CN110681180A - 一种内分泌干扰物的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种内分泌干扰物的提取方法，包括如下步骤：S1、获取代提物；S2、盐析初步提取；S3、亚临界水萃取二提；S4、提取混合物洗脱；S5、洗脱后处理，本发明提供一种内分泌干扰物的提取方法，涵盖取样、样品处理、样品萃取、样品洗脱提取，方便安全有效的提取内分泌干扰物，由于本发明直接对样品进行处理，提取所得内分泌干扰物干净彻底；本发明进一步所述中盐析初步提取中，加入有机溶剂和钠盐，通过超声提取，离心分离来获得提取余料，有效完成初步提取；进一步所述对亚临界水萃取二提中，将提取余料与硅藻土混料处理，同时制备亚临界水萃取剂，对亚临界水萃取；通过温度压强的控制提高了萃取率，温度控制在100‑120℃之间，压强控制在10MPa‑15MPa。

Description

一种内分泌干扰物的提取方法

技术领域

本发明属于内分泌干扰物提取领域，具体为一种内分泌干扰物的提取方法。

背景技术

内分泌干扰物也称为环境激素，是一种外源性干扰内分泌系统的化学物质，指环境中存在的能干扰人类或动物内分泌系统诸环节并导致异常效应的物质，它们通过摄入、积累等各种途径，并不直接作为有毒物质给生物体带来异常影响，而是类似雌激素对生物体起作用，即使数量极少，也能让生物体的内分泌失衡，出现种种异常现象。这类物质会导致动物体和人体生殖器障碍、行为异常、生殖能力下降、幼体死亡、甚至灭绝。

激素具有对内环境稳定的维护和发育过程的调节作用。内分泌干扰物为干扰激素的制造、释放、传送、代谢、结合、作用或排除的外源性因子。包括杀虫剂、除草剂、杀菌剂、塑化剂、表面活化剂、有机金属、卤代杂环烃、植物雌激素等。由于激素在许多组织中有指导分化的关键作用，发育中的生物体对有激素或抗激素活性的化学物尤其敏感。

现有的对内分泌干扰物的提取方法，存在着提取不彻底，操作不便，不利于收集，内分泌干扰物对于人体有一定的影响，收集一定要安全有效，为此，我们推出了一种内分泌干扰物的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决内分泌干扰物提取不彻底，操作不便不利于收集问题，提供一种内分泌干扰物的提取方法。

本发明采用的技术方案如下：

一种内分泌干扰物的提取方法，包括如下步骤：

S1、获取代提物；将含有环境内分泌干扰物的样品粉碎，并水用充分溶解；

S2、盐析初步提取；利用与水混溶的有机溶剂和钠盐对内分泌干扰物进行超声提取，获得盐析初提物；

S3、亚临界水萃取二提；利用亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物

S4、提取混合物洗脱；将盐析初提物和亚临界水萃取二提物混合后，利用洗脱液进行洗脱处理

S5、洗脱后处理，浓缩获得内分泌干扰物的提取物。

其中，所述S2中盐析初步提取，其具体步骤如下：

S201、加入有机溶剂和钠盐；按比例加入有机溶剂和钠盐水溶液；

S202、超声提取；利用超声波间歇性提取，

S203、离心分离获得提取余料；利用离心机对其进行高速离心处理，分离初提物和余料。

其中，所述S3中对亚临界水萃取二提，其具体步骤如下：

S301、将提取余料与硅藻土混料处理；将提取余料与一定比例的硅藻土搅拌混合；

S302、制备亚临界水萃取剂；在纯水中加入修饰剂，所述修饰剂为丙酮、乙醇、甲醇中的至少一种；形成亚临界水萃取剂；

S303、亚临界水萃取，控制亚临界水萃取和压强以及PH值，进行亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物。

其中，所述S4中对提取混合物洗脱，其具体步骤如下:

S401、初提和二提的提取物混合；将初提物和亚临界水萃取二提物混合均匀，获得提取混合物；

S402、乙腈水溶液洗脱提取混合物；利用乙腈水溶液作为洗脱液对提取混合物进行洗脱提纯；

其中，所述S5中洗脱后处理，其具体步骤如下：

S501、添加钠盐离心提取乙腈提取液；利用钠盐的盐析作用同时配合离心提取乙腈提取液；

S502、微氮气吹至近干获得提取物；利用微氮气对乙腈进行风干，浓缩获得提取物。

其中，所述S201中加入有机溶剂和钠盐，加入的钠盐为氯化钠或者硫酸钠。

其中，所述S303中亚临界水萃取温度控制在100-120℃之间，压强控制在 10MPa-15MPa之间，PH控制在10-12之间。

其中，所述S402乙腈水溶液洗脱提取混合物，乙腈洗脱溶液浓度为1：50～1:80。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：

1、本发明提供一种内分泌干扰物的提取方法，涵盖取样、样品处理、样品萃取、样品洗脱提取，方便安全有效的提取内分泌干扰物；由于本发明直接对样品进行处理，提取所得内分泌干扰物干净彻底。

2、本发明进一步所述中盐析初步提取中，加入有机溶剂和钠盐，通过超声提取，离心分离来获得提取余料，有效完成初步提取。

3、本发明进一步所述对亚临界水萃取二提中，将提取余料与硅藻土混料处理，同时制备亚临界水萃取剂，对亚临界水萃取；通过温度压强的控制提高了萃取率；温度控制在100-120℃之间，压强控制在10MPa-15MPa之间。

4、本发明进一步所述对提取混合物洗脱中，将初提和二提的提取物混合，再用乙腈水溶液洗脱提取混合物，对乙腈水溶液浓度的要求使提取效果更佳；乙腈洗脱溶液浓度为1:50～1：80，其中优选1∶60。

5、本发明进一步所述洗脱后处理中，通过添加钠盐离心提取乙腈提取液，用微氮气吹至近干获得提取物，科学有效的保证了提取率。

附图说明

图1为本发明的流程示意简图；

图2为本发明中盐析初步提取流程示意简图；

图3为本发明中亚临界水萃取二提流程示意简图；

图4为本发明中提取混合物洗脱流程示意简图；

图5为本发明中洗脱后处理流程示意简图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制；术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性；此外，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例一，参照图1～5，一种内分泌干扰物的提取方法，包括如下步骤：

S1、获取代提物；将含有环境内分泌干扰物的样品粉碎，并水用充分溶解；

S2、盐析初步提取；利用与水混溶的有机溶剂和钠盐对内分泌干扰物进行超声提取，获得盐析初提物；

S3、亚临界水萃取二提；利用亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物；

S4、提取混合物洗脱；将盐析初提物和亚临界水萃取二提物混合后，利用洗脱液进行洗脱处理；

S5、洗脱后处理，浓缩获得内分泌干扰物的提取物。

其中，所述S2中盐析初步提取，其具体步骤如下：

S201、加入有机溶剂和钠盐；按比例加入有机溶剂和钠盐水溶液；其中，所述S201中加入有机溶剂和钠盐，加入的钠盐为氯化钠或者硫酸钠。

S202、超声提取；利用超声波间歇性提取，

S203、离心分离获得提取余料；利用离心机对其进行高速离心处理，分离初提物和余料。

其中，所述S3中对亚临界水萃取二提，其具体步骤如下：

S301、将提取余料与硅藻土混料处理；将提取余料与一定比例的硅藻土搅拌混合；

S302、制备亚临界水萃取剂；在纯水中加入修饰剂，所述修饰剂为丙酮；形成亚临界水萃取剂；

S303、亚临界水萃取，控制亚临界水萃取和压强以及PH值，进行亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物；其中，所述S303中亚临界水萃取温度控制在100℃，压强控制在10MPa，PH控制在10。

其中，所述S402乙腈水溶液洗脱提取混合物，乙腈洗脱溶液浓度为1：50。

其中，所述S4中对提取混合物洗脱，其具体步骤如下:

S401、初提和二提的提取物混合；将初提物和亚临界水萃取二提物混合均匀，获得提取混合物；

S402、乙腈水溶液洗脱提取混合物；利用乙腈水溶液作为洗脱液对提取混合物进行洗脱提纯；

其中，所述S5中洗脱后处理，其具体步骤如下：

S501、添加钠盐离心提取乙腈提取液；利用钠盐的盐析作用同时配合离心提取乙腈提取液；

S502、微氮气吹至近干获得提取物；利用微氮气对乙腈进行风干，浓缩获得提取物。

实施例二；本实施例与实施例一的区别在于；

所述钠盐为硫酸钠，所述修饰剂为丙酮和乙醇的混合物，所述S303中亚临界水萃取温度控制在110℃，压强控制在12MPa，PH控制在12；所述S402乙腈水溶液洗脱提取混合物，乙腈洗脱溶液浓度为1：60；

实施例三；本实施例与实施例一的区别在于；

所述钠盐为硫酸钠，所述修饰剂为丙酮和甲醇的混合物，所述S303中亚临界水萃取温度控制在120℃，压强控制在12MPa，PH控制在12；所述S402乙腈水溶液洗脱提取混合物，乙腈洗脱溶液浓度为1：80。

工作原理：本发明提供一种内分泌干扰物的提取方法，涵盖取样、样品处理、样品萃取、样品洗脱提取，方便安全有效的提取内分泌干扰物，由于本发明直接对样品进行处理，提取所得内分泌干扰物干净彻底；本发明进一步所述中盐析初步提取中，加入有机溶剂和钠盐，通过超声提取，离心分离来获得提取余料，有效完成初步提取；本发明进一步所述对亚临界水萃取二提中，将提取余料与硅藻土混料处理，同时制备亚临界水萃取剂，对亚临界水萃取，通过温度压强的控制提高了萃取率，温度控制在100-120℃之间，压强控制在10MPa-15MPa之间；本发明进一步所述对提取混合物洗脱中，将初提和二提的提取物混合，再用乙腈水溶液洗脱提取混合物，对乙腈水溶液浓度的要求使提取效果更佳，乙腈洗脱溶液浓度为1：50～1：80，其中优选 1 ∶ 60；本发明进一步所述洗脱后处理中，通过添加钠盐离心提取乙腈提取液，用微氮气吹至近干获得提取物，科学有效的保证了提取率。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、获取代提物；将含有环境内分泌干扰物的样品粉碎，并水用充分溶解；

S2、盐析初步提取；利用与水混溶的有机溶剂和钠盐对内分泌干扰物进行超声提取，获得盐析初提物；

S3、亚临界水萃取二提；利用亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物；

S4、提取混合物洗脱；将盐析初提物和亚临界水萃取二提物混合后，利用洗脱液进行洗脱处理

S5、洗脱后处理，浓缩获得内分泌干扰物的提取物。

2.如权利要求1所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S2中盐析初步提取，其具体步骤如下：

S201、加入有机溶剂和钠盐；按比例加入有机溶剂和钠盐水溶液；

S202、超声提取；利用超声波间歇性提取，

S203、离心分离获得提取余料；利用离心机对其进行高速离心处理，分离初提物和余料。

3.如权利要求2所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S3中对亚临界水萃取二提，其具体步骤如下：

S301、将提取余料与硅藻土混料处理；将提取余料与一定比例的硅藻土搅拌混合；

S302、制备亚临界水萃取剂；在纯水中加入修饰剂，所述修饰剂为丙酮、乙醇、甲醇中的至少一种；形成亚临界水萃取剂；

S303、亚临界水萃取，控制亚临界水萃取和压强以及PH值，进行亚临界水萃取，获得亚临界水萃取二提物。

4.如权利要求3所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S4中对提取混合物洗脱，其具体步骤如下:

S401、初提和二提的提取物混合；将初提物和亚临界水萃取二提物混合均匀，获得提取混合物；

S402、乙腈水溶液洗脱提取混合物；利用乙腈水溶液作为洗脱液对提取混合物进行洗脱提纯。

5.如权利要求4所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S5中洗脱后处理，其具体步骤如下：

S501、添加钠盐离心提取乙腈提取液；利用钠盐的盐析作用同时配合离心提取乙腈提取液；

S502、微氮气吹至近干获得提取物；利用微氮气对乙腈进行风干，浓缩获得提取物。

6.如权利要求1～5任一所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S201加入的钠盐为氯化钠或者硫酸钠。

7.如权利要求6所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S303中亚临界水萃取温度控制在100-120℃之间，压强控制在 10MPa-15MPa之间，PH控制在10-12之间。

8.如权利要求6所述的一种内分泌干扰物的提取方法，其特征在于：所述S402乙腈水溶液洗脱提取混合物，乙腈洗脱溶液浓度为1：50～1:80。

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