CN103109728B - 一种长白松试管内快速育苗方法 - Google Patents
一种长白松试管内快速育苗方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103109728B CN103109728B CN2013100744534A CN201310074453A CN103109728B CN 103109728 B CN103109728 B CN 103109728B CN 2013100744534 A CN2013100744534 A CN 2013100744534A CN 201310074453 A CN201310074453 A CN 201310074453A CN 103109728 B CN103109728 B CN 103109728B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pine
- changbai
- stem
- test tube
- propagation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 235000008582 Pinus sylvestris Nutrition 0.000 title description 2
- 241000218626 Pinus sylvestris Species 0.000 title description 2
- 239000001839 pinus sylvestris Substances 0.000 title description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 claims abstract description 46
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 claims abstract description 35
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- UZKQTCBAMSWPJD-UQCOIBPSSA-N trans-Zeatin Natural products OCC(/C)=C\CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 UZKQTCBAMSWPJD-UQCOIBPSSA-N 0.000 claims abstract description 26
- UZKQTCBAMSWPJD-FARCUNLSSA-N trans-zeatin Chemical compound OCC(/C)=C/CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 UZKQTCBAMSWPJD-FARCUNLSSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 229940023877 zeatin Drugs 0.000 claims abstract description 26
- PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 1-naphthaleneacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CC=CC2=C1 PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 21
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 claims abstract description 15
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical class [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 4
- 239000004519 grease Substances 0.000 claims description 4
- 239000003501 hydroponics Substances 0.000 claims description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 claims description 3
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 239000005971 1-naphthylacetic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000018783 Dacrycarpus dacrydioides Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000007320 Pinus strobus Species 0.000 claims description 2
- 235000008578 Pinus strobus Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 abstract description 21
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 20
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 abstract description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 5
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N Carbendazim Natural products C1=CC=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 208000005102 Kashin-Beck Disease Diseases 0.000 description 1
- IXORZMNAPKEEDV-SNTJWBGVSA-N LSM-6641 Chemical compound C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)[C@H]1C(O)=O)C[C@H]2[C@]2(C=C[C@@H]3O)[C@H]1[C@@]3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-SNTJWBGVSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000218641 Pinaceae Species 0.000 description 1
- 235000005205 Pinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218602 Pinus <genus> Species 0.000 description 1
- 235000013078 Pinus sylvestris var sylvestriformis Nutrition 0.000 description 1
- 241000161280 Pinus sylvestris var. sylvestriformis Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000028446 budding cell bud growth Effects 0.000 description 1
- JNPZQRQPIHJYNM-UHFFFAOYSA-N carbendazim Chemical compound C1=C[CH]C2=NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 JNPZQRQPIHJYNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006013 carbendazim Substances 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 230000005059 dormancy Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 239000003415 peat Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- Y02P60/216—
Landscapes
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
本发明涉及一种植物繁殖技术,即一种长白松试管内快速育苗方法。其步骤如下:(1)将长白松野生植株主干枝条水培,处理后留茎段和茎尖作为外植体备用;(2)基本培养基+吲哚丁酸0.07~0.08mg·L-1+萘乙酸0.03~0.04mg·L-1+玉米素0.16~0.17mg·L-1+赤霉素2.90~3.20mg·L-1;(3)长白松植株的快速繁殖、炼苗和移栽。采用长白松野生植株的主干茎段为材料,在试管内调控主干茎段生根同时主干芽萌发生长,以达到茎节增殖的一步快繁目标,解决了种子繁殖困难和扦插繁殖生根率和移栽成活率低及野生资源受灭绝性威胁等问题,为进一步人工规模化繁殖和栽培长白松提供优质种苗。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物繁殖技术,即一种长白松试管内快速育苗方法。
背景技术
在现有技术中,长白松[Pinus sylvestris var. sylvestriformis(Takenouchi)Cheng et C. D. Chu]又称美人松,松科松属常绿乔木,是长白松特有种。该种在长白山区数量稀少,分布区域十分狭窄,仅集中分布在长白山国家级自然保护区(100余hm2)和安图县二道白河镇(100余hm2),其余散生在二道白河和三道白河沿岸的针阔混交林和针叶林中。被《中国珍稀濒危保护植物名录(第一册)》定为渐危种,国家三级重点保护植物。被《国家重点保护野生植物名录(第一批)》定为国家一级重点保护植物。被《中国物种红色名录》定为濒危种(NE)。在《吉林省野生动植物保护管理暂行条例》一文中被定为省级一类重点保护植物。长白松材质好,易加工,耐腐蚀,不扭不裂,是良好的材用树种。松节和花粉入药,主治风湿性关节炎、大骨节病、眩晕、胃痛等。也可作东北及华北地区的绿化及造林树种。
长白松通常以插条扦插或种子繁殖为主,但其种子小、种皮坚硬,种子萌发率较低;插条扦插繁殖不仅生根率和移栽成活率极低,而且导致野生资源受到灭绝性威胁。长白松大规模人工栽培、开发和利用受到极大限制。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种利于长白松茎段生根同时顶芽萌发生长成苗,满足人工规模化繁殖和栽培的长白松试管内快速育苗方法。
本发明的技术解决方案是:一种长白松试管内快速育苗方法,其步骤如下:
(1)将长白松野生植株主干枝条水培使其主干芽萌发生长,处理后留茎段和茎尖作为外植体备用。
(2)基本培养基中进行茎段生根同时顶芽萌发生长成苗:基本培养基成分和含量为:100.0 mg·L-1(NH4)2SO4,650.0 mg·L-1KNO3,32.0 mg·L-1CaCl2·2H2O,38.0 mg·L-1MgSO4·7H2O,90.0 mg·L-1KH2PO4;2.8 mg·L-1MnSO4·4H2O,2.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O,0.30 mg·L-1KI,1.0 mg·L-1H3BO3;4.5 mg·L-1FeSO4·7H2O,6.0 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O;0.2 mg·L-1烟酸,0.2 mg·L-1盐酸吡哆醇(VB6),1.30 mg·L-1甘氨酸;附加吲哚丁酸0.07~0.08 mg·L-1+萘乙酸0.03~0.04 mg·L-1+玉米素0.16~0.17 mg·L-1+赤霉素2.90~3.20 mg·L-1 ;琼脂条7.5 g·L-1,添加食用白糖30.0 g·L-1,调节pH值至5.8,嫩茎段在光照周期8 h·d-1、光照强度1000 lx和温度24±2℃条件下培养。优选吲哚丁酸0.08 mg·L-1+萘乙酸0.04 mg·L-1+玉米素0.17 mg·L-1+赤霉素3.20 mg·L-1 。
(3)长白松植株的快速繁殖、炼苗和移栽。
步骤(1)中水培前把将长白松野生植株主干枝条置于-10~0 ℃的冰柜中休眠50 d。
步骤(1)的处理是指待主干萌发生长至3.0~4.0 cm时,将主干剪下并切割成段后,摘去嫩针叶及短小叶柄,用5%碳酸钠溶液浸泡3 min以除去表面油脂,75%乙醇涮洗30 s,移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min,无菌水冲洗6次,无菌滤纸吸干表面水分。
步骤(3)中的快速繁殖是指按每瓶接种8个茎段,40天为1个周期,每个茎段在1个培养周期内平均可切割成4~5段计算,每年有多个周期进行扩繁。
步骤(3)的炼苗和移栽是指种苗扩繁到一定数量后,选取1.00 cm以上的小植株进行炼苗移栽,小植株成活率可达到92.8%以上。
本发明的优点是:1、本发明利用植物组织培养技术,采用长白松野生植株的主干茎段为材料,在试管内调控主干茎段生根同时主干芽萌发生长,以达到茎节增殖的一步快繁目标,利于长白松茎段生根同时顶芽萌发生长成苗,解决了种子繁殖困难和扦插繁殖生根率和移栽成活率低及野生资源受灭绝性威胁等问题。2、本发明为进一步人工规模化繁殖和栽培长白松提供优质种苗。3、成苗率达99.5%以上;小植株成活率可达到92.8%以上。
下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
具体实施方式
一种长白松试管内快速育苗方法:
1 材料与方法
1.1 材料及处理
11月上旬,取长白松野生植株主干枝条,置于-10~0 ℃的冰柜(保证芽充分休眠)中休眠50 d后取出进行水培促使其主干芽萌发生长,待主干萌发生长至3.0~4.0 cm时,将主干剪下并切割成段(长度为1.5 cm)后,摘去嫩针叶及短小叶柄,用5%碳酸钠溶液浸泡3 min以除去表面油脂,75%乙醇(体积分数)涮洗30 s,移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min,无菌水冲洗6次,无菌滤纸吸干表面水分,切除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后留1.0 cm的茎段和茎尖作为外植体备用。
1.2 长白松茎段生根同时顶芽萌发生长、植株快速和炼苗栽培
基本培养基成分和含量:100.0 mg·L-1(NH4)2SO4,650.0 mg·L-1KNO3,32.0 mg·L-1CaCl2·2H2O,38.0 mg·L-1MgSO4·7H2O,90.0 mg·L-1KH2PO4;2.8 mg·L-1MnSO4·4H2O,2.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O,0.30 mg·L-1KI,1.0 mg·L-1H3BO3;4.5 mg·L-1FeSO4·7H2O,6.0 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O;0.2 mg·L-1烟酸,0.2 mg·L-1盐酸吡哆醇(VB6),1.30 mg·L-1甘氨酸。培养基中附加吲哚丁酸IAA(0.12~0.17 mg·L-1)、萘乙酸NAA(0.08~0.13 mg·L-1)、玉米素ZT(0.10~0.15 mg·L-1)和赤霉素GA3(1.70~2.80 mg·L-1),琼脂条7.5 g·L-1,添加食用白糖30.0 g·L-1,调节pH值至5.8,嫩茎段在光照周期8 h·d-1、光照强度1000 lx和温度(24±2) ℃条件下培养。为提高长白松嫩茎段生根的速度及生根率和顶芽萌发生长速度,通过均匀设计法设计实验,选用U12(124)均匀表,每个处理接种10个主干嫩茎段,重复3次取平均值,筛选确定影响长白松主干茎段生根同时顶芽萌发生长的吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素最佳浓度配比。主干茎段培养40 d统计生根率和苗的长度,以均出现茎段生根和顶芽萌发生长的苗为准。生根率(%)=(生根的茎段数/接种的茎段总数)×100%,生长率(%)=(苗总长度-1.0)/1.0×100%。
茎段生根后顶芽萌发生长至3.00 cm时,在无菌条件下打开培养瓶,将茎段留3个针叶剪下苗干,并将苗干切割成0.5 cm 的茎段,再次将小茎段转接到茎段生根同时顶芽萌发生长培养基中,计算出每个茎段生根同时顶芽萌发生长的增殖倍数和周期。
当种苗扩繁到需要数量后,且小植株长至1.00 cm时,将小植株从培养瓶中取出,放在高锰酸钾溶液(浓度为5 mg·L-1)中洗净根上的琼脂,将小植株栽植到经多菌灵(300倍液)消毒过的腐熟草炭土、腐烂松针和珍珠岩 (3: 3: 1)的基质中,覆盖塑料薄膜(透性好)进行保温保湿,温度控制在(20±2) ℃,保持相对湿度在70%,自然光照10 h·d-1,温度升高时,适当通风换气。
2 结果与分析
2.1 吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素对长白松茎段生根的影响
数据(表1)经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=104-278X 1-340X 2+375X 3,显著性水平α=0.05,复相关系数R=0.9942,剩余标准差S=1.1400,检验值F t =227.9﹥临界值F (0.05,3,8)=4.066,回归方程具有显著性,吲哚丁酸、萘乙酸和玉米素对茎段的生根影响具有显著性,赤霉素对茎段的生根影响不显著。通过计算吲哚丁酸、萘乙酸和玉米素对生根的贡献值和贡献率可知,U 1=214,U 1/U=24.0%;U 2=319,U 2/U=35.8%;U 3=492,U 3/U=55.3%,说明3个因素对长白松茎段生根的贡献顺序为:玉米素>萘乙酸>吲哚丁酸,又因玉米素与生根率呈正相关,而吲哚丁酸、萘乙酸与生根率呈负相关。由此推测,玉米素质量浓度高于0.15 mg·L-1的,吲哚丁酸和萘乙酸质量浓度分别低于0.12 mg·L-1和0.08 mg·L-1可能生根率更高。为验证此推测,又以吲哚丁酸质量浓度为0.12、0.11、0.10、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02和0.01 mg·L-1,萘乙酸质量浓度为0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02和0.01 mg·L-1,玉米素为0.15、0.16、0.17、0.18、0.19和0.20 mg·L-1开展12个水平的验证试验,重复3次。结果发现,玉米素质量浓度为(0.15~0.17 mg·L-1),吲哚丁酸质量浓度为(0.07~0.09 mg·L-1)和萘乙酸质量浓度为(0.03~0.05 mg·L-1)时,长白松嫩茎段生根率最高,平均生根率达98.6%以上。均高于表1所列12个处理的生根率。
表1 影响长白松节增殖因素筛选的U12(124)试验设计与结果。
2.2 吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素对长白松顶芽萌发生长的影响
数据(表1)经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=-105-444X 1--161X 2+1200X 3+50.9X 4,显著性水平α=0.05,复相关系数R=0.9566,剩余标准差S=3.2400,检验值F t =18.86﹥临界值F (0.05,4,7)=4.120,回归方程显著。吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素均对长白松嫩茎段丁芽萌发生长的影响具有显著性。同理,计算吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素对茎段顶芽萌发生长的贡献值和贡献率可知,U 1=538,U 1/U=68.1%;U 2=71.7,U 2/U=9.07%;U 3=104,U 3/U=13.1%;U 4=76.7,U 4/U=9.71%,说明4个因素对长白松茎段顶芽萌发生长的贡献顺序为:吲哚丁酸>玉米素>赤霉素>萘乙酸,又因玉米素和赤霉素与茎段顶芽萌发生长呈正相关,而吲哚丁酸和萘乙酸与茎段顶芽萌发生长呈负相关。推测吲哚丁酸和萘乙酸质量浓度分别低于0.12 mg·L-1和0.08 mg·L-1,玉米素和赤霉素的质量浓度分别高于0.15 mg·L-1和2.80 mg·L-1时,茎段顶芽萌发生长率可能更高。为验证此可能性,又以吲哚丁酸质量浓度为0.12、0.11、0.10、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02和0.01 mg·L-1,萘乙酸质量浓度为0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02和0.01 mg·L-1,玉米素为0.15、0.16、0.17、0.18、0.19和0.20 mg·L-1,赤霉素为2.80、2.90、3.00、3.10、3.20、3.30、3.40和3.50 mg·L-1开展12个水平的验证试验,重复3次取平均值。结果发现,吲哚丁酸质量浓度在0.06~0.08 mg·L-1、萘乙酸质量浓度在0.02~0.04 mg·L-1、玉米素质量浓度在0.16~0.18 mg·L-1和赤霉素质量浓度在2.90~3.20 mg·L-1范围内时,长白松茎段顶芽萌发生长更好,顶芽萌发后的平均生长率为178.6%,比表1所列12个处理的生长率均大。
由以上实验结果可知,由于影响长白松嫩茎段生根的因素和浓度范围是培养基、玉米素质量浓度为0.15~0.17 mg·L-1、吲哚丁酸质量浓度为0.07~0.09 mg·L-1和萘乙酸质量浓度为0.03~0.05 mg·L-1;而茎段顶芽萌发生长的主要影响因素和浓度范围为培养基、吲哚丁酸质量浓度在0.06~0.08 mg·L-1、萘乙酸质量浓度在0.02~0.04 mg·L-1、玉米素质量浓度在0.16~0.18 mg·L-1和赤霉素质量浓度在2.90~3.20 mg·L-1。
因此,将长白松野生植株主干枝条置于-10~0 ℃的冰柜中休眠50 d后取出进行水培促使其主干芽萌发生长,待主干萌发生长至3.0~4.0 cm时,将主干剪下并切割成段(长度为1.5 cm)后,摘去嫩针叶及短小叶柄,用5%碳酸钠溶液浸泡3 min以除去表面油脂,75%乙醇(体积分数)涮洗30 s,移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min,无菌水冲洗6次,无菌滤纸吸干表面水分,切除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后留1.0 cm的茎段和茎尖接种到附加吲哚丁酸IBA(0.07~0.08 mg·L-1)+萘乙酸NAA(0.03~0.04 mg·L-1)+玉米素ZT(0.16~0.17 mg·L-1)+赤霉素GA3(2.90~3.20 mg·L-1) 的基本培养基中进行茎段生根同时顶芽萌发生长,成苗率达99.5%以上。
2.3 长白松植株的快速繁殖
按1.2方法,按每瓶接种8个茎段,40天为1个周期,每个茎段在1个培养周期内平均可切割成4~5段计算,每年有n个周期(长白松每年9个周期)进行扩繁,年生产长白松种苗数为:∑年产试管苗=[8×(4~5)9×99.5%×92.8%]株,可见,本发明可以满足长白松工厂化育苗和规模化栽培的需要。
2.4 长白松小植株的炼苗和移栽
根据1.2中的方法,当种苗扩繁到一定数量后,选取1.00 cm以上的小植株进行炼苗移栽,经统计计算,小植株成活率可达到92.8%以上。
Claims (5)
1. 一种长白松试管内快速育苗方法,其特征在于步骤如下:
(1)将长白松野生植株主干枝条水培使其主干芽萌发生长,处理后留茎段和茎尖作为外植体备用;水培前将长白松野生植株主干枝条置于-10~0 ℃的冰柜中休眠50 d;
(2)基本培养基中进行茎段生根同时顶芽萌发生长成苗:基本培养基成分和含量为:100.0 mg·L-1(NH4)2SO4,650.0 mg·L-1KNO3,32.0 mg·L-1CaCl2·2H2O,38.0 mg·L-1MgSO4·7H2O,90.0 mg·L-1KH2PO4;2.8 mg·L-1MnSO4·4H2O,2.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O,0.30 mg·L-1KI,1.0 mg·L-1H3BO3;4.5 mg·L-1FeSO4·7H2O,6.0 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O;0.2 mg·L-1烟酸,0.2 mg·L-1盐酸吡哆醇,1.30 mg·L-1甘氨酸;附加吲哚丁酸0.07~0.08 mg·L-1+萘乙酸0.03~0.04 mg·L-1+玉米素0.16~0.17 mg·L-1+赤霉素2.90~3.20 mg·L-1 ;琼脂条7.5 g·L-1,添加食用白糖30.0 g·L-1,调节pH值至5.8,嫩茎段在光照周期8 h·d-1、光照强度1000 lx和温度24±2℃条件下培养;
(3)长白松植株的快速繁殖、炼苗和移栽。
2.按照权利要求1所述的一种长白松试管内快速育苗方法,其特征在于步骤(1)的处理是指待主干萌发生长至3.0~4.0 cm时,将主干剪下并切割成段后,摘去嫩针叶及短小叶柄,用5%碳酸钠溶液浸泡3 min以除去表面油脂,75%乙醇涮洗30 s,移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min,无菌水冲洗6次,无菌滤纸吸干表面水分。
3.按照权利要求1所述的一种长白松试管内快速育苗方法,其特征在于步骤(3)中的快速繁殖是指按每瓶接种8个茎段,40天为1个周期,每个茎段在1个培养周期内平均可切割成4~5段计算,每年有多个周期进行扩繁。
4.按照权利要求1所述的一种长白松试管内快速育苗方法,其特征在于步骤(3)的炼苗和移栽是指种苗扩繁到一定数量后,选取1.00 cm以上的小植株进行炼苗移栽,小植株成活率可达到92.8%以上。
5.按照权利要求1所述的一种长白松试管内快速育苗方法,其特征在于步骤(2)中吲哚丁酸0.08 mg·L-1+萘乙酸0.04 mg·L-1+玉米素0.17 mg·L-1+赤霉素3.20 mg·L-1 。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013100744534A CN103109728B (zh) | 2013-03-10 | 2013-03-10 | 一种长白松试管内快速育苗方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013100744534A CN103109728B (zh) | 2013-03-10 | 2013-03-10 | 一种长白松试管内快速育苗方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103109728A CN103109728A (zh) | 2013-05-22 |
CN103109728B true CN103109728B (zh) | 2013-12-18 |
Family
ID=48408115
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2013100744534A Active CN103109728B (zh) | 2013-03-10 | 2013-03-10 | 一种长白松试管内快速育苗方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103109728B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105359948B (zh) * | 2015-09-11 | 2018-08-28 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 杂种落叶松微扦插育苗方法 |
CN105766583B (zh) * | 2016-03-28 | 2018-09-28 | 烟台市林业科学研究所 | 一种黑赤松针叶束水培生根方法 |
CN105746288B (zh) * | 2016-04-15 | 2019-05-28 | 中国林业科学研究院热带林业研究所 | 一种卡西亚松扦插育苗体系的建立方法 |
CN107242024A (zh) * | 2017-08-07 | 2017-10-13 | 韦孺聪 | 一种无花果树的种植方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4132270A1 (de) * | 1991-09-27 | 1993-07-29 | Forschungsanstalt Fuer Forst U | Verfahren zur vorbehandlung von saatgut, insbesondere solches von forstgehoelzen |
CN1552184A (zh) * | 2003-12-19 | 2004-12-08 | 华利军 | 大棚容器培育油松或刺柏树苗的方法 |
CN102144547A (zh) * | 2011-01-14 | 2011-08-10 | 四川农业大学 | 一种葡萄砧木组培快繁和移栽方法 |
CN102422767A (zh) * | 2011-09-14 | 2012-04-25 | 靖宇县特产研究所 | 一种野生长白松的人工繁育方法 |
CN102531791A (zh) * | 2012-01-19 | 2012-07-04 | 佘远国 | 一种油茶容器育苗基质及制备方法 |
CN102550380A (zh) * | 2011-02-14 | 2012-07-11 | 福建省连城冠江铁皮石斛有限公司 | 野生铁皮石斛原种保护及人工培育方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070237837A1 (en) * | 2002-09-04 | 2007-10-11 | Biomor Israel Ltd. | Biocompatible tea tree oil compositions |
-
2013
- 2013-03-10 CN CN2013100744534A patent/CN103109728B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4132270A1 (de) * | 1991-09-27 | 1993-07-29 | Forschungsanstalt Fuer Forst U | Verfahren zur vorbehandlung von saatgut, insbesondere solches von forstgehoelzen |
CN1552184A (zh) * | 2003-12-19 | 2004-12-08 | 华利军 | 大棚容器培育油松或刺柏树苗的方法 |
CN102144547A (zh) * | 2011-01-14 | 2011-08-10 | 四川农业大学 | 一种葡萄砧木组培快繁和移栽方法 |
CN102550380A (zh) * | 2011-02-14 | 2012-07-11 | 福建省连城冠江铁皮石斛有限公司 | 野生铁皮石斛原种保护及人工培育方法 |
CN102422767A (zh) * | 2011-09-14 | 2012-04-25 | 靖宇县特产研究所 | 一种野生长白松的人工繁育方法 |
CN102531791A (zh) * | 2012-01-19 | 2012-07-04 | 佘远国 | 一种油茶容器育苗基质及制备方法 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
东部白松试管芽诱导和增殖技术研究;叶景丰等;《辽宁林业科技》;20101115(第6期);全文 * |
刘昌大等.火炬松容器育苗技术.《湖南林业》.2008,(第6期),全文. |
叶景丰等.东部白松试管芽诱导和增殖技术研究.《辽宁林业科技》.2010,(第6期),全文. |
林木组织培养及工厂化育苗中污染的控制技术;訾梅廷等;《防护林科技》;20050510(第3期);全文 * |
火炬松容器育苗技术;刘昌大等;《湖南林业》;20080605(第6期);全文 * |
訾梅廷等.林木组织培养及工厂化育苗中污染的控制技术.《防护林科技》.2005,(第3期),全文. |
韦小丽等.湿地松轻基质容器苗育苗技术.《南京林业大学学报(自然科学版)》.2003,第27卷(第5期),全文. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103109728A (zh) | 2013-05-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104838995B (zh) | 一种番茄水培扦插生根的育苗方法 | |
CN103039258B (zh) | 一种长白山杜鹃花属植物速生方法 | |
CN106508644B (zh) | 一种甘薯脱毒种薯繁殖方法 | |
CN103477752B (zh) | 一种提高青钱柳种子发芽率的方法 | |
CN103039366B (zh) | 一种长白山杜鹃花属植物菌根化苗的工厂化方法 | |
CN103039365B (zh) | 一种东北红豆杉试管内一步成苗方法 | |
CN102960250A (zh) | 一种利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法 | |
CN103109728B (zh) | 一种长白松试管内快速育苗方法 | |
CN103430845A (zh) | 一种草莓组织培养方法 | |
CN105409954A (zh) | 促进植物苗生根成活的组合物 | |
CN101273692B (zh) | 广西野生毛葡萄扦插繁殖育苗的方法 | |
CN103109747B (zh) | 一种基于茎节增殖的金钱松快速繁殖方法 | |
CN104737761B (zh) | 秤锤树的扦插繁殖方法 | |
KR101893753B1 (ko) | 빌레나무의 실생번식 방법 | |
CN102960249B (zh) | 一种利用朝鲜崖柏嫩茎段试管内生根和生长同步的高效育苗方法 | |
CN103168690B (zh) | 蕲山药脱毒微型种豆的繁育方法 | |
CN104782455B (zh) | 用于烟草腋芽扦插繁殖的基质及其应用 | |
CN104082110A (zh) | 一种栽培栝楼块根育苗技术 | |
CN102960095B (zh) | 一种刺参种子快速后熟方法 | |
CN105557424A (zh) | 一种提高树木扦插成活率的穗条剪取前期处理方法 | |
CN105900564B (zh) | 一种促使珍稀濒危植物甜菜树种子高效萌发的方法 | |
CN108142126A (zh) | 一种沉水樟的扦插育苗方法 | |
CN109041847B (zh) | 一种翅荚木成年树幼化复壮及无性繁殖育苗的方法 | |
CN105145042A (zh) | 马铃薯脱毒原原种土壤培养方法 | |
CN107889745B (zh) | 一种避免杉木试管苗偏冠的组培方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |