),2.98(s,1H),2.81(s,2H),2.71(s,1H),2.60(d,J＝7.4Hz,3H),2.41(d,J＝4.9Hz,3H),2.02(s,1H),1.87(s,1H),1.64(s,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-130.0,-148.7.

MS m/z(ESI):560.2[M+H]⁺.

实施例67

(4-(环丙基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丙基甲基)-1,4-重氮基庚环-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例18。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.45(d,J＝3.3Hz,1H),8.35–8.12(m,2H),7.77–7.52(m,2H),4.90–4.81(m,1H),4.16–3.63(m,3H),3.65–3.26(m,5H),3.14–2.89(m,2H),2.59(s,3H),2.36(s,3H),2.30–1.96(m,2H),1.60(d,J＝9.0Hz,6H),1.16–0.97(m,1H),0.77–0.56(m,2H),0.48–0.19(m,2H).

MS m/z(ESI):575.2[M+H]⁺.

实施例68

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-氮杂环丁烷代哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-氮杂环丁烷代哌啶-1-基)甲酮的制备方法如下：

将1-(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基烟酰)哌啶-4-酮(350mg,0.67mmol)，氮杂环丁烷盐酸盐(126mg,1.34mmol)溶于二氯甲烷(5mL)和甲醇(15mL)混合溶剂中，加入钛酸四乙酯(458mg,2.0mmol)，反应搅拌在室温下10小时后，醋酸硼氢化钠(425mg,2.0mmol)加入反应液中，反应在室温下搅拌3小时，LCMS显示反应完全，将反应液加到饱和碳酸氢钠溶液中(5mL),搅拌30分钟，加入无水硫酸钠，过滤，直接旋干，剩余物用快速硅胶柱纯化，再经反相柱层析纯化得到浅灰色固体产品(159mg,产率42％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：10.22(s,1H),8.71(s,1H),8.31(s,1H),8.14(d,J＝8.2Hz,1H),7.70(d,J＝11.9Hz,1H),7.56(d,J＝8.3Hz,1H),4.94–4.76(m,1H),4.08(s,1H),3.12(d,J＝44.4Hz,6H),2.65(s,3H),2.28(d,J＝47.8Hz,4H),1.91(s,2H),1.60(t,J＝20.1Hz,8H),1.27–0.83(m,3H).

¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d₆)δ：-128.75,-148.44.

MS m/z(ESI):561.3[M+H]⁺

实施例69

(4-(环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例68。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:10.98(s,1H),9.17(s,1H),8.87(s,1H),8.41(s,1H),8.18–7.56(m,3H),4.95(s,1H),4.58(s,1H),3.49(s,1H),3.07(s,1H),2.80(s,3H),2.48(d,J＝17.7Hz,10H),2.06(t,J＝27.0Hz,3H),1.83–1.57(m,8H),1.43–1.06(m,5H).

¹⁹F NMR(376MHz,DMSO)δ-127.75，-127.75.

MS m/z(ESI):603.3[M+H]⁺.

实施例70

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((3,3,3-三氟丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-((3,3,3-三氟丙基)氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.57(d,J＝3.8Hz,1H),8.33(d,J＝6.9Hz,2H),7.80(d,J＝11.8Hz,1H),7.62(d,J＝8.5Hz,1H),4.74(d,J＝12.6Hz,1H),3.67(d,J＝12.2Hz,1H),3.37(s,1H),3.23(t,J＝13.5Hz,1H),3.17–3.06(m,3H),3.00(t,J＝12.5Hz,1H),2.71(s,3H),2.55(dt,J＝15.7,9.2Hz,2H),2.46(s,3H),2.20(dd,J＝17.7,10.0Hz,1H),2.01(d,J＝10.2Hz,1H),1.73(d,J＝6.9Hz,6H),1.46(dd,J＝45.8,11.0Hz,1H),1.33(d,J＝19.4Hz,1H).

MS m/z(ESI):617.2[M+H]⁺.

实施例71

(4-(叔-丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(叔-丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):577.2[M+H]⁺.

