CN111610169A - 试样测定装置及试样测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种关于试样测定装置的光学单元,能够进一步提高组装容易度和维护性的试样测定装置及试样测定方法。试样测定装置(10)具备:照射部(100),其向试样照射照射光,并使得从试样中的粒子产生光;光学模块(200),其固定有多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270),该多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)具有供从试样中的粒子产生的光入射的入射面、选择性地反射入射至入射面的光的一部分的反射面(201~206)以及出射由反射面(201~206)反射的光的出射面(212、222、232、242、252、262);光接收部(300),其接收从多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的出射面(212、222、232、242、252、262)出射的光。
Description
技术领域
本发明涉及测定试样的试样测定装置及试样测定方法。
背景技术
已知有获取试样中细胞的荧光图像并进行试样测定的试样测定装置。专利文献1所记载的试样测定装置(荧光图像分析装置600)如图16所示具备光学单元610,且光学单元610具有由4片分色镜组合而成的结构。光学单元610的4片分色镜以相互略微不同的角度反射由于光照试样而从试样中的粒子产生的不同波长的4种光,并使其在拍摄部620的光接收面上分离,分别针对各个波长获取荧光图像。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本专利特开2018-10018号公报。
发明内容
发明要解决的技术问题
上述试样测定装置中,在装置制造中的组装时、装置出厂后的维护时需对多个分色镜进行光轴对准等位置调整,以使得通过光学单元610所具备的多个分色镜反射的各波长的光照射在拍摄部620的光接收面上所希望的位置。
如图17所示,上述光学单元610例如具备4片安放分色镜611a的板611,作业人员通过旋转设于板611的销611b来调整安放于板611的分色镜611a的旋转位置。4片板611分别独立安放分色镜611a,作业人员分别对4片板611单独地进行分色镜611a的位置调整。
本发明目的在于提供一种关于试样测定装置的光学单元,能够进一步提高组装容易度和维护性的试样测定装置及试样测定方法。
解决技术问题的技术手段
本发明第1形态涉及试样测定装置。参照图1,本形态所涉及的试样测定装置(10)具备:照射部(100),其向试样照射照射光,并使得从试样中的粒子产生光;光学模块(200),其固定有多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270),该多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)具有使从试样中粒子产生的光入射的入射面、选择性地反射入射至入射面的光的一部分的反射面(201~206)以及出射由反射面(201~206)反射的光的出射面(212、222、232、242、252、262);光接收部(300),其接收从多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的出射面(212、222、232、242、252、262)出射的光。
光学模块(200)是一种光学构件,其一部分或全部由几乎均质的透射性材料构成,对光进行透射并利用进入光学模块(200)内及外部空间的光的速度的不同使光发生折射。构成光学模块(200)的棱镜(210、220、230、240、250、260、270)例如由玻璃、树脂、水晶等制成。
根据本形态所涉及的试样测定装置(10),例如从试样中的粒子产生的波长互不相同的多个光分别被设于光学模块(200)的多个反射面(201~206)反射,并被分别导向光接收部(300)。对多个波长的光使用通用的光学模块(200),由此,无需使用用于将各波长的光分别导向光接收部(300)的各个分色镜等。通过设置固定有具备反射面(201~206)的多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的光学模块(200)能够固定各反射面(201~206)之间的角度,因此在这种光学单元中,不需要分别针对多个波长个别地进行多个光学构件的光轴对准等的调整。因此,能够减轻试样测定装置组装时和维护时的作业负担。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:光学模块(200)中,多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)接合且形成为一体。“多个棱镜形成为一体”指的是光在通过光学模块(200)的多个反射面(201~206)时,不会通过各棱镜的外部(空气)。由于多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)形成为一体,光学模块(200)的多个反射面(201~206)的角度关系不会变化。另外,由于多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)形成为一体,因此多个反射面(201~206)不会露在外部(空气)。由此,能够抑制被多个反射面(201~206)反射的各光的光轴从所希望的方向偏离到预想外的程度。因此,能够抑制到达光接收部(300)的所希望的光接收区域的光减少。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:光学模块(200)透射从试样中的粒子产生的光,且光接收部(300)接受透射过光学模块(200)的光。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)沿入射光学模块(200)的光的前进方向配置。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)相对于入射至光学模块(200)的光的前进方向来说向相同方向倾斜。这样一来,被光学模块(200)的各反射面(201~206)反射的光朝向同一方向侧,因此能够轻松地用1个光接收部(300)接收经由光学模块(200)的光。因此,与配置多个光接收部(300)的情况相比能够简洁地构成试样测定装置(10)。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)中第1组反射面(201、203、205)相对于入射光学模块(200)的光的前进方向来说向第1方向倾斜,多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)中不同于第1组的第2组反射面(202、204、206)相对于入射光学模块(200)的光的前进方向来说向不同于第1方向的第2方向倾斜。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)相对于入射至光学模块(200)的光的前进方向来说以相同角度倾斜。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)相对于入射至光学模块(200)的光的前进方向来说以互不相同的角度倾斜。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的出射面(212、222、232、242、252、262)分别向对应的光接收区域(321~326)出射不同波长的光。这样一来,能够通过调整多个出射面的形状来将各波长的光导向光接收部(300)的对应的光接收区域。
此时,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的出射面(212、222、232、242、252、262)相对于入射光学模块(200)的光的前进方向来说以不同角度倾斜。这样一来,能够通过调整多个出射面(212、222、232、242、252、262)的角度来将各波长的光导向光接收部(300)的对应的光接收区域。
另外,可为如下技术方案:多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)的间隔的宽度使得被反射面(201~206)反射的光不会入射到与对应的出射面(212、222、232、242、252、262)相邻的其他出射面(212、222、232、242、252、262)。这样一来,能够抑制各波长的光在光接收部(300)的光接收区域重叠。因此,能够高精确度地获取基于各波长的光的信号。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:棱镜(210、220、230、240、250、260、270)由透射性的玻璃或树脂制成。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:反射面(201~206)反射一定波长的光并透射一定波长以外的光。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:光接收部(300)在1个光接收面(311)中接收被多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)反射的光。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:光接收部具备第1光接收部(510)和第2光接收部(520),第1光接收部(510)在第1光接收面(511)接收被多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)中第1组反射面(201、203、205)反射的光,第2光接收部(520)在不同于第1光接收面(511)的第2光接收面(521)接收被多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)中不同于第1组的第2组反射面(202、204、206)反射的光。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:光接收部(300)是TDI相机或CCD相机。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备缩小光学系统(400),该缩小光学系统(400)缩小从被照射光照射了的试样中的粒子产生的光的光束尺寸并使其成为平行光,且将光导向光学模块(200)。这样一来,能够使得光学模块(200)的尺寸小型化。因此,能够缩小试样测定装置(10)的整体尺寸。
此时,可为如下技术方案:缩小光学系统(400)具备聚集从试样中的粒子产生的光的第1透镜(41)、将由第1透镜(41)聚集的光转换为平行光并将其导向光学模块(200)的第2透镜(42)。这样一来,通过将第1透镜(41)的焦距设置地大于第2透镜(42)的焦距,能够将光接收部(300)的光接收面上的像设定地大。
此时,可为如下技术方案:第1透镜(41)及第2透镜(42)是凸透镜。
此时,可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备光圈(32),该光圈(32)配置于由第1透镜(41)聚集的光的汇聚位置,且用于去除除了由第1透镜(41)聚集的光以外的不需要的光。这样一来,能够去除多余的光。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备第3透镜(43、501、502),该第3透镜(43、501、502)使被多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)反射的不同波长的光分别在光接收部(300、510、520)汇聚。这样一来,通过使用缩小光束尺寸的缩小光学系统(400)能够将第3透镜(43、501、502)的焦距设定地小。由此,能够缩小从第3透镜(43、501、502)到光接收部(300、510、520)的距离,因此能够缩小该方向上的试样测定装置(10)的宽度。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备物镜(31),该物镜(31)对从被照射光照射了的试样中的粒子产生的光进行聚集。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)中,光接收部(300、510、520)在不同的光接收区域(321~326、531~536)分别拍摄粒子的明视场图像及荧光图像。
此时,可为如下技术方案:在多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的反射面(201~206)的端部配置的反射面(206)反射明视场图像用的光。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备阻断照射光所含一定波长的光的过滤器(33、34)。照射光所含一定波长的光入射到从试样产生的各波长的光所入射到的光接收部(300)的光接收面的话,该光会成为杂散光,从粒子产生的光的测定精确度会降低。与此相对,设置阻断照射光所含一定波长的光的过滤器的话,能够抑制被导向光接收面的杂散光。
此时,可为如下技术方案:光接收部(300)在不同的光接收区域(321~326、531~536)分别拍摄粒子的明视场图像及荧光图像,过滤器(34)配置于光学模块(200)和光接收部(300、520)之间,且在荧光图像用的光通过的位置阻断明视场图像用的光。
可为如下技术方案:本形态所涉及的试样测定装置(10)具备供试样流动的流动室(20),照射部(100)向在流动室(20)流动的试样照射照射光。
本形态所涉及的试样测定装置(10)中,可为如下技术方案:粒子为细胞,光接收部(300)从被照射光照射了的细胞接收互不相同的多个波长的荧光。由此,能够基于多个波长的荧光详细进行细胞分析。
本发明的第2形态涉及一种试样测定方法。本形态所涉及的试样测定方法中,向试样照射照射光,使从试样中的粒子产生的光入射光学模块(200),将从多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)的出射面(212、222、232、242、252、262)出射的光导向光接收区域(321~326、531~536),该光学模块(200)固定有多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270),该多个棱镜(210、220、230、240、250、260、270)具有:从照射光所照射到的试样中的粒子产生的光所入射的入射面、选择性地反射入射的光的反射面(201~206),以及出射由反射面(201~206)反射的光的出射面(212、222、232、242、252、262)。
根据本形态所涉及的试样测定方法能起到与第1形态同样的效果。
发明效果
根据本发明,关于试样测定装置的光学单元,能够提高组装容易度和维护性。
附图说明
图1是实施方式1所涉及的试样测定装置的结构示意图;
图2是实施方式1所涉及的试样测定装置的结构框图;
图3是实施方式1所涉及的照射部的结构示意图;
图4是实施方式1所涉及的棱镜的结构示意图;
图5(a)是实施方式1所涉及的棱镜组装前的状态的斜视示意图;图5(b)是实施方式1所涉及的棱镜组装完成后的状态的斜视示意图;
图6是实施方式1的变更例所涉及的棱镜组装前的状态的斜视示意图;
图7是实施方式1所涉及的光接收部的结构示意图;
图8(a)是实施方式1所涉及的缩小光学系统及测定部的光学系统整体的综合倍率的说明示意图;图8(b)是比较例所涉及的缩小光学系统及测定部的光学系统整体的综合倍率的说明示意图;
图9是实施方式1的变更例所涉及的缩小光学系统的结构示意图;
图10是实施方式1所涉及的试样测定装置的测定作业的流程图;
图11是实施方式2所涉及的测定部的结构示意图;
图12是实施方式3所涉及的棱镜的结构示意图;
图13是实施方式4所涉及的棱镜的结构示意图;
图14是实施方式4所涉及的测定部的结构示意图;
图15是实施方式5所涉及的测定部的结构示意图;
图16是关联技术所涉及的结构的说明示意图;
图17是关联技术所涉及的结构的说明示意图。
具体实施方式
<实施方式1>
图1是试样测定装置10的结构示意图。图1中,XYZ轴相互正交,X轴方向及Y轴方向是与水平面平行的方向,Z轴正方向是铅直下方向。其他图中XYZ轴也与图1同样地进行了设定。
试样测定装置10是一种流式细胞仪,在该流式细胞仪中,向在形成于流动室20内部的流路21流动的试样照射照射光,并拍摄被照射光照射的试样中的粒子的图像。试样测定装置10能够通过对拍摄的粒子图像进行分析来测定粒子和试样等的状态。
测定部63具备:照射部100、流动室20、物镜31、光圈32、过滤器33、34、第1透镜41、第2透镜42、第3透镜43、光学模块200、光接收部300。
照射部100向在形成于流动室20内部的流路21流动的试样照射照射光。照射光包括多个波长λ11、λ12、λ13、λ6的光。照射光照射至试样后,从试样所含粒子会产生散射光和荧光等光。能从试样中的粒子产生的光的波长由照射部100照射的光的波长及向试样中的粒子施加的荧光标记等预先决定。从粒子产生的光包括第1波长的光、第2波长的光、第3波长的光、第4波长的光、第5波长的光以及第6波长的光。第1波长的光、第2波长的光、第3波长的光、第4波长的光、第5波长的光以及第6波长的光以下分别称为波长λ1的光、波长λ2的光、波长λ3的光、波长λ4的光、波长λ5的光以及波长λ6的光。在实施方式1中,“波长λ的光”意味着相对于中心波长λ而言一定范围的波长的光。
在图1中,图示了针对试样向X轴正方向照射照射光,但针对流动室20的照射光的照射方向不限于此。如后述参照图3的那样,在实施方式1中,用于激发荧光的照射光向Y轴正方向照射试样,用于在照射光向X轴正方向照射试样时获取明视场图像。
在流动室20的内部,流路21在Z轴方向上形成,在流路21,试样向Z轴正方向流动。物镜31剧集从试样向X轴正侧产生的光并使其成为平行光。第1透镜41是凸透镜,其对由物镜31聚集并转换为平行光的光进行聚集,并使其在光圈32的位置汇聚。第1透镜41抑制色差。第1透镜41也可以由多个透镜构成。
光圈32是与Y-Z平面平行的平板,光圈32中形成有在X轴方向贯通的孔32a。孔32a配置于由第1透镜41聚集光的汇聚位置。通过配置光圈32,从试样中的粒子产生的光以外的不需要的光、例如被流动室20的外侧面等反射的光等被光圈32阻挡,仅有从试样中的粒子产生的光会通过孔32a并被导向第2透镜42。由此,能够去除多余的光,即,从除了试样中的粒子以外的地方产生的光。光圈32不限于平板,也可以是能够改变孔32a的直径的光圈机构。当多余的光不会引起特别问题时,也可以省略光圈32。
第2透镜42是凸透镜,其将通过光圈32的孔32a的光进行聚集并将其转换为平行光,且将其导向光学模块200。第2透镜42能够抑制色差。第2透镜42也可由多个透镜构成。过滤器33仅使从试样中的粒子产生的光通过。具体而言,设定过滤器33的透射波长且使得多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光透射过滤器33,多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6以外的波长的光被过滤器33阻断。第2透镜42和过滤器33之间也可以配置相位调制元件,以实现扩大的景深(Extended Depth of Focus : EDoF)。
在此,如上所述,向试样照射的照射光包括多个波长λ11、λ12、λ13的光。多个波长λ11、λ12、λ13的光的光束强度高,从试样中的粒子产生的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光例如是荧光,与照射光相比较光束强度较低,多个波长λ11、λ12、λ13的光入射到光接收部300的光接收面311的话,这些光会成为杂散光,从而粒子产生的光的测定精确度会降低。与此相对,设置阻断多个波长λ11、λ12、λ13的光的过滤器33的话,能抑制导向光接收面311的杂散光。
光学模块200是一种光学构件,其一部分或全部由几乎均质的透射性材料构成,其透射光并利用进入光学模块200内及外部空间的光的速度的不同使光折射。如后所述,光学模块200由多个棱镜构成。构成光学模块200的棱镜例如由玻璃、树脂、水晶等制成。光学模块200使从试样中的粒子产生的光透射。
光学模块200具备第1反射面、第2反射面、第3反射面、第4反射面、第5反射面以及第6反射面。第1反射面、第2反射面、第3反射面、第4反射面、第5反射面以及第6反射面以下分别称为反射面201、反射面202、反射面203、反射面204、反射面205以及反射面206。由第2透镜42转换为平行光的光向X轴正方向入射光学模块200。多个反射面201~206沿入射至光学模块200的光的前进方向依次排列配置。多个反射面201~206选择性地反射互不相同的波长的光并将其导向光接收部300的不同的光接收区域321~326。
在此,“导向光接收部的不同的光接收区域”可以像本实施方式这样,从光学模块200射出的多个波长的光经由第3透镜43等其他光学构件间接地导向光接收部300的各个光接收区域321~326,也可以直接导向光接收部300的各个光接收区域321~326。
反射面201能够反射波长λ1的光并透射波长λ1以外的光。反射面202能够反射波长λ2的光并透射波长λ2以外的光。反射面203能够反射波长λ3的光并透射波长λ3以外的光。反射面204能够反射波长λ4的光并透射波长λ4以外的光。反射面205能够反射波长λ5的光并透射波长λ5以外的光。反射面206能够反射波长λ6的光并透射波长λ6以外的光。
光学模块200在Y轴正侧具备第1出射面、第2出射面、第3出射面、第4出射面、第5出射面以及第6出射面。以下第1出射面、第2出射面、第3出射面、第4出射面、第5出射面以及第6出射面分别称为出射面212、出射面222、出射面232、出射面242、出射面252以及出射面262。
多个出射面212、222、232、242、252、262分别使被多个反射面201~206反射的各波长的光折射。更详细而言,多个出射面212、222、232、242、252、262分别对各光进行折射使得透射内部的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光的前进方向互不相同,且分别朝向光接收部300的对应的多个光接收区域321~326(参照图7)出射多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光。通过调整多个出射面212、222、232、242、252、262的形状能够将各波长的光导向光接收部300的不同的光接收区域321~326。
另外,光学模块200具备第1棱镜、第2棱镜、第3棱镜、第4棱镜、第5棱镜、第6棱镜以及第7棱镜。以下第1棱镜、第2棱镜、第3棱镜、第4棱镜、第5棱镜、第6棱镜以及第7棱镜分别称为棱镜210、棱镜220、棱镜230、棱镜240、棱镜250、棱镜260、棱镜270。
光学模块200通过使得7个棱镜210、220、230、240、250、260、270形成为一体而构成。“多个棱镜形成为一体”指的是光在通过光学模块200的多个反射面201~206时不会通过各棱镜的外部(空气)。由于使得多个棱镜形成为一体,光学模块200的多个反射面201~206的角度的关系不会变化。6个反射面201~206分别形成于6个棱镜220、230、240、250、260、270的X轴负侧的斜面(从试样中的粒子产生的光所入射的入射面)。光学模块200的详细结构稍后参照图4~图5(b)进行说明。
过滤器34配置于被多个反射面201~205反射的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光会通过的位置,并阻断漏出至多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光通过的区域的波长λ6的光。具体而言,过滤器34的透射波长使得多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光透射过滤器34,多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5以外的波长的光被过滤器34阻断。另外,过滤器34的配置位置偏离波长λ6的光朝向光接收部300的光接收区域326会通过的位置。
在此,波长λ6的光是作为照射光向试样照射并透射过试样中的粒子的光。因此,波长λ6的光的光束强度高于例如荧光等从试样中的粒子产生的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光的光束强度。因此,如果波长λ6的光入射到多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光所对应的光接收部300的5个光接收区域321~325的话,该光会成为杂散光,从粒子产生的光的测定精确度会降低。与此相对,设置阻断波长λ6的光的过滤器34的话,能够抑制导向多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的5个光接收区域321~325的杂散光。
第3透镜43使被光学模块200的多个反射面201~205反射并透射过过滤器34的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光分别在光接收部300汇聚。另外,第3透镜43使被光学模块200的反射面206反射的波长λ6的光在光接收部300汇聚。第3透镜43用于抑制色差。第3透镜43也可以由多个透镜构成。
在实施方式1中,可以使从试样产生的光成为平行光并入射光学模块200,但是也可以使从试样产生的光成为聚集的光并入射光学模块200。此时能够省略第3透镜43。
光接收部300分别在互不相同的光接收区域321~326接收经由光学模块200的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光。光接收部300是TDI(Time Delay Integration)相机。光接收部300拍摄经由光学模块200的各波长的光,并生成分别与各波长的光对应的拍摄图像。如后所述,多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光是从染色目标部位的荧光色素产生的荧光,因此基于多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的光的拍摄图像是荧光图像。波长λ6的光是透射过粒子的光,因此基于波长λ6的光的拍摄图像是明视场图像。光接收部300也可以是CCD相机等其他相机。但是,光接收部300是TDI相机的话,能够更加精确地获取基于目标部位的拍摄图像。
像这样,当从试样中的粒子产生互不相同的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光时,这些光分别被设于光学模块200的多个反射面201~206反射,并被分别导向光接收部300的不同的光接收区域321~326。通过对多个波长的光使用通用的光学模块200就无需使用用于将各波长的光分别导向不同的光接收区域321~326的各个分色镜等。通过设置多个反射面201~206形成为一体的光学模块200,各反射面之间的角度得到固定,因此不需要分别针对多个波长个别地进行多个光学构件的光轴对准等调整。因此,能够减轻试样测定装置10组装时和维护时的作业负担。
另外,多个棱镜210、220、230、240、250、260、270形成为一体,因此多个反射面201~206不会露在外部(空气)。由此,能够抑制被多个反射面201~206反射的各光的光轴从所希望的方向偏离到预想外的程度。因此,能够抑制到达光接收部300的所希望的光接收区域的光减少。
上述说明中,列举了对在流动室20的流路21流动的试样同时照射包括多个波长λ11、λ12、λ13、λ6的光作为照射光,并从试样能产生多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光的例子,但本发明不限于此。同时照射的光按照后述染色目标部位的荧光色素的种类、染色的目标部位的数量以及明视场图像获取的有无等来决定即可,多个波长λ11、λ12、λ13、λ6中的至少1个光作为照射光照射即可。此时,按照作为照射光照射至试样的光的波长,多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光中至少1个光会从试样中的粒子产生。
图2是试样测定装置10的结构框图。
预处理单元50对采自被检者的全血的样本进行一定处理,将白细胞作为测定对象粒子进行提取。采自被检者的样本除了采自生物体的全血之外,也可以是血浆、脑脊髓液、组织液、尿。测定对象粒子不限于白细胞,例如可以是上皮细胞等其他细胞,也可以是内质网的外泌体等。
另外,预处理单元50使用染色试剂以用荧光色素对测定对象粒子的目标部位进行染色。目标部位是测定对象粒子内的细胞核、基因以及测定对象粒子表面的多肽等。细胞核能够通过细胞核染色用荧光色素进行特异性染色。基因及粒子表面的多肽能够通过与包括荧光色素的标记抗体杂交来进行染色。实施方式1中,能够获取λ1、λ2、λ3、λ4、λ5这5种波长的荧光图像,因此目标部位能够从粒子内的细胞核、粒子内的一定基因以及粒子表面的一定多肽等中最多选择5个。
当选择5个目标部位时,设5个目标部位为P1~P5的话,目标部位P1会被通过照射波长λ11的激发光会产生波长λ1的荧光的荧光色素染色。目标部位P2被通过照射波长λ11的激发光时产生波长λ2的荧光的荧光色素染色。目标部位P3被通过照射波长λ12的激发光时产生波长λ3的荧光的荧光色素染色。目标部位P4被通过照射波长λ12的激发光时产生波长λ4的荧光的荧光色素染色。目标部位P5被通过照射波长λ13的激发光时产生波长λ5的荧光的荧光色素染色。多个波长λ11、λ12、λ13、λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6是互不相同的波长。
试样测定装置10对通过预处理单元50的预处理而制备成的试样进行测定并分析。控制部61例如是CPU。存储部62例如是ROM、RAM、硬盘。控制部61按照存储于存储部62的程序和数据控制试样测定装置10内的各部。
测定部63具备图1所示各种光学构件以及参照图3后述的各种光学构件。控制部61驱动测定部63的4个光源101~104(参照图3)、用于使试样流向流动室20的流路21(参照图1、3)的机构、光接收部300(参照图1)等来进行试样测定。控制部61获取由光接收部300生成的拍摄图像并将获取的拍摄图像存储于存储部62。控制部61基于获取的拍摄图像进行试样分析,并在显示部64显示分析结果。显示部64例如是液晶显示器、等离子显示器、CRT(Cathode Ray Tube)显示器等。输入部65例如是键盘和鼠标。
如上所述,测定对象试样中的白细胞的5个部位P1~P5被荧光标记,光接收部300接收从5个部位P1~P5产生的互不相同的多个波长的荧光。由此,控制部61能够基于多个波长的荧光对测定对象白细胞进行详细的分析。
图3是照射部100的结构示意图。
照射部100具备4个光源101~104、4个聚光镜111~114、2个分色镜121、122。
4个光源101~104是半导体激光光源。从4个光源101~104出射的光分别是不同的4个波长λ11、λ12、λ13、λ6的激光。4个聚光镜111~114分别聚集从4个光源101~104出射的光。分色镜121使波长λ11的光透射,并反射波长λ12的光。分色镜122使2个波长λ11、λ12的光透射,并反射波长λ13的光。3个波长λ11、λ12、λ13的光向Y轴正方向照射于流动室20的流路21。波长λ6的光向X轴正方向照射于流动室20的流路21。包括测定对象粒子的试样向流动室20的流路21流动。
向在流动室20的流路21流动的试样照射3个波长λ11、λ12、λ13的光之后,从试样所含测定对象粒子会产生荧光。具体而言,从粒子的5个目标部位P1~P5分别产生5个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的荧光。另外,向在流动室20的流路21流动的试样照射波长λ6的光之后,该光透射试样所含测定对象粒子。透射过粒子的波长λ6的光用于生成明视场图像。
图4是光学模块200的结构示意图。
如上所述,光学模块200具备多个反射面201~206。多个反射面201~206相对于入射光学模块200的光的前进方向即X轴正方向来说向相同方向倾斜。即,多个反射面201~206的有光入射的X轴负侧的面在X-Y平面内都倾斜且朝向Y轴正侧。另外,多个反射面201~206在X-Y平面内相对于X轴正方向以相同角度θ倾斜。多个反射面201~206相对于X轴正方向以相同方向倾斜,由此被光学模块200的多个反射面201~206反射的光朝向同一方向侧,因此能够通过1个光接收部300轻松地接收经由了光学模块200的光。因此,与配置多个光接收部的情况相比能够简化试样测定装置10的结构。
如上所述,光学模块200具备多个出射面212、222、232、242、252、262。在实施方式1中,多个出射面212、222、232、242、252、262分别为在X-Y平面内相对于X轴正方向以角度θ11、θ12、θ13、θ14、θ15、θ16倾斜的平面。且角度θ11、θ12、θ13、θ14、θ15、θ16是互不相同的角度。这样一来,通过调整多个出射面212、222、232、242、252、262的角度能够将各波长的光导向光接收部300的对应的光接收区域。
多个出射面212、222、232、242、252、262不限于是平面,也可以是透镜面。此时,能够使通过多个出射面212、222、232、242、252、262的各波长的光汇聚,因此也能省略第3透镜43。
图5(a)是光学模块200组装前的状态的斜视示意图。
如上所述,光学模块200通过将7个棱镜210、220、230、240、250、260、270形成为一体而构成。棱镜210的斜面213、棱镜220的反射面201及斜面221、棱镜230的反射面202及斜面231、棱镜240的反射面203及斜面241、棱镜250的反射面204及斜面251、棱镜260的反射面205及斜面261以及棱镜270的反射面206相互平行。在棱镜210的X轴负侧形成有与Y-Z平面平行的入射面211,在棱镜270的X轴正侧形成有与Y-Z平面平行的背面271。
通过在多个棱镜220、230、240、250、260、270的X轴负侧的斜面(从试样中的粒子产生的光所入射的入射面)上蒸镀电介质的多层膜等薄膜,以分别形成多个反射面201、202、203、204、205、206。通过改变蒸镀的电介质的多层膜的膜厚能够调整在各反射面反射及透射的光的波长。即,在多个反射面201~206形成的电介质的多层膜具有不同的厚度。多个反射面201是所谓的分色面,是如上所述反射一定波长的光并使一定波长以外的光透射的波长选择面。
在形成了多个反射面201~206之后,接合棱镜210的斜面213和反射面201,接合棱镜220的斜面221和反射面202,接合棱镜230的斜面231和反射面203,接合棱镜240的斜面241和反射面204,接合棱镜250的斜面251和反射面205,接合棱镜260的斜面261和反射面206。由此,如图5(b)所示,完成多个棱镜210、220、230、240、250、260、270形成为一体的光学模块200。通过这种组装方法能够轻松地构成光学模块200并使其成为预期的形状。
多个棱镜210、220、230、240、250、260、270的接合可以使用UV固化胶粘剂等胶粘剂,也可以对各棱镜的接合面进行高精确度研磨,在不使用接合剂的情况下通过接合面的表面分子间作用力进行接合(optical contact)。
波长选择面也可以形成于棱镜210的斜面213、棱镜220的斜面221、棱镜230的斜面231、棱镜240的斜面241、棱镜250的斜面251以及棱镜260的斜面261。
多个棱镜210、220、230、240、250、260在组装前也可以分别再由2个棱镜构成。例如如图6所示,可以为:棱镜210由2个棱镜210a、210b构成,棱镜220由2个棱镜220a、220b构成,棱镜230由2个棱镜230a、230b构成,棱镜240由2个棱镜240a、240b构成,棱镜250由2个棱镜250a、250b构成,棱镜260由2个棱镜260a、260b。多个棱镜210b、220b、230b、240b、250b、260b分别具备多个出射面212、222、232、242、252、262且为三棱柱的形状。
从图6的状态组装光学模块200时,用与上述图5(a)、(b)同样的方法接合棱镜210a和棱镜210b相对的面。同样地,接合棱镜220a和棱镜220b,接合棱镜230a和棱镜230b,接合棱镜240a和棱镜240b,接合棱镜250a和棱镜250b,接合棱镜260a和棱镜260b。由此,各棱镜变为与图5(a)同样的状态,之后,再像图5(b)那样进行接合。
图7是光接收部300的结构示意图。
如上所述,光接收部300是TDI相机。光接收部300具备用于对所接收的光进行拍摄的由集成电路构成的拍摄元件310。在拍摄元件310设有光接收面311。光接收面311是对入射到光接收部300的光进行接收的面,其是配置有用于生成信号的像素的区域所对应的面。在光接收面311设定有用于分别接收6个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光的6个不同的光接收区域321~326。不同的光接收区域321~326分别是在Z轴方向延伸的矩形形状,其在宽度方向上排列配置且在光接收面311不会相互重叠。宽度方向是与水平面及光接收面311平行的方向。在此,“不同的光接收区域”意味着光接收部300的光接收面311上的设在不同位置的区域。
在图7中,左端的光接收区域321对荧光图像用的波长λ1的荧光进行接收。左起第2个光接收区域322对荧光图像用的波长λ2的荧光进行接收。左起第3个光接收区域323对荧光图像用的波长λ3的荧光进行接收。右起第3个光接收区域324对荧光图像用的波长λ4的荧光进行接收。右起第2个光接收区域325对荧光图像用的波长λ5的荧光进行接收。右端的光接收区域326对明视场图像用的波长λ6的光进行接收。
根据粒子在流动室20的流路21中向Z轴正方向移动,由白色箭头指示投影至6个光接收区域321~326的由测定对象粒子产生的光的位置,分别在6个光接收区域321~326内在Z轴正方向移动。为方便起见,在图7的6个光接收区域321~326,从测定对象粒子产生的光的像用虚线图示。6个光接收区域321~326的大小设定为使得从测定对象粒子产生的光的像落在光接收区域的内部。
这样,被光学模块200的多个反射面201~206反射的各波长的光在1个光接收面311上分离,因此光接收部300能够在6个光接收区域321~326内拍摄移动的光斑并生成与各波长的光对应的拍摄图像。
接下来,参照图4、图5(b)及图7对光学模块200各部的长度及角度进行说明。
如图4所示,多个反射面201~206在X-Y平面内相对于X轴方向全为倾斜角度θ。例如本实施方式1的角度θ可设定为60°。多个出射面212、222、232、242、252、262在X-Y平面内相对于X轴方向分别为倾斜角度θ11、θ12、θ13、θ14、θ15、θ16。
在光学模块200光所入射到的入射面211是与Y-Z平面平行的平面。入射面211和反射面201的Y轴负方向的端部的距离为d1。X轴方向上的反射面201和反射面202的距离、反射面202和反射面203的距离、反射面203和反射面204的距离、反射面204和反射面205的距离以及反射面205和反射面206的距离都是d2。光学模块200的X轴正侧的背面271是与Y-Z平面平行的平面。反射面206的Y轴负方向的端部和背面271的距离为d3。入射面211的Y轴方向的长度及背面271的Y轴方向的长度为d4。多个出射面212、222、232、242、252、262的X-Y平面内的长度都是d5。如图5(b)所示,光学模块200的Z轴方向的长度为d6。
如图4所示,被多个反射面201~206中相邻的2个反射面反射的光需要分别入射到对应的出射面。例如设定反射面201和反射面202的间隔以及反射面202和反射面203的间隔,使得被反射面202反射的光不入射到与该光入射的出射面222相邻的多个出射面212、232。其他反射面201、203~206也同样。即,多个反射面201~206间隔的宽度使得被多个反射面201~206分别反射的光不会入射到与对应的出射面相邻的其他出射面。从这一观点出发,距离d2设定为6mm。这样设定距离d2的话,能够抑制各波长的光在光接收部300的光接收面311(参照图7)重叠。因此能够高精确度地获取基于各波长的光的信号,即拍摄图像。
如图4所示,被多个反射面201~206反射的光分别被多个出射面212、222、232、242、252、262折射,其前进方向在X-Y平面内会发生变化。被多个反射面201~206分别反射的光的方向称作“基准线”的话,从多个出射面212、222、232、242、252、262出射的光分别与多个反射面201~206中基准线之间的角度为θ21、θ22、θ23、θ24、θ25、θ26。向Z轴正方向看,将相对于基准线顺时针的角度设为正角度的话,在图4的示例中,角度θ21、θ22、θ23为负值,角度θ24、θ25、θ26为正值。
在实施方式1中,角度差θ22-θ21、θ23-θ22、θ24-θ23、θ25-θ24、θ26-θ25都是相同的角度差Δθ。
如图7所示,光接收面311上的相邻的光接收区域的宽度方向的中心之间的距离是Δx。在此,设第3透镜43的焦距为f3的话,角度差Δθ用以下公式(1)算出。
Δθ=Arctan(Δx/f3)…(1)
因此,设定光学模块200的多个出射面212、222、232、242、252、262的倾斜度,使得相邻的出射面中光的出射方向的角度差为通过上述公式(1)算出的角度差Δθ。
图8(a)是测定部63的缩小光学系统400和测定部63的光学系统整体的综合倍率的说明示意图。图8(a)中,为方便起见,图示了流动室20、物镜31、第1透镜41、第2透镜42、第3透镜43、光接收部300。图8(a)中,为方便起见,图示了被第2透镜42转换为平行光的光直接入射第3透镜43,之后在光接收部300的光接收面311聚集。
缩小光学系统400包括图1所示第1透镜41和第2透镜42。上述物镜31聚集从试样产生的光并将其转换为平行光,且将其导向缩小光学系统400。
第1透镜41和第2透镜42是凸透镜,其相互共用焦点位置。设第1透镜41的焦距为f1,第2透镜42的焦距为f2的话,配置第1透镜41和第2透镜42使得第1透镜41和第2透镜42的间隔为f1+f2。此时,第1透镜41的焦点位置和第2透镜42的焦点位置被共用。另外,第1透镜41和第2透镜42的焦距设定为f1>f2。由此,来自物镜31的平行光的光束尺寸被缩小光学系统400缩小,变为平行光后从缩小光学系统400出射。具体而言,从缩小光学系统400出射的平行光的光束直径为入射缩小光学系统400的平行光的光束直径的f2/f1。
像这样,当通过缩小光学系统400缩小从试样产生的光的光束尺寸将其变为平行光之后将光导向光学模块200时,能够使得光学模块200的尺寸小型化。由此,能够缩小试样测定装置10整体的尺寸。
接下来参照图8(a),对测定部63的光学系统整体的综合倍率进行说明。
设光学系统整体的综合倍率为M,物镜31的焦距为f0。第1透镜41、第2透镜42以及第3透镜43的焦距如上所述分别为f1、f2、f3。配置流动室20和物镜31使得流动室20的流路21和物镜31的间隔为f0,且配置第3透镜43和光接收部300使得第3透镜43和光接收部300的光接收面311的间隔为f3。使从在流动室20的流路21流动的测定对象粒子产生的光以何种程度的大小向光接收部300的光接收面311照射由综合倍率M决定。综合倍率M能够使用焦距f0~f3通过以下公式(2)算出。
M=(-f1/f0)×(-f3/f2)…(2)
例如将综合倍率M的目标值设定为60倍的情况下,将M=60代入上述公式(2)来设定各透镜的焦距。使用一般物镜31时,物镜31的焦距f0为3mm。将M=60和f0=3mm代入上述公式(2)并进行变形后获得以下公式(3)。
f3=180×(f2/f1)…(3)
参照上述公式(3)可知通过减小f2/f1的值能够减小f3的值。因此,例如使得f1=30mm、f2=15mm的话,能够设定为f3=90mm。
图8(b)是在图8(a)所示缩小光学系统400中使得f1=f2的情况的比较例的示图。
如图8(b)所示,第1透镜41和第2透镜42的焦距相等时,f2/f1=1。此时,在上述公式(3)中,代入f2/f1=1的话,得到f3=180mm。同样地,在不使用缩小光学系统400时,在上述式(3)中由于省略了f2/f1,因此也得到f3=180mm。像这样,第1透镜41和第2透镜42的焦距相等时以及不使用缩小光学系统400时,第3透镜43的焦距f3变大,为180mm。
与此相对,在实施方式1中,为了实现目标综合倍率M,能够通过将f2/f1的值(即缩小光学系统400的缩小率)设定为1/2,以将第3透镜43的焦距f3缩小至90mm。因此,能够实现所希望的综合倍率M并缩小从第3透镜43到光接收部300的距离,因此能够在第3透镜43和光接收部300的排列方向上使试样测定装置10小型化。
另外,如上述公式(2)所示,通过使得焦距f1大于焦距f2,换言之,通过减小缩小光学系统400的缩小率f2/f1,能够使得综合倍率M变大。因此,能够通过减小缩小光学系统400的缩小率,可以基于从微小粒子产生的光在在光接收面311上设置大的光的像。
在实施方式1中,缩小光学系统400的第2透镜42是凸透镜,但也可以是凹透镜。
图9是第2透镜42由凹透镜构成时的缩小光学系统400的变更例的示图。此时第1透镜41的焦点位置和第2透镜42的焦点位置也被共用。图9的结构中,缩小光学系统400也能够缩小从试样产生的光的光束尺寸并使其成为平行光将其导向光学模块200,因此也能实现光学模块200尺寸的小型化。图9的结构中,上述公式(2)的关系也成立,例如代入f0=3mm、f1=30mm、f2=-15mm、f3=90mm的话,M=-60倍。因此,与上述同样地,能够通过减小缩小光学系统400的缩小率f2/f1的值,以减小第3透镜43的焦距f3,因此能够实现所希望的综合倍率M并实现试样测定装置10的小型化。
另外,在图9的结构中,由于无法配置具有足够小孔32a的光圈32,因此在需要通过光圈32去除多余的光的情况下,优选如图8(a)所示第2透镜42为凸透镜。
图10是试样测定装置10的测定作业的流程图。
在使试样流动的步骤S1中,控制部61使通过预处理单元50的预处理制备而成的试样向流动室20的流路21流动。在向试样照射光的步骤S2中,控制部61向在流动室20的流路21流动的试样照射包括多个波长λ11、λ12、λ13、λ6的光的照射光。
在使光入射到光学模块的步骤S3中,物镜31、第1透镜41、第2透镜42以及过滤器33使从照射有照射光的试样中的粒子产生的光入射至光学模块200。由此,向流动室20的X轴正方向侧产生的多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5的荧光及用于生成明视场图像的波长λ6的光入射到光学模块200的入射面211并透射过光学模块200的内部。
在反射光的步骤S4中,光学模块200通过多个反射面201~206选择性地反射入射到光学模块200的互不相同的波长的光。在折射光的步骤S5中,光学模块200通过出射面212、222、232、242、252、262折射被多个反射面201~206反射的互不相同的波长的光。在将光导向光接收区域的步骤S6中,从出射面212、222、232、242、252、262出射的光分别被导向对应的6个光接收区域321~326。
在拍摄步骤S7中,光接收部300生成在6个光接收区域321~326接收的各波长的光所对应的拍摄图像。在分析步骤S8中,控制部61基于在拍摄步骤S7获取的拍摄图像,并基于目标部位的位置、数量、分布状态等对测定对象白细胞进行分析。在显示步骤S9中,控制部61在显示部64显示在拍摄步骤S7获取的拍摄图像和在分析步骤S8获取的分析结果。
<实施方式2>
图11是实施方式2所涉及的测定部63的结构示意图。
与图1所示实施方式1的测定部63相比较,实施方式2的测定部63省略了第1透镜41、第2透镜42、光圈32。另外,与实施方式1相比,实施方式2的光学模块200、过滤器34、第3透镜43较大。实施方式2的其他结构与实施方式1的试样测定装置10的结构相同。
在实施方式2中,省略了由第1透镜41和第2透镜42构成的缩小光学系统400,因此被物镜31聚集并变为平行光的光在光束尺寸不会缩小的情况下被导向光学模块200。因此,如图11所示,需要使得光学模块200比实施方式1大。另外,入射光学模块200的光束尺寸大的话,被多个反射面201~206反射的各波长的光容易相互重叠,需要扩大多个反射面201~206的间隔、即图4所示的距离d2。由此,实施方式2的光学模块200比实施方式1大。另外,如果光学模块200的距离d2大的话,则需要使得过滤器34及第3透镜43也大。
像这样,在实施方式2中也与实施方式1同样地通过对多个波长的光使用通用的光学模块200而无需使用用于将各波长的光分别导向不同的光接收区域321~326的单独的分色镜等。因此,无需分别针对多个波长分别进行多个光学构件的光轴对准等调整。因此能够减轻试样测定装置10组装时和维护时的作业负担。另一方面,在实施方式2中,省略了缩小光学系统400,因此试样测定装置10与实施方式1相比更大型化。因此,从实现试样测定装置10小型化的观点来看,优选实施方式1。
<实施方式3>
图12是实施方式3所涉及的光学模块200的结构示意图。实施方式3的光学模块200以外的结构与实施方式1的试样测定装置10的结构相同。
在实施方式3中,多个反射面201~206的倾斜角度θ1、θ2、θ3、θ4、θ5、θ6互不相同。另外,多个反射面201~206与实施方式1同样地相对于入射到光学模块200的光的前进方向而言向相同方向倾斜。在实施方式1中,多个波长λ1、λ2、λ3、λ4、λ5、λ6的光的前进方向通过多个出射面而互不相同,但在实施方式3中,通过多个反射面201~206的倾斜角度而互不相同的。
实施方式3的光学模块200在光学模块200的Y轴正侧具备与X-Z平面平行的1个出射面200a。被多个反射面201~206反射的光被出射面200a折射并从出射面200a出射。在此,出射面200a中各波长的光的折射角与波长相应地不同,因此在从出射面200a出射的光的前进方向的调整作业中,也需要考虑到出射面200a的折射。
在实施方式3中,考虑到各波长的光在出射面200a中的折射角,通过调整多个反射面201~206的倾斜角度来决定从出射面200a出射的各波长的光的前进方向。此时也能够与实施方式1同样地将被光学模块200反射的各波长的光照射到所希望的光接收区域。因此,在实施方式3中,通过对多个波长的光使用图12所示通用的光学模块200也与实施方式1同样地无需使用用于将各波长的光分别导向不同的光接收区域321~326的单独的分色镜等。因此,无需分别针对多个波长个别地进行多个光学构件的光轴对准等调整。因此能够减轻试样测定装置10组装时和维护时的作业负担。
<实施方式4>
图13是实施方式4所涉及的光学模块200的结构示意图。
实施方式4的光学模块200与图12所示实施方式3的光学模块200相比较,不同之处在与反射面202、204、206的倾斜方向不同。在实施方式4中,与实施方式3相同地,反射面201、203、205向Y轴正侧反射光,反射面202、204、206朝向Y轴负侧反射光。换言之,在多个反射面中,第1组的3个反射面201、203、205相对于入射到光学模块200的光的前进方向而言向Y轴正方向倾斜,在多个反射面中,与第1组不同的第2组的3个反射面202、204、206相对于入射到光学模块200的光的前进方向而言向Y轴负方向倾斜。
另外,与图12所示实施方式3的光学模块200相比较,实施方式4的光学模块200在光学模块200的Y轴负侧具备与X-Z平面平行的1个出射面200b。被第1组的3个反射面201、203、205反射的光经出射面200a折射并从出射面200a出射。被第2组的3个反射面202、204、206反射的光经出射面200b折射并从出射面200b出射。
图14是实施方式4所涉及的测定部63的结构示意图。为方便起见,在图14中省略了位于第1透镜41的X轴负侧的结构。实施方式4的测定部63以外的结构与实施方式1的试样测定装置10的结构相同。
与实施方式1相比较,实施方式4的测定部63具备2个第3透镜501、502、2个光接收部510、520来代替第3透镜43及光接收部300。第3透镜501和光接收部510与实施方式1同样地配置于光学模块200的Y轴正侧,第3透镜502和光接收部520配置于光学模块200的Y轴负侧。朝向Y轴正侧反射的3个波长λ1、λ3、λ5的光被第3透镜501聚集,在光接收部510的光接收面511中被互不相同的光接收区域531、533、535接收。另一方面,朝向Y轴负侧反射的3个波长λ2、λ4、λ6的光被第3透镜502聚集,在光接收部520的光接收面521中被互不相同的光接收区域532、534、536接收。
另外,过滤器34配置于光学模块200和第3透镜502之间。此时的过滤器34的透射波长使得2个波长λ2、λ4的光透射过过滤器34,2个波长λ2、λ4以外的波长的光被过滤器34阻断。过滤器34的配置位置偏离波长λ6的光朝向光接收部520的光接收面521会通过的位置。
如图13、14所示,在实施方式4中也通过对多个波长的光使用通用的光学模块200而与实施方式3同样地无需使用用于将各波长的光分别导向不同的光接收区域531~536的各个分色镜等。因此,无需分别针对多个波长分别进行多个光学构件的光轴对准等的调整。因此能够减轻试样测定装置10组装时和维护时的作业负担。
实施方式1的光学模块200中,也可以改变多个反射面202、204、206的倾斜方向,使得多个反射面202、204、206朝向Y轴负侧反射光。此时,与多个反射面202、204、206对应的多个出射面222、242、262设于光学模块200的Y轴负侧。
<实施方式5>
图15是实施方式5所涉及的测定部63的结构示意图。
在实施方式5中,从照射部100的光源101(参照图3)出射的波长λ11的光为线偏振光,光源101设置于装置内且使得线偏振光的偏振方向为一定方向。来自光源101的光照射于试样时的偏振方向称作“初始偏振方向”。波长λ11的光照射于试样中的粒子后,从粒子向X轴正方向产生散射光。从粒子产生的散射光的偏振方向根据粒子中所含成分所具有的旋光性,相应地从初始偏振方向发生变化。
在实施方式5中,从光源101出射的光如参照图3那样向Y轴正方向向试样照射,物镜31配置于流路21的X轴正方向。因此,被物镜31聚集、经过光学模块200并被导向光接收部300的散射光是从粒子产生的侧向散射光。
实施方式5的过滤器33使波长λ11的光透射。由此,从试样产生的波长λ11的散射光会透射过滤器33并入射至光学模块200。
与实施方式1相比较,实施方式5的多个反射面201~206还使波长λ11的光透射。与实施方式1相比较,实施方式5的光学模块200在反射面206的X轴正侧还具备第7反射面和第8反射面。第7反射面及第8反射面以下分别称作反射面207及反射面208。另外,实施方式5的光学模块200还具备第8棱镜和第9棱镜。第8棱镜及第9棱镜以下分别称为棱镜280及棱镜290。实施方式5的棱镜270、280与实施方式1的棱镜220、230、240、250、260形状相同,实施方式5的棱镜290与实施方式1的棱镜270形状相同。
通过在与反射面207对应的组装前的棱镜280的斜面施加偏振用涂层,以在该斜面形成偏振过滤器并形成反射面207。反射面207反射第1偏振方向的光,并透射与第1偏振方向不同的第2偏振方向的光。具体而言,反射面207反射与初始偏振方向一致的波长λ11的散射光,使与初始偏振方向不一致的波长λ11的散射光透射。通过在与反射面208对应的组装前的棱镜290的斜面施加对光进行全反射的涂层来在该斜面形成全反射镜并形成反射面208。棱镜270和棱镜280的接合以及棱镜280和棱镜290的接合与实施方式1各模块的接合相同。
由于位于反射面207的Y轴正侧的出射面272,被反射面207反射的与初始偏振方向一致的波长λ11的散射光的前进方向发生变化。由于位于反射面208的Y轴正侧的出射面282,被反射面208反射的与初始偏振方向不一致的波长λ11的散射光的前进方向发生变化。
这样,被多个反射面201~208反射的各光照射到光接收部300的光接收面311上的不同的光接收区域321、322、323、324、325、326、327、328。与初始偏振方向一致的波长λ11的散射光导向光接收区域327,与初始偏振方向不一致的波长λ11的散射光导向光接收区域328。由此,除了基于被多个反射面201~206反射的光的拍摄图像,还能够获取基于被多个反射面207、208反射的光的拍摄图像。通过参照基于被多个反射面207、208反射的光的拍摄图像能够对测定对象粒子所含成分的旋光性进行判断并分析测定对象粒子。
在实施方式5中,当从试样中的粒子产生初始偏振方向的散射光及与初始偏振方向不一致的散射光时,这些散射光分别被设置于光学模块200的多个反射面207、208反射,并导向光接收部300的不同的光接收区域327、328。因此,通过对偏振方向不同的光使用图15所示通用的光学模块200就无需使用用于将偏振方向不同的光分别导向不同的光接收区域327、328的各个偏振过滤器等。通过设置一体形成有多个反射面207、208的光学模块200,各反射面之间的角度固定,因此无需分别针对偏振方向不同的各个光个别地进行多个光学构件的光轴对准等的调整。因此能够减轻试样测定装置10组装时和维护时的作业负担。
另外,在实施方式5中,在与图10所示实施方式1的试样测定装置10相同的测定作业中,基于从试样中的粒子产生的波长λ11的散射光进行分析及显示。以下,参照图10对与实施方式1不同的测定作业进行说明。
在实施方式5中,在使光入射至光学模块的步骤S3中,物镜31、第1透镜41、第2透镜42以及过滤器33使从被照射光照射了的试样中的粒子产生的波长λ11的散射光入射至光学模块200。
在反射光的步骤S4中,光学模块200通过2个反射面207、208选择性地反射入射到光学模块200的偏振方向不同的光。在折射光的步骤S5中,光学模块200分别通过2个出射面272、282折射被2个反射面207、208反射的不同偏振方向的光。在将光导向光接收区域的步骤S6中,从2个出射面272、282出射的光分别导向对应的2个光接收区域327、328。
在拍摄步骤S7中,光接收部300生成在不同的2个光接收区域327、328中接收到的、不同的偏振方向的2种散射光所对应的拍摄图像。在分析步骤S8中,控制部61基于在拍摄步骤S7获取的拍摄图像判定粒子所含成分所具有的旋光性,并基于判定出的旋光性进行测定对象粒子分析。在显示步骤S9中,控制部61在显示部64显示在拍摄步骤S7获取的拍摄图像和在分析步骤S8获取的分析结果。
另外,在图15所示结构中,若仅进行散射光的分析,则可以使用仅设有多个反射面207、208及出射面272、282的光学模块200。另外,也可以为反射面207使与初始偏振方向一致的波长λ11的散射光透射并反射与初始偏振方向不一致的波长λ11的散射光。另外,通过光学模块200导向多个光接收区域327、328的偏振方向不同的光不限于侧向散射光,也可以是前向散射光或荧光。
编号说明
10:试样测定装置
20:流动室
31:物镜
32:光圈
33、34:过滤器
41:第1透镜
42:第2透镜
43:第3透镜
100:照射部
200:光学模块
201~208:反射面
200a、200b、212、222、232、242、252、262、272、282:出射面
210、220、230、240、250、260、270、280、290:棱镜
300:光接收部
310:拍摄元件
311:光接收面
321~328:光接收区域
400:缩小光学系统
501、502:第3透镜
510:光接收部(第1光接收部)
511:光接收面(第1光接收面)
520:光接收部(第2光接收部)
521:光接收面(第2光接收面)
531~536:光接收区域
Claims (27)
1.一种试样测定装置,包括:
照射部,向试样照射照射光,并使得从所述试样中的粒子产生光;
光学模块,固定有多个棱镜,所述多个棱镜具有使从所述试样中的粒子产生的光入射的入射面、选择性地反射入射至所述入射面的光的一部分的反射面,以及出射由所述反射面反射的光的出射面;
光接收部,其接收从所述多个棱镜的各自的所述出射面出射的光。
2.根据权利要求1所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光学模块中,所述多个棱镜相互接合且形成为一体。
3.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜各自的所述反射面沿入射至所述光学模块的光的前进方向配置。
4.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜各自的所述反射面相对于入射至所述光学模块的光的前进方向来说向相同方向倾斜。
5.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜的所述多个反射面中第1组反射面相对于入射至所述光学模块的光的前进方向向第1方向倾斜,
所述多个棱镜的所述多个反射面中不同于所述第1组的第2组反射面相对于入射所述光学模块的光的前进方向来说向不同于所述第1方向的第2方向倾斜。
6.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜的所述多个出射面将从所述多个反射面选择性地反射的多个光分别出射至对应的光接收区域。
7.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜各自的所述出射面相对于入射至所述光学模块的光的前进方向以不同角度倾斜。
8.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜的所述多个反射面以被各个所述反射面反射的光不会入射至与对应的出射面相邻的其他出射面进行间隔配置。
9.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜分别由透射性的玻璃或树脂制成。
10.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜至少包括第1棱镜及第2棱镜,
所述第1棱镜具有第1入射面、选择性地反射入射至所述第1入射面的光中第1波长的光并透射不同于所述第1波长的其他波长的光的第1反射面、出射被所述第1反射面反射的光的第1出射面,
所述第2棱镜具有供透射过所述第1反射面的光入射的第2入射面、选择性地反射入射至所述第2入射面的光中不同于所述第1波长的第2波长的光并透射不同于所述第2波长的其他波长的光的第2反射面、出射被所述第2反射面反射的光的第2出射面。
11.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述多个棱镜的所述多个反射面包括反射一定偏振方向的光的反射面。
12.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光接收部在1个光接收面上接收被所述多个棱镜各自的所述反射面反射的光。
13.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光接收部具备第1光接收部和第2光接收部,
所述第1光接收部在第1光接收面接收被所述多个棱镜的所述多个反射面中第1组反射面反射的光,
所述第2光接收部在不同于第1光接收面的第2光接收面接收被所述多个棱镜的所述多个反射面中不同于所述第1组的第2组反射面反射的光。
14.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光接收部是TDI相机或CCD相机。
15.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,还包括:
缩小光学系统;
所述缩小光学系统缩小从被所述照射光照射了的所述试样中的粒子产生的光的光束尺寸并使其成为平行光,且将光导向所述光学模块。
16.根据权利要求15所述的试样测定装置,其特征在于:
所述缩小光学系统包括:
第1透镜,聚集从所述试样中的粒子产生的;以及
第2透镜,将由所述第1透镜聚集的光转换为所述平行光并将其导向所述光学模块。
17.根据权利要求16所述的试样测定装置,其特征在于:
所述第1透镜和所述第2透镜分别是凸透镜。
18.根据权利要求17所述的试样测定装置,其特征在于:
所述缩小光学系统包括光圈,所述光圈配置于由所述第1透镜聚集的光的汇聚位置,且用于去除除了由所述第1透镜聚集的光以外的不需要的光。
19.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,还包括:
第3透镜;
所述第3透镜使被所述多个棱镜各自的所述反射面反射的光在所述光接收部汇聚。
20.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,还包括:
物镜;
所述物镜对从被所述照射光照射了的所述试样中的粒子产生的光进行聚集。
21.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光接收部在不同的光接收区域分别拍摄所述粒子的明视场图像及荧光图像。
22.根据权利要求21所述的试样测定装置,其特征在于:
在所述多个棱镜的所述多个反射面的端部配设的反射面反射所述明视场图像用的光。
23.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,还包括:
阻断所述照射光所含一定波长的光的过滤器。
24.根据权利要求23所述的试样测定装置,其特征在于:
所述光接收部在不同的光接收区域分别拍摄所述粒子的明视场图像及荧光图像,
所述过滤器配置于所述光学模块和所述光接收部之间,且在所述荧光图像用的光通过的位置阻断所述明视场图像用的光。
25.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
包括供所述试样流动的流动室;
所述照射部向在所述流动室流动的所述试样照射所述照射光。
26.根据权利要求1或2所述的试样测定装置,其特征在于:
所述粒子是细胞,
所述光接收部从被所述照射光照射了的所述细胞接收波长互不相同的多个荧光。
27.一种试样测定方法,其包括以下步骤:
向试样照射照射光,
使从所述试样中的粒子产生的光入射光学模块,所述光学模块固定有多个棱镜,所述多个棱镜具有:使从所述照射光照射到的所述试样中的粒子产生的光入射的入射面、选择性地反射入射到所述入射面的光的一部分的反射面、出射由所述反射面反射的光的出射面,
将从所述多个棱镜各自的所述出射面出射的光导向光接收区域。
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