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CN116096707A - 成纤维细胞生长因子受体激酶的抑制剂 - Google Patents

成纤维细胞生长因子受体激酶的抑制剂 Download PDF

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CN116096707A
CN116096707A CN202180056709.1A CN202180056709A CN116096707A CN 116096707 A CN116096707 A CN 116096707A CN 202180056709 A CN202180056709 A CN 202180056709A CN 116096707 A CN116096707 A CN 116096707A
Authority
CN
China
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optionally substituted
mmol
ethynyl
pharmaceutically acceptable
methoxymethyl
Prior art date
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Pending
Application number
CN202180056709.1A
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English (en)
Inventor
史蒂芬·W·卡尔多
约翰·泰霍纳斯
埃里克·A·墨菲
陶菲克·卡努尼
李·D·阿诺德
罗伯特·卡尼亚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jinnaite Biopharmaceutical Co
Original Assignee
Jinnaite Biopharmaceutical Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Application filed by Jinnaite Biopharmaceutical Co filed Critical Jinnaite Biopharmaceutical Co
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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Abstract

本文提供了成纤维细胞生长因子受体激酶的杂芳基抑制剂、包含所述化合物的药物组合物以及使用所述化合物治疗疾病的方法。

Description

成纤维细胞生长因子受体激酶的抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年6月5日提交的美国专利申请第63/035,243号的权益，其全部内容通过引用并入本文。
背景技术
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)是受体酪氨酸激酶(RTK)的亚家族，这些激酶结合成纤维细胞生长因子蛋白家族的成员。成纤维细胞生长因子/FGF受体网络的失调在肿瘤中频繁发生。因此，需要靶向异常FGFR激酶活性的疗法用于治疗癌症和其他病症。
发明内容
本文提供了成纤维细胞生长因子受体(FGFR)激酶的抑制剂、包含所述化合物的药物组合物以及使用所述化合物治疗疾病的方法。
一个实施方案提供了一种具有式(I)的结构的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：
Figure BDA0004113375550000011
其中，
X为C-H或N；
Y为C-H或N；
Z选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0004113375550000021
t为1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、氟、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基烷基；
R4为任选取代的含氮的9或10原子杂芳基；
R选自氢、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基、任选取代的C3-C7杂环基烷基、任选取代的C2-C7烯基、-CO2R5、-CONHR5或–CON(R5)2；并且
R5各自独立地选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基或任选取代的C3-C7杂环基烷基。
一个实施方案提供了一种包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一个实施方案提供了一种治疗有需要的患者中的疾病或病症的方法，其包括向患者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。另一个实施方案提供了上述方法，其中疾病或病症是癌症。
援引并入
本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，用于本文确定的具体目的。
具体实施方式
如本文和所附权利要求中使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式“一种(a、an)”和“该(the)”包括复数指示物。因此，例如，提及“一种药剂(an agent)”包括多种这样的药剂，提及“该细胞”包括提及一种或多种细胞(或提及多个细胞)及其本领域技术人员已知的等价物，等等。当范围在本文中用于物理性质(例如分子量)或化学性质(例如化学式)时，意图包括范围和其中的具体实施方案的所有组合和子组合。当提及数字或数值范围时，术语“约”意指所提及的数字或数值范围是在实验可变性内(或在统计实验误差内)的近似值，并且因此在某些情况下，数字或数值范围将在该数字或数值范围的1％与15％之间变化。术语“包含(comprising)”(和相关术语如“包含(comprise、comprises)”或“具有(having)”或“包括(including)”)不旨在排除在其他某些实施方案中，例如，本文所述的任何物质组合物、组合物、方法或过程等的实施方案“由所述特征组成”或“基本上由所述特征组成”。
定义
如在说明书和所附权利要求中所使用的，除非有相反的说明，否则以下术语具有以下指示的含义。
“氨基”是指–NH2基团。
“氰基”是指-CN基团。
“硝基”是指-NO2基团。
“氧杂”是指-O-基团。
“氧代”是指＝O基团。
“硫代”是指＝S基团。
“亚氨基”是指＝N-H基团。
“肟基”是指＝N-OH基团。
“肼基”是指＝N-NH2基团。
“烷基”是指仅由碳和氢原子组成的直链或支链烃链基团，不包含不饱和度，具有1至15个碳原子(例如，C1-C15烷基)。在某些实施方案中，烷基包含1至13个碳原子(例如，C1-C13烷基)。在某些实施方案中，烷基包含1至8个碳原子(例如，C1-C8烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至5个碳原子(例如，C1-C5烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至4个碳原子(例如，C1-C4烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至3个碳原子(例如，C1-C3烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至2个碳原子(例如，C1-C2烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1个碳原子(例如，C1烷基)。在其他实施方案中，烷基包含5至15个碳原子(例如，C5-C15烷基)。在其他实施方案中，烷基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8烷基)。在其他实施方案中，烷基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5烷基)。在其他实施方案中，烷基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5烷基)。在其他实施方案中，烷基选自甲基、乙基、1-丙基(正丙基)、1-甲基乙基(异丙基)、1-丁基(正丁基)、1-甲基丙基(仲丁基)、2-甲基丙基(异丁基)、1,1-二甲基乙基(叔丁基)、1-戊基(正戊基)。烷基通过单键与分子的其余部分连接。除非在说明书中另有具体说明，否则烷基任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“烷氧基”是指通过氧原子键合的式–O-烷基的基团，其中烷基为如上定义的烷基链。
“烯基”是指仅由碳和氢原子组成的直链或支链烃链基团，其含有至少一个碳-碳双键且具有2至12个碳原子。在某些实施方案中，烯基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中，烯基包含2至4个碳原子。烯基通过单键与分子的其余部分连接，例如乙烯基(ethenyl)(即乙烯基(vinyl))、丙-1-烯基(即烯丙基)、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基等。除非在说明书中另有具体说明，否则烯基任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“炔基”是指仅由碳和氢原子组成的直链或支链烃链基团，其含有至少一个碳-碳三键且具有2至12个碳原子。在某些实施方案中，炔基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中，炔基包含2至6个碳原子。在其他实施方案中，炔基包含2至4个碳原子。炔基通过单键与分子的其余部分连接，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。除非在说明书中另有具体说明，否则炔基任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚烷基”或“亚烷基链”是指将分子的其余部分连接到仅由碳和氢组成的不含不饱和度的基团上的直链或支链二价烃链，具有1至12个碳原子，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基等。亚烷基链通过单键与分子的其余部分连接并通过单键与基团连接。亚烷基链与分子的其余部分和与基团的连接点是通过亚烷基链中的一个碳或通过链中的任何两个碳。在某些实施方案中，亚烷基包含1至8个碳原子(例如，C1-C8亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至5个碳原子(例如，C1-C5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至4个碳原子(例如，C1-C4亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至3个碳原子(例如，C1-C3亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至2个碳原子(例如，C1-C2亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1个碳原子(例如，C1亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚烷基)。除非在说明书中另有具体说明，否则亚烷基链任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚烯基”或“亚烯基链”是指将分子的其余部分连接到仅由碳和氢组成的基团的直链或支链二价烃链，其含有至少一个碳-碳双键，并且具有1至12个碳原子。亚烯基链通过单键与分子的其余部分连接并通过单键与基团连接。在某些实施方案中，亚烯基包含2至8个碳原子(例如，C2-C8亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至4个碳原子(例如，C2-C4亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至3个碳原子(例如，C2-C3亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2个碳原子(例如，C2亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚烯基)。除非在说明书中另有具体说明，否则亚烯基链任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚炔基”或“亚炔基链”是指将分子的其余部分连接到仅由碳和氢组成的基团的直链或支链二价烃链，其含有至少一个碳-碳三键，并且具有1至12个碳原子。亚炔基链通过单键与分子的其余部分连接并通过单键与基团连接。在某些实施方案中，亚炔基包含2至8个碳原子(例如，C2-C8亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至4个碳原子(例如，C2-C4亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至3个碳原子(例如，C2-C3亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含两个碳原子(例如，C2亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚炔基)。除非在说明书中另有具体说明，否则亚炔基链任选地被一个或多个以下取代基取代：卤素、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟代烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“芳基”是指通过从环碳原子除去氢原子而衍生自芳族单环或多环烃环体系的基团。芳族单环或多环烃环体系仅含有氢和5至18个碳原子的碳，其中环体系中的至少一个环是完全不饱和的，即，根据休克尔理论(Hückel theory)，其含有环状、离域的(4n+2)π–电子体系。衍生出芳基的环体系包括但不限于诸如苯、芴、茚满、茚、萘满和萘的基团。除非在说明书中另有具体说明，否则术语“芳基”或前缀“芳-”(如在“芳烷基”中)意在包括任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的芳基：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，Rb各自独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且其中除非另有说明，否则上述取代基中的每一个是未取代的。
“芳烷基”是指式-Rc-芳基的基团，其中Rc为如上定义的亚烷基链，例如亚甲基、亚乙基等。芳烷基的亚烷基链部分如上文关于亚烷基链所述任选地被取代。芳烷基的芳基部分如上文关于芳基所述任选地被取代。
“芳烯基”是指式–Rd-芳基的基团，其中Rd是如上定义的亚烯基链。芳烯基基团的芳基部分如上文关于芳基所述任选地被取代。芳烯基基团的亚烯基链部分如上文关于亚烯基所述任选地被取代。
“芳炔基”是指式-Re-芳基的基团，其中Re是如上定义的亚炔基链。芳炔基基团的芳基部分如上文关于芳基所述任选地被取代。芳炔基基团的亚炔基链部分如上文关于亚炔基链所述任选地被取代。
“芳烷氧基”是指通过氧原子键合的式-O-Rc-芳基的基团，其中Rc为如上定义的亚烷基链，例如亚甲基、亚乙基等。芳烷基的亚烷基链部分如上文关于亚烷基链所述任选地被取代。芳烷基的芳基部分如上文关于芳基所述任选地被取代。
“碳环基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环烃基，其包括稠环或桥环体系，具有3至15个碳原子。在某些实施方案中，碳环基包含3至10个碳原子。在其他实施方案中，碳环基包含5至7个碳原子。碳环基通过单键与分子的其余部分连接。碳环基是饱和的(即，仅含有单个C-C键)或不饱和的(即，含有一个或多个双键或三键)。完全饱和的碳环基也称为“环烷基”。单环环烷基的实例包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。不饱和碳环基也称为“环烯基”。单环环烯基的实例包括例如环戊烯基、环己烯基、环庚烯基和环辛烯基。多环碳环基基团包括例如金刚烷基、降冰片基(即双环[2.2.1]庚烷基)、降冰片烯基、十氢萘基、7,7-二甲基-双环[2.2.1]庚烷基等。除非在说明书中另有具体说明，否则术语“碳环基”意在包括任选地被一个或多个取代基取代的碳环基基团，该取代基独立地选自烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，Rb各自独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且其中除非另有说明，否则上述取代基中的每一个是未取代的。
“碳环基烷基”是指式–Rc-碳环基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚烷基链。亚烷基链和碳环基基团如上文所定义任选地被取代。
“碳环基炔基”是指式–Rc-碳环基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚炔基链。亚炔基链和碳环基基团如上文所定义任选地被取代。
“碳环基烷氧基”是指通过氧原子键合的式–O-Rc-碳环基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚烷基链。亚烷基链和碳环基基团如上文所定义任选地被取代。
如本文所用，“羧酸生物电子等排体”是指表现出与羧酸部分类似的物理、生物和/或化学性质的官能团或部分。羧酸生物电子等排体的实例包括但不限于：
Figure BDA0004113375550000111
Figure BDA0004113375550000112
等。
“卤代”或“卤素”是指溴、氯、氟或碘取代基。
“氟代烷基”是指被一个或多个如上定义的卤代基团取代的如上定义的烷基基团，例如三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、2,2,2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基等。在一些实施方案中，氟代烷基基团的烷基部分如上文对烷基基团所定义的那样任选地被取代。
“杂环基”是指包含2至12个碳原子和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的3-18元非芳香族环基。除非说明书中另有具体说明，否则杂环基为单环、双环、三环或四环环系，其任选地包括稠环或桥环体系。杂环基基团中的杂原子任选地被氧化。如果存在，一个或多个氮原子任选地被季铵化。杂环基基团是部分或完全饱和的。杂环基通过环的任何原子与分子的其余部分连接。此类杂环基基团的实例包括但不限于二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三噻烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫代吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。除非说明书中另有具体说明，否则术语“杂环基”意在包括如上定义的杂环基，其任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，Rb各自独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且其中除非另有说明，否则上述取代基中的每一个是未取代的。
“N-杂环基”或“N-连接的杂环基”是指含有至少一个氮的如上文所定义的杂环基，并且其中杂环基与分子其余部分的连接点是通过杂环基中的氮原子。N-杂环基基团如上文关于杂环基基团所述任选地被取代。这种N-杂环基的实例包括但不限于1-吗啉基、1-哌啶基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉基和咪唑烷基。
“C-杂环基”或“C-连接的杂环基”是指含有至少一个杂原子的如上所定义的杂环基，并且其中杂环基与分子其余部分的连接点是通过杂环基中的碳原子。C杂环基基团如上文关于杂环基基团所述任选地被取代。这种C-杂环基的实例包括但不限于2-吗啉基、2-或3-或4-哌啶基、2-哌嗪基、2-或3-吡咯烷基等。
“杂环基烷基”是指式–Rc-杂环基的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂环基为含氮杂环基，则杂环基任选地在氮原子处连接至烷基。杂环基烷基的亚烷基链如上文关于亚烷基链所述任选地被取代。杂环基烷基的杂环基部分如上文关于杂环基所述任选地被取代。
“杂环基烷氧基”是指通过氧原子键合的式–O-Rc-杂环基的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂环基为含氮杂环基，则杂环基任选地在氮原子处连接至烷基。杂环基烷氧基的亚烷基链如上文关于亚烷基链所述任选地被取代。杂环基烷氧基的杂环基部分如上文关于杂环基所述任选地被取代。
“杂芳基”是指衍生自包含2至17个碳原子和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子的3-18元芳族环基团的基团。如本文所用，杂芳基为单环、双环、三环或四环环系，其中环体系中的至少一个环是完全不饱和的，即，根据休克尔理论(Hückel theory)，其含有环状、离域的(4n+2)–电子体系。杂芳基包括稠环或桥环体系。杂芳基基团中的杂原子任选地被氧化。如果存在，一个或多个氮原子任选地被季铵化。杂芳基通过环的任何原子与分子的其余部分连接。杂芳基的实例包括但不限于氮杂基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并[d]噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚基、苯并[b][1,4]恶嗪基、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二恶英基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基(苯并噻吩基)、苯并噻吩并[3,2-d]嘧啶基、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、环戊二烯并[d]嘧啶基、6,7-二氢-5H-环戊二烯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6-二氢苯并[h]喹唑啉基、5,6-二氢苯并[h]噌啉基、6,7-二氢-5H-苯并[6,7]环庚并[1,2-c]哒嗪基、二苯并呋喃基、二苯并苯硫基、呋喃基、呋喃酮基、呋喃并[3,2-c]吡啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]嘧啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]哒嗪基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]吡啶基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、吲嗪基、异唑基、5,8-桥亚甲基-5,6,7,8-四氢喹唑啉基、萘啶基、1,6-萘啶酮基、噁二唑基、2-氧代吖庚因基、噁唑基、环氧乙烷基、5,6,6a,7,8,9,10,10a-八氢苯并[h]喹唑啉基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、酚噁嗪、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡唑并[3,4-d]嘧啶基、吡啶基、吡啶并[3,2-d]嘧啶基、吡啶并[3,4-d]嘧啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吡咯基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、5,6,7,8-四氢喹唑啉基、5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、6,7,8,9-四氢-5H环庚并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6,7,8-四氢吡啶并[4,5-c]哒嗪基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基、噻吩并[2,3-d]嘧啶基、噻吩并[3,2-d]嘧啶基、噻吩并[2,3-c]吡啶基和噻吩基(即，噻吩基)。除非说明书中另有具体说明，否则术语“杂芳基”意在包括如上定义的杂芳基，其任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、卤代烯基、卤代炔基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中Ra各自独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，Rb各自独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且其中除非另有说明，否则上述取代基中的每一个是未取代的。
“N-杂芳基”是指含有至少一个氮的如上定义的杂芳基，其中杂芳基与分子其余部分的连接点是通过杂芳基中的氮原子。N-杂芳基如上文关于杂芳基所述任选地被取代。
“C-杂芳基”是指如上所定义的杂芳基，其中杂芳基与分子其余部分的连接点是通过杂芳基中的碳原子。C-杂芳基如上文关于杂芳基所述任选地被取代。
“杂芳基烷基”是指式–Rc-杂芳基的基团，其中Rc是如上定义的亚烷基链。如果杂芳基为含氮杂芳基，则杂芳基任选地在氮原子处连接至烷基。杂芳基烷基的亚烷基链任选地被如上所定义的亚烷基链取代。杂芳基烷基的杂芳基部分任选地被如上所定义的杂芳基取代。
“杂芳基烷氧基”是指通过氧原子键合的式–O-Rc-杂芳基的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂芳基为含氮杂芳基，则杂芳基任选地在氮原子处连接至烷基。杂芳基烷氧基的亚烷基链任选地被如上所定义的亚烷基链取代。杂芳基烷氧基的杂芳基部分任选地被如上所定义的杂芳基取代。
在一些实施方案中，本文公开的化合物含有一个或多个不对称中心，因此产生对映异构体、非对映异构体和其他立体异构形式，其根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-。除非另有说明，本文公开的化合物的所有立体异构形式都被本公开考虑。当本文所述的化合物含有烯烃双键时，并且除非另外指明，否则本公开旨在包括E和Z几何异构体(例如，顺式或反式)。同样，所有可能的异构体以及它们的外消旋和光学纯形式以及所有互变异构形式也包括在内。术语“几何异构体”是指烯烃双键的E或Z几何异构体(例如，顺式或反式)。术语“位置异构体”是指围绕中心环的结构异构体，例如围绕苯环的邻位、间位和对位异构体。
“互变异构体”是指其中质子可以从分子的一个原子移动到同一分子的另一个原子的分子。在某些实施方案中，本文提供的化合物作为互变异构体存在。在可能互变异构化的情况下，将存在互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比例取决于若干因素，包括物理状态、温度、溶剂和pH。互变异构平衡的一些实例包括：
Figure BDA0004113375550000161
在一些实施方案中，本文公开的化合物以不同的富集同位素形式使用，例如富集2H、3H、11C、13C和/或14C的含量。在一个具体实施方案中，化合物在至少一个位置被氘化。此类氘化形式可通过美国专利第5,846,514号和第6,334,997号中所述的方法制备。如美国专利第5,846,514号和第6,334,997号中所述，氘化可改善代谢稳定性和/或功效，从而增加药物作用的持续时间。
除非另有说明，否则本文所述的结构旨在包括区别仅在于存在一个或多个同位素富集原子的化合物。例如，除了氢被氘或氚替代或碳被13C-或14C-富集的碳替代之外具有本发明结构的化合物在本公开的范围内。
本公开的化合物任选地在构成此类化合物的一个或多个原子处含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可以用同位素标记，例如氘(2H)、氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)。用2H、11C、13C、14C、15C、12N、13N、15N、16N、16O、17O、14F、15F、16F、17F、18F、33S、34S、35S、36S、35Cl、37Cl、79Br、81Br、125I的同位素取代都是预期的。在一些实施方案中，预期18F的同位素取代。本发明化合物的所有同位素变体，无论是否是放射性的，都包括在本发明的范围内。
在某些实施方案中，本文公开的化合物的一些或全部1H原子被2H原子替代。含氘化合物的合成方法是本领域已知的，并且仅作为非限制性实例包括以下合成方法。
氘取代的化合物使用各种方法合成，例如描述于：Dean,Dennis C.编著RecentAdvances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compounds for DrugDiscovery and Development.[Curr.,Pharm.Des.,2000；6(10)]2000,第110页；GeorgeW.；Varma,Rajender S.The Synthesis of Radiolabeled Compounds viaOrganometallic Intermediates,Tetrahedron,1989,45(21),6601-21；以及Evans,E.Anthony.Synthesis of radiolabeled compounds,J.Radioanal.Chem.,1981,64(1-2),9-32。
氘化原料容易获得，并且进行本文所述的合成方法以提供含氘化合物的合成。大量含氘试剂和结构单元可商购自化学供应商，例如Aldrich Chemical Co.。
适用于亲核取代反应的氘转移试剂如碘甲烷-d3(CD3I)是容易获得的，并且可以用于在亲核取代反应条件下将氘取代的碳原子转移至反应底物。CD3I的使用仅作为实例在以下反应方案中说明。
Figure BDA0004113375550000181
氘转移试剂如氘化铝锂(LiAlD4)用于在还原条件下将氘转移至反应底物。在下面的反应方案中仅以举例的方式说明了LiAlD4的使用。
Figure BDA0004113375550000182
使用氘气和钯催化剂来还原不饱和碳-碳键并进行芳基碳-卤素键的还原取代，如以下反应方案中仅以举例的方式所示。
Figure BDA0004113375550000183
在一个实施方案中，本文公开的化合物含有1个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有2个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有3个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有4个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有5个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有6个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有多于6个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物完全被氘原子取代并且不包含不可交换的1H氢原子。在一个实施方案中，氘掺入水平通过其中使用氘代合成结构单元作为原料的合成方法测定。
“药学上可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐两者。本文所述的任何一种成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂化合物的药学上可接受的盐旨在涵盖任何和所有药学上合适的盐形式。本文所述的化合物的优选的药学上可接受的盐是药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的碱加成盐。
“药学上可接受的酸加成盐”是指保留游离碱的生物有效性和性质的那些盐，其不是生物学上或其他方面不期望的，并且其与无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢碘酸、氢氟酸、亚磷酸等形成。还包括与有机酸形成的盐，所述有机酸例如脂肪族单羧酸和脂肪族二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸，链烷二酸、芳族酸、脂肪族磺酸和芳族磺酸等，包括例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。因此，示例性的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、辛酸盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。还考虑了氨基酸的盐，例如精氨酸盐、葡糖酸盐和半乳糖醛酸盐(参见例如Berge S.M.等人,"Pharmaceutical Salts,"Journal of Pharmaceutical Science,66:1-19(1997))。在一些实施方案中，根据本领域技术人员熟悉的方法和技术，通过使游离碱形式与足量的所需酸接触以产生盐来制备碱性化合物的酸加成盐。
“药学上可接受的碱加成盐”是指保留游离酸的生物有效性和性质的那些盐，其不是生物学上或其他方面不期望的。这些盐通过向游离酸中加入无机碱或有机碱来制备。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐与金属或胺如碱金属和碱土金属或有机胺形成。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、N,N-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、海巴胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、乙二苯胺、N-甲基葡糖胺、葡糖胺(glucosamine)、甲基葡糖胺(methylglucamine)、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。参见Berge等人，同上。
“药学上可接受的溶剂化物”是指一种呈溶剂加成形式的物质组合物。在一些实施方案中，溶剂化物含有化学计量或非化学计量的量的溶剂，并且在用药学上可接受的溶剂如水、乙醇等制备的过程中形成。当溶剂是水时形成水合物或者当溶剂是醇时形成醇化物。本文所述的化合物的溶剂化物在本文所述的方法中方便地制备或形成。本文提供的化合物以非溶剂化形式以及溶剂化形式任意存在。
术语“对象”或“患者”包括哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物类的任何成员：人、非人灵长类如黑猩猩和其他猿类和猴类；农场动物如牛、马、绵羊、山羊、猪；家畜如兔、狗和猫；实验室动物包括啮齿动物如大鼠、小鼠和豚鼠等。在一个实施方案中，哺乳动物是人。
如本文所用，“治疗(treatment、treating)”或“减轻(palliating)”或“改善(ameliorating)”可互换使用。这些术语是指获得有益或期望结果的方法，包括但不限于治疗益处和/或预防益处。“治疗益处”是指根除或改善所治疗的潜在病症。此外，通过根除或改善与潜在病症相关的一种或多种生理症状实现治疗益处，使得在患者中观察到改善，尽管患者仍然患有潜在病症。在一些实施方案中，为了预防益处，将组合物施用于处于发展特定疾病的风险中的患者，或施用于报告疾病的一种或多种生理症状的患者，即使尚未作出该疾病的诊断。
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)是受体酪氨酸激酶(RTK)的亚家族，其结合成纤维细胞生长因子蛋白家族的成员。FGFR基因通常含有18个外显子，具有相似的外显子-内含子结构，并且随机分布在整个基因组中，与FGF基因位置没有明显的连接。FGFR在整个发育和成年期以组织特异性方式差异表达，并且包含细胞外配体结合结构域、单跨膜结构域和分裂的细胞内激酶结构域。胞外区含有2-3个参与FGF结合的免疫球蛋白(Ig)样结构域。这些Ig样结构域调节配体亲和力和配体特异性。胞内区具有负责FGFR酪氨酸激酶活性的功能结构域，以及在受体分子的蛋白结合和磷酸化或自磷酸化中起作用的额外位点。Porta等人(Criticial Reviews in Oncology/Hematology 113(2017)256-67)以及Babina和Turner(Nature Review-Cancer 2017doi:10.1038/nrc.2017.8)在科学文献中综述了成纤维细胞生长因子受体药理学。
FGFR家族包含四个家族成员-FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4，但这四个成员能够通过初级转录物的可变剪接产生多种受体同种型。最近基于与FGFR结合配体(称为成纤维细胞生长因子(FGF))的相互作用发现了缺乏FGF信号酪氨酸激酶结构域的密切相关的受体FGFR5(也称为FGFRL1)(Trueb B.Biology of FGFRL1,the fifth fibroblast growthfactor receptor.Cell Mol Life Sci.2011；68(6):951–964)。总之，FGFR信号传导与多个细胞级联的活化和应答(如细胞生长、增殖、分化和存活)相关(Thisse B等人，Functionsand regulations of fibroblast growth factor signaling during embryonicdevelopment.Dev Biol.2005；287(2):390–402；Wesche等人，Fibroblast growth factorsand their receptors in cancer.Biochem J.2011；437(2):199–213；Haugsten EM等人，Roles of fibroblast growth factor receptors in carcinogenesis.Mol CancerRes.2010；8(11):1439-1452)。
许多人类病理学病症与FGFR信号传导的失调相关。异常的FGFR信号传导主要归因于几种潜在的机制，包括基因扩增、功能获得性编码突变、基因融合、单核苷酸多态性(SNP)、配体可用性和FGF介导的信号传导中受损的终止程序(Tiong KH等人，Functionalroles of fibroblast growth factor receptors(FGFRs)signaling in humancancers.Apoptosis.2013；18(12):1447-68)。此外，由于FGFR经受选择性剪接，在不同情况下产生可促进或抑制肿瘤发生的多种同种型，因此增加了另一层复杂性。
FGFR融合体
人类癌症中的FGFR融合体分为由血液恶性肿瘤中的染色体易位引起的1型融合体和由实体瘤中的染色体重排引起的2型融合体(FGFR inhibitors:Effects on cancercells,tumor microenvironment and whole-body homeostasis(Review).Int J MolMed.2016；38(1):3-15)。通过从用于异常底物的配体依赖性二聚化和/或募集的融合配偶体获得蛋白-蛋白相互作用模块，两种类型的FGFR融合蛋白被赋予致癌潜能。人FGFR融合蛋白通常由两个主要片段组成—前段是来自配偶体基因的二聚化结构域，后段是酪氨酸激酶结构域(Garcia-Closas M等人，Heterogeneity of breast cancer associations withfive susceptibility loci by clinical and pathological characteristics.PLoSGenet.2008；4(4):e1000054)。与野生型受体不同，突变体FGFR在细胞内表达并保留在细胞溶质中，因此它们逃脱典型的受体降解过程，进一步延长活化信号。
成纤维细胞生长因子(FGF)/FGF受体(FGFR)网络的失调在肿瘤中频繁发生，导致FGF/FGFR靶向疗法的发展成为若干基础、临床前和临床研究的焦点。
杂芳族FGFR抑制性化合物
在一个方面，本文提供了一种杂芳族FGFR抑制性化合物。
一个实施方案提供了一种具有式(I)的结构的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：
Figure BDA0004113375550000221
其中，
X为C-H或N；
Y为C-H或N；
Z选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0004113375550000231
t为1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、氟、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基烷基；
R4为任选取代的含氮的9或10原子杂芳基；
R选自氢、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基、任选取代的C3-C7杂环基烷基、任选取代的C2-C7烯基、-CO2R5、-CONHR5或–CON(R5)2；并且
R5各自独立地选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基或任选取代的C3-C7杂环基烷基。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H且Y为C-H。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H且Y为N。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N且Y为C-H。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N且Y为N。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为
Figure BDA0004113375550000232
另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R3为氢或氟。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2和R3为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C4烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C2烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的烷基被任选取代的氨基取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的氨基是二甲基氨基。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自任选取代的苯并咪唑，任选取代的1H-吲唑、任选取代的2H-吲唑、任选取代的苯并三唑、任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自喹啉、喹喔啉、吡唑并[1,5-a]嘧啶、咪唑并[1,2-a]吡啶、吡唑并[1,5-a]吡啶、咪唑并[1,2-a]嘧啶、咪唑并[1,2-b]哒嗪或吡唑并[1,5-a]吡啶。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并咪唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的1H-吲唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的2H-吲唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的含氮的9或10原子杂芳基任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的苯并咪唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的1H-吲唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的2H-吲唑被烷基、环烷基或卤素任选取代。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C1-C6烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CO2R5。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CONHR5或–CON(R5)2。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的C1-C6烷基为被C1-C3烷氧基取代的C1-C3烷基。
一个实施方案提供一种具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：
Figure BDA0004113375550000251
其中，
X为C-H或N；
Z选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0004113375550000261
t为1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、氟、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基烷基；
R4为任选取代的含氮的9或10原子杂芳基；
R选自氢、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基、任选取代的C3-C7杂环基烷基、任选取代的C2-C7烯基、-CO2R5、-CONHR5或–CON(R5)2；并且
R5各自独立地选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基或任选取代的C3-C7杂环基烷基。
一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H。
一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N。
一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为
Figure BDA0004113375550000262
另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R3为氢或氟。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2和R3为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C4烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C2烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的烷基被任选取代的氨基取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的氨基是二甲基氨基。
一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自任选取代的苯并咪唑、任选取代的1H-吲唑、任选取代的2H-吲唑、任选取代的苯并三唑、任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自喹啉、喹喔啉、吡唑并[1,5-a]嘧啶、咪唑并[1,2-a]吡啶、吡唑并[1,5-a]吡啶、咪唑并[1,2-a]嘧啶、咪唑并[1,2-b]哒嗪或吡唑并[1,5-a]吡啶。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并咪唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的1H-吲唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的2H-吲唑。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的含氮的9或10原子杂芳基任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的苯并咪唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的1H-吲唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的2H-吲唑被烷基、环烷基或卤素任选取代。
一个实施方案提供了一种式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为氢。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C1-C6烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基烷基。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CO2R5。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CONHR5或–CON(R5)2。另一个实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的C1-C6烷基为被C1-C3烷氧基取代的C1-C3烷基。
在一些实施方案中，本文公开的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物具有表1中提供的结构。
表1
Figure BDA0004113375550000291
Figure BDA0004113375550000301
Figure BDA0004113375550000311
Figure BDA0004113375550000321
Figure BDA0004113375550000331
Figure BDA0004113375550000341
Figure BDA0004113375550000351
Figure BDA0004113375550000361
Figure BDA0004113375550000371
Figure BDA0004113375550000381
Figure BDA0004113375550000391
Figure BDA0004113375550000401
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Figure BDA0004113375550000431
Figure BDA0004113375550000441
Figure BDA0004113375550000451
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Figure BDA0004113375550000911
Figure BDA0004113375550000921
Figure BDA0004113375550000931
Figure BDA0004113375550000941
Figure BDA0004113375550000951
Figure BDA0004113375550000961
化合物的制备
本文所述的反应中使用的化合物根据本领域技术人员已知的有机合成技术，由可商购的化学品和/或从化学文献中描述的化合物开始制备。“市售化学品”获自标准商业来源，包括Acros Organics(Pittsburgh,PA)、Aldrich Chemical(Milwaukee,WI，包括SigmaChemical and Fluka)、Apin Chemicals Ltd.(Milton Park，UK)、Avocado Research(Lancashire，U.K.)、BDH Inc.(Toronto，Canada)、Bionet(Cornwall，U.K.)、ChemserviceInc.(West Chester，PA)、Crescent Chemical Co.(Hauppauge，NY)、Eastman OrganicChemicals、Eastman Kodak Company(Rochester，NY)、Fisher Scientific Co.(Pittsburgh，PA)、Fisons Chemicals(Leicestershire，UK)、Frontier Scientific(Logan，UT)、ICN Biomedicals,Inc.(Costa Mesa，CA)、Key Organics(Cornwall，U.K.)、Lancaster Synthesis(Windham，NH)、Maybridge Chemical Co.Ltd.(Cornwall，U.K.)、Parish Chemical Co.(Orem，UT)、Pfaltz&Bauer,Inc.(Waterbury，CN)、Polyorganix(Houston，TX)、Pierce Chemical Co.(Rockford，IL)、Riedel de Haen AG(Hanover，Germany)、Spectrum Quality Product,Inc.(New Brunswick，NJ)、TCI America(Portland,OR)、Trans World Chemicals,Inc.(Rockville，MD)和Wako Chemicals USA,Inc.(Richmond，VA)。
详述可用于制备本文所述化合物的反应物的合成或提供对描述所述制备的文章的参考的合适参考书和论文包括例如，"Synthetic Organic Chemistry",John Wiley&Sons,Inc.,New York；S.R.Sandler等人，"Organic Functional Group Preparations,"第2版，Academic Press,New York,1983；H.O.House,"Modern Synthetic Reactions",第2版，W.A.Benjamin,Inc.Menlo Park,Calif.1972；T.L.Gilchrist,"HeterocyclicChemistry",第2版,John Wiley&Sons,New York,1992；J.March,"Advanced OrganicChemistry:Reactions,Mechanisms and Structure",第4版，Wiley-Interscience,NewYork,1992。详述可用于制备本文所述的化合物的反应物的合成或提供对描述所述制备的文章的参考的其他合适的参考书和论文包括例如，Fuhrhop,J.和henzlin G."OrganicSynthesis:Concepts,Methods,Starting Materials",第二次修订和扩大版(1994)JohnWiley&Sons ISBN:3-527-29074-5；Hoffman,R.V."Organic Chemistry,An IntermediateText"(1996)Oxford University Press,ISBN 0-19-509618-5；Larock,R.C."Comprehensive Organic Transformations:A Guide to Functional GroupPreparations"第2版(1999)Wiley-VCH,ISBN:0-471-19031-4；March,J."AdvancedOrganic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure"第4版(1992)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-60180-2；Otera,J.(editor)"Modern Carbonyl Chemistry"(2000)Wiley-VCH,ISBN:3-527-29871-1；Patai,S."Patai's 1992Guide to the Chemistry ofFunctional Groups"(1992)Interscience ISBN:0-471-93022-9；Solomons,T.W.G."Organic Chemistry"第7版(2000)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-19095-0；Stowell,J.C.,"Intermediate Organic Chemistry"第2版(1993)Wiley-Interscience,ISBN:0-471-57456-2；"Industrial Organic Chemicals:Starting Materials andIntermediates:An Ullmann's Encyclopedia"(1999)John Wiley&Sons,ISBN:3-527-29645-X，共8卷；"Organic Reactions"(1942-2000)John Wiley&Sons，共55卷；以及"Chemistry of Functional Groups"John Wiley&Sons，共73卷。
具体的和类似的反应物任选地通过由美国化学学会的化学文摘服务处制备的已知化学品的索引来鉴定，其可在大多数公共和大学图书馆以及通过在线数据库(联系华盛顿特区美国化学学会以获得更多细节)获得。目录中已知但不可商购的化学品任选地由定制化学合成机构制备，其中许多标准化学品供应机构(例如，上文列出的那些)提供定制合成服务。用于本文所述化合物的药用盐的制备和选择的参考文献是P.H.Stahl&C.G.Wermuth"Handbook of Pharmaceutical Salts",Verlag Helvetica Chimica Acta,Zurich,2002。
药物组合物
在某些实施方案中，本文所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物作为纯化学品施用。在其他实施方案中，本文所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物与药学上合适的或可接受的载体(本文也称为药学上合适的(或可接受的)赋形剂、生理学上合适的(或可接受的)赋形剂或生理学上合适的(或可接受的)载体)组合，该药学上合适的或可接受的载体基于例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro,第21版MackPub.Co.,Easton,PA (2005))中所述的所选择的施用途径和标准药学实践而选择。
本文提供了包含至少一种本文所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物以及一种或多种药学上可接受的载体的药物组合物。如果载体与组合物的其他成分相容并且对组合物的接受者(即对象或患者)无害，则载体(或赋形剂)是可接受的或合适的。
一个实施方案提供了一种药物组合物，其包含药学上可接受的赋形剂和式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
一个实施方案提供了一种制备药物组合物的方法，其包括将式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的载体混合。
在某些实施方案中，如式(I)所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物是基本上纯的，因为其含有小于约5％、或小于约1％、或小于约0.1％的其他有机小分子，例如在合成方法的一个或多个步骤中产生的未反应的中间体或合成副产物。
一个实施方案提供了一种药物组合物，其包含药学上可接受的赋形剂和式(II)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
一个实施方案提供了一种制备药物组合物的方法，其包括将式(II)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的载体混合。
在某些实施方案中，如式(II)所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物是基本上纯的，因为其含有小于约5％、或小于约1％、或小于约0.1％的其他有机小分子，例如在合成方法的一个或多个步骤中产生的未反应的中间体或合成副产物。
合适的口服剂型包括例如硬或软明胶、甲基纤维素或其他容易溶解在消化道中的合适材料的片剂、丸剂、小药囊或胶囊。在一些实施方案中，使用合适的无毒固体载体，其包括例如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。(参见，例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro,第21版Mack Pub.Co.,Easton,PA(2005))中所述的所选择的施用途径和标准药学实践而选择。
在一些实施方案中，将式(I)所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物配制用于通过注射施用。在一些情况下，注射制剂是水性制剂。在一些情况下，注射制剂是非水性制剂。在一些情况下，注射剂制是油基制剂，例如芝麻油等。
在一些实施方案中，将式(II)所述的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物配制用于通过注射施用。在一些情况下，注射制剂是水性制剂。在一些情况下，注射制剂是非水性制剂。在一些情况下，注射剂制是油基制剂，例如芝麻油等。
包含至少一种如本文所述的杂芳族FGFR激酶抑制化合物的组合物的剂量取决于受试者或患者(例如，人)的病状而不同。在一些实施方案中，这些因素包括一般健康状况、年龄和其他因素。
药物组合物以适于待治疗(或预防)的疾病的方式施用。合适的剂量和合适的施用持续时间和频率将由诸如患者的状况、患者疾病的类型和严重性、活性成分的具体形式和施用方法等因素决定。通常，合适的剂量和治疗方案提供了足以提供治疗和/或预防益处(例如，改善的临床结果，例如更频繁的完全或部分缓解，或更长的无病和/或总体存活，或减轻症状严重性)的量的组合物。最佳剂量通常使用实验模型和/或临床试验来确定。最佳剂量取决于患者的身体质量、体重或血容量。
口服剂量通常为约1.0mg至约1000mg，每天一至四次或更多次。
治疗方法
一个实施方案提供了一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗人或动物体的方法中。
一个实施方案提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗癌症或肿瘤性疾病的方法中。
一个实施方案提供了一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗癌症或肿瘤性疾病的药物中的用途。
在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，其包括向患者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，其包括向患者施用包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一个实施方案提供了式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗人或动物体的方法中。
一个实施方案提供了式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗癌症或肿瘤性疾病的方法中。
一个实施方案提供了式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗癌症或肿瘤性疾病的药物中的用途。
在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，其包括向患者施用式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，其包括向患者施用包含式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
本文提供了其中口服施用药物组合物的方法。本文提供了其中通过注射施用药物组合物的方法。
根据本公开，其他实施方案和使用对于本领域技术人员来说是显而易见的。提供以下实施例仅作为各种实施方案的说明，并且不应解释为以任何方式限制本发明。
实施例
I.化学合成
在一些实施方案中，本文公开的杂芳族FGFR激酶抑制性化合物根据以下实施例合成。如下文和本发明的整个描述中所用，除非另外指明，否则以下缩写应理解为具有以下含义：
℃ 摄氏度
δH 四甲基硅烷低磁场的化学位移(百万分率)
DCM 二氯甲烷(CH2Cl2)
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
EA 乙酸乙酯
ESI 电喷雾电离
Et 乙基
g 克
h 小时
HPLC 高效液相色谱
Hz 赫兹
J 偶合常数(NMR光谱测定法中)
LCMS 液相色谱质谱
μ 微
m 多重峰(光谱)；米；毫
M 摩尔
M+ 母体分子的离子
Me 甲基
MHz 兆赫
min 分钟
mol 摩尔；分子量(以分子量计)
mL 毫升
MS 质谱
nm 纳米
NMR 核磁共振
pH 氢的电势；水溶液的酸度或碱度的量度
PE 石油醚
RT 室温
s 单峰(光谱)
t 三重峰(光谱)
T 温度
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
中间体1：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001021
步骤1：(2R,4S)-4-[4-氯-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃和氩气气氛下向(2R,4R)-4-羟基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40.00g，172.94mmol)、4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(45.92g，164.29mmol)和PPh3(54.43g，207.53mmol)的THF(500.00mL)的搅拌溶液中滴加入DIAD(41.14mL，203.46mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在室温下搅拌2h。将所得混合物在25℃真空浓缩60min。将残余物用EA(2000mL)稀释。将所得混合物用水(3×1000mL)和盐水(1000mL)洗涤。有机层经无水Na2SO4(500g)干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用EA的PE溶液(10-45％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的(2R,4S)-4-[4-氯-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80g，94％)。C17H22ClIN4O3[M+H]+的MS ESI计算值493.04，实测值493.10。
步骤2：(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向钢密封管中加入(2R,4S)-4-[4-氯-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40.00g，81.18mmol)、二噁烷(100mL)和NH3·H2O(300mL)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将所得混合物在25℃减压浓缩60min至干燥。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用MeOH的DCM溶液(0-4.5％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(32.3g，84％)。C17H24IN5N3[M+H]+的MS ESI计算值474.09；实测值474.25。
步骤3：5-碘-7-[(3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