实施例72

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(异丙基氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备

(6-((5-氟-4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)(4-(异丙基氨基)哌啶-1-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.52(d,J＝3.8Hz,1H),8.33–8.18(m,2H),7.76(d,J＝11.9Hz,1H),7.56(d,J＝8.6Hz,1H),4.87(m,1H),4.78(m,1H),3.65(s,1H),3.52(dd,J＝12.8,6.5Hz,2H),3.22(m,1H),2.90(d,J＝13.0Hz,1H),2.64(s,3H),2.40(s,3H),2.17(s,1H),2.00(s,1H),1.68(t,J＝11.1Hz,6H),1.47(d,J＝43.5Hz,2H),1.30(d,J＝6.5Hz,6H).

¹⁹F NMR(376MHz,MeOD)δ:-130.6,-149.5.

MS m/z(ESI):562.3[M+H]⁺.

实施例73

(4-((4,4-二氟环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-((4,4-二氟环己基)氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):621.2[M+H]⁺.

实施例74

(4-(环丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备

(4-(环丁基氨基)哌啶-1-基)(6-((5-氟-4-(1-异丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲基吡啶-3-基)甲酮的制备方法参照实施例3。

MS m/z(ESI):557.2[M+H]⁺.

生物学测试评价

以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。

一、本发明化合物对酶学活性分析检测方法：

本实验运用LANCE(Lanthanide chelate excite)激酶检测技术，检测分析了受试化合物对CDK4/6的酶学抑制活性。方法简述如下：

1)在384孔实验板(Greiner,Cat.No.784076)加入不同浓度的化合物，每个浓度设双复孔，之后加入CDK4(Carna,Cat.No.04-105)，或者CDK6的激酶CDK6(Carna,Cat.No.04-107)，混合均匀后；

2)加入底物Ulight-MBP peptide(PerkinElmer,Cat.No.TRF0109-D)与ATP的混合液；

3)室温反应60分钟后加入EDTA终止反应，终止5分钟后加入抗体Europium-anti-phospho-Myelin BasicProtein(MBP)(PerkinElmer,Cat.No.TRF0109-D)；

4)室温孵育60分钟后上机检测(λex＝330nm,λem＝620nm andλem＝665nm)

5)根据以下公式采集，计算数据：

信号值＝OD665/OD620*10000；

抑制率(％)＝100-(信号值-min)/(max-min)*100。

并使用Graphpad 5.0软件进行数据分析及拟合计算IC50，所得数据列表如下：

表1

从以上实验结果可以看出，本发明实施例化合物对CDK激酶活性具有很强的抑制活性，尤其是对CDK 4和/或6激酶活性具有很好的抑制活性及选择性。

二、本发明化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性的测定

化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性通过以下的方法进行测试。

该方法用来测定本发明中的化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性的抑制作用。

实验步骤：

本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对colo205细胞增殖的抑制作用，并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC₅₀。

1、在96孔细胞培养板中接种50～100μL的colo205细胞悬液，密度为1～5*10⁴细胞/ml，将培养板于培养箱培养16～24小时(37℃，5％CO₂)。

2、向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液，将培养板在培养箱孵育6天(37℃，5％CO₂)。

3、每孔加入50～100μL CellTiter-Glo试剂，并振荡10分钟，室温静置10分钟。

4、酶标仪测定各板的化学发光信号值。

5、通过化学发光信号值计算抑制率。

6、根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC₅₀。

本发明中化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性的试验进行测定，测得的IC₅₀值见表2。

表2本发明中化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性抑制IC₅₀

从以上实验结果可以看出，本发明实施例化合物对结肠癌肿瘤细胞colo205增殖活性具有很强的抑制作用。

三、大鼠药代动力学测定

1.研究目的：

以SD Rats为受试动物，研究化合物3，化合物34和化合物63，口服给药在rat体内(血浆)的药代动力学行为。

2.试验方案

2.1试验药品：

本发明实施例化合物3，化合物34和化合物63自制。

2.2试验动物：

SD rat 3只，雄性，上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。

2.3药物配制：

称取10g羟乙基纤维素(HEC)，溶于1000mL纯净水，加入2.5mL Tween80和0.5mL防泡剂。混合均匀成澄清溶液。称取6.1mg实施例化合物3，6.9mg实施例化合物34，5.8mg实施例化合物63，分别溶于该溶液中，摇匀，超声15分钟，得到无色澄清溶液，浓度为0.5mg/mL。

