CN110742842B - 一种延缓皮肤老化的精华组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种延缓皮肤老化的精华组合物及其制备方法，属于化妆品技术领域，其技术要点：一种延缓皮肤老化的精华组合物，包括N‑棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯、对羟基苯乙酮、生育酚、虾青素、姜根提取物、乙酰基六肽‑8、水解胶原、肌肽、复配神经酰胺、增稠剂、保湿剂、皮肤调理剂、润肤剂，以及水。复配神经酰胺选自神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1以及神经酰胺2中的一种或一种以上。本发明不仅操作安全方便，而且能够延缓皮肤老化，促进胶原蛋白生成，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量，具有良好的抗老化作用。

Description

一种延缓皮肤老化的精华组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，更具体地说，它涉及一种延缓皮肤老化的精华组合物及其制备方法。

背景技术

随着经济的发展和人民生活水平的不断提升，追求面部的年轻化，是我们年长人群的期望，也是女人一生不断在追求的，并且她们也是为之奋斗终身的事业。

面部衰老不是突然发生的，是一个累积的过程，在这个过程中，面部皮肤和结构受到外在和内在的影响而不断地发生着变化，比如：表皮增厚老化，表皮含水率下降，色斑生成，眼睑和两腮下垂，抬头纹，鱼尾纹和法令纹生成等等。这些面部老化的表现除了受个体遗传基因对干细胞寿命的限制以外，还会受到以下一些主要因素的影响。

其一，面部肌肉不是连续分布，而是成区域性地块状分布。肌肉群包括额头，眼周，鼻翼，腮部，唇周等。我们知道肌肉上面是脂肪层，然后是真皮胶原层，表皮层。婴幼儿时期，脸部运动肌肉在建立过程，整个脸部比较匀称，主要由表皮，真皮和皮下脂肪构成。随着年龄增长和脸部表情运动，逐渐发展出骨连肌。由于肌肉不是连续的，而是块状，那么随着年龄增长，面部轮廓也出现不连续性。面部随着年龄增长逐步出现下眼部下垂，腮部隆起，两脸颊下垂与唇部肌肉错位导致法令纹，以及额头皱纹发生等老化特征，值得注意的是，这种面部衰老表现是一种条块式位移衰老，脸部失去了圆润度和平滑度。

其二，面部老化过程的第二个重要影响因素是紫外线。美国皮肤学家AlbertKligman提出“光老化是一种慢性皮肤病”是对光老化的高度概括。紫外线特别是320-400nm的UVA段紫外线可以到达真皮层，它会活化黑色素细胞，促进皮肤黑化以及色斑形成，也会破坏朗格汉斯免疫细胞，降低皮肤的免疫力，还会破坏成纤维细胞，降低细胞内质网的胶原蛋白的生成能力，不能补充新的胶原蛋白，影响真皮层的丰满度和弹性，长期发展，造成不可逆的皱纹。

其三，面部老化过程的第三个重要影响因素是角质层充盈度下降，含水率减少。婴幼儿角质层含水率高达60％，而成年人下降到30％以下，甚至到10％以下。老化发展过程中，表皮细胞间脂质的合成下降，水通道蛋白-3表达下降，透明质酸合成能力下降，导致角质层含水率降低，皮肤缺乏充盈度，表皮的相关细胞生物学功能也会降低，皮肤外观表现粗糙不细腻，并进一步引发细纹发生。

但是现有的面部精华组合物，例如公告号为CN109260454A的一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，其包括甲、乙两个组分；所述甲组分为口服制剂，所述甲组分包含如下重量份的原料：维生素C1-2份、胶原蛋白肽4-6份、中药提取物12-15份、缓释凝胶1-2份、去离子水10-12份；所述乙组分为注射制剂，所述乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8-12；所述甲、乙两个组分的质量之比为10:3-4。上述发明通过口服制剂以达到由内而外的美白、保湿、抗老化等，通过皮下注射，具有生物电位，吸引成纤维细胞进入而产生新的胶原蛋白，二者相辅相成，促进皮肤胶原蛋白生成，可有效用在抗衰老，滋润皮肤，抗皱，抗晦暗，创面愈合等方面。

上述发明的主要目的还是在于胶原蛋白的生成，但是乙组分要达到皮下注射的要求，其成本较大，操作难度大，操作者很难自己进行皮下注射操作；若自己操作进行皮下注射，则很容易感染细菌，甚至出现一些破伤风等事故，因此需要提出一种新的技术方案来解决上述问题。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种延缓皮肤老化的精华组合物，不仅操作安全方便，而且能够延缓皮肤老化，促进胶原蛋白生成，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量，具有良好的抗老化作用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种延缓皮肤老化的精华组合物，按照质量份数计，包括如下的组分：