将(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.79g，3.78mmol)的2M氯化氢溶液在EA(20.00mL，40.00mmol)和DCM(20.00mL)中的混合物在氩气气氛下于室温搅拌16h。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相柱色谱法纯化，条件如下：柱：AQ硅胶；流动相，MeCN水溶液(10mmol/L的NH4HCO3)，25min内10％至35％梯度。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的5-碘-7-[(3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(0.90g，64％)。C12H16IN5O[M+H]+的MS ESI计算值374.04，实测值374.05。
步骤4：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
在0℃和氩气气氛下向5-碘-7-[(3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(0.80g，2.14mmol)和DIEA(1.52mL，11.76mmol)的DCM(12.00mL)搅拌溶液中滴加入丙烯酰氯(0.62mL，1.93mmol)。将反应混合物在0℃和氩气气氛下搅拌10min。在0℃下用水(30mL)淬灭反应。将所得混合物用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用EA的PE溶液(10-50％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.78g，85％)。C15H18IN5O2[M+H]+的MS ESI计算值428.05；实测值428.10。
中间体2：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001051
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃和氮气气氛下向3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(5.00g，19.16mmol)和(2R,4R)-4-羟基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6.65g，28.75mmol)的THF(500mL)搅拌溶液中加入PPh3(7.54g，28.75mmol)和DIAD(5.81g，28.75mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h并在室温搅拌3h。将所得混合物减压浓缩。将残余物用EA(100mL)稀释。将所得混合物用水(3×70mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用MeOH的DCM溶液(0-6％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6.8g，74％)。C16H23IN6O3[M+H]+的MS ESI计算值475.09，实测值475.15。
步骤2：3-碘-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.50g，3.16mmol)的DCM(17.00mL)搅拌溶液中滴加入2M氯化氢的EA溶液(35mL)。将反应混合物在室温和氮气气氛下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。过滤后，将滤液减压浓缩，得到呈灰白色固体状的3-碘-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(1.3g，100％)。C11H15IN6O[M+H]+的MS ESI计算值375.04，实测值375.08。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下向3-碘-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.25g，2.80mmol)的DCM(28.00mL)搅拌溶液中滴加入丙烯酰氯(0.23g，2.57mmol)和DIEA(1.95mL，11.20mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5min。将所得混合物用水(30mL)稀释。将所得混合物用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过反相柱色谱法纯化，用43％ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(1.07g，89％)。C14H17IN6O2[M+H]+的MS ESI计算值429.05，实测值429.10。
中间体3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001071
步骤1：4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶
向4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5.00g，32.56mmol)的DMF(45mL)溶液中加入NIS(14.65g，65.12mmol)。将反应混合物在室温和氮气气氛下搅拌2天。将所得混合物在0℃用水(150mL)稀释。通过过滤收集沉淀的固体，用饱和Na2S2O3溶液洗涤，干燥，得到呈灰白色固体状的4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(9.4g，96％)，其未经进一步纯化直接用于下一步骤。C6H3ClIN3[M+H]+的MS ESI计算值：279.91，281.90；实测值：279.95，281.95。
步骤2：N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
在室温下向4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(6.10g，21.83mmol)的1-丁醇(120mL)搅拌混合物中加入1-(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(10.95g，65.48mmol)。将反应混合物在110℃和氮气气氛下搅拌16h。将反应混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化，用丙酮/CHCl3(0-14％)洗脱。将含有所需产物的级分浓缩，得到呈灰白色固体状的N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(3.47g，38％)。C15H15IN4O2[M+H]+的MS ESI计算值411.02，实测值411.05。
步骤3：3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
将N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(3.47g，8.46mmol)的TFA(15mL)混合物在50℃和氮气气氛下搅拌2h。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用饱和NaHCO3(水溶液)碱化至pH8，并将所得混合物用EA(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×80mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用MeOH/CHCl3(0-12％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(2g，90％)。
步骤4：(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(2.50g，9.61mmol)和Cs2CO3(6.26g，19.21mmol)的DMF(50mL)混合物中加入(2R,4R)-4-(甲磺酰氧基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.07g，12.50mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌16h。将所得混合物冷却至室温并用水(50mL)稀释。将所得混合物用EA(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用MeOH的DCM溶液(0-8％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色油状的(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.92g，75％)。C17H24IN5O3[M+H]+的MS ESI计算值474.09；实测值474.20。
步骤5：3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
在0℃和氮气气氛下向(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.92g，6.24mmol)的DCM(20.00mL)搅拌溶液中滴加入4MHCl的EA溶液(30.00mL)。将反应混合物在环境温度搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相，ACN水溶液(NH4HCO3 1g/L)，30min内10％至35％梯度；检测器，UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(2.2g，81％)。C12H16IN5O[M+H]+的MS ESI计算值374.04；实测值374.05。
步骤6：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下向3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(1.00g，2.68mmol)的DCM(3mL)搅拌溶液中滴加入丙烯酰氯(21.83mg，0.241mmol)和DIEA(1.87mL，10.736mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌15min。将所得混合物用水(20mL)稀释并用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×40mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用MeOH的DCM溶液(0-8％)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.99g，86％)。C15H18IN5O2[M+H]+的MS ESI计算值428.05；实测值428.10。
中间体4：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550001091
步骤1：(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲基二酯
在0℃下向(2R,4R)-4-羟基吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲基二酯(100.0g，408.2mmol)和咪唑(39.0g，573.5mmol)的DCM(1.5L)混合物中加入TBDPSCl(123.0g，448.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(1.5L)淬灭并用DCM(1.0L)萃取两次。将合并的有机层用盐水(1.5L)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物与PE(1.5L)一起研磨，得到呈白色固体状的(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲基二酯(120.0g，60％)。[M+H]计算值：484.2；实测值，484.2。
步骤2：(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃下向(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲基二酯(10.0g，20.7mmol)的THF(150mL)混合物中加入2M LiBH4的THF(55mL，110mmol)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(1.0L)淬灭并用EA(1.0L)萃取两次。将合并的有机层用盐水(1.0L)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(PE/EA＝4/1)，得到呈黄色油状的(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9.6g，100％)。[M+H]计算值：456.2；实测值，456.2。
步骤3：(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9.6g，20.7mmol)的THF(100mL)混合物中加入NaH(1.3g，60％，32.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后加入CH3I(6.0g，42.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌12h。将反应混合物用水(1.0L)淬灭并用EA(1.0L)萃取两次。将合并的有机层用盐水(1.0L)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(PE/EA ＝4/1)，得到呈白色固体状的(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7.8g，81％)。[M+H]计算值：470.3；实测值，470.3。
步骤4：(2R,4R)-4-羟基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20.0g，42.6mmol)的THF(200mL)混合物中加入1M TBAF的THF溶液(64.0mL，64.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。将反应混合物用水(1.0L)淬灭并用EA(1.0L)萃取两次。将合并的有机层用盐水(1.0L)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(PE/EA ＝2/1)，得到呈无色油状的(2R,4R)-4-羟基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.0g，50％)。
步骤5：(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃下向(2R,4R)-4-羟基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，14.7mmol)和TEA(4.4g，44.1mmol)的DCM(50mL)混合物中加入MsCl(3.4g，29.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。将反应混合物用冰水(100mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油状的粗产物(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，100％，粗产物)。
步骤6：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(4.8g，14.7mmol)和粗产物(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，14.7mmol)的DMF(50mL)溶液中加入K2CO3(6.0g，34.9mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2h。将反应混合物用冰水(100mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝30/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.7g，53％)。[M+H]计算值：475.1；实测值，475.1。
中间体5：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550001121
步骤1：4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶
将4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(1.5g，9.8mmol)、1,4-二噁烷(25mL)、氢氧化钾(2.0g，35.7mmol)和碘(4.9g，19.5mmol)的溶液在75℃下填充4h。将反应混合物用饱和硫代硫酸钠水溶液五水合物(30mL)淬灭并通过过滤收集固体，得到呈黄色固体状的4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(2.5g，92％)。[M+H]计算值：280.0；实测值，280.0
步骤2：N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
向4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(8.5g，30.0mmol)的DMSO(100mL)溶液中加入(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(15.3g，90.0mmol)。将混合物在120℃加热3h。将混合物冷却至室温，用EA(200mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油状的N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(8.6g，70％)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。[M+H]计算值：411.0；实测值，411.0
步骤3：3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
将N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(8.6g，21.0mmol)的TFA(50mL)混合物加热至50℃持续3h。除去溶剂后，将残余物用碳酸氢钠水溶液碱化至pH＝8并用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下蒸发。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝3/1)纯化，得到呈白色固体状的3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(4.3g，60％)。[M+H]计算值：260.7；实测值，260.7
步骤4：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(3.8g，14.7mmol)和粗产物(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，14.7mmol)的DMF(50mL)溶液中加入K2CO3(6.0g，34.9mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，用冰水(100mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝30/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，50％)。[M+H]计算值：474.1；实测值，474.1。
中间体6：(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550001131
步骤1：4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
在0℃下向4-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(10.0g，65.6mmol)的DMF(50mL)溶液中加入NIS(22.2g，98.3mmol)，然后将混合物温热至室温并搅拌5h。将反应混合物用饱和硫代硫酸钠水溶液五水合物(50mL)淬灭并通过过滤收集固体，得到呈白色固体状的4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(16.0g，87％)。[M+H]计算值：278.9；实测值，278.9
步骤2：(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下向4-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(5.0g，18.0mmol)和粗产物(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7.1g，23.0mmol)的DMF(50mL)溶液中加入Cs2CO3(11.7g，35.8mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温，用冰水(100mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝30/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.5g，51％)。[M+H]计算值：492.1；实测值，492.1。
实施例1：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001141
步骤1：2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
向5-溴-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，9.5mmol)和CuI(200mg，1.05mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(532mg，0.76mmol)的THF(60mL)和TEA(30mL)溶液中加入乙炔基三甲基硅烷(5.6g，56.9mmol)。将反应混合物80℃和氮气气氛下搅拌过夜。冷却至室温后，除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速柱色谱法(PE/EA ＝1/3)纯化，得到呈黄色固体状的2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(400mg，18％)。[M+H]计算值：229.1；实测值，229.1。
步骤2：5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
向2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(400mg，1.75mmol)的THF(20mL)溶液中加入1M TBAF的THF溶液(2.40mL，2.40mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min。除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速柱色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(210mg，77％)。[M+H]计算值：157.1；实测值，157.1。
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(303mg，0.64mmol)、5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(100mg，0.64mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(44mg，0.04mmol)、PPh3(10mg，0.04mmol)和DIEA(248mg，1.92mmol)，并在80℃下搅拌10h。随后冷却至室温。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速柱色谱法(100％EA)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(160mg，50％)。[M+H]计算值：503.2；实测值，503.2。
步骤4：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(160mg，0.32mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(128mg，100％)。[M+H]计算值：403.2；实测值，403.2
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(128mg，0.32mmol)和DIEA(124mg，0.96mmol)的DCM(10mL)和THF(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(29mg，0.32mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(64.8mg，44％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.37-8.34(m,1H),7.76-7.74(m,1H),7.53-7.40(m,2H),6.65-6.39(m,2H),5.95(br s,2H),5.83-5.67(m,2H),4.66-4.53(m,1H),4.22-4.04(m,2H),3.84-3.80(m,1H),3.55-3.51(m,1H),3.40-3.39(m,3H),2.66(s,3H),2.51-2.46(m,2H)。[M+H]计算值：457.2；实测值，457.2
实施例2：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001171
步骤1：(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.1mmol)、5-乙炔基-1H-吲唑(300mg，2.11mmol)和CuI(60mg，0.32mmol)的DMF(20mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(122mg，0.11mmol)、PPh3(28mg，0.11mmol)和DIEA(816mg，6.33mmol)，并在80℃下搅拌过夜。随后冷却至室温。将反应混合物冷却至室温，用水(50mL)稀释并用DCM(50mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法(DCM/MeOH＝10/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，97％)。[M+H]计算值：489.2；实测值，489.2。
步骤2：3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.61mmol)的EA(40mL)溶液中加入HCl/EA(2mL)。将反应混合物在室温搅拌30min。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(250mg，97％)。[M+H]计算值：389.2；实测值，389.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(250mg，0.59mmol)和DIEA(230mg，1.77mmol)的DCM(4mL)和DMA(4mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(53mg，0.59mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将该混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(109.0mg，42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):13.32(s,1H),8.27-8.16(m,3H),7.65-7.60(m,2H),6.78-6.53(m,1H),6.20-6.14(m,1H),5.69-5.62(m,2H),4.59-4.46(m,1H),4.08-3.81(m,2H),3.64-3.47(m,2H),3.33(s,3H),2.67-2.55(m,1H),2.50-2.37(m,1H)。[M+H]计算值：443.2；实测值，443.2。
实施例3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001191
步骤1：5-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑&6-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，7.8mmol)的DMF(30mL)混合物中加入NaH(322mg，8.05mmol，60％wt.)。将反应混合物在0℃下搅拌30min，然后加入CH3I(1.3g，9.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用EA(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝25/1)，得到呈黄色固体状的5-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(270mg，13％)和6-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(370mg，17％)。[M+H]计算值：273.0；实测值，273.0
步骤2：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.0g，10.5mmol)和CuI(190mg，1.00mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(702mg，1.00mmol)的DMF(60mL)混合物中加入乙炔基三甲基硅烷(6.2g，63.0mmol)和TEA(5.3g，52.8mmol)。将反应混合物80℃和在氮气气氛搅拌12h。冷却至室温后，除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/3)纯化，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.5g，54％)。[M+H]计算值：445.2；实测值，445.2。
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.3mmol)的THF(20mL)溶液中加入含1M TBAF的THF(3.0mL，3.0mmol)溶液。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，61％)。[M+H]计算值：373.2；实测值，373.2。
步骤4：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(223mg，0.60mmol)、5-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(136mg，0.50mmol)和CuI(14mg，0.07mmol)的DMF(15mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(29mg，0.03mmol)、PPh3(7mg，0.03mmol)和DIEA(193mg，1.50mmol)，并在80℃下搅拌5h。随后冷却至室温。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，58％)。[M+H]计算值：517.3；实测值，517.3。
步骤5：3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.29mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(121mg，100％)。[M+H]计算值：417.2；实测值，417.2
步骤6：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(121mg，0.29mmol)和DIEA(112mg，0.87mmol)的DCM(20mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(26mg，0.29mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃至室温下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(55.2mg，41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.26(d,J＝2.8Hz,1H),7.93(s,1H),7.57-7.51(m,2H),6.78-6.71(m,1H),6.60-6.53(m,1H),6.19-6.14(m,1H),5.71-5.58(m,2H),4.59-4.46(m,1H),4.11-3.83(m,2H),3.80(s,3H),3.64-3.47(m,2H),3.33(s,3H),2.67-2.55(m,4H),2.38-2.35(m,1H)。[M+H]计算值：471.2；实测值，471.2。
实施例4：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001221
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(262mg，0.72mmol)、6-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(160mg，0.60mmol)和CuI(17mg，0.09mmol)的DMF(15mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(35mg，0.06mmol)、PPh3(8mg，0.06mmol)和DIEA(232mg，1.80mmol)，并在80℃下搅拌5h。随后冷却至室温。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(230mg，58％)。[M+H]计算值：517.3；实测值，517.3。
步骤2：3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(230mg，0.44mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(185mg，100％)。[M+H]计算值：417.2；实测值，417.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(185mg，0.44mmol)和DIEA(170mg，1.32mmol)的DCM(20mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(40mg，0.44mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃至室温下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(82.3mg，40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.27(d,J＝2.4Hz,1H),7.94(s,1H),7.57-7.47(m,2H),6.78-6.53(m,2H),6.19-6.14(m,1H),5.71-5.58(m,2H),4.59-4.48(m,1H),4.11-3.83(m,2H),3.76(s,3H),3.64-3.47(m,2H),3.33(s,3H),2.69-2.50(m,4H),2.39-2.35(m,1H)。[M+H]计算值：471.2；实测值，471.2。
实施例5：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001241
步骤1：(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.54mmol)、5-碘-1H-苯并[d]咪唑(224mg，0.65mmol)和CuI(15mg，0.08mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(31mg，0.03mmol)、PPh3(7mg，0.03mmol)和DIEA(210mg，1.62mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(185mg，71％)。[M+H]计算值：489.2；实测值，489.2。
步骤2：3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.37mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将混合物在室温下搅拌0.5h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(150mg，95％)。[M+H]计算值：389.2；实测值，389.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(150mg，0.35mmol)和DIEA(136mg，1.05mmol)的DCM(1.5mL)和DMA(1.5mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(32mg，0.35mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(54.7mg，35％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.36-8.35(m,1H),8.20-8.13(m,1H),7.94-7.91(m,1H),7.71-7.68(m,1H),7.51-7.50(m,1H),6.60-6.45(m,2H),6.36-6.11(m,1H),5.81-5.73(m,2H),4.68-4.51(m,1H),4.15-4.07(m,1H),3.83-3.82(m,1H),3.54-3.52(m,2H),3.39(s,3H),2.97-2.75(m,1H),2.51-2.49(m,1H)。[M+H]计算值：443.2；实测值，443.2
实施例6：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001261
步骤1：5-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑&6-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向5-碘-1H-苯并[d]咪唑(2.4g，10.0mmol)的DMF(20mL)混合物中加入NaH(480mg，12.0mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h，然后加入CH3I(1.7g，12.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用EA(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈白色固体状的5-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(180mg，7％)和6-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(200mg，8％)。[M+H]计算值：259.0；实测值，259.0
步骤2：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(235mg，0.63mmol)、5-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(163mg，0.63mmol)和CuI(19mg，0.10mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(36mg，0.03mmol)、PPh3(8mg，0.03mmol)和DIEA(244mg，1.89mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，38％)。[M+H]计算值：503.2；实测值，503.2。
步骤3：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.24mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(96mg，100％)。[M+H]计算值：403.2；实测值，403.2
步骤4：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(96mg，0.24mmol)和DIEA(93mg，0.72mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(21mg，0.24mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(26mg，24％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.38-8.36(m,1H),8.06-7.98(m,2H),7.56-7.44(m,2H),6.61-6.39(m,2H),6.15-6.05(m,2H),5.83-5.68(m,2H),4.66-4.48(m,1H),4.13-4.00(m,2H),3.89(s,3H),3.83-3.81(m,1H),3.54-3.52(m,1H),3.40(s,3H),2.96-2.77(m,1H),2.49-2.47(m,1H)。[M+H]计算值：457.2；实测值，457.2
实施例7：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001281
步骤1：(S)-3-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(S)-3-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(330mg，0.77mmol)、5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(100mg，0.64mmol)和CuI(19mg，0.10mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(37mg，0.03mmol)、PPh3(8mg，0.03mmol)和DIEA(244mg，1.89mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(S)-3-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(170mg，58％)。[M+H]计算值：459.2；实测值，459.2。
步骤2：(S)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(S)-3-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(170mg，0.37mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈白色固体状的(S)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(133mg，100％)。[M+H]计算值：359.2；实测值，359.2
步骤3：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向(S)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(133mg，0.37mmol)和DIEA(143mg，1.11mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(33mg，0.37mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将该混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(S)-1-(3-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(31.2mg，21％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.36(d,J＝5.6Hz,1H),7.77(s,1H),7.52-7.42(m,2H),6.57-6.40(m,2H),5.92(brs,2H),5.75-5.53(m,2H),4.11-3.98(m,3H),3.82-3.75(m,1H),2.66-2.49(m,5H)。[M+H]计算值：413.2；实测值，413.2。
实施例8：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(2-甲基-3H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001301
步骤1：2-甲基-5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3H-1,3-苯并二唑
在氮气气氛下向5-溴-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(1.00g，4.74mmol)、CuI(0.18g，0.95mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.33g，0.47mmol)的DMF(20.00mL)搅拌混合物中滴加入三甲基甲硅烷基乙炔(4.02mL，40.90mmol)和TEA(13.17mL，130.16mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在80℃下搅拌24h。将所得混合物用水(100mL)稀释。用EtOAc(3×100mL)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(20:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色固体状的2-甲基-5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3H-1,3-苯并二唑(0.32g，27％)。C13H16N2Si[M+H]+的MS ESI计算值229.11，实测值229.15。
步骤2：5-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑
在0℃和氮气气氛下向2-甲基-5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3H-1,3-苯并二唑(0.27g，1.18mmol)的THF(2.70mL，33.33mmol)搅拌溶液中滴加入1M TBAF的THF(1.77mL，1.77mmol)溶液。将所得混合物在室温和氮气气氛下搅拌16h。将所得混合物用水(30mL)稀释。用EtOAc(3×30mL)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的5-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(0.12g，62％)。C10H8N2[M+H]+的MS ESI计算值157.07，实测值157.15。
步骤3：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(2-甲基-3H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.11g，0.26mmol)、5-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(60.32mg，0.39mmol)、CuI(9.81mg，0.05mmol)和TEA(0.11mL，1.06mmol)的DMF(1.00mL)溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(18.07mg，0.03mmol)。将反应混合物用氮气脱气并在90℃下搅拌2h。将所得混合物用水(20mL)稀释。将所得混合物用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19×250mm 10μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内25B至50B；210/254nm；RT1：5.75。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(2-甲基-3H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(43.2mg，35％)。C25H25N7O2[M+H]+的MS ESI计算值456.21，实测值456.30。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.17-8.16(m,2H),7.77-7.67(m,2H),7.47(d,J＝8.4Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),6.77-6.53(m,2H),6.21-6.15(m,1H),5.73-5.53(m,2H),4.61-4.44(m,1H),4.11-4.07(m,1H),3.85-3.80(m,2H),3.61-3.32(m,8H),2.57-2.50(m,1H),2.36-2.33(m,1H)。
实施例9：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001321
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(235mg，0.63mmol)、6-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(163mg，0.63mmol)和CuI(19mg，0.10mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(36mg，0.03mmol)、PPh3(8mg，0.03mmol)和DIEA(244mg，1.89mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(170mg，54％)。[M+H]计算值：503.2；实测值，503.2。
步骤2：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(170mg，0.34mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(136mg，100％)。[M+H]计算值：403.2；实测值，403.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(136mg，0.34mmol)和DIEA(132mg，1.02mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(30mg，0.34mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将该混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(34.7mg，22％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.39-8.38(m,1H),7.99-7.71(m,3H),7.49(d,J＝7.2Hz,1H),6.62-6.39(m,2H),5.96(br s,2H),5.84-5.67(m,2H),4.66-4.48(m,1H),4.16-4.06(m,2H),3.88(s,3H),3.84-3.82(m,1H),3.55-3.52(m,1H),3.40(s,3H),2.96-2.77(m,1H),2.51-2.48(m,1H)。[M+H]计算值：457.2；实测值，457.2
实施例10：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001341
步骤1：5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d][1,2,3]三唑
向5-溴-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(2.0g，10.1mmol)和CuI(200mg，1.05mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(532mg，0.76mmol)的THF(10mL)和TEA(5mL)溶液中加入乙炔基三甲基硅烷(9.8g，100.1mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌过夜。除去溶剂，得到残余物，将其通过快速色谱法(PE/EA＝3/1)纯化，得到呈白色固体状的5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(800mg，38％)。[M+H]计算值：216.1；实测值，216.1。
步骤2：5-乙炔基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑
向5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(800mg，3.72mmol)的THF(10mL)溶液中加入1M TBAF的THF溶液(3.72mL，3.72mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min。除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝1/1)，得到呈棕色固体状的5-乙炔基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(350mg，66％)。[M+H]计算值：144.1；实测值，144.1。
步骤3：(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(60mg，0.42mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(44mg，0.04mmol)、PPh3(10mg，0.04mmol)和DIEA(248mg，1.92mmol)，并在80℃下搅拌10h。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，48％)。[M+H]计算值：490.2；实测值，490.2。
步骤4：3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
向(2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.20mmol)的EA(10mL)溶液中加入HCl/EA(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。真空浓缩反应混合物，得到呈白色固体状的3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(90mg，100％)。[M+H]计算值：390.2；实测值，390.2
步骤5：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-30℃和氮气气氛下向3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(80mg，0.21mmol)和DIEA(52mg，0.40mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(18mg，0.21mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-30℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(3-((1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(64.8mg，44％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.39-8.35(m,1H),8.16(br s,1H),7.78-7.72(m,1H),7.51-7.42(m,1H),6.62-6.42(m,2H),5.79-5.64(m,2H),4.70-4.55(m,1H),4.27-3.84(m,3H),3.54-3.52(m,2H),3.48(s,3H),2.90-2.70(m,1H),2.53-2.49(m,1H)。[M+H]计算值：444.2；实测值，444.2。
实施例11：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001361
步骤1：(S)-3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在-10℃和氮气气氛下，在1h内向4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(10.1g，36.2mmol)、(R)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(13.6g，72.4mmol)和PPh3(17.1g，65.1mmol)的无水THF(200mL)搅拌溶液中缓慢加入DIAD(10.9g，54.2mmol)。随后将所得反应混合物升温至室温并搅拌过夜。将溶剂蒸发并且将残余物通过快速色谱法(PE/EA＝5/1)纯化，得到呈白色固体状的(S)-3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9.9g，60％)。[M+H]计算值：449.0，实测值：449.0
步骤2：(S)-3-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.0g，11.2mmol)和NH4OH(20mL)的1,4-二噁烷(10mL)溶液在高压釜中在100℃下搅拌过夜。使混合物冷却至室温并真空浓缩。向反应混合物中加入水(30mL)。过滤收集所得固体，真空干燥，得到呈白色固体状的(S)-3-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.5g，73％)。[M+H]计算值：430.1，实测值：430.1
步骤3：(S)-3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(S)-3-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.30mmol)、5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(57mg，0.30mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(17mg，0.02mmol)、PPh3(5mg，0.02mmol)和DIEA(116mg，0.90mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(S)-3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，29％)。[M+H]计算值：458.2；实测值：458.2。
步骤4：(S)-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的TFA盐
向(S)-3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，0.09mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的(S)-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(31mg，100％)。[M+H]计算值：358.2；实测值，358.2
步骤5：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向(S)-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(31mg，0.09mmol)和DIEA(35mg，0.27mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(8mg，0.09mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(S)-1-(3-(4-氨基-5-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(7.3mg，20％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.30(s,1H),7.69(s,1H),7.54-7.52(m,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝10.4Hz,1H),6.51-6.41(m,2H),5.94-5.90(m,2H),5.80-5.72(m,1H),5.50-5.43(m,1H),4.18-3.79(m,4H),2.68(s,3H),2.57-2.36(m,2H)。[M+H]计算值：412.2；实测值，412.2。
实施例12：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001391
步骤1：3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺
将3,5-二氟-2-硝基苯胺(800mg，4.60mmol)和NIS(1.1g，5.10mmol)的AcOH(10mL)混合物在70℃下搅拌3h。然后除去AcOH，加入饱和NaHCO3水溶液(50mL)并用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(PE/EA＝5/1)，得到呈黄色固体状的3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺(1.0g，65％)。
步骤2：3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺
向3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺(800mg，2.67mmol)和CuI(51mg，0.27mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(94mg，0.13mmol)的DMF(20mL)溶液中加入乙炔基三甲基硅烷(523mg，5.34mmol)和TEA(404mg，4.00mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌2h。除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝5/1)纯化，得到呈黄色固体状的3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺(650mg，90％)。[M+H]计算值：271.1；实测值，271.1。
步骤3：3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺
在50℃下向3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺(650mg，2.41mmol)和NH4Cl(1.3g，24.1mmol)的EtOH(20mL)和H2O(10mL)溶液中加入铁(1.3g，24.1mmol)。将混合物在50℃下搅拌3h。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝1/1)，得到呈黄色油状的3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺(270mg，47％)。[M+H]计算值：241.1；实测值，241.1。
步骤4：4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺(270mg，1.13mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入1,1,1-三乙氧基乙烷(219mg，1.35mmol)和ZrCl4(26mg，0.11mmol)。将混合物在室温搅拌2h。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝1/1)，得到呈黄色固体状的4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(160mg，54％)。[M+H]计算值：265.1；实测值，265.1。
步骤5：5-乙炔基-4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑&6-乙炔基-5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(160mg，0.61mmol)的DMF(10mL)溶液中加入NaH(29mg，0.73mmol)。将混合物在0℃下搅拌30min，然后滴加CH3I(103mg，0.73mmol)。将混合物在室温搅拌2h。将混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(100％EA)，得到呈黄色固体状的5-乙炔基-4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(50mg，40％)和6-乙炔基-5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(30mg，24％)。[M+H]计算值：207.1；实测值，207.1。
步骤6：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(60mg，0.29mmol)和CuI(9mg，0.05mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(17mg，0.02mmol)、PPh3(5mg，0.02mmol)和DIEA(116mg，0.92mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，30％)。[M+H]计算值：553.2；实测值，553.2。
步骤7：3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.09mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(3mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(41mg，100％)。[M+H]计算值：453.2；实测值，453.2
步骤8：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(41mg，0.09mmol)和DIEA(35mg，0.27mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(8mg，0.09mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(19.2mg，42％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.42(br s,1H),6.93-6.55(m,1H),6.44-6.40(m,2H),6.28(br s,2H),5.85-5.67(m,2H),4.66-4.50(m,1H),4.20-4.14(m,2H),4.03(d,J＝12.0Hz,1H),3.73(s,3H),3.54-3.51(m,1H),3.40(s,3H),2.95-2.76(m,1H),2.62-2.45(m,4H)。[M+H]计算值：507.2；实测值，507.2
实施例13：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001431
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、6-乙炔基-5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(60mg，0.29mmol)和CuI(9mg，0.05mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(17mg，0.02mmol)、PPh3(5mg，0.02mmol)和DIEA(116mg，0.92mmol)，并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，18％)。[M+H]计算值：553.2；实测值，553.2。
步骤2：3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，0.05mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(3mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(25mg，100％)。[M+H]计算值：453.2；实测值，453.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(25mg，0.06mmol)和DIEA(23mg，0.18mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(5mg，0.06mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(7.6mg，27％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.39(s,1H),7.22(s,1H),6.57-6.41(m,2H),5.83-5.68(m,3H),4.67-4.48(m,1H),4.13-4.05(m,2H),3.94(s,3H),3.80-3.77(m,1H),3.54-3.51(m,1H),3.40(s,3H),2.93-2.76(m,1H),2.61(s,3H),2.50-2.45(m,1H)。[M+H]计算值：507.2；实测值，507.2
实施例14：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001451
步骤1：(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、6-乙炔基-1H-吲唑(71mg，0.51mmol)及CuI(2mg，0.01mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(243mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)及DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，75％)。[M+H]计算值：489.2；实测值，489.2。
步骤2：3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.31mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(119mg，100％)。[M+H]计算值：389.2；实测值，389.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-40℃和氮气气氛下向3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(119mg，0.31mmol)和DIEA(118mg，0.92mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(25mg，0.28mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-40℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(3-((1H-吲唑-6-基)乙炔基)-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(21.7mg，16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):13.32(s,1H),8.27(d,J＝2.8Hz,1H),8.15(s,1H),7.97(s,1H),7.84(d,J＝8.4Hz,1H),7.40-6.52(m,4H),6.19-6.18(m,1H),5.86-5.65(m,2H),4.61-4.47(m,1H),4.05-3.96(m,2H),3.82-3.47(m,3H),3.31-3.29(m,2H),2.68-2.50(m,1H),2.40-2.37(m,1H)。[M+H]计算值：443.2；实测值，443.2
实施例15：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001471
步骤1：N-环丙基-4-碘-2-硝基苯胺
将1-氟-4-碘-2-硝基苯(3.0g，11.2mmol)和环丙胺(1.3g，22.4mmol)的DEM(20mL)混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用DCM(50mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体状的粗产物N-环丙基-4-碘-2-硝基苯胺(3.0g，98％)。[M+H]计算值：305.0；实测值，305.0
步骤2：N1-环丙基-4-碘苯-1,2-二胺
向N-环丙基-4-碘-2-硝基苯胺(3.0g，10.0mmol)和NH4Cl(2.2g，40.0mmol)的EtOH(30mL)和H2O(6mL)溶液中加入铁(2.2g，40.0mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝3/1)，得到呈棕色油状的N1-环丙基-4-碘苯-1,2-二胺(1.8g，67％)。[M+H]计算值：275.0；实测值，275.0。
步骤3：1-环丙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向N1-环丙基-4-碘苯-1,2-二胺(3.0g，10.9mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入1,1,1-三乙氧基乙烷(3.5g，22.0mmol)和ZrCl4(233mg，1.09mmol)。将混合物在室温搅拌12h。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝3/1)，得到呈黄色固体状的1-环丙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.5g，50％)。[M+H]计算值：299.0；实测值，299.0。
步骤4：1-环丙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
向1-环丙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.2g，4.0mmol)和CuI(76mg，0.40mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(141mg，0.20mmol)的DMF(30mL)溶液中加入乙炔基三甲基硅烷(789mg，8.05mmol)和TEA(610mg，6.04mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌2h。除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的1-环丙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(800mg，80％)。[M+H]计算值：269.1；实测值，269.1。
步骤5：1-环丙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
向1-环丙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(800mg，2.97mmol)的THF(20mL)混合物中加入1M TBAF的THF(3.6mL，3.6mmol)溶液。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用EA(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物通过硅胶柱色谱法纯化(PE/EA＝1/1)，得到呈白色固体状的1-环丙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(420mg，72％)。[M+H]计算值：197.1；实测值，197.1。
步骤6：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(99mg，0.51mmol)及CuI(2mg，0.01mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(243mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)及DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，79％)。[M+H]计算值：543.3；实测值，543.3。
步骤7：3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.33mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(146mg，100％)。[M+H]计算值：443.2；实测值，443.2
步骤8：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-40℃和氮气气氛下向3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的TFA盐(146mg，0.33mmol)和DIEA(128mg，0.99mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(30mg，0.33mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-40℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(49.3mg，30％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.38(s,1H),7.89(s,1H),7.50-7.47(m,2H),6.54-6.39(m,2H),5.97(br s,2H),5.81-5.66(m,2H),4.66-4.46(m,1H),4.13-4.06(m,2H),3.81-3.79(m,1H),3.54-3.51(m,1H),3.39(s,3H),3.27-3.24(m,1H),2.94-2.75(m,1H),2.70(s,3H),2.47-2.44(m,1H),1.29-1.27(m,2H),1.08-1.07(m,2H)。[M+H]计算值：497.3；实测值，497.3
实施例16：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001501
步骤1：4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶
将4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(1.5g，9.8mmol)、1,4-二噁烷(25mL)、氢氧化钾(2.0g，35.7mmol)和碘(4.9g，19.5mmol)的溶液在75℃下填充4h。将反应混合物用饱和硫代硫酸钠水溶液五水合物(30mL)淬灭并过滤收集固体，得到呈黄色固体状的4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(2.5g，92％)。[M+H]计算值：280.0；实测值，280.0
步骤2：N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
向4-氯-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(8.5g，30.0mmol)的DMSO(100mL)溶液中加入(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(15.3g，90.0mmol)。将混合物在120℃加热3h。将混合物冷却至室温，用EA(200mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油状的N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(8.6g，70％)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。[M+H]计算值：411.0；实测值，411.0
步骤3：3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺
将N-(2,4-二甲氧基苄基)-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(8.6g，21.0mmol)的TFA(50mL)混合物加热至50℃持续3h。除去溶剂后，将残余物用碳酸氢钠水溶液碱化至pH＝8并用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下蒸发。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝3/1)纯化，得到呈白色固体状的3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(4.3g，60％)。[M+H]计算值：260.7；实测值，260.7
步骤4：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(3.8g，14.7mmol)和粗产物(2R,4R)-2-(甲氧基甲基)-4-((甲基磺酰基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，14.7mmol)的DMF(50mL)溶液中加入K2CO3(6.0g，34.9mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，用冰水(100mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物用硅胶柱色谱法纯化(DCM/MeOH＝30/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，50％)。[M+H]计算值：474.1；实测值，474.1。
步骤5：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.63mmol)、6-乙炔基-5,7-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(155mg，0.76mmol)和CuI(18mg，0.09mmol)的DMF(20mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(364mg，0.32mmol)、PPh3(8mg，0.03mmol)和DIEA(244mg，1.89mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，57％)。[M+H]计算值：552.2；实测值，552.2
步骤6：3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.37mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(163mg，100％)。[M+H]计算值：452.2；实测值，452.2
步骤7：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(163mg，0.36mmol)和DIEA(139mg，1.08mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(33mg，0.36mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物冷却至室温，用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮的HCOOH盐(39.1mg，21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.13(s,1H),7.81(d,J＝6.0Hz,1H),7.59(d,J＝9.6Hz,1H),7.00(d,J＝6.4Hz,1H),6.77-6.60(m,3H),6.18-6.13(m,1H),5.71-5.65(m,1H),5.50-5.48(m,1H),4.59-4.48(m,1H),4.04-3.75(m,5H),3.60-3.47(m,2H),2.69-2.55(m,1H),2.51-2.49(m,7H)。[M+H]计算值：506.2；实测值，506.2
实施例17：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001531
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(125mg，0.26mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(61mg，0.32mmol)及CuI(7mg，0.04mmol)的DMF(20mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(151mg，0.13mmol)、PPh3(3mg，0.01mmol)及DIEA(102mg，0.79mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(65mg，28％)。[M+H]计算值：542.3；实测值，542.3
步骤2：3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(65mg，0.12mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(53mg，100％)。[M+H]计算值：442.2；实测值，442.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(53mg，0.12mmol)和DIEA(45mg，0.35mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(10mg，0.11mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将该混合物在-50℃下搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(16.6mg，28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):7.85(s,1H),7.79(d,J＝6.0Hz,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.49-7.46(m,1H),6.95(d,J＝6.4Hz,1H),6.76-6.53(m,1H),6.37(s,2H),6.17-6.13(m,1H),5.72-5.64(m,1H),5.49-5.46(m,1H),4.58-4.45(m,1H),4.07-3.78(m,2H),3.60-3.33(m,6H),2.60-2.50(m,4H),2.41-2.38(m,1H),1.21-1.96(m,2H),1.04-1.02(m,2H)。[M+H]计算值：496.2；实测值，496.2
实施例18：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001551
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、6-乙炔基-5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(97mg，0.51mmol)及CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(243mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)及DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈白色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，35％)。[M+H]计算值：538.2；实测值，538.2
步骤2：3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.15mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(65mg，100％)。[M+H]计算值：438.2；实测值，438.2
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃和氮气气氛下向3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的TFA盐(65mg，0.15mmol)和DIEA(45mg，0.35mmol)的DCM(15mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(10mg，0.11mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((5,7-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(22.1mg，30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):13.21-12.91(m,1H),7.81(d,J＝6.0Hz,1H),7.39(s,1H),6.97(d,J＝6.4Hz,1H),6.77-6.50(m,3H),6.18-6.14(m,1H),5.69-5.66(m,1H),5.52-5.48(m,1H),4.60-4.47(m,1H),4.08-3.77(m,2H),3.60-3.54(m,2H),3.33(s,3H),2.67-2.50(m,4H),2.42-2.38(m,1H)。[M+H]计算值：492.2；实测值，492.2
实施例19：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001561
步骤1：(R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(66mg，0.42mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的(R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(140mg，66％)。[M+H]计算值：502.2；实测值，502.2
步骤2：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的HCl盐
在室温下向(R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(140mg，0.28mmol)的EA(5mL)溶液中加入HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温搅拌2h。LCMS显示反应完成。将反应混合物浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的粗HCl盐(130mg，100％)。[M+H]计算值：402.2；实测值，402.2。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺的HCl盐(105mg，0.24mmol)和DIEA(102mg，0.72mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(24mg，0.26mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(5mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(52.7mg，30％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.49(s,1H),8.08(s,1H),7.99(s,1H),7.63-7.44(m,3H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),6.51-6.42(m,2H),5.74(dd,J＝4.8,8.0Hz,1H),5.54-5.31(m,1H),4.68-4.51(m,1H),4.16-4.04(m,2H),3.95-3.92(m,1H),3.91(s,3H),3.56-3.55(m,1H),3.56-3.40(m,1H),3.40(s,3H),2.79-2.71(m,1H),2.47-2.42(m,1H)。[M+H]计算值：456.2；实测值，456.2。
实施例20：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001581
步骤1：N-乙基-4-碘-2-硝基苯胺
在0℃和氮气气氛下向4-碘-2-硝基苯胺(10.0g，37.9mmol)的无水DMF(80mL)搅拌溶液中逐份加入矿物油中的60重量％氢化钠(1.5g，37.9mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30min，然后加入碘乙烷(5.9g，37.9mmol)，并在0℃下搅拌30min。将反应混合物用水(240mL)淬灭后，用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈红色固体状的N-乙基-4-碘-2-硝基苯胺(10.8g，98％)。[M+H]计算值：293.1；实测值，293.1
步骤2：N1-乙基-4-碘苯-1,2-二胺
在室温向N-乙基-4-碘-2-硝基苯胺(5.0g，1.7mmol)的EtOH(150mL)和H2O(30mL)溶液中加入Fe(3.8g，68.4mmol)和NH4Cl(3.6g，68.4mmol)。然后将混合物在80℃下搅拌4h。冷却至室温后，将反应混合物过滤，并将滤液用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝50/1)纯化，得到呈黑色固体状的N1-乙基-4-碘苯-1,2-二胺(4.25g，95％)。[M+H]计算值：263.1；实测值，263.1
步骤3：1-乙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
将N1-乙基-4-碘苯-1,2-二胺(3.2g，12.2mmol)、1,1,1-三乙氧基乙烷(2.4g，14.8mmol)和ZrCl4(280mg，1.22mmol)的MeOH(20mL)混合物在30℃下搅拌1h。然后将反应混合物溶解在水(30mL)中并用DCM(15mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(PE/EA＝5/1)，得到呈红色固体状的1-乙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.50g，72％)。[M+H]计算值：287.0；实测值，287.0。
步骤4：1-乙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
在氮气气氛下向1-乙基-5-碘-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.5g，8.7mmol)、乙炔基三甲基硅烷(1.7g，17.4mmol)和CuI(247mg，1.30mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(308mg，0.44mmol)和TEA(1.3g，13.1mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物用快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝50/1)，得到呈棕色固体状的1-乙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，93％)。[M+H]计算值：257.2；实测值，257.2
步骤5：1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
向1-乙基-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，7.8mmol)的THF(20mL)溶液中加入TBAF的THF(7.8mL，7.8mmol)溶液。然后将混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用EA(30mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝50/1)纯化，得到呈红色固体状的1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.4g，96％)。[M+H]计算值：185.1；实测值，185.1
步骤6：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.40mmol)、1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(81mg，0.44mmol)及CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)及DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，94％)。[M+H]计算值：531.2；实测值，531.2
步骤7：3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的HCl盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.38mmol)的EA(5mL)溶液中加入HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。LCMS显示反应完成。在真空下将反应混合物浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的粗HCl盐(170mg，97％)。[M+H]计算值：431.2；实测值，431.2。
步骤8：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的HCl盐(170mg，0.36mmol)和DIEA(140mg，1.08mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(33mg，0.36mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(5mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮的甲酸盐(52.7mg，30％)呈黄色固体状的。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.36(s,1H),7.94(s,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),6.45-6.40(m,2H),6.18(br s,2H),5.85-5.67(m,2H),4.67-4.65(m,1H),4.22-4.04(m,4H),3.82(dd,J＝4.0,9.2Hz,1H),3.54-3.49(m,1H),3.49(s,3H),2.83-2.76(m,1H),2.65(s,3H),2.50-2.45(m,1H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：485.3；实测值，485.3
实施例21：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001611
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.40mmol)、1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(74mg，0.40mmol)、CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次，将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈棕色固体状的((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(140mg，66％)。[M+H]计算值：530.2；实测值，530.2
步骤2：3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐
在室温下向((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(140mg，0.26mmol)的EA(5mL)溶液中加入HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(112mg，93％)。[M+H]计算值：430.2；实测值，430.2。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(112mg，0.20mmol)、DIEA(78mg，0.60mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(18mg，0.20mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(5mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(57.6mg，57％)呈黄色固体状的。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.56(s,1H),7.94-7.65(m,3H),7.47-7.27(m,2H),6.75-6.72(m,1H),6.57-6.41(m,2H),6.45-6.40(m,2H),5.76-5.70(m,1H),5.52-5.30(m,1H),4.66-4.50(m,1H),4.22-4.10(m,2H),3.93-3.87(m,1H),3.02-3.43(m,1H),3.40(s,3H),3.02-2.71(m,1H),2.64(s,3H),2.54-2.40(m,1H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：484.2；实测值，484.2。
实施例22：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001631
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.40mmol)、5-乙炔基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(70mg，0.44mmol)、CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，90％)。[M+H]计算值：502.2；实测值，502.2
步骤2：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.36mmol)的EA(5mL)溶液中加入HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温搅拌3h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(150mg，95％)。[M+H]计算值：402.2；实测值，402.2。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(150mg，0.34mmol)、DIEA(132mg，1.02mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(31mg，0.34mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(5mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(11mg，7％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.50-8.00(m,1H),7.62(s,1H),7.51-7.44(m,2H),7.29-7.25(m,1H),6.69-6.65(m,1H),6.53-6.34(m,2H),5.72-5.64(m,1H),5.42-5.25(m,1H),4.60-4.43(m,1H),4.10-4.03(m,2H),3.84(dd,J＝2.4,9.6Hz,1H),3.48-3.40(m,1H),3.33(s,3H),2.86-2.60(m,4H),2.53-2.34(m,1H)。[M+H]计算值：456.2；实测值，456.2。
实施例23：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001651
步骤1：1-乙基-5-碘-1H-苯并[d]咪唑
将N1-乙基-4-碘苯-1,2-二胺(2.2g，8.40mmol)和TsOH(145mg，0.84mmol)的三乙氧基甲烷(15mL)和MeOH(15mL)混合物在室温下搅拌4h。然后将混合物浓缩，得到残余物，将其溶于饱和NaHCO3(20mL)水溶液中并用EA(15mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝5/1)纯化，得到呈棕色固体状的1-乙基-5-碘-1H-苯并[d]咪唑(1.90g，83％)。[M+H]计算值：273.0；实测值，273.0。
步骤2：1-乙基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
在氮气气氛下向1-乙基-5-碘-1H-苯并[d]咪唑(2.75g，10.1mmol)、乙炔基三甲基硅烷(1.98g，20.2mmol)、CuI(290mg，1.52mmol)的DMF(25mL)混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(358mg，0.55mmol)和TEA(1.54g，15.2mmol)，并在30℃下搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用EA(60mL)萃取三次，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝50/1)纯化，得到呈棕色固体状的1-乙基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.30g，95％)。[M+H]计算值：243.1；实测值，243.1。
步骤3：1-乙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑
向1-乙基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.3g，9.5mmol)的THF(20mL)溶液中加入1M TBAF的THF(9.5mL，9.5mmol)溶液。然后将混合物在室温搅拌3h。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝50/1)，得到呈红色固体状的1-乙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑(1.35g，96％)。[M+H]计算值：171.1；实测值，171.1
步骤4：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.40mmol)、1-乙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑(82mg，0.48mmol)、CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝50/1)纯化，得到呈黄色固体状的((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(190mg，93％)。[M+H]计算值：516.3；实测值，516.3。
步骤5：3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐
在室温下向((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(190mg，0.37mmol)的EA(5mL)溶液中加入HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(160mg，96％)。[M+H]计算值：416.2；实测值，416.2。
步骤6：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺盐酸盐(160mg，0.35mmol)、DIEA(136mg，1.05mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(33mg，0.36mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(5mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(75.2mg，46％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.36(s,1H),8.14(s,0.4H),8.01(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(d,J＝8.4Hz,1H),7.54(dd,J＝0.8,8.0Hz,1H),6.96(d,J＝6.0Hz,1H),6.79-6.52(m,1H),6.40(br s,2H),6.20-6.13(m,1H),5.72-5.65(m,1H),5.50-5.46(m,1H),4.48-4.47(m,1H),4.32(q,J＝7.2Hz,2H),4.09-3.81(m,2H),3.61-3.48(m,2H),3.33-3.22(m,3H),2.67-2.57(m,1H),2.42-2.37(m,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：470.2；实测值，470.2。
实施例25：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001671
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑(91mg，0.51mmol)、CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌16h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，54％)。[M+H]计算值：528.3；实测值，528.3。
步骤2：3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺TFA盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.23mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌2h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的TFA盐3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(97mg，粗产物)。[M+H]计算值：428.2；实测值，428.2。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃下向3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(97mg，0.23mmol)、DIEA(89mg，0.39mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(17mg，0.18mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌2h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(10mg，9.1％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.35(s,1H),8.01(s,1H),7.80(d,J＝6.4Hz,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),6.96(d,J＝6.0Hz,1H),6.76-6.54(m,1H),6.38(br s,2H),6.18-6.14(m,1H),5.70-5.66(m,1H),5.54-5.42(m,1H),4.59-4.48(m,1H),4.07-3.81(m,2H),3.57-3.48(m,5H),2.66-2.50(m,2H),2.42-2.38(m,1H),1.13-1.06(m,4H)。[M+H]计算值：481.8；实测值，481.8。
实施例25：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001691
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(86mg，0.51mmol)、CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)中的混合物中加入Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(155mg，1.20mmol)，并在80℃下搅拌16h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，36％)。[M+H]计算值：516.2；实测值，516.2
步骤2：3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.15mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温搅拌2h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(44mg，粗产物)。[M+H]计算值：416.2；实测值，416.2。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
在-50℃下向3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(97mg，0.23mmol)、DIEA(89mg，0.39mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(17mg，0.18mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌2h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(5.8mg，8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.17(s,1H),7.85(s,1H),7.79(d,J＝6.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.47(dd,J＝0.8,8.0Hz,1H),6.95(d,J＝6.4Hz,1H),6.79-6.53(m,1H),6.38(br s,2H),6.19-6.13(m,1H),5.69-5.65(m,1H),5.48-5.46(m,1H),4.58-4.48(m,1H),4.08-3.77(m,2H),3.76(s,3H),3.60-3.48(m,2H),3.32(s,3H),2.67-2.65(m,1H),2.54(s,3H),2.42-2.37(m,1H)。[M+H]计算值：470.9；实测值，470.9
实施例26：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001711
步骤1：4,6-二氟-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺(2.2g，9.17mmol)的MeOH(15mL)和三乙氧基甲烷(15mL)溶液中加入TsOH(157mg，0.92mmol)，将混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物溶解的EA(100mL)中并用水(30mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，将残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到呈黄色固体的4,6-二氟-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(1.64g，71％)。[M+H]计算值：251.1；实测值，251.1。
步骤2：6-乙炔基-5,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑&5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向4,6-二氟-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(1.64g，6.51mmol)的DMF(35mL)溶液中加入NaH(312mg，7.818mmol，60重量％)，将混合物在0℃下搅拌20min，接着滴加入CH3I(1.11g，7.81mmol)。将混合物在室温搅拌4h。将混合物用水(10mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到6-乙炔基-5,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑和5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑的混合物。将混合物通过手性-HPLC进一步纯化，得到呈黄色固体状的6-乙炔基-5,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(290mg，24％)和5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(300mg，25％)。[M+H]计算值：193.1；实测值，193.1。
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(97mg，0.51mmol)、CuI(9mg，0.05mmol)的DMF(5mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(243mg，0.21mmol)、PPh3(5mg，0.02mmol)和DIEA(223mg，1.51mmol)，并在80℃下搅拌16h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，57％)。[M+H]计算值：538.2；实测值，538.2。
步骤4：3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.24mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(0.5mL)，将混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(105mg，粗产物)。[M+H]计算值：438.2；实测值，438.2
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃下向3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(125mg，0.24mmol)、DIEA(93mg，0.72mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(19mg，0.24mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(56mg，47％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.38(s,1H),7.82(d,J＝6.4Hz,1H),7.67(d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J＝6.4Hz,1H),6.76-6.50(m,3H),6.19-6.13(m,1H),5.72-5.65(m,1H),5.52-5.47(m,1H),4.60-4.46(m,1H),4.11-3.89(m,1H),3.87(s,3H),3.83-3.81(m,1H),3.63-3.47(m,2H),3.30(s,3H),2.71-2.55(m,1H),2.43-2.38(m,1H)。[M+H]计算值：491.8；实测值，491.8
实施例27：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001741
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(600mg，1.2mmol)、5-乙炔基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(267mg，1.7mmol)、CuI(15mg，0.07mmol)的DMF(20mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(71mg，0.06mmol)、PPh3(16mg，0.06mmol)和DIEA(473mg，3.66mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(60mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，9％)。[M+H]计算值：520.2；实测值，520.2
步骤2：(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(600mg，1.15mmol)、二苯基甲亚胺(420mg，2.32mmol)、Pd2(dba)3(212mg，0.23mmol)、BINAP(144mg，0.23mmol)和t-BuONa(333mg，3.45mmol)的甲苯(20mL)溶液在90℃和氮气气氛下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(330mg，43％)。[M+H]计算值：665.3；实测值，665.3
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.45mmol)的MeOH(4mL)和H2O(4mL)溶液中加入羟胺盐酸盐(790mg，11.3mmol)和NaHCO3(949mg，11.3mmol)，并在10℃下搅拌2h。将反应混合物用水(20m L)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(225mg，100％)。[M+H]计算值：501.2，实测值，501.2
步骤4：1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺盐酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(225mg，0.45mmol)的THF(10mL)溶液中加入EA/HCl(10mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺盐酸盐(210mg，粗产物)。[M+H]计算值：401.2；实测值，401.2。
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
在-50℃下向1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺盐酸盐(210mg，0.48mmol)、DIEA(187mg，1.44mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(43mg，0.48mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(58.4mg，60％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.27(s,1H),8.14(s,1H),7.85-7.77(m,2H),7.71-7.62(m,2H),7.44(dd,J＝1.2,9.2Hz,1H),6.97(d,J＝6.8Hz,1H),6.76-6.53(m,1H),6.29-6.11(m,3H),5.74-5.56(m,1H),5.31-5.28(m,1H),4.46-4.45(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.86(s,3H),3.78-3.74(m,1H),3.62-3.49(m,2H),3.31(s,3H),2.67-2.55(m,1H),243-2.40(m,1H)。[M+H]计算值：454.9；实测值，454.9
实施例28：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001771
步骤1：(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，向(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.37mmol)、6-碘-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(122mg，0.45mmol)、CuI(21mg，0.12mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(86mg，0.07mmol)、PPh3(97mg，0.04mmol)和DIEA(148mg，1.12mmol)，并在50℃下搅拌5h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，39％)。[M+H]计算值：679.3；实测值，679.3
步骤2：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.14mmol)的MeOH(5mL)和H2O(3mL)溶液中加入羟胺盐酸盐(258mg，0.68mmol)和NaHCO3(309mg，3.68mmol)，并在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，46％)。[M+H]计算值：515.2，实测值，515.2。
步骤3：3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.097mmol)的DCM(0.5mL)溶液中加入TFA(0.2mL)。将反应混合物在室温搅拌2h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(40mg，粗产物)。[M+H]计算值：415.2；实测值，415.2。
步骤4：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(40mg，0.097mmol)、DIEA(37mg，0.29mmol)的DCM(15mL)和DMA(0.5mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(7mg，0.078mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(10.6mg，23％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):7.71-7.67(m,3H),7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H),6.90-6.88(m,1H),6.82-6.53(m,1H),6.22-6.15(m,1H),5.99(br s,2H),5.74-5.67(m,1H),5.31-5.21(m,1H),4.60-4.45(m,1H),4.09-3.75(m,5H),3.60-3.48(m,2H),3.32(s,3H),2.60-2.55(m,1H),2.54(s,3H),2.40-2.35(m,1H)。[M+H]计算值：469.2；实测值，469.2
实施例29：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001791
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，向(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(736mg，1.5mmol)、5-乙炔基-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(255mg，1.5mmol)、CuI(85mg，0.45mmol)的DMF(30mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(173mg，0.15mmol)、PPh3(39mg，0.15mmol)和DIEA(585mg，4.53mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(60mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(370mg，39％)。[M+H]计算值：534.2；实测值，534.2
步骤2：(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(370mg，0.7mmol)、二苯基甲亚胺(253mg，1.4mmol)、Pd2(dba)3(128mg，0.14mmol)、BINAP(87mg，0.14mmol)和t-BuONa(202mg，2.1mmol)的甲苯(20mL)中的溶液在90℃和氮气气氛下搅拌10h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(370mg，78％)。[M+H]计算值：679.3；实测值，679.3
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(370mg，0.54mmol)的MeOH(20mL)和H2O(20mL)溶液中加入羟胺盐酸盐(945mg，13.5mmol)和NaHCO3(1.10g，13.5mmol)，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(110mg，40％)。[M+H]计算值：515.2，实测值，515.2
步骤4：3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.21mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(97mg，粗产物)。[M+H]计算值：415.2；实测值，415.2。
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
在-50℃和氮气气氛下向3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(97mg，0.21mmol)、DIEA(82mg，0.63mmol)的DCM(1mL)和DMA(1mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(20mg，0.21mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮格式(58.4mg，60％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.15(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,1H),7.71-7.70(m,2H),7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.36(dd,J＝1.2,8.4Hz,1H),7.00(d,J＝6.4Hz,1H),6.80-6.53(m,1H),6.42-6.38(m,2H),6.21-6.15(m,2H),5.74-5.66(m,1H),5.31-5.27(m,1H),4.63-4.45(m,1H),4.12-4.08(m,1H),3.80-3.75(m,3H),3.62-3.40(m,3H),3.32(s,3H),2.60-2.58(m,1H),2.54(s,3H),2.41-2.35(m,1H)。[M+H]计算值：469.3；实测值，469.3。
实施例30：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001821
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(660mg，1.34mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑(290mg，1.60mmol)、CuI(76mg，0.40mmol)的DMF(20mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(150mg，0.13mmol)、PPh3(34mg，0.13mmol)和DIEA(516mg，4.02mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(60mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝50/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(680mg，81％)。[M+H]计算值：546.2；实测值，546.2