2.4给药：

SD大鼠3只，雄性，禁食一夜后分别PO，剂量为5mg/kg，给药体积10mL/kg。

2.5样品采集：

于给药前和给药后0.5,1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,24.0h颈静脉采血0.2mL，置于EDTA-2K试管中，4℃ 6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存；给药后4h进食。

2.5测定结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果，见表3

表3：本发明化合物的大鼠药代动力学参数

实验结论：表中数据显示，在口服给药剂量为5mg/kg时，本发明的3个化合物实施例3，实施例34和实施例63在大鼠血浆中都达到很高的暴露量。最高血药浓度和作用时间差异较大，但AUC差异较小。都可以保证有效的作用浓度。

四、荷瘤小鼠药代动力学测定

1.研究目的：

以Colo205荷瘤小鼠为受试动物，研究化合物实施例化合物3，化合物34和化合物63在50mg/kg剂量下口服给药在小鼠体内(血浆和肿瘤组织)的药代动力学行为。

2.试验方案

2.1试验药品：

本发明实施例化合物3，化合物34和化合物63，自制。

2.2试验动物：

nude mouse 3只，雄性，上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。

2.3药物配制：

称取10g羟乙基纤维素(HEC)，溶于1000mL纯净水，加入2.5mL Tween80和0.5mL防泡剂。混合均匀成澄清溶液。称取36.6mg实施例化合物3，22.6mg实施例化合物34，35.2mg实施例化合物63，分别溶于该溶液中，摇匀，超声15分钟，得到无色澄清溶液，浓度为5.0mg/mL。

2.4给药：

Colo205荷瘤小鼠3只，雄性；禁食一夜后分别p.o.，剂量为50mg/kg，给药体积10mL/kg。

2.5样品采集：

小鼠给药前和给药后，CO₂处死，心脏采血0.2ml，置于EDTA-2K试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存；肿瘤组织称重后，置于2mL离心管中，于-80℃保存。

2.5测定结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果，见表4。

表4：本发明化合物的小鼠药代动力学参数

实验结论：如表中数据所显示，50mg/kg剂量下，实施例3，实施例34和实施例63在小鼠血浆和肿瘤里的暴露量达到很高的水平，实施例3和实施例63在肿瘤里的暴露量明显高于血液里，而从Tmax和MRT可以看出来在肿瘤里的浓度是一个逐渐增加的过程，而代谢速度更慢，说明化合物会逐渐蓄积在肿瘤里，并一直在肿瘤里保持较高的浓度，从而保证更好的抑瘤效果。

五、Colo205移植瘤模型上对肿瘤的抑制实验

5.1实验目的：

以BALB/c裸小鼠为受试动物，采用人结直肠癌细胞Colo205异种移植瘤(CDX)模型进行体内药效实验，评价受试化合物抗肿瘤作用。

5.2实验仪器与试剂：

5.2.1仪器：

超净工作台(BSC-1300II A2，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)

CO₂培养箱(Thermo)

离心机(Centrifuge 5720R,Eppendorf)

全自动细胞计数仪(Countess II,Life Technologies)

移液器(10-20μL,Eppendorf)

显微镜(TS100，尼康)

游标卡尺(500-196，日本三丰)

细胞培养瓶(T25/T75/T225,Corning)

5.2.2试剂：

RPMI培养基1640(11875-093,Gibco)

胎牛血清(FBS)(10099-141,Gibco)

0.25％胰蛋白酶(25200-056,Gibco)

青链霉素双抗(SV30010,GE)

磷酸盐缓冲液(PBS)(10010-023,Gibco)

5.3实验操作：

从细胞库中取出一株Colo205细胞，用1640培养基(1640+10％FBS+1％Glu+1％SP)复苏细胞，复苏后的细胞置细胞培养瓶中(在瓶壁标记好细胞种类、日期、培养人名字等)置于CO₂培养箱中培养(培养箱温度为37℃，CO₂浓度为5％)。待细胞铺满培养瓶底部80-90％后传代，传代后细胞继续置于CO₂培养箱中培养。重复该过程直到细胞数满足体内药效需求。收集培养好的细胞，用全自动细胞计数仪计数，根据计数结果用PBS重悬细胞，制成细胞悬液(密度4×10⁷/ml)。置于冰盒中待用。

