CN116023247A - 2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents
2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116023247A CN116023247A CN202111257510.3A CN202111257510A CN116023247A CN 116023247 A CN116023247 A CN 116023247A CN 202111257510 A CN202111257510 A CN 202111257510A CN 116023247 A CN116023247 A CN 116023247A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dimethylphenyl
- methyl
- dihydroxy
- groups
- methylphenyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- -1 ketone compound Chemical class 0.000 title claims description 122
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 68
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 16
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 65
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 54
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 20
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 20
- RJWLXGOSIRVRAR-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethylbenzene-1,3-diol Chemical compound CC1=CC=C(O)C(C)=C1O RJWLXGOSIRVRAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 claims description 13
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 12
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- FNYDIAAMUCQQDE-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzene-1,3-diol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1O FNYDIAAMUCQQDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 claims description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 9
- AOPMHYFEQDBXPZ-UHFFFAOYSA-N 2,4-dihydroxy-3-methylbenzaldehyde Chemical compound CC1=C(O)C=CC(C=O)=C1O AOPMHYFEQDBXPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- IUNJCFABHJZSKB-UHFFFAOYSA-N 2,4-dihydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C(O)=C1 IUNJCFABHJZSKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical class C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 6
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- FUASSFFRJZEPLA-CMDGGOBGSA-N (e)-1-(2-hydroxy-4-methoxy-5-methylphenyl)-3-phenylprop-2-en-1-one Chemical compound C1=C(C)C(OC)=CC(O)=C1C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 FUASSFFRJZEPLA-CMDGGOBGSA-N 0.000 claims description 5
- LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-M crotonate Chemical compound C\C=C\C([O-])=O LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-M 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000005530 alkylenedioxy group Chemical group 0.000 claims description 4
- ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N boron tribromide Chemical compound BrB(Br)Br ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 4
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 claims description 3
- 238000005863 Friedel-Crafts acylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 3
- 125000000242 4-chlorobenzoyl group Chemical group ClC1=CC=C(C(=O)*)C=C1 0.000 claims description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 claims description 2
- 239000008298 dragée Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000006191 orally-disintegrating tablet Substances 0.000 claims description 2
- 125000003854 p-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Cl 0.000 claims description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 2
- 229940119568 Inducible nitric oxide synthase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 7
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 abstract description 3
- 150000005207 1,3-dihydroxybenzenes Chemical class 0.000 abstract description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N Resorcinol Natural products OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 abstract description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 abstract description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 abstract 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 24
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 22
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 22
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 16
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 16
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 14
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 14
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical group CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 12
- 101100391174 Dictyostelium discoideum forC gene Proteins 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 11
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WOGITNXCNOTRLK-VOTSOKGWSA-N (e)-3-phenylprop-2-enoyl chloride Chemical compound ClC(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WOGITNXCNOTRLK-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 4
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 4
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- RJUIDDKTATZJFE-NSCUHMNNSA-N (e)-but-2-enoyl chloride Chemical group C\C=C\C(Cl)=O RJUIDDKTATZJFE-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 3
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 3