所述复配神经酰胺选自神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1以及神经酰胺2中的一种或一种以上。

进一步的，所述复配神经酰胺为0.005-0.05份的神经酰胺3、0.0025-0.025份的神经酰胺6II、0.000005-0.00005份的神经酰胺1以及0.004-0.08份的神经酰胺2。

通过采用上述技术方案，虾青素是类胡萝卜素的一种，属于一种脂溶性及水溶性的色素，为一种较强的天然抗氧化剂。虾青素的化学名称为3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，化学分子式为：C₄₀H₅₂O₄。虾青素特殊的分子构造，可以穿越人体细胞外壁，直接清除细胞内的氧自由基，增强细胞再生能力，维持人体机能平衡和减少衰老细胞的堆积，由内而外保护细胞和DNA健康。虾青素的强抗氧化性可能使它成为潜在的光保护剂，有效清除引起皮肤老化的自由基，保护细胞膜和线粒体膜免受氧化损伤，用于阻止皮肤光老化。因此虾青素具有防紫外线辐射、阻止皮肤光老化，以及增强机体代谢等作用，提高了人体抗衰老能力。而姜根提取物是从生姜中提取出来生物具有活性成分的浓缩液，姜根提取物具有增强免疫力、抗菌、杀虫、消炎的作用。

神经酰胺天然存在于角质层细胞间质中，在角质层生理功能中起关键作用，使皮肤光滑细致，防止皮肤因水分流失而干燥；同时神经酰胺也参与细胞分化等多种生理过程。而复配神经酰胺是多种神经酰胺(例如神经酰胺1-3)的复合产物，而N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯是合成的神经酰胺(即类神经酰胺)，它能克服天然神经酰胺的缺点，其结构与天然神经酰胺类似。N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯具有保湿和去除细纹的作用，与复配神经酰胺搭配使用，能够有效达到修复皮肤，起到皮肤屏障的作用。

保湿剂是一类亲水性的润肤物质，在较低湿度范围内具有结合水的能力，给皮肤补充水分，它们可以通过控制产品与周围空气之间水分的交换使皮肤维持在高于正常水含量的平衡状态，起到减轻皮肤干燥的作用。

乙酰基六肽-8又称阿基瑞林，它是一种神经递质抑制类胜肽，其抗皱活性高，副作用小。其抗皱机理是：乙酰基六肽-8参与竞争SNAP-25在融泡复合体的位点，从而影响复合体的形成；当融泡复合体稍有不稳定，囊泡不能有效释放神经递质，从而致使肌肉收缩减弱，防止皱纹的形成。

水解胶原是经由水解处理后的小分子量胶原蛋白(即分子量胶原蛋白是指分子量在1500道尔顿以下的胶原蛋白)，水解胶原是一种极易吸收的胶原蛋白，能够充分满足人体修复皮肤及结缔组织所需，具有抑制黑色素、美白肌肤、延缓衰老、改善微循环、祛斑祛皱、紧致肌肤，以及修复细纹等作用。

对羟基苯乙酮由乙酸苯醋经三氯化铝催化重排制得，在化妆品中起到抗氧化剂的作用，而生育酚是一种维生素E水解后的产物，是最主要的抗氧化剂之一，生育酚、对羟基苯乙酮与虾青素、姜根提取物复配使用能够进一步提高其抗氧化作用。

进一步的，神经酰胺3的英文名为CERAMIDE 3，其CAS号是100403-19-8。神经酰胺3是一种脂质物质，人工合成成分，它和构成皮肤角质层的物质结构相近，能很快渗透进皮肤，帮助皮肤天然保护层的更新，能促进自然水合作用的平衡，和角质层中的水结合，形成一种网状结构，锁住水分。对肌肤保湿修护有良好作用，是角质层中重要的活肤成分，能增强皮肤屏障，重建细胞，形成有效的屏障来防止水分流失和减少外部环境的影响。受刺激的皮肤尤其需要更多的神经酰胺，有研究表明，擦含有神经酰胺成分的产品能减少红肿和经皮水分流失，起到增强皮肤屏障并帮助受损肌肤缓解干燥状态的作用。

而神经酰胺2的英文名为CERAMIDE 2，其CAS号是100403-19-8。神经酰胺2在化妆品中作皮肤调理剂、抗氧化剂和保湿剂的作用，它能在完善皮脂膜的同时抑制活跃的皮脂腺分泌，使肌肤水油平衡，增强肌肤的自我保护机能同神经酰胺1，较适合皮肤油腻且有需求的年轻肌肤。该成分对肌肤保湿修护有良好作用，是角质层中重要的活肤成分，能增强皮肤屏障，重建细胞。受刺激的皮肤尤其需要更多的神经酰胺，有研究表明，擦含有神经酰胺成分的产品能减少红肿和经皮水分流失，起到增强皮肤屏障的作用。

神经酰胺1的英文名为CERAMIDE 1，其CAS号是100403-19-8。神经酰胺1在化妆品中作皮肤调理剂和保湿剂使用，它能密集修补皮肤的天然皮脂膜，强化肌肤表层屏障的防御机能，有良好的封闭性，减少水分蒸发和流失，适合所有肌肤类型。

神经酰胺6II的英文名为CERAMIDE 6II，其CAS号是100403-19-8。神经酰胺6II在化妆品中作皮肤调理剂、抗氧化剂和保湿剂的作用，它能在完善皮脂膜的同时抑制活跃的皮脂腺分泌，通过皮肤鳞屑剥落使皮肤的自然剥落过程正常化，让肌肤水油平衡，增强肌肤的自我保护机能同神经酰胺1，较适合皮肤油腻且有需求的年轻肌肤。该成分对肌肤保湿修护有良好作用，是角质层中重要的活肤成分，能增强皮肤屏障，重建细胞，并能形成有效屏障来防止水分流失和减少外部环境的影响。受刺激的皮肤尤其需要更多的神经酰胺，有研究表明，擦含有神经酰胺成分的精华组合物(即产品)能减少红肿和经皮水分流失，起到增强皮肤屏障帮助受损肌肤缓解干燥状态的作用。

综上，添加的生育酚、对羟基苯乙酮、虾青素和姜根提取物提供了强效抗氧化性，有效延缓了皮肤衰老。进一步添加的复配神经酰胺、类神经酰胺，以及保湿剂搭配使用，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量。同时，添加的多种多肽和水解胶原，有效对抗和补充了胶原蛋白的流失，具有良好的抗老化作用。

进一步的，所述润肤剂选自胆甾醇、辛酸/癸酸甘油三酯、己基癸醇，以及油菜甾醇类中的一种或多种。

通过采用上述技术方案，胆甾醇又称胆固醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物。胆甾醇具有优良的乳化、分散、润滑能力。而辛酸/癸酸三酸甘油酯(GREOIL GTCC)是一种无味的油脂，属棕榈油或椰子油的衍生物。可作为保湿因子的基料，化妆品的稳定剂，防冻剂，均质剂。

己基癸醇，又称2-己基-1-癸醇，它是一种多元醇。在化妆品中具有一定的抓水能力，可以用作保湿剂。而油菜甾醇类的英文名为：BRASSICA CAMPESTRIS(RAPESEED)STEROLS，Cas No：90989-79-0。油菜甾醇类为柔润剂、皮肤调理剂、保湿剂。油菜甾醇类可用作保湿剂，具有保湿功效，同时具有一定的抗炎作用，用作抗炎剂。

综上，上述胆甾醇、辛酸/癸酸甘油三酯、己基癸醇，以及油菜甾醇类均是常见的润肤剂，不仅能够起到保湿的作用，而且将其涂覆在人体肌肤上时，可以在人体肌肤上形成一层类似油膜的结构，此时形成的油膜与四种神经酰胺复配使用，能够起到良好的皮肤屏障作用。

进一步的，所述保湿剂选自乙基己基甘油、丁二醇、甘油、透明质酸钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、辛甘醇中的一种或一种以上。

通过采用上述技术方案，上述乙基己基甘油、丁二醇、甘油、透明质酸钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、辛甘醇均是常见的保湿剂，多种保湿剂可与四种神经酰胺以及类神经酰胺搭配使用，提高了皮肤的充盈度，大大增加了角质层的水分含量。

进一步的，还包括0.02-0.2份的螯合剂，所述螯合剂为EDTA二钠。

通过采用上述技术方案，EDTA二钠是常见的螯合剂，EDTA二钠可以起到鳌合重金属离子的作用，有效减少了皮肤重金属中毒的现象发生。

进一步的，还包括0.09-1.8份的菊粉和0.01-0.2份的褐藻提取物。

进一步的，所述褐藻提取物的主要成分为岩藻聚糖硫酸酯。

通过采用上述技术方案，菊粉是植物中储备性多糖，是水溶性膳食纤维。而褐藻提取物是常见的从海洋藻类中提取的生物活性物质(例如岩藻聚糖硫酸酯)，褐藻提取物能帮助人体细胞提高其自噬功能，可以杀死或消耗死去的细胞。其中，岩藻聚糖硫酸酯具有免疫调节活性，能够使得巨噬细胞和脾细胞产生细胞因子和趋化因子；同时岩藻聚糖硫酸酯还能抑制活性氧自由基的生产并促进其清除，具有明显的抗氧化活性。综上，上述菊粉、褐藻等益生元的加入能够在皮肤表面形成生物膜，能够有效改善皮肤微生态，让皮肤更健康。