步骤2：(2R,4S)-4-(3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(680mg，1.25mmol)、二苯基甲亚胺(453mg，2.50mmol)、Pd2(dba)3(230mg，0.25mmol)、BINAP(156mg，0.25mmol)和t-BuONa(360mg，3.25mmol)的甲苯(30mL)溶液在90℃和氮气气氛下搅拌10h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝20/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(570mg，66％)。[M+H]计算值：691.2；实测值，691.2
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(570mg，0.83mmol)的MeOH(20mL)和H2O(20mL)溶液中加入羟胺盐酸盐(1.40g，20.7mmol)和NaHCO3(1.70g，20.7mmol)，并在室温下搅拌5h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化(DCM/MeOH＝10/1)，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(310mg，71％)。[M+H]计算值：527.2，实测值，527.2
步骤4：3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(310mg，0.59mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(2mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(270mg，粗产物)。[M+H]计算值：427.2；实测值，427.2。
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(270mg，0.57mmol)、DIEA(221mg，1.71mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(52mg，0.57mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(79.6mg，29％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.32(s,1H),8.15(s,1H),7.88-7.83(m,2H),7.72-7.65(m,2H),7.47(dd,J＝1.2,8.4Hz,1H),7.04(d,J＝6.4Hz,1H),6.80-6.53(m,3H),6.21-6.15(m,1H),5.74-5.67(m,1H),5.35-5.27(m,1H),4.64-4.45(m,1H),4.13-4.08(m,1H),3.82-3.75(m,2H),3.62-3.46(m,2H),3.33(s,3H),2.64-2.52(m,1H),243-2.36(m,1H),1.14-1.02(m,4H)。[M+H]计算值：481.3；实测值，481.3
实施例31：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001851
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(900mg，1.8mmol)、1-乙基-5-乙炔基-1H-苯并[d]咪唑(374mg，2.2mmol)、CuI(103mg，0.54mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(208mg，0.18mmol)、PPh3(47mg，0.18mmol)和DIEA(700mg，5.4mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(60mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈橙色固体状的(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(800mg，83％)。[M+H]计算值：534.2；实测值，534.2
步骤2：(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,4S)-4-(4-氯-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(850mg，1.59mmol)、二苯基甲亚胺(575mg，3.18mmol)、Pd2(dba)3(293mg，0.32mmol)、BINAP(199mg，0.32mmol)和t-BuONa(458mg，4.77mmol)的甲苯(20mL)溶液在90℃和氮气气氛下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(700mg，65％)。[M+H]计算值：679.3；实测值，679.3。
步骤3：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(2R,4S)-4-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(800mg，1.18mmol)的MeOH(50mL)和H2O(30mL)溶液中加入盐酸羟胺(2.06g，29.4mmol)和NaHCO3(2.50g，29.4mmol)，并在室温下搅拌5h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EA(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(480mg，79％)。[M+H]计算值：515.2，实测值，515.2
步骤4：3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，0.51mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(230mg，粗产物)。[M+H]计算值：415.2；实测值，415.2。
步骤5：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(210mg，0.50mmol)、DIEA(194mg，1.50mmol)的DCM(2mL)和DMA(2mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(45mg，0.50mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取三次，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，将其通过制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(33.7mg，14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.35(s,1H),8.14(s,1H),7.89-7.86(m,2H),7.73-7.67(m,2H),7.44(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H),7.09(d,J＝6.4Hz,1H),6.80-6.53(m,3H),6.21-6.15(m,1H),5.74-5.67(m,1H),5.36-5.28(m,1H),4.64-4.45(m,1H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),4.13-3.73(m,2H),3.62-3.44(m,2H),3.33(s,3H),2.67-2.61(m,1H),249-2.39(m,1H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：469.2；实测值，469.2
实施例32：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001881
步骤1：N-乙基-3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺
向3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺(3.0g，10.0mmol)的AcOH(10mL)和THF(10mL)溶液中加入乙醛(440mg，10.0mmol)，并在30℃下搅拌20min。然后向混合物中加入NaBH(OAc)3(4.20g，20.0mmol)，并在40℃下搅拌3h。将反应混合物用饱和NH4Cl(20mL)水溶液淬灭，用EA(50mL)萃取三次，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将其通过快速色谱法纯化(PE/EA＝10/1)，得到呈黄色固体状的N-乙基-3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺(2.3g，70％)。[M+H]计算值：329.0；实测值，329.0。
步骤2：N-乙基-3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺
向N-乙基-3,5-二氟-4-碘-2-硝基苯胺(2.30g，7.01mmol)、CuI(133mg，0.70mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(246mg，0.35mmol)的DMF(20mL)混合物中加入乙炔基三甲基硅烷(1.37g，14.0mmol)和TEA(1.35g，10.5mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌2h。冷却至室温后，除去溶剂，得到残余物，将其通过快速色谱法(PE/EA＝5/1)纯化，得到呈棕色固体状的N-乙基-3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺(1.0g，50％)。[M+H]计算值：299.1；实测值，299.1。
步骤3：N1-乙基-3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺
在50℃下向N-乙基-3,5-二氟-2-硝基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺(1.0g，3.35mmol)和NH4Cl(1.8g，33.5mmol)的EtOH(20mL)和H2O(20mL)溶液中加入铁(1.9g，33.5mmol)。在50℃下搅拌2h后，将混合物过滤并浓缩，通过快速色谱法(PE/EA＝10/1)纯化残余物，得到呈白色固体状的N1-乙基-3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺(700mg，77％)。[M+H]计算值：269.1；实测值，269.1。
步骤4：1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
在0℃下向N1-乙基-3,5-二氟-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1,2-二胺(700mg，2.61mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入1,1,1-三甲氧基乙烷(508mg，3.15mmol)和ZrCl4(61mg，0.26mmol)。在室温下搅拌2h后，将混合物过滤并浓缩，将残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/3)纯化，得到呈灰白色固体状的1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(670mg，87％)。[M+H]计算值：293.1；实测值，293.1。
步骤5：1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑
向1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(670mg，2.29mmol)的THF(20mL)溶液中加入1M TBAF的THF(2.75mL，2.75mmol)溶液。将反应混合物在室温搅拌3h。除去溶剂，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(430mg，85％)。[M+H]计算值：221.1；实测值，221.1。
步骤6：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(112mg，0.50mmol)、CuI(12mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(243mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次，将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，将其通过快速色谱法(DCM/MeOH＝10/1)纯化，得到呈棕色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，54％)。[M+H]计算值：567.3；实测值，567.3。
步骤7：3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)
吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.23mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)，将混合物在室温搅拌3h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(107mg，粗产物)。[M+H]计算值：467.2；实测值，467.2
步骤8：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(105mg，0.22mmol)、DIEA(142mg，1.11mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(18mg，0.20mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(19.2mg，42％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):8.42-8.36(m,1H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),6.65-6.40(m,2H),6.04(br s,2H),5.80-5.65(m,2H),4.71-4.48(m,1H),4.19-3.96(m,4H),3.86-3.78(m,1H),3.57-3.48(m,1H),3.40(s,3H),3.03-2.78(m,1H),2.63(s,3H),2.52-2.42(m,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：521.2；实测值，521.2
实施例33：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001911
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(112mg，0.50mmol)、CuI(76mg，0.40mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(242mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.021mmol)和DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(60mL)稀释并用EA(30mL)萃取三次，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(100％EA)纯化，得到呈黄色固体的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，50％)。[M+H]计算值：566.3；实测值566.3
步骤2：3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐
在室温下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.21mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌3h。在真空下浓缩反应混合物，得到呈黄色固体状的3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(98mg，粗产物)。[M+H]计算值：466.3；实测值，466.3。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-50℃和氮气气氛下向3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1-((3S,5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(95mg，0.20mmol)、DIEA(129mg，1.00mmol)的DCM(15mL)和DMA(5mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(17mg，0.18mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(5mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(45.4mg，42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):7.82(d,J＝6.0Hz,1H),7.84(d,J＝8.4Hz,1H),6.97(d,J＝6.4Hz,1H),6.79-6.50(m,3H),6.20-6.14(m,1H),5.72-5.65(m,1H),5.52-5.47(m,1H),4.66-4.52(m,1H),4.25(q,J＝7.2Hz,2H),4.12-3.80(m,2H),3.63-3.48(m,2H),3.33(s,3H),2.72-2.52(m,1H),2.61(s,3H),2.43-2.38(m,1H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：520.2；实测值，520.2
实施例34：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001931
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.23mmol)和1-乙基-5-乙炔基吲唑(59.62mg，0.35mmol)的DMF(3.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)4(26.9mg，0.02mmol)、CuI(8.89mg，0.05mmol)和TEA(70.89mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis T3 OBDPrep柱，10μm，19mm×250mm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内25％B至55％B；检测器：UV 254和210nm；RT：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(39.5mg，34％)。C25H26N8O2[M+H]+的MS ESI计算值471.22；实测值471.10。1H-NMR(300MHz,d6-DMSO)δ8.49-8.08(m,3H),7.81-7.67(m,2H),6.83-6.55(m,1H),6.19-6.13(m,1H),5.82-5.57(m,2H),4.48(q,J＝7.2Hz,3H),4.11-3.92(m,1H),3.66-3.43(m,6H),2.71-2.55(m,1H),2.43-2.30(m,1H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例35：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001941
步骤1：5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1H-吲唑
在室温下向5-溴-1H-吲唑(5.00g，25.38mmol)、三甲基甲硅烷基乙炔(10.76mL，109.54mmol)、CuI(0.97g，5.08mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(3.56g，5.08mmol)的DMF(100.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(70.54mL，697.15mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在80℃下搅拌16h。将所得混合物用水(300mL)稀释，用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×300mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(4:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色固体状的5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1H-吲唑(4.68g，68％)。C12H14N2Si[M+H]+的MS ESI计算值215.09，实测值215.20。
步骤2：5-乙炔基-1H-吲唑
在0℃和氮气气氛下向5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1H-吲唑(4.68g，21.83mmol)的THF(45.00mL)搅拌溶液中滴加入TBAF(32.19mL，32.19mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。将所得混合物用水(100mL)稀释，用EtOAc(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(3:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的5-乙炔基-1H-吲唑(2.3g，66％)。C9H6N2[M+H]+的MS ESI计算值143.05，实测值143.20。
步骤3：5-乙炔基-1-甲基吲唑和5-乙炔基-2-甲基吲唑
在0℃和氮气气氛下向5-乙炔基-1H-吲唑(0.80g，5.62mmol)和K2CO3(2.33g，16.88mmol)的丙酮(16.00mL)搅拌溶液中滴加入CH3I(0.53mL，3.70mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。将所得混合物过滤，用乙酸乙酯(3×40mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用23％的EA的PE溶液洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的5-乙炔基-1-甲基吲唑(0.50g，54％)。C10H8N2[M+H]+的MS ESI计算值157.07，实测值157.15。还用40％EA的PE溶液洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的5-乙炔基-2-甲基吲唑(0.30g，30％)。C10H8N2[M+H]+的MS ESI计算值157.07，实测值157.10。
步骤4：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.1g，0.23mmol)、5-乙炔基-1-甲基吲唑(54.84mg，0.35mmol)、CuI(8.92mg，0.05mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(16.43mg，0.02mmol)的DMF(1.50mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.10mL，0.96mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物用水(30mL)稀释，用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19*250mm 10μm；流动相A：水(0.05％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内20B至50B；210/254nm；RT1：5.65。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(55.4mg，51％)。C25H25N7O2[M+H]+的MS ESI计算值456.21，实测值456.15。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.22(s,1H),8.16-8.13(m,1H),7.84-7.55(m,5H),7.29-7.24(m,1H),6.78-6.51(m,1H),6.19-6.13(m,1H),5.74-5.57(m,2H),4.61-4.47(m,1H),4.12-4.09(m,3H),3.89-3.63(m,2H),3.58-3.42(m,2H),3.32(s,3H),2.69-2.61(m,1H),2.39-2.32(m,1H)。
实施例36：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(70.00mg，0.16mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入5-乙炔基-2-甲基吲唑(38.38mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(11.50mg，0.07mmol)、CuI(6.24mg，0.03mmol)和TEA(49.74mg，0.492mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物过滤并将滤液通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis PrepT3 OBD柱，19*250mm 10u；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内30B至55B；210/254nm；RT1：5.58。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(40.90mg，54％)。C25H25N7O2[M+H]+的MS ESI计算值456.21，实测值456.10。H-NMR(300MHz,d6-DMSO)δ8.27-8.00(m,3H),7.76(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(dd,J＝8.8,1.5Hz,1H),7.09(s,1H),6.66-6.62(m,1H),6.22-6.10(m,1H),5.76-5.62(m,1H),5.52-5.48(m,1H),4.49-4.43(m,3H),4.10-4.05(m,1H),3.96-3.59(m,2H),3.31(d,J＝3.4Hz,3H),2.45-2.33(m,1H),1.52-1.08(m,4H)。
实施例37：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001971
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.23mmol)和1-乙基-5-乙炔基吲唑(59.76mg，0.35mmol)的DMF(3.00mL)溶液中滴加Pd(PPh3)2Cl2(16.43mg，0.02mmol)、CuI(8.9mg，0.05mmol)和TEA(71.05mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis T3 OBDPrep柱，10μm，19mm×250mm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内30％B至55％B；检测器：UV 254和210nm；RT：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(33mg，29％)。C26H27N7O2[M+H]+的MS ESI计算值470.22；实测值470.10。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21-8.13(m,2H),7.85(s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,1.5Hz,1H),7.13-7.08(m,1H),6.95-6.90(m,1H),6.59-6.52(m,1H),6.19-6.13(m,1H),5.71-5.66(m,1H),5.55-5.51(m,1H),4.48(q,J＝7.2Hz,3H),4.11-4.07(m,1H),3.94-3.84(m,1H),3.64-3.53(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.45-3.41(m,1H),3.33(d,J＝5.2Hz,3H),2.72-2.62(m,1H),2.43-4.39(m,1H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例38：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550001981
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(70.00mg，0.16mmol)的DMF(2.00mL)搅拌溶液中加入2-乙基-5-乙炔基吲唑(41.83mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(11.50mg，0.02mmol)、CuI(6.24mg，0.03mmol)和TEA(49.74mg，0.492mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物过滤并将滤液通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19*250mm 10u；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内30B至50B；210/254nm；RT1：5.58。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(41.1mg，53％)。C26H27N7O2[M+H]+的MS ESI计算值470.23，实测值470.05。H-NMR(300MHz,d6-DMSO)δ8.54(s,1H),8.21(s,1H),8.09-7.78(m,3H),7.69(d,J＝8.9Hz,1H),7.56-7.32(m,2H),6.83-6.46(m,1H),6.24-6.10(m,1H),5.79-5.54(m,2H),4.69-4.41(m,3H),4.14-3.79(m,2H),3.74-3.41(m,4H),3.17-3.12(m,1H),2.77-2.62(m,1H),2.43-2.37(m,1H),1.52(t,J＝7.4Hz,3H)
实施例39：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈
Figure BDA0004113375550001991
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(105mg，0.51mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(242mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次，将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(70mg，30％)。[M+H]计算值：547.2；实测值，547.2。
步骤2：2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(70mg，0.12mmol)的DCM(5mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色油状的2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐(57mg，粗产物)。[M+H]计算值：447.2；实测值，447.2。
步骤3：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈甲酸盐
在-50℃和氮气气氛下向2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐(57mg，0.12mmol)和DIEA(77mg，0.60mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(10mg，0.11mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈甲酸盐(17.8mg，28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.13(s,0.3H),7.84(d,J＝6.4Hz,1H),7.59(d,J＝9.2Hz,1H),7.06(d,J＝6.4Hz,1H),6.86-6.79(m,2H),5.59(dd,J＝10.0,16.4Hz,1H),6.19(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.73-5.61(m,2H),4.87-4.50(m,1H),4.15-3.99(m,2H),3.76(s,3H),3.18-3.00(m,2H),2.82-2.70(m,1H),2.56(s,3H),2.42-2.37(m,1H)。[M+H]计算值：501.3；实测值，501.3。
实施例40：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002001
在室温和氮气气氛下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.1g，0.23mmol)和5-乙炔基-1-甲基吲唑(54.71mg，0.35mmol)的DMF(3.00mL)混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(16.39mg，0.02mmol)、CuI(8.89mg，0.05mmol)和TEA(70.89mg，0.701mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridgeC18 OBD Prep柱，10μm，19mm×250mm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内40％B至80％B；检测器：UV 254和210nm；RT：5.55min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(18.6mg，16％)。C24H24N8O2[M+H]+的MS ESI计算值457.20；实测值457.20。1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.27(s,1H),8.08(d,J＝13.1Hz,2H),7.63(d,J＝3.6Hz,2H),6.83-6.53(m,1H),6.34-6.25(m,1H),5.82-5.69(m,2H),4.62(d,J＝10.6Hz,1H),4.10-4.05(m,4H),3.92-3.77(m,1H),3.62-3.51(m,2H),3.41(d,J＝1.5Hz,3H),2.90-2.70(m,1H),2.54-2.50(m,1H)。
实施例41：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002011
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(70.00mg，0.16mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入5-乙炔基-2-甲基吲唑(38.30mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(11.47mg，0.02mmol)、CuI(6.23mg，0.03mmol)和TEA(49.62mg，0.49mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。使混合物冷却至室温。将所得混合物过滤并将滤液通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19*250mm10u；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内30B至60B；210/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(17.50mg，23％)。C24H24N8O2[M+H]+的MS ESI计算值457.21，实测值457.10。H-NMR(300MHz,d6-DMSO)δ8.46(s,1H),8.26-8.20(m,2H),7.64(d,J＝8.9Hz,1H),7.45(d,J＝8.9Hz,1H),6.67-6.60(m,1H),6.18-6.12(m,1H),5.68-5.62(m,1H),4.55-4.50(m,1H),4.19(s,3H),3.90-3.85(m,1H),3.73-3.31(m,7H),2.70-2.65(m,1H),2.40-2.36(m,1H)。
实施例42：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002021
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(70.00mg，0.16mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入2-乙基-5-乙炔基吲唑(41.74mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(11.47mg，0.02mmol)、CuI(6.23mg，0.03mmol)和TEA(49.62mg，0.49mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相，NH4HCO3水溶液，10min内0％至33％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈棕色固体状的粗产物。将粗产物(168.00mg)通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3OBD柱，19*250mm 10u；流动相A水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内40B至65B；210/254nm；RT1：5.95。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(28.10mg，36％)。C25H26N8O2[M+H]+的MS ESI计算值471.23，实测值471.10。H-NMR(300MHz,d6-DMSO)δ8.50(s,1H),8.25-8.21(m,2H),7.66(d,J＝8.9Hz,1H),7.46(dd,J＝8.9,1.6Hz,1H),6.67-6.62(m,1H),6.19-6.12(m,1H),5.75-5.55(m,2H),4.50-4.40(m,3H),4.17-3.74(m,2H),3.71-3.45(m,2H),3.30(s,3H),2.75-2.55(m,1H),2.39-2.35(m,1H),1.51(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例43：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈
Figure BDA0004113375550002031
步骤1：(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.42mmol)、5-乙炔基-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑(87mg，0.51mmol)和CuI(11mg，0.06mmol)的DMF(10mL)混合物中加入Pd(PPh3)4(242mg，0.21mmol)、PPh3(6mg，0.02mmol)和DIEA(163mg，1.26mmol)，并在80℃下搅拌5h。冷却至室温后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(20mL)萃取三次，将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到呈黄色固体状的(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，36％)。[M+H]计算值：511.3；实测值，511.3。
步骤2：2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐
向(2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氰基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.16mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐(64mg，粗产物)。[M+H]计算值：411.2；实测值，411.2。
步骤3：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈
在-50℃和氮气气氛下向2-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸盐(40mg，0.09mmol)和DIEA(58mg，0.45mmol)的DCM(10mL)溶液中缓慢加入丙烯酰氯(8mg，0.08mmol)的DCM(0.5mL)溶液。将混合物在-50℃下搅拌0.5h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用DCM(10mL)萃取两次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，将该残余物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈(7mg，15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):7.85(s,1H),7.81(d,J＝6.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(d,J＝6.4Hz,1H),6.59(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),6.39(br,2H),6.19(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.71(dd,J＝1.6,6.4Hz,1H),5.59-5.57(m,1H),4.87-4.49(m,1H),4.13(dd,J＝6.4,11.2Hz,1H),3.97(dd,J＝4.0,10.8Hz,1H),3.76(s,3H),3.19-2.97(m,2H),2.73-2.67(m,1H),2.55(s,3H),2.40-2.33(m,1H)。[M+H]计算值：465.2；实测值，465.2。
实施例44：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002051
向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.23mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑(89.75mg，0.47mmol)、Pd(PPh3)2Cl(16.39mg，0.023mmol)和CuI(8.89mg，0.05mmol)的DMF搅拌混合物中加入TEA(70.89mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A:水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内35B至60B；254/210nm；RT：4.35。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(43.4mg，38％)。C24H22F2N8O2[M+H]+的ESI计算值493.18；实测值493.20。H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(d,J＝2.3Hz,1H),7.45(dd,J＝9.7,1.9Hz,1H),7.10-7.16(m,1H),6.74-6.53(m,1H),6.12-6.18(m,1H),5.77-5.50(m,2H),4.54(d,J＝57.2Hz,1H),4.27(s,3H),4.15-3.80(m,2H),3.66-3.45(m,2H),3.33(d,J＝5.8Hz,3H),2.77-2.57(m,1H),2.42(d,J＝3.6Hz,1H)。
实施例45：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002061
步骤1：4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛
在-78℃和氩气气氛围下向LDA(7.03mL，14.06mmol)的THF(70.00mL)搅拌溶液中滴加入4,6-二氟-2-甲基吲唑(1.75g，10.41mmol)的THF(15.00mL)溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌2h。在-78℃下向以上混合物中滴加入DMF(1.61mL，20.81mmol)。将所得混合物再搅拌2h。在0℃下将所得混合物用饱和NH4Cl(水溶液)淬灭，用EtOAc(2×500mL)萃取。将合并的有机层用水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(3:2)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛(1.09g，53％)。H NMR(300MHz,氯仿-d)δ10.34(s,1H),7.3-7.26(m,1H),6.98-6.85(m,1H),4.52(d,J＝1.2Hz,3H)。
步骤2：5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑
在室温和氩气气氛下向4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛(1.09g，5.56mmol)和K2CO3(2.30g，16.64mmol)的MeOH(30.00mL)搅拌混合物中滴加入(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.67mL，11.13mmol)。将反应混合物搅拌过夜。将所得混合物用水(200mL)稀释，用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(3:2)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基吲唑(0.88g，82％)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.14(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.57-6.68(m,1H),4.24(s,3H),3.92(s,1H)。
步骤3：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.10mg，0.23mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑(90.0mg，0.47mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.4mg，0.023mmol)和CuI(8.92mg，0.047mmol)的DMF(1mL)混合物中加入TEA(71.05mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD柱19*150mm 5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：5.3min内35B至65B；254/210nm；RT：5.3。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-2-甲基-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(68.8mg，55％)。C25H23F2N7O2[M+H]+的ESI计算值492.19；实测值492.20。H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.86(d,J＝6.1Hz,1H),7.46(d,J＝9.4Hz,1H),7.12-7.16(m,1H),7.03(d,J＝6.1Hz,1H),6.84-6.39(m,3H),6.18(d,J＝16.6Hz,1H),5.70(t,J＝10.9Hz,1H),5.55(s,1H),4.55(d,J＝39.8Hz,1H),4.29(d,J＝1.1Hz,3H),4.15-3.76(m,2H),3.67-3.49(m,2H),3.34(s,3H),2.69-2.75(m,1H),2.42-2.40(m,1H)。
实施例46：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002081
步骤1：4-碘-N-甲基-2-硝基苯胺
向1-氟-4-碘-2-硝基苯(10.00g，37.45mmol)的TEA(26.53g，262.18mmol)混合物中加入甲胺(5.82g，187.27mmol)。将反应混合物在80℃和氮气气氛下搅拌过夜。将所得混合物用水(200mL)稀释，用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。这样得到呈黄色固体状的4-碘-N-甲基-2-硝基苯胺(10.5g，96％)，其未经进一步纯化即用于下一步骤中。C7H7BrN2O2[M+H]+的MS ESI计算值248.98，实测值249.00。
步骤2：4-碘-N1-甲基苯-1,2-二胺
向4-碘-N-甲基-2-硝基苯胺(5.00g，17.98mmol)和NH4Cl(4.81g，89.91mmol)的EtOH和水中的混合物中加入Fe(4.02g，71.93mmol)。将反应混合物在70℃在氮气气氛下搅拌过夜。将所得混合物过滤，用EtOH(3×200mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩。将残余物用水(200mL)稀释，用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩并干燥，得到呈黑色油状的4-碘-N1-甲基苯-1,2-二胺(4.5g，98％)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。C7H9BrN2[M+H]+的MS ESI计算值200.99；实测值201.00。
步骤3：5-溴-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑
将4-溴-N1-甲基苯-1,2-二胺(1.00g，4.97mmol)和TFA(5.00mL)的溶液在75℃和氮气气氛下搅拌16h。将所得混合物减压浓缩。通过加入饱和NaHCO3(水溶液)淬灭残余物，将所得混合物用EtOAc(3×50mL)萃取。将有机层合并，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(6:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅棕色固体状的5-溴-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(0.90g，65％)。C9H6BrF3N2[M+H]+的MS ESI计算值278.97；实测值279.00。
步骤4：1-甲基-2-(三氟甲基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑
向5-溴-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(2.50g，7.67mmol)、CuI(0.29g，1.53mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.54g，0.77mmol)的DMF(25.00mL，342.01mmol)搅拌混合物中加入三甲基甲硅烷基乙炔(3.25mL，33.10mmol)和TEA(21.31mL，210.64mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在85℃下搅拌1.5h。将所得混合物用水(150mL)稀释并用EA(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用14％EA的PE溶液洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕黄色固体状的1-甲基-2-(三氟甲基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.1g，83％)。C14H15F3N2Si[M+H]+的MS ESI计算值297.10，实测值297.10。
步骤5：5-乙炔基-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑
在0℃和氮气气氛下向1-甲基-2-(三氟甲基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑(2.10g，7.09mmol)的THF(21.00mL)搅拌溶液中滴加入TBAF(10.63mL)。将反应混合物在室温搅拌1h。将所得混合物用水(80mL)稀释，用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(5:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的5-乙炔基-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(1.48g，84％)。C11H7F3N2[M+H]+的MS ESI计算值225.06，实测值225.05。
步骤6：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.16mmol)、5-乙炔基-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(89.6mg，0.33mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.4mg，0.02mmol)和CuI(8.9mg，0.03mmol)的DMF(1mL)搅拌混合物中加入TEA(52.5mg，0.49mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内50B至70B；210/254nm；RT：4.02。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(31.5mg，37％)。C25H23F3N8O2[M+H]+的ESI计算值525.19；实测值525.10。H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(d,J＝2.7Hz,2H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.83(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),6.52-6.83(m,1H),6.12-6.25(m,1H),5.76-5.55(m,2H),4.70-4.40(m,1H),4.12-4.08(dd,J＝10.7,7.5Hz,1H),4.02(d,J＝1.2Hz,3H),3.97-3.92(m,1H),3.86-3.3.79(m,1H),3.68-3.60(m,1H),3.55-3.45(m,1H),3.34(s,3H),2.76-2.57(m,1H),2.46-2.32(m,1H)。
实施例47：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002111
向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.16mmol)、5-乙炔基-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(89.2mg，0.34mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.5mg，0.02mmol)和CuI(11.5mg，0.03mmol)的DMF(1mL)搅拌混合物中加入TEA(50.11mg，0.50mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19*250mm 10u；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内30B至60B；210/254nm；RT：5.58。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(48.4mg，56％)。C26H24F3N7O2[M+H]+的ESI计算值524.19；实测值524.05。H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.20(d,J＝24.5Hz,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,1H),7.83-7.79(m,2H),7.08-6.91(m,1H),6.86-6.50(m,1H),6.45(s,1H),6.18(d,J＝16.4Hz,2H),5.71(t,J＝11.3Hz,1H),5.51(s,1H),4.56(d,J＝40.7Hz,1H),4.30-3.97(m,4H),3.89-3.85(m,1H),3.72-3.44(m,2H),3.35(d,J＝3.3Hz,3H),2.65-2.64(m,1H),2.49-2.45(m,1H)。
实施例48：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002121
步骤1：3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐
在0℃和氩气气氛围下向(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.40g，11.39mmol)的DCM(50.00mL)搅拌溶液中滴加入HCl的EA(4M)溶液(50.00mL)。将所得混合物在室温下搅拌1h。通过过滤收集沉淀的固体并用DCM(3×30mL)洗涤。在减压下干燥残余物，得到呈浅黄色固体状的3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(4.8g，92％)。C11H16ClIN6O[M+H-HCl]+的MS ESI计算值375.04，实测值375.10。
步骤2：1-[(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
在0℃和氩气气氛围下向3-碘-1-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.57g，1.39mmol)和DIEA(1.21mL，6.95mmol)的DCM(19.00mL)搅拌混合物中滴加入丙烯酰氯(4.16mL，1.04mmol)(0.25M的DCM溶液)。将所得混合物搅拌10min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.41g，68％)。C14H17IN6O2[M+H]+的MS ESI计算值429.05，实测值428.95。
步骤3：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮)
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.15g，0.35mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基吲唑(0.13g，0.70mmol)、CuI(13.34mg，0.07mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(24.59mg，0.04mmol)的DMF(2.00mL)混合物中加入TEA(0.15mL，1.48mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌16h。将所得混合物用水(50mL)稀释，用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内20B至50B；210/254nm；RT1：4.02。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(65.1mg，38％)。C24H22F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值493.18；实测值493.20。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37-8.28(m,2H),7.74(d,J＝9.6Hz,1H),6.69-6.65(m,1H),6.19-6.15(m 1H),5.75-5.58(m,2H),4.54(d,J＝54.4Hz,1H),4.07(s,3H),4.02-3.92(m,1H),3.84-3.78(m,1H),3.67-3.45(m,2H),3.32(s,3H),2.74-2.55(m,1H),2.44-2.36(m,1H)。
实施例49：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-乙基-4,6-二氟-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002141
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.30mmol)、2-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟吲唑(93.89mg，0.45mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(21.31mg，0.03mmol)和CuI(11.56mg，0.06mmol)的DMF(2.00mL)搅拌溶液中加入TEA(92.16mg，0.91mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相ACN，0.01mmolNH4HCO3水溶液，20min内20％至40％梯度；检测器，UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基-4,6-二氟吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(10.2mg，6％)。C25H24F2N8O2[M+H]+的ESI计算值507.2；实测值507.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝1.2Hz,1H),7.59-7.36(m,1H),7.14-6.95(m,1H),6.68-6.45(m,1H),6.18-5.96(m,1H),5.89-5.48(m,2H),4.62(q,J＝7.2Hz,3H),4.28-3.77(m,2H),3.71-3.43(m,2H),3.34(s,3H),2.67-2.45(m,1H),2.40-2.45(m,1H),1.69-1.33(m,3H)。
实施例50：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((4,6-二氟-1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002151
步骤1：4,6-二氟-1H-吲唑
向2,4,6-三氟苯甲醛(20.00g，124.93mmol)和O-甲基羟胺盐酸盐(10.96g，131.17mmol)的DME(260.00mL)混合物中加入K2CO3(26.07g，188.64mmol)。将反应混合物在50℃和氩气气氛下搅拌过夜。使混合物冷却至室温。将所得混合物过滤，用DCM(3×100mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩。在室温下向上述混合物中加入NH2NH2.H2O(6.68mL，133.42mmol)和DME(260.00mL)。将所得混合物在100℃下再搅拌2h。LCMS显示40％的产物。加入NH2NH2.H2O(6.68mL，133.42mmol)。将所得混合物在100℃下再搅拌2h。LCMS显示主要产物。将所得混合物减压浓缩。将所得混合物用水(100mL)稀释，用EtOAc(3×300mL)萃取。将合并的有机层用水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/PE(9:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的4,6-二氟-1H-吲唑(15.4g，80％)。C7H4F2N2[M-H]-的MS ESI计算值153.03，实测值153.00。
步骤2：4,6-二氟-2-甲基吲唑和6-二氟-2-甲基吲唑
在0℃和氩气气氛围下向4,6-二氟-1H-吲唑(0.50g，3.24mmol)和K2CO3(1.35g，9.73mmol)的丙酮(10.00mL)搅拌混合物中滴加入CH3I(0.30mL，2.12mmol)。将所得混合物搅拌2h。将所得混合物过滤，用DCM(3×50mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(5:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的4,6-二氟-1-甲基吲唑(0.29g，53％)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.02(d,J＝0.8Hz,1H),6.88-6.86(m,1H),6.65-6.62(m,1H),4.04(s,3H)。
将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的4,6-二氟-2-甲基吲唑(0.20g，37％)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(s,1H),7.15-7.10(m,1H),6.59-6.55(m,1H),4.20(s,3H)。
步骤3：4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-甲醛
在-78℃和氩气气氛围下向LDA(10.70mL，21.40mmol)的THF(100.00mL)搅拌溶液中滴加入4,6-二氟-1-甲基吲唑(2.4g，14.27mmol)的THF(25.00mL)溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌2h。向上述混合物中滴加N-甲基-N-苯基甲酰胺(3.61mL，28.85mmol)。将所得混合物在-78℃下再搅拌2h。在0℃下所得混合物用饱和NH4Cl(水溶液)淬灭，用EtOAc(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(4:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-甲醛(2g，71％)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.40(t,J＝1.2Hz,1H),8.19(d,J＝1.2Hz,1H),6.95(dd,J＝10.8,1.2Hz,1H),4.08(s,3H)。
步骤4：5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基吲唑
在室温和氩气气氛下，向4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-甲醛(2.00g，10.20mmol)和K2CO3(2.82g，20.39mmol)的MeOH(60.00mL)搅拌混合物中滴加入(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(2.30mL，11.95mmol)。将反应混合物搅拌16h。将所得混合物用水(150mL)稀释，用EtOAc(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EtOAc(5:1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅棕色固体状5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基吲唑(0.84g，38％)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.08-8.03(m,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),4.04(s,3H),3.50(s,1H)。
步骤5：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.15g，0.35mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基吲唑(0.13g，0.70mmol)、CuI(13.37mg，0.07mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(24.64mg，0.04mmol)的DMF(2.00mL)混合物中加入TEA(0.15mL，1.08mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌16h。将所得混合物用水(50mL)稀释，用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A:水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内30B至50B；210/254nm；RT1：5.56。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(57mg，33％)。C25H23F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值492.19；实测值492.20。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(d,J＝0.8Hz,1H),7.82(dd,J＝6.0,1.2Hz,1H),7.74(d,J＝9.6Hz,1H),6.98(d,J＝6.0Hz,1H),6.82-6.53(m,1H),6.51(s,2H),6.19-6.15(m,1H),5.69-5.65(m,1H),5.50(q,J＝6.4Hz,1H),4.67-4.39(m,1H),4.07(s,3H),3.95-3.86(m,1H),3.84-3.77(m,1H),3.64-3.57(m,1H),3.56-3.47(m,1H),3.33(d,J＝4.8Hz,3H),2.74-2.55(m,1H),2.45-2.31(m,1H)。
实施例51：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((2-乙基-4,6-二氟-2H-吲唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002181
向1-[(2R)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.1g，0.23mmol)、2-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟吲唑(72.39mg，0.35mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.43mg，0.02mmol)和CuI(8.92mg，0.05mmol)的DMF(2.00mL)搅拌溶液中加入TEA(71.05mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相ACN，NH4HCO30.01mmol水溶液，20min内20％至40％梯度；检测器，UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(2-乙基-4,6-二氟吲唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(11.3mg，9％)。C26H25F2N7O2[M+H]+的ESI计算值506.2；实测值506.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(d,J＝7.2Hz,1H),7.46-7.25(m,2H),7.14-6.95(m,1H),6.65-6.43(m,1H),6.29-6.14(m,1H),5.80-5.48(m,2H),4.61(q,J＝7.3Hz,3H),4.18-3.78(m,2H),3.68-3.48(m,2H),3.32(d,J＝6.2Hz,3H),2.81-2.57(m,1H),2.46-2.29(m,1H),1.55(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例52：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((1-乙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈
Figure BDA0004113375550002191
向2-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈(0.15g，0.35mmol)、1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1,3-苯并二唑(97.95mg，0.53mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(24.88mg，0.04mmol)和CuI(13.50mg，0.07mmol)的DMF(2.00mL)搅拌溶液中加入TEA(0.11g，1.06mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将所得混合物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相ACN，0.01mmolNH4HCO3水溶液，20min内20％至40％梯度；检测器，UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的2-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈(29.5mg，17％)。C26H25N9 O[M+H]+的ESI计算值480.2；实测值480.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),7.95(s,2H),7.71-7.42(m,2H),6.71-6.52(m,2H),6.32-6.14(m,1H),5.90-5.64(m,2H),4.96-4.46(m,1H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),4.21-3.78(m,2H),3.22-3.18(m,1H),3.10-2.94(m,1H),2.93-2.65(m,1H),2.57(s,3H),2.40-2.01(m,1H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例53：2-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈；甲酸
Figure BDA0004113375550002201
向2-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈(70.00mg，0.17mmol)、1-乙基-5-乙炔基-2-甲基-1,3-苯并二唑(61.09mg，0.33mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(11.64mg，0.02mmol)和CuI(6.31mg，0.03mmol)的DMF(1.50mL)搅拌混合物中加入TEA(50.33mg，0.50mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌2h。将所得混合物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在20min内25％至40％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的2-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈；甲酸(18.50mg，21％)。C27H26N8O[M+H]+的MS ESI计算值479.20，实测值479.21；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(s,1H),7.82(d,J＝6.1Hz,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(dd,J＝8.3,1.5Hz,1H),6.97(d,J＝6.1Hz,1H),6.60(dd,J＝16.7,10.3Hz,1H),6.41(s,2H),6.21-5.92(m,1H),5.75-5.63(m,1H),5.59-5.23(m,1H),4.55-4.32(m,1H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),4.15-4.10(m,1H),3.96-3.75(m,1H),3.19-3.13(m,1H),3.06-3.02(m,1H),2.80-2.66(m,1H),2.58(s,3H),2.40-2.35(m,1H),1.31-1.19(m,3H)。
实施例54：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002211
在室温向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.27mmol)和5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(51.81mg，0.27mmol)的DMF(2.50mL)中的搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(18.92mg，0.02mmol)、CuI(10.27mg，0.05mmol)和TEA(81.84mg，0.80mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19×250mm 10μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内25B至50B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(75.70mg，50％)。C24H19F5N8O2[M+H]+的MS ESI计算值547.16；实测值547.00；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.32(s,1H),7.66(d,J＝9.1Hz,1H),6.68-6.62(m,1H),6.20-6.16(m,1H),5.86-5.50(m,2H),4.73-4.61(m,1H),4.46-4.44(m,1H),4.39-4.20(m,1H),4.09-4.05(m,2H),3.87(s,3H),2.90-2.65(m,1H),2.47-2.45(m,1H)。
实施例55：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002221
向5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(58.34mg，0.30mmol)、1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.30mmol)、CuI(11.56mg，0.06mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(21.31mg，0.03mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入TEA(92.16mg，0.91mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过反相色谱法纯化，条件如下：柱：Spherical C18,20-40μm,40g；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：40mL/min；梯度(B％)：在35min内5％-40％，检测器：UV 254/220nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(54.40mg，36％)。C24H22F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值493.18；实测值493.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.31(d,J＝2.3Hz,1H),7.66(d,J＝9.1Hz,1H),6.79-6.54(m,1H),6.20-6.14(m,1H),5.75-5.57(m,2H),4.54(d,J＝54.8Hz,1H),4.14-3.91(m,2H),3.87(s,3H),3.69-3.46(m,2H),3.32-3.31(m,3H),2.73-2.69(m,1H),2.43-2.38(m,1H)。
实施例56：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002231
在室温下向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-乙炔基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.20g，0.42mmol)和5-碘-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(77.00mg，0.49mmol)的DMF(3.00mL)中的搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(28.76mg，0.04mmol)、CuI(16.37mg，0.08mmol)和TEA(0.17mL，1.30mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Atlantis Prep T3 OBD柱，19×250mm 10μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内15B至55B；210/254nm；RT：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(66.00mg，27％)。C24H21F3N8O2[M+H]+的MS ESI计算值511.17；实测值511.25；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.30(d,J＝2.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),6.59(d,J＝16.6Hz,1H),6.19(d,J＝16.7Hz,1H),5.71(d,J＝10.3Hz,1H),5.60-5.69(m,1H),4.62(d,J＝7.4Hz,1H),4.48-4.45(m,1H),4.36-4.23(m,1H),4.13-4.09(m,1H),4.05-4.02(m,1H),3.92(s,3H),2.65-2.60(m,1H),2.43-2.39(m,1H)。
实施例57：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002241
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H20F4N8O2[M+H]+的MS ESI计算值529.16；实测值529.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(d,J＝11.3Hz,2H),8.15(d,J＝6.3Hz,1H),7.71(d,J＝9.8Hz,1H),6.59(dd,J＝16.8,10.3Hz,1H),6.19(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.79-5.66(m,1H),5.66-5.58(m,1H),4.61(s,1H),4.51-4.46(m,1H),4.36-4.24(m,1H),4.15-3.99(m,2H),3.85(s,3H),2.72-2.65(m,1H),2.46-2.43(m,1H)。
实施例58：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
Figure BDA0004113375550002251
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.23g，0.48mmol)、5-乙炔基-1-甲基-1,3-苯并二唑(74.65mg，0.48mmol)、CuI(18.21mg，0.10mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(33.55mg，0.05mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.20mL，1.97mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：6min内25B至30B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(63.30mg，24％)。C26H24F3N7O4[M+H-46]+的MS ESI计算值510.18；实测值510.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),8.14-8.02(m,2H),7.69-7.66(m,2H),7.57-7.55(m,1H),6.97(d,J＝5.9Hz,1H),6.62-6.55(m,1H),6.43(s,2H),6.21(dd,J＝16.9,2.3Hz,1H),5.79-5.67(m,1H),5.55-5.49(m,1H),4.97-4.51(m,1H),4.51-4.19(m,2H),4.10-3.94(m,2H),3.88(s,3H),2.71-2.59(m,1H),2.46-2.39(m 1H)。
实施例59：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐
Figure BDA0004113375550002261
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.20g，0.42mmol)、5-乙炔基-6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(72.39mg，0.42mmol)、CuI(15.83mg，0.08mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(29.17mg，0.04mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入TEA(0.17mL，1.22mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：6min内25B至30B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(39.20mg，16％)。C26H23F4N7O4[M+H-46]+的MS ESI计算值528.17；实测值528.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),8.14(s,1H),8.12-8.02(m,1H),7.82-7.77(m,1H),7.72-7.65(m,1H),7.03(dd,J＝6.4,4.0Hz,1H),6.73(s,2H),6.62-6.55(m,1H),6.21-6.16(m,1H),5.79-5.67(m,1H),5.56-5.48(m,1H),4.86-4.61(m,1H),4.51-4.20(m,2H),4.10-4.08(m,1H),3.98-3.95(m,1H),3.85(s,3H),2.82-2.60(m,1H),2.48-2.40(m,1H)。
实施例60：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002271
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.27mmol)和5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(51.91mg，0.27mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(18.96mg，0.02mmol)、CuI(10.29mg，0.05mmol)和TEA(82.01mg，0.81mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：6min内2B至50B；210/254nm；RT1：5.53min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(62.10mg，41％)。C25H20F5N7O2[M+H]+的MS ESI计算值546.17；实测值545.95；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),7.84(d,J＝6.2Hz,1H),7.68(d,J＝9.2Hz,1H),7.00(d,J＝6.2Hz,1H),6.85-6.51(m,3H),6.19(dd,J＝16.7,2.3Hz,1H),5.85-5.65(m,1H),5.63-5.46(m,1H),4.75-4.73(m,1H),4.44-4.43(m,1H),4.37-4.22(m,1H),4.09-4.08(m,1H),3.98-3.95(m,1H),3.88(s,3H),2.85-2.62(m,1H),2.43-2.41(m,1H)。
实施例61：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002281
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.30mmol)和5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(58.47mg，0.30mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(21.36mg，0.03mmol)、CuI(11.59mg，0.06mmol)和TEA(92.37mg，0.91mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，10min内10％至50％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(58.90mg，38％)。C25H23F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值492.20；实测值492.05；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.30(s,1H),8.18(d,J＝2.4Hz,1H),7.83(d,J＝12.6Hz,1H),7.56(d,J＝9.1Hz,1H),6.53-6.49(m,1H),6.27-6.08(m,1H),5.81-5.64(m,1H),5.47-5.43(m,1H),4.53-4.51(m,1H),4.08-4.07(m,1H),3.84-3.82(m,4H),3.62-3.43(m,2H),3.31(s,3H),2.51-2.41(m,1H),2.38-2.34(m,1H)。
实施例62：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002291
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.20g，0.47mmol)、5-乙炔基-6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(81.35mg，0.47mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(32.78mg，0.05mmol)和CuI(17.79mg，0.09mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入TEA(0.19mL，1.93mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过反向快速色谱进一步纯化，条件如下：柱：SunFire PrepC18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内25B至50B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(72.40mg，32％)。C24H23FN8O2[M+H]+的MS ESI计算值475.19，实测值475.25；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.48-8.22(m,2H),8.14(d,J＝6.3Hz,1H),7.70(d,J＝9.7Hz,1H),6.68-6.65(m,2H),6.19-6.15(m,1H),5.73-5.42(m,2H),4.55-4.52(m,1H),4.12-4.08(m,1H),3.96-3.92(m,1H),3.85(s,3H),3.67-3.45(m,2H),3.32(s,3H),2.66-2.63(m,1H),2.46-2.32(m,1H)。
实施例63：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002301
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.20g，0.47mmol)、5-乙炔基-6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(81.54mg，0.47mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(32.86mg，0.05mmol)和CuI(17.83mg，0.09mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入TEA(0.20mL，1.93mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在40min内10％至40％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(70.70mg，31％)。C25H24FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值474.20，实测值474.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),8.20-8.17(m,1H),7.92-7.90(m,1H),7.81(d,J＝18.2Hz,1H),7.66(d,J＝9.8Hz,1H),6.78-6.72(m,1H),6.59-6.55(m,1H),6.19-6.16(m,1H),5.72-5.69(m,1H),5.59-5.35(m,1H),4.66-4.36(m,1H),4.13-4.09(m,1H),3.85-3.83(m,4H),3.64-3.44(m,2H),3.33-3.31(m,3H),2.76-2.55(m,1H),2.42-2.30(m,1H)。
实施例64：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002311
在室温下向1-(二氟甲基)-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(80.00mg，0.35mmol)、1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.15g，0.35mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(24.61mg，0.04mmol)和CuI(13.36mg，0.07mmol)的DMF(4.00mL)搅拌混合物中加入TEA(0.11g，1.05mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物，将该粗产物通过反相快速色谱法进一步纯化,条件如下：柱：Spherical C18，20-40μm，330g；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：45mL/min；梯度(B％)：26％～36％，20min；检测器：254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，68％)。C24H20F4N8O2[M+H]+的MS ESI计算值529.17；实测值529.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),8.31-8.27(m,1H),8.05(d,J＝58.5Hz,1H),7.78(dd,J＝8.5,1.1Hz,1H),6.75(dd,J＝16.7,10.3Hz,1H),6.60-6.52(m,1H),6.21-6.17(m,1H),5.74-5.57(m,2H),4.62-4.44(m,1H),4.12-3.79(m,2H),3.66-3.46(m,2H),3.32(s,3H),2.73-2.56(m,1H),2.45-2.32(m,1H)。
实施例65：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002321
在室温下向1-(二氟甲基)-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(53.40mg，0.23mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.43mg，0.02mmol)、CuI(8.92mg，0.05mmol)和1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.23mmol)的DMF(4.00mL)搅拌混合物中加入TEA(71.05mg，0.70mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到粗产物。然后将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：X-Bridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内35B至60B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并减压浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(86.10mg，69％)。C25H21F4N7O2[M+H]+的MS ESI计算值528.17；实测值528.09；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81(s,1H),8.15-8.12(m,1H),7.84-7.78(m,2H),7.00-6.99(m,1H),6.79-6.54(m,3H),6.19-6.13(m,1H),5.72-5.68(m,1H),5.55-5.49(m,1H),4.83-4.43(m,1H),4.11-3.78(m,2H),3.68-3.44(m,2H),3.32-3.29(m,3H),2.78-2.54(m,1H),2.41-2.30(m,1H)。
实施例66：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002331
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.25g，0.52mmol)、5-乙炔基-1-甲基-1,3-苯并二唑(89.26mg，0.57mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(36.46mg，0.05mmol)和CuI(19.79mg，0.10mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.22mL，2.14mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释并用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep Phenyl OBD柱，19×150mm 5μm 13nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内30B至70B；254/210nm；RT1：4.23min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(38.20mg，14％)。C25H22F3N7O2[M+H]+的MS ESI计算值510.18；实测值510.20；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),7.97(d,J＝11.4Hz,2H),7.57-7.35(m,2H),7.20(s,1H),6.53-6.33(m,2H),5.79(d,J＝5.9Hz,3H),5.61-5.50(m,1H),4.75(s,1H),4.52-4.49(m,1H),4.21-4.18(m,2H),3.93-3.89(m,4H),2.76-2.57(m,2H)。
实施例67：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002341
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.25g，0.52mmol)、5-乙炔基-6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(90.49mg，0.52mmol)、CuI(19.79mg，0.11mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(36.46mg，0.05mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.22mL，2.14mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep Phenyl OBD柱，19×150mm 5μm 13nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内30B至50B；254/210nm；RT1：4.25min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(41.00mg，15％)。C25H21F4N7O2[M+H]+的MS ESI计算值528.17；实测值528.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(s,1H),8.19(s,1H),7.94-7.78(m,2H),7.68-7.66(m,1H),6.63-6.56(m,2H),6.24-6.19(m,1H),5.74-5.71(m,1H),5.52-5.38(m,1H),4.85-4.59(m,1H),4.42-4.38(m,1H),4.28-4.13(m,2H),3.93-3.91(m,1H),3.89-3.84(m,3H),2.70-2.67(m,1H),2.51-2.40(m,1H)。
实施例68：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002351
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.23g，0.48mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(91.85mg，0.48mmol)、CuI(18.21mg，0.10mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(33.55mg，0.05mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.22mL，2.14mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep Phenyl OBD柱，19×150mm 5μm 13nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：4.3min内30B至50B；254/210nm；RT1：4.25min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((4,6-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(41.00mg，15％)。C25H20F5N7O2[M+H]+的MS ESI计算值546.16；实测值546.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21(s,1H),8.19(s,1H),7.92-7.86(m,1H),7.63-7.60(m,1H),6.63-6.56(m,1H),6.23-6.19(m,1H),5.74-5.71(m,1H),5.54-5.51(m,1H),4.85-4.59(m,1H),4.42-4.38(m,1H),4.28-4.13(m,2H),3.94-3.86(m,4H),2.70-2.67(m,1H),2.51-2.40(m,1H)。
实施例69：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002361
1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-[2-[1-(二氟甲基)-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H21F4N7O2[M+H]+的MS ESI计算值528.27；实测值528.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.76(s,1H),8.31-8.11(m,2H),7.96-7.91(d,J＝8.5Hz,1H),7.74-7.71(m,1H),6.81-6.72(m,1H),6.61-6.52(m,1H),6.20-6.14(m,1H),5.74-5.66(m,1H),5.57-5.43(m,1H),4.61-4.46(m,1H),4.13-4.07(m,2H),3.62-3.45(m,2H),3.43-3.40(m,3H),2.86-2.60(m,1H),2.49-2.35(m,1H)。
实施例70：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002371
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.13g，0.27mmol)、1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(55.59mg，0.27mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(18.92mg，0.02mmol)和CuI(10.27mg，0.05mmol)的DMF(2.50mL)搅拌混合物中加入TEA(81.84mg，0.81mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物(0.15g)，将其通过制备型HPLC进一步纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内35B至60B；210/254nm；RT1：5.56min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-4,6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(74.50mg，48％)。C25H21F5N8O2[M+H]+的MS ESI计算值561.48；实测值561.00；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.33(s,1H),7.74(d,J＝9.2Hz,1H),6.76-6.60(m,1H),6.20(d,J＝16.8Hz,1H),5.87-5.47(m,2H),4.56(d,J＝36.8Hz,1H),4.42-4.23(m,3H),4.10(d,J＝8.7Hz,2H),3.85-3.78(m,1H),2.72-2.60(m,1H),2.49-2.42(m,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例71：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002381
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮C25H22F4N8O2[M+H]+的MS ESI计算值543.18，实测值543.25；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.41(s,1H),8.30(s,1H),8.06-7.97(m,2H),7.19(d,J＝9.2Hz,1H),6.75-6.55(m,2H),6.17-6.14(m,1H),5.76-5.65(m,2H),4.78(d,J＝7.3Hz,1H),4.49-4.25(m,4H),4.15-4.07(m,2H),2.82-2.67(m,1H),2.43-2.39(m,1H),1.57(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例72：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002391
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H24F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值519.20；实测值519.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43-8.04(m,2H),6.76-6.41(m,2H),6.27-6.20(m,2H),5.95-5.63(m,2H),4.76-4.48(m,1H),4.26-3.94(m,2H),3.99-3.85(m,1H),3.60-3.42(m,6H),3.07-2.77(m,1H),2.51-2.47(m,1H),1.28-1.23(m,2H),1.12-1.08(m,2H)。
实施例73：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮；甲酸
Figure BDA0004113375550002392
向1-环丙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(51.31mg，0.23mmol)、1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-丙基吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，0.23mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(16.50mg，0.02mmol)和CuI(8.96mg，0.05mmol)的DMF(2.00mL)搅拌混合物中加入TEA(71.38mg，0.70mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Sun-Fire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内35B至50B；210/254nm；RT：5.36min。将含有所需产物的级分合并并减压浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮；甲酸(40.20mg，30％)。C28H27F2N7O4[M+H-46]+的MS ESI计算值518.20；实测值518.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(s,1H),7.70-7.53(m,2H),7.19(d,J＝8.2Hz,1H),6.76-6.72(m,1H),6.45-6.42(m,2H),5.79-5.68(m,1H),5.56-5.30(m,1H),4.65-4.52(m,1H),4.17-4.08(m,2H),3.93-3.90(m,1H),3.55(d,J＝4.0Hz,1H),3.49-3.45(m,1H),3.43-3.34(m,4H),2.80-2.69(m,1H),2.58-2.39(m,1H),1.28-1.20(m,2H),1.12-1.05(m,2H)。
实施例74：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002411
在环境温度向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(2.00g，4.68mmol)、5-乙炔基-6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑(0.98g，5.62mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.33g，0.47mmol)和CuI(0.18g，0.94mmol)的DMF(20.00mL)搅拌混合物中加入TEA(2.00mL，14.41mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(200mL)稀释并用DCM(4×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5×100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。通过用ACN(25mL)研磨来纯化粗产物。通过过滤收集固体，用ACN(3×10mL)洗涤并干燥，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.07g，48％)。C25H24FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值474.20，实测值474.35；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),8.07(d,J＝6.0Hz,1H),7.81(d,J＝6.8Hz,1H),7.76(d,J＝10.0Hz,1H),7.02(s,1H),6.76-6.53(m,3H),6.18-6.13(m,1H),5.72-5.65(m,1H),5.51(s,1H),4.60-4.47(m,1H),4.09-4.08(m,1H),3.92-3.81(m,4H),3.60-3.48(m,2H),3.32(s,3H),2.50-2.33(m,2H)。
实施例75：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002421
向1-环丙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(0.15g，0.69mmol)和1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.29g，0.69mmol)的DMF(3.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(48.25mg，0.07mmol)、CuI(26.18mg，0.14mmol)和TEA(0.21g，2.06mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩。将粗产物(0.18g)通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在6min内35％B至50％B；210/254nm；RT：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(75.50mg，21％)。C27H25F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值518.20；实测值518.25；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.30(s,1H),7.97(s,1H),7.38(d,J＝6.5Hz,1H),7.19(d,J＝8.4Hz,1H),6.60-6.33(m,4H),5.90-5.40(m,2H),4.68-4.37(m,1H),4.28-4.17(m,1H),3.86-3.52(m,3H),3.44-3.41(m,4H),2.64-2.51(m,2H),1.29-1.25(m,2H),1.14-1.04(m,2H)。
实施例76：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002431
向1-环丙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(0.15g，0.69mmol)和1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.33g，0.69mmol)的DMF(3.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(48.25mg，0.07mmol)、CuI(26.18mg，0.14mmol)和TEA(0.21g，2.06mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩。将粗产物(0.18g)通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm10nm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在6min内35％B至50％B；210/254nm；RT：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(60.5mg，15％)。C26H21F5N8O2[M+H]+的MS ESI计算值573.17；实测值573.20；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),8.00(s,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),6.43(d,J＝6.1Hz,2H),6.14(s,2H),5.81-5.60(m,2H),4.79(s,1H),4.58-4.45(m,1H),4.16(d,J＝6.5Hz,3H),3.45-3.40(m,1H),3.08-2.96(m,1H),2.52-2.48(m,1H),1.28-1.24(m,2H),1.14-1.11(m,2H)。
实施例77：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002441
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(2.00g，4.67mmol)、1-乙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.88g，4.67mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.33g，0.46mmol)和CuI(0.18g，0.93mmol)的DMF(40.00mL)搅拌溶液中加入TEA(1.42g，14.01mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物用水(200mL)稀释，用EA(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。然后将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：30min内25B至40B；220/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.58g，69％)。C25H25FN8O2[M+H]+的MS ESI计算值489.21，实测值489.10；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(d,J＝5.8Hz,1H),8.10-7.93(m,2H),7.19(d,J＝9.2Hz,1H),6.67-6.37(m,2H),6.26(s,2H),5.88-5.80(m,1H),5.74-5.67(m,1H),4.75-4.45(m,1H),4.26-3.98(m,4H),3.84-3.81(m,1H),3.66-3.47(m,1H),3.40(s,3H),3.00-2.76(m,1H),2.63-2.46(m,1H),1.57-1.55(m,3H)。
实施例78：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002451
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((三氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C26H22F4N8O2[M+H]+的MS ESI计算值555.18；实测值555.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝28.1Hz,2H),8.16(d,J＝6.1Hz,1H),7.70-7.55(m,2H),6.86-6.50(m,2H),6.19(d,J＝16.8Hz,1H),5.83-5.53(m,2H),4.86-4.73(m,1H),4.48-4.45(m,1H),4.36-4.20(m,1H),4.17-3.97(m,2H),3.55-3.50(m,1H),2.74-2.66(m,1H),2.49-2.37(m,1H),1.21-0.97(m,4H)。
实施例79：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002461
在环境温度下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(4.00g，9.36mmol)、1-乙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(1.76g，9.36mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.66g，0.93mmol)、CuI(0.36g，1.87mmol)的DMF(80.00mL)溶液中滴加入TEA(2.84g，28.08mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物用水(300mL)稀释，用EA(3×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩。将粗产物通过反相快速色谱法纯化，条件如下：柱：Spherical C18,20-40μm,330g；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：100mL/min；梯度(B％)：40min内20％-40％，检测器：UV 254/220nm；RT：40min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.13g，24％)。C26H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值488.21，实测值488.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06-7.99(m,2H),7.89(t,J＝7.1Hz,1H),7.19(dd,J＝9.2,1.7Hz,1H),6.74(d,J＝6.2Hz,1H),6.58-6.41(m,2H),5.84-5.71(m,3H),5.57-5.31(m,1H),4.68-4.47(m,1H),4.27-4.09(m,4H),3.92-3.89(m,1H),3.57-3.47(m,1H),3.43(s,3H),3.06-2.67(m,1H),2.60-2.40(m,1H),1.58(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例80：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002471
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.80g，4.21mmol)和1-乙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.79g，4.21mmol)的DMF(40.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(0.30g，0.42mmol)、CuI(0.16g，0.84mmol)和TEA(1.28g，12.64mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。使所得混合物冷却至室温。将所得混合物用水(200mL)稀释并用EA(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在30min内10％至50％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分并合并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.13g，54％)。C26H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值488.21，实测值488.30；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),8.00-7.81(m,2H),7.28(d,J＝8.1Hz,1H),7.17(d,J＝9.1Hz,1H),6.55-6.35(m,2H),5.95(s,2H),5.83-5.51(m,2H),4.71-4.37(m,1H),4.27-4.03(m,3H),3.87-3.49(m,3H),3.41(s,3H),2.64-2.48(m,2H),1.58(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例81：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002481
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(4.00g，8.31mmol)、1-乙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(1.56g，8.31mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.58g，0.83mmol)和CuI(0.32g，1.66mmol)的DMF(70.00mL)搅拌溶液中加入TEA(2.52g，24.93mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物用水(200mL)稀释，用EA(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩。然后将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Sun-Fire Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：30min内25B至45B；220/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-[(三氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.17g，26％)。C26H23F4N7O2[M+H]+的MS ESI计算值542.18；实测值542.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10-7.94(m,2H),7.89(d,J＝6.3Hz,1H),7.18(d,J＝9.2Hz,1H),6.68(d,J＝6.2Hz,1H),6.55-6.36(m,2H),5.88(s,2H),5.80-5.73(m,1H),5.40-5.32(m,1H),4.78(d,J＝9.0Hz,1H),4.62-4.59(m,1H),4.35-4.06(m,5H),2.92-2.84(m,1H),2.51-2.45(m,1H),1.59-1.55(m,3H)。
实施例82：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002491
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.40g，0.93mmol)和1-(二氟甲基)-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.20g，0.93mmol)的DMF(8.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(65.56mg，0.09mmol)、CuI(35.58mg，0.18mmol)和TEA(0.28g，2.80mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在10min内0％至45％梯度；检测器：UV254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.30g，62％)。C24H21F3N8O2[M+H]+的MS ESI计算值511.18；实测值511.10；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝4.2Hz,1H),8.19(s,1H),8.10-8.07(m,1H),7.64-7.33(m,2H),6.68-6.37(m,2H),6.21(s,2H),5.96-5.63(m,2H),4.65-4.45(m,1H),4.15-4.02(m,2H),3.94-3.48(m,2H),3.42(s,3H),3.07-2.71(m,1H),2.53-2.48(m,1H)。
实施例83：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002501
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.30g，0.70mmol)、1-(二氟甲基)-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.15g，0.70mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(49.29mg，0.07mmol)和CuI(26.75mg，0.14mmol)的DMF(5.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.21g，2.11mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。然后将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：Sun-FirePrep C18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：30min内20B至45B；220/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.24g，68％)。C25H22F3N7O2[M+H]+的MS ESI计算值510.18；实测值510.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),8.09(dd,J＝6.2,4.0Hz,1H),7.92-7.87(m,1H),7.46-7.44(m,1H),6.42(d,J＝63.86Hz,1H),6.77-6.76(m,1H),6.61-6.41(m,2H),5.85-5.72(m,3H),5.59-5.31(m,1H),4.68-4.52(m,1H),4.19-3.93(m,3H),3.58-3.48(m,1H),3.43(s,3H),2.82-2.73(m,1H),2.63-2.38(m,1H)。
实施例84：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002511
1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-[2-[1-(二氟甲基)-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H22F3N7O2[M+H]+的MS ESI计算值510.18；实测值510.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(s,1H),8.16(s,1H),7.96(d,J＝6.2Hz,1H),7.42(d,J＝8.7Hz,1H),7.35-7.27(m,1H),6.55-6.35(m,2H),5.95-5.90(m,2H),5.82-5.54(m,2H),4.67(dd,J＝7.9,4.0Hz,1H),4.21(dd,J＝10.6,7.4Hz,1H),4.12-4.02(m,1H),3.87-3.48(m,3H),3.41(s,3H),2.77-2.19(m,2H)。
实施例85：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002521
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.50g，1.17mmol)、1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(0.29g，1.40mmol)、CuI(44.47mg，0.23mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(81.95mg，0.12mmol)的DMF(5.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.49mL，3.53mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：MeCN的水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在40min内25％至50％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.19g，33％)。C25H24F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值507.20；实测值507.35；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.31-7.93(m,2H),7.73(d,J＝8.4Hz,1H),6.90-6.25(m,2H),6.24-6.05(m,1H),5.73-5.63(m,2H),4.68-4.41(m,1H),4.31(q,J＝7.2Hz,2H),4.14-3.85(m,2H),3.82-3.60(m,2H),3.33-3.32(s,3H),2.80-2.53(m,1H),2.42-2.39(m,1H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例86：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002531
在室温下向1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)和1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(0.22g，1.05mmol)的DMF(80.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(73.93mg，0.11mmol)、CuI(40.12mg，0.21mmol)和TEA(0.32g，3.16mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在30min内5％至70％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.35g，65％)。C26H25F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值506.21；实测值506.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(d,J＝1.8Hz,1H),7.86-7.71(m,2H),7.00(dd,J＝6.7,2.5Hz,1H),6.81-6.54(m,3H),6.17(m,1H),5.69(m,1H),5.52(t,J＝6.7Hz,1H),4.66-4.44(m,1H),4.31(m,2H),4.13-3.74(m,2H),3.65-3.44(m,2H),3.32(s,3H),2.77-2.52(m,1H),2.46-2.35(m,1H),1.42(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例87：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002541
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.50g，1.17mmol)、1-乙基-5-乙炔基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑(0.29g，1.40mmol)、CuI(44.58mg，0.23mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(82.14mg，0.12mmol)的DMF(5.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.50mL，3.60mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：MeCN的水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在40min内25％至50％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-乙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.39g，66％)。C26H25F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值506.20；实测值506.35；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(s,1H),8.20(d,J＝4.0Hz,1H),7.90(d,J＝20.8Hz,1H),7.68(d,J＝9.2Hz,1H),6.82-6.71(m,1H),6.62-6.54(m,1H),6.21-6.15(m,1H),5.71-5.67(m,1H),5.60-5.39(m,1H),4.67-4.41(m,1H),4.36-4.30(m,2H),4.16-3.78(m,2H),3.65-3.42(m,2H),3.32(s,3H),2.76-2.54(m,1H),2.43-2.31(m,1H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例88：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002551
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)和6-氯-1-乙基-5-乙炔基-1,3-苯并二唑(0.22g，1.05mmol)的DMF(5.00mL)搅拌混合物中加入CuI(40.12mg，0.21mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(73.93mg，0.11mmol)和TEA(0.32g，3.16mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：SunFire PrepC18 OBD柱，19×150mm 5μm 10nm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)；流动相B：ACN；流速：50mL/min；40min内5％-15％；检测器：UV 254/210nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.24g，45％)。C26H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值504.18，实测值504.05；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09-8.02(m,3H),7.58(s,1H),6.76(s,1H),6.45(d,J＝7.2Hz,2H),5.80-5.71(m,3H),5.56-5.50(m,1H),4.66(d,J＝8.9Hz,1H),4.25(d,J＝7.4Hz,2H),4.16-4.12(m,2H),3.95-3.91(m,1H),3.53-3.49(m,1H),3.43(s,3H),2.82-2.74(m,1H),2.47-2.42(m,1H),1.62-1.58(m,3H)。
实施例89：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002561
向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)、5-氯-6-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(0.20g，1.05mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(73.93mg，0.11mmol)和CuI(40.12mg，0.21mmol)的DMF(4.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.44mL，3.16mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：SunFire Prep C18 OBD柱，流动相A：水(10mmoL NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：80mL/min；梯度：30min内10B至40B；210/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.23g，44％)。C25H24ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值490.17，实测值490.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),7.66(d,J＝35.2Hz,2H),7.26(d,J＝3.9Hz,1H),6.70-6.33(m,2H),6.02(brs,2H),5.85-5.67(m,1H),5.59-5.51(m,1H),4.71-4.52(m,1H),4.19-4.07(m,2H),3.88-3.74(m,1H),3.61-3.47(m,1H),3.40(d,J＝3.6Hz,3H),2.73-2.40(m,5H)。
实施例90：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002571
在室温向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.55g，1.28mmol)和6-氯-5-乙炔基-1-甲基-1,3-苯并二唑(0.25g，1.28mmol)的DMF(9.00mL)中的搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(90.15mg，0.13mmol)、CuI(48.92mg，0.26mmol)和TEA(0.53mL，3.84mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC进一步纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内35B至60B；210/254nm；RT1：5.85min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.18g，29％)。C24H23ClN8O2[M+H]+的MS ESI计算值491.16，实测值491.05；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.29(d,J＝2.6Hz,1H),8.20(s,1H),7.96(s,1H),6.67-6.54(m,2H),6.27-6.17(m,1H),5.76-5.57(m,2H),4.67-4.54(m,1H),4.14-3.78(m,5H),3.66-3.46(m,2H),3.32(s,3H),2.75-2.53(m,1H),2.48-2.39(m,1H)。
实施例91：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002581
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)、6-氯-5-乙炔基-1-甲基-1,3-苯并二唑(0.20g，1.05mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(73.93mg，0.11mmol)和CuI(40.12mg，0.21mmol)的DMF(4.50mL)搅拌混合物中加入TEA(0.44mL，3.16mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物，将该粗产物通过制备型HPLC进一步纯化，条件如下：柱：XBridge PrepC18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内35B至50B；210/254nm；RT1：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.26g，56％)。C25H24ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值490.17，实测值490.96；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),8.00-7.80(m,2H),7.52(s,1H),7.29(d,J＝4.9Hz,1H),6.63-6.36(m,2H),5.90(s,2H),5.81-5.54(m,2H),4.53(d,J＝73.8Hz,1H),4.27-3.94(m,1H),3.88-3.74(m,5H),3.58-3.55(m,1H),3.39(s,3H),2.58-2.52(m,2H)。
实施例92：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002591
在室温向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)和6-氯-1-乙基-5-乙炔基-1,3-苯并二唑(0.22mg，1.05mmol)的DMF(11.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(73.76mg，0.11mmol)、CuI(40.03mg，0.21mmol)和TEA(0.32g，3.15mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相；ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，30min内5％至70％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.24g，43％)。C25H25ClN8O2[M+H]+的MS ESI计算值505.19，实测值505.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.32-8.16(m,2H),8.04(s,1H),6.81-6.58(m,1H),6.58-6.20(m,1H),6.20-6.13(m,1H),5.69(m,2H),4.55(d,J＝57.1Hz,1H),4.37-4.31(m,2H),3.96(m,2H),3.65-3.62(m,1H),3.56-3.46(m,2H),3.33(d,J＝5.2Hz,3H),2.76-2.54(m,1H),2.43-2.34(m,1H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例93：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002601
在室温向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-碘吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.50g，1.17mmol)和6-氯-1-乙基-5-乙炔基-1,3-苯并二唑(0.24g，1.17mmol)的DMF(12.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(82.14mg，0.12mmol)、CuI(44.58mg，0.23mmol)和TEA(0.36g，3.51mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在30min内5％至70％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.23g，39％)。C26H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值504.19，实测值504.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),8.02(s,2H),7.54(s,1H),7.31-7.29(m,1H),6.65-6.31(m,2H),5.93(s,2H),5.77-5.53(m,2H),4.68-4.36(m,1H),4.26-4.00(m,3H),3.87-3.76(m,1H),3.60-3.45(m,1H),3.39(s,3H),2.66-2.45(m,2H),1.89-1.81(m,1H),1.62-1.48(m,3H)。
实施例94：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002611
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.47g，1.10mmol)、5-乙炔基-4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑(0.21g，1.10mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(77.04mg，0.11mmol)和CuI(20.90mg，0.11mmol)的DMF(8.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.33g，3.29mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物。然后将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：5.8min内35B至55B；210/254nm；RT1：5.58min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.15g，27％)。C24H22F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值493.18；实测值493.05；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(d,J＝9.6Hz,1H),7.07-7.02(m,1H),6.55-6.28(m,3H),5.91-5.56(m,2H),4.75-4.55(m,1H),4.44-3.77(m,3H),3.67-3.33(m,4H),3.05-2.74(m,1H),2.64(d,J＝13.6Hz,3H),2.60-2.41(m,1H)。
实施例95：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002621
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H23F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值492.19；实测值492.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83-7.80(m,1H),7.12-7.04(m,1H),6.74(d,J＝6.5Hz,1H),6.68-6.34(m,2H),6.19-6.12(m,2H),5.84-5.63(m,1H),5.54-5.17(m,1H),4.76-4.46(m,1H),4.28-3.85(m,3H),3.61-3.32(m,4H),2.83-2.34(m,5H)。
实施例96：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002631
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H25ClN8O2[M+H]+的MS ESI计算值505.14，实测值505.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝5.6Hz,1H),8.00(d,J＝5.8Hz,1H),7.42(s,1H),6.66-6.39(m,2H),6.20(s,1H),5.95-5.63(m,2H),4.75-4.49(m,1H),4.26-3.97(m,2H),3.88-3.82(m,1H),3.76(s,3H),3.58-3.49(m,1H),3.42(s,3H),3.04-2.77(m,1H),2.65(s,3H),2.52-2.47(m,1H)。
实施例97：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002641
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.45g，1.05mmol)和6-氯-5-乙炔基-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑(0.22g，1.05mmol)的DMF(11.00mL)搅拌混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(73.93mg，0.11mmol)、CuI(40.12mg，0.21mmol)和TEA(0.32g，3.16mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在70℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，在30min内10％至50％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.16g，30％)。C26H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值504.19，实测值504.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝5.2Hz,1H),7.90(d,J＝6.5Hz,1H),7.40(d,J＝2.2Hz,1H),6.72(t,J＝7.3Hz,1H),6.51-6.38(m,2H),5.83-5.66(m,3H),5.53(m,1H),4.66(d,J＝8.9Hz,1H),4.20-4.07(m,2H),3.94-3.91(m,1H),3.75(s,3H),3.58-3.47(m,1H),3.43(s,3H),2.78(m,1H),2.64(s,3H),2.57-2.40(m,1H)。
实施例98：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002651
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮C25H24ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值490.17，实测值490.05；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(d,J＝5.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.91(d,J＝6.4Hz,1H),7.53(s,1H),6.77-6.69(m,1H),6.52-6.38(m,2H),5.86-5.66(m,3H),5.53-5.50(m,1H),4.66-4.64(m,1H),4.20-4.00(m,2H),3.93-3.89(m,1H),3.88(s,3H),3.57-3.47(m,1H),3.43(s,3H),2.78-2.73(m,1H),2.49-2.45(m,1H)。
实施例99：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002652
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.40g，0.93mmol)、5-氯-6-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(0.18g，0.93mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(65.56mg，0.09mmol)和CuI(35.58mg，0.18mmol)的DMF(1.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.28g，2.80mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol/L NH4HCO3)，30min内10％至40％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.18g，39％)。C24H23ClN8O2[M+H]+的MSESI计算值491.20，实测值491.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.29(d,J＝1.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.70(s,1H),6.66-6.32(m,2H),6.16-5.96(m,1H),5.67-5.31(m,2H),4.73-4.40(m,1H),4.18-3.73(m,2H),3.70-3.43(m,2H),3.32(s,3H),2.75-2.58(m,1H),2.50(s,3H),2.38-2.12(m,1H)。
实施例100：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002661
在室温下向1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-碘吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.50g，1.17mmol)、5-氯-6-乙炔基-2-甲基-3H-1,3-苯并二唑(0.22g，1.17mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(82.14mg，0.12mmol)和CuI(44.58mg，0.23mmol)的DMF(1.50mL)中的搅拌混合物中滴加入TEA(0.35g，3.51mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌40min。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内35B至55B；210/254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.21g，36％)。C25H24ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值490.20，实测值490.05；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.66(d,J＝18.1Hz,1H),7.99-7.86(m,1H),7.81(d,J＝6.1Hz,1H),7.76-7.67(m,1H),6.97(d,J＝6.2Hz,1H),6.86-6.46(m,3H),6.17-5.96(m,1H),5.79-5.64(m,1H),5.50(s,1H),4.48(s,1H),4.10-4.01(m,1H),3.97-3.75(m,2H),3.67-3.43(m,3H),3.30(s,1H),2.55(s,1H),2.52(s,3H),2.40(s,1H)。
实施例101：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002671
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值504.18，实测值504.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),7.86(s,1H),7.38(s,1H),7.31(s,1H),6.68-6.35(m,2H),5.95(s,2H),5.84-5.69(m,1H),5.69-5.59(m,1H),4.67(s,1H),4.29-4.13(m,1H),4.13-3.95(m,1H),3.82(s,1H),3.74(s,3H),3.63-3.48(m,1H),3.41(s,3H),2.71-2.48(m,5H)。
实施例102：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002681
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮C25H24ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值523.17，实测值523.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝2.3Hz,2H),7.81(s,1H),6.97-5.96(m,3H),5.80-5.50(m,2H),4.73-4.33(m,1H),4.16-3.80(m,2H),3.77(s,3H),3.67-3.45(m,2H),3.32(s,3H),2.76-2.59(m,1H),2.57(s,3H),2.39(d,J＝5.7Hz,1H)。
实施例103：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002691
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C26H25ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值522.17，实测值522.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84-7.77(m,2H),6.98(d,J＝6.1Hz,1H),6.83-6.46(m,3H),6.16(dd,J＝16.8,3.1Hz,1H),5.69-5.65(m,1H),5.50(d,J＝7.8Hz,1H),4.69-4.39(m,1H),4.16-3.75(m,5H),3.68-3.43(m,2H),3.32(s,3H),2.77-2.61(m,1H),2.57(s,3H),2.43-2.39(m,1H)。
实施例104：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002692
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H22ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值509.15，实测值509.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝5.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.38(s,1H),6.51-6.37(m,2H),6.32-5.95(m,1H),5.92-5.80(m,1H),5.78-5.68(m,1H),4.77-4.46(m,1H),4.24-3.98(m,2H),3.89(s,3H),3.87-3.80(m,1H),3.59-3.49(m,1H),3.42(s,3H),3.05-2.78(m,1H),2.57-2.45(m,1H)。
实施例105：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002701
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H23ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值508.16，实测值508.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95-7.83(m,2H),7.39-7.33(m,1H),6.76-6.68(m,1H),6.52-6.38(m,2H),5.79-5.69(m,3H),5.60-5.24(m,1H),4.71-4.46(m,1H),4.19-3.99(m,2H),3.95-3.90(m,1H),3.88(s,3H),3.58-3.47(m,1H),3.43(s,3H),3.08-2.68(m,1H),2.57-2.40(m,1H)。
实施例106：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002711
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-4-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H23ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值508.16，实测值508.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),7.91(s,1H),7.34(d,J＝1.6Hz,1H),6.70-6.31(m,2H),5.91(s,2H),5.82-5.69(m,1H),5.70-5.55(m,1H),4.71-4.39(m,1H),4.30-4.17(m,1H),4.06(d,J＝7.2Hz,1H),3.87(s,3H),3.85-3.79(m,1H),3.61-3.49(m,1H),3.41(s,3H),2.64-2.53(m,2H)。
实施例107：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002712
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(4,6-二氟-2-甲基-1H-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H23F2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值492.19；实测值492.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.31(s,1H),7.35(s,1H),7.13(s,1H),6.43(d,J＝8.7Hz,3H),5.79-5.52(m,2H),4.69(s,1H),4.28-4.19(m,1H),4.09(s,1H),3.90-3.82(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.42(s,3H),2.69(s,3H),2.57(m,2H)。
实施例108：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002721
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H25FN8O2[M+H]-的MS ESI计算值501.22，实测值501.30；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),8.09(s,2H),7.48(s,1H),6.53-6.38(m,2H),6.19(s,2H),5.90-5.82(m,1H),5.79-5.65(m,1H),4.68(s,1H),4.22-4.00(m,2H),3.86-3.82(m,1H),3.57-3.51(m,1H),3.42(s,3H),2.90-2.73(m,1H),2.52-2.49(m,1H),1.24(d,J＝6.6Hz,2H),1.11-1.07(m,2H)。
实施例109：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002731
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C27H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值500.22，实测值500.30；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.09-7.79(m,3H),7.39-7.31(m,1H),6.80-6.63(m,1H),6.49-6.37(m,2H),5.89-5.63(m,3H),5.59-5.22(m,1H),4.74-4.44(m,1H),4.21-3.99(m,2H),3.96-3.82(m,1H),3.62-3.45(m,1H),3.43(s,3H),3.41-3.35(m,1H),2.87-2.65(m,1H),2.57-2.32(m,1H),1.27-1.13(m,2H),1.13-0.93(m,2H)。
实施例110：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002732
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C27H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值500.22，实测值500.15；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.35(s,1H),7.96(s,1H),7.50-7.16(m,3H),6.69-6.32(m,2H),5.93(s,2H),5.83-5.68(m,1H),5.68-5.49(m,1H),4.74-4.34(m,1H),4.27-4.01(m,1H),3.88-3.46(m,3H),3.41(s,4H),2.57(s,2H),1.30-1.12(m,2H),1.08(s,2H)。
实施例112：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-(苯并[d]噻唑-5-基乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002741
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-(苯并[d]噻唑-5-基乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C23H21N7O2S[M+H]+的MS ESI计算值460.15，实测值460.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),8.56-8.51(m,1H),8.31-8.24(m,2H),7.80(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.69-6.64(m,1H),6.17-6.10(m,1H),5.75-5.57(m,2H),4.54-4.45(m,1H),4.24-3.75(m,2H),3.70-3.42(m,2H),3.33(s,3H),2.74-2.56(m,1H),2.45-2.34(m,1H)。
实施例113：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002751
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氯-4-氟-1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮C26H25ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值522.17，实测值522.20；H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(d,J＝4.1Hz,1H),7.89(d,J＝22.0Hz,1H),7.76(s,1H),6.76(dd,J＝16.7,10.3Hz,1H),6.57(dd,J＝16.7,10.3Hz,1H),6.19-6.17(m,1H),5.80-5.64(m,1H),5.52-5.48(m,1H),4.66-4.38(m,1H),4.14-3.80(m,2H),3.76(s,3H),3.66-3.40(m,2H),3.32(s,3H),2.72-2.60(m,1H),2.56(s,3H),2.37-2.33(m,1H)。
实施例114：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-(2-[[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基]乙炔基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002761
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-(2-[[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基]乙炔基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C22H21N9O2[M+H]+的MSESI计算值444.18，实测值444.30；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.09-9.01(m,1H),8.63(s,1H),8.40(s,1H),8.31(d,J＝1.8Hz,1H),7.50(dd,J＝7.1,1.7Hz,1H),6.77-6.58(m,1H),6.25-6.11(m,1H),5.77-5.59(m,2H),4.62-4.59(m,1H),4.12-3.83(m,2H),3.64-3.42(m,2H),3.32-3.29(m,3H),2.75-2.52(m,2H)。
实施例115：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1,3-苯并噁唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002771
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1,3-苯并噁唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮C23H21N7O3[M+H]+的MS ESI计算值444.20，实测值444.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(d,J＝5.3Hz,1H),8.20(s,1H),8.08-8.05(m,1H),7.66-6.96(m,2H),6.73-6.35(m,2H),5.96(s,2H),5.91-5.68(m,2H),4.79-4.46(m,1H),4.23-3.95(m,2H),3.91-3.49(m,2H),3.42(s,3H),2.89-2.66(m,1H),2.51-2.32(m,1H)。
实施例116：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002781
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H24ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值523.17，实测值523.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝5.6Hz,1H),7.99(d,J＝2.0Hz,1H),7.38(d,J＝2.4Hz,1H),6.67-6.45(m,1H),6.46-6.09(m,2H),5.92-5.79(m,1H),5.78-5.67(m,1H),4.75-4.46(m,1H),4.30-3.97(m,4H),3.88-3.79(m,1H),3.59-3.49(m,1H),3.42(s,3H),3.07-2.76(m,1H),2.56-2.45(m,1H),1.60(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例117：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002791
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H25ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值522.17，实测值522.30；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(d,J＝2.0Hz,1H),7.91-7.86(m,1H),7.37(d,J＝2.8Hz,1H),6.76-6.68(m,1H),6.49-6.38(m,2H),5.82-5.69(m,3H),5.59-5.46(m,1H),4.71-4.45(m,1H),4.28-4.21(m,2H),4.14(d,J＝8.4Hz,2H),4.07-3.88(m,1H),3.58-3.47(m,1H),3.43(s,3H),3.06-2.71(m,1H),2.57-2.40(m,1H),1.59(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例118：1-1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002792
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-乙基-4-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H25ClFN7O2[M+H]+的MS ESI计算值522.17，实测值522.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),7.96(s,1H),7.35(s,2H),6.71-6.37(m,2H),6.00(s,2H),5.81-5.56(m,2H),4.74-4.37(m,1H),4.29-4.18(m,3H),4.10-4.03(m,1H),3.87-3.77(m,1H),3.61-3.49(m,1H),3.41(s,3H),2.64-2.54(m,2H),1.59(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例119：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1,3-苯并噁唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002801
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氟-1,3-苯并噁唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H20FN7O3[M+H]+的MS ESI计算值462.46，实测值462.16；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(d,J＝4Hz,1H),8.18(s,1H),8.04(t,J＝24Hz,1H),7.46(d,J＝8Hz,1H),6.60-6.42(m,2H),6.10(s,2H),5.88-5.83(m,1H),5.76-5.70(m,1H),4.70-4.52(m,1H),4.19-4.03(m,2H),3.87-3.84(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.42(s,3H),2.95-2.77(m,1H),2.54-2.49(m,1H)。
实施例120：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002811
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C24H22F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值493.18；实测值493.20；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.51-8.16(m,2H),8.03(d,J＝5.2Hz,1H),6.35-6.81(m,1H),6.17(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.83-5.49(m,2H),4.55(d,J＝40.2Hz,1H),4.27-3.75(m,5H),3.70-3.41(m,2H),3.34(s,3H),2.85-2.56(m,1H),2.42(s,1H)。
实施例121：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002821
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H22ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值509.15，实测值509.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(d,J＝5.3Hz,1H),7.98-7.91(m,2H),6.70-6.36(m,2H),6.20-6.10(m,2H),5.90-5.70(m,2H),4.42-4.00(m,6H),3.87-3.83(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.42(s,3H),3.12-2.70(m,1H),2.53-2.48(m,1H)。
实施例122：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002831
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H24F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值507.52；实测值507.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),7.67(d,J＝4Hz,1H),6.60-6.42(m,2H),6.09(s,2H),5.86-5.69(m,2H),4.67-4.52(m,1H),4.19-4.03(m,2H),3.97(s,3H),3.87-3.82(m,1H),3.57-3.53(m,1H),3.42(s,3H),2.96-2.62(m,1H),2.62(s,3H),2.54-2.47(m,1H)。
实施例123：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002841
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H24F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值507.20；实测值507.30；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(d,J＝5.5Hz,1H),7.92(s,1H),7.80(d,J＝5.3Hz,1H),6.48-6.35(m,2H),6.09(s,2H),5.90-5.77(m,1H),5.71-5.70(m,1H),4.70-4.63(m,1H),4.39-4.38(m,2H),4.14-4.11(m,1H),4.10-3.95(m,1H),3.83-3.79(m,1H),3.57-3.48(m,1H),3.40(s,3H),2.79-2.78(m,1H),2.49-2.48(m,1H),1.63-1.55(m,3H)。
实施例124：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002851
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C23H21FN8O2[M+H]+的MSESI计算值461.18，实测值461.15；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.94(d,J＝5.1Hz,1H),8.36-8.23(m,2H),8.07(s,1H),7.80(s,1H),6.51-6.87(m,1H),6.10-6.23(m,1H),5.78-5.55(m,2H),4.55(d,J＝40.6Hz,1H),4.18-3.77(m,2H),3.72-3.45(m,2H),3.33(s,3H),2.79-2.54(m,1H),2.47-2.35(m,1H)。
实施例125：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002861
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮C25H24ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值523.17，实测值523.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.4Hz,1H),7.78(d,J＝6.1Hz,1H),6.47-6.34(m,2H),6.20(s,2H),5.88-5.83(m,1H),5.72-5.67(m,1H),4.66-4.56(m,1H),4.20-4.04(m,2H),3.95(s,3H),3.85-3.82(m,1H),3.56-3.51(m,1H),3.40(s,3H),3.02-2.77(m,1H),2.61(s,3H),2.54-2.40(m,1H)。
实施例126：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002862
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H25ClN8O2[M+H]+的MS ESI计算值517.18，实测值517.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.8Hz,1H),8.09(d,J＝7.0Hz,1H),7.99(d,J＝2.1Hz,1H),7.68(d,J＝2.0Hz,1H),6.49-6.35(m,2H),6.18(s,2H),5.85-5.83(m,1H),5.72-5.70(m,1H),4.74-4.37(m,1H),4.20-4.10(m,1H),4.12-3.96(m,1H),3.86-3.82(m,1H),3.55-3.54(m,1H),3.40(s,3H),3.39-3.37(m,1H),2.83-2.80(m,1H),2.50-2.48(m,1H),1.28-1.19(m,2H),1.19-1.03(m,2H)。
实施例127：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002871
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-5-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C27H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值516.18，实测值516.20；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.21(s,1H),8.01(s,1H),7.91-7.78(m,2H),6.83-6.54(m,4H),6.24-6.16(m,1H),5.75-5.68(m,1H),5.59-5.45(m,1H),4.72-4.36(m,1H),4.18-3.77(m,1H),3.70-3.41(m,3H),3.34(s,3H),2.76-2.55(m,1H),2.45-2.30(m,1H),1.14-1.08(m,4H)。
实施例128：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002881
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H24ClFN8O2[M+H]+的MS ESI计算值523.17，实测值523.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.31(s,1H),8.10(s,1H),6.65(m,1H),6.23-6.10(m,1H),5.78-5.57(m,2H),4.53-4.45(m,1H),4.39-4.31(m,2H),4.12-4.05(m,1H),4.03-3.91(m,1H),3.81(m,1H),3.70-3.58(m,1H),3.48(d,J＝4.8Hz,1H),3.32(d,J＝5.3Hz,3H),2.73-2.54(m,1H),2.34(t,J＝2.0Hz,1H),1.45(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例129：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002891
1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H23ClF2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值540.96；实测值540.16；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41-8.39(m,1H),8.03-8.02(m,1H),7.73(s,1H),7.45-7.30(m,1H),6.60-6.34(m,4H),5.89-5.85(m,1H),5.76-5.70(m,1H),4.7-4.53(m,1H),4.19-4.04(m,2H),3.86-3.83(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.42(s,3H),2.86-2.78(m,1H),2.75(s,3H),2.53-2.49(m,1H)。
实施例130：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002901
1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-3-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H24ClF2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值540.16；实测值540.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝4Hz,1H),7.90(d,J＝8Hz,1H),7.72(s,1H),7.49(s,1H),6.75(d,J＝8Hz,1H),6.57-6.43(m,2H),5.87-5.71(m,3H),5.56-5.35(m,1H),4.68-4.52(m,1H),4.19-3.91(m,3H),3.57-3.43(m,4H),2.83-2.75(m,4H),2.49-2.42(m,1H)。
实施例131：1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002902
1-[(2R,4S)-4-(4-氨基-5-{2-[6-氯-1-(二氟甲基)-2-甲基-1,3-苯并二唑-5-基]乙炔基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C26H24ClF2N7O2[M+H]+的MS ESI计算值540.16；实测值540.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30(d,J＝12Hz,1H),7.87(d,J＝4Hz,1H),7.67(s,1H),7.43-7.33(m,1H),6.57-6.39(m,1H),6.20(s,2H),5.79-5.57(m,2H),4.68-4.21(m,1H),4.21-4.19(m,1H),4.10-4.06(s,1H),3.84-3.80(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.42(s,3H),2.72(s,3H),2.58-2.51(m,2H)。
实施例132：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002911
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H21ClN8O[M+H]+的MS ESI计算值461.15，实测值461.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.57-7.87(m,5H),6.62-6.32(m,1H),6.17-5.86(m,1H),5.69-5.56(m,1H),5.51-5.21(m,1H),4.39-4.32(m,2H),4.18-3.52(m,4H),2.47-2.32(m,2H),1.41-1.20(m,3H)。
实施例133：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002912
(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C24H22ClN7O[M+H]+的ESI计算值460.16，实测值460.25；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.13(s,1H),8.04(s,1H),7.81(dd,J＝6.1,1.2Hz,1H),6.97(dd,J＝7.2,6.1Hz,1H),6.74-6.46(m,3H),6.13-6.27(m,1H),5.63-5.78(m,1H),5.53-5.34(m,1H),4.27-4.39(m,2H),4.19-3.55(m,4H),2.30-2.47(m,2H),1.36-1.48(m,3H)。
实施例134：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(2H3)甲氧基甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002921
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(2H3)甲氧基甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H19F2N8O2[M+H]+的MS ESI计算值496.20；实测值496.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),7.94(s,1H),7.10-7.04(m,1H),6.49-6.37(m,2H),6.25(brs,2H),5.92-5.70(m,2H),4.74-4.65(m,1H),4.21-4.05(m,2H),3.89-3.82(m,4H),3.55-3.49(m,1H),2.89-2.76(m,1H),2.50-2.48(m,1H)。
实施例135：1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(2H3)甲氧基甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002931
1-[(2R,4S)-4-[4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-2-[(2H3)甲氧基甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H22D3ClN8O2[M+H]+的MS ESI计算值508.20，实测值508.25；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.46(s,1H),8.31(d,J＝1.8Hz,1H),8.21(s,1H),8.04(s,1H),6.81-6.55(m,2H),6.21-6.16(m,1H),5.81-5.52(m,2H),4.61-4.48(m,1H),4.34-4.29(m,2H),4.17-3.77(m,2H),3.69-3.43(m,2H),2.76-2.57(m,1H),2.46-2.31(m,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例136：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-7-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002932
(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-7-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮C24H21ClFN7O[M+H]+的MS ESI计算值478.15，实测值478.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.05(s,1H),7.81(d,J＝6.1Hz,1H),6.98(t,J＝6.6Hz,1H),6.67-6.63(m,1H),6.51(s,2H),6.20-6.17(m,1H),5.78-5.70(m,1H),5.49-5.44(m,1H),4.47-4.40(m,2H),4.17-3.84(m,2H),3.82-3.53(m,2H),2.46-2.41(m,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)
实施例137：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002941
(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C23H20ClN7O[M+H]+的MS ESI计算值446.14，实测值446.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.12(s,1H),7.98(s,1H),7.81(d,J＝6.1Hz,1H),6.97(dd,J＝7.1,6.2Hz,1H),6.76-6.38(m,3H),6.20-6.17(m,1H),5.79-5.70(m,1H),5.44-5.34(m,1H),4.19-3.88(m,2H),3.79(d,J＝4.7Hz,2H),3.30(s,3H),2.46-2.42(m,2H)。
实施例138：1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002951
1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C27H26ClN7O2[M+H]+的MS ESI计算值516.18，518.18，实测值516.05，518.05；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(d,J＝5.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.79-7.70(m,1H),7.71(s,1H),6.78(d,J＝6.4Hz,1H),6.64-6.39(m,2H),5.79-5.69(m,1H),5.59-5.31(m,1H),4.70-4.48(m,1H),4.18-4.02(m,2H),3.95-3.92(m,1H),3.60-3.38(m,5H),3.02-2.72(m,1H),2.59-2.41(m,1H),1.31-1.20(m,2H),1.13-1.06(m,2H)。
实施例139：1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-[(二氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002961
1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(4,6-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-[(二氟甲氧基)甲基]吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H20F4N8O2[M+H]+的MS ESI计算值529.16；实测值529.15；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),8.29(d,J＝1.6Hz,1H),7.64(d,J＝9.1Hz,1H),7.04-6.67(m,1H),6.62-6.45(m,1H),6.16-6.11(m,1H),5.7-5.52(m,2H),4.63-4.45(m,1H),4.25-4.09(m,1H),4.09-3.90(m,3H),3.85(s,3H),2.86-2.57(m,1H),2.45-2.31(m,1H)。
实施例140：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002971
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C22H19FN8O[M+H]+的MS ESI计算值431.17，实测值431.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝9.5Hz,2H),8.16(dd,J＝6.3,2.0Hz,1H),7.72(d,J＝9.8Hz,1H),6.65-6.56(m,1H),6.19-6.15(m,1H),5.72-5.67(m,1H),5.63-5.41(m,1H),4.24-3.78(m,6H),3.77-3.55(m,1H),2.41-2.30(m,2H)。
实施例141：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002981
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H20FN7O[M+H]+的MS ESI计算值430.17，实测值430.05；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),8.07(dd,J＝6.4,2.1Hz,1H),7.77(dd,J＝35.8,7.9Hz,2H),6.97-6.92(m,1H),6.78-6.40(m,3H),6.22-6.13(m,1H),5.73-5.68(m,1H),5.56-5.33(m,1H),4.14-4.01(m,1H),3.98-3.55(m,6H),2.48-2.25(m,2H)。
实施例142：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002982
(S)-1-(3-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C23H20FN7O[M+H]+的MS ESI计算值430.17，实测值430.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),8.19(d,J＝1.3Hz,1H),7.92(dd,J＝6.4,3.4Hz,1H),7.77(d,J＝16.6Hz,1H),7.66(d,J＝9.8Hz,1H),6.53-6.72(m,2H),6.13-6.23(m,1H),5.65-5.77(m,1H),5.24-5.41(m,1H),4.18-3.86(m,2H),3.84(s,3H),3.80-3.66(m,2H),3.48-3.59(m,1H),2.49-2.30(m,2H)。
实施例143：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550002991
(S)-1-(3-(4-氨基-5-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C24H22ClN7O[M+H]+的MS ESI计算值460.16，实测值460.25；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.13(s,1H),8.04(s,1H),7.81(dd,J＝6.1,1.2Hz,1H),6.97(dd,J＝7.2,6.1Hz,1H),6.74-6.46(m,3H),6.13-6.27(m,1H),5.63-5.78(m,1H),5.53-5.34(m,1H),4.27-4.39(m,2H),4.19-3.55(m,4H),2.30-2.47(m,2H),1.36-1.48(m,3H)。
实施例144：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003001
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H20ClFN8O[M+H]+的MS ESI计算值479.14，实测值479.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝4Hz,1H),7.97(d,J＝4Hz,2H),6.57-6.42(m,2H),6.17(s,2H),5.75-5.71(m,1H),5.69-5.53(m,1H),4.42(q,J＝48Hz,2H),4.15-4.01(m,3H),3.82-3.74(m,1H),2.71-2.63(m,1H),2.56-2.45(m,1H),1.60(t,J＝16Hz,3H)。
实施例145：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003002
(S)-1-(3-(4-氨基-3-((6-氯-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C22H18ClFN8O[M+H]+的MS ESI计算值465.13，实测值465.25；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.30(d,J＝0.9Hz,1H),8.12(s,1H),6.63-6.61(m,1H),6.17-6.04(m,1H),5.86-5.39(m,2H),4.35-3.40(m,7H),2.38-2.31(m,2H)。
实施例146：(S)-1-(3-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003011
(S)-1-(3-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C24H21FN8O[M+H]+的MS ESI计算值457.18，实测值457.25；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.30(s,1H),8.16(dd,J＝6.3,2.0Hz,1H),7.66(d,J＝9.5Hz,1H),6.63-6.58(m,1H),6.19-6.13(m,1H),5.78-5.35(m,2H),4.03-3.77(m,2H),3.76-3.46(m,2H),2.54(s,1H),2.40-2.36(m,2H),1.09-1.03(m,4H)。
实施例147：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003012
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C22H19ClN8O[M+H]+的MS ESI计算值447.14，实测值447.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.37(d,J＝4Hz,1H),8.14(s,1H),7.95(s,1H),7.53(s,1H),6.57-6.40(m,2H),6.40-5.75(m,2H),5.75-5.68(m,1H),5.68-5.53(m,1H),4.15-4.00(m,3H),3.87(s,3H),3.83-3.73(m,1H),2.74-2.63(m,1H),2.54-2.45(m,1H)。
实施例148：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003021
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H19ClFN7O[M+H]+的MS ESI计算值464.13，实测值464.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.03(s,1H),7.83(m,1H),6.99(m,1H),6.75 -6.50(m,3H),6.23-6.11(m,1H),5.71(m,1H),5.45(m,1H),4.16(m,1H),4.02(d,J＝1.4Hz,3H),3.93-3.86(m,1H),3.82-3.47(m,2H),2.49-2.26(m,2H)。
实施例149：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003031
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C25H22FN7O[M+H]+的MS ESI计算值456.19，实测值456.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),8.08(s,1H),7.81-7.79(m,1H),7.67-7.62(m,1H),7.02-6.95(m,1H),6.74-6.44(m,3H),6.18(m,1H),5.70(m,1H),5.54-5.33(m,1H),4.14-4.05(m,1H),4.00-3.46(m,5H),2.44-2.27(m,1H),1.18-0.96(m,4H)。
实施例150：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003032
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H22FN7O[M+H]+的MS ESI计算值444.19，实测值444.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),8.07(dd,J＝6.4,2.2Hz,1H),7.80(dd,J＝10.7,8.0Hz,2H),6.97-4.94(m,1H),6.77-6.40(m,3H),6.23-6.16(m,1H),5.76-5.58(m,1H),5.53-5.35(m,1H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),4.17-3.54(m,4H),2.46-2.26(m,2H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例151：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003041
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-甲基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.3s(s,1H),8.29(s,1H),8.14(d,J＝6.4Hz,1H),7.70(d,J＝12.0Hz,1H),6.51-6.73(m,1H),6.11-6.20(m,1H),5.57-5.73(m,2H),4.38-4.54(m,1H),3.96-4.16(m,1H),3.90(d,J＝6.4Hz,1H),3.84(s,3H),2.67-2.75(m,1H),2.10-2.22(m,1H)。1.28-1.30(m，3H)。[M+H]计算值：445.2；实测值，445.2
实施例152：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003042
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H21FN8O[M+H]+的MS ESI计算值445.18，实测值445.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.42(s,1H),8.31(s,1H),8.16(dd,J＝6.4,2.2Hz,1H),7.78(d,J＝10.0Hz,1H),6.65-6.59(m,1H),6.19-6.11(m,1H),5.80-5.40(m,2H),4.30-4.26(m,2H),4.18-3.61(m,4H),2.41-2.35(m,2H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例153：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003051
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H20F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值463.17；实测值463.15；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.27-8.22(m,2H),7.76(s,1H),6.66-6.56(m,1H),6.31-6.25(m,1H),5.77(s,1H),5.55(s,1H),4.45(m,2H),4.28-3.47(m,4H),2.55(m,2H),1.55(m,3H)。
实施例154：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003061
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C22H18F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值449.16；实测值449.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(d,J＝18.6Hz,2H),8.01(s,1H),6.66-6.61(m,1H),6.20-6.16(m,1H),5.78-5.40(m,2H),4.19-3.53(m,7H),2.49-2.28(m,2H)。
实施例155：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003062
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H21F2N7O[M+H]+的MS ESI计算值462.18；实测值462.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),7.97(s,1H),7.02(s,1H),6.89-6.26(m,3H),6.19-6.11(m,1H),5.71-5.65(m,1H),5.59-5.31(m,1H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),4.23-3.52(m,4H),2.40-2.35(m,2H),1.47(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例156：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003071
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H19F2N7O[M+H]+的MS ESI计算值448.16；实测值448.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),7.93-7.79(m,2H),6.98-6.95(m,1H),6.68-6.58(m,1H),6.47(s,2H),6.21-6.13(m,1H),5.73-5.64(m,1H),5.56-5.37(m,1H),4.19-3.55(m,7H),2.50-2.33(m,2H)。
实施例157：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003072
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C25H21F2N9O[M+H]+的MSESI计算值502.18；实测值502.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(s,1H),7.92(s,1H),6.45-6.39(m,2H),6.19(s,2H),5.80-5.70(m,2H),4.80-4.75(m,1H),4.46-4.38(m,2H),4.28-4.16(m,2H),3.32-3.28(m,1H),3.03-2.96(m,1H),2.85-2.80(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.61-1.59(m,3H)。
实施例158：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003081
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C24H19F2N9O[M+H]+的MSESI计算值488.17；实测值488.10；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝11.2Hz,2H),8.02(dd,J＝5.3,1.4Hz,1H),6.90-6.54(m,1H),6.20(dd,J＝16.7,2.3Hz,1H),5.84-5.60(m,2H),4.69-4.62(m,1H),4.25-4.08(m,1H),4.02-3.96(m,3H),3.21-3.28(m,1H),3.03-2.95(m,1H),2.79-2.71(m,1H),2.42-2.37(m,2H)。
实施例159：2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((6,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈
Figure BDA0004113375550003091
2-((2R,4S)-1-丙烯酰基-4-(4-氨基-3-((6,7-二氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)吡咯烷-2-基)乙腈。C25H20F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值487.17；实测值487.15；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),7.99-7.90(m,1H),7.84(d,J＝6.1Hz,1H),6.99(d,J＝6.1Hz,1H),6.69-6.41(m,3H),6.20(dd,J＝16.6,2.4Hz,1H),5.82-5.53(m,2H),4.55(s,1H),4.14-4.01(m,1H),4.02-3.95(m,4H),3.22-2.97(m,2H),2.81-2.66(m,1H),2.44-2.25(m,1H)。
实施例160：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003092
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-乙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C26H22F2N8O[M+H]+的MSESI计算值501.19；实测值501.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(s,1H),7.87(d,J＝8Hz,1H),7.80(d,J＝8Hz,1H),6.75(d,J＝8Hz,1H),6.43-6.40(m,2H),6.09(s,2H),5.77(dd,J＝4,4Hz,1H),5.54-5.51(m,1H),4.76(s,1H),4.42(q,J＝60Hz,2H),4.28-4.23(m,1H),4.14-4.09(m,1H),3.47-3.41(m,1H),3.00-2.97(m,1H),2.73-2.68(m,1H),2.53-2.50(m,1H),1.59(t,J＝32Hz,3H)。
实施例161：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003101
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C24H19ClFN9O[M+H]+的MSESI计算值504.14，506.14，实测值504.10，506.10；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),7.94(d,J＝12.7Hz,2H),6.42(d,J＝6.1Hz,2H),6.25(s,2H),5.76-5.68(m,2H),4.80(d,J＝7.0Hz,1H),4.31-4.19(m,2H),4.08-4.01(m,3H),3.34-3.26(m,1H),3.06-3.00(m,1H),2.86-2.80(m,1H),2.58-2.50(m,1H)。
实施例162：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003111
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C26H22ClFN8O[M+H]+的MSESI计算值517.16，实测值517.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94-7.89(m,3H),6.76(d,J＝8Hz,1H),6.48-6.42(m,2H),5.97(s,2H),5.79-5.71(m,1H),5.55-5.45(m,1H),4.78-7.72(m,2H),4.29-4.15(m,2H),3.45-3.38(m,1H),3.05-2.98(m,1H),2.83-2.71(m,1H),2.56-2.50(m,1H),1.62-1.59(m,3H),1.28-1.22(m,1H)。
实施例163：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003112
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.40(s,1H),8.29(s,1H),8.14(d,J＝12.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),6.78-6.51(m,1H),6.16(t,J＝13.2Hz,1H),5.76-5.52(m,2H),4.57-4.37(m,3H),4.19-3.87(m,2H),2.79-2.68(m,1H),2.21-2.09(m,1H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H),1.28-1.30(m,3H)。[M+H]计算值：455.2；实测值为459.2。
实施例164：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003121
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.39(s,1H),8.34(s,1H),8.19(s,1H),7.98(s,1H),7.93-7.29(m,2H),6.75-6.50(m,1H),6.10(t,J＝13.2Hz,1H),5.74-5.57(m,2H),4.58-4.35(m,1H),4.10-3.90(m,2H),3.86(s,3H),2.81-2.64(m,1H),2.30-2.09(m,1H),1.28-1.30(m,3H)。[M+H]计算值：461.2；实测值：461.2。
实施例165：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003131
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.33(s,1H),8.05(d,J＝6.0Hz,1H),7.80(s,1H),7.71(d,J＝12.0Hz,1H),7.04-7.02(m,1H),6.72-6.47(m,3H),6.11-6.20(m,1H),5.73-5.62(m,1H),5.52(t,J＝6.8Hz,1H),4.53-4.40(m,1H),4.15-3.81(m,5H),2.75-2.60(m,1H),2.24-2.08(m,1H),1.31-1.29(m,3H)。[M+H]计算值：444.1；实测值：444.1。
实施例166：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003132
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.48(s,1H),8.04-8.08(m,1H),7.81-7.69(m,2H),7.07-7.02(m,1H),6.73-6.42(m,3H),6.16(t,J＝13.2Hz,1H),5.78-5.71(m,1H),5.60-5.49(m,1H),4.58-4.49(m,1H),4.35-4.32(m,2H),4.22-3.78(m,2H),2.80-2.70(m,1H),2.20-2.06(m,1H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H),1.31-1.30(m,3H)。[M+H]计算值：458.2；实测值：458.2。
实施例167：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003141
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.36(s,1H),8.11(s,1H),7.98(s,1H),7.81(d,J＝6.4Hz,1H),7.05-7.03(m,1H),6.73-6.53(m,3H),6.17(t,J＝16.4Hz,1H),5.68(dd,J＝10.4,29.6Hz,1H),5.57-5.51(m,1H),4.55-4.40(m,1H),4.18-3.78(m,5H),2.76-2.59(m,1H),2.33-2.09(m,1H),1.32-1.27(m,3H)。[M+H]计算值：460.2；实测值：460.2。
实施例168：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003142
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.50(br s,1H),8.30-8.22(m,3H),8.05(s,1H),6.73-6.51(m,2H),6.21-6.11(m,1H),5.73-5.57(m,2H),4.54-4.37(m,1H),4.34-4.29(m,2H),4.17-3.97(m,1H),3.91(d,J＝7.2Hz,1H),2.72-2.62(m,1H),2.26-2.10(m,1H),1.41(t,J＝7.6Hz,3H)。1.31-1.28(m，3H)。[M+H]计算值：475.2；实测值：475.2。
实施例169：1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003151
1-((2S,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.46(br s,1H),8.12(s,1H),8.04(s,1H),7.82(brs,1H),7.04(s,1H),6.73-6.52(m,3H),6.21-6.12(m,1H),5.73-5.62(m,1H),5.56-5.52(m,1H),4.53-4.40(m,1H),4.34-4.29(m,2H),4.18-3.80(m,2H),2.76-2.61(m,1H),2.25-2.08(m,1H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H),1.32-1.30(m,3H)。[M+H]计算值：474.2；实测值：474.2。
实施例170：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003161
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.40(s,1H),8.30(s,1H),8.15(d,J＝6.4Hz,1H),7.78(d,J＝10.0Hz,1H),6.85-6.19(m,4H),5.76-5.73(m,1H),5.63-5.58(m,1H),4.98-4.72(m,1H),4.31-4.26(m,2H)。4.13-3.80(m,2H),2.80-2.54(m,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：495.2；实测值：495.2。
实施例171：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003162
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.51(s,1H),8.07-8.05(m,1H),7.82-7.77(m,2H),6.98(d,J＝6.0Hz,1H),6.81-6.50(m,3H),6.41-6.13(m,2H),5.77-5.72(m,1H),5.50-5.47(m,1H),4.97-4.69(m,1H),4.32-4.26(m,2H),4.14-3.77(m,2H),2.80-2.54(m,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：494.2；实测值：494.2。
实施例172：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003171
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.38(s,1H),8.13(s,1H),7.98(s,1H),7.83(s,1H),7.08(d,J＝5.6Hz,1H),6.88-6.74(m,2H),6.65-6.55(m,1H),6.41-6.13(m,2H),5.77-5.73(m,1H),5.53-5.50(m,1H),4.96-4.71(m,1H),4.15-3.78(m,5H),2.81-2.57(m,2H)。[M+H]计算值：496.1；实测值：496.1。
实施例173：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003181
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-乙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C25H21ClFN9O[M+H]+的MSESI计算值518.15，实测值518.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(s,1H),7.26(d,J＝4Hz,2H),6.41-6.39(m,2H),6.15(s,2H),5.76-5.70(m,2H),4.79-4.77(m,1H),4.43-4.37(m,2H),4.25-4.19(m,2H),3.30-3.25(m,1H),3.06-2.99(m,1H),2.83-2.78(m,1H),2.62-2.51(m,1H),1.61-1.57(m,3H)。
实施例174：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003182
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-7-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C25H20ClFN8O[M+H]+的MSESI计算值503.14，505.14，实测值503.10，505.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95-7.84(m,3H),6.73(d,J＝6.2Hz,1H),6.46-6.39(m,2H),5.83(s,2H),5.77-5.74(m,1H),5.53-5.50(m,1H),4.77-4.74(m,1H),4.27-4.22(m,1H),4.20-4.13(m,1H),4.06(d,J＝1.4Hz,3H),3.45-3.40(m,1H),3.00-2.95(m,1H),2.74-2.69(m,1H),2.54-2.47(m,1H)。
实施例175：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003191
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.37(s,1H),8.30(s,1H),8.15(d,J＝5.2Hz,1H),7.67(d,J＝9.2Hz,1H),6.74-6.51(m,1H),6.21-6.11(m,1H),5.76-5.58(m,2H),4.63-4.46(m,1H),4.17-3.92(m,2H),3.55-3.50(m,1H),2.76-2.57(m,1H),2.26-2.11(m,1H),1.30-1.38(m,3H),1.14-1.03(m,4H)。C25H22F3N7O[M+H]计算值：507.2；实测值：507.2。
实施例176：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003201
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.37(s,1H),8.06(d,J＝6.4Hz,1H),7.80(d,J＝6.0Hz,1H),7.67(d,J＝9.2Hz,1H),7.04-7.02(m,1H),6.73-6.47(m,3H),6.21-6.12(m,2H),5.74-5.63(m,1H),5.55-5.50(m,1H),4.55-4.38(m,1H),4.18-3.79(m,2H),3.56-3.51(m,1H),2.78-2.58(m,1H),2.25-2.08(m,1H),1.32-1.30(m,3H),1.13-1.06(m,4H)。C25H23F3N6O[M+H]计算值：506.2；实测值为506.1。
实施例177：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003202
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.33(s,1H),8.30(s,1H),8.14(d,J＝6.4Hz,1H),7.70(d,J＝6.0Hz,1H),6.80-6.54(m,2H),6.80-6.19(m,2H),5.76-5.73(m,1H),5.62-5.58(m,1H),4.98-4.68(m,1H),4.16-4.04(m,2H),3.84(s,3H),2.79-2.54(m,2H)。[M+H]计算值：481.2；实测值，481.1。
实施例178：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003211
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.37(s,1H),8.30(s,1H),8.15(d,J＝5.6Hz,1H),7.67(d,J＝9.2Hz,1H),6.80-6.20(m,4H),5.76-5.73(m,1H),5.63-5.58(m,1H),4.75-4.68(m,1H),4.15-4.05(m,2H),3.55-3.50(m,1H),2.67-2.57(m,2H),1.14-1.03(m,4H)。C25H22F3N7O[M+H]计算值：507.2；实测值为507.1。
实施例179：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003221
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.36(s,1H),8.30(s,1H),8.20(s,1H),7.97(s,1H),6.80-6.20(m,4H),5.77-5.74(m,1H),5.62-5.60(m,1H),4.97-4.68(m,1H),4.14-3.87(m,4H),2.78-2.55(m,2H)。[M+H]计算值：497.1；实测值，497.1。
实施例180：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003222
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-乙基-6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.44(s,1H),8.30(s,1H),8.20(s,1H),8.02(s,1H),6.80-6.24(m,4H),5.75(d,J＝10.0Hz,1H),5.63-5.58(m,1H),4.96-4.68(m,1H),4.34-4.28(m,2H)。4.16-3.78(m,2H),2.81-2.56(m,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：511.1；实测值为511.2。
实施例181：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003231
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.33(s,1H),8.06-8.03(m,1H),7.80(d,J＝6.0Hz,1H),7.71(d,J＝10.0Hz,1H),6.97(d,J＝6.0Hz,1H),6.81-6.49(m,3H),6.41-6.20(m,2H),5.76-5.72(m,1H),5.50-5.47(m,1H),4.97-4.70(m,1H),4.14-3.77(m,5H),2.80-2.56(m,2H)。[M+H]计算值：480.2；实测值为480.2。
实施例182：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003241
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.39(s,1H),8.13-7.86(m,2H),7.67(d,J＝9.2Hz,1H),6.70(s,1H),6.81-6.55(m,3H),6.41-6.13(m,2H),5.77-5.73(m,1H),5.50-5.45(m,1H),4.96-4.68(m,1H),4.13-3.76(m,2H),3.55-3.50(m,1H),2.80-2.56(m,2H),1.13-1.09(m,4H)。C25H23F3N6O[M+H]计算值：506.2；实测值为506.1。
实施例183：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003242
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((6-氯-1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.44(s,1H),8.16(s,0.4H),8.11(s,1H),8.03(s,1H),7.80(d,J＝6.0Hz,1H),6.98(d,J＝6.0Hz,1H),6.81-6.54(m,3H),6.40-6.11(m,2H),5.76-5.73(m,1H),5.50-5.47(m,1H),4.98-4.70(m,1H),4.34-4.28(m,2H),4.15-4.00(m,2H),2.80-2.56(m,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。[M+H]计算值：510.2；实测值：510.2。
实施例184：1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003251
1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H20F2N8O[M+H]+的MSESI计算值463.17；实测值463.25；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.38-8.28(m,2H),8.17-7.92(m,1H),7.72-7.42(m,1H),6.62-6.42(m,1H),6.21-5.96(m,1H),5.84-5.48(m,2H),4.92-4.44(m,3H),4.09-3.94(m,2H),3.87(s,3H),2.83-2.58(m,1H),2.50-2.41(m,1H)。
实施例185：1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003261
1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1-甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H21F2N7O[M+H]+的MSESI计算值462.18；实测值462.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),8.06(d,J＝5.7Hz,1H),7.86-7.51(m,3H),7.08-6.38(m,4H),6.19(d,J＝16.6Hz,1H),5.71(t,J＝11.6Hz,1H),5.58-5.38(m,1H),4.88-4.44(m,3H),4.12(t,J＝9.1Hz,1H),3.86(s,3H),2.68(t,J＝22.4Hz,1H),2.33(s,1H)。
实施例186：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003271
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-5-((6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C24H21F2N7O[M+H]+的MS ESI计算值462.18；实测值462.15；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39-8.11(m,2H),8.01-7.55(m,3H),6.69-6.64(m,1H),6.20-6.16(m,1H),5.76-5.72(m,1H),5.49-5.46(m,1H),4.89-4.37(m,3H),4.16-4.14(m,1H),3.84(s,4H),2.81-2.58(m,1H),2.42(d,J＝7.2Hz,1H)。
实施例187：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003281
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C26H22ClN9O[M+H]+的MS ESI计算值512.16，实测值512.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(s,1H),8.08-7.96(m,2H),7.71(s,1H),6.47-6.39(m,2H),6.26(s,2H),5.75-5.46(m,2H),4.79(s,1H),4.2-4.17(m,2H),3.52-3.24(m,2H),3.05-2.96(m,1H),2.86-2.65(m,1H),2.56-2.13(m,1H),1.25-1.16(m,2H),1.14-1.06(m,2H)。
实施例188：2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈
Figure BDA0004113375550003282
2-[(2R,4S)-4-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-1-(丙-2-烯酰基)吡咯烷-2-基]乙腈。C26H23N9O[M+H]+的MS ESI计算值478.20，实测值478.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),8.06(brs,2H),7.65-7.57(m,2H),6.47-6.39(m,2H),5.97(s,2H),5.79-5.68(m,2H),4.80-4.73(m,1H),4.28-4.16(m,2H),3.50-3.34(m,1H),3.35-3.31(m,1H),3.10-3.08(m,1H),2.90-2.86(m,1H),2.61-2.54(m,1H),1.30-1.06(m,4H)。
实施例189：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003291
在室温和氮气气氛下向1-[(3S)-3-{4-氨基-3-碘吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.20g，0.52mmol)的DMF(2.00mL)搅拌溶液中加入6,7-二氟-1,2-二甲基-5-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1,3-苯并二唑(0.17g，0.63mmol)、K2CO3(0.22g，1.56mmol)、TBAI(0.29g，0.78mmol)、CuI(19.83mg，0.10mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(36.54mg，0.05mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在100℃下搅拌3.5h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物，将该粗产物通过制备型HPLC进一步纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：6min内15B至50B；210/254nm；RT：5.75min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6,7-二氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(42.30mg，17％)。C23H20F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值463.17；实测值463.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30(s,1H),7.87-7.85(m,1H),6.71-6.56(m,1H),6.21-6.15(m,1H),5.74-5.66(m,1H),5.58-5.45(m,1H),3.90-3.34(m,7H),2.55(s,3H),2.53-2.50(m,2H)。
实施例190：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003301
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-7-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H20ClFN8O[M+H]+的MS ESI计算值491.14，实测值491.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝2.9Hz,1H),7.96(d,J＝13.2Hz,2H),6.63-6.38(m,2H),6.31(brs,1H),5.82-5.50(m,2H),4.19-3.93(m,3H),3.80-3.75(m,1H),3.64-3.61(m,1H),2.60-2.55(m,2H),1.36-1.22(m,4H)。
实施例191：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003311
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氯-1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H21ClN8O[M+H]+的MS ESI计算值473.15，实测值473.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(s,1H),8.08-7.96(m,2H),7.71(s,1H),6.63-6.39(m,2H),6.28(brs,2H),5.86-5.47(m,2H),4.19-3.98(m,3H),3.88-3.71(m,1H),3.41-3.21(m,1H),2.83-2.37(m,2H),1.30-1.06(m,4H)。
实施例192：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003312
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(6-氟-1,2-二甲基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C23H21FN8O[M+H]+的MS ESI计算值445.18，实测值445.10；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),7.97(dd,J＝6.3,2.9Hz,1H),7.63(d,J＝9.9Hz,1H),6.64-6.59(m,1H),6.18-6.11(m,1H),5.70-5.62(m,1H),5.50-5.45(m,1H),4.19-3.78(m,3H),3.74(s,3H),3.70-3.57(m,1H),2.54(s,4H),2.42-2.27(m,1H)。
实施例193：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003321
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H22N8O[M+H]+的MS ESI计算值439.19，实测值439.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝1.9Hz,1H),8.06(brs,2H),7.65-7.54(m,2H),6.55-6.50(m,1H),6.48-6.37(m,1H),5.97-5.91(m,2H),5.73-5.70(m,1H),5.57-5.55(m,1H),4.19-4.07(m,3H),3.87-3.71(m,1H),3.44-3.31(m,1H),2.78-2.60(m,1H),2.55-2.41(m,1H),1.27-1.18(m,2H),1.12-1.08(m,2H)。
实施例194：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003331
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-6,7-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H20F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值475.17；实测值475.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝4.6Hz,1H),7.96(d,J＝4.2Hz,1H),7.80-7.78(m,1H),6.55-6.42(m,2H),6.06(s,2H),5.77-5.70(m,1H),5.60-5.56(m,1H),4.15-4.03(m,3H),3.81-3.76(m,1H),3.66-3.62(m,1H),2.76-2.60(m,1H),2.58-2.44(m,1H),1.28-1.18(m,4H)。
实施例195：1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003332
1-[(3S)-3-{4-氨基-3-[2-(1-环丙基-4,6-二氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮。C24H20F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值475.17；实测值475.15；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.49-8.44(s,1H),8.32-8.30(d,J＝0.9Hz,1H),7.67-7.58(m,1H),6.79-6.64(m,1H),6.20-6.18(m,1H),5.80-5.70(m,1H),5.51-5.49(s,1H),4.2-3.81(m,3H),3.73-3.51(m,2H),2.40-2.30(m,2H),1.17-1.04(m,4H)。
实施例196：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((二氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003341
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((二氟甲氧基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C26H23F3N8O2[M+H]+的MS ESI计算值537.19；实测值537.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.2Hz,1H),8.00(d,J＝5.8Hz,2H),7.35(d,J＝9.1Hz,1H),6.51-6.39(m,3H),6.33-6.10(m,2H),5.74-5.71(m,2H),4.71(d,J＝39.9Hz,1H),4.41(dd,J＝10.5,4.1Hz,1H),4.17-4.12(m,2H),4.04(dd,J＝10.2,2.8Hz,1H),3.48-3.31(m,1H),2.91(q,J＝9.3,8.8Hz,1H),2.54(d,J＝8.9Hz,1H),1.32-1.17(m,2H),1.09-1.00(m,2H)。
实施例197：1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003351
1-((2R,4S)-4-(4-氨基-3-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮。C25H22F2N8O[M+H]+的MS ESI计算值489.19；实测值489.25；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),8.19-7.92(m,2H),7.41(s,1H),6.64-6.38(m,2H),6.29(s,2H),5.86-5.62(m,2H),4.98-4.87(m,1H),4.82-4.44(m,2H),4.25-4.09(m,2H),3.56-3.32(m,1H),2.90(d,J＝12.6,8.9Hz,1H),2.66-2.45(m,1H),1.19-1.15(m,4H)。
实施例198：1-[(2R,4R)-4-{4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003361
步骤1：(2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003362
在室温下向(2R)-4-(4-氨基-5-碘咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.00g，1.97mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.79g，3.93mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.14g，0.20mmol)和CuI(74.86mg，0.39mmol)的DMF(10.00mL)搅拌混合物中滴加入TEA(0.82mL，5.90mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌1.5h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用5％的MeOH/DCM洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈黄色固体的(2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.01g，88％)。C31H29FN8O3[M+H]+的MS ESI计算值581.23，实测值581.15。
步骤2：5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-((5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺
Figure BDA0004113375550003371
在室温下向20mL小瓶中滴加入(2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.01g，1.74mmol)和TFA(6.06mL)。将反应混合物在60℃下搅拌2h。将反应混合物用饱和NaHCO3(水溶液)碱化至pH 8。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，条件如下：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，19×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：7min内10B至65B；210/254nm；RT1：6.50min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色固体状的5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-((5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.61g，79％)。C23H23FN8O[M+H]+的MS ESI计算值447.20，实测值447.10；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(d,J＝5.2Hz,2H),7.89(s,1H),7.32(d,J＝9.1Hz,1H),6.76(s,2H),3.94-3.90(m,1H),3.88(s,1H),3.69(s,2H),3.50(s,3H),3.41-3.36(m,4H),3.31-3.29(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.27-1.19(m,2H),1.09-1.05(m,2H)。
步骤3：1-((2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003381
在0℃下向5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-((5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.48g，1.09mmol)的DCM(5.00mL)搅拌溶液中滴加入DIEA(0.76mL，4.36mmol)和丙烯酰氯(3.94mL，0.98mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5min。在0℃下用MeOH(5mL)淬灭反应混合物。将所得混合物溶解于水(50mL)中并用EA(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。将残余物用硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-((2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.45g，82％)。C26H25FN8O2[M+H]+的MS ESI计算值501.21，实测值501.10。
步骤4：1-[(2R,4R)-4-{4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003391
将来自最后步骤的粗产物(1-((2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮)通过手性HPLC色谱法纯化，条件如下：柱：CHIRALPAK IF,2×25cm,5μm；流动相A：Hex:DCM＝1:1(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC,流动相B：EtOH--HPLC；流速：16mL/min；梯度：在20min内50％B至50％B；波长：220/254nm；RT1：13.11min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4R)-4-{4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(96.30mg，21％)。C26H25FN8O2[M+H]+的MS ESI计算值501.21，实测值501.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.74(s,1H),8.35(s,1H),8.09(d,J＝9.1Hz,1H),8.01(d,J＝4Hz,1H),7.64(d,J＝4Hz,1H),6.87(s,1H),6.75-6.58(m,1H),6.20-6.14(s,1H),5.70-5.67(m,1H),4.48-4.36(m,1H),4.23-4.05(m,2H),3.91-3.84(m,1H),3.55-3.45(m,2H),3.40(s,1H),2.43-2.25(m,1H),1.14-1.04(m,4H)。
实施例199：1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003401
将粗产物(1-((2R)-4-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮)通过手性HPLC色谱法纯化，条件如下：柱：CHIRALPAK IF,2×25cm,5μm；流动相A：Hex:DCM＝1:1(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC,流动相B：EtOH--HPLC；流速：16mL/min；梯度：在20min内50％B至50％B；波长：220/254nm；RT2：16.44min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(2R,4S)-4-{4-氨基-5-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.16g，36％)。C26H25FN8O2[M+H]+的MS ESI计算值501.21，实测值501.15。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75(s,1H),8.36(s,1H),8.10(d,J＝9.1Hz,1H),8.01(s,1H),7.65(d,J＝4.1Hz,1H),6.88(s,1H),6.76-6.61(m,1H),6.20-6.14(m,1H),5.72-5.68(m,1H),4.41-4.36(m,1H),4.28-4.18(m,1H),3.90-3.72(m,2H),3.56-3.49(m,1H),3.47-3.41(m,2H),3.07(s,3H),2.35-2.27(m,1H),1.15-1.04(m,4H)。
实施例200：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003411
步骤1：(S)-吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)3-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)二酯
Figure BDA0004113375550003412
在室温和氮气气氛下向(3S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(8.04g，37.35mmol)的1,4-二噁烷(80.00mL)搅拌混合物中滴加入N-羟基琥珀酰亚胺(4.30g，37.35mmol)。在室温下向上述混合物中滴加DCC(7.71g，37.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。将所得混合物过滤，用1,4-二噁烷(3×200mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈黄色油状的(S)-吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)3-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)二酯(11.00g，粗产物)。C14H20N2O6[M+H-56]+的MS ESI计算值257.13，实测值257.05；
步骤2：(S)-3-(((3-氨基-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-三嗪-6-基)甲基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003421
在0℃和空气气氛下向3-氨基-6-(氨基甲基)-4H-1,2,4-三嗪-5-酮二盐酸盐(8.02g，56.80mmol)的H2O(112.50mL)搅拌溶液中滴加入NaHCO3(6.28g，74.73mmol)的H2O(56.30mL)溶液。在室温下向上述混合物中滴加(S)-吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)3-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)二酯(11.67g，37.36mmol)的ACN(46.69mL)和THF(46.68mL)溶液。将反应混合物在室温搅拌2h。将所得混合物减压浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(8/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的(S)-3-(((3-氨基-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-三嗪-6-基)甲基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.60g，36％)。C14H22N6O4[M+H]+的MS ESI计算值339.17，实测值339.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H),8.13(t,J＝5.7Hz,1H),6.79(s,2H),4.08(d,J＝5.7Hz,2H),3.42-3.39(m,1H),3.25(t,J＝10.3Hz,1H),3.18(d,J＝4.1Hz,2H),2.98(s,1H),2.07-1.82(m,2H),1.40(s,9H).
步骤3：(S)-2-氨基-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮
Figure BDA0004113375550003422
在室温下向(S)-3-(((3-氨基-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-三嗪-6-基)甲基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.60g，10.64mmol)的ACN(36.00mL)搅拌溶液中滴加入POCl3(13.05g，85.12mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌3.5h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：MeCN水溶液(10mmol NH4HCO3)，20min内0％至20％梯度；检测器：UV 254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的(S)-2-氨基-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮(6.40g，粗产物)。C9H12N6O[M+H]+的MS ESI计算值221.11，实测值221.20。
步骤4：(S)-3-(2-氨基-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003431
在0℃和空气气氛下向(S)-2-氨基-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮(2.27g，10.31mmol)的THF(20.00mL)搅拌溶液中滴加入的NaHCO3(2.60g，30.92mmol)的水(20.00mL)溶液。3min后，在室温下向上述混合物中滴加2,5-二氧代吡咯烷-1-基碳酸苄酯(3.85g，15.47mmol)。将反应混合物在室温搅拌0.5h。将所得混合物溶解于水(30mL)中并用EA(3×80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×60mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(9/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的(S)-3-(2-氨基-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.80g，49％)。C17H18N6O3[M+H]+的MS ESI计算值355.14，实测值355.05；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.48(s,1H),7.75(d,J＝8.3Hz,1H),7.44-7.30(m,4H),5.25-5.10(m,2H),5.08-4.90(m,2H),4.13-4.02(m,1H),3.93-3.63(m,3H),3.58-3.52(m,1H),2.51-2.25(m,2H)。
步骤5：(S)-3-(2-氨基-5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003441
在室温下向(S)-3-(2-氨基-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.80g，5.08mmol)的DMF(18.00mL)搅拌溶液中滴加入NIS(2.29g，10.16mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌16h。将所得混合物溶解于水(40mL)中并用EA(3×80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×40mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色油状的(S)-3-(2-氨基-5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(3.10g，95％)。C17H17IN6O3[M+H]+的MS ESI计算值481.04，实测值481.00；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.31(s,1H),7.40-7.28(m,4H),5.12(d,J＝19.3Hz,4H),4.06-3.50(m,5H),2.39-2.32(m,3H)。
步骤6：(S)-3-(5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003442
在室温向(S)-3-(2-氨基-5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(2.30g，4.79mmol)的THF(120.00mL)搅拌溶液中滴加tBuONO(2.47g，23.94mmol)的DMF(30.00mL)溶液。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌2h。将所得混合物溶解于水(50mL)中并用EA(3×80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(4×40mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色油状的(S)-3-(5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.76g，79％)。C17H16IN5O3[M+H]+的MS ESI计算值466.03，实测值466.05；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.32(d,J＝11.8Hz,1H),7.55(d,J＝3.7Hz,1H),7.37(q,J＝12.4,8.8Hz,5H),5.17(s,2H),4.07-3.47(m,3H),2.79(s,1H),2.43(d,J＝46.4Hz,2H)。
步骤7：(S)-3-(4-氨基-5-碘咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003451
在室温下向1H-1,2,4-三唑(1.20g，17.37mmol)的吡啶(30.00mL)搅拌溶液中滴加POCl3(1.78g，11.58mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌15min。在室温下向上述混合物中滴加(S)-3-(5-碘-4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.90g，1.93mmol)的吡啶(12.00mL)溶液。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下再搅拌16h。当温度保持低于0℃时，向剧烈搅拌的POCl3(115.00mL)溶液中滴加上述反应混合物。将所得混合物用EA(3×80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×40mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的(S)-3-(4-氨基-5-碘咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.48g，53％)。C17H17IN6O2[M+H]+的MS ESI计算值465.05，实测值465.00；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(s,1H),7.42-7.31(m,5H),6.79-6.75(m,1H),5.17(s,2H),3.97(d,J＝12.0Hz,2H),3.76(t,J＝8.3Hz,2H),3.56(t,J＝9.1Hz,1H),2.39(s,2H)。
步骤8：(S)-3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯
Figure BDA0004113375550003461
在室温下向(S)-3-(4-氨基-5-碘咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.43g，0.93mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.37g，1.86mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(65.01mg，0.09mmol)和CuI(35.28mg，0.18mmol)的DMF(5.00mL)搅拌混合物中滴加TEA(0.28g，2.79mmol)。将反应混合物用氩气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体的(S)-3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.49g，99％)。C29H25FN8O2[M+H]-的MS ESI计算值537.21，实测值537.40；
步骤9：(S)-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺
Figure BDA0004113375550003471
在室温下向100mL瓶中滴加(S)-3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.49g，0.92mmol)和TFA(15.00mL)。将反应混合物在60℃和空气气氛下搅拌2h。将所得混合物减压浓缩。将残余物用饱和NaHCO3(水溶液)碱化至pH 8。将所得混合物通过反向快速色谱法纯化，条件如下：柱：C18硅胶；流动相：ACN水溶液(10mmol NH4HCO3)，20min内95％；检测器：UV254nm。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈棕色固体状的(S)-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.30g，81％)。C21H19FN8[M+H]+的MS ESI计算值403.17，实测值403.10。
步骤10：(S)-1-(3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003472
在0℃下向(S)-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)-7-(吡咯烷-3-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.25g，0.63mmol)的DCM(5.00mL)搅拌溶液中滴加DIEA(0.32g，2.52mmol)和丙烯酰氯(45.52mg，0.50mmol)。将反应混合物在0℃和空气气氛下搅拌5min。将所得混合物溶解在水(15mL)中并用CH2Cl2(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用CH2Cl2/MeOH(10/1)洗脱，得到粗产物，将该粗产物通过制备型HPLC进一步纯化，条件如下：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内20％B至40％B；波长：254nm；RT：7.2min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的(S)-1-(3-(4-氨基-5-((1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙炔基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(50.70mg，18％)。C24H21FN8O[M+H]+的MS ESI计算值457.18，实测值457.20；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),8.35(s,1H),8.08(d,J＝6.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.64(d,J＝9.5Hz,1H),6.87(s,1H),6.57-6.69(m,1H),6.09-6.33(m,1H),5.54-5.64(m,1H),4.14-3.84(m,3H),3.83-3.58(m,2H),3.48-3.57(m,1H),2.47-2.12(m,2H),1.32-1.16(m,4H)。
实施例201：1-[(3S)-3-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003481
步骤1：(3S)-3-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003491
在室温下向1-(3-氯吡嗪-2-基)甲胺盐酸盐(10.00g，55.54mmol)、DIEA(23.69g，0.17mol)、HATU(21.33g，56.10mmol)的DCM(600.00mL)搅拌混合物中分批加入(3R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(10.00g，46.45mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌16h。将所得混合物用水(100mL)淬灭并用DCM(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的(3S)-3-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(21.70g，粗产物)。C15H21ClN4O3[M+H]+的MS ESI计算值285.13，实测值285.20。
步骤2：(3S)-3-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003492
在0℃下向(3S)-3-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20.00g，58.68mmol)的DMF(20.00mL)和EA(400.00mL)搅拌溶液中滴加入POCl3(71.98g，0.47mol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌45min。将所得混合物用NaHCO3(水溶液)(100mL)稀释并用EA(3×150mL)萃取。将残余物用NaOH(水溶液)碱化至pH 9。将合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EA(1/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的(3S)-3-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(12.70g，67％)。C15H19ClN4O2[M+H]+的MS ESI计算值323.12，实测值323.00；
步骤3：(3S)-3-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003501
在室温下向(3S)-3-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(12.00g，37.17mmol)的DMF(60.00mL)搅拌溶液中滴加NIS(8.36g，37.17mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌16h。将所得混合物用水(100mL)稀释并用EA(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EA(1/1)洗脱。将含有所需产物的级分浓缩，得到呈浅黄色油状的(3S)-3-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15.00g，89％)。C15H18ClIN4O2[M+H]+的MS ESI计算值449.02，实测值448.90；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(d,J＝45.5Hz,2H),3.90-3.51(m,4H),3.46-3.42(m,1H),2.25(d,J＝35.0Hz,2H),1.42(s,9H).
步骤4：(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003511
在室温下向(3S)-3-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(8.00g，17.83mmol)的1,4-二噁烷(16.00mL)搅拌溶液中滴加NH3H2O(64.00mL)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌16h。将所得混合物溶解于水(20mL)中并用EA(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈黄色油状的(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.00g，39％)。C15H20IN5O2[M+H]+的MS ESI计算值430.07，实测值430.00；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.27(s,1H),7.09(d,J＝5.1Hz,1H),5.79(s,2H),3.96-3.81(m,1H),3.69-3.65(m,3H),3.48(q,J＝9.0Hz,1H),2.53-2.15(m,2H),1.49(s,9H).
步骤5：1-碘-3-[(3S)-吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐
Figure BDA0004113375550003512
在0℃下向(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.76mg，1.77mmol)的DCM(7.00mL)搅拌溶液中滴加HCl的EA(4M)(7.00mL，28.00mmol)溶液。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-碘-3-[(3S)-吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐(0.70g，粗产物)。C10H13ClIN5[M+H-HCl]+的MS ESI计算值330.01，实测值329.90。
步骤6：1-[(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003521
在0℃下向1-碘-3-[(3S)-吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐(0.70g，2.12mmol)的DCM(7.00mL)搅拌溶液中滴加DIEA(0.82g，6.38mmol)和丙烯酰氯(6.81mL，1.70mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在0℃下搅拌10min。用MeOH(2mL)淬灭反应。将所得混合物溶解于水(5mL)中并用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的1-[(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.40g，49％)。C13H14IN5O[M+H]+的MS ESI计算值384.02，实测值384.20。
步骤7：1-[(3S)-3-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003531
在室温下向1-[(3S)-3-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.35g，0.91mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.19g，0.91mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(64.11mg，0.09mmol)和CuI(34.79mg，0.18mmol)的DMF(7.00mL)搅拌溶液中滴加TEA(0.27g，2.73mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱，得到粗产物，将该粗产物通过反相快速色谱进一步纯化，条件如下：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内20％B至35％B；波长：254nm；RT1：7.05min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈白色固体状的1-[(3S)-3-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.14g，35％)。C25H22FN7O[M+H]+的MS ESI计算值456.19，实测值456.35；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.10-7.90(m,2H),7.36-7.31(m,1H),7.27-6.83(m,2H),6.79-6.33(m,2H),6.03(s,2H),5.78-5.67(m,1H),4.39-3.46(m,5H),3.38-3.32(m,1H),2.84-2.21(m,2H),1.33-1.11(m,2H),1.14-0.75(m,2H)。
实施例202：1-[(2R,4R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003541
将来自最后步骤的残余产物(1-[(2R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮)通过手性HPLC色谱法纯化，条件如下：柱：CHIRAL ART Cellulose-SB,2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：MeOH:EtOH＝1:1--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在16.5min内50％B至50％B；波长：220/254nm；RT2：14.52min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(56.80mg，7％)。C27H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值500.21，实测值500.40；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-7.94(m,2H),7.35(d,J＝9.1Hz,1H),7.11(d,J＝5.2Hz,1H),6.83-6.58(m,1H),6.57-6.35(m,2H),5.75(d,J＝10.1Hz,1H),4.71-4.35(m,1H),4.14-4.09(m,1H),3.77(d,J＝9.0Hz,1H),3.70-3.46(m,3H),3.41-3.39(m,1H),3.37(d,J＝5.3Hz,3H),2.81-2.52(m,2H),1.29-1.19(m,2H),1.14-1.04(m,2H)。
实施例203：1-[(2R,4S)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003551
步骤1：(2R)-4-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003552
在室温和氮气气氛下向(5R)-1-(叔丁氧基羰基)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-甲酸(5.98g，23.05mmol)、HATU(10.67g，28.05mmol)和1-(3-氯吡嗪-2-基)甲胺盐酸盐(5.00g，27.77mmol)的DCM(0.43L)搅拌混合物中滴加DIEA(11.85g，91.65mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌16h。将所得混合物用水(100mL)淬灭并用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈黄色油状的(2R)-4-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9.10g，85％)。C17H25ClN4O4[M+H]+的MS ESI计算值385.16，实测值385.30；
步骤2：(2R)-4-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷叔丁酯
Figure BDA0004113375550003561
在0℃和氮气气氛下向(2R)-4-{[(3-氯吡嗪-2-基)甲基]氨基甲酰基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9.00g，23.38mmol)的DMF(9.00mL)和EA(180.00mL)搅拌溶液中滴加入POCl3(7.17g，46.77mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌1h。将反应混合物用NaHCO3(水溶液)(100mL)稀释并用EA(4×150mL)萃取。将残余物用NaOH(水溶液)碱化至pH 10。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EA(1/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的(2R)-4-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷叔丁酯(4.00g，64％)。C17H23ClN4O3[M+H]+的MS ESI计算值367.15，实测值367.10；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.83-7.58(m,2H),7.36-7.34(m,1H),4.32-3.38(m,9H),2.65-2.26(m,2H),1.46(s,9H).
步骤3：(2R)-4-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003562
在室温下向(2R)-4-{8-氯咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷(4.00g，10.90mmol)的DMF(20.00mL)搅拌溶液中滴加NIS(2.45g，10.90mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌16h。将所得混合物用水(100mL)稀释并用EA(5×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用PE/EA(1/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的(2R)-4-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.50g，83％)。C17H22ClIN4O3[M+H]+的MS ESI计算值493.04，实测值493.15；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.39(m,1H),4.14-4.19(m,1H),3.85-3.94(m,1H),3.70(d,J＝28.0Hz,2H),3.50-3.43(m,1H),3.40(d,J＝12.2Hz,3H),2.97(s,1H),2.69-2.26(m,2H),1.49(s,9H).
步骤4：(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004113375550003571
在室温下向(2R)-4-{8-氯-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.60g，9.33mmol)的1,4-二噁烷(9.20mL)搅拌溶液中滴加NH3H2O(36.80mL，0.94mol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌16h。将所得混合物用水(20mL)稀释并用EA(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈黄色固体状的(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.70g，61％)。C17H24IN5O3[M+H]+的MS ESI计算值474.09，实测值474.20；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(d,J＝10.6Hz,1H),7.07(t,J＝4.1Hz,1H),5.84(s,2H),4.18(s,1H),3.83-3.79(m,1H),3.77-3.61(m,2H),3.51-3.41(m,2H),3.39(d,J＝14.3Hz,3H),2.65-2.19(m,2H),1.48(s,9H).
步骤5：1-碘-3-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐
Figure BDA0004113375550003581
在0℃下向(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g，2.11mmol)的DCM(10.00mL)搅拌溶液中滴加HCl(4M)的EA(10.00mL，40.00mmol)溶液。将反应混合物用氮气脱气三次并在室温下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。所需产物1-碘-3-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐(0.90g，粗产物)未经进一步纯化直接用于下一步骤。C12H17ClIN5O[M+H-HCl]+的MS ESI计算值374.04，实测值374.20。
步骤6：1-[(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003582
在0℃下向1-碘-3-[(5R)-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-胺盐酸盐(0.92g，2.45mmol)的DCM(9.18mL)搅拌溶液中滴加DIEA(0.95g，7.37mmol)和丙烯酰氯(7.87mL，1.96mmol)。将反应混合物在0℃和氮气气氛下搅拌10min。将所得混合物通过加入MeOH(2mL)淬灭并用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈浅黄色油状的1-[(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.60g，57％)。C15H18IN5O2[M+H]+的MS ESI计算值428.05，实测值428.05。
步骤7：1-[(2R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003591
在室温下向1-[(2R)-4-{8-氨基-1-碘咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.60g，1.40mmol)、1-环丙基-5-乙炔基-6-氟-1,3-苯并二唑(0.29g，1.47mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(98.57mg，0.14mmol)和CuI(53.49mg，0.28mmol)的DMF(12.00mL)搅拌混合物中滴加TEA(0.43g，4.21mmol)。将反应混合物用氮气脱气三次并在90℃下搅拌1h。将所得混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到1-[(2R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.35g，49％)。C27H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值500.21，实测值500.35。
步骤8：1-[(2R,4S)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0004113375550003601
将来自最后步骤的残余产物(1-[(2R)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮)通过手性HPLC色谱法纯化，条件如下：柱：CHIRAL ART Cellulose-SB,2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：MeOH:EtOH＝1:1--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在16.5min内50％B至50％B；波长：220/254nm；RT1：11.20min。将含有所需产物的级分合并并浓缩，得到呈灰白色固体状的1-[(2R,4S)-4-{8-氨基-1-[2-(1-环丙基-6-氟-1,3-苯并二唑-5-基)乙炔基]咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.14g，21％)。C27H26FN7O2[M+H]+的MS ESI计算值500.21，实测值500.40；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(t,J＝3.1Hz,2H),7.30(s,1H),7.27-7.12(m,2H),6.60-6.31(m,2H),6.18-5.88(m,2H),5.72-5.78(m,1H),4.65-4.36(m,1H),4.18-4.04(m,2H),3.95-3.79(m,1H),3.62-3.49(m,1H),3.47-3.32(m,4H),2.54-2.25(m,2H),1.25-0.97(m,4H)。
II.生物学评价
实施例1：FGFR2激酶方案-条件1
反应生物学热点测定平台(http://www.reactionbiology.com)用于测量如前所述的激酶/抑制剂相互作用(Anastassiadis等人，2011)。简言之，对于每个反应，将激酶和底物在含有20mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、1mM EGTA、0.02％Brij35、0.02mg/mL BSA、0.1mM Na3VO4、2mM DTT和1％DMSO的缓冲液中混合。所有化合物均为粉末形式并且新鲜溶解于DMSO中用于测定。然后使用ECHO 550纳升分配器通过声分配将化合物加入到各反应混合物中。对于人FGFR2野生型测试，使用肽底物聚[Glu:Tyr](4:1)以0.2mg/ml的浓度促进反应。对于人FGFR2(V564F)测试，使用肽底物聚[Glu:Tyr](4:1)以0.2mg/ml的浓度促进反应。所有测定的ATP浓度保持在100微摩尔。化合物以10-剂量IC50模式用3倍连续稀释进行测试。孵育20min后，以10mM的最终总浓度加入ATP(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO 63178)和从PerkinElmer(Boston,MA,02118Cat#BLU 003H250UC)购买的[g33P]ATP(比活性10microCi/微升)。将反应在室温下进行2h并点样到P81离子交换纤维素层析纸(Reaction Biology)上。将滤纸在0.75％磷酸中洗涤以除去未掺入的ATP。计算各激酶/抑制剂对相对于含载体(DMSO)激酶反应的剩余激酶活性百分比。使用Dotmatics知识解决方案研究曲线拟合(Dotmatics,Bishops Stortford,UK,CM23)计算IC50值。
实施例2：FGFR2激酶方案-条件2
反应生物学热点测定平台(http://www.reactionbiology.com)用于测量如前所述的激酶/抑制剂相互作用(Anastassiadis等人，2011)。简言之，对于每个反应，将激酶和底物在含有20mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、1mM EGTA、0.02％Brij35、0.02mg/mL BSA、0.1mM Na3VO4、2mM DTT和1％DMSO的缓冲液中混合。所有化合物均为粉末形式并且新鲜溶解于DMSO中用于测定。然后使用ECHO 550纳升分配器通过声分配将化合物加入到各反应混合物中。对于人FGFR2野生型测试，使用肽底物聚[Glu:Tyr](4:1)以0.2mg/ml的浓度促进反应。对于人FGFR2(V564F)测试，使用肽底物聚[Glu:Tyr](4:1)以0.2mg/ml的浓度促进反应。所有测定的ATP浓度保持在100微摩尔。化合物以10-剂量IC50模式用3倍连续稀释进行测试。将化合物加入到板中并将ATP直接加入到孔中。不进行预孵育，以100μm的最终总浓度向每个孔中加入ATP(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO 63178)和从PerkinElmer(Boston,MA,02118Cat#BLU 003H250UC)购买的[g33P]ATP(比活性10microCi/微升)。将反应在室温下进行2h并点样到P81离子交换纤维素层析纸(Reaction Biology)上。将滤纸在0.75％磷酸中洗涤以除去未掺入的ATP。计算各激酶/抑制剂对相对于含载体(DMSO)激酶反应的剩余激酶活性百分比。使用Dotmatics知识解决方案研究曲线拟合(Dotmatics,Bishops Stortford,UK,CM23)计算IC50值。
表3
Figure BDA0004113375550003621
Figure BDA0004113375550003631
Figure BDA0004113375550003641
Figure BDA0004113375550003651
Figure BDA0004113375550003661
Figure BDA0004113375550003671
Figure BDA0004113375550003681
注：生物化学测定IC50数据指定在以下范围内：
A:≤0.10μM C:>1.0μM至≤10μM
B:>0.10μM至≤1.0μM D:>10μM至30μM
III.药物剂型的制备
实施例1：口服胶囊
活性成分是表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。通过将1-1000mg活性成分与淀粉或其他合适的粉末共混物混合来制备口服施用的胶囊。将混合物掺入适于口服施用的口服剂量单位如硬明胶胶囊中。
实施例2：注射用溶液
活性成分是表1的化合物或其药学上可接受的盐，并且以50mg-eq/mL的浓度配制在芝麻油中的溶液。
本文描述的实施例和实施方案仅用于说明的目的，并且本领域技术人员建议的各种修改或改变将包括在本申请的精神和范围以及所附权利要求的范围内。

Claims (41)

1.一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，具有式(I)的结构：
Figure FDA0004113375540000011
其中，
X为C-H或N；
Y为C-H或N；
Z选自具有以下结构的基团：
Figure FDA0004113375540000012
t为1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、氟、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基烷基；
R4为任选取代的含氮的9或10原子杂芳基；
R选自氢、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基、任选取代的C3-C7杂环基烷基、任选取代的C2-C7烯基、-CO2R5、-CONHR5或–CON(R5)2；并且
R5各自独立地选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的C3-C7碳环基烷基、任选取代的C3-C7杂环基或任选取代的C3-C7杂环基烷基。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H且Y为C-H。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H且Y为N。
4.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N且Y为C-H。
5.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N且Y为N。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为
Figure FDA0004113375540000021
7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2为氢。
8.如权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R3为氢或氟。
9.如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2和R3为氢。
10.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为氢。
11.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C4烷基。
12.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C2烷基。
13.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1烷基。
14.如权利要求11、12或13所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的烷基被任选取代的氨基取代。
15.如权利要求14所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的氨基是二甲基氨基。
16.如权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自任选取代的苯并咪唑、任选取代的1H-吲唑、任选取代的2H-吲唑、任选取代的苯并三唑、任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。
17.如权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4选自任选取代的含氮的9或10原子杂芳基，其选自喹啉、喹喔啉、吡唑并[1,5-a]嘧啶、咪唑并[1,2-a]吡啶、吡唑并[1,5-a]吡啶、咪唑并[1,2-a]嘧啶、咪唑并[1,2-b]哒嗪或吡唑并[1,5-a]吡啶。
18.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并咪唑。
19.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的1H-吲唑。
20.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的2H-吲唑。
21.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为任选取代的苯并噁唑、任选取代的咪唑并[4,5-c]吡啶或任选取代的咪唑并[4,5-b]吡啶。
22.如权利要求16或17所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的含氮的9或10原子杂芳基任选地被烷基、环烷基或卤素取代。
23.如权利要求18所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的苯并咪唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。
24.如权利要求19所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的1H-吲唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。
25.如权利要求20所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的2H-吲唑任选地被烷基、环烷基或卤素取代。
26.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为氢。
27.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C1-C6烷基。
28.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基。
29.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7碳环基烷基。
30.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基。
31.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为任选取代的C3-C7杂环基烷基。
32.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CO2R5。
33.如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R为-CONHR5或–CON(R5)2。
34.如权利要求27所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的C1-C6烷基为被C1-C3烷氧基取代的C1-C3烷基。
35.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1-34中任一项所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
36.一种制备药物组合物的方法，所述方法包括将权利要求1-34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的载体混合。
37.如权利要求1-34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗人或动物体的方法中。
38.如权利要求1-34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗癌症或肿瘤性疾病的方法中。
39.如权利要求1-34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗癌症或肿瘤性疾病的药物中的用途。
40.一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用如权利要求1-34中任一项所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
41.一种治疗有需要的患者中的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用包含如权利要求1-34中任一项所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
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