- RKKPUBAAIGFXOG-YTXTXJHMSA-N Sorbicillin Chemical compound C\C=C\C=C\C(=O)C1=CC(C)=C(O)C(C)=C1O RKKPUBAAIGFXOG-YTXTXJHMSA-N 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 3
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- NFFPFTGFVSWSTH-SNAWJCMRSA-N (e)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(Cl)=O)=CC(OC)=C1OC NFFPFTGFVSWSTH-SNAWJCMRSA-N 0.000 description 2
- GLBIKPKWQDIQCJ-ZZXKWVIFSA-N (e)-3-(4-fluorophenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound FC1=CC=C(\C=C\C(Cl)=O)C=C1 GLBIKPKWQDIQCJ-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 2
- CGOJOQBYEAVATL-QPJJXVBHSA-N (e)-3-(4-methoxyphenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound COC1=CC=C(\C=C\C(Cl)=O)C=C1 CGOJOQBYEAVATL-QPJJXVBHSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102000006538 Nitric Oxide Synthase Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010008858 Nitric Oxide Synthase Type I Proteins 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 2
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N trans-chalcone Chemical class C=1C=CC=CC=1C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 2
- ZFOVCSTVYYYRSU-ZZXKWVIFSA-N (e)-3-(4-chlorophenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound ClC(=O)\C=C\C1=CC=C(Cl)C=C1 ZFOVCSTVYYYRSU-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 1
- ARGVABDJPRRAQI-VOTSOKGWSA-N (e)-3-(4-methylphenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(\C=C\C(Cl)=O)C=C1 ARGVABDJPRRAQI-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 1
- LPAMMSFOMIQXDN-UHFFFAOYSA-N 1,3-dimethoxy-2,4-dimethylbenzene Chemical compound COC1=CC=C(C)C(OC)=C1C LPAMMSFOMIQXDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSNMRWURXNWCGA-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethoxy-1-methylbenzene Chemical compound COC1=CC=C(C)C(OC)=C1 OSNMRWURXNWCGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFQOFJQVKVEXIY-UHFFFAOYSA-N 3-(phenylmethoxycarbonylamino)-3-piperidin-3-ylpropanoic acid Chemical compound C1CCNCC1C(CC(=O)O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 VFQOFJQVKVEXIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006595 Griess deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000008052 Nitric Oxide Synthase Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010075520 Nitric Oxide Synthase Type III Proteins 0.000 description 1
- 102100022397 Nitric oxide synthase, brain Human genes 0.000 description 1
- 101710111444 Nitric oxide synthase, brain Proteins 0.000 description 1
- 102000023984 PPAR alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010015181 PPAR delta Proteins 0.000 description 1
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- YLEIFZAVNWDOBM-ZTNXSLBXSA-N ac1l9hc7 Chemical compound C([C@H]12)C[C@@H](C([C@@H](O)CC3)(C)C)[C@@]43C[C@@]14CC[C@@]1(C)[C@@]2(C)C[C@@H]2O[C@]3(O)[C@H](O)C(C)(C)O[C@@H]3[C@@H](C)[C@H]12 YLEIFZAVNWDOBM-ZTNXSLBXSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- SRVFFFJZQVENJC-IHRRRGAJSA-N aloxistatin Chemical compound CCOC(=O)[C@H]1O[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCCC(C)C SRVFFFJZQVENJC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- OSVHLUXLWQLPIY-KBAYOESNSA-N butyl 2-[(6aR,9R,10aR)-1-hydroxy-9-(hydroxymethyl)-6,6-dimethyl-6a,7,8,9,10,10a-hexahydrobenzo[c]chromen-3-yl]-2-methylpropanoate Chemical compound C(CCC)OC(C(C)(C)C1=CC(=C2[C@H]3[C@H](C(OC2=C1)(C)C)CC[C@H](C3)CO)O)=O OSVHLUXLWQLPIY-KBAYOESNSA-N 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 239000012468 concentrated sample Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- PUSKHXMZPOMNTQ-UHFFFAOYSA-N ethyl 2,1,3-benzoselenadiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C2N=[Se]=NC2=C1 PUSKHXMZPOMNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- GRTWTVFDPBKQNU-UHFFFAOYSA-N hexa-2,4-dienoyl chloride Chemical group CC=CC=CC(Cl)=O GRTWTVFDPBKQNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 108091008725 peroxisome proliferator-activated receptors alpha Proteins 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开一种2‑丙烯‑1‑酮类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域。本发明基于诱导型一氧化氮合酶(iNOS)介导的一氧化氮(NO)生成模型，以甲基取代的间苯二酚为起始原料，设计、合成了系列2‑丙烯‑1‑酮类化合物，以及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药。本发明旨在它们的制备方法及其在制备炎症治疗剂特别是制备一氧化氮(NO)生成抑制剂中的用途，在作为抗炎药物方面具有潜在应用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及一类新型2-丙烯-1-酮类化合物的制备方法和医药用途，具体涉及新颖的2-丙烯-1-酮类化合物及其制备方法和抑制一氧化氮(NO)的作用，在作为抗炎药物方面具有潜在应用。
背景技术
一氧化氮(NO)在正常生理和病理过程中扮演重要角色，NO产生的异常几乎与所有的炎症疾病的病理过程密切相关[Hesslinger et al，BiochemSoc Trans，2009，37：886-891]。正常生理条件下，NO由Ⅰ型一氧化氮合酶(nNOS，也称为神经元型一氧化氮合酶)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及Ⅲ型一氧化氮合酶(eNOS，也称为血管内皮细胞型一氧化氮合酶)催化生成。一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成NO和L-瓜氨酸。其中，iNOS能够被各种促炎因子和信号分子上调，并且与哮喘、慢性阻塞性肺病、特发性肺纤维化以及风湿性关节炎等多种炎症疾病相关[Santolini，J InorgBiochem，2011，105：127-141]。因此，能够抑制iNOS介导的NO释放的化合物能够成为新的炎症治疗剂。