进一步的，所述增稠剂选自卡波姆、黄原胶、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、聚丙烯酸中的一种或一种以上。

通过采用上述技术方案，卡波姆是一种药用辅料，也没有特别的副作用。是以季戊四醇等与丙烯酸交联得到的丙烯酸交联树脂，有增稠、悬浮等重要用途。而黄原胶是由糖类经黄单胞杆菌发醉,产生的胞外微生物多塘。由于它的大分子特殊结构和胶体特性,而具有多种功能,可作为乳化剂、稳定剂、凝胶增稠剂等作用。

此外，丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物是一种成膜剂，能够代替乳化剂在化妆品中进行使用，不仅减少了乳化剂对皮肤的刺激作用，而且丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物因为其分子量较大，不能透皮吸收，具有良好的抗刺激性作用，安全性好。而聚丙烯酸在化妆品中作粘合剂、乳化稳定剂、成膜剂使用。

由此卡波姆、黄原胶、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、聚丙烯酸均是参加的增稠剂，能够起到改善和增加精华组合物的粘稠度的作用。

进一步的，所述皮肤调理剂选自植物鞘氨醇、4-叔丁基环己醇、红没药醇、甘草酸二钾、β-葡聚糖、羟苯基丙酰胺苯甲酸、腐植酸、矿物盐中的一种或一种以上。

进一步的，β-葡聚糖可以是燕麦β-葡聚糖_或者青稞β-葡聚糖。

通过采用上述技术方案，植物鞘氨醇为磷脂质(Ceramides)的前驱物，与皮肤脂质较为相近，是水分保持和屏障功能的重要组分。植物鞘氨醇是人体表皮中重要的油脂成分之一，随着年龄加大和进入老年期，人体皮肤中的植物鞘氨醇会渐渐减少，导致干性皮肤和粗糙皮肤，外用植物鞘氨醇有高效保持皮肤柔润、并有保护皮层的作用；植物鞘氨醇有抗菌性，也有抗炎作用，可用于痤疮等皮肤疾患的防治。而4-叔丁基环己醇为白色针状或粉状结晶。它具有木香似广藿香样的香气，该活性物能有效舒缓敏感肌肤，从而抑制刺痛感和灼烧感的作用。

此外，β-葡聚糖可以是燕麦β-葡聚糖_或者青稞β-葡聚糖。它能够用于保湿，抗皱去皱纹，并且自带部分消炎作用，还有促进角质层再生等作用。而红没药醇从菊类植物中提取，有抗炎抑菌的作用，该成分稳定性好，和皮肤有很好的相容性，降低皮肤炎症，减轻皮肤粉刺，防止暗疮产生，提高皮肤的抗刺激能力，修复有炎症受伤的皮肤，在防晒产品中提高SPF值。红没药醇有明显的抗炎和抗痉作用，在此功能上，天然的红没药醇的作用是合成品的二倍，有止痛、缓和刺激和抗过敏功能，对过敏性皮肤或儿童皮肤均有护肤效应。红没药醇在皮肤皮层有高渗透性，作用是常用渗透剂的几十倍；可作为主剂或助剂用于防治粉刺一类的皮肤疾病，对皮肤还有调理作用。

由此本发明的精华组合物中未采用一般的舒缓剂，例如甘草酸二钾或者羟苯基丙酰胺苯甲酸等物质，同时褐藻提取物均是从天然植物中提取得到的，原材料绿色环保，对人体肌肤无刺激作用。同时，结合褐藻提取物以及岩藻聚糖硫酸酯的优良活性，能够抑制活性氧自由基的生产并促进其清除，能够达到改善皮肤过敏、发红等炎症问题，帮助修复皮肤。

腐植酸是天然水体中有机物的主要组成部分，其主要来源是土壤腐植质低分子量组分(例如可以是1500道尔顿以下)以及水生植物的分解和低等的浮游生物，腐植酸的基本结构是芳环和脂环，环上连有羧基、羟基、羰基、醌基，以及甲氧基官能团。也正是由于腐植酸分子结构的复杂性机多种官能团的影响，才使得其具有很多物理和化学性能，并使其具有良好的胶体性、溶解性、离子交换性、吸附性、沉淀性、络合性、氧化还原性以及热稳定性能。由于本申请中使用的水中不含有卤化物，此时添加的腐植酸，反而能够提升精华组合物良好的抗氧化和控油性能。而矿物盐是含有70多种微量元素的矿物成分，例如硒元素、镁元素、锌元素、硅元素、钙元素，以及钠元素等，能够补充头部皮肤细胞所需的各种微量元素营养，增强细胞自身活力，提高细胞耐受力，并能提高皮肤水合力，从而有助于延长衰老，为皮肤微生物提供益生元，以此来维护皮肤生物膜的平衡。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种延缓皮肤老化的精华组合物的制备方法，包括如下的操作步骤：

步骤一、按配比将水加入水锅，开启搅拌，依次将复配神经酰胺、对羟基苯乙酮和生育酚加入水锅，加热至75-80℃。

步骤二、再将交联剂预混分散后加入水锅，均质1-3min。

步骤三、将N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯以及润肤剂依次加入油锅，加热至75-80℃，得到油锅混合料。

步骤四、将步骤三中的油锅混合料加入水锅，均质2-5min，在3000-5000r/min的转速下进行搅拌均匀并降温。

步骤五、降温搅拌至水锅内的温度在50℃以下，然后边搅拌边加入虾青素、水解胶原、肌肽、乙酰基六肽-8、姜根提取物，添加完成后均质3-6min。

步骤六、继续搅拌，降温到35℃以下，检测出料。

增稠剂分两次添加完，分别添加在步骤一和步骤三中；皮肤调理剂份三次添加完，分别添加在步骤一、步骤三以及步骤五；保湿剂分四次添加完，分别添加在步骤一、步骤二、步骤三以及步骤四中。

进一步的，在步骤一中还加入有0.02-0.2份的EDTA二钠。

进一步的，在步骤五中还加入有0.09-1.8份的菊粉和0.01-0.2份的褐藻提取物。

通过采用上述技术方案，不仅操作方便，而且通过相似相容原则进行添加，增加了各组分之间的稳定性，加快了各组分的溶解，能够延缓皮肤老化，促进胶原蛋白生成，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量，具有良好的抗老化作用。

综上所述，本发明具有以下有益效果：

1、本发明能够延缓皮肤老化，促进胶原蛋白生成，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量，具有良好的抗老化作用；

2、优化的，上述胆甾醇、辛酸/癸酸甘油三酯、己基癸醇，以及油菜甾醇类，不仅能够起到保湿的作用，而且将胆甾醇等涂覆在人体肌肤上时，可以在人体肌肤上形成一层类似油膜的结构，此时形成的油膜与四种神经酰胺复配使用，能够起到良好的皮肤屏障作用。

3、添加的生育酚、对羟基苯乙酮、虾青素和姜根提取物提供了强效抗氧化性，有效延缓了皮肤衰老。进一步添加的复配神经酰胺、类神经酰胺，以及保湿剂搭配使用，提高了皮肤的充盈度，增加了角质层水分含量。同时，添加的多种多肽和水解胶原，有效对抗和补充了胶原蛋白的流失，具有良好的抗老化作用。

附图说明

图1为一种延缓皮肤老化的精华组合物中试验样品4和对照样品1-3的皮肤的角质层水分含量变化的曲线图；

图2为在倒置显微镜下观察到的细胞形态图，依次主要体现的是空白对照组、0.156％、0.313％、0.625％、1.25％，以及2.5％体积浓度下的细胞形态情况；

图3为对照样品4在不同浓度下的细胞活力曲线；

图4为根据表5中的数据制得的关于空白对照组、溶剂对照组以及试验样品4中胶原蛋白含量的检测含量的柱状图；

图5为根据表7的数据制得的关于试验样品4、对照样品1-3中自由基的清除率的折线图；

图6为一种延缓皮肤老化的精华组合物中试验样品4的两位志愿者四周前后眼角细纹对照图。

具体实施方式

以下结合附图对本发明作进一步详细说明。

一、实施例

实施例1：一种延缓皮肤老化的精华组合物，包括如表1所示的重量份数的组分。

其制备方法，包括如下操作步骤：

步骤一、按表1的配方比将水加入水锅中，开启搅拌，依次将神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1、神经酰胺2、植物鞘氨醇、卡波姆、黄原胶、乙基己基甘油、丁二醇、胆甾醇、对羟基苯乙酮、生育酚加入水锅，加热至75℃。

步骤二、将甘油、透明质酸钠，以及丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物预混分散后加入水锅，均质1min。

步骤三、将辛酸/癸酸甘油三酯、1,2-戊二醇、4-叔丁基环己醇、己基癸醇、红没药醇、N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯、油菜甾醇类和聚丙烯酸依次加入油锅，加热至75℃，得到油锅混合料。

步骤四、将步骤三中的油锅混合料加入水锅，均质2min，5000r/min，开始降温。

步骤五、降温搅拌水锅至50℃，依次加入虾青素、水解胶原、肌肽、甘草酸二钾、β-葡聚糖、1,2-己二醇、辛甘醇、菊粉、褐藻提取物、羟苯基丙酰胺苯甲酸、腐植酸、矿物质、乙酰基六肽-8以及姜根提取物，加入完成后均质4min。

步骤六、继续搅拌，降温到35℃，检测出料。

表1一种延缓皮肤老化的精华组合物中实施例1-6的重量份数的组分

实施例2：一种延缓皮肤老化的精华组合物，与实施例1的不同之处在于：如表1所示，其重量份数的组分不同。

其制备方法包括如下操作步骤：

步骤一、按表1的配方比将水加入水锅中，开启搅拌，依次将神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1、神经酰胺2、植物鞘氨醇、卡波姆、黄原胶、乙基己基甘油、丁二醇、胆甾醇、对羟基苯乙酮、生育酚加入水锅，加热至78℃。

步骤二、将甘油、透明质酸钠，以及丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物预混分散后加入水锅，均质2min。

步骤三、将辛酸/癸酸甘油三酯、1,2-戊二醇、4-叔丁基环己醇、己基癸醇、红没药醇、N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯、油菜甾醇类和聚丙烯酸依次加入油锅，加热至78℃，得到油锅混合料。

步骤四、将步骤三中的油锅混合料加入水锅，均质3.5min，4000r/min，开始降温。

步骤五、降温搅拌水锅至40℃，依次加入虾青素、水解胶原、肌肽、甘草酸二钾、β-葡聚糖、1,2-己二醇、辛甘醇、菊粉、褐藻提取物、羟苯基丙酰胺苯甲酸、腐植酸、矿物质、乙酰基六肽-8以及姜根提取物，加入完成后均质3min。

步骤六、继续搅拌，降温到30℃，检测出料。

实施例3：一种延缓皮肤老化的精华组合物，与实施例1的不同之处在于：如表1所示，其重量份数的组分不同。

其制备方法包括如下操作步骤：

步骤一、按表1的配方比将水加入水锅中，开启搅拌，依次将神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1、神经酰胺2、植物鞘氨醇、卡波姆、黄原胶、乙基己基甘油、丁二醇、胆甾醇、对羟基苯乙酮、生育酚加入水锅，加热至80℃。

步骤二、将甘油、透明质酸钠，以及丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物预混分散后加入水锅，均质3min。

步骤三、将辛酸/癸酸甘油三酯、1,2-戊二醇、4-叔丁基环己醇、己基癸醇、红没药醇、N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯、油菜甾醇类和聚丙烯酸依次加入油锅，加热至80℃，得到油锅混合料。

步骤四、将步骤三中的油锅混合料加入水锅，均质5min，3000r/min，开始降温。

步骤五、降温搅拌水锅至25℃，依次加入虾青素、水解胶原、肌肽、甘草酸二钾、β-葡聚糖、1,2-己二醇、辛甘醇、菊粉、褐藻提取物、羟苯基丙酰胺苯甲酸、腐植酸、矿物质、乙酰基六肽-8以及姜根提取物，加入完成后均质6min。

步骤六、继续搅拌，降温到25℃，检测出料。

实施例4：一种延缓皮肤老化的精华组合物，与实施例1的不同之处在于：如表1所示，其重量份数的组分不同，以及制备方法也不同，在步骤一中还加入有0.02份的EDTA二钠。在步骤五中还加入有0.09份的菊粉和0.01份的褐藻提取物。

实施例5：一种延缓皮肤老化的精华组合物，与实施例1的不同之处在于：如表1所示，其重量份数的组分不同，以及制备方法也不同，在步骤一中还加入有0.1份的EDTA二钠。在步骤五中还加入有1.1份的菊粉和0.12份的褐藻提取物。

实施例6：一种延缓皮肤老化的精华组合物，与实施例1的不同之处在于：如表1所示，其重量份数的组分不同，以及制备方法也不同，在步骤一中还加入有0.2份的EDTA二钠。在步骤五中还加入有1.8份的菊粉和0.2份的褐藻提取物。

二、对比例

对比例1：一种延缓皮肤老化的精华组合物，其采用的是市场上购得的雅诗兰黛特润修护肌透精华露。

对比例2：一种延缓皮肤老化的精华组合物，其采用的是市场上购得的Olay水感透白光塑精华露。

对比例3：一种延缓皮肤老化的精华组合物，其采用的是市场上购得的菲洛嘉NCTF血清再生精华液。

三、试验数据检查

试验一：角质层水分改变量

试验对象：将实施例1-6制得的净化组合物作为试验样品1-6，将对比例1-3制得的净化组合物作为对照样品1-3。

试验方法：随机选取同一地区的18-40周岁的人群45人，每组有5个测试样。首先采用洗面奶(市购的妮维雅凝水活采泡沫洗面乳150g)，然后擦干脸部水分后分别将试验样品1-6和对照样品1-3涂抹在皮肤上，吸收完全后，采用皮肤含水量测试仪(恒达科技)，分别测试未使用、0.5h、1h、2h、3h和4h时该处皮肤的角质层水分含量，并分别进行一次实时的水分流失数据统计。

试验结果：表2和图1可知，使用试样样品1-6的皮肤角质层水分含量均大于使用对照样品1的皮肤角质层水分含量。在1小时内，使用试验样品4的皮肤角质层水分流失最大，试验样品4的曲线比较陡峭。而在1-4小时的时间段内，使用试验样品4的皮肤角质层水分缓慢下降，试验样品4的曲线比较平缓。

从图1可以明显的看出，对照样品1和对照样品2的含水量曲线明显低于试验样品4和对照样品3的。试验样品4和对照样品3的曲线可看出：在1.5h之前对照样品3的含水量高于试验样品4的，在1.5h之后对照样品3的含水量明显低于试验样品4的，说明试验样品4的锁水能力高于对照样品3的锁水能力。

通过这个实验的表2和图1结合可看出试样样品1-6的补水保湿能力总体高于对照样品1-3的补水保湿能力。由此从曲线看样样品1-6可以明显的提高角质层的含水量。

表2试验样品1-6和对照样品1-3的角质层水分含量的测试结果

试验二：抗光老化力能力

试验对象：试验设置空白对照组、溶剂对照组，将实施例4制得的净化组合物作为试验样品4。

试验方法：

1、测试系统：本次测试所用细胞为成纤维细胞，由广东博溪生物科技有限公司通过细胞原代、传代培养获得。

2、试剂：Low-DMEM(GIBCO),PBS(博士德)、MTT(Sigma)、DMSO(Sigma)、CollagenIELISA试剂盒(Abcam)。

3、主要设备：CO₂培养箱(Thermo)、超净工作台(苏净安泰)、倒置显微镜(Olympus)、微量振荡器(其林贝尔)、酶标仪(BioTek)、恒温箱(泰斯特)。

4、细胞毒性测试：

(1)细胞接种：按1E4/孔的接种密度接种细胞致96孔板，于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)。

(2)配液一：在试样样品4中，设置8个浓度梯度，每个浓度梯度下设置3个重复孔。

(3)配液二：按细胞毒性测试浓度梯度设置表(见表3)配制受试物工作液①-⑧。

(4)给药：待96孔板中细胞铺板率达到40-60％时进行给药。空白对照组每孔加入200μL细胞培养液，在试验样品4每孔中加入200μL含有相对应浓度受试物的培养液；调零孔无细胞接种，仅加入200μL细胞培养液。给药完成后将96孔板放置在培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中培养。

(5)测试：细胞培养24h后，弃掉上清，加入MTT工作液(0.5mg/mL，现配现用),37℃37C避光孵育4h。孵育结束后，弃掉上清每孔加150μL DMSO，在490nm处读取OD值。

(6)细胞相对活力计算：

5、细胞毒性测试：

(1)细胞接种：按4E4/孔的密度接种细胞至24孔板中，于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中培养过夜。

(2)配液：根据细胞毒性测试结果，各样品选取CV90附近5个浓度，进行形态学测试。

(3)给药：待24孔板细胞铺板率达到40-60％时，进行给药。试验样品4加入含相应浓度受试物的细胞培养液，空白对照组加入细胞培养液，于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中培养24h。

(4)形态观察：培养结束后，在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照(20x)，参见图3。

6、抗光老化功效检测

(1)细胞接种：按2.5E5/孔的密度接种细胞至6孔板中，于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中培养过夜。

(2)配液：按照试验分组(见表4)进行受试物工作液的配置。

(3)给药:根据表4实验具体设计，待6孔板中细胞铺板率达到40-50％时，进行分组给药，每孔给药量为2ml.每组设3个复孔。于培养期(37℃、5％CO₂、95％RH)培养24h。

(4)辐射：培养24h后进行UVA辐照，辐照后更换新鲜养基后，于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)培养24h。

(5)收集细胞上清:培养24h后，将细胞培上清液收集于1.5mLEP管中，并保存于-80℃冰箱冷冻保存。

(6)ELISA测试：根据Cllagen 1ELISA试剂念进行Cllagen检测。

试验结果：如表3、图2和图3可知，细胞毒性测试结果和形态学测试结果，最终确定试验样品4的最大安全浓度为1.25％。

如表4、表5和图4可知，试验样品4经由UVA照射后，从81.85ng/ml(空白对照组)下降至76.76ng/ml，而溶剂对照组经由UVA照射后，从81.85ng/ml(空白对照组)下降至55.51ng/ml，与溶剂对照组(UVA+)相比较，试验样品4的胶原蛋白含量流失较少，因此明显得出本申请的对照样品4可以明显提升胶原蛋白的含量(P＜0.05)，试验样品4具有一定的抗老化功效。

表3试样样品4中8个浓度梯度

表4

试验对象	样品浓度	处理方式	检测指标	检测方法
					空白对照组	/	UVA-	Collagen	ELISA
溶剂对照组	/	UVA+	Collagen	ELISA
					试验样品4	1.25％	UVA+	Collagen	ELISA

表5

试验三：自由基的清除率测试

试验对象：将实施例4制得的净化组合物作为试验样品4；将对比例1-3制得的净化组合物作为对照样品1-3。

试验方法：

本实验是根据DPPH自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光光度计进行快速的定量分析。

将所测试的试验样品1以及对照样品1-3分别用蒸馏水配制成质量浓度0.1mg/ml，0.2mg/ml，0.4mg/ml，0.6mg/ml，0.8mg/ml的溶液，取2ml稀释液及0.2mg/mlDPPH·50％乙醇溶液2ml加入同一具试管中摇匀，在室温下密闭静置30min，于517nm波长下测定吸光度，计算其清除率，从而评估并讨论精雕即润益颜精华乳和其他产品的抗氧化能力。

清除率＝[1-(A₁-A₂)/A₀]×100％

式中，A₁为样品溶液+DPPH·50％乙醇溶液的吸光度；

A₂为样品溶液+50％乙醇溶液的吸光度；

A₀为DPPH·50％乙醇溶液+蒸馏水的吸光度。

表6

表7试验样品4以及对照样品1的自由基的清除率检测结果

试验结果：如表6、表7和图5中可看出，清除自由基的能力随着浓度的升高而变强。对照样品1和对照样品2的曲线大部分重合，0.1mg/ml-0.2mg/ml浓度间，对照样品1的清除率小于对照样品2。对照样品3的曲线比较曲折，0.1mg/ml-0.3mg/ml浓度间，对照样品3的清除率大于对照样品1；0.4mg/ml-0.8mg/ml浓度间，对照样品3的清除率小于试验样品4。试验样品4的清除率曲线远远高于对照样品1-3的清除率。

与对照样品1-3相比较，0.2mg/ml-0.4mg/ml浓度间，清除率最高的是试验样品4，其次是对照样品3、对照样品2，清除率最低的是对照样品1。清除率越大，抗抗氧化能力越强，所以抗氧化能力依次是试验样品4＞对照样品3＞对照样品2＞对照样品1。高浓度时，清除率最高的是试验样品4，最差的是对照样品3，对照样品1、对照样品2的清除率差不多。

由此可知，综上本申请的试验样品4的抗氧化能力远远强于对照样品1-3的抗氧化能力。

试验四：眼角皱纹该变量

试验对象：将实施例4制得的净化组合物分别作为试验样品4。

试验方法：在同一地区随机选择两名年龄在40-50岁的眼角有明显皱纹的女性作为志愿者，上述志愿者将试验样品4连续涂抹4周后记录0周、4周的两次眼角细纹结果(拍照记录)，上述结果如图6所示。

试验结果：如图6的照片显示，两位志愿者的眼角皱纹在试验样品4四周以后得到明显改善，皱纹深度变浅，长度变短。

具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (1)

1.一种延缓皮肤老化的精华组合物，其特征在于，按照质量份数计，由如下的组分组成：

水82.44份；

EDTA二钠0.02份；

对羟基苯乙酮0.75份；

神经酰胺 3 0.033份；

神经酰胺 6 II 0.018份；

神经酰胺1 0.00003份；

植物鞘氨醇0.018份；

卡波姆0.0087份；

黄原胶0.009份；

乙基己基甘油0.0089份；

丁二醇6.81份；

神经酰胺 2 0.065份；

胆甾醇0.047份；

生育酚0.012份；

甘油11.12份；

透明质酸钠0.7份；

丙烯酸（酯）类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.69份；

辛酸/癸酸甘油三酯3.2份；

1,2-戊二醇2.7份；

4-叔丁基环己醇0.16份；

己基癸醇2.11份；

红没药醇0.14份；

N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯0.13份；

油菜甾醇类0.025份；

聚丙烯酸0.18份；

虾青素0.031份

水解胶原0.31份；

肌肽0.75份；

甘草酸二钾0.3份；

β-葡聚糖0.032份；

1,2-己二醇0.736份；

辛甘醇0.016份；

菊粉0.09份；

褐藻提取物0.01份；

羟苯基丙酰胺苯甲酸0.033份；

腐植酸0.014份；

矿物质0.025份；

乙酰基六肽-8 0.007份；

姜根提取物0.058份。

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