CN114786723A

CN114786723A - 序贯抗cd19疗法

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Publication number: CN114786723A
Application number: CN202080075641.7A
Authority: CN
Inventors: J·恩德尔; S·弗里克
Original assignee: Morphosys AG
Current assignee: Morphosys AG
Priority date: 2019-10-31
Filing date: 2020-10-30
Publication date: 2022-07-22
Also published as: WO2021084064A1; MX2022005032A; AU2020375149A1; KR20220104176A; IL292430A; EP4051317A1; CA3158985A1; TW202131950A; US20240156863A1; JP2023501211A

Abstract

本发明涉及用于使用结合至人CD1g的治疗剂序贯治疗人患者的癌症的治疗性组合物和方法。

Description

序贯抗CD19疗法

发明领域

本发明涉及用于使用结合至人CD19的治疗剂序贯治疗人患者的癌症的免疫治疗性组合物和方法。具体而言，描述了诸如CAR-T细胞的免疫治疗方案，这些方案可用于用抗CD19抗体他法西他单抗(tafasitamab)进行先前治疗后的患者的B细胞恶性肿瘤，诸如非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)以及慢性淋巴细胞性白血病(CLL)的疗法。

发明背景

CD19(B细胞受体的共受体)为B细胞谱系的标志物，这是因为其在整个B细胞发育中表达直至B细胞最后分化成浆细胞为止(Wang,Exp Hematol Oncol.2012)。CD19存在于健康和恶性B细胞两者的表面上。大多数B细胞肿瘤表达CD19，实例包括急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和B细胞淋巴瘤。约90％的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)表达CD19抗原(Kimura等人,International Journal of Hematology 2007)，且约80％的ALL病例表达CD19抗原。一些肿瘤不表达CD19的事实指示CD19对于B细胞存活并非至关重要的。这一事实得到来自CD19基因敲除小鼠的数据支持，这些数据揭示CD19缺乏对骨髓中的早期B细胞前体的数目无影响，对B细胞的大小和形态也无影响。相反，CD19-/-小鼠显示外周B细胞的总数目和频率减小。因此，CD19有助于体液、抗原诱导的反应与耐受性诱导之间的平衡并且因此在建立最佳免疫反应中起重要作用(Wang,Exp HematolOncol.2012)。

由于在恶性B细胞上普遍存在，CD19为免疫疗法的合适靶标。CD19表达受限于B谱系细胞并且其在多能造血干细胞或大多数其他正常组织上未发现(Scheuermann,LeukLymphoma.1995)。有助于CD19靶向治疗市场的主要药物类别包括单克隆抗体(例如，MOR208，他法西他单抗；MEDI-551，伊奈利珠单抗(inebilizumab))、抗体-药物缀合物(例如，SAR3419，考图昔单抗拉夫坦辛(coltuximab ravtansine))、双特异性药物(例如，博纳吐单抗(blinatumomab)，

)或嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)方法(例如，阿基仑赛(axicabtagen-ciloleucel)，

替沙仑赛(tisagenlecleucel)，

)。

他法西他单抗为Fc增强型人源化单克隆抗体，该抗体靶向CD19并且已显示经由抗体依赖性细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性细内吞噬作用(ADCP)和直接细胞毒性来发挥其抗肿瘤作用(Awan FT等人,Blood.2010年2月11日；115(6):1204-13)(WO2008022152)。最近其被FDA授予突破性疗法称号。当前，在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的II期和III期临床试验中正研究他法西他单抗与免疫调节剂来那度胺(lenalidomide)(L-MIND)和化学治疗性药物苯达莫司汀(bendamustine)(B-MIND)的组合。L-MIND(NCT02399085)是一项在不符合自体干细胞移植(ASCT)条件的患有复发性/难治性(R/R)DLBCL的患者中进行的他法西他单抗(TAFA)加上来那度胺(LEN)的开放标记、单臂、II期研究。B-MIND(NCT02763319)是一项在不符合高剂量化学疗法(HDC)和ASCT条件的患有(R/R)DLBCL的患者中进行的他法西他单抗与苯达莫司汀(BEN)的组合对比利妥昔单抗(rituximab)的开放标记、双臂、II/III期功效和安全性研究。

利用经离体基因工程化以靶向肿瘤抗原的自体T细胞的过继细胞转移是用于治疗CD19阳性血液恶性肿瘤的有前景的治疗方法。CD19导向的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法已在B细胞淋巴瘤和急性成淋巴细胞性白血病中展示显著活性，并且在2017年，FDA批准了两种抗CD19 CAR-T疗法。这些抗CD19 CAR-T细胞已在治疗患有复发性、难治性B细胞淋巴恶性肿瘤的患者(Maude S等人,NEngl J Med.2018,378:439-48)，诸如在≥2种全身性疗法线失败之后的患有R/R DLBCL的患者(Neelapu S等人,N Engl J Med.2017,377:2531-44)中显示出显著功效。尽管这些研究证实了前所未有的功效，但还显而易见的是并非所有患者都对抗CD19 CAR-T细胞有反应，而且即使对于最初有反应的那些患者，反应持久性仍受限制。患者对CAR-T细胞疗法有反应的能力可能受例如先前治疗线的数目或类型、升高的关于CAR-T细胞的抑制信号表达(例如PD-L1，其造成抑制)、靶抗原表达的变化或表位丢失影响。

随着出现用于治疗B细胞恶性肿瘤的其他CD19导向的方式(诸如单克隆抗体和双特异性T细胞衔接体(BiTe))，适当的治疗排序问题有待解决。同样地，不清楚用单克隆抗体(诸如塔法西他单抗)靶向CD19是否将干扰靶向CD19的CAR-T在后续疗法中发挥其抗肿瘤作用的能力。

免疫疗法的高潜能通常伴随有肿瘤逃逸的警告，其中克隆肿瘤细胞发展出一种机制，它们可以通过这种机制抵抗特定的疗法。其中最早鉴别的抵抗机制为从肿瘤细胞的表面下调CD19(Grupp SA等人,NEngl J Med.(2013)368:1509-18，Ruella M Comput StructBiotechnol J.(2016)14:357-62)。治疗性化合物对肿瘤施加选择性压力，并且已对治疗性化合物产生抗性的恶性克隆能够增殖。举例而言，在CD19/CD3双特异性T细胞衔接体(博纳吐单抗)治疗下，在约10％至20％的患有急性成淋巴细胞性白血病(ALL)的患者中，出现CD19阴性(CD19-)复发。这种免疫逃逸可由多种机制促成，这些机制诸如谱系切换、免疫编辑、表位丢失、剪接或外显子变体和点突变，包括获取使CD19呈现非功能性的继发性CD19突变。免疫逃逸是针对患有ALL的患者的治疗抗性的主要形式(Braig F等人,2017Blood.129(1):100-104；Grupp SA等人,N Engl J Med.2013年4月18日；368(16):1509-1518)。可针对未被抗体识别或不受其结合影响的克隆选择通过单克隆抗体靶向肿瘤细胞表面上的特异性抗原。

在此类情况下，靶向免疫疗法时代待解决的重要问题是：在针对相同肿瘤抗原的先前疗法之后，在疾病进展之后，是否可利用不同的癌症免疫疗法方式靶向所述相同抗原？在此类临床情境中，存在对于来自先前疗法线的持续抗原阻断的担忧。另外，存在对于靶向特定抗原的先前疗法的选择性压力允许并不表达该抗原的克隆进展，从而使得针对相同靶标的后续疗法无效(抗原逃逸)的担忧。开发用于减弱、防止或避免抗原丢失逃逸或不存在对针对相同抗原的先前疗法线的任何干扰的新方法将因此代表该领域的进步。

从先前技术已知，CD19可易于在Ab结合时进行内化(Pulczynski S Blood.1993,81(6):1549-57)并且肿瘤细胞上的CD19表达的丢失是用靶向CD19的T细胞治疗的患者中的常见逃逸机制(Grupp SA,NEngl J Med.2013年4月18日；368(16):1509-1518)。已描述了双重CD19和CD123靶向防止CD19定向免疫疗法之后的抗原丢失复发(Ruella等人,J ClinInvest.2016年10月3日；126(10):3814-3826)，但此概念使用多个靶标的组合。