2-丙烯-1-酮是一类重要的药效团，王等报道了一类该类型衍生物的制备方法及其在由PPARα和PPARδ引起的疾病的治疗剂及其在代谢综合症、心脑血管疾病以及炎症和神经退行性疾病中的应用[王等，发明专利申请，2019，CN109265380A 20190125]。Raphael等报道了一类1，3-二苯基-2-丙烯-1-酮衍生物在肝脏保护和肝纤维化、脂肪肝等治疗方面的应用[U.S.Pat.App.Publ.,2015,US20150051145A1 20150219]。Karine等报道了一类1，3-二苯基-2-丙烯-1-酮类衍生物作为PPAR激动剂及其在生物医药和化妆品领域中的应用[PCT Int.Appl.(2005),WO 2005073184 A1 20050811]。目前，2-丙烯-1-酮类化合物在抑制iNOS介导的NO释放研究鲜少见报道。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种2-丙烯-1-酮类化合物。
本发明的另一目的在于提供上述2-丙烯-1-酮类化合物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述2-丙烯-1-酮类化合物的应用。
本发明设计和合成一类新型的2-丙烯-1-酮类化合物，进行具有炎症相关疾病治疗的药物创制研究。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
本发明涉及具有通式(Ⅰ)结构的新型2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，及其光学活性体，非对映异构体。
其中，
R1为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基；
R2为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(4)任意长度脂肪烃的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R3为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(4)任意长度脂肪烃的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R4为下列基团中的任意一个基团：(1)甲基，(2)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(3)含烷基、羟基、烷氧基、亚烷二氧基、卤素等取代或不取代的芳香环；
进一步的：
R1为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基；
R2为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(4)含2～5个碳原子的脂肪族烃基的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R3为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(4)含2～5个碳原子的脂肪族烃基的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R4为(1)甲基，(2)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(3)含烷基、羟基、烷氧基、亚烷二氧基、卤素等取代或不取代的芳香环；
更进一步的：
R1为(1)H原子，(2)甲基；
R2为(1)H原子，(2)甲基；
R3为(1)H原子，(2)甲基，(3)2-丁烯-1-酰基，2，4-己二烯-1-酰基，(4)4-氟苯丙烯酰基，4-氯苯丙烯酰基；
R4为(1)甲基，(2)丙烯基，(3)含甲基、羟基、甲氧基、亚甲二氧基以及氟、氯等卤素取代或不取代的苯环。
本发明优选的化合物为：
P1：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P2：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P3：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P4：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P5：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-丙烯-1-酮；
P6：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P7：(E)-4-[(E)-3-(4-氟苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯；
P8：(E)-4-[(E)-3-(4-氯苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯；
P9：(2E，4E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)己-2，4-二烯-1-酮；
P10：(2E，4E)-4-[(2E，4E)-己-2，4-二烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)己-2，4-二烯酸酯；
P11：(E)-4-[(E)-丁-2-烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)丁-2-烯酸酯；
P12：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P13：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P14：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P15：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P16：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P17：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P18：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P19：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P20：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P21：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P22：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P23：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P24：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
为了制备本发明通式(Ⅰ)所述的2-丙烯-1-酮类化合物，及其光学活性体，采用如下路线合成该类化合物：
(一)以2，4-二羟基-3-甲基苯甲醛(1a)为起始原料，首先经氢化铝锂(LiAlH4)还原得到2，4-二甲基间苯二酚(2a)中间体，中间体2a在三氯化铝(AlCl3)的催化下与新鲜制备的酰氯发生付-克酰基化反应得到产物(反应式1)。其中酰氯通过相应的羧酸与二氯亚砜(SOCl2)制备得到(反应式2)。
(二)或以2，4-二羟基-3-甲基苯甲醛(1a)和2，4-二羟基苯甲醛(1b)为起始原料，首先经氢化铝锂(LiAlH4)还原得到2，4-二甲基间苯二酚(2a)和4-甲基间苯二酚(2b)中间体，中间体2a和2b与碘甲烷(MeI)反应得到中间体3a和3b。中间体3a和3b在三氯化铝(AlCl3)的催化下与新鲜制备的酰氯发生付-克酰基化反应得到产物A(反应式3)，其中酰氯通过相应的羧酸与二氯亚砜(SOCl2)制备得到(反应式2)。产物A经三溴化硼(BBr3)脱甲基得到产物B和C。
具体反应式如下：
反应式1：
反应式2：
反应式3：
其中，
一种药物组合物，包含上述2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的载体。
上述2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，或药物组合物在制备一氧化氮(NO)生成抑制剂药物中的应用。
上述2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，或药物组合物在制备抑制iNOS(诱导型一氧化氮合酶)介导的NO生成抑制剂药物中的应用。
上述2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，或药物组合物在制备iNOS(诱导型一氧化氮合酶)抑制剂中的应用。
上述2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，或药物组合物在制备抗炎药物中的应用。
所述药物的剂型为注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩片或微丸。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
本发明基于诱导型一氧化氮合酶(iNOS)介导的一氧化氮(NO)生成模型，以甲基取代的间苯二酚为起始原料，设计、合成了系列2-丙烯-1-酮类化合物，以及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药。本发明旨在它们的制备方法及其在制备炎症治疗剂特别是制备一氧化氮(NO)生成抑制剂中的用途。
附图说明
图1是标准品NO浓度测试标准曲线。
图2是化合物P1-P24对LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞一氧化氮(NO)释放的抑制作用；其中，“+”为模型组；利用一氧化氮检测试剂盒检测NO的浓度，重复实验三次，实验结果为均值±S.E.M，与DMSO组比较###p<0.001，与LPS组(模型组，+)比较*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001。
图3是化合物P1-P11对LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞iNOS蛋白表达水平的影响；其中，“+”为模型组；使用免疫印迹法检测蛋白的表达量，实验数据重复三次，实验结果为均值±S.E.M，与DMSO组比较###p<0.001，与LPS组(模型组，+)比较**p<0.01、***p<0.001。
图4是化合物P12-P24对LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞iNOS蛋白表达水平的影响；其中，“+”为模型组；使用免疫印迹法检测蛋白的表达量，实验数据重复三次，实验结果为均值±S.E.M，与DMSO组比较###p<0.001，与LPS组(模型组，+)比较***p<0.001。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮(P1)
将2.2g三氯化铝(AlCl3，6.6mmol，1.0eq)溶解于55mL无水四氢呋喃(THF)，缓慢加入625.0mg氢化铝锂(LiAlH4，16.5mmol，2.5eq)后氩气保护下冰浴至0℃。将1.0g 2，4-二羟基-3-甲基苯甲醛(1a，6.6mmol)溶解于5mL THF中，缓慢滴加至反应体系，然后在65℃下回流反应3h。反应液冷却至0℃后加入1M HCl终止反应。用乙酸乙酯(EtOAc)稀释后依次用1MHCl、饱和碳酸氢钠(NaHCO3)和水洗，然后用无水硫酸钠(Na2SO4)干燥后减压浓缩至干。残渣经硅胶开放柱色谱石油醚-乙酸乙酯洗脱(10：1，体积比，下同)得化合物2a(2，4-二甲基间苯二酚)，为白色粉末，收率为71％(650mg)。ESI-MS m/z＝137.1。
将100mg 2，4-二甲基间苯二酚(2a，0.7mmol)溶解于无水二氯甲烷(DCM)中，氩气保护下冰浴至0℃。缓慢加入120～150μL肉桂酰氯(1.5eq)和120mg三氯化铝(AlCl3，0.9mmol，1.3eq)，其中肉桂酰氯通过肉桂酸与二氯亚砜(SOCl2)反应制备得到。室温下搅拌反应1h后加入1M HCl终止反应。加入DCM稀释后依次用1M HCl、饱和NaHCO3溶液和水洗，然后用无水硫酸钠(Na2SO4)干燥后减压浓缩至干。残渣用高效液相色谱(HPLC)制备(85％MeOH-H2O)后得到化合物P1为淡黄色固体，收率为13.5％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δH13.76(1H,s),8.00(1H,d,J＝15.5Hz),7.98(1H,s),7.92-7.89(2H,m),7.79(1H,dd,J＝15.5Hz),7.49-7.45(3H,m),2.20(3H,s),2.05(3H,s).13C NMR(75MHz,CDCl3)δC 191.3,162.2,161.7,143.2,134.7,130.5,129.5,128.9(×4),121.4,116.3,112.1,110.5,16.1,8.2.ESI-MS m/z＝291.0[M+Na]+。
实施例2：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲基苯基)丙-2-烯-1-酮(P2)
实施例2的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为4-甲基肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(80％MeOH-H2O)得到化合物P2为淡黄色固体，分离收率为27.4％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ13.60(s,1H),7.75(d,J＝15.5Hz,1H),7.53–7.48(m,4H),7.17-7.15(overlapped,2H),2.32(s,3H),2.18(s,3H),2.08(s,3H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ192.1,162.3,160.3,143.9,141.1,132.2,129.7(×2),128.8,128.5(×2),119.7,115.8,113.2,111.1,21.5,16.0,7.7。ESI-MS m/z＝283.3[M+H]+。
实施例3：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(P3)
实施例3的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为4-甲氧基肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(80％MeOH-H2O)得到化合物P3为淡黄色固体，分离收率为19.6％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.85(d,J＝15.4Hz,1H),7.65–7.59(m,2H),7.55(s,1H),7.48(d,J＝15.4Hz,1H),6.98–6.91(m,2H),3.86(s,3H),2.25(s,3H),2.17(s,3H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ191.9,162.8,161.8,158.8,144.0,130.5(×2),129.0,127.8,118.3,114.6(×3),113.8,110.6,55.3,15.6,7.3。ESI-MS m/z＝299.2[M+H]+。
实施例4：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(P4)
实施例4的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为3，4，5-三甲氧基肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(80％MeOH-H2O)得到化合物P4为淡黄色固体，分离收率为18.1％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.82(s,1H),7.94(s,1H),7.91(d,J＝15.3Hz,1H),7.76(d,J＝15.3Hz,1H),7.23(s,2H),3.87(s,6H),3.72(s,3H),2.21(s,3H),2.05(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ191.6,162.2(×2),161.1,153.1(×2),144.0,139.9,130.2,129.5,120.4,116.1,112.3,110.6,106.8,60.2,56.2(×2),16.3,8.2。ESI-MS m/z＝359.4[M+H]+。
实施例5：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-丙烯-1-酮(P5)
实施例5的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为3，4-亚甲二氧基肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(80％MeOH-H2O)得到化合物P5为淡黄色固体，分离收率为16.0％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.83(s,1H),7.98(s,1H),7.85(d,J＝15.3Hz,1H),7.72(d,J＝15.3Hz,1H),7.70(s,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),6.99(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),6.11(s,2H),2.19(s,3H),2.04(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ191.5,162.2,161.0,149.6,148.2,143.5,129.5,129.3,126.2,119.2,116.1,112.3,110.5,108.5,107.0,101.7,16.1,8.2。ESI-MS m/z＝313.1[M+H]+。
实施例6：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮(P6)
实施例6的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为4-氟肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(90％MeOH-H2O)得到化合物P6为淡黄色固体，分离收率为9.1％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ13.53(s,1H),7.84(d,J＝15.5Hz,1H),7.67-7.64(m,2H),7.54(s,1H),7.53(d,J＝15.5Hz,1H),7.14–7.10(m,2H),2.26(s,3H),2.17(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ191.8,164.2(d,J＝250Hz),162.9,159.1,142.9,130.6(d,J＝9.0Hz)(×2),128.9,120.5,116.3(d,J＝21.0Hz)(×2),114.8,113.7,110.7,100.2,15.8,7.7。ESI-MSm/z＝287.4[M+H]+。
实施例7：(E)-4-[(E)-3-(4-氟苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯(P7)
实施例7的化合物制备方法同实施例6，反应残渣经HPLC制备(90％MeOH-H2O)时同时得到P7为淡黄色固体，分离收率为18.9％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ13.20(s,1H),7.92(d,J＝5.1Hz,1H),7.87(d,J＝4.5Hz,1H),7.70–7.53(m,6H),7.17-7.11(m,4H),6.62(d,J＝16.0Hz,1H),2.20(s,3H),2.13(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ193.1,166.1,165.0(×2),164.0,161.8,154.2,146.2,144.0,131.1,130.8(d,J＝11.0Hz)(×2),130.5(d,J＝10.0Hz)(×2),,128.4,121.1,120.3,120.2,117.6,116.5(d,J＝5.0Hz)(×2),116.2(d,J＝5.0Hz)(×2),116.0,16.4,9.2。ESI-MS m/z＝435.4[M+H]+。
实施例8：(E)-4-[(E)-3-(4-氯苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯(P8)
实施例8的化合物制备方法同实施例1，只是在反应中加入的酰氯为4-氯代肉桂酰氯，反应残渣经HPLC制备(90％MeOH-H2O)得到化合物P8为淡黄色固体，分离收率为7.5％。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ13.16(s,1H),7.90(d,J＝7.2Hz,1H),7.85(d,J＝6.6Hz,1H),7.64–7.54(m,6H),7.43-7.40(m,4H),6.67(d,J＝16.0Hz,1H),2.20(s,3H),2.12(s,3H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ193.0,163.9,161.9,154.2,146.1,143.8,137.1,136.9,133.3,132.5,129.9(×2),129.7(×2),129.5(×4),128.4,121.1,121.0,120.4,117.6,116.9,16.4,9.2。ESI-MS m/z＝465.1[M-H]-。
实施例9：(2E，4E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)己-2，4-二烯-1-酮(P9)
实施例9的化合物制备方法同实施例1，只是酰氯试剂换成了2，4-己二烯酰氯。反应滤液浓缩残渣经高效液相色谱(HPLC)制备(90％MeOH-H2O)得到化合物P9为淡黄色固体，收率为19.6％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δH 13.59(1H,s),7.44(1H,s),7.45(1H,dd,J＝14.8,10.2Hz),6.94(1H,d,J＝14.8Hz),6.40-6.21(2H,m),2.21(3H,s),2.14(3H,s),1.90(3H,d,J＝6.0Hz).13C NMR(75MHz,CDCl3)δC 192.7,162.7,158.9,144.7,141.3,130.7,128.9,122.0,114.6,113.6,110.6,19.1,15.8,7.7.ESI-MS m/z＝233.0[M+H]+。
实施例10：(2E，4E)-4-[(2E，4E)-己-2，4-二烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)己-2，4-二烯酸酯(P10)
实施例10的化合物制备方法同实施例9，反应滤液浓缩残渣经高效液相色谱(HPLC)制备(90％MeOH-H2O)得到另一化合物P10为淡黄色固体，收率为8.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δH 13.24(1H,s),7.53(1H,s),7.53-7.46(2H,m),6.96(1H,d,J＝15.2Hz),6.40-6.22(4H,m),6.01(1H,d,J＝15.2Hz),2.13(3H,s),2.07(3H,s),1.92(3H,d,J＝5.2Hz),1.91(3H,d,J＝5.2Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δC 193.7,164.4,161.7,154.1,147.7,145.7,142.1,141.4,130.7,129.8,128.3,121.9,120.9,120.1,117.5,117.2,19.1,18.9,16.3,9.1.ESI-MS m/z＝349.1[M+Na]+。
实施例11：(E)-4-[(E)-丁-2-烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)丁-2-烯酸酯(P11)
实施例11的化合物制备方法同实施例1，只是酰氯试剂换成了2-丁烯酰氯。反应滤液浓缩残渣经高效液相色谱(HPLC)制备(85％MeOH-H2O)得到化合物P11为淡黄色固体，收率为18.2％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δH 13.12(1H,s),7.55(1H,s),7.33-7.15(2H,m),7.03(1H,dd,J＝14.8,2.0Hz),6.12(1H,dd,J＝14.8,2.0Hz),2.14(3H,s),2.08(3H,s),2.05(3H,dd,J＝6.0,2.0Hz),2.02(3H,dd,J＝6.0,2.0Hz).13C NMR(75MHz,CDCl3)δC 193.5,163.5,161.7,154.0,147.9,145.6,128.6,125.8,121.3,120.9,120.1,117.0,18.8,18.4,16.2,9.0.ESI-MS m/z＝275.0[M+H]+。
实施例12：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮(P12)
称取1.05g(7.88mmol)AlCl3加入20mL的无水THF，冷却至0℃。缓慢加入0.3g(7.9mmol)的LiAlH4，除去空气后N2保护。将3.29mmol的2,4-二羟基-苯甲醛(1b)溶于2mL的THF中，用注射器缓慢打入反应体系中。水浴65℃回流3h。反应结束后冰浴条件下缓慢加入1MHCl淬灭反应，用EtOAc萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/8：1)得到化合物2b(4-甲基间苯二酚)。
称取0.89mmol的4-甲基间苯二酚(2b)和240mg(1.74mmol)K2CO3溶于DMF。加入0.3mL(6.96mmol)的碘甲烷(MeI)，常温下反应30h。反应结束后加水和DCM，合并有机相用饱和NaCl水溶液洗涤两次，用无水Na2SO4干燥。过滤后经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/80：1)得到化合物3b(4-甲基-1，3-二甲氧基苯)。
称取1.44mmol的4-氟肉桂酸溶于2mL的SOCl2中，加入1滴DMF，60℃下加热回流60min。反应结束后，减压浓缩除去多余SOCl2，加入1.5mL DCM稀释备用(4-氟肉桂酰氯DCM溶液)。取0.6mmol的中间体3b溶解于3mL DCM，在0℃下缓慢加入96mg(0.72mmol)AlCl3，N2保护。用注射器缓缓加入新制备的酰氯DCM溶液，反应3h。反应结束后，用1MHCl淬灭，DCM萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥后过滤，硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/12：1)得到化合物P12为淡黄色固体，总收率为15.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64(d,J＝15.8Hz,1H),7.60–7.54(m,3H),7.48(d,J＝15.8Hz,1H),7.08–7.04(m,2H),6.42(s,1H),3.92(d,J＝1.4Hz,3H),3.89(d,J＝2.0Hz,3H),2.16(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ190.2(s),163.8(d,J＝250.0Hz),162.3,159.3(s),140.4(s),133.0(s),131.9(d,J＝4.0Hz),130.2(d,J＝8.0Hz)(×2),127.2(d,J＝2.3Hz),120.8(s),119.3(s),116.0(d,J＝20.0Hz)(×2),94.8(s),56.2(s),55.6(s),15.3(s).HRMS(ESI)m/zcalcd.forC18H18FO3[M+H]+301.1287；found,301.1288。
实施例13：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮(P13)
实施例13化合物的制备方法同实施例12，称取0.31mmol的化合物P12溶解于3mL的DCM中，N2保护下于-20℃搅拌10min，缓慢滴加1.86mmol的1MBBr3的DCM溶液，继续反应1h后移至常温反应过夜。反应结束后加DCM稀释，有机相用水洗涤两次，用无水Na2SO4干燥。过滤后滤液经减压浓缩后经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/30：1)得到化合物P13为淡黄色固体，总收率为6.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.39(s,1H),7.79(d,J＝15.5Hz,1H),7.64–7.60(m,2H),7.57(s,1H),7.47(d,J＝15.5Hz,1H),7.09(t,J＝8.6Hz,2H),6.40(s,1H),3.84(s,3H),2.16(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ191.5(s),165.5,164.1(d,J＝250Hz),164.7(s),142.8(s),131.2(d,J＝3.3Hz),130.6(s),130.5(d,J＝10.0Hz)(×2),120.2(d,J＝2.3Hz),118.16(s),116.2(d,J＝20.0Hz)(×2),113.2(s),99.2(s),55.8(s),15.8(s).HRMS(ESI)m/zcalcd.forC17H16FO3[M+H]+287.1072；found,287.1085。
实施例14：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮(P14)
实施例14的化合物制备方法同实施例13，浓缩后样品经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/10：1)得到化合物P14为淡黄色固体，收率为8.1％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.30(s,1H),10.77(s,1H),8.06(s,1H),7.99–7.96(m,2H),7.94(d,J＝15.5Hz,1H),7.77(d,J＝15.5Hz,1H),7.30(d,J＝8.8Hz,1H),7.28(d,J＝8.8Hz,1H),6.35(s,1H),2.12(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ191.2(s),164.2(s),163.7(s),163.4(d,J＝249.0Hz),142.2(s),132.6(s),131.4,131.3(d,J＝10.0Hz)(×2),121.3,116.7(s),115.9(d,J＝20.0Hz)(×2),112.6(s),102.0(s),15.1(s).HRMS(ESI)m/zcalcd.forC16H14FO3[M+H]+273.0916；found,273.0928。
实施例15：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮(P15)
实施例15化合物的制备方法同实施例12，只是加入的酰氯试剂为肉桂酰氯。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/12：1)得到化合物P15为淡黄色固体，收率为12.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(d,J＝15.8Hz,1H),7.61-7.59(m,3H),7.55(d,J＝15.8Hz,1H),7.42–7.36(m,3H),6.44(s,1H),3.93(s,3H),3.91(s,3H),2.17(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ190.7,162.3,159.3,141.8,135.8,133.0,130.0,128.9(×2),128.4(×2),127.5,121.0,119.3,94.9,56.3,55.7,15.4.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC18H19O3[M+H]+283.1393；found,283.1370。
实施例16：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮(P16)
实施例16化合物的制备方法同实施例15，得到的化合物P15经1M BBr3的DCM溶液脱甲基，反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/50：1)得到化合物P16为淡黄色固体，收率为5.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.42(s,1H),7.87(d,J＝15.5Hz,1H),7.67–7.65(m,2H),7.61(s,1H),7.58(d,J＝15.5Hz,1H),7.43-7.41(m,3H),6.43(s,1H),3.86(s,3H),2.18(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ191.8,165.5,164.7,144.1,135.0,130.8,130.7,129.1(×2),128.6(×2),120.6,118.2,113.3,99.2,55.8,15.8.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC17H17O3[M+H]+269.1178；found,269.1180。
实施例17：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮(P17)
实施例17化合物的制备方法同实施例16，滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/10：1)得到化合物P17为淡黄色固体，收率为6.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.31(s,1H),10.77(s,1H),8.09(s,1H),8.00(d,J＝15.5Hz,1H),7.92-7.89(m,2H),7.78(d,J＝15.5Hz,1H),7.47-7.45(m,3H),6.36(s,1H),2.13(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ191.3,164.2,163.7,143.4,134.7,132.6,130.6,129.0(×2),128.9(×2),121.4,116.7,112.6,102.0,15.1.HRMS(ESI)m/zcalcd.for C16H15O3[M+H]+255.1021；found,255.1026。
实施例18：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(P18)
实施例18化合物的制备方法同实施例12，只是加入的酰氯试剂为4-甲氧基肉桂酰氯，反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/10：1)得到化合物P18为淡黄色固体，总收率为12.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65(d,J＝15.7Hz,1H),7.57–7.54(m,3H),7.43(d,J＝15.7Hz,1H),6.91(d,J＝8.6Hz,2H),6.43(s,1H),3.91(s,3H),3.89(s,3H),3.83(s,3H),2.16(s,3H).13CNMR(101MHz,CDCl3)δ190.7,162.0,161.3,159.0,141.8,132.9,130.0(×2),128.4,125.3,121.2,119.1,114.4(×2),94.9,56.2,55.6,55.5,15.3.HRMS(ESI)m/zcalcd.for C19H21O4[M+H]+313.1499；found,313.1483。
实施例19：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(P19)
实施例19化合物的制备方法同实施例12，只是甲基化起始原料换成了2，4-二甲基间苯二酚(2a)，与MeI反应后得到2，4-二甲基-1，3-二甲氧基苯(3a)，接下来加入的酰氯试剂为3，4，5-三甲氧基取代的肉桂酰氯。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/6：1)得到化合物P19为淡黄色固体，收率为12.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(d,J＝15.7Hz,1H),7.28(d,J＝15.7Hz,1H),7.26(s,1H),6.78(s,2H),3.84–3.81(overlapped,9H),3.69(m,3H),3.63(m,3H),2.20(s,6H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ192.4,160.5,156.9,153.4(×2),143.7,140.2,130.4,129.4,129.1,126.9,125.7,125.0,105.6(×2),62.3,60.8,59.7,56.1(×2),15.7,9.3.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC22H27O6[M+H]+387.1808；found,387.1825。
实施例20：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(P20)
实施例20化合物的制备方法同实施例12，只是加入的酰氯试剂为3，4，5-三甲氧基肉桂酰氯。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析(石油醚-乙酸乙酯/10：1)得到化合物P20为淡黄色固体，收率为12.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(d,J＝15.7Hz,1H),7.56(s,1H),7.41(d,J＝15.7Hz,1H),6.82(s,2H),6.44(s,1H),3.92(s,3H),3.90(s,3H),3.89(s,6H),3.88(s,3H),2.16(s,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ190.6,162.1,159.1,153.5(×2),142.1,140.0,132.9,131.2,126.9,121.0,119.3,105.6(×2),94.9,61.1,56.3(×3),55.7,15.3.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC21H25O6[M+H]+373.1710；found,373.1703。
实施例21：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮(P21)
实施例21化合物的制备方法同实施例19，只是加入的酰氯试剂为2-丁烯酰氯，反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/50：1)得到化合物P21为淡黄色固体，收率为17.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.18(s,1H),6.95–6.85(m,1H),6.73(dd,J＝15.4,1.2Hz,1H),3.72(s,3H),3.66(s,3H),2.24(s,3H),2.22(s,3H),1.94(dd,J＝6.8,1.2Hz,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.4,160.4,156.8,144.7,131.8,129.3,129.1,126.8,125.1,62.4,59.9,18.5,15.9,9.5.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC14H19O3[M+H]+235.1334；found,235.1341。
实施例22：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮(P22)
实施例22化合物的制备方法同实施例21，得到的化合物P21经1M的BBr3脱甲基。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/15：1)得到化合物P22为淡黄色固体，收率为12.5％。1H NMR(300MHz,MeOH-d4)δ7.51(s,1H),7.12(d,J＝15.0Hz,1H),7.10–7.01(m,1H),2.16(s,3H),2.06(s,3H),1.98(d,J＝5.1Hz,3H).13C NMR(75MHz,MeOH-d4)δ193.7,163.7,162.2,144.8,130.3,127.0,117.1,113.3,112.0,18.6,16.4,8.0.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC12H15O3[M+H]+207.1021；found,207.1023。
实施例23：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮(P23)
实施例23化合物的制备方法同实施例12，只是加入的酰氯试剂为2-丁烯酰氯。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/15：1)得到化合物P23为淡黄色固体，收率为17.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.47(s,1H),6.97–6.83(m,2H),6.40(s,1H),3.88(s,6H),2.14(s,3H),1.93(dd,J＝6.4,0.8Hz,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ191.1,161.9,158.9,142.1,132.8,132.2,120.8,119.0,94.9,56.1,55.6,18.5,15.3.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC13H17O3[M+H]+221.1178；found,221.1180。
实施例24：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮(P24)
实施例24化合物的制备方法同实施例23，分离得到的化合物P23经1M的BBr3的DCM溶液脱甲基。反应结束后滤液浓缩物经硅胶开放柱层析洗脱(石油醚-乙酸乙酯/15：1)得到化合物P24为淡黄色固体，收率为12.1％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.12(s,1H),7.55(s,1H),7.19–7.09(m,1H),6.98(dd,J＝15.1,1.2Hz,1H),6.36(s,1H),2.20(s,3H),2.02(dd,J＝6.8,1.5Hz,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ192.4,164.8,161.2,144.7,132.3,125.8,115.9,113.8,103.3,18.8,15.3.HRMS(ESI)m/zcalcd.forC11H13O3[M+H]+193.0865；found,193.0864。
实施例25本发明2-丙烯-1-酮类化合物的药理研究
(一)实验方法
(1)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7一氧化氮(NO)释放的影响
采用Griess法测定NO的释放，NO在体内或水溶液中易氧化生成NO2 -，在酸性条件下，NO促使Griess反应发生而生成重氮化合物。由该反应生成的重氮化合物的浓度与NO2 -的浓度呈线性关系，而该化合物可在540～560nm处进行定量测定。具体实验方法为取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7(常规市售)细胞以2×105/孔的密度接种于96孔板，置于37℃、5％CO2培养箱中培养过夜。加入0.5μg/mL脂多糖(LPS)处理后加入10μM样品进行处理，空白对照组为DMSO，模型组(+)为LPS加等体积的DMSO，阳性对照为20μM浓度的氢化可的松(Hyd)和姜黄素(Cur)，处理时间为24小时。用DMEM全培养基将标准品(NaNO2标准液)稀释至40.0、20.0、10.0、5.0、2.5、1.25、0μM(避光)，用来制作标准曲线。按照50μL每孔，将标准品与待测样品细胞上清液加入到96孔板中，按照50μL/孔，室温下往96孔板加入Griessreagent。轻轻混匀，在540nm波长下检测吸光度。每个处理设置3个重复。
(2)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平的影响
采用Western blot方法检测2-丙烯-1-酮类化合物对LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞iNOS表达水平的影响。RAW 264.7细胞以每孔2×106接种于六孔板，置于37℃培养箱培养过夜后加样处理。DMSO为空白对照组，模型组为LPS加等体积的DMSO，药物处理组为10μM的样品加LPS，阳性对照组为20μM的氢化可的松(Hyr)加LPS。处理24小时后收集细胞至EP管中，加入配制好的细胞裂解液(蛋白裂解液与PMSF+Aprotinin以体积比100：1配制)，使用超声破碎仪破碎细胞3次，10s/次，随后放入4℃高速离心机，以12000g离心10分钟，取上清液至新的EP管中。采用BCA检测试剂盒进行蛋白质浓度定量。将计算好的蛋白溶液中加入Loading Buffer(终浓度1×)后混匀，放入水浴锅中煮沸变性5分钟。待冷却之后，上样进行SDS-PAGE凝胶电泳实验。将变性好的样品蛋白按照计算体积加入到孔中，然后进行SDS-PAGE，经60V、20min的压制，再设置以每块胶20～25mA的电流，跑胶1～2小时。结束后将样品胶压制在甲醇活化好的PVDF膜上进行转膜，设置转膜电压为100V、转膜时间为1.25h。转膜结束后按照目标蛋白分子量将PVDF膜剪切成条带，注明分子量与标记好蛋白名称，将条带放入到5％的脱脂奶粉中进行封闭，室温下震摇封闭1h，回收脱脂奶粉，同时用TBST缓冲液清洗条带3次，每次5min。进而将蛋白条带放入对应的iNOS抗体(Cell SignalingTechnology，#13120S)孵育液中(利用TBST缓冲液1：1000稀释)4℃摇床孵育过夜，第二天用TBST缓冲液清洗条带，8分钟×5次。然后将洗好的条带放入到对应种源的二抗(辣根过氧化物酶偶联)，室温下摇床孵育1小时，随后用TBST清洗条带5次，每次8分钟。最后进行凝胶成像系统成像，用Image J软件处理、分析结果。
(二)实验结果
(1)化合物P1-P24对LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7NO释放的影响
标准品NO浓度测试标准曲线，如图1所示。从图2的实验结果来看，除化合物P5、P7和P8外，其他化合物都表现出了明显的抑制LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞NO释放的作用，其中多数化合物表现出了比阳性对照药物姜黄素(Cur)更好的活性。
(2)化合物P1-P24对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白水平的影响
从图3、4的实验结果来看，化合物P2-P8、P10-P24均明显抑制LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞iNOS蛋白表达水平，说明其具有好的抗炎活性。
以上实验结果表明，合成得到的化合物均具有明显的抗炎作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.2-丙烯-1-酮类化合物，其特征在于：所述化合物具有通式(Ⅰ)所示的结构：
其中，
R1为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基；
R2为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(4)任意长度脂肪烃的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R3为下列基团中的任意一个基团：(1)H原子，(2)甲基，(3)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(4)任意长度脂肪烃的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R4为下列基团中的任意一个基团：(1)甲基，(2)含2个以上碳原子的脂肪族烃基，(3)含烷基、羟基、烷氧基、亚烷二氧基、卤素取代或不取代的芳香环。
2.根据权利要求1所述的2-丙烯-1-酮类化合物，其特征在于：
R1为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基；
R2为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(4)含2～5个碳原子的脂肪族烃基的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R3为(1)H原子，(2)甲基，(3)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(4)含2～5个碳原子的脂肪族烃基的酰基，(5)含芳香环的酰基；
R4为(1)甲基，(2)含2～5个碳原子的脂肪族烃基，(3)含烷基、羟基、烷氧基、亚烷二氧基、卤素取代或不取代的芳香环。
3.根据权利要求2所述的2-丙烯-1-酮类化合物，其特征在于：
R1为(1)H原子，(2)甲基；
R2为(1)H原子，(2)甲基；
R3为(1)H原子，(2)甲基，(3)2-丁烯-1-酰基，2，4-己二烯-1-酰基，(4)4-氟苯丙烯酰基，4-氯苯丙烯酰基；
R4为(1)甲基，(2)丙烯基，(3)含甲基、羟基、甲氧基、亚甲二氧基以及氟、氯取代或不取代的苯环。
4.根据权利要求3所述的2-丙烯-1-酮类化合物，其特征在于：
P1：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P2：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P3：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P4：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P5：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-丙烯-1-酮；
P6：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P7：(E)-4-[(E)-3-(4-氟苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯；
P8：(E)-4-[(E)-3-(4-氯苯基)-丙烯酰基-3-羟基-2，6-二甲基苯基]-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯；
P9：(2E，4E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)己-2，4-二烯-1-酮；
P10：(2E，4E)-4-[(2E，4E)-己-2，4-二烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)己-2，4-二烯酸酯；
P11：(E)-4-[(E)-丁-2-烯酰基)-3-羟基-2，6-二甲基苯基)丁-2-烯酸酯；
P12：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P13：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P14：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
P15：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P16：(E)-1-(2-羟基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P17：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
P18：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P19：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P20：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
P21：(E)-1-(2，4-二甲氧基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P22：(E)-1-(2，4-二羟基-3，5-二甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P23：(E)-1-(2，4-二甲氧基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
P24：(E)-1-(2，4-二羟基-5-甲基苯基)丁-2-烯-1-酮；
5.权利要求3或4所述的2-丙烯-1-酮类化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(一)以2，4-二羟基-3-甲基苯甲醛1a为起始原料，首先经氢化铝锂还原得到2，4-二甲基间苯二酚2a中间体，中间体2a在三氯化铝的催化下与新鲜制备的酰氯发生付-克酰基化反应得到产物，反应式1；
其中，酰氯通过相应的羧酸与二氯亚砜制备得到，反应式2；
(二)或，以2，4-二羟基-3-甲基苯甲醛1a和2，4-二羟基苯甲醛1b为起始原料，首先经氢化铝锂还原得到2，4-二甲基间苯二酚2a和4-甲基间苯二酚2b中间体，中间体2a和2b与碘甲烷反应得到中间体3a和3b；中间体3a和3b在三氯化铝的催化下与新鲜制备的酰氯发生付-克酰基化反应得到产物A，反应式3；产物A经三溴化硼脱甲基得到产物B和C；
其中，酰氯通过相应的羧酸与二氯亚砜制备得到，反应式2；
具体反应式如下：
反应式1：
反应式2：
反应式3：
其中，
6.一种药物组合物，其特征在于：包含权利要求1～4任一项所述的2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐，光学活性体，非对映异构体和药学上可接受的载体。
7.权利要求1～4任一项所述的2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物在制备一氧化氮生成抑制剂药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：
所述的2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物在制备抑制诱导型一氧化氮合酶介导的NO生成抑制剂药物中的应用；
或者，所述的2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物在制备诱导型一氧化氮合酶抑制剂中的应用。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：
所述的2-丙烯-1-酮类化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物在制备抗炎药物中的应用。
10.根据权利要求7～9任一项所述的应用，其特征在于：
所述药物的剂型为注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩片或微丸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111257510.3A CN116023247A (zh) | 2021-10-27 | 2021-10-27 | 2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111257510.3A CN116023247A (zh) | 2021-10-27 | 2021-10-27 | 2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116023247A true CN116023247A (zh) | 2023-04-28 |
Family
ID=86078286
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111257510.3A Pending CN116023247A (zh) | 2021-10-27 | 2021-10-27 | 2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116023247A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1688566A (zh) * | 2002-10-01 | 2005-10-26 | 宝生物工程株式会社 | 治疗药 |
| CN102397269A (zh) * | 2011-09-20 | 2012-04-04 | 温州医学院 | 查尔酮类化合物在制备抗炎药物中的应用 |
| KR20170024291A (ko) * | 2015-08-25 | 2017-03-07 | 한림대학교 산학협력단 | 프레닐찰콘 및 피라노찰콘 화합물 합성방법 |
-
2021
- 2021-10-27 CN CN202111257510.3A patent/CN116023247A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1688566A (zh) * | 2002-10-01 | 2005-10-26 | 宝生物工程株式会社 | 治疗药 |
| CN102397269A (zh) * | 2011-09-20 | 2012-04-04 | 温州医学院 | 查尔酮类化合物在制备抗炎药物中的应用 |
| KR20170024291A (ko) * | 2015-08-25 | 2017-03-07 | 한림대학교 산학협력단 | 프레닐찰콘 및 피라노찰콘 화합물 합성방법 |
Non-Patent Citations (9)
| Title |
|---|
| AHMED AL FAHAD等: "Oxidative dearomatisation: the key step of sorbicillinoid biosynthesis", 《CHEMICAL SCIENCE》, no. 5, 20 November 2013 (2013-11-20), pages 524 * |
| ANNA SIB等: "Stereoselective Total Synthesis of Bisorbicillinoid Natural Products by Enzymatic Oxidative Dearomatization/Dimerization", 《ANGEW.CHEM》, vol. 56, 8 September 2017 (2017-09-08), pages 12888 - 3 * |
| CHAO QI等: "Total Synthesis and Stereochemical Assignment of (±)-Sorbiterrin A", 《JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY》, vol. 136, no. 9, 24 February 2014 (2014-02-24), pages 3374 * |
| JONG WON KIM等: "Anti-inflammatory phomalichenones from an endolichenic fungus phoma sp.", 《THE JOURNAL OF ANTIBIOTICS》, no. 71, 26 April 2018 (2018-04-26), pages 754 * |
| LIU, X. L.等: "Functionalized chalcones with basic functionalities have antibacterial activity against drug sensitive Staphylococcus aureus", 《EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 43, no. 8, 11 October 2007 (2007-10-11), pages 9 - 152 * |
| RACHEL H. CARTER等: "The Synthesis of Indan-I -ones and lsocoumarins", 《JOURNAL OF THE CHEMICAL SOCIETY》, no. 2, 1 January 1981 (1981-01-01), pages 472 * |
| WEN-JIAN LAN等: "Novel Sorbicillin Analogues from the Marine Fungus Trichoderma sp.Associated with the Seastar Acanthaster planci", 《NATURAL PRODUCT COMMUNICATION》, vol. 7, no. 10, 28 November 2012 (2012-11-28), pages 1337 * |
| 张爽等: "查耳酮衍生物的结构修饰及生物活性研究进展", 《药学进展》, vol. 36, no. 6, 25 June 2012 (2012-06-25), pages 244 - 245 * |
| 张金玉: "《有机合成反应及路线设计研究》", 31 May 2021, 中国原子能出版传媒有限公司, pages: 91 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Harrak et al. | Synthesis and biological activity of new anti-inflammatory compounds containing the 1, 4-benzodioxine and/or pyrrole system | |
| CN101711231B (zh) | 具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、它们的衍生物、生物活性及其用途 | |
| CN1207727A (zh) | 具有类视色素样生物活性的取代芳基或杂芳基酰胺类化合物 | |
| Shiraishi et al. | Quinones. 4. Novel eicosanoid antagonists: synthesis and pharmacological evaluation | |
| WO1995003044A1 (en) | Benzimidazolinones substituted with phenoxyphenylacetic acid derivatives | |
| CN104109115B (zh) | 一种含氮杂环链接的苯丙酸类化合物、其药物组合物、制备方法和用途 | |
| JPH09503994A (ja) | バラノイド | |
| JP2561354B2 (ja) | ベンゾシクロアルケニルジヒドロキシアルカン酸化合物、その製造方法及びそれを含有する医薬組成物 | |
| JP2022522334A (ja) | 新規な甲状腺模倣物 | |
| CN102164905B (zh) | 作为体内缺氧模拟剂的化合物，组合物，及其应用 | |
| JPH03501859A (ja) | 置換二環式化合物のｎ‐イミダゾリル及びｎ‐イミダゾリルメチル誘導体 | |
| WO1994024119A1 (en) | Coumarin derivative and use thereof | |
| CN116023247A (zh) | 2-丙烯-1酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN108586426B (zh) | 一种烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物、其制备方法及医药用途 | |
| JPS6229582A (ja) | カルボン酸の合成用中間体 | |
| EP1742903B1 (en) | Pentenoic acid derivatives, processes for the preparation thereof, pharmaceutical compositions comprising them, and therapeutic applications thereof | |
| JPH01305078A (ja) | 新規なヘテロアロチノイド誘導体 | |
| JPH0347165A (ja) | ピロールカルボン酸誘導体 | |
| US5705525A (en) | Thiophene compounds | |
| CA2980221A1 (en) | Indole analogs as 5-oxo-ete receptor antagonists and method of use thereof | |
| US4013692A (en) | Certain 3-phenyl-benzofuran lower alkanoic acids and esters thereof | |
| Lu et al. | Design, synthesis and biological evaluation of novel bergapten derivatives as potent lipid lowering agents | |
| CN115197236B (zh) | 直线型土甘草a类似物及其制备与用途 | |
| JP2559814B2 (ja) | カテコール誘導体及びこれを含有する医薬製剤 | |
| JPS6144853A (ja) | γ−リノレン酸誘導体およびこれを含有する血小板凝集抑制剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |