CN102895233B

CN102895233B - 苯并氮杂卓类化合物在制备预防或治疗癫痫的药物中的应用

Info

Publication number: CN102895233B
Application number: CN201210323710.9A
Authority: CN
Inventors: 镇学初; 张翱; 郭琳
Original assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS; Suzhou University
Current assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS; Suzhou University
Priority date: 2012-09-04
Filing date: 2012-09-04
Publication date: 2015-06-24
Anticipated expiration: 2032-09-04
Also published as: CN102895233A

Abstract

本发明公开了一种苯并氮杂卓类化合物及其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备预防或治疗癫痫的药物中的应用，所述苯并氮杂卓类化合物的结构通式为：其抗癫痫作用与别构激活sigma-1受体有关，显示了这类化合物作为全新型的抗癫痫药物治疗的良好前景。

Description

苯并氮杂卓类化合物在制备预防或治疗癫痫的药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种预防或治疗癫痫的药物，具体涉及一类苯并氮杂卓类化合物及其在药学上可接受的盐或者溶剂合物，作为sigma-1受体的别构调节剂在制备预防或治疗癫痫疾病药物中的应用。

背景技术

癫痫是中枢神经系统常见的严重的疾病；在神经系统疾病中，其患病率居于第三位。全世界大约有5000万患者。癫痫患者的临床表现主要为不可预知的惊厥发作。其病理基础为神经元的过度兴奋。调节神经元的兴奋性是癫痫治疗的主要方法之一。

目前上市的抗癫痫药物以控制惊厥为主：降低惊厥发作的频率、缩短发作时间。但是，对癫痫的整个病理过程并无明显改善。而且，大约有30%患者对这些传统的治疗药物有抵抗作用。因此，寻找抗惊厥药物和发现能延缓癫痫病理过程的治疗方法或药物是治疗癫痫的一个热点和关键。

sigma-1受体是一类分子量为25-30kD的蛋白质分子，分布在细胞膜、线粒体和内质网等细胞器的表面，参与多种蛋白质的合成与转运。另外，sigma-1受体还可以调制电压门控离子通道、配体门控离子通道、钙离子稳态以及激活胞内信号通路。因此，该蛋白与神经细胞的兴奋性密切相关。

现已发现，simga-1受体活化以后，能够抑制神经元的过度兴奋。从而提示，sigma-1受体可以作为癫痫治疗的靶点。但是，sigma-1受体激动剂的选择性较差，不仅激活sigma-1蛋白，还与其他受体结合。因此，如果针对sigma-1受体研究预防或治疗癫痫疾病的药物，需要解决受体的过分激活问题。

发明内容

本发明的发明目的是提供一种苯并氮杂卓类化合物及其在药学上可接受的盐或者溶剂合物作为sigma-1受体的别构调节剂，在制备预防或治疗癫痫药物中的应用。

为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：

一种苯并氮杂卓类化合物及其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备预防或治疗癫痫的药物中的应用，所述苯并氮杂卓类化合物的结构通式为：

式中，R₁为氢或羟基；R₂为氢或羟基；

R₃、R₄选自氢，C1-C6的烷基，用卤素、羟基、C1-C3烷氧基、硝基取代的C1-C6的烷基，C1-C6的烯基，用卤素、羟基、C1-C3烷氧基、硝基取代的C1-C6的烯基，苯基，用卤素、羟基、C1-C3烷氧基、硝基取代的苯基；或者，R₃、R₄二者共同形成双键，双键末端为氢或C1-C4的烷基；

R₅选自氢，苄基，C1-C6烷基，用卤素、羟基或C1-C3烷氧基取代的C1-C6烷基，C3-C6环烷基，用卤素、羟基或C1-C3烷氧基取代的C3-C6环烷基；

n为0或1且当n=0时，R₃和R₄都不为氢。

上述通式表示的部分化合物含有一个手性中心，因此可存在立体异构体。本发明包括通式表示的化合物的R或S单个立体异构体及它们的混合物。

上述技术方案中，所述药学上可接受的盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲基磺酸盐、乙基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

优选地，所述药学上可接受的盐为氢溴酸盐。

上述技术方案中，所述药学上可接受的溶剂合物包括通式所示的化合物与水、乙醇、异丙醇、乙醚或丙酮的溶剂合物。

通式中，R₃、R₄选自甲基、乙基、丙基、异丙基、羟甲基、甲氧基甲基、羟乙基、烯丙基、乙烯基、2、3或4-甲基苯基、2、3或4-甲氧基苯基、2、3或4-硝基苯基、2、3或4-氯苯基、2、3或4-溴苯基、2、3或4-氟苯基、2、3或4-三氟甲基苯基、2、3或4-羟基苯基；

R₅选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、环丁基、环丙甲基、环戊基、环己基、1’-氟乙基、2’-氟乙基、甲氧基甲基、1’-甲氧基乙基、2’-甲氧基乙基、羟甲基。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

1．本发明的化合物具有抗癫痫作用，而且其抗癫痫作用与别构激活sigma-1受体有关，显示了这类化合物作为全新型的抗癫痫药物治疗的良好前景。

2．和受体激动剂相比，受体的别构调节剂具有以下优点：（1）别构效应剂具有饱和效应，该效应一方面防止了受体的过分激活，另一方面，又延长了受体活化的时间；（2）高度特异性；（3）其生物效应与内源性配体直接关联，保留了复杂的生理反应模式。

附图说明

图1：S1对脑内sigma-1受体饱和曲线的影响

图2：S1对脑内sigma-1受体解离曲线的影响

图3：S1对小鼠电休克癫痫阈值的影响

图4：Sigma-1受体阻断剂BD 1047逆转S1抗癫痫作用

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：

本发明实施例中给出的苯并氮杂卓化合物的结构式见下表：

实施例一：制备实施例

¹H-NMR用Varian MercuryAMX300型仪测定；MS用VGZAB-HS或VG-7070型仪测定，除注明外均为EI源（70ev）；所有溶剂在使用前均经过重新蒸馏，所使用的无水溶剂均是按标准方法干燥处理获得；除说明外，所有反应均是在氮气保护下进行并TLC跟踪，后处理时均经饱和氯化钠水溶液洗涤和无水硫酸钠干燥过程；产品的纯化除说明外均使用硅胶（200~300目）柱色谱法；其中硅胶（200~300目）由青岛海洋化工厂生产，GF254薄层硅胶板由烟台江友硅胶开发有限公司生产。

1.化合物S 1的合成

参见下列反应式：

其中原料1-2的合成参考文献Journal of Medicinal Chemistry,50(12),2787-2798;2007。

上步得到的化合物1-2（20g，73.7mmol）溶于100mL三氟乙酸中，向其中缓缓加入浓硫酸（6mL）。100°C下回流搅拌1.5小时后，冷却至室温。旋大部分三氟乙酸，加入冰水，冰浴下用NH3·H2O中和至碱性。乙酸乙酯萃取两次，合并有机相。水洗，盐水洗，干燥，浓缩，得到化合物1-3和2-3的黄色混合液23g。

上步得到的化合物1-3和2-3混合液（18.5g，73.0mmol）和37%甲醛水溶液（18g，221.8mmol）溶于200mL甲酸中，120°C下回流搅拌2小时。冷却至0室温，旋掉大部分溶剂。加入冰水，冰浴下用2N NaOH中和至碱性，乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，水洗，盐水洗，干燥，浓缩。得到的粗品用硅胶柱层析（氯仿：甲醇=10：1）分离，得到黄色液体1-4（6.2g，两步收率39.1%）和黄色液体2-4（5.8g，两步收率36.6%）。

化合物1-4：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.17(m,6H),6.82(d,J=8.1Hz,1H),6.74(d,J=7.5Hz,1H),5.07(d,J=4.2Hz,1H),3.75(s,3H),3.61(m,1H),2.87(m,2H),2.53(m,2H),2.34(s,3H),2.18(m,1H)。

化合物1-4（5.3g，19.82mmol）溶于48%HBr水溶液（70mL）中，120°C下回流搅拌2小时。冷却至室温，浓缩得到黑色液体。向其中加入冰水，冰浴下用NH3·H2O中和至碱性，CHCl3萃取两次。合并有机相，水洗，盐水洗，干燥，浓缩。得到淡黄色固体S1（5.5g，100%）。

化合物S1：¹H NMR(300MHz,CDCl ₃)δ7.25(m,5H),6.58(s,1H),6.41(m,2H),4.32(d,J=9.0Hz,1H),3.15(m,2H),2.97(m,1H),2.83(m,1H),2.65(m,1H),2.38(m,4H)。

2，化合物S2的合成

S2的合成方法同S1，由化合物2-4可以得到S2.

化合物S2：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.34(m,5H),7.11(d,J=8.7Hz,2H),6.84(d,J=6.9Hz,2H),4.68(dd,J=3.6,9.3Hz,1H),3.79(s,3H),2.90(m,3H),2.72(m,3H),2.05(brs,2H)。

3．化合物S3的合成

中间体3-1的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S 11119/1-S 11119/71;2009。

化合物S3的合成同S1。

化合物S3：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.30(m,10H),6.82(s,2H),5.54（brs，2H）,4.67(d,J=10.5Hz,1H),4.18(d,J=10.5Hz,1H),3.92(d,J=13.8Hz,1H),3.26(s,1H),2.92(m,3H),2.74(m,2H)。

4．化合物S4的合成

中间体4-1的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S 11119/1-S 11119/71;2009。

中间体4-1：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.17(m,11H),6.82(d,J=8.1Hz,1H),6.74(d,J=7.5Hz,1H),5.43（s，2H）,5.07(d,J=4.2Hz,1H),3.75(s,3H),3.61(m,1H),2.87(m,2H),2.53(m,2H),2.18(m,1H)。

化合物S4的合成同化合物S1。

化合物S4：¹H NMR(300MHz,CDCl ₃)δ7.17(m,11H),6.82(d,J=8.1Hz,1H),6.74(d,J=7.5Hz,1H),5.52(brs，1H),5.43（s，2H）,5.07(d,J=4.2Hz,1H),3.61(m,1H),2.87(m,2H),2.53(m,2H),2.18(m,1H)。

5．化合物S5的合成

其中中间体5-3的合成参考文献：Journal of MedicinalChemistry,34(12),3366-71;1991。中间体5-4的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S11119/1-S11119/71;2009。

化合物S5的合成方法同S1，由中间体5-4得到。化合物S5：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.35(m,2H),7.24(m,1H),6.99(m，2H),6.85(s，2H),5.32(brs，2H),4.32(t,J=4.5Hz,1H),3.10(m,4H),2.81(m,1H),2.56(m,2H),2.37(dd,J=6.9,13.2Hz,1H),0.91(m,1H),0.51(m,2H),0.11(m,2H)。

6．化合物S6的合成

中间体6-4的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S11119/1-S11119/71;2009。

化合物S6的合成方法同S1，由中间体6-4得到。

化合物S6：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.23(m,1H),7.06(m,1H),6.99(m，2H),6.82(s,2H),5.50（brs，2H）4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)。

7．化合物S7的合成

中间体7-4的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S 11119/1-S 11119/71;2009。

化合物S7的合成方法同S1，由中间体7-4得到。

化合物S7：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.23(m,1H),7.06(m,1H),6.87(s，2H),6.68(s,1H),6.25(s,1H),5.53(brs，2H),4.25(d,J=8.1Hz,1H),3.00(m,4H),2.82(m,1H),2.59(m,2H),2.46(t,J=10.5Hz,1H),2.34(s,3H),1.08(t,J=7.2Hz,3H)。

8.化合物S8的合成

中间体8-1的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S11119/1-S 11119/71;2009。

化合物S8的合成方法同S1，由中间体8-1得到。

化合物S8：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.24(m,1H),7.07(m,1H),6.99(m，2H),6.82（s，2H）,5.90(m,1H),5.50(brs，2H)5.17(m,2H),4.25(dd,J=3.0,6.9Hz,1H),3.10(m,5H),2.86(m,2H),2.26(t,J=9.9Hz,1H),2.35(s,3H)。

9．化合物S9的合成

中间体9-1的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S 11119/1-S 11119/71;2009。

化合物S9的合成方法同S 1，由中间体9-1得到。

化合物S9：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.23(m,1H),7.06(m,1H),6.99(m，2H),6.85（s，2H）,5.52(brs，2H),4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)。

10.化合物S 10的合成

中间体10-1的合成参考文献：Chemistry--A European Journal,15(42),11119-11122,S11119/1-S11119/71;2009。

化合物S10的合成方法同S1，由中间体10-1得到。

化合物S10：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.36(m,2H),7.25(m,1H),6.99(m，2H),6.84（s，2H）,5.53（brs，2H）,4.31(d,J=7.2Hz,1H),3.06(m,3H),2.80(m,2H),2.58(m,1H),2.25(d,J=7.2Hz,2H),1.81(m,1H),0.91(m,6H)。

11.化合物S11的合成

中间体11-4的合成方法同1-4。

中间体11-4：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.44（d，2H）,7.23(d，2H),6.68(s,1H),6.26(s,1H),4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.86(s,3H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)。

S11和合成方法同S1。

化合物S11：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.44（d，2H）,7.23(d，2H),6.84（s，2H）,5.53(brs，2H),4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.86(s,3H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)。

12.化合物S12的合成

中间体12-1的合成方法同5-4。

中间体12-1：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.23(m,1H),7.06(m,1H),6.99(m,2H),6.68(s,1H),6.26(s,1H),4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.61(s,3H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)，1.35（m，1H）,0.67(m，2H),0.42(m，2H)。

化合物S 12的合成方法同S1。

化合物S12：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.23(m,1H),7.06(m,1H),6.99(m,2H),6.85(s,2H),5.54(brs,2H),4.25(d,J=8.7Hz,1H),3.61(s,3H),3.04(m,2H),2.84(m,3H),2.37(m,7H)，1.35（m，1H）,0.67(m，2H),0.42(m，2H)。

13.化合物S13的合成

原料13-1的合成参考文献：Tetrahedron,67(5),842-848;2011。

化合物S13的合成方法同S1。

化合物S13：¹H NMR(300MHz,CDCl ₃)δ7.02（s,2H）,5.50(brs,2H),5.32(s,1H),5.23(s,1H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H)。

14.化合物S14的合成

中间体14-1的合成同1-4.

中间体14-1：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.61(s,1H),6.21(s,1H),5.32(s,1H),5.23(s,1H),3.84（s，3H）,3.68(s,3H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),2.36(s，3H)。

化合物S 14的合成方法同S1。

化合物S14：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.03(s，2H),5.53(brs，2H),5.32(s,1H),5.23(s,1H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),2.36(s，3H)。

15.化合物S15的合成

中间体15-2的合成方法同5-4。

中间体15-2：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.61(s,1H),6.21(s,1H),5.32(s,1H),5.23(s,1H),3.84（s，3H）,3.68(s,3H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),2.63(m,1H),1.40-1.75（m，8H）。

化合物S15的合成方法同S1。

化合物S15：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.03(s，2H),5.53(brs，2H),5.32(s,1H),5.23(s,1H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),2.63(m,1H),1.40-1.75（m，8H）。

16.化合物S16的合成

化合物S 13溶于乙醇中，加入10%的钯碳，置换氢气，搅拌2h，过滤，旋干得化合物S16.其分析数据：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.03(s，2H),5.53(brs，2H),3.29-3.17(m,1H),3.14-2.94(m,2H),2.92-2.71(m,2H),2.64(d,J=12.2Hz,1H),2.24(d,J=9.1Hz,1H),1.22(d,J=7.2Hz,3H)。

17.化合物S 17的合成

中间体17-1的合成仿照13-1。

中间体17-1：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.61(s,1H)。

6.21(s,1H),3.84（s，3H）,3.68(s,3H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),1.82（s,6H）。

化合物S 17的合成同S1。

化合物S 17：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.03(s，2H),5.53(brs，2H),3.84（s，3H）,3.68(s,3H),3.58(s,2H),3.13–2.90(m,4H),1.82（s,6H）。

18.化合物S18的合成

化合物S18的合成同S16。

化合物S18：7.03(s，2H),5.53(brs，2H),3.29-3.17(m,1H),3.14-2.94(m,2H),2.92-2.71(m,2H),2.64(d,J=12.2Hz,1H),2.24(d,J=9.1Hz,1H),1.22(d,J=7.2Hz,6H)。

实施例2苯并氮杂卓化合物对sigma-1受体的别构调节作用

实验方法

（1）动物

取健康成年雄性SD大鼠（180-200g），五只一笼，饲养于温度21±2℃环境，正常昼夜（0700h-1900h给光），自由进食进水。

（2）动物脑组织细胞膜制备

大鼠断头处死后，分离脑组织。然后加入10倍体积的Kreb’s溶液，用玻璃匀浆器匀浆。匀浆液在4℃下离心10分钟。吸取上清，然后再次离心10分钟（离心力1000g,4℃）。再次吸取上清，离心力35000g,离心30分钟。最后，沉淀重悬于kreb’s溶液中。

（3）受体结合实验

首先，将膜成分稀释于Kreb’s溶液中，其蛋白终浓度为180-200g/ml。同样，用Kreb’s溶液稀释³H(+)-pentazocine（sigma-1受体特异性配体），终浓度为30nM。整个结合反应体系中含有100μl膜蛋白成份,20μl³H(+)-pentazocine,20μl受试药物和60μl Kreb's溶液。BD 104710μM用以标记非特异性结合活性。对照管中，用等体积的Kreb's溶液来代替受试药物。30℃孵育2.5h后,真空抽滤，将与蛋白结合的放射性配基吸附于Whatmann GF/B玻璃纤维滤纸。在液闪仪上测定放射性活性(PekinELmer)。

（4）根据下列公式计算其别构调节强度

结果

结果如表1所示

表1、苯并氮杂卓化合物对sigma-1受体的别构调节作用

实施例3 S1对sigma-1受体的饱和曲线的影响

实验方法

本例中仅改变放射性配基的浓度（5-400nM）。实验动物、细胞膜制备、放射性活性测量等过程与例1相同。并根据下列公式拟合饱和曲线，计算其结合常数（Kd）:

B = \frac{B_{\max} \times L}{K_{d} + L}

其中，B是单位组织（mg）中与放射性配基结合的受体的数目。Bmax是单位组织（mg）中与受体的最大数目；Kd是结合常数；L是³H(+)-pentazocine浓度。

结果

如图1所示，S1可以使饱合曲线左移，明显降低结合常数。未加入S1时，sigma-1受体与pentazocine的结合常数为186±42.8nM；加入S1以后，其结合常数减至85.09±22.59nM。该实验说明，该化合物可以增强simga-1受体与放射性配体的亲和力，进一步确认了其别构调节作用。

实施例4 S1对sigma-1受体的解离曲线的影响

首先将膜提取物与³H(+)-pentazocine在30℃条件下共同孵育2.5h，使受体与放射性配体的结合达到平衡状态。然后，再加入20μl S1(终浓度10μM)。随之，加入BD104710μM，启动解离过程。在不同的时间点分别测定与受体结合的放射性活性。放射性活性的测定方法同例2相同。按照下列公式，拟合解离曲线的相关参数。

Binding ratio = \frac{R_{t}}{R_{0}} = e^{{- k}_{dis} t}

Binding ratio是结合百分比。R_t是在t时刻的放射性活性，R₀反应平衡时放射性活性，k_dis是解离速率。

结果

如表3和图2所示，S1可以减缓解离过程。进一步说明本发明的化合物是sigma-1受体的正向别构调节剂。

表3、S1对sigma-1受体的解离曲线的影响

	K_dis(h^-1)	T_1/2(h)
			对照	0.939±0.116	0.745±0.094
S1(10μM)	0.4470±0.1612	1.453±0.147

实施例5 S1对小鼠化学诱发惊厥模型的作用

实验方法

（1）动物

取健康成年雄性C57BL/6J小鼠（18-22g），五只一笼，饲养于温度21±2℃环境，正常昼夜（0600h-1800h给光），自由进食进水。

小鼠惊厥模型制作：戊四氮100mg/kg，皮下注射。

（2）药物及给药方式

S1溶于无菌生理盐水，配成20mg/ml无色透明溶液；按0.1ml/10g将药物腹腔注射至大鼠体内。丙戊酸钠溶于生理盐水，配成5mg/ml无色透明溶液；按0.1ml/10g将药物腹腔注射至大鼠体内。

首先，每只动物给腹腔给予S1。半小时之后，皮下注射PTZ（100mg/kg）。观察半小时内动物阵挛发作(Clonus)潜伏期、全身阵挛强直发作（GTCS）潜伏期、死亡时间、发病率及死亡率。

（3）统计分析

用SPSS11.0软件对实验结果进行统计分析，两组之间的比较采用t检验。P值小于0.05被认为有统计学意义。

结果

S1可以延长阵挛发作的潜伏期、延长全身阵挛强直性发作（GTCS）的潜伏期、高中剂量可以延长小鼠死亡终点

表4S1对小鼠惊厥的作用

和模型组相比，P<0.05.

实施例6S1对小鼠电休克致强直性惊厥模型的作用

实验方法

（1）动物

（2）药物及给药方式

S1溶于无菌生理盐水，配成20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml无色透明溶液；按0.1ml/10g将药物腹腔注射至小鼠体内。

首先，每只动物给腹腔给予不同剂量的受试药物（高剂量：20mg/kg;中剂量：10mg/kg；低剂量：5mg/kg）。半小时之后，采用最大电休克法测定小鼠的致惊厥阈。

（3）小鼠的致惊厥阈测定。根据预实验结果，第一只动物接受18mA的电刺激，动物在一分钟内出现后肢强直则视为反应阳性。如果动物反应阳性，第二动物的电刺激强度则减少1mA；反之，则增加1mA。采用上述的方式循环，直至所有的动物测完为止。然后计算小鼠惊厥的阈值。

（4）统计分析

用SPSS11.0软件对实验结果进行统计分析，包括单因素方差分析（one-way ANOVA）和t检验。P值小于0.05被认为有统计学意义。

结果

如图3所示，S1提高小鼠的致惊厥阈，具有抗癫痫作用。

实施例7S1的抗癫痫作用与sigma-1受体有关

实验方法

实验动物、小鼠阈值测定的方法及统计方法均与例6相同。首先给予sigma受体的阻断剂BD 1047（2mg/kg，腹腔注射）,20分钟后按照例6的方式给予受试药物S1(20mg/kg)，再过30分钟后，测定其致惊厥值。

结果

如图4所示，S1提高小鼠的致惊厥阈，但是BD1047可逆转其效应。

Claims

1. 一种苯并氮杂卓类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗癫痫的药物中的应用，所述苯并氮杂卓类化合物的结构为

。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药学上可接受的盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲基磺酸盐、乙基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述药学上可接受的盐为氢溴酸盐。