CN114277027A - 一种用于电泳分离物回收的用具及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种用于电泳分离物回收的用具，包括转移管和电泳槽，所述转移管上设置有腔体和用于裁切凝胶块的第一开口；凝胶片段经过所述第一开口从凝胶块上分离并转移至所述腔体内；载有凝胶片段的转移管从凝胶块上方转移至所述电泳槽内。使用转移管作为回收目标电泳分离物过程的承载体后，从裁切到电泳结束过程，被裁切下来的凝胶片段只经过一次裁切和转移，不需要切除凝胶片段上多余的凝胶，电泳完成后也不需要添加缓冲液对凝胶片段破碎离心除去凝胶后取缓冲液，但是，使用转移管电泳后所得的纯化液不含凝胶且体积小。回收过程不需要使用试剂盒，回收率接近100％，回收没有电泳分离物含量、分子量大小的限制，回收效率高且经济环保。
Description
技术领域
本发明涉及电泳分离技术领域，尤其是指一种用于电泳分离物回收的用具及其使用方法。
背景技术
琼脂糖凝胶电泳,是一种广泛应用于生物学、医学和化学领域的实验方法。例如琼脂糖凝胶电泳分离不同片段大小的DNA，其目的在于回收在琼脂糖凝胶中特定大小片段的目标DNA，然后用于酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等。传统的方法中，在分离出含有目标片段的琼脂糖后，先溶解琼脂糖凝胶并用离子交换柱吸附凝胶中的DNA，再通过多种缓冲液洗脱掉凝胶中附着的有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸等杂质，最后把目标DNA洗脱下来才得到回收后的目标DNA。然而，现有技术中存在许多的不足，例如：1)回收的效率不高，通常为60％-80％，如果凝胶中DNA含量低，回收后可能无法继续下一步酶切、PCR、测序、文库筛选、连接、转化等实验；2)回收DNA的量有上限限制，通常为10-15微克；3)回收DNA的片段大小有限制，通常为100bp-10kb,低于100bp或者超过10kb，会导致回收率严重下降或者回收失败；4)实验流程耗费时间久，一个样本的回收时间约为20min，多样本的回收会相应地增加时间的消耗；5)由于目前多数DNA回收的试剂盒依赖进口厂家，耗材昂贵。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：设计一种不依赖试剂盒、回收率高、耗时短的批量DNA回收方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种用于电泳分离物回收的用具，包括转移管和电泳槽，所述转移管上设置有腔体和用于裁切凝胶块的第一开口；凝胶片段经过所述第一开口从凝胶块上分离并转移至所述腔体内；载有凝胶片段的转移管从凝胶块上方转移至所述电泳槽内。
进一步地，所述转移管上还设置有便于取出电泳分离物的纯化液的第二开口，所述第一开口与所述第二开口分居所述转移管的两端。
进一步地，所述电泳槽内设置有与所述转移管匹配的槽位。
进一步地，所述转移管竖直放置于所述槽位上，所述电泳槽的正极位于负极上方，所述第二开口位于所述第一开口上方。
进一步地，所述第一开口呈矩形；所述第一开口的长度为A，宽度为B，其中，200mm≤A≤220mm，30mm≤B≤40mm。
进一步地，所述第二开口呈圆形，直径的长度为
或所述第二开口呈椭圆形，短轴的长度为C，长轴的长度为D；或所述第二开口呈矩形，长度为E，宽度为F；其中，
10mm≤C≤12mm，15mm≤D≤18mm，C≤D，8mm≤E≤12mm，5mm≤F≤6mm，E≥F。
进一步地，所述转移管的高度为H，其中，30mm≤H≤35mm。
进一步地，所述槽位至少设置有两个，所述转移管的数目与所述槽位的数目匹配。
一种用于电泳分离物回收的用具的使用方法，具体步骤为：将转移管的第一开口对准凝胶块上的目标电泳条带，轻轻按压并推动，然后将转移管插入电泳槽内；开启电泳槽，直至电泳结束；最后使用移液枪将电泳液吸取出来。
在轻轻按压并推动的步骤中，所述第一开口裁切出凝胶片段，所述凝胶片段在被裁出的同时还穿过所述第一开口移动至所述腔体内。
所述凝胶片段为凝胶块的一部分且载有目标的电泳分离物；所述电泳液为所述电泳分离物的纯化液。
进一步地，所述电泳分离物为DNA、RNA、蛋白质、多肽中的一种。