本发明是基于在用单克隆抗CD19抗体他法西他单抗(MOR208)治疗后仍可靶向CD19的惊人发现。因此，有可能在他法西他单抗治疗之后，施用另一任选地不同的抗CD19部分。具体而言，本公开的发明人惊奇地发现在他法西他单抗与CD19导向的CAR-T细胞(CART19)之间不存在功能性干扰。这一发现得到了一项未公布的病例研究的支持，该研究展示在利用他法西他单抗作为L-MIND试验的一部分的先前治疗之后，通过抗CD19 CAR-T细胞疗法实现的患有复发性且难治性DLBCL的患者的持续缓解。

发明内容

公开了用于治疗血液癌的方法和组合物，所述方法包括向患者施用包含自体T细胞的组合物，所述自体T细胞表达特异性结合至对癌症具有特异性的抗原的重组受体，其中所述患者先前用包含抗CD19抗体的组合物进行治疗，所述抗体包含：

i)包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区，或

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

更具体而言，一个实施方案涉及用于治疗CD19+血液癌的方法和化合物。具体而言，对癌症具有特异性的抗原为人CD19。优选地，CD19+血液癌为DLBCL。在另一优选实施方案中，DLBCL为复发性或难治性(R/R)DLBCL。

在一个实施方案中，表达重组受体的自体T细胞为CAR-T细胞。在一个实施方案中，CAR-T细胞针对CD20或CD19。在一个优选实施方案中，CAR-T细胞针对CD19。更具体而言，CAR-T细胞针对CD19并且选自由以下组成的组：阿基仑赛(axicabtagen-ciloleucel)

替沙仑赛(tisagenlecleucel)

利基迈伦塞(lisocabtagene maraleucel)(JCAR017)和UCART19。

具体而言，公开了用于治疗患者的癌症的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者先前用抗CD19抗体进行治疗。

更具体而言，一个实施方案涉及用于治疗患者的癌症的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗的组合物进行治疗。在特定实施方案中，公开了用于治疗患者的癌症的替沙仑赛CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗的组合物进行治疗。特定实施方案涉及用于治疗患者的R/R DLBCL的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗的组合物进行治疗。另一方面涉及用于治疗患者的R/RDLBCL的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗和来那度胺的组合疗法进行治疗。在某一特定实施方案中，公开了用于治疗患者的R/R DLBCL的替沙仑赛CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗的组合物进行治疗。在另一方面，公开了用于治疗患者的R/R DLBCL的替沙仑赛CAR-T细胞，其中所述患者先前用包含他法西他单抗和来那度胺的组合疗法进行治疗。

附图说明

图1：他法西他单抗针对具有和不具有自然杀伤(NK)细胞的Jeko-1细胞系(A)的细胞毒性。在NK细胞存在或不存在下，在与不同浓度的他法西他单抗一起孵育CD19+、荧光素酶+Jeko细胞之后24小时评定细胞毒性。在NK细胞存在下，他法西他单抗展现显著更高的抗肿瘤细胞毒性。在24小时之后，通过生物发光成像测定活性。(n＝3个独立实验，数据与靶向Nalm-6和Ly7细胞系(B和C)一致)。

图2：克隆FMC63(CART19中的CD19结合结构域)与他法西他单抗竞争CD19结合。在用2或0.5mg/mL他法西他单抗治疗Jeko细胞4小时之后，执行使用FMC63抗CD19抗体的流式细胞术。通过流式细胞术观测到很大程度上减小的CD19信号，指示他法西他单抗与FMC63直接竞争结合。

图3：在单克隆抗CD19抗体他法西他单抗存在下，CART19展现有效的抗原特异性细胞毒性。将荧光素酶阳性CD19+Jeko细胞(A)与不同浓度的他法西他单抗一起孵育，接着如所指示在3小时后以不同的E:T比率添加CART19细胞。在24小时之后，通过生物发光成像测定活性(n＝3个独立实验)。当使用Ly7或Nalm-6细胞系时，获得一致的结果(B和C)。

图4：在抗CD19抗体他法西他单抗存在下，CART19细胞继续显示显著的抗原特异性脱粒和细胞因子产生。当CART19细胞或未经转导的T细胞(UTD)与Jeko(在具有或不具有他法西他单抗预处理的情况下)以1:5比率并且在CD28、CD49d和莫能菌素(monensin)存在下一起孵育时(根据标准脱粒方法)，尽管CD19与单克隆抗体结合，但CART19继续显示类似水平的脱粒和细胞因子产生(n＝2个独立实验)。在不存在与存在他法西他单抗之间，GM-CSF、INFγ、IL-2和MIP1b细胞因子产生水平没有不同(数据未显示)。

图5：CART19细胞展现不因他法西他单抗存在受损的显著抗原特异性增殖。当将CART19或UTD与CD19+Jeko细胞以1:1比率在他法西他单抗存在或不存在下共培养时，CART19而非UTD展现显著抗原特异性增殖，所述抗原特异性增殖与CD19被他法西他单抗阻断时的抗原特异性增殖没有不同。

图6：DLBCL病例研究：在他法西他单抗+来那度胺之后，抗CD19 CAR-T细胞疗法是可行的。

图7：在第-14天，通过将JeKo-1细胞注射到NGS小鼠中来诱导肿瘤。在第-8天，将小鼠随机分配成他法西他单抗组(10只小鼠)和PBS组(4只小鼠，Δ)。他法西他单抗组经由腹膜内注射接受10MG/KG每周3次的他法西他单抗。在第-1天，将接受他法西他单抗的小鼠随机分配成他法西他单抗继续(○)组或他法西他单抗中止(□)组。在第0天，来自3个组的全部小鼠接受2.5X10⁶个CART19细胞(IV)。与他法西他单抗中止组或PBS对照组相比，他法西他单抗继续组显示存活期缩减(**P＝0.005，对数等级检验，继续组对比于中止组或继续组对比于PBS组，在PBS组与他法西他单抗中止组之间不存在显著差异)。

图8：在第-14天，通过将JeKo-1细胞注射到NGS小鼠中来诱导肿瘤。在第-8天，将小鼠随机分配成他法西他单抗组(10只小鼠)和PBS组(4只小鼠，Δ)。他法西他单抗组经由腹膜内注射接受10mg/kg每周3次的他法西他单抗。在第-1天，将接受他法西他单抗的小鼠随机分配成他法西他单抗继续(○)组或中止(□)组。在第0天，来自3个组的全部小鼠接受2.5x10⁶个CART19细胞(IV)。(A)与中止组或PBS对照组相比，他法西他单抗继续组显示更高的肿瘤负荷(****p<0.0001，双因素方差分析，继续组对比于中止组或继续组对比于PBS组)。(B)在他法西他单抗中止组与PBS组之间未观测到不同(n.s.，即不显著，双因素方差分析，中止组对比于PBS组)。

定义

术语“抗体”意指单克隆抗体，包括任何同种型，诸如IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。IgG抗体由通过二硫键接合的两条同一重链和两条同一轻链组成。各重链和轻链含有恒定区和可变区。各可变区含有三个称为“互补决定区”(“CDR”)或“高变区”的区段，它们主要负责结合抗原的表位。它们被称为CDR1、CDR2和CDR3，从N末端依次进行编号。CDR外部的可变区的较高度保守部分称为“框架区”。“抗体片段”意指含有至少一条可变重链或可变轻链的Fv、scFv、dsFv、Fab、Fab'F(ab')2片段或另一片段，可变重链或可变轻链各自含有CDR和框架区。

“VH”是指抗体或抗体片段的免疫球蛋白重链的可变区。“VL”是指抗体或抗体片段的免疫球蛋白轻链的可变区。

术语“CD19”是指称为CD19的蛋白质，其具有以下同义词：B4、B淋巴细胞抗原CD19、B淋巴细胞表面抗原B4、CVID3、分化抗原CD19、MGC12802和T细胞表面抗原Leu-12。人CD19(UniProt-P15391)具有以下氨基酸序列：

MPPPRLLFFLLFLTPMEVRPEEPLVVKVEEGDNAVLQCLKGTSDGPTQQLTWSRESPLKPFLKLSLGLPGLGIHMRPLAIWLFIFNVSQQMGGFYLCQPGPPSEKAWQPGWTVNVEGSGELFRWNVSDLGGLGCGLKNRSSEGPSSPSGKLMSPKLYVWAKDRPEIWEGEPPCLPPRDSLNQSLSQDLTMAPGSTLWLSCGVPPDSVSRGPLSWTHVHPKGPKSLLSLELKDDRPARDMWVMETGLLLPRATAQDAGKYYCHRGNLTMSFHLEITARPVLWHWLLRTGGWKVSAVTLAYLIFCLCSLVGILHLQRALVLRRKRKRMTDPTRRFFKVTPPPGSGPQNQYGNVLSLPTPTSGLGRAQRWAAGLGGTAPSYGNPSSDVQADGALGSRSPPGVGPEEEEGEGYEEPDSEEDSEFYENDSNLGQDQLSQDGSGYENPEDEPLGPEDEDSFSNAESYENEDEELTQPVARTMDFLSPHGSAWDPSREATSLGSQSYEDMRGILYAAPQLRSIRGQPGPNHEEDADSYENMDNPDGPDPAWGGGGRMGTWSTR(SEQ ID NO:13)。本申请还涵盖人CD19的变体(例如，剪接变体、多态性和SNP)。

“MOR00208”、“MOR208”、“XmAb 5574”或“他法西他单抗”为抗CD19抗体。VH和VL结构域的氨基酸序列分别在SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8中给出。MOR208重链Fc区的氨基酸序列为：ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:9)。

MOR208轻链Fc区的氨基酸序列为：

RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:10)。MOR208抗体在以引用方式整体并入的序列号为12/377,251的美国专利申请中描述为名为如下的4G7 H1.52杂合S239D/I332E/4G7 L1.155的抗体(后来名为MOR00208)：

>4G7 H1.52杂合S239D/I332E

EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGYTFTSYVMHWVRQAPGKGLEWIGYINPYNDGTKYNEKFQGRVTISSDKSISTAYMELSSLRSEDTAMYYCARGTYYYGTRVFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:11)

>4G7 L1.155

DIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRSSKSLQNVNGNTYLYWFQQKPGQSPQLLIYRMSNLNSGVPDRFSGSGSGTEFTLTISSLEPEDFAVYYCMQHLEYPITFGAGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSK ADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:12)

“施用的”或“施用”包括但不限于通过可注射形式，诸如(例如)静脉内、肌肉内、皮内或皮下途径或经粘膜途径，例如以用于吸入的鼻用喷雾或气溶胶形式或以可摄取的溶液、胶囊或片剂形式来递送药物。优选地，施用是通过可注射形式。

如本文所用，术语“嵌合抗原受体(CAR)”可指例如工程化的T细胞受体、嵌合T细胞受体或嵌合免疫受体，并且涵盖在特定免疫效应细胞上移植限定特异性的工程化的受体。可采用CAR以在T细胞上赋予单克隆抗体的特异性，从而允许产生大量特异性T细胞，例如用于过继细胞疗法。在具体实施方案中，例如，CAR将细胞的特异性导向至肿瘤相关抗原。在一些实施方案中，CAR包含胞内活化结构域、跨膜结构域和包含肿瘤相关抗原结合区的胞外结构域。在一些方面，CAR包含源自单克隆抗体的FMC63单链可变片段(scFv)的融合物，这些单克隆抗体融合至铰链接头CD8h、跨膜结构域CD8TM和信号传导胞内结构域41BBζ。CAR设计的特异性可源自抗体片段(例如，scFv、Fab、VHH、scFab)、受体配体(例如，肽)或源自Dectin。在具体实施方案中，我们可通过使用对B谱系分子CD19具有特异性的CAR重导向T细胞的特异性来靶向恶性B细胞。在某些情况下，CAR包含用于其他共刺激信号传导的结构域，诸如(但不限于)CD3ζ、FcR、CD27、CD28、CD137、DAP10、41BBζ和/或OX40。在一些情况下，分子可与CAR共表达，这些分子包括共刺激分子、用于成像(例如，用于正电子发射断层显像)的报告基因、在添加前药时条件性地剥蚀T细胞的基因产物、归巢受体、细胞因子和细胞因子受体。

化合物或组合的“治疗有效量”是指足以治愈、减轻或部分地遏制给定疾病或病症及其并发症的临床表现的量。对特定治疗目的有效的量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受试者的体重和一般状态。应当理解，测定适当剂量可使用常规实验通过构建值的矩阵并测试矩阵中的不同点来实现，所有这些均在经培训医师或临床科学家的普通技能内。

术语“血液癌”包括涉及造血源组织中的异常细胞生长和/或增殖的血源性肿瘤和疾病或病症，诸如淋巴瘤、白血病和骨髓瘤。

非霍奇金氏淋巴瘤(“NHL”)为起源于淋巴细胞的异质恶性肿瘤。在美国，据估计发病率为每年65,000人，其中死亡率为约20,000人(American Cancer Society,2006；和SEERCancer Statistics Review)。疾病可在所有年龄段中出现，常见发作开始于超过40岁的成年人，发病率随着年龄增长而增加。NHL的特征在于积聚于淋巴结、血液、骨髓和脾中的淋巴细胞的克隆增殖，但可能涉及任何主要器官。病理学家和临床医师所使用的当前分类系统为世界卫生组织(WHO)肿瘤分类，其将NHL分组成前体和成熟B细胞或T细胞肿瘤。对于进入临床试验，PDQ当前将NHL划分为惰性的或侵袭性的。惰性NHL组主要由以下组成：滤泡性亚型、小淋巴细胞性淋巴瘤、MALT(粘膜相关淋巴组织)和边缘区淋巴瘤；惰性涵盖约50％的新近诊断的B细胞NHL患者。侵袭性NHL包括经组织学诊断患有以下的患者：原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBL、“DLBCL”或DLCL)(40％所有新近诊断的患者患有弥漫性大细胞淋巴瘤)、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's)和套细胞淋巴瘤(“MCL”)。用于组合化学疗法的最常用剂包括环磷酰胺、长春新碱和强的松(CVP)；或环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、强的松(CHOP)。约70％至80％的患者将对其初始化学疗法有反应，缓解持续时间持续约2至3年。最终，大部分患者会复发。抗CD20抗体(利妥昔单抗)的发现和临床使用在反应和存活率上提供了显著改善。对于大部分患者的当前护理标准为利妥昔单抗+CHOP(R-CHOP)或利妥昔单抗+CVP(R-CVP)。显示利妥昔单抗疗法在若干类型的NHL中有效，并且当前批准作为用于惰性(滤泡性淋巴瘤)和侵袭性NHL(弥漫性大B细胞淋巴瘤)两者的第一线治疗。然而，存在抗CD20单克隆抗体(mAb)的显著限制，包括原发性耐药(在复发性惰性患者中为50％反应)、获得性耐药(在再治疗之后为50％反应率)、罕见完全反应(在复发性群体中为2％完全反应率)和持续复发模式。最后，许多B细胞并不表达CD20，并且因此许多B细胞病症不可使用抗CD20抗体疗法进行治疗。

慢性淋巴细胞性白血病(也称为“慢性淋巴白血病”或“CLL”)是由B淋巴细胞的异常积聚所引起的成年人白血病类型。在CLL中，恶性淋巴细胞可能看似正常且成熟，但它们不能够有效地应对感染。CLL为成年人最常见的白血病形式。男性罹患CLL的机率为女性的两倍。然而，关键的风险因素是年龄。超过75％的新病例是在超过50岁的患者中诊断出的。每年诊断出超过10,000例病例并且死亡率接近每年5,000例(American Cancer Society,2006；and SEER Cancer Statistics Review)。CLL是一种不可治愈的疾病，但在大多数情况下进展缓慢。许多患有CLL的人多年来过着正常且积极的生活。由于其发作缓慢，因此早期CLL通常不予治疗，这是因为据信早期CLL干预不会改善存活时间或生活质量。替代地，随着时间推移监测状况。初始CLL治疗视疾病的确切诊断和进展而变化。存在几十种用于CLL疗法的剂。诸如FCR(氟达拉滨、环磷酰胺和利妥昔单抗)和BR(依鲁替尼和利妥昔单抗)的组合化学疗法方案有效用于新近诊断CLL和复发性CLL两者。同种异体骨髓(干细胞)移植由于其风险而很少用作CLL的第一线治疗。

另一类型的白血病是视为CLL变体的小淋巴细胞性淋巴瘤(“SLL”)，其缺乏CLL诊断所需的克隆淋巴细胞增多，但另外共有病理和免疫表型特征(Campo等人,2011)。SLL的定义需要存在淋巴结病和/或脾肿大。此外，B淋巴细胞在外周血中的数目不应超出5E+09/L。在SLL中，只要可能，应通过淋巴结切片的组织病理学评估来证实诊断(Hallek等人,2008)。在美国，SLL的发病率占CLL的约25％(Dores等人,2007)。

另一类型的白血病为急性成淋巴细胞性白血病(ALL)，也称为急性淋巴细胞性白血病。ALL的特征在于骨髓中恶性且未成熟的白细胞(也称为淋巴母细胞)的过度产生和不断增殖。“急性”是指循环淋巴细胞(“母细胞”)的未分化、不成熟状态，并且如果保持不治疗，则疾病进展迅速并且预期寿命为数周至数月。

如此上下文中所用，“受试者”或“患者”是指任何哺乳动物，包括啮齿动物，诸如小鼠或大鼠；和灵长类动物，诸如食蟹猴(长尾猕猴(Macaca fascicularis))、恒河猴(恒河猕猴(Macaca mulatta))或人(智人(Homo sapiens))。优选地，受试者或患者为灵长类动物，且最优选地为人。

术语“组合”或“药物组合”是指施用一种疗法外加另一疗法。同样地，“与......组合”包括以任何顺序同步(例如，同时)并且连续施用。作为非限制性实例，可在向患者施用第二疗法(例如药剂，诸如来那度胺)之前(例如，1分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周、8周、9周、10周、11周或12周)、与其同时或在其之后(例如，1分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周或更长时间)施用第一疗法(例如剂，诸如抗CD19抗体)。

术语“序贯组合”或“序贯治疗组合”是指在完成先前疗法之后施用不同疗法。另外的疗法可包括于两种疗法之间。举例而言并且作为如本文所公开的一个实施方案，序贯组合是指在患者已从包含如本文所公开的抗CD19抗体的先前疗法复发或难以用所述先前疗法治疗之后，用针对CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞治疗患者。在一个实施方案中，在施用第二不同疗法之前1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周或更长时间完成序贯组合的先前或第一疗法。

“沙利度胺类似物”包括但不限于沙利度胺本身、来那度胺(CC-5013，Revlimid^TM)、泊马度胺(Pomalidomide)(CC4047，Actimid^TM)和公开于WO2002068414和WO2005016326中的化合物，这些申请以引用方式整体并入。该术语是指使用沙利度胺结构作为主链的合成化学化合物(例如，已添加侧基或已从母结构删除这些基团)。类似物与沙利度胺及其代谢化合物在结构上不同，诸如不同之处在于烷基链的长度、分子片段、一种或多种官能团或离子化的改变。术语“沙利度胺类似物”还包括沙利度胺的代谢物。沙利度胺类似物包括个别化合物的S-对映异构体和R-对映异构体的外消旋混合物，以及个别地S-对映异构体或R-对映异构体。外消旋混合物为优选的。沙利度胺类似物包括具有以下结构的化合物，诸如来那度胺：

如本文所用，术语“复发”是指在初始反应时段之后，例如在用疗法，例如癌症疗法进行先前治疗(例如，完全反应或部分反应)之后，疾病(例如，癌症)的再现。更一般地，在一个实施方案中，反应(例如，完全反应或部分反应)可涉及可检测的MRD(微小残留病)的缺失。在一个实施方案中，初始反应时段持续至少1、2、3、4、5或6天；至少1、2、3或4周；至少1、2、3、4、6、8、10或12个月；或至少1、2、3、4或5年。

如本文所用，“难治性”是指对治疗没有反应的疾病，例如癌症。在实施方案中，难治性癌症可在治疗开始前或开始时对治疗具有抗性。在其他实施方案中，难治性癌症可在治疗期间变成具有抗性的。难治性癌症也称为抗性癌症。

表1序列表

在各个方面，本发明涉及编码如本文所述经公开用于治疗患者的癌症的抗体或CAR中的任一者的核酸序列。

工作实施例

用于实验的CART19细胞是通过慢病毒转导具有第二代CD19 CAR构建体(克隆FMC63作为CD19结合结构域，FMC63-CD8h-CD8TM-41BBζ，类似于用于替沙仑赛的经FDA批准的构建体)的健康供体T细胞而产生。从正常供体分离的T细胞以1:3比率(细胞:珠粒)使用Cell Therapy Systems Dynabeads CD3/CD28(Life Technologie s,Oslo,Norway)刺激，并且接着在用MOI为3.0的慢病毒颗粒刺激之后24小时进行转导。在第6天执行磁珠去除以及通过流式细胞术评估T细胞上的CAR19表达。在第8天收获CART细胞并低温保藏以用于未来实验。如各实验中所指定，将CART细胞在用于实验中之前解冻并且在T细胞培养基中静置6至12小时。

实施例1

在CD19阳性靶细胞系、Jeko(套细胞淋巴瘤)、Ly7(DLBCL)和Nalm-6(ALL)上测试他法西他单抗或CART19细胞的功能活性。细胞系最初获自ATCC或DSMZ。将细胞系用荧光素酶(萤火虫/EGFP、CBG/EGFP或CBR/EGFP)转导，接着进行分类，以获得大于99％阳性群体。在24h ADCC测定(他法西他单抗滴定加上自然杀伤(NK)细胞；图1)和T细胞细胞毒性测定(CART19，E:T滴定；数据未显示)中，针对两种疗法观测所测试的全部细胞系上的独特活性。根据标准方案(CaoL-F等人，Cytometry A,2010,第77卷6(第534-545页)执行杀伤测定。简言之，在NK细胞存在或不存在下，在用不同浓度的他法西他单抗孵育CD19+荧光素酶+靶细胞之后24小时评定细胞毒性。

实施例2

研究了在他法西他单抗与CAR之间的直接CD19结合竞争的情况下，所观测的CART19活性是否可能受他法西他单抗影响。对于针对此类结合竞争的第一测试，将CD19+细胞系Nalm-6或Jeko与2或0.5mg/mL他法西他单抗一起孵育，以使受体饱和。使用FMC63抗体(携带与CART19相同的CD19结合结构域)的后续流式细胞术分析未能检测CD19表达，从而指示FMC63与他法西他单抗之间的直接结合竞争(图2)。为了研究此类结合竞争对CART19细胞效应功能的任何潜在影响，将他法西他单抗以不断增大的浓度与靶细胞(CD19+细胞系Jeko、Ly7或Nalm-6)一起孵育，接着将CART19细胞以不同效应物:靶标比率(0.1:1至10:1)添加至细胞培养物中，而不添加其他效应细胞。他法西他单抗的存在(即，结合至CD19抗原)并不影响重要的CART细胞效应功能，诸如抗原特异性杀伤(图3)、脱粒(图4)、CART19细胞的细胞因子产生或抗原特异性增殖(图5)。

概括地说，数据指示尽管存在他法西他单抗及其对CD19结合的竞争，但CART19细胞继续展现有效的抗原特异性效应功能。因此，通过他法西他单抗靶向CD19并不体外损害CD19导向的嵌合抗原受体(CAR)T细胞活性。

实施例3

在最初呈现有8cm肠系膜肿块的58岁女性患者的病例研究中，检查揭示了由滤泡性淋巴瘤引起的III期生发中心B细胞样(GCB)DLBCL、Ki-67增殖指数80％和IGH/BCL2融合。患者接受了6个周期的剂量调整的R-EPOCH。尽管此一线疗法实现完全缓解(CR)，但患者在两年内经历疾病复发。随后，患者接受利妥昔单抗加上异环磷酰胺、卡铂和依托泊苷(RICE)化学疗法，所述化学疗法实现第二CR。患者的ASCT下降。约两年之后，出现第二次复发。在满足合格标准之后，其入选L-MIND试验并且接受TAFA加上LEN持续6个周期(1周期＝28天；静脉内TAFA 12mg/kg，每周一次x 3个周期，此后两周一次；在各周期的第1至21天每日25mgLEN)。TAFA/LEN具有良好耐受性。利用此研究方案实现了疾病稳定，随后6个月后有所进展。第四线治疗由利妥昔单抗、吉西他滨(gemcitabine)、奥沙利铂(oxaliplatin)(R-GEM-OX)组成，持续4个周期，患者对所述第四线治疗具有部分反应。此后不久，患者接受针对CD19的CAR T疗法(阿基仑赛

)(图6)。治疗过程因2级细胞因子释放综合征而复杂化。完全反应在治疗后一个月实现，此后一直持续。截至本日期，患者保持不变而无复发的临床迹象。因此，尽管在患有复发性和难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(R/R-DLBCL)的患者中利用他法西他单抗进行先前治疗，但利用针对CD19的CAR-T细胞疗法实现持续缓解。

他法西他单抗的半衰期为约16天，这表明它在五个月后的CAR T细胞输注之前被消除。尽管在TAFA后进展时未进行活组织检查，但假定CD19抗原逃逸并不能解释复发，这是因为患者已利用针对CD19的后续CAR-T细胞疗法实现了持续缓解。因此，尽管先前靶向相同抗原，但用抗CD19单克隆抗体他法西他单抗治疗后的疾病进展可不排除患者进行针对CD19的CAR-T细胞疗法。

实施例4

在第-14天，向NSG(NOD scidγ小鼠，免疫缺陷实验室小鼠)小鼠注射1X10⁶个荧光素酶+JEKO-1细胞。在第-8天，通过生物发光成像(BLI)评定肿瘤负荷并且将小鼠随机分配成他法西他单抗组(10只小鼠)和PBS组(4只小鼠)。他法西他单抗组经由腹膜内注射接受10MG/KG每周3次的他法西他单抗。在第-1天，通过BLI评定肿瘤负荷并且将小鼠随机分配成他法西他单抗继续组或中止组。在第0天，来自3个组的全部小鼠接受2.5X10⁶个CART19细胞(IV)。来自他法西他单抗继续组的那些小鼠平行于CART19细胞而持续他法西他单抗治疗。对于所有小鼠，每周一次执行监测肿瘤负荷的BLI并且监测小鼠的存活期。将小鼠处死。

在他法西他单抗继续组中观测到CD19竞争并且证实更短的存活时段(P＝0.005，对数等级检验，继续组对比于中止组或继续组对比于PBS组)。然而，他法西他单抗中止组使小鼠得到缓解并且未显示存活期缩减。总体而言，关于总存活期，在PBS组与他法西他单抗中止组之间不存在差异(对数等级检验)(图7)。

此外，与中止组或PBS对照组相比，他法西他单抗继续组显示更高的肿瘤负荷(****P<0.0001，双因素方差分析，继续组对比于中止组或继续组对比于PBS组)。在他法西他单抗中止组与PBS组之间未观测到不同(N.S.，即不显著，双因素方差分析，中止组对比于PBS组)(图8)。

因此，这些体内数据指示针对CD19的CAR-T细胞疗法未受先前他法西他单抗治疗损害。可以推断先前他法西他单抗疗法并不排除患者进行针对CD19的CAR-T细胞疗法。

然而，这些数据还指示在CD19抗体和CD19 CART竞争相同或重叠的CD19表位的情况下，此类CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞疗法的组合平行治疗可能不利地影响这些疗法的功效。

实施方案

在一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者先前用包含抗CD19抗体的组合物进行治疗，所述抗体包含有包含序列SYVMH(SEQID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

在一方面，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含以下序列的可变重链：

EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGYTFTSYVMHWVRQAPGKGLEWIGYINPYNDGTKYNEKFQGRVTISSDKSISTAYMELSSLRSEDTAMYYCARGTYYYGTRVFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:7)，和/或包含以下序列的可变轻链：

DIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRSSKSLQNVNGNTYLYWFQQKPGQSPQLLIYRMSNLNSGVPDRFSGSGSGTEFTLTISSLEPEDFAVYYCMQHLEYPITFGAGTKLEIK(SEQ ID NO:8)。

在一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗体包含与SEQ ID NO:7的可变重链和/或SEQ ID NO:8的可变轻链具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的可变重链和/或可变轻链。

在优选实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗体包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链。

在另一优选实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体他法西他单抗。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含与针对CD19的治疗剂竞争结合至人CD19的抗CD19抗体。

在其他实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，并且其中针对CD19的治疗剂选自由以下组成的组：抗体、抗体-药物缀合物、双特异性治疗剂、替代支架蛋白或嵌合抗原受体(CAR)T细胞。

在优选实施方案中，用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂为嵌合抗原受体(CAR)T细胞，其中患者难以用包含抗CD19抗体的先前治疗来治疗或从先前治疗复发。在某些实施方案中，CAR-T细胞优选为以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛(KTE-C19，Axi-cel，

)和/或替沙仑赛(CTL019，

)、利基迈仑赛(JCAR017，临床试验：例如NCT02631044、NCT03310619)或UCART19(S 68587，NCT02808442)。在另一方面，CAR-T细胞为CAR-T细胞构建体中的一者或它们中的两者或更多者的组合，这些构建体已知为KITE037、韦尔根那仑赛(welgenaleucel)、ICTCAR-003、IM-19、CTX-110、SSCAR-010、ICTCAR-011。

在其他实施方案中，用于治疗患者的癌症的治疗剂针对B细胞谱系标志物，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体。优选地，用于治疗患者的癌症的治疗剂针对CD19和/或CD20，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体他法西他单抗。

在另一个实施方案中，用于治疗患者的癌症的CAR-T细胞针对CD19和/或CD20，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体他法西他单抗。

在优选实施方案中，所述治疗剂用于药物组合物中。在其他实施方案中，所述治疗剂包含于药物组合物中。

在一方面，公开了一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体并且其中癌症为血液癌。在某些实施方案中，血液癌选自非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)滤泡性淋巴瘤(FL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、伯基特淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；白血病，诸如(例如)慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，血液癌为DLBCL。在其他实施方案中，癌症为复发性或难治性(R/R)癌症，优选为复发性或难治性血液癌。R/R血液癌选自R/R非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、R/R伯基特淋巴瘤和R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；R/R白血病，诸如(例如)R/R慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、R/R急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或R/R急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，R/R血液癌为复发性或难治性(R/R)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在特定实施方案中，公开了一种用于治疗患者的R/R DLBCL的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，优选地所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在特定实施方案中，公开了一种用于治疗患者的R/R DLBCL的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含他法西他单抗与来那度胺的组合。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的R/R DLBCL的针对CD19的CAR-T细胞，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含他法西他单抗与苯达莫司汀的组合。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ IDNO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQID NO:6)的LCDR3区。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链。

在特定方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含他法西他单抗。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链。

在特定方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含他法西他单抗。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体与来那度胺或苯达莫司汀组合治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ IDNO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体与来那度胺或苯达莫司汀组合治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ IDNO:8的可变轻链。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体与来那度胺或苯达莫司汀组合治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链。

在特定方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体与来那度胺或苯达莫司汀组合治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含他法西他单抗。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区，并且其中针对CD19的CAR-T细胞包含以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛

和/或替沙仑赛

利基迈仑赛(JCAR017)或UCART19(S 68587)。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，并且其中针对CD19的CAR-T细胞包含以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛

和/或替沙仑赛

利基迈仑赛(JCAR017)或UCART19(S68587)。

在一方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，并且其中针对CD19的CAR-T细胞包含以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛

和/或替沙仑赛

利基迈仑赛(JCAR017)或UCART19(S68587)。

在特定方面，本文公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后为难治性或复发性的并且用针对CD19的CAR-T细胞进行治疗，并且其中抗CD19抗体包含他法西他单抗，并且其中针对CD19的CAR-T细胞包含以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛

和/或替沙仑赛

利基迈仑赛(JCAR017)或UCART19(S68587)。

在其他方面，CAR-T细胞为CAR-T细胞构建体中的一者或它们中的两者或更多者的组合，这些构建体已知为KITE037、韦尔根那仑赛、ICTCAR-003、IM-19、CTX-110、SSCAR-010、ICTCAR-011。

在另一方面，公开了一种包含抗CD19抗体和针对CD19剂的嵌合抗原受体(CAR)T细胞的序贯治疗组合，所述序贯治疗组合用于治疗癌症。

在某一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞。

在另一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中至少每两周一次施用抗CD19抗体。

在另一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用。

在另一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者至少两周一次施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用。

在一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用，其中所述药剂为生物或化学治疗剂或其药学上可接受的盐。

在另一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用，其中所述药剂为治疗性抗体或抗体片段、氮芥、嘌呤类似物、沙利度胺类似物、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、BCL-2抑制剂、布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂或其药学上可接受的盐。

在另一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用，其中所述药剂选自由以下组成的组：利妥昔单抗、R-CHOP、环磷酰胺、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、芥尿嘧啶(uramustine)、异环磷酰胺、美法仑(melphalan)、苯达莫司汀、巯基嘌呤、硫唑嘌呤(azathioprine)、硫鸟嘌呤、氟达拉宾(fludarabine)、沙利度胺、来那度胺、泊利度胺、艾德昔布(idelalisib)、杜韦力西布(duvelisib)、考班昔布(copanlisib)、依鲁替尼(ibrutinib)、维奈托克(venetoclax)或它们的药学上可接受的盐。

在优选方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用，其中所述药剂为来那度胺或其药学上可接受的盐。

在特定方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体与来那度胺或其药学上可接受的盐组合施用，并且其中以每剂量12mg/kg的量至少每两周一次施用所述抗CD19抗体，并且其中以25mg的量每日施用来那度胺。

在某一方面，公开了一种用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞，其中抗CD19抗体与来那度胺或其药学上可接受的盐组合施用，并且其中以每剂量12mg/kg的量至少每两周一次施用所述抗CD19抗体，并且其中以25mg的量每日施用来那度胺，并且其中以至多12个周期的方案施用所述抗CD19抗体，其中对于第1周期至第3周期，每周一次施用所述抗CD19抗体，并且从第4周期开始，每14天施用所述抗CD19抗体，并且其中每日施用来那度胺。

在本文所公开的用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合的优选方面，抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

在本文所公开的用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合的其他方面，抗CD19抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链。在特定方面，本文所公开的序贯治疗组合包含用于治疗癌症的抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞，所述抗CD19抗体包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链。在一些方面，本文所公开的序贯治疗组合包含用于治疗癌症的他法西他单抗和针对CD19的CAR-T细胞。

在本文所公开的用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合的优选方面，抗CD19抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

并且针对CD19的CAR-T细胞包含以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛(KTE-C19，Axi-cel，

)和/或替沙仑赛(CTL019，

)、利基迈仑赛(JCAR017)或UCART19(S 68587)。在另一方面，CAR-T细胞为CAR-T细胞构建体中的一者或它们中的两者或更多者的组合，这些构建体已知为KITE037、韦尔根那仑赛、ICTCAR-003、IM-19、CTX-110、SSCAR-010、ICTCAR-011。

在本文所公开的用于治疗癌症的包含抗CD19抗体和针对CD19的CAR-T细胞的序贯治疗组合的优选方面，癌症为选自以下的血液癌：非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)滤泡性淋巴瘤(FL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、伯基特淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；白血病，诸如(例如)慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，血液癌为DLBCL。在其他实施方案中，癌症为复发性或难治性(R/R)癌症，优选为复发性或难治性血液癌。R/R血液癌选自R/R非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、R/R伯基特淋巴瘤和R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；R/R白血病，诸如(例如)R/R慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、R/R急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或R/R急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，R/R血液癌为复发性或难治性(R/R)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在一个优选方面，序贯治疗组合包含用于治疗患者的DLBCL的他法西他单抗和阿基仑赛

CAR-T细胞，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发。

CAR-T细胞，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含他法西他单抗。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者先前用包含针对CD19的治疗剂的组合物进行治疗。在某一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者先前用包含针对CD19的CAR-T细胞的组合物进行治疗。

在优选实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含SEQ ID NO:7的可变重链和/或包含SEQ ID NO:8的可变轻链，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含与SEQ ID NO:7的可变重链和/或SEQ ID NO:8的可变轻链具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的可变重链和/或可变轻链，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在某一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在特定实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的包含他法西他单抗的抗CD19抗体，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在另一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19 CAR-T细胞，其中嵌合抗原受体与抗CD19抗体竞争结合至人CD19。

在其他实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19治疗剂，并且其中治疗剂选自由以下组成的组：抗体、抗体-药物缀合物、双特异性治疗剂、替代支架蛋白或CAR-T细胞。

在优选实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19 CAR-T细胞，并且其中抗CD19抗体包含他法西他单抗。在某些实施方案中，CAR-T细胞优选为以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛(KTE-C19，Axi-cel，

)和/或替沙仑赛(CTL019，

)、利基迈仑赛(JCAR017，临床试验：例如NCT02631044、NCT03310619)或UCART19。在另一个实施方案中，CAR-T细胞为CAR-T细胞构建体中的一者或它们中的两者或更多者的组合，这些构建体已知为KITE037、韦尔根那仑赛、ICTCAR-003、IM-19、CTX-110、SSCAR-010、ICTCAR-011。

在其他实施方案中，用于治疗患者的癌症的抗体针对B细胞谱系标志物，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含治疗性抗CD19剂。

在另一个实施方案中，用于治疗患者的癌症的抗体针对CD19和/或CD20，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含治疗性抗CD19剂。

在其他实施方案中，用于治疗患者的癌症的抗体针对B细胞谱系标志物，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在另一个实施方案中，用于治疗患者的癌症的抗体针对CD19和/或CD20，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在优选方面，针对B细胞谱系标志物(例如，CD19和/或CD20)的所述抗体用于药物组合物中。在其他方面，针对B细胞谱系标志物(例如，CD19和/或CD20)的所述抗体包含于药物组合物中。

在一个实施方案中，公开了一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者先前用包含针对CD19的CAR-T细胞的组合物进行治疗，并且其中癌症为血液癌。在某些实施方案中，血液癌选自非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)滤泡性淋巴瘤(FL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、伯基特淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；白血病，诸如(例如)慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，血液癌为DLBCL。在其他实施方案中，癌症为复发性或难治性(R/R)癌症，优选为复发性或难治性血液癌。R/R血液癌选自R/R非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、R/R伯基特淋巴瘤和R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；R/R白血病，诸如(例如)R/R慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、R/R急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或R/R急性骨髓白血病(AML)。在优选实施方案中，R/R血液癌为复发性或难治性(R/R)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在特定实施方案中，公开了一种用于治疗患者的R/R DLBCL的抗CD19抗体，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞，其中抗CD19抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在特定实施方案中，公开了用于治疗患者的R/R DLBCL的他法西他单抗与来那度胺的组合，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在另一个实施方案中，公开了用于治疗患者的R/R DLBCL的他法西他单抗与苯达莫司汀的组合，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

治疗方法

在一个实施方案中，公开了一种用于利用针对CD19的CAR-T细胞治疗患者的癌症的方法，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体。

在一个实施方案中，公开了一种用于利用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体。

在一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者难以用先前治疗线来治疗或从先前治疗线复发，所述先前线包含抗CD19抗体。

在另一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者在先前治疗线中的至少一者中接受包含抗CD19抗体的药物组合物。

在另一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者在先前治疗线中的至少一者中接受包含抗CD19抗体的药物组合物，并且其中所述患者在先前治疗线中的至少一者之后为难治性或复发性的。

在另一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物治疗患者的血液癌的方法，其中所述患者在先前治疗线中的至少一者中接受包含他法西他单抗的药物组合物。

在一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中治疗患者的癌症的方法，所述方法包括以下步骤：

i)鉴别已接受包含抗CD19抗体的药物组合物的患者，所述抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区，以及

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含针对CD19的治疗剂的另一药物组合物。

i)鉴别已接受包含抗CD19抗体的药物组合物的患者，所述抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和/或SEQ ID NO:8的可变轻链，以及

i)鉴别已接受包含抗CD19抗体的药物组合物的患者，所述抗体包含SEQ ID NO:11的重链和/或SEQ ID NO:12的轻链，以及

i)鉴别已接受包含抗CD19抗体他法西他单抗的药物组合物的患者，以及

在某些实施方案中，步骤ii)中第二、第三、第四或任一其他多线疗法的针对CD19的治疗剂为单克隆抗体、抗体药物缀合物、双特异性治疗剂、替代支架蛋白或嵌合抗原受体(CAR)T细胞。优选地，第二、第三、第四或任一其他多线疗法的药物组合物的针对CD19的治疗剂为CAR-T细胞。

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含针对CD19的CAR-T细胞的另一药物组合物。

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含针对CD19的CAR-T细胞的另一药物组合物，其中CAR-T细胞选自阿基仑赛、替沙仑赛、利基迈仑赛和/或UCART19中的一者或组合。

在一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中治疗患者的R/R DLBCL的方法，所述方法包括以下步骤：

在一些实施方案中，公开了一种利用治疗性抗CD19剂治疗复发性或难治性CD19+血液癌的方法，所述方法包括以下步骤：

a)鉴别患有复发性或难治性CD19+血液癌的患者，以及

b)向所述患者施用有效量的针对CD19的治疗剂，

其中在步骤a)之前，患者已用包含抗CD19抗体的药物组合物进行治疗，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在特定实施方案中，公开了一种利用针对CD19的CAR-T细胞治疗复发性或难治性CD19+血液癌的方法，所述方法包括以下步骤：

a)鉴别患有复发性或难治性CD19+血液癌的患者，以及

b)向所述患者施用有效量的针对CD19的CAR-T细胞，其中在步骤a)之前，患者已用包含抗CD19抗体的药物组合物进行治疗，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在特定实施方案中，公开了一种利用针对CD19的CAR-T细胞治疗复发性或难治性DLBCL的方法，所述方法包括以下步骤：

a)鉴别患有复发性或难治性DLBCL的患者，以及

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在一些方面，提供了治疗方法，所述治疗方法涉及：(1)向患有癌症的患者施用包含抗CD19抗体的组合物，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

以及(2)随后向所述患者施用包含对于患者为自体性的并且表达特异性结合至CD19的重组受体的T细胞的组合物，其中所述患者为复发性或难治性的。

在优选实施方案中，用于治疗患者的癌症的针对CD19的自体T细胞为嵌合抗原受体(CAR)T细胞，其中所述患者先前用包含抗CD19抗体的组合物进行治疗。在某些实施方案中，CAR-T细胞优选为以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛(KTE-C19，Axi-cel，

)和/或替沙仑赛(CTL019，

在一个实施方案中，公开了一种用于利用抗CD19抗体治疗患者的癌症的方法，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在一个实施方案中，公开了一种用于利用包含抗CD19抗体的组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

在一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含抗CD19抗体的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者为难治性或复发性的并且在先前治疗线中接受包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物。

在另一个实施方案中，公开了一种用于在第二、第三、第四或任一其他多线治疗中利用包含抗CD19抗体的药物组合物治疗患者的癌症的方法，其中所述患者为难治性或复发性的并且在先前治疗线中的一者中接受包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物。

i)鉴别已接受包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物的患者，以及

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含抗CD19抗体的另一药物组合物，所述抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含抗CD19抗体的另一药物组合物，所述抗体包含SEQ ID NO:7的可变重链和/或SEQ ID NO:8的可变轻链。

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含抗CD19抗体的另一药物组合物，所述抗体包含SEQ ID NO:11的重链和/或SEQ ID NO:12的轻链。

ii)在所述第二、第三、第四或任一其他多线治疗中向患者施用包含抗CD19抗体他法西他单抗的另一药物组合物。

i)鉴别已接受包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物的患者，其中CAR-T细胞选自阿基仑赛、替沙仑赛、利基迈仑赛和/或UCART19中的一者或组合，以及

在一些实施方案中，公开了一种利用抗CD19抗体治疗复发性或难治性CD19+血液癌的方法，所述方法包括以下步骤：

a)鉴别患有复发性或难治性CD19+血液癌的患者，以及

b)向所述患者施用有效量的抗CD19抗体，其中在步骤a)之前，患者已用包含针对CD19的CAR-T细胞的药物组合物进行治疗，并且其中步骤b)中的抗CD19抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在一些方面，提供了治疗方法，所述治疗方法涉及：(1)向患有癌症的患者施用包含T细胞的组合物，所述T细胞对于患者为自体性的并且表达特异性结合至与癌症相关的CD19的重组受体，以及(2)随后向患者施用包含抗CD19抗体的组合物，其中患者为难治性或复发性的，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

在优选实施方案中，用于治疗患者的癌症的针对CD19的自体T细胞为嵌合抗原受体(CAR)T细胞，其中患者为难治性或复发性的并且其中患者随后用包含抗CD19抗体的组合物进行治疗。在某些实施方案中，CAR-T细胞优选为以下中的一者或以下中的两者或更多者的组合：阿基仑赛(KTE-C19，Axi-cel，

)和/或替沙仑赛(CTL019，

)、利基迈仑赛(JCAR017，临床试验：例如NCT02631044、NCT03310619)或UCART19。在另一个实施方案中，CAR-T细胞为(CAR)T细胞构建体中的一者或它们中的两者或更多者的组合，这些构建体已知为KITE037、韦尔根那仑赛、ICTCAR-003、IM-19、CTX-110、SSCAR-010、ICTCAR-011。

预测反应的方法

在另一个实施方案中，公开了一种用于确定患者在用他法西他单抗进行治疗之后是否有可能对针对CD19的CAR-T细胞疗法有反应的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使从患者分离的肿瘤样品与有效量的包含SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ IDNO:8的可变轻链的抗CD19抗体接触，以体外使抗原饱和，

b)以不同的效应物:靶标比率添加针对CD19的CAR-T细胞，以及

c)评定CAR-T细胞效应功能(例如，抗原特异性杀伤、脱粒、细胞因子产生或增殖)，

其中存在CAR-T细胞效应功能指示患者有可能对抗CD19CAR-T细胞疗法有反应，而不存在CAR-T细胞效应功能指示患者可能不对抗CD19 CAR-T细胞疗法有反应。

在另一个实施方案中，公开了一种用于确定难治性或复发性患者在用他法西他单抗进行治疗之后是否有可能对针对CD19的CAR-T细胞疗法有反应的方法，所述方法包括以下步骤：

b)以不同的效应物:靶标比率添加针对CD19的CAR-T细胞，以及

在特定实施方案中，不同的效应物:靶标(E:T)比率为0:1、0.3125:1、0.625:1、1.25:1、2.5:1、5:1和10:1。在一个实施方案中，抗CD19 CAR-T细胞包含格式FMC63-CD8h-CD8TM-41BBζ的CAR构建体。

针对CD19的治疗剂在制造用于治疗患者的血液癌的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

针对CD19的CAR-T细胞在制造用于治疗患者的血液癌的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

并且其中针对CD19的CAR-T细胞选自以下的组：阿基仑赛

替沙仑赛

利基迈仑赛或UCART19。

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

并且其中血液癌选自非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)滤泡性淋巴瘤(FL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、伯基特淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；白血病，诸如(例如)慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或急性骨髓白血病(AML)；复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏B细胞淋巴瘤，诸如(例如)R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、R/R伯基特淋巴瘤和R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；R/R白血病，诸如(例如)R/R慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、R/R急性成淋巴细胞性白血病(ALL)或R/R急性骨髓白血病(AML)，优选为R/R DLBCL。

针对CD19的阿基仑赛

CAR-T细胞在制造用于治疗患者的R/RDLBCL的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体他法西他单抗。

抗CD19抗体在制造用于治疗患者的血液癌的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞，并且其中所述抗CD19抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

抗CD19抗体在制造用于治疗患者的血液癌的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞，并且其中所述抗C19抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

并且其中针对CD19的CAR-T细胞选自以下的组：阿基仑赛

替沙仑赛

利基迈仑赛或UCART19。

抗CD19抗体在制造用于治疗患者的血液癌的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞，并且其中所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗，

抗CD19抗体在制造用于治疗患者的R/R DLBCL的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞，并且其中所述抗体包含：

ii)SEQ ID NO:7的可变重链和SEQ ID NO:8的可变轻链，或

iii)SEQ ID NO:11的重链和SEQ ID NO:12的轻链，或

iv)他法西他单抗。

他法西他单抗在制造用于治疗患者的R/R DLBCL的药剂中的用途，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含针对CD19的CAR-T细胞。

序列表

<110> 莫佛塞斯公司

<120> 序贯抗CD19疗法

<130> MS310/EP-PROV

<140>

<141>

<160> 13

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 1

Ser Tyr Val Met His

1 5

<210> 2

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 2

Asn Pro Tyr Asn Asp Gly

1 5

<210> 3

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 3

Gly Thr Tyr Tyr Tyr Gly Thr Arg Val Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 4

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 4

Arg Ser Ser Lys Ser Leu Gln Asn Val Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr

1 5 10 15

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 5

Arg Met Ser Asn Leu Asn Ser

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

肽”

<400> 6

Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Ile Thr

1 5

<210> 7

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 7

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Ser Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Thr Tyr Tyr Tyr Gly Thr Arg Val Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 8

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 8

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Gln Asn Val

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Asn Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Met Gln His

85 90 95

Leu Glu Tyr Pro Ile Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 9

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 9

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Asp Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Glu Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

225 230 235 240

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 10

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 10

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 11

<211> 451

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 11

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Ser Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Thr Tyr Tyr Tyr Gly Thr Arg Val Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Asp Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Glu

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 12

<211> 219

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> 来源

<223> /注释=“人工序列的描述：合成

多肽”

<400> 12

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Gln Asn Val

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Asn Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Met Gln His

85 90 95

Leu Glu Tyr Pro Ile Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 13

<211> 556

<212> PRT

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 13

Met Pro Pro Pro Arg Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe Leu Thr Pro Met

1 5 10 15

Glu Val Arg Pro Glu Glu Pro Leu Val Val Lys Val Glu Glu Gly Asp

20 25 30

Asn Ala Val Leu Gln Cys Leu Lys Gly Thr Ser Asp Gly Pro Thr Gln

35 40 45

Gln Leu Thr Trp Ser Arg Glu Ser Pro Leu Lys Pro Phe Leu Lys Leu

50 55 60

Ser Leu Gly Leu Pro Gly Leu Gly Ile His Met Arg Pro Leu Ala Ile

65 70 75 80

Trp Leu Phe Ile Phe Asn Val Ser Gln Gln Met Gly Gly Phe Tyr Leu

85 90 95

Cys Gln Pro Gly Pro Pro Ser Glu Lys Ala Trp Gln Pro Gly Trp Thr

100 105 110

Val Asn Val Glu Gly Ser Gly Glu Leu Phe Arg Trp Asn Val Ser Asp

115 120 125

Leu Gly Gly Leu Gly Cys Gly Leu Lys Asn Arg Ser Ser Glu Gly Pro

130 135 140

Ser Ser Pro Ser Gly Lys Leu Met Ser Pro Lys Leu Tyr Val Trp Ala

145 150 155 160

Lys Asp Arg Pro Glu Ile Trp Glu Gly Glu Pro Pro Cys Leu Pro Pro

165 170 175

Arg Asp Ser Leu Asn Gln Ser Leu Ser Gln Asp Leu Thr Met Ala Pro

180 185 190

Gly Ser Thr Leu Trp Leu Ser Cys Gly Val Pro Pro Asp Ser Val Ser

195 200 205

Arg Gly Pro Leu Ser Trp Thr His Val His Pro Lys Gly Pro Lys Ser

210 215 220

Leu Leu Ser Leu Glu Leu Lys Asp Asp Arg Pro Ala Arg Asp Met Trp

225 230 235 240

Val Met Glu Thr Gly Leu Leu Leu Pro Arg Ala Thr Ala Gln Asp Ala

245 250 255

Gly Lys Tyr Tyr Cys His Arg Gly Asn Leu Thr Met Ser Phe His Leu

260 265 270

Glu Ile Thr Ala Arg Pro Val Leu Trp His Trp Leu Leu Arg Thr Gly

275 280 285

Gly Trp Lys Val Ser Ala Val Thr Leu Ala Tyr Leu Ile Phe Cys Leu

290 295 300

Cys Ser Leu Val Gly Ile Leu His Leu Gln Arg Ala Leu Val Leu Arg

305 310 315 320

Arg Lys Arg Lys Arg Met Thr Asp Pro Thr Arg Arg Phe Phe Lys Val

325 330 335

Thr Pro Pro Pro Gly Ser Gly Pro Gln Asn Gln Tyr Gly Asn Val Leu

340 345 350

Ser Leu Pro Thr Pro Thr Ser Gly Leu Gly Arg Ala Gln Arg Trp Ala

355 360 365

Ala Gly Leu Gly Gly Thr Ala Pro Ser Tyr Gly Asn Pro Ser Ser Asp

370 375 380

Val Gln Ala Asp Gly Ala Leu Gly Ser Arg Ser Pro Pro Gly Val Gly

385 390 395 400

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Glu Gly Tyr Glu Glu Pro Asp Ser Glu Glu

405 410 415

Asp Ser Glu Phe Tyr Glu Asn Asp Ser Asn Leu Gly Gln Asp Gln Leu

420 425 430

Ser Gln Asp Gly Ser Gly Tyr Glu Asn Pro Glu Asp Glu Pro Leu Gly

435 440 445

Pro Glu Asp Glu Asp Ser Phe Ser Asn Ala Glu Ser Tyr Glu Asn Glu

450 455 460

Asp Glu Glu Leu Thr Gln Pro Val Ala Arg Thr Met Asp Phe Leu Ser

465 470 475 480

Pro His Gly Ser Ala Trp Asp Pro Ser Arg Glu Ala Thr Ser Leu Gly

485 490 495

Ser Gln Ser Tyr Glu Asp Met Arg Gly Ile Leu Tyr Ala Ala Pro Gln

500 505 510

Leu Arg Ser Ile Arg Gly Gln Pro Gly Pro Asn His Glu Glu Asp Ala

515 520 525

Asp Ser Tyr Glu Asn Met Asp Asn Pro Asp Gly Pro Asp Pro Ala Trp

530 535 540

Gly Gly Gly Gly Arg Met Gly Thr Trp Ser Thr Arg

545 550 555

Claims

1.一种用于治疗患者的癌症的针对CD19的治疗剂，其中所述患者难以用先前治疗来治疗或从先前治疗复发，所述先前治疗包含抗CD19抗体，所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

2.根据前述权利要求中任一项使用的针对CD19的治疗剂，其中所述治疗剂选自由以下组成的组：抗体、抗体-药物缀合物、双特异性治疗剂、替代支架蛋白或嵌合抗原受体(CAR)T细胞。

3.根据权利要求2使用的针对CD19的治疗剂，其中所述治疗剂为嵌合抗原受体(CAR)T细胞。

4.根据权利要求3使用的针对CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞，其中所述CAR-T细胞为阿基仑赛、替沙仑赛、利基迈仑赛或UCART19。

5.根据前述权利要求中任一项使用的针对CD19的治疗剂，其中所述癌症为血液癌并且选自非霍奇金氏B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤(FL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、伯基特淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、B细胞白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。

6.根据权利要求5使用的针对CD19的治疗剂，其中所述血液癌为复发性或难治性血液癌。

7.根据权利要求6使用的针对CD19的治疗剂，其中所述复发性或难治性血液癌为R/R-DLBCL。

8.一种用于治疗患者的癌症的抗CD19抗体，其中所述患者在这种抗CD19抗体治疗之后用针对CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞进行治疗，并且其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。

9.一种包含抗CD19抗体和针对CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞的序贯治疗组合，所述序贯治疗组合用于治疗癌症。

10.根据权利要求9所述的用于治疗癌症的序贯治疗组合，其中向癌症患者施用所述抗CD19抗体，并且其中在所述患者已复发或为难治性之后，向所述患者施用针对CD19的CAR-T细胞。

11.根据权利要求10所述的用于治疗癌症的序贯治疗组合，其中所述抗CD19抗体与一种或多种另外的药剂组合施用。

12.根据权利要求11所述的用于治疗癌症的序贯治疗组合，其中所述药剂为治疗性抗体或抗体片段、氮芥、嘌呤类似物、沙立度胺类似物、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、BCL-2抑制剂、布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂或它们的药学上可接受的盐。

13.根据权利要求12所述的用于治疗癌症的序贯治疗组合，其中所述药剂为来那度胺或其药学上可接受的盐。

14.根据权利要求13所述的用于治疗癌症的序贯治疗组合，其中以多至12个周期的方案施用所述抗CD19抗体，其中对于第1周期至第3周期，每周一次施用所述抗CD19抗体，并且从第4周期开始，每14天施用所述抗CD19抗体，并且其中每天施用来那度胺。

15.根据权利要求9至14中任一项所述的序贯治疗组合，其中所述抗CD19抗体包含有包含序列SYVMH(SEQ ID NO:1)的HCDR1区、包含序列NPYNDG(SEQ ID NO:2)的HCDR2区、包含序列GTYYYGTRVFDY(SEQ ID NO:3)的HCDR3区、包含序列RSSKSLQNVNGNTYLY(SEQ ID NO:4)的LCDR1区、包含序列RMSNLNS(SEQ ID NO:5)的LCDR2区和包含序列MQHLEYPIT(SEQ ID NO:6)的LCDR3区。