CN112156156B - 一种兽用中药抗病毒口服液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘200～300份、金银花150～200份、黄芩100～200份、栀子100～150份、板蓝根100～150份、鱼腥草80～100份、知母80～100份、桔梗50～80份、淡竹叶50～80份、甘草10～50份，具有清热解毒的功效，主治外感发热，在临床上可用于畜禽多种病毒病的防治。采用固态发酵技术和液态酶解技术联合应用，针对组方中的药材特性选用不同的益生菌和酶，来提高中药口服液的澄清度和有效成分的含量，保证产品临床使用效果，与常规提取工艺比较，能够降低能源消耗，并能保护对热敏感的有效成分，具有较好的推广应用价值。

Description

一种兽用中药抗病毒口服液及其制备方法

技术领域

本发明涉及畜禽中药口服液领域，具体涉及一种兽用中药抗病毒口服液及其制备方法。

背景技术

近几年随着家禽养殖规模不断加大，病毒性疾病已经成为目前危害家禽养殖的头号杀手。新城疫、禽流感、肾型传支已经成为目前危害养殖最为常见的病毒病。由于病毒病造成的养殖损失巨大，肉禽高死亡、饲料报酬增高，蛋禽高死亡、产蛋下降，种禽产蛋下降在临床上屡见不鲜。随着国家对抗病毒西药的禁止使用，中药抗病毒越来越被重视，开发一种对于家禽安全有效便于使用的新型抗病毒中药成为市场需要。

中医中药在预防和治疗病毒性疾病具有悠久的历史和丰富的临床经验，随着药学研究的不断深入和扩大，证实中药具有较强的抗病毒活性。另外中药具有毒副作用小、无耐药性，且大都具有增强机体免疫力的作用。但是随着人药、兽药的用量逐年上升，中药材资源显得有些紧张。由于中药口服液制剂常规提取生产工艺相对落后，主要是以水提醇沉工艺为主，有效成分提取率低，杂质清除率低，消耗大量溶剂，这样产品生产成本比较高。因此对中药材常规提取工艺进行优化，才能提升产品竞争力。

中药材大多来源于植物的根、茎、叶、果实等，这些部位细胞具有纤维性强、淀粉多等特性，中药材的活性成分存在于纤维素的细胞内，少量存在于细胞间隙。植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素、果胶质等大分子组成，植物中小分子活性成分渗透到溶液中，必须要穿透植物细胞壁。中药常规提取工艺如热水、酸、碱、有机溶剂浸提法，受细胞壁主要成分纤维素的阻碍，往往提取效率较低，且有效成分的收率偏低，大量有效成分在植物细胞壁中没有释放到溶媒中。同时，传统的除杂工艺通常醇沉法、酸碱法以及絮凝沉淀法进行除杂，效率较低，且易损失较多的有效成分，对紧缺的药材资源是一大浪费，并且提高了生产成本。

发明内容

本发明的第一个目的在于，针对现有技术存在的问题，提供一种兽用中药抗病毒口服液。

本发明的第二个目的在于，提供上述抗病毒口服液的制备方法。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘200～300份、金银花150～200份、黄芩100～200份、栀子100～150份、板蓝根100～150份、鱼腥草80～100份、知母80～100份、桔梗50～80份、淡竹叶50～80份、甘草10～50份。

进一步地，根据本发明的第一个方面所述的兽用中药抗病毒口服液，提供一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘250份、金银花150份、黄芩120份、栀子120份、板蓝根100份、鱼腥草90份、知母90份、桔梗60份、淡竹叶60份、甘草40份。

根据本发明的第一个方面所述的兽用中药抗病毒口服液，所述活性成分由原料通过固态发酵联合酶解技术制备得到。

本发明的第二个方面，提供上述兽用中药抗病毒口服液的制备方法，包括以下步骤：

S1：将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶和甘草单独干燥粉碎，混合均匀得混合物A，加入益生菌、培养基进行固体发酵，得混合物B；

S2：将黄芩加入沸水中，过滤分离得药液C和药渣D；

S3：将混合物B和药渣D混合得混合物E，加入复合酶，之后酶灭活处理，得中药提取液F；

S4：对中药提取液F过滤离心，除去固体杂质得药液G，与药液C混合后过滤浓缩即可。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所述益生菌为植物乳酸菌。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所述植物乳酸菌的浓度为2.0～4.0×10⁹CFU/g。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所述益生菌的质量为混合物A的2～5％。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所述培养基的成分为：葡萄糖10～30g、酵母粉10～20g、蛋白胨10～20g。

优选地，根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所述培养基的成分为：葡萄糖15g、酵母粉10g、蛋白胨10g。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所发酵条件为：温度为36～38℃，相对湿度为40～45％，时间为72～96h。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S1中所粉碎具体为粉碎后细度达到20～30目。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述复合酶的质量为混合物E的1～3％。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述复合酶的质量为混合物E的2％。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成。

进一步地，根据本发明第二个方面所述的制备方法，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶的质量比为(3～6)：(1～4)：(2～5)：(1～3)。

进一步地，根据本发明第二个方面所述的制备方法，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶的质量比为4：2：3：1。

优选地，根据本发明第二个方面所述的制备方法，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶的酶活力为20000～50000U/g。

优选地，根据本发明第二个方面所述的制备方法，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的酶活力为40000U/g。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述酶解的条件为：pH值为4.5～6.5，温度为40～60℃，时间为20～30min。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述酶解的条件为：pH值为5.5，温度为45℃，时间为25min。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述酶灭活的条件为：温度为80～100℃，时间为30～40min。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述酶灭活的条件为：温度为90℃，时间为35min。

根据本发明第二个方面所述的制备方法，步骤S3中所述浓缩具体为截留分子量100～1500Da，直径0～5nm的有效成分。

本发明的有益效果是：

1.本发明提供了一种兽用抗病毒中药口服液，其中连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草能起到清热解毒的作用；知母、桔梗等具有清热泻火、滋阴润燥、宣肺祛痰的作用；甘草具有化痰止咳、调和诸药等功效，根据中医中药的遣药组方原则，按照君、臣、佐、使进行配伍，具有清热解毒的功效，主治外感发热，在临床上可用于畜禽多种病毒病的防治。

2.上述中药口服液的制备方法方法采用固态发酵技术和液态酶解技术联合应用，针对组方中的药材特性选用不同的益生菌和酶，在温和条件下进行固态发酵和酶解，先通过固态发酵技术，能够产生多糖、多肽等提高免疫力、抗菌、抗病毒成分；再进行酶解中药材的细胞壁，其中纤维素酶、半纤维素酶能酶解中药植物的细胞壁，细胞内有效容易溶出，提高有效成分溶出率；果胶酶、淀粉酶能够提高中药提取液的澄清度，降低其粘稠度。将影响液体制剂中的杂质组分分解去除，来提高中药口服液的澄清度和有效成分的含量，能够使主要有效成分含量提取率增加50～220％，保证产品临床使用效果，与常规提取工艺比较，能够降低能源消耗，并能保护对热敏感的有效成分，具有较好的推广应用价值。

本发明依据古典医学专著《温病条辩》，其中方剂“银翘散”，方剂组成“连翘一两(9g)、银花一两(9g)、苦桔梗六钱(6g)、薄荷六钱(6g)、竹叶四钱(4g)、生甘草五钱(5g)、荆芥穗四钱(5g)、淡豆豉五钱(5g)、牛蒡子六钱(9g)”主要用于人上预防治疗温疫病、流感等，主治温病初起，发热无汗或有汗不畅，微恶风寒，头痛口渴等症。

畜禽在治疗预防治疗温疫、流感病方面，与人用药治疗方法上有异同。中医药的应用遵循“辨证论治”原则，具体药物的选择，配伍关系的安排，药量大小的确定，以及剂型、服法的要求等等，都与病症的变化，体质的强弱，年龄的大小、四时气候的不同等因素密切相关，因此，遣药组方又要求有充分的灵活变化。本专利组方依据古典医学专著《温病条辩》中的“银翘散”基本组方，结合畜禽用法用量，遵循方剂变化原则，优化调整为上述组方，经在畜禽上的临床验证，其治疗效果明显。

根据中医辨证论治、君臣佐使的原则，并结合畜禽临床疾病诊治特点。“温邪上受，首先犯肺”。肺与皮毛相合，所以温病初起，多见发热，头痛，微恶风寒，汗出不畅或无汗。肺受湿热之邪，上熏口咽，故口渴、咽痛。肺失清肃，故咳嗽。治当辛凉解表，透邪泄肺，使热清毒解。用连翘、金银花为君药，既有辛凉透邪清热之效，又具有芳香劈秽解毒之功。黄芩、栀子为臣药，苦寒清降，清热燥湿，助君清三焦之热。鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶为佐药，有养阴生津，清肺热、宣肺利咽之功效。甘草为使药，调和诸药，兼以益气和中。

附图说明

图1为对比实施例1和实施例1中所得抗病毒口服液有效主成分含量对比。

图2为鸡群中采食量变化折线图。

图3为鸡群中产蛋率变化折线图。

图4为鸡群中死亡数量变化折线图。

图5为鸡群中咳嗽比例变化折线图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限定。

实施例1

一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘250份、金银花150份、黄芩120份、栀子120份、板蓝根100份、鱼腥草90份、知母90份、桔梗60份、淡竹叶60份、甘草40份。

上述口服液的制备方法为：

S1：将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草按照传统炮制工艺进行洗、切、烘等前处理，然后各个药材单独粉碎，细度达到25～30目，依次称取后连翘、金银花、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草，反复搅拌混合均匀，按其质量的5％加入菌种植物乳酸菌，其中植物乳酸菌的浓度为2.0～4.0×10⁹CFU/g。再加入纯化水、培养基等，充分混合均匀，其中培养基的成分为葡萄糖15g、酵母粉10g、蛋白胨10g。使其含水量在40～45％，然后装入发酵专用袋，控制发酵温度36～38℃，相对湿度40～45％，固态发酵84h，固态发酵后得混合物B；

S2：按照黄芩质量比，煮沸的8倍量的纯化水，再加入黄芩，煮沸20min，过滤分离得药液C和药渣D；

S3：将混合物B和药渣D进行混合并搅拌均匀得混合物E，加入6～8倍量的水，再加入质量百分比2％的复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成，比例为4：2：3：1，上述酶的酶活力为30000～40000U/g，搅拌均匀；PH值为6～6.5，温度为50～55℃，边搅拌边酶解30min，然后升温至90～100℃，恒温边搅拌边提取30min，对酶灭活处理，得中药提取液F；

S4：对中药提取液F粗虑、离心，粗虑后对滤液采取蝶式离心，对中药材提取物进行固、液分离，除去固体杂质，得药液G，与药液C混合，膜过滤、浓缩，采用纤维超滤膜进行超滤，除去微粒杂质，然后采用纳滤膜进行浓缩，截留分子量150～1500Da、直径0～5nm的有效成分，得到中药浓缩液，浓缩至相对密度1.04～1.08，定容达到规定体积1000L，加入防腐剂，灌装成成品。

实施例2

一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘200份、金银花200份、黄芩200份、栀子100份、板蓝根100份、鱼腥草100份、知母80份、桔梗50份、淡竹叶80份、甘草10份。

上述口服液的制备方法为：

S1：将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草按照传统炮制工艺进行洗、切、烘等前处理，然后各个药材单独粉碎，细度达到20～25目，依次称取后连翘、金银花、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草，反复搅拌混合均匀，按其质量的2％加入菌种地衣芽孢杆菌，其中植物乳酸菌的浓度为2.0～4×10⁹CFU/g。再加入纯化水、培养基等，充分混合均匀，其中培养基的成分为葡萄糖15g、酵母粉10g、蛋白胨10g。使其含水量在35～40％，然后装入发酵专用袋，控制发酵温度36～38℃，相对湿度40～45％，固态发酵72h，固态发酵后得混合物B；

S2：按照黄芩质量比，煮沸的6倍量的纯化水，再加入黄芩，煮沸10min，过滤分离得药液C和药渣D；

S3：将混合物B和药渣D进行混合并搅拌均匀得混合物E，加入6～8倍量的水，再加入质量百分比1％的复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成，比例为4：2：3：1，上述酶的酶活力为40000～50000U/g，搅拌均匀；PH值为5～6，温度为55～60℃，边搅拌边酶解20min，然后升温至80～90℃，恒温边搅拌边提取40min，对酶灭活处理，得中药提取液F；

S4：对中药提取液F粗虑、离心，粗虑后对滤液采取蝶式离心，对中药材提取物进行固、液分离，除去固体杂质，得药液G，与药液C混合，膜过滤、浓缩，采用纤维超滤膜进行超滤，除去微粒杂质，然后采用纳滤膜进行浓缩，截留分子量150～1500Da、直径0～5nm的有效成分，得到中药浓缩液，浓缩至相对密度1.02～1.04，定容达到规定体积1000L，加入防腐剂，灌装成成品。

实施例3

一种兽用中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料制成：连翘300份、金银花150份、黄芩100份、栀子150份、板蓝根150份、鱼腥草80份、知母100份、桔梗80份、淡竹叶50份、甘草50份。

上述口服液的制备方法为：

S1：将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草按照传统炮制工艺进行洗、切、烘等前处理，然后各个药材单独粉碎，细度达到20～25目，依次称取后连翘、金银花、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草，反复搅拌混合均匀，按其质量的4％加入菌种地衣芽孢杆菌，其中植物乳酸菌的浓度为2.0～4.0×10⁹CFU/g。再加入纯化水、培养基等，充分混合均匀，其中培养基的成分为葡萄糖15g、酵母粉10g、蛋白胨10g。使其含水量在40～45％，然后装入发酵专用袋，控制发酵温度36～38℃，相对湿度40～45％，固态发酵96h，固态发酵后得混合物B；

S2：按照黄芩质量比，煮沸的7倍量的纯化水，再加入黄芩，煮沸15min，过滤分离得药液C和药渣D；

S3：将混合物B和药渣D进行混合并搅拌均匀得混合物E，加6～8倍量水，再加入质量百分比3％的复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成，比例为4:2:3:1，上述酶的酶活力为20000～30000U/g，搅拌均匀；PH值控制在4.5～5，温度控制在40～55℃，边搅拌边酶解25min，然后升温至90～100℃，恒温边搅拌边提取35min，对酶灭活处理，得中药提取液F；

S4：对中药提取液F粗虑、离心，粗虑后对滤液采取蝶式离心，对中药材提取物进行固、液分离，除去固体杂质，得药液G，与药液C混合，膜过滤、浓缩，采用纤维超滤膜进行超滤，除去微粒杂质，然后采用纳滤膜进行浓缩，截留分子量150～1500Da、直径0～5nm的有效成分，得到中药浓缩液，浓缩至相对密度1.04～1.08，定容达到规定体积1000L，加入防腐剂，灌装成成品。

对比实施例1

一种兽用中药抗病毒口服液，由以下重量份的原料组成：连翘250份、金银花150份、黄芩120份、栀子120份、板蓝根100份、鱼腥草90份、知母90份、桔梗60份、淡竹叶60份、甘草40份。

上述口服液的制备方法为：

1.将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶、甘草洗净切段，加8倍量水，煮沸，提取3次，一、二次煮沸各2h，第三次煮沸1h，离心过滤，合并滤液；

2.对滤液进行浓缩，浓缩到相对密度为1.17(60℃)，加入乙醇，使含醇量达到75％，冷藏静置72h；

3.冷藏后过滤，滤液回收乙醇，定容，加水调至1000L，灌装、灭菌，即得成品。

对比实施例2

一种兽用中药抗病毒口服液，采用一种常用的治疗止咳、利咽、祛痰的经典配方。与实施例1中的配方的相同之处在于：都具有君药连翘、金银花，具有清热、抗病毒之功效，为经典药对组合；桔梗、淡竹叶、甘草等佐使药具有止咳、利咽、祛痰之功效。由以下重量份的原料组成：连翘250份、金银花150份、薄荷120份、荆芥穗120份、淡豆豉100份、牛蒡子90份、桔梗60份、淡竹叶60份、甘草40份。

上述口服液的制备方法为：

S1：将连翘、金银花、薄荷、荆芥穗、淡豆豉、牛蒡子、桔梗、淡竹叶、甘草，按照传统炮制工艺进行洗、切、烘等前处理，然后各个药材单独粉碎，细度达到25～30目，然后按照组方量投料，搅拌混合均匀，按其质量的5％加入菌种植物乳酸菌，其中植物乳酸菌的浓度为2.0～4.0×10⁹CFU/g。再加入纯化水、培养基等，充分混合均匀，其中培养基的成分为葡萄糖15g、酵母粉10g、蛋白胨10g。使其含水量在40～45％，然后装入发酵专用袋，控制发酵温度36～38℃，相对湿度40～45％，固态发酵84h，固态发酵后得混合物B；

S2：将混合物B加入6～8倍量的水，再加入质量百分比2％的复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成，比例为4：2：3：1，上述酶的酶活力为30000～40000U/g，搅拌均匀；PH值为6～6.5，温度为50～55℃，边搅拌边酶解30min，然后升温至90～100℃，恒温边搅拌边提取30min，对酶灭活处理，得中药提取液C；

S3：对中药提取液C粗虑、离心，粗虑后对滤液采取蝶式离心，对中药材提取物进行固、液分离，除去固体杂质，得药液D，膜过滤、浓缩，采用纤维超滤膜进行超滤，除去微粒杂质，然后采用纳滤膜进行浓缩，截留分子量150～1500Da、直径0～5nm的有效成分，得到中药浓缩液，浓缩至相对密度1.04～1.08，定容达到规定体积1000L，加入防腐剂，灌装成成品。

实施例4有效主成分含量检测

通过测量黄芩苷含量、绿原酸含量、栀子苷含量、多糖类含量来进行评估提取效率。分别检测了实施例1和对比实施例1中的有效主成分含量。

(1)黄芩苷含量检测方法：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(50：50：1)为流动相；检测波长为274nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取本口服液1ml，置50ml量瓶中，加50％甲醇适量，超声处理20分钟，放置至室温，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪测定，测定，即得。

(2)绿原酸含量检测方法：

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸(20:80:1)为流动相；检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。

对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含40μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取本口服液2ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液10μl和供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

(3)栀子苷含量检测方法：

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(15:85)为流动相；检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备：取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密吸取本口服液0.25mL，置于50ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度线，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

(4)多糖含量测定方法

试剂及配制：浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液。DNS显色液：称取3.25gDNS溶于少量蒸馏水中并转移至500ml容量瓶中，加入2mol/L的NaOH溶液162.5ml，再加入7.5ml的丙三醇，摇匀，加蒸馏水定容至500ml，摇匀。

操作步骤：

①标准曲线制作：在6支试管中分别加入1mg/ml葡萄糖标准溶液0.00ml，0.10ml，0.20ml，0.30ml，0.40ml，0.50ml，补蒸馏水至0.5ml，然后加入DNS试剂1.5ml，充分混匀。置于沸水浴中煮沸5min，然后迅速流水冷却，并分别向试管中加入4ml蒸馏水，混匀。在540nm处读OD值。以葡萄糖浓度(μg/ml)为横坐标，以OD值为纵坐标制作标准曲线，得到其线性回归方程。

②样品含量测定：吸取0.5ml样品液，按照上述步骤操作测定OD值，并代入回归方程中计算样品中的还原糖含量。

检测结果见表1和图1。

表1有效主成分含量

从图1和表1可以看出，实施例1中采用固态发酵与酶解技术联合提取法与对比实施例1中的常规提取方法对比，实施例1中制备方法得到的口服液澄清度更高，主要有效成分含量提取率增加增加50～220％，并可以增加多肽、多糖等活性成分含量，其中黄芩苷含量提取率增加73.21％，绿原酸含量提取率增加75％，栀子苷含量提取率增加91.67％，多糖含量提取率增加218.56％。说明相对于对比实施例1中的常规提取方法，实施例1中的制备方法可以显著提高有效主成分的含量。

实施例5临床应用效果对比

试验动物：湖北某养殖户养殖10000羽蛋鸡，鸡群发病，症状表现为：精神不振、嗜睡打蔫、发热、咽喉红肿、咳嗽、流涕、采食量下降、产蛋率下降、死鸡等，现场观察诊断为病毒性流感。

根据鸡群栏舍结构规格，将鸡群平均分成4组，每组2500羽蛋鸡，发病比例以及临床症状一致。分别命名为空白组、对比实施例2、对比实施例1、实施例1。其中空白组投喂清水；对比实施例2投喂对比实施例2提供的抗病毒口服液；对比实施例1投喂对比实施例1提供的抗病毒口服液；实施例1投喂实施例1提供的抗病毒口服液。各组投喂剂量相同，同时投喂药物，连续投喂5天，观察鸡群采食量、产蛋率、死鸡、咳嗽比例等变化情况。

(1)鸡群中采食量分析

分别记录4组的鸡群在投喂药物之前以及之后6天的鸡群的采食量，具体数据见表2和图2。

表2鸡群中采食量变化(斤/羽/天)

由表2和图2可知，和其他组相比，实施例1组中抗病毒口服液可以快速治疗病毒性疾病导致的采食量下降，并且效果显著。说明实施例1组中抗病毒口服液在提高采食量方面效果更好。

(2)鸡群中产蛋率分析

分别记录4组的鸡群在投喂药物之前以及之后6天的鸡群的产蛋率，具体数据见表3和图3。

表3鸡群中产蛋率变化(％)

表3和图3可知，和其他试验组相比，实施例1组中抗病毒口服液可快速提高鸡群产蛋率，且恢复到产蛋高峰，表明实施例1组中抗病毒口服液在提高产蛋率方面效果更好。

(3)鸡群中死亡数量分析

分别记录4组的鸡群在投喂药物之前以及之后6天的鸡群的死鸡数量，计算其死淘率，具体数据见表4和图4。

表4鸡群中死亡数量变化(羽)

由表4和图4可知，和其他试验组相比，实施例1组中抗病毒口服液可显著减少由于病毒性疾病导致的死鸡数量，表明实施例1组中抗病毒口服液在降低死淘率方面效果更好。

(4)鸡群中咳嗽比例分析

分别记录4组的鸡群在投喂药物之前以及之后6天的鸡群的咳嗽比例，具体数据见表5和图5。

表5鸡群中咳嗽比例变化(％)

由表5和图5可知，和其他试验组相比，实施例1组中抗病毒口服液可显著快速减少由于病毒性疾病导致的咳嗽比例，表明实施例1组中抗病毒口服液在止咳方面效果更好。

综上所述，实施例1组中的抗病毒口服液在提高采食量和产蛋率、降低死淘率以及止咳方面都明显优于对比实施例1和对比实施例2。

一方面说明相对于对比实施例1中的常规提取方法，实施例1中的制备方法可以显著提高有效主成分的含量，更好的发挥药物作用。

另一方面说明，相对于对比实施例2中的经典组方，实施例1中的中药组合在抗病毒方面效果更好。因为由于畜禽病毒性感冒容易引起脏腑实热、耗伤津液，引起咳嗽，咽痛。对比实施例2中的经典方银翘散则主治温病初起的辛凉解表剂，仅为透表清热的轻剂，薄荷辛凉解表，清利咽喉。辛温的荆芥穗、豆豉，助君药开皮毛逐邪，侧重于表，为轻症。而实施例1中在有君药连翘、金银花之外，又添加黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草为君药，若火毒炽盛，高热烦躁，三焦俱热者，增强清三焦实热。同时会耗伤津液，出现咳喘咽痛，故添加知母增强滋阴润燥，与桔梗、淡竹叶甘草组成佐使药，用于温热病邪热亢盛，滋阴润肺。实施例1中的组方侧重于温病由表入里，形成实热症，由轻症转为重症，抗病毒效果更好。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种用于治疗鸡病毒性流感的中药抗病毒口服液，其活性成分由以下重量份的原料通过固态发酵联合酶解技术制成：连翘200～300份、金银花150～200份、黄芩100～200份、栀子100～150份、板蓝根100～150份、鱼腥草80～100份、知母80～100份、桔梗50～80份、淡竹叶50～80份、甘草10～50份；

所述中药抗病毒口服液的制备方法，包括以下步骤：

S1：将连翘、金银花、黄芩、栀子、板蓝根、鱼腥草、知母、桔梗、淡竹叶和甘草分别干燥粉碎，将除黄芩以外的其他原料混合均匀得混合物A，加入植物乳酸菌和培养基进行固态发酵，得混合物B；

S2：将黄芩加入沸水中，过滤分离得药液C和药渣D；

S3：将混合物B和药渣D混合得混合物E，加入由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶组成的复合酶，之后酶灭活处理，得中药提取液F；

S4：对中药提取液F过滤离心，除去固体杂质得药液G，与药液C混合后过滤浓缩即可；

所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶的质量比为（3～6）：（1～4）：（2～5）：（1～3）；

步骤S3中酶解的条件为：pH值为4.5～6.5，温度为40～60℃，时间为20～30min。

2.根据权利要求1所述的中药抗病毒口服液，其特征在于，步骤S1中所述植物乳酸菌的质量为混合物A的2～5%。

3.根据权利要求1所述的中药抗病毒口服液，其特征在于，步骤S1中所述发酵条件为：温度为36～38℃，湿度为40～50%，时间为10～15h。

4.根据权利要求1所述的中药抗病毒口服液，其特征在于，步骤S3中所述复合酶的质量为混合物E的1～3%。

5.根据权利要求1所述的中药抗病毒口服液，其特征在于，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶的酶活力为20000～50000U/g。

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