本发明的有益效果在于：使用转移管作为回收目标电泳分离物过程的承载体后，从裁切到电泳结束过程，被裁切下来的凝胶片段只经过一次裁切和转移，不需要切除凝胶片段上多余的凝胶，电泳完成后也不需要添加缓冲液对凝胶片段破碎离心除去凝胶后取缓冲液，但是，使用转移管电泳后所得的纯化液不含凝胶且体积小。回收过程只对凝胶片段进行电泳，不需要使用试剂盒，回收率接近100％，且回收没有电泳分离物含量上限的限制，也没有电泳分离物分子量大小的限制，单个实验的时间消耗在5min左右，多样本的回收也几乎不增加额外的时间，且经济环保。
上述提及的凝胶块由凝胶形成。经过凝胶块电泳分离后，不同分子量的电泳分离物以电泳条带的形式分布在凝胶块上。现有技术中，为了降低干扰，需要切除凝胶片段的不含目标电泳分离物的边沿。
附图说明
下面结合附图详述本发明的具体结构：
图1为本发明的一种用于电泳分离物回收的用具的转移管的结构示意图；
图2为本发明的一种用于电泳分离物回收的用具的转移管裁切凝胶块的示意图；
图3为本发明的一种用于电泳分离物回收的用具的组装结构示意图；
其中，1-转移管，11-第一开口，12-第二开口，13-腔体，2-电泳槽，21-槽位，22-外盖，3-凝胶块，31-凝胶片段。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
请参阅图1、图2以及图3，一种用于电泳分离物回收的用具，包括转移管1和电泳槽2，所述转移管1上设置有腔体13和用于裁切凝胶块3的第一开口11；凝胶片段31经过所述第一开口11从凝胶块3上分离并转移至所述腔体13内；载有凝胶片段31的转移管1从凝胶块3上方转移至所述电泳槽2内。
使用转移管1作为回收目标电泳分离物过程的承载体后，从裁切到电泳结束过程，被裁切下来的凝胶片段31只经过一次裁切和转移，不需要切除凝胶片段31上多余的凝胶，电泳完成后也不需要添加缓冲液对凝胶片段31破碎离心除去凝胶后取缓冲液，但是，使用转移管1电泳后所得的纯化液不含凝胶且体积小，同时也缩短了整个样品处理的工序和所耗费的时间。回收过程只对凝胶片段31进行电泳，不需要使用试剂盒，回收率接近100％，且回收没有电泳分离物含量上限的限制，也没有电泳分离物分子量大小的限制，单个实验的时间消耗在5min左右，多样本的回收也几乎不增加额外的时间，且经济环保。
优选地，所述转移管1上还设置有便于取出电泳分离物的纯化液的第二开口12，所述第一开口11与所述第二开口12分居所述转移管1的两端。电泳分离物回收完成后，含有目标电泳分离物的电泳液体积非常小，开设第二开口12方便使用移液枪等工具吸取电泳液。
优选地，所述电泳槽2内设置有与所述转移管1匹配的槽位21，便于将转移管1放置于槽位21上进行电泳。
优选地，所述转移管1竖直放置于所述槽位21上；所述电泳槽2的正极位于负极上方，所述第二开口12位于所述第一开口11上方。该结构有利于形成较小体积的含目标电泳分离物的电泳液，同时也便于从转移管1内将电泳液转移出来。
优选地，所述第一开口11呈矩形；所述第一开口11的长度为A，宽度为B，其中，200mm≤A≤220mm，30mm≤B≤40mm。可根据目标电泳分离物电泳条带的宽度大小选用第一开口11大小不同的转移管1。
优选地，所述第二开口12呈圆形，直径的长度为
或所述第二开口12呈椭圆形，短轴的长度为C，长轴的长度为D；或所述第二开口12呈矩形，长度为E，宽度为F；其中，
10mm≤C≤12mm，15mm≤D≤18mm，C≤D，8mm≤E≤12mm，5mm≤F≤6mm，E≥F，便于移液枪枪头插入腔体内移取电泳液。
优选地，所述转移管1的高度为H，其中，30mm≤H≤35mm，便于移液枪枪头移取电泳液。
优选地，所述槽位21至少设置有两个，所述转移管1的数目与所述槽位21的数目匹配，便于同时进行回收多个样本的电泳分离物。由于电泳是同时进行，电泳一个样本和电泳多个样本电泳所耗费的时间一致。
优选地，如图3所示，所述电泳槽的槽位21和外盖22采用透明材料制作，方便观察电泳的进度。
实施例2
一种用于电泳分离物回收的用具的使用方法，具体步骤为：将转移管1的第一开口11对准凝胶块3上的目标电泳条带，轻轻按压并推动，然后将转移管1插入电泳槽2内；开启电泳槽2，直至电泳结束；最后使用移液枪将电泳液吸取出来。
在轻轻按压并推动的步骤中，所述第一开口11裁切出凝胶片段31，所述凝胶片段31在被裁出的同时还穿过所述第一开口11移动至所述腔体13内。由于凝胶块3本身比较脆软，所以裁切后凝胶片段31切口平整，也易于与凝胶块3分离，即使切口不平整也不影响后续电泳。所述凝胶片段31为凝胶块3的一部分且载有目标的电泳分离物；所述电泳液为所述电泳分离物的纯化液。凝胶依靠糖链之间的次级链(如氢键)来维持网状结构，结构非常脆软，所以使用转移管1轻轻按压即能将凝胶片段31切下。切下后，因为后续只是电泳，凝胶片段31边沿存在多余的凝胶也不影响回收结果，电泳液中不存在凝胶碎粒或游离的琼脂糖，所以电泳缓冲液中含有的电泳分离物含量更高。
上述方案在DNA回收上，既能提升DNA浓度、纯度，又能降低回收的成本、缩短工艺时间。故可以在DNA回收技术上取得非常好的经济效益，绿色环保。
此外，上述方法还可以应用于分离纯化RNA、蛋白质、多肽。
综上所述，本发明提供的一种用于电泳分离物回收的用具及其使用方法，由于使用转移管作为回收目标电泳分离物过程的承载体，从裁切到电泳结束过程，被裁切下来的凝胶片段只经过一次裁切和转移，不需要切除凝胶片段上多余的凝胶，电泳完成后也不需要添加缓冲液将凝胶片段破碎离心除去凝胶后取缓冲液，进而使得电泳后所得的纯化液不含凝胶且体积小，同时也缩短了整个样品处理的工序和所耗费的时间。回收过程只对凝胶片段进行电泳，不需要使用试剂盒，回收率接近100％，且回收没有电泳分离物含量上限的限制，也没有电泳分离物分子量大小的限制，单个实验的时间消耗在5min左右，多样本的回收也几乎不增加额外的时间，且经济环保。
此处第一、第二……只代表其名称的区分，不代表它们的重要程度和位置有什么不同。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，包括转移管和电泳槽，所述转移管上设置有腔体和用于裁切凝胶块的第一开口；凝胶片段经过所述第一开口从凝胶块上分离并转移至所述腔体内；载有凝胶片段的转移管从凝胶块上方转移至所述电泳槽内。
2.如权利要求1所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述转移管上还设置有便于取出电泳分离物的纯化液的第二开口，所述第一开口与所述第二开口分居所述转移管的两端。
3.如权利要求2所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述电泳槽内设置有与所述转移管匹配的槽位。
4.如权利要求3所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述转移管竖直放置于所述槽位上，所述电泳槽的正极位于负极上方，所述第二开口位于所述第一开口上方。
5.如权利要求4所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述第一开口呈矩形；所述第一开口的长度为A，宽度为B，其中，200mm≤A≤220mm，30mm≤B≤40mm。
6.如权利要求4所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述第二开口呈圆形，直径的长度为
或所述第二开口呈椭圆形，短轴的长度为C，长轴的长度为D；或所述第二开口呈矩形，长度为E，宽度为F；其中，
10mm≤C≤12mm，15mm≤D≤18mm，C≤D，8mm≤E≤12mm，5mm≤F≤6mm，E≥F。
7.如权利要求4所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述转移管的高度为H，其中，30mm≤H≤35mm。
8.如权利要求3至7任一所述的用于电泳分离物回收的用具，其特征在于，所述槽位至少设置有两个，所述转移管的数目与所述槽位的数目匹配。
9.一种权利要求1至8任一所述的用于电泳分离物回收的用具的使用方法，其特征在于，具体步骤为：将转移管的第一开口对准凝胶块上的目标电泳条带，轻轻按压并推动，然后将转移管插入电泳槽内；开启电泳槽，直至电泳结束；最后使用移液枪将电泳液吸取出来；
在轻轻按压并推动的步骤中，所述第一开口裁切出凝胶片段，所述凝胶片段在被裁出的同时还穿过所述第一开口移动至所述腔体内；
所述凝胶片段为凝胶块的一部分且载有目标的电泳分离物；所述电泳液为所述电泳分离物的纯化液。
10.如权利要求9所述的用于电泳分离物回收的用具的使用方法，其特征在于，所述电泳分离物为DNA、RNA、蛋白质、多肽中的一种。
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