BALB/c裸小鼠，雌性，6-8周龄，体重约为18-22克。将小鼠保持在一个特殊的无病原体的环境中，且在单个通风笼中，每笼5只小鼠。所有的笼子、垫料和水在使用前进行消毒。所有动物可以自由获取标准认证的商业实验室饮食。接种前用一次性大小鼠通用耳标标记裸鼠，并用75％医用酒精消毒接种部位皮肤。每只小鼠在右胁腹皮下按每0.1毫升4×10⁶个细胞的密度接种Colo205肿瘤细胞，用于肿瘤生长。当平均肿瘤体积达到100-200立方毫米时开始给药。将受试化合物每日经口灌胃给药，给药剂量为50mg/kg。肿瘤体积用游标卡尺测量，每周两次。体积以立方毫米计量。通过以下公式计算：V＝0.5*D*d*d，其中D和d分别是肿瘤的长径和短径。抗肿瘤药效是通过化合物处理过的动物的平均肿瘤增加体积除以未处理过动物的平均肿瘤增加体积来确定。抑瘤率＝1-[(Vt-V0)给药组/(Vt-V0)溶剂对照组]*100％。实验结束后安乐死动物。

表5：本发明化合物的移植瘤小鼠药效参数

实验结论：从表中数据可以看出,在50mg/kg剂量下，本发明的化合物实施例3，实施例34和实施例63显著抑制Colo205裸小鼠移植瘤生长。

在安慰剂组肿瘤增长到1763立方毫米的情况下,实施例34给药动物组的肿瘤增长到430立方毫米,显示出优异的抑制肿瘤增长的效果.而实施例3和实施例63给药的动物组肿瘤增长更慢.效果更显著。

六、hERG钾离子通道抑制活性测试

6.1细胞培养

6.1.1本试验所用的细胞为转染有hERG、cDNA与稳定表达hERG通道的CHO细胞系(由丹麦Sophion Bioscience公司提供)，细胞代数为P14至P16。细胞培养在含有)下列成分的培养基中：Ham’s F12培养基，10％(v/v)灭活的胎牛血清，100μg/ml潮霉素B，100μg/mlGeneticin。

表6细胞培养基组成成份

6.1.2 CHO hERG细胞生长于含上述培养液的培养皿中，并在37℃、含5％CO₂的培养箱中进行培养。电生理实验之前24到48小时，CHO hERG细胞被转移到放置于培养皿中的圆形玻璃片上，并在以上相同的培养液及培养条件下生长，每个圆形玻片上CHO hERG细胞的密度需要达到绝大多数细胞是独立、单个的要求。

6.2实验溶液

下列溶液(由Sophion推荐)用于电生理记录。

表7细胞内液和外液的组成成分

6.3电生理记录系统

本实验采用手动膜片钳系统(HEKAEPC-10信号放大器及数字转换系统，购自德国HEKA Electronics)作全细胞电流的记录。表面生长有CHO hERG细胞的圆形玻片被放置于倒置显微镜下的电生理记录槽中。记录槽内以细胞外液作持续灌流(大约每分钟1毫升)。实验过程采用常规全细胞膜片钳电流记录技术。如无特殊说明，实验都是在常规室温下进行(～25℃)。细胞钳制在-80mV的电压下。细胞钳制电压去极化到+20mV以激活hERG钾通道，5秒后再钳制到-50mV以消除失活并产生尾电流。尾电流峰值用作hERG电流大小的数值。上述步骤所记录的hERG钾电流在记录槽内持续的细胞外液灌流下达到稳定后则可以叠加灌流待测试的药物，直到药物对hERG电流的抑制作用达到稳定状态。一般以最近的连续3个电流记录线重合作为判断是否稳定状态的标准。达到稳定态势以后以细胞外液灌流冲洗直到hERG电流回复到加药物之前的大小。一个细胞上可以测试一个或多个药物，或者同一种药物的多个浓度，但是在不同药物之间需要以细胞外液冲洗。Cisapride(西沙必利，购自Sigma)被用于实验中作为阳性对照以保证所使用的细胞质量正常。

6.4化合物处理和稀释

为了取得化合物的IC₅₀，我们选择了下列浓度(30，10，3，1，0.3和0.1，3(30，10，3，1，0.3和0.1μM)来作测试。在试验之前，首先用DMSO以梯度稀释的方式稀释成10，3，1，0.3和0.1mM的贮备液，再用细胞外液1000倍稀释成最终的μM测试浓度，除了30μM测试浓度DMSO的最终浓度都为0.3％，其它各浓度化合物溶液中DMSO的最终浓度都为0.1％。阳性对照Cisapride(西沙比利)的测试浓度为0.1μM。所有的化合物溶液都经过常规的5到10分钟超声和振荡以保证化合物完全溶解。

6.5数据分析

试验数据由HEKA Patchmaster(V2x73.2)，Microsoft Excel以及Graphpad Prism5.0提供的数据分析软件进行分析。

6.6质量控制

报告中的试验数据需要满足以下标准：

记录参数：

膜电阻Rm>500MΩ

接入电阻(Ra)<5MΩ

尾电流幅度>300pA

电流rundown(自发性减小)每分钟<2％

漏电流<200pA或者hERG电流峰值的10％(在90％的记录时间之内)

药理学参数：

0.1μM的西沙比利(C4740-10mg,Sigma)阻断超过50％的hERG电流作为阳性对照。

6.7实验结果

实施例在多浓度对hERG电流的抑制结果如下表：

化合物编号	3	34	63
				hERG(uM)	>30	>10	30.3

药物对于心脏hERG钾离子通道的抑制是药物导致QT延长综合症的主要原因。从实验结果可以看出，实施例化合物3，化合物34和化合物63对于心脏hERG钾离子通道基本没有抑制作用。

综上所述，本发明提供了一系列具有新颖结构的高活性，高选择性CDK4/6激酶抑制剂，酶活性和细胞活性更强，对激酶的选择性更好。在大鼠和小鼠上都显示出更好的药代动力学性质，也体现出了更优的药效。而心脏毒性显著降低。有很大的潜力被开发成针对细胞周期增殖异常类疾病的药物。尤其是针对HR+/Her-类乳腺癌的药物。

Claims

1.通式(VI)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：

其中：

R为氟；

R₁为C_1-3烷基；

R₄为氢原子；

R₅为C_1-6烷基、C_1-2卤代烷基、C_3-6环烷基或-(CH₂)_nOR₆，所述C_3-6环烷基任选进一步被选自C_1-3烷基、卤素中的一个或多个取代基所取代；

R₆选自为C_1-3烷基，进一步被C_1-3烷氧基取代；

n为2。

2.根据权利要求1所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₁为甲基。

3.根据权利要求1或2所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₅选自正己基、环丙基、环丁基、环己基或-(CH₂)_nOR₆，所述环丙基、环丁基、环己基任选进一步被选自甲基、乙基、氟、氯中的一个或多个取代基所取代。

4.如下所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，化合物的具体结构为：

5.如下所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，化合物的具体结构为：

6.权利要求1-3任一项所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：

通式化合物(V-A)和通式化合物(V-B)偶联后得到通式(I)化合物，该通式(I)化合物任选进一步反应，或进一步脱保护基得到不同的通式(I)化合物，其中偶联反应中催化试剂选自Pd₂(dba)₃和Xantphos试剂；

其中：

X为卤素；

x为1；

环A为

L为羰基、R₂为-NR₄R₅，R、R₁、R₄和R₅分别为如权利要求1-3所述。

7.根据权利要求6所示的制备方法，X为氯。

8.一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的权利要求1-5任一所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

9.根据权利要求1-5任一所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或权利要求8所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防由CDK激酶4和/或6介导的癌症或肿瘤相关疾病的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述癌症或肿瘤相关疾病选自脑瘤、肺癌、肝癌、胃癌、口腔癌、头颈癌、肠癌、肾癌、食管腺癌、鳞状上皮细胞癌、甲状腺癌、骨癌、皮肤癌、原位癌、淋巴瘤、神经纤维瘤、成神经细胞瘤、肥大细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、胶质瘤或肉瘤。

11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述癌症或肿瘤相关疾病选自膀胱癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫癌、前列腺癌、雌性生殖道癌、睾丸癌或胃肠道间质瘤。

12.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述癌症或肿瘤相关疾病选自直肠癌、结肠癌、食管鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、脂肪肉瘤、胶质母细胞瘤、子宫颈癌或子宫内膜癌。

13.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述乳腺癌包括在绝经后女性雌激素受体阳性和/或人表皮生长因子受体2阴性的局部晚期或转移性乳腺